FI68828B - Foerfarande foer framstaellning av nya neuroleptiska 2-(aminoalkyl)-5-fenyl-2,3,4,4a,5,9b-hexahydro-4a,9b-trans-1h-pyrido(4,3-b)indolderivat - Google Patents

Description

U„j^l Γοΐ M1v KUULUTUSJULKAISU ^8828

«Jiff? tBJ (11> UTLÄGGNIN GSSKRIFT

C (45) Ta tentti oyönnetty 11 11 1935 ^ ^ ^ (511 Kv.lk.*/lnt.CI.4 C 07 D 471/04 // (C 07 D 471/04, C 07 D 209:00, C 07 D 221:00) SUOMI FINLAND (21) Patenttihakemus — Patentansöknirtg 802371 (22) Hakemispäivä — Ansökningsdag 29*07.80 (Fi) (23) Alkupäivä — Giltighetsdag 29*07*80 (41) Tullut julkiseksi — Blivit offentlig .01 ,8l

Patentti- ja rekisterihallitus /44^ Nähtäväksi panon ja kuul. julkaisun pvm.— qt gc

Patent- och registerstyrelsen ' Ansökan utlagd och utl.skriften publicerad (32)(33)(31) Pyydetty etuoikeus — Begärd prioritet 30.07.79 USA(US) 61573 (71) Pfizer Inc., 235 East 42nd Street, New York, New York 10017, USA(US) (72) Willard McKowan Welch, New London, Connecticut, Charles Armon Harbert, New London, Connecticut, USA(US) (74) Oy Kolster Ab (54) Menetelmä uusien neuioleptisten 2-(aminoalkyy1i)-5-fenyyli-2,3,4,4a ,5,9b-heksahydro-4a ,9b-trans-1H-pyrido/4,3~b/indolijohdannaisten valmi stamiseksi - Förfarande för framställning av nya neurolepciskä 2-(aminoalkyl)-5--feny1-2,3,4,4a,5,9b-hexahydro-4a,9b-trans-1H-pyr i do/4,3~b/indolder ivat

Keksinnön kohteena on menetelmä uusien neuroleptisten 2-(aminoalkyyli)-5-fenyyli-2,3,4,43,5,9b-heksahydro-4a,9b-trans-lH-pyrido/4,3-b7indolijohdannaisten (+)-enantiomeerien, (+)- ja (-)-enantiomeerien seoksien ja (-)-rasemaattien valmistamiseksi, joilla on kaava I

9 H

XVrYr--VCH2>m-NIiR

U L >4a J I

" N

I H

fcTi

Y

2 68828 jossa m on 2-9, X ja Y ovat toisistaan riippumatta H tai F ja R on H, 1-3 hiiliatomia sisältävä alkanoyyli, 2-3 hiiliatomia sisältävä alkoksikarbonyyli tai mahdollisesti monosubstituoitu bent-soyyli- tai fenyylisulfonyyliryhmä substituentin ollessa CH^, F,

Cl, Br tai OCH^, ja niiden farmakologisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi.

Skitsofreenisen käyttäytymisen menestyksekäs hoito käyttämällä antipsykoottisia rauhoittavia lääkkeitä, kuten klooripro-matsiinia, on stimuloinut tutkimusta, jonka avulla voitaisiin löytää muita neuroleptisiä lääkkeitä, joilla olisi entistä parempi biologinen profiili. Yksi tällainen yhdisteryhmä ovat heksahydropyri-do/_4,3-b/indolit. Yhdisteillä on seuraava perusrengasrakenne

9 1 9bA

I O I i ! -- ^ N '"4^· 6 | 4 5 ja stereokemia kohdissa 4a ja 9b voi olla cis tai trans.

Ennestään tunnetaan useita heksahydropyridoindoleja, jotka ovat hyödyllisiä rauhoittavina lääkkeinä, neuroleptisinä aineina, kipulääkkeinä, sedatiiveina, lihastenrentouttajina ja verenpainetta alentavina aineina.

Esimerkiksi FI-patenttihakemuksesta 800179, FI-kuulutus-julkaisuista 57 950, 62 304 ja 63 402 sekä US-patenttijulkaisuista 3 687 961, 4 001 263 ja 4 141 980 tunnetaan kemialliselta rakenteeltaan kaavan I mukaisten yhdisteiden kaltaisia yhdisteitä, joilla on samankaltaisia terapeuttisia ominaisuuksia kuin kaavan I mukaisilla yhdisteillä.

Esillä olevan keksinnön mukaisesti valmistetut kaavan I mukaiset aminoalkyyliyhdisteet ja niiden asyloidut johdannaiset ovat kuitenkin uusia yhdisteitä, joiden yllättävän suuri terapeuttinen aktiivisuus ei ollut odotettavissa tunnetun tekniikan perusteella.

68828 3

Uusilla kaavan I mukaisilla heksahydro-trans-4a,9b-pyrido-fT, 3-b7indoleilla, jotka 5-asemassa on substituoitu aryyliryh-mällä ja 2-asemassa aminoalkyyli- tai amidoalkyyliryhmällä, on havaittu olevan voimakas neuroleptinen vaikutus.

Optisesti puhtailla kaavan I mukaisten yhdisteiden (-)-enan-tiomeerijohdannaisilla on huomattavasti vähemmän neuroleptistä aktiivisuutta kuin vastaavilla (+)-enantiomeereilla tai raseemisil-la seoksilla. Näin ollen puhtaat (-)-enantiomeerit eivät kuulu tähän keksintöön, mutta näiden seokset, jotka sisältävät eri määriä (+)-enantiomeerejä, taas kuuluvat tähän keksintöön.

Edullisia kaavan I mukaisia yhdisteitä ovat seuraavat: (+)- tai (-)-2-(N-bentsoyyli-1'-amino-n-but-4'-yyli)-5-(p-fluorifenyyli)-8-fluori-2,3,4,4a,5,9b-heksahydro-4a,9b-trans-lH-pyrido/ί,3-b/indoli (kaavan I mukainen (+)-enantiomeerinen tai raseeminen yhdiste, jossa m on 4, NHR on NHCOPh, X on F ja on F) , (+)- tai (-)-2-/N-(o-metoksibentsoyyli)-1'-amino-n-but-4'-yyli/-5-(p-fluorifenyyli)-8-fluori-2,3,4,4a,5,9b-heksahydro-4a,9b-trans-lH-pyrido/4,3-S7indoli (kaavan I mukainen (+)-enantiomeerinen tai raseeminen yhdiste, jossa m on 4, NHR on NHCOC6H4OCH3(o), X on F ja Y on F), (+)- tai (-)-2-(N-etoksikarbonyyli-1'-amino-n-but-4'-yyli)-5-(p-fluorifenyyli)-8-fluori-2,3,4,4a,5,9a-heksahydro-4a,9b-trans-lH-pyrido/4,3-b/indoli (kaavan I mukainen (+)-enantiomeerinen tai raseeminen yhdiste, jossa m on 4, NHR on NHCOOC2H5, X on F ja Y on F), (+)- tai (-)-2-(N-asetyyli-1'-amino-n-but-4'-yyli)-5-fenyyli-2,3,4,4a,5,9b-heksahydro-4a,9b-trans-lH-pyrido/4,3 Hb/indoli (kaavan I mukainen (+)-enantiomeerinen tai raseeminen yhdiste, jossa m on 4, NHR on NHCOCH^ ja X ja F ovat kumpikin vety-atomeja) .

Keksinnön mukaiselle menetelmälle on tunnusomaista, että 4 68828 kaavan IV mukainen nitriili

H

-----1 'N-(CH2'm-lCN

N , k» (Oi ΐ

Y

jossa X, Y ja m merkitsevät samaa kuin edellä, pelkistetään metal-lihydridillä eetteriliuottimessa tai vedyllä jalometallin avulla inertissä orgaanisessa liuottimessa kaavan I mukaiseksi yhdisteeksi, jossa R on H, ja haluttaessa valmistaa kaavan I mukainen yhdiste, jossa R on muu kuin vety, saatu kaavan I mukainen yhdiste, jossa R on vety, saatetaan reagoimaan asyyli- tai sulfonyylihalogenidin (kloridi tai bromidi) kanssa, joka voi olla 1-3 hiiliatomia sisältävä alkanoyylihalogenidi, 2 tai 3 hiiliatomia sisältävä alk-oksikarbonyylihalogenidi, bentsoyylihalogenidi , fenyylisulfonyy-lihalogenidi tai monosubstituoitu bentsoyyli- tai fenyylisulfon-yylihalogenididi substituentin ollessa CH3, F, Cl, Br tai OCH^ inertissä liuottimessa, joka sisältää neutralointiainetta, tai kaavan I mukainen yhdiste, jossa R on vety, saatetaan reagoimaan karboksyylihapon tai sulfonihapon kanssa, joka vastaa asyyli-tai sulfonyylihalogenidia, inertissä liuottimessa, joka sisältää disykloheksyylikarbodi-imidiä, ja haluttaessa saatu kaavan I mukainen yhdiste muutetaan hap-poadditiosuolaksi.

Esillä olevan keksinnön mukaisen menetelmän yhteydessä esitetyissä kaavoissa 4a- ja 9b-asemissa olevat vetyatomit ovat trans-asemassa toisiinsa nähden, joten tässä on kyse suhteellisesta trans-stereokemiasta, ei absoluuttisesta stereokemiasta.

Sivulla 6 olevassa reaktiokaaviossa A pyrido^*4,3-b/-indoliytimestä 5 63828

H

X ____JX^^n käytetään merkintää s''' n- ΓοίχΧ j T j ,v

IOI

Y

Näin ollen kaavan I mukaisista johdannaisista käytetään merkintää

(CH )NHR

Ό ja lähtöaineena käytetystä kaavan II mukaisesta pyrido/4,3-b/in-dolista

H

X \ -X r-------N-H

LOI Γ i

H

rpi r

Y

käytetään merkintää N-H .

Kaavan IV mukaiset nitriilit ja edelleen kaavan I mukaiset johdannaiset voidaan syntetisoida liittämällä ensin lähtöaineena käytettyyn tunnettuun kaavan II mukaiseen pyrido/jT, 3-b/indoliin 6 68828 kaavan lila mukainen sivuketjusyntoni, kuten kaaviossa A on esitetty, ja muuntamalla sen jälkeen näiden liitostuotteiden muodostamat sivuketjut.

Kaaviossa A ja sen selostuksessa substituentit X ja Y sekä luku m merkitsevät samaa kuin edellä ja Hai on kloori, bromi, p-tolueenisulfonyyli tai metaanisulfonyyli.

Kaavio A

Kaavan I mukaisten heksahydro-trans-pyridoindolijohdannaisten valmistus

... , ,CN

reaktio 1 j + Hal-(CH ) -1CN—5! I 2 m-1 2 m

II Ilia IV

0-(CH_) NH_ ^ m z I (R = H) N-(CH_) NH---> "n-(CH_) NHR3 2 m 2 ^ I 2 m reaktio 3

I (R = H) I

Reaktio 3 on asylointi tai sulfonylointi. R on asyyli- tai sulfonyyliryhmä.

Reaktio 1 käsittää sivuketjusyntonin III liittämisen py-ridoindoliytimeen alalla tunnetulla tavalla. Reaktiossa saadaan kaavan IV mukainen nitriili, jota pitää edelleen modifioida, jotta saadaan kaavan I mukainen johdannainen. Reaktiot 2 ja 3 esittävät näitä muuntamista jotka niinikään ovat ennestään tunnettuja.

Reaktio 1 voidaan suorittaa saattamalla ympäristön lämpötilan ja palautusjäähdytyslämpötilan välillä olevassa lämpötilassa suunnilleen ekvimolaariset määrät lähtöaineena käytettyä kaavan II mukaista pyridoindolia ja kaavan lila mukaista sivuketju-syntonia reagoimaan keskenään inertissä polaarisessa liuottimessa,

II

7 68828 kuten metanolissa, etanolissa, tetrahydrofuraanissa, glyraessä, alemmassa alkyyliketonissa, dimetyyliformamidissa tai dimetyyli-sulfoksidissa, käyttämällä apuna vähintään ekvivalenttista määrää neutralointiainetta, kuten natriumbikarbonaattia, pyridiiniä tai trietyyliamiinia, ja antamalla reaktion tapahtua käytännöllisesti katsoen täydellisesti. Reaktiotuotteena saatu nitriili voidaan puhdistaa käyttämällä tavanomaisia menetelmiä, kuten uuttoa, kiteytystä, kromatografiaa tai näiden yhdistelmää.

Reaktio 2 käsittää kaavan IV mukaisen nitriilin pelkistyksen kaavan I mukaiseksi johdannaiseksi, jossa NHR on primaarinen amiini, Nl·^· Reaktio voidaan suorittaa käyttämällä tunnettuja reagensseja, kuten litiumalumiinihydridiä eetterissä tai tetrahydrof uraanissa tai vetyä ja palladium/hiilikatalyyttiä tms. katalyyttiä metanolissa, etanolissa tai etyyliasetaatissa.

Primaarinen amiinijohdannainen voidaan muuntaa kaavan I mukaiseksi johdannaiseksi, jossa R on muu kuin vety, käyttämällä reaktiota 3.

Kun halutaan valmistaa kaavan I mukainen johdannainen, jossa R on asyyliryhmä tai sulfonyyliryhmä, so. alkanoyyliryhmä, alk-oksikarbonyyliryhmä, bentsoyyliryhmä, fenyylisulfonyyliryhmä tai monosubstituoitu bentsoyyli- tai fenyylisulfonyyliryhmä, kaavan I mukainen primaarinen amiinijohdannainen asyloidaan tai sulfonoi-daan käyttämällä Schotten-Baumann-olosuhteita. Schotten-Baumann-asylointi voidaan suorittaa saattamalla primaarinen amiinijohdannainen reagoimaan sopivan asyyli- tai sulfonyylihalogenidin (Cl, Br) kanssa inertissä liuottimessa, kuten metyleenikloridissa, alemmassa alkyyliketonissa, dimetyyliformamidissa tai dimetyyli-sulfoksidissa, käyttämällä apuna neutralointiainetta, kuten natriumbikarbonaattia, pyridiiniä tai trietyyliamiinia. Tällä menetelmällä saatu tuote voidaan puhdistaa käyttämällä apuna tavallisia menetelmiä, kuten uuttoa, kiteytystä, pylväskromatografiaa tai näiden yhdistelmää.

Optisesti aktiiviset tai raseemiset johdannaiset voidaan valmistaa käyttämällä lähtöaineina vastaavia optisesti aktiivisia tai raseemisia pyridoindoleja. Raseemiset johdannaiset voidaan β 68828 myös erottaa ennestään tunnetuilla raseemisten amiinien erotusmenetelmillä (vrt. Fieser et ai., "Reagents for Organic Synthesis", Wiley and Sons, Inc., New York (1967), Voi 1, s. 977 ja siinä annetut viitteet). Kun esimerkiksi muodostetaan amiinisuola käyttämällä D-pyroglutamiinihappoa, saadaan diastereomeerejä, jotka voidaan erottaa jakokiteytyksellä. (+)-enantiomeeri voidaan saada käsittelemällä erottunutta suolaa emäksellä.

Kaavan I mukaisten johdannaisten farmakologisesti hyväksyttävät suolat voidaan valmistaa saattamalla ne reagoimaan noin ekvivalenttisen määrän kanssa orgaanista tai epäorgaanista happoa joko vesiliuoksessa tai vedettömässä liuoksessa. Sopiva happoja ovat mm. suolahappo, bromivetyhappo, jodivetyhappo, rikkihappo, fosforihappo, etikkahappo, maitohappo, sitruunahappo, viinihappo, meripihkahappo, omenahappo ja glukonihappo. Suola voidaan erottaa poistamalla liuotin vakuumissa tai tarvittaessa saostamalla.

Kaavan I mukaiset johdannaiset ovat hyödyllisiä neurolep-tisinä aineina hoidettaessa psyykkisiä häiriötiloja ja sairauksia, kuten skitsofreniaa, psykooseja ja neurooseja. Tällaista hoitoa tarvitsevia oireita ovat mm. tuskaisuus, aggressiivisuus, kiihoittuneisuus, masennus, hallusinaatiot, jännittyneisyys ja emotionaalinen tai sosiaalinen syrjäänvetäytyminen. Yleisesti katsottuna on johdannaisilla huomattava rauhoittava vaikutus, mutta vähemmän sivuvaikutuksia kuin tällä hetkellä käytössä olevissa lääkkeissä.

Kaavan I mukaiset johdannaiset voidaan sisällyttää erilaisiin farmaseuttisiin valmisteisiin, jotka sisältävät niitä yksin tai sekoitettuna farmaseuttiseen kantaja-aineeseen, kuten inert-tiin kiinteään laimentimeen, veteen tai johonkin myrkyttömään orgaaniseen liuottimeeen, ja valmisteet voivat olla esimerkiksi tabletteina, liivatekapseleina, jauheina, pillereinä, siirappeina, injektioliuoksina tms. Sopivia kantaja-aineita ovat esim. vesi, etanoli, gelatiinit, laktoosi, tärkkelykset, kasviöljyt, petroli-hyytelö, kumit, glykolot, talkki, bentsoyylialkoholit ja muut tunnetut lääkeaineiden kantaja-aineet. Haluttaessa nämä farmaseuttiset valmisteet voivat sisältää säilöntäaineinta, kostutusaineita, stabilointiaineita, voiteluaineita, adsorptioaineita, puskurointi-aineita ja isotonisia aineita.

Il 9 68828

Kaavan I mukaiset johdannaiset voidaan antaa hoidon tarpeessa oleville potilaille suun kautta, laskimonsisäisesti, lihaksensisäisesti, ihonalaisesti tai vatsaontelonsisäisesti. Tavallisesti käytetään ensin pieniä annoksia ja niiden suuruutta lisätään, kunnes optimaalinen taso on saavutettu. Kuten minkä tahansa lääkkeen ollessa kyseessä, annoksen suuruus, annosmuoto ja antotapa riippuvat potilaan iästä, painosta ja antotavasta ja lopullinen arviointi jää hoitavan lääkärin tehtäväksi.

Tavallisesti ihmisellä saadaan tehokkaita hoitotuloksia, kun aktiiviainetta käytetään noin 0,1 - 100 mg vuorokaudessa.

Jos aktiiviaineella on pitkitetty vaikutus, annos voidaan antaa joka toinen päivä tai kerran tai kaksi viikossa.

Kaavan I mukaisten johdannaisten vaikutus voidaan määrittää suorittamalla rotilla hyvin tunnettu koe, jossa antagonisoi-daan amfetamiinin aiheuttamat oireet. Menetelmä korreloi erinomaisesti ihmisen reaktioiden kanssa ja se on esitetty julkaisuissa: A. Weissman et ai., J. Pharmacol. Exp. Ther. 151 (1966) 339 ja Quinton et ai., Nature 200 (1963) 178. Seuraavassa esitetyn vertailukokeen perusteella voidaan todeta, että kaavan I mukaisilla johdannaisilla on erinomainen rauhoittava vaikutus verrattuna standardilääkkeeseen eli klooripromatsiiniin.

Rotille aiheutettujen amfetamiinioireiden antagonisointi

Eräiden kaavan I mukaisten johdannaisten vaikutuksia voimakkaisiin amfetamiinilla indusoituihin oireisiin rotilla arvioitiin menetelmillä, jotka Quinton ja Halliwell sekä Weissman ovat esittäneet. Rotat laitettiin yksin peitettyihin muovihäkkeihin, joiden mitat olivat noin 26 x 42 x 16 cm. Lyhyen tottumisajan jälkeen kunkin ryhmän jäsenille, yleensä viisi eläintä kutakin annos-tasoa kohti, annettiin ihonalaisesti (s.c.) valittu annos koeyh-distettä. Sitten niille annettiin 1, 5 ja 24 tunnin kuluttua vatsaontelonsisäisesti (i.p.) 5 mg/kg d-amfetamiinisulfaattia. Tunnin kuluttua anfetamiinin antamisesta jokaista rottaa tarkkailtiin amfetamiinin aiheuttaman luonteenomaisen häkin ympäri liikkumisen havaitsemiseksi. Amfetamiinin antamisen jälkeisistä vastetulok-sista voitiin määrittää se yhdisteannos, joka tarvittiin antago-nisoimaan tai estämään amfetamiinin aiheuttama luonteenomainen 10 68828 häkin ympäri liikkuminen 50 %:lla koe-eläimistä (ED^^). Arviointi-ajankohta sattuu yksiin amfetamiinin huippuvaikutuksen kanssa, joka on 60-80 minuutin kuluttua annoksen antamisesta. Esimerkkien 2, 3 ja 4-15 mukaisilla yhdisteillä ja ihonalaisesti annetuilla klooripromatsiinivertailuyhdisteellä saadut tulokset on esitetty taulukossa 1.

Taulukko 1: Amfetamiinikoe rotilla

Esimerkki ^50 (m9/kg) 1 h 5 h 24 h 2 17,7 4,5-11,5 17,7 3 0,02 0,006 0,66 4 0,11 0,36 1

5 NT NT NT

6 0,01 0,004 0,4 7 0,023 0,002 0,032 8 0,09 0,018 0,05 9 0,02 0,006 0,28 10 (-)-enantiomeeri 111 11 0,1-0,3 0,01-0,03 0,3-1 12 0,05 0,02 0,3 13 0,45 0,18 1

14 1 1 NT

15 1,0-0,1 1,0-0,1 1,0-0,1 klooripromatsiini _5,3_8,5_32 (s.c.) NT = ei tehty koetta

Ns. "sisäsyntyinen" rauhoittava vaikutus voidaan määrittää menetelmällä Leysen et ai., Biochem. Pharmacol., 27 (1978) 307. Mitataan lääkkeen kyky inhiboida ^H-spiroperidolin liittyminen do-pamiinireseptoreihin ja saadut tulokset korreloivat lääkkeiden suhteelliseen kykyyn vaikuttaa dopamiinireseptorien välittämään käyttäytymiseen /Burt, et ai.. Molecular Pharmacol., 12 (1976)80&/· Seuraavassa esitetyn vertailukokeen tuloksista ilmenee, että tämän sisäsyntyisen menetelmän mukaan kaavan I mukaisilla johdannaisilla on erinomainen neuroleptinen vaikutus.

11 688 28

Vaikutus, joka inhiboi 3H-spiroperidolin liittymisen dopa-miinireseptoreihin

Johdannaisten suhteellista affiniteettia reseptoreihin tut-3 kittiin käyttämällä H-spiroperidolia (spiperone) merkittynä ligan-dinä menetelmässä Leysen et ai. Biochem Pharmacol, 27 (1978) 307-316. Kokeessa meneteltiin seuraavalla tavalla:

Rotilta (Spraque-Dawley CD, koiras, 250-300 g, Charles River Laboratories, Wilmington, MA) poistettiin pää ja aivoista leikeltiin välittömästi jääkylmän lasilevyn päällä pois aivojuovio (corpus striatum, 100 mg/aivot). Kudos homogenoitiin 40 tilavuus-osassa (1 g + 40 ml) jääkylmää 50 mM Tris.HCl-puskuria pH 7,7 (tris/hydroksimetyyli/aminometaani; THAM). Homogenaatti sentri-fugoitiin kahdesti (20 000 1/min, 10 min) ja välillä saatu laskeuma homogenoitiin tuoreeseen THAM-puskuriin (sama tilavuus). Lopullinen laskeuma suspendoitiin 90 tilavuusosaan kylmää, tuoretta (yhden viikon vanha) varastoliuosta, jossa oli 50 mM Tris-pusku-ria, pH 7,6, joka sisälsi 120 mM NaCl (7,014 g/1), 5 mM KC1 (0,3728 g/1) , 2 mM CaCl2 (0,222 g/1), 1 mM MgCl2 (0,204 g/1) , 0,1 % askorbiinihappoa (1 mg/ml) ja 10 /um pargylineä (100 /ai va-rastoliuosta/100 ml puskuria; varastoliuos = 15 rag/10 ml kahdesti tislattua vettä). Askorbiinihappo ja pargyline lisättiin tuoreina päivittäin. Kudossuspensio laitettiin 37°C vesihauteeseen viideksi minuutiksi, jotta kudoksen monoamiinioksidaasi varmasti inaktivoitu! ja sen jälkeen sitä pidettiin jäässä käyttöön asti. In-kubointiseos sisälsi 0,02 ml inhibiittoriliuosta (koeyhdistettä halutun väkevyisenä varastoliuoksena). 1,0 ml kudoshomogenaattia 3 ja 0,10 ml merkintäainetta ( H-spiroperidoli, New England Nuclear 23,6 Cl/ftmol) sekoitettiin niin, että lopulliseen inkubointiseok-seen saatiin väkevyydeksi 0,5 nM (tavallisesti laimentamalla 2,5 (ul varastoliuosta 17 ml:aan kahdesti tislattua vettä). Putkia inkuboitiin perättäisesti kolmen ryhmissä 10 minuuttia 37°C:ssa ja sen jälkeen kustakin inkuboidusta putkesta suodatettiin 0,9 ml Whatman FG/B-suodattimen läpi suurtyhjöpumpun avulla. Kukin suodatin laitettiin skintillaatioputkeen, lisättiin 10 ml skintillaa-tiofluoria ja jokaista putkea käänneltiin voimakkaasti ylösalaisin viisi sekuntia. Näytteiden annettiin seisoa yön yli, kunnes suo- i2 68828 dattimet olivat läpikuultavia, käänneltiin jälleen ylösalaisin ja radioaktiivisuutta laskettiin 1,0 minuutin ajan. Sitoutuminen -5 3 laskettiin fentamooleina (10 moolia) H-spiroperidolia, joka oli sitoutunut mg:aan proteiinia. Kontrollit (liuotin tai 1-butacla- -7 mol, 10 M; 4,4 mg liuotettiin 200 /iltaan jääetikkaa ja sen jälkeen laimennettiin 2,0 ml:aan kahdesti tislatulla vedellä väkevyy--4 deltään 10 M varastoliuokseksi, jota pidettiin jääkaapissa), — 7 —4 sokko (d-butaclamol, 10 M, 4,4 mg/2 ml väkevyydeltään 10 M varastoliuokseksi samoin kuin 1-butaclamol) ja inhibiittoriliuokset mitattiin kolmena kappaleena. Väkevyys, jossa sitoutuminen pieneni 50 % (IC,-0) , arvioitiin puolilogaritmipaperilla. Liukenemattomat lääkkeet liuotettiin 50 % etanoliin (1 % etanoli-inkubointi).

Esimerkkin 2, 3 ja 4-15 mukaisilla yhdisteillä ja ihonalaisesti annetulla klooripromatsiinilla saadut tulokset on esitetty taulukossa 2 nM-väkevyyksinä, jotka aiheuttivat 50 % vähenemisen 3 H-spiroperidolin sitoutumiseen.

3

Taulukko 2: Vaikutus, joka inhiboi H-spiroperidolin liittymisen dopamiinireseptoreihin „ . ~ ICcn (nM)

Esimerkki 50 2 24 3 13 4 16 5 10 6 9 7 8 8 9 9 4,7 10 1000 11 19 12 11 13 14 14 27 15 16 klooripromatsiini 51 (s.c.)

Il 13 68828

Esimerkki 1 (-)-2-(1'-syaani-n-prop-31-yyli)-5-(p-fluorifenyyli)-8-fluori-2,3,4,4a,5,9b-heksahydro-4a,9b-trans-lH-pyrido/J ,3-b7indoli /!j3itriili (kaava IV\j

Sekoitettu suspensiota, jossa oli 8-fluori-5~(p-fluorifenyyli) -2,3,4,4a,5,9b-heksahydro-4a,9b-trans-lH-pyrido/4,3-b7indo-lia (lähtöaineena käytetty pyridoindoli sm) (1 g, 3,49 mM) , gamma-bromibutyronitriiliä (0,723 g, 4,88 mM), vedetöntä natriumkarbonaattia (2,1 g, 20,9 mM), kaliumjodidia (0,289 g, 1,74 mM) ja metyyli-isobutyyliketonia (40 ml), palautusjäähdytettiin typpi-atmosfäärissä 16 tuntia. Reaktioseos jäähdytettiin huoneen lämpötilaan ja haihdutettiin kuiviin vakuumissa. Jäljelle jäänyt valkoinen kiinteä aine erotettiin veteen (40 ml) ja kloroformiin (50 ml) liukeneviin osiin. Faasit erotettiin ja vesifaasi uutettiin kloroformilla (50 ml). Kun orgaaniset kerrokset yhdistettiin, kuivattiin (MgSC>4) ja haihdutettiin vakuumissa, saatiin vaaleankeltainen öljy. Kun öljy käsiteltiin kloorivetykaasulla asetonissa (40 ml), saatiin suodattamalla ja asetonilla (10 ml) pesemällä 0,813 g (60 % saanto) otsikon nitriiliä valkoisena kiinteänä aineena, sp. 245-249°C (HCl-suola).

Analyysi yhdisteelle C2iH21N3F2*HC1: laskettu: C 64,67 H 5,42 N 10,77 löydetty: C 64,38 H 5,71 N 10,71.

Esimerkki 2 (-)-2-(41-amino-n-but-41-yyli)-5-(p-fluorifenyyli)-8-fluori-2,3,4,4a,5,9b-heksahydro-4a,9b-trans-lH-pyrido/4,3-b7indoli (johdannainen 2)

Sekoitettuun suspensioon, jossa oli litiumalumiinihydridiä (0,167 g, 4,4 mM) dietyylieetterissä (35 ml), lisättiin typpi-atmosfäärissä esimerkissä 1 valmistettua nitriiliä (0,781 g, 2,0 mM) sellaisella nopeudella, että reaktiolämpötila pysyi välillä 28"30°C (15 minuuttia). Sekoitusta jatkettiin neljä tuntia ympäristön lämpötilassa ja sen jälkeen lisättiin Glauber-suolaa (Na2S04·10H2O) (1,2 g, 4 mM) pienissä erissä 10 minuutin aikana.

14 6 8 828

Valkoinen kiinteä aine suodatettiin talteen, pestiin dietyylieet-terillä (10 ml) ja suodos haihdutettiin vakuumissa niin, että saatiin vaaleankeltainen öljy. Kun öljy käsiteltiin kloorivedyllä eetterissä (35 ml), suodatettiin ja pestiin eetterillä (20 ml), saatiin 0,498 g (64 % saanto) otsikon johdannaista (2) valkoisena kiinteänä aineena, sp. 224-227°C (HCl-suola).

Analyysi yhdisteelle C2iH25N3F2 ’ 2,5H20 HCl: laskettu: C 53,28 H 6,38 N 8,87 löydetty: C 52,98 H 5,94 N 8,66.

Esimerkki 3 (-)-2-(N-asetyyli-11-amino-n-but-4'-yyli)-5-(p-fluorifen-yyli-8-fluori-2,3,4,4a,5,9b-heksahydro-4a,9b-trans-lH-pyrido-/4,3-b/indoli (johdannainen 3)

Sekoitettuun liuokseen, jossa oli esimerkin 2 mukaista johdannaista (2) (0,315 g, 0,803 mM), trietyyliamiinia (0,44 ml, 3,2 mM) ja metyleenikloridia (10 ml), lisättiin typpiatmosfäärissä 2°C:ssa (jäähaude) liuos, jossa oli asetyylikloridia (0,063 ml, 8,8 mM) 5 ml:ssa metyleenikloridia, sellaisella nopeudella, että reaktiolämpötila pysyi 2-5°C:ssa. Seosta sekoitettiin kaksi tuntia ympäristön lämpötilassa ja sen jälkeen se kaadettiin kyllästettyyn natriumbikarbonaattiliuokseen (30 ml). Faasit erotettiin ja vesifaasi uutettiin metyleenikloridilla (30 ml). Kun orgaaniset faasit yhdistettiin, kuivattiin (MgSO^) ja haihdutettiin vakuumissa, saatiin vaaleankeltainen öljy. Kun öljy käsiteltiin kloorivedyllä isopropanolissa (5 ml) ja suodatettiin, saatiin 0,230 g (65 % saanto) otsikon johdannaista (3) valkoisena kiinteänä aineena, sp. 234-245°C (HCl-suola).

Analyysi yhdisteelle C23H27ON.JF2 * HCl: laskettu: C 63,36 H 6,47 N 9,63 löydetty: C 63,25 H 6,48 N 9,73.

Esimerkit 4-15

Seuraavat johdannaiset valmistettiin noudattamalla esimerkin 3 mukaista menetelmää käyttämällä asetyylikloridin sijasta ekvivalenttista määrää sopivaa happokloridia sekä sopivan kaavan n is 6882 8 I mukaista aminoalkyyliyhdistettä, jossa R on vety ja joka on valmistettu esimerkkien 1 ja 2 mukaisella tavalla käyttämällä lähtöaineena sopivaa kaavan II mukaista pyridoindolia ja sopivaa kaavan Hai (C^i^-^CN mukaista halogeeninitriiliä.

Lähes kaikkien syntetisoitujen johdannaisten pyridoindoli-ydin on 5-(p-fluorifenyyli)-8-fluori-2,3,4,4a,5,9b-heksahydro-4a,9b-trans-lH-pyrido£4,3-b7indoli. Tästä syystä (ellei toisin ilmoiteta) seuraavissa esimerkeissä johdannaisen nimi on aina annettu 2-aseman substituentin (sivuketju) mukaan, mutta edellä mainittu pyridoindoliydin sisältyy myös yhdisteen nimeen. Täten esimerkin 4 mukaisen johdannaisen täydellinen nimi on 2-(N-asetyyli-2-aminoetyyli)-5-(p-fluorifenyyli)-8-fluori-2,3,4,4a,5,9b-heksa-hydro-4a, 9b-trans-lH-pyrido/_4,3-b7indoli .

ie 6 8 8 2 8 3>ι sm— loo r~~o o ro cr, σιι/ι vui *3"«o 4J+J cow γμί woo vei ropi ooooot^mmintM cnoo +> +> - ~ ~ - " " - " " " K " ' ' ' ' ' ' 0) o) σισι σισ\ oooo ooco cooo mo oooo σ>σο λ: s) M >1 03 :0 moo oo<n oto <»σι n o r~c^ r^ro Γ'Ο meri

H H H h O OI 00 *!· OLD CM O rk -k N O LOI ^ tN rl CT\ O ID O

k - ' - - - - - ^ ' m ro - *· - " - *· - - - " •H U3U0 lO ID l£i v£3 t-~ l£3 I— t"· '—' w l£> l£> <D l£3 113 l£> U0 l£3 Γ~Γ~ tn Ϊ>Ί C Ch >, rio σι(Ν mo σΐΗ 03 03 r-rHcoiooooiorooo·^ r-t (NroromincoOiHrO'd’ e £3 Oirt νο·<ί μπ oih roro

0} kk ·.·. * *. kV «.«.-H -H

e OI OI i—| H i—li—1 O O CM CM 03 03 CMCOOOroroOOinin »< inin ®id teto toto teto G G vdvd kovn toto to us

C C

03 03 H Ό S3

O S3 S3 CM rH

s: o o cmih cm pmh u CM CMi—I CM CM CM* TO M CM Ek U h CO U S3

G h h U h En o coffi ro roffi · O

d) ro roS3 ro cOrH ro cm G G COrH Z · Z Z · co cm G ZHZ'IZ'-lESOZK-H -H ZU cm O cm rH cm O Z S3

-H 0U 00 0U0S3 0 G G OKOtNOUOcMO

M coS3 m cm σ>κ i—i · ro^r M Ai θ' · ®X HK r-tffi σνρ* •rl n) cm· cm S3 CM· roO ro"\ cm O cm ro · ro <M\

•H> ®0 S3 CM S3 O S3 m S3 rH 03 03 S3 cm S3 cn S30 SIcm S3 >-H

Cu cO h cm cm\ μ·π mffi d) g g cosi σι cm oo\ ro g 03 CM s; CMi—I CM S3 CM CM CMi—I 3 3 CM CM CMrH CM S3 CM rH CMi-l ΗΛ3 U · U · U · U · U · tn tn U · U · U · U · U ·

U CO O rH CM O O

O fot^^oocMvocako I £3 +> I G P1 I I i I l I I I Sh 0) X3 P 03 l • θ'i p O’ r~ ro m o\ o £3 3 O £3 oo CU cm cm ro o rH in m in E H «J E -rl oi

tn CM CM CM CM CM CM CM CM 3UH> S Ή CM

III I r-,

| ^ _ I — O — -H I I

-rl -H -H o CO Cl ro rH I G I r-^

•Hr-Hi—li—I P *3 >1 -P I £3 *P

rH >1 >1 >1 S3 · >1 · >1 G O I H I

I >, >1 >1 >1 >i C S3 C I S3 G O >itn

O >ι I I I S3 £3 — C - I -H G ro G

Ο I - - - 3 -p 3 p C H -p I 03

03 ro in ίο r~ -p S3 rH S3 I l 3 g -M >,1 I l | rH S3 >1 S3 -P O I 3 P -P

S3 Di -P 0) -P >i O >i O G G I II

r-, O £3 AC CU >ιτο I το Λ -H rH - -PO

•H Sh 03 0) 03 I —' ~ ' I g I rH SP

rH CU CU S3 S3 p p C 3 I Λ 'O -H

>1 | | | | | -H I -rl I I -H cd -H 03 I >1 rH

>, e C e G -PSh-PShO - rH.-|rHrH£3S30 +J I I I S 03 S 03 G rH >ι O >ι O I 3 S3

03 O O O O S3 03 S3 0) -P I >i3 >(3 O « C

0 £3 G G G l £ l £ £ -HcdOtnCtncAi-Ή e -H -H -H -H G O C O 3 HH B1H OH H J)\ •H g g £ g l-HI-HI >,0 -P3 Ήί3 ESJ31 g 3 3 3 3 O-PO-P- >iSC-rHrH-H3ll 3 I I I | G G £3 £3 i—l (StnoiPSPlrQco 1 - - - - -H3-H0JI o-PS30tno-o'>" CM I—I I—I rH I—I gC3££3-H Λ 3 -rl H H H H ··» I i i i i 3o)3q3<h SH-HtnAJCAiioJVj

•H -H cd -H 03 -H 03 -H 3 II II >i 3 3 P AC O 03 O -H M· O

rH rH rH rH rH i—I rH i—I t—I — .—. “ r*k >1 rH Αΐ O OP 03 P *—l " S3

>1 >iO>lO>lO>iO-H+rHlOO-HrHHHS3SS3 >iP -H >1 >1 3 >1 G >1 3 >1 G I "- I — tn G «At 03>irH>i>i'P

+j jjtn +Jtn 4->tn +j tn H i -Hl 4J tn X o £S3 Os3 -PcoN

033 03 -H 03-H 03-H 0> -P rH (fl ·Ρ 3 £3 -P OP I \ +> -^ 0) " CU

uin tn s3 tns5 tns3 en S3 >ι·η >h-h Q3S3 -PS3 o-h i-p wcmi 30 3·Η 3 -H 3 -H 3 ·Η >iO >ιΟΛ·Η (US'-Ή Οι·Η 3lrk 13 IP IP IP IP-P3-P3 IP I S3 I >ι I >ι I Ή S3 ζω zo ZO ZO ZO 03 tn ωιη ZO z—Z>iZ>i!Z'-i'-'

---Ή '—' rH ' ' rH r—I ‘ rH Ui Ή W ·Η ' · rH ·Η M I ' I ' ' Sl rH

i s3 ia; ia; ia; ia; 3s3 3S3 ia: ιή i- i- i >i i CM Ή CM O CM O CM O CM O I Ή |H MO NSCMf IMU IMCi •H IClIPIPIPIPZPZPIPISill I* I03C^ g rkO —S3 rkS3 —S3 rkS3 — O "^O "S3 r-l rk-Pr-k+JrkMH'· •P -H rH +1 >1+1 >1+1 >ι+Ι >ι I H I rH +1 >i+l - +1 3 +1 3 +1 I 3 Z — AC ^ S3 '-r S3 ""S3 "-S3 cm AC cm A! "-S3 P* "-S3 "-S3 "-in -y

E

•»H

tn p* m S3 ro coorHCMco-^rin

pq rH rH rp i—| rH i—I

Claims (5)

17 68828

1. Menetelmä uusien neuroleptisten 2-(aminoalkyyli)-5-fe-nyyli-2, 3,4,4a,5,9b-heksahydro-4a,9b-trans-1H-pyrido</5,3-b7 indoli johdannaisten (+)-enantiomeerien, (+)- ja (-)-enantiomeerien seoksien ja (-)-rasemaattien valmistamiseksi, joilla on kaava I

9 H X " \"r\\ \ )4a i 7. i ' ^ I k O '1 Y jossa m on 2-9, X ja Y ovat toisistaan riippumatta H tai F ja R on H, 1-3 hiiliatomia sisältävä alkanoyyli, 2-3 hiiliatomia sisältävä alkoksikarbonyyli tai mahdollisesti monosubstituoitu bentso-yyli- tai fenyylisulfonyyliryhmä substituentin ollessa CH^, F, Cl, Br tai OCH^, ja niiden farmakologisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että kaavan IV mukainen nitriili H X \' | V I N-(CH_) ..CN I Oi N i i j I X H o Ϊ Y jossa X, Y ja m merkitsevät samaa kuin edellä, pelkistetään metallihyd-ridillä eetteriliuottimessa tai vedyllä jalometallin avulla inertis-sä orgaanisessa liuottimessa kaavan I mukaiseksi yhdisteeksi, jossa R on H, ja 68828 1 u haluttaessa valmistaa kaavan I mukainen yhdiste, jossa R on muu kuin vety, saatu kaavan I mukainen yhdiste, jossa R on vety, saatetaan reagoimaan asyyli- tai sulfonyylihalogeriidin (kloridi tai bromidi) kanssa, joka voi olla 1-3 hiiliatomia sisältävä alkanoyyliha-logenidi, 2 tai 3 hiiliatomia sisältävä alkoksikarbonyylihalogenidi, bentsoyylihalogenidi, fenyylisulfonyylihalogenidi tai monosubsti-tuoitu bentsoyyli- tai fenyylisulfonyylihalogenidi substituentin ollessa CH^, F, Cl, Br tai OCH^inertissä liuottimessa, joka sisältää neutralointiainetta, tai kaavan I mukainen yhdiste, jossa R on vety, saatetaan reagoimaan karboksyylihapon tai sulfonihapon kanssa, joka vastaa asyyli- tai sulfonvylihalogenidia, inertissä liuottimessa, joka sisältää disykloheksyylikarbodi-imidiä, ja haluttaessa saatu kaavan I mukainen yhdiste muutetaan hap-poadditiosuolaksi.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä (+)- tai (-)-2-(N-bentsoyyli-1'-amino-n-but-4'-yyli)-5-(p-fluorifenyyli)-8-fluori-2,3,4,4a,5,9b-heksahydro-4a,9b-trans-1H-pyrido-/4,3-b/ indolin valmistamiseksi, tunnettu siitä, että (+)- tai (-)-2-(4'-amino-n-but-4 '-yyli)-5-(p-fluorifenyyli)-8-fluori-2,3,4,4a,5,9b-heksahyd-ro-4a,9b-trans-1H-pyrido/4,3-b/indoli saatetaan reagoimaan bentso-yylikloridin kanssa.

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä (+)-tai (-)-2-/N- (o-metoksibentsoyyli) -1 ' -amino-n-but-4 ' -yyliT/-5- (p-f luorif enyyli) - 8-fluori-2,3,4,4a,5,9b-heksahydro-4a,9b-trans-1H-pyrido/4,3-b/-indolin valmistamiseksi, tunnettu siitä, että (+)-tai (—)—2—(4'— amino-n-but-4'-yyli)-5-(p-fluorifenyyli)-8-fluori-2,3,4,4a,5,9b-hek-sahydro-4a,9b-trans-1H-pyrido/4,3-b/indoli saatetaan reagoimaan o-metoksibentsoyylikloridin kanssa.

4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä ( + )- tai (-)-2-(N-etoksikarbonyyli-1'-amino-n-but-4'-yyli)-5-(p-fluorifenyyli)-8- fluori-2,3,4,4a,5,9b-heksahydro-4a,9b-trans-1H-pyrido-/4,3-b/indolin valmistamiseksi, tunnettu siitä, että (+)- tai (-)-2-(4'-ami-nO-n-but-4'-yyli)-5-(p-fluorifenyyli)-8-fluori-2,3,4,4a,5,9b-heksa-hydro-4a,9b-trans-1H-pyrido/4,3-b/indoli saatetaan reagoimaan etok-sikarbonyylikloridin kanssa.

5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä (+)- tai (-)-2-(N-asetyyli-1'-amino-n-but-4'-yyli)-5-fenyyli-2,3,4,4a,5,9b-heksa- li 68828 19 hydro-4a,9b-trans-1H-pyrido/4,3-b/indolin valmistamiseksi, tunnettu siitä, että (+)- tai {-)-2-(4'-amino-n-but-41-yyli)-5-fenyyli-2,3,4,4a,5,9b-heksahydro-4a,9b-trans-1H-pyrido/4,3-b/indoli saatetaan reagoimaan asetyylikloridin kanssa. 20 6 8 8 2 8