JP2014503187A5

JP2014503187A5 -

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Publication number: JP2014503187A5
Application number: JP2013535314A
Authority: JP
Filing date: 2011-10-31
Publication date: 2014-12-18

Claims

対象由来の体液中のヘプシジンレベルを低下させる方法であって、
ａ）ヘプシジンと結合可能な核酸分子を準備することと、
ｂ）ヘプシジンと前記核酸分子との結合が可能な条件下で前記核酸分子と体液とを接触させて、ヘプシジンと前記核酸分子との複合体を形成させることと、
ｃ）前記体液から前記複合体を除去すること、または前記体液から前記ヘプシジンを除去することと
を含む方法。
前記核酸分子が、５’→３’方向に第一の末端ヌクレオチドストレッチと、中央部のヌクレオチドストレッチと、第二の末端ヌクレオチドストレッチとを含み、または第二の末端ヌクレオチドストレッチと、中央部のヌクレオチドストレッチと、第一の末端ヌクレオチドストレッチとを含み、前記中央部のヌクレオチドストレッチが３２〜４０個のヌクレオチド、好ましくは３２〜３５個のヌクレオチドを含む、請求項１に記載の方法。
前記中央部のヌクレオチドストレッチが、ヌクレオチド配列５’ＲＫＡＵＧＧＧＡＫＵＡＡＧＵＡＡＡＵＧＡＧＧＲＧＵＷＧＧＡＧＧＡＡＲ３’（配列番号１８２）または５’ＲＫＡＵＧＧＧＡＫＡＡＧＵＡＡＡＵＧＡＧＧＲＧＵＷＧＧＡＧＧＡＡＲ３’（配列番号１８３）を含む、請求項２に記載の方法。
前記第一の末端ヌクレオチドストレッチが５〜８個のヌクレオチドを含み、前記第二の末端ヌクレオチドストレッチが５〜８個のヌクレオチドを含む、請求項３に記載の方法。
前記第一の末端ヌクレオチドストレッチがヌクレオチド配列５’Ｘ_１Ｘ_２Ｘ_３ＳＢＳＢＣ３’を含み、前記第二の末端ヌクレオチドストレッチがヌクレオチド配列５’ＧＶＢＶＹＸ_４Ｘ_５Ｘ_６３’を含む、請求項３または４に記載の方法であって、
Ｘ_１がＡであるかまたは存在せず、Ｘ_２がＧであるかまたは存在せず、Ｘ_３がＢであるかまたは存在せず、Ｘ_４がＳであるかまたは存在せず、Ｘ_５がＣであるかまたは存在せず、Ｘ_６がＵであるかまたは存在しない方法。
前記核酸が、配列番号１１５〜１１９、配列番号１２１、配列番号１４２、配列番号１４４、配列番号１４６、配列番号１４８、配列番号１５１、配列番号１５２、配列番号１７５または配列番号１７６のいずれか１つによる核酸配列を含む、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
前記中央部のヌクレオチドストレッチが、ヌクレオチド配列５’ＧＲＣＲＧＣＣＧＧＶＧＧＡＣＡＣＣＡＵＡＵＡＣＡＧＡＣＵＡＣＫＡＵＡ３’（配列番号１８５）または５’ＧＲＣＲＧＣＣＧＧＶＡＧＧＡＣＡＣＣＡＵＡＵＡＣＡＧＡＣＵＡＣＫＡＵＡ３’（配列番号１８６）を含む、請求項２に記載の方法。
前記第一の末端ヌクレオチドストレッチが４〜７個のヌクレオチドを含み、前記第二の末端ヌクレオチドストレッチが４〜７個のヌクレオチドを含む、請求項７に記載の方法。
前記第一の末端ヌクレオチドストレッチがヌクレオチド配列５’Ｘ_１Ｘ_２Ｘ_３ＳＢＳＮ３’を含み、前記第二の末端ヌクレオチドストレッチがヌクレオチド配列５’ＮＳＶＳＸ_４Ｘ_５Ｘ_６３’を含む、請求項７または８に記載の方法であって、
Ｘ_１がＡであるかまたは存在せず、Ｘ_２がＧであるかまたは存在せず、Ｘ_３がＲであるかまたは存在せず、Ｘ_４がＹであるかまたは存在せず、Ｘ_５がＣであるかまたは存在せず、Ｘ_６がＵであるかまたは存在しない方法。
前記核酸分子が、配列番号１２２〜１２６、配列番号１５４、配列番号１５９、配列番号１６３または配列番号１７４のいずれか１つによる核酸配列を含む、請求項１〜２および７〜９のいずれか１項に記載の方法。
前記中央部のヌクレオチドストレッチが、５’→３’方向にボックスＡと連結ヌクレオチドストレッチとボックスＢとを含むか、または５’→３’方向にボックスＢと連結ヌクレオチドストレッチとボックスＡとを含む、請求項２に記載の方法であって、
前記ボックスＡがヌクレオチド配列５’ＷＡＡＡＧＵＷＧＡＲ３’（配列番号１８８）を含み、前記連結ヌクレオチドストレッチが１０〜１８個のヌクレオチドを含み、前記ボックスＢがヌクレオチド配列５’ＲＧＭＧＵＧＷＫＡＧＵＫＣ３’（配列番号１８９）を含む方法。
前記連結ヌクレオチドストレッチが、５’→３’方向に第一の連結ヌクレオチドサブストレッチと、第二の連結ヌクレオチドサブストレッチと、第三の連結ヌクレオチドサブストレッチとを含み、前記第一の連結ヌクレオチドサブストレッチと前記第三の連結ヌクレオチドサブストレッチが、それぞれ互いに独立して３〜６個のヌクレオチドを含み、前記第二の連結ヌクレオチドサブストレッチが３〜５個のヌクレオチドを含む、請求項１１に記載の方法。
請求項１２に記載の方法であって、
ａ）前記第一の連結ヌクレオチドサブストレッチが、５’ＧＧＡＣ３’、５’ＧＧＡＵ３’および５’ＧＧＡ３’の群から選択されるヌクレオチド配列を含み、かつ前記第三の連結ヌクレオチドサブストレッチがヌクレオチド配列５’ＧＵＣＣ３’を含むか、
ｂ）前記第一の連結ヌクレオチドサブストレッチがヌクレオチド配列５’ＧＣＡＧ３’を含み、かつ前記第三の連結ヌクレオチドサブストレッチがヌクレオチド配列５’ＣＵＧＣ３’を含むか、
ｃ）前記第一の連結ヌクレオチドサブストレッチがヌクレオチド配列５’ＧＧＧＣ３’を含み、かつ前記第三の連結ヌクレオチドサブストレッチがヌクレオチド配列５’ＧＣＣＣ３’を含むか、
ｄ）前記第一の連結ヌクレオチドサブストレッチがヌクレオチド配列５’ＧＡＣ３’を含み、かつ前記第三の連結ヌクレオチドサブストレッチがヌクレオチド配列５’ＧＵＣ３’を含むか、
ｅ）前記第一の連結ヌクレオチドサブストレッチがヌクレオチド配列５’ＡＣＵＵＧＵ３’を含み、かつ前記第三の連結ヌクレオチドサブストレッチが、５’ＧＣＡＡＧＵ３’および５’ＧＣＡＡＧＣ３’の群から選択されるヌクレオチド配列を含むか、または
ｆ）前記第一の連結ヌクレオチドサブストレッチがヌクレオチド配列５’ＵＣＣＡＧ３’を含み、かつ前記第三の連結ヌクレオチドサブストレッチがヌクレオチド配列５’ＣＵＧＧＡ３’を含み、
好ましくは前記第一の連結ヌクレオチドサブストレッチがヌクレオチド配列５’ＧＡＣ３’を含み、かつ前記第三の連結ヌクレオチドサブストレッチがヌクレオチド配列５’ＧＵＣ３’を含む方法。
前記第二の連結ヌクレオチドサブストレッチが、５’ＶＢＡＡＷ３’、５’ＡＡＵＷ３’および５’ＮＢＷ３’の群から選択されるヌクレオチド配列を含む、請求項１２または１３に記載の方法。
前記第一の末端ヌクレオチドストレッチが４〜７個のヌクレオチドを含み、前記第二の末端ヌクレオチドストレッチが４〜７個のヌクレオチドを含む、請求項１１〜１４のいずれか１項に記載の方法。
前記第一の末端ヌクレオチドストレッチがヌクレオチド配列５’Ｘ_１Ｘ_２Ｘ_３ＢＫＢＫ３’を含み、前記第二の末端ヌクレオチドストレッチがヌクレオチド配列５’ＭＶＶＶＸ_４Ｘ_５Ｘ_６３’を含む、請求項１１〜１５のいずれか１項に記載の方法であって、
Ｘ_１がＧであるかまたは存在せず、Ｘ_２がＳであるかまたは存在せず、Ｘ_３がＶであるかまたは存在せず、Ｘ_４がＢであるかまたは存在せず、Ｘ_５がＳであるかまたは存在せず、Ｘ_６がＣであるかまたは存在しない方法。
前記核酸分子が、配列番号２９、配列番号３３、配列番号３４、配列番号３９〜４１、配列番号４３、配列番号４６、配列番号１３７〜１４１または配列番号１７３のいずれか１つによる核酸配列を含む、請求項１〜２および１１〜１６のいずれか１項に記載の方法。
前記核酸分子が、配列番号１２７〜１３１のいずれか１つによる核酸配列を含む、請求項１に記載の方法。
前記核酸分子が修飾基を含み、好ましくは、前記修飾基を含む前記核酸分子の生物体からの排泄速度が、ヘプシジンと結合可能で前記修飾基を含まない核酸分子に比べて減少している、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の方法。
前記核酸分子が修飾基を含み、好ましくは、前記修飾基を含む前記核酸分子の生物体内での滞留時間が、ヘプシジンと結合可能で前記修飾基を含まない核酸分子に比べて増加している、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の方法。
前記修飾基が、生分解性および非生分解性の修飾を含む群から選択され、好ましくは前記修飾基が、直鎖ポリ（エチレン）グリコール、分岐ポリ（エチレン）グリコール、ヒドロキシエチルデンプン、ペプチド、タンパク質、多糖、ステロール、ポリオキシプロピレン、ポリオキシアミダート、ポリ（２−ヒドロキシエチル）−Ｌ−グルタミンおよびポリエチレングリコールを含む群から選択される、請求項１９または２０に記載の方法。
前記核酸分子がＬ−核酸である、請求項１〜２１のいずれか１項に記載の方法。
前記核酸分子が担体に固定化されている、請求項１〜２２のいずれか１項に記載の方法。
前記体液が前記体液と透析液とを隔てる半透膜と接触し、ヘプシジンおよび／またはヘプシジンと前記核酸分子との複合体が前記半透膜を介して前記体液から前記透析液に拡散することにより、前記体液中のヘプシジンレベルが低下する、請求項１〜２２のいずれか１項に記載の方法。
担体に固定化された核酸分子を調製する方法であって、
前記核酸分子がヘプシジンと結合可能であり、
ヘプシジンと結合可能な核酸分子と、活性化された担体とを反応させて、前記核酸分子の３’末端、５’末端またはその両方と前記担体との間で結合を形成させることを含む方法。
担体に固定化された核酸分子であって、ヘプシジンと結合可能な核酸分子。
請求項１〜２４のいずれか１項に記載の方法で使用する、医療装置。
対象、好ましくは哺乳動物、より好ましくはヒトの体液中のヘプシジンレベルを低下させる方法で使用する核酸分子であって、前記核酸が、ヘプシジンと結合可能な核酸分子である核酸分子。
対象の体液からヘプシジンを除去する方法で使用する核酸分子であって、請求項１〜２４のいずれか１項に定義される核酸分子である核酸分子。
貧血患者を治療する方法で使用する核酸分子であって、請求項１〜２４のいずれか１項に定義される核酸分子である核酸分子。