BR112013006570B1

BR112013006570B1 - método de prolongar a estabilidade de bactérias produtoras de ácido lático

Info

Publication number: BR112013006570B1
Application number: BR112013006570A
Authority: BR
Inventors: Sjöberg Elisabeth
Original assignee: Biogaia Ab
Priority date: 2010-09-21
Filing date: 2011-09-20
Publication date: 2020-01-21
Also published as: EP2619007A1; CN103118870A; ES2716553T3; CA2812984A1; RU2013118314A; KR101931827B1; PL2619007T3; CN108913529A; ZA201302018B; JP2016193763A; MX2013003222A; MX342523B; HRP20190499T1; IL225177A0; CA2812984C; RU2578577C2; EP2619007B1; BR112013006570A2; JP2013540079A; AU2011304368A1

Abstract

produtos incluindo bactérias láticas e um dessecante, recipiente de seu armazenamento e método de preparação. a presente invenção refere-se genericamente a embalagens de produtos que são sensíveis á umidade e á oxidação, consequentemente, prolonga o período de vida útil de um produto deste tipo. mais especificamente, a presente invenção refere-se a um método de prolongar a vida de prateleira de probióticos de ácido-lático produtor de bactérias formuladas com óleo, através da utilização de um absorvente de umidade específico e tecnologia de eliminação de oxigênio. segundo a definicação adotada atualmente pela fao/oms, probióticos são: 'microrganismos vivos que, quando administrados em quantidades adequadas conferem um benefício á saúde do hospedeiro'. hoje em dia, um número de diferentes bactérias são usadas como probióticos de, por exemplo, ácido-lático produtor de bactérias tais como as estripes de lactobacillus e bifidobacteria. ácido-lático produtor de bactérias não é utilizado apenas pelo seu efeito benéfico sobre a saúde humana ou animal, também é amplamente utilizado na indústria de alimentos para processos de fermentação. muitas vezes, os microrganismos comercializados para estes fins são formulados como pós liofilizados em um abiente de baixo teor de água. um problema geral encontrado no pedido de tais preparações liofilizadas de microganismos é a estabilidade limitada do armazenamento de células uma vez que o teor de água livre disponível é prejudicial para as células. ao longo do tempo os microrganismos tornam-se menos viáveis resultando em doses elevada necessidade de compensar esta perda de atividade, se existem suficientes organismos viáveis para tornar isto possível.

Description

“MÉTODO DE PROLONGAR A ESTABILIDADE DE BACTÉRIAS PRODUTORAS DE ÁCIDO LÁTICO.”

CAMPO DA INVENÇÃO [001] A presente invenção refere-se genericamente a embalagens de produtos que são sensíveis à umidade e à oxidação, consequentemente, prolongando o período de vida útil de um produto deste tipo. Mais especificamente, a presente invenção refere-se a um método de prolongar a vida de prateleira de bactérias probióticas produtoras de ácido lático formuladas com óleo, através da utilização de um absorvente de umidade específico e tecnologia de eliminação de oxigênio.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO [002] Segundo a definição adotada atualmente pela FAO / OMS, probióticos são: microrganismos vivos que, quando administrados em quantidades adequadas conferem um benefício à saúde do hospedeiro. Hoje em dia, um número de diferentes bactérias é usado como probióticos de, por exemplo, bactérias produtoras de ácido lático tais como as estirpes de Lactobacillus e Bifidobacteria. Bactérias produtoras de ácido lático não são utilizadas apenas pelo seu efeito benéfico sobre a saúde humana ou animal, também é amplamente utilizado na indústria de alimentos para processos de fermentação. Muitas vezes, os microrganismos comercializados para estes fins são formulados como pós liofilizados em um ambiente de baixo teor de água.

[003] Um problema geral encontrado na aplicação de tais preparações liofilizadas de microrganismos é a estabilidade limitada do armazenamento das células uma vez que o teor de água livre disponível é prejudicial para as células. Ao longo do tempo os microrganismos tornam-se menos viáveis resultando em necessidade de doses elevadas para compensar esta perda de atividade, se existem suficientes organismos viáveis para tornar isto possível.

Petição 870190111348, de 31/10/2019, pág. 13/28 / 9 [004] Para efeitos de armazenamento, é geralmente conhecida a utilização de folha que tem uma camada de plástico em uma superfície do lado de fora do compartimento, tal como uma folha de alumínio laminada com polietileno como material de embalagem para reduzir a exposição das bactérias de ácido lático liofilizadas à umidade e oxigênio. Mas mesmo quando os materiais de barreira são eficazes para limitar a transmissão das moléculas de água através de um pacote, certas características do pacote podem ainda permitir a transmissão das moléculas de água, por exemplo, ao longo das arestas de um pacote selado a quente. Além disso, o processo de enchimento da embalagem em si mesmo pode contribuir para a retenção de água no interior da embalagem.

[005] Uma solução para manter um nível particularmente baixo de umidade dentro de uma embalagem é a de incorporar sachês de material dessecante para dentro do espaço interno da embalagem para remover a umidade a partir do espaço livre da embalagem. O material dessecante é geralmente conhecido por reduzir o teor de umidade no interior de um pacote. Materiais típicos são materiais dessecantes físicos, tais como peneiras moleculares que se ligam às moléculas de água no interior dos espaços dos poros de um material. Outro tipo de material desidratante inclui agentes de formação de hidrato, tais como sais, tais como cloreto de amônia. Materiais dessecantes também podem ser utilizados, que não formam hidratos, tais como o sal (NaCl) ou o brometo de potássio (KBr).

[006] Outra forma de proteger culturas de bactérias de ácido lático liofilizadas é a utilização de uma formulação à base de óleo. As células de bactérias de ácido lático têm sido usadas em formulações de óleo para melhorar a estabilidade das bactérias, por exemplo, ver a Patente dos EUA. No. 4.518.696 por Gehrman et al. Os inventores do pedido de patente EUA No. 20050271641 foram um passo a mais pela adição de etapa de secagem a vácuo do óleo antes da formulação para estabilidade aumentada de culturas de

Petição 870190111348, de 31/10/2019, pág. 14/28 / 9 bactérias e um produto chamado Reuteri Drops foi fabricado. O produto é uma formulação à base de óleo que contém L. reuteri feita por uma boa estabilidade e vida de prateleira. A característica singular deste processo de produção é um passo de secagem do óleo para remover a maior parte da água. O óleo usado no pedido de patente EUA No. 20050271641 é um óleo vegetal puro comestível, de preferência óleo de girassol. Embora não é esperado que o óleo tal como óleo de girassol puro contenha muita água, um efeito inesperado da etapa de processamento de secagem do óleo, colocando-a a vácuo, é uma estabilidade significativamente aumentada dos lactobacilos na formulação.

[007] No entanto, existe ao longo do tempo continua a ser um problema com a estabilidade de bactérias do ácido lático formuladas em óleo, o qual pode ou não ter sido processada a vácuo, uma vez que pode não ser possível remover toda a umidade por vácuo e / ou a umidade pode entrar novamente na formulação de óleo durante o acondicionamento ou o armazenamento em recipientes diferentes.

[008] A invenção aqui descrita, felizmente, proporciona um método melhorado e mais eficiente para o armazenamento de bactérias de ácido lático liofilizadas através da combinação de formulações contendo bactérias de ácido lático à base de óleo, por exemplo, como descrito na publicação do pedido de patente EUA No. 20050271641, e material polimérico absorvente de umidade como descrito no pedido de patente EP1187874, na patente EP1121190 patente e na Patente EUA N° 6.174.952, ou uma folha de embalagem de camadas múltiplas de plástico polimérico flexível tendo um material químico dessecante incorporado dentro de uma camada de folha, tal como descrito na Patente dos EUA No. 8.003.179.

[009] A descrição do material polimérico nos documentos de patentes acima mencionados inclui processos e as estruturas resultantes para a produção de um polímero modificado com canais comunicantes. Os canais

Petição 870190111348, de 31/10/2019, pág. 15/28 / 9 comunicantes agem como passagens de transmissão controlada através do polímero. Um agente material polimérico é misturado com o polímero, de modo que ele é distribuído no interior do polímero. Um material de absorção de água é misturado com o polímero de modo a que o material absorvente de água é distribuído no interior do produto. O produto é solidificado, de modo que o agente hidrofílico forma passagens no produto através do qual uma composição desejada está em comunicação com o material absorvente de água que é arrastada no interior do produto. O produto solidificado descrito nos documentos de patentes acima mencionadas pode ser utilizado para formar um artigo desejado em forma de pastilhas, tais como insertos tipo tampão e revestimentos para recipientes fechados, ou pode ser formado numa película, folha, grânulo ou pastilha. Um exemplo de tal produto é M-0026Strip Activ™, (CSP Technologies, Auburn, EUA), que é um absorvente de umidade da película com peneira molecular.

[0010] No entanto, ao contrário da presente invenção, nenhuma das técnicas anteriores, incluindo os documentos de patente mencionados acima, mencionam a absorção de umidade a partir de um líquido não-água, incluindo óleo, utilizando um material absorvente de umidade específico, tais como as películas ou folhas de polímero especialmente preparadas com um material dessecante químico incorporado. Pelo contrário, é evidente a partir de, por exemplo, EP1187874, que esta tecnologia se destina à passagem de um gás através do polímero.

[0011] Assim, era previamente conhecido que a estabilidade das culturas probióticas produtoras de ácido lático está estreitamente correlacionada com a atividade da água da formulação; era igualmente conhecida secar o óleo sob vácuo para a estabilização de lactobacilos. Foi uma surpresa quando o inventor da presente invenção mostrou que o uso de material dessecante específico incorporado numa estrutura polimérica específica em conjunto com o óleo formulado L. reuteri melhorou

Petição 870190111348, de 31/10/2019, pág. 16/28 / 9 consideravelmente a estabilidade de tais culturas.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO [0012] A presente invenção refere-se à embalagem de produtos que são sensíveis à umidade e à oxidação, consequentemente, prolonga o período de vida útil de um produto deste tipo.

[0013] Um objeto principal da presente invenção é o de proporcionar um método aperfeiçoado para a armazenagem das bactérias de ácido lático liofilizadas formuladas em óleo.

[0014] Um objeto da presente invenção é a utilização de material de absorção de umidade específica, tais como as películas ou uma folha de polímero especialmente preparadas que tem um material desidratante químico incorporado numa embalagem para a armazenagem das bactérias láticas liofilizadas formuladas com óleo.

[0015] Um outro objeto é a utilização de um recipiente revestido internamente com um material absorvente de umidade específica para o armazenamento de bactérias láticas liofilizadas formuladas com óleo.

[0016] A presente invenção proporciona um recipiente de armazenamento incluindo um produto sensível à umidade e à oxidação, em suspensão num líquido não-água, e uma película de polímero dessecante ou um filme de dessecante. Numa forma de realização da invenção, o recipiente é revestido internamente com a referida película de polímero dessecante ou o dito filme dessecante.

[0017] Numa forma de realização da invenção, a película de polímero dessecante incluído no recipiente é de 0,2 - 5 mm de espessura e de 5 - 25 mm de largura, tal como 0,6 mm de espessura e 15 mm de largura.

[0018] Numa forma de realização da invenção, o produto sensível à umidade e à oxidação incluído no recipiente é bactéria produtora de ácido lático, tais como Lactobacillus reuteri.

[0019] A presente invenção proporciona ainda um método de

Petição 870190111348, de 31/10/2019, pág. 17/28 / 9 prolongar a estabilidade de um produto sensível à umidade e à oxidação num líquido não-água, compreendendo:

(A) adicionar o produto sensível a um óleo e misturar lentamente para formar uma suspensão homogênea;

(B) distribuir a suspensão homogênea para um frasco, e (C) colocar uma película de um polímero dessecante ou um filme de dessecante na referida garrafa antes de selar a garrafa.

[0020] Numa forma de realização, a presente invenção fornece um método de prolongar a vida de prateleira de um produto sensível à umidade e à oxidação num líquido não-água, compreendendo:

(A) combinar um triglicerídeo de cadeia média e óleo de girassol com o dióxido de silício para formar uma mistura;

(B) homogeneizar a mistura;

(C) adicionar bactérias produtoras de ácido lático à mistura e misturar outra vez lentamente para formar uma suspensão homogênea;

(D) colocar a suspensão homogênea num recipiente e cobrir a suspensão homogênea com nitrogênio;

(E) distribuir a suspensão homogênea para um frasco, e (F) colocar uma película de filme de dessecante na referida garrafa antes de selar a garrafa.

[0021] Numa forma de realização dos métodos acima descritos, o produto sensível à umidade e à oxidação é bactéria produtora de ácido lático.

[0022] Numa concretização dos métodos, as bactérias produtoras deácido lático compreendem Lactobacillus reuteri. Por exemplo, as bactérias Lactobacillus reuteri são na forma em pó liofilizada.

[0023] Numa concretização dos métodos, a película colocada na garrafa é de 0,2 - 5 mm de espessura e de 5 - 25 mm de largura, tal como 0,6 mm de espessura e 15 mm de largura.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

Petição 870190111348, de 31/10/2019, pág. 18/28 / 9 [0024] A Figura 1 mostra o resultado de um estudo de estabilidade com o presente invento. Mostrando o conteúdo de água em um produto com Lactobacillus reuteri formulados em óleo, com o filme de dessecante M-0026 Active-Película™. O produto de referência não contém qualquer filme dessecante.

[0025] A Figura 2 é uma figura que mostra o resultado de um estudo de estabilidade, tal como na Figura 1.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO E CONCRETIZAÇÕES PREFERIDAS DO MESMO [0026] O objeto geral da presente invenção é a utilização de material de absorção de umidade específica, tais como as películas ou folhas de polímero especialmente preparados com um material desidratante químico incorporado numa embalagem para a armazenagem de bactérias láticas liofilizadas formuladas com óleo. O material absorvente de umidade deve ser usado na embalagem de tal forma que fique apenas em contato direto com o óleo contendo as bactérias de ácido lático liofilizadas e, assim, poder absorver a possível a água a partir do óleo.

[0027] O material específico absorvente de umidade pode também ser utilizado para revestimento interior do recipiente utilizado para a armazenagem de bactérias láticas liofilizadas formuladas com óleo.

[0028] Uma forma de realização da invenção é um método de prolongar a vida de prateleira de produtos sensíveis à umidade e à oxidação, tais como Lactobacillus reuteri formulados em óleo, por meio de um filme de dessecante específico (M-0026-Strip Activ™, CSP Technologies, Auburn, EUA) ou um filme com um material dessecante incorporado (como descrito na Patente dos EUA No. 8.003.179, por exemplo, PET12PE/ALU 12 PE / PE dessecante + / PE a partir de Alcan).

[0029] Outra forma de realização da invenção é um método de prolongar a vida de prateleira de produtos sensíveis à umidade e à oxidação,

Petição 870190111348, de 31/10/2019, pág. 19/28 / 9 tais como L. reuteri formulados óleo seco a vácuo, utilizando-se uma película específica dessecante (M-0026-Strip Activ™, CSP Technologies , Auburn, EUA), ou uma filme com um material dessecante incorporado (como descrito na Patente dos EUA No.8003, 179).

[0030] Um estudo de estabilidade foi realizado para investigar a forma como uma película absorvente de umidade (M-0026-Strip Activ™, CSP Technologies, Auburn, EUA) fornecida por CSP Technologies influencia a viabilidade da formulação de L. reuteri com óleo. O método de teste usado no estudo de estabilidade para a determinação da água é a ASTM D6304 - 07, que é um método de teste padrão para a determinação de água em produtos de petróleo, óleos lubrificantes e aditivos por titulação colométrica de Karl Fischer.

EXEMPLO 1 - Produção de um produto liofilizado contendo L. reuteri formulado em óleo [0031] A mistura de ingredientes.

[0032] 1. Misture o triglicéride de cadeia média (por exemplo,

Akomed R, (Karlshamns AB, Karlshamn Suécia)) e o óleo de girassol (por exemplo, Akosun, Karlshamns) com dióxido de silício, (Cab-o-sil M5P, M5P, Cabot) numa máquin a/ tanque de mistura Bolz (Alfred Bolz Apparatebau GmbH, Wangen im Allgu, Alemanha) [0033] 2. Homogeneização. Bomba e dispax Sine (Sine Pump,

Arvada, Colorado) são ligados ao misturador Bolz e a mistura é homogeneizada.

[0034] 3. Adição de Lactobacillus reuteri. Cerca de 20 kg de mistura de óleo seco é transferido para um recipiente de aço inoxidável 50 litros. L. reuteri em pó (de preferência liofilizado, a quantidade de L. reuteri utilizada varia dependendo da quantidade desejada no óleo. Um exemplo é o de adicionar 0,2 kg de cultura com 10¹¹ CFU por grama). Ele é misturado lentamente até ficar homogêneo.

Petição 870190111348, de 31/10/2019, pág. 20/28 / 9 [0035] 4. Mistura. A pré-mistura com L. reuteri é trazido de volta ao mixer Bolz.

[0036] 5. Descarga. A suspensão é descarregada para um recipiente de

200 litros, e coberto com nitrogênio. A suspensão é mantida no recipiente até que o enchimento em frascos de 5 ml de vidro.

[0037] 6. 20 mm de M-0026-Strip Activ™, espessura 0,6 mm e largura de 15 mm, (CSP Technologies, Auburn, EUA), é adicionado em cada frasco.

EXEMPLO 2 - Estudo de estabilidade com L. reuteri DSM 17938 liofilizadas formuladas em óleo com a M-0026 Activ-Strips™ [0038] As garrafas do exemplo 1 foram armazenadas em armários climáticos, a 25° C/60 HR e 30° C/65 UR, respectivamente, BioGaia, Lund, na Suécia.

[0039] Um estudo foi iniciado no dia 12 de Dezembro de 2009, que mostra claramente que o teor de água das garrafas do Exemplo 1 é nitidamente menor do que no frasco de referência sem película dessecante; este está associado a um produto mais estável. Para os resultados do estudo, ver figura 1.

[0040] Um outro estudo de estabilidade realizados como acima, mas com um outro lote de L. reuteri, verifica os resultados, mostrando que o teor de água é menor nos frascos contendo uma película dessecante. Para os resultados do estudo, ver figura 2.

[0041] A presente invenção não está limitada às formas de realização preferidas acima descritas. Várias alternativas, modificações e equivalentes podem ser utilizados. Por conseguinte, as concretizações acima não deverão ser tomadas como limitativos do âmbito da invenção, que é definido pelas reivindicações anexas.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Método de prolongar a estabilidade de bactérias produtoras de ácido láticoem um óleo, caracterizado por:

compreender as etapas de:

a) adicionar as bactérias produtoras de ácido lático a um óleo e misturar lentamente para formar uma suspensão homogênea;

b) distribuir a suspensão homogênea para um frasco, e

c) colocar uma película de um polímero dessecante ou um filme de dessecante em contato direto com a suspensão homogênea na referida garrafa antes de selar a garrafa.

2. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a bactéria produtora de ácido lático compreender Lactobacillus reuteri.

3. Método, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que as bactérias Lactobacillus reuteri estarem na forma de pó liofilizado.

4. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 13, caracterizada pelo fato de que a película é de 0,2 a 5 mm de espessura e de 5 a 25 mm de largura, tal como 0,6 mm de espessura e 15 mm de largura.