JP5753626B2

JP5753626B2 - ピラゾリジン−３−オン誘導体

Info

Publication number: JP5753626B2
Application number: JP2014505663A
Authority: JP
Inventors: ヤーシュケ，ゲオルク; ヨリドン，ジネーゼ; リンデマン，ローター; リッチ，アントーニオ; リュエル，ダニエル; シュタードラー，ハインツ; フィエイラ，エリック
Original assignee: F Hoffmann La Roche AG
Current assignee: F Hoffmann La Roche AG
Priority date: 2011-04-26
Filing date: 2012-04-23
Publication date: 2015-07-22
Anticipated expiration: 2032-04-23
Also published as: EP2702050B1; MA35134B1; CA2829171C; HK1191329A1; KR20130143141A; CL2013003068A1; US8648088B2; CA2829171A1; CO6801735A2; US20120277243A1; MY165141A; TWI434840B; EP2702050A1; MX2013011107A; CR20130476A; CN103492374A; UA113625C2; NZ614883A; TW201309669A; AU2012247654A1

Description

本発明は、式Ｉ：

［式中、
Ｘは、Ｎ又はＣＨであり；
Ｇは、Ｎ又はＣＨであり；
但し、Ｘ又はＧの最大限１つは、窒素であることができ；
Ｒ^１は、フェニル又はピリジルであり、これらは、ハロゲン、低級アルキル又は低級アルコキシにより場合により置換されており；
Ｒ^２は、水素、低級アルキルであるか、又はＲ^４と一緒になって、Ｃ_３−Ｃ_６−シクロアルキルを形成することもでき；
Ｒ^３／Ｒ^３’／Ｒ^４／Ｒ^４’は、互いに独立して、水素、低級アルキル又はＣＦ_３である］
で表されるエチニル誘導体、あるいはそれらの薬学的に許容しうる酸付加塩、ラセミ混合物、又はその対応するエナンチオマー及び／又は光学異性体及び／又は立体異性体に関する。

ここで驚くべきことに、一般式Ｉで示される化合物は、代謝型グルタマート受容体サブタイプ５（ｍＧｌｕＲ５）のポジティブアロステリックモジュレーター（ＰＡＭ）であるということが見出された。

中枢神経系（ＣＮＳ）において、刺激の伝達は、ニューロンより放出される神経伝達物質の神経性受容体との相互作用によって起こる。

グルタマートは脳内の主要な興奮性神経伝達物質であり、種々の中枢神経系（ＣＮＳ）機能において、独自の役割を演じる。グルタマート依存性の刺激受容体は、二つの主要なグループに分類されている。第１の主要グループ（すなわち、イオンチャンネル型受容体）は、リガンド制御型イオンチャネルを形成する。代謝調節型グルタマート受容体（ｍＧｌｕＲ）は、第二の主要なグループに属し、さらにＧタンパク質共役型受容体のファミリーに属する。

現在のところ、このようなｍＧｌｕＲの８つの異なるメンバーが知られており、このうち幾つかには、サブタイプさえある。
それらの配列相同性、シグナル伝達機構及びアゴニスト選択性に従って、これら８つの受容体は、３つのサブグループに再分割され得：
ｍＧｌｕＲ１及びｍＧｌｕＲ５は、グループＩに属し、ｍＧｌｕＲ２及びｍＧｌｕＲ３は、グループＩＩに属し、そしてｍＧｌｕＲ４、ｍＧｌｕＲ６、ｍＧｌｕＲ７及びｍＧｌｕＲ８は、グループＩＩＩに属する。

第１グループに属する代謝型グルタマート受容体のリガンドは、急性及び／又は慢性神経障害（例えば、精神病、癲癇、統合失調症、アルツハイマー病、認知障害及び記憶欠損）ならびに慢性及び急性痛の治療又は予防のために使用され得る。

これと関連したその他の処置可能な適応症は、バイパス術又は移植により引き起こされた制限された脳機能、脳への血液供給の不足、脊髄損傷、頭部損傷、妊娠により引き起こされた低酸素、心停止、及び低血糖である。さらなる処置可能な適応症は、虚血、ハンチントン舞踏病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、エイズにより引き起こされた認知症、眼損傷、網膜症、特発性パーキンソニズム又は薬物により引き起こされたパーキンソニズム、ならびにグルタマート欠乏機能につながる病状、例えば、筋痙攣、痙攣、片頭痛、尿失禁、ニコチン中毒、アヘン中毒、不安症、嘔吐、ジスキネジア及びうつ病などである。

完全又は部分的にｍＧｌｕＲ５によって介在される障害は、例えば、神経系の急性、外傷性及び慢性変性過程（例えば、アルツハイマー病、老年認知症、パーキンソン病、ハンチントン舞踏病、筋萎縮性側索硬化症及び多発性硬化症）、精神疾患（例えば、統合失調症及び不安症）、うつ病、疼痛及び薬物依存である（Expert Opin. Ther. Patents (2002), 12, (12)）。

選択的モジュレーターを開発するための新しい手段は、高度に保存されたオルソステリック結合部位とは異なる部位に結合することによって受容体を調節する、アロステリック機構を通じて作用する化合物を同定することである。最近になって、ｍＧｌｕＲ５の陽性アロステリックモジュレーターが、この魅力的な代替手段を提供する新規な薬学的実体として出現した。陽性アロステリックモジュレーターは、例えば、ＷＯ２００８／１５１１８４、ＷＯ２００６／０４８７７１、ＷＯ２００６／１２９１９９及びＷＯ２００５／０４４７９７に、そしてMolecular Pharmacology, 40, 333 - 336, 1991; The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics, Vol 313, No. 1, 199-206, 2005に記載されている。

陽性アロステリックモジュレーターは、それら自身によって受容体を直接活性化しないが、アゴニストによって刺激される反応を著しく増強し、効力及び最大有効性を増す、化合物である。これらの化合物の結合は、その細胞外Ｎ末端結合部位での、グルタマート部位アゴニストの親和性を増す。このように、陽性アロステリックモジュレーターは、適切な生理的受容体活性化を高めるために魅力的な機構である。ｍＧｌｕＲ５受容体の選択的陽性アロステリックモジュレーターの不足がある。従来のｍＧｌｕＲ５受容体モジュレーターは、典型的には、満足のいく水溶解性を欠き、そして経口バイオアベイラビリティーの不良を示す。したがって、これらの欠乏を克服し、かつｍＧｌｕＲ５受容体の選択的陽性アロステリックモジュレーターを効果的に提供する、化合物の必要性が依然としてある。

式Ｉで示される化合物は、有益な治療特性を有することにより識別される。それらは、ｍＧｌｕＲ５受容体の陽性アロステリックモジュレーターに関連する障害の治療又は予防において使用され得る。

陽性アロステリックモジュレーターである化合物の最も好ましい適応症は、統合失調症及び認知である。

本発明は、式Ｉの化合物及びそれらの薬学的に許容しうる塩、薬学的に活性な物質としてのそれらの化合物、それらの製造プロセス、ならびにｍＧｌｕＲ５受容体の陽性アロステリックモジュレーターに関連する障害、例えば、統合失調症、結節性硬化症及び認知の治療又は予防における使用及び式Ｉの化合物を含有する医薬組成物に関する。

本明細書で使用される一般的用語の下記の定義は、問題になっている用語が単独で現れるか、又は組み合わせで現れるかにかかわらず、適用される。

本明細書で使用される場合、用語「低級アルキル」は、１〜４個の炭素原子を有する直鎖又は分岐鎖の炭素鎖を含む、飽和、すなわち脂肪族炭化水素基を示す。「アルキル」の例は、メチル、エチル、ｎ−プロピル及びイソプロピルである。

用語「アルコキシ」は、Ｒ’が、先に定義したとおりの低級アルキルである、基−Ｏ−Ｒ’を示す。

用語「ハロゲン」は、フルオロ、クロル、ブロモ又はヨウ化を示す。

用語「薬学的に許容しうる塩」又は「薬学的に許容しうる酸付加塩」は、無機及び有機酸、例えば、塩酸、硝酸、硫酸、リン酸、クエン酸、ギ酸、フマル酸、マレイン酸、酢酸、コハク酸、酒石酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸等との塩を包含する。

本発明の一実施態様は、式ＩＡ：

［式中、
Ｒ^１は、フェニル又はピリジルであり、これらは、ハロゲン、低級アルキル又は低級アルコキシにより場合により置換されており；
Ｒ^２は、水素、低級アルキルであるか、又はＲ^４と一緒になって、Ｃ_３−Ｃ_６−シクロアルキルを形成することもでき；
Ｒ^３／Ｒ^３’／Ｒ^４／Ｒ^４’は、互いに独立して、水素、低級アルキル又はＣＦ_３である］
で表される化合物、あるいはそれらの薬学的に許容しうる酸付加塩、ラセミ混合物、又はその対応するエナンチオマー及び／又は光学異性体及び／又は立体異性体、例えば、以下の化合物である：
５，５−ジメチル−２−（５−フェニルエチニル−ピリジン−２−イル）−ピラゾリジン−３−オン
（ＲＳ）−５−イソプロピル−２−（５−フェニルエチニル−ピリジン−２−イル）−ピラゾリジン−３−オン
１，５，５−トリメチル−２−（５−フェニルエチニル−ピリジン−２−イル）−ピラゾリジン−３−オン
１，５，５−トリメチル−２−（５−ｍ−トリルエチニル−ピリジン−２−イル）−ピラゾリジン−３−オン
２−［５−（３−フルオロ−フェニルエチニル）−ピリジン−２−イル］−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン
２−［５−（３−フルオロ−フェニルエチニル）−ピリジン−２−イル］−１，５，５−トリメチル−ピラゾリジン−３−オン
２−［５−（３−クロロ−フェニルエチニル）−ピリジン−２−イル］−１，５，５−トリメチル−ピラゾリジン−３−オン
２−［５−（４−フルオロ−フェニルエチニル）−ピリジン−２−イル］−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン
（ＲＳ）−１−（５−フェニルエチニル−ピリジン−２−イル）−テトラヒドロ−ピロロ［１，２−ｂ］ピラゾール−２−オン
２−［５−（２−クロロ−ピリジン−４−イルエチニル）−ピリジン−２−イル］−１，５，５−トリメチル−ピラゾリジン−３−オン
２−［５−（２，５−ジフルオロ−フェニルエチニル）−ピリジン−２−イル］−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン
１−エチル−５，５−ジメチル−２−（５−フェニルエチニル−ピリジン−２−イル）−ピラゾリジン−３−オン
１−エチル−２−［５−（４−フルオロ−フェニルエチニル）−ピリジン−２−イル］−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン
（ＲＳ）−１−エチル−５−イソプロピル−２−（５−フェニルエチニル−ピリジン−２−イル）−ピラゾリジン−３−オン、又は
（ＲＳ）−５−メチル−２−（５−フェニルエチニル−ピリジン−２−イル）−５−トリフルオロメチル−ピラゾリジン−３−オン。

本発明のさらなる一実施態様は、式ＩＢ：

［式中、
Ｒ^１は、フェニル又はピリジルであり、これらは、ハロゲン、低級アルキル又は低級アルコキシにより場合により置換されており；
Ｒ^２は、水素、低級アルキルであるか、又はＲ^４と一緒になって、Ｃ_３−Ｃ_６−シクロアルキルを形成することもでき；
Ｒ^３／Ｒ^３’／Ｒ^４／Ｒ^４’は、互いに独立して、水素、低級アルキル又はＣＦ_３である］
で表される化合物、あるいはそれらの薬学的に許容しうる酸付加塩、ラセミ混合物、又はその対応するエナンチオマー及び／又は光学異性体及び／又は立体異性体、例えば、以下の化合物である：
５，５−ジメチル−２−（５−フェニルエチニル−ピリミジン−２−イル）−ピラゾリジン−３−オン
（ＲＳ）−１−（５−フェニルエチニル−ピリミジン−２−イル）−テトラヒドロ−ピロロ［１，２−ｂ］ピラゾール−２−オン
（ＲＳ）−１−［５−（３−フルオロ−フェニルエチニル）−ピリミジン−２−イル］−テトラヒドロ−ピロロ［１，２−ｂ］ピラゾール−２−オン
（ＲＳ）−１−［５−（４−フルオロ−フェニルエチニル）−ピリミジン−２−イル］−テトラヒドロ−ピロロ［１，２−ｂ］ピラゾール−２−オン
１，５，５−トリメチル−２−（５−フェニルエチニル−ピリミジン−２−イル）−ピラゾリジン−３−オン
２−［５−（３−フルオロ−フェニルエチニル）−ピリミジン−２−イル］−１，５，５−トリメチル−ピラゾリジン−３−オン
２−［５−（４−フルオロ−フェニルエチニル）−ピリミジン−２−イル］−１，５，５−トリメチル−ピラゾリジン−３−オン、又は
２−［５−（２，５−ジフルオロ−フェニルエチニル）−ピリミジン−２−イル］−１，５，５−トリメチル−ピラゾリジン−３−オン。

本発明のさらなる一実施態様は、式ＩＣ：

［式中、
Ｘは、Ｎ又はＣＨであり；
Ｇは、Ｎ又はＣＨであり；
但し、Ｘ又はＧの最大限１つは、窒素であることができ；
Ｒ^１は、フェニル又はピリジルであり、これらは、ハロゲン、低級アルキル又は低級アルコキシにより場合により置換されており；
Ｒ^２は、水素、低級アルキルであるか、又はＲ^４と一緒になって、Ｃ_３−Ｃ_６−シクロアルキルを形成することもでき；
Ｒ^３／Ｒ^３’／Ｒ^４／Ｒ^４’は、互いに独立して、水素、低級アルキル又はＣＦ_３である］
で表される化合物、あるいはそれらの薬学的に許容しうる酸付加塩、ラセミ混合物、又はその対応するエナンチオマー及び／又は光学異性体及び／又は立体異性体、例えば、以下の化合物である：
２−［６−（２，５−ジフルオロ−フェニルエチニル）−ピリダジン−３−イル］−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン。

本発明のさらなる一実施態様は、式ＩＩ：

［式中、
Ｘは、Ｎ又はＣ−Ｒ^５であり、ここで、Ｒ^５は、水素、メチル又はハロゲンであり；
Ｇ及びＡは、独立して、Ｎ又はＣＨであり；
但し、Ｘ、Ｇ又はＡの最大限１つは、窒素であることができ；
Ｒ^１は、フェニル又はヘテロアリールであり、これらは、ハロゲン、低級アルキル又は低級アルコキシにより場合により置換されており；
Ｒ^２は、水素、低級アルキルであるか、又はＲ^４と一緒になって、Ｃ_３−Ｃ_６−シクロアルキルを形成することもでき；
Ｒ^３／Ｒ^３’／Ｒ^４／Ｒ^４’は、互いに独立して、水素、低級アルキル、ＣＨ_２−低級アルコキシである］
で表されるエチニル誘導体、あるいはそれらの薬学的に許容しうる酸付加塩、ラセミ混合物、又はその対応するエナンチオマー及び／又は光学異性体及び／又は立体異性体である。

本発明の式Ｉで示される化合物の調製は、連続型又は収束型反応経路で実施され得る。本発明の化合物の合成は、以下のスキーム１に示される。反応及び得られた生成物の精製を実施するのに必要とされる技能は、当業者に公知である。方法の以下の、明細書に使用される置換基及び指数は、本明細書で先に示された意味を有する。

式（Ｉ）で示される化合物は、下記で示される方法によって、実施例で示される方法によって、又は同等の方法によって、製造され得る。個別の反応工程における適切な反応条件は、当業者に公知である。しかしながら、反応シーケンスは、スキームに表示されたものに限定されず、出発物質及びそれらそれぞれの反応性に依存して、反応工程シーケンスは、自由に変えられうる。出発物質は、市販であるか、あるいは下記に示される方法と類似の方法によって、本明細書もしくは実施例で引用された参考文献に記載されている方法によって、又は当技術分野において公知の方法によって、調製され得るかのいずれかである。

式Ｉの本化合物及びそれらの薬学的に許容しうる塩は、当技術分野で公知の方法、例えば、後述するプロセス変形型であって、
ａ）式：

で表される化合物を、式：

で表される化合物と反応させて、式：

（式中、置換基は、上述したとおりである）
で表される化合物にすること、又は
ｂ）式：

で表される化合物を、式：
Ｒ^２−Ｘ’
（式中、Ｘ’は、Ｂｒ又はＩである）
で表される化合物と反応させて、式：

（式中、置換基は、上述したとおりである）
で表される化合物を形成すること、又は
ｃ）式：

（式中、Ｘ’は、Ｂｒ、Ｉ、Ｆ、Ｉである）
で表される化合物を、式：

で表される化合物と反応させて、式：

（式中、置換基は、上述したとおりである）
で表される化合物にすること、又は所望であれば、得られた化合物を薬学的に許容しうる酸付加塩に変換すること
を含む、方法により調製されうる。

式Ｉの化合物の調製は、スキーム１〜４及び実施例１〜２４においてさらに詳細に記載される。

式Ｉ−１のエチニル−ピリジン又はエチニル−ピリミジン化合物は、例えば、ジクロロメタンのような溶媒中、ＳＯＣｌ_２などの塩素化試薬の存在下で、適切なα−β−不飽和酸１をベンゾトリアゾール２を反応させて、対応するベンゾトリアゾールアミド３を生成することにより得られうる。ＴＨＦのような溶媒中、トリエチルアミンなどの塩基の存在下で、ベンゾトリアゾールアミド３を５−ヨード−又は５−ブロモ−２−ヒドラジノ複素環誘導体４と反応させると、対応するピラゾリジン−３−オン誘導体５を生成する。ピラゾリジン−３−オン誘導体５と適切に置換されたアリールアセチレン６のSonogashiraカップリングによって、一般式Ｉ−１の所望のエチニル化合物を生成する（スキーム１）。

式Ｉ−２のエチニル−ピリジン又はエチニル−ピリミジン化合物は、例えば、アセトニトリル（ＡＣＮ）のような溶媒中、Ｋ_２ＣＯ_３などの塩基の存在下で、一般式Ｉ−１のエチニル化合物を適切な置換アルキル化剤と反応させて、一般式Ｉ−２の所望のエチニル化合物を生成することにより得られうる（スキーム２）。

式Ｉのエチニル化合物は、また、トルエンのような溶媒中、炭酸セシウムなどの塩基の存在下で（Ｘ＝Ｃｌ、Ｆ）、又はXantphos及びＰｄ_２（ｄｂａ）_３などの適切な配位子を有するパラジウム触媒カップリング条件を用いて（Ｘ＝Ｂｒ，Ｉ）、２−ブロモ−５−ヨードピリジン、５−ヨード−２−フルオロ−ピリジン、５−ヨード−２−ブロモピリミジン、２−クロロ−５−ヨードピリダジン又は２−ブロモ−５−ヨードピラジンなどの適切なパラジハロ置換複素環誘導体７と適切なピラゾリジン−３−オン８を置換して、対応する２−ヘテロアリール−ピラゾリジン−３−オン誘導体９を生成することにより得られうる。９と適切に置換されたアリールアセチレン６のSonogashiraカップリングによって、一般式Ｉの所望のエチニル化合物を生成する（スキーム３）。

一般的に言えば、式Ｉ−１、Ｉ−２又はＩの化合物を合成するために使用する一連の工程は、また、特定の場合において修飾され得、例えば、スキーム１〜３に記載の手順と同様の手順を用いて、最初にSonogashiraカップリングを行って、適切に置換されたアリール−又はヘテロアリール−エチニル誘導体１０を形成し、続いて、ピラゾリジン−３−オン８と反応させることができる（スキーム４）。

生物学的アッセイ及びデータ：
細胞内Ｃａ^２＋動員アッセイ
ヒトｍＧｌｕ５ａ受容体をコードするｃＤＮＡを安定的にトランスフェクトされたモノクローナルＨＥＫ−２９３細胞系を生成した；ｍＧｌｕ５陽性アロステリックモジュレーター（ＰＡＭ）を用いた作業のために、低い受容体発現レベル及び低い構成的受容体活性を有する細胞株を選択して、アゴニストの対ＰＡＭ活性の鑑別を可能にした。細胞を、標準プロトコル（Freshney, 2000）に従って、１mM グルタミン、１０％（v/v）加熱不活性化仔ウシ血清、ペニシリン／ストレプトマイシン、５０μg／mL ハイグロマイシン及び１５μg／mL ブラストサイジンを補充した高グルコースを含むダルベッコ変法イーグル培地中で培養した（全ての細胞培養試薬及び抗生物質はInvitrogen, Basel, Switzerlandより）。

実験の約２４時間前、５×１０^４細胞／ウェルを、ポリ−Ｄ−リシン被覆した黒色／透明底部の９６ウェルプレートに播種した。細胞に、３７℃で１時間、添加液（１×ＨＢＳＳ、２０mM ＨＥＰＥＳ）中の２．５μM Ｆｌｕｏ−４ＡＭを添加し、そして添加液で５回洗浄した。細胞を、Functional Drug Screening System 7000（Hamamatsu, Paris, France）内に移し、そして試験化合物の１１回の半対数段階希釈液を３７℃で加え、そして細胞を、蛍光のオンライン記録と共に１０〜３０分間インキュベートした。この予備インキュベーション工程に続いて、蛍光のオンライン記録と共に、アゴニストＬ−グルタミン酸塩を、ＥＣ_２０（典型的には約８０μM）に対応する濃度で細胞に加えた；細胞の応答性における日毎の変動を説明するために、グルタミン酸塩のＥＣ_２０を、グルタミン酸塩の完全用量反応曲線の記録によって、各実験の直前に決定した。

応答を、蛍光におけるピーク増加−基底（すなわち、Ｌ−グルタミン酸塩の添加なしの蛍光）として測定し、Ｌ−グルタミン酸塩の飽和濃度で得た最大刺激効果に対して標準化した。グラフを、Levenburg Marquardtアルゴリズムを使用してデータを繰り返しプロットする曲線当て嵌めプログラム、XLfitを使用して、最大刺激％でプロットした。使用した単一部位競合分析方程式は、ｙ＝Ａ＋（（Ｂ−Ａ）／（１＋（（ｘ／Ｃ）Ｄ）））であった［式中、ｙは、最大刺激効果％であり、Ａは、最小のｙであり、Ｂは、最大のｙであり、Ｃは、ＥＣ_５０であり、ｘは、競合化合物の濃度のｌｏｇ１０であり、そしてＤは、曲線の傾斜である（ヒル係数）］。これらの曲線から、ＥＣ_５０（半最大刺激が得られた濃度）、ヒル係数ならびにＬ−グルタミン酸塩の飽和濃度で得た最大刺激効果の％における最大応答を計算した。

ＰＡＭ試験化合物を用いた予備インキュベーションの間（すなわち、Ｌ−グルタミン酸塩のＥＣ_２０濃度の適用前）に得られた陽性シグナルは、アゴニスト活性を示し、そのようなシグナルの非存在は、アゴニスト活性の欠如を証明していた。ＥＣ_２０濃度のＬ−グルタミン酸塩の添加後に観察されたシグナルの低下は、試験化合物の阻害活性を示した。

下記表に、調製した化合物１〜２４と対応する結果（ＥＣ_５０、nM）を示す。

実施例１８、２０〜２２は、下記の方法を用いて、ヒトｍＧｌｕＲ５受容体について試験された：

結合実験については、ヒトｍＧｌｕ５ａ受容体をコードするｃＤＮＡを、Schlaeger及びChristensen［Cyto-technology 15:1-13 (1998)］により記載された手順を用いて、ＥＢＮＡ細胞に一過性にトランスフェクトした。細胞膜ホモジネートをアッセイ当日まで−８０℃で保存し、その後、これらを融解させ、結合バッファー（１５mM Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、１２０mM ＮａＣｌ、１００mM ＫＣｌ、２５mM ＣａＣｌ_２、２５mM ＭｇＣｌ_２、ｐＨ７．４）に再懸濁し、ポリトロン処理（polytronised）して、２０μgタンパク質／ウェルの最終アッセイ濃度にした。

これらの膜に、１２種類の濃度（０．０４〜１００nM）の［^３Ｈ］ＭＰＥＰを、４℃で１時間かけて加えることによって（合計容量２００μl）、飽和等温線を決定した。固定濃度の［^３Ｈ］ＭＰＥＰ（２nM）で競合実験を実施し、１１種類の濃度（０．３〜１０，０００nM）を使用して試験化合物のＩＣ_５０値を評価した。インキュベーションは、４℃で１時間かけて実施された。

インキュベーションの終わりに、Filtermate 96ハーベスター（Packard BioScience）を備えたユニフィルター（洗浄バッファー中０．１％ＰＥＩで１時間プレインキュベートした、ＧＦ／Ｃフィルターが結合した９６ウェル白色マイクロプレート、Packard Bio-Science, Meriden, CT）で膜を濾過し、冷Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（５０mM、ｐＨ７．４）バッファーで３回洗浄した。１０μM ＭＰＥＰの存在下で非特異的結合を測定した。４５μlのmicroscint 40（Canberra Packard S.A., Zurich, Switzerland）を加えた後に補正をクエンチングし、２０分間振盪し、Packard Top-countマイクロプレートシンチレーションカウンターでフィルター上の放射能をカウントした（３分間）。

機能アッセイについては、ＨＥＫ−２９３細胞の組み換えヒトｍＧｌｕ５ａ受容体で、Porter等［Br. J. Pharmacol. 128:13-20 (1999)］により以前に記載されたように［Ｃａ^２＋］ｉ測定を実施した。Fluo 4-AM（ＦＬＵＫＡから入手可能、０．２μMの最終濃度）を使用して、細胞に色素をロードした。蛍光測定用イメージングプレートリーダー（FLIPR, Molecular Devices Corporation, La Jolla, CA, USA）を使用して、［Ｃａ^２＋］ｉ測定を実施した。アンタゴニストの評価は、試験化合物との５分間のプレインキュベーション、続く、最大下添加（submaximal addition）のアゴニストを加えることによって実施された。

阻害（アンタゴニスト）曲線を、ＩＣ_５０を与える４パラメーターロジスティック方程式、及び反復非線形曲線適合ソフトウエア（Xcel fit）を使用するＨｉｌｌ係数と適合させた。

結合実験については、試験化合物のＫｉ値が与えられた。Ｋｉ値は、下記式により定義される：
Ｋ_ｉ＝ＩＣ_５０／［１＋Ｌ／Ｋ_ｄ］
（式中、ＩＣ_５０値は、競合する放射性リガンド（［^３Ｈ］ＭＰＥＰ）の５０％阻害をもたらす試験化合物の濃度である。Ｌは、結合実験で使用する放射性リガンドの濃度であり、そして、放射性リガンドのＫ_ｄ値は、調製した膜の各バッチについて実験的に決定される）

式Ｉで示される化合物及びそれらの薬学的に許容しうる塩は、医薬として、例えば、医薬製剤の形態で使用されうる。医薬製剤は、例えば錠剤、コーティング錠、糖衣錠、硬及び軟ゼラチンカプセル剤、液剤、乳剤又は懸濁剤の剤形で、経口投与されうる。しかし、投与はまた、例えば、坐剤の剤形で直腸内にも、又は例えば、注射液の剤形で非経口的にも実施されうる。

式Ｉの化合物及びそれらの薬学的に許容されうる塩は、医薬製剤の製造ため、薬学的に不活性な無機又は有機の担体と共に加工されうる。乳糖、トウモロコシデンプン又はその誘導体、タルク、ステアリン酸又はその塩等を、例えば、錠剤、コーティング錠、糖衣錠及び硬ゼラチンカプセル剤のためのそのような担体として使用することができる。軟ゼラチンカプセル剤のための適切な担体は、例えば、植物油、ロウ、脂肪、半固体及び液体ポリオール類等である。しかし、活性物質の性質に応じて、軟ゼラチンカプセル剤の場合は、通常担体を必要としない。液剤及びシロップ剤の製造に適切な担体は、例えば水、ポリオール、ショ糖、転化糖、グルコース等である。アルコール、ポリオール、グリセロール、植物油等のような佐剤は、式Ｉの化合物の水溶性塩の水性注射用液剤に使用されうるが、原則として必要ではない。坐剤に適切な担体は、例えば、天然又は硬化油、ロウ、脂肪、半液体又は液体のポリオール等である。

加えて、医薬製剤は、保存剤、可溶化剤、安定化剤、湿潤剤、乳化剤、甘味料、着色剤、香料、浸透圧を変動させるための塩、緩衝剤、マスキング剤又は酸化防止剤を含有することができる。これらはまた、更に他の治療有用物質を含有することができる。

前述のように、式Ｉの化合物又はそれらの薬学的に許容されうる塩と、治療上不活性な賦形剤とを含有している薬剤も、本発明の目的であり、１種以上の式Ｉの化合物又はそれらの薬学的に許容されうる塩と、所望により、１種以上のその他の治療上価値のある物質とを、１種以上の治療上不活性な担体と共にガレヌス製剤の投与形態にすることを含む、そのような薬剤の製造方法も、本発明の目的である。

さらに前述のように、先に述べた疾患の予防及び／又は治療において有用な医薬の製造のための、式（Ｉ）で示される化合物の使用も、本発明の目的である。

用量は、広い範囲内で変えることができ、当然それぞれの特定の症例における個別の要求に適合させられうる。一般に、経口又は非経口投与のための有効用量は、０．０１〜２０mg/kg/日の間であり、前述の全ての適応症に対して０．１〜１０mg/kg/日の用量が好ましい。したがって、体重７０kgの成人のための１日投与量は、１日当たり０．７〜１４００mgの間、好ましくは１日当たり７〜７００mgの間である。

本発明の化合物を含む医薬組成物の調製：
例Ａ
以下の組成の錠剤を常法により製造する。
mg/錠剤
活性成分１００
粉末乳糖９５
白色トウモロコシデンプン３５
ポリビニルピロリドン８
カルボキシメチルデンプンナトリウム塩１０
ステアリン酸マグネシウム２
錠剤重量２５０

実験の部：
実施例１
５，５−ジメチル−２−（５−フェニルエチニル−ピリジン−２−イル）−ピラゾリジン−３−オン

工程１：１−ベンゾトリアゾール−１−イル−３−メチル−ブタ−２−エン−１−オン

１Ｈ−ベンゾトリアゾール（２．１４ｇ、１８．０mmol、４当量）をジクロロメタン（２５ml）に溶解し、塩化チオニル（３３０μl、４．５mmol、１当量）を室温で加えた。３−メチル−ブタ−２−エン酸［CAS 541-47-9]（４５０mg、４．５mmol）を加え、混合物を室温で２時間撹拌した。懸濁液を濾過し、濾液を２ＮＮａＯＨ溶液で１回、そして、ジクロロメタンで２回抽出した。有機抽出物を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させて、蒸発乾固した。粗生成物を、酢酸エチル：シクロヘキサン傾斜０：１００〜５０：５０で溶離する、シリカゲルカラムフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。所望の１−ベンゾトリアゾール−１−イル−３−メチル−ブタ−２−エン−１−オン（８１０mg、収率９０％）を明黄色の固体、MS: m/e = 202.1 (M+H⁺)として得た。

工程２：２−（５−ブロモ−ピリジン−２−イル）−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン

１−ベンゾトリアゾール−１−イル−３−メチル−ブタ−２−エン−１−オン（実施例１、工程１）（４００mg、２．０mmol）、（５−ブロモ−ピリジン−２−イル）−ヒドラジン（４１０mg、２．２mmol、１．１当量）及びＥｔ_３Ｎ（１．９５ml、１４．０mmol、７当量）をＴＨＦ（２ml）に一緒に溶解し、還流温度で９０分間撹拌した。反応混合物を冷却し、飽和Ｎａ_２ＣＯ_３溶液で、そして、酢酸エチルで２回抽出した。有機抽出物をブラインで抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥させて、蒸発乾固した。粗生成物を、酢酸エチル：シクロヘキサン傾斜０：１００〜５０：５０で溶離する、シリカゲルカラムフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。所望の２−（５−ブロモ−ピリジン−２−イル）−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン（２３０mg、収率４３％）を黄色の油状物、MS: m/e = 270.2/272.2 (M+H⁺)として得た。

工程３：５，５−ジメチル−２−（５−フェニルエチニル−ピリジン−２−イル）−ピラゾリジン−３−オン

ビス−（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（２７mg、３９μmol、０．０５当量）をＴＨＦ２mlに溶解した。２−（５−ブロモ−ピリジン−２−イル）−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン（実施例１、工程２）（２１０mg、７７０μmol）及びフェニルアセチレン（１３０mg、１．２４mmol、１．６当量）を室温で加えた。トリエチルアミン（３２５μl、２．３３mmol、３当量）、トリフェニルホスフィン（６mg、２３．３μmol、０．０３当量）及びヨウ化銅（Ｉ）（４mg、２３．３μmol、０．０３当量）を加え、混合物を６５℃で１６時間撹拌した。反応混合物を冷却し、飽和ＮａＨＣＯ_３溶液で、そして、少量のジクロロメタンで２回抽出した。ジクロロメタン層をシリカゲルカラムに直接装填して、酢酸エチル：ヘプタン傾斜０：１００〜１００：０で溶離することによって、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。所望の５，５−ジメチル−２−（５−フェニルエチニル−ピリジン−２−イル）−ピラゾリジン−３−オン（１０２mg、収率４５％）を白色の固体、MS: m/e = 292.1 (M+H⁺)として得た。

実施例２
（ＲＳ）−５−イソプロピル−２−（５−フェニルエチニル−ピリジン−２−イル）−ピラゾリジン−３−オン

工程１：（Ｅ／Ｚ）−１−ベンゾトリアゾール−１−イル−４−メチル−ペンタ−２−エン−１−オン

４−メチル−ペンタ−２−エン酸［CAS 10321-71-8］及び１Ｈ−ベンゾトリアゾールから、実施例１、工程１に記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物を無色の液体、MS: m/e = 215 (M+H⁺)として得た。

工程２：（ＲＳ）−２−（５−ブロモ−ピリジン−２−イル）−５−イソプロピル−ピラゾリジン−３−オン

（Ｅ／Ｚ）−１−ベンゾトリアゾール−１−イル−４−メチル−ペンタ−２−エン−１−オン（実施例２、工程１）及び（５−ブロモ−ピリジン−２−イル）−ヒドラジンから、実施例１、工程２に記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物を明黄色の油状物、MS: m/e = 284.0/286.0 (M+H⁺)として得た。

工程３：（ＲＳ）−５−イソプロピル−２−（５−フェニルエチニル−ピリジン−２−イル）−ピラゾリジン−３−オン

（ＲＳ）−２−（５−ブロモ−ピリジン−２−イル）−５−イソプロピル−ピラゾリジン−３−オン（実施例２、工程２）及びフェニルアセチレンから、実施例１、工程３に記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物を明黄色の油状物、MS: m/e = 306.1 (M+H⁺)として得た。

実施例３
１，５，５−トリメチル−２−（５−フェニルエチニル−ピリジン−２−イル）−ピラゾリジン−３−オン

５，５−ジメチル−２−（５−フェニルエチニル−ピリジン−２−イル）−ピラゾリジン−３−オン（実施例１、工程４）（３５mg、１２０μmol）をＡＣＮ（２ml）に溶解した。Ｋ_２ＣＯ_３（３３mg、２４０μmol、２当量）及びヨードメタン（２２mg、１５６μmol、１．３当量）を加え、混合物を８０℃で１６時間撹拌した。反応混合物を蒸発させて、水で、そして、酢酸エチルで２回抽出した。有機層をブラインで抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発乾固した。粗生成物を逆相カラムクロマトグラフィーにより精製した。所望の１，５，５−トリメチル−２−（５−フェニルエチニル−ピリジン−２−イル）−ピラゾリジン−３−オン（１８mg、収率４９）を無色の油状物、MS: m/e = 306.2 (M+H⁺)として得た。

実施例４
１，５，５−トリメチル−２−（５−ｍ−トリルエチニル−ピリジン−２−イル）−ピラゾリジン−３−オン

工程１：５，５−ジメチル−２−（５−ｍ−トリルエチニル−ピリジン−２−イル）−ピラゾリジン−３−オン

２−（５−ブロモ−ピリジン−２−イル）−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン（実施例１、工程２）及びｍ−トリルアセチレンから、実施例１、工程３に記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物を褐色の油状物、MS: m/e = 306.2 (M+H⁺)として得た。

工程２：１，５，５−トリメチル−２−（５−ｍ−トリルエチニル−ピリジン−２−イル）−ピラゾリジン−３−オン

５，５−ジメチル−２−（５−ｍ−トリルエチニル−ピリジン−２−イル）−ピラゾリジン−３−オン（実施例４、工程１）から、実施例３に記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物を白色の固体、MS: m/e = 320.2 (M+H⁺)として得た。

実施例５
２−［５−（３−フルオロ−フェニルエチニル）−ピリジン−２−イル］−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン

２−（５−ブロモ−ピリジン−２−イル）−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン（実施例１、工程２）及び１−エチニル−３−フルオロ−ベンゼンから、実施例１、工程３に記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物を明黄色の固体、MS: m/e = 310.2 (M+H⁺)として得た。

実施例６
２−［５−（３−フルオロ−フェニルエチニル）−ピリジン−２−イル］−１，５，５−トリメチル−ピラゾリジン−３−オン

２−［５−（３−フルオロ−フェニルエチニル）−ピリジン−２−イル］−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン（実施例５）から、実施例３に記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物を無色の油状物、MS: m/e = 324.2 (M+H⁺)として得た。

実施例７
２−［５−（３−クロロ−フェニルエチニル）−ピリジン−２−イル］−１，５，５−トリメチル−ピラゾリジン−３−オン

工程１：２−［５−（３−クロロ−フェニルエチニル）−ピリジン−２−イル］−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン

２−（５−ブロモ−ピリジン−２−イル）−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン（実施例１、工程２）及び１−エチニル−３−クロロ−ベンゼンから、実施例１、工程３に記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物を黄色の固体、MS: m/e = 326.1/328.1 (M+H⁺)として得た。

工程２：２−［５−（３−クロロ−フェニルエチニル）−ピリジン−２−イル］−１，５，５−トリメチル−ピラゾリジン−３−オン

２−［５−（３−クロロ−フェニルエチニル）−ピリジン−２−イル］−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン（実施例７、工程１）から、実施例３に記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物を白色の固体、MS: m/e = 340.1/342.1 (M+H⁺)として得た。

実施例８
２−［５−（４−フルオロ−フェニルエチニル）−ピリジン−２−イル］−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン

２−（５−ブロモ−ピリジン−２−イル）−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン（実施例１、工程２）及び１−エチニル−４−フルオロ−ベンゼンから、実施例１、工程３に記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物を白色の固体、MS: m/e = 310.1 (M+H⁺)として得た。

実施例９
５，５−ジメチル−２−（５−フェニルエチニル−ピリミジン−２−イル）−ピラゾリジン−３−オン

工程１：２−（５−ブロモ−ピリミジン−２−イル）−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン

１−ベンゾトリアゾール−１−イル−３−メチル−ブタ−２−エン−１−オン（実施例１、工程１）及び（５−ブロモ−ピリミジン−２−イル）−ヒドラジンから、実施例１、工程２に記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物を明黄色の固体、MS: m/e = 271.2/273.1 (M+H⁺)として得た。

工程２：５，５−ジメチル−２−（５−フェニルエチニル−ピリミジン−２−イル）−ピラゾリジン−３−オン

２−（５−ブロモ−ピリミジン−２−イル）−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン（実施例９、工程１）及びフェニルアセチレンから、実施例１、工程３に記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物を明灰色の固体、MS: m/e = 293.2 (M+H⁺)として得た。

実施例１０
（ＲＳ）−１−（５−フェニルエチニル−ピリジン−２−イル）−テトラヒドロ−ピロロ［１，２−ｂ］ピラゾール−２−オン

工程１：２−ブロモ−５−フェニルエチニル−ピリジン

２−ブロモ−５−ヨードピリジン及びフェニルアセチレンから、実施例１、工程３に記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物を白色の固体、MS: m/e = 258/260 (M+H⁺)として得た。

工程２：（ＲＳ）−１−（５−フェニルエチニル−ピリジン−２−イル）−テトラヒドロ−ピロロ［１，２−ｂ］ピラゾール−２−オン

２−ブロモ−５−フェニルエチニル−ピリジン（実施例１０、工程１）（１５０mg、０．５８mmol）をトルエン（２ml）に溶解し、（ＲＳ）−テトラヒドロ−ピロロ［１，２−ｂ］ピラゾール−２−オン［CAS 1159091-93-6］（７３mg、０．５８mmol、１．０当量）、炭酸セシウム（２８０mg、０．８７mmol、１．５当量）、Xantphos［CAS 161265-03-8］（１４mg、０．０２mmol、０．０４当量）及びＰｄ_２（ｄｂａ）_３（１１mg、０．０１mmol、０．０２当量）を窒素下で加えた。混合物を１００℃で３時間撹拌した。トルエン混合物をシリカゲルカラムに直接装填して、酢酸エチル：ヘプタン傾斜０：１００〜１００：０で溶離することによって、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。所望の（ＲＳ）−１−（５−フェニルエチニル−ピリジン−２−イル）−テトラヒドロ−ピロロ［１，２−ｂ］ピラゾール−２−オン（１７mg、収率９％）を明褐色の固体、MS: m/e = 304.1 (M+H⁺)として得た。

実施例１１
（ＲＳ）−１−（５−フェニルエチニル−ピリミジン−２−イル）−テトラヒドロ−ピロロ［１，２−ｂ］ピラゾール−２−オン

工程１：２−ブロモ−５−フェニルエチニル−ピリミジン

２−ブロモ−５−ヨードピリミジン（CAS 905856-70-4）及びフェニルアセチレンから、実施例１、工程３に記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物を白色の固体、MS: m/e = 259.0/261.0 (M+H⁺)として得た。

工程２：（ＲＳ）−１−（５−フェニルエチニル−ピリミジン−２−イル）−テトラヒドロ−ピロロ［１，２−ｂ］ピラゾール−２−オン

２−ブロモ−５−フェニルエチニル−ピリミジン（実施例１１、工程１）及び（ＲＳ）−テトラヒドロ−ピロロ［１，２−ｂ］ピラゾール−２−オン（CAS 1159091-93-6）から、実施例１０、工程２に記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物を褐色の固体、MS: m/e = 305.1 (M+H⁺)として得た。

実施例１２
（ＲＳ）−１−［５−（３−フルオロ−フェニルエチニル）−ピリミジン−２−イル］−テトラヒドロ−ピロロ［１，２−ｂ］ピラゾール−２−オン

工程１：（ＲＳ）−１−（５−ブロモ−ピリミジン−２−イル）−テトラヒドロ−ピロロ［１，２−ｂ］ピラゾール−２−オン

２−ヨード−５−ブロモピリミジン及び（ＲＳ）−テトラヒドロ−ピロロ［１，２−ｂ］ピラゾール−２−オン（CAS 1159091-93-6）から、実施例１０、工程２に記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物を黄色の固体、MS: m/e = 283.0/285.0 (M+H⁺)として得た。

工程２：（ＲＳ）−１−［５−（３−フルオロ−フェニルエチニル）−ピリミジン−２−イル］−テトラヒドロ−ピロロ［１，２−ｂ］ピラゾール−２−オン

（ＲＳ）−１−（５−ブロモ−ピリミジン−２−イル）−テトラヒドロ−ピロロ［１，２−ｂ］ピラゾール−２−オン（実施例１２、工程１）及び３−フルオロフェニルアセチレンから、実施例１、工程３に記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物を明黄色の固体、MS: m/e = 323.1 (M+H⁺)として得た。

実施例１３
（ＲＳ）−１−［５−（４−フルオロ−フェニルエチニル）−ピリミジン−２−イル］−テトラヒドロ−ピロロ［１，２−ｂ］ピラゾール−２−オン

（ＲＳ）−１−（５−ブロモ−ピリミジン−２−イル）−テトラヒドロ−ピロロ［１，２−ｂ］ピラゾール−２−オン（実施例１２、工程１）及び４−フルオロフェニルアセチレンから、実施例１、工程３に記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物を黄色の固体、MS: m/e = 323.1 (M+H⁺)として得た。

実施例１４
１，５，５−トリメチル−２−（５−フェニルエチニル−ピリミジン−２−イル）−ピラゾリジン−３−オン

５，５−ジメチル−２−（５−フェニルエチニル−ピリミジン−２−イル）−ピラゾリジン−３−オン（実施例９、工程２）及びヨードメタンから、実施例３に記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物を褐色の固体、MS: m/e = 307.2 (M+H⁺)として得た。

実施例１５
２−［５−（３−フルオロ−フェニルエチニル）−ピリミジン−２−イル］−１，５，５−トリメチル−ピラゾリジン−３−オン

工程１：５，５−ジメチル−３−オキソ−ピラゾリジン−１−カルボン酸tert−ブチルエステル

５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン（CAS 24572-33-6）から、Literature Tetrahedron 66 (2010) 8992-9008ページに記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物を白色の固体、MS: m/e = 215.2 (M+H⁺)として得た。

工程２：２−（５−ブロモ−ピリミジン−２−イル）−５，５−ジメチル−３−オキソ−ピラゾリジン−１−カルボン酸tert−ブチルエステル

２−ヨード−５−ブロモピリミジン及び５，５−ジメチル−３−オキソ−ピラゾリジン−１−カルボン酸tert−ブチルエステル（実施例１５、工程１）から、実施例１０、工程２に記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物を黄色の固体、MS: m/e = 371.1/373.0 (M+H⁺)として得た。

工程３：２−［５−（３−フルオロ−フェニルエチニル）−ピリミジン−２−イル］−５，５−ジメチル−３−オキソ−ピラゾリジン−１−カルボン酸tert−ブチルエステル

２−（５−ブロモ−ピリミジン−２−イル）−５，５−ジメチル−３−オキソ−ピラゾリジン−１−カルボン酸tert−ブチルエステル（実施例１５、工程２）及び３−フルオロフェニルアセチレンから、実施例１、工程３に記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物を褐色の固体、MS: m/e = 411.2 (M+H⁺)として得た。

工程４：２−［５−（３−フルオロ−フェニルエチニル）−ピリミジン−２−イル］−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン

２−［５−（３−フルオロ−フェニルエチニル）−ピリミジン−２−イル］−５，５−ジメチル−３−オキソ−ピラゾリジン−１−カルボン酸tert−ブチルエステル（実施例１５、工程３）（１１８mg、０．２９mmol）をジクロロメタン（２ml）に溶解し、ＴＦＡ（０．５５ml、７．２mmol、２５当量）を室温で加えて、１６時間撹拌した。反応混合物を飽和Ｎａ_２ＣＯ_３溶液及び少量のジクロロメタンで抽出した。有機抽出物をシリカゲルカラムに直接装填した。粗生成物を、酢酸エチル：ヘプタン傾斜０：１００〜１００：０で溶離する、シリカゲルカラムフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。所望の２−［５−（３−フルオロ−フェニルエチニル）−ピリミジン−２−イル］−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン（６１mg、収率６９％）を明黄色の固体、MS: m/e = 311.2 (M+H⁺)として得た。

工程５：２−［５−（３−フルオロ−フェニルエチニル）−ピリミジン−２−イル］−１，５，５−トリメチル−ピラゾリジン−３−オン

２−［５−（３−フルオロ−フェニルエチニル）−ピリミジン−２−イル］−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン（実施例１５、工程４）及びヨードメタンから、実施例３に記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物を明褐色の固体、MS: m/e = 325.3 (M+H⁺)として得た。

実施例１６
２−［５−（４−フルオロ−フェニルエチニル）−ピリミジン−２−イル］−１，５，５−トリメチル−ピラゾリジン−３−オン

工程１：２−［５−（４−フルオロ−フェニルエチニル）−ピリミジン−２−イル］−５，５−ジメチル−３−オキソ−ピラゾリジン−１−カルボン酸tert−ブチルエステル

２−（５−ブロモ−ピリミジン−２−イル）−５，５−ジメチル−３−オキソ−ピラゾリジン−１−カルボン酸tert−ブチルエステル（実施例１５、工程２）及び４−フルオロフェニルアセチレンから、実施例１、工程３に記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物を橙色の固体、MS: m/e = 411.2 (M+H⁺)として得た。

工程２：２−［５−（４−フルオロ−フェニルエチニル）−ピリミジン−２−イル］−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン

２−［５−（４−フルオロ−フェニルエチニル）−ピリミジン−２−イル］−５，５−ジメチル−３−オキソ−ピラゾリジン−１−カルボン酸tert−ブチルエステル（実施例１６、工程１）から、実施例１５、工程４に記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物を明黄色の固体、MS: m/e = 311.2 (M+H⁺)として得た。

工程３：２−［５−（４−フルオロ−フェニルエチニル）−ピリミジン−２−イル］−１，５，５−トリメチル−ピラゾリジン−３−オン

２−［５−（４−フルオロ−フェニルエチニル）−ピリミジン−２−イル］−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン（実施例１６、工程２）及びヨードメタンから、実施例３に記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物を明黄色の固体、MS: m/e = 325.3 (M+H⁺)として得た。

実施例１７
２−［５−（２，５−ジフルオロ−フェニルエチニル）−ピリミジン−２−イル］−１，５，５−トリメチル−ピラゾリジン−３−オン

２−ヨード−５−ブロモピリミジン及び５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン（CAS 24572-33-6）から、実施例１０、工程２に記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物を黄色の固体、MS: m/e = 271.1/273.1 (M+H⁺)として得た。

工程２：２−（５−ブロモ−ピリミジン−２−イル）−１，５，５−トリメチル−ピラゾリジン−３−オン

２−（５−ブロモ−ピリミジン−２−イル）−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン（実施例１７、工程１）及びヨードメタンから、実施例３に記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物を明黄色の固体、MS: m/e = 285.0/286.9 (M+H⁺)として得た。

工程３：２−［５−（２，５−ジフルオロ−フェニルエチニル）−ピリミジン−２−イル］−１，５，５−トリメチル−ピラゾリジン−３−オン

２−（５−ブロモ−ピリミジン−２−イル）−１，５，５−トリメチル−ピラゾリジン−３−オン（実施例１７、工程２）及び２，５−ジフルオロフェニルアセチレン（CAS 956386-38-2）から、実施例１、工程３に記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物を白色の固体、MS: m/e = 343.3 (M+H⁺)として得た。

実施例１８
２−［５−（２−クロロ−ピリジン−４−イルエチニル）−ピリジン−２−イル］−１，５，５−トリメチル−ピラゾリジン−３−オン

工程１：２−ブロモ−５−フェニルエチニル−ピリミジン

２−ブロモ−５−ヨードピリジン及び２−クロロ−４−エチニル−ピリジン（CAS 945717-09-9）から、実施例１、工程３に記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物（黄色の固体）、MS: m/e = 293.2/295.2 (M+H⁺)を得た。

工程２：２−［５−（２−クロロ−ピリジン−４−イルエチニル）−ピリジン−２−イル］−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン

２−ブロモ−５−フェニルエチニル−ピリミジン（実施例１８、工程１）及び５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン（CAS 24572-33-6）から、実施例１０、工程２に記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物を黄色の固体、MS: m/e = 327.4/329.4 (M+H⁺)として得た。

工程３：２−［５−（２−クロロ−ピリジン−４−イルエチニル）−ピリジン−２−イル］−１，５，５−トリメチル−ピラゾリジン−３−オン

２−［５−（２−クロロ−ピリジン−４−イルエチニル）−ピリジン−２−イル］−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン（実施例１８、工程２）及びヨードメタンから、実施例３に記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物を白色の固体、MS: m/e = 341.4/343.3 (M+H⁺)として得た。

実施例１９
２−［６−（２，５−ジフルオロ−フェニルエチニル）−ピリダジン−３−イル］−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン

工程１：２−（６−クロロ−ピリダジン−３−イル）−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン

１−ベンゾトリアゾール−１−イル−３−メチル−ブタ−２−エン−１−オン（実施例１、工程１）及び（６−クロロ−ピリダジン−３−イル）−ヒドラジン（CAS 17284-97-8）から、実施例１、工程２に記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物を黄色の油状物、MS: m/e = 227.1/229.3 (M+H⁺)として得た。

工程２：２−［６−（２，５−ジフルオロ−フェニルエチニル）−ピリダジン−３−イル］−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン

２−（６−クロロ−ピリダジン−３−イル）−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン（実施例１９、工程１）及び２，５−ジフルオロフェニルアセチレン（CAS 956386-38-2）から、実施例１、工程３に記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物を明黄色の固体、MS: m/e = 329.2 (M+H⁺)として得た。

実施例２０
２−［５−（２，５−ジフルオロ−フェニルエチニル）−ピリジン−２−イル］−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン

２−（５−ブロモ−ピリジン−２−イル）−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン（実施例１、工程２）及び２，５−ジフルオロフェニルアセチレン（CAS 956386-38-2）から、実施例１、工程３に記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物（褐色の油状物）、MS: m/e = 328.1 (M+H⁺)を得た。

実施例２１
１−エチル−５，５−ジメチル−２−（５−フェニルエチニル−ピリジン−２−イル）−ピラゾリジン−３−オン

２−ブロモ−５−フェニルエチニル−ピリジン（実施例１０、工程１）及び１−エチル−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン（CAS 26485-97-2）から、実施例１０、工程２に記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物を黄色の油状物、MS: m/e = 320.4 (M+H⁺)として得た。

実施例２２
１−エチル−２−［５−（４−フルオロ−フェニルエチニル）−ピリジン−２−イル］−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン

工程１：１−エチル−２−（５−ヨード−ピリジン−２−イル）−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン

２−フルオロ−５−ヨードピリジン（２００mg、０．９０mmol）をトルエン（１ml）に溶解し、１−エチル−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン［CAS 26485-97-2］（１２８mg、０．９０mmol、１．０当量）及び炭酸セシウム（４４０mg、１．３５mmol、１．５当量）を窒素下で加えた。混合物を１００℃で４時間撹拌した。トルエン混合物をシリカゲルカラムに直接装填して、酢酸エチル：ヘプタン傾斜０：１００〜５０：５０で溶離することによって、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。所望の１−エチル−２−（５−ヨード−ピリジン−２−イル）−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン（８８mg、収率２８％）を黄色の油状物、MS: m/e = 346.3 (M+H⁺)として得た。

工程２：１−エチル−２−［５−（４−フルオロ−フェニルエチニル）−ピリジン−２−イル］−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン

１−エチル−２−（５−ヨード−ピリジン−２−イル）−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン（実施例２２、工程１）及び４−フルオロフェニルアセチレンから、実施例１、工程３に記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物を白色の固体、MS: m/e = 338.4 (M+H⁺)として得た。

実施例２３
（ＲＳ）−１−エチル−５−イソプロピル−２−（５−フェニルエチニル−ピリジン−２−イル）−ピラゾリジン−３−オン

２−ブロモ−５−フェニルエチニル−ピリジン（実施例１０、工程１）及び（ＲＳ）−１−エチル−５−イソプロピル−ピラゾリジン−３−オン（CAS 1185083-91-3）から、実施例１０、工程２に記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物を明黄色の油状物、MS: m/e = 334.4 (M+H⁺)として得た。

実施例２４
（ＲＳ）−５−メチル−２−（５−フェニルエチニル−ピリジン−２−イル）−５−トリフルオロメチル−ピラゾリジン−３−オン

工程１：（ＲＳ）−５−メチル−５−トリフルオロメチル−ピラゾリジン−３−オン

４，４，４−トリフルオロ−３−メチル−ブタ−２−エン酸エチルエステル（CAS 24490-03-7）（３００mg、１．６５mmol）をエタノール（３ml）に溶解し、エタノール中の６４％ヒドラジン一水和物（０．１３ml、１．７３mmol、１．０５当量）を室温で加えて、密閉管中、８０℃で１６時間撹拌した。反応混合物を蒸発乾固した。所望の（ＲＳ）−５−メチル−５−トリフルオロメチル−ピラゾリジン−３−オン（２８０mg、定量的）を白色の固体、MS: m/e = 169.2 (M+H⁺)として得た。

工程１：（ＲＳ）−５−メチル−２−（５−フェニルエチニル−ピリジン−２−イル）−５−トリフルオロメチル−ピラゾリジン−３−オン

２−ブロモ−５−フェニルエチニル−ピリジン（実施例１０、工程１）及び（ＲＳ）−５−メチル−５−トリフルオロメチル−ピラゾリジン−３−オン（実施例２４、工程１）から、実施例１０、工程２に記載の化学と同様の化学を用いて、標記化合物を黄色の油状物、MS: m/e = 346.4 (M+H⁺)として得た。

Claims

式：

［式中、
Ｘは、Ｎ又はＣＨであり；
Ｇは、Ｎ又はＣＨであり；
但し、Ｘ又はＧの最大限１つは、窒素であることができ；
Ｒ^１は、フェニル又はピリジルであり、これらは、ハロゲン、Ｃ _１ −Ｃ _４アルキル又はＣ _１ −Ｃ _４アルコキシにより場合により置換されており；
Ｒ^２は、水素、Ｃ _１ −Ｃ _４アルキルであるか、又はＲ^４と一緒になって、Ｃ_３−Ｃ_６−シクロアルキルを形成することもでき；
Ｒ^３／Ｒ^３’／Ｒ^４／Ｒ^４’は、互いに独立して、水素、Ｃ _１ −Ｃ _４アルキル又はＣＦ_３である］
で表される化合物、あるいはそれらの薬学的に許容しうる酸付加塩、ラセミ混合物、又はその対応するエナンチオマー及び／又は光学異性体及び／又は立体異性体。
請求項１に記載の式ＩＡ：

［式中、
Ｒ^１は、フェニル又はピリジルであり、これらは、ハロゲン、Ｃ _１ −Ｃ _４アルキル又はＣ _１ −Ｃ _４アルコキシにより場合により置換されており；
Ｒ^２は、水素、Ｃ _１ −Ｃ _４アルキルであるか、又はＲ^４と一緒になって、Ｃ_３−Ｃ_６−シクロアルキルを形成することもでき；
Ｒ^３／Ｒ^３’／Ｒ^４／Ｒ^４’は、互いに独立して、水素、Ｃ _１ −Ｃ _４アルキル又はＣＦ_３である］
で表される化合物、あるいはそれらの薬学的に許容しうる酸付加塩、ラセミ混合物、又はその対応するエナンチオマー及び／又は光学異性体及び／又は立体異性体。
以下の化合物である、請求項１及び２のいずれか一項に記載の式ＩＡの化合物：
５，５−ジメチル−２−（５−フェニルエチニル−ピリジン−２−イル）−ピラゾリジン−３−オン
（ＲＳ）−５−イソプロピル−２−（５−フェニルエチニル−ピリジン−２−イル）−ピラゾリジン−３−オン
１，５，５−トリメチル−２−（５−フェニルエチニル−ピリジン−２−イル）−ピラゾリジン−３−オン
１，５，５−トリメチル−２−（５−ｍ−トリルエチニル−ピリジン−２−イル）−ピラゾリジン−３−オン
２−［５−（３−フルオロ−フェニルエチニル）−ピリジン−２−イル］−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン
２−［５−（３−フルオロ−フェニルエチニル）−ピリジン−２−イル］−１，５，５−トリメチル−ピラゾリジン−３−オン
２−［５−（３−クロロ−フェニルエチニル）−ピリジン−２−イル］−１，５，５−トリメチル−ピラゾリジン−３−オン
２−［５−（４−フルオロ−フェニルエチニル）−ピリジン−２−イル］−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン
（ＲＳ）−１−（５−フェニルエチニル−ピリジン−２−イル）−テトラヒドロ−ピロロ［１，２−ｂ］ピラゾール−２−オン
２−［５−（２−クロロ−ピリジン−４−イルエチニル）−ピリジン−２−イル］−１，５，５−トリメチル−ピラゾリジン−３−オン
２−［５−（２，５−ジフルオロ−フェニルエチニル）−ピリジン−２−イル］−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン
１−エチル−５，５−ジメチル−２−（５−フェニルエチニル−ピリジン−２−イル）−ピラゾリジン−３−オン
１−エチル−２−［５−（４−フルオロ−フェニルエチニル）−ピリジン−２−イル］−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン
（ＲＳ）−１−エチル−５−イソプロピル−２−（５−フェニルエチニル−ピリジン−２−イル）−ピラゾリジン−３−オン、又は
（ＲＳ）−５−メチル−２−（５−フェニルエチニル−ピリジン−２−イル）−５−トリフルオロメチル−ピラゾリジン−３−オン。
請求項１に記載の式ＩＢ：

［式中、
Ｒ^１は、フェニル又はピリジルであり、これらは、ハロゲン、Ｃ _１ −Ｃ _４アルキル又はＣ _１ −Ｃ _４アルコキシにより場合により置換されており；
Ｒ^２は、水素、Ｃ _１ −Ｃ _４アルキルであるか、又はＲ^４と一緒になって、Ｃ_３−Ｃ_６−シクロアルキルを形成することもでき；
Ｒ^３／Ｒ^３’／Ｒ^４／Ｒ^４’は、互いに独立して、水素、Ｃ _１ −Ｃ _４アルキル又はＣＦ_３である］
で表される化合物、あるいはそれらの薬学的に許容しうる酸付加塩、ラセミ混合物、又はその対応するエナンチオマー及び／又は光学異性体及び／又は立体異性体。
以下の化合物である、請求項１及び４のいずれか一項に記載の式ＩＢの化合物：
５，５−ジメチル−２−（５−フェニルエチニル−ピリミジン−２−イル）−ピラゾリジン−３−オン
（ＲＳ）−１−（５−フェニルエチニル−ピリミジン−２−イル）−テトラヒドロ−ピロロ［１，２−ｂ］ピラゾール−２−オン
（ＲＳ）−１−［５−（３−フルオロ−フェニルエチニル）−ピリミジン−２−イル］−テトラヒドロ−ピロロ［１，２−ｂ］ピラゾール−２−オン
（ＲＳ）−１−［５−（４−フルオロ−フェニルエチニル）−ピリミジン−２−イル］−テトラヒドロ−ピロロ［１，２−ｂ］ピラゾール−２−オン
１，５，５−トリメチル−２−（５−フェニルエチニル−ピリミジン−２−イル）−ピラゾリジン−３−オン
２−［５−（３−フルオロ−フェニルエチニル）−ピリミジン−２−イル］−１，５，５−トリメチル−ピラゾリジン−３−オン
２−［５−（４−フルオロ−フェニルエチニル）−ピリミジン−２−イル］−１，５，５−トリメチル−ピラゾリジン−３−オン、又は
２−［５−（２，５−ジフルオロ−フェニルエチニル）−ピリミジン−２−イル］−１，５，５−トリメチル−ピラゾリジン−３−オン。
請求項１に記載の式ＩＣ：

［式中、
Ｘは、Ｎ又はＣＨであり；
Ｇは、Ｎ又はＣＨであり；
但し、Ｘ又はＧの最大限１つは、窒素であることができ；
Ｒ^１は、フェニル又はピリジルであり、これらは、ハロゲン、Ｃ _１ −Ｃ _４アルキル又はＣ _１ −Ｃ _４アルコキシにより場合により置換されており；
Ｒ^２は、水素、Ｃ _１ −Ｃ _４アルキルであるか、又はＲ^４と一緒になって、Ｃ_３−Ｃ_６−シクロアルキルを形成することもでき；
Ｒ^３／Ｒ^３’／Ｒ^４／Ｒ^４’は、互いに独立して、水素、Ｃ _１ −Ｃ _４アルキル又はＣＦ_３である］
で表される化合物、あるいはそれらの薬学的に許容しうる酸付加塩、ラセミ混合物、又はその対応するエナンチオマー及び／又は光学異性体及び／又は立体異性体。
以下の化合物である、請求項１及び６のいずれか一項に記載の式ＩＣの化合物：
２−［６−（２，５−ジフルオロ−フェニルエチニル）−ピリダジン−３−イル］−５，５−ジメチル−ピラゾリジン−３−オン。
請求項１〜７のいずれか一項に記載の式Ｉの化合物の製造方法であって、
ａ）式：

で表される化合物を、式：

で表される化合物と反応させて、式：

（式中、置換基は、請求項１に記載のとおりである）
で表される化合物にすることを含む、方法。
請求項１〜７のいずれか一項に記載の式Ｉの化合物の製造方法であって、
ｂ）式：

で表される化合物を、式：
Ｒ ^２ −Ｘ’
（式中、Ｘ’は、Ｂｒ又はＩである）
で表される化合物と反応させて、式：

（式中、Ｒ ^２を除く置換基は、請求項１に記載のとおりであり、Ｒ ^２はＣ _１ −Ｃ _４アルキルである）
で表される化合物を形成することを含む、方法。
請求項１〜７のいずれか一項に記載の式Ｉの化合物の製造方法であって、
ｃ）式：

（式中、Ｘ’は、Ｂｒ、Ｉ、Ｆ、Ｉである）
で表される化合物を、式：

で表される化合物と反応させて、式：

（式中、置換基は、請求項１に記載のとおりである）
で表される化合物にすることを含む、方法。
請求項８〜１０のいずれか一項に記載の式Ｉの化合物の製造方法であって、得られた化合物を薬学的に許容しうる酸付加塩に変換することを含む、方法。
請求項８〜１１のいずれか一項に記載の方法により調製される、請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物。
治療活性物質としての使用のための、請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物。
請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物及び治療活性担体を含む、医薬品組成物。
統合失調症又は認知症の処置のために使用される、請求項１４に記載の医薬品組成物。
統合失調症又は認知症の処置のための薬剤の製造のための、請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物の使用。
統合失調症又は認知症の処置のための、請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物。