JPH07316144A

JPH07316144A - ジフェニルメチルピペラジン誘導体

Info

Publication number: JPH07316144A
Application number: JP7067249A
Authority: JP
Inventors: Hiroshi Fukumi; 宏福見; Hidenori Shimozu; 秀則下津; Teiichiro Koga; 貞一郎古賀
Original assignee: Sankyo Co Ltd
Current assignee: Sankyo Co Ltd
Priority date: 1994-03-29
Filing date: 1995-03-27
Publication date: 1995-12-05

Abstract

(57)【要約】【構成】一般式【化１】［式中Ｒ¹ 、Ｒ² 、Ｒ³ およびＲ⁴ は水素原子、ハロ
ゲン原子、低級アルキル基または低級アルコキシ基を示
し、ｍは０乃至２を示し、ｎは２乃至４を示し、ｐは１
乃至２を示す。］を有するジフェニルメチルピペラジン
誘導体に関する。【効果】本発明の化合物は優れた抗高コレステロ−ル血
症作用を有する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は脂質代謝障害による高コ
レステロ−ル血症などの高脂血症の治療とアテロ−ム性
動脈硬化症の予防に有用な、優れたジフェニルメチルピ
ペラジン誘導体またはその薬理上許容される塩に関す
る。

【０００２】

【従来の技術】動脈硬化症は、体内におけるコレステロ
−ルの蓄積が原因の一つであることが知られている。ま
た、動脈硬化症のほとんどはアテロ−ム性動脈硬化症で
あり、この疾患ではコレステロールが動脈壁に蓄積して
アテローム斑点を作り、この蓄積したコレステロ−ル
は、血中に含まれている低密度リポタンパク質（ＬＤ
Ｌ）と呼ばれる粒子に由来しているとされている。従っ
て、血中のＬＤＬ濃度が高いほど、アテロ−ム性動脈硬
化症は早く進行する。

【０００３】ヒトＬＤＬ受容体遺伝子を導入したトラン
スジェニックマウスが作製され、人為的にＬＤＬ受容体
遺伝子の発現を上昇させることにより血中のＬＤＬが、
著明に低下したと報告されている[Science, 250, 1273
(1990)]。

【０００４】血中ＬＤＬを低下させる薬剤としては、内
因性コレステロ−ルの生合成経路上の律速酵素である３
−ヒドロキシ−３−メチルグルタリルコエンザイムＡ
リダクタ−ゼ（3-hydroxy-3-methyglutaryl-Co A reduc
tase) ［ＨＭＧ−ＣｏＡリダクタ−ゼ］を特異的に阻害
する物質、例えば現在市販されているメバロチン（登録
商標、一般名：プラバスタチンナトリウム）およびメ
バコ−ル（登録商標、一般名：ロバスタチン）があげら
れる。この物質は、肝臓におけるコレステロ−ルの生合
成を阻害する事によって、間接的にＬＤＬ受容体の数の
上昇をもたらし、それによって、血中のＬＤＬ濃度を低
下させる。

【０００５】

【発明が解決しょうとする課題】本発明者らは、ＬＤＬ
受容体遺伝子の発現を直接亢進させ、血中のＬＤＬを特
異的に低下させる作用を有する物質として新規なジフェ
ニルメチルピペラジン誘導体またはその薬理上許容され
る塩が優れたＬＤＬ受容体遺伝子発現増強作用を有し脂
質代謝障害による高コレステロ−ル血症などの高脂血症
の治療とアテロ−ム性動脈硬化症の予防に有効なことを
見出して本発明を完成した。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明は、一般式

【０００７】

【化２】

【０００８】［式中、Ｒ¹ 、Ｒ² 、Ｒ³ およびＲ⁴ は同
一もしくは異なって水素原子、ハロゲン原子、低級アル
キル基または低級アルコキシ基を示し、ｍは０乃至２を
示し、ｎは２乃至４を示し、ｐは１乃至２を示す。］を
有するジフェニルメチルピペラジン誘導体またはその薬
理上許容される塩である。

【０００９】前記一般式（Ｉ）を有するジフェニルメチ
ルピペラジン誘導体またはその薬理上許容される塩にお
いて、Ｒ¹ 、Ｒ² 、Ｒ³ およびＲ⁴ がハロゲン原子を示
す場合、該ハロゲン原子としては例えばフッ素、塩素ま
たは臭素原子などが挙げられる。

【００１０】Ｒ¹ 、Ｒ² 、Ｒ³ およびＲ⁴ が低級アルキ
ル基を示す場合、該低級アルキル基としては炭素数１乃
至４個を有するアルキル基、例えばメチル、エチル、プ
ロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓ−ブチ
ルまたはｔ−ブチルなどが挙げられる。

【００１１】Ｒ¹ 、Ｒ² 、Ｒ³ およびＲ⁴ が低級アルコ
キシ基を示す場合、該低級アルコキシ基としては炭素数
１乃至４個を有するアルコキシ基、例えばメトキシ、エ
トキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソ
ブトキシ、ｓ−ブトキシまたはｔ−ブトキシなどが挙げ
られる。

【００１２】前記一般式（Ｉ）を有するジフェニルメチ
ルピペラジン誘導体において、好適には、Ｒ¹ 、Ｒ² 、
Ｒ³ およびＲ⁴ が同一もしくは異なって水素原子、フッ
素原子、塩素原子、メチルまたはメトキシを示し、ｍが
１または２を示し、ｎが２または３を示し、ｐが１また
は２を示す化合物を挙げることができる。

【００１３】本発明の代表的な化合物としては、例えば
次表１に記載する化合物を例示することができる。

【００１４】

【化３】

【００１５】

【表１】 ──────────────────────────────────── 例示化合物番号Ｒ¹ Ｒ² Ｒ³ Ｒ⁴ ｍｎｐ ─────────────────────────────────── １ＨＨＨＨ１２１２ＨＨＨＨ１３１３ＨＨＨＨ１２２４ＨＨＨＨ１３２５ＨＨＨＨ２２１６ＨＨＨＨ２３１７ＨＨＨＨ２４１８ＨＨＨＨ２２２９ＨＨＨＨ２３２１０ＨＨ４−Ｆ４−Ｆ１２１１１ＨＨ４−Ｆ４−Ｆ１３１１２ＨＨ４−Ｆ４−Ｆ１２２１３ＨＨ４−Ｆ４−Ｆ１３２１４ＨＨ４−Ｆ４−Ｆ２２１１５ＨＨ４−Ｆ４−Ｆ２３１１６ＨＨ４−Ｆ４−Ｆ２４１１７ＨＨ４−Ｆ４−Ｆ２２２１８ＨＨ４−Ｆ４−Ｆ２３２１９ＨＨ４−ＦＨ１２１２０ＨＨ４−ＦＨ１３１２１ＨＨ４−ＦＨ２２１２２ＨＨ４−ＦＨ２３１２３ＨＨ４−ＦＨ２４１２４ＨＨ４−ＣｌＨ１２１２５ＨＨ４−ＣｌＨ１３１２６ＨＨ３−ＣｌＨ２２１２７ＨＨ２−ＣｌＨ２３１２８ＨＨ４−ＣｌＨ２４１２９ＨＨ４−Ｃｌ４−Ｃｌ１２１３０ＨＨ４−Ｃｌ４−Ｃｌ１３１３１ＨＨ４−ＣｌＨ２２１３２ＨＨ４−ＣｌＨ２３１３３ＨＨ４−ＣｌＨ２４１３４ＨＨ４−ＣＨ₃ Ｈ１２１３５ＨＨ４−ＣＨ₃ Ｈ２２１３６ＨＨ３−ＣＨ₃ Ｈ２３１３７ＨＨ４−ＣＨ₃ Ｈ２４１３８ＨＨ４−ＣＨ₃ ４−ＣＨ₃ １２１３９ＨＨ４−ＣＨ₃ ４−ＣＨ₃ １３１４０ＨＨ４−ＣＨ₃ ４−ＣＨ₃ １２２４１ＨＨ４−ＣＨ₃ ４−ＣＨ₃ １３２４２ＨＨ４−ＣＨ₃ ４−ＣＨ₃ ２２１４３ＨＨ４−ＣＨ₃ ４−ＣＨ₃ ２３１４４ＨＨ２−ＣＨ₃ ２−ＣＨ₃ ２４１４５ＨＨ４−ＯＣＨ₃ Ｈ１２１４６ＨＨ４−ＯＣＨ₃ Ｈ２２１４７ＨＨ４−ＯＣＨ₃ Ｈ２３１４８ＨＨ４−ＯＣＨ₃ Ｈ２４１４９ＨＨ４−ＯＣＨ₃ ４−ＯＣＨ₃ １２１５０ＨＨ４−ＯＣＨ₃ ４−ＯＣＨ₃ １３１５１ＨＨ４−ＯＣＨ₃ ４−ＯＣＨ₃ １２２５２ＨＨ４−ＯＣＨ₃ ４−ＯＣＨ₃ １３２５３ＨＨ４−ＯＣＨ₃ ４−ＯＣＨ₃ ２２１５４ＨＨ４−ＯＣＨ₃ ４−ＯＣＨ₃ ２３１５５ＨＨ４−ＯＣＨ₃ ４−ＯＣＨ₃ ２４１５６ＦＦＨＨ１２１５７４−Ｆ４−ＦＨＨ１３１５８４−Ｆ４−ＦＨＨ１２２５９４−Ｆ４−ＦＨＨ１３２６０４−Ｆ４−ＦＨＨ２２１６１４−Ｆ４−ＦＨＨ２３１６２４−Ｆ４−ＦＨＨ２４１６３４−Ｆ４−ＦＨＨ２２２６４２−Ｆ４−ＦＨＨ２３２６５４−ＦＨＨＨ１２１６６４−ＦＨＨＨ１３１６７４−ＦＨＨＨ２２１６８４−ＦＨＨＨ２３１６９４−ＦＨＨＨ２４１７０４−Ｃｌ４−ＣｌＨＨ１２１７１４−Ｃｌ４−ＣｌＨＨ１３１７２４−Ｃｌ４−ＣｌＨＨ１２２７３４−Ｃｌ４−ＣｌＨＨ１３２７４４−Ｃｌ４−ＣｌＨＨ２２１７５４−Ｃｌ４−ＣｌＨＨ２３１７６４−Ｃｌ４−ＣｌＨＨ２４１７７４−Ｃｌ４−ＣｌＨＨ２２２７８４−Ｃｌ４−ＣｌＨＨ２３２７９４−ＣｌＨＨＨ１２１８０４−ＣｌＨＨＨ１３１８１４−ＣｌＨＨＨ２２１８２４−ＣｌＨＨＨ２３１８３４−ＣｌＨＨＨ２４１８４４−ＣＨ₃ ４−ＣＨ₃ ＨＨ１２１８５４−ＣＨ₃ ４−ＣＨ₃ ＨＨ１３１８６４−ＣＨ₃ ４−ＣＨ₃ ＨＨ２２１８７４−ＣＨ₃ ４−ＣＨ₃ ＨＨ２３１８８２−ＣＨ₃ ４−ＣＨ₃ ＨＨ２４１８９４−ＣＨ₃ ＨＨＨ１２１９０４−ＣＨ₃ ＨＨＨ１３１９１４−ＣＨ₃ ＨＨＨ２２１９２４−ＣＨ₃ ＨＨＨ２３１９３４−ＣＨ₃ ＨＨＨ２４１９４４−ＯＣＨ₃ ４−ＯＣＨ₃ ＨＨ１２１９５４−ＯＣＨ₃ ４−ＯＣＨ₃ ＨＨ１３１９６４−ＯＣＨ₃ ４−ＯＣＨ₃ ＨＨ２２１９７４−ＯＣＨ₃ ４−ＯＣＨ₃ ＨＨ２３１９８４−ＯＣＨ₃ ４−ＯＣＨ₃ ＨＨ２４１９９４−ＯＣＨ₃ ＨＨＨ１２１１００４−ＯＣＨ₃ ＨＨＨ１３１１０１４−ＯＣＨ₃ ＨＨＨ２２１１０２４−ＯＣＨ₃ ＨＨＨ２３１１０３４−ＯＣＨ₃ ＨＨＨ２４１１０４４−Ｆ４−Ｆ４−Ｆ４−Ｆ１２１１０５４−Ｆ４−Ｆ４−Ｆ４−Ｆ１３１１０６４−Ｆ４−Ｆ４−Ｆ４−Ｆ１２２１０７４−Ｆ４−Ｆ４−Ｆ４−Ｆ１３２１０８４−Ｆ４−Ｆ４−Ｆ４−Ｆ２２１１０９４−Ｆ４−Ｆ４−Ｆ４−Ｆ２３１１１０４−Ｆ４−Ｆ４−Ｆ４−Ｆ２４１１１１４−Ｆ４−Ｆ４−Ｆ４−Ｆ２２２１１２４−Ｆ４−Ｆ４−Ｆ４−Ｆ２３２１１３４−Ｆ４−Ｆ４−Ｆ４−Ｈ１２１１１４４−Ｆ４−Ｆ４−ＦＨ１３１１１５４−Ｆ４−Ｆ４−ＦＨ２２１１１６４−Ｆ４−Ｆ３−ＦＨ２３１１１７４−Ｆ４−Ｆ４−ＣｌＨ１２１１１８４−Ｆ４−Ｆ４−ＣｌＨ２２１１１９４−Ｆ４−Ｆ４−ＣＨ₃ Ｈ１２１１２０４−Ｆ４−Ｆ４−ＣＨ₃ Ｈ２２１１２１４−Ｆ４−Ｆ４−Ｃｌ４−Ｃｌ１２１１２２４−Ｆ４−Ｆ４−Ｃｌ４−Ｃｌ２２１１２３４−Ｆ４−Ｆ４−ＣｌＨ１２１１２４４−Ｆ４−Ｆ４−ＣｌＨ２２１１２５４−Ｆ４−Ｆ４−ＯＣＨ₃ Ｈ１２１１２６４−Ｆ４−Ｆ４−ＯＣＨ₃ ４−ＯＣＨ₃ １２１１２７４−Ｃｌ４−Ｃｌ４−Ｆ４−Ｆ１３１１２８４−Ｃｌ４−Ｃｌ４−Ｆ４−Ｆ１２２１２９４−Ｃｌ４−Ｃｌ４−Ｆ４−Ｆ１３２１３０４−Ｃｌ４−Ｃｌ４−Ｆ４−Ｆ２２１１３１４−Ｃｌ４−Ｃｌ４−Ｆ４−Ｆ１２１１３２４−ＣｌＨ４−Ｆ４−Ｆ１２１１３３４−ＣｌＨ４−Ｆ４−Ｆ１３１１３４４−ＣｌＨ４−Ｆ４−Ｆ２２１１３５４−ＣｌＨ４−Ｆ４−Ｆ２３１１３６４−ＣｌＨ４−Ｆ４−Ｆ２４１１３７２−ＦＨ４−Ｆ４−Ｆ１２１１３８３−ＦＨ４−Ｆ４−Ｆ２２１１３９４−ＣＨ₃ Ｈ４−Ｆ４−Ｆ１２１１４０４−ＣＨ₃ Ｈ４−Ｆ４−Ｆ２２１１４１４−ＯＣＨ₃ Ｈ４−Ｆ４−Ｆ１２１１４２３−ＯＣＨ₃ Ｈ４−Ｆ４−Ｆ２２１１４３４−ＦＨ４−ＦＨ１２１１４４４−ＦＨ４−ＦＨ２２１１４５４−ＣＨ₃ Ｈ４−ＦＨ１２１１４６４−ＣＨ₃ Ｈ４−ＦＨ２２１１４７４−ＣｌＨ４−ＦＨ１２１１４８４−ＣｌＨ４−ＦＨ２２１１４９４−ＦＨ４−ＣＨ₃ Ｈ１２１１５０４−ＦＨ４−ＣＨ₃ Ｈ２２１１５１４−ＣＨ₃ Ｈ４−ＣＨ₃ Ｈ１２１１５２４−ＣＨ₃ Ｈ４−ＣＨ₃ Ｈ２２１１５３４−ＣｌＨ４−ＣＨ₃ Ｈ１２１１５４４−ＣｌＨ４−ＣＨ₃ Ｈ２２１１５５２−ＯＣＨ₃ Ｈ４−ＣＨ₃ Ｈ１２１１５６３−ＯＣＨ₃ Ｈ４−ＣＨ₃ Ｈ２２１１５７ＨＨＨＨ０２１１５８ＨＨＨＨ０３１１５９ＨＨＨＨ０４１１６０４−Ｆ４−ＦＨＨ０２１１６１４−Ｆ４−ＦＨＨ０３１１６２４−Ｆ４−Ｆ４−Ｆ４−Ｆ０２１１６３４−Ｆ４−Ｆ４−Ｆ４−Ｆ０３１１６４４−Ｃｌ４−Ｃｌ４−Ｆ４−Ｆ０２１１６５４−Ｃｌ４−Ｃｌ４−Ｆ４−Ｆ０３１１６６４−ＣｌＨ４−Ｆ４−Ｆ０２１１６７４−ＣｌＨ４−Ｆ４−Ｆ０３１１６８４−ＣＨ₃ Ｈ４−Ｆ４−Ｆ０２１１６９２−ＣＨ₃ Ｈ４−Ｆ４−Ｆ０３１１７０４−ＣｌＨＨＨ０２１１７１４−ＣｌＨＨＨ０３１１７２４−ＣＨ₃ ＨＨＨ０２１１７３４−ＣＨ₃ ＨＨＨ０３１１７４４−ＦＨＨＨ０２１１７５４−ＦＨＨＨ０３１１７６４−Ｆ４−Ｆ４−ＣｌＨ０２１１７７４−Ｆ４−Ｆ４−ＣｌＨ０３１１７８４−Ｆ４−Ｆ４−ＣＨ₃ Ｈ０２１１７９４−Ｆ４−Ｆ２−ＣＨ₃ Ｈ０３１１８０４−Ｆ４−Ｆ３−ＯＣＨ₃ Ｈ０２１１８１４−Ｆ４−Ｆ４−ＯＣＨ₃ Ｈ０３１１８２４−Ｆ４−Ｆ４−ＦＨ０２１１８３４−Ｆ４−Ｆ４−ＦＨ０３１１８４４−Ｃｌ４−Ｃｌ４−ＦＨ０２１１８５４−Ｃｌ４−Ｃｌ４−ＣＨ₃ Ｈ０２１１８６４−Ｃｌ４−Ｃｌ４−ＣｌＨ０２１１８７ＨＨ４−Ｆ４−Ｆ０２１ ──────────────────────────────────── 本発明の前記一般式（Ｉ）を有するジフェニルメチルピ
ペラジン誘導体は、以下の方法に従って製造される。

【００１６】

【化４】

【００１７】［式中、Ｒ¹ 、Ｒ² 、Ｒ³ 、Ｒ⁴ 、ｍ、ｎ
およびｐは前述したものと同意義を示す。］即ち、本発明の前記一般式（Ｉ）を有するジフェニルメ
チルピペラジン誘導体は、前記一般式（ＩＩ）を有する
カルボン酸誘導体またはその反応性誘導体と前記一般式
（ＩＩＩ）を有するアミン誘導体とを反応させることに
よって得られる。

【００１８】前記一般式（ＩＩ）を有するカルボン酸と
前記一般式（ＩＩＩ）を有するアミン誘導体との反応
は、塩基の存在下または不存在下で、好適には溶剤中、
縮合剤の存在下で行われる。

【００１９】本反応に使用される縮合剤としては、カル
ボン酸とアミンからアミド結合を製造するものであれば
特に限定はなく、好適には、ジシクロヘキシルカルボジ
イミド（ＤＣＣ）、１−エチル−３−（３−ジメチルア
ミノプロピル）カルボジイミド・塩酸塩（ＷＳＣ・ＨＣ
ｌ）、シアノリン酸ジエチル（ＤＥＰＣ）、カルボニル
ジイミダゾール、ジフェニルホスホリルアジド（ＤＰＰ
Ａ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール−ジシクロヘ
キシルカルボジイミドまたはジエチルアゾジカルボキシ
レート−トリフェニルホスフィンなどを挙げることがで
きる。更に好適には、１−エチル−３−（３−ジメチル
アミノプロピル）カルボジイミド・塩酸塩またはシアノ
リン酸ジエチルである。

【００２０】反応は、塩基の存在下または不存在下で行
われる。反応を塩基の存在下で行う場合、使用される塩
基としては反応に関与しなければ特に限定はなく、好適
には、トリメチルアミン、トリエチルアミン、ピリジ
ン、ジメチルアニリン、Ｎ−メチルモルホリン、４−ジ
メチルアミノピリジンのような有機アミンであり、特に
好適には、トリエチルアミンまたはＮ−メチルモルホリ
ンである。

【００２１】使用される溶剤としては、反応に関与しな
ければ特に限定はなく、例えば、ベンゼン、トルエン、
キシレンのような芳香族炭化水素類；ジクロロメタン、
ジクロロエタン、クロロホルムのようなハロゲン化炭化
水素類；エーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサンの
ようなエーテル類；酢酸エチル、酢酸プロピルのような
有機酸エステル類；ジメチルホルムアミド、ジメチルア
セトアミド、ヘキサメチルホスホロトリアミドのような
アミド類；またはアセトニトリルのようなニトリル類；
を挙げることができる。好適にはエーテル類（特にテト
ラヒドロフラン）、ハロゲン化炭化水素類（特にジクロ
ロメタン）、アミド類（特にジメチルホルムアミド）、
有機酸エステル類（特に酢酸エチル）である。

【００２２】反応温度は通常、−１０℃乃至５０℃（好
適には、０℃乃至３０℃）である。反応に要する時間
は、反応温度等によって異なるが、通常、３０分間乃至
２４時間（好適には、１時間乃至１５時間）である。

【００２３】次に、前記一般式（ＩＩ）を有するカルボ
ン酸の反応性誘導体と前記一般式（ＩＩＩ）を有するア
ミン誘導体とを反応させて、前記一般式（Ｉ）を有する
ジフェニルメチルピペラジン誘導体を製造する反応は、
前記一般式（ＩＩ）を有するカルボン酸を反応性誘導体
とした後に、前記一般式（ＩＩＩ）を有するアミン誘導
体と反応させることによって製造される。

【００２４】前記一般式（ＩＩ）を有するカルボン酸の
反応性誘導体としては、例えば、酸クロリド、酸ブロミ
ドのような酸ハライド；モノメチルぎ酸エステル、モノ
エチルぎ酸エステル、モノイソブチルぎ酸エステルのよ
うなモノ−Ｃ₁ 〜Ｃ₄ アルキルぎ酸エステル、またはモ
ノフェニルぎ酸エステルのようなモノアリールぎ酸エス
テルとの混合酸無水物；を挙げることができる。好適に
は酸ハライドである。そして、酸ハライドのようなカル
ボン酸の反応性誘導体は、常法、例えば前記一般式（Ｉ
Ｉ）を有するカルボン酸を不活性溶剤中（例えばジクロ
ロメタン、ベンゼン、トルエン、テトラヒドロフラン
等）、必要に応じて塩基の存在下（例えばピリジン、ト
リエチルアミン、ジメチルアニリン等）、相当するハロ
ゲン化剤（例えば塩化チオニル、臭化チオニル等）と１
０℃乃至１００℃、１０分間乃至２０時間反応させるこ
とによって得られる。

【００２５】また、ぎ酸エステルとの混合酸無水物は、
前記一般式（ＩＩ）を有するカルボン酸を不活性溶剤中
（例えばジクロロメタン、ベンゼン、トルエン、テトラ
ヒドロフラン等）、必要に応じて塩基の存在下（例えば
ピリジン、トリエチルアミン、ジメチルアニリン等）、
クロロぎ酸エステル（クロロぎ酸メチル、クロロぎ酸エ
チル、クロロぎ酸イソブチル、クロロぎ酸フェニル等）
と０℃乃至５０℃で１分間乃至２時間反応させることに
よって得られる。

【００２６】前記一般式（ＩＩ）を有するカルボン酸の
反応性誘導体と前記一般式（ＩＩＩ）を有するアミン誘
導体との反応は、塩基の存在下または不存在下で行われ
る。反応を塩基の存在下で行う場合、使用される塩基と
しては反応に関与しなければ特に限定はなく、例えばト
リメチルアミン、トリエチルアミン、ピリジン、ジメチ
ルアニリン、Ｎ−メチルモルホリン、４−ジメチルアミ
ノピリジンのような有機アミンであり、好適にはトリエ
チルアミン、Ｎ−メチルモルホリンである。使用される
溶剤としては、反応に関与しなければ特に限定はなく、
ジクロロメタン、ジクロロエタン、クロロホルムのよう
なハロゲン化炭化水素類；エーテル、テトラヒドロフラ
ン、ジオキサンのようなエーテル類；ベンゼン、トルエ
ン、キシレンのような芳香族炭化水素類；酢酸エチル、
酢酸プロピルのような有機酸エステル類；ジメチルホル
ムアミド、ジメチルアセトアミドのようなアミド類；ま
たはアセトニトリルのようなニトリル類；を挙げること
ができる。好適にはエーテル類、ハロゲン化炭化水素
類、有機酸エステル類である。

【００２７】反応温度は、通常、−１０℃乃至５０℃
（好適には、０℃乃至３０℃）である。反応に要する時
間は、反応温度によって異なるが通常、１分間乃至２４
時間（好適には、１０分間乃至１０時間）である。

【００２８】原料化合物である前記一般式（ＩＩ）を有
するカルボン酸誘導体またはその反応性誘導体および前
記一般式（ＩＩＩ）を有するアミン誘導体は、公知［J.
Med. Chem., 32, 583 (1989) ; Chem.Pharm. Bull., 3
7, 100 (1989) ; J. Med.Chem., 32, 1820 (1989)]
であるか、公知の方法若しくはそれらに類似した方法に
従って製造される。

【００２９】前記一般式（Ｉ）を有するジフェニルメチ
ルピペラジン誘導体は、必要に応じて薬理上許容し得る
塩にすることができる。そのような塩としては、例えば
フッ化水素酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸
塩のようなハロゲン化水素酸塩；硝酸塩；過塩素酸塩；
燐酸塩；炭酸塩；等の無機酸塩：メタンスルホン酸塩、
トリフルオロメタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩
のような低級アルキルスルホン酸塩；ベンゼンスルホン
酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩のようなアリールスル
ホン酸塩；フマール酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、酒
石酸塩、蓚酸塩、マレイン酸塩のような有機カルボン酸
塩；等の有機酸塩：およびグルタミン酸塩、アスパラギ
ン酸塩のようなアミノ酸塩；等の有機酸の酸付加塩：を
挙げることができる。

【００３０】なお、前記一般式（Ｉ）を有するジフェニ
ルメチルピペラジン誘導体において、二重結合に基くシ
スおよびトランス体等の異性体あるいは不斉炭素原子に
基く光学異性体が存在する場合があるが、本発明はかか
る異性体のひとつおよびその混合物をも包含するもので
ある。

【００３１】更に、前記一般式（Ｉ）を有するジフェニ
ルメチルピペラジン誘導体が、溶剤和物（例えば水和
物）を形成する場合には、これらもすべて含むものであ
る。

【００３２】

【作用】本発明の化合物は、ＬＤＬ受容体遺伝子の発現
を直接亢進させ、血中のＬＤＬを特異的に低下させる結
果、脂質代謝障害による高コレステロ−ル血症などの高
脂血症の治療剤及びアテローム性動脈硬化症の予防剤と
して有効である。

【００３３】本発明の前記一般式（Ｉ）を有するジフェ
ニルメチルピペラジン誘導体またはその薬理上許容され
る塩の投与形態としては、例えば錠剤、カプセル剤、顆
粒剤、散剤もしくはシロップ剤等による経口投与または
注射剤等による非経口投与を挙げることができる。これ
らの製剤は、賦形剤（例えば乳糖、マンニット、トウモ
ロコシデンプン、結晶セルロース等）、結合剤（例えば
セルロース誘導体、アラビアゴム、ゼラチン等）、崩壊
剤（例えばカルボキシメチルセルロースカルシウム
等）、滑沢剤（例えばタルク、ステアリン酸マグネシウ
ム等）、安定剤、矯味矯臭剤、注射剤用溶剤（例えば
水、エタノール、グリセリン等）等の添加剤を用いて周
知の方法で製造される。その使用量は症状、年齢等によ
り異なるが、１日１ｍｇ〜１０００ｍｇ（好適には、１
０ｍｇ〜２００ｍｇ）を成人に対して、１日１回または
数回に分けて投与することができる。

【００３４】

【実施例】以下に、実施例および試験例をあげて本発明
を更に具体的に説明する。

【００３５】実施例１Ｎ−［２−［４−ビス（４−フルオロフェニル）メチル
−１−ピペラジニル］エチル］−５，５−ジフェニル−
２，４−ペンタジエン酸アミド（例示化合物番号１
０）（ａ）テトラヒドロフラン１５ｍｌ中に５，５−ジフェ
ニル−２，４−ペンタジエン酸０．５００ｇ, ４−ビ
ス（４−フルオロフェニル）メチル−１−（２−アミノ
エチル）ピペラジン０．６６２ｇ, シアノリン酸ジエ
チル０．３３０ｇおよびトリエチルアミン０．２０
０ｇを氷冷却下で加え１時間攪拌後、室温で１６時間攪
拌した。反応混合物を氷水中にあけ酢酸エチルで抽出し
た。抽出液を硫酸マグネシウムで脱水後、抽出液より溶
剤を留去した。得られた残留物をシリカゲルカラムクロ
マトグラフィーに付し、エタノール−酢酸エチル（１：
２０）で溶出して目的化合物を結晶として０．５３０
ｇ（収率４８％）得た。１）融点：１４５−１４９℃ ２）ＮＭＲスペクトル δ ppm (CDCl₃)：2.23-2.60(10
H,m), 3.38(2H,br q,J=5.9Hz), 4.22(1H,s),5.96-6.12
(1H,br), 6.04(1H,d,J=15.2Hz), 6.76(1H,d,J=11.2Hz),
6.89-7.04(4H,m), 7.15-7.45(15H,m) ３）ＩＲスペクトル ν_max cm^-1(CHCl₃) ：3425, 300
0, 2840, 1660, 1610, 1508, 1152。

【００３６】上記で得た目的化合物を酢酸エチルに溶解
し、等モルの４Ｎ−塩酸−酢酸エチルを加え、目的化合
物の塩酸塩を得た。１）融点：２２０−２２２℃（分解）。（ｂ）ジクロロメタン３０ｍｌ中に５，５−ジフェニ
ル−２，４−ペンタジエン酸３．００ｇ、４−ビス
（４−フルオロフェニル）メチル−１−（２−アミノエ
チル）ピペラジン４．３７０ｇおよび１−エチル−３
−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド・塩
酸塩（ＷＳＣ・ＨＣｌ）２．７６０ｇを加え３時間攪
拌した。反応混合物に水を加え酢酸エチルで抽出した。
抽出液を硫酸マグネシウムで脱水後、抽出液より溶剤を
留去した。得られた残留物をシリカゲルカラムクロマト
グラフィーに付し、メタノール−ジクロロメタン（１：
２０）で溶出して目的化合物を結晶として５．８２０
ｇ（収率７６％）得た。

【００３７】１）融点：１４５−１４９℃。

【００３８】実施例２Ｎ−［２−［４−ビス（４−フルオロフェニル）メチル
−１−ピペラジニル］エチル］−７，７−ジフェニル−
２，４，６−ヘプタトリエン酸アミド（例示化合物番号
１４）７，７−ジフェニル−２，４，６−ヘプタトリエン酸
５００ｍｇと４−ビス（４−フルオロフェニル）メチル
−１−（２−アミノエチル）ピペラジン６００ｍｇを用
いて実施例１（ａ）と同様に処理して目的化合物を結晶
として６００ｍｇ（収率６２％）得た。１）融点：１４５−１４８℃ ２）ＮＭＲスペクトル δ ppm（CDCl₃)：2.28-2.56(10
H, m), 3.39(2H, br q, J=5.3Hz), 4.22(1H, s),5.86(1
H, d, J=15.2Hz), 6.01(1H, br t, J=4.6Hz),6.45(1H,
dd, J=14.5Hz, J=10.6Hz), 6.63(1H, dd, J=14.5Hz, J=
11.2Hz),6.78(1H, d, J=11.2Hz), 6.90-7.03(4H, m),
7.11-7.47(15H, m) ３）ＩＲスペクトル ν_max cm^-1(CHCl₃) ：3440, 302
5, 2840, 1660, 1610, 1510, 1155。

【００３９】上記で得た目的化合物を酢酸エチルに溶解
し、過剰の４Ｎ−塩酸−酢酸エチルを加え濃縮後、イソ
プロピルエ−テルを加え結晶化させて、目的化合物の塩
酸塩を得た。１）融点：１５９−１６２℃。

【００４０】実施例３Ｎ−［２−［４−ビス（フルオロフェニル）メチル−１
−ピペラジニル］エチル］−３，３−ジフェニル−プロ
ペン酸アミド（例示化合物番号１８７）３，３−ジフェニルプロペン酸５００ｍｇと４−ビス
（４−フルオロフェニル）メチル−１−（２−アミノエ
チル）ピペラジン６４０ｍｇを用いて、実施例１
（ａ）と同様に処理して目的化合物を泡状物として６
９０ｍｇ（収率６３％）得た。１）ＮＭＲスペクトル δ ppm（CDCl₃)：2.13-2.46(10
H, m), 3.23(2H, br.q, J=5.4Hz), 4.20(1H, s),5.68-
5.95(1H, br.), 6.28(1H, s), 6.90-7.08(8H, m), 7.14
-7.43(8H, m) ２）ＩＲスペクトル ν_max cm^-1(CHCl₃) ：3020, 298
0, 2820, 1650, 1620, 1530, 1300, 1150。

【００４１】上記で得た目的化合物を実施例２後段と同
様に処理して目的化合物の塩酸塩を得た。１）融点：１５２−１５５℃（分解）。

【００４２】実施例４Ｎ−［２−［４−ビス（４−フルオロフェニル）メチル
−１−ピペラジニル］エチル］−３，３−ビス（４−フ
ルオロフェニル）プロペン酸アミド（例示化合物番号
１６２）３，３−ビス（４−フルオロフェニル）プロペン酸５
００ｍｇと４−ビス（４−フルオロフェニル）メチル−
１−（２−アミノエチル）ピペラジン７３９ｍｇを用
いて、実施例１（ａ）と同様に処理して目的化合物を泡
状物として５００ｍｇ（収率３９％）得た。１）ＮＭＲスペクトル δ ppm（CDCl₃)：2.09-2.42(10
H, m), 3.19(2H, br q, J=5.4Hz), 4.18(1H, s),5.66-
5.77(1H, br), 6.37(1H, s), 6.89-7.04(4H, m), 7.18-
7.40(14H, m) ２）ＩＲスペクトル ν_max cm^-1 (CHCl₃)：3425, 300
0, 2825, 1675, 1605, 1505, 1440, 1150。

【００４３】上記で得た目的化合物を実施例２後段と同
様に処理して目的化合物物の塩酸塩を得た。１）融点：１４９−１５１℃（分解）。

【００４４】実施例５Ｎ−［２−（４−ジフェニルメチル−１−ピペラジニ
ル）エチル］−５，５−ジフェニル−２，４−ペンタジ
エン酸アミド（例示化合物番号１）５，５−ジフェニル−２，４−ペンタジエン酸５００
ｍｇと４−ジフェニルメチル−１−（２−アミノエチ
ル）ピペラジン６５０ｍｇを用いて実施例１（ｂ）と
同様に処理して目的化合物を泡状物として８７０ｍｇ
（収率８３％）得た。１）ＮＭＲスペクトル δ ppm（CDCl₃)：2.20-2.65(10
H, m), 3.37(2H, br q, J=5.6Hz), 4.21(1H, s),6.04(1
H, d, J=15.0Hz), 6.08(1H, br t, J=4.5Hz),6.76(1H,
d, J=11.5Hz), 7.14-7.48(21H, m) ２）ＩＲスペクトル ν_max cm^-1 (CHCl₃)：3420, 300
0, 2820, 1655, 1610, 1500, 1450, 1152。

【００４５】上記で得た目的化合物を実施例１（ａ）後
段と同様に処理して目的化合物の塩酸塩を得た。１）融点：１４０−１４４℃。

【００４６】実施例６Ｎ−［２−（４−ジフェニルメチル−１−ピペラジニ
ル）エチル］−７，７−ジフェニル−２，４，６−ヘプ
タトリエン酸アミド（例示化合物番号５）７，７−ジフェニル−２，４，６−ヘプタトリエン酸
２７６ｍｇと４−ジフェニルメチル−１−（２−アミノ
エチル）ピペラジン３２５ｍｇを用いて、実施例１
（ｂ）と同様に処理して目的化合物を泡状物として３
８０ｍｇ（収率６９％）得た。１）ＮＭＲスペクトル δ ppm（CDCl₃)：2.22-2.64(10
H, m), 3.41(2H, br q, J=5.5Hz), 4.23(1H, s),5.87(1
H, d, J=14.6Hz), 6.04(1H, br t, J=4.4Hz),6.46(1H,
dd, J=14.6Hz, J=11.2Hz), 6.62(1H, dd, J=14.6Hz, J=
11.2Hz),6.78(1H, d, J=11.2Hz), 7.30-7.50(21H, m) ２）ＩＲスペクトル ν_max cm^-1 (CHCl₃)：3400, 300
0, 2810, 1650, 1615, 1600, 1495, 1450, 1245, 115
0。

【００４７】上記で得た目的化合物を実施例１（ａ）後
段と同様に処理して目的化合物の塩酸塩を得た。１）融点：１２５−１３２℃（分解）。

【００４８】実施例７Ｎ−［２−［４−ビス（４−フルオロフェニル）メチル
−１−ピペラジニル］エチル］−５，５−ビス（４−ク
ロロフェニル）−２，４−ペンタジエン酸アミド（例示
化合物番号１３１）５，５−ビス（４−クロロフェニル）−２，４−ペンタ
ジエン酸２００ｍｇと４−ビス（４−フルオロフェニ
ル）メチル−１−（２−アミノエチル）ピペラジン２
２８ｍｇを用いて、実施例１（ｂ）と同様に処理して目
的化合物を泡状物として２００ｍｇ（収率７３％）得
た。１）ＮＭＲスペクトル δ ppm（CDCl₃)：2.27-2.57(10
H, m), 3.33-3.45(2H, m), 4.23(1H, s),6.01-6.18(1H,
br), 6.06(1H, d, J=15.2Hz), 6.73(1H, d, J=11.2H
z),6.90-7.03(4H, m), 7.08-7.44(17H, m) ２）ＩＲスペクトル ν_max cm^-1 (CHCl₃)：3400, 300
0, 2950, 2820, 1655, 1603, 1505, 1152。

【００４９】上記で得た目的化合物を実施例１（ａ）後
段と同様に処理して目的化合物の塩酸塩を得た。１）融点：１４２−１４５℃。

【００５０】実施例８Ｎ−［２−［４−ビス（４−フルオロフェニル）メチル
−１−ピペラジニル］エチル］−５−（４−クロロフェ
ニル）−５−フェニル−２，４−ペンタジエン酸アミド
（例示化合物番号１３２）５−（４−クロロフェニル）−５−フェニル−２，４−
ペンタジエン酸２００ｍｇと４−ビス（４−フルオロフ
ェニル）メチル−１−（２−アミノエチル）ピペラジン
２５６ｍｇを用いて、実施例１（ｂ）と同様に処理し
て目的化合物を泡状物として２６０ｍｇ（定量的収
率）得た。１）ＮＭＲスペクトル δ ppm（CDCl₃)：2.24-2.60(10
H, m), 3.69-3.46(2H, m), 4.22(1H, s),5.96-6.13(1H,
br), 6.04(1H, d, J=14.5Hz),6.74(2H, dd, J=14.5Hz,
J=11.2Hz), 6.92-7.03(4H, m),7.08-7.45(18H, m) ２）ＩＲスペクトル ν_max cm^-1 (CHCl₃)：3400, 300
0, 2820, 1655, 1605, 1505, 1155。

【００５１】上記で得た目的化合物を実施例１（ａ）後
段と同様に処理して目的化合物の塩酸塩を得た。１）融点：１４９−１５２℃。

【００５２】実施例９Ｎ−［２−（４−ジフェニルメチル−１−ピペラジニ
ル）エチル］−５，５−ビス（４−クロロフェニル）−
２，４−ペンタジエン酸アミド（例示化合物番号７０）５，５−ビス（４−クロロフェニル）−２，４−ペンタ
ジエン酸２００ｍｇと４−ジフェニルメチル−１−
（２−アミノエチル）ピペラジン２０３ｍｇを用い
て、実施例１（ｂ）と同様に処理して目的化合物を結晶
として３３０ｍｇ（収率８８％）得た。１）融点：１８４−１８９℃ ２）ＮＭＲスペクトル δ ppm（CDCl₃)：2.30-2.57(10
H, m), 3.38(2H, br q, J=5.9Hz), 4.24(1H, s),6.05-
6.19(1H, br), 6.06(1H, d, J=14.5Hz), 6.73(1H, d, J
=11.2Hz),7.06-7.47(19H, m) ３）ＩＲスペクトル ν_max cm^-1 (CHCl₃)：3400, 300
0, 2950, 2820, 1655, 1610, 1590, 1490, 1450, 1150,
1090。

【００５３】上記で得た目的化合物を実施例１（ａ）後
段と同様に処理して目的化合物の塩酸塩を得た。１）融点：１３５−１３８℃。

【００５４】実施例１０Ｎ−［２−（４−ジフェニルメチル−１−ピペラジニ
ル）エチル］−５−（４−クロロフェニル）−５−フェ
ニル−２，４−ペンタジエン酸アミド（例示化合物番号
７９）５−（４−クロロフェニル）−５−フェニル−２，４−
ペンタジエン酸２００ｍｇと４−ジフェニルメチル−１
−（２−アミノエチル）ピペラジン２２８ｍｇを用い
て、実施例１（ｂ）と同様に処理して目的化合物を泡状
物として３７０ｍｇ（収率９４％）得た。１）ＮＭＲスペクトル δ ppm（CDCl₃)：2.27-2.61(10
H, m), 3.31-3.46(2H, m), 4.23(1H, s),6.05(1H, d, J
=15.2Hz), 6.05-6.18(1H, br),6.75(1H, dd, J=14.5Hz,
J=11.2Hz), 6.75(1H, dd, J=14.5Hz, J=11.2Hz),7.09-
7.46(20H, m) ２）ＩＲスペクトル ν_max cm^-1 (CHCl₃)：3420, 330
0, 2950, 2820, 1655, 1610, 1490, 1450, 1152。

【００５５】上記で得た目的化合物を実施例１（ａ）後
段と同様に処理して目的物の塩酸塩を得た。１）融点：１２３−１２５℃。

【００５６】実施例１１Ｎ−［３−［４−ビス（４−フルオロフェニル）メチル
−１−ピペラジニル］プロピル］−５，５−ジフェニル
−２，４−ペンタジエン酸アミド（例示化合物番号１
１）５，５−ジフェニル−２，４−ペンタジエン酸アミド
２００ｍｇと４−ビス（４−フルオロフェニル）メチル
−１−（３−アミノプロピル）ピペラジン３０４ｍｇを
用いて、実施例１（ｂ）と同様に処理して目的化合物を
泡状物として４１０ｍｇ（収率８９％）得た。１）ＮＭＲスペクトル δ ppm（CDCl₃)：1.54-1.74(2
H, m), 2.26-2.57(10H, m), 3.38(2H, br q, J=5.9Hz),
4.22(1H. s), 5.79(1H, d, J=14.5Hz), 6.75(1H, d, J=
11.2Hz),6.91-7.01(4H, m), 7.01-7.12(1H, br), 7.11-
7.43(15H, m) ２）ＩＲスペクトル ν_max cm^-1 (CHCl₃)：3450, 327
5, 3000, 2950, 2820, 1660, 1605, 1505, 1442, 115
2。

【００５７】上記で得た目的化合物を実施例１（ａ）後
段と同様に処理して目的物の塩酸塩を得た。１）融点：２３９−２４１℃。

【００５８】実施例１２Ｎ−［３−［４−ビス（４−フルオロフェニル）メチル
−１−ピペラジニル］プロピル］−７，７−ジフェニル
−２，４，６−ヘプタトリエン酸アミド（例示化合物番
号１５）７，７−ジフェニル−２，４，６−ヘプタトリエン酸
２４３ｍｇと４−ビス（４−フルオロフェニル）メチル
−１−（３−アミノプロピル）ピペラジン３０４ｍｇを
用いて、実施例１（ｂ）と同様に処理して目的物を泡状
物として４７０ｍｇ（収率９８％）得た。１）ＮＭＲスペクトル δ ppm（CDCl₃)：1.55-1.74(2
H, m), 2.30-2.56(8H, m), 3.39(2H, br q, J=5.9Hz),
4.25(1H, s), 5.78(1H, d, J=15.2Hz),6.45(1H, dd, J=
14.5Hz, J=11.2Hz), 6.63(1H, dd, J=14.5Hz, J=11.2H
z),6.83(1H, d, J=11.2Hz), 6.42-7.04(4H, m), 7.07-
7.45(16H, m) ２）ＩＲスペクトル ν_max cm^-1 (CHCl₃)：3450, 325
0, 3000, 2950, 2800, 1650, 1600, 1500, 1440, 115
0。

【００５９】上記で得た目的化合物を実施例１（ａ）後
段と同様に処理して目的物の塩酸塩を得た。１）融点：１４５−１５０℃。

【００６０】実施例１３Ｎ−［２−［４−ビス（４−フルオロフェニル）メチル
−２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−１Ｈ−１，
４−ジアゼピン−１−イル］エチル］−５，５−ジフェ
ニル−２，４−ペンタジエン酸アミド（例示化合物番号
１２）５，５−ジフェニル−２，４−ペンタン酸１８６ｍｇ
と４−ビス（４−フルオロフェニル）メチル−１−（２
−アミノエチル）ホモピペラジン２７０ｍｇを用いて
実施例１（ｂ）と同様に処理して、目的化合物を泡状物
として３９０ｍｇ（収率９１％）得た。１）ＮＭＲスペクトル δ ppm（CDCl₃)：1.67-1.82(2
H, m), 2.52-2.74(8H, m), 2.80(2H, t, J=5.3Hz),3.37
(2H, br q, J=5.3Hz), 4.58(1H, s), 6.06(1H, d, J=1
4.5Hz),6.14-6.40(1H, br), 6.77(1H, d, J=11.2Hz),
6.89-7.03(4H, m),7.14-7.46(15H, m) 。

【００６１】試験例１ＬＤＬ受容体遺伝子増強活性
（クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼを
用いたアッセイ法）ＬＤＬ受容体遺伝子の発現量の定量は、基本的にはSudh
off 等の方法（Cell、48, 1061-1069 (1987) ）を用い
た。すなわち、ＬＤＬレセプター遺伝子のプロモーター
領域に存在する、ＳＲＥ(Sterol Responsive Element)
と呼ばれるＤＮＡ領域をＤＮＡ合成機（アプライドバイ
オシステムズ社製）を用いて、化学的に合成し、細菌の
クロラムフェニコール耐性遺伝子を持つプラスミドへと
挿入した。次に、作成した組み換えプラスミドをチャイ
ニーズ・ハムスター卵巣細胞へ遺伝子導入装置（（株）
島津製作所製）を用いて導入した。この細胞のＬＤＬ受
容体遺伝子のレベルはクロラムフェニコールアセチル
トランスフェラーゼ（ＣＡＴ）の活性を測ることで定量
できる。この方法は、一般にレポーターアッセイ法と呼
ばれる方法であり、ゴーマンらによって報告された（Mo
lecular and Cellular Biology、2 、1044-1051 (198
2) ）。ＬＤＬ受容体遺伝子とＣＡＴ遺伝子を染色体上
に有する細胞の抽出液の調製法とクロラムフェニコール
アセチルトランスフェラーゼの測定法は、上記のゴー
マンらの方法に従った。また、この細胞の培養は、以下
のように行った。即ち、４穴プレートに適当な数の細胞
を植え込み、２４時間後に培養液（９０％ α−ＭＥＭ
(Minimum Essential Medium)＋１０％牛胎児血清（ＦＣ
Ｓ））を除き、適当な量のサンプルを添加した培養液
（95%α−MEM ＋5 % FCS ）でさらに２４時間培養し
た。細胞培養は、３７℃に保温した５％炭酸ガスインキ
ュベーター中で行った。被検化合物を培養液に添加し、
２４時間後に細胞抽出液を調製して、クロラムフェニコ
ールアセチルトランスフェラーゼの活性を測定した結
果、サンプル無添加のコントロールと比較してクロラム
フェニコールアセチルトランスフェラーゼ（ＣＡＴ）
の活性の上昇が見られた。従って、ＬＤＬの受容体遺伝
子の発現を上昇させている事が示された。実施例２の化
合物は特に優れたＬＤＬ受容体遺伝子増強活性を示し、
０．３μｇ／ｍｌの濃度で培養液に添加すると、無添加
のコントロールに比べて約２倍のＣＡＴ活性の上昇が見
られた。

【００６２】試験例２ＬＤＬ受容体遺伝子増強活性
（ルシフェラーゼ・アッセイ）ルシフェラーゼ・アッセイ法は、上記の試験例１で述べ
たレポーターアッセイ法の一種であり、クロラムフェニ
コールアセチルトランスフェラーゼ遺伝子のかわり
に、蛍由来のルシフェラーゼ遺伝子を用いる方法である
（J. R. de WetらMolecular and Cellular Biology、
7、 725-737 (1987))。上記の試験例１で述べた化学合
成したＬＤＬ受容体遺伝子のプロモーター領域に、蛍ル
シフェラーゼ遺伝子を結合したプラスミドを作成して、
チャイニーズ・ハムスター卵巣細胞（ＣＨＯ）へ同様な
方法で導入した。この細胞のＬＤＬ受容体遺伝子のレベ
ルはルシフェラーゼの活性を測ることで定量できる。

【００６３】ルシフェラーゼ酵素のアッセイ用試薬とし
ては、ピッカジーンルシフェラーゼアッセイシステム
（東洋インキ（株）社製）を使用した。ケミルミネッセ
ンス測定装置（ルミノメーター）としては、ラボシステ
ムズ社のルミノスキャンを用いた。細胞の培養と破砕法
は、以下の方法で行った。即ち、ＬＤＬ受容体遺伝子プ
ロモーターとルシフェラーゼ遺伝子を組み込んだＣＨＯ
細胞を１２穴プレートに適当量植え込み、約２４時間後
に培養液（90 % α−MEM ＋10 % FCS）を除き、被検化
合物を添加した培養液（95 % α−MEM ＋5 % FCS ）と
交換した。さらに、２４時間培養後、培養液を除き、緩
衝液（137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 4.3mM Na₂HPO₄, 1.4
mM KH₂PO₄ ）で細胞を２回洗い、９０μl の細胞溶解液
（25mM Tris-phosphate, pH 7.8 、2 mM DTT、 2 mM 1,2
-diaminocyclohexane-N,N,N',N'-tetraacetic acid、10
% Glycerol, 1 % Triton X-100 ）を加えた後、低速遠
心機で遠心した上清を細胞粗抽出液として、ルシフェラ
ーゼアッセイに用いた。細胞抽出液の蛋白質濃度は、Ｂ
ｉｏ−Ｒａｄ社製のＰｒｏｔｅｉｎＡｓｓａｙＫｉｔ
を用いて測定した。ルシフェラーゼアッセイ用９６穴プ
レートに細胞粗抽出液２０μl を入れ、プレートをルミ
ノスキャンにセットした後、発光基質液（20 mM Tricin
e、 33.3 mM DTT、1.07 mM (MgCO₃)₄ Mg(OH)₂/5H₂O、270
μM Coenzyme A、 2.67 mM MgSO₄、 470μM luciferin、
0.1 mM EDTA、 530μM ATP ）を１００μl ずつ分注して
室温で反応を開始させた。反応開始後、５秒間の発光量
の積分値（単位：ｒｌｕ）を読み取り、蛋白質量（単
位：ｍｇ）で割った値（ｒｌｕ／ｍｇ）を計算した。そ
の結果、無添加のコントロールに比べて、本発明の化合
物はルシフェラーゼ活性を上昇させる活性があった。

【００６４】実施例２の化合物は特に優れたＬＤＬ受容
体遺伝子増強活性を示し、０．３μｇ／ｍｌの濃度で培
養液に添加すると、無添加のコントロールに比べて約３
倍のルシフェラーゼ活性の上昇が見られた。

【００６５】試験例３ＬＤＬ受容体増強活性（放射性
ヨード標識ＬＤＬＢＩＮＤＩＮＧＡＳＳＡＹ）ＬＤＬ受容体遺伝子発現増強作用が、実際にＬＤＬ受容
体蛋白質の上昇につながるかどうかを確認するために、
ＬＤＬ受容体にヨードで放射標識したＬＤＬ（［¹²⁵
Ｉ］- ＬＤＬ）を結合させて、ＬＤＬ受容体の上昇を直
接確認する実験を行った。ヒト新鮮血１４０ｍｌより、
Goldstein らの方法（Method in Enzymology、 98、241-
260 (1983) ）に従って、コレステロ−ルを除いたヒト
血清（ＬＰＤＳ）およびヒトＬＤＬを調製した。ＬＤＬ
のヨード標識と細胞への結合実験もGoldsteinらの方法
に従った。ヒト繊維芽細胞ＮＨＤＦの培養は、適当量の
培養液（90 % E-MEM＋ESSENTIAL AMINO ACIDS(GIBCO)＋
L-GLUTAMINE(SIGMA)＋SODIUMBICARBONATE (SIGMA)＋PEN
ICILLIN /STREPTOMYCIN (SIGMA)＋10 % FCS）を用いて
行った。２４穴のプレートに適当な数の細胞を植え込
み、血清濃度を５％に落として、被検化合物を添加し
た。２４時間後に、培地を除き、２００μl の培養液
（90 % E-MEM＋10 % LPDS ）に［¹²⁵ Ｉ］- ＬＤＬ（10
μg/ml）を添加した。３７℃で２時間放置後、１ｍｌの
Buffer B (150 mM NaCl, 50 mM Tris, 2mg/mlBSA ( Bo
vine Serum Albumin ; 生化学工業 Fraction V) ) で
３回洗浄し、さらに Buffer A ( Buffer B without BSA
)で１回洗浄した。０．５ｍｌの０．１ＭＮａＯＨを
添加して細胞を溶解し、懸濁液をチューブに移してガン
マカウンターで放射性ヨードを測定した。上記の培養液
に、非標識ＬＤＬ（500 μg/ml）を加えた場合のカウン
トを非特異的結合として最終的に差し引いた。細胞破砕
液の一部を蛋白質の定量に用いた。ガンマカウンターに
よって測定した放射活性より、取り込まれた［¹²⁵ Ｉ］
−ＬＤＬ量を計算し、細胞の蛋白質量で割って、ｎｇＬ
ＤＬ／ｍｇＰｒｏｔｅｉｎで活性を表した。その結
果、本発明の化合物は［¹²⁵ Ｉ］−ＬＤＬのヒト繊維芽
細胞への結合と細胞内への取り込みをコントロールに比
べ上昇させた。

【００６６】実施例２の化合物は特に優れたＬＤＬ受容
体遺伝子増強活性を示し、０．３μｇ／ｍｌの濃度で培
養液に添加すると、無添加のコントロールに比べて約６
倍のＬＤＬ結合活性の上昇が見られた。

【００６７】試験例４コレステロ−ル低下作用正常食を与えた雄性ゴールデンハムスター（体重１３０
ｇ）を一群４匹用いた。１％ tween 80 で懸濁した被検
化合物を１日１回７日間経口投与した。最終投与後１７
時間絶食し、ハムスターをエーテル深麻酔し、心臓より
採血した。血液を３０分間室温で放置後２０００×ｇで
１０分間４℃にて遠心分離し血清を得た。分離した血清
のコレステロ−ルを酵素的測定法にて測定した。

【００６８】実施例２の化合物はコントロール群と比べ
て優れたコレステロール低下活性を示し、コントロール
群に比べて総コレステロールを２５％低下させた。

【００６９】

【発明の効果】本発明の新規化合物ジフェニルメチルピ
ペラジン誘導体またはその薬理上許容される塩は優れた
ＬＤＬ受容体遺伝子発現増強作用を有し脂質代謝障害に
よる高コレステロ−ル血症などの高脂血症、アテロ−ム
性動脈硬化症の予防薬、治療薬として使用できる。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】一般式【化１】［式中、Ｒ¹ 、Ｒ² 、Ｒ³ およびＲ⁴ は同一もしくは異
なって水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル基または
低級アルコキシ基を示し、ｍは０乃至２を示し、ｎは２
乃至４を示し、ｐは１乃至２を示す。］を有するジフェ
ニルメチルピペラジン誘導体またはその薬理上許容され
る塩。