JP2009107952A - 抗骨粗鬆症剤 - Google Patents

Abstract

【課題】 近年の高齢化社会の重要な問題点として、骨密度が低下し骨がもろくなる骨粗鬆症の発生が挙げられる。骨粗鬆症は、骨の湾曲、痛み、骨折などの症状を伴い、有効な治療方法が求められている。本発明は、安全性が高く、かつ、優れた抗骨粗鬆症効果を有する抗骨粗鬆症剤およびこれを用いた飲食品を提供することを課題とする。
【解決手段】 松樹皮由来抽出物由来のプロアントシアニジンを有効成分として含有することを特徴とする抗骨粗鬆症剤。該抗骨粗鬆症剤を含有することを特徴とする飲食品。
【選択図】 なし

Description

本発明は、抗骨粗鬆症剤およびこれを含む飲食品に関する。

近年の高齢化社会の重要な問題点として、骨密度が低下し骨がもろくなる骨粗鬆症の発生が挙げられる。骨粗鬆症は、骨の湾曲、痛み、骨折などの症状を伴い、有効な治療方法が求められている。
骨粗鬆症の治療薬としては活性型ビタミンＤ₃ 、女性ホルモン（エストロゲン）、カルシトニン、イプリフラボン、ビスフォスフォネート、ビタミンＫなどが挙げられるが、絶大な効果は期待できない。また、骨粗鬆症は、適切な運動や日常摂取する食品に留意して予防することが重要である。上記食品にに関して言えば、カルシウムを多く含む乳製品や魚類の摂取が推奨されている。さらに、カルシウム、マグネシウム、ビタミンＤ、カゼインホスホペプチド（腸管からのカルシウム吸収を促進する作用があると言われている）などを含む健康食品の利用も推奨されている。
また、下記特許文献１には、有効成分としてビタミンＫと大豆ソフラボンとを含有し、乾燥重量中のビタミンＫ濃度が１００ppm以上、かつ大豆イソフラボン濃度が５０００ppm以上である抗骨粗鬆症剤が提案されている。

一方、プロアントシアニジンは植物中に含有されるポリフェノールの一種であり、抗酸化作用（特許文献２）、抗肥満作用（特許文献３）などの種々の活性を有することが知られている。
特許第３２５００７１号明細書 特公平３−７２３２号公報 特開２００６−１６３３０号公報

本発明の目的は、安全性が高く、かつ、優れた抗骨粗鬆症効果を有する抗骨粗鬆症剤およびこれを用いた飲食品を提供することにある。

請求項１に記載の発明は、プロアントシアニジンを有効成分として含有することを特徴とする抗骨粗鬆症剤である。
請求項２に記載の発明は、プロアントシアニジンが松樹皮由来抽出物であることを特徴とする請求項１に記載の抗骨粗鬆症剤である。
請求項３に記載の発明は、プロアントシアニジンがオリゴメリックプロアントシアニジンであることを特徴とする請求項１または２に記載の抗骨粗鬆症剤である。
請求項４に記載の発明は、請求項１〜３のいずれかに記載の抗骨粗鬆症剤を含有することを特徴とする飲食品である。

本発明によれば、安全性が高く、かつ、優れた抗骨粗鬆症効果を有する抗骨粗鬆症剤およびこれを用いた飲食品を提供することができる。

以下、本発明をさらに詳しく説明する。
本発明の有効成分として用いられるプロアントシアニジンとは、フラバン−３−オールおよび／またはフラバン−３，４−ジオールを構成単位とする重合度が２以上、好ましくは２〜１０量体、さらに好ましくは２〜４量体の縮重合体からなる化合物群、誘導体およびそれらの立体異性体を指称する。プロアントシアニジンのうち、フラバン−３−オールおよび／またはフラバン−３，４−ジオールを構成単位とする重合度が２〜４の縮重合体をＯＰＣ（オリゴメリックプロアントシアニジン；ｏｌｉｇｏｍｅｒｉｃ ｐｒｏａｎｔｈｏｃｙａｎｉｄｉｎ）という。ＯＰＣは強力な抗酸化物質であり、植物の葉、樹皮、果物の皮もしくは種子の部分に豊富に含有されている。具体的には、ブドウ、松の樹皮、ピーナッツの薄皮、イチョウ、ニセアカシアの果実、コケモモ、ブルーベリー、イチゴ、アボガド、大麦、小麦、大豆、黒大豆、カカオなどに含まれている。また、西アフリカのコーラナッツ、ペルーのラタニアの根にもＯＰＣが含まれていることが知られている。ＯＰＣはヒトの体内では生成することができない物質である。

本発明の有効成分として用いられるプロアントシアニジンについては、原料の由来あるいは原料の利用部分、製造法、精製法は何ら制限されないが、上記の樹皮、果実もしくは種子の粉砕物、またはこれらの抽出物のような食品原料を使用することができる。特に松樹皮、さらに好ましくはＯＰＣが豊富に含まれているフランス海岸松樹皮の抽出物を用いることが好ましい。フランス海岸松樹皮はプロアントシアニジンの原料として好ましく用いられる。

プロアントシアニジンは、公知の方法［例えば、特許文献１に記載の方法あるいは松の樹皮からの抽出法；アール・ダブル・ヘミングウェイ（Ｒ．Ｗ．Ｈｅｍｉｎｇｗａｙ）ら、フィトケミストリー（Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ），１９８３年，第２２巻、ｐ．２７５−２８１］あるいはそれに準じた方法を採用することによって上記各種植物体から容易に得ることができる。

以下、ＯＰＣを豊富に含む松樹皮の抽出物を例に挙げて、プロアントシアニジンの調製方法を説明する。

松樹皮抽出物は、松樹皮を水または有機溶媒で抽出して得られる。水を用いる場合には、温水または熱水が用いられる。抽出に用いる有機溶媒としては、食品あるいは薬剤製造に許容される有機溶媒が用いられ、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、ブタン、アセトン、ヘキサン、シクロヘキサン、プロピレングリコール、含水エタノール、含水プロピレングリコール、エチルメチルケトン、グリセリンン、酢酸メチル、酢酸エチル、ジエチルエーテル、ジクロロメタン、食用油脂、１，１，１，２−テトラフルオロエタン、１，２−トリクロロエテンなどが挙げられる。これらの水および有機溶媒は単独で用いてもよいし、組み合わせて用いてもよい。特に、熱水、含水エタノール、含水プロピレングリコールが好適に用いられる。

松樹皮からプロアントシアニジンを抽出する方法は、特に限定されないが、例えば、加温抽出法、超臨界流体抽出法などが用いられる。

超臨界流体抽出法は、物質の気液の臨界点（臨界温度、臨界圧力）を超えた状態の流体である超臨界流体を用いて抽出を行う方法である。超臨界流体としては、二酸化炭素、エチレン、プロパン、亜酸化窒素（笑気ガス）などが用いられ、とりわけ二酸化炭素が好適に用いられる。

超臨界流体抽出法は、目的成分を超臨界流体によって抽出する抽出工程および目的成分と超臨界流体とを分離する分離工程からなる。分離工程は、圧力変化による抽出分離、温度変化による抽出分離、または吸着剤、吸収剤を用いた抽出分離のいずれを行ってもよい。

また、エントレーナー添加法による超臨界流体抽出を行ってもよい。この方法は、超臨界流体に、例えば、エタノール、プロパノール、ｎ−ヘキサン、アセトン、トルエンなどを２〜２０％程度添加し、得られた抽出流体で超臨界流体抽出を行うことによって、ＯＰＣなどの被抽出物の抽出流体に対する溶解度を飛躍的に上昇させる、あるいは分離の選択性を増強させる方法であり、効率的に松樹皮抽出物を得る方法である。

松樹皮からの抽出は、上記の方法以外に、液体二酸化炭素回分法、液体二酸化炭素還流法、超臨界二酸化炭素還流法などにより行ってもよい。

以上のようにして得られたプロアントシアニジンは、液状もしくは半固形状の形態で得られるが、このものから抽出溶媒を減圧留去、スプレードライ、凍結乾燥等の公知の方法によって除去すれば、そのままプロアントシアニジン含有濃縮物や乾燥物として使用することができる。さらに精製するには、カラムクロマトグラフィー、向流分配法等の公知の精製手段を採用して、目的を達成することができる。

本発明のプロアントシアニジンは、水によく溶解し、生体への吸収性が高い。酸性、中性、アルカリ性のいずれの条件においても安定性が高く、その機能を維持した状態で飲食品に配合することが容易である。また、摂取開始後短期間で効果が期待でき、少量の摂取でも十分な効果を得られるため、飲食品としての摂取許容量および摂取形態に制限のある幼児や老人等への食事素材として、利用価値が高い。そのため、本発明の飲食品は、例えば健康食品、保健機能食品（特定保健用食品、栄養機能食品）等であってよい。

本発明の抗骨粗鬆症剤は、錠剤、ピル、カプセル、顆粒、粉末、散剤、液剤等の固形または溶液の形態（以下、製剤ともいう）に公知の方法により適宜調製することができる。即ち、本発明に有用な固形製剤または液状製剤は、プロアントシアニジンと所望により添加剤とを混合し、従来充分に確立された公知の製剤製法を用いることにより製造される。添加剤としては、例えば賦形剤、ｐＨ調整剤、清涼化剤、懸濁化剤、希釈剤、消泡剤、粘稠剤、溶解補助剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、抗酸化剤、コーティング剤、着色剤、矯味矯臭剤、界面活性剤、可塑剤または香料などが挙げられる。

上記賦形剤としては、例えば、Ｄ−ソルビトール、Ｄ−マンニトール或いはキシリトールなどの糖アルコール、ブドウ糖、白糖、乳糖或いは果糖などの糖類、結晶セルロース、カルメロースナトリウム、リン酸水素カルシウム、コムギデンプン、コメデンプン、トウモロコシデンプン、バレイショデンプン、デキストリン、βーシクロデキストリン、軽質無水ケイ酸、酸化チタン、またはメタケイ酸アルミン酸マグネシウムなどが挙げられる。

上記ｐＨ調整剤としては、例えばクエン酸、リンゴ酸、リン酸水素ナトリウムまたはリン酸二カリウムなどが挙げられる。
上記清涼化剤としては、例えばｌ−メントールまたはハッカ水などが挙げられる。
上記懸濁化剤としては、例えば、カオリン、カルメロースナトリウム、キサンタンガム、メチルセルロースまたはトラガントなどが挙げられる。
上記希釈剤としては、例えば精製水、エタノール、植物油または乳化剤等が挙げられる。
上記消泡剤としては、例えばジメチルポリシロキサンまたはシリコン消泡剤などが挙げられる。

上記粘稠剤としては、例えばキサンタンガム、トラガント、メチルセルロースまたはデキストリンなどが挙げられる。
上記溶解補助剤としては、例えばエタノール、ショ糖脂肪酸エステルまたはマクロゴールなどが挙げられる。
上記崩壊剤としては、例えば低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、クロスカルメロースナトリウム、ヒドロキシプロピルスターチまたは部分アルファー化デンプンなどが挙げられる。

上記結合剤としては、例えばメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニールピロリドン、ゼラチン、アラビアゴム、エチルセルロース、ポリビニルアルコール、プルラン、アルファー化デンプン、カンテン、トラガント、アルギン酸ナトリウムまたはアルギン酸プロピレングリコールエステルなどが挙げられる。

上記滑沢剤としては、例えばステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸ポリオキシル、セタノール、タルク、硬化油、ショ糖脂肪酸エステル、ジメチルポリシロキサン、ミツロウまたはサラシミツロウなどが挙げられる。
上記抗酸化剤としては、例えばアスコルビン酸、ジブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、没食子酸プロピル、ブチルヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、トコフェロール、アスコルビン酸またはクエン酸などが挙げられる。

上記コーティング剤としては、例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート、カルボキシメチルエチルセルロース、酢酸フタル酸セルロース、ポリビニルアセタールジエチルアミノアセテート、アミノアルキルメタアクリレートコポリマー、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート、メタアクリル酸コポリマー、ポリビニルアセタートジエチルアミノアセテートまたはセラックなどが挙げられる。
上記着色剤としては、例えばウコン抽出液、リボフラビン、酸化チタンまたはカロチン液などが挙げられる。

上記矯味矯臭剤としては、例えばクエン酸、アジピン酸、アスコルビン酸、果糖、Ｄ−ソルビトール、ブドウ糖、サッカリンナトリウム、単シロップ、白糖、ハチミツ、アマチャ、カンゾウ、クエン酸、アジピン酸、アスコルビン酸、オレンジ油、トウヒチンキ、ウイキョウ油、ハッカまたはメントールなどが挙げられる。
上記界面活性剤としては、例えば、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、モノステアリン酸グリセリン、モノステアリン酸ソルビタン、モノラウリン酸ソルビタン、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレン、ポリソルベート類、ラウリル硫酸ナトリウム、マクロゴール類またはショ糖脂肪酸エステルなどが挙げられる。
上記可塑剤としては、例えばクエン酸トリエチル、ポリエチレングリコール、トリアセチンまたはセタノールなどが挙げられる。
上記香料としては、例えば、動物性香料或いは植物性香料等の天然香料、または単離香料或いは純合成香料等の合成香料などが挙げられる。

上記各種製剤の形態において、プロアントシアニジンの量は、製剤全体に対して、通常約１〜８０重量％、好ましくは約２〜５０重量％である。
本発明の製剤の投与方法は、経口でも非経口であってもよい。また、本発明の有効成分であるプロアントシアニジンの投与量は、その種類、その剤型、また患者の年令、体重、適応症状などによって異なるが、例えば内服剤の場合は、成人１日１〜数回、１回量約１〜５００ｍｇ、好ましくは３〜３００ｍｇ程度投与するのがよい。

本発明の飲食品は、飲食品製造時にプロアントシアニジンまたは上記プロアントシアニジン含有製剤を飲食品材料に配合することにより製造される。例えば、パン、チューインガム、クッキー、チョコレート、シリアル等の固形食品、ジャム、アイスクリーム、ヨーグルト、ゼリー等のジャム状、クリーム状またはゲル状食品、ジュース、コーヒー、ココア、緑茶、ウーロン茶、紅茶等の飲料等のあらゆる食品形態にすることが可能である。また、調味料、食品添加物等に配合することもできる。プロアントシアニジンまたは上記プロアントシアニジン含有製剤の飲食品材料への配合量は、特に限定されないが、通常約０．０００１〜８０重量％、好ましくは約０．００５〜５０重量％である。また、特に飲料の場合は、１ｍｇ／Ｌ〜２０ｇ／Ｌ、好ましくは２ｍｇ／Ｌ〜１０ｇ／Ｌである。

また、本発明が飲食品である場合のプロアントシアニジンの摂取量は、副作用の心配がないことから上記内服剤の投与量と同等の量であってよい。

以下、ＯＰＣを豊富に含む松樹皮抽出物を例に挙げて、実施例により本発明を詳しく説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。

実施例１
松樹皮９００ｇに精製水７．２Ｌを加え、ブレンダー（Ｗａｒｉｎｇ Ｂｌｅｎｄｅｒ）で破砕した後、１００℃で１０分間加熱抽出した。次いで、直ちに濾過して濾液を得た。濾過後の残渣を精製水１．８Ｌで洗浄し、濾液と洗浄液とを合わせて９Ｌの松樹皮の熱水粗抽出液を得た。この抽出液１ｍＬを凍結乾燥したところ、乾燥重量は８ｍｇであった。

上記粗抽出液１Ｌ（粉末乾燥重量８ｇ）を２５℃まで放冷し、塩化ナトリウムを１００％飽和濃度となるまで添加してよく攪拌した後、４℃で２４時間静置した。静置後、この溶液を濾過し、９１０ｍＬの濾液を得た。この濾液を以下に示す工程によりさらに精製した。まず、水で膨潤させた芳香族系合成樹脂（ダイアイオンＨＰ−２０：三菱化学株式会社製）を１００ｍＬ充填した３０×３００ｍｍのカラムに上記濾液を通液し、さらに１Ｌの精製水で洗浄した。次いで、カラムから１５％（Ｖ／Ｖ）のエタノール−水混合溶媒で溶出し、２００ｍＬの松樹皮の熱水抽出精製物を得た（以下、松樹皮の熱水抽出物１とする）。得られた精製物を凍結乾燥して粉末化した。本操作を繰り返して、９Ｌの松樹皮の熱水抽出液から松樹皮の熱水抽出物１の乾燥粉末７．５１ｇを得た。

上記乾燥粉末中のプロアントシアニジンおよびＯＰＣの含有量を、特開２００５−２３０３２号公報に記載の方法により測定した結果、プロアントシアニジンは、上記乾燥粉末中に４０重量％含有されていた。また、ＯＰＣは、２〜４量体として、上記乾燥粉末中に２０重量％含有されていた。

上記松樹皮の熱水抽出物１の乾燥粉末について、抗骨粗鬆症効果を調べるため、以下の動物実験を行った。
骨粗鬆症改善効果試験
ＳＤ系ラット（２２週齢）メスの卵巣を外科的に取り除き、骨粗鬆症のモデルラットを作成した。卵巣摘出ラットを７匹ずつ６群に分け、３５日間の試験期間中、１日置きに（計１７回）、前記熱水抽出物１の乾燥粉末の摂取量が１ｍｇ／ｋｇとなるように、生理食塩水溶解した液体を２ｍｌ経口投与した。飼料はオリエンタル酵母株式会社のマウス・ラット・ハムスター用固形飼料ＣＲＦ−１を用い、給餌および給水方法は自由摂取とした。試験期間中、各群間で、餌の摂取量に差は認められなかった。試験開始後３５日目にラットの体重を測定した後、大腿骨を取り出した。大腿骨は、接着組織および筋肉を取り除いて分析に使用した。大腿骨の体積を測定した後、エタノールで３回洗浄し、次にアセトンで３回洗浄したのち、一晩乾燥し、その後、重量を測定して大腿骨の乾燥重量を求めた。体積および乾燥重量から、骨密度（乾燥重量ｇ／体積ｍｍ³ ）を測定した。なお対照実験として、前記熱水抽出物１の乾燥粉末を含まない生理食塩水をラットに投与したこと以外は、上記実験を繰り返した例（比較例）も併せて、その結果を表１に示す。

実施例１と比較例とを対比したところ、実施例１はp＜0.05の危険率で有意差が認められた。

実施例２
実施例１において、前記熱水抽出物１の乾燥粉末の摂取量を０．５ｍｇ／ｋｇとなるようにしたこと以外は、実施例１を繰り返した。その結果、実施例２の骨密度は１．０５６±０．００４ｍｇ／ｍｍ^３であった。

実施例３
８５℃の熱水で抽出した烏龍茶、紅茶、緑茶、ほうじ茶、ジャスミン茶の抽出液に対して、茶葉使用率が０．８重量％になるように脱イオン水を追加した。その際、アスコルビン酸を０．０２５重量％になるように添加し、ついで重曹を用いて飲みやすいｐＨに調整した。さらに当該調合液１００ｇに対して、前記熱水抽出物１の乾燥粉末が５ｍｇとなるように添加した後、常法通りＵＨＴ殺菌をおこない、３５０ｍｌ容ＰＥＴボトルに充填し、各種飲料を得た。

実施例４
以下の処方にてジュースを調製した。
冷凍濃縮オレンジ果汁 ５．０質量部
果糖ブドウ糖液糖 １．０質量部
クエン酸 ０．１０質量部
Ｌ−アスコルビン酸 ０．０９質量部
前記熱水抽出物１の乾燥粉末 ０．０５質量部

Claims (4)

1. プロアントシアニジンを有効成分として含有することを特徴とする抗骨粗鬆症剤。
2. プロアントシアニジンが松樹皮由来抽出物であることを特徴とする請求項１に記載の抗骨粗鬆症剤。
3. プロアントシアニジンがオリゴメリックプロアントシアニジンであることを特徴とする請求項１または２に記載の抗骨粗鬆症剤。
4. 請求項１〜３のいずれかに記載の抗骨粗鬆症剤を含有することを特徴とする飲食品。