JP5525136B2 - シート光を発生するための光学装置 - Google Patents
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Description
原理的にSPIM技術においては、標本自体に含まれる蛍光、またはコントラスト調整のために標本内に挿入された蛍光が、レーザ光によって励起され、その際にレーザ放射が、いわゆる「シート光」に形成される。このシート光により、標本の深部に位置する選択された断層面が1つずつ照明され、撮像光学系によって、光学的断面の形態をとるこの標本断層面の画像が得られる。
SPIM技術との関連で、シート光を発生するための光学装置が記載されている(例えば、特許文献1および2参照)。
−1つのコリメータ、
−1つの非球面光学素子、
−1つの視野絞り面を実現するための1つのレンズまたはレンズ群、
−1つの開口絞り面を実現するための1つのレンズまたはレンズ群
が設けられている。
本発明による第4の実施形態の装置においては、1つのコヒーレント光源から発し、1つの光ファイバから出射される光束中に、この光束をシート光の形状に変換するための1つの微小光学素子が組み込まれている。
−楕円形の断面を有する1つの光束を発生するための、例えばテレスコープ式円柱レンズの形態をとる、1つのアナモルフィック光学系、
−この光束の走査運動を発生するための、例えばスイング・ミラー、ポリゴン・スキャナ、またはデジタル・マイクロミラー・デバイス(DMD)の形態をとる、1つの偏向機構、
−走査された光束を通過させて標本に向ける、1つの集束レンズまたはレンズ群
が設けられている。
この構成により、標本の内部に集束される、楕円形の断面を有する光束を、走査運動に基づいて、時間順に何重にも互いに相接して並べることにより、シート光様の照明面が発生されるようになる。互いに相接して並べられる、集束された個々の光束により、シート光の幾何形状がもたらされる。
図1aおよび図1bにさらに示されるように、シート光3として形成された照明ビーム経路は、まず、1つの視野絞り面9を実現するように構成された1つのレンズ群8、例えば1つの色消しレンズを通過し、その後、1つの開口絞り面11を実現するためにもう1つのレンズ群10を通過し、最後に、集束光学系として構成された第3のレンズ群12を通過し、シート光3はそれを通過して標本1の内部に向けられる。
−現在使用中の視野絞り13を、この第2の対物レンズに合わせて調整された絞り開口を有する別の視野絞り13と交換すること、または、
−現在使用中の開口絞り14を、この交換後の対物レンズに合わせて調整された絞り開口を有する別の開口絞り14と交換すること、または、
−同時に両方の絞り13、14を交換することにより、交換後の対物レンズに、シート光の断面および長さlを適合させ、それにより標本1の選択された断層面の効率的な観察を可能にすること
が企図されている。
図1および図2に示される変形形態に対する相違点および補足点として、図3に示される変形形態においては、標本1の内部の影の形成を低減するための1つの機構が設けられている。影の形成が低減されることにより、観察される標本断層面の内部で、照明放射の向きで、照明光を透過しない標本粒子の後方に位置する標本物質が、これらの標本粒子の影で暗くなることが回避されることになる。
この場合は、1つの広帯域レーザ26が設けられており、そこから時間的に部分的にコヒーレントなビームが放射され、1つのグリッド27に向けられる。このグリッド27は、分光素子として作用し、それにより、グリッド27によって反射された光の空間コヒーレンスが低減される。この光は、その後で、図5に示されるように、円柱レンズ・アレイ24および25に当たる。あるいは、グリッド27の代わりに、プリズムまたは階段状ミラーの形態をとる、複数の分光素子を使用することもできる。
図8には、本発明による第4の実施形態の装置が示されている。ここでは、1つのコヒーレント光源から発する、1つの(図示されていない)光ファイバから出射される1つの光束5が、光束5をシート光3の形状に変換する1つの微小光学素子30に向けられる。この微小光学素子30は、例えば、光学作用を引き起こす自由形状の複数の面を設けた微小光学系でよく、あるいは、グリン・レンズの形態に構成されたものでもよい。
スイング・ミラー33の走査運動の結果、標本の内部に集束される楕円形光束は、時間順に位置34、35および36に位置することになり、その際に、標本1の内部の照明されるそれぞれの領域が、互いに相接して並ぶことにより、所望のシート光3が生じる。
Claims (9)
- 選択的平面照明顕微鏡(SPIM)において、3次元標本(1)を照明するためのシート光(3)を発生するための光学装置であって、
1つの光束(5)を放射するための1つの光源と、
該光束(5)を、該光束(5)と垂直な座標のX方向に延びる厚さ(d)と、Y方向に延びる幅(b)とを有する断面と、前記光束(5)に沿った座標のZ方向に延びる、少なくとも標本の全体寸法に亘る長さ(l)とを有する1つのシート光(3)の形状に変換するための複数の光学素子と
を有する光学装置において、
光束成分が異なる向きで標本に当たるように、該シート光内の光束成分の向きをY方向において変更する手段
を備えることを特徴とする光学装置。 - 前記光源が、コヒーレント光の1つの光束(5)を放射し、この光束(5)の経路中に、
1つのコリメータ(6)と、
パウエル・レンズの形態をとる1つの非球面光学素子(7)と、
1つの視野絞り面(9)を実現するための1つのレンズまたはレンズ群(8)と、
1つの開口絞り面(11)を実現するための1つのレンズまたはレンズ群(10)と
が設けられることを特徴とする、請求項1に記載の光学装置。 - シート光内の光束成分の向きを変更するために、1つのウォブル板(22)が存在する、請求項2に記載の光学装置。
- シート光内の光束成分の向きを変更するために、1つのスイング・ミラー(23)、または1つのポリゴン・スキャナが設けられる、請求項2に記載の光学装置。
- 前記光源が、空間的に部分的にコヒーレントな光の1つの光束(5)を放射し、この光束(5)の経路中に、2つの1次元円柱レンズ・アレイ(24、25)及び1つのコリメーション光学系(37)を含む1つの円筒形のハニカム・コンデンサが配置され、横コヒーレンス長が、前記各円柱レンズ・アレイ(24、25)の周期よりも短くなっている、請求項1に記載の光学装置。
- 前記空間的に部分的にコヒーレントな光を発生するために、1つの広帯域レーザ(26)の形態をとる、時間的に部分的にコヒーレントな1つの光源が設けられ、該広帯域レーザ(26)に、1つのグリッド(27)、プリズム、または階段状ミラーの形態をとる1つの分光素子が後置される、請求項5に記載の光学装置。
- 前記光源が、複数の個別レーザ光源(28)から成る1つのアレイによって構成され、該アレイに、1つの円柱レンズ(29)または1つのグリン・レンズが後置される、請求項1に記載の光学装置。
- 前記複数の光学素子は、光束(5)のシート光の形状への変換に加えて、同時に断面の1つの向きへの均質化作用と、該断面と直交する面への合焦作用とを併せもつ1つのグリン・レンズの形態をとる1つの微小光学素子(30)が設けられている、請求項1に記載の光学装置。
- 前記光源が、コヒーレント光の1つの光束(5)を放射し、該光束(5)の経路中に、
楕円形の断面を有する1つの光束を発生するための、1つのテレスコープ式円柱レンズ(31)の形態をとる1つのアナモルフィック光学系と、その後に続く、
この光束の走査運動を発生するための、1つのスイング・ミラー(32)の形態をとる1つの偏向機構、
走査後の光束を通過させて前記標本に向ける1つの集束レンズまたはレンズ群(12)が設けられる、請求項1に記載の光学装置。
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