ES2599763T3

ES2599763T3 - Geles basados en ácido hialurónico que incluyen hidrocloruro de lidocaína

Info

Publication number: ES2599763T3
Application number: ES09785850.0T
Authority: ES
Inventors: Pierre Lebreton
Original assignee: Allergan Industrie SAS
Current assignee: Allergan Industrie SAS
Priority date: 2008-08-04
Filing date: 2009-03-02
Publication date: 2017-02-03
Anticipated expiration: 2029-03-02
Also published as: US20210283313A1; EP2674147A1; US20130244970A1; JP5808848B2; WO2010015900A1; HUE048366T2; CN103285423B; PT2323617T; CN102170856B; US20190343990A1; AU2009278883A1; CA2732788C; CN102170855B; US9089517B2; CA3023168C; US9089518B2; MX2011001322A; US9089519B2; US10328180B2; MX2011001321A

Abstract

Un método para preparar una composición de relleno de tejido blando, método que comprende las etapas de: proporcionar un componente de ácido hialurónico reticulado con al menos un agente reticulante seleccionado del grupo que consiste en 1,4-butanodiol diglicidil éter (BDDE), 1,2- bis(2,3-epoxipropoxi)etileno y 1-(2,3-epoxipropil)- 2,3-epoxiciclohexano, o combinaciones de los mismos; en donde el componente de ácido hialurónico comprende más de un 10% de ácido hialurónico no reticulado en volumen; ajustar el pH de dicho componente de ácido hialurónico a un pH ajustado por encima de 7,2; y añadir una disolución que contiene al menos un agente anestésico a dicho componente de ácido hialurónico que tiene dicho pH ajustado para obtener una composición de relleno de tejido blando basada en ácido hialurónico, en donde el al menos un agente anestésico es HCl de lidocaína.

Description

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DESCRIPCION

Geles basados en acido hialuronico que incluyen hidrocloruro de lidocama Campo de la invencion

La presente invencion se refiere de forma general a un metodo para preparar rellenos de tejido blando inyectables, y mas espedficamente se refiere a rellenos dermicos y subdermicos basados en acido hialuronico que incluyen un agente anestesico, tal como se establece en las reivindicaciones.

Antecedentes

De forma general se acepta que cuando una persona envejece, la cara comienza a mostrar los efectos de la gravedad, la exposicion al sol y los anos de movimientos musculares faciales, tal como al sonrefr, fruncir el ceno, masticar y cerrar los ojos. Los tejidos subyacentes que mantienen la piel con una apariencia joven comienzan a deteriorarse, dando como resultado a menudo arrugas de expresion, arrugas de sonrisa, "patas de gallo" y grietas faciales, denominadas a menudo "efectos del envejecimiento".

En un esfuerzo por tratar o corregir los efectos del envejecimiento, se han desarrollado rellenos de tejidos blandos para ayudar a rellenar las lmeas y depresiones faciales, y para restaurar la perdida de volumen de tejido relativa a la perdida de grasa. De este modo, los rellenos de tejido blando restauran temporalmente una apariencia mas suave y juvenil.

Idealmente, los rellenos de tejido blando tienen una larga duracion, una apariencia natural y son suaves y lisos cuando se implantan en la piel o debajo de la piel. Ademas, los rellenos de tejido blando son faciles de implantar en un paciente usando una aguja fina, y requieren una baja fuerza de extrusion para la inyeccion. Los rellenos ideales tampoco producinan efectos secundarios adversos, y senan inyectables sin molestias, o con molestias mmimas, para el paciente.

Los rellenos de tejidos blandos basados en colageno se desarrollaron hace mas de 20 anos, y durante algun tiempo los rellenos basados en colageno bovino fueron los unicos rellenos dermicos aprobados por la "Food and Drug Administration" (FDA) de EE.UU. Debido a que dichos rellenos dermicos tienen base bovina, una de las principales desventajas ha sido el potencial de reaccion alergica en los pacientes. Se cree que aproximadamente el 3-5% de los sujetos humanos presentan reacciones alergicas graves al colageno bovino, requiriendose por tanto una evaluacion cuidadosa antes del uso de estos rellenos en cualquier persona particular. Ademas de las reacciones alergicas, los rellenos basados en colageno se degradan rapidamente tras ser inyectados y requieren tratamientos frecuentes para mantener una apariencia mas suave y juvenil.

En febrero de 2003, las composiciones de relleno de colageno derivado de humano recibieron la aprobacion de la FDA. Estos colagenos proporcionan la ventaja de un riesgo significativamente reducido de reacciones alergicas. Sin embargo, a pesar de la incidencia reducida de reacciones alergicas, los rellenos derivados de colageno humano aun presentan el problema de la rapida degradacion del producto inyectado.

La investigacion en rellenos que no produzcan reacciones alergicas y que mantengan una apariencia mas suave y juvenil ha llevado al desarrollo de productos basados en acido hialuronico (AH). En diciembre de 2003 la FDA aprobo el primer relleno basado en AH. Esto dio pie rapidamente al desarrollo de otros rellenos basados en AH.

El AH, tambien conocido como hialuronano, es un polisacarido natural soluble en agua, espedficamente un glucosaminoglucano, que es un componente principal de la matriz extra-celular y que se encuentra ampliamente distribuido en los tejidos animales. El AH tiene una excelente biocompatibilidad y no produce reacciones alergicas cuando se implanta en un paciente. Ademas, el AH presenta la capacidad de asociarse a cantidades grandes de agua, lo que lo convierte en un excelente agente de volumen de los tejidos blandos.

El desarrollo de rellenos basados en AH que exhiban propiedades ideales in vivo, asf como una capacidad de uso quirurgico ideal, ha demostrado ser complejo. Por ejemplo, los rellenos basados en AH que exhiben unas propiedades de estabilidad in vivo deseables pueden llegar a ser tan viscosos que su inyeccion a traves de agujas finas es diffcil. Inversamente, los rellenos basados en AH que se inyectan con relativa facilidad a traves de agujas finas a menudo presentan propiedades de estabilidad in vivo relativamente inferiores.

Un metodo para solventar este problema es usando rellenos basados en AH reticulado. El AH reticulado se forma haciendo reaccionar AH libre con un agente reticulante en las condiciones de reaccion adecuadas. Los metodos para preparar rellenos de tejidos blandos basados en AH que incluyen AH tanto libre como reticulado son bien conocidos.

Se ha propuesto incorporar determinados agentes terapeuticos, por ejemplo, agentes anestesicos tales como la lidocama, en composiciones basadas en AH inyectables. Desafortunadamente, las composiciones inyectables basadas en AH que incorporan lidocama durante el proceso de fabricacion presentan propension a una degradacion

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parcial o casi completa antes de la inyeccion, particularmente durante las etapas de esterilizacion a alta temperatura y/o cuando se llevan a almacenamiento durante un periodo de tiempo significativo.

Un objetivo de los metodos de fabricacion y uso de las composiciones de relleno blando basadas en AH descritas en la presente memoria, es proporcionar rellenos de tejidos blandos que no produzcan reacciones alergicas en los pacientes, que sean biocompatibles y que sean estables y utilizables in vivo, y que incluyan uno o mas agentes anestesicos locales.

Compendio

La presente invencion se refiere a un metodo para preparar un relleno de tejido blando, por ejemplo, un relleno dermico o subdermico, basado en acido hialuronico (AH) y sales de AH farmaceuticamente aceptables, por ejemplo, hialuronato sodico (NaAH), tal como se establece en la reivindicacion 1. Dicho metodo proporciona composiciones basadas en AH que incluyen una cantidad terapeuticamente efectiva del agente anestesico lidocama en forma de HCl de lidocama, y que presentan una estabilidad mejorada, respecto a las composiciones basadas en AH convencionales que incluyen, por ejemplo, lidocama, cuando son sometidas a tecnicas de esterilizacion tales como autoclavado, y/o cuando son almacenadas durante periodos de tiempo largos a temperatura ambiente.

En la presente memoria se proporciona un metodo para preparar una composicion de relleno de tejido blando como la establecida en la reivindicacion 1.

En una realizacion, la cantidad del agente anestesico esta presente en una concentracion de entre 0,1% y 5,0% en peso de la composicion. En otra realizacion adicional, el agente anestesico esta presente en una concentracion de entre 0,2% y aproximadamente 1,0% en peso de la composicion. En una realizacion, el agente anestesico es lidocama en la forma de HCl de lidocama y esta presente en una concentracion de 0,3% en peso de la composicion.

En otra realizacion, la composicion de relleno de tejido blando tiene una fuerza de extrusion de entre 10 N y 13 N, por ejemplo, a una velocidad de 12,5 mm/minuto. En otra realizacion adicional, la composicion tiene una viscosidad de entre 5 Pa*s y 450 Pa*s, por ejemplo, cuando se mide a 5 Hz.

En una realizacion, el componente de AH es un gel, por ejemplo, un gel hidratado cohesivo. En una realizacion, el componente de AH comprende mas de un 10%, por ejemplo, mas de un 15%, por ejemplo, hasta un 20% o mas de AH libre. Para los propositos de esta descripcion, el AH libre incluye AH completamente no reticulado, asf como cadenas y fragmentos de AH ligeramente reticulados, todos en forma soluble en agua.

En otra realizacion adicional, el componente de AH es un gel que comprende partmulas de AH reticulado en un medio relativamente fluido de AH libre. En algunas realizaciones, el componente de AH tiene un tamano de partmula medio superior a aproximadamente 200 pm, por ejemplo, superior a aproximadamente 250 pm.

En otra realizacion, la composicion se esteriliza, por ejemplo, mediante autoclavado, para formar una composicion esterilizada, y en donde la composicion esterilizada es estable a temperatura ambiente durante al menos 6 meses, por ejemplo, al menos 9 meses, al menos 12 meses o mas.

En otra realizacion adicional, el pH ajustado esta por encima de 7,5. En otra realizacion, el metodo comprende ademas la etapa de homogeneizar el componente de AH durante o despues de la etapa de adicion de la disolucion que contiene el, al menos uno, agente anestesico. En una realizacion adicional, la etapa de homogeneizar comprende someter a la composicion a mezclamiento con una cizalla controlada.

En otra realizacion, la etapa de proporcionar un componente de AH comprende proporcionar material de NaAH libre seco e hidratar el material de NaAH libre seco en una disolucion alcalina para obtener un gel de NaAH libre alcalino. En otra realizacion adicional, el gel de NaAH libre tiene un pH superior a 8,0. En otra realizacion adicional, el pH es superior a 10.

En una realizacion adicional, el componente de AH comprende mas de un 20% de AH libre y la porcion reticulada del componente de AH tiene un grado de reticulacion inferior al 6% o inferior al 5%.

En otra realizacion adicional, la composicion de relleno de tejido blando presenta naturaleza particulada en tanto en cuanto comprende partmulas de Ah reticulado dispersadas en un medio de AH soluble fluido. En algunas realizaciones, el tamano medio de dichas partmulas es inferior a 200 pm, y en otras realizaciones el tamano medio de dichas partmulas es inferior a 250 pm.

Breve descripcion de las figuras

La Figura 1 ilustra graficamente la concentracion de lidocama en el gel de la Muestra 5 del Ejemplo de Referencia 4 preparado mediante el procedimiento del Ensayo 2 frente al tiempo.

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Definiciones

Se pretende que determinados terminos usados en la especificacion se refieran a las siguientes definiciones, tal y como se detallan a continuacion. Cuando la definicion del termino sea diferente del significado usado habitualmente para el termino, el solicitante pretende utilizar las definiciones proporcionadas a continuacion, a menos que se indique lo contrario espedficamente.

Estable en autoclave o estable para autoclavar, tal como se usan en la presente memoria, describen un producto o composicion que es resistente a la degradacion, de tal modo que el producto o composicion mantienen al menos uno, y preferiblemente todos, de los siguientes aspectos tras una esterilizacion en autoclave efectiva: apariencia transparente, pH, fuerza de extrusion y/o caractensticas reologicas, concentracion de acido hialuronico (AH), esterilidad, osmolaridad y concentracion de lidocama.

AH de elevado peso molecular, tal como se usa en la presente memoria, describe un material de AH que tiene un peso molecular de al menos 1,0 millones de Daltons (MW > 106 Da o 1 MDa) y hasta 4,0 MDa. Por ejemplo, el AH de elevado peso molecular en las presentes composiciones puede tener un peso molecular de 2,0 MDa. En otro ejemplo, el AH de elevado peso molecular puede tener un peso molecular de aproximadamente 2,8 MDa.

AH de bajo peso molecular, tal como se usa en la presente memoria, describe un material de AH que tiene un peso molecular inferior a 1,0 MDa. El AH de bajo peso molecular puede tener un peso molecular de entre 200.000 Da (0,2 MDa) y menos de 1,0 MDa, por ejemplo, entre 300.000 Da (0.3 M Da) y 750.000 Da (0,75 MDa).

El grado de reticulacion, tal como se usa en la presente memoria, se refiere a los enlaces intermoleculares que unen las moleculas de polfmero de AH individuales, o cadenas de monomero, en una estructura permanente, o tal como se describe en la presente memoria la composicion de relleno de tejido blando. Ademas, el grado de reticulacion para los propositos de la presente descripcion se define adicionalmente como la proporcion de porcentaje en peso del agente reticulante a las unidades monomericas de AH dentro de la porcion reticulada de la composicion basada en AH. Se mide a traves de la proporcion en peso de monomeros de AH respecto a reticulante (monomeros de AH:reticulante).

AH libre, tal como se usa en la presente memoria, se refiere a las moleculas de polfmero de AH individuales que no estan reticuladas, o lo estan de forma muy limitada (grado de reticulacion muy bajo), con la estructura macromolecular altamente reticulada (mayor grado de reticulacion) que constituye la composicion de relleno de tejido blando. El AH libre generalmente sigue siendo soluble en agua. El AH libre se puede definir alternativamente como el componente "no reticulado", o ligeramente reticulado, de la estructura macromolecular que constituye la composicion de relleno de tejido blando descrita en la presente memoria.

Cohesivo, tal como se describe en la presente memoria, es la capacidad de la composicion basada en AH para retener su forma y resistir la deformacion. La cohesividad se ve afectada, entre otros factores, por la proporcion de peso molecular del AH libre inicial, por el grado de reticulacion, por la cantidad de AH libre residual despues de la reticulacion, y por el pH de la composicion basada en AH. Una composicion basada en AH que es cohesiva resiste la separacion de fases cuando se somete al metodo de ensayo descrito en la presente memoria en el Ejemplo 1.

Descripcion detallada

La presente invencion se refiere de forma general a un metodo para preparar un relleno de tejido blando, por ejemplo, un relleno dermico o subdermico, basado en acidos hialuronicos (AH) y sales de AH farmaceuticamente aceptables, por ejemplo, hialuronato sodico (NaAH), tal como se establece en la reivindicacion 1. Este metodo proporciona composiciones basadas en AH que incluyen HCl de lidocama como agente anestesico, del cual hay al menos uno, que presentan una estabilidad mejorada respecto a las composiciones basadas en AH convencionales, que incluyen, por ejemplo, lidocama, cuando son sometidas a elevadas temperaturas y presiones, por ejemplo, las experimentadas durante la aplicacion de tecnicas de esterilizacion por calor y/o presion, por ejemplo, autoclavado y/o por ejemplo cuando se almacenan a temperatura ambiente durante un periodo de tiempo prolongado.

Las composiciones estables mantienen al menos uno de los siguientes aspectos, o todos, tras una esterilizacion en autoclave efectiva y/o tras un almacenamiento prolongado: apariencia transparente, pH para uso en un paciente, fuerza de extrusion y/o caractensticas reologicas, concentracion de acido AH, esterilidad, osmolaridad y concentracion de lidocama. Tambien se proporcionan los metodos o procesos para preparar dichas composiciones basadas en AH, asf como los productos preparados mediante dichos metodos y procesos.

Tal como se usa en la presente memoria, acido hialuronico (AH) puede referirse a cualquiera de sus sales de hialuronato, e incluye, aunque sin limitacion, hialuronato sodico (NaAH), hialuronato potasico, hialuronato de magnesio, hialuronato de calcio, y combinaciones de los mismos.

De forma general, la concentracion de AH en las composiciones descritas en la presente memoria es preferiblemente de al menos 10 mg/mL y hasta 40 mg/mL. Por ejemplo, la concentracion de AH en algunas de las composiciones se encuentra en el rango de entre 20 mg/mL y 30 mg/mL. Ademas, por ejemplo, en algunas

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realizaciones, las composiciones tienen una concentracion de AH de 22 mg/mL, 24 mg/mL, 26 mg/mL o aproximadamente 28 mg/mL.

Adicionalmente, la concentracion de uno o mas anestesicos es una cantidad efectiva para mitigar el dolor experimentado durante la inyeccion de la composicion. El agente anestesico, del que hay al menos uno, es lidocama en la forma de HCl de lidocama. Las composiciones descritas en la presente memoria pueden tener una concentracion de lidocama de entre 0,1% y 5% en peso de la composicion, por ejemplo, de 0,2% a 1,0% en peso de la composicion. En una realizacion, la composicion tiene una concentracion de lidocama de 0,3% en peso (% p/p) de la composicion. La concentracion de lidocama en las composiciones descritas en la presente memoria puede ser terapeuticamente efectiva, lo que significa que la concentracion es adecuada para proporcionar un beneficio terapeutico sin infligir dano al paciente.

Es un descubrimiento sorprendente que las formulaciones de composiciones basadas en AH reticulado que incluyen lidocama en la forma de HCl de lidocama pueden fabricarse de un modo acorde a la presente invencion para producir composiciones de AH/lidocama inyectables que son estables en la esterilizacion.

La composicion precursora puede comprender un primer componente que incluye partmulas de AH relativamente altamente reticuladas en un fase sustancialmente solida, y un segundo componente que comprende AH libre o relativamente menos reticulado en una fase sustancialmente fluida en la que se dispersan las partmulas relativamente altamente reticuladas. La composicion puede incluir de un 10% a un 20%, o mas, de aH libre en volumen.

Por ejemplo, la composicion precursora puede comprender un gel cohesivo basado en AH.

En otras realizaciones, el AH libre constituye mas del 20% en peso del componente de AH.

En algunas realizaciones, las presentes composiciones presentan naturaleza particulada y comprenden partmulas de AH relativamente altamente reticulado dispersadas en un medio de AH relativamente menos reticulado. En algunas realizaciones, el tamano medio de dichas partmulas de AH reticulado es al menos de 200 pm o al menos de 250 pm. Dichas composiciones particuladas generalmente son menos cohesivas que otras composiciones similares que no presentan partmulas discernibles, o que presentan partmulas con un tamano medio inferior a 200 pm.

Por ejemplo, en algunas realizaciones, la composicion precursora puede fabricarse aplicando presion a una masa de gel basado en AH relativamente altamente reticulado a traves de un tamiz o una malla para crear partmulas de AH relativamente altamente reticulado de tamano y forma uniformes de forma general. Dichas partmulas se mezclan a continuacion con un material que actua de vehmulo, por ejemplo, una cantidad de AH libre, para producir un gel.

Los productos y composiciones proporcionados por el metodo de la reivindicacion 1 se consideran esterilizados cuando se exponen a temperaturas de al menos 120°C a 130°C y/o presiones de al menos 82737 Pa (12 libras por pulgada cuadrada, PSI) a 137895 Pa (20 PSI) durante un autoclavado por un periodo de tiempo de al menos 1 minuto a 15 minutos.

Los productos y composiciones proporcionados por el metodo de la reivindicacion 1 tambien permanecen estables cuando se almacenan durante largos periodos de tiempo a temperatura ambiente. Preferiblemente, las composiciones proporcionadas por el metodo de la reivindicacion 1 permanecen estables durante un periodo de tiempo de al menos dos meses, o de al menos seis meses, o de al menos 9 meses, o de al menos 12 meses, o de al menos 36 meses, a temperaturas de al menos 25°C. En una realizacion espedfica, las composiciones son estables a una temperatura de hasta 45°C durante un periodo de al menos dos meses.

El proceso de fabricacion incluye, en una realizacion, la etapa inicial de proporcionar material de AH sin purificar en la forma de fibras o polvos de Ah secos. El material de AH sin purificar puede ser AH, sus sales y/o mezclas de los mismos. En una realizacion preferida, el material de AH comprende fibras o polvos de NaAH, e incluso mas preferiblemente, NaAH de origen bacteriano. En algunos aspectos de la presente descripcion, el material de AH puede derivar de un animal. El material de AH puede ser una combinacion de materiales sin purificar que incluyen AH y al menos otro polisacarido adicional, por ejemplo, glucosaminoglucano (GAG).

En algunas realizaciones, el material de AH de las composiciones comprende o consta casi completamente de AH de peso molecular elevado. Es decir, casi el 100% del material de AH de las presentes composiciones puede ser AH de elevado peso molecular, tal como se ha definido anteriormente. En otras realizaciones, el material de AH de las composiciones comprende una combinacion de AH de peso molecular relativamente alto y AH de peso molecular relativamente bajo, tal como se ha definido anteriormente.

El material de AH de las composiciones puede comprender entre un 5% y un 95% de AH de elevado peso molecular, incluyendo el resto del material de AH un Ah de bajo peso molecular. En una realizacion tfpica de la invencion, la proporcion de AH de elevado peso molecular a AH de bajo peso molecular es al menos de 2 (p/p > 2), y preferiblemente mayor, presentando el AH de elevado peso molecular un peso molecular por encima de 1,0 MDa.

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Los especialistas en la tecnica apreciaran que la seleccion de un material de AH de alto y bajo peso molecular, y sus porcentajes o proporciones relativos, depende de las caractensticas deseadas, por ejemplo, de la fuerza de extrusion, el modulo elastico, el modulo viscoso y el angulo de fase expresado como la relacion del modulo viscoso respecto al modulo elastico, la cohesividad, etc., del producto basado en AH final. Para informacion adicional que puede ser util para entender este y otros aspectos de la presente descripcion, vease Lebreton, Publicacion de Solicitud de Patente de EE.UU. N° 2006/0194758.

Los geles basados en AH pueden prepararse segun la presente descripcion, en primer lugar limpiando y purificando el material de AH seco o sin purificar que tiene la relacion de peso molecular alto/bajo deseada. Estas etapas generalmente implican la hidratacion de las fibras o polvos de AH secos en la proporcion de peso molecular alto/bajo deseada, por ejemplo, usando agua pura, y filtrando el material para eliminar elementos extranos grandes y/u otras impurezas. El material hidratado y filtrado a continuacion es secado y purificado. Los AH de alto y de bajo peso molecular pueden limpiarse y purificarse por separado, o pueden mezclarse juntos, por ejemplo, en la proporcion deseada, justo antes de la reticulacion.

En un aspecto de la presente descripcion, se hidratan fibras de NaAH, secas y puras, en una disolucion alcalina para producir un gel alcalino de NaAH libre. Se puede usar cualquier disolucion alcalina adecuada para hidratar el NaAH en esta etapa, por ejemplo, aunque sin limitacion, disoluciones acuosas que contengan hidroxido sodico (NaOH), hidroxido potasico (KOH), bicarbonato sodico (NaHCOa), hidroxido de litio (LiOH), y otros similares. En otra realizacion, la disolucion alcalina adecuada es una disolucion acuosa que contenga NaOH. El gel alcalino resultante tendra un pH por encima de 7,5. El pH del gel alcalino resultante puede tener un valor pH superior a 9, o un pH superior a 10, o un pH superior a 12, o un pH superior a 13.

La siguiente etapa del proceso de fabricacion implica la etapa de reticulacion del gel de NaAH alcalino hidratado con un agente de reticulacion seleccionado entre 1,4-butanodiol diglicidil eter (BDDE), 1,2-bis(2,3-epoxipropoxi)etileno y 1-(2,3-epoxipropil)-2,3-epoxiciclohexano. El uso de mas de un agente de reticulacion no queda excluido del alcance de la presente descripcion. En un aspecto de la presente descripcion, los geles de AH descritos en la presente memoria son reticulados usando BDDE.

La etapa de reticulacion puede llevarse a cabo usando cualquier medio conocido por los especialistas en la tecnica. Los especialistas en la tecnica apreciaran como optimizar las condiciones de reticulacion segun la naturaleza del AH, y como llevar a cabo la reticulacion en un grado optimo.

El grado de reticulacion para los propositos de la presente descripcion se define como la proporcion de porcentaje en peso del agente reticulante respecto de las unidades monomericas de AH dentro de la porcion reticulada de la composicion basada en AH. Se mide a traves de la proporcion en peso de monomeros de AH respecto a reticulante (monomeros de AH : reticulante).

El grado de reticulacion del componente de AH de las presentes composiciones es al menos del 2% y hasta el 20%.

En algunas realizaciones, el grado de reticulacion esta entre el 4% y el 12%. En algunas realizaciones, el grado de reticulacion es inferior al 6%, por ejemplo, inferior al 5%.

En otras realizaciones, el grado de reticulacion es superior al 5%, por ejemplo, del 6% al 8%.

En algunas realizaciones, el componente de AH es capaz de absorber al menos aproximadamente una vez su peso en agua. Cuando esta neutralizado e hinchado, el componente de AH reticulado y el agua absorbida por el componente de AH reticulado se encuentran en una proporcion de 1:1. Los geles basados en AH hidratado resultantes presentan la caractenstica de ser altamente cohesivos.

Los geles basados en AH de acuerdo a algunas realizaciones de la invencion pueden presentar una cohesividad suficiente para que los geles no sufran una separacion de fases sustancial tras ser centrifugados a 2000 rd/min durante 5 minutos. En otra realizacion, los geles presentan la caractenstica de ser capaces de absorber al menos una vez su peso en agua, y de presentar una cohesividad suficiente para que cuando se hinchan con agua en una proporcion gel/agua de 1:1, los geles mantengan su integridad, por ejemplo, al ser sometidos a centrifugacion.

Los geles de AH reticulados hidratados pueden hincharse para obtener la cohesividad deseada. Esta etapa puede llevarse a cabo neutralizando el gel de AH reticulado hidratado, por ejemplo, anadiendo una disolucion acuosa que contiene un acido, tal como HCl. A continuacion los geles son hinchados en una disolucion salina tamponada con fosfato (PBS) durante un tiempo suficiente y a una temperatura baja.

En una realizacion, los geles hinchados resultantes son altamente cohesivos sin partfculas visibles distinguibles, por ejemplo, sin partfculas visibles distinguibles cuando se observan a simple vista. En una realizacion preferida, los geles no presentan partfculas visibles distinguibles observados bajo un aumento inferior a 35X.

Los geles son purificados a continuacion empleando medios convencionales tales como dialisis o precipitacion en alcohol, para recuperar el material reticulado, para estabilizar el pH del material y para eliminar cualquier resto de

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agente de reticulacion sin reaccionar. Se puede anadir agua adicional o una disolucion acuosa ligeramente alcalina para llevar la concentracion del NaAH en la composicion a una concentracion deseada.

El pH de los geles de AH reticulados, purificados, con pH sustancialmente neutro, se ajusta para hacer que el gel se vuelva ligeramente alcalino, de tal modo que los geles tengan un pH superior a 7,2, por ejemplo, de 7,5 a 8,0. Esta etapa puede llevarse a cabo mediante cualquier medio adecuado, por ejemplo, anadiendo a los geles una cantidad adecuada de NaOH, KOH, NaHCO3 o LiOH diluidos, o cualquier otra molecula, disolucion y/o composicion tamponante alcalinas conocidas por el especialista en la tecnica.

A continuacion se anade una cantidad efectiva de HCl de lidocama a los geles de NaAH cohesivos purificados. Por ejemplo, en algunas realizaciones, se proporciona el HCl de lidocama en forma de polvo que se solubiliza en agua para inyeccion (WFI, del ingles "water for injection"). Los geles se mantienen neutros con un tampon o ajustando con NaOH diluido para que la composicion final de AH/lidocama tenga un pH deseado, sustancialmente neutro. Preferiblemente, las composiciones de relleno basadas en AH finales que incluyen lidocama tendran una concentracion de lidocama de entre al menos 0,1% y 5%, por ejemplo, 2% en peso de la composicion, o en otro ejemplo 0,3%.

Tras la adicion del HCl de lidocama, o alternativamente, durante la adicion del HCl de lidocama, los geles de AH/lidocama, o las composiciones, se homogenizan para crear geles de AH/lidocama cohesivos altamente homogeneos que tienen una consistencia y estabilidad deseadas. Preferiblemente, la etapa de homogeneizacion comprende mezclar, agitar o batir los geles con una fuerza de cizalla controlada que obtenga mezclas sustancialmente homogeneas.

Las composiciones de AH/lidocama descritas en la presente memoria presentan una viscosidad que es dependiente de las propiedades de la composicion y de la presencia de HCl de lidocama como el al menos un agente anestesico. La viscosidad de la composicion de AH/lidocama puede ser de 50 Pa*s a 450 Pa*s. En otras realizaciones, la viscosidad puede ser de 50 Pa*s a 300 Pa*s, de 100 Pa*s a 400 Pa*s, o de 250 Pa*s a 400 Pa*s, o de 50 Pa*s a 250 Pa*s.

Tras homogeneizacion, las composiciones de AH/lidocama son introducidas en jeringas y esterilizadas. Las jeringas utiles segun la presente descripcion incluyen cualquier jeringa conocida en la tecnica capaz de administrar composiciones de rellenos dermicos viscosos. Generalmente, las jeringas tienen un volumen interno de 0,4 mL a 3 mL, mas preferiblemente de entre 0,5 mL y 1,5 mL o de entre 0,8 mL y 2,5 mL. Este volumen interno esta asociado al diametro interno de la jeringa, que desempena una funcion clave en la fuerza de extrusion necesaria para inyectar composiciones de rellenos dermicos de alta viscosidad. Los diametros internos generalmente son de aproximadamente 4 mm a aproximadamente 9 mm, mas preferiblemente de 4,5 mm a 6,5 mm o de 4,5 mm a 8,8 mm. Ademas, la fuerza de extrusion necesaria para administrar las composiciones de AH/lidocama con la jeringa depende del calibre de la aguja. Los calibres de aguja usados generalmente incluyen calibres de entre 18G y 40G, mas preferiblemente de 25G a 33G o de 16G a 25G. El especialista en la tecnica puede determinar las dimensiones correctas de la jeringa y el calibre de aguja requeridos para alcanzar un requerimiento de fuerza de extrusion concreta.

Las fuerzas de extrusion presentadas por las composiciones de AH/lidocama descritas en la presente memoria usando las dimensiones de aguja descritas antes, son a una velocidad de inyeccion que es confortable para el paciente. Confortable para el paciente se usa para definir una velocidad de inyeccion que no lesione o produzca un dolor excesivo al paciente durante la administracion en el tejido blando. El especialista en la tecnica apreciara que confortable, tal como se usa en la presente memoria, incluye no solo el confort del paciente, sino tambien el confort y la habilidad del medico o practicante que inyecte las composiciones de AH/lidocama. Aunque con las composiciones de AH/lidocama de la presente descripcion se pueden obtener determinadas fuerzas de extrusion, el especialista en la tecnica entendera que fuerzas de extrusion elevadas pueden conducir a una falta de control durante la inyeccion, y que dicha falta de control puede ocasionar un dolor adicional al paciente. Las fuerzas de extrusion de las presentes composiciones de AH/lidocama puede oscilar entre 8 N y 15 N, o mas preferiblemente entre 10 N y 13 N, o entre 11 N y 12 N.

Esterilizacion, tal como se usa en la presente memoria, comprende cualquier metodo conocido en la tecnica para matar o eliminar de forma efectiva agentes transmisibles, preferiblemente sin alterar o degradar sustancialmente las composiciones de AH/lidocama.

Un metodo de esterilizacion preferible de las jeringas rellenadas es mediante autoclave. El autoclavado puede llevarse a cabo aplicando una combinacion de calor, presion y humedad a una muestra que necesite ser esterilizada. Para esta etapa se pueden usar muchas temperaturas, presiones y tiempos de ciclo diferentes. Por ejemplo, las jeringas rellenadas pueden ser esterilizadas a una temperatura de al menos 120°C a 130°C o mas. Se puede utilizar humedad o no. La presion aplicada en algunas realizaciones depende de la temperatura usada en el proceso de esterilizacion. El ciclo de esterilizacion puede ser de al menos 1 minuto a 20 minutos o mas.

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Otro metodo de esterilizacion incorpora el uso de una especie gaseosa que se sabe que produce la muerte o que elimina agentes transmisibles. Preferiblemente, se usa oxido de etileno como gas de esterilizacion, que es conocido en la tecnica como agente util para la esterilizacion de dispositivos y productos medicos.

Un metodo de esterilizacion adicional incorpora el uso de una fuente de irradiacion que es conocida en la tecnica por matar o eliminar agentes transmisibles. Se dirige un haz de radiacion a la jeringa que contiene la disolucion de AH/lidocama, y la longitud de onda de energfa mata o elimina los agentes transmisibles no deseados. La energfa preferible util incluye, aunque sin limitacion, luz ultravioleta (UV), radiacion gamma, luz visible, microondas o cualquier otra longitud de onda o banda de longitudes de onda que mate o elimine los agentes transmisibles no deseados, preferiblemente sin alterar o degradar sustancialmente la composicion de AH/lidocama.

Ejemplo 1

Metodo para evaluar la cohesividad del gel

Se pueden llevar a cabo los siguientes ensayos para evidenciar la cohesividad de una composicion de gel basada en Ah para los propositos de la presente descripcion.

En primer lugar, se colocan 0,2 g o 0,4 g de una composicion de gel a evaluar en una jeringa de vidrio. A continuacion, se anaden 0,2 g o mas de tampon de fosfato a la jeringa y la mezcla se agita intensamente durante 1 hora para obtener una mezcla homogenea. A continuacion, la mezcla homogeneizada se centrifuga durante 5 minutos a 2000 tr/min para eliminar las burbujas de aire y para permitir la decantacion de partmulas. La jeringa se coloca entonces en posicion vertical y se deposita una gota de colorante de eosina en la superficie del gel con una jeringa y una aguja de calibre 18G. Despues de 10 minutos, el colorante se ha difundido lentamente a traves del gel.

Tras dilucion del gel, homogeneizacion y decantacion, un gel de cohesividad relativamente lenta muestra una separacion de fases (una fase superior diluida menos viscosa sin partmulas y una fase inferior compuesta por partmulas decantadas que son visibles a simple vista o con un microscopio). En las mismas condiciones, un gel altamente cohesivo muestra sustancialmente ausencia de separacion de fases, y se evita que el colorante difunda en la formulacion cohesiva. Un gel relativamente menos cohesivo, por otro lado, muestra una separacion de fases clara.

Ejemplo 2

Smtesis de relleno de tejido blando con lidocama

Las fibras o polvos de NaAH se hidratan en una disolucion alcalina, por ejemplo, una disolucion acuosa que contiene NaOH. La mezcla se agita a temperatura ambiente, aproximadamente 23°C, para formar un gel de AH alcalino sustancialmente homogeneo.

Se diluye un agente reticulante, BDDE, en una disolucion acuosa y se anade al gel de AH alcalino. La mezcla se homogeniza durante varios minutos.

Alternativamente, el BDDE se puede anadir directamente a las fibras de AH (en estado seco) al principio del proceso, antes de la hidratacion. La reaccion de reticulacion comenzara entonces de forma relativamente lenta a temperatura ambiente, asegurando una homogeneidad y eficacia de reticulacion incluso mejores. Vease, por ejemplo, Piron et al., Patente de EE.UU. N° 6.921.819.

La mezcla de gel de AH reticulado resultante se calienta a continuacion a 50°C durante 2,5 horas. En ese momento el material es un gel de AH/BDDE altamente reticulado (aspecto = gel solido). Este gel reticulado se neutraliza a continuacion una disolucion acida adecuada. El gel de AH neutralizado se hincha entonces en un tampon de fosfato a una temperatura fna, por ejemplo a una temperatura de 5°C, para obtener un gel de AH altamente cohesivo. En este ejemplo espedfico, la disolucion salina tamponada con fosfato contiene agua-para-inyeccion (WFI), hidrogeno fosfato disodico y dihidrogeno fosfato sodico. Cuando esta neutralizado e hinchado, el componente de AH reticulado y el agua absorbida por el componente de AH reticulado se encuentran en una proporcion de 1:1.

El gel de AH hinchado cohesivo se agita entonces mecanicamente y se rellena en membranas de dialisis, y se dializa contra un tampon de fosfato. El gel de AH se rellena en membranas de dialisis y se dializa contra un tampon de fosfato durante varios dfas con cambios regulares del bano, a fin de eliminar el reticulante no reaccionado, estabilizar el pH cerca de la neutralidad (pH=7,2) y asegurar una osmolaridad apropiada del gel de AH. La osmolaridad del gel de AH cohesivo resultante esta entre 200 mOsmol y 400 mOsmol, lo mas preferiblemente 300 mOsmol.

Despues de la dialisis, el gel de AH cohesivo resultante tiene un pH sustancialmente neutro, preferiblemente de 7,2, y no tiene partmulas distinguibles visiblemente en un medio fluido cuando se observa con un aumento inferior a 35X.

Primero se solubiliza en WFI clorhidrato de lidocama (HCl de lidocama) en forma de polvo, y se filtra a traves de un filtro de 0,2 pm. Se anade una disolucion diluida de NaOH al gel de AH cohesivo a fin de alcanzar un pH ligeramente

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basico (por ejemplo, un pH de entre 7,5 y 8). A continuacion se anade la disolucion de HCl de lidocama al gel ligeramente basico para alcanzar una concentracion final deseada, por ejemplo, una concentracion de 0,3% (p/p). El pH resultante de la mezcla de AH/lidocama es entonces 7 y la concentracion de AH es 24 mg/mL. Se lleva a cabo una agitacion mecanica con el objetivo de obtener una homogeneidad apropiada en un reactor estandar equipado con un mecanismo de mezcla apropiado.

Segun la invencion, se anade un gel de AH libre a la mezcla de gel de AH/lidocama con la ventaja de aumentar la cinetica de la administracion de lidocama. Por ejemplo, las fibras de AH libres se hinchan en una disolucion tamponante de fosfato, para obtener un gel viscoelastico homogeneo. Este gel de AH libre se anade a continuacion al gel de AH reticulado/lidocama. El gel resultante se rellena a continuacion en jeringas esterilizadas listas para rellenar ("Ready-to-Fill") y se autoclavan a temperaturas y presiones suficientes para la esterilizacion durante al menos aproximadamente 1 minuto.

Tras autoclavar, el producto de AH/lidocama final se envasa y se distribuye a los medicos. El producto fabricado segun este metodo exhibe una o mas caractensticas de estabilidad como se ha definido anteriormente en la presente memoria. Por ejemplo, el producto de AH/lidocama autoclavado presenta una viscosidad, cohesividad y fuerza de extrusion que son aceptables. No se observo degradacion del producto de gel de AH/lidocama durante el ensayo del producto despues de que el producto hubiera pasado varios meses en almacenamiento.

Ejemplo 3

Propiedades de los rellenos de tejido blando

Las propiedades de las composiciones de AH/lidocama fabricadas segun los metodos descritos en la presente memoria se muestran a continuacion en la Tabla 1. Por ejemplo, la fuerza de extrusion se midio usando un INSTRON® Advanced Materials Testing System Model 5564 (Instron, Norwood, MA) ejecutando el software BLUEHILL® version 2.11 (Instron, Norwood, MA).

Tabla 1

: Composicion de AH/lidocama

Apariencia: Gel transparente homogeneo

PH: 7,2

Fuerza de extrusion (N): 10,8 N

Contenido de NaAH: 23,7 mg/g

Esterilidad: Esteril (SAL<10"6)

Osmolaridad: 321 mOsml/kg

Contenido de lidocama (%): 0,29%

Contenido de 2,6-dimetilanilina: Conforme

Para asegurar que las especificaciones del producto se mantienen durante el almacenamiento de la composicion, se llevaron a cabo multiples estudios. Adicionalmente, se midio el contenido de 2,6-dimetilanilina para confirmar la ausencia de degradacion de lidocama.

La Tabla 2 proporciona un resumen de los resultados del ensayo de estabilidad para la composicion fabricada como se ha descrito en la presente memoria.

Tabla 2

: Composicion de AH/lidocama

Ensayo: Resultados a 3 meses Resultados a 6 meses Resultados a 9 meses

Aspecto transparente y homogeneo: Conforme Conforme Conforme

pH: 7,2 7,2 7,2

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: Composicion de AH/lidocama

Ensayo: Resultados a 3 meses Resultados a 6 meses Resultados a 9 meses

Fuerza de extrusion (N): 11,9 11,1 11,9

Concentracion de NaAH (mg/g): 23,8 23,1 24,2

Esterilidad: Conforme Conforme Conforme

Osmolaridad (mOsm/kg): 349 329 342

Contenido de lidocama (%): 0,29 0,29 0,29

Contenido de 2,6-dimetil anilina: Conforme Conforme Conforme

Se descubrio que tras un tiempo de 9 meses (desde la fecha de fabricacion), la composicion continua cumpliendo las especificaciones del producto.

Ejemplo de referencia 4:

Cinetica de liberacion

El siguiente ejemplo ilustra la cinetica de liberacion de la lidocama desde los geles de AH cohesivos segun la presente descripcion. El objetivo del Ejemplo es demostrar que la lidocama contenida en los geles de AH segun la presente descripcion se libera libremente desde los geles cuando se colocan en la piel.

Se llevo a cabo una dialisis para los diferentes periodos de tiempo (se colocaron 10 g de gel en una bolsa de dialisis pequena y despues se colocaron en 30 g de agua). Despues de cada dialisis fuera detenida a un tiempo dado, el gel fue homogenizado con una espatula y se determino la cantidad de lidocama mediante un metodo UV. La concentracion final del bano de dialisis coincidio con la concentracion teorica de lidocama, lo que indica la liberacion sin restriccion de lidocama desde el gel.

La Tabla 3 ilustra la concentracion de lidocama en % (p/p), la correccion del valor y la determinacion del % de lidocama liberada. Adicionalmente, la Figura 1 ilustra graficamente los resultados tabulados a continuacion en la Tabla 3. En la Figura 1 se indica la concentracion de lidocama de equilibrio teorica que existina si la lidocama fuera retenida en el gel o si fuera liberada sin restriccion. Tal como se observa graficamente, los datos sugieren que la lidocama se libera sin restriccion desde el gel.

Tabla 3

: MMA3056 MMA4031-EC6 MMA4031-EC2 MMA4031-EC3 MMA4031-EC4 MMA4031-EC5 MMA4029-EC7

Tiempo de dialisis (h): 0 h 1 h 30 min 5 h 7 h 23 h 48 h 72 h

[lidocaina] (%): 0,29 0,20 0,16 0,15 0,08 0,07 0,07

La Figura 1 muestra que el perfil de concentracion de lidocama con el tiempo alcanza un equilibrio que se corresponde con la liberacion sin restricciones de la lidocama. La formulacion de la composicion de la Figura 1 es un gel de AH reticulado cohesivo. La composicion tiene una concentracion de 24 mg/mL, una reticulacion del 6%, una G' de 170 y una relacion de AH de peso molecular alto a AH de peso molecular bajo de entre 95% a 5% a 100% de AH de peso molecular alto. Este estudio in vitro demuestra que la lidocama se libera sin restriccion desde el gel y no queda retenida en el gel una vez implantado.

Aunque la invencion ha sido descrita e ilustrada con un cierto grado de particularidad, debe entenderse que la presente descripcion se ha realizado unicamente a modo de ejemplo, y que los especialistas en la tecnica pueden proponer numerosos cambios en la combinacion y disposicion de las partes sin alejarse del alcance de la invencion, tal y como es reivindicada en la presente memoria mas adelante.

A menos que se indique otra cosa, se debe entender que todos los numeros que expresen cantidades de ingredientes, propiedades tales como el peso molecular, condiciones de reaccion, etc., usados en la memoria descriptiva y las reivindicaciones estan modificados en todos los casos por el termino "aproximadamente". De acuerdo con esto, a menos que se indique lo contrario, los parametros numericos indicados en la especificacion y

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las reivindicaciones adjuntas son aproximaciones que pueden variar dependiendo de las propiedades deseadas que se buscan obtener por la presente invencion. Al menos, y no como un intento de limitar la aplicacion de la doctrina de los equivalentes al alcance de las reivindicaciones, cada parametro numerico se debe considerar al menos a la luz del numero de dfgitos significativos descritos y aplicando las tecnicas de redondeo habituales. A pesar de que los intervalos y parametros numericos que establecen el amplio alcance de la invencion son aproximaciones, los valores numericos indicados en los ejemplos espedficos se presentan con tanta precision como es posible. Sin embargo, cualquier valor numerico contiene inherentemente determinados errores que necesariamente son resultado de la desviacion estandar encontrada en sus respectivas mediciones de analisis.

La terminologfa "un", "una", "el", "la" y determinantes similares utilizados en el contexto descriptivo de la presente invencion (espedficamente en el contexto de las reivindicaciones que vienen a continuacion) se debe considerar que cubren el singular y el plural, a menos que se indique otra cosa en la presente memoria o que claramente quede contradicho por el contexto. La descripcion de los rangos de valores en la presente memoria simplemente pretende servir como un procedimiento abreviado para hacer referencia a cada uno de los valores independientes que entran dentro del rango. A menos que se indique lo contrario en la presente memoria, cada valor individual se incorpora a la especificacion como si estuviera descrito individualmente en la presente memoria. Todos los procedimientos descritos en la presente memoria se pueden realizar en cualquier orden idoneo, a menos que se indique otra cosa en la presente memoria o por lo demas quede contradicho claramente por el contexto. El uso de todos y cada uno de los ejemplos, o de lenguaje que incluya ejemplos (por ejemplo, "tal como"), proporcionado en la presente memoria pretende simplemente ilustrar mejor la presente invencion y no supone una limitacion al alcance de la invencion que se reivindica. Ningun lenguaje en la especificacion se debe considerar como indicativo de elemento esencial no reivindicado alguno para la puesta en practica de la invencion.

Los grupos de elementos o realizaciones alternativos de la invencion descritos en la presente memoria no deben interpretarse como limitaciones. Cada miembro de grupo se puede citar y reivindicar individualmente o en cualquier combinacion con otros miembros del grupo u otros elementos incluidos en la presente memoria. Se anticipa que uno o varios miembros de un grupo podnan quedar incluidos, o eliminados, de un grupo por razones de comodidad y/o patentabilidad. Cuando se produce tal inclusion o eliminacion, la especificacion se estima que contiene el grupo que se modifica, de modo que satisface la descripcion escrita de todos los grupos de Markush utilizados en las reivindicaciones adjuntas.

Las realizaciones espedficas descritas en la presente memoria se pueden limitar adicionalmente en las reivindicaciones que utilizan la expresion "que consisten en", o "que consisten esencialmente en". Cuando se utiliza en las reivindicaciones, tanto si asf se registro o se anadio como enmienda, la terminologfa de transicion "que consiste en" excluye cualquier elemento, etapa o ingrediente no especificado en las reivindicaciones. La terminologfa de transicion «que consiste esencialmente en» limita el alcance de una reivindicacion a los materiales o etapas especificados y los que materialmente no afectan a las caractensticas basicas o nuevas. Las realizaciones de la invencion asf reivindicadas estan inherente o expresamente descritas y se permiten en la presente memoria.

En conclusion, debe entenderse que las realizaciones de la invencion descrita en la presente memoria son ilustrativas de los principios de la presente invencion.

Claims

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REIVINDICACIONES

1. Un metodo para preparar una composicion de relleno de tejido blando, metodo que comprende las etapas de:

proporcionar un componente de acido hialuronico reticulado con al menos un agente reticulante seleccionado del grupo que consiste en 1,4-butanodiol diglicidil eter (BDDE), 1,2- bis(2,3-epoxipropoxi)etileno y 1-(2,3-epoxipropil)- 2,3-epoxiciclohexano, o combinaciones de los mismos;

en donde el componente de acido hialuronico comprende mas de un 10% de acido hialuronico no reticulado en volumen;

ajustar el pH de dicho componente de acido hialuronico a un pH ajustado por encima de 7,2; y

anadir una disolucion que contiene al menos un agente anestesico a dicho componente de acido hialuronico que tiene dicho pH ajustado para obtener una composicion de relleno de tejido blando basada en acido hialuronico,

en donde el al menos un agente anestesico es HCl de lidocama.
2. El metodo de la reivindicacion 1, en donde el componente de acido hialuronico comprende al menos un 20% de acido hialuronico no reticulado en volumen.