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JP2020516648A - ヒト化モノクローナル終末糖化産物抗体 - Google Patents

ヒト化モノクローナル終末糖化産物抗体 Download PDF

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JP2020516648A JP2019555873A JP2019555873A JP2020516648A JP 2020516648 A JP2020516648 A JP 2020516648A JP 2019555873 A JP2019555873 A JP 2019555873A JP 2019555873 A JP2019555873 A JP 2019555873A JP 2020516648 A JP2020516648 A JP 2020516648A
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Abstract

終末糖化産物修飾タンパク質又はペプチドに細胞上で結合するヒト化モノクローナル抗体は、重鎖及び軽鎖を含む。抗体は、カルボキシメチルリシン修飾タンパク質又はペプチドと結合する。組成物は、終末糖化産物修飾タンパク質又はペプチドに細胞上で結合するヒト化モノクローナル抗体、及び薬学的に許容される担体を含む。

Description

［背景技術］
終末糖化産物（ＡＧＥ、advanced glycation end-product；ＡＧＥ修飾タンパク質、又は最終糖化産物とも呼ばれる）は、糖とタンパク質側鎖との非酵素反応から生じる（Ando K, et al., Membrane Proteins of Human Erythrocytes Are Modified by Advanced Glycation End Products During Aging in the Circulation, Biochemical and Biophysical Research Communications, Vol. 258, 123, 125 (1999)）。このプロセスは、還元糖とアミノ基との可逆反応から開始してシッフ塩基を形成し、次いでこれは、共有結合したアマドリ転位産物を形成する。形成されると、アマドリ産物は、さらなる転位を受けてＡＧＥを産生する。
ＡＧＥ修飾タンパク質に細胞上で結合する抗体は、当技術分野において公知である。例としては、Bucalaによる米国特許第５，７０２，７０４号明細書及びAl-Abed et al.による米国特許第６，３８０，１６５号明細書に記載されている抗体が挙げられる。非ヒト抗ＡＧＥ抗体もまた市販されている。例えば、R&D Systems, Inc.社（Minneapolis, MN）は、キーホールリンペットヘモシアニンと共役したカルボキシメチルリシンに対して産生するマウス抗ＡＧＥ抗体を販売している。市販の抗体は、研究又は診断用にデザインされており、動物又はヒトにおけるインビボでの使用に適さない物質を含み得る。このような抗体は、治療抗体ではなく、ヒト対象への投与を意図していない。
ＡＧＥ及びＡＧＥ修飾細胞は、糖尿病合併症、炎症、網膜症、腎症、脳卒中、内皮細胞機能障害、及び神経変性障害を含む、いくつかの病態と関連している（Bierhaus A, “AGEs and their interaction with AGE-receptors in vascular disease and diabetes mellitus. I. The AGE concept,” Cardiovasc Res, Vol. 37(3), 586-600 (1998)）。ＡＧＥと種々の病態、疾患及び障害との間の関連性は、ＡＧＥを治療標的として同定することに繋がる。ＡＧＥ修飾細胞を標的化し除去するための療法は、超音波の適用、及びＡＧＥに結合するヒト化抗体を含む、抗体の投与を含む（例えば、国際公開第２００９／１４３４１１号パンフレット、米国特許出願公開第２０１３／０２４３７８５号明細書及び米国特許出願公開第２０１６／０２１５０４３号明細書を参照）。抗体をベースとした免疫療法は、抗原を発現しない細胞を温存しながら、抗体が結合する抗原を発現する細胞を特異的に標的化し殺傷する、その能力のために特に望ましい。
抗体は、２つの重鎖及び２つの軽鎖で構成されるＹ字型のタンパク質である。Ｙ字型の２つの腕部は、抗体の抗原結合断片（Ｆａｂ、fragment antigen-binding）領域を形成し、一方、Ｙ字型の底部又は尾部は、抗体の結晶化可能断片（Ｆｃ、fragment crystallizable）領域を形成する。抗原結合は、抗原結合断片領域の末端部分（Ｙ字型の腕部の先端）のパラトープと呼ばれる位置で生じ、これは、一組の相補性決定領域（ＣＤＲ、complementarity determining region又は超可変領域としても知られる）である。相補性決定領域は、種々の抗体間で異なり、所与の抗原への結合特異性を所与の抗体に付与する。抗体の結晶化可能断片領域は、抗原結合の結果を判定し、例えば、補体カスケードを引き起こすか、又は抗体依存性細胞媒介細胞毒性作用（ＡＤＣＣ、antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity）を開始することにより免疫系と相互作用し得る。
治療用モノクローナル抗体は、ハイブリドーマ技術を使用してマウスにおいて最初に作製された。マウス及び他の非修飾の非ヒト抗体をヒト対象へ投与することに伴う顕著な問題は、ヒト免疫系が非ヒト抗体を攻撃するリスクである。マウス抗体を受ける多くのヒト患者は、ヒト抗マウス抗体応答（ＨＡＭＡ応答、human anti-mouse antibody response）と呼ばれるアレルギー反応を生じる。ＨＡＭＡ応答は、発疹のように軽度であるか、又は腎不全のように重篤であり得る。加えて、ヒト免疫系は、マウス抗体を中和することが多く、その半減期を減少させ、対象となる抗原を標的化するその能力を損なう。
非ヒト抗体は、非ヒト及びヒト抗体成分の組合せを含むように抗体を改変することによって、ヒトに対して低免疫原性に作製することができる。非ヒト抗体は、所望の標的抗原に対する特異性により選択される。キメラ抗体は、非ヒト抗体の可変領域をヒト定常領域と組み合わせることにより作製することができる。キメラ抗体は、約７０％がヒトであり、非修飾の非ヒト抗体よりも低免疫原性である。ヒト化抗体は、ヒト抗体の相補性決定領域（ＣＤＲ）を非ヒト抗体の相補性決定領域と置換することにより作製することができる。ヒト化抗体は、約９５％がヒトであり、より多量のヒト抗体成分を含むため、キメラ抗体よりも低免疫原性である。ヒト化は、周知の科学技術であり（例えば、米国特許第５，６９３，７６２号明細書を参照）、カスタム抗体ヒト化サービスが市販されるまでに進歩している。
米国特許第５，７０２，７０４号明細書 米国特許第６，３８０，１６５号明細書 国際公開第２００９／１４３４１１号パンフレット 米国特許出願公開第２０１３／０２４３７８５号明細書 米国特許出願公開第２０１６／０２１５０４３号明細書 米国特許第５，６９３，７６２号明細書
Ando K, et al., Membrane Proteins of Human Erythrocytes Are Modified by Advanced Glycation End Products During Aging in the Circulation, Biochemical and Biophysical Research Communications, Vol. 258, 123, 125 (1999) Bierhaus A, "AGEs and their interaction with AGE-receptors in vascular disease and diabetes mellitus. I. The AGE concept," Cardiovasc Res, Vol. 37(3), 586-600 (1998)
第１の態様では、本発明は、重鎖及び軽鎖を含む、ヒト化モノクローナル終末糖化産物抗体である。重鎖は、配列番号２、配列番号３、配列番号４及び配列番号５からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸配列との、少なくとも９０％の配列同一性、好ましくは少なくとも９５％の配列同一性、より好ましくは少なくとも９８％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。軽鎖は、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４及び配列番号１５からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸配列との、少なくとも９０％の配列同一性、好ましくは少なくとも９５％の配列同一性、より好ましくは少なくとも９８％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。抗体は、カルボキシメチルリシン修飾タンパク質又はペプチドと結合する。
第２の態様では、本発明は、重鎖可変領域を有する重鎖、及び軽鎖可変領域を有する軽鎖を含む、ヒト化モノクローナル終末糖化産物抗体である。重鎖可変領域は、配列番号７、配列番号８、配列番号９及び配列番号１０からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸配列との、少なくとも９０％の配列同一性、好ましくは少なくとも９５％の配列同一性、より好ましくは少なくとも９８％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。軽鎖可変領域は、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９及び配列番号２０からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸配列との、少なくとも９０％の配列同一性、好ましくは少なくとも９５％の配列同一性、より好ましくは少なくとも９８％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。抗体は、カルボキシメチルリシン修飾タンパク質又はペプチドと結合する。
第３の態様では、本発明は、重鎖及び軽鎖を含む、ヒト化モノクローナル終末糖化産物抗体である。重鎖は、配列番号２、配列番号３、配列番号４及び配列番号５からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸配列を有するアミノ酸配列を含む。軽鎖は、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４及び配列番号１５からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸配列を有するアミノ酸配列を含む。抗体は、カルボキシメチルリシン修飾タンパク質又はペプチドと結合する。
第４の態様では、本発明は、重鎖可変領域を有する重鎖、及び軽鎖可変領域を有する軽鎖を含む、ヒト化モノクローナル終末糖化産物抗体である。重鎖可変領域は、配列番号７、配列番号８、配列番号９及び配列番号１０からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸配列を有するアミノ酸配列を含む。軽鎖可変領域は、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９及び配列番号２０からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸配列を有するアミノ酸配列を含む。抗体は、カルボキシメチルリシン修飾タンパク質又はペプチドと結合する。
第５の態様では、本発明は、ヒト化モノクローナル終末糖化産物抗体、及び薬学的に許容される担体を含む組成物である。
第６の態様では、本発明は、ヒト化モノクローナル終末糖化産物抗体を含む組成物を対象に投与するステップを含む、ＡＧＥ又はＡＧＥ修飾細胞と関連する病態、疾患又は障害と診断されたヒト対象を治療する方法である。抗体は、配列番号２、配列番号３、配列番号４及び配列番号５からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸配列との、少なくとも９０％の配列同一性、好ましくは少なくとも９５％の配列同一性、より好ましくは少なくとも９８％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖を含む。抗体は、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４及び配列番号１５からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸配列との、少なくとも９０％の配列同一性、好ましくは少なくとも９５％の配列同一性、より好ましくは少なくとも９８％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
定義
用語「ペプチド」は、アミノ酸２〜５０個からなる分子を意味する。
用語「タンパク質」は、５０個を超えるアミノ酸からなる分子を意味する。
用語「終末糖化産物」、「ＡＧＥ」、「ＡＧＥ修飾タンパク質又はペプチド」、「最終糖化産物」及び「ＡＧＥ抗原」は、糖とタンパク質側鎖との反応の結果として形成され、さらに転位し不可逆的架橋結合を形成する、修飾されたタンパク質又はペプチドを指す。このプロセスは、還元糖とアミノ基と間の可逆反応から開始してシッフ塩基を形成し、次いでこれは、共有結合したアマドリ転位産物を形成する。形成されると、アマドリ産物は、さらなる転位を受けてＡＧＥを産生する。ＡＧＥ修飾タンパク質、及びＡＧＥ修飾タンパク質に対する抗体は、Bucalaによる米国特許第５，７０２，７０４号明細書及びAl-Abed et al.による米国特許第６，３８０，１６５号明細書に記載されている。ＡＧＥを形成するのに必要な転化を受けていない糖化タンパク質又はペプチド、例えば、糖化アルブミンにおいて見出されるＮ−デオキシフルクトシルリシンは、ＡＧＥではない。ＡＧＥは、ＡＧＥ修飾（ＡＧＥエピトープ又はＡＧＥ部分とも呼ばれる）、例えば、２−（２−フロイル）−４（５）−（２−フラニル）−１Ｈ−イミダゾール（「ＦＦＩ」）；５−ヒドロキシメチル−１−アルキルピロール−２−カルバルデヒド（「ピラリン（Pyrraline）」）；非蛍光性モデルＡＧＥである１−アルキル−２−ホルミル−３，４−ジグリコシルピロール（「ＡＦＧＰ」）；カルボキシメチルリシン；カルボキシエチルリシン；及びペントシジンの存在により同定することができる。別のＡＧＥであるＡＬＩは、米国特許第６，３８０，１６５号明細書に記載されている。
用語「終末糖化産物抗体」、「ＡＧＥ修飾タンパク質に細胞上で結合する抗体」、「抗ＡＧＥ抗体」又は「ＡＧＥ抗体」は、ＡＧＥ修飾タンパク質又はペプチドに結合する抗体を意味し、ここで、ＡＧＥにより修飾されたタンパク質又はペプチドは、通常、細胞表面上に結合して見出されるタンパク質又はペプチドである。「終末糖化産物抗体」、「ＡＧＥ修飾タンパク質に細胞上で結合する抗体」、「抗ＡＧＥ抗体」又は「ＡＧＥ抗体」は、ＡＧＥ修飾タンパク質又はペプチドとＡＧＥ修飾されていない同一のタンパク質又はペプチドの両方に同一の特異性及び選択性で結合する抗体又は他のタンパク質を含まない（即ち、ＡＧＥ修飾の存在により、結合が増大しない）。アルブミンは、通常、細胞表面上に結合して見出されるタンパク質ではないため、ＡＧＥ修飾アルブミンは細胞上のＡＧＥ修飾タンパク質ではない。「終末糖化産物抗体」、「ＡＧＥ修飾タンパク質に細胞上で結合する抗体」、「抗ＡＧＥ抗体」又は「ＡＧＥ抗体」は、細胞の除去、破壊、又は死滅を生じる抗体のみを含む。また、例えば、毒素、薬物、又は他の化学物質若しくは粒子と共役した抗体を含む。
用語「ヒト化抗体」は、ヒト抗体の相補性決定領域（ＣＤＲ）を非ヒト抗体のＣＤＲと置換しており、抗体可変領域アミノ酸配列が、他の種よりもヒトに近い、遺伝子改変抗体を意味する。
用語「変異体」は、１つ又は２つ以上のヌクレオチド、タンパク質又はアミノ酸残基が、欠失、置換又は付加されている、特異的に同定された配列と異なるヌクレオチド、タンパク質又はアミノ酸配列を意味する。変異体は、天然発生の対立遺伝子変異体、又は非天然発生の変異体であり得る。同定された配列の変異体は、同定された配列の機能特性のいくつか又はすべてを保持し得る。
用語「パーセント（％）配列同一性」は、必要に応じて、配列をアラインメントしギャップを導入して、最大パーセントの配列同一性を達成した後の、参照ポリペプチド配列のアミノ酸残基と同一である、候補配列のアミノ酸残基の割合として定義し、いかなる保存的置換をも配列同一性の一部として考慮しない。パーセントアミノ酸配列同一性を判定するためのアラインメントは、公的に入手可能なコンピュータソフトウェア、例えば、BLAST、BLAST-2、ALIGN又はMegalign（DNASTAR社）ソフトウェアを使用して種々の方法で達成することができる。好ましくは、％配列同一性の値は、配列比較コンピュータプログラムであるALIGN-2を使用して生成する。ALIGN-2配列比較コンピュータプログラムは、Genentech, Inc.社（South San Francisco, CA）から公的に入手可能であるか、又は米国著作権局（the U.S. Copyright Office）のユーザ文書に保管されており、米国著作権登録番号ＴＸＵ５１００８７に登録されているソースコードからコンパイルすることが可能である。ALIGN-2プログラムは、デジタルUNIX V4.0Dを含むUNIXオペレーティングシステム上での使用のためにコンパイルすべきである。すべての配列比較パラメータは、ALIGN-2プログラムにより設定し、変更しない。
アミノ酸配列比較にALIGN-2を利用する場合では、所与のアミノ酸配列Ａの所与のアミノ酸配列Ｂに対する％配列同一性（或いは、所与のアミノ酸配列Ｂに対する特定の％アミノ酸配列同一性を有する、又は含む、所与のアミノ酸配列Ａとしても表現することができる）は、以下のように算出される：１００×分数Ｘ／Ｙ（式中、Ｘは、配列アラインメントプログラムALIGN-2により、Ａ及びＢのプログラムアラインメントの完全な一致として点数化されたアミノ酸残基の数であり、Ｙは、Ｂのアミノ酸残基の総数である）。アミノ酸配列Ａの長さがアミノ酸配列Ｂの長さと等しくない場合、ＡのＢに対する％アミノ酸配列同一性は、ＢのＡに対する％アミノ酸配列同一性に等しくない。他に詳細に述べない限り、本明細書において使用する、すべての％アミノ酸配列同一性の値は、ALIGN-2コンピュータプログラムを使用して得られる。
市販のマウス抗ＡＧＥ抗体の抗体結合を表すグラフである。 トランスフェクトしたマウスモノクローナル抗ＡＧＥ抗体のクロマトグラムである。 トランスフェクトしたマウスモノクローナル抗ＡＧＥ抗体のゲル電気泳動図である。 酵素結合免疫吸着アッセイにおけるトランスフェクトしたマウスモノクローナル抗ＡＧＥ抗体のＣＭＬ−ＯＶＡへの結合を表すグラフである。
本発明は、ＡＧＥ修飾タンパク質又はペプチドに細胞上で結合する新規のヒト化モノクローナル抗体である。詳細には、抗ＡＧＥ抗体は、カルボキシメチルリシン修飾タンパク質又はペプチドに細胞上で結合する。抗体は、ヒト対象へのインビボでの投与に適しており、好ましくは、ヒトに対して実質的に非免疫原性である。抗体は、毒素、又は細胞死を誘導するための他の物質と共役していてもよい。抗体はまた、薬学的に許容される担体とともに組成物に含まれ得る。抗体は、同等の市販の非ヒト抗ＡＧＥ抗体と比較して優れた抗原結合特性を有すると考えられる。
ヒト化モノクローナル終末糖化産物抗体は、配列番号２、配列番号３、配列番号４及び配列番号５からなる群から選択されるタンパク質配列を有する重鎖、及び配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４及び配列番号１５からなる群から選択されるタンパク質配列を有する軽鎖を含む。ヒト化した重鎖の可変ドメインは、配列番号７、配列番号８、配列番号９及び配列番号１０からなる群から選択されるタンパク質配列を有し得る。ヒト化した軽鎖の可変ドメインは、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９及び配列番号２０からなる群から選択されるタンパク質配列を有し得る。
抗ＡＧＥ抗体は、カルボキシメチルリシンＡＧＥ修飾を有するタンパク質又はペプチドに結合する。カルボキシメチルリシン（Ｎ（イプシロン）−（カルボキシメチル）リシン、Ｎ（６）−カルボキシメチルリシン、２−アミノ−６−（カルボキシメチルアミノ）ヘキサン酸及びＣＭＬとしても知られる）は、酸化ストレス及び化学的糖化の結果としてタンパク質又はペプチド及び脂質において見出される。カルボキシメチルリシン修飾タンパク質又はペプチドは、多様な細胞上に発現する受容体のＲＡＧＥにより認識される。カルボキシメチルリシンは、十分に研究されており、カルボキシメチルリシン関連製剤が、市販されている。例えば、Cell Biolabs, Inc.社は、ＣＭＬ−ＢＳＡ抗原、ＣＭＬポリクローナル抗体、ＣＭＬ免疫ブロットキット、及びＣＭＬ競合ＥＬＩＳＡキットを販売している（www.cellbiolabs.com/cml-assays）。ＣＭＬオボアルブミン（ＣＭＬ−ＯＶＡ）は、抗体結合の検証に好ましい対照である。
抗ＡＧＥ抗体は、抗体−抗原複合体からの解離速度、即ちｋｄ（ｋｂａｃｋ又はオフレートとも呼ばれる）が低く、好ましくは、最大で６×１０−３、５×１０−３、１×１０−３、８×１０−４、５×１０−４、１×１０−４、８×１０−５、５×１０−５又は１×１０−５（秒−１）である。好ましくは、抗ＡＧＥ抗体の結合特性は、図１に示す、R&D Systems, Inc.社（Minneapolis, MN；カタログ番号ＭＡＢ３２４７）から入手可能なマウスのカルボキシメチルリシンモノクローナル抗体（クローン３１８００３）よりも優れている
ヒト化抗体の結合は、例えば、濃度依存的結合ＥＬＩＳＡ又は細胞をベースとした結合アッセイにより評価することができる。好ましくは、ヒト化抗ＡＧＥ抗体の結合は、非ヒト抗ＡＧＥ抗体の結合と等価であるか、又は非ヒト抗ＡＧＥ抗体の結合よりも優れている。
抗ＡＧＥ抗体は、抗体依存性細胞媒介細胞毒性作用（ＡＤＣＣ）によりＡＧＥ修飾細胞を破壊し得る。ＡＤＣＣは、細胞により媒介される免疫防御機構であり、免疫系のエフェクター細胞が、膜表面の抗原が特異的抗体により結合した標的細胞を活発に溶解する。ＡＤＣＣは、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、マクロファージ、好中球又は好酸球により媒介され得る。エフェクター細胞は、結合する抗体のＦｃ部位に結合する。ＮＫ細胞、例えば、ＮＫ９２細胞（NantKwest社、Culver City, CAから入手可能な細胞株）を、抗ＡＧＥ抗体の投与とともに又は後続して投与すると、補体の活性を増強させ、これにより抗ＡＧＥ抗体の細胞殺傷作用を増強することができる。抗ＡＧＥ抗体はまた、補体依存性細胞毒性作用（ＣＤＣ、complement-dependent cytotoxicity）によりＡＧＥ修飾細胞を破壊し得る。ＣＤＣでは、免疫系の補体カスケードは、抗体が標的抗原に結合することにより引き起こされる。
抗ＡＧＥ抗体は、ＡＧＥ修飾細胞の破壊を生じる物質と共役していてもよい。このような物質の例としては、毒素、細胞毒性物質、磁性ナノ粒子及び磁性スピン渦ディスク（magnetic spin-vortex disc）が挙げられる。
抗ＡＧＥ抗体と共役する孔形成毒素（ＰＦＴ）（Aroian R. et al., “Pore-Forming Toxins and Cellular Non-Immune Defenses (CNIDs),” Current Opinion in Microbiology, 10:57-61 (2007)）のような毒素を患者に注射して、ＡＧＥ修飾細胞を選択的に標的化して除去し得る。抗ＡＧＥ抗体は、ＡＧＥ修飾細胞を認識して結合する。次いで、毒素は、細胞表面で孔形成を生じ、この後、浸透圧溶解により細胞が除去される。
抗ＡＧＥ抗体と共役する磁性ナノ粒子を患者に注射して、ＡＧＥ修飾細胞を標的化して除去することができる。磁場を印加することにより磁性ナノ粒子を加熱して、ＡＧＥ修飾細胞を選択的に除去することができる。
或いは、血管を遮断し得る自己凝集を避けるため磁場を印加する場合にのみ磁化される磁性スピン渦ディスクは、磁場を印加すると回転し始め、標的細胞の膜破壊を生じる。抗ＡＧＥ抗体と共役する磁性スピン渦ディスクは、他の細胞を除去することなく、ＡＧＥ修飾細胞型を特異的に標的化する。
ヒト化モノクローナル抗ＡＧＥ抗体又はその変異体は、その翻訳後修飾を含む、配列番号２、配列番号３、配列番号４又は配列番号５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有する重鎖を含み得る。少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有する重鎖は、参照配列と比較して、置換（例えば、保存的置換）、挿入、又は欠失を含み得るが、その配列を含む抗ＡＧＥ抗体は、ＡＧＥに結合する能力を保持する。置換、挿入、又は欠失は、配列のいかなる部分においても生じ得る。
ヒト化モノクローナル抗ＡＧＥ抗体又はその変異体は、その翻訳後修飾を含む、配列番号７、配列番号８、配列番号９又は配列番号１０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有する重鎖可変領域を含み得る。少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有する可変領域は、参照配列と比較して、置換（例えば、保存的置換）、挿入、又は欠失を含み得るが、その配列を含む抗ＡＧＥ抗体は、ＡＧＥに結合する能力を保持する。置換、挿入、又は欠失は、配列のいかなる部分においても生じ得る。
ヒト化モノクローナル抗ＡＧＥ抗体又はその変異体は、その翻訳後修飾を含む、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４又は配列番号１５のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有する軽鎖を含み得る。少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有する軽鎖は、参照配列と比較して、置換（例えば、保存的置換）、挿入、又は欠失を含み得るが、その配列を含む抗ＡＧＥ抗体は、ＡＧＥに結合する能力を保持する。置換、挿入、又は欠失は、配列のいかなる部分においても生じ得る。
ヒト化モノクローナル抗ＡＧＥ抗体又はその変異体は、その翻訳後修飾を含む、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９又は配列番号２０のアミノ酸配列に対する少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有する軽鎖可変領域を含み得る。少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の配列同一性を有する可変領域は、参照配列と比較して、置換（例えば、保存的置換）、挿入、又は欠失を含み得るが、その配列を含む抗ＡＧＥ抗体は、ＡＧＥに結合する能力を保持する。置換、挿入、又は欠失は、配列のいかなる部分においても生じ得る。
抗体断片は、全抗体の代わりに使用し得る。好ましくは、断片は、配列番号２、配列番号３、配列番号４及び配列番号５からなる群から選択されるタンパク質配列を有する重鎖、並びに配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４及び配列番号１５からなる群から選択されるタンパク質配列を有する軽鎖で構成される抗体に由来する。抗体は、酵素分解によって、より小さな断片に分解される。パパイン分解により、重鎖間ジスルフィド架橋のＮ末端側が切断されてＦａｂ断片が生成される。Ｆａｂ断片は、軽鎖と、重鎖の２つのＮ末端ドメイン（Ｆｄ断片としても知られる）のうちの１つとを含む。ペプシン分解により、重鎖間ジスルフィド架橋のＣ末端側が切断されてＦ（ａｂ’）２断片が生成される。Ｆ（ａｂ’）２断片は、軽鎖と、ジスルフィド架橋により結合する２つのＮ末端ドメインとの両方を含む。ペプシン分解により、Ｆｖ（可変断片、fragment variable）及びＦｃ（結晶化可能断片）断片がまた形成され得る。Ｆｖ断片は、２つのＮ末端可変ドメインを含む。Ｆｃ断片は、免疫グロブリン受容体と細胞上で、及び補体カスケードの開始要素と相互作用するドメインを含む。ペプシンにより、重鎖の第３の定常ドメイン（ＣＨ３）の前で免疫グロブリンＧがまた切断されて、大きな断片Ｆ（ａｂｃ）及び小さな断片ｐＦｃ’が生成され得る。或いは、抗体断片は、組換えにより作製することができる。
ヒト化抗体配列は、公知の抗体配列と比較して、その有効性を予測することができる。例えば、ヒト化抗体配列は、肉眼及び／又はコンピュータモデリングにより解析して、抗原結合を最も保持する可能性のある配列を同定することができる。ヒト化抗体配列はまた、免疫原性応答の可能性を増加させることがわかっている配列の存在についてスクリーニングすることができる。例えば、ＭＨＣクラスII分子の溝においてペプチド配列が提示されることにより、ＣＤ８＋Ｔ細胞の活性化及び免疫原性応答が生じる。この応答を減少させるために、Ｔ細胞を活性化し得る「Ｔ細胞エピトープ」を組み込まないように抗体をデザインして、ＭＨＣクラスII分子への結合親和性を減少させることができる。ヒトフレームワーク又はＣＤＲ内の残基を、等価なヒト生殖細胞系列に変異させて（生殖細胞系列化（germlining）として知られるプロセス）潜在的ＭＨＣ−IIエピトープを除去することができる。
抗ＡＧＥ抗体は、マウスモノクローナル抗ＡＧＥ抗体をヒト化することにより得ることができる。マウスモノクローナル抗ＡＧＥ抗体は、配列番号１に示す重鎖タンパク質配列（可変ドメインのタンパク質配列は配列番号６に示す）及び配列番号１１に示す軽鎖タンパク質配列（可変ドメインのタンパク質配列は配列番号１６に示す）を有する。抗体は、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ、Chinese Hamster Ovary）細胞において組換えにより作製することができる。ヒト化モノクローナル抗体は、合成後に精製することができる。例えば、抗体は、MabSelect SuRe Protein A培地（GE Healthcare社）を使用して精製することができる。
ヒト化モノクローナル抗ＡＧＥ抗体は、薬学的に許容される担体とともに組成物中に含むことができる。「薬学的に許容される担体」は、薬剤投与に適合する、ありとあらゆる溶媒、分散媒、コーティング剤、抗菌及び抗真菌剤、等張及び吸収遅延剤等を含む。このような担体又は希釈剤の好ましい例としては、水、食塩水、リンゲル液及びブドウ糖溶液が挙げられる。補足の活性化合物をまた組成物に組み込むことができる。非経口投与に使用する溶液及び懸濁液は、注射用水、食塩溶液、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール又は他の合成溶媒のような無菌希釈剤、ベンジルアルコール又はメチルパラベンのような抗菌剤、アスコルビン酸又は亜硫酸水素ナトリウムのような抗酸化剤、酢酸、クエン酸又はリン酸のような緩衝液、塩化ナトリウム又はブドウ糖のような浸透圧調整剤を含むことができる。ｐＨは、塩酸又は水酸化ナトリウムのような、酸又は塩基により調整することができる。非経口製剤は、ガラス又はプラスチック製の、アンプル、使い捨て注射器又は多回投与バイアルに封入することができる。
注射に適切な医薬組成物は、無菌注射用溶液又は分散液の即時調製のための無菌水溶液又は分散液を含む。注射に適切な抗体の医薬組成物に種々の賦形剤を含むことができる。静脈内投与では、適切な担体は、生理食塩水、静菌水、CREMOPHOR EL（登録商標）（BASF社、Parsippany, NJ）又はリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ、phosphate buffered saline）を含む。すべての場合において、組成物は、無菌でなくてはならず、注射器を使用して投与するために液体であるべきである。このような組成物は、製造及び保存の間、安定であるべきであり、細菌及び真菌のような微生物の混入を避けて保存されなければならない。例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、アスコルビン酸、及びチメロサールのような種々の抗菌及び抗真菌剤を微生物混入に対して含有させることができる。等張剤、例えば、糖、ポリアルコール、例えば、マンニトール、ソルビトール、及び塩化ナトリウムを組成物に含むことができる。吸収を遅延させ得る組成物は、モノステアリン酸アルミニウム及びゼラチンのような物質を含む。無菌注射用溶液は、必要量の抗体及び他の任意の治療用成分を、適切な溶媒中に、必要に応じて成分の１つ又は組合せとともに組み込むことにより調製し、その後、無菌化することができる。無菌注射用溶液の調製のための無菌固体の調製方法は、真空乾燥及び凍結乾燥して固体を得ることを含む。
吸入による投与では、抗体は、適切な噴霧剤、例えば、二酸化炭素のようなガスを含む噴霧器又は加圧容器によるエアロゾルスプレーとして送達することができる。抗体はまた、例えば、iSPERSE（商標）吸入薬物送達プラットフォーム（PULMATRIX社、Lexington, MA）を使用して乾燥粉末として吸入させることにより送達することができる。
各タイプの抗体の適切な用量レベルは、一般に、患者体重１ｋｇあたり約０．０１〜５００ｍｇである。用量レベルは、好ましくは約０．１〜約２５０ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは約０．５〜約１００ｍｇ／ｋｇである。適切な用量レベルは、約０．０１〜２５０ｍｇ／ｋｇ、約０．０５〜１００ｍｇ／ｋｇ、又は約０．１〜５０ｍｇ／ｋｇであり得る。この範囲内では、用量は、０．０５〜０．５、０．５〜５又は５〜５０ｍｇ／ｋｇであり得る。抗体は、１日１〜４回のレジメンに基づいて、例えば、１日１回又は２回投与することができる。抗体は、典型的に、インビボでの半減期が長く、これにより、投与レジメンが１日１回、１週間に１回、２若しくは３週間毎に１回、１カ月に１回、又は６０〜９０日毎に１回に減少し得る。
抗ＡＧＥ抗体の投与を受ける対象は、抗体がＡＧＥ修飾細胞を効果的に除去したかどうかを判定するために試験することができる。ＡＧＥ修飾細胞の存在は、ＡＧＥ修飾と関連するマーカー、例えば、ｐ１６ＩＮＫ４ａを測定することにより判定することができる。抗体の投与及び後続の試験は、所望の治療結果を達成するまで反復することができる。
単位用量剤形は、投与及び用量均一性を容易にするために作製することができる。単位用量剤形は、治療を受ける対象のための単一用量として適切な物理的に個別の単位を指し、治療有効量の１つ又は２つ以上のタイプの抗体を、必要とされる医薬担体とともに含む。好ましくは、単位用量剤形は、密封された容器に入っており、無菌化されている。
ＡＧＥ又はＡＧＥ修飾細胞と関連する病態、疾患又は障害と診断された任意のヒト対象は、本明細書に記載の方法により治療することができる。ヒト化モノクローナル抗ＡＧＥ抗体により治療され得る病態、疾患又は障害の例としては、アルツハイマー病、筋委縮性側索硬化症（ＡＬＳ又はルー・ゲーリック病）、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ、chronic obstructive pulmonary disease）、ハンチントン舞踏病、特発性肺線維症、筋ジストロフィー（ベッカー型、デュシェンヌ型、肢帯型及びヤマモト型筋ジストロフィーを含む）、黄斑変性症、白内障、糖尿病性網膜症、パーキンソン病、早老症（ウェルナー症候群及びハッチンソン・ギルフォード早老症を含む）、白斑症、嚢胞性線維症、アトピー性皮膚炎、湿疹、関節炎（変形性関節症、関節リウマチ及び若年性関節リウマチを含む）、アテローム性動脈硬化症、がん及び転移性がん（例えば、乳がん、トリプルネガティブ乳がん、肺がん、メラノーマ、結腸がん、腎細胞癌、前立腺がん、子宮頸がん、膀胱がん、直腸がん、食道がん、肝がん、口腔及び咽喉がん、多発性骨髄腫、卵巣がん、胃がん、膵がん並びに網膜芽細胞腫（retinal blastoma cancer）を含む）、がん治療関連障害又はがん治療副作用、高血圧症、緑内障、骨粗鬆症、サルコペニア、悪液質、脳卒中、心筋梗塞、心房細動、移植拒絶反応、Ｉ型糖尿病、II型糖尿病、放射線被曝、ＨＩＶ治療副作用、化学兵器被曝、中毒症、炎症、腎症、レビー小体認知症、プリオン病（ウシ海綿状脳症、クロイツフェルト・ヤコブ病、スクレイピー、慢性消耗性疾患、クールー病及び致死性家族性不眠症を含む）、脊椎湾曲症（lordokyphosis）、自己免疫疾患、脂肪組織の減少、乾癬、クローン病、喘息、加齢による生理作用（しわ、染み、脱毛、皮下脂肪組織の減少、及び皮膚の菲薄化のような「外観的」作用を含む）、特発性ミオパシー（例えば、特発性炎症性ミオパシー、特発性炎症性筋炎、多発性筋炎、皮膚筋炎、孤発性封入体筋炎、及び若年性筋炎を含む）、多発性硬化症、視神経脊髄炎（ＮＭＯ、neuromyelitis optica；デビック病又はデビック症候群）、てんかん並びに副腎白質ジストロフィー（ＡＬＤ、adrenoleukodystrophy；Ｘ連鎖副腎白質ジストロフィー、Ｘ−ＡＬＤ、大脳ＡＬＤ又はｃＡＬＤ）が挙げられる。
特に好ましい治療群は、ＡＧＥ又はＡＧＥ修飾細胞と関連する病態、疾患又は障害と診断されたが、従来の治療を受けることができない対象を含む。例えば、転移性がんは、ＡＧＥ修飾細胞と関連する病態として認識されている。転移性がんを有する患者は、他の診断、健康状態又は合併症のため、手術、放射線療法又は化学療法のようながん治療を受けることができないことがある。例えば、妊娠中の女性は、胎児を害するリスクがあるため放射線療法を受けることができない。高齢の又は衰弱した患者、例えば、がん性悪液質を経験している患者は、侵襲的方法に耐えることが不可能であるリスクがあるため、手術に適切な候補であるとは言えない。免疫系不全又は慢性感染症を既に有する患者は、多くの化学療法薬が免疫系を害するため、化学療法を受けることが可能であるとは言えない。
抗ＡＧＥ抗体は、細胞分離プロセス、例えば、磁気細胞分離において使用することができる。磁気細胞分離では、抗ＡＧＥ抗体は、コーティングと呼ばれるプロセスにより磁気ビーズに結合させる。次いで、コーティングされた磁気ビーズは、ＡＧＥ修飾細胞に特異的に結合させることができる。次いで、磁気ビーズ上でコーティングされた抗ＡＧＥ抗体に結合したＡＧＥ修飾細胞は、印加した磁場に応答し、ＡＧＥ修飾細胞が非ＡＧＥ修飾細胞から分離することが可能となる。磁気細胞分離は、ＡＧＥ修飾細胞を組織試料及び液体試料から単離するために使用することができる。磁気ビーズは、マイクロビーズ（０．５〜５００μｍ）又はナノ粒子（５〜５００ｎｍ）であり得る。磁気ビーズ上でコーティングされた抗ＡＧＥ抗体はまた、イムノアッセイ及び免疫沈降法のような単離プロセスにおいて使用することができる。同様に、磁気ビーズ上でコーティングされた抗ＡＧＥ抗体は、ＡＧＥ修飾タンパク質又はペプチドを特異的に標的化して組織試料及び液体試料から分離するために使用することができる。
抗ＡＧＥ抗体は、細胞精製プロセス、例えば、イムノパニング（immunopanning）及び免疫吸着法において使用することができる。精製プロセスは、所望の又は不必要な細胞の組織培養物、細胞培養物又は血液からの単離において有用である。細胞精製は、移植、例えば、骨髄移植、又は輸注、例えば、輸血において使用することができる。細胞精製は、自家幹細胞移植において、化学療法の間、転移性悪性細胞を除去し有益な幹細胞を濃縮するのに特に有用である。抗ＡＧＥ抗体を使用したイムノパニング又は免疫吸着法により、ＡＧＥ修飾細胞を組織培養物、細胞培養物又は血液試料から単離することができる。
配列番号１に対応する１文字表記のアミノ酸配列は、
MGWTLVFLFLLSVTAGVHSQVQLLQPGAELVKPGASVKLACKASGYLFTTYWMHWLKQRPGQGLEWIGEISPTNGRAYYNARFKSEATLTVDKSSNTAYMQLSSLTSEASAVYYCARSFGNYEFAYWGQGTLVTVSVASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
である。
配列番号２に対応する１文字表記のアミノ酸配列は、
MGWTLVFLFLLSVTAGVHSEVQLLESGAEAKKPGASVKLSCKASGYLFTTYWMHWVHQAPGQRLEWMGEISPTNGRAYYNARFKSRVTITVDKSASTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSFGNYEFAYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
である。
配列番号３に対応する１文字表記のアミノ酸配列は、
MGWTLVFLFLLSVTAGVHSQVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYLFTTYWMHWVRQAPGQRLEWIGEISPTNGRAYYNARFKSRVTITRDTSASTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSFGNYEFAYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
である。
配列番号４に対応する１文字表記のアミノ酸配列は、
MGWTLVFLFLLSVTAGVHSQVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYLFTTYWMHWVRQAPGQGLEWMGEISPTNGRAYYNARFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSFGNYEFAYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
である。
配列番号５に対応する１文字表記のアミノ酸配列は、
MGWTLVFLFLLSVTAGVHSQVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCEASGYLFTTYWMHWVRQAPGQGLEWMGEISPTNGRAYYNARFKSRVTITRDTSINTAYMELSRLRSDDTAVYYCARSFGNYEFAYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
である。
配列番号６に対応する１文字表記のアミノ酸配列は、
QVQLLQPGAELVKPGASVKLACKASGYLFTTYWMHWLKQRPGQGLEWIGEISPTNGRAYYNARFKSEATLTVDKSSNTAYMQLSSLTSEASAVYYCARSFGNYEFAYWGQGTLVTVSV
である。
配列番号７に対応する１文字表記のアミノ酸配列は、
EVQLLESGAEAKKPGASVKLSCKASGYLFTTYWMHWVHQAPGQRLEWMGEISPTNGRAYYNARFKSRVTITVDKSASTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSFGNYEFAYWGQGTLVTVSS
である。
配列番号８に対応する１文字表記のアミノ酸配列は、
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYLFTTYWMHWVRQAPGQRLEWIGEISPTNGRAYYNARFKSRVTITRDTSASTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSFGNYEFAYWGQGTLVTVSS
である。
配列番号９に対応する１文字表記のアミノ酸配列は、
QVQLVQSGAEVKKPGSSVKVSCKASGYLFTTYWMHWVRQAPGQGLEWMGEISPTNGRAYYNARFKSRVTITADKSTSTAYMELSSLRSEDTAVYYCARSFGNYEFAYWGQGTLVTVSS
である。
配列番号１０に対応する１文字表記のアミノ酸配列は、
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCEASGYLFTTYWMHWVRQAPGQGLEWMGEISPTNGRAYYNARFKSRVTITRDTSINTAYMELSRLRSDDTAVYYCARSFGNYEFAYWGQGTLVTVSS
である。
配列番号１１に対応する１文字表記のアミノ酸配列は、
MVSSAQFLGLLLLCFQGTRCDVVMTQTPLSLPVSLGDQASISCRSRQSLVNSNGNTFLQWYLQKPGQSPKLLIYKVSLRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGLYFCSQSTHVPPTFGGGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
である。
配列番号１２に対応する１文字表記のアミノ酸配列は、
MVSSAQFLGLLLLCFQGTRCDIVMTQTPLSLPVTLGQPASISCRSRQSLVNSNGNTFLQWLQQRPGQPPRLLIYKVSLRFSGVPDRFSGSGAGTDFTLTISRVEAEDVGIYFCSQSTHVPPTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
である。
配列番号１３に対応する１文字表記のアミノ酸配列は、
MVSSAQFLGLLLLCFQGTRCDIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCRSRQSLVNSNGNTFLQWYLQKPGQSPQLLIYKVSLRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEPEDVGVYYCSQSTHVPPTFGGGTKVEVKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
である。
配列番号１４に対応する１文字表記のアミノ酸配列は、
MVSSAQFLGLLLLCFQGTRCDVVMTQSPLSLPVTLGQPASISCRSRQSLVNSNGNTFLQWFQQRPGQSPRRLIYKVSLRFSGVPDRFSGSGSDTDFTLRISRVEAEDVGLYYCSQSTHVPPTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
である。
配列番号１５に対応する１文字表記のアミノ酸配列は、
MVSSAQFLGLLLLCFQGTRCDIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCRSRQSLVNSNGNTFLQWLLQKPGQPPQLLIYKVSLRFSGVPNRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGLYYCSQSTHVPPTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
である。
配列番号１６に対応する１文字表記のアミノ酸配列は、
DVVMTQTPLSLPVSLGDQASISCRSRQSLVNSNGNTFLQWYLQKPGQSPKLLIYKVSLRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGLYFCSQSTHVPPTFGGGTKLEIK
である。
配列番号１７に対応する１文字表記のアミノ酸配列は、
DIVMTQTPLSLPVTLGQPASISCRSRQSLVNSNGNTFLQWLQQRPGQPPRLLIYKVSLRFSGVPDRFSGSGAGTDFTLTISRVEAEDVGIYFCSQSTHVPPTFGQGTKVEIK
である。
配列番号１８に対応する１文字表記のアミノ酸配列は、
DIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCRSRQSLVNSNGNTFLQWYLQKPGQSPQLLIYKVSLRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEPEDVGVYYCSQSTHVPPTFGGGTKVEVK
である。
配列番号１９に対応する１文字表記のアミノ酸配列は、
DVVMTQSPLSLPVTLGQPASISCRSRQSLVNSNGNTFLQWFQQRPGQSPRRLIYKVSLRFSGVPDRFSGSGSDTDFTLRISRVEAEDVGLYYCSQSTHVPPTFGQGTKLEIK
である。
配列番号２０に対応する１文字表記のアミノ酸配列は、
DIVMTQTPLSLSVTPGQPASISCRSRQSLVNSNGNTFLQWLLQKPGQPPQLLIYKVSLRFSGVPNRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGLYYCSQSTHVPPTFGGGTKVEIK
である。
［実施例］
市販の抗ＡＧＥ抗体の親和性及び動態
市販のマウス抗終末糖化産物抗体の親和性及び動態を試験した。キーホールリンペットヘモシアニン（クローン３１８００３）と共役したカルボキシメチルリシンに対して産生した抗ＡＧＥ抗体を入手した（R&D Systems, Inc.社、Minneapolis, MN；カタログ番号ＭＡＢ３２４７）。Ｎα，Ｎα−ビス（カルボキシメチル）−Ｌ−リシントリフルオロアセテート塩（Sigma-Aldrich社、St. Louis, MO）を細胞のＡＧＥ修飾タンパク質のモデル基質として使用した。非標識相互作用解析をBIACORE（商標）T200（GE Healthcare社、Pittsburgh, PA）上で、Series SセンサーチップCM5（GE Healthcare社、Pittsburgh, PA）を使用し、ブランクとして設定したＦｃ１、及び試験抗体で固定したＦｃ２を用いて行った（分子量１５０，０００Ｄａ）。泳動緩衝液は、温度２５℃のＨＢＳ−ＥＰ緩衝液（１０ｍＭのＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭのＮａＣｌ、３ｍＭのＥＤＴＡ及び０．０５％のＰ−２０、ｐＨ７．４）であった。ソフトウェアは、BIACORE（商標）T200評価ソフトウェア、バージョン２．０であった。二重対照（Ｆｃ２−１及び緩衝液のみの注射）を解析において使用し、データをラングミュア１：１結合モデルにフィッティングさせた。
図１は、時間に対する抗体応答のグラフを表す。次の値は、解析により決定された：ka(1/Ms)=1.857×103、kd(1/秒)＝6.781×10-3、KD(M)=3.651×10-6、Rmax(RU)=19.52及びカイ2=0.114。フィッティングのカイ２値がＲｍａｘの１０％未満であるため、適合度は信頼できる。
マウスモノクローナル抗ＡＧＥ抗体の一過性発現
マウスモノクローナル抗ＡＧＥ抗体をチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞においてトランスフェクトして、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ、enzyme-linked immunosorbent assay）及び表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ、surface plasmon resonance）解析による評価のために十分な量の抗体を発現させ、精製した。抗体のアミノ酸配列をコードするＤＮＡを合成した。このＤＮＡを哺乳動物一過性発現プラスミドｐＤ２６１０−ｖ１３（DNA2.0社）にクローニングした。
懸濁液に適応させたＣＨＯ細胞（Thermo Fisher社、英国）２．０〜３．０×１０５細胞／ｍＬを、通気孔付きの５００ｍＬエルレンマイヤーフラスコ（Corning社、オランダ）において８ｍＭのＬ−グルタミン（Thermo Fisher社、英国）及び１０ｍＬ／Ｌのヒポキサンチン／チミジン（Thermo Fisher社、英国）を添加したProCHO-4無血清培地（Lonza社、ベルギー）中に１３５ｒｐｍ、８％ＣＯ２、３７℃で培養した。マキシプレップの構築物をPureLink（登録商標）HiPureプラスミドフィルターマキシプレップキット（Thermo Fisher社、英国）を使用して調製した。ベクターＤＮＡをNanoDrop Lite分光光度計を使用して定量した。
最終密度１．０×１０６細胞／ｍＬの細胞５００ｍＬに１．２５μｇ／ｍＬのベクターＤＮＡを一過性にトランスフェクトし、通気孔付きの５００ｍＬエルレンマイヤーフラスコ（Corning社、オランダ）において８ｍＭのＬ−グルタミン（Invitrogen社、英国）及び１０ｍＬ／Ｌのヒポキサンチン／チミジン（Invitrogen社、英国）を添加したProCHO-5無血清培地（Lonza社、ベルギー）中で培養した。培養物を３７℃、８％ＣＯ２及び１３５ｒｐｍで８日間インキュベートし、７．５％（ｖ／ｖ）のPower Feed A（Sartorius社、独国）を２〜３日毎に日常的に与え、その後、４０００ｒｐｍ、４℃で４０分間の遠心分離により回収した。トランスフェクションによって抗体６１２ｍＬを作製した。
AKTAクロマトグラフィー装置（GE Healthcare社）を室温（１９℃）で使用して抗体精製を行った。遠心分離の後、洗浄緩衝液で平衡化した１ｍＬのHiTrap Protein Aカラムを備えたAKTAシステムに、濾過した（０．２２μｍ）細胞培養上清を適用した。ロードした後、２０カラム容量の洗浄緩衝液でカラムを洗浄した。結合した抗体を１０カラム容量の溶出緩衝液で段階溶出した。図２は、２８０ｎｍでの抗体のクロマトグラムを表す。すべての溶出画分をｐＨ９．０のトリス緩衝液で中和した。溶出ピークに対応する溶出画分を選択して、ＰＢＳ中４℃で一晩透析した。
ドデシル硫酸ナトリウム・ポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）を使用して抗体の純度を評価した。抗体は、９５％超純粋であることがわかった。図３は、抗体のゲル電気泳動図を表す。還元条件下では、抗体の重鎖及び軽鎖の両方が肉眼で確認でき、予想分子量の約５０及び２５ｋＤａのそれぞれにおいて観察された。非還元条件下では、単一の主バンドが観察された。いかなる追加の主バンドも存在しないことから、抗体凝集物が存在しないことを示す。
精製した抗体濃縮物を分光光度法により評価した。NanoDrop Lite 分光光度計を用いて、Ａ２８０におけるＩｇＧの標準的基準として吸光係数２０５，５００Ｍ−１・ｃｍ−１（又は1.0mg/mL=1.37のA280［ＭＷ＝１５０，０００Ｄａと仮定する］）を使用し、製造者の指示に従って抗体を定量した。０．６ｍｇ／ｍＬの濃度のトランスフェクトしたマウス抗体６００ｍＬを２．３ｍＬまで精製して総収率１．４ｍｇの抗体とした。
トランスフェクトした抗体の結合をＥＬＩＳＡにより評価した。ＣＭＬ−ＯＶＡ／Ｎε−（カルボキシメチル）リシン−ＯＶＡ（Circulex社、日本、カタログ番号ＣＹ−Ｒ２０５３）１００ｎｇ／ウェルを９６ウェルMaxiSorp（登録商標）プレート上のコーティング緩衝液（０．０５ＭのＮａ２ＣＯ３を追加することによりｐＨ９．５とした０．０５ＭのＮａＨＣＯ３）中に４℃で一晩固定した。コーティング緩衝液を除去し、プレートをPBS Tween（ＰＢＳ−Ｔ）（０．１％（ｖ／ｖ）のTween 20）で３回洗浄した。ＰＢＳ中３％（ｗ／ｖ）のスキムミルク１ウェルあたり２００μＬを各ウェルに追加し、室温で２時間撹拌した。次いで、プレートをＰＢＳ−Ｔで３回洗浄した。
抗体を１，０００ｎｇ／ｍＬから０．４８８ｎｇ／ｍＬまでインキュベーション緩衝液（ＰＢＳ、１％（ｗ／ｖ）のＢＳＡ）中に希釈した。希釈した抗体１ウェルあたり１００μＬをプレートに３ウェルずつ追加し、室温で２時間撹拌した。
ウェルをＰＢＳ−Ｔで３回洗浄した。洗浄後、インキュベーション緩衝液中１：５，０００で希釈したヤギ抗マウスＨＲＰ（Ｆｃ特異的）（Bio Rad社、カタログ番号０３００−０１０８Ｐ）１ウェルあたり１００μＬをすべてのウェルに追加し、プレートを室温で１時間撹拌した。ウェルをＰＢＳ−Ｔで３回洗浄した。洗浄後、ＴＭＢ基質１００μＬを各ウェルに追加し、３７℃で１０分間インキュベートした。１ＭのＨＣｌを５０μＬ各ウェルに追加し、プレートをTecan Sunriseプレートリーダーにおいて４５０ｎｍで直ちに読み取った。図４は、ＣＭＬ−ＯＶＡへの抗体結合についてのＥＬＩＳＡを表す。グラフに示す値は、３回の読み取りの平均値である。
ＥＬＩＳＡの結果は、トランスフェクトした抗体が、公知のＡＧＥ修飾タンパク質であるＣＭＬ−ＯＶＡタンパク質を認識して結合することを示す。結果は、抗体配列が正しく、抗体が活性であることを確証する。同様の結果が、このようなマウス抗体の相補性決定領域を含むヒト化モノクローナル抗ＡＧＥ抗体についても予想される。
ヒト化抗体の作製
マウス抗ＡＧＥ抗体を配列決定した。重鎖のアミノ酸配列を配列番号１に示し、軽鎖のアミノ酸配列を配列番号１１に示す。重鎖及び軽鎖の可変ドメインのアミノ酸配列を配列番号６及び配列番号１６にそれぞれ示す。
マウス重鎖のＣＤＲ残基をIMGT及びKabat番号付けシステムを使用して同定した。マウス重鎖可変領域に最も近いヒト生殖細胞系列遺伝子Ｖ領域を決定した。ヒトＩｇＧ配列のオンラインデータベースを検索し、BLAST検索アルゴリズムを使用してマウス重鎖可変ドメインと比較し、ヒト可変ドメインの候補をBLASTの結果のトップ２００から選択した。これらは、フレームワーク相同性、キーフレームワーク残基の維持、及び標準的なループ構造の組合せに基づいて４候補にまで絞られた。
マウス重鎖可変ドメインのＣＤＲを４つのアクセプターフレームワーク内に移植して、４つのヒト化重鎖可変ドメイン変異体を作製した。４つのヒト化重鎖可変ドメインのアミノ酸配列を配列番号７、配列番号８、配列番号９及び配列番号１０に示す。ヒト化重鎖可変ドメインの相同性をマウス重鎖可変ドメインと比較した。相同性比較の結果を以下の表２に示す。
相同性の順に、配列番号７が、マウス重鎖可変ドメインと最も類似しており、続いて、配列番号９、配列番号８及び配列番号１０が類似していた。
マウス軽鎖のＣＤＲ残基をIMGT及びKabat番号付けシステムを使用して同定した。マウス軽鎖可変領域に最も近いヒト生殖細胞系列遺伝子Ｖ領域を決定した。ヒトＩｇＫ配列のオンラインデータベースを検索し、BLAST検索アルゴリズムを使用してマウス軽鎖可変ドメインと比較し、ヒト可変ドメインの候補をBLASTの結果のトップ２００から選択した。これらは、フレームワーク相同性、キーフレームワーク残基の維持、及び限界ループ構造の組合せに基づいて４候補にまで絞られた。
マウス軽鎖可変ドメインのＣＤＲを４つのアクセプターフレームワーク内に移植して、４つのヒト化軽鎖可変ドメイン変異体を作製した。４つのヒト化軽鎖可変ドメインのアミノ酸配列を配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９及び配列番号２０に示す。ヒト化軽鎖可変ドメインの相同性をマウス軽鎖可変ドメインと比較した。相同性比較の結果を以下の表３に示す。
相同性の順に、配列番号１８が、マウス軽鎖可変ドメインと最も類似しており、続いて、配列番号２０、配列番号１９及び配列番号１７が類似していた。
ヒト化重鎖及び軽鎖可変ドメイン変異体を調べて、これらがヒト化されているかどうかを世界保健機関（ＷＨＯ、the World Health Organization）のヒト化抗体の定義に従って判定した。ＷＨＯは、可変領域アミノ酸配列が他の種よりもヒトに近い場合、抗体がヒト化されているとしている。配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９及び配列番号２０を、Immunogenetics Information System（登録商標）（IMGT（登録商標））DomainGapAlignツールを使用して評価した（Ehrenmann F. et al., “IMGT/3Dstructure-DB and IMGT/DomainGapAlign: a database and a tool for immunoglobulins or antibodies, T cell receptors, MHC, IgSF and MhcSF”, Nucleic Acids Research, Vol. 38, D301-307）。すべてのヒト化可変ドメインは、マウスよりもヒトに近かった。したがって、すべてのヒト化可変ドメインは、ＷＨＯのヒト化抗体の定義を満たす。
マウス抗体の重鎖及び軽鎖可変ドメイン、並びに８つのヒト化重鎖及び軽鎖変異体配列をＭＨＣII結合ペプチドについてスクリーニングして、ヒト化プロセスにより高親和性を有するペプチド配列が除去されたかどうかを、インシリコアルゴリズムを使用して判定した。ヒト重鎖生殖細胞系列配列ＩＧＨＶ１−４６及びＩＧＨＶ１−３並びにヒト軽鎖生殖細胞系列配列ＩＧＫＶ２−３０及びＩＧＫＶ２−２９をまた解析して比較した。世界人口の９９％超の典型であり、ＭＨＣクラスIIエピトープの予測に使用される標準的な対立遺伝子のセットである、次の８つの対立遺伝子について配列をスクリーニングした：ＤＲＢ１＊０１：０１；ＤＲＢ１＊０３：０１；ＤＲＢ１＊０４：０１；ＤＲＢ１＊０７：０１；ＤＲＢ１＊０８：０２；ＤＲＢ１＊１１：０１；ＤＲＢ１＊１３：０２；ＤＲＢ１＊１５：０１。
マウス重鎖可変ドメインは、２つの高親和性Ｔ細胞エピトープコア（ＩＣ５０＜５０ｎＭ）を有する。ヒト生殖細胞系列配列ＩＧＨＶ１−４６並びに配列番号７、配列番号９及び配列番号１０は、１つの潜在的Ｔ細胞エピトープをそれぞれ有した。ヒト生殖細胞系列配列ＩＧＨＶ１−３及び配列番号８は、２つの潜在的Ｔ細胞エピトープをそれぞれ有した。ヒト生殖細胞系列配列が免疫原性である可能性が低いため、潜在的Ｔ細胞エピトープは、ＭＨＣクラスIIエピトープソフトウェアの過剰予測であり得る。潜在的Ｔ細胞エピトープは、むしろ制御性Ｔ細胞エピトープである可能性があり、これは配列に有益である。
マウス軽鎖可変ドメイン並びに配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９及び配列番号２０は、２つの高親和性Ｔ細胞エピトープコア（ＩＣ５０＜５０ｎＭ）及び１つの潜在的Ｔ細胞エピトープをそれぞれ有した。ヒト生殖細胞系列配列ＩＧＫＶ２−３０は、潜在的Ｔ細胞エピトープを有しなかった。ヒト生殖細胞系列配列ＩＧＫＶ２−２９は、２つの潜在的Ｔ細胞エピトープを有した。重鎖可変配列においてと同様に、潜在的Ｔ細胞エピトープは、ＭＨＣクラスIIエピトープソフトウェアの過剰予測であり得、むしろ有益な制御性Ｔ細胞エピトープである可能性がある。
マウス及びヒト化抗体の翻訳後修飾を試験した。Ｎ結合型グリコシル化モチーフＮＸＳ／Ｔ（Ｘは、プロリン以外の任意のアミノ酸である）は、可変ドメインのいずれにも存在しなかった。配列をまた、アスパラギンをアスパラギン酸へ脱アミド化する傾向があり得る、アミノ酸モチーフＳＮＧ、ＥＮＮ、ＬＮＧ及びＬＮＮの存在について解析した。モチーフＳＮＧは、すべての軽鎖のＣＤＲ１に存在した。このモチーフは潜在的に免疫原性であるが、ＣＤＲにのみ生じるため、置換は行わなかった。
マウス重鎖及び軽鎖シグナルペプチドを同定した。このようなシグナルペプチドは、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞において高レベルの発現を生じ得る。重鎖シグナルペプチドは、マウス重鎖（配列番号１）及び４つのヒト化重鎖（配列番号２、配列番号３、配列番号４及び配列番号５）に含まれる。軽鎖シグナルペプチドは、マウス軽鎖（配列番号１１）及び４つのヒト化軽鎖（配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４及び配列番号１５）に含まれる。
可変ドメイン結合部位の構造は、I-Tasserをベースとしたタンパク質構造予測ソフトウェアであるDNASTAR NovaFoldを使用してモデル化した。NovaFoldでは、I-Tasserアルゴリズムを利用し、これは、スレッディング（threading）及びab initioのフォールディング技術を組み合わせて、それまで未知の構造を有するタンパク質の正確なフル３Ｄ原子モデルを構築する。タンパク質構造の解析により、重鎖及び軽鎖可変ドメインの組合せである配列番号７−配列番号１７、配列番号７−配列番号１８、配列番号８−配列番号２０及び配列番号９−配列番号１８が、マウス重鎖及び軽鎖可変ドメインの組合せである配列番号５−配列番号１６と最も近い構造を有すると考えられることが示された。概して、配列番号１８に示す配列を有する軽鎖可変ドメインを含むヒト化変異体は、他の軽鎖可変ドメインを含むヒト化変異体よりも好ましい構造を有した。同様に、配列番号７に示す配列を有する重鎖可変ドメインを含むヒト化変異体は、他の重鎖可変ドメインを含むヒト化変異体よりも好ましい構造を有した。
（仮想例）：将来の抗体試験
各重鎖可変ドメイン（配列番号７、配列番号８、配列番号９及び配列番号１０）は、ヒトＩｇＧ１アイソタイプ定常ドメイン配列を用いてインフレームで合成する。重鎖配列全体は、コドンを最適化し（DNA2.0社、米国）、ＤＮＡ配列を検証する。ＩｇＧ１定常ドメイン（アロタイプＧ１ｍ１７，１）のアミノ酸配列を以下に示す。
ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
各軽鎖可変ドメイン（配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９及び配列番号２０）は、ヒトＩｇＫアイソタイプ定常ドメイン配列を用いてインフレームで合成する。軽鎖配列全体は、コドンを最適化し（DNA2.0社、米国）、ＤＮＡ配列を検証する。ＩｇＫ定常ドメイン（アロタイプＫｍ３）のアミノ酸配列を以下に示す。
TVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
各変異鎖は、ＤＮＡ配列決定解析により検証する。次いで、各ヒト化抗体の一過性トランスフェクション及び発現を行う。ある１つのキメラ抗体を発現させて陽性対照として使用し、マウス可変ドメイン及びヒトＩｇ定常ドメインを含有させる。以下の表４に示すように、ヒト化重鎖及び軽鎖可変ドメイン並びにヒトＩｇ定常ドメインを含む１６種のヒト化変異体を発現させる。
（仮想例）：サルコペニアの治療
高齢患者をサルコペニアと診断する。配列番号２と９９％の配列同一性を有する重鎖、及び配列番号１２と９９％の配列同一性を有する軽鎖を有するヒト化モノクローナル抗ＡＧＥ抗体を女性に投与する。抗体を５ｍｇ／ｋｇの用量で１週間に１回、静脈内に投与する。抗体は、細胞表面に終末糖化産物、例えば、老化細胞を発現する細胞を特異的に標的化して殺傷する。抗体投与の前後に患者のｐ１６ＩＮＫ４ａレベルを測定することにより治療の有効性を判定する。患者は、抗体に対する免疫応答を生じない。筋肉量の増加から明らかとなるように、患者のサルコペニアは改善する。
（仮想例）：変形性関節症の治療
患者を変形性関節症と診断する。薬学的に許容される担体、並びに配列番号７と９８％の配列同一性を有する重鎖可変配列、及び配列番号１８と９８％の配列同一性を有する軽鎖可変領域を有する、ヒト化モノクローナル抗ＡＧＥ抗体を含む組成物を男性に投与する。抗体を１０ｍｇ／ｋｇの用量で１日１回、経口的に投与する。抗体は、細胞表面に終末糖化産物、例えば、老化軟骨細胞を発現する細胞を特異的に標的化して殺傷する。組成物投与の前後に患者のｐ１６ＩＮＫ４ａレベルを測定することにより治療の有効性を判定する。患者は、抗体を含む組成物に対する免疫応答を生じない。関節痛の減少から明らかとなるように、患者の変形性関節症は改善する。
参考文献
1. International Application Pub. No. WO 2009/143411 to Gruber (26 Nov. 2009).
2. U.S. Patent No. 5,702,704 to Bucala (issued December 30, 1997).
3. U.S. Patent No. 6,380,165 to Al-Abed et al. (issued April 30, 2002).
4. U.S. Patent No. 6,387,373 to Wright et al. (issued May 14, 2002).
5. U.S. Patent No. 4,217,344 to Vanlerberghe et al. (issued August 12, 1980).
6. U.S. Patent No. 4,917,951 to Wallach (issued April 17, 1990).
7. U.S. Patent No. 4,911,928 to Wallach (issued March 27, 1990).
8. U.S. Patent Application Publication Pub. No. US 2010/226932 to Smith et al. (September 9, 2010).
9. Ando K, et al., “Membrane Proteins of Human Erythrocytes Are Modified by Advanced Glycation End Products During Aging in the Circulation,” Biochemical and Biophysical Research Communications, Vol. 258, 123-27 (1999).
10. Lindsey JB, et al., “Receptor For Advanced Glycation End-Products (RAGE) and soluble RAGE (sRAGE): Cardiovascular Implications,” Diabetes Vascular Disease Research, Vol. 6(1), 7-14, (2009).
11. Bierhaus A, “AGEs and their interaction with AGE-receptors in vascular disease and diabetes mellitus. I. The AGE concept,” Cardiovasc Res, Vol. 37(3), 586-600 (1998).
12. Meuter A., et al. “Markers of cellular senescence are elevated in murine blastocysts cultured in vitro: molecular consequences of culture in atmospheric oxygen” J Assist Reprod Genet. 2014 Aug 10. [Epub ahead of print].
13. Baker, D.J. et al., “Clearance of p16Ink4a-positive senescent cells delays ageing-associated disorders”, Nature, vol. 479, pp. 232-236, (2011).
14. Jana Hadrabova, et al. “Chicken immunoglobulins for prophylaxis: Effect of inhaled antibodies on inflammatory parameters in rat airways” Journal of Applied Biomedicine (in press; Available online 5 May 2014).
15. Vlassara, H. et al., “High-affinity-receptor-mediated Uptake and Degradation of Glucose-modified Proteins: A Potential Mechanism for the Removal of Senescent Macromolecules”, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, Vol. 82, 5588, 5591 (1985).
16. Roll, P. et al., “Anti-CD20 Therapy in Patients with Rheumatoid Arthritis”, Arthritis & Rheumatism, Vol. 58, No. 6, 1566-1575 (2008).
17. Kajstura, J. et al., “Myocite Turnover in the Aging Human Heart”, Circ. Res., Vol. 107(11), 1374-86, (2010).
18. de Groot, K. et al., “Vascular Endothelial Damage and Repair in Antineutrophil Cytoplasmic Antibody-Associated Vasculitis”, Arthritis and Rheumatism, Vol. 56(11), 3847, 3847 (2007).
19. Manesso, E. et al., “Dynamics of β-Cell Turnover: Evidence for β-Cell Turnover and Regeneration from Sources of β-Cells other than β-cell Replication in the HIP Rat”, Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab., Vol. 297, E323, E324 (2009).
20. Kirstein, M. et al., “Receptor-specific Induction of Insulin-like Growth Factor I in Human Monocytes by Advanced Glycosylation End Product-modified Proteins”, J. Clin. Invest., Vol. 90, 439, 439-440 (1992).
21. Murphy, J. F., “Trends in cancer immunotherapy”, Clinical Medical Insights: Oncology, Vol. 14(4), 67-80 (2010).
22. Virella, G. et al., “Autoimmune Response to Advanced Glycosylation End-Products of Human LDL”, Journal of Lipid Research, Vol. 44, 487-493 (2003).
23. Ameli, S. et al., “Effect of Immunization With Homologous LDL and Oxidized LDL on Early Atherosclerosis in Hypercholesterolemic Rabbits”, Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology, Vol. 16, 1074 (1996).
24. “Sarcopenia”, available online at en.wikipedia.org/wiki/Sarcopenia (November 14, 2014).
25. “What is sarcopenia?”, available online at www.iofbonehealth.org/what-sarcopenia (2014).
26. Blahd, W., “Sarcopenia with aging”, available online at www.webmd.com/healthy-aging/sarcopenia-with-aging (August 3, 2014).
27. “Keyhole limpet hemocyanin”, available online at en.wikipedia.org/wiki/Keyhole_limpet_hemocyanin (April 18, 2014).
28. “CML-BSA Product Data Sheet”, available online at www.cellbiolabs.com/sites/default/files/STA-314-cml-bsa.pdf (2010).
29. “CML (N-epsilon-(Carboxymethyl)Lysine) Assays and Reagents”, available online at www.cellbiolabs.com/cml-assays (Accessed on December 15, 2014).
30. Cruz-Jentoft, A. J. et al., “Sarcopenia: European consensus on definition and diagnosis”, Age and Ageing, Vol. 39, pp. 412-423 (April 13, 2010).
31. Rolland, Y. et al., “Sarcopenia: its assessment, etiology, pathogenesis, consequences and future perspectives”, J. Nutr. Health Aging, Vol. 12(7), pp. 433-450 (2008).
32. Mera, K. et al., “An autoantibody against Nε-(carboxyethyl)lysine (CEL): Possible involvement in the removal of CEL-modified proteins by macrophages”, Biochemical and Biophysical Research Communications, Vol. 407, pp. 420-425 (March 12, 2011).
33. Reddy, S. et al., “Nε-(carboxymethyl)lysine is a dominant advanced glycation end product (AGE) antigen in tissue proteins”, Biochemistry, Vol. 34, pp. 10872-10878 (August 1, 1995).
34. Naylor, R. M. et al., “Senescent cells: a novel therapeutic target for aging and age-related diseases”, Clinical Pharmacology & Therapeutics, Vol. 93(1), pp.105-116 (December 5, 2012).
35. Katcher, H. L., “Studies that shed new light on aging”, Biochemistry (Moscow), Vol. 78(9), pp. 1061-1070 (2013).
36. Ahmed, E. K. et al., “Protein Modification and Replicative Senescence of WI-38 Human Embryonic Fibroblasts”, Aging Cells, Vol. 9, 252, 260 (2010).
37. Vlassara, H. et al., “Advanced Glycosylation Endproducts on Erythrocyte Cell Surface Induce Receptor-Mediated Phagocytosis by Macrophages”, J. Exp. Med., Vol. 166, 539, 545 (1987).
38. Fielding, R. A., et al., “Sarcopenia: an undiagnosed condition in older adults. Current consensus definition: prevalence, etiology, and consequences”, Journal of the American Medical Directors Association, Vol. 12(4), pp. 249-256 (May 2011).
39. Maass, D. R. et al., “Alpaca (Lama pacos) as a convenient source of recombinant camelid heavy chain antibodies (VHHs)”, Journal of Immunological Methods, Vol. 324, No. 1-2, pp. 13-25 (July 31, 2007).
40. Strietzel, C.J. et al., “In vitro functional characterization of feline IgGs”, Veterinary Immunology and Immunopathology, Vol. 158, pp. 214-223 (2014).
41. Patel, M. et al., “Sequence of the dog immunoglobulin alpha and epsilon constant region genes”, Immunogenetics, Vol. 41, pp. 282-286 (1995).
42. Wagner, B. et al., “The complete map of the Ig heavy chain constant gene region reveals evidence for seven IgG isotypes and for IgD in the horse”, The Journal of Immunology, Vol. 173, pp. 3230-3242 (2004).
43. Hamers-Casterman, C. et al., “Naturally occurring antibodies devoid of light chains”, Nature, Vol. 363, pp. 446-448 (June 3, 1993).
44. De Genst, E. et al., “Antibody repertoire development in camelids”, Developmental & Comparative Immunology, Vol. 30, pp. 187-198 (available online July 11, 2005).
45. Griffin, L.M. et al., “Analysis of heavy and light chain sequences of conventional camelid antibodies from Camelus dromedarius and Camelus bactrianus species”, Journal of Immunological Methods, Vol. 405, pp. 35-46 (available online January 18, 2014).
46. Nguyen, V.K. et al., “Camel heavy-chain antibodies: diverse germline VHH and specific mechanisms enlarge the antigen-binding repertoire”, The European Molecular Biology Organization Journal, Vol. 19, No, 5, pp. 921-930 (2000).
47. Muyldermans, S. et al., “Sequence and structure of VHdomain from naturally occurring camel heavy chain immunoglobulins lacking light chains”, Protein Engineering, Vol. 7, No. 9, pp. 1129-1135 (1994).
48. Glover, A., “Of mice and men”, European Biopharmaceutical Review, Winter 2016, 4 pages (January 2016).
49. “The basic guide to magnetic bead cell separation”, Sepmag, available online at www.sepmag.eu/free-basic-guide-magnetic-bead-cell-separation (downloaded April 12, 2017).

Claims (20)

  1. 細胞分離プロセスのためのヒト化モノクローナル終末糖化産物抗体であって、
    配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、及び配列番号１５からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸配列を含む、前記抗体。
  2. ＡＧＥ又はＡＧＥ修飾細胞と関連する病態、疾患、又は障害の治療における使用のためのヒト化モノクローナル終末糖化産物抗体であって、
    配列番号２、配列番号３、配列番号４、及び配列番号５からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸配列との、少なくとも９０％の配列同一性、好ましくは少なくとも９５％の配列同一性、より好ましくは少なくとも９８％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖、並びに
    配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、及び配列番号１５からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸配列との、少なくとも９０％の配列同一性、好ましくは少なくとも９５％の配列同一性、より好ましくは少なくとも９８％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖
    を含む、前記抗体。
  3. ＡＧＥ又はＡＧＥ修飾細胞と関連する病態、疾患又は障害を治療するための医薬の製造のためのヒト化モノクローナル終末糖化産物抗体の使用であって、
    前記抗体が、配列番号２、配列番号３、配列番号４、及び配列番号５からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸配列との、少なくとも９０％の配列同一性、好ましくは少なくとも９５％の配列同一性、より好ましくは少なくとも９８％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖、並びに
    配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、及び配列番号１５からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸配列との、少なくとも９０％の配列同一性、好ましくは少なくとも９５％の配列同一性、より好ましくは少なくとも９８％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖
    を含む、前記使用。
  4. ヒト化モノクローナル終末糖化産物抗体を含む組成物を対象に投与するステップ
    を含む、ＡＧＥ又はＡＧＥ修飾細胞と関連する病態、疾患又は障害と診断された対象を治療する方法であって、
    前記抗体が、配列番号２、配列番号３、配列番号４、及び配列番号５からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸配列との、少なくとも９０％の配列同一性、好ましくは少なくとも９５％の配列同一性、より好ましくは少なくとも９８％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖、並びに
    配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、及び配列番号１５からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸配列との、少なくとも９０％の配列同一性、好ましくは少なくとも９５％の配列同一性、より好ましくは少なくとも９８％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖
    を含む、前記方法。
  5. 重鎖、及び
    軽鎖
    を含む、ヒト化モノクローナル終末糖化産物抗体であって、
    前記重鎖が、配列番号２、配列番号３、配列番号４、及び配列番号５からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸配列との、少なくとも９０％の配列同一性、好ましくは少なくとも９５％の配列同一性、より好ましくは少なくとも９８％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、
    前記軽鎖が、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４、及び配列番号１５からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸配列との、少なくとも９０％の配列同一性、好ましくは少なくとも９５％の配列同一性、より好ましくは少なくとも９８％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、
    前記抗体が、カルボキシメチルリシン修飾タンパク質又はペプチドに結合する、前記抗体。
  6. 重鎖可変領域を有する重鎖、及び
    軽鎖可変領域を有する軽鎖
    を含む、ヒト化モノクローナル終末糖化産物抗体であって、
    前記重鎖可変領域が、配列番号７、配列番号８、配列番号９及び配列番号１０からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸配列との、少なくとも９０％の配列同一性、好ましくは少なくとも９５％の配列同一性、より好ましくは少なくとも９８％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、
    前記軽鎖可変領域が、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９及び配列番号２０からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸配列との、少なくとも９０％の配列同一性、好ましくは少なくとも９５％の配列同一性、より好ましくは少なくとも９８％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、
    前記抗体が、カルボキシメチルリシン修飾タンパク質又はペプチドに結合する、前記抗体。
  7. 重鎖、及び
    軽鎖
    を含む、ヒト化モノクローナル終末糖化産物抗体であって、
    前記重鎖が、配列番号２、配列番号３、配列番号４及び配列番号５からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸配列を有するアミノ酸配列を含み、
    前記軽鎖が、配列番号１２、配列番号１３、配列番号１４及び配列番号１５からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸配列を有するアミノ酸配列を含み、
    前記抗体が、カルボキシメチルリシン修飾タンパク質又はペプチドに結合する、前記抗体。
  8. 重鎖可変領域を有する重鎖、及び
    軽鎖可変領域を有する軽鎖
    を含む、ヒト化モノクローナル終末糖化産物抗体であって、
    前記重鎖可変領域が、配列番号７、配列番号８、配列番号９及び配列番号１０からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸配列を有するアミノ酸配列を含み、
    前記軽鎖可変領域が、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９及び配列番号２０からなる群から選択される少なくとも１つのアミノ酸配列を有するアミノ酸配列を含み、
    前記抗体が、カルボキシメチルリシン修飾タンパク質又はペプチドに結合する、前記抗体。
  9. ＣＭＬ−オボアルブミンに結合する、請求項１、２及び５〜８のいずれかに記載の抗体。
  10. ヒトに対して実質的に非免疫原性である、請求項１、２及び５〜９のいずれかに記載の抗体。
  11. 最大で６×１０−３（秒−１）の解離速度（Ｋｄ）を有する、請求項１、２及び５〜１０のいずれかに記載の抗体。
  12. ＡＧＥ修飾細胞の破壊を生じる物質と共役する、請求項１、２及び５〜１１のいずれかに記載の抗体。
  13. 物質が、毒素、細胞毒性物質、磁性ナノ粒子、及び磁性スピン渦ディスクからなる群から選択される少なくとも１つを含む、請求項１、２及び５〜１２のいずれかに記載の抗体。
  14. 重鎖可変領域が、配列番号７との、少なくとも９０％の配列同一性、好ましくは少なくとも９５％の配列同一性、より好ましくは少なくとも９８％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、
    軽鎖可変領域が、配列番号１８との、少なくとも９０％の配列同一性、好ましくは少なくとも９５％の配列同一性、より好ましくは少なくとも９８％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１、２及び５〜１３のいずれかに記載の抗体。
  15. 重鎖可変領域が、配列番号７を含み、
    軽鎖可変領域が、配列番号１８を含む、請求項１、２及び５〜１４のいずれかに記載の抗体。
  16. 請求項１、２及び５〜１５のいずれかに記載のヒト化モノクローナル終末糖化産物抗体、及び
    薬学的に許容される担体
    を含む、組成物。
  17. 単位用量剤形である、請求項１６に記載の組成物。
  18. 無菌である、請求項１６又は１７に記載の組成物。
  19. ＡＧＥ又はＡＧＥ修飾細胞と関連する病態、疾患又は障害が、アルツハイマー病、筋委縮性側索硬化症、慢性閉塞性肺疾患、ハンチントン舞踏病、特発性肺線維症、筋ジストロフィー、黄斑変性症、白内障、糖尿病性網膜症、パーキンソン病、早老症、白斑症、嚢胞性線維症、アトピー性皮膚炎、湿疹、関節炎、アテローム性動脈硬化症、がん、転移性がん、がん治療関連障害又はがん治療副作用、高血圧症、緑内障、骨粗鬆症、サルコペニア、悪液質、脳卒中、心筋梗塞、心房細動、移植拒絶反応、Ｉ型糖尿病、II型糖尿病、放射線被曝、ＨＩＶ治療副作用、化学兵器被曝、中毒症、炎症、腎症、レビー小体認知症、プリオン病、脊椎湾曲症、自己免疫疾患、脂肪組織の減少、乾癬、クローン病、喘息、加齢による生理作用、特発性ミオパシー、多発性硬化症、視神経脊髄炎、てんかん、及び副腎白質ジストロフィーからなる群から選択される、請求項１〜１５のいずれかに記載の抗体、使用又は方法。
  20. 投与の有効性について対象を試験するステップと、投与を反復する任意のステップとをさらに含む、請求項４又は１９に記載の方法。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2022163179A (ja) * 2017-04-13 2022-10-25 シワ コーポレーション ヒト化モノクローナル終末糖化産物抗体

Families Citing this family (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101592156B1 (ko) 2008-05-23 2016-02-04 시와 코퍼레이션 재생을 촉진하는 방법, 조성물 및 장치
US8721571B2 (en) 2010-11-22 2014-05-13 Siwa Corporation Selective removal of cells having accumulated agents
US10584180B2 (en) 2014-09-19 2020-03-10 Siwa Corporation Anti-AGE antibodies for treating inflammation and auto-immune disorders
US10358502B2 (en) 2014-12-18 2019-07-23 Siwa Corporation Product and method for treating sarcopenia
US9993535B2 (en) 2014-12-18 2018-06-12 Siwa Corporation Method and composition for treating sarcopenia
MX2018009988A (es) 2016-02-19 2018-12-17 Siwa Corp Metodo y composicion para tratar el cancer, destruir las celulas cancerosas metastasicas y evitar la metastasis del cancer usando anticuerpo para productos finales de glicacion avanzada (age).
KR20180133452A (ko) 2016-04-15 2018-12-14 시와 코퍼레이션 신경퇴행성 질환을 치료하기 위한 항-노화 항체
JP2019518763A (ja) 2016-06-23 2019-07-04 シワ コーポレーション 様々な疾患及び障害の治療において使用するためのワクチン
US10858449B1 (en) 2017-01-06 2020-12-08 Siwa Corporation Methods and compositions for treating osteoarthritis
US10925937B1 (en) 2017-01-06 2021-02-23 Siwa Corporation Vaccines for use in treating juvenile disorders associated with inflammation
US10995151B1 (en) 2017-01-06 2021-05-04 Siwa Corporation Methods and compositions for treating disease-related cachexia
US10961321B1 (en) 2017-01-06 2021-03-30 Siwa Corporation Methods and compositions for treating pain associated with inflammation
US11518801B1 (en) 2017-12-22 2022-12-06 Siwa Corporation Methods and compositions for treating diabetes and diabetic complications
US20220175916A1 (en) * 2018-07-23 2022-06-09 Siwa Corporation Methods and compositions for treating chronic effects of radiation and chemical exposure
EP3845559A4 (en) 2018-08-31 2022-12-28 Bloom Technology Corporation ANTIBODIES FOR ADVANCED GLYCATION TERMINAL PRODUCTS AND THEIR USE
WO2023177390A1 (en) * 2022-03-14 2023-09-21 Siwa Corporation Humanized monoclonal advanced glycation end-product antibody for treating pancreatic cancer

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2002526758A (ja) * 1998-10-05 2002-08-20 ザ・トラスティーズ・オブ・コランビア・ユニバーシティー・イン・ザ・シティー・オブ・ニューヨーク 或る化合物がペプチドと後生的糖化最終産物受容体（ｒａｇｅ）の相互作用を阻害することが可能かどうかを決定する方法。
JP2003160599A (ja) * 2001-11-22 2003-06-03 Transgenic Inc カルボキシメチル化ペプチドに対する抗体
WO2016044252A2 (en) * 2014-09-19 2016-03-24 Siwa Corporation Anti-age antibodies for treating inflammation and auto-immune disorders
US20160215043A1 (en) * 2014-12-18 2016-07-28 Siwa Corporation Product and method for treating sarcopenia

Family Cites Families (161)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4217344A (en) 1976-06-23 1980-08-12 L'oreal Compositions containing aqueous dispersions of lipid spheres
US4900747A (en) 1984-03-19 1990-02-13 The Rockefeller University Method and agents for removing advanced glycosylation endproducts
US5811075A (en) 1984-03-19 1998-09-22 The Rockefeller University Method and agents for removing advanced glycosylation endproducts
AU600306B2 (en) 1986-09-12 1990-08-09 Rockefeller University, The Methods and agents for removing advanced glycosylation endproducts
US4911928A (en) 1987-03-13 1990-03-27 Micro-Pak, Inc. Paucilamellar lipid vesicles
US4917951A (en) 1987-07-28 1990-04-17 Micro-Pak, Inc. Lipid vesicles formed of surfactants and steroids
US4965288A (en) 1988-02-25 1990-10-23 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Inhibitors of lysyl oxidase
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
IN172208B (ja) 1990-04-02 1993-05-01 Sint Sa
US20040208826A1 (en) 1990-04-02 2004-10-21 Bracco International B.V. Ultrasound contrast agents and methods of making and using them
US20080063603A1 (en) 1990-04-02 2008-03-13 Bracco International B.V. Ultrasound contrast agents and methods of making and using them
US6372249B1 (en) 1991-12-16 2002-04-16 Baylor College Of Medicine Senscent cell-derived inhibitors of DNA synthesis
US5624804A (en) 1991-12-20 1997-04-29 The Rockefeller University Immunochemical detection of In vivo advanced glycosylation end products
ATE144124T1 (de) 1991-12-20 1996-11-15 Technomed Medical Systems Schallwellen aussendende,thermische effekte und kavitationseffekte erzeugende vorrichtung fur die ultraschalltherapie
WO1994000592A1 (en) 1992-06-26 1994-01-06 Exocell, Inc. Monoclonal antibodies against glycated low density lipoprotein
US5620479A (en) 1992-11-13 1997-04-15 The Regents Of The University Of California Method and apparatus for thermal therapy of tumors
US5518720A (en) 1992-12-30 1996-05-21 Exocell, Inc. Treatment of complications of diabetes with substances reactive with the fructosyl-lysine structure in glycated albumin
US6387373B1 (en) 1993-01-15 2002-05-14 Novavax, Inc. Vaccines containing paucilsmellar lipid vesicles as immunological adjuvants
CA2160909A1 (en) 1993-04-28 1994-11-10 Hagan Bayley Cell-targeted lytic pore-forming agents
AU692237B2 (en) 1994-02-03 1998-06-04 Picower Institute For Medical Research, The Compositions and methods for advanced glycosylation endproduct-mediated modulation of amyloidosis
US6410598B1 (en) 1994-02-03 2002-06-25 Michael P. Vitek Compositions and methods for advanced glycosylation endproduct-mediated modulation of amyloidosis
US5744318A (en) 1994-12-30 1998-04-28 Alteon Inc. Monoclonal antibody for the detection of advanced glycosylation endproducts in biological samples
CA2208411A1 (en) 1994-12-30 1996-07-11 Alteon, Inc. Monoclonal antibodies specific for advanced glycosylation endproducts in biological samples
US6176842B1 (en) 1995-03-08 2001-01-23 Ekos Corporation Ultrasound assembly for use with light activated drugs
WO1997007803A1 (en) 1995-08-25 1997-03-06 Case Western Reserve University Process for detecting pentosidine and for assessing the biological age of a biological sample
US5620409A (en) 1995-09-15 1997-04-15 The Research Foundation Of State University Of New York Method for inhibiting clot formation
JP3579549B2 (ja) 1995-10-24 2004-10-20 株式会社トクヤマ 糖尿病または糖尿病合併症用マーカーとしての使用
US6090382A (en) 1996-02-09 2000-07-18 Basf Aktiengesellschaft Human antibodies that bind human TNFα
US5664570A (en) 1996-02-20 1997-09-09 Svc Apparatus for applying high-intensity ultrasonic waves to a target volume within a human or animal body
US5908925A (en) 1996-06-27 1999-06-01 Exocell, Inc. Genetically engineered immunoglobulins with specificity for glycated albumin
US5984882A (en) 1996-08-19 1999-11-16 Angiosonics Inc. Methods for prevention and treatment of cancer and other proliferative diseases with ultrasonic energy
US6261537B1 (en) 1996-10-28 2001-07-17 Nycomed Imaging As Diagnostic/therapeutic agents having microbubbles coupled to one or more vectors
US7258857B2 (en) 1996-11-22 2007-08-21 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Rage-related methods for treating inflammation
US6245318B1 (en) 1997-05-27 2001-06-12 Mallinckrodt Inc. Selectively binding ultrasound contrast agents
US7101838B2 (en) 1997-08-05 2006-09-05 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Method to prevent accelerated atherosclerosis using (sRAGE) soluble receptor for advanced glycation endproducts
CN1270637A (zh) 1997-08-08 2000-10-18 华盛顿大学 新的衰老因子基因p23的分离
US6380165B1 (en) 1997-09-19 2002-04-30 The Picower Institute For Medical Research Immunological advanced glycation endproduct crosslink
US6896659B2 (en) 1998-02-06 2005-05-24 Point Biomedical Corporation Method for ultrasound triggered drug delivery using hollow microbubbles with controlled fragility
JP4016304B2 (ja) 1998-02-26 2007-12-05 日本油脂株式会社 モノクローナル抗体、ハイブリッド細胞、およびモノクローナル抗体の製造方法
AU4556699A (en) 1998-06-09 1999-12-30 Alteon Inc. Monoclonal antibodies specific for guanidino group-derived advanced glycosylation endproducts in biological samples
AU765719B2 (en) 1998-10-06 2003-09-25 Trustees Of Columbia University In The City Of New York, The Extracellular novel rage binding protein (EN-RAGE) and uses thereof
US6309355B1 (en) 1998-12-22 2001-10-30 The Regents Of The University Of Michigan Method and assembly for performing ultrasound surgery using cavitation
DK1159003T3 (da) 1999-03-02 2011-02-07 Centocor Inc Anti-tnfalfa-antistoffer til terapi af steroid-resistent astma
US6067859A (en) 1999-03-04 2000-05-30 The Board Of Regents, The University Of Texas System Optical stretcher
AR024464A1 (es) 1999-06-25 2002-10-02 Genentech Inc Anticuerpos anti-erbb2 humanizados.
JP2003507013A (ja) 1999-08-13 2003-02-25 ザ・トラスティーズ・オブ・コランビア・ユニバーシティー・イン・ザ・シティー・オブ・ニューヨーク βシートフィブリルのＲＡＧＥへの結合を阻害する方法及びその結果
EP1219639A4 (en) 1999-09-08 2009-03-25 Toray Industries CIPO - Patent
US6853864B2 (en) 2000-02-02 2005-02-08 Catholic University Of America, The Use of electromagnetic fields in cancer and other therapies
JP2003531588A (ja) 2000-04-11 2003-10-28 ジェネンテック・インコーポレーテッド 多価抗体とその用途
EP1283728A2 (en) 2000-05-23 2003-02-19 Amersham Health AS Contrast agents
NO312338B1 (no) 2000-08-25 2002-04-29 Gunnar Myhr Anordning for selektiv celle- eller virusödeleggelse hos en levende organisme
US6946292B2 (en) 2000-10-06 2005-09-20 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Cells producing antibody compositions with increased antibody dependent cytotoxic activity
CN2445326Y (zh) 2000-10-09 2001-08-29 刘永详 测定被糖化蛋白的免疫分析装置
US6676963B1 (en) 2000-10-27 2004-01-13 Barnes-Jewish Hospital Ligand-targeted emulsions carrying bioactive agents
US6821274B2 (en) 2001-03-07 2004-11-23 Gendel Ltd. Ultrasound therapy for selective cell ablation
US7481781B2 (en) 2000-11-17 2009-01-27 Gendel Limited Ultrasound therapy
US7347855B2 (en) 2001-10-29 2008-03-25 Ultrashape Ltd. Non-invasive ultrasonic body contouring
KR100948543B1 (ko) 2001-01-03 2010-03-18 울트라쉐이프 엘티디 비 침투 초음파를 이용한 신체 다듬기
DE60202008T2 (de) 2001-03-22 2005-12-01 Roche Diagnostics Gmbh Verfahren zum Auffinden von Reagenzien und Festphasenkomponenten in spezifischen Bindungsassays, frei von fortgeschrittenen Glykosylierungsendprodukten
US20040210042A1 (en) 2001-07-19 2004-10-21 Tsuchida Jun-Ichi Polypeptides relating to signal transfer of advanced glycation end product receptor
MY139983A (en) 2002-03-12 2009-11-30 Janssen Alzheimer Immunotherap Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide
JP4468810B2 (ja) 2002-07-24 2010-05-26 キューエルティー インコーポレーティッド ピラゾリルベンゾチアゾール誘導体および治療薬としてのそれらの使用法
EP1575513A4 (en) 2002-08-16 2007-04-04 Wyeth Corp COMPOSITIONS AND METHODS FOR TREATING RAGE-ASSOCIATED DISEASES
US20070128117A1 (en) 2003-02-04 2007-06-07 Bracco International B.V. Ultrasound contrast agents and process for the preparation thereof
AU2004215125B2 (en) 2003-02-26 2011-01-06 Institute For Research In Biomedicine Monoclonal antibody production by EBV transformation of B cells
WO2004079368A2 (en) 2003-03-08 2004-09-16 Auvation Ltd Markers for colorectal cancer
JP2007500521A (ja) 2003-07-31 2007-01-18 ウッドウェルディング・アクチェンゲゼルシャフト 傷口面に組織再生を促進する方法と装置
US7358226B2 (en) 2003-08-27 2008-04-15 The Regents Of The University Of California Ultrasonic concentration of drug delivery capsules
DE602005021057D1 (de) 2004-01-20 2010-06-17 Toronto E Hochfrequenz-ultraschall-darstellung mit kontrastmitteln
KR20070004730A (ko) 2004-02-17 2007-01-09 다이나미스 테라퓨틱스, 인코포레이티드 프룩토스아민 3 키나아제 및 콜라겐 및 엘라스틴의 형성
EP1771565B1 (en) 2004-07-20 2012-09-05 The Feinstein Institute for Medical Research Rage protein derivatives
GEP20105110B (en) 2004-08-03 2010-11-10 Transtech Pharma Inc Rage fusion proteins and their use
GB0422525D0 (en) 2004-10-11 2004-11-10 Luebcke Peter Dermatological compositions and methods
GT200600031A (es) 2005-01-28 2006-08-29 Formulacion anticuerpo anti a beta
WO2006094951A1 (en) 2005-03-03 2006-09-14 Bracco Research Sa Medical imaging system based on a targeted contrast agent
US20060241524A1 (en) 2005-03-11 2006-10-26 Qi Yu Intravascular ultrasound catheter device and method for ablating atheroma
JP2006249015A (ja) 2005-03-11 2006-09-21 Mochida Pharmaceut Co Ltd 細胞老化抑制剤
US20080268477A1 (en) * 2005-04-05 2008-10-30 Jms Co., Ltd. Antibody Reactive Specifically to Age Derived from 3,4-Dge
US20070225242A1 (en) 2005-06-21 2007-09-27 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Method and composition for treating and preventing tumor metastasis in vivo
US7612181B2 (en) 2005-08-19 2009-11-03 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof
US20070059247A1 (en) 2005-08-30 2007-03-15 Lindner Jonathan R Deposit contrast agents and related methods thereof
US20070065415A1 (en) 2005-09-16 2007-03-22 Kleinsek Donald A Compositions and methods for the augmentation and repair of defects in tissue
US20070083120A1 (en) 2005-09-22 2007-04-12 Cain Charles A Pulsed cavitational ultrasound therapy
US20070078290A1 (en) 2005-09-30 2007-04-05 Esenaliev Rinat O Ultrasound-based treatment methods for therapeutic treatment of skin and subcutaneous tissues
US7766833B2 (en) 2005-11-23 2010-08-03 General Electric Company Ablation array having independently activated ablation elements
JP4779115B2 (ja) 2005-12-16 2011-09-28 国立大学法人東北大学 早期肺癌の術後予後検査方法
WO2007098186A2 (en) 2006-02-22 2007-08-30 Novavax, Inc. Adjuvant and vaccine compositions
SI2676967T1 (sl) 2006-02-28 2020-01-31 Biogen Ma Inc. Metode zdravljenja vnetne in avtoimunske bolezni z natalizumabom
WO2008144753A2 (en) 2007-05-21 2008-11-27 Alder Biopharmaceuticals, Inc. Antibodies to tnf alpha and use thereof
WO2008154638A2 (en) 2007-06-12 2008-12-18 Board Of Regents, The University Of Texas System Antagonists of the receptor for advanced glycation end-products (rage)
ES2564634T3 (es) 2007-06-14 2016-03-28 Galactica Pharmaceuticals, Inc. Proteínas de fusión de RAGE
JP2007277263A (ja) 2007-07-13 2007-10-25 Transgenic Inc カルボキシメチル化タンパク質に対する抗体
WO2009085216A2 (en) 2007-12-20 2009-07-09 Squicor Compositions and methods for detecting or elimninating senescent cells to diagnose or treat disease
US7751057B2 (en) 2008-01-18 2010-07-06 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Magnetomotive optical coherence tomography
WO2009102791A1 (en) 2008-02-12 2009-08-20 Tk Holdings Inc. Airbag
DE102008009461A1 (de) 2008-02-15 2009-08-20 Beiersdorf Ag Verfahren zur Reduzierung der Zeichen der Hautalterung
BRPI0911758A8 (pt) 2008-05-09 2017-10-10 Abbott Lab Anticorpos para receptor de produtos finais de glicação avançada (rage) e utilizações dos mesmos
KR101592156B1 (ko) 2008-05-23 2016-02-04 시와 코퍼레이션 재생을 촉진하는 방법, 조성물 및 장치
AU2014202548A1 (en) 2008-05-23 2014-05-29 Siwa Corporation Methods, compositions and apparatuses for facilitating regeneration
AU2016204196A1 (en) 2008-05-23 2016-07-14 Siwa Corporation Methods, compositions and apparatuses for facilitating regeneration
JP5229473B2 (ja) 2008-06-04 2013-07-03 財団法人ヒューマンサイエンス振興財団 超音波医療装置
US20110319499A1 (en) 2008-06-30 2011-12-29 The Johns Hopkins University Methods for the Detection of Advanced Glycation Endproducts and Markers for Disease
EP2399934B1 (en) * 2009-02-20 2017-09-06 The University of Tokyo Novel monoclonal antibody, and use thereof
CA2761901C (en) 2009-05-12 2019-08-13 The Administrators Of The Tulane Educational Fund Methods of inhibiting the ghrelin/growth hormone secretatogue receptor pathway and uses thereof
WO2011035104A1 (en) 2009-09-17 2011-03-24 Sanuwave, Inc. Methods and devices for cleaning and sterilization with shock waves
US20110070227A1 (en) 2009-09-18 2011-03-24 Anna-Marie Novotney-Barry Treatment of Autoimmune and Inflammatory Diseases
EP2493486A1 (en) 2009-10-30 2012-09-05 University Of Arkansas For Medical Science Use of autologous effector cells and antibodies for treatment of multiple myeloma
WO2011101039A1 (en) 2010-02-22 2011-08-25 Universite Pierre Et Marie Curie (Paris 6) Apparatus for the treatment of brain affections and method implementing thereof
US9662347B2 (en) 2010-05-11 2017-05-30 Gachon University Of Industry-Academic Cooperation Foundation Method for inhibiting the induction of cell death by inhibiting the synthesis or secretion of age-albumin in cells of the mononuclear phagocyte system
EP3511017A1 (en) 2010-09-27 2019-07-17 Siwa Corporation Selective removal of age-modified cells for treatment of atherosclerosis
US8721571B2 (en) 2010-11-22 2014-05-13 Siwa Corporation Selective removal of cells having accumulated agents
WO2012135616A1 (en) 2011-03-31 2012-10-04 Siwa Corporation Vaccination against advanced glycation end-products
UA112434C2 (uk) 2011-05-27 2016-09-12 Ґлаксо Ґруп Лімітед Антигензв'язувальний білок, який специфічно зв'язується з всма
WO2013009784A2 (en) 2011-07-10 2013-01-17 Guided Therapy Systems, Llc Systems and method for accelerating healing of implanted material and/or native tissue
US8954155B2 (en) 2011-09-19 2015-02-10 Biotalk Technologies Inc Apparatus and method for rejuvenating skin
CN103857697A (zh) 2011-09-23 2014-06-11 伍兹堡尤利乌斯－马克西米利安斯大学 形成金黄色葡萄球菌表位结合位点的肽或肽的组合
WO2013070468A1 (en) 2011-11-08 2013-05-16 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Glypican-3-specific antibody and uses thereof
KR101939401B1 (ko) 2011-11-10 2019-01-16 가천대학교 산학협력단 단핵식세포계 세포의 ａｇｅ-알부민 합성 또는 분비 저해제를 유효성분으로 포함하는 허혈성 심장질환 예방 또는 치료용 조성물
CA2862319C (en) * 2012-02-17 2021-11-30 Seattle Genetics, Inc. Antibodies to integrin .alpha.v.beta.6 and use of same to treat cancer
TWI557112B (zh) 2012-03-05 2016-11-11 百靈佳殷格翰國際股份有限公司 β－分泌酶抑制劑
US20130288980A1 (en) 2012-04-02 2013-10-31 Buck Institute For Research On Aging Targeting senescent and cancer cells for selective killing by interference with foxo4
US10379026B2 (en) 2012-08-29 2019-08-13 Inguran, Llc Cell processing using magnetic particles
KR101520336B1 (ko) 2012-11-30 2015-05-14 전남대학교산학협력단 패혈증 비브리오균의 편모 구성성분인 플라젤린과 병원체의 항원 단백을 융합시킨 재조합 단백을 포함하는 노화 예방, 개선 또는 치료용 조성물
EP2742935A1 (en) 2012-12-14 2014-06-18 Tissue Med Biosciences Forschungs- und Entwicklungsgesellschaft mbH SERF2 for the treatment of atrophy and for increasing cell growth
EP2964668B1 (en) 2013-03-06 2019-11-27 Protalix Ltd. Tnf alpha inhibitor polypeptides, polynucleotides encoding same, cells expressing same and methods of producing same
US20140257262A1 (en) 2013-03-11 2014-09-11 Alexandre Carpentier Interstitial ultrasonic disposable applicator and method for tissue thermal conformal volume ablation and monitoring the same
SI2970487T1 (sl) 2013-03-12 2020-07-31 Molecular Templates, Inc. Citotoksični proteini, ki obsegajo celico-ciljajoče vezavne regije in podenotske regije Shiga toksina A, za selektivno ubijanje specifičnih celičnih tipov
JP2015076575A (ja) 2013-10-11 2015-04-20 株式会社日本自動車部品総合研究所 冷却器
CN107106700B (zh) * 2013-12-16 2020-10-30 基因泰克公司 肽模拟化合物及其抗体-药物缀合物
JP6793902B2 (ja) 2013-12-20 2020-12-02 ノバルティス アーゲー 調節可能キメラ抗原受容体
AU2015206515B2 (en) 2014-01-15 2019-12-12 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Cartilage targeting agents and their use
US10099027B2 (en) 2014-01-24 2018-10-16 Cole Research & Design Oral suction device
WO2015116735A1 (en) 2014-01-28 2015-08-06 Mayo Foundation For Medical Education And Research Methods and combinations for killing senescent cells and for treating senescence-associated diseases and disorders
EP3669881B1 (en) 2014-01-28 2022-03-30 Buck Institute for Research on Aging Compositions for use in the treatment of senescence-assiocated eye disease and disorders
DE102014107077B3 (de) 2014-05-20 2015-08-13 Ecs Engineered Control Systems Ag Schaltvorrichtung
US10238742B2 (en) 2014-06-25 2019-03-26 Yale University Cell penetrating nucleolytic antibody based cancer therapy
EP3207062A1 (en) 2014-10-16 2017-08-23 The Broad Institute Inc. Compositions and methods for identifying and treating cachexia or pre-cachexia
JP6385806B2 (ja) 2014-11-21 2018-09-05 株式会社大林組 自由面形成工法
US9993535B2 (en) 2014-12-18 2018-06-12 Siwa Corporation Method and composition for treating sarcopenia
WO2017018185A1 (ja) 2015-07-24 2017-02-02 ソニー株式会社 情報処理装置および方法、並びに、プログラム
US10889634B2 (en) 2015-10-13 2021-01-12 Siwa Corporation Anti-age antibodies and methods of use thereof
EP3362483A1 (en) 2015-10-13 2018-08-22 Siwa Corporation Anti-age antibodies and methods of use thereof
KR102503910B1 (ko) 2015-11-09 2023-02-27 삼성전자주식회사 기립 보조 방법 및 장치
MX2018009988A (es) 2016-02-19 2018-12-17 Siwa Corp Metodo y composicion para tratar el cancer, destruir las celulas cancerosas metastasicas y evitar la metastasis del cancer usando anticuerpo para productos finales de glicacion avanzada (age).
US10981021B2 (en) 2016-03-11 2021-04-20 Carthera Method for transiently disrupting a region of the blood-brain barrier of a human
KR20180133452A (ko) * 2016-04-15 2018-12-14 시와 코퍼레이션 신경퇴행성 질환을 치료하기 위한 항-노화 항체
JP2019518763A (ja) 2016-06-23 2019-07-04 シワ コーポレーション 様々な疾患及び障害の治療において使用するためのワクチン
RU2617313C1 (ru) 2016-07-18 2017-04-24 Государственное автономное учреждение здравоохранения Свердловской области "Центр специализированных видов медицинской помощи "Институт медицинских клеточных технологий" Способ определения биологического возраста у мужчин
US10925937B1 (en) 2017-01-06 2021-02-23 Siwa Corporation Vaccines for use in treating juvenile disorders associated with inflammation
US10995151B1 (en) 2017-01-06 2021-05-04 Siwa Corporation Methods and compositions for treating disease-related cachexia
US10858449B1 (en) 2017-01-06 2020-12-08 Siwa Corporation Methods and compositions for treating osteoarthritis
US10961321B1 (en) 2017-01-06 2021-03-30 Siwa Corporation Methods and compositions for treating pain associated with inflammation
JP2020516648A (ja) * 2017-04-13 2020-06-11 シワ コーポレーション ヒト化モノクローナル終末糖化産物抗体
KR20200003067A (ko) 2017-05-04 2020-01-08 시와 코퍼레이션 진단용 최종 당화 산물 항체
US20220175916A1 (en) 2018-07-23 2022-06-09 Siwa Corporation Methods and compositions for treating chronic effects of radiation and chemical exposure
CA3108885A1 (en) 2018-08-14 2020-02-20 Imel Biotherapeutics, Inc. Methods and compositions for treating mitochondrial disease or disorders and heteroplasmy
WO2020041625A1 (en) 2018-08-23 2020-02-27 Siwa Corporation Anti carboxymethyl lysine antibodies and ultrasound for removing age-modified cells
JP7372644B2 (ja) 2018-12-27 2023-11-01 アクア株式会社 冷蔵庫
US20230181730A1 (en) 2020-05-01 2023-06-15 Siwa Corporation Methods of treating infections
WO2021247397A2 (en) 2020-06-04 2021-12-09 Siwa Corporation Methods and compositions for enhancing the immune system
WO2022093195A1 (en) 2020-10-27 2022-05-05 Siwa Corporation Methods and compositions for treating osteoarthritis using anti-age antibodies or age antigens

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2002526758A (ja) * 1998-10-05 2002-08-20 ザ・トラスティーズ・オブ・コランビア・ユニバーシティー・イン・ザ・シティー・オブ・ニューヨーク 或る化合物がペプチドと後生的糖化最終産物受容体（ｒａｇｅ）の相互作用を阻害することが可能かどうかを決定する方法。
JP2003160599A (ja) * 2001-11-22 2003-06-03 Transgenic Inc カルボキシメチル化ペプチドに対する抗体
WO2016044252A2 (en) * 2014-09-19 2016-03-24 Siwa Corporation Anti-age antibodies for treating inflammation and auto-immune disorders
US20160215043A1 (en) * 2014-12-18 2016-07-28 Siwa Corporation Product and method for treating sarcopenia

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
BIOCHIMICA ET BIOPHYSICA ACTA, vol. VOL:1636, NR:2-3, JPN5020005679, 22 March 2004 (2004-03-22), pages 82 - 89, ISSN: 0004704909 *
JOURNAL OF IMMUNOLOGICAL METHODS, vol. VOL:215, NR:1-2, JPN5020005681, June 1998 (1998-06-01), pages 95 - 104, ISSN: 0004704910 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2022163179A (ja) * 2017-04-13 2022-10-25 シワ コーポレーション ヒト化モノクローナル終末糖化産物抗体

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