JP2013540079A - 乳酸菌及び乾燥剤を含む産物 - Google Patents
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Abstract
本発明は、非水液中に懸濁された水分及び酸化に感受性がある産物、並びに乾燥剤ポリマーストリップ又は乾燥剤フィルムを含む保存容器を提供する。水分及び酸化に感受性がある産物は、ラクトバチルス・ロイテリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｒｅｕｔｅｒｉ）などの乳酸産生菌であってもよい。さらに、特異的吸水技術を使用することにより、油中に配合したプロバイオティクス乳酸産生菌の貯蔵寿命を延長する方法を提供する。
Description
本発明は一般に、水分及び酸化に感受性がある産物のパッケージングに関するものであり、したがってこのような産物の貯蔵寿命を延長する。より具体的には本発明は、特異的吸水及び酸素除去技術を使用することにより、油と共に配合してプロバイオティクス乳酸産生菌の貯蔵寿命を延長する方法に関する。
ＦＡＯ／ＷＨＯにより現在採用されている定義によれば、プロバイオティクスは、「適量投与すると宿主に健康利点を与える生きた微生物」である。現在、いくつかの異なる細菌、例えばラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）及びビフィドバクテリア（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉａ）の株などの乳酸産生菌が、プロバイオティクスとして使用されている。乳酸産生菌はヒト又は動物の健康に対するその有益な影響でのみ使用される訳ではなく、それらは発酵プロセス用に食品産業においても広く使用される。これらの目的で市販される微生物は、低含水率の環境で凍結乾燥粉末として製剤化されることが多い。
このような凍結乾燥微生物製剤の施用において遭遇する一般的な問題は、利用可能な含有遊離水が細胞に有害であるため、細胞の保存安定性が限られることである。経時的に微生物は生存能力が低くなり、この活性喪失を埋め合わせるのに、これを可能にする十分な生存能力の微生物が存在する場合、高用量が必要となる。
保存の目的で、水分及び酸素への凍結乾燥乳酸菌の露出を低下させるためのパッケージング材料として、コンパートメント外側の一表面上にプラスチック層を有するホイル、例えばポリエチレンラミネートアルミ箔などを利用することが一般に知られている。バリア材料がパッケージを介した水分子の透過を制限するのに有効であるときでさえ、パッケージの幾つかの特徴が、例えばヒートシールパッケージの端に沿った、水分子の透過を依然として可能にし得る。さらにパッケージを充填する方法自体が、パッケージング内の水の捕捉に貢献する可能性がある。
パッケージ内に特に低いレベルの水分を維持するための１つの解決策は、パッケージの内部空間に乾燥剤材料のサシェを組み入れて、パッケージの頭隙から水分を除去することである。乾燥剤材料は、パッケージ内の水分量を低下させることが一般に知られている。典型的な乾燥剤材料は、材料の孔空間内で水分子と結合する分子ふるいなどの、「物理的」乾燥剤材料である。別のタイプの乾燥剤材料は、塩などの水和物形成剤、例えば塩化アンモニウムなどを含む。一般的な塩（ＮａＣｌ）又は臭化カリウム（ＫＢｒ）などの、水和物を形成しない乾燥剤材料を使用することもできる。
凍結乾燥乳酸菌培養物を保護するための別の方法は、油系製剤を使用することである。乳酸菌細胞は、細菌の改善型安定性油系製剤において使用されている。例えば、Ｇｅｈｒｍａｎらによる米国特許第４，５１８，６９６号を参照。米国特許出願公開第２００５０２７１６４１号の発明者らは、細菌培養物の安定性を増大するため製剤化前に油を真空乾燥するステップを加えることによりさらに前進し、「Ｒｅｕｔｅｒｉ Ｄｒｏｐｓ」と呼ばれる産物を製造した。この産物は、優れた安定性及び貯蔵寿命のため作製されたラクトバチルス・ロイテリ（Ｌ．ｒｅｕｔｅｒｉ）を含有する油系製剤である。この製造プロセスの独自の特徴は、大部分の水を除去するための油の乾燥ステップである。米国特許出願公開第２００５０２７１６４１号で使用された油は、純粋な食用植物油、好ましくはヒマワリ油である。純粋なヒマワリ油などの油は多量の水を含有するとは予想されないが、それを真空下に置くことにより油を乾燥させる処理ステップの予期せぬ影響は、製剤におけるラクトバチルスの有意に増大した安定性である。
しかしながら、真空により処理された可能性がある又は可能性がない油中に配合した乳酸菌の、安定性に関する問題が依然として時折存在する。真空により全ての水分を除去することは可能でない可能性があり、及び／又は、異なる容器内でのパッケージング又は保存中に、新たな水分が油系製剤に入る可能性があるからである。
本明細書に記載する本発明は、例えば米国特許出願公開第２００５０２７１６４１号に記載されている、乳酸菌を含有する油系製剤と、特許出願ＥＰ１１８７８７４、特許ＥＰ１１２１１９０及び米国特許第６，１７４，９５２号に記載されている吸水性ポリマー材料、又は米国特許第８，００３，１７９号に記載されている、ホイルの層内に化学的乾燥剤材料が組み入れられている多層フレキシブルプラスチックポリマー性パッケージングホイルを組み合わせることによって、凍結乾燥乳酸菌を保存するための、改善されたより効率的な方法を幸い提供する。
前述の特許文書中のポリマー材料の記載は、相互接続チャネルを有する修飾型ポリマーを生成するための方法、及び結果として生じる構造を含む。相互接続チャネルは、ポリマーを介した制御された透過通路として働く。親水性剤は、それがポリマー内に分布するようにポリマーにブレンドする。吸水性材料は、吸水性材料が産物内に分布するようにポリマーにブレンドする。親水性剤が、産物内に運ばれた吸水性材料に望ましい組成物が伝わる通路を産物中に形成するように、産物を凝固させる。前述の特許文書に記載されている凝固産物を使用して、プラグ型インサート及びライナーなどの密閉容器に望ましい形状の物品を形成することができ、又はそれをフィルム、シート、ビーズ若しくはペレットに成形することができる。このような産物の一例は、分子ふるいを有する吸水性フィルムであるＭ−００２６ Ａｃｔｉｖ−Ｓｔｒｉｐ（商標）、（ＣＳＰ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ａｕｂｕｒｎ、ＵＳＡ）である。
しかしながら、本明細書の発明と異なり、前述の特許文書を含めたいかなる従来技術も、化学的乾燥剤材料が組み入れられている特別に調製したポリマーストリップ又はホイルなどの、特異的吸水性材料を使用した、油を含めた非水液からの水分の吸収に言及していない。これとは反対に、この技術がポリマーを介したガスの通過を目的とすることは、例えばＥＰ１１８７８７４から明らかである。
したがって、プロバイオティクス乳酸産生菌培養物の安定性は製剤の水分活性と密接な関係があることは以前から知られており、ラクトバチルスの安定化のため真空下で油を乾燥させることも知られていた。本明細書の発明の本発明者は、驚くべきことに、特異的ポリマー構造中に組み入れられた特異的乾燥剤材料及び油配合ラクトバチルス・ロイテリの使用によって、このような培養物の安定性が相当に改善されたことを示した。
本発明は、水分及び酸化に感受性がある産物のパッケージングに関するものであり、したがってこのような産物の貯蔵寿命を延長する。
本発明の主な目的は、油中に配合した凍結乾燥乳酸菌を保存するための改善法を提供することである。
本発明の目的は、油と配合した凍結乾燥乳酸菌の保存用に、パッケージング中に化学的乾燥剤材料が組み入れられている特別に調製したポリマーストリップ又はホイルなどの、特異的吸水性材料を使用することである。
別の目的は、油と配合した凍結乾燥乳酸菌の保存用に、特異的吸水性材料で内面コーティングされた容器を使用することである。
本発明は、非水液中に懸濁された水分及び酸化に感受性がある産物、並びに乾燥剤ポリマーストリップ又は乾燥剤フィルムを含む保存容器を提供する。
本発明の実施形態では、容器は、前記乾燥剤ポリマーストリップ又は前記乾燥剤フィルムで内面コーティングされている。
本発明の実施形態では、容器中に含まれる乾燥剤ポリマーストリップは、０．６ｍｍ厚及び１５ｍｍ幅などの０．２〜５ｍｍ厚及び５〜２５ｍｍ幅である。
本発明の実施形態では、容器中に含まれる水分及び酸化に感受性がある産物は、ラクトバチルス・ロイテリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｒｅｕｔｅｒｉ）などの乳酸産生菌である。
本発明は、非水液中の水分及び酸化に感受性がある産物の安定性を延長する方法であって、
ａ）感受性産物を油に加えること、及びゆっくり混合して均質懸濁液を形成すること、
ｂ）均質懸濁液を瓶に分配すること、及び
ｃ）前記瓶を密閉する前に瓶中に乾燥剤ポリマーストリップ又は乾燥剤フィルムを配置すること
を含む方法をさらに提供する。
ａ）感受性産物を油に加えること、及びゆっくり混合して均質懸濁液を形成すること、
ｂ）均質懸濁液を瓶に分配すること、及び
ｃ）前記瓶を密閉する前に瓶中に乾燥剤ポリマーストリップ又は乾燥剤フィルムを配置すること
を含む方法をさらに提供する。
実施形態では、本発明は、非水液中の水分及び酸化に感受性がある産物の貯蔵寿命を延長する方法であって、
ａ）中鎖トリグリセリド及びヒマワリ油と二酸化珪素を組み合わせて混合物を形成すること、
ｂ）混合物を均質化すること、
ｃ）乳酸産生菌を混合物に加えること、及び再度ゆっくり混合して均質懸濁液を形成すること、
ｄ）器の中に均質懸濁液を入れること、及び均質懸濁液を窒素で覆うこと、
ｅ）均質懸濁液を瓶に分配すること、並びに
ｆ）前記瓶を密閉する前に瓶中に乾燥剤フィルムストリップを配置すること
を含む方法を提供する。
ａ）中鎖トリグリセリド及びヒマワリ油と二酸化珪素を組み合わせて混合物を形成すること、
ｂ）混合物を均質化すること、
ｃ）乳酸産生菌を混合物に加えること、及び再度ゆっくり混合して均質懸濁液を形成すること、
ｄ）器の中に均質懸濁液を入れること、及び均質懸濁液を窒素で覆うこと、
ｅ）均質懸濁液を瓶に分配すること、並びに
ｆ）前記瓶を密閉する前に瓶中に乾燥剤フィルムストリップを配置すること
を含む方法を提供する。
前に記載した方法の実施形態では、水分及び酸化に感受性がある産物は乳酸産生菌である。
方法の実施形態では、乳酸産生菌はラクトバチルス・ロイテリを含む。例えば、ラクトバチルス・ロイテリ菌は凍結乾燥粉末形態にある。
方法の実施形態では、瓶中に配置されるストリップは０．６ｍｍ厚及び１５ｍｍ幅などの０．２〜５ｍｍ厚及び５〜２５ｍｍ幅である。
本発明の全般的な目的は、油と配合した凍結乾燥乳酸菌の保存用に、パッケージング中に化学的乾燥剤材料が組み入れられている特別に調製したポリマーストリップ又はホイルなどの、特異的吸水性材料を使用することである。吸水性材料は、それが凍結乾燥乳酸菌を含有する油のみと直接接触し、それによって油から可能な限りの水を吸収することができるように、パッケージングにおいて使用しなければならない。
特異的吸水性材料を使用して、油と配合した凍結乾燥乳酸菌の保存に使用する容器を内面コーティングすることもできる。
本発明の一実施形態は、特異的乾燥剤フィルム（Ｍ−００２６ Ａｃｔｉｖ−Ｓｔｒｉｐ（商標）、ＣＳＰ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ａｕｂｕｒｎ、ＵＳＡ）又は乾燥剤材料が組み入れられているフィルム（米国特許第８，００３，１７９号に記載されている、例えばＡｌｃａｎからのＰＥＴ１２ＰＥ／ＡＬＵ１２／ＰＥ／ＰＥ＋乾燥剤／ＰＥ）を使用することにより、油中に配合したラクトバチルス・ロイテリなどの、水分及び酸化に感受性がある産物の貯蔵寿命を延長する方法である。
本発明の別の実施形態は、特異的乾燥剤フィルム（Ｍ−００２６ Ａｃｔｉｖ−Ｓｔｒｉｐ（商標）、ＣＳＰ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ａｕｂｕｒｎ、ＵＳＡ）又は（米国特許第８，００３，１７９号に記載されている）乾燥剤材料が組み入れられているフィルムを使用することにより、真空乾燥油中に配合したラクトバチルス・ロイテリなどの、水分及び酸化に感受性がある産物の貯蔵寿命を延長する方法である。
安定性試験を実施して、どのようにＣＳＰ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓにより提供された吸水フィルム（Ｍ−００２６ Ａｃｔｉｖ−Ｓｔｒｉｐ（商標）、ＣＳＰ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ａｕｂｕｒｎ、ＵＳＡ）が、油と配合したラクトバチルス・ロイテリの生存能力に影響を与えるか調べた。この安定性試験において水分測定用に使用した試験法は、比色定量カールフィッシャー滴定法による石油製品、潤滑油、及び添加剤における水分測定用の標準的試験法であるＡＳＴＭ Ｄ６３０４−０７である。
（例１−油中に配合したラクトバチルス・ロイテリを含有する凍結乾燥産物の製造）
成分の混合。
１．Ｂｏｌｚ混合機／タンク（Ａｌｆｒｅｄ ＢＯＬＺ Ａｐｐａｒａｔｅｂａｕ ＧｍｂＨ、Ｗａｎｇｅｎ ｉｍ Ａｌｌｇｕ、ドイツ）中で、中鎖トリグリセリド（例えば、Ａｋｏｍｅｄ Ｒ、（Ｋａｒｌｓｈａｍｎｓ ＡＢ、Ｋａｒｌｓｈａｍｎ、スウェーデン））及びヒマワリ油（例えば、Ａｋｏｓｕｎ、Ｋａｒｌｓｈａｍｎｓ）と二酸化珪素（Ｃａｂ−ｏ−ｓｉｌ Ｍ５Ｐ、Ｍ５Ｐ、Ｃａｂｏｔ）を混合する。
２．均質化。サインポンプ及びディスパックス（Ｓｉｎｅ Ｐｕｍｐ、Ａｒｖａｄａ、Ｃｏｌｏ．）をＢｏｌｚミキサーと接続し、混合物を均質化する。
３．ラクトバチルス・ロイテリの添加。約２０ｋｇの乾燥油混合物を５０リットルのステンレス鋼製容器に移す。ラクトバチルス・ロイテリの粉末（好ましくは凍結乾燥、使用するラクトバチルス・ロイテリの量は油中に必要とされる量に応じて変わる。一例は、１ｇ当たり１０１１のＣＦＵを有する０．２ｋｇの培養物の添加である）。それを均質化状態までゆっくり混合する。
４．混合。ラクトバチルス・ロイテリとのプレミックスをＢｏｌｚミキサーに戻す。
５．排出。懸濁液を２００リットルの器の中に排出し、窒素で覆う。５ｍｌのガラス瓶に充填するまで、懸濁液はその器の中に保持する。
６．２０ｍｍのＭ−００２６ Ａｃｔｉｖ−Ｓｔｒｉｐ（商標）、厚さ０．６ｍｍ及び幅１５ｍｍ、（ＣＳＰ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ａｕｂｕｒｎ、ＵＳＡ）をそれぞれの瓶中に加える。
成分の混合。
１．Ｂｏｌｚ混合機／タンク（Ａｌｆｒｅｄ ＢＯＬＺ Ａｐｐａｒａｔｅｂａｕ ＧｍｂＨ、Ｗａｎｇｅｎ ｉｍ Ａｌｌｇｕ、ドイツ）中で、中鎖トリグリセリド（例えば、Ａｋｏｍｅｄ Ｒ、（Ｋａｒｌｓｈａｍｎｓ ＡＢ、Ｋａｒｌｓｈａｍｎ、スウェーデン））及びヒマワリ油（例えば、Ａｋｏｓｕｎ、Ｋａｒｌｓｈａｍｎｓ）と二酸化珪素（Ｃａｂ−ｏ−ｓｉｌ Ｍ５Ｐ、Ｍ５Ｐ、Ｃａｂｏｔ）を混合する。
２．均質化。サインポンプ及びディスパックス（Ｓｉｎｅ Ｐｕｍｐ、Ａｒｖａｄａ、Ｃｏｌｏ．）をＢｏｌｚミキサーと接続し、混合物を均質化する。
３．ラクトバチルス・ロイテリの添加。約２０ｋｇの乾燥油混合物を５０リットルのステンレス鋼製容器に移す。ラクトバチルス・ロイテリの粉末（好ましくは凍結乾燥、使用するラクトバチルス・ロイテリの量は油中に必要とされる量に応じて変わる。一例は、１ｇ当たり１０１１のＣＦＵを有する０．２ｋｇの培養物の添加である）。それを均質化状態までゆっくり混合する。
４．混合。ラクトバチルス・ロイテリとのプレミックスをＢｏｌｚミキサーに戻す。
５．排出。懸濁液を２００リットルの器の中に排出し、窒素で覆う。５ｍｌのガラス瓶に充填するまで、懸濁液はその器の中に保持する。
６．２０ｍｍのＭ−００２６ Ａｃｔｉｖ−Ｓｔｒｉｐ（商標）、厚さ０．６ｍｍ及び幅１５ｍｍ、（ＣＳＰ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ａｕｂｕｒｎ、ＵＳＡ）をそれぞれの瓶中に加える。
（例２−油中に配合した凍結乾燥ラクトバチルス・ロイテリＤＳＭ１７９３８及びＭ−００２６ Ａｃｔｉｖ−Ｓｔｒｉｐｓ（商標）を用いた安定性試験）
例１からの瓶は、ＢｉｏＧａｉａ、Ｌｕｎｄ、スウェーデンにおいて、それぞれ２５℃／６０％相対湿度及び３０℃／６５％相対湿度で耐候性試験器中に保存した。
例１からの瓶は、ＢｉｏＧａｉａ、Ｌｕｎｄ、スウェーデンにおいて、それぞれ２５℃／６０％相対湿度及び３０℃／６５％相対湿度で耐候性試験器中に保存した。
１つの試験を２００９年１２月１２日に開始し、例１からの瓶中の水分量は乾燥剤ストリップを含まない参照瓶中より著しく低下し、これはより安定性の高い産物と関係があることが明らかに示された。この試験の結果に関しては、図１を参照。
前述のように、ただし別群のラクトバチルス・ロイテリで実施した別の安定性試験は、乾燥剤ストリップを含有する瓶中の水分量が低いことを示す結果を確認する。この試験の結果に関しては、図２を参照。
本発明は、前に記載した好ましい実施形態に限られない。様々な代替形態、変更形態及び均等物を使用することができる。したがって、前述の実施形態は、添付の特許請求の範囲によって定義される本発明の範囲を、制限するものと解釈すべきではない。
Claims (10)
- 非水液中に懸濁された、水分及び酸化に感受性がある産物、並びに乾燥剤ポリマーストリップ又は乾燥剤フィルムを含む保存容器。
- 前記乾燥剤ポリマーストリップ又は前記乾燥剤フィルムで内面コーティングされた、請求項１に記載の容器。
- 前記乾燥剤ポリマーストリップが、０．６ｍｍ厚及び１５ｍｍ幅などの０．２〜５ｍｍ厚及び５〜２５ｍｍ幅である、請求項１又は２に記載の容器。
- 水分及び酸化に感受性がある産物が、ラクトバチルス・ロイテリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｒｅｕｔｅｒｉ）などの乳酸産生菌である、請求項１から３までのいずれか一項に記載の容器。
- 非水液中の水分及び酸化に感受性がある産物の安定性を延長する方法であって、
ａ）感受性産物を油に加えること、及びゆっくり混合して均質懸濁液を形成すること、
ｂ）均質懸濁液を瓶に分配すること、並びに
ｃ）前記瓶を密閉する前に瓶中に乾燥剤ポリマーストリップ又は乾燥剤フィルムを配置すること
を含む、上記方法。 - 非水液中の水分及び酸化に感受性がある産物の貯蔵寿命を延長する方法であって、
ａ）中鎖トリグリセリド及びヒマワリ油と二酸化珪素を組み合わせて混合物を形成すること、
ｂ）混合物を均質化すること、
ｃ）乳酸産生菌を混合物に加えること、及び再度ゆっくり混合して均質懸濁液を形成すること、
ｄ）器の中に均質懸濁液を入れること、及び均質懸濁液を窒素で覆うこと、
ｅ）均質懸濁液を瓶に分配すること、及び
ｆ）前記瓶を密閉する前に瓶中に乾燥剤フィルムストリップを配置すること
を含む、上記方法。 - 水分及び酸化に感受性がある産物が乳酸産生菌である、請求項５又は６に記載の方法。
- 乳酸産生菌がラクトバチルス・ロイテリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｒｅｕｔｅｒｉ）を含む、請求項７に記載の方法。
- ラクトバチルス・ロイテリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｒｅｕｔｅｒｉ）菌が凍結乾燥粉末形態にある、請求項８に記載の方法。
- ストリップが、０．６ｍｍ厚及び１５ｍｍ幅などの０．２〜５ｍｍ厚及び５〜２５ｍｍ幅である、請求項５から９までのいずれか一項に記載の方法。
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