JP2000503666A - Ｍａｐｐｉａ ｆｏｅｔｉｄａから単離したカンプトセシン―骨格化合物および新規な医薬ならびに治療薬のためのシントンとしてのその使用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、Mappia foetida の異なる部分に存在する式（Ｉ）の新規アルカロイドの単離または半合成、ならびにそれらの医薬用途および抗腫瘍活性および抗ウイルス活性を有する化合物の調製のための新規なシントン(syntone)としてのその使用に関する。同産物は、カンプトセシンおよびフォーチジンＩおよびIIの新規なアナログの調製のための新規なシントンである。これらの新規化合物の特別な水溶性は、それにより、誘導体化せずに非経口的投与が可能になるため、非常に重要である。

Description

【発明の詳細な説明】Mappia foetida から単離したカンプトセシン−骨格化合物および新規な医薬な らびに治療薬のためのシントンとしてのその使用 本発明は、Mappia foetida から単離したカンプトセシン骨格アルカロイドま たはそのアルカロイドからの半合成によって得たカンプトセシン骨格アルカロイ ドに関する。 Mappia foetida は、インド亜大陸で生育している植物で、その種々の部分、 主に種子に、カンプトセシン、マッピシン(mappicine)、およびフォーチジン(fo etidine)ＩおよびII（ＥＰ−Ａ−６８５４８１）を含んでいることが知られてい る。 本発明のアルカロイドは、以下の一般式： (式中、Ｒは、水素原子またはメトキシ基であり；Ｒ₁は、ヒドロキシ、Ｍがア ルカリカチオン、好ましくはナトリウムまたはカリウムであるＯＭ基、Ｃ₁〜Ｃ₆ アルコキシ基、場合によっては置換されているフェノキシ基、アミノ基、Ｃ₁〜 Ｃ₆モノアルキルアミノ基またはアルキル部分が場合によってアミノで置換され ているＣ₂〜Ｃ₁₂ジアルキルアミノ基、アリールアミノ基であり；Ｒ₂は、Ｃ₁〜 Ｃ₆アルキル基、または式ＣＯＲ₃の基であって、Ｒ₃がＣ₁〜Ｃ₆アルキルである か場合によっては置換されているフェニルまたはベンジルである) を有する。 フェノキシ基、フェニル基、またはベンジル基は、ハロゲン原子；Ｃ₁〜Ｃ₆ア ルキル基、Ｃ₁〜Ｃ₆アルコキシ基、ニトロ基、シアノ基、Ｃ₁〜Ｃ₃ハロアルキル 基により置換することができる。 Ｒが水素またはメトキシであり、Ｒ₁がヒドロキシまたはＯＭ基（Ｍ＝ナトリ ウムまたはカリウム）であり、そしてＲ₂がアセチルである化合物１は、Mappia foetida から、人工的に乾燥させた植物バイオマスを５０℃よりも高くない温度 で、好ましくは３５℃で、最初に脂肪族ケトンかまたは脂肪族エステルで、続い て脂肪族アルコールで抽出して単離することができる。これらの操作条件では、 カンプトセシン酸および９−メトキシ−カンプトセシン酸の１７−アセチル誘導 体を、高い収率で抽出することができる。Mappia foetida はカンプトセシンの 選択的供給源として幅広く研究されてきたが、そのアルカロイドは、おそらく不 適切な溶媒を用いる抽出の間にカンプトセシンに分解してしまうため、同定され なかった。脂肪族アルコールの存在下では、これらのアルカロイドは抽出時の中 性pH でさえカンプトセシンに容易に転換する。 同じグループの化合物は、アルカリ培地中でのカンプトセシンのＣ₁₇ヒドロキ シルの選択的アセチル化により得ることができる。 得られた化合物は、次に、他の式１の化合物であって、Ｒ₂がアセチルとは異 なり、および／またはＲ₁がアルコキシ基、フェノキシ基、または上で定義した アミノ基である化合物の調製のための、またはフォーチジンＩおよびIIの調製の ための出発物質として用いることができる。この目的のためには、エステルまた はアミドの調製のための従来の方法、例えば、エステルの調製のためには、Ｒ₁ がＯＭ基である化合物１と、エチルまたはベンジルブロモアセテートのようなア ルキルハロゲン化物との反応、あるいはアミドの調製のためには、Ｒ₁がＯＨで ある化合物１と、アミンおよびジシクロヘキシルカルボジイミドとの反応、を用 いることができる。 化合物１は、腫瘍細胞系に対して細胞傷害活性を有する。例えば、表１は、結 腸癌系（ＨＣＴ１１６）に対する、およびほとんどの一般的な化学療法に対して 耐性である同じ系（ＨＣＴ１１６／ＶＭ４６）に対する細胞傷害活性を報告して いる。結果は、本発明の化合物がカンプトセシンよりもどれほど活性であるかを 証明する。 表１− １７−アセチル−カンプトセシン酸とカンプトセシンの細胞傷害活性 化合物１は、したがって、抗腫瘍医薬組成物において、活性素因として、適切 な担体（例えば、注射可能な生理学的溶液）と混合して用いることができる。用 量は幅広い限度内で変わり得るが（５〜５００ｍｇ／１日）、原則として、それ は一日約１０mgのアルカロイドである。 以下の実施例により本発明をさらに例示する。 実施例１１７−アセチル−カンプトセシン酸および１７−アセチル−９−メトキシカンプ トセシン酸の単離 ３Kg の Mappia foetida の種子を無水アセトンで３回（３×３１）室温で抽 出した。合わせた抽出物を乾燥するまで濃縮し、カンプトセシン、９−メトキシ カンプトセシンおよび少量の１７−アセチル−カンプトセシン酸を含む５８０ｇ のワックス様の塊を得た。アセトン抽出物からの植物材料を再度繰り返し１０℃ でメタノールで抽出した（３×３１）；抽出物を低温で濃縮した後、２００ｇの 乾燥残存物を得、それを１ｌの水に懸濁し、５００mlのｎ−ブタノールで３回抽 出した；合わせたブタノール抽出物を３０℃よりも高くない温度で減圧下で乾燥 するまで濃縮した。１７−アセチル−カンプトセシン酸および９−メトキシ−１ ７−アセチル−カンプトセシン酸の混合物が豊富な２８．９ｇのアルカロイド画 分を得、ＲＰ１８カラムを逆相でメタノール／水およびメタノールを用いて溶出 しながらクロマトグラフィーを行なって、それぞれクマロイルアグマチン（cuma roylagmatine）およびカンプトセシン酸からなる３つの画分を得た。この画分を さらにシリカゲルで精製して、以下の分光学的、および化学的−物理的性 質を有する３．８ｇの１７−アセチル−カンプトセシン酸を得た： ９−メトキシ−１７−アセチル−カンプトセシン酸の量は、先のものの１／５ であり、以下の化学的−物理的性質を有する：m.p.:208℃ α_D=56.4(c=0.05 H₂ O)。 実施例２１７−アセチル−カンプトセシン酸のカンプトセシンからの調製 １ｇのカンプトセシンを３０mlの水に懸濁し、３４０mgのＮａＯＨを添加して 、撹拌しながら４０℃に２時間またはいずれにしろ完全に溶けるまで維持した； 減圧下で水を除去し、残渣を強い反応の下で２０mlのＤＭＦ中で取り出した；こ の溶液に徐々に６００mg の無水酢酸を添加し、全体を撹拌しながら２時間維持 した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をクロロホルム／メタノール／水が５：６： ４の混合物で分配した。メタノール相を乾燥するまで濃縮し、残渣を結晶化させ て実施例１で記載したのと同じ性質を有する１７−アセチル−カンプトセシン酸 を得た。 実施例３１７−アセチルカンプトセシン−２１−メチルエステル １７−アセチルカンプトセシン（１００mg、０．２５mmol）を無水ＤＭＦ（８ ml）に溶解し、室温で２０時間撹拌しながら、無水炭酸カリウム（６８mg、０． ４９mmole）およびヨードメタン（６９mg、０．４９mmole）をそれに添加した。 反応混合物を濾過し、クロロホルム（５ml）で洗浄した。濾液をクロロホルム（ １０ml）で希釈し、水（５ml×３）で洗浄した。有機相を無水硫酸ナトリウムで 乾燥した。濾過後、溶媒を減圧下で除去し、残渣（１７０mg）をフラッシュクロ マトグラフィーに付した（CHCl₃:CH₃OH=9:1）。表題化合物を固体として得 た（４５mg、収率４５％）。 同じ方法にしたがって、しかしヨードメタンの代わりにエチルブロモアセテー トまたはｔ−ブチルブロモアセテートを用いて、対応するエチル（ａ）またはｔ −ブチル（ｂ）エステルを得た： 実施例４１７−デアセチル−カンプトセシン酸，２１−エステル 化合物ｂ（６０mg、０．１１mmol）を無水クロロホルム（２ml）に溶解した。 ヨードトリメチルシラン（３３mg、０．１７mmole）を、０℃で窒素雰囲気下で 、０℃で１時間、室温で１時間撹拌しながら添加した。反応混合物を５％ＮａＨ ＣＯ₃溶液（５ml）に注ぎ入れた。水相をクロロホルム相が無色になるまでクロ ロホルムで繰り返し洗浄した。この水相を２．５％ＨＣｌ溶液で０℃でpH７にな るまで中和し、ブタノールで抽出した（５ml×６）。このブタノール相 をあわせ、減圧下で蒸発させ、残渣（５１mg）を得、それを、クロロホルム−メ タノールで溶出しながらシリカゲルを通すフラッシュクロマトグラフィーに付し て表題化合物を得た（１１mg）。

【手続補正書】 【提出日】１９９９年３月２５日（１９９９．３．２５） 【補正内容】 Ｉ．請求の範囲の欄 別紙のとおりに補正する。 II．明細書の欄 （１）明細書第１頁１０行目と１１行目の間に「“Journal of Medicinal Chemistry”，1979，Vol.22，NO．3が公知文献である。」を挿入する。 請求の範囲 １．下式（１） （式中、Ｒは、水素原子またはメトキシ基であり；Ｒ₁は、ヒドロキシ、Ｍが アルカリカチオンであるＯＭ基、Ｃ₁〜Ｃ₆アルコキシ基、場合によっては置換さ れているフェノキシ基、アミノ基、Ｃ₁〜Ｃ₆モノアルキルアミノ基またはアルキ ル部分が場合によってアミノ基で置換されているＣ₂〜Ｃ₁₂ジアルキルアミノ基 、またはアリールアミノ基であり；Ｒ₂は、Ｃ₁〜Ｃ₆アルキル基、または式ＣＯ Ｒ₃の基であって、Ｒ₃がＣ₁〜Ｃ₆アルキルであるか場合によっては置換されてい るフェニルまたはベンジルであるが、ただし、Ｒ、Ｒ₁およびＲ₂は同時にそれぞ れＨ、ＮＨＣＨ（ＣＨ₃ )₂、ＣＯＣＨ₃／ＣＯＣ₅Ｈ₁₁ではない）の化合物。 ２．Ｍが、ナトリウムおよびカリウムから選択されるアルカリカチオンである、 請求項１記載の式（１）の化合物。 ３．Ｒが水素またはメトキシであり、Ｒ₁が、ヒドロキシまたはＯＭ基であり、 そしてＲ₂がアセチルである、請求項１または２記載の化合物１。 ４．中間体としての請求項３記載の化合物の用途。 ５．あらかじめ乾燥させた Mappia foetida の植物バイオマスの、５０℃よりも 低い温度での脂肪族ケトンまたは脂肪族エステル、続いて脂肪族アルコールでの 抽出による、請求項３記載の化合物の調製方法。 ６．アルカリ培地中でのカンプトセシンのＣ₁₇ヒドロキシルの選択的アセチル化 による、請求項３記載の化合物の調製方法。 ７．公知の方法による請求項３記載の化合物のエステル化またはアミド化を含む 、請求項１記載の化合物の調製方法。 ８．抗腫瘍性細胞傷害性医薬の調製のため、請求項１〜３記載の化合物を活性成 分として含有する医薬組成物。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，Ｌ Ｕ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ， ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，Ｓ Ｄ，ＳＺ，ＵＧ)，ＵＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ， ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，Ｇ Ｂ，ＧＥ，ＧＨ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ， ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，Ｎ Ｏ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ， ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．下式（１） (式中、Ｒは、水素原子またはメトキシ基であり；Ｒ₁は、ヒドロキシ、Ｍがア ルカリカチオン、好ましくはナトリウムまたはカリウムであるＯＭ基、Ｃ₁〜Ｃ₆ アルコキシ基、場合によっては置換されているフェノキシ基、アミノ基、Ｃ₁〜 Ｃ₆モノアルキルアミノ基またはアルキル部分が場合によってアミノ基で置換さ れているＣ₂〜Ｃ₁₂ジアルキルアミノ基、アリールアミノ基であり；Ｒ₂は、Ｃ₁ 〜Ｃ₆アルキル基または、式ＣＯＲ₃の基であって、Ｒ₃がＣ₁〜Ｃ₆アルキルであ るか場合によっては置換されているフェニルまたはベンジルである）の化合物。 ２．Ｒが水素またはメトキシであり、Ｒ₁が、ヒドロキシまたはＯＭ基（Ｍ＝ナ トリウムまたはカリウム）であり、そしてＲ₂がアセチルである、請求項１記載 の化合物。 ３．中間体としての請求項２記載の化合物の用途。 ４．あらかじめ乾燥させた Mappia foetida の植物バイオマスの、５０℃よりも 低い温度での脂肪族ケトンまたは脂肪族エステル、続いて脂肪族アルコールでの 抽出による、請求項２記載の化合物の調製方法。 ５．アルカリ培地中でのカンプトセシンのＣ₁₇ヒドロキシルの選択的アセチル化 による、請求項２記載の化合物の調製方法。 ６．公知の方法による請求項２記載の化合物のエステル化またはアミド化を含む 、請求項１記載の化合物の調製方法。 ７．抗腫瘍性細胞傷害性医薬の調製のため、請求項１または２記載の化合物を活 性成分として含有する医薬組成物。