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JP2552048B2 - ヌクレオチド鎖合成用試薬 - Google Patents

ヌクレオチド鎖合成用試薬

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JP2552048B2
JP2552048B2 JP3514119A JP51411991A JP2552048B2 JP 2552048 B2 JP2552048 B2 JP 2552048B2 JP 3514119 A JP3514119 A JP 3514119A JP 51411991 A JP51411991 A JP 51411991A JP 2552048 B2 JP2552048 B2 JP 2552048B2
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Description

【発明の詳細な説明】 技術分野 本発明は、オリゴヌクレオチド鎖への選択的開裂性及
び／又はアベイシックサイトの混入に関し、より詳細に
は、この目的に有効な新規試薬に関する。本発明はま
た、生化学アッセイ及びリン酸化反応におけるこの新規
試薬の使用方法に関する。
背 景 オリゴヌクレオチド及びポリヌクレオチド鎖への選択
的開裂性サイトの混入は、関連する米国特許出願第251,
152号及び曾祖父米国特許第4,775,619号に記載されてい
る。その開示は引例として含まれる。選択的開裂性サイ
トは多くの異なるタイプのハイブリッド形成アッセイフ
ォーマットにおいて有効である。例えば、ハイブリッド
形成が標識プローブ及びサンプルDNAの固体支持デュプ
レックスを与える１タイプのアッセイにおいて、ハイブ
リッド構造内に含まれる開裂性サイトは固体支持体から
の標識の容易な分離の可能にする。米国特許第4,775,61
9号は、主にそのようなアッセイにおける制限エンドヌ
クレアーゼ開裂性サイトの使用に関する。化学的開裂性
サイト、例えば、ジスルフィド結合、1,2−ジオール等
も用いてよく、オリゴヌクレオチド合成の間に導入して
よく、そして特定の化学試薬、例えばチオール、過沃素
酸塩等により開裂可能である。
本発明はまた、選択的開裂性サイトに関する。しか
し、本発明の方法は、光分解により開裂可能なサイト並
びに他の手段、例えば化学もしくは酵素試薬、例えば還
元剤を用いることにより開裂可能なサイトの挿入を含
む。本発明の開裂性サイトは、オリゴヌクレオチドもし
くはポリヌクレオチド鎖への化学部分、好ましくは光不
安定な部分の混入により形成される。この新規光不安定
部分は、上記出願に記載されているものを含む多くの異
なるタイプのハイブリッド形成アッセイフォーマットに
おいて、並びに本出願人のEPO出願No.88.309697.6に記
載されている拡大核酸ハイブリッド形成アッセイにおい
て有効である。
本発明の試薬の他の用途は、通常を用語において、オ
リゴヌクレオチド内のアベイシックサイトの形成であ
る。「アベイシックサイト」とは、通常はヒドロキシル
基−OH又はヌクレオベースを含む部位におけるエーテル
部分−ORを意味する。そのような誘導化の利用性は、以
下に詳細に説明するように広いものである。
本発明の試薬のさらに他の用途は、化学的リン酸化で
ある。オリゴヌクレオチド化学の多くの異なる特徴にお
いて、ヒドロキシル基の化学的リン酸化が必要である。
例えば、オリゴヌクレオチド合成において、合成及び脱
保護後、オリゴヌクレオチドの遊離５′−ヒドロキシル
基は殆どの生物学的プロセスに用いるためリン酸化され
なければならない。また、（１）ポリメラーゼによる
３′未満の延長を防ぐため、及び（２）DNAの化学的連
結反応において、３′−ヒドロキシル官能基のリン酸化
も必要であり、すなわち、３′ホスフェート部分は典型
的には、オリゴヌクレオチドのカップリングにおいて化
学的手段を用いることが必要である。
５′リン酸化は従来T4ポリヌクレオチドキナーゼ及び
ATPにより行われ、この反応は特に信頼のおける又は有
効なものではない。多くの化学的５′リン酸化方法も公
知であり、例えばNadeauxら、Biochemistry，23:6153−
6159（1984）,van der Marelら、Tetrahedron Lett．2
2:1463−1466（1981）,Himmelsbach and Pfleiderer、T
etrahedron Lett.,23:4793−4796（1982）,Maruggら、N
ucleic Acids Research，12:8639−8651（1984）、及び
Kondoら、Nucleic Acids Research Symposium Series，
16:161−164（1985）に記載されているものを含む。し
かし、これらの方法のほとんどは、不安定な試薬の使用
を含み又は標準的脱保護及び精製方法の大きな改良を必
要としている。一官能性及び二官能性３′−リン酸化試
薬にも同様の問題がみられた（Sonveauxの、特に297頁
参照）。
従って、オリゴヌクレオチドもしくはポリヌクレオチ
ド鎖内に開裂性及び／又はアベイシックサイトを与える
ことの有用性に加え、本発明の化合物の多くは、現在の
リン酸化法の限界を克服するリン酸化試薬としてさらに
有効である（そして従来のジメトキシトリチル（DMT）
精製法において用いられているリン酸化反応においても
有効であろう）。オリゴヌクレオチドの合成方法に関す
る文献は、β−シアノエチルホスフェート保護基の使用
をベースとする５′−３′合成に関し、例えば、de Nap
oliら、Gazz Chim Ital，114,:65（1984）,Rosenthal
ら、Tetrahedron Lett.,24:1691（1983）,Belagaje and
Brush、Nucleic Acids Research，10:6295（1977），
であり、溶液相５′−３′合成を記載する文献は、Haya
tsu and Khorana、J.American Chemical Society，89:3
880（1957）,Gait and Sheppard、Nucleic Acid Resear
ch, ４:1135（1977）,Cramer and Koster、Angew.Chem.I
nt.Ed.Engl．７:473（1968）、及びBlackburnら、Journ
al of the Chemical Society,Part C,2438（1967）を含
む。
上記に加え、Matteucci and Caruthers、J.American
Chemical Society，103:3185−3191（1981）は、オリゴ
ヌクレオチドの調製におけるホスホクロリダイトの使用
を記載している。Beaucage and Caruthers、Tetrahedro
n Letters，22:1859−1862（1981）、及び米国特許第4,
415,732号は、オリゴヌクレオチドの調製におけるホス
ホアミダイトの使用を記載している。Smith、ABL,15−2
4（1983年12月）は、自動化固体相オリゴヌデオキシリ
ボヌクレオチド合成を記載している。また、ここに引用
した文献及びWarnerら、DNA,3:401−411（1984）も参照
のこと。
Horn and Urdea、DNA,5.5:421−425（1986）は、ビス
（シアノエトキシ）−N,N−ジイソプロピル−アミノホ
スフィンを用いる固体支持DNAフラグメントのリン酸化
を記載している。Horn and Urdea、Tetrahedron Letter
s，27:4705−4708（1986）も参照のこと。
ハイブリッド形成法に関する文献は、以下のものを含
む。Meinkoth and Wahl、Anal.Biochemistry，138:267
−274（1984）はハイブリッド形成法のすぐれた総説を
与えている。Learyら、Proc.Natl.Acad.Sci．（USA）8
0:4045−4049（1983）は、特定のオリゴヌクレオチド配
列を検出するためのアビジン−酵素抱合体と抱合したビ
オチン化DNAの使用を記載している。Rankiら、Gene，2
1:77:85は、オリゴヌクレオチド配列の検出用の「サン
ドイッチ」ハイブリッド形成を記載している。Pfeuffer
and Helmrich、J.Biol.Chem．250:867−876（1975）
は、セファロース4Bへのグアノシン−５′−Ｏ−（３−
チオトリホスフェート）のカップリングを記載してい
る。Baumenら、J.Histochem.and Cytochem．29:227−23
7は、蛍光剤によるRNAの３′−標識付けを記載してい
る。PCT出願のWO/8302277は、標識付けのための改質さ
れたリボヌクレオチドのDNAフラグメントへの添加及び
そのようなDNAフラグメントの分析方法を記載してい
る、Renz and Kurz、Nucl.Acid.Res.,12:3435−3444
は、オリゴヌクレオチドへの酵素の共有結合を記載して
いる。Wallance、DNA Recombinant Technology，（Woo,
S.,編）CRC Pressは、診断におけるプローブの使用の一
般的背景を与えている。Cou and Merigan、N.Eng.J.of
Med.,308:921−925は、CMVの検出用のラジオアイソトー
プ標識プローブの使用を記載している。Inman、Methad
in Enzymol.34B,24:77−102（1974）は、ポリアクリル
アミドへの結合方法を記載しており、Parikhら、Method
in Enzymol.34B,24:77−102（1974）は、アガロースと
のカップリング反応を記載している。Alwineら、Proc.N
atl.Acad.Sci．（USA），74:5350−5354（1977）は、ハ
イブリッド形成のためのゲルから固体支持体へオリゴヌ
クレオチドを転換する方法を記載している。Chuら、Rro
c.Natl.Acad.Sci（USA）11:6513−6529は、末端ヌクレ
オチオを誘導化する方法を記載している。Hoら、Bioche
mistry，20:64−67（1981）は、エステルを形成するた
めのホスフェートを介した末端ヌクレオチドを誘導化す
ることを記載している。Ashley and MacDonald、Anal.B
iochem.,140:95−103（1984）は、表面結合した鋳型か
らプローブを調製する方法を報告している。
Hebert and Gravel、Can.J.Chme．52:187−189（197
4）、及びRubinsteinら、Tetrahedron Lett．17:1445−
1448（1975）は、光感受性保護基としての２−ニトロフ
ェニル含有化合物の使用を記載している。
K.Groebkeら、Helvetica Chemica Acta．73:608−617
（1990）は、ヒドロキシル官能基を保護するためのｔ−
ブチルジメチルシリル部分の使用を記載している文献と
する限り関連する。
開示の概要 本発明の主要な目的は、当該分野において上記要求を
満たすこと、及びオリゴヌクレオチド鎖に選択的開裂性
及び／又はアベイシックサイトを挿入するための方法及
び試薬を提供することである。
本発明の他の目的は、オリゴヌクレオチド鎖に、化学
的に開裂可能な選択的開裂性サイトを挿入するための方
法及び試薬を提供することである。
本発明の他の目的は、オリゴヌクレオチド鎖に、光に
より開裂可能な選択的開裂性サイトを挿入するための方
法及び試薬を提供することである。
本発明の他の目的は、オリゴヌクレオチド鎖にアベイ
シックサイトを挿入するための方法及び試薬を提供する
ことである。
本発明のさらに他の目的は、ヒドロキシル基を化学的
にリン酸化するための方法及び試薬を提供することであ
る。
本発明のさらに他の目的は、その後分枝鎖核酸マルチ
マーの形成に用いられるオリゴヌクレオチドにアベイシ
ックサイトを挿入するための試薬を提供することであ
る。
本発明の他の目的は、アベイシックサイトがヌクレオ
チド性ではないそのような試薬を提供することである。
本発明の他の目的、利点及び新規特徴を以下の説明に
示す。そして一部は以下より又は本発明の実施により当
業者に明らかとなるであろう。
一態様において、新規試薬が提供され、これは一般式 （上式中、R1、R2、ｘ及びｙは以下に規定のものと同じ
である） を有する光不安定な化合物である。この化合物は、光に
より開裂を可能にするようにオリゴヌクレオチドに混入
される。
他の態様において、新規試薬は以下の構造を有し提供
される。
（上式中、R1、R2、及びＲは以下に規定のものと同じで
ある） この化合物はオリゴヌクレオチド鎖内にアベイシック
サイトを形成することにおいて有効であり、これは開裂
性であってもなくてもよい。
さらに他の態様において、新規試薬は以下の構造を有
し提供される。
（上式中、R1、R2、及びRnは以下に規定のものと同じで
ある） この化合物は核酸マルチマーの合成において分枝点を
形成することにおいて有効である。
他の態様において、この試薬を用いる方法も提供され
る。
本発明の実施態様 A.定義： 「選択的開裂性サイト」とは、選択的に開裂できる官
能基又は多くの官能基を意味する。上記に示すような本
発明の焦点は、主に光分解を用いて特に開裂可能なサイ
トである。
「オリゴヌクレオチド」及び「ポリヌクレオチド」と
いう語は、ポリデオキシリボヌクレオチド（２′−デオ
キシ−Ｄ−リボース又はその改質形状を含む）、ポリリ
ボヌクレオチド（Ｄ−リボース又はその改質形状を含
む）、及びプリンもしくはピリミジン塩基の又は改質プ
リンもしくはピリミジン塩基のＮ−グルコシドである他
のタイプのポリヌクレオチドに属する。「ヌクレオシ
ド」は同様に、リボヌクレオシド、デオキシリボヌクレ
オシド、又はプリンもしくはピリミジン塩基の又は改質
プリンもしくはピリミジン塩基のＮ−グルコシドである
他のヌクレオシドに属する、「オリゴヌクレオチド」と
「ポリヌクレオチド」の間の長さは特に区別がなく、こ
れらの用語は相互に用いられる。このオリゴヌクレオチ
ド及びポリヌクレオチオは一重鎖でも二重鎖てもよく、
典型的には一重鎖である。また、本発明のオリゴヌクレ
オチドは通常は約２〜約2000個のモノマーユニットを有
し、より典型的には、ほとんどのプローブベース用途に
対し、約２〜約100個のモノマーユニットを有する。
「核酸サンプル」とは、目的とする核酸配列を含むサ
ンプルを意味する。
「核酸アナライト」とは、目的とする配列を含む前記
核酸サンプル内のDNAもしくはPNAを意味する。
「リン酸化試薬」とは、ヒドロキシル含有化合物との
反応の際に、リン酸モノエステルを与える化合物を意味
する。
「低級アルキル」及び「低級アルコキシ」とは、それ
ぞれ、約１〜８個、より典型的には約１〜６個の炭素原
子を有するアルキル及びアルコキシ置換基を意味する。
芳香族置換基を示す場合、個々の芳香族環は１個以上
の炭素において機能もしくは反応性に実質的に影響を及
ぼさない部分により置換されていてよいと理解すべきで
ある。
B.新規光不安定性試薬の構造： 本発明の一つの実施態様では、以下の構造で示される
光不安定性の化学化合物である新規試薬が提供される。
上式中、R1は塩基安定性の酸感受性ブロッキング基で
あり、R2はヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチド鎖の
５′位に試薬を付加させることができるように選ばれた
リン誘導体であり、そしてｘとｙのうちの一方は０で、
その他方は１〜12の範囲にある整数である。上記一般式
には２種の塩基型構造：（１）ｘが０以外で且つｙが０
であるもの（本明細書では“NP1−型”試薬と称するこ
とがある）；及び（２）ｘが０で且つｙが０以外である
もの（本明細書では“NP2−型”試薬と称することがあ
る）が含まれる。これら２種の構造は、上記一般式から
容易に推測されるように非常に似ている。それらは、ニ
トロフェニル部分があるために、光分解により容易に開
裂することができる特異的部位をオリゴヌクレオチド鎖
に導入するのにそれぞれ有用である。しかしながら、以
下にさらに詳細に説明するように、その２族の化学試薬
は、それらが若干異なる関連において有用である限り、
区別することができる。
新規光不安定性試薬の各種の置換基についてここでさ
らに詳細に説明する。
R1は、先に記載したように、塩基安定性の酸感受性ブ
ロッキング基である。このようなブロッキング基は、オ
リゴヌクレオチド合成の分野ではよく知られており、そ
して未置換または置換アリールまたはアラルキル基を含
む。ここでアリールは、例えばフェニル、ナフチル、フ
ラニル、ビフェニル、等であり、そしてその置換基は０
〜３個、通常は０〜２個であり、また中性または極性
の、電子供与性または吸引性の、任意の非妨害安定基を
含む。このような基の例は、ジメトキシトリチル（DM
T）、モノメトキシトリチル（MMT）、トリチル及びピク
シルである。ここで使用するのに特に好ましい部分はDM
Tである。
R2は、ヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチド鎖の
５′−ヒドロキシル基と試薬との縮合を促進するように
選ばれたリン誘導体である。このような基には、ホスホ
ルアミダイト、ホスホトリエステル、ホスホジエステ
ル、ホスファイト、Ｈ−ホスファイト、ホスホロチオエ
ート等が含まれる（例えば、Urdeaらの欧州特許公報第0
225807号「溶液相の核酸サンドイッチアッセイ及びそれ
に有用なポリヌクレオチドプローブ（Solution Phase N
ucleic Acid Sandwich Assay and Polynucleotide Prob
es Useful Therein）」を参照のこと。本明細書ではそ
の開示を参照する）。R2として有用な特に好ましい基
は、以下の構造で示されるホスホルアミダイトである： 上式中、Ｙはメチル及びβ−シアノエチルより成る群
から選択され、そして“iPr"はイソプロピルを表す。最
も好まいくは、Ｙはβ−シアノエチルである。
上記定義から容易に推定できるように、R1及びR2置換
基は、標準的なホスホルアミダイト化学プロトコールを
使用してDNYフラグメントへ光不安定性試薬を導入でき
るように一般に選択される。すなわち、オリゴヌクレオ
チド合成の際に、R2置換基はヌクレオシドまたはオリゴ
ヌクレオチド鎖の５′−ヒドロキシル基と反応するよう
に選定され、一方、R1部分はヌクレオシドまたはオリゴ
ヌクレオチド鎖の３′−ヒドロキシルと反応できるよう
に選定される。
添え字のｘとｙについては、ｘとｙのうちの一方は０
であり、その他方は１〜12の範囲、より好ましくは１〜
４の範囲にある整数で、そして最も好ましくは１であ
る。
上記の一般的なカテゴリーに含まれる試薬の例は以下
のものである： 上記のこれらの特別な構造体、〔２−（２−ニトロフ
ェニル）−２−（Ｏ−ジメトキシトリチルオキシ）エト
キシ〕−N,N−ジイソプロピルアミノ−２−シアノエト
キシホスフィン及び〔２−（２−ニトロフェニル）−１
−（Ｏ−ジメトキシトリチルオキシ）エトキシ〕−N,N
−ジイソプロピルアミノ−２−シアノエトキシホスフィ
ン、はそれぞれ本明細書では“NP1"及び“NP2"と示さ
れ、そして以下の実施例１及び２で合成する特別な試薬
である。
C.上記試薬の合成： NP1型の試薬、すなわちｘが０以外でｙが０であるも
のは、経路１に記載した反応序列により合成される。NP
2型の試薬は、経路２に記載した反応の組合せにより合
成される。
経路１及び２中の略号：“DMT"＝ジメトキシトリチ
ル；“DMT−C1"＝塩化ジメトキシトリチル；“iPr"＝イ
ソプロピル；“DiPEA"＝ジイソプロピルエチルアミン；
“TBDMS−C1"＝塩化ｔ−ブチルジメチルシリル；“DMA
P"＝４−ジメチルアミノピリジン；“TEA"＝トリエチル
アミン；“TBAF"＝フッ化テトラブチルアンモニウム。
NP1型試薬の合成は、２−（Ｏ−ニトロフェニル）1,2
−エタンジオールの末端ヒドロキシル基を、R1種で、例
えばDMT等でキャップした後に、残りのヒドロキシル基
を選ばれたリン誘導体と反応させてR2部分を生じさせる
工程を含む。経路１に示したように、後者の目的のため
の例示的な試薬は、クロロ−N,N−ジイソプロピルアミ
ノ−２−シアノエトキシホスフィンである。この基本経
路に関する変更は容易に推定することができる。例え
ば、別のR1置換基を付与するために、塩化ジメトキシト
リチルの代わりに、塩化モノメトキシトリチル、塩化ト
リチル、塩化ピクシル、等が使用されるであろう。同様
に、別のR2置換基を生じさせるために、この反応の第二
段階で代わりとなる置換ホスフィンが使用されるであろ
う。ｘを変化させるためには、初期の出発物質において
新たに別のメチレン基が必要である。
NP2型の試薬、すなわちｘが０でｙが０以外のものを
合成するためには、同様の合成序列を行うが、但しR1及
びR2置換基の導入順序を逆にする。こうして、最初に、
２−（Ｏ−ニトロフェニル）1,2−エタンジオールの末
端ヒドロキシル基を塩化ｔ−ブチルジメチルシリル
（“TBDMS−C1"）と反応させて次の反応工程中にそのヒ
ドロキシル基をブロックし、残りの遊離のヒドロキシル
基を、塩基安定性の酸感受性ブロッキング基、例えば塩
化ジメトキシトリチル（“DMT−C1"）と反応させてR1置
換基を付与する。その後、末端ヒドロキシル基を、例え
ばフッ化テトラブチルアンモニウムで脱保護し、そして
経路１にあるように、適当な置換ホスフィン誘導体と反
応させてR2部分を生じさせる。
D.選択的切断部位を創製するための上記試薬の使用： 本発明の新規光不安定性試薬は、当該技術分野によく
知られているように、また例えば先に引用したいくつか
の参考文献に記載されているように、標準的なホスホル
アミダイト化学を用いて、オリゴヌクレオチドまたはポ
リヌクレオチド鎖の中に容易に導入される。一般には、
DNAフラグメントへの新規試薬の導入は、R2における
５′−ヒドロキシル基への結合、及びR1における３′−
ヒドロキシル基への結合を含む。
こうして、光不安定性試薬の導入後には、雑種オリゴ
ヌクレオチド鎖は以下の構造を有する： 上記構造において、DNA1はDNAの第一セグメントを表
し、DNA2はDNAの第二セグメントを表し、そしてｘとｙ
は先に定義したとおりである。DNA1及びDNA2は直鎖であ
っても枝別れであってもよい。このポリヌクレオチド試
薬は、出願人の欧州特許出願第88.309203.3号及び米国
特許第4,775,619号に記載されているようなハイブリダ
イゼーションアッセイに使用することができる。これら
のアッセイは、選択可能な切断部位を有する直鎖ポリヌ
クレオチド試薬の使用を含み、すなわちそこではDNA1と
DNA2は直鎖である。また、本発明の光不安定性部分を含
有するポリヌクレオチド試薬は、米国特許出願第07/25
2,638号及び同第07/340,031号の増幅アッセイに使用す
ることもでき、これら両方を本明細書では参照として取
り入れる（PCT特許公報第W08/03891号を参照のこと）。
それらの出願明細書に記載されているように、切断可能
な「リンカー」分子は、（標識されたオリゴヌクレオチ
ドに結合するマルチマーの部分のような）所定のセグメ
ントを解放するための手段として、またはマルチマーの
構造を分析するために、所定の部位における増幅マルチ
マーに導入することができる。このような範囲では、DN
A1及び／またはDNA2は枝別れしたポリヌクレオチドセグ
メントである。マルチマー合成及び精製に続いて、マル
チマーの枝別れしたポリヌクレオチド構造は、ヌクレオ
チド構造のさらなる分解を伴うことなく特異的に切断す
ることができる。個々のマルチマーの「枝」の定量を可
能にするために、切断可能な部位をマルチマーの接合部
に、またはその付近に導入することが明らかに好まし
い。
オリゴヌクレオチドまたはポリヌクレオチドに導入さ
れた光不安定性試薬がNP1型（すなわち、ｘが０以外で
ｙが０）であるか、あるいはNP2型（すなわち、ｘが０
でｙが０以外）であるかによって、切断の際に２種の異
なる型のフラグメントが生じる。すなわち、経路３に記
載したように、NP1型部分を含有するオリゴヌクレオチ
ドは、末端５′−ホスフェートを有する第一フラグメン
トと、３′−末端に残留２−ニトロソフェニル種を含有
する第二フラグメントとを生じる。対照的に、経路４に
記載したように、NP2型部分を含有するポリヌクレオチ
ドと切断すると、５′−末端に残留２−ニトロソフェニ
ル基を含有する第一フラグメントと、末端３−ホスフェ
ートを有する第二フラグメントとを生じる。
切断は、少なくとも約350nmの波長を有するVU光を用
いた光分解によって行われるので、酵素試薬や化学試薬
がまったく不要である。こうして、よりきれいな手順が
提供されるので、必然的に外部の切断試薬で汚染される
ことのない製品が得られる。さらに、ポリヌクレオチド
試薬自体はもともと安定性が高く、適当な波長の紫外線
での処理によってのみ切断可能である。
E.上記試薬を用いたリン酸化： 上記試薬は、光不安定性の切断部位を付与するという
有用性の他に、化学リン酸化試薬としても有用である。
これらの試薬を使用するリン酸化は、ヒドロキシル含有
化合物との縮合と、その後のニトロフェニル基の光化学
的切断及び解放を含む。この新規試薬はこれに関しても
非常に多様性がある。というのは、それらが、ヌクレオ
シドまたはオリゴヌクレオチド鎖の５′−または３′−
リン酸化のいずれかに使用することができるからであ
る。
５′−リン酸化には、NP1型試薬、すなわちｘが０以
外でｙが０の試薬が必要である。上記経路３に記載した
ように、NP1型分子を含有するポリヌクレオチド試薬を
切断すると、５′−ホスフェート基を含有するヌクレオ
シドまたはDNAフラグメントが生じる。
３′−リン酸化には、経路４に記載したように、NP2
型試薬が必要である。NP2型分子を含有するポリヌクレ
オチド試薬を切断すると、フラグメントの一つが３′−
ホスフェート基を含有し、そして残りのフラグメントが
ニトロソフェニル残基を含有する切断フラグメントが生
じる。
F.二次的オリゴヌクレオチド鎖合成用のサイトおよびア
ベイシックサイトの導入： 本発明の他の実施態様において、アベイシックサイト
をオリゴヌクレオチド鎖に導入するのに有用な反応剤を
提供する、このサイトは「裂開可能」であっても、また
はなくてもよい。これら反応剤は次の構造を有する。
式中、R1およびR2は、上記このセクションのパートＡ
で記載したものであり、Ｒは、２−ニトロベンジル、４
−ペンテン−１−イル、 （式中、Ｒ′は、水素、アリールまたはアルアルキル、
もしアリールまたはアルアルキルであるときは、C1〜C8
のアリールまたはアルアルキルが好ましく、Riは、同一
または相違して、アミノ、ニトロ、ハロゲノ、ヒドロキ
シル、低級アルキルおよび低級アルコキシからなる群か
ら選び、Rjは同一または相違して、アミノ、ニトロ、ハ
ロゲノ、ヒドロキシル、低級アルキルおよび低級アルコ
キシからなる群から選び、ｉは0,1,2または３、ｊは0,
1,2,3または４である。
Rnは、レブリニル基−（CO）CH2CH2（CO）CH3またはR
1に影響せずに、除去されて水素で置換することができ
る他のブロック性または保護性の基、たとえば CH3O−CH2−CH2−Ｏ−CH2−， であり、Rmは、炭素原子が１〜16、好ましくは２〜12の
アルキレンか、またはオキシエチレンオリゴマー−（CH
2CH2O）２−、（式中、Ｚは１〜16、典型的には２〜12
を含む整数）である。任意に、Ｒが−Rm−Ｏ−Rnのと
き、Rnはレブリニル、Rmは−（CH2CH2O）４−である。
これらのデオキシリボーゼをベースとする反応剤は、
アベイシックサイトを、オリゴヌクレオチドまたはポリ
ヌクレオチド鎖に導入するのみでなく、また上記反応剤
のように開裂可能なサイトを提供する。
Ｒが のとき、Ｒ′は水素またはフェニルが好ましい。Riおよ
びRjは、示したように、多数の相違する置換基の１つを
表すことができる。特に好ましい実施態様においては、
前述の構造は２−メチレン−9,10−アントラキノンカル
ボネートエステル、すなわちRiおよびRjは、Ｒ′と同様
に水素である。
次式の反応剤 は、デオキシリボーゼと、Ｒ基のアルコール誘導体、す
なわちＲ−OHから容易に合成することができる。２−ニ
トロベンジルの場合は、たとえばデオキシリボーゼを２
−ニトロベンジルアルコールと反応させて、１′−Ｏ−
（２−ニトロベンジル）誘導体を与えることができる。
この中間体は、標準的方法、たとえばジメトキシトリチ
ル（DMT）基または同族の基を５′位置（R1）に導入
し、燐誘導体たとえばホスホルアミジト、ホスホトリエ
ステルなどを３′位置（R2）に導入するために、５′−
および３′−が保護された同族体に容易に変換すること
ができる。
これらの反応剤は、このセクションのパートＤに記載
したように、標準的なホスホルアミジト化学を使用し
て、オリゴヌクレオチドまたはポリヌクレオチド鎖に容
易に導入することができる。これらのデオキシリボーゼ
をベースとする裂開可能な基をオリゴヌクレオチドまた
はポリヌクレオチド鎖を導入した後に、アベイシックサ
イト−ORを含む裂開可能な鎖は、次の構造を有するであ
ろう。
（式中、DNA1およびDNA2は、初めに記載したDNAの第１
および第２のセグメントである。このようなポリヌクレ
オチド反応剤は、多様なハイブリダイゼイション試験に
使用することができる。
これらの反応剤を含むオリゴヌクレオチドまたはポリ
ヌクレオチド鎖の裂開は、次のように行うことができ
る。Ｒが２−ニトロベンジルのとき、裂開は、波長が35
0nm以上の紫外線を使用して光合成し、次にたとえば水
酸化アンモニウムなどで塩基性加水分解で行うことがで
きる。Ｒが−CH2CH2S−φ（式中、φはフェニルを表
す）のとき、裂開は硫黄原子を、たとえば過沃素酸ナト
リウムで−SO−またはSO2−に酸化し、次に塩基で処理
して行うことができる。Ｒが−CH2CH2Si（CH3）３のと
き、オリゴヌクレオチドは、たとえば弗化物イオンで処
理した後、ここでも次に塩基で処理して裂開することが
できる。Ｒが たとえば、２−メチレン−9,10−アントラキノンアセ
タールのとき、裂開はNa2S2O4で酸化した後、塩基で処
理して行うことができる。Ｒが のとき、裂開は、DBU（1,8−ジアザビシクロ〔５・４・
０〕ウンデカ−７−エン）を使用して行うことができ
る。Ｒがホスフェイトのとき、除去は、アルカリ性ホス
ファターゼで、次に塩基で処理して行うことができる。
Ｒが４−ペンテン−１−イルのとき、裂開は、典型的に
Ｎ−ブロモサクシンイミドを使用し、次に塩基で処理し
て行うことができる。
上述のように、オリゴヌクレオチドまたはポリヌクレ
オチド鎖を裂開させる本発明の反応剤は、本明細書でさ
きに参照した本出願人の欧州特許出願88.309697.6に記
載する増幅試験で使用することができる。デオキシリボ
ーゼをベースとするこのセクションに記載した反応剤で
核酸「マルチマー」の分枝点は、次の構造を有する多官
能性核酸モノマーを使用して作ることができる。
式中、R1は、塩基に安定であり、酸に敏感なブロック
性基を表し、 R2は、化学合成中にオリゴヌクレオチドの５′位置に
核酸を付加することができる燐誘導体を表し、 R3は、水素、メチル、沃素、臭素および弗素からなる
群から選ぶ基を表し、 R4は、水素またはメチルを表し、 R5は、レブリニル、 （式中、Ｒ′,RiおよびRjはさきに規定した基を表し、
ｋは、0,1,2,3または４を表し、Rkは同一または相違し
て、アミノ、ニトロ、ハロゲノ、ヒドロキシル、低級ア
ルキルおよび低級アルコキシからなる群から選ぶ）から
なる群から選び、 Ｚは、 (2)−（CH2−CH2−Ｏ）ｘ−(1);および(2) −（CH2）ｘ−Ｏ−(1) （式中、ｘおよびｙは同一または相違し、１〜８の範囲
の整数である）を表す。
次いで、これらの核酸モノマーを、第二のオリゴヌク
レオチド鎖が合成されるサイトを画定する開裂しうる、
又は除きうる成分R5で、上記のようにしてオリゴヌクレ
オチド又はポリヌクレオチド鎖に組み入れうる。
核酸「マルチマー（multimer）」の枝分れ点も、次の
一般構造を持つ多官能性、非ヌクレオチド化合物を用い
て創り出しうる ここに、R1,R2及びRnは、先に定義したとおりであ
る。特に好ましい態様においては、R1はDMTであり、R2
はβ−シアノエチルフォスフォラミダイトであり、Rnは
レブリニル（levulinyl）である。そのような化合物
は、トリス−ヒドロキシメチルエタンから、（１）例え
ばトリフェニルクロロシラン又は塩化トシルとの反応に
より水酸基の１つを保護すること；（２）この保護され
た化合物をR2の塩、例えば塩化ジメチルトリチルと反応
させて、２つの水酸基の内の１つを−OR2に転化するこ
と；（３）こうして生じた化合物をRn−OH又は“Rn"の
塩、例えばレブリン酸又はその塩と反応させて、ステッ
プ（１）の保護基を置換すること；そして（４）中間化
合物 を、残った遊離水酸基を−OR1に転化するに有効な試
薬、例えばβ−シアノエトキシ−N,N−ジイソプロピル
アミノクロロフォスフィンと反応させること、により合
成しうる。
G.追加の選択しうる開裂リンカー（linker）成分： オリゴヌクレオチド鎖内の選択的開裂サイトを提供す
るに有用な、更に他の試薬は、次の構造で示される ここにDMTは、ジメチルトリチルを表わし、Bzはベン
ジルを表わし、iPrはイソプロピルを表わし、R6はメチ
ル又はβ−シアノエチルを表わす。先に述べた試薬のよ
うに、この成分は、従来法により、オリゴヌクレオチド
に容易に組み込みうる。この成分を含むサイトにおける
開裂は、２段階化学過程により達せられる：（１）過ヨ
ウ素酸ナトリウム水溶液で１時間酸化し、次いで（２）
ｎ−プロピルアミン水溶液で処理する。
本発明を、好ましい特別の態様と関連して述べた上の
記述、及び以下に述べる例は、説明のためであって、本
発明を限定するものではない。
例１ 〔２−（２−ニトロフェニル）−２−（Ｏ−ジメトキシ
トリチロシキ）エエトキシ〕−N,N−ジイソプロピルア
ミノ−２−シアノエトキシフォスフィン（“NP1"）の合
成： ２−（Ｏ−ニトロフェニル）−1,2−エタンジオール
（2.5g、13.6ミリモル）を、ピリジンと共に共蒸発によ
り乾燥した。残渣をピリジン（50ml）に溶解し、4,4′
−ジメトキシトリチルクロライド（DMT−C1）13.6ミリ
モルを加えた。反応混合物を20℃で18時間攪拌した。次
いでピリジンの殆どを蒸発除去し、油状残渣を250ml酢
酸エチルに溶解した。有機相を５％NaHCO3（２×250m
l）、80％飽和NaCl水溶液（１×250ml）で洗浄し、固体
Na2SO4上で乾燥した。濾過の後、溶媒を真空かけて除
き、残留物をトルエン（１×200ml）及びCH3CN（１×20
0ml）で共蒸発した。製品をシリカゲル（CH2−Cl2−0.5
％トリエチルアミンで溶離した）のカラムで精製し、6.
5g（13.6ミリモル）の純粋製品（収率100％）を得た。
この精製した１−Ｏ−DMT−２−（Ｏ−ニトロフェニ
ル）−1,2−エタンジオールを、ジイソプロピルエチル
アミン（30ミリモル）の存在下、10℃で30分、クロロ−
N,N−ジイソプロピルアミノ−２−シアノエトキシフォ
スフィン（15ミリモル）と、CH2Cl2（50ml）中で反応さ
せることにより、β−シアノエチルフォスフォルアミダ
イトに転化した。次いで酢酸エチル（200ml）を加え、
組み合わせ有機相を80％飽和NaCl水溶液（２×250ml）
で洗浄し、固体Na2SO4上で乾燥した。真空かけて、溶媒
を除いた後、残留物のトルエン（100ml）及びCH3CN（10
0ml）で共蒸発させて、9.5gの１−Ｏ−ジメトキシトリ
チル−２−（Ｏ−ニトロフェニル）−1,2−エタンジオ
ールの２−Ｏ−フォスフォルアミダイト（収率100％）
を得た。
例２ 〔２−（２−ニトロフェニル）−１−（Ｏ−ジメトキシ
トリチロキシ）エトキシ〕−N,N−ジイソプロピルアミ
ノ−２−シアノエトキシフォスフィン（“NP2"）の合
成： ２−（Ｏ−ニトロフェニル）−1,2−エタンジオール
（2.5g、13.6ミリモル）をCH3CNとの共蒸発により乾燥
した。次いで乾燥した化合物をCH2Cl2（100ml）−CH3Cl
（10ml）中に溶解した。N,N−ジメチルアミノピリジン
（100mg）及びトリエチルアミン（3.6ml、26ミリモル）
を加え、攪拌しながら、固体ｔ−ブチルジメチルシリル
クロライド（TBDMS−C1）（2.6g、15ミリモル）を加え
た。攪拌を20℃で18時間続けた。更にTBDMS−C1（200m
g）を加えた。１時間後、反応混合物を400mlの酢酸エチ
ルで稀釈した。有機相を５％NaHCO3（２×250ml）及び8
0％NaCl飽和水溶液（１×250ml）で洗浄し、固体Na2SO4
上で乾燥した。溶媒を真空かけて除いた後、残留物のト
ルエン（200ml）及びCH3CN（200ml）と共蒸発し、2.5g
の粗１−Ｏ−TBDMS−２−（Ｏ−ニトロフェニル）−1,2
−エタンジオールを得た。この粗物質をピリジンで共蒸
発し、残留物をピリジン（50ml）に溶解した。DMT−C1
（30ミリモル）を加え、反応混合物を20℃で48時間攪拌
した。溶媒を、真空かけて除いた後、残留物を酢酸エチ
ル（250ml）に溶解した。有機相を５％NaHCO3（２×250
ml）及び80％NaCl飽和水溶液（１×250ml）で洗浄し、
固体Na2SO4上で乾燥した。溶媒を真空かけて除いた後、
残留物をトルエン及びCH3CNで共蒸発した。残留物をTHF
（100ml）に溶解し、10mlのTHF中テトラブチルアンモニ
ウムフルオライド1M溶液を10ml加えた。１−Ｏ−TBDMS
基の除去は30分以内に完了した。製品をシリカゲルカラ
ム上で精製し、純粋な２−Ｏ−DMT−２−（Ｏ−ニトロ
フェニル）−1,2−エタンジオール（2.4g、4.5ミリモ
ル）を得た。この物質を、上述のようにして、２−シア
ノエチルフォスフォルアミダイトに転化し、定量的収率
を得た。
例３ 標準的なフォスフォルアミダイト合成過程を用いてテ
ストフラグメント５′−T15−３′−ｐ−NP1−ｐ−５′
−T20−３′−OH（ｐ＝ホスフェート）を組立てた。完
全な脱保護の後、H2Oに溶解した精製DNAオリゴマーを15
分間光分解に付した（Hgランプ、λ＞350nm）。光分解
したサンプルをPAGE分析したところ、前記処理により、
テストフラグメントが新しいフラグメントに完全に開裂
し、この新しいフラグメントは、セグメントT20及びT15
について予想されるように泳動した（migrated）。
例４ ５′−DMT−１′−Ｏ−（２−ニトロベンジル）−２−
デオキシリボース３′−Ｏ−メチルホスホルアミダイト
の合成： 100mlの乾燥アセトニトリル中のデオキシリボース（1
0ミリモル）、２−ニトロベンジルアルコール（30ミリ
モル）及びジクロロ酢酸（DCA:100ml）を２時間加熱し
て静かに還流させた。20℃に冷却後、ピリジンを加えて
DCAを中和し、真空中で溶媒を除去した。残留物を500ml
の酢酸エチルに溶解させ、有機相を400mlの５％NaHC
O3、400mlの80％NaCl飽和水溶液で洗浄して、固体Na2SO
4で乾燥させた。ろ過してから真空中で溶媒を除去し、
残留物をトルエン及びアセトニトリルと共に蒸発させ
た。この粗反応混合物をCH2Cl2に溶解させ、生成物をシ
リカゲルクロマトグラフィーにより０〜６％のメタノー
ル勾配を使って単離した。生成物（α−及びβ−異性体
の1:1比の混合物）を含有しているフラクションを集
め、真空中で溶媒を除去して2.5gのわずかに黄色の固形
物（5.2ミリモル、収率52％）を得た。
デオキシリボース−Ｏ−ニトロベンジルの残留物を、
200mgのジメチルアミノピリジン（DMAP）と1.4mlのトリ
エチルアミンを含有している25mlのCH2Cl2に溶解させ
た。この溶液に、25mlのCH2Cl2に溶解したDMT−Cl（1.7
g、５ミリモル）を一滴ずつ加えた。全部の出発物質が
消費されたら、反応混合物を250mlの酢酸エチルで希釈
して抽出し、先に説明したように乾燥させて共蒸発させ
た。この粗反応混合物をシリカゲルクロマトグラフィー
にかけ、０〜３％のメタノール勾配で５′−DMT−１′
−Ｏ−２−ニトロベンジル−２′−デオキシリボース異
性体を溶離して、2.3gの黄色発泡体（2.65ミリモル）を
得た。
標準的な手順を使って３−メチルホスホルアミダイト
を調製した。５′−DMT−１′−Ｏ−（２−ニトロベン
ジル）−２′−デオキシリボースを2.8mlのD PEAを含有
している40mlのCH2Cl2に溶解させ、そして０℃でN,N−
ジイソプロピルアミノメチルクロロホスフィン（2.0ミ
リモル）を加えた。30分後、反応混合物を200mlの酢酸
エチルで希釈し、200mlの80％NaCl飽和水溶液で３回洗
浄し、固体Na2SO4で乾燥させ、そしてろ過した。溶媒を
真空中で除去し、残留物をトルエン及びアセトニトリル
と共に蒸発させた。この物質はそれ以上の精製を行わず
に使用した。
この保護されたアベーシックヌクレオシドホスホルア
ミダイトを標準の条件下で固体担体上のオリゴマー３′
−T20−〔１′−Ｏ−（２−ニトロベンジル）−２′−
デオキシリボース〕−T10に取入れた。フラグメントをD
CAで保護解除し（５′−DMTを取除くため）、チオフェ
ノールで保護解除し（チオフェノール／トリエチルアミ
ノ／ジオキサン、1:1:2v/v、20℃で１時間、メチルを取
除くため）、そしてNH4OHで保護解除した（水酸化アン
モニウム水溶液、20℃で１時間、３′−スクシネート結
合を開裂するため）。上澄み液を60℃で18時間加熱し
た。開裂は認められず、５′−DMT−１′−Ｏ−（２−
ニトロベンジル）−２′−デオキシリボース部分の塩基
安定性が証明された。水中にあるこの物質の試料を高強
度のHgランプを使って20分間光分解にかけて、５′−DM
T−１′−Ｏ−（２−ニトロベンジル）−２′−デオキ
シリボース部分からＯ−ニトロベンジル基を取除いた。
この光分解工程の間にオリゴマーの開裂は認められなか
った。光分解にかけたオリゴマーの試料を60℃のNH4OH
中で２時間温置した。この塩基処理の結果、オリゴマー
は二つの成分オリゴマーT10−３′−ｐと５′−ｐ−T10
とに完全に開裂した。
これらの反応の概要をスキーム５及びスキーム６に示
す。
２−ニトロベンジル ２′デオキシリボサイドの結合
したDNAフラグメントの開裂 例５ Ｎ−４−（Ｏ−N,N−ジイソプロピルアミノメトキシホ
スフィニル−６−オキシヘキシル）−５′−DMT−２′,
3′−ジベンゾイルシチジンの調製： ウリジン（24.5g、100ミリモル）をピリジン（２×15
0ml）を用いての共蒸発で乾燥させた。残留物を150mlの
ピリジンに溶解させ、そしてかき混ぜながらジメトキシ
トリチルクロリド−Cl（34g、100ミリモル）を一滴ずつ
加えた。この反応混合物を48時間かき混ぜておいた。メ
タノール（100ml）を加え、そして30分後に溶媒を真空
中で除去した。残留物を800mlの酢酸エチルに溶解さ
せ、有機相を800mlの５％NaHCO3で３回、800mlの80％Na
Cl飽和水溶液で３回洗浄し、固体Na2SO4で乾燥させ、ろ
過し、乾くまで蒸発させ、続いてトルエン及びアセトニ
トリルを用いて共蒸発させた。粗生成物の０〜７％メタ
ノール/1％トリエチルアミン勾配を使用したシリカゲル
クロマトグラフィーから46.36g、84.9ミリモルの５′−
DMT−リボウリジン）が得られ、ピリジンを用いた共蒸
発で乾燥させて、残留物を250mlのピリジンに溶解させ
た。このピリジン溶液に、100mlの塩化メチレン中の塩
化ベンゾイル（20ml、170ミリモル）を０℃で一滴ずつ
加えた。20℃で２時間攪拌後、真空中で溶媒を除去し、
残留物のトルエンを用いて共蒸発させた。残留物を酢酸
エチルに溶解させ、そして５′−DMT−ウリジンについ
て先に説明したのと同じ水性処理を施した。
粗５′−DMT−２′,3′−ジベンゾイル−ウリジン
（これは更に精製することなく使用した）を150mlのア
セトニトリルに溶解させた。1,2,4−トリアゾール（88.
19g）を０℃で400mlのアセトニトリルに懸濁させ、そし
て素早くかき混ぜながらPOCl3（27.56ml）を加えた。次
いでこの０℃の攪拌スラリーに、トリエチルアミン（10
6.7ml）を15分間かけて一滴ずつ加えた。30分後、150ml
のアセトニトリルに溶解した５′−DMT−２′,3′−ジ
ベンゾイル−ウリジンを上記の０℃の攪拌スラリーに一
滴ずつ加えた。氷水浴を取外し、攪拌を室温で１時間続
けた。この反応混合物を1400mlの酢酸エチルで希釈し、
上述のように抽出しそして乾燥させた。溶媒を真空中で
除去し、トルエンを用い、次いでアセトニトリルを用い
て共蒸発させて、４−（トリアゾロ）−１−ｂ−Ｄ−
５′−Ｏ−DMT−２′,3′−ジベンゾイル−リボフラノ
シル）−２（1H）−ピリミジノンを定量的収量で白色の
発泡体として得た。この後者の化合物の350ml CH3CN攪
拌溶液に固体の６−アミノヘキサノール（11.89g、101.
5ミリモル）を直接加えた。攪拌を18時間続けた。次い
でこの反応混合物を700mlの酢酸エチルで希釈して、上
述のように抽出した。Na2SO4で有機相を乾燥後、真空中
で溶媒を除去した。生成物をシリカ60Hカラムで精製
し、CH2Cl2中の０〜50％の酢酸で溶離して、Ｎ−４−
（６−ヒドロキシヘキシル）−５′−Ｏ−DMT−２′,
3′−ジベンゾイルシチジンの黄色発泡体を35.4g（41.5
ミリモル）得た。
標準の手順を使って対応するメチルホスホルアミダイ
トを調製した。変性ヌクレオシドＮ−４−（６−ヒドロ
キシヘキシル−５′−DMT−２′,3′−ジベンゾイルシ
チジン（8.7g、10.2ミリモル）を、8.8ml（50ミリモ
ル）のジソプロピルエチルアミンを含有している50mlの
塩化メチレンに溶解させ、そしてN,N−ジイソプロピル
アミノメトキシクロロホスフィン（1.94ml、10ミリモ
ル）を０℃でゆっくり加えた。30分後、この反応混合物
を250mlの酢酸エチルで希釈し、そして有機相を250mlの
５％NaHCO3で２回、80％NaCl飽和水溶液で２回洗浄し、
固体Na2SO4で乾燥させてろ過した。溶媒を真空中で除去
し、トルエンとアセトニトリルを用いて残留物を共蒸発
させた。この粗ホスフィチル化物質を、２％のトリエチ
ルアミンを含有している塩化メチレン中の50〜70％酢酸
エチル勾配を使ってシリカゲルのカラムで精製して、7.
25gのＮ−４−（Ｏ−N,N−ジイソプロピルアミノメトキ
シホスフィニル−６−オキシヘキシル）−５′−DMT−
２′,3′−ジベンゾイルシチジンを得た。
例６ 過ヨウ素酸ナトリウムでのシス−ジオール系の酸化開
裂は、RNA分子の末端リボヌクレオシドを容易に起こ
る。アミンの存在下において、得られたジアルデヒドは
塩基部分と５′−炭素のホスフェートの両方をたやすく
なくす。この例は、この概念を、二つのDNAオリゴマー
がＮ−４−（６−ヒドロキシヘキシル）シチジン分子の
５′−及び側鎖ヒドロキシル基を介して結合されている
開裂可能部位分子の設計に利用することを説明する。
環外アルキルヒドロキシル基を含有している変性リボ
ヌクレオシドＲをウリジンから合成した。保護されたＲ
リボヌクレオシドホスホルアミダイトを標準条件下で固
体担体上のオリゴマー５′−T10−Ｒ−T15−３′に取入
れた、生成物の精製試料を一連の化学処理にかけ、そし
て試料をPAGEで分析した。アンモニアを用いた60℃で18
時間の処理後には、オリゴマーの開裂は認められなかっ
た。過ヨウ素酸ナトリウム水溶液を用いて４℃で30分間
の処理をしたところ、部分的な開裂に至った。過ヨウ素
酸塩処理したオリゴマーを酢酸トリエチルアンモニウム
中のｎ−プロピルアミンに60℃で90分間更にさらすと、
オリゴマーは完全に開裂してT10−３′−ｐと５′端で
変性されたT15種とになった。スキーム７はＲリボヌク
レオシドに結合したDNAフラグメントの開裂の概１を示
している。
開裂スキームは、いくつかの分枝状DNAオリゴマーに
応用されており、このスキームでは、保護化Ｒリボヌク
レオシドホスホロアミダイトは、それぞれ10,20及び30
個の櫛状分枝点を含む固相に担持された線状オリゴマー
の二次合成の第１サイクルの際に取り込まれた。各場合
に、二次合成は、以下の構造： ３′−T20−En−５′〔分枝−点−３′−Ｒ−T10−
５′〕ｎ、ｎ＝10,20,30の分枝状オリゴマーが得られる
T10オリゴマーであった。これらの分子を開裂条件にお
いた。PAGE分析は、すべての場合に、すべての側腕オリ
ゴマーは開裂して離れ、T10−３′−ｐが主生成物であ
ったことを示している。この分析は、更に、生成物分布
は枝状DNA分子中の分枝の数に依存し、分子中に分枝が
多く存在すればする程、より短いオリゴマーの量が増加
することを示している。生成物の均質性が低下するの
は、主に化学合成の際の固相担持体内の立体的拘束の結
果であると思われる。
実施例７ 本実施例では、スキーム８に示すように多官能結合基
“DMT−Ｅ（Lev）BCEアミダイト”の製造について述べ
る。
トリス−ヒドロキシメチルエタン（Ｅ′;200mmole）
ピリジン250mlと共蒸発させ次いで残渣をピリジン125ml
に溶解した。０℃まで冷却したこの溶液に、塩化トシル
（“TsCl";50mmole）溶液（CH2Cl2125ml中）を滴加し
た。この反応混合物を室温まで温め次いで攪拌を全部で
５時間続けた。次に溶剤を真空除去した。残渣を酢酸エ
チル500mlに溶解し、これを５％NaHCO3溶液500mlで２
回、80％飽和NaCl水溶液500mlで１回洗浄し、最後に固
体状Na2So4で乾燥した。ろ過後、溶剤を真空除去して粗
Ｅ′（Ts）13.7gを得た。この物質を更に精製すること
なく使用した。すべてのＥ′（Ts）をCH2Cl2250ml及び
トリエチルアミン（14ml;100mmole）に溶解し次いでN,N
−ジメチルアミノピリジン（100mg）を添加した。CH2Cl
2125mlに溶解したDMT−Cl（13.6g;40mmole）をこの溶液
に添加した。室温で18時間後、反応混合物を酢酸エチル
500mlで希釈し次いで前述と同様の水性後処理に付し
た。
粗反応生成物を、CH2Cl2/0.5％トリエチルアミン中の
メタノール勾配液で溶離する標準シリカカラム（“800m
l"シリカ）を用いて精製したところ純粋なDMT−Ｅ′（T
s）14.8g（25mmole）が得られた。レブリン酸セシウム
塩（M.Bodanszky及びA.Bodanszky.The Practice of Pep
tide Synthesis、37頁、Springer Verlag（1984）によ
り製造）をDMF50mlに溶解して調製したばかりのもの50m
moleで前記の物質すべてを処理した。この溶液を、密閉
バイアル中ホットプレートで（セッティング3;温度約30
℃）18時間加熱したが、その時点での分析は反応完了を
示していた。DMFを真空除去し次いで残渣を酢酸エチル
に溶解した。有機相を前記のように洗浄した。粗生成物
をシリカゲルクロマトグラフィにかけ次いで純粋な生成
物をCH2Cl2/0.5％トリエチルアミンで溶離してDMT−
Ｅ′（Lev）の純粋生成物2.5g（4.8mmole）を得た。純
粋なDMT−Ｅ′（Lev）を以下のようにして２−シアノエ
チルホスホロアミダイトへ転化した。DMT−Ｅ′（Lev）
を、N,N′−ジイソプロピルエチルアミン（2.6ml;15mmo
le）を含有するCH2Cl220mlに溶解し次いで０℃まで冷却
し；この溶液にアルゴン下注射器を用いて２−シアノエ
トキシ−N,N−ジイソプロピルアミノクロロホスフィン
（1.1ml;5mmole）を添加した。約30分後、反応が完了し
次いで反応混合物を酢酸エチル150mlで希釈した。有機
相を５％NaHCO3150mlで２回、80％飽和NaCl溶液150mlで
２回洗浄した。固体状Na2SO4で乾燥後、溶液をろ過蒸発
させて乾燥してDMT−Ｅ′（Lev）BCEアミダイトの白色
泡状物質3.6gを得た。粗アミダイトを、CH2Cl2/酢酸エ
チル／トリエチルアミン（45:45:10v/v）を用いて溶離
するシリカゲルカラムを用いて精製した純粋なDMT−
Ｅ′（Lev）BCEアミダイト（3.24g;4.5mmole）の白色泡
状物質を得た。NMR（31P）δ148.5ppm及びカプリング効
率98％。
実施例８ 本実施例では、スキーム９に示すように、多官能結合
基“DMT−Ｅ′（Lev）BCEアミダイト”の別の合成法に
ついて述べる。
トリス−ヒドロキシメチルエタン（200mmole）をピリ
ジン250mlと共蒸発させ次いで残渣をピリジン125mlに溶
解した。０℃まで冷却したこの溶液に、トリフェニルク
ロロシラン（“TPS";50mmole）溶液（CH2Cl2125ml中）
を滴加した。この反応混合物を室温まで温め次いで攪拌
を全部で18時間続けた。次に溶剤を真空除去した。残渣
を酢酸エチル500mlに溶解し、これを５％NaHCO3溶液500
mlで２回、80％飽和NaCl水溶液500mlで１回洗浄し、最
後に固体状Na2SO4で乾燥した。ろ過後、溶剤を真空除去
して粗Ｅ′（TPS）18gを得た。この物質を更に精製する
ことなく使用した。すべてのＥ′（TPS）（46mmole）を
CH2Cl2250ml及びトリエチルアミン（14ml;100mmole）に
溶解し次いでN,N−ジメチルアミノピリジン（100mg）を
添加した。CH2Cl2125mlに溶解したDMT−Cl（50mmole）
をこの溶液に添加した。室温で18時間後、反応混合物を
酢酸エチル500mlで希釈し次いで前述と同様の水性後処
理に付して、黄色泡状物質35.8gを得た。
粗反応生成物を、CH2Cl2/0.5％トリエチルアミン中の
メタノール勾配液で溶離する標準シリカカラム（“800m
l"シリカ）を用いて精製したところ純粋なDMT−Ｅ′（T
PS）14.8g（25mmole）が得られた。精製DMT−Ｅ′−（T
PS）（10mmole）をN,N−ジメチルアミノピリジン（100m
g）及び2,6−ルチンジン（2.6ml、20mmole）を含有する
50mlに溶解し、次いでレブリン酸（2.3g、20mmole）を
添加した。CH2Cl250mlに溶解した１−エチル−３−（３
−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（3.
83g、20mmole）をこの溶液に添加した。18時間後、反応
は完了し（tlc分析）、次いでこの反応混合物を酢酸エ
チル500mlで希釈し、前記と同様の水性後処理に付し
た。この後処理から得られた残渣をTHF（50ml）に溶解
し、次いで先ず第１にピリジン40ml次に濃酢酸10mlを添
加し、続いてTHF（Aldrich）中の1Mテトラブチルアンモ
ニウムフルオライド20mlを添加した。30後のTlc分析は
すべての出発物質が消費されたことを示していた。ほと
んどの溶剤を次に真空除去し次いで残留した残渣を以下
の水性後処理に付した：酢酸エチル（250ml）を添加し
てほとんどの有機物質を溶解し次いで５％重炭酸ナトリ
ウム溶液250mlを徐々に添加した（CO2発生）。次に固体
状NaHCO3を攪拌しながら添加しそして溶解し、遂には固
体状塩が残留しそしてCO2発生が停止した。水性／有機
性溶液を合せたものを分液ロートに移し次いで有機相を
前記のように洗浄した。溶剤を除去すると、粗DMT−
Ｅ′（Lev）5.96gが明澄オイルとして生成した。この生
成物を、約500gのシリカ並びに溶離剤として０％及び１
％のメタノールを含有するCH2Cl2/0.25％トリエチルア
ミンを用いるシリカゲルクロマトグラフィにより単離し
て、DMT−Ｅ′（Lev）2.7g（5.2mmole）を明澄な無色オ
イルとして得た。
純粋なDMT−Ｅ′（Lev）を以下のようにして２−シア
ノエチルホスホロアミダイトへ転化した。DMT−Ｅ′（L
ev）を、N,N−ジイソプロピルエチルアミン（2.6ml;15m
mole）を含有するCH2Cl220mlに溶解し次いで０℃まで冷
却し；この溶液にアルゴン下注射器を用いて２−シアノ
エトキシ−N,N−ジイソプロピルアミノクロロホスフィ
ン（1.1ml;5mmole）を添加した。約30分後、反応が完了
し次いで反応混合物を酢酸エチル150mlで希釈した。有
機相を５％NaHCO3150mlで２回、80％飽和NaCl溶液150ml
で２回洗浄した。固体状Na2SO4で乾燥後、溶液をろ過蒸
発させて乾燥してDMT−Ｅ′（Lev）BCEアミダイトの白
色泡状物質3.4gを得た。粗アミダイトを、CH2Cl2/酢酸
エチル／トリエチルアミン（45:45:10v/v）を用いて溶
離するシリカゲルカラムを用いて精製して純粋なDMT−
Ｅ′（Lev）BCEアミダイト（2.4g;3.3mmole）の白色泡
状物質を得た。NMR（31P）δ148.5ppm及びカプリング効
率98％。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ０７Ｈ 11/04 Ｃ０７Ｈ 11/04 15/18 15/18 15/207 15/207 19/073 19/073 19/10 19/10 21/04 21/04 Ｚ 23/00 23/00 Ｃ１２Ｑ 1/68 9453−4Ｂ Ｃ１２Ｑ 1/68 Ａ (56)参考文献 Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔｅ ｒｓ，Ｎｏ．17，ｉｓｓｕｅｄ1975，Ｐ Ｐ．1445−1448

Claims (15)

    (57)【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】次の式： （式中、 R1は塩基安定性、酸感受性ブロッキング基であり； R2はオリゴヌクレオチド鎖の５′位に試薬を付加するこ
    とを可能にするために選択されたリン誘導体であり；そ
    して ｘ及びｙの１つは０であり、他方は１〜12の範囲の整数
    である） により表わされるヌクレオチド鎖合成用試薬。
  2. 【請求項２】ｘが０である、請求項１に記載の試薬。
  3. 【請求項３】ｙが１〜４の範囲の整数である、請求項２
    に記載の試薬。
  4. 【請求項４】R1がジメトキシトリチル、モノメトキシト
    リチル、トリチル及びビキシルから成る群から選択され
    る請求項３に記載の試薬。
  5. 【請求項５】R2がホスホラミダイト、ホスホトリエステ
    ル、ホスホジエステル、ホスファイト、Ｈ−ホスホネー
    ト及びホスホロチオエートから成る群から選択される、
    請求項３に記載の試薬。
  6. 【請求項６】R2がホスホラミダイト、ホスホトリエステ
    ル、ホスホジエステル、ホスファイト、Ｈ−ホスホネー
    ト及びホスホロチオエートから成る群から選択される、
    請求項４に記載の試薬。
  7. 【請求項７】R2が、次の式： （式中、Ｙはメチル及びβ−シアノエチルから成る群か
    ら選択され、そしてiPrはイソプロピルを表わす） により表わされるホスホラミダイトである、請求項５に
    記載の試薬。
  8. 【請求項８】R2が次の式： （式中、Ｙはメチル及びβ−シアノエチルから成る群か
    ら選択され、そしてiPrはイソプロピルを表わす） により表わされるホスホラミダイトである、請求項６に
    記載の試薬。
  9. 【請求項９】ｙが０である、請求項１に記載の試薬。
  10. 【請求項１０】ｘが１〜４の範囲の整数である、請求項
    ９に記載の試薬。
  11. 【請求項１１】R1がジメトキシトリチル、モノメトキシ
    トリチル、トリチル及びピキシルから成る群から選択さ
    れる請求項９に記載の試薬。
  12. 【請求項１２】R2がホスホラミダイト、ホスホトリエス
    テル、ホスホジエステル、ホスファイト、Ｈ−ホスホネ
    ート及びホスホロチオエートから成る群から選択され
    る、請求項10に記載の試薬。
  13. 【請求項１３】R2がホスホラミダイト、ホスホトリエス
    テル、ホスホジエステル、ホスファイト、Ｈ−ホスホネ
    ート及びホスホロチオエートから成る群から選択され
    る、請求項11に記載の試薬。
  14. 【請求項１４】R2が次の式： （式中、Ｙはメチル及びβ−シアノエチルから成る群か
    ら選択され、そしてiPrはイソプロピルである） により表わされるホスホラミダイトである、請求項12に
    記載の試薬。
  15. 【請求項１５】R2が次の式： （式中、Ｙはメチル及びβ−シアノエチルから成る群か
    ら選択され、そしてiPrはイソプロピルを表わす） により表わされるホスホラミダイトである、請求項13に
    記載の試薬。
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Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5430136A (en) * 1984-10-16 1995-07-04 Chiron Corporation Oligonucleotides having selectably cleavable and/or abasic sites
US6335434B1 (en) 1998-06-16 2002-01-01 Isis Pharmaceuticals, Inc., Nucleosidic and non-nucleosidic folate conjugates
US8153602B1 (en) 1991-11-19 2012-04-10 Isis Pharmaceuticals, Inc. Composition and methods for the pulmonary delivery of nucleic acids
US5849905A (en) * 1994-11-23 1998-12-15 Centre National De La Recherche Scientifique Biologically active phosphotriester-type nucleosides and methods for preparing same
US6020482A (en) * 1992-05-25 2000-02-01 Gosselin; Gilles Phosphotriester type biologically active compounds
US5770725A (en) * 1992-05-25 1998-06-23 Gosselin; Gilles Phosphotriester type biologically active compounds
FR2692265B1 (fr) 1992-05-25 1996-11-08 Centre Nat Rech Scient Composes biologiquement actifs de type phosphotriesters.
US6436635B1 (en) * 1992-11-06 2002-08-20 Boston University Solid phase sequencing of double-stranded nucleic acids
US5795714A (en) * 1992-11-06 1998-08-18 Trustees Of Boston University Method for replicating an array of nucleic acid probes
US5605798A (en) * 1993-01-07 1997-02-25 Sequenom, Inc. DNA diagnostic based on mass spectrometry
US6194144B1 (en) 1993-01-07 2001-02-27 Sequenom, Inc. DNA sequencing by mass spectrometry
US5955591A (en) * 1993-05-12 1999-09-21 Imbach; Jean-Louis Phosphotriester oligonucleotides, amidites and method of preparation
JP3484197B2 (ja) 1993-09-03 2004-01-06 アイシス・ファーマシューティカルス・インコーポレーテッド アミン誘導化ヌクレオシドおよびオリゴヌクレオシド
US5986076A (en) * 1994-05-11 1999-11-16 Trustees Of Boston University Photocleavable agents and conjugates for the detection and isolation of biomolecules
US5597909A (en) * 1994-08-25 1997-01-28 Chiron Corporation Polynucleotide reagents containing modified deoxyribose moieties, and associated methods of synthesis and use
US5580731A (en) * 1994-08-25 1996-12-03 Chiron Corporation N-4 modified pyrimidine deoxynucleotides and oligonucleotide probes synthesized therewith
US6428955B1 (en) 1995-03-17 2002-08-06 Sequenom, Inc. DNA diagnostics based on mass spectrometry
US7803529B1 (en) * 1995-04-11 2010-09-28 Sequenom, Inc. Solid phase sequencing of biopolymers
US20060063193A1 (en) * 1995-04-11 2006-03-23 Dong-Jing Fu Solid phase sequencing of double-stranded nucleic acids
US5830655A (en) * 1995-05-22 1998-11-03 Sri International Oligonucleotide sizing using cleavable primers
US6420549B1 (en) 1995-06-06 2002-07-16 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotide analogs having modified dimers
US5856464A (en) * 1995-06-07 1999-01-05 Lajolla Pharmaceutical Company Selective capping solution phase oligonucleotide synthesis
US5998580A (en) * 1995-10-13 1999-12-07 Fay; Frederick F. Photosensitive caged macromolecules
AU7264196A (en) * 1995-10-16 1997-05-07 Chiron Corporation Method of screening for factors that modulate gene expression
US6022963A (en) * 1995-12-15 2000-02-08 Affymetrix, Inc. Synthesis of oligonucleotide arrays using photocleavable protecting groups
US20110028350A1 (en) * 1995-12-15 2011-02-03 Affymetrix, Inc. Photocleavable protecting groups
US6147205A (en) * 1995-12-15 2000-11-14 Affymetrix, Inc. Photocleavable protecting groups and methods for their use
US6027890A (en) 1996-01-23 2000-02-22 Rapigene, Inc. Methods and compositions for enhancing sensitivity in the analysis of biological-based assays
US6312893B1 (en) 1996-01-23 2001-11-06 Qiagen Genomics, Inc. Methods and compositions for determining the sequence of nucleic acid molecules
US6613508B1 (en) 1996-01-23 2003-09-02 Qiagen Genomics, Inc. Methods and compositions for analyzing nucleic acid molecules utilizing sizing techniques
US7875733B2 (en) 2003-09-18 2011-01-25 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligomeric compounds comprising 4′-thionucleosides for use in gene modulation
US20030044941A1 (en) 1996-06-06 2003-03-06 Crooke Stanley T. Human RNase III and compositions and uses thereof
US7812149B2 (en) 1996-06-06 2010-10-12 Isis Pharmaceuticals, Inc. 2′-Fluoro substituted oligomeric compounds and compositions for use in gene modulations
US20040266706A1 (en) * 2002-11-05 2004-12-30 Muthiah Manoharan Cross-linked oligomeric compounds and their use in gene modulation
US9096636B2 (en) 1996-06-06 2015-08-04 Isis Pharmaceuticals, Inc. Chimeric oligomeric compounds and their use in gene modulation
US5898031A (en) 1996-06-06 1999-04-27 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligoribonucleotides for cleaving RNA
AU2980297A (en) * 1996-06-10 1998-01-07 Laboratory Of Molecular Biophotonics Photocleavable cyclic oligonucleotide
US5853990A (en) 1996-07-26 1998-12-29 Edward E. Winger Real time homogeneous nucleotide assay
DK0937096T3 (da) 1996-11-06 2004-06-14 Sequenom Inc Fremgangsmåde til massespektrometri-analyse
US6140053A (en) * 1996-11-06 2000-10-31 Sequenom, Inc. DNA sequencing by mass spectrometry via exonuclease degradation
DE19782095T1 (de) * 1996-11-06 2000-03-23 Sequenom Inc DNA-Diagnose auf der Basis von Massenspektrometrie
US6133436A (en) 1996-11-06 2000-10-17 Sequenom, Inc. Beads bound to a solid support and to nucleic acids
JP2001524808A (ja) 1996-12-10 2001-12-04 ジーントレイス・システムズ・インコーポレイテッド 放出可能な不揮発性の質量標識分子
US6576752B1 (en) 1997-02-14 2003-06-10 Isis Pharmaceuticals, Inc. Aminooxy functionalized oligomers
US6172209B1 (en) 1997-02-14 2001-01-09 Isis Pharmaceuticals Inc. Aminooxy-modified oligonucleotides and methods for making same
US6127533A (en) * 1997-02-14 2000-10-03 Isis Pharmaceuticals, Inc. 2'-O-aminooxy-modified oligonucleotides
US6887906B1 (en) 1997-07-01 2005-05-03 Isispharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for the delivery of oligonucleotides via the alimentary canal
US6365731B1 (en) 1997-08-06 2002-04-02 Ambion, Inc. Stripping nucleic acids with iodine and sodium thiosulfate
EP1003914A1 (en) * 1997-08-05 2000-05-31 Ambion, Inc. Methods and compositions for stripping nucleic acids
US6268131B1 (en) 1997-12-15 2001-07-31 Sequenom, Inc. Mass spectrometric methods for sequencing nucleic acids
US20040186071A1 (en) 1998-04-13 2004-09-23 Bennett C. Frank Antisense modulation of CD40 expression
US6723564B2 (en) 1998-05-07 2004-04-20 Sequenom, Inc. IR MALDI mass spectrometry of nucleic acids using liquid matrices
EP1469009A2 (en) * 1998-05-21 2004-10-20 Isis Parmaceuticals, Inc. Compositions and methods for non-parenteral delivery of oligonucleotides
EP1080226A4 (en) 1998-05-21 2004-04-21 Isis Pharmaceuticals Inc COMPOSITIONS AND METHODS FOR TOPICAL ADMINISTRATION OF OLIGONUCLEOTIDES
US6472522B1 (en) 1998-08-27 2002-10-29 Bayer Corporation Purification of oligomers using dual-end selection
US6225293B1 (en) 1998-09-02 2001-05-01 Isis Pharmaceuticals, Inc. Methods and compounds for tracking the biodistribution of macromolecule-carrier combinations
US6077709A (en) 1998-09-29 2000-06-20 Isis Pharmaceuticals Inc. Antisense modulation of Survivin expression
US6300320B1 (en) 1999-01-05 2001-10-09 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of c-jun using inhibitors of protein kinase C
US6127124A (en) * 1999-01-20 2000-10-03 Isis Pharmaceuticals, Inc. Fluorescence based nuclease assay
US7098192B2 (en) 1999-04-08 2006-08-29 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense oligonucleotide modulation of STAT3 expression
US20030207295A1 (en) * 1999-04-20 2003-11-06 Kevin Gunderson Detection of nucleic acid reactions on bead arrays
US20060275782A1 (en) 1999-04-20 2006-12-07 Illumina, Inc. Detection of nucleic acid reactions on bead arrays
EP1923471B1 (en) 1999-04-20 2012-12-19 Illumina, Inc. Detection of nucleic acid reactions on bead arrays
CA2371843A1 (en) * 1999-05-07 2000-11-16 Yale University Multiple tag analysis
US8481268B2 (en) 1999-05-21 2013-07-09 Illumina, Inc. Use of microfluidic systems in the detection of target analytes using microsphere arrays
US8080380B2 (en) 1999-05-21 2011-12-20 Illumina, Inc. Use of microfluidic systems in the detection of target analytes using microsphere arrays
US6656730B1 (en) 1999-06-15 2003-12-02 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides conjugated to protein-binding drugs
US6261840B1 (en) 2000-01-18 2001-07-17 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of PTP1B expression
US20020055479A1 (en) 2000-01-18 2002-05-09 Cowsert Lex M. Antisense modulation of PTP1B expression
US6680172B1 (en) 2000-05-16 2004-01-20 Regents Of The University Of Michigan Treatments and markers for cancers of the central nervous system
US8568766B2 (en) 2000-08-24 2013-10-29 Gattadahalli M. Anantharamaiah Peptides and peptide mimetics to treat pathologies associated with eye disease
JP2005523232A (ja) * 2000-09-11 2005-08-04 アフィメトリックス インコーポレイテッド 光切断可能保護基
US20030077590A1 (en) * 2000-09-22 2003-04-24 Pedersen Finn Skou Methods for diagnosis and treatment of diseases associated with altered expression of neurogranin
US20020115058A1 (en) * 2000-09-22 2002-08-22 Pedersen Finn Skou Methods for diagnosis and treatment of diseases associated with altered expression of Pik3r1
US20030044803A1 (en) * 2000-09-22 2003-03-06 Pedersen Finn Skou Methods for diagnosis and treatment of diseases associated with altered expression of JAK1
EP1326892A2 (en) 2000-10-12 2003-07-16 University of Rochester Compositions that inhibit proliferation of cancer cells
US7892730B2 (en) * 2000-12-22 2011-02-22 Sagres Discovery, Inc. Compositions and methods for cancer
US20030165878A1 (en) * 2000-12-22 2003-09-04 Morris David W. Novel compositions and methods in cancer associated with altered expression of MCM3AP
US7820447B2 (en) 2000-12-22 2010-10-26 Sagres Discovery Inc. Compositions and methods for cancer
US20030232334A1 (en) 2000-12-22 2003-12-18 Morris David W. Novel compositions and methods for cancer
US20030099963A1 (en) * 2000-12-22 2003-05-29 Morris David W. Novel compositions and methods in cancer associated with altered expression of TBX21
US7645441B2 (en) * 2000-12-22 2010-01-12 Sagres Discovery Inc. Compositions and methods in cancer associated with altered expression of PRLR
US20030087252A1 (en) * 2000-12-22 2003-05-08 Morris David W. Novel compositions and methods in cancer associated with altered expression of PRDM11
US7700274B2 (en) * 2000-12-22 2010-04-20 Sagres Discovery, Inc. Compositions and methods in cancer associated with altered expression of KCNJ9
US7767802B2 (en) 2001-01-09 2010-08-03 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting expression of anti-apoptotic genes
US20030092157A1 (en) * 2001-03-16 2003-05-15 Hayden Michael R. Compositions, screening systems and methods for modulating HDL cholesterol and triglyceride levels
US20030191073A1 (en) 2001-11-07 2003-10-09 Challita-Eid Pia M. Nucleic acid and corresponding protein entitled 161P2F10B useful in treatment and detection of cancer
JP2004537516A (ja) 2001-05-11 2004-12-16 オラセンス リミテッド アンチセンス浸透促進剤
WO2002097123A2 (en) * 2001-05-25 2002-12-05 Xenon Genetics, Inc. Diagnostic methods for cardiovascular disease, low hdl-cholesterol levels, and high triglyceride levels
KR100607612B1 (ko) 2001-06-20 2006-08-02 제넨테크, 인크. 종양의 진단 및 치료를 위한 방법 및 이를 위한 조성물
US7803915B2 (en) 2001-06-20 2010-09-28 Genentech, Inc. Antibody compositions for the diagnosis and treatment of tumor
EP2221376B1 (en) 2001-06-21 2012-11-21 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of superoxide dismutase 1, soluble expression
US7425545B2 (en) 2001-07-25 2008-09-16 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of C-reactive protein expression
US6964950B2 (en) 2001-07-25 2005-11-15 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of C-reactive protein expression
US20030096772A1 (en) 2001-07-30 2003-05-22 Crooke Rosanne M. Antisense modulation of acyl CoA cholesterol acyltransferase-2 expression
US7407943B2 (en) 2001-08-01 2008-08-05 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of apolipoprotein B expression
US7227014B2 (en) 2001-08-07 2007-06-05 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of apolipoprotein (a) expression
DE10142643A1 (de) * 2001-08-31 2003-04-24 Clondiag Chip Tech Gmbh Detektion von Wechselwirkungen auf Sonden-Arrays
US20050147984A1 (en) * 2001-08-31 2005-07-07 Clondiag Chip Technologies Gmbh Interaction detection on several probe arrays
CA2460120A1 (en) 2001-09-18 2003-03-27 Genentech, Inc. Compositions and methods for the diagnosis and treatment of tumor
US20070098728A1 (en) * 2001-09-24 2007-05-03 Pedersen Finn S Novel compositions and methods in cancer
NZ577565A (en) 2001-10-09 2010-10-29 Isis Pharmaceuticals Inc Antisense modulation of insulin-like growth factor binding protein 5 expressions
US6750019B2 (en) 2001-10-09 2004-06-15 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of insulin-like growth factor binding protein 5 expression
DE10150121B4 (de) * 2001-10-11 2005-12-01 Bernhard-Nocht-Institut für Tropenmedizin Echtzeitdetektion von DNA-Amplifikationsprodukten
WO2005049075A2 (en) 2003-11-17 2005-06-02 Genentech, Inc. Compositions and methods for the treatment of tumor of hematopoietic origin
US20040166490A1 (en) * 2002-12-17 2004-08-26 Morris David W. Novel therapeutic targets in cancer
US20040126762A1 (en) * 2002-12-17 2004-07-01 Morris David W. Novel compositions and methods in cancer
US20040180344A1 (en) * 2003-03-14 2004-09-16 Morris David W. Novel therapeutic targets in cancer
US20040197778A1 (en) * 2002-12-26 2004-10-07 Sagres Discovery, Inc. Novel compositions and methods in cancer
US20060040262A1 (en) * 2002-12-27 2006-02-23 Morris David W Novel compositions and methods in cancer
US6965025B2 (en) 2001-12-10 2005-11-15 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of connective tissue growth factor expression
NZ533933A (en) 2002-01-02 2008-06-30 Genentech Inc Compositions and methods for the diagnosis and treatment of glioma tumor
DE10201463B4 (de) 2002-01-16 2005-07-21 Clondiag Chip Technologies Gmbh Reaktionsgefäß zur Durchführung von Array-Verfahren
WO2003072805A2 (en) 2002-02-21 2003-09-04 Asm Scientific, Inc. Recombinase polymerase amplification
US8030000B2 (en) 2002-02-21 2011-10-04 Alere San Diego, Inc. Recombinase polymerase amplification
US7399590B2 (en) 2002-02-21 2008-07-15 Asm Scientific, Inc. Recombinase polymerase amplification
US20030180712A1 (en) 2002-03-20 2003-09-25 Biostratum Ab Inhibition of the beta3 subunit of L-type Ca2+ channels
JP2005520543A (ja) 2002-03-21 2005-07-14 サイグレス ディスカバリー， インコーポレイテッド 癌における新規組成物および方法
MXPA04010092A (es) 2002-04-16 2004-12-13 Genentech Inc Composiciones y metodos para el diagnostico y tratamiento de tumores.
US7199107B2 (en) 2002-05-23 2007-04-03 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of kinesin-like 1 expression
US20040092470A1 (en) * 2002-06-18 2004-05-13 Leonard Sherry A. Dry powder oligonucleotide formualtion, preparation and its uses
US20040019000A1 (en) * 2002-07-19 2004-01-29 Muthiah Manoharan Polyalkyleneamine-containing oligomers
EP2116604A1 (en) 2002-08-05 2009-11-11 University of Rochester Protein transducing domain/deaminase chimeric proteins, related compounds, and uses thereof
US6878805B2 (en) * 2002-08-16 2005-04-12 Isis Pharmaceuticals, Inc. Peptide-conjugated oligomeric compounds
AU2003243151A1 (en) 2002-08-16 2004-03-03 Agensys, Inc. Nucleic acid and corresponding protein entitled 251p5g2 useful in treatment and detection of cancer
BR0314236A (pt) 2002-09-13 2005-08-09 Replicor Inc Formulação de oligonucleotìdeo, composição farmacêutica, kit, composto antiviral, preparação de oligonucleotìdeo e métodos para seleção de um oligonucleotìdeo antiviral para uso como um agente antiviral, para profilaxia ou tratamento de uma infecção viral em um paciente, para tratamento profilático de câncer causado por oncovìrus, para identificação de um composto que altera a ligação de um oligonucleotìdeo a pelo menos um componente viral, para purificação da ligação de oligonucleotìdeos a pelo menos um componente viral e para enriquecimento de oligonucleotìdeos a partir de um agrupamento de oligonucleotìdeos
AU2003278957A1 (en) 2002-09-26 2004-04-23 Amgen, Inc. Modulation of forkhead box o1a expression
EP1578765A4 (en) 2002-11-05 2008-04-23 Isis Pharmaceuticals Inc OLIGOMERIC COMPOUNDS CONTAINING SUGAR SUBSTITUTE AND COMPOSITIONS FOR USE IN GENE MODULATION
US9150605B2 (en) 2002-11-05 2015-10-06 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compositions comprising alternating 2′-modified nucleosides for use in gene modulation
AU2003291753B2 (en) 2002-11-05 2010-07-08 Isis Pharmaceuticals, Inc. Polycyclic sugar surrogate-containing oligomeric compounds and compositions for use in gene modulation
US9150606B2 (en) 2002-11-05 2015-10-06 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compositions comprising alternating 2'-modified nucleosides for use in gene modulation
AU2003287505A1 (en) 2002-11-05 2004-06-03 Isis Pharmaceuticals, Inc. Chimeric oligomeric compounds and their use in gene modulation
DK1569695T3 (da) 2002-11-13 2013-08-05 Genzyme Corp Antisense-modulering af apolipoprotein-b-ekspression
WO2004044181A2 (en) 2002-11-13 2004-05-27 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of apolipoprotein b expression
JP4915980B2 (ja) 2002-11-15 2012-04-11 エムユーエスシー ファウンデーション フォー リサーチ デベロップメント 補体レセプター２標的化補体調節因子
JP4555089B2 (ja) 2002-11-15 2010-09-29 モーフオテク・インコーポレーテツド ｉｎｖｉｔｒｏ免疫感作により創製されたハイブリドーマからの抗体の高生産量の生成方法
US7557092B2 (en) 2002-11-21 2009-07-07 University Of Utah Research Foundation Purinergic modulation of smell
US7144999B2 (en) 2002-11-23 2006-12-05 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of hypoxia-inducible factor 1 alpha expression
EP1625140A4 (en) * 2002-12-23 2008-06-18 Dynavax Tech Corp BRANCHED IMMUNOMODULAR COMPOUNDS AND METHOD OF USE THEREOF
EP1594892A2 (en) 2003-02-10 2005-11-16 Agensys, Inc. Nucleic acid and corresponding protein named 158p1d7 useful in the treatment and detection of bladder and other cancers
ES2400033T3 (es) 2003-02-11 2013-04-05 Antisense Therapeutics Ltd Modulación de la expresión del receptor del factor de crecimiento I similar a la insulina
JP2007524362A (ja) 2003-02-14 2007-08-30 サイグレス ディスカバリー， インコーポレイテッド 癌における治療ｇｐｃｒ標的
US7767387B2 (en) * 2003-06-13 2010-08-03 Sagres Discovery, Inc. Therapeutic targets in cancer
US20040170982A1 (en) * 2003-02-14 2004-09-02 Morris David W. Novel therapeutic targets in cancer
US20070218071A1 (en) * 2003-09-15 2007-09-20 Morris David W Novel therapeutic targets in cancer
US6943768B2 (en) 2003-02-21 2005-09-13 Xtellus Inc. Thermal control system for liquid crystal cell
US7803781B2 (en) 2003-02-28 2010-09-28 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of growth hormone receptor expression and insulin-like growth factor expression
US20040185559A1 (en) 2003-03-21 2004-09-23 Isis Pharmaceuticals Inc. Modulation of diacylglycerol acyltransferase 1 expression
US7598227B2 (en) 2003-04-16 2009-10-06 Isis Pharmaceuticals Inc. Modulation of apolipoprotein C-III expression
US7399853B2 (en) 2003-04-28 2008-07-15 Isis Pharmaceuticals Modulation of glucagon receptor expression
NZ543840A (en) 2003-05-30 2009-09-25 Agensys Inc Prostate stem cell antigen (PSCA) variants and subsequences thereof, namely SEQ ID NO:6537
CA2540692C (en) 2003-06-02 2013-05-28 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotide synthesis with alternative solvents
WO2005002507A2 (en) 2003-06-03 2005-01-13 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of survivin expression
DK2336317T3 (da) 2003-06-13 2019-12-16 Alnylam Europe Ag Dobbeltstrenget ribonukleinsyre med forøget effektivitet i en organisme
US20040259100A1 (en) 2003-06-20 2004-12-23 Illumina, Inc. Methods and compositions for whole genome amplification and genotyping
US7790691B2 (en) * 2003-06-20 2010-09-07 Isis Pharmaceuticals, Inc. Double stranded compositions comprising a 3′-endo modified strand for use in gene modulation
WO2005013901A2 (en) 2003-07-31 2005-02-17 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligomeric compounds and compositions for use in modulation of small non-coding rnas
US7825235B2 (en) 2003-08-18 2010-11-02 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of diacylglycerol acyltransferase 2 expression
US20050053981A1 (en) 2003-09-09 2005-03-10 Swayze Eric E. Gapped oligomeric compounds having linked bicyclic sugar moieties at the termini
US7354706B2 (en) * 2003-09-09 2008-04-08 The Regents Of The University Of Colorado, A Body Corporate Use of photopolymerization for amplification and detection of a molecular recognition event
US20090163375A1 (en) 2003-09-09 2009-06-25 Bowman Christopher N Use of Photopolymerization for Amplification and Detection of a Molecular Recognition Event
NZ576775A (en) 2003-09-18 2010-12-24 Isis Pharmaceuticals Inc Modulation of eIF4E expression
US20070281896A1 (en) * 2003-09-30 2007-12-06 Morris David W Novel compositions and methods in cancer
DK1678194T3 (da) 2003-10-10 2013-10-07 Alchemia Oncology Pty Ltd Modulering af syntese og degradering af hyaluronan i behandlingen af sygdom
US20050191653A1 (en) 2003-11-03 2005-09-01 Freier Susan M. Modulation of SGLT2 expression
US20050136417A1 (en) * 2003-12-19 2005-06-23 Affymetrix, Inc. Amplification of nucleic acids
US20050136414A1 (en) * 2003-12-23 2005-06-23 Kevin Gunderson Methods and compositions for making locus-specific arrays
JP2007520222A (ja) 2004-01-20 2007-07-26 アイシス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド グルココルチコイドレセプター発現の調節
US7468431B2 (en) 2004-01-22 2008-12-23 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of eIF4E-BP2 expression
US8778900B2 (en) * 2004-01-22 2014-07-15 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of eIF4E-BP1 expression
US8569474B2 (en) 2004-03-09 2013-10-29 Isis Pharmaceuticals, Inc. Double stranded constructs comprising one or more short strands hybridized to a longer strand
WO2005089268A2 (en) 2004-03-15 2005-09-29 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for optimizing cleavage of rna by rnase h
US20050244869A1 (en) 2004-04-05 2005-11-03 Brown-Driver Vickie L Modulation of transthyretin expression
WO2005097817A2 (en) 2004-04-05 2005-10-20 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Process and reagents for oligonucleotide synthesis and purification
EP3034510A1 (en) 2004-04-30 2016-06-22 Alnylam Pharmaceuticals Inc. Oligonucleotides comprising a c5-modified pyrimidine
EP2322665A1 (en) 2004-05-14 2011-05-18 Rosetta Genomics Ltd MicroRNAs and uses thereof
WO2005111211A2 (en) 2004-05-14 2005-11-24 Rosetta Genomics Ltd. Micronas and uses thereof
NZ550772A (en) 2004-05-21 2009-10-30 Uab Research Foundation Variable lymphocyte receptors, related polypeptides and nucleic acids, and uses thereof
EP1756562A1 (en) 2004-05-21 2007-02-28 Atonomics A/S Surface acoustic wave sensor comprising a hydrogel
NZ551627A (en) 2004-05-28 2010-02-26 Agensys Inc Antibodies and related molecules that bind to PSCA proteins
US8394947B2 (en) 2004-06-03 2013-03-12 Isis Pharmaceuticals, Inc. Positionally modified siRNA constructs
US20060024677A1 (en) 2004-07-20 2006-02-02 Morris David W Novel therapeutic targets in cancer
US7427675B2 (en) 2004-08-23 2008-09-23 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods for the characterization of oligonucleotides
US7884086B2 (en) 2004-09-08 2011-02-08 Isis Pharmaceuticals, Inc. Conjugates for use in hepatocyte free uptake assays
PL1809303T3 (pl) 2004-09-23 2019-11-29 Arc Medical Devices Inc Kompozycje farmaceutyczne i sposoby dotyczące hamowania zrostów włóknistych lub stanów zapalnych przy użyciu fukanów o niskiej zawartości siarczanów
US8338093B2 (en) * 2004-12-31 2012-12-25 Affymetrix, Inc. Primer array synthesis and validation
US7547775B2 (en) 2004-12-31 2009-06-16 Affymetrix, Inc. Parallel preparation of high fidelity probes in an array format
AU2006210553A1 (en) 2005-02-01 2006-08-10 Ab Advanced Genetic Analysis Corporation Reagents, methods and libraries for bead-based sequencing
US20060281680A1 (en) 2005-03-10 2006-12-14 Genentech, Inc. Methods and compositions for modulating vascular integrity
EP2444099A1 (en) 2005-03-31 2012-04-25 Agensys, Inc. Antibodies and related molecules that bind to 161P2F10B proteins
US20090220495A1 (en) 2005-04-07 2009-09-03 Abdallah Fanidi Cancer Related Genes (PRLR)
EP2062591A1 (en) 2005-04-07 2009-05-27 Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. CACNA1E in cancer diagnosis detection and treatment
JP5329949B2 (ja) 2005-05-31 2013-10-30 エコーレ ポリテクニーク フェデラーレ デ ローザンヌ 遺伝子に基づいた薬物の細胞質送達のためのトリブロックコポリマー
US8252756B2 (en) 2005-06-14 2012-08-28 Northwestern University Nucleic acid functionalized nanoparticles for therapeutic applications
EP2829615B1 (en) 2005-07-25 2018-05-09 Alere San Diego, Inc. Kit for multiplexing recombinase polymerase amplification
EP1934331A4 (en) 2005-10-14 2009-01-21 Musc Found For Res Dev PAX2 AS A TARGET FOR THE INDUCTION OF DEFB1-MEDIATED TUMORIMMUNITY AND CANCER THERAPY
US8080534B2 (en) 2005-10-14 2011-12-20 Phigenix, Inc Targeting PAX2 for the treatment of breast cancer
US7320965B2 (en) 2005-10-28 2008-01-22 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting expression of Huntingtin gene
AU2006311730B2 (en) 2005-11-09 2010-12-02 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting expression of Factor V Leiden mutant gene
EP1966377A2 (en) 2005-11-21 2008-09-10 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of eif4e-bp2 expression
CN101437933B (zh) 2005-12-28 2013-11-06 斯克里普斯研究所 作为药物靶标的天然反义和非编码的rna转录物
WO2007115168A2 (en) 2006-03-31 2007-10-11 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting expression of eg5 gene
BRPI0711182A2 (pt) 2006-05-03 2011-08-23 Baltic Technology Dev agentes anti-sentido combinando base fortemente ligada-oligonucleotìdeo modificado e nuclease artificial
WO2008035205A2 (en) 2006-05-04 2008-03-27 Asm Scientific, Inc. Recombinase polymerase amplification
JP2009537153A (ja) 2006-05-19 2009-10-29 アルニラム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド ＡｈａのＲＮＡｉ調節およびその治療上の使用
AU2007253677B2 (en) 2006-05-22 2011-02-10 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting expression of IKK-B gene
WO2008097328A2 (en) * 2006-06-23 2008-08-14 Northwestern University Asymmetric functionalized nanoparticles and methods of use
CA2672246A1 (en) * 2006-06-30 2008-03-13 Rosetta Genomics Ltd Detecting nucleic acids
US8198253B2 (en) 2006-07-19 2012-06-12 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compositions and their uses directed to HBXIP
US8999317B2 (en) 2006-11-01 2015-04-07 University Of Rochester Methods and compositions related to the structure and function of APOBEC3G
WO2009024834A2 (en) * 2006-12-05 2009-02-26 Rosetta Genomics Ltd Nucleic acids involved in viral infection
KR20090089462A (ko) 2006-12-11 2009-08-21 유니버시티 오브 유타 리써치 파운데이션 병적 혈관형성 및 혈관 투과성을 치료하기 위한 조성물 및 방법
WO2009045469A2 (en) 2007-10-02 2009-04-09 Amgen Inc. Increasing erythropoietin using nucleic acids hybridizable to micro-rna and precursors thereof
KR100827449B1 (ko) 2007-02-07 2008-05-07 삼성전자주식회사 광분해성 화합물과 상기 화합물이 커플링된 올리고머프로브 어레이용 기판, 올리고머 프로브 어레이 및 이의제조 방법
JP5512285B2 (ja) 2007-02-09 2014-06-04 ノースウェスタン ユニバーシティ 細胞内標的を検出するための粒子
US20080241140A1 (en) 2007-02-12 2008-10-02 Medical College Of Georgia Gene amplification of coactivator coaa and uses thereof
WO2008121604A2 (en) 2007-03-29 2008-10-09 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting expression of a gene from the ebola
CA2689923A1 (en) 2007-05-30 2008-12-11 Northwestern University Nucleic acid functionalized nanoparticles for therapeutic applications
CA2704729C (en) 2007-08-28 2020-06-23 Uab Research Foundation Synthetic apolipoprotein e mimicking polypeptides and methods of use
WO2009032702A2 (en) 2007-08-28 2009-03-12 Uab Research Foundation Synthetic apolipoprotein e mimicking polypeptides and methods of use
US9388457B2 (en) * 2007-09-14 2016-07-12 Affymetrix, Inc. Locus specific amplification using array probes
US8445217B2 (en) 2007-09-20 2013-05-21 Vanderbilt University Free solution measurement of molecular interactions by backscattering interferometry
US7951785B2 (en) 2007-09-21 2011-05-31 California Institute Of Technology NFIA in glial fate determination, glioma therapy and astrocytoma treatment
WO2009045536A2 (en) * 2007-10-05 2009-04-09 The University Of North Carolina At Chapel Hill Receptor targeted oligonucleotides
US20090137405A1 (en) * 2007-11-16 2009-05-28 Christopher Bowman Detection of nucleic acid biomarkers using polymerization-based amplification
EP2222851B1 (en) 2007-11-20 2017-06-28 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of cd40 expression
WO2009076400A2 (en) 2007-12-10 2009-06-18 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting expression of factor vii gene
WO2009111658A2 (en) 2008-03-05 2009-09-11 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting expression of eg5 and vegf genes
EP2105145A1 (en) * 2008-03-27 2009-09-30 ETH Zürich Method for muscle-specific delivery lipid-conjugated oligonucleotides
WO2009124295A2 (en) 2008-04-04 2009-10-08 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligomeric compounds comprising bicyclic nucleosides and having reduced toxicity
US8575123B2 (en) 2008-04-11 2013-11-05 Tekmira Pharmaceuticals Corporation Site-specific delivery of nucleic acids by combining targeting ligands with endosomolytic components
US8324366B2 (en) 2008-04-29 2012-12-04 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for delivering RNAI using lipoproteins
JP5420668B2 (ja) 2008-08-25 2014-02-19 エクスカリアード・ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド 結合組織成長因子を対象とするアンチセンスオリゴヌクレオチドおよびその使用
EP2690175B1 (en) 2008-09-02 2016-12-28 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for combined inhibition of mutant EGFR gene and IL-6 expression
AU2009298802A1 (en) 2008-09-23 2010-04-08 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Chemical modifications of monomers and oligonucleotides with cycloaddition
EP3584320A1 (en) 2008-09-25 2019-12-25 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Lipid formulated compositions and methods for inhibiting expression of serum amyloid a gene
HUE026604T2 (hu) 2008-10-20 2016-06-28 Alnylam Pharmaceuticals Inc Transztiretin-expresszió gátlására szolgáló készítmények és eljárások
EP2447274B1 (en) 2008-10-24 2017-10-04 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Oligomeric compounds and methods
MX359674B (es) 2008-11-10 2018-10-05 Alnylam Pharmaceuticals Inc Lipidos y composiciones novedosas para el suministro de terapeuticos.
EP2365803B1 (en) 2008-11-24 2017-11-01 Northwestern University Polyvalent rna-nanoparticle compositions
JP6091752B2 (ja) 2008-12-04 2017-03-08 クルナ・インコーポレーテッド Ｅｐｏに対する天然アンチセンス転写物の抑制によるエリスロポエチン（ｅｐｏ）関連疾患の治療
CN108042560A (zh) 2008-12-04 2018-05-18 库尔纳公司 通过抑制针对沉默调节蛋白1的天然反义转录物来治疗沉默调节蛋白1相关的疾病
US20110294870A1 (en) 2008-12-04 2011-12-01 Opko Curna, Llc Treatment of tumor suppressor gene related diseases by inhibition of natural antisense transcript to the gene
AU2009324534B2 (en) 2008-12-10 2015-07-30 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. GNAQ targeted dsRNA compositions and methods for inhibiting expression
US20100233270A1 (en) 2009-01-08 2010-09-16 Northwestern University Delivery of Oligonucleotide-Functionalized Nanoparticles
WO2010091308A2 (en) 2009-02-06 2010-08-12 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligomeric compounds and methods
DK2396038T3 (en) 2009-02-12 2016-02-01 Curna Inc TREATMENT OF BRAIN-DERIVATED NEUROTROPHIC FACTOR- (BDNF) RELATED DISEASES BY INHIBITION OF NATURAL ANTISENCE TRANSCRIPTION TO BDNF
US20110319476A1 (en) 2009-02-12 2011-12-29 Opko Curna, Llc Treatment of glial cell derived neurotrophic factor (gdnf) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to gdnf
US20120190565A1 (en) 2009-02-20 2012-07-26 Pangea Biosciences, Inc. Method Of Diagnosis Or Prognosis Of A Neoplasm Comprising Determining The Level Of Expression Of A Protein In Stromal Cells Adjacent To The Neoplasm
US9347092B2 (en) 2009-02-25 2016-05-24 Roche Molecular System, Inc. Solid support for high-throughput nucleic acid analysis
JP5457222B2 (ja) 2009-02-25 2014-04-02 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲー 小型化ハイスループット核酸分析
US20120041051A1 (en) 2009-02-26 2012-02-16 Kevin Fitzgerald Compositions And Methods For Inhibiting Expression Of MIG-12 Gene
EP2403863B1 (en) 2009-03-02 2013-08-28 Alnylam Pharmaceuticals Inc. Nucleic acid chemical modifications
JP6250263B2 (ja) 2009-03-04 2017-12-20 クルナ・インコーポレーテッド サーチュイン１（ｓｉｒｔ１）に対する天然アンチセンス転写物の抑制によるｓｉｒｔ１関連疾患の治療
CA2754043A1 (en) 2009-03-12 2010-09-16 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Lipid formulated compositions and methods for inhibiting expression of eg5 and vegf genes
EP2408919B1 (en) 2009-03-16 2017-10-18 CuRNA, Inc. Treatment of nuclear factor (erythroid-derived 2)-like 2 (nrf2) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to nrf2
CA2755404C (en) 2009-03-17 2020-03-24 Joseph Collard Treatment of delta-like 1 homolog (dlk1) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to dlk1
EP3248618A1 (en) 2009-04-22 2017-11-29 Massachusetts Institute Of Technology Innate immune suppression enables repeated delivery of long rna molecules
US8318690B2 (en) 2009-05-01 2012-11-27 Curna, Inc. Treatment of hemoglobin (HBF/HBG) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to HBF/HBG
EP2427553A4 (en) 2009-05-06 2012-11-07 Opko Curna Llc TREATMENT OF LIPID TRANSPORT AND METABOLISM-RELATED DISEASES BY INHIBITING THE NATURAL ANTISENSE TRANSCRIPT AGAINST A LIPID TRANSPORT AND METABOLIC TREATMENT
CN102803492B (zh) 2009-05-06 2016-06-29 库尔纳公司 通过抑制针对三重四脯氨酸(ttp)的天然反义转录物来治疗ttp相关疾病
DK2432881T3 (en) 2009-05-18 2018-02-26 Curna Inc TREATMENT OF REPROGRAMMING FACTOR-RELATED DISEASES BY INHIBITING NATURAL ANTISENSE TRANSCRIPTS TO A REPROGRAMMING FACTOR
WO2010135310A1 (en) * 2009-05-20 2010-11-25 Biosite Incorporated Dna glycosylase/lyase and ap endonuclease substrates
KR101703695B1 (ko) 2009-05-22 2017-02-08 큐알엔에이, 인크. 전사 인자 ｅ3(ｔｆｅ3)에 대한 천연 안티센스 전사체의 억제에 의해 ｔｆｅ3 및 인슐린 수용체 기질 2(ｉｒｓ2)의 치료
KR101704988B1 (ko) 2009-05-28 2017-02-08 큐알엔에이, 인크. 항바이러스 유전자에 대한 천연 안티센스 전사체의 억제에 의한 항바이러스 유전자 관련된 질환의 치료
WO2010141940A1 (en) 2009-06-05 2010-12-09 Alere San Diego, Inc. Recombinase polymerase amplification reagents and kits
MX367665B (es) 2009-06-10 2019-08-30 Alnylam Pharmaceuticals Inc Formulación mejorada de lípido.
ES2629339T3 (es) 2009-06-16 2017-08-08 Curna, Inc. Tratamiento de enfermedades relacionadas con la paraoxonasa 1 (pon1) por inhibición de transcrito antisentido natural a pon1
KR101801404B1 (ko) 2009-06-16 2017-12-20 큐알엔에이, 인크. 콜라겐 유전자에 대한 천연 안티센스 전사체의 억제에 의한 콜라겐 유전자 관련된 질환의 치료
PT3449926T (pt) 2009-06-17 2019-11-12 Cold Spring Harbor Laboratory Composições e métodos de modulação de excisões de smn2 em um sujeito
ES2618894T3 (es) 2009-06-24 2017-06-22 Curna, Inc. Tratamiento de enfermedades relacionadas con el receptor del factor de necrosis tumoral 2 (tnfr2) por inhibición del transcrito natural antisentido para tnfr2
CA2765815A1 (en) 2009-06-26 2010-12-29 Opko Curna, Llc Treatment of down syndrome gene related diseases by inhibition of natural antisense transcript to a down syndrome gene
KR101802536B1 (ko) 2009-08-05 2017-11-28 큐알엔에이, 인크. 인슐린 유전자 (ｉｎｓ)에 대한 자연 안티센스 전사체의 저해에 의한 인슐린 유전자 (ｉｎｓ) 관련된 질환의 치료
AP3574A (en) 2009-08-14 2016-02-08 Alnylam Pharmaceuticals Inc Lipid formulated compositions and methods for inhibiting expression of a gene from the ebola virus
CA2771172C (en) 2009-08-25 2021-11-30 Opko Curna, Llc Treatment of 'iq motif containing gtpase activating protein' (iqgap) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to iqgap
CA2772715C (en) 2009-09-02 2019-03-26 Genentech, Inc. Mutant smoothened and methods of using the same
KR20120105446A (ko) 2009-10-22 2012-09-25 제넨테크, 인크. 대식세포-자극 단백질의 헵신 활성화를 조정하기 위한 방법 및 조성물
CA2779099C (en) 2009-10-30 2021-08-10 Northwestern University Templated nanoconjugates
NZ599707A (en) 2009-11-30 2014-07-25 Genentech Inc Antibodies for treating and diagnosing tumors expressing slc34a2 (tat211 = seqid2 )
US9687550B2 (en) 2009-12-07 2017-06-27 Arbutus Biopharma Corporation Compositions for nucleic acid delivery
RU2639550C2 (ru) 2009-12-16 2017-12-21 Курна, Инк. Лечение заболеваний, связанных с сайт-1 мембраносвязанной пептидазой транскрипционных факторов (mbtps1), путем ингибирования природного антисмыслового транскрипта к mbtps1
ES2749426T3 (es) 2009-12-18 2020-03-20 Univ British Columbia Métodos y composiciones para administración de ácidos nucleicos
JP6031356B2 (ja) 2009-12-23 2016-11-24 カッパーアールエヌエー，インコーポレイテッド Ｕｃｐ２に対する天然アンチセンス転写産物の阻害による脱共役タンパク質２（ｕｃｐ２）関連疾患の治療
US8940708B2 (en) 2009-12-23 2015-01-27 Curna, Inc. Treatment of hepatocyte growth factor (HGF) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to HGF
KR101853508B1 (ko) 2009-12-29 2018-06-20 큐알엔에이, 인크. 종양 단백질 63 (ｐ63)에 대한 천연 안티센스 전사체의 억제에 의한 ｐ63에 관련된 질환의 치료
EP2519633B1 (en) 2009-12-29 2017-10-25 CuRNA, Inc. Treatment of nuclear respiratory factor 1 (nrf1) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to nrf1
KR101878501B1 (ko) 2010-01-04 2018-08-07 큐알엔에이, 인크. 인터페론 조절 인자 8 (ｉｒｆ8)에 대한 자연 안티센스 전사체의 저해에 의한 인터페론 조절 인자 8 (ｉｒｆ8) 관련된 질환의 치료
US8912157B2 (en) 2010-01-06 2014-12-16 Curna, Inc. Treatment of pancreatic developmental gene related diseases by inhibition of natural antisense transcript to a pancreatic developmental gene
DK2524039T3 (en) 2010-01-11 2018-03-12 Curna Inc TREATMENT OF GENDER HORMON-BINDING GLOBULIN (SHBG) RELATED DISEASES BY INHIBITION OF NATURAL ANTISENCE TRANSCRIPTS TO SHBG
ES2671877T3 (es) 2010-01-25 2018-06-11 Curna, Inc. Tratamiento de enfermedades relacionadas con la RNASA (H1) mediante inhibición del transcrito antisentido natural a RNASA H1
WO2011094580A2 (en) 2010-01-28 2011-08-04 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Chelated copper for use in the preparation of conjugated oligonucleotides
US9198972B2 (en) 2010-01-28 2015-12-01 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Monomers and oligonucleotides comprising cycloaddition adduct(s)
US20130028889A1 (en) 2010-02-04 2013-01-31 Ico Therapeutics Inc. Dosing regimens for treating and preventing ocular disorders using c-raf antisense
KR101838308B1 (ko) 2010-02-22 2018-03-13 큐알엔에이, 인크. 피롤린-5-카르복실레이트 환원효소 1(ｐｙｃｒ1)에 대한 천연 안티센스 전사체의 억제에 의한 ｐｙｃｒ1과 관련된 질환의 치료
WO2011105900A2 (en) 2010-02-23 2011-09-01 Academisch Ziekenhuis Bij De Universiteit Van Amsterdam Antagonists of complement component 8-alpha (c8-alpha) and uses thereof
WO2011105902A2 (en) 2010-02-23 2011-09-01 Academisch Ziekenhuis Bij De Universiteit Van Amsterdam Antagonists of complement component 8-beta (c8-beta) and uses thereof
WO2011105901A2 (en) 2010-02-23 2011-09-01 Academisch Ziekenhuis Bij De Universiteit Van Amsterdam Antagonists of complement component 9 (c9) and uses thereof
AR080243A1 (es) 2010-02-23 2012-03-21 Genentech Inc Composiciones y metodos para el diagnostico y tratamiento de tumores
WO2011112516A1 (en) 2010-03-08 2011-09-15 Ico Therapeutics Inc. Treating and preventing hepatitis c virus infection using c-raf kinase antisense oligonucleotides
ES2743600T3 (es) 2010-03-12 2020-02-20 Brigham & Womens Hospital Inc Métodos de tratamiento de los trastornos inflamatorios vasculares
JP5860029B2 (ja) 2010-03-29 2016-02-16 アルナイラム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッドＡｌｎｙｌａｍ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ， Ｉｎｃ． トランスチレチン（ＴＴＲ）関連眼アミロイドーシスのためのｓｉＲＮＡ療法
US9102938B2 (en) 2010-04-01 2015-08-11 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. 2′ and 5′ modified monomers and oligonucleotides
WO2011127180A1 (en) 2010-04-06 2011-10-13 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting expression of cd274/pd-l1 gene
JP5978203B2 (ja) 2010-04-09 2016-08-24 カッパーアールエヌエー，インコーポレイテッド Ｆｇｆ２１に対する天然アンチセンス転写物の阻害による線維芽細胞増殖因子（ｆｇｆ２１）線維芽細胞増殖因子ｆｇｆ２１）関連疾患の治療
WO2011133871A2 (en) 2010-04-22 2011-10-27 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. 5'-end derivatives
US10913767B2 (en) 2010-04-22 2021-02-09 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides comprising acyclic and abasic nucleosides and analogs
WO2011133868A2 (en) 2010-04-22 2011-10-27 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Conformationally restricted dinucleotide monomers and oligonucleotides
EP2625186B1 (en) 2010-04-28 2016-07-27 Ionis Pharmaceuticals, Inc. 5' modified nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
US8993738B2 (en) 2010-04-28 2015-03-31 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modified nucleosides, analogs thereof and oligomeric compounds prepared therefrom
EP2606057B1 (en) 2010-04-28 2016-06-15 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Modified 5' diphosphate nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
ES2625689T3 (es) 2010-04-29 2017-07-20 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Modulación de la expresión de transtiretina
US20130156845A1 (en) 2010-04-29 2013-06-20 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Lipid formulated single stranded rna
KR101915115B1 (ko) 2010-05-03 2018-11-05 큐알엔에이, 인크. 시르투인 (sirt)에 대한 자연 안티센스 전사체의 저해에 의한 시르투인 (sirt) 관련된 질환의 치료
EP2566893A1 (en) 2010-05-03 2013-03-13 F. Hoffmann-La Roche AG Compositions and methods for the diagnosis and treatment of tumor
TWI586356B (zh) 2010-05-14 2017-06-11 可娜公司 藉由抑制ｐａｒ４天然反股轉錄本治療ｐａｒ４相關疾病
RU2585229C2 (ru) 2010-05-26 2016-05-27 Курна, Инк. Лечение заболеваний, связанных с атональным гомологом 1 (атон1), путем ингибирования природного антисмыслового транскрипта гена атон1
JP6081910B2 (ja) 2010-06-02 2017-02-15 アルナイラム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッドＡｌｎｙｌａｍ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ， Ｉｎｃ． 肝線維症治療用組成物および肝線維症の治療法
US9638632B2 (en) 2010-06-11 2017-05-02 Vanderbilt University Multiplexed interferometric detection system and method
US20130236968A1 (en) 2010-06-21 2013-09-12 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Multifunctional copolymers for nucleic acid delivery
WO2012009402A2 (en) 2010-07-14 2012-01-19 Opko Curna Llc Treatment of discs large homolog (dlg) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to dlg
WO2012016188A2 (en) 2010-07-30 2012-02-02 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for delivery of active agents
US20130323269A1 (en) 2010-07-30 2013-12-05 Muthiah Manoharan Methods and compositions for delivery of active agents
SG10201508118WA (en) 2010-09-30 2015-11-27 Agency Science Tech & Res Methods and reagents for detection and treatment of esophageal metaplasia
EP2625197B1 (en) 2010-10-05 2016-06-29 Genentech, Inc. Mutant smoothened and methods of using the same
US8993533B2 (en) 2010-10-06 2015-03-31 Curna, Inc. Treatment of sialidase 4 (NEU4) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to NEU4
US20140031250A1 (en) 2010-10-07 2014-01-30 David Tsai Ting Biomarkers of Cancer
CA2815212A1 (en) 2010-10-22 2012-04-26 Curna, Inc. Treatment of alpha-l-iduronidase (idua) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to idua
US20130210893A1 (en) 2010-10-27 2013-08-15 Curna, Inc. Treatment of interferon-related developmental regulator 1 (ifrd1) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to ifrd1
CN103370054A (zh) 2010-11-09 2013-10-23 阿尔尼拉姆医药品有限公司 用于抑制Eg5和VEGF基因的表达的脂质配制的组合物和方法
WO2012065143A1 (en) 2010-11-12 2012-05-18 The General Hospital Corporation Polycomb-associated non-coding rnas
CN103459599B (zh) 2010-11-23 2017-06-16 库尔纳公司 通过抑制nanog的天然反义转录物而治疗nanog相关疾病
EP2648763A4 (en) 2010-12-10 2014-05-14 Alnylam Pharmaceuticals Inc COMPOSITIONS AND METHODS FOR EXPRESSION INHIBITION OF GENES KLF-1 AND BCL11A
WO2012078967A2 (en) 2010-12-10 2012-06-14 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for increasing erythropoietin (epo) production
US9999673B2 (en) 2011-01-11 2018-06-19 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. PEGylated lipids and their use for drug delivery
WO2012097261A2 (en) 2011-01-14 2012-07-19 The General Hospital Corporation Methods targeting mir-128 for regulating cholesterol/lipid metabolism
BR112013019803A2 (pt) 2011-02-02 2019-06-11 Excaliard Pharmaceuticals Inc método de tratar quelóides ou cicatrizes hipertróficas usando os compostos anti-sentido objetivando fator de desenvolvimento de tecido conjuntivo (ctgf)
EP2678026B1 (en) 2011-02-21 2016-05-18 The University of Zurich Ankyrin g for use in the treatment of neurodegenerative disorders
US9562853B2 (en) 2011-02-22 2017-02-07 Vanderbilt University Nonaqueous backscattering interferometric methods
JP6108628B2 (ja) 2011-03-29 2017-04-05 アルナイラム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッドＡｌｎｙｌａｍ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ， Ｉｎｃ． Ｔｍｐｒｓｓ６遺伝子の発現を阻害する組成物および方法
CA2838588C (en) 2011-06-09 2021-09-14 Curna, Inc. Treatment of frataxin (fxn) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to fxn
KR102028028B1 (ko) 2011-06-21 2019-10-07 알닐람 파마슈티칼스 인코포레이티드 아포리포단백질 c-iii(apoc3) 유전자의 발현 억제를 위한 조성물 및 방법
US9068184B2 (en) 2011-06-21 2015-06-30 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibition of expression of protein C (PROC) genes
SG10201800715PA (en) 2011-06-21 2018-02-27 Alnylam Pharmaceuticals Inc Angiopoietin-like 3 (angptl3) irna compostions and methods of use thereof
EP2723390B1 (en) 2011-06-23 2017-12-27 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Serpina1 sirnas: compositions of matter and methods of treatment
EP2739735A2 (en) 2011-08-01 2014-06-11 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Method for improving the success rate of hematopoietic stem cell transplants
AU2012308302A1 (en) 2011-09-14 2014-03-20 Northwestern University Nanoconjugates able to cross the blood-brain barrier
DK2756080T3 (da) 2011-09-14 2019-05-20 Translate Bio Ma Inc Multimeriske oligonukleotidforbindelser
US9701623B2 (en) 2011-09-27 2017-07-11 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Di-aliphatic substituted pegylated lipids
CA2851280C (en) 2011-10-11 2021-05-18 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Micrornas in neurodegenerative disorders
BR112014012288A2 (pt) 2011-11-22 2017-05-23 Intermune Inc métodos para diagnosticar e tratar fibrose pulmonar idiopática
EP2790736B1 (en) 2011-12-12 2018-01-31 Oncoimmunin, Inc. In vivo delivery of oligonucleotides
SG10201604896TA (en) 2011-12-16 2016-08-30 Moderna Therapeutics Inc Modified nucleoside, nucleotide, and nucleic acid compositions
GB2523211B (en) 2012-01-27 2020-03-18 Univ Jefferson MCT protein inhibitor-related prognostic and therapeutic methods
KR20140136488A (ko) 2012-03-15 2014-11-28 큐알엔에이, 인크. 뇌 유래 신경영양 인자（ｂｄｎｆ）에 대한 천연 안티센스 전사체의 저해에 의한 뇌 유래 신경영양 인자（ｂｄｎｆ）관련 질환의 치료
CA2868996A1 (en) 2012-04-02 2013-10-10 Moderna Therapeutics, Inc. Modified polynucleotides for the production of proteins
WO2013151666A2 (en) 2012-04-02 2013-10-10 modeRNA Therapeutics Modified polynucleotides for the production of biologics and proteins associated with human disease
US9133461B2 (en) 2012-04-10 2015-09-15 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting expression of the ALAS1 gene
CA2871073A1 (en) 2012-04-20 2013-10-24 Aptamir Therapeutics, Inc. Mirna modulators of thermogenesis
US9127274B2 (en) 2012-04-26 2015-09-08 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Serpinc1 iRNA compositions and methods of use thereof
WO2013163628A2 (en) 2012-04-27 2013-10-31 Duke University Genetic correction of mutated genes
US9273949B2 (en) 2012-05-11 2016-03-01 Vanderbilt University Backscattering interferometric methods
KR20150030205A (ko) 2012-05-16 2015-03-19 라나 테라퓨틱스, 인크. Smn 유전자 패밀리 발현을 조절하기 위한 조성물 및 방법
EP2850189B8 (en) 2012-05-16 2019-01-23 Translate Bio MA, Inc. Compositions and methods for modulating gene expression
WO2014022852A1 (en) 2012-08-03 2014-02-06 Aptamir Therapeutics, Inc. Cell-specific delivery of mirna modulators for the treatment of obesity and related disorders
WO2014074785A1 (en) 2012-11-08 2014-05-15 Ludwig Institute For Cancer Research Ltd. Methods of predicting outcome and treating breast cancer
PL2920304T3 (pl) 2012-11-15 2019-07-31 Roche Innovation Center Copenhagen A/S Koniugaty oligonukleotydowe
HRP20220607T1 (hr) 2012-11-26 2022-06-24 Modernatx, Inc. Terminalno modificirana rna
EP2946014A2 (en) 2013-01-17 2015-11-25 Moderna Therapeutics, Inc. Signal-sensor polynucleotides for the alteration of cellular phenotypes
WO2014118272A1 (en) 2013-01-30 2014-08-07 Santaris Pharma A/S Antimir-122 oligonucleotide carbohydrate conjugates
EP2951305B1 (en) 2013-01-30 2018-08-15 F.Hoffmann-La Roche Ag Lna oligonucleotide carbohydrate conjugates
US20150366890A1 (en) 2013-02-25 2015-12-24 Trustees Of Boston University Compositions and methods for treating fungal infections
EP2968391A1 (en) 2013-03-13 2016-01-20 Moderna Therapeutics, Inc. Long-lived polynucleotide molecules
SG10201912286TA (en) 2013-03-14 2020-02-27 Alnylam Pharmaceuticals Inc COMPLEMENT COMPONENT C5 iRNA COMPOSITIONS AND METHODS OF USE THEREOF
US10258698B2 (en) 2013-03-14 2019-04-16 Modernatx, Inc. Formulation and delivery of modified nucleoside, nucleotide, and nucleic acid compositions
US8980864B2 (en) 2013-03-15 2015-03-17 Moderna Therapeutics, Inc. Compositions and methods of altering cholesterol levels
WO2014160871A2 (en) 2013-03-27 2014-10-02 The General Hospital Corporation Methods and agents for treating alzheimer's disease
US10022372B2 (en) 2013-04-19 2018-07-17 Thomas Jefferson University Caveolin-1 related methods for treating glioblastoma with temozolomide
US10590412B2 (en) 2013-04-19 2020-03-17 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for modulation nucleic acids through nonsense mediated decay
HUE038146T2 (hu) 2013-05-22 2018-09-28 Alnylam Pharmaceuticals Inc Serpina1 IRNS készítmények és eljárások alkalmazásukra
JP6869720B2 (ja) 2013-06-13 2021-05-12 アンチセンス セラピューティクス リミテッド 併用療法
AU2014300981B2 (en) 2013-06-27 2017-08-10 Roche Innovation Center Copenhagen A/S Antisense oligomers and conjugates targeting PCSK9
LT3019619T (lt) 2013-07-11 2021-12-10 Modernatx, Inc. Sintetinius polinukleotidus apimančios kompozicijos, koduojančios susijusius su crispr baltymus ir sintetines sgrnas, ir jų naudojimo būdai
ES2773547T3 (es) 2013-08-08 2020-07-13 Scripps Research Inst Un procedimiento de marcaje enzimático específico de sitio de ácidos nucleicos in vitro mediante la incorporación de nucleótidos no naturales
EP3041934A1 (en) 2013-09-03 2016-07-13 Moderna Therapeutics, Inc. Chimeric polynucleotides
EP3041938A1 (en) 2013-09-03 2016-07-13 Moderna Therapeutics, Inc. Circular polynucleotides
TW202003849A (zh) 2013-10-02 2020-01-16 美商艾爾妮蘭製藥公司 抑制lect2基因表現之組合物及方法
WO2015051214A1 (en) 2013-10-03 2015-04-09 Moderna Therapeutics, Inc. Polynucleotides encoding low density lipoprotein receptor
US10119143B2 (en) 2013-10-04 2018-11-06 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting expression of the ALAS1 gene
KR102252561B1 (ko) 2013-11-22 2021-05-20 미나 테라퓨틱스 리미티드 Ｃ/ｅｂｐ 알파 짧은 활성화 ｒｎａ 조성물 및 사용 방법
CA2844640A1 (en) 2013-12-06 2015-06-06 The University Of British Columbia Method for treatment of castration-resistant prostate cancer
CA3107872A1 (en) 2013-12-12 2015-06-18 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Complement component irna compositions and methods of use thereof
JP6736467B2 (ja) 2014-02-04 2020-08-05 ジェネンテック， インコーポレイテッド 平滑化変異体及びその使用方法
EA201691587A1 (ru) 2014-02-11 2017-01-30 Элнилэм Фармасьютикалз, Инк. КОМПОЗИЦИИ НА ОСНОВЕ iRNA ДЛЯ КЕТОГЕКСОКИНАЗЫ (KHK) И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ
TWI638047B (zh) 2014-04-09 2018-10-11 史基普研究協會 藉由核酸三磷酸酯轉運子將非天然或經修飾的核苷三磷酸酯輸入至細胞中
WO2015161170A2 (en) 2014-04-17 2015-10-22 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for modulation of smn2 splicing in a subject
WO2015171918A2 (en) 2014-05-07 2015-11-12 Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College Compositions and uses for treatment thereof
WO2015175510A1 (en) 2014-05-12 2015-11-19 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for treating a serpinc1-associated disorder
GB201408623D0 (en) 2014-05-15 2014-07-02 Santaris Pharma As Oligomers and oligomer conjugates
CA3215908A1 (en) 2014-05-22 2015-11-26 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Angiotensinogen (agt) irna compositions and methods of use thereof
JP6581604B2 (ja) 2014-06-04 2019-09-25 イグジキュア, インコーポレーテッドExicure, Inc. 予防的または治療的適用のためのリポソーム球状核酸による免疫調節物質の多価送達
AU2015272128B2 (en) 2014-06-10 2021-10-28 Erasmus University Medical Center Rotterdam Antisense oligonucleotides useful in treatment of Pompe disease
WO2015200697A1 (en) 2014-06-25 2015-12-30 The General Hospital Corporation Targeting human satellite ii (hsatii)
WO2016011226A1 (en) 2014-07-16 2016-01-21 Moderna Therapeutics, Inc. Chimeric polynucleotides
WO2016014846A1 (en) 2014-07-23 2016-01-28 Moderna Therapeutics, Inc. Modified polynucleotides for the production of intrabodies
CA2954475C (en) 2014-07-31 2023-05-16 Uab Research Foundation Apoe mimetic peptides and higher potency to clear plasma cholesterol
CA2959386C (en) 2014-08-29 2024-06-04 Lee Adam Wheeler Methods and compositions for the treatment of cancer
WO2016033424A1 (en) 2014-08-29 2016-03-03 Genzyme Corporation Methods for the prevention and treatment of major adverse cardiovascular events using compounds that modulate apolipoprotein b
EP3191591A1 (en) 2014-09-12 2017-07-19 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Polynucleotide agents targeting complement component c5 and methods of use thereof
EP3663403A1 (en) 2014-09-26 2020-06-10 University of Massachusetts Rna-modulating agents
WO2016061487A1 (en) 2014-10-17 2016-04-21 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Polynucleotide agents targeting aminolevulinic acid synthase-1 (alas1) and uses thereof
WO2016069694A2 (en) 2014-10-30 2016-05-06 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Polynucleotide agents targeting serpinc1 (at3) and methods of use thereof
JOP20200092A1 (ar) 2014-11-10 2017-06-16 Alnylam Pharmaceuticals Inc تركيبات iRNA لفيروس الكبد B (HBV) وطرق لاستخدامها
JP2017535552A (ja) 2014-11-17 2017-11-30 アルナイラム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッドＡｌｎｙｌａｍ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ， Ｉｎｃ． アポリポタンパク質Ｃ３（ＡＰＯＣ３）ｉＲＮＡ組成物およびその使用方法
WO2016081911A2 (en) 2014-11-21 2016-05-26 Northwestern University The sequence-specific cellular uptake of spherical nucleic acid nanoparticle conjugates
AU2015360794B2 (en) 2014-12-08 2021-07-08 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Lipocationic polymers and uses thereof
WO2016100716A1 (en) 2014-12-18 2016-06-23 Vasant Jadhav Reversirtm compounds
EP3247988A4 (en) 2015-01-23 2018-12-19 Vanderbilt University A robust interferometer and methods of using same
WO2016130600A2 (en) 2015-02-09 2016-08-18 Duke University Compositions and methods for epigenome editing
WO2016130806A2 (en) 2015-02-13 2016-08-18 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Patatin-like phospholipase domain containing 3 (pnpla3) irna compositions and methods of use thereof
US12129471B2 (en) 2015-02-23 2024-10-29 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Materials and methods for treatment of human genetic diseases including hemoglobinopathies
US10961532B2 (en) 2015-04-07 2021-03-30 The General Hospital Corporation Methods for reactivating genes on the inactive X chromosome
MX2017012610A (es) 2015-04-08 2018-03-16 Alnylam Pharmaceuticals Inc Composiciones y metodos para inhibir la expresion del gen lect2.
EP3307316A1 (en) 2015-06-12 2018-04-18 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Complement component c5 irna compositions and methods of use thereof
WO2016205323A1 (en) 2015-06-18 2016-12-22 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Polynucleotde agents targeting hydroxyacid oxidase (glycolate oxidase, hao1) and methods of use thereof
WO2016209862A1 (en) 2015-06-23 2016-12-29 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Glucokinase (gck) irna compositions and methods of use thereof
AU2016282986A1 (en) 2015-06-26 2018-02-01 Beth Israel Deaconess Medical Center, Inc. Cancer therapy targeting tetraspanin 33 (tspan33) in myeloid derived suppressor cells
EP3314027A4 (en) 2015-06-29 2019-07-03 Caris Science, Inc. THERAPEUTIC OLIGONUCLEOTIDES
WO2017011286A1 (en) 2015-07-10 2017-01-19 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Insulin-like growth factor binding protein, acid labile subunit (igfals) and insulin-like growth factor 1 (igf-1) irna compositions and methods of use thereof
CA2989970A1 (en) 2015-07-17 2017-01-26 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Multi-targeted single entity conjugates
WO2017019918A1 (en) 2015-07-28 2017-02-02 Caris Science, Inc. Targeted oligonucleotides
EP3344769B1 (en) 2015-09-02 2024-04-17 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Programmed cell death 1 ligand 1 (pd-l1) irna compositions and methods of use thereof
EP3349802B1 (en) 2015-09-14 2021-08-04 The Board of Regents of the University of Texas System Lipocationic dendrimers and uses thereof
US20190048340A1 (en) 2015-09-24 2019-02-14 Crispr Therapeutics Ag Novel family of rna-programmable endonucleases and their uses in genome editing and other applications
US11970710B2 (en) 2015-10-13 2024-04-30 Duke University Genome engineering with Type I CRISPR systems in eukaryotic cells
EP4279084A1 (en) 2015-10-28 2023-11-22 Vertex Pharmaceuticals Inc. Materials and methods for treatment of duchenne muscular dystrophy
WO2017075670A1 (en) 2015-11-05 2017-05-11 Children's Hospital Los Angeles "mobilizing leukemia cells"
MX2018005332A (es) 2015-11-06 2018-11-09 Crispr Therapeutics Ag Materiales y metodos para tratamiento de la enfermedad de almacenamiento de glucogeno tipo 1a.
CA3005878A1 (en) 2015-11-19 2017-05-26 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Lymphocyte antigen cd5-like (cd5l)-interleukin 12b (p40) heterodimers in immunity
JP6932698B2 (ja) 2015-12-01 2021-09-08 クリスパー・セラピューティクス・アクチェンゲゼルシャフトＣＲＩＳＰＲ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ ＡＧ アルファ１アンチトリプシン欠乏症の治療のための材料および方法
AU2015416656B2 (en) 2015-12-07 2023-02-23 Erasmus University Medical Center Rotterdam Enzymatic replacement therapy and antisense therapy for Pompe disease
WO2017100236A1 (en) 2015-12-07 2017-06-15 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for treating a serpinc1-associated disorder
US11761007B2 (en) 2015-12-18 2023-09-19 The Scripps Research Institute Production of unnatural nucleotides using a CRISPR/Cas9 system
MX2018007840A (es) 2015-12-23 2019-05-02 Crispr Therapeutics Ag Materiales y metodos para el tratamiento de la esclerosis lateral amiotrofica y/o la degeneracion lobar frontotemporal.
US10627396B2 (en) 2016-01-29 2020-04-21 Vanderbilt University Free-solution response function interferometry
US20190038771A1 (en) 2016-02-02 2019-02-07 Crispr Therapeutics Ag Materials and methods for treatment of severe combined immunodeficiency (scid) or omenn syndrome
EP3411396A1 (en) 2016-02-04 2018-12-12 Curis, Inc. Mutant smoothened and methods of using the same
EP3416689B1 (en) 2016-02-18 2023-01-18 CRISPR Therapeutics AG Materials and methods for treatment of severe combined immunodeficiency (scid) or omenn syndrome
US11234996B2 (en) 2016-02-25 2022-02-01 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Treatment methods for fibrosis targeting SMOC2
KR20230136689A (ko) 2016-03-14 2023-09-26 에프. 호프만-라 로슈 아게 Pd-l1 발현의 감소를 위한 올리고뉴클레오티드
WO2017158422A1 (en) 2016-03-16 2017-09-21 Crispr Therapeutics Ag Materials and methods for treatment of hereditary haemochromatosis
JP2019516393A (ja) 2016-03-18 2019-06-20 カリス サイエンス インコーポレイテッド オリゴヌクレオチドプローブおよびその使用
IL262416B2 (en) 2016-04-18 2024-02-01 Crispr Therapeutics Ag Materials and methods for the treatment of hemoglobin diseases
WO2017191503A1 (en) 2016-05-05 2017-11-09 Crispr Therapeutics Ag Materials and methods for treatment of hemoglobinopathies
BR112018073699A2 (pt) 2016-05-16 2019-05-07 The Board Of Regents Of The University Of Texas System amino lipídios de sulfonamida catiônica e amino lipídios zwiteriônico anfifílicos
CA3025486A1 (en) 2016-05-25 2017-11-30 Caris Science, Inc. Oligonucleotide probes and uses thereof
US20190256845A1 (en) 2016-06-10 2019-08-22 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. COMPLEMENT COMPONENT C5 iRNA COMPOSITIONS AND METHODS OF USE THEREOF FOR TREATING PAROXYSMAL NOCTURNAL HEMOGLOBINURIA (PNH)
EP4163293A1 (en) 2016-06-24 2023-04-12 The Scripps Research Institute Novel nucleoside triphosphate transporter and uses thereof
WO2018002762A1 (en) 2016-06-29 2018-01-04 Crispr Therapeutics Ag Materials and methods for treatment of amyotrophic lateral sclerosis (als) and other related disorders
WO2018002783A1 (en) 2016-06-29 2018-01-04 Crispr Therapeutics Ag Materials and methods for treatment of friedreich ataxia and other related disorders
EP3478829A1 (en) 2016-06-29 2019-05-08 Crispr Therapeutics AG Materials and methods for treatment of myotonic dystrophy type 1 (dm1) and other related disorders
JP7548696B2 (ja) 2016-07-06 2024-09-10 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド 疼痛関連障害を処置するための物質及び方法
EP3481856A1 (en) 2016-07-06 2019-05-15 Crispr Therapeutics AG Materials and methods for treatment of pain related disorders
WO2018007871A1 (en) 2016-07-08 2018-01-11 Crispr Therapeutics Ag Materials and methods for treatment of transthyretin amyloidosis
WO2018013525A1 (en) 2016-07-11 2018-01-18 Translate Bio Ma, Inc. Nucleic acid conjugates and uses thereof
WO2018020323A2 (en) 2016-07-25 2018-02-01 Crispr Therapeutics Ag Materials and methods for treatment of fatty acid disorders
NL2017295B1 (en) 2016-08-05 2018-02-14 Univ Erasmus Med Ct Rotterdam Antisense oligomeric compound for Pompe disease
NL2017294B1 (en) 2016-08-05 2018-02-14 Univ Erasmus Med Ct Rotterdam Natural cryptic exon removal by pairs of antisense oligonucleotides.
EP3532638A4 (en) 2016-10-31 2020-07-29 University of Massachusetts TARGETING MICROARN-101-3 P IN CARCINOTHERAPY
TW202313978A (zh) 2016-11-23 2023-04-01 美商阿尼拉製藥公司 絲胺酸蛋白酶抑制因子Ａ１ ｉＲＮＡ組成物及其使用方法
EP3555296A4 (en) 2016-12-13 2020-07-29 Seattle Children's Hospital (DBA Seattle Children's Research Institute) METHODS OF EXOGENOUS DRUG ACTIVATION OF CHEMICAL-INDUCED SIGNALING COMPLEXES EXPRESSED IN MODIFIED CELLS IN VITRO AND IN VIVO
WO2018112320A1 (en) 2016-12-16 2018-06-21 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating or preventing ttr-associated diseases using transthyretin (ttr) irna compositions
JP7458785B2 (ja) 2017-01-23 2024-04-01 リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド ヒドロキシステロイド１７－βデヒドロゲナーゼ１３（ＨＳＤ１７Ｂ１３）バリアント及びその使用
US11407997B2 (en) 2017-02-22 2022-08-09 Crispr Therapeutics Ag Materials and methods for treatment of primary hyperoxaluria type 1 (PH1) and other alanine-glyoxylate aminotransferase (AGXT) gene related conditions or disorders
WO2018154418A1 (en) 2017-02-22 2018-08-30 Crispr Therapeutics Ag Materials and methods for treatment of early onset parkinson's disease (park1) and other synuclein, alpha (snca) gene related conditions or disorders
EP3585900B1 (en) 2017-02-22 2022-12-21 CRISPR Therapeutics AG Materials and methods for treatment of spinocerebellar ataxia type 2 (sca2) and other spinocerebellar ataxia type 2 protein (atxn2) gene related conditions or disorders
EP3585898A1 (en) 2017-02-22 2020-01-01 CRISPR Therapeutics AG Materials and methods for treatment of spinocerebellar ataxia type 1 (sca1) and other spinocerebellar ataxia type 1 protein (atxn1) gene related conditions or disorders
EP3585895A1 (en) 2017-02-22 2020-01-01 CRISPR Therapeutics AG Compositions and methods for gene editing
CA3059446A1 (en) 2017-04-18 2018-10-25 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Methods for the treatment of subjects having a hepatitis b virus (hbv) infection
WO2018195486A1 (en) 2017-04-21 2018-10-25 The Broad Institute, Inc. Targeted delivery to beta cells
WO2018209270A1 (en) 2017-05-11 2018-11-15 Northwestern University Adoptive cell therapy using spherical nucleic acids (snas)
WO2019097305A2 (en) 2017-05-12 2019-05-23 Crispr Therapeutics Ag Materials and methods for engineering cells and uses thereof in immuno-oncology
CA3069321A1 (en) 2017-07-11 2019-01-17 Synthorx, Inc. Incorporation of unnatural nucleotides and methods thereof
WO2019014530A1 (en) 2017-07-13 2019-01-17 Alnylam Pharmaceuticals Inc. LACTATE DEHYDROGENASE A (LDHA) RNAI COMPOSITIONS AND METHODS OF USE
TW202248207A (zh) 2017-08-03 2022-12-16 美商欣爍克斯公司 用於增生及感染性疾病治療之細胞激素結合物
US11667952B2 (en) 2017-08-24 2023-06-06 Takara Bio Usa, Inc. Methods of producing nucleic acids using oligonucleotides modified by a stimulus
EP4219715A3 (en) 2017-09-08 2023-09-06 MiNA Therapeutics Limited Stabilized cebpa sarna compositions and methods of use
EP4183882A1 (en) 2017-09-08 2023-05-24 MiNA Therapeutics Limited Stabilized hnf4a sarna compositions and methods of use
WO2019055460A1 (en) 2017-09-13 2019-03-21 The Children's Medical Center Corporation COMPOSITIONS AND METHODS FOR THE TREATMENT OF TRANSPOSON-ASSOCIATED DISEASES
US20190247517A1 (en) 2017-10-17 2019-08-15 Casebia Therapeutics Limited Liability Partnership Compositions and methods for gene editing for hemophilia a
MA50849A (fr) 2017-10-26 2020-09-02 Vertex Pharma Substances et procédés pour le traitement d'hémoglobinopathies
CA3078971A1 (en) 2017-11-01 2019-05-09 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Complement component c3 irna compositions and methods of use thereof
EP3707155A2 (en) 2017-11-09 2020-09-16 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Crispr/cas systems for treatment of dmd
EP3714054A1 (en) 2017-11-20 2020-09-30 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Serum amyloid p component (apcs) irna compositions and methods of use thereof
CN111727251B (zh) 2017-11-21 2024-09-20 克里斯珀医疗股份公司 用于治疗常染色体显性色素性视网膜炎的材料和方法
US20200384033A1 (en) 2017-12-05 2020-12-10 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Crispr-cas9 modified cd34+ human hematopoietic stem and progenitor cells and uses thereof
CN111801417B (zh) 2017-12-14 2024-10-29 克里斯珀医疗股份公司 新的rna-可编程的内切核酸酶系统及其在基因组编辑和其他应用中的用途
EP3728593A1 (en) 2017-12-18 2020-10-28 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. High mobility group box-1 (hmgb1) irna compositions and methods of use thereof
JP7402163B2 (ja) 2017-12-21 2023-12-20 クリスパー セラピューティクス アーゲー ２ａ型アッシャー症候群の処置のための材料および方法
EP3728595A1 (en) 2017-12-21 2020-10-28 CRISPR Therapeutics AG Materials and methods for treatment of usher syndrome type 2a and/or non-syndromic autosomal recessive retinitis pigmentosa (arrp)
WO2019140330A1 (en) 2018-01-12 2019-07-18 Casebia Therapeutics Limited Liability Partnership Compositions and methods for gene editing by targeting transferrin
WO2019147743A1 (en) 2018-01-26 2019-08-01 Massachusetts Institute Of Technology Structure-guided chemical modification of guide rna and its applications
WO2019150203A1 (en) 2018-02-05 2019-08-08 Crispr Therapeutics Ag Materials and methods for treatment of hemoglobinopathies
US11566236B2 (en) 2018-02-05 2023-01-31 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Materials and methods for treatment of hemoglobinopathies
EP3752616A1 (en) 2018-02-16 2020-12-23 CRISPR Therapeutics AG Compositions and methods for gene editing by targeting fibrinogen-alpha
EP3758729B1 (en) 2018-02-26 2024-11-06 Synthorx, Inc. Il-15 conjugates and uses thereof
JP7550648B2 (ja) 2018-03-19 2024-09-13 クリスパー セラピューティクス アーゲー 新規ｒｎａプログラム可能エンドヌクレアーゼ系およびその使用
US12049631B2 (en) 2018-03-30 2024-07-30 Rheinische Friedrich-Wilhelms-Universitat Bonn Aptamers for targeted activation of T cell-mediated immunity
WO2019195738A1 (en) 2018-04-06 2019-10-10 Children's Medical Center Corporation Compositions and methods for somatic cell reprogramming and modulating imprinting
EP4242307A3 (en) 2018-04-12 2023-12-27 MiNA Therapeutics Limited Sirt1-sarna compositions and methods of use
WO2019204668A1 (en) 2018-04-18 2019-10-24 Casebia Therapeutics Limited Liability Partnership Compositions and methods for knockdown of apo(a) by gene editing for treatment of cardiovascular disease
EP3784259A4 (en) 2018-04-27 2021-12-29 Seattle Children's Hospital (DBA Seattle Children's Research Institute) Rapamycin resistant cells
JP7353301B2 (ja) 2018-05-07 2023-09-29 アルニラム ファーマスーティカルズ インコーポレイテッド 肝臓外送達
LT3794122T (lt) 2018-05-14 2023-11-27 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Angiotenzinogeno (agt) irnr kompozicijos ir jų panaudojimo būdai
SG11202100715WA (en) 2018-08-13 2021-02-25 Alnylam Pharmaceuticals Inc HEPATITIS B VIRUS (HBV) dsRNA AGENT COMPOSITIONS AND METHODS OF USE THEREOF
AR115960A1 (es) 2018-08-16 2021-03-17 Alnylam Pharmaceuticals Inc Composiciones y métodos para inhibir la expresión del gen lect2
CA3110661A1 (en) 2018-08-29 2020-03-05 University Of Massachusetts Inhibition of protein kinases to treat friedreich ataxia
EP3853364A1 (en) 2018-09-18 2021-07-28 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Ketohexokinase (khk) irna compositions and methods of use thereof
CA3114396A1 (en) 2018-09-28 2020-04-02 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Transthyretin (ttr) irna compositions and methods of use thereof for treating or preventing ttr-associated ocular diseases
CA3116885A1 (en) 2018-10-17 2020-04-23 Crispr Therapeutics Ag Compositions and methods for delivering transgenes
US10913951B2 (en) 2018-10-31 2021-02-09 University of Pittsburgh—of the Commonwealth System of Higher Education Silencing of HNF4A-P2 isoforms with siRNA to improve hepatocyte function in liver failure
ES2961039T3 (es) 2018-12-20 2024-03-07 Vir Biotechnology Inc Terapia combinada contra el VHB
CA3123617A1 (en) 2018-12-20 2020-06-25 Praxis Precision Medicines, Inc. Compositions and methods for the treatment of kcnt1 related disorders
CA3126933A1 (en) 2019-01-16 2020-07-23 Genzyme Corporation Serpinc1 irna compositions and methods of use thereof
CN113660946A (zh) 2019-02-06 2021-11-16 新索思股份有限公司 Il-2缀合物及其使用方法
WO2020168362A1 (en) 2019-02-15 2020-08-20 Crispr Therapeutics Ag Gene editing for hemophilia a with improved factor viii expression
WO2020171889A1 (en) 2019-02-19 2020-08-27 University Of Rochester Blocking lipid accumulation or inflammation in thyroid eye disease
SG11202109741VA (en) 2019-03-12 2021-10-28 Crispr Therapeutics Ag Novel high fidelity rna-programmable endonuclease systems and uses thereof
EP3953473A1 (en) 2019-04-12 2022-02-16 MiNA Therapeutics Limited Sirt1-sarna compositions and methods of use
CN114126628A (zh) 2019-05-13 2022-03-01 维尔生物科技有限公司 用于治疗乙型肝炎病毒(hbv)感染的组合物及方法
AU2020279101A1 (en) 2019-05-17 2021-11-18 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Oral delivery of oligonucleotides
KR20220034109A (ko) 2019-06-14 2022-03-17 더 스크립스 리서치 인스티튜트 반합성 유기체의 복제, 전사 및 번역을 위한 시약 및 방법
EP4007811A2 (en) 2019-08-01 2022-06-08 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Carboxypeptidase b2 (cpb2) irna compositions and methods of use thereof
EP4007812A1 (en) 2019-08-01 2022-06-08 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Serpin family f member 2 (serpinf2) irna compositions and methods of use thereof
WO2021030522A1 (en) 2019-08-13 2021-02-18 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. SMALL RIBOSOMAL PROTEIN SUBUNIT 25 (RPS25) iRNA AGENT COMPOSITIONS AND METHODS OF USE THEREOF
CA3150163A1 (en) 2019-08-15 2021-02-18 Synthorx, Inc. Immuno oncology combination therapies with il-2 conjugates
WO2021032777A1 (en) 2019-08-19 2021-02-25 Mina Therapeutics Limited Oligonucleotide conjugate compositions and methods of use
MX2022002053A (es) 2019-08-23 2022-03-17 Synthorx Inc Conjugados de il-15 y sus usos.
BR112022003860A2 (pt) 2019-09-03 2022-08-16 Alnylam Pharmaceuticals Inc Composições e métodos para inibir a expressão do gene lect2
CN114746122A (zh) 2019-09-10 2022-07-12 新索思股份有限公司 Il-2缀合物和治疗自身免疫性疾病的使用方法
WO2021067747A1 (en) 2019-10-04 2021-04-08 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for silencing ugt1a1 gene expression
US20240141358A1 (en) 2019-10-18 2024-05-02 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Solute carrier family member irna compositions and methods of use thereof
JP2022553348A (ja) 2019-10-22 2022-12-22 アルナイラム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド 補体成分Ｃ３ ｉＲＮＡ組成物およびその使用方法
WO2021087325A1 (en) 2019-11-01 2021-05-06 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for silencing dnajb1-prkaca fusion gene expression
CN114728018B (zh) 2019-11-01 2024-07-19 阿尔尼拉姆医药品有限公司 亨廷顿(HTT)iRNA药剂组合物及其使用方法
WO2021091986A1 (en) 2019-11-04 2021-05-14 Synthorx, Inc. Interleukin 10 conjugates and uses thereof
CN114945669A (zh) 2019-11-06 2022-08-26 阿尔尼拉姆医药品有限公司 肝外递送
EP4055165A1 (en) 2019-11-06 2022-09-14 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Transthyretin (ttr) irna compositions and methods of use thereof for treating or preventing ttr-associated ocular diseases
KR20220115946A (ko) 2019-11-13 2022-08-19 알닐람 파마슈티칼스 인코포레이티드 안지오텐시노겐 (agt) 관련 장애를 치료하기 위한 방법 및 조성물
EP4061945A1 (en) 2019-11-22 2022-09-28 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Ataxin3 (atxn3) rnai agent compositions and methods of use thereof
JP2023506181A (ja) 2019-12-13 2023-02-15 アルナイラム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド ヒト第９染色体オープンリーディングフレーム７２（Ｃ９ＯＲＦ７２）ｉＲＮＡ剤組成物およびその使用方法
WO2021126734A1 (en) 2019-12-16 2021-06-24 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Patatin-like phospholipase domain containing 3 (pnpla3) irna compositions and methods of use thereof
EP4077674A1 (en) 2019-12-18 2022-10-26 Alia Therapeutics S.R.L. Compositions and methods for treating retinitis pigmentosa
WO2021154941A1 (en) 2020-01-31 2021-08-05 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Complement component c5 irna compositions for use in the treatment of amyotrophic lateral sclerosis (als)
CA3170377A1 (en) 2020-02-10 2021-08-19 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for silencing vegf-a expression
WO2021167841A1 (en) 2020-02-18 2021-08-26 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Apolipoprotein c3 (apoc3) irna compositions and methods of use thereof
WO2021178607A1 (en) 2020-03-05 2021-09-10 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Complement component c3 irna compositions and methods of use thereof for treating or preventing complement component c3-associated diseases
WO2021178736A1 (en) 2020-03-06 2021-09-10 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. KETOHEXOKINASE (KHK) iRNA COMPOSITIONS AND METHODS OF USE THEREOF
IL296106A (en) 2020-03-06 2022-11-01 Alnylam Pharmaceuticals Inc Compositions and methods for inhibiting expression of transthyretin (ttr)
EP4121534A1 (en) 2020-03-18 2023-01-25 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for treating subjects having a heterozygous alanine-glyoxylate aminotransferase gene (agxt) variant
EP4127168A1 (en) 2020-03-26 2023-02-08 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Coronavirus irna compositions and methods of use thereof
US20230190785A1 (en) 2020-03-30 2023-06-22 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for silencing dnajc15 gene expression
EP4133078A1 (en) 2020-04-06 2023-02-15 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for silencing myoc expression
KR20230008078A (ko) 2020-04-07 2023-01-13 알닐람 파마슈티칼스 인코포레이티드 Scn9a 발현을 사일런싱하기 위한 조성물 및 방법
EP4133077A1 (en) 2020-04-07 2023-02-15 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Transmembrane serine protease 2 (tmprss2) irna compositions and methods of use thereof
WO2021206917A1 (en) 2020-04-07 2021-10-14 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. ANGIOTENSIN-CONVERTING ENZYME 2 (ACE2) iRNA COMPOSITIONS AND METHODS OF USE THEREOF
CA3181400A1 (en) 2020-04-27 2021-11-04 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Apolipoprotein e (apoe) irna agent compositions and methods of use thereof
KR20230017789A (ko) 2020-04-30 2023-02-06 알닐람 파마슈티칼스 인코포레이티드 보체 인자 B (CFB) iRNA 조성물 및 이의 사용 방법
EP4150077A1 (en) 2020-05-15 2023-03-22 Korro Bio, Inc. Methods and compositions for the adar-mediated editing of transmembrane channel-like protein 1 (tmc1)
WO2021231691A1 (en) 2020-05-15 2021-11-18 Korro Bio, Inc. Methods and compositions for the adar-mediated editing of retinoschisin 1 (rsi)
EP4150090A1 (en) 2020-05-15 2023-03-22 Korro Bio, Inc. Methods and compositions for the adar-mediated editing of otoferlin (otof)
EP4150078A1 (en) 2020-05-15 2023-03-22 Korro Bio, Inc. Methods and compositions for the adar-mediated editing of argininosuccinate lyase (asl)
WO2021231679A1 (en) 2020-05-15 2021-11-18 Korro Bio, Inc. Methods and compositions for the adar-mediated editing of gap junction protein beta 2 (gjb2)
EP4150076A1 (en) 2020-05-15 2023-03-22 Korro Bio, Inc. Methods and compositions for the adar-mediated editing of methyl-cpg binding protein 2 (mecp2)
WO2021231673A1 (en) 2020-05-15 2021-11-18 Korro Bio, Inc. Methods and compositions for the adar-mediated editing of leucine rich repeat kinase 2 (lrrk2)
CA3162416C (en) 2020-05-15 2023-07-04 Korro Bio, Inc. Methods and compositions for the adar-mediated editing of argininosuccinate synthetase (ass1)
US20230183707A1 (en) 2020-05-21 2023-06-15 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting marc1 gene expression
KR20230016201A (ko) 2020-05-22 2023-02-01 웨이브 라이프 사이언시스 리미티드 이중 가닥 올리고뉴클레오티드 조성물 및 이와 관련된 방법
US11408000B2 (en) 2020-06-03 2022-08-09 Triplet Therapeutics, Inc. Oligonucleotides for the treatment of nucleotide repeat expansion disorders associated with MSH3 activity
WO2021252557A1 (en) 2020-06-09 2021-12-16 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Rnai compositions and methods of use thereof for delivery by inhalation
CA3184289A1 (en) 2020-06-18 2021-12-23 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Xanthine dehydrogenase (xdh) irna compositions and methods of use thereof
WO2021262840A1 (en) 2020-06-24 2021-12-30 Vir Biotechnology, Inc. Engineered hepatitis b virus neutralizing antibodies and uses thereof
CN116209465A (zh) 2020-06-25 2023-06-02 新索思股份有限公司 用il-2缀合物与抗egfr抗体的免疫肿瘤学组合疗法
WO2022011214A1 (en) 2020-07-10 2022-01-13 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Circular sirnas
JP2023540429A (ja) 2020-07-10 2023-09-25 アンセルム（アンスティチュート・ナシオナル・ドゥ・ラ・サンテ・エ・ドゥ・ラ・ルシェルシュ・メディカル） てんかんを治療するための方法及び組成物
EP4217489A1 (en) 2020-09-24 2023-08-02 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Dipeptidyl peptidase 4 (dpp4) irna compositions and methods of use thereof
EP4222264A1 (en) 2020-09-30 2023-08-09 CRISPR Therapeutics AG Materials and methods for treatment of amyotrophic lateral sclerosis
TW202229552A (zh) 2020-10-05 2022-08-01 美商艾拉倫製藥股份有限公司 Ｇ蛋白－偶合受體７５（ＧＰＲ７５）ｉＲＮＡ組成物及其使用方法
MX2023004032A (es) 2020-10-09 2023-04-27 Synthorx Inc Terapias inmuno-oncologicas con conjugados de il-2.
BR112023006364A2 (pt) 2020-10-09 2023-05-09 Synthorx Inc Terapia de combinação de imuno-oncologia com conjugados de il-2 e pembrolizumabe
WO2022087329A1 (en) 2020-10-23 2022-04-28 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Mucin 5b (muc5b) irna compositions and methods of use thereof
CA3200595A1 (en) 2020-11-13 2022-05-19 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Coagulation factor v (f5) irna compositions and methods of use thereof
WO2022125490A1 (en) 2020-12-08 2022-06-16 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Coagulation factor x (f10) irna compositions and methods of use thereof
EP4271696A2 (en) 2020-12-31 2023-11-08 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Cyclic-disulfide modified phosphate based oligonucleotide prodrugs
US20240336914A1 (en) 2020-12-31 2024-10-10 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. 2'-modified nucleoside based oligonucleotide prodrugs
EP4274896A1 (en) 2021-01-05 2023-11-15 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Complement component 9 (c9) irna compositions and methods of use thereof
TW202245843A (zh) 2021-02-12 2022-12-01 美商欣爍克斯公司 Ｉｌ－２接合物及西米普利單抗（ｃｅｍｉｐｌｉｍａｂ）之皮膚癌組合療法
KR20230146048A (ko) 2021-02-12 2023-10-18 알닐람 파마슈티칼스 인코포레이티드 슈퍼옥사이드 디스뮤타제 1(sod1) irna 조성물 및 슈퍼옥사이드 디스뮤타제 1- (sod1-) 관련 신경퇴행성 질환을 치료하거나 예방하기 위한 이의 사용 방법
WO2022174102A1 (en) 2021-02-12 2022-08-18 Synthorx, Inc. Lung cancer combination therapy with il-2 conjugates and an anti-pd-1 antibody or antigen-binding fragment thereof
WO2022182864A1 (en) 2021-02-25 2022-09-01 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Prion protein (prnp) irna compositions and methods and methods of use thereof
CA3211059A1 (en) 2021-02-26 2022-09-01 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Ketohexokinase (khk) irna compositions and methods of use thereof
BR112023017737A2 (pt) 2021-03-04 2023-10-03 Alnylam Pharmaceuticals Inc Composições de irna de angiopoietina-semelhantes 3 (angptl3) e métodos de uso das mesmas
WO2022192519A1 (en) 2021-03-12 2022-09-15 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Glycogen synthase kinase 3 alpha (gsk3a) irna compositions and methods of use thereof
KR20230160872A (ko) 2021-03-26 2023-11-24 미나 테라퓨틱스 리미티드 Tmem173 sarna 조성물 및 사용 방법
AR125230A1 (es) 2021-03-29 2023-06-28 Alnylam Pharmaceuticals Inc COMPOSICIONES DE AGENTES DE ARNi CONTRA HUNTINGTINA (HTT) Y SUS MÉTODOS DE USO
WO2022212153A1 (en) 2021-04-01 2022-10-06 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Proline dehydrogenase 2 (prodh2) irna compositions and methods of use thereof
US20240209371A1 (en) 2021-04-22 2024-06-27 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Compositions and methods for treating cancer
IL307926A (en) 2021-04-26 2023-12-01 Alnylam Pharmaceuticals Inc Transmembrane assemblies, serine 6 ((TMPRSS6 IRNA) and methods of using them
JP2024519293A (ja) 2021-04-29 2024-05-10 アルナイラム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド シグナル伝達兼転写活性化因子６（ＳＴＡＴ６）ｉＲＮＡ組成物およびその使用方法
JP2024522068A (ja) 2021-05-18 2024-06-11 アルナイラム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド ナトリウム－グルコース共輸送体２（ｓｇｌｔ２）ｉｒｎａ組成物およびその使用方法
EP4341405A1 (en) 2021-05-20 2024-03-27 Korro Bio, Inc. Methods and compositions for adar-mediated editing
WO2022256283A2 (en) 2021-06-01 2022-12-08 Korro Bio, Inc. Methods for restoring protein function using adar
JP2024522996A (ja) 2021-06-02 2024-06-25 アルナイラム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド パタチン様ホスホリパーゼドメイン含有３（ＰＮＰＬＡ３）ｉＲＮＡ組成物およびその使用方法
TW202313679A (zh) 2021-06-03 2023-04-01 美商欣爍克斯公司 包含il-2接合物及pd-1拮抗劑之頭頸癌組合療法
AR126000A1 (es) 2021-06-04 2023-08-30 Alnylam Pharmaceuticals Inc Agentes de arni del marco de lectura abierto 72 del cromosoma 9 humano (c9orf72), composiciones y métodos de uso de los mismos
EP4351541A2 (en) 2021-06-08 2024-04-17 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for treating or preventing stargardt's disease and/or retinal binding protein 4 (rbp4)-associated disorders
EP4101928A1 (en) 2021-06-11 2022-12-14 Bayer AG Type v rna programmable endonuclease systems
JP2024526062A (ja) 2021-06-11 2024-07-17 バイエル・アクチエンゲゼルシヤフト Ｖ型ｒｎａプログラム可能エンドヌクレアーゼ系
WO2023278410A1 (en) 2021-06-29 2023-01-05 Korro Bio, Inc. Methods and compositions for adar-mediated editing
US20230194709A9 (en) 2021-06-29 2023-06-22 Seagate Technology Llc Range information detection using coherent pulse sets with selected waveform characteristics
CA3225469A1 (en) 2021-06-30 2023-01-05 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for treating an angiotensinogen- (agt-) associated disorder
JP2024527584A (ja) 2021-07-09 2024-07-25 アルナイラム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド ＣＮＳ送達のためのＢｉｓ－ＲＮＡｉ化合物
WO2023285431A1 (en) 2021-07-12 2023-01-19 Alia Therapeutics Srl Compositions and methods for allele specific treatment of retinitis pigmentosa
JP2024528659A (ja) 2021-07-19 2024-07-30 アルナイラム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド 非原発性高シュウ酸尿症疾患または障害を有するまたは発症するリスクがある対象を治療するための方法および組成物
IL309897A (en) 2021-07-21 2024-03-01 Alnylam Pharmaceuticals Inc Target gene IRNA compositions associated with a metabolic disorder and methods of using them
JP2024528701A (ja) 2021-07-23 2024-07-30 アルナイラム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド ベータカテニン（ＣＴＮＮＢ１）ｉＲＮＡ組成物およびその使用方法
JP2024529437A (ja) 2021-07-29 2024-08-06 アルナイラム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド ３－ヒドロキシ－３－メチルグリタル－ＣＯＡレダクターゼ（ＨＭＧＣＲ）ｉＲＮＡ組成物およびその使用方法
AU2022323090A1 (en) 2021-08-03 2024-02-01 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Transthyretin (ttr) irna compositions and methods of use thereof
MX2024001445A (es) 2021-08-04 2024-02-27 Alnylam Pharmaceuticals Inc Composiciones de acido ribonucleico de interferencia (arni) y metodos para silenciar el angiotensinogeno (agt).
AR126771A1 (es) 2021-08-13 2023-11-15 Alnylam Pharmaceuticals Inc COMPOSICIONES DE ARNi CONTRA EL FACTOR XII (F12) Y SUS MÉTODOS DE USO
EP4144841A1 (en) 2021-09-07 2023-03-08 Bayer AG Novel small rna programmable endonuclease systems with impoved pam specificity and uses thereof
WO2023044370A2 (en) 2021-09-17 2023-03-23 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Irna compositions and methods for silencing complement component 3 (c3)
IL311454A (en) 2021-09-20 2024-05-01 Alnylam Pharmaceuticals Inc Inhibin subunit E (INHBE) modulator compositions and methods of using them
IL311864A (en) 2021-10-15 2024-06-01 Alnylam Pharmaceuticals Inc IRNA compositions for extrahepatic administration and methods of using them
EP4419683A1 (en) 2021-10-22 2024-08-28 Korro Bio, Inc. Methods and compositions for disrupting nrf2-keap1 protein interaction by adar mediated rna editing
CA3234636A1 (en) 2021-10-29 2023-05-04 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Complement factor b (cfb) irna compositions and methods of use thereof
EP4423272A2 (en) 2021-10-29 2024-09-04 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Huntingtin (htt) irna agent compositions and methods of use thereof
WO2023099884A1 (en) 2021-12-01 2023-06-08 Mina Therapeutics Limited Pax6 sarna compositions and methods of use
EP4452327A1 (en) 2021-12-20 2024-10-30 Synthorx, Inc. Head and neck cancer combination therapy comprising an il-2 conjugate and pembrolizumab
EP4453196A1 (en) 2021-12-21 2024-10-30 Alia Therapeutics Srl Type ii cas proteins and applications thereof
WO2023122750A1 (en) 2021-12-23 2023-06-29 Synthorx, Inc. Cancer combination therapy with il-2 conjugates and cetuximab
WO2023118068A1 (en) 2021-12-23 2023-06-29 Bayer Aktiengesellschaft Novel small type v rna programmable endonuclease systems
WO2023141314A2 (en) 2022-01-24 2023-07-27 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Heparin sulfate biosynthesis pathway enzyme irna agent compositions and methods of use thereof
AU2023227443A1 (en) 2022-03-01 2024-10-10 Crispr Therapeutics Ag Methods and compositions for treating angiopoietin-like 3 (angptl3) related conditions
WO2023170435A1 (en) 2022-03-07 2023-09-14 Mina Therapeutics Limited Il10 sarna compositions and methods of use
WO2023194359A1 (en) 2022-04-04 2023-10-12 Alia Therapeutics Srl Compositions and methods for treatment of usher syndrome type 2a
WO2023220744A2 (en) 2022-05-13 2023-11-16 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Single-stranded loop oligonucleotides
WO2023237587A1 (en) 2022-06-10 2023-12-14 Bayer Aktiengesellschaft Novel small type v rna programmable endonuclease systems
WO2024006999A2 (en) 2022-06-30 2024-01-04 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Cyclic-disulfide modified phosphate based oligonucleotide prodrugs
WO2024039776A2 (en) 2022-08-18 2024-02-22 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Universal non-targeting sirna compositions and methods of use thereof
TW202424193A (zh) 2022-09-15 2024-06-16 美商艾拉倫製藥股份有限公司 第１３型１７β－羥基類固醇去氫酶（ＨＳＤ１７Ｂ１３）ｉＲＮＡ組成物及其使用方法
WO2024056880A2 (en) 2022-09-16 2024-03-21 Alia Therapeutics Srl Enqp type ii cas proteins and applications thereof
WO2024073732A1 (en) 2022-09-30 2024-04-04 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Modified double-stranded rna agents
WO2024105162A1 (en) 2022-11-16 2024-05-23 Alia Therapeutics Srl Type ii cas proteins and applications thereof
WO2024129743A2 (en) 2022-12-13 2024-06-20 Bluerock Therapeutics Lp Engineered type v rna programmable endonucleases and their uses
WO2024136899A1 (en) 2022-12-21 2024-06-27 Synthorx, Inc. Cancer therapy with il-2 conjugates and chimeric antigen receptor therapies
WO2024134199A1 (en) 2022-12-22 2024-06-27 Mina Therapeutics Limited Chemically modified sarna compositions and methods of use
WO2024149810A2 (en) 2023-01-11 2024-07-18 Alia Therapeutics Srl Type ii cas proteins and applications thereof
WO2024168010A2 (en) 2023-02-09 2024-08-15 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Reversir molecules and methods of use thereof
WO2024196937A1 (en) 2023-03-20 2024-09-26 Synthorx, Inc. Cancer therapy with il-2 peg conjugates
WO2024216155A1 (en) 2023-04-12 2024-10-17 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Extrahepatic delivery of double-stranded rna agents

Family Cites Families (28)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4032659A (en) * 1969-03-20 1977-06-28 American Home Products Corporation Method of viral chemoprophylaxis
US3984298A (en) * 1970-12-28 1976-10-05 Haber Instruments, Incorporated Electromolecular propulsion in semiconductive media
US4230797A (en) * 1975-04-28 1980-10-28 Miles Laboratories, Inc. Heterogenous specific binding assay employing a coenzyme as label
CA1083508A (fr) * 1975-11-13 1980-08-12 Jacques Grange Supports porteurs de chaines laterales, procedes d'obtention de ces supports, procedes de fixation de composes organiques comportant un residu glucidique sur lesdits supports, produits et reactifs resultant de ladite fixation chimique
SE8003732L (sv) * 1980-05-19 1981-11-20 Pharmacia Diagnostics Ab Sett vid bestemningsmetoder involverande biospecifika affinitetsreaktioner
US4358535A (en) * 1980-12-08 1982-11-09 Board Of Regents Of The University Of Washington Specific DNA probes in diagnostic microbiology
JPS594115B2 (ja) * 1981-03-09 1984-01-27 理化学研究所 新核酸分解酵素及びその製造法
CA1180647A (en) * 1981-07-17 1985-01-08 Cavit Akin Light-emitting polynucleotide hybridization diagnostic method
US4395486A (en) * 1981-08-19 1983-07-26 Medical College Of Ga. Research Inst., Inc. Method for the direct analysis of sickle cell anemia
FI63596C (fi) * 1981-10-16 1983-07-11 Orion Yhtymae Oy Mikrobdiagnostiskt foerfarande som grundar sig pao skiktshybridisering av nukleinsyror och vid foerfarandet anvaenda kombinationer av reagenser
FR2519005B1 (fr) * 1981-12-29 1985-10-25 Pasteur Institut Fragments d'adn marques a l'une au moins de leurs extremites par des ribonucleotides modifies reconnaissables par des molecules affines et procede pour realiser une analyse de tels fragments d'adn
US4948882A (en) * 1983-02-22 1990-08-14 Syngene, Inc. Single-stranded labelled oligonucleotides, reactive monomers and methods of synthesis
US4542102A (en) * 1983-07-05 1985-09-17 Molecular Diagnostics, Inc. Coupling of nucleic acids to solid support by photochemical methods
US4683194A (en) * 1984-05-29 1987-07-28 Cetus Corporation Method for detection of polymorphic restriction sites and nucleic acid sequences
US4563417A (en) * 1984-08-31 1986-01-07 Miles Laboratories, Inc. Nucleic acid hybridization assay employing antibodies to intercalation complexes
US5430136A (en) * 1984-10-16 1995-07-04 Chiron Corporation Oligonucleotides having selectably cleavable and/or abasic sites
US4775619A (en) * 1984-10-16 1988-10-04 Chiron Corporation Polynucleotide determination with selectable cleavage sites
US5258506A (en) * 1984-10-16 1993-11-02 Chiron Corporation Photolabile reagents for incorporation into oligonucleotide chains
US5118605A (en) * 1984-10-16 1992-06-02 Chiron Corporation Polynucleotide determination with selectable cleavage sites
US4876187A (en) * 1985-12-05 1989-10-24 Meiogenics, Inc. Nucleic acid compositions with scissile linkage useful for detecting nucleic acid sequences
US4868105A (en) * 1985-12-11 1989-09-19 Chiron Corporation Solution phase nucleic acid sandwich assay
US5093232A (en) * 1985-12-11 1992-03-03 Chiron Corporation Nucleic acid probes
US4910300A (en) * 1985-12-11 1990-03-20 Chiron Corporation Method for making nucleic acid probes
US5124246A (en) * 1987-10-15 1992-06-23 Chiron Corporation Nucleic acid multimers and amplified nucleic acid hybridization assays using same
CA1339351C (en) * 1987-10-15 1997-08-26 Michael S. Urdea Nucleic acid multimers and amplified nucleic acid hybridization assays using same
JP2565552B2 (ja) * 1987-10-15 1996-12-18 カイロン コーポレイション 核酸マルチマーおよびそれを用いた増幅核酸ハイブリダイゼーション分析法
US5386020A (en) * 1991-01-10 1995-01-31 New York University Multiply connected, three-dimensional nucleic acid structures
US5424413A (en) * 1992-01-22 1995-06-13 Gen-Probe Incorporated Branched nucleic acid probes

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
TETRAHEDRON LETTERS=1975 *
ＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔｅｒｓ，Ｎｏ．１７，ｉｓｓｕｅｄ１９７５，ＰＰ．１４４５−１４４８

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