ES2249384T3 - Espiro(isobenzofuran-1,4'-piperadin)-3-onas y 3h-espirobenzofuran-1,4-piperidinas. - Google Patents

Abstract

Un compuesto de **fórmula** o una sal o profármaco farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que: X es oxígeno o H2; cada uno de A, D, V, W, Y y Z es independientemente CR1; B es N o CR2; E es N o CR3; R1 se selecciona independientemente cada vez que está presente entre: (i) hidrógeno, halógeno, hidroxi, amino, nitro, ciano, -C(=O)NH2 y -COOH; y (ii) L-RA-Q-G, en la que L es un enlace, -O-, -C(=O)-, -OC(=O)-, -C(=O)O-, -O- C(=O)O-, -S(O)n-;-NRB-, -C(=O)NHRB-, -NHRBC(=O)-, -NRBS(O)n- o -S(O)nNRB-; n se elige independientemente cada vez que está presente entre 0, 1 ó 2; RA es alquilo (C1-C8), alquenilo (C2-C8), alquinilo (C2-C8), cicloalquilo (C3-C8), cicloalquenilo (C3-C8), cicloalquinilo (C3-C8) o heterocicloalquilo (C3-C8), cada uno opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes seleccionados independientemente entre hidroxi, halógeno, amino, ciano, nitro, alquilo (C1-C6) y halo-alquilo (C1- C6).

Description

Espiro[isobenzofuran-1,4'-piperadin]-3-onas y 3H-espirobenzofuran-1,4'-piperidinas.

Campo de la invención

Esta invención se refiere en líneas generales a espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-onas y 3H-espirobenzofuran-1-4'-piperidinas sustituidas que son moduladores de los receptores de neuropéptido Y_{5} (NPY5) de mamíferos, y al uso de dichos compuestos para tratar una diversidad de trastornos fisiológicos asociados a la activación del receptor de NPY5, tales como trastornos de la alimentación, trastornos psiquiátricos y enfermedades cardiovasculares. La invención también se refiere al uso de dichos compuestos como sondas para la detección y localización de receptores de NPY5.

Antecedentes de la invención

El neuropéptido Y (NPY) es un péptido de 36 aminoácidos que media una diversidad de efectos fisiológicos en seres humanos y otros mamíferos. Está altamente conservado en las especies de mamíferos, y pertenece a una gran familia de péptidos que incluye, entre otros, el péptido YY (PYY) y el péptido pancreático (PP). NPY es el péptido más abundante en le cerebro de mamíferos, y también está presente en neuronas simpáticas. Además, las fibras que contienen NPY se han encontrado en tejidos periféricos, tales como alrededor de las arterias en el corazón, el tracto respiratorio, el tracto gastrointestinal y el tracto genitourinario.

Una inyección central de NPY provoca una multitud de respuestas fisiológicas, tales como estimulación de la alimentación, aumento del almacenamiento de grasas, elevación del nivel azúcar e insulina en la sangre, comportamientos ansiolíticos, reducción de la actividad locomotora, liberación de hormonas, aumento de la presión sanguínea, reducción de la temperatura corporal y catalepsia. En el sistema cardiovascular, NPY parece estar implicado en la regulación del tono coronario. Estos efectos están mediados selectivamente por diversos receptores de NPY, que actualmente incluyen los subtipos Y_{1}, Y_{2}, Y_{3}, Y_{4}, Y_{5} e Y_{6}, así como el hipotético subtipo Y_{tipo-1} (por ejemplo, Wahlestedt y Reis (1993) Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol. 33:309; Gehlert y Hipskind (1995) Curr. Pharm. Design, 1:295; Michel y col. (1998) Pharmacol. Rev. 50:143).

El subtipo de receptor Y_{5} (por ejemplo, Patente de Estados Unidos Nº 5.602.024) parece estar implicado en la regulación del apetito, incluyendo la modulación de la ingesta de alimentos y gasto de energía. Además, los estudios de ratones propensos a ataques han sugerido que el receptor de NPY_{5} tiene una actividad anti-epiléptica en el control de ataques límbicos. Los receptores de tipo NPY_{5} también se han implicado en la atenuación de síntomas de retirada de la morfina, potenciamiento de diuresis y natriuresis, disminución de los niveles de glucosa en sangre, inhibición de secreción de la hormona luteinizante, y reducción de la liberación de acetilcolina en el íleo.

Los agonistas y antagonistas peptídicos selectivos se han identificado para la mayoría de los subtipos del receptor de NPY. Los péptidos, sin embargo, generalmente tienen serios defectos para uso terapéutico incluyendo, mala estabilidad metabólica, baja biodisponibilidad oral y mala permeabilidad en el cerebro. Hasta la fecha, se ha informado de pocos antagonistas no peptídicos. El documento WO 01/14376 describe ciertos antagonistas de tipo espiro del receptor de NPY, pero son necesarios antagonistas adicionales con propiedades mejoradas como agentes terapéuticos para el tratamiento de trastornos fisiológicos asociados a la activación del receptor de NPY5, tales como trastornos de la alimentación (por ejemplo, obesidad y bulimia), trastornos psiquiátricos, diabetes y enfermedades cardiovasculares (tales como hipertensión). La presente invención satisface esta necesidad, y proporciona ventajas relacionadas adicionales.

Sumario de la invención

La presente invención proporciona moduladores del receptor de NPY5 que inhiben o mejoran la unión de NPY al receptor de NPY5. Tales moduladores comprenden generalmente una espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona o 3H-espiroisobenzofuran-1,4'-piperidina caracterizada por la siguiente fórmula (o una sal farmacéuticamente aceptable o un profármaco de la misma):

Fórmula I

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1

Dentro de la Fórmula I, X es oxígeno o H_{2}; cada uno de A, D, V, W, Y y Z se selecciona independientemente cada vez que está presente entre hidrógeno, halógeno, hidroxi, amino, nitro, ciano, -C(=O)NH_{2}, -COOH y grupos de fórmula L-R_{A}-Q-G. Dentro de la fórmula L-R_{A}-Q-G, L es un enlace, -O-, -C(=O)-, -OC(=O), -C(=O)O-, -O-C(=O)O-, -S(O)_{n}-, -NR_{B}-, -C(=O)NHR_{B}-, -NHR_{B}C(=O)-, -NR_{B}S(O)_{n}- o -S(O)_{n}NR_{B}-. n se selecciona independientemente cada vez que está presente entre 0, 1 ó 2, R_{A} es alquilo (C_{1}-C_{8}), alquenilo (C_{2}-C_{8}), alquinilo (C_{2}-C_{8}), cicloalquilo (C_{3}-C_{8}), cicloalquenilo (C_{3}-C_{8}), cicloalquinilo (C_{3}-C_{8}) o heterocicloalquilo (C_{3}-C_{8}), cada uno opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes seleccionados independientemente entre hidroxi, halógeno, amino, ciano, nitro, alquilo (C_{1}-C_{6}) y haloalquilo (C_{1}-C_{6}). Q es un enlace, -O-, -C(=O)-, -OC(=O), -C(=O)O-, -O-C(=O)O-, -S(O)_{n}-, -CHR_{B}-, -NR_{B}-, -C(=O)NHR_{B}-, -NHR_{B}C(=O)-, -NR_{B}S(O)_{n}- o -S(O)_{n}NR_{B}. R_{B} se selecciona independientemente en cada caso entre hidrógeno, alquilo (C_{1}-C_{8}), cicloalquilo (C_{3}-C_{8}), cicloalquil (C_{3}-C_{8})-alquilo (C_{1}-C_{8}) y alquil (C_{1}-C_{8})-cicloalquilo (C_{3}-C_{8}). G es: (i) hidrógeno; o (ii) alquilo (C_{1}-C_{8}), alquenilo (C_{2}-C_{8}), alquinilo (C_{2}-C_{8}), cicloalquil (C_{3}-C_{8})-alquilo (C_{1}-C_{8}) o un grupo carbocíclico o heterocíclico de 3 a 10 miembros, cada uno opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes seleccionados independientemente entre hidroxi, halógeno, amino, ciano, nitro, alquilo (C_{1}-C_{8}), haloalquilo (C_{1}-C_{8}), alcoxi (C_{1}-C_{8}), -NH-alquilo (C_{1}-C_{8}), -N-(alquilo (C_{1}-C_{8}))_{2}, -NHC(=O)-alquilo (C_{1}-C_{8}), -N-alquil (C_{1}-C_{8})-C(=O)(alquilo), -NHS(O)_{s} alquilo (C_{1}-C_{8})_{2}, -S(O)_{s} alquilo (C_{1}-C_{8}), -S(O)_{s}NH-alquilo (C_{1}-C_{8}) y -S(O)_{s}N-(alquilo (C_{1}-C_{8}))_{2}, donde s es 0, 1 ó 2.

En ciertas realizaciones, R_{1} se selecciona independientemente cada vez que está presente entre hidrógeno, halógeno, hidroxi, nitro, ciano, amino, alquilo (C_{1}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6}), cicloalquilo (C_{3}-C_{7}), cicloalquil (C_{3}-C_{7})-alquilo (C_{1}-C_{4}), alquenilo (C_{2}-C_{6}), cicloalquenilo (C_{3}-C_{7}), alquinilo (C_{2}-C_{6}), cicloalquinilo (C_{3}-C_{7}), haloalquilo (C_{1}-C_{6}), haloalcoxi (C_{1}-C_{6}), mono y dialquil (C_{1}-C_{6})-amino, aminoalquilo (C_{1}-C_{6}) y mono- y dialquil (C_{1}-C_{6})-amino-alquilo (C_{1}-C_{6}).

R_{2} y R_{3} se seleccionan independientemente cada vez que está presente entre hidrógeno, halógeno, hidroxi, amino, nitro, ciano, -C(=O)NH_{2}, -COOH; y grupos de fórmula T-R_{C}-U-M. Dentro de la fórmula T-R_{C}-U-M, T es un enlace, -O-, -C(=O)-, -OC(=O)-, -C(=O)O-, -O-C(=O)O-, -S(O)_{n}-, -NR_{D}-, -C(=O)NHR_{D}-, -NHR_{D}C(=O), -NR_{D}S(O)_{n}- o -S(O)_{n}NR_{D}-. n se selecciona independientemente en cada caso entre 0, 1 ó 2. R_{C} es alquilo (C_{1}-C_{8}), alquenilo (C_{2}-C_{8}), alquinilo (C_{2}-C_{8}) o un grupo carbocíclico o heterocíclico de 3 a 10 miembros, cada uno opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes seleccionados independientemente entre hidroxi, halógeno, amino, ciano, nitro, alquilo (C_{1}-C_{6}) y haloalquilo (C_{1}-C_{6}). U es un enlace, -O-, -C(=O)-, -OC(-O)-, -C(=O)O-, -O-C(=O)O-, -S(O)_{n}-, -CHR_{D}-, -NR_{D}-, -C(=O)NHR_{D}-, -NHR_{D}C(=O)-, -NR_{D}S(O)_{n}- o -S(O)_{n}NR_{D}-. R_{D} se selecciona independientemente cada vez que está presente entre hidrógeno, alquilo (C_{1}-C_{8}), cicloalquilo (C_{3}-C_{8}), cicloalquil (C_{3}-C_{8})-alquilo (C_{1}-C_{8}) y alquil (C_{1}-C_{8})-cicloalquilo (C_{3}-C_{8}). M es: (i) hidrógeno; o (ii) alquilo (C_{1}-C_{8}), alquenilo (C_{2}-C_{8}), alquinilo (C_{2}-C_{8}) o un grupo carbocíclico o heterocíclico de 3 a 10 miembros, cada uno opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes seleccionados independientemente entre hidroxi, halógeno, amino, ciano, nitro, alquilo (C_{1}-C_{8}), halo-alquilo (C_{1}-C_{8}), alcoxi (C_{1}-C_{8}), -NH-alquilo (C_{1}-C_{8}), -N-(alquilo (C_{1}-C_{8}))_{2}, -NHC(=O)-alquilo (C_{1}-C_{8}), -N-alquil (C_{1}-C_{8})-C(=O)(alquilo), -NHS(O)_{s} alquilo (C_{1}-C_{8}), -S(O)_{s} alquilo (C_{1}-C_{8}), -S(O)_{s}NH-alquilo (C_{1}-C_{8}) y -S(O)_{s}N(alquilo (C_{1}-C_{8}))_{2}, donde s es 0, 1 ó 2.

En ciertas realizaciones, R_{2} y R_{3} se seleccionan independientemente entre: (i) hidrógeno y halógeno; y (ii) T-R_{C}, donde T es un enlace, -O-, -C(=O)-, -OC(=O)-, -C(=O)O- o -S(O)_{2}-; y R_{C} es alquilo (C_{1}-C_{6}) o un grupo carbocíclico o heterocíclico de 5 a 6 miembros, estando cada uno de ellos opcionalmente sustituido como se ha descrito anteriormente.

En ciertas realizaciones, las espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-onas o 3H-espiroisobenzofuran-1,4'-piperidinas sustituidas proporcionadas en este documento muestran una K_{i} de 1 micromolar o menos, 100 nanomolar o menos o 10 nanomolar o menos en un ensayo de unión del ligando al receptor de NPY5. El ligando (por ejemplo, NPY o PYY) de tales ensayos puede estar radiomarcado.

La presente invención también proporciona moduladores del receptor de NPY5 que comprenden un compuesto que se ha descrito anteriormente junto con (es decir, unido a o combinado con) otros componentes tales como un fármaco, resto diana o vehículo.

En otros aspectos, la presente invención proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto o modulador que se ha descrito anteriormente junto con un vehículo o excipiente fisiológicamente aceptable. En ciertas realizaciones, una composición farmacéutica proporcionada en este documento también puede comprender uno o más agentes activos más (es decir, fármacos). Las composiciones farmacéuticas proporcionadas en este documento pueden formularse, por ejemplo, en forma de un fluido inyectable, una nebulización, una crema, una píldora, una cápsula, un jarabe o un parche transdérmico.

La presente invención también proporciona, en otros aspectos, procedimientos para la preparación de un medicamento para tratar una enfermedad o trastorno asociado con la activación del receptor e NPY5, que comprende administrar a un paciente en necesidad de tal tratamiento una cantidad eficaz de un compuesto o modulador que se ha descrito anteriormente. Tales enfermedades y trastornos incluyen, por ejemplo, trastornos alimenticios (por ejemplo, obesidad y bulimia nerviosa), trastornos psiquiátricos, trastornos cardiovasculares y diabetes. El compuesto o modulador puede administrarse por vía oral, o por cualquier otro medio tal como por vía intranasal, intravenosa o tópica. En ciertas realizaciones, el paciente es un ser humano.

En otros aspectos, la presente invención proporciona compuestos que se han descrito anteriormente, donde los compuestos están radiomarcados.

Se proporcionan procedimientos, en otros aspectos, para determinar la presencia o ausencia de un receptor de NPY5 en una muestra, que comprenden las etapas de: (a) poner en contacto una muestra con un agente que comprende un compuesto que se ha descrito anteriormente en condiciones que permitan la unión del agente al receptor de NPY5; y (b) detectar un nivel de agente unido al receptor de NPY5. En ciertas realizaciones, el agente es un compuesto radiomarcado, y la etapa de detección comprende las etapas de: (i) separar el agente no enlazado del agente enlazado; y (ii) detectar la presencia o ausencia de agente enlazado en la muestra. La detección puede realizarse, por ejemplo, usando autorradiografía.

La presente invención también proporciona, en otros aspectos, procedimientos para modular la unión de NPY al receptor de NPY5. Algunos de estos procedimientos se realizan in vitro, y comprenden poner en contacto el receptor de NPY5 con un compuesto o modulador que se ha descrito anteriormente en ciertas condiciones y en una cantidad suficiente para modular de forma detectable la unión de NPY al receptor de NPY5. Otros de tales procedimientos pueden realizarse in vivo, y comprenden poner en contacto células que expresan el receptor de NPY5 con un compuesto o modulador que se ha descrito anteriormente en una cantidad suficiente para modular de forma detectable la unión de NPY5 a las células que expresan un receptor de NPY5 clonado in vitro. La modulación de la unión de NPY puede determinarse, por ejemplo, usando un ensayo de unión de ligandos que se proporciona en este documento.

Además, se proporcionan procedimientos para modular la unión de NPY al receptor de NPY5 en un paciente que comprende administrar a un paciente (es decir, un ser humano o un animal no humano) un compuesto o modulador que se ha descrito anteriormente. Los pacientes pueden incluir, por ejemplo, animales de compañía tales como
perros.

En ciertas realizaciones de los procedimientos anteriores, la modulación es inhibición y/o el receptor de NPY5 es un receptor de NPY5 humano.

En otros aspectos, la presente invención proporciona procedimientos para modular la actividad de transducción de señal del receptor de NPY5, que comprenden poner en contacto un receptor de NPY5, in vivo o in vitro, con una cantidad suficiente de un modulador del receptor de NPY5, en condiciones adecuadas para la unión de NPY al receptor de NPY5.

También se proporcionan por la presente invención preparaciones farmacéuticas empaquetadas que comprenden: (a) una composición farmacéutica que se ha descrito anteriormente en un recipiente; y (b) instrucciones para usar la composición para tratar a un paciente que padece de una enfermedad o trastorno asociado con la activación del receptor de NPY5. Tales trastornos incluyen, por ejemplo, trastornos alimenticios, trastornos psiquiátricos, trastornos cardiovasculares (tales como hipertensión) y diabetes.

Estos y otros aspectos de la presente invención se harán obvios después de la referencia a la siguiente descripción detallada.

Descripción detallada

Como se ha indicado anteriormente, la presente invención proporciona moduladores del receptor de NPY5 que comprenden ligandos del receptor de NPY5 de molécula pequeña que son espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-onas o 3H-espiroisobenzofuran-1,4'-piperidinas. Tales moduladores pueden usarse in vitro o in vivo, para inhibir o mejorar la unión de NPY al receptor de NPY5 en una diversidad de contextos, discutidos con detalle a continua-
ción.

Definiciones

Antes de describir la invención con detalle, puede ser útil proporcionar las definiciones de ciertos términos que van a usarse en este documento. Los compuestos de la presente invención se describen generalmente usando la nomenclatura convencional. Para los compuestos que tienen centros asimétricos, debería entenderse que se abarcan todos los isómeros ópticos y mezclas de los mismos. Además, los compuestos con dobles enlaces carbono-carbono pueden aparecer en las formas Z y E, incluyéndose todas las formas isoméricas de los compuestos dentro de la presente invención. Cuando un compuesto existe en diversas formas tautoméricas, la invención no se limita a uno sólo de los tautómeros específicos, sino que incluye todas las formas tautoméricas. Ciertos compuestos se describen en este documento usando una fórmula general que incluye variables. A menos que se especifique otra cosa, cada variable dentro de tal fórmula se define independientemente de las otras variables.

Como se usa en este documento "alquilo C_{1}-C_{8}" se refiere a grupos alquilo de cadena lineal o ramificada que tienen 1-8 átomos de carbono tales como, por ejemplo, metilo, etilo, propilo, isopropilo, n-butilo, sec-butilo, terc-butilo, pentilo, 2-pentilo, isopentilo, neopentilo, hexilo, 2-hexilo, 3-hexilo y 3-metilpentilo. Un sustituyente alquilo C_{1}-C_{8} puede unirse a un átomo de una molécula de interés mediante cualquier porción químicamente adecuada del grupo alquilo C_{1}-C_{8}. Los grupos alquilo preferidos son grupos alquilo C_{1}-C_{6}, especialmente metilo, etilo, propilo y butilo. Se prefieren particularmente grupos alquilo C_{1}-C_{3}. De igual forma, un grupo "alquenilo C_{2}-C_{6}" se refiere a grupos alqueno de cadena lineal o ramificada que tienen de 2 a 8 átomos de carbono, se prefieren grupos C_{2}-C_{6} y se prefieren particularmente grupos C_{2}-C_{4}. Dentro de un grupo alquenilo, están presentes uno o más dobles enlaces carbono-carbono y pueden aparecer en cualquier punto estable a lo largo de la cadena (por ejemplo, etenilo, alilo e isopropenilo). Un grupo "alquinilo C_{2}-C_{8}" se refiere a grupos alquino de cadena lineal o ramificada que tienen de 2 a 8 átomos de carbono, se prefieren grupos C_{2}-C_{6} y se prefieren particularmente grupos alquinilo C_{2}-C_{4}. Dentro de un grupo alquinilo, están presentes triples enlaces carbono-carbono insaturados, y pueden aparecer en cualquier punto estable a lo largo de la cadena (Por ejemplo, etinilo y propargilo). Un "punto adecuado" es un enlace que, cuando es insaturado, da como resultado un compuesto químicamente estable (es decir, un compuesto que puede aislarse, caracterizarse y ensayarse para la actividad biológica).

Por grupo "cicloalquilo C_{3}-C_{10}" se indican grupos alquilo que tienen 3-10 átomos de carbono que forman un sistema de anillos mono-, bi- o policíclicos, tales como, por ejemplo, ciclopropilo, ciclopropilmetilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo y norbornilo. Los grupos "cicloalquilo C_{3}-C_{8}" que tienen 3-8 átomos de carbono forman un anillo unitario se prefieren en ciertas realizaciones y se prefieren particularmente anillos cicloalquilo C_{5}-C_{6}. De igual forma, un grupo "cicloalquenilo" o “cicloalquenilo C_{3}-C_{10}” se refiere a grupos hidrocarburo que tienen 3-10 átomos de carbono que forman un sistema de anillos mono-, bi- o policíclicos y que contienen uno o más dobles enlaces carbono-carbono que pueden aparecer en cualquier punto adecuado del anillo (por ejemplo, ciclopentenilo, ciclohexenilo o cicloheptenilo). Un grupo "cicloalquinilo" o "cicloalquinilo C_{3}-C_{10}" se refiere a grupos hidrocarburo que tienen 3-10 átomos de carbono que forman un sistema de anillos mono-, bi- o policíclicos y que contienen uno o más triples enlaces carbono-carbono que pueden aparecer en cualquier punto estable del anillo.

La expresión "(cicloalquil)alquilo" o "cicloalquil (C_{3}-C_{10})-alquilo (C_{1}-C_{8})" se refiere a un sustituyente alquilo lineal o ramificado que tiene de 1 a 8 átomos de carbono, que está unido además a un sistema de anillos mono-, bi- o policíclicos y que tiene 3-10 átomos de carbono (por ejemplo, ciclopropilmetilo, ciclobutilmetilo, ciclopentilmetilo, ciclohexilmetilo o cicloheptilmetilo).

Un grupo "alcanoílo C_{2}-C_{8}" se refiere a un grupo acilo con 2 a 8 átomos de carbono en una organización lineal, ramificada o cicloalquilo. Se prefieren grupos alcanoílo C_{2}-C_{6} y se prefieren particularmente grupos alcanoílo C_{2}-C_{4}.

Un grupo "alcanona C_{2}-C_{8}" se refiere a un sustituyente cetona con 2 a 8 átomos de carbono en una organización lineal, ramificada o cíclica. Se prefieren grupos alcanona C_{2}-C_{6} y se prefieren particularmente grupos alcanona C_{2}-C_{4}.

Por grupo "alcoxi C_{1}-C_{8}" en la presente invención, se pretende indicar un grupo alquilo de 1 a 8 átomos de carbono u nido mediante un enlace oxígeno. Los grupos alcoxi C_{1}-C_{8} incluyen, por ejemplo, metoxi, etoxi, propoxi, isopropoxi, n-butoxi, sec-butoxi, terc-butoxi, n-pentoxi, 2-pentoxi, 3-pentoxi, isopentoxi, neopentoxi, hexoxi, 2-hexoxi, 3-hexoxi y 3-metilpentoxi. Se prefieren generalmente grupos alcoxi C_{1}-C_{6} y se prefieren particularmente grupos alcoxi C_{1}-C_{4}, especialmente etoxi y metoxi. De igual forma, un grupo "alquil C_{1}-C_{8}-tio" se refiere a un grupo alquilo de 1 a 8 átomos de carbono unido mediante un enlace azufre. Un grupo "aril C_{3}-C_{10}-oxi" se refiere a grupos arilo de 3 a 10 átomos de carbono unidos mediante un enlace oxígeno (por ejemplo, fenoxi).

El término "alcoxi C_{1}-C_{8}-carbonilo" se refiere a un grupo alcoxi unido mediante un carbonilo. En otras palabras, un grupo alcoxicarbonilo tiene la estructura general -C(=O)-O-alquilo. Se prefieren generalmente grupos alcoxi C_{1}-C_{6}-carbonilo y se prefieren particularmente grupos alcoxi C_{1}-C_{4}-carbonilo.

Un grupo "alcanoil C_{1}-C_{8}-oxi", como se usa en este documento, se refiere a un grupo alcanoílo unido mediante un enlace oxígeno. En otras palabras, un grupo alcanoiloxi tiene la estructura general -O-C(=O)-alquilo. Se prefieren generalmente grupos alcanoil C_{1}-C_{6}-oxi y se prefieren particularmente grupos alcanoil C_{1}-C_{4}-oxi.

El término "carbonato C_{1}-C_{8}" se refiere a un grupo alcoxicarbonilo unido mediante un enlace oxígeno. En otras palabras, un grupo carbonato tiene la estructura general -O-C(=O)-O-alquilo. Se prefieren generalmente grupos carbonato C_{1}-C_{6} y se prefieren particularmente grupos carbonato C_{1}-C_{4}.

De igual forma, un grupo "alquil C_{2}-C_{8}-éter" se refiere a un sustituyente éter con 2 a 8 átomos de carbono, colocado de tal manera que al menos un átomo de carbono se encuentra al lado del átomo de oxígeno. Se prefieren grupos éter C_{2}-C_{6} y se prefieren particularmente grupos éter C_{2}-C_{4}.

El término "halógeno" incluye flúor, cloro, bromo y yodo. Un grupo "haloalquilo" puede ser un grupo hidrocarburo alifático saturado de cadena lineal o ramificada, sustituido con 1 o más átomos de halógeno. Los grupos "halo-alquilo (C_{1}-C_{8})" tienen de 1 a 8 átomos de carbono; los grupos "halo-alquilo (C_{1}-C_{6})" tienen de 1 a 6 átomos de carbono. Los ejemplos de grupos haloalquilo incluyen, pero sin limitación, mono-, di- o trifluorometilo; mono-, di- o triclorometilo; mono-, di-, tri-, tetra- o pentafluoroetilo; y mono-, di-, tri-, tetra- o pentacloroetilo. Los grupos haloalquilo típicos son trifluorometilo y difluorometilo. Preferiblemente, no están presentes más de 5, y más preferiblemente no más de 3, grupos haloalquilo en los compuestos proporcionados en este documento. El término "haloalcoxi" se refiere a un grupo haloalquilo que se ha definido anteriormente unido mediante un enlace oxígeno. Los grupos "halo-alcoxi (C_{1}-C_{8})" tienen de 1 a 8 átomos de carbono.

El término "hidroxi-alquilo (C_{1}-C_{8})" (o "hidroxi-alquilo (C_{1}-C_{6})") se refiere a un grupo alifático que tiene de 1 a 8 (o de 1 a 6) átomos de carbono, y comprende además al menos un grupo hidroxilo en la cadena de carbonos principal y/o en una cadena lateral. Los grupos hidroxi-alquilo (C_{1}-C_{8}) incluyen, por ejemplo, 2-hidroxi-1,1-dimetil-etilo, 1-hidroximetil-2-metil-propilo y 2-hidroxi-propilo.

El término "carbamato C_{1}-C_{8}", como se usa en este documento, se refiere a un grupo que tiene la estructura general -N-C(=O)-O-alquilo. Se prefieren generalmente grupos alquilo C_{1}-C_{6} y se prefieren particularmente grupos alquilo C_{1}-C_{4}.

Cualquiera de los grupos mencionados anteriormente pueden estar sustituidos con cualquier otro grupo indicado anteriormente, con la condición de que se de como resultado un compuesto estable. Los sustituyentes adecuados incluyen, por ejemplo, halógenos, ciano, nitro, alquilo C_{1}-C_{8}, alquenilo C_{2}-C_{8}, alquinilo C_{2}-C_{8}, alcoxi C_{1}-C_{8}, alquil C_{1}-C_{8}-tio, hidroxi, amino, mono o di-alquil (C_{1}-C_{8})-amino, cicloalquil (C_{3}-C_{7})-alquilo (C_{0}-C_{3}), haloalquilo (C_{1}-C_{8}), haloalcoxi (C_{1}-C_{8}), alcanoílo C_{1}-C_{8}, alcoxi C_{1}-C_{8}-carbonilo, -COOH, -CONH_{2}, mono- o di-alquil (C_{1}-C_{8})-carboxamido, -SO_{2}NH_{2} y mono o di-alquil (C_{1}-C_{8})-sulfonamido. Los grupos carbocíclicos y heterocíclicos que se describen a continuación también pueden usarse como sustituyentes. Preferiblemente, los grupos anteriores están sustituidos con 0 a 5 sustituyentes seleccionados independientemente; más preferiblemente de 0 a 3 sustituyentes seleccionados independientemente.

Un "heteroátomo", como se usa en este documento, es oxígeno, azufre o nitrógeno.

Un "grupo carbocíclico" comprende al menos un anillo formado en su totalidad por enlaces carbono-carbono. Tal grupo tiene generalmente de 1 a 3 anillos condensados o colgantes, preferiblemente un anillo o dos anillos condensados. Típicamente, cada anillo contiene de 3 a 10 miembros en el anillo, preferiblemente de 5 a 8 miembros en el anillo. A menos que se especifique otra cosa, tal anillo puede ser aromático o no aromático. Los ejemplos representativos de grupos carbocíclicos son grupos cicloalquilo (por ejemplo, ciclopentano y ciclohexano), cicloalquenos y cicloalquinos, así como grupos aromáticos tales como fenilo, bencilo, naftilo, fenoxilo, benzoxilo y feniletanonilo. Los átomos de carbono presentes en un grupo carbocíclico, por supuesto, pueden unirse a una diversidad de sustituyentes del anillo, tales como hidrógeno, un halógeno, ciano, nitro, alquilo C_{1}-C_{8}, alquenilo C_{2}-C_{8}, alquinilo C_{2}-C_{8}, alcoxi C_{1}-C_{8}, alquiltio C_{1}-C_{8}, hidroxi, amino, mono o dialquil (C_{1}-C_{8})-amino, cicloalquil (C_{3}-C_{7})-alquilo (C_{0}-C_{3}), haloalquilo (C_{1}-C_{8}), haloalcoxi (C_{1}-C_{8}), alcanoílo C_{1}-C_{8}, alcoxi C_{1}-C_{8}-carbonilo, -COOH, -CONH_{2}, mono- o di-alquil (C_{1}-C_{8})-carboxamido, -SO_{2}NH_{2} y mono o di-alquil (C_{1}-C_{8})-sulfonamido.

Un "grupo heterocíclico" comprende al menos un anillo en el que al menos un átomo del anillo es un heteroátomo (es decir, N, O o S) o el resto de los átomos del anillo son carbono. Preferiblemente, un grupo heterocíclico comprende 1-4 heteroátomos; en ciertas realizaciones, se prefieren 1 ó 2 heteroátomos. Un grupo heterocíclico tiene generalmente de 1 a 3 anillos condensados o colgantes, preferiblemente un anillo o dos anillos condensados. Típicamente, cada anillo contiene de 3 a 10 miembros en el anillo, preferiblemente de 5 a 8 miembros en el anillo, y puede estar opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes tales como halógeno, ciano, nitro, alquilo C_{1}-C_{8}, alquenilo C_{2}-C_{8}, alquinilo C_{2}-C_{8}, alcoxi C_{1}-C_{8}, alquil C_{1}-C_{8}-tio, hidroxi, amino, mono o dialquil (C_{1}-C_{8})-amino, halo-alquilo (C_{1}-C_{8}), haloalcoxi (C_{1}-C_{8}), hidroxialquilo (C_{1}-C_{8}), hidroxi-alcoxi (C_{1}-C_{8})-alcanoílo C_{2}-C_{8}, alcoxi C_{1}-C_{8}-carbonilo, -COOH, -SO_{2}NH_{2}, mono o dialquilsulfonamido, -C(O)NH_{2} o mono o di-alquil (C_{1}-C_{8})-carboxamido. A menos que se especifique otra cosa, un grupo heterocíclico puede ser aromático o no aromático. Como con un grupo carbocíclico, los átomos de un anillo heterocíclico también pueden unirse a una diversidad de sustituyentes del anillo.

Un anillo heterocíclico puede unirse a un grupo colgante en cualquier heteroátomo o átomo de carbono que de como resultado una estructura estable. Los anillos heterocíclicos descritos en este documento pueden estar sustituidos sobre el carbono o sobre un átomo de nitrógeno si el compuesto resultante es estable. Un nitrógeno del heterociclo puede estar opcionalmente cuaternizado. Preferiblemente, si el número total de átomos de S y O del heterociclo es superior a 1, entonces estos heteroátomos no son adyacentes uno al otro. Más preferiblemente, el número total de átomos de S y O del heterociclo no es superior a 1.

Los ejemplos de grupos heterocíclicos incluyen, pero sin limitación, acridinilo, azocinilo, bencimidazolilo, benzofuranilo, benzotiofuranilo, benzotiofenilo, benzoxazolilo, benzotiazolilo, benzotriazolilo, benzotetrazolilo, bencisoxazolilo, bencisotiazolilo, bencimidazolinilo, carbazolilo, NH-carbazolilo, carbolinilo, cromanilo, cromenilo, cinnolinilo, decahidroquinolinilo, ditiazinilo, dihidrofurotetrahidrofurano, furanilo, furazanilo, imidazolidinilo, imidazolinilo, imidazolilo, indazolilo, indolenilo, indolinilo, indolizinilo, indolilo, isobenzofuranilo, isocromanilo, isoindazolilo, isoindolinilo, isoindolilo, isoquinolinilo, isotiazolilo, isoxazolilo, morfolinilo, naftiridinilo, octahidroisoquinolinilo, oxadiazolilo, oxazolidinilo, oxazolilo, oxazolidinilo, pirimidinilo, fenantridinilo, fenantrolinilo, fenazinilo, fenotiazinilo, fenoxatiinilo, fenoxazinilo, ftalazinilo, piperazinilo, piperidinilo, pteridinilo, purinilo, piranilo, pirazinilo, pirazolidinilo, pirazolinilo, pirazolilo, piridazinilo, piridooxazol, piridoimidazol, piridotiazol, piridinilo, piridilo, pirimidinilo, pirrolidinilo, pirrolinilo, pirrolilo, quinazolinilo, quinolinilo, quinoxalinilo, quinuclidinilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidroisoquinolinilo, tetrahidroquinolinilo, tetrazolilo, tiadiazinilo, tiadiazolilo, tiantrenilo, tiazolilo, tienilo, tienotiazolilo, tienooxazolilo, tienoimidazolilo, tiofenilo, triazinilo y xantenilo. Será obvio que cualquier grupo heterocíclico puede estar sustituido con uno o más sustituyentes como se ha descrito anteriormente.

Los grupos heterocíclicos preferidos incluyen, por ejemplo, piridilo, pirimidinilo (por ejemplo, pirimidin-2-ilo), piridinilo (piridin-2-ilo, piridin-3-ilo y piridin-4-ilo), morfolinilo (por ejemplo, morfolin-4-ilo), piperidinilo (por ejemplo, piperidin-1-ilo), pirrolidinilo (por ejemplo, pirrolidin-1-ilo), tetrazolilo, triazinilo, tienilo, coumarinilo, imidazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, indolilo, pirrolilo, pirazolilo, quinolinilo, isoquinolinilo, tiazolilo, benzotiadiazolilo, triazolilo, pirazinilo, furilo, tienilo, benzotienilo, benzofuranilo, tetrahidropiranilo, tetrahidrofuranoílo, indanilo y derivados sustituidos del os anteriores tales como metil-tetrahidropiran-2-ilo y 2-hidroxi-indan-1-ilo.

Un grupo "heterocicloalquilo" como se usa en este documento, es un grupo heterocíclico no aromático que tiene 3-10 átomos de carbono y al menos un heteroátomo. Los heterocicloalquilos preferidos son heterocicloalquilos (C_{3}-C_{8}) tales como piperidina y pirrolidina.

Un "sustituyente", como se usa en este documento, se refiere a un resto molecular que se enlaza covalentemente a un átomo de una molécula de interés. Por ejemplo, un "sustituyente del anillo" puede ser un resto tal como un halógeno, grupo alquilo, grupo haloalquilo u otro grupo que se ha discutido en este documento, que se enlaza covalentemente a un átomo (preferiblemente un átomo de carbono o nitrógeno) que es un miembro del anillo. El término "sustitución" se refiere a reemplazar un átomo de hidrógeno de una estructura molecular por un sustituyente que se ha descrito en este documento, de tal forma que la valencia del átomo indicado no se supere, y de tal forma que se de como resultado de la sustitución un compuesto químicamente estable (es decir, un compuesto que puede aislarse, caracterizarse y ensayarse para la actividad biológica). Cuando el sustituyente es ceto (es decir, =O), entonces se reemplazan 2 hidrógenos del átomo. Los sustituyentes ceto no están presentes en restos aromáticos. Los grupos que están "opcionalmente sustituidos" están no sustituidos o sustituidos con otro grupo diferente de hidrógeno en una o más posiciones disponibles, típicamente las posiciones 1, 2, 3 ó 4, con uno o más grupos adecuados (que pueden ser iguales o diferentes) que se han descrito en este documento.

El término "receptor de NPY" se refiere a una proteína que comprende cualquier secuencia de polipéptidos del receptor de NPY, y se prefieren generalmente secuencias de mamíferos y especialmente de monos y seres humanos. Un "receptor de NPY5" se refiere a una proteína que comprende una secuencia del subtipo Y_{5} del receptor de NPY, tal como la que se describe en la Patente de Estados Unidos Nº 5.602.024 y en este documento. Un receptor de NPY o NPY5 puede constar en su totalidad de una secuencia que se encuentra en la naturaleza, o puede comprender más componentes (por ejemplo, secuencia guía de extremo N) que no inhiben sustancialmente la capacidad del receptor para unirse al ligando (es decir, se mantiene al menos un 50% de a afinidad de unión del receptor para NPY y/o PYY). Por ejemplo, se considera que un receptor quimérico de NPY5/NPY1, como se ha descrito en este documento, es un receptor de NPY5. De igual forma, pueden usarse secuencias del receptor de NPY5 truncadas, o secuencias que contienen eliminaciones de aminoácidos, sustitutos, adiciones o modificaciones, con la condición de que las propiedades de unión del receptor de NPY5 no disminuyan sustancialmente (es decir, se mantiene al menos un 50% de la afinidad de unión a ligandos endógenos). La afinidad de unión de un receptor de NPY candidato para el ligando puede evaluarse usando un ensayo de unión convencional que se proporciona en este documento.

Un "modulador del receptor de NPY5", también denominado en este documento como un "modulador", es un compuesto que modula (es decir, aumenta o disminuye) la unión del ligando a un receptor de NPY5. En otras palabras, un modulador puede ser un antagonista o agonista del receptor de NPY5. Los moduladores comprenden un compuesto que es una espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona o 3H-espiroisobenzofuran-1,4'-piperidina sustituida que tiene actividad moduladora del receptor de NPY5. Un modulador puede constar en su totalidad de tal compuesto, o puede comprender además uno o más restos adicionales, con la condición de que la actividad moduladora del compuesto activo no disminuya sustancialmente (es decir, la capacidad de aumentar o disminuir la unión del ligando al receptor de NPY5, determinada usando un ensayo de unión proporcionado en este documento, no disminuye en más de un 50%). Tales restos adicionales incluyen, por ejemplo, restos de dirección, otros agentes activos y vehículos, cualquiera de los cuales unido al compuesto activo mediante una diversidad de técnicas convencionales que incluyen condensación directa, o por medio de engarces bi- o multi-funcionales. Como alternativa, tales restos adicionales pueden combinarse con el compuesto activo, sin enlace covalente. Un modulador se une "específicamente" al receptor de NPY5 si une el receptor de NPY5 humano (unión total menos unión no específica) con una Ki que es 10 veces, preferiblemente 100 veces, y más preferiblemente 1000 veces, menor que la Ki medida para la unión del modulador a otros receptores de NPY, tales como NPY1. Un modulador se une con "alta afinidad" si la Ki en un receptor de NPY es menor de 1 micromolar, preferiblemente menor de 100 nanomolar o 10 nanomolar. Pueden realizarse ensayos de unión para evaluar la Ki, por ejemplo, usando el ensayo de unión a NPY humano in vitro del Ejemplo 676, mostrado en este documento. La unión del ligando al receptor de NPY1 puede inhibirse en tales ensayos usando técnicas bien conocidas, tales como a través del uso de compuesto de Thomae, que se ha descrito en este documento. Será obvio que puede usarse NPY o PPY como ligando en los ensayos de unión.

Un "resto de dirección", como se usa en este documento, es una sustancia (por ejemplo, un compuesto o célula) que aumenta la concentración local de un modulador en las proximidades de un sitio diana en un paciente. Existe una diversidad de restos de dirección conocidos en la técnica, incluyendo anticuerpos y fragmentos de los mismos, receptores, ligandos y otras moléculas que se unen a células de, o incluidas en, un tejido diana.

Un "vehículo", "grupo vehículo" o "molécula vehículo" es una sustancia que puede asociarse con un compuesto activo antes de la administración a un paciente, generalmente para el propósito de controlar la estabilidad o biodisponibilidad del compuesto. Los vehículos para el uso en tales formulaciones son generalmente biocompatibles, y también pueden ser biodegradables. Los vehículos incluyen, por ejemplo, moléculas monovalentes o multivalentes tales como albúmina de suero (por ejemplo, humano o bovino), albúmina de huevos, péptidos, polilisina y polisacáridos tales como aminodextrano y poliamidoaminas. Los vehículos también incluyen materiales con soporte sólido tales como perlas y micropartículas que comprenden, por ejemplo, polilactato poliglicolato, poli(lactida-co-glicolida), poliacrilato, látex, almidón, celulosa o dextrano. Un vehículo puede relacionar los compuestos de una diversidad de formas, incluyendo unión covalente directamente o mediante un grupo de engarce, interacción no covalente o
mezcla.

Un resto se "asocia con" un compuesto activo si el resto se une (covalentemente o no) o se combina con el compuesto activo.

Un "engarce", como se usa en este documento, es cualquier molécula que no comprende un compuesto que modula la unión de NPY a un receptor de NPY5, y que puede unirse covalentemente a al menos dos restos químicos. Los engarces pueden usarse para unir otro resto a un compuesto que modula la unión de NPY a un receptor de NPY5. En general, un engarce es bi-funcional o multi-funcional (por ejemplo, una estructura ramificada). Se conocen muchos engarces en la técnica, y pueden incorporarse en un modulador del receptor de NPY usando cualquier procedimiento apropiado, que será obvio para los especialistas en la técnica.

Un "profármaco" es un compuesto que no satisface totalmente los requerimientos estructurales de los compuestos de este documento, pero que se modifica in vivo, después de la administración a un paciente, produciendo un compuesto activo de la presente invención. Por ejemplo, un profármaco puede ser un derivado acilado de un compuesto proporcionado en este documento. Los profármacos incluyen compuestos en los que los grupos hidroxi, amina o sulfhidrilo se unen a cualquier grupo que, cuando se administra a un sujeto mamífero, se escinde, formando un grupo hidroxilo, amino o sulfhidrilo libre, respectivamente. Los ejemplos de profármacos incluyen, pero sin limitación, derivados acetato, formiato y benzoato de grupos funcionales alcohol y amina de los compuestos proporcionados en este documento.

Un ``paciente es cualquier individuo tratado con un modulador del receptor de NPY5 que se proporciona en este documento. Los pacientes incluyen seres humanos, así como otros animales tales como animales de compañía y ganado. Los pacientes pueden estar afectados por una afección asociada con la activación indeseada del receptor de NPY5, o pueden no padecer de tal afección (es decir, el tratamiento puede ser profiláctico).

Moduladores del receptor de NPY5

Como se ha indicado anteriormente, la presente invención proporciona moduladores del receptor del neuropéptido Y_{5} (NPY5) (es decir, agentes que modulan de forma detectable la unión del ligando a NPY5 y la transducción de señal mediada por el receptor de NPY5). Tales moduladores pueden ser específicos para NPY5 (es decir, no modulan de forma detectable la unión del ligando a otros receptores de NPY) o también pueden inhibir o mejorar la unión del ligando a uno o más receptores de NPY, tales como NPY1. Los moduladores del receptor de NPY5 pueden usarse para modular la unión de NPY a NPY5 in vivo, especialmente en el tratamiento de trastornos alimenticios (por ejemplo, obesidad y bulimia), trastornos psiquiátricos, diabetes y enfermedades cardiovasculares en seres humanos, animales de compañía domesticados y animales de ganado. Los moduladores también se usan en una diversidad de ensayos in vitro, tales como ensayos para la actividad del receptor, como pruebas para la detección y localización de receptores de NPY5 y como patrones en ensayos de unión de NPY y fracciones celulares mediadas por NPY.

Los moduladores del receptor de NPY5 proporcionados en este documento comprenden compuestos activos que son derivados sustituidos de espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona o 3H-espiroisobenzofuran-1,4'-piperidina, que modulan de forma detectable la unión del ligando al receptor de NPY5 en concentraciones nanomolares, preferiblemente en concentraciones subnanomolares. Ciertos compuestos activos se unen específicamente y/o con alta afinidad al receptor de NPY5. Los compuestos activos pueden incluir agonistas y antagonistas del receptor.

La presente invención se basa, en parte, en el descubrimiento de que las moléculas pequeñas que satisfacen la Fórmula I (así como sales farmacéuticamente aceptables y profármacos de las mismas) modulan la unión de NPY al receptor de NPY5.

Fórmula I

1

En la Fórmula I, X es oxígeno o H_{2}; A, D, W, V, Y y Z son independientemente CR_{1}, B es N o CR_{2} y E es N o CR_{3}. Preferiblemente, al menos dos de W, V, Y y Z (especialmente Y y Z) son CH, con el resto CR_{1}. En ciertas realizaciones, W, V, Y y Z son todos CH. Preferiblemente, A y D se seleccionan independientemente entre CH y C-halógeno; como alternativa, A y D son preferiblemente CR_{1}, B es preferiblemente CR_{2} y E es preferiblemente CR_{3}.

R_{1} se selecciona independientemente en cada caso entre hidrógeno, halógeno,hidroxi, amino, nitro, ciano, -C(=O)NH_{2} y -COOH y grupos de fórmula L-R_{A}-Q-G. Dentro de L-R_{A}-Q-G, L es un enlace, -O-, -C(=O)-, -OC(=O)-, -C(=O)O-, -O-C(=O)O-, -S(O)_{n}-;-NR_{B}-, -C(=O)NHR_{B}-, -NHR_{B}C(=O)-, -NR_{B}S(O)_{n}- o -S(O)_{n}NR_{B}-; preferiblemente L es -O-, -C(=O)-, -OC(=O)-, -C(=O)O- o -NR_{B}. n es independientemente en cada caso 0, 1 ó 2. R_{A} es alquilo (C_{1}-C_{8}), alquenilo (C_{2}-C_{8}), alquinilo (C_{2}-C_{8}), cicloalquilo (C_{3}-C_{8}), cicloalquenilo (C_{3}-C_{8}), cicloalquinilo (C_{3}-C_{8}) o heterocicloalquilo (C_{3}-C_{8}), cada uno opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes seleccionados independientemente entre hidroxi, halógeno, amino, ciano, nitro, alquilo (C_{1}-C_{6}) y halo-alquilo (C_{1}-C_{6}). Preferiblemente, R_{A} es alquilo (C_{1}-C_{6}), alquenilo (C_{2}-C_{6}), alquinilo (C_{2}-C_{6}), cicloalquilo (C_{5}-C_{7}) o heterocicloalquilo (C_{5}-C_{7}), cada uno opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes seleccionados independientemente entre hidroxi, halógeno, amino, ciano, nitro, alquilo (C_{1}-C_{6}) y haloalquilo (C_{1}-C_{6}).

Dentro de la fórmula L-R_{A}-Q-G, Q es un enlace, -O-, -C(=O)-, -OC(=O)-, -C(=O)O-, -O-C(=O)O-, -S(O)_{n}-,
-CHR_{B}-, -NR_{B}-, -C(=O)NHR_{B}-, -NHR_{B}C(=O)-, -NR_{B}S(O)_{n}- o -S(O)_{n}NR_{B}; preferiblemente Q es un enlace, -O- o -NR_{B}-. R_{B} se selecciona independientemente en cada caso entre hidrógeno, alquilo (C_{1}-C_{8}), cicloalquilo (C_{3}-C_{8}), cicloalquil (C_{3}-C_{8})-alquilo (C_{1}-C_{8}) y alquil (C_{1}-C_{8})-cicloalquilo (C_{3}-C_{8}) (preferiblemente hidrógeno, alquilo (C_{1}-C_{6}) o cicloalquilo (C_{5}-C_{7}). G es: hidrógeno; o alquilo (C_{1}-C_{8}), alquenilo (C_{2}-C_{8}), alquinilo (C_{2}-C_{8}), cicloalquil (C_{3}-C_{8})-alquilo (C_{1}-C_{8}) o un grupo carbocíclico o heterocíclico de 3 a 10 miembros, cada uno opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes seleccionados independientemente entre hidroxi, halógeno, amino, ciano, nitro, alquilo (C_{1}-C_{8}), haloalquilo (C_{1}-C_{8}), alcoxi (C_{1}-C_{8}), -NH-alquilo (C_{1}-C_{8}), -N-(alquilo (C_{1}-C_{8}))_{2}, -NHC(=O)-alquilo (C_{1}-C_{8}), -N-alquil (C_{1}-C_{8})-C(=O)(alquilo), -NHS(O)_{s} alquilo (C_{1}-C_{8}), -S(O)_{s} alquilo (C_{1}-C_{8}), -S(O)_{s}NH-alquilo (C_{1}-C_{8}) y -S(O)_{s}N-(alquilo (C_{1}-C_{8}))_{2}, donde s es 0, 1 ó 2. Preferiblemente, G es (i) hidrógeno; o (ii) alquilo (C_{1}-C_{6}), alquenilo (C_{2}-C_{6}), alquinilo (C_{2}-C_{6}), cicloalquilo (C_{5}-C_{7}), cicloalquil (C_{5}-C_{7})-alquilo (C_{1}-C_{6}) o heterocicloalquilo (C_{5}-C_{7}), cada uno opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes seleccionados independientemente entre hidroxi, alquilo (C_{1}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6}), halógeno, amino, ciano y nitro. Más preferiblemente G es hidrógeno.

Preferiblemente, R_{1} se selecciona independientemente en cada aso entre hidrógeno, halógeno, hidroxi, nitro, ciano, amino, alquilo (C_{1}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6}) sustituido con amino o mono- o di-alquil (C_{1}-C_{6})-amino, cicloalquilo (C3-C_{7}), cicloalquil (C_{3}-C_{7})-alquilo (C_{1}-C_{4}), alquenilo (C_{2}-C_{6}), cicloalquenilo (C_{3}-C_{7}), alquinilo (C_{2}-C_{6}), cicloalquinilo (C_{3}-C_{7}), haloalquilo (C_{1}-C_{6}), haloalcoxi (C_{1}-C_{6}), mono y di-alquil (C_{1}-C_{6})-amino, amino-alquilo (C_{1}-C_{6}) y mono- y dialquil (C_{1}-C_{6})-amino-alquilo (C_{1}-C_{6}). Los grupos R_{1} particularmente preferidos incluyen hidrógeno, halógeno, hidroxi, nitro, ciano, amino, alquilo (C_{1}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6}), haloalquilo (C_{1}-C_{6}) y haloalcoxi (C_{1}-C_{6}); especialmente hidrógeno, metilo, etilo, metoxi, etoxi y derivados halogenados de los anteriores tales como trifluorometilo, trifluorometoxi y difluorometoxi.

En la Fórmula I, cada uno de R_{2} y R_{3} se selecciona independientemente entre hidrógeno, halógeno, hidroxi, amino, nitro, ciano, -C(=O)NH_{2} y -COOH y grupos de fórmula T-R_{C}-U-M. Dentro de la fórmula T-R_{C}-U-M, T es un enlace, -O-, -C(=O)-, -OC(=O)-, -C(=O)O-, -O-C(=O)O-, -S(O)_{n}-, -NR_{D}-, -C(=O)NHR_{D}-, - NHR_{D}C(=O)-, -NR_{D}S(O)_{n}-
o -S(O)_{n}NR_{D}-, donde n es 0, 1 ó 2. Preferiblemente, T es -O-, -C(=O)-, -OC(=O)-, -C(=O)O-, -S(O)_{n}- o -NR_{D}-. R_{C} es alquilo (C_{1}-C_{8}), alquenilo (C_{2}-C_{8}), alquinilo (C_{2}-C_{8}) o un grupo carbocíclico o heterocíclico de 3 a 10 miembros, estando cada uno opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes seleccionados independientemente entre hidroxi, halógeno, amino, ciano, nitro, alquilo (C_{1}-C_{6}) y halo-alquilo (C_{1}-C_{6}). n se selecciona independientemente en cada caso entre 0, 1 ó 2. Los grupos R_{C} preferidos incluyen fenilo, piridilo, tiazolilo, oxazolilo, tiadiazolilo, oxadiazolilo, pirazolilo, isoxazolilo, piperazinilo, pirimidinilo, piridazinilo, pirazinilo, piranilo, tiofenilo, furanilo, pirrolilo, imidazolilo, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo y morfolinilo, estando cada uno de ellos sustituido con 0 a 2 sustituyentes seleccionados independientemente entre hidroxi, halógeno, amino, ciano, nitro, alquilo (C_{1}-C_{6}), haloalquilo (C_{1}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6}) y halo-alcoxi (C_{1}-C_{6}).

Dos sustituyentes de R_{C} pueden unirse, formando un sustituyente cíclico. Por ejemplo, dos sustituyentes alcoxi pueden unirse para formar un anillo heterocíclico de cinco o seis miembros (es decir, un anillo a dioxalano o dioxano). Tal grupo R_{A} tiene la estructura:

2

\vskip1.000000\baselineskip

U (dentro de la fórmula T-R_{C}-U-M) es un enlace, -O-, -C(=O)-, -OC(=O)-, -C(=O)O-, -O-C(=O)O-, -S(O)_{n}-,
-CHR_{D}-, -NR_{D}-, -C(=O)NHR_{D}-, -NHR_{D}C(=O)-, -NR_{D}S(O)_{n}- o -S(O)_{n}NR_{D}-; preferiblemente un enlace, -O-, -C(=O)-, -OC(=O)-, -C(=O)O-, -S(O)_{n}-, -CHR_{D}- o -NR_{D}- y más preferiblemente un enlace, -C(=O)-, -CHR_{D}- o -NR_{D}-. R_{D} se selecciona independientemente en cada caso entre hidrógeno, alquilo (C_{1}-C_{8}), cicloalquilo (C_{3}-C_{8}), cicloalquil (C_{3}-C_{8})-alquilo (C_{1}-C_{8}) y alquil (C_{1}-C_{8})-cicloalquilo (C_{3}-C_{8}) (preferiblemente cada R_{D} es independientemente hidrógeno, alquilo (C_{1}-C_{6}) o cicloalquilo (C_{5}-C_{7})). M es: hidrógeno; o alquilo (C_{1}-C_{8}), alquenilo (C_{2}-C_{8}), alquinilo (C_{2}-C_{8}) o un grupo carbocíclico o heterocíclico de 3 a 10 miembros, cada uno opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes seleccionados independientemente entre hidroxi, halógeno, amino, ciano, nitro, alquilo (C_{1}-C_{8}), haloalquilo (C_{1}-C_{8}), alcoxi (C_{1}-C_{8}), -NH-alquilo (C_{1}-C_{8}), -N(alquilo (C_{1}-C_{8}))_{2}, -NHC(O)-alquilo (C_{1}-C_{8}), -N-alquil (C_{1}-C_{8})C(=O)(alquilo), -NHS(O)_{s}-alquilo (C_{1}-C_{8}), -S(O)_{s} alquilo (C_{1}-C_{8}), -S(O)_{s}NH-alquilo (C_{1}-C_{8}) y -S(O)_{s}N-(alquilo (C_{1}-C_{8}))_{2}, donde s es 0, 1 ó 2. Los grupos M preferidos son (i) hidrógeno; y (ii) alquilo (C_{1}-C_{6}), alquenilo (C_{2}-C_{6}), alquinilo (C_{2}-C_{6}) y grupos carbocíclicos o heterocíclicos de 3 a 10 miembros, cada uno opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes seleccionados independientemente entre hidroxi, halógeno, amino, ciano, nitro, alquilo (C_{1}-C_{6}), haloalquilo (C_{1}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6}), halo-alcoxi (C_{1}-C_{6}), NH-alquilo (C_{1}-C_{6}) y N(alquilo (C_{1}-C_{6}))_{2}.

Los grupos R_{2} y R_{3} preferidos son: (i) hidrógeno y halógeno; y (ii) alquilo (C_{1}-C_{6}), cicloalquilo (C_{5}-C_{7}), alquenilo (C_{2}-C_{6}), alquinilo (C_{2}-C_{6}), cicloalquil (C_{5}-C_{7})-alquilo (C_{1}-C_{6}), heterocicloalquilo (C_{5}-C_{7}), heterocicloalquil (C_{6}-C_{7})-alquilo (C_{1}-C_{6}) y grupos carbocíclicos y heterocíclicos de 3 a 10 miembros, cada uno opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes seleccionados independientemente entre hidroxi, halógeno, amino, ciano, nitro, alquilo (C_{1}-C_{6}), haloalquilo (C_{1}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6}), -NH-alquilo (C1-C_{6}), -N(alquilo (C1-C_{6}))_{2}, -NHC(=O)-alquilo (C_{1}-C_{6}), -N-alquil (C_{1}-C_{6})-C(O)(alquilo), -NHS(O)_{s} alquilo (C_{1}-C_{6}), -S(O)_{s} alquilo (C_{1}-C_{6}), -S(O)_{s}NH-alquilo (C_{1}-C_{6}), -S(O)_{s}N(alquilo (C_{1}-C_{6}))_{2} (donde s es 0,1 ó 2) y grupos carbocíclicos y heterocíclicos 3 a 10 miembros. Los ejemplos representativos de grupos carbocíclicos y heterocíclicos sustituidos y no sustituidos incluyen benzhidrilo, fenilo, piridilo (por ejemplo, 4-piridilo o 3-piridilo), tiazolilo, oxazolilo, tiadiazolilo, triazolilo, oxadiazolilo, pirazolilo, isoxazolilo, piperazinilo, pirimidinilo, piridazinilo, pirazinilo, piranilo, tiofenilo, furanilo, pirrolilo, imidazolilo, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo y morfolinilo, cada uno sustituido con 0 a 2 sustituyentes seleccionados independientemente entre hidroxi, halógeno, amino, ciano, nitro, alquilo (C_{1}-C_{6}), halo-alquilo (C_{1}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6}) y halo-alcoxi (C_{1}-C_{6}). Los grupos sustituidos incluyen, por ejemplo, 2-alquil-4-piridilo y 2-alquil-3-piridilo. Los grupos R_{2} y R_{3} particularmente preferidos se seleccionan entre hidrógeno, halógeno, ciano y T-R_{C}, donde T es un enlace, -O-, -C(=O)-, -OC(=O)-, -C(=O)O- o -S(O)_{2}- y R_{C} es alquilo (C_{1}-C_{6}) o un anillo carbocíclico o heterocíclico de 5 ó 6 miembros, cada uno opcionalmente sustituido con 1 a 3 sustituyentes seleccionados independientemente entre hidroxilo, halógeno, ciano, alquilo (C_{1}-C_{6}) y haloalquilo (C_{1}-C_{6}). Tales grupos R_{2} y R_{3} incluyen, por ejemplo, benzoílo, fenoxi, benciloxi y derivados sustituidos de los mismos.

Preferiblemente, R_{2} y R_{3} se seleccionan independientemente en cada caso entre: (i) trifluorometoxi, trifluorometilo, trifluorosulfonilo, hidrógeno, halógeno, hidroxi, nitro, ciano, amino, haloalquilo y -COOH; y (ii) benzoílo, benzhidrilo, fenoxi, benciloxi, fenilo, piridilo, tiazolilo, oxazolilo, tiadiazolilo, oxadiazolilo, pirazolilo, isoxazolilo, piperazinilo, pirimidinilo, piridazinilo, pirazinilo, piranilo, tiofenilo, furanilo, pirrolilo, imidazolilo, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo y morfolinilo, cada uno sustituido con 0 a 2 sustituyentes seleccionados independientemente entre hidroxi, halógeno, amino, ciano, nitro, alquilo (C_{1}-C_{6}), haloalquilo (C_{1}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6}) y haloalcoxi (C_{1}-C_{6}). Más preferiblemente, R_{2} y R_{3} se seleccionan independientemente entre: (i) hidrógeno, halógeno y ciano; y (ii) alquilo (C_{1}-C_{6}), cicloalquilo (C_{3}-C_{7}), haloalquilo (C_{1}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6}), haloalcoxi (C_{1}-C_{6}), alcanoílo (C_{1}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6})-carbonilo, alquil (C_{1}-C_{6})-aminocarbonilo, alquil (C_{1}-C_{6})-sulfonilo, oxadiazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, tiofenilo, triazolilo, pirimidinilo, piridinilo, pirazinilo, fenilo, bencilo, fenoxi, benciloxi y benzoílo, cada uno está opcionalmente sustituido con 1 a 3 sustituyentes seleccionados entre halógeno y alquilo (C_{1}-C_{6}). En ciertas realizaciones particularmente preferidas, al menos uno de R_{2} y R_{3} se selecciona entre hidrógeno, hidroxi, halógeno, alquilo (C_{1}-C_{6}), haloalquilo (C_{1}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6}) y haloalcoxi (C_{1}-C_{6}).

En ciertas realizaciones preferidas, R_{1} se selecciona independientemente en cada caso entre hidrógeno, hidroxi, halógeno, alquilo (C_{1}-C_{6}), haloalquilo (C_{1}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6}) y haloalcoxi (C_{1}-C_{6}); uno de R_{2} o R_{3} se selecciona entre hidrógeno, hidroxi, halógeno, alquilo (C_{1}-C_{6}), haloalquilo (C_{1}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6}) y haloalcoxi (C_{1}-C_{6}) y el otro de R_{2} o R_{3} se selecciona entre, hidroxi, halógeno, ciano y alquilo (C_{1}-C_{6}), cicloalquilo (C_{5}-C_{7}), haloalquilo (C_{1}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6}), haloalcoxi (C_{1}-C_{6}), alcanoílo (C_{1}-C_{6}); alcanoil (C_{1}-C_{6})-oxi, alcoxi (C_{1}-C_{6})-carbonilo, alquil (C_{1}-C_{6})-aminocarbonilo, carbamato (C_{1}-C_{6}), alquil (C_{1}-C_{6})-sulfonilo, oxadiazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, tiofenilo, triazolilo, pirimidinilo, piridinilo, pirazinilo, fenilo, bencilo, fenoxi, benciloxi y benzoílo, cada uno opcionalmente sustituido con 1 a 3 sustituyentes seleccionados independientemente entre hidroxi, halógeno, alquilo (C_{1}-C_{6}), haloalquilo (C_{1}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6}) y haloalcoxi (C_{1}-C_{6}).

Será obvio que las combinaciones de sustituyentes R_{1}, R_{2} y R_{3} sólo se permiten si tales compuestos dan como resultado compuestos estables. Como se ha indicado anteriormente, un compuesto estable o una estructura estable pretende implicar un compuesto que es lo suficientemente robusto para sobrevivir al aislamiento, caracterización y ensayo para la actividad biológica.

Los compuestos representativos de Fórmula I incluyen, pero sin limitación, (1) 1'-(6-trifluorometil-3H-imidazo[4,5-b]piridina-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona; (2)1'-(7-cloro-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[iso-
benzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona; (3) 1'-(1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona; (4) 1'-(5-n-propilsulfonil-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona; (5) 1'-(5-ciano-1H-bencimi-
dazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona; (6) 1'-(5-acetil-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona; (7) 1'-(5-carboxi-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona, éster metílico; (8) 1'-(5'pirazin-2-il-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona; (9) 1'-(5'piridin-3-il-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona; (10) 1'-(5-trifluorometoxi-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona; (11) 1'-(5-metil-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona; (12) 1'-(5-benzoil-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona; (13) 1'-(5-metoxi-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona; (14) 1'-(5-cloro-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona; (15) 6-bromo-7-cloro-2-(espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona-3H-imi-
dazo[4,5-b]piridina; (16) 1'-(5-fluoro-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona; (17) 1'-(5-metil-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona; (18) 1'-(5-metilsulfonil-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona; (19) 1'-(5-oxazol-2-il-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona; (20) 1'-(5,6-difluoro-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona; (21) 1'-(5-fenil-1H-imidazo[4,5-b]pirazin-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona; (22) 1'-(5-trifluorometil-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona; (23) 1'-(5,7-dicloro-1H-bencimidazol-2-il)-espiro
[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona; (24) 1'-(5,6-dimetoxi-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona; (25) 1'-(5-trifluorometilsulfonil-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona; (26) 1'-(5-(3,5-dimetil-isoxazol-4-il)-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona; (27) 1'-(5-etoxi-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona; y (28) 5-cloro-2-(espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona-3H-imidazo[4,5-b]piridina; que se representan mediante las siguientes estructuras:

\vskip1.000000\baselineskip

3

4

5

6

En ciertas realizaciones preferidas, los compuestos proporcionados en este documento satisfacen la Fórmula Ia, en la que cada posición de las variables se define como se ha descrito anteriormente.

Fórmula Ia

7

En ciertas realizaciones particularmente preferidas, A, D, Y y Z de Fórmula Ia son todos CR_{1}, B es CR_{2} y E es CR_{3}; más preferiblemente Y y Z son ambos CH, y A y D son CR_{1}, donde R_{1} se selecciona independientemente en cada caso entre hidrógeno, halógeno, metilo y etilo.

Será obvio para los especialistas en la técnica que los compuestos indicados específicamente anteriormente sólo son ejemplos representativos de los compuestos proporcionados en este documento, y no pretenden limitar el alcance de la presente invención. Además, como se ha indicado anteriormente, todos los compuestos de la presente invención pueden estar presentes en forma de una base libre o en forma de una sal de adición de ácidos farmacéuticamente aceptables o de un profármaco.

Las espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-onas y 3H-espiroisobenzofuran-1,4'-piperidinas sustituidas proporcionadas en este documento alteran de forma detectable (modulan) la unión de NPY al receptor de NPY5, lo que se determina usando ensayos de unión del ligando al receptor NPY5 in vitro y/o ensayos de transducción de señal. Las referencias de este documento a un "ensayo de unión del ligando al receptor de NPY5" pretenden indicar el protocolo proporcionado en el Ejemplo 676. Brevemente, puede realizarse un ensayo de competición en el que una preparación del receptor de NPY5 se incuba con NPY marcado (por ejemplo, con ^{125}I) y compuesto de ensayo no marcado. En los ensayos proporcionados en este documento, el receptor de NPY5 usado es preferiblemente un receptor de NPY5 de mamífero, más preferiblemente un receptor de NPY5 humano o de mono. El receptor puede expresarse de manera recombinante o expresarse de forma natural, y puede comprender una secuencia nativa o una secuencia modificada (por ejemplo, truncada y/o condensada a una secuencia de extremo N no nativa). La preparación del receptor de NPY5 puede ser, por ejemplo, una preparación de membrana de células Sf9 o células de Melanoma de Bowes que expresan de manera recombinante el receptor de NPY5 humano o un receptor quimérico de NPY5/NPY1 humano.

La incubación con un compuesto que modula de manera detectable la unión de NPY al receptor de NPY5 dará como resultado una disminución o un aumento en la cantidad de marcador unido a la preparación del receptor de NPY5, respecto a la cantidad de marcador unido en ausencia del compuesto. Preferiblemente, dicho compuesto presentará una K_{i} en un receptor de NPY5 de menos de 1 micromolar, más preferiblemente menor de 500 nM, 100 nM, 20 nM o 10 nM, en un ensayo realizado como se describe en el Ejemplo 676. Los compuestos generalmente preferidos son antagonistas del receptor de NPY5 y disminuyen la actividad del receptor de NPY5 (medido como movilización de calcio, como se describe en el Ejemplo 677) en al menos el 20%, preferiblemente en al menos el 50% y más preferiblemente en al menos el 80%. Para ciertos usos, los compuestos preferidos también disminuyen la ingesta de alimentos y la ganancia de peso en uno o más modelos animales, tal como modelos de privación de alimentos (como se describe, por ejemplo, en la solicitud PCT publicada PCT/US00/26887) y el modelo de antagonismo de polipéptido pancreático bovino, como se describe en el Ejemplo 678.

Si se desea, los compuestos proporcionados en este documento pueden evaluarse para ciertas propiedades farmacológicas incluyendo, pero sin limitación, biodisponibilidad oral, unión a la proteína del suero y semivida in vitro e in vivo. Además, la penetración de la barrera hematoencefálica puede ser deseable para los compuestos usados para tratar trastornos del SNC, aunque pueden preferirse bajos niveles en el cerebro de los compuestos usados para tratar trastornos periféricos. Pueden usarse ensayos rutinarios que se conocen bien en la técnica para evaluar estas propiedades e identificar compuestos de primera calidad para un uso particular. Por ejemplo, los ensayos usados para predecir la biodisponibilidad incluyen transporte a través de monocapas celulares intestinales humanas, incluyendo monocapas de células Caco-2. La penetración de la barrera hematoencefálica de un compuesto en humanos puede predecirse a partir de los niveles en el cerebro del compuesto en animales de laboratorio a los que se les da el compuesto por vía intravenosa. Puede predecirse la unión de proteína al suero a partir de ensayos de unión a albúmina. La semivida del compuesto es inversamente proporcional a la frecuencia de dosificación de un compuesto y puede predecirse a partir de ensayos de semivida microsomal. A la vista de la presente descripción, una persona especialista en la técnica podría usar dichas técnicas rutinarias para seleccionar un compuesto que presenta propiedades óptimas para un propósito particular.

Como se ha observado anteriormente, los moduladores del receptor de NPY5 proporcionados en este documento pueden comprender, además de un compuesto activo de Fórmula I, uno o más restos asociados adicionales. Dichos restos pueden unirse directamente (es decir, mediante un enlace) o mediante un engarce, pueden unirse de manera no covalente o pueden combinarse con el compuesto. Dichos restos adicionales pueden usarse, por ejemplo, para facilitar el suministro, direccionamiento o detección del compuesto. Por ejemplo, los compuestos proporcionados en este documento pueden dirigirse suficientemente a un sitio deseado in vivo; sin embargo, podría ser beneficioso para ciertas aplicaciones incluir un resto director adicional para facilitar la dirección a uno o más tejidos específicos. Los restos directores preferidos incluyen aquellos que se dirigen a las regiones cerebrales asociadas con la actividad de NPY5.

Para ciertas realizaciones, puede ser beneficioso también, o como alternativa, asociar un fármaco con un modulador. Como se usa en este documento, el término "fármaco" se refiere a cualquier agente bioactivo pretendido para administración a un mamífero para prevenir o tratar una enfermedad u otra afección indeseable. Los fármacos incluyen hormonas, factores de crecimiento, proteínas, péptidos y otros compuestos. Por ejemplo, los moduladores para el tratamiento de trastornos de la alimentación, en particular obesidad y bulimia nerviosa, pueden comprender un agente tal como sibutramina, dexenfluramina, leptina, un secretagogo de la hormona del crecimiento, un agonista de melanocortina, un agonista de beta-3, un agonista de 5HT-2, un antagonista de orexina, un antagonista de una hormona de concentración de melanina, un antagonista de galanina, un agonista de CCK, un agonista de GLP-1, un agonista de la hormona liberadora de corticotropina o a un antagonista de NPY_{1}. Los restos que facilitan la detección incluyen radionúclidos, grupos luminiscentes, grupos fluorescentes y enzimas, todos los cuales pueden asociarse con un compuesto por procedimiento estándar.

Para los propósitos de detección, que se discuten con más detalle a continuación, los compuestos proporcionados en este documento pueden marcarse o no marcarse isotópicamente. Tales compuestos son idénticos a los indicados anteriormente, pero difieren en que uno o más átomos se reemplazan por un átomo que tiene una masa atómica o número másico diferente de la masa atómica o número másico que se encuentra normalmente en la naturaleza. Los ejemplos de isótopos que pueden incorporarse en los compuestos proporcionados en este documento incluyen isótopos de hidrógeno, carbono, nitrógeno, oxígeno, fósforo, flúor y cloro, tales como ^{2}H, ^{3}H, ^{11}C, ^{13}C, ^{14}C, ^{15}N, ^{18}O, ^{17}O, ^{31}P, ^{32}P, ^{35}S, ^{18}F y ^{36}Cl. Además, la sustitución con isótopos más pesados tales como deuterio (es decir, ^{2}H) puede producir ciertas ventajas terapéuticas que dan como resultado una mayor estabilidad metabólica (por ejemplo, vida media in vivo aumentada o requerimientos de dosificación reducidos) e incluso puede preferirse en algunas circunstancias.

Otros restos que pueden asociarse con un compuesto activo incluyen vehículos. Tales sustancias pueden modular la biodisponibilidad o estabilidad del compuesto. Los vehículos representativos incluyen, por ejemplo, moléculas tales como albúmina, polilisina, poliamidoaminas, péptidos, proteínas, poliestireno, poliacrilamida, lípidos, ceramida y biotina, materiales con soporte sólido tales como perlas y micropartículas que comprenden, por ejemplo, polilactato poliglicolato, poli(lactida-co-glicolida), poliacrilato, látex, almidón, celulosa o dextrano.

Preparación de moduladores del receptor de NPY5

Las espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-onas y 3H-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidinas sustituidas pueden prepararse generalmente usando procedimientos sintéticos convencionales que se conocen bien por los especialistas en la técnica de la síntesis orgánica. Los procedimientos representativos se describen a continuación y en los Ejemplos 1-674. Tales procedimientos pueden combinarse con otros procedimientos sintéticos conocidos y variaciones de los mismos (por ejemplo, modificación de materiales de partidas) que serán obvios para los especialistas en la técnica, para generar todos los compuestos proporcionados en este documento.

A modo de ejemplo, puede usarse una vía sintética similar a la mostrada en cualquiera de los Esquemas 1-7 (a continuación). En algunos de estos esquemas, puede usarse una base, un disolvente inerte y/o un catalizador organometálico. Las bases de los esquemas 1, 4 y 7 incluyen, pero sin limitación, hidruros de metales alcalinos (preferiblemente hidruro sódico), alcóxidos de metales alcalinos (1-6 carbonos) (preferiblemente metóxido sódico, etóxido sódico o terc-butóxido sódico), hidruros de metales alcalinotérreos, dialquilamidas de metales alcalinos (preferiblemente diisopropilamida), carbonatos de metales alcalinos, bicarbonatos de metales alcalinos, bis-(trialquilsilil)amidas de metales alcalinos (preferiblemente (trimetilsilil)amida de litio o sodio), trialquilaminas (preferiblemente N,N-di-isopropil-N-etilamina o trietilamina), arilaminas (preferiblemente 4-dimetilanilina) y aminas heteroaromáticas (preferiblemente piridina). En los Esquemas 2, 3, 5 y 6 las bases adecuadas incluyen, por ejemplo, alcóxidos de metales alcalinos (1-6 carbonos) (preferiblemente metóxido sódico, etóxido sódico o terc-butóxido sódico), carbonatos de metales alcalinos (preferiblemente carbonato sódico) o bicarbonatos, hidróxidos de metales alcalinos, fosfatos de metales alcalinos y trialquilaminas (preferiblemente N,N-di-isopropil-N-etilamina o trietilamina).

Los disolventes inertes que pueden usarse en los esquemas 1, 4 y 7 incluyen, pero sin limitación, alcoholes de alquilo (1-8 carbonos; preferiblemente metanol, etanol o terc-butanol), alcanonitrilos inferiores (1-6 carbonos; preferiblemente acetonitrilo), dialquiléteres (preferiblemente éter dietílico), éteres cíclicos (preferiblemente tetrahidrofurano o 1,4-dioxano), N,N-dialquilformamidas (preferiblemente dimetilformamida), N,N-dialquilacetamidas (preferiblemente dimetilacetamida), amidas cíclicas (preferiblemente N-metilpirrolidin-2-ona), dialquilsulfóxidos (preferiblemente dimetilsulfóxido), hidrocarburos aromáticos (preferiblemente benceno o tolueno).

Los catalizadores organometálicos que pueden usarse en los esquemas 2, 3, 5 y 6 incluyen, por ejemplo, complejos de fosfina y paladio (tales como Pd(PPh_{3})_{4}), haluros y alcanoatos de paladio tales como PdCl_{2}(PPh_{3})_{2} o Pd(OAc)_{2}) y complejos de níquel (tales como NiCl_{2}(PPh_{3})_{2}).

Esquema 1

8

Como se ilustra en el Esquema 1, los compuestos de Fórmula Ia pueden prepararse a partir de compuestos intermedios de fórmula VI, en la que L es un grupo saliente, tal como a halógeno (preferiblemente cloro o bromo), alcanosulfoniloxi, arilsulfoniloxi o haloalcanosulfoniloxi y A, B, E y D son como se han definido anteriormente. Los compuestos de fórmula VI reaccionan con una espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona o una 3H-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidina de fórmula VII (Parham y col. (1976) J. Org. Chem. 41: 2628-2633), en la que X, Z y R_{1} son como se han definido anteriormente, enpresencia o ausencia de una base en presencia o ausencia de un disolvente inerte, a temperaturas de reacción que varían de -78ºC a 250ºC, generando compuestos de Fórmula Ia). Las temperaturas de reacción preferidas varían de 0ºC a 140ºC.

Esquema 2

9

Como alternativa, como se ilustra en el Esquema 2, los compuestos de Fórmula Ia, en la que B es CR_{2} y R_{2} es como se ha definido anteriormente, pueden obtenerse partiendo de un intermedio de fórmula VIII, en la que B es C-L y L es un halógeno (preferiblemente bromo o yodo) o haloalcanosulfoniloxi (preferiblemente trifluorometilsulfoniloxi) y A, E y D son como se han definido anteriormente. Los compuestos de fórmula VIII reaccionan con un compuesto de fórmula R_{2}M (en la que M es un metal alcalino, ZnCl, ZnBr, MgBr, MgCl, Mgl, CeCl_{2}, CeBr_{2}, haluros de cobre, B(OH)_{2}, B(O-alquilo inferior)_{2} o Sn(alquilo inferior)_{3}), en presencia o ausencia de un catalizador organometálico en presencia o ausencia de una base en un disolvente inerte, a temperaturas que varían de -100ºC a 200ºC, dando compuestos de Fórmula Ia. Los especialistas en la técnica reconocerán que los reactivos R_{2}M pueden generarse in situ. Pueden obtenerse otros patrones de sustitución del anillo arilo con el mismo protocolo, si A, E o D son C-L, como se ha definido anteriormente.

Esquema 3

10

Como alternativa, como se ilustra en el Esquema 3, los compuestos de Fórmula Ia, en la que B es CR_{2} como se ha definido anteriormente, pueden obtenerse partiendo de intermedios de fórmula IX, en la que L es un halógeno (preferiblemente bromo o yodo) o haloalcanosulfoniloxi (preferiblemente trifluorometilsulfoniloxi) y A, E y D son como se han definido anteriormente. Los compuestos de fórmula IX reaccionan con un compuesto de fórmula R_{2}M (en la que M es un metal alcalino, ZnCl, ZnBr, MgBr, MgCl, MgL CeCl_{2}, CeBr_{2}, haluros de cobre, B(OH)_{2}, B(O-alquilo inferior) o Sn(alquilo inferior)_{3}), en presencia o ausencia de un catalizador organometálico en presencia o ausencia de una base en un disolvente inerte, a temperaturas que varían de -100ºC a 200ºC, dando compuestos de fórmula X, en la que B es CR_{2}. Los especialistas en la técnica reconocerán que los reactivos R_{2}M pueden generarse in situ. Pueden obtenerse otros patrones de sustitución del anillo arilo con el mismo protocolo, si A, E o D son C-L, como se ha descrito anteriormente.

Los compuestos de fórmula X pueden tratarse con difenilfosforilazida en dioxano en presencia de trietilamina, produciendo compuestos de fórmula XII. Después, los compuestos de fórmula XI pueden activarse con un agente de cloración, tal como oxicloruro de fósforo, en presencia de cloruro de trialquilamonio, preferiblemente cloruro de trimetilamonio, en presencia o ausencia de disolvente, produciendo compuestos de fórmula XII.

Los compuestos de fórmula XII reaccionan con una espiro[isobenzofuran-1,4'-pieridin]-3-ona o una 3H-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidina de fórmula VII en condiciones similares a las descritas para los compuestos de fórmula VI en el Esquema I, produciendo compuestos de Fórmula Ia.

En ciertas situaciones, los compuestos de esta invención pueden contener uno o más átomos de carbono asimétricos, para que los compuestos puedan existir en diferentes formas estereoisoméricas. Estos compuestos pueden ser, por ejemplo, racematos o formas ópticamente activas. Como se ha indicado anteriormente, todos los estereoisómeros se abarcan por la presente invención. Sin embargo, puede desearse obtener enantiómeros unitarios (es decir, formas ópticamente activas). Los procedimientos convencionales para preparar enantiómeros unitarios incluyen síntesis asimétrica y resolución de los racematos. La resolución de los racematos puede realizarse, por ejemplo, mediante procedimientos convencionales tales como cristalización en presencia de un agente de resolución, o cromatografía usando, por ejemplo, una columna de HPLC quiral.

Como se ha indicado anteriormente, la presente invención abarca sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos descritos en este documento. Como se usa en este documento, una "sal farmacéuticamente aceptable" es una sal de ácido o base que generalmente se considera en la técnica que es adecuada para el uso en contacto con los tejidos de los seres humanos o animales sin toxicidad excesiva, irritación, respuesta alérgica u otro problema o complicación. Tales sales incluyen sales de ácidos minerales y orgánicos de residuos básicos tales como aminas, así como sales alcalinas u orgánicas de residuos ácidos tales como ácidos carboxílicos. Las sales farmacéuticas específicas incluyen, pero sin limitación, sales de ácidos tales como ácido clorhídrico, fosfórico, bromhídrico, málico, glicólico, fumárico, sulfúrico, sulfámico, sulfanílico, fórmico, tluenosulfónico, metanosulfónico, etanodisulfónico, 2-hidroxietilsulfónico, nítrico, benzoico, 2-acetoxibenzoico, cítrico, tartárico, láctico, esteárico, salicílico, glutámico, ascórbico, pamoico, succínico, fumárico, maleico, propiónico, hidroximaleico, yodhídrico, fenilacético, alcanoico tal como acético, HOOC-(CH_{2})_{n}-COOH donde n es 0-4 y similares. De igual forma, los cationes farmacéuticamente aceptables incluyen, pero sin limitación, sodio, potasio, calcio, aluminio, litio y amonio. Los especialistas en la técnica reconocerán otras sales farmacéuticamente aceptables para los compuestos proporcionados en este documento, incluyendo las indicadas por Remington's Pharmaceutical Sciences, 17ª ed., Mack Publishing Company, Easton, PA, pág. 1418 (1985). Por consiguiente, la presente descripción debería construirse para incluir todas las sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos indicados específicamente.

Existe una gran diversidad de procedimientos sintéticos para la preparación de sales farmacéuticamente aceptables. En general, una sal farmacéuticamente aceptable puede sintetizarse a partir de un compuesto padre que contiene un resto básico o ácido mediante cualquier procedimiento químico convencional. Brevemente, tales sales pueden prepararse haciendo reaccionar las formas de ácido o base libres de estos compuestos con una cantidad estequiométrica de la base o ácido apropiado en agua o en un disolvente orgánico, o en una mezcla de los dos; generalmente, se prefieren medios no acuosos tales como éter, acetato de etilo, etanol, isopropanol o acetonitrilo.

La presente invención también abarca profármacos de los compuestos de Fórmulas I-III, que pueden modificarse (por manipulación rutinaria o in vivo) para generar un agente activo abarcado por las Fórmulas I-III. Tales profármacos pueden prepararse modificando grupos funcionales presentes en los compuestos de tal forma que las modificaciones se escinden en los compuestos precursores. Los profármacos incluyen compuestos en los que los grupos hidroxi, amina o sulfhidrilo se enlazan con un grupo que, cuando se administra a un sujeto mamífero, se escinde en un grupo hidroxilo, amino o sulfhidrilo libre, respectivamente. Los ejemplos de profármacos incluyen, pero sin limitación, derivados acetato, formiato y benzoato de grupos funcionales alcohol y amina de los compuestos proporcionados en este documento. Los profármacos preferidos incluyen derivados acilados. Los especialistas en la técnica reconocerán que pueden emplearse diversos procedimientos sintéticos para preparar profármacos de los compuestos proporcionados en este documento.

Pueden asociarse otros restos con un compuesto usando cualquier procedimiento adecuado. El engarce covalente puede realizarse generalmente usando grupos funcionales adecuados (por ejemplo, grupos hidroxi, carboxi, sulfhidrilo o amino) del compuesto y unirse al resto. Por ejemplo, un grupo nucleófilo, tal como un grupo amino o sulfhidrilo, de uno puede reaccionar con un grupo que contiene carbonilo, tal como un anhídrido o un haluro de ácido, o con un grupo alquilo que contiene un buen grupo saliente (Por ejemplo, un haluro) del otro. El uso de engarces bifuncionales, multifuncionales y/o escindibles también puede desearse para ciertas aplicaciones. Tales engarces se conocen bien en la técnica. Los compuestos asociados con vehículos pueden enlazarse covalentemente o, preferiblemente, tal asociación no implica interacción covalente y se realiza por mezclado.

Los compuestos pueden estar radiomarcados mediante sus síntesis usando precursores que comprenden al menos un átomo que es un radioisótopo (es decir, un reactivo no marcado isotópicamente se sustituye por un reactivo marcado isotópicamente). Hay numerosos radioisótopos fácilmente disponibles, incluyendo isótopos de hidrógeno, carbono, nitrógeno, oxígeno, fósforo, azufre, yodo, flúor y cloro, tales como ^{14}C, ^{3}H, ^{35}S o ^{125}I. La síntesis de compuestos radiomarcados puede realizarse convenientemente con un suministrador de radioisótopos especializado en la síntesis convencional de compuestos de investigación radiomarcados, tal como Amersham Corporation, Arlington Heights, IL; Cambridge Isotope Laboratories, Inc. Andover, MA; SRI International, Menlo Park, CA; Wizard Laboratories, West Sacramento, CA; ChemSyn Laboratories, Lexena, KS; American Radiolabeled Chemicals, inc., St. Louis, MO; y Moravek Biochemicals Inc., Brea, CA. Los compuestos marcados con tritio también se preparan convenientemente de forma catalítica mediante intercambio catalizado con paladio en ácido acético tritiado, intercambio catalizado con ácido en ácido trifluoroacético tritiado, o intercambio catalizado heterogéneo con gas tritio. Tales preparaciones también pueden realizarse por radiomarcado convencional mediante cualquiera de los suministradores indicados anteriormente usando el compuesto como sustrato. Además, ciertos precursores pueden someterse a intercambio de tritio-halógeno con gas tritio, Reducción con gas tritio de enlaces insaturados o reducción usando borohidruro sódico, según sea apropiado.

Composiciones farmacéuticas

La presente invención también proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden moduladores del receptor de NPY5, junto con al menos un vehículo o excipiente fisiológicamente aceptable. Dichas composiciones pueden comprender, por ejemplo, agua, tampones (por ejemplo, solución salina tamponada neutra o solución salina tamponada con fosfato), etanol, aceite mineral, aceite vegetal, dimetilsulfóxido, carbohidratos (por ejemplo, glucosa, manosa, sacarosa o dextranos), manitol, proteínas, adyuvantes, polipéptidos o aminoácidos tales como glicina, antioxidantes, agentes quelantes tales como EDTA o glutatión y/o conservantes. Las composiciones farmacéuticas preferidas se formulan para suministro oral a seres humanos u otros animales (por ejemplo, animales de compañía tales como perros).

Si se desea, también pueden incluirse otros ingredientes activos. Por ejemplo, las composiciones pretendidas para el tratamiento de trastornos de la alimentación, particularmente obesidad y bulimia nerviosa, pueden comprender adicionalmente un agente tal como sibutramina, dexenfluramina, leptina, un secretagogo de la hormona del crecimiento, un agonista de melanocortina, un agonista beta-3, un agonista de 5HT-2, un antagonista de orexina, un antagonista de la hormona de concentración de melanina, un antagonista de galanina, un agonista de CCK, un agonista de GLP-1 y/o un agonista de la hormona de liberación de corticotropina o un antagonista NPY_{1}.

Las composiciones farmacéuticas pueden formularse para cualquier modo apropiado de administración, incluyendo, por ejemplo, administración tópica, oral, nasal, rectal o parenteral. El término parenteral como se usa en este documento incluye inyecciones subcutánea, intradérmica, intravascular (por ejemplo, intravenosa), intramuscular, medular, intracraneal, intratecal, intraperitoneal o inyecciones similares o técnicas de infusión. En ciertas realizaciones, se prefieren composiciones en una forma adecuada para su uso oral. Dichas formas incluyen, por ejemplo, comprimidos, trociscos, grageas, suspensiones acuosas u oleosas, polvos o gránulos dispersables, emulsión, cápsulas duras o blandas, o jarabes o elixires. En otras realizaciones más, las composiciones de la presente invención pueden formularse en forma de un liofilizado.

Las composiciones pretendidas para su uso oral pueden contener adicionalmente uno o mas componentes tales como agentes edulcorantes, agentes aromatizantes, agentes colorantes y agentes conservantes para proporcionar preparaciones atrayentes y sabrosas. Los comprimidos contienen el ingrediente o ingredientes activos en mezcla con excipientes fisiológicamente aceptables que son adecuados para la fabricación de comprimidos. Dichos excipientes incluyen, por ejemplo, diluyentes inertes (por ejemplo, carbonato cálcico, carbonato sódico, lactosa, fosfato cálcico o fosfato sódico), agentes de granulación y desintegración (por ejemplo, almidón de maíz o ácido algínico), agentes aglutinantes (por ejemplo, almidón, gelatina o goma arábiga) y agentes lubricantes (por ejemplo, estearato de magnesio, ácido esteárico o talco). Los comprimidos pueden estar sin revestir o se pueden revestir por técnicas conocidas para retardar la desintegración y absorción en el tracto gastrointestinal y proporcionar de este modo una acción sostenida durante un periodo más largo. Por ejemplo, puede emplearse un material de retardo en el tiempo tal como monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo.

La formulaciones para su uso oral también pueden presentarse en forma de cápsulas de gelatina dura en las que el ingrediente activo está mezclado con un diluyente sólido inerte (por ejemplo, carbonato cálcico, fosfato cálcico o caolín), o en forma de cápsulas de gelatina blanda en las que el ingrediente activo está mezclado con agua o un medio oleoso (por ejemplo, aceite de cacahuete, parafina líquida o aceite de oliva).

Las suspensiones acuosas contienen los materiales activos en mezcla con excipientes adecuados para la fabricación de suspensiones acuosas. Dichos excipientes son agentes de suspensión (por ejemplo, carboximetilcelulosa sódica, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, alginato sódico, polivinilpirrolidona, goma de tragacanto y goma arábiga); y agentes de dispersión o humectantes (por ejemplo, fosfatidas de origen natural tales como lecitina, productos de condensación de un óxido de alquileno con ácidos grasos tales como estearato de polioxietileno, productos de condensación de óxido de etileno con alcoholes alifáticos de cadena larga tales como heptadecaetilenoxicetanol, productos de condensación de óxido de etileno con ésteres parciales derivados de ácidos grasos y un hexitol tales como monooleato de polioxietilen sorbitol, o productos de condensación de óxido de etileno con ésteres parciales derivados de ácidos grasos y anhídridos de hexitol tales como monooleato de polietilen sobitano). Las suspensiones acuosas también pueden contener uno o más conservantes, por ejemplo, p-hidroxibenzoato de etilo o n-propilo, uno o más agentes colorantes, uno o más agentes aromatizantes, y/o uno o más agentes edulcorantes, tales como sacarosa o sacarina.

Las suspensiones oleosas pueden formularse suspendiendo los ingredientes activos en un aceite vegetal (por ejemplo, aceite de cacahuete, aceite de oliva, aceite de sésamo o aceite de coco), o en un aceite mineral tal como parafina líquida. Las suspensiones oleosas también pueden contener un agente espesante tal como cera de abejas, parafina dura o alcohol cetílico. Los agentes edulcorantes, tales como los expuestos anteriormente, y/o agentes aromatizantes pueden añadirse para proporcionar preparaciones orales sabrosas. Dichas suspensiones pueden conservarse por la adición de un antioxidante tal como ácido ascórbico.

Los polvos y gránulos dispersables adecuados para la preparación de una suspensión acuosa por la adición de agua proporcionan el ingrediente activo en mezcla con un agente de dispersión o humectante, un agente de suspensión y/o uno o más conservantes. Los agentes de dispersión o humectantes y agentes de suspensión adecuados se ejemplifican por los ya mencionados anteriormente. También pueden estar presentes excipientes adicionales, tales como agentes edulcorantes, aromatizantes y/o colorantes.

Las composiciones farmacéuticas también pueden estar en forma de emulsiones de aceite en agua. La fase oleosa puede ser un aceite vegetal (por ejemplo, aceite de oliva o aceite de cacahuete), o un aceite mineral (por ejemplo, parafina líquida) o mezclas de los mismos. Los agentes emulsionantes adecuados pueden ser gomas de origen natural (por ejemplo, goma arábiga o goma de tragacanto), fosfatidas de origen natural (por ejemplo, semilla de soja, lecitina y ésteres o ésteres parciales derivados de ácidos grasos y hexitol), anhídridos (por ejemplo, monooleato de sorbitano) y productos de condensación de ésteres parciales derivados de ácidos grasos y hexitol con óxido de etileno (por ejemplo, monooleato de polioxietilen sorbitano). Las emulsiones también pueden contener agentes edulcorantes y/o aromatizantes.

Los jarabes y elixires pueden formularse con agentes edulcorantes, tales como glicerol, propilenglicol, sorbitol o sacarosa. Dichas formulaciones también pueden comprender uno o más demulcentes, conservantes, agentes aromatizantes y/o agentes colorantes.

Una composición farmacéutica puede prepararse en forma de suspensión acuosa u oleaginosa inyectable estéril. El modulador, dependiendo del vehículo y la concentración usados, puede estar suspendido o disuelto en el vehículo. Dicha composición puede formularse de acuerdo con la técnica conocida usando agentes de dispersión, humectantes y/o de suspensión adecuados, tales como los mencionados anteriormente. Entre los vehículos y disolventes aceptables que pueden emplearse están, agua, 1, 3-butanodiol, solución de Ringer y solución de cloruro sódico isotónica. Además, pueden usarse aceites fijados estériles como disolvente o medio de suspensión. Para este propósito puede emplearse cualquier aceite fijado suave, incluyendo mono- o diglicéridos sintéticos. Además, los ácidos grasos tales como ácido oleico encuentran uso en la preparación de composiciones inyectables, y adyuvantes tales como anestésicos locales, conservantes y/o agentes tamponantes también pueden disolverse en el vehículo.

Los moduladores también pueden prepararse en forma de supositorios (por ejemplo, para administración rectal). Dichas composiciones pueden prepararse mezclando el fármaco con un excipiente no irritante adecuado que es sólido a temperaturas habituales pero líquido a la temperatura rectal y por lo tanto se fundirá en el recto para liberar el fármaco. Los excipientes adecuados incluyen, por ejemplo, manteca de cacao y polietilenglicoles.

Para administración a animales no humanos, la composición también puede añadirse al pienso animal o agua potable. Puede ser conveniente formular composiciones de pienso animal y agua potable de modo que el animal asimile una cantidad apropiada de la composición junto con su dieta. También puede ser conveniente presentar la composición en forma de una premezcla para la adición al pienso o agua potable.

Las composiciones farmacéuticas pueden formularse en forma de formulaciones de liberación sostenida (es decir, una formulación tal como una cápsula que provoca una liberación lenta del modulador después de la administración). Dichas formulaciones pueden prepararse generalmente usando tecnología bien conocida y administrarse por, por ejemplo, implante oral, rectal o subcutáneo, o por implante en el sitio diana deseado. Los vehículos para su uso en dichas formulaciones son biocompatibles, y también pueden ser biodegradables; preferiblemente la formulación proporciona un nivel relativamente constante de liberación del modulador. La cantidad de modulador contenida en una formulación de liberación sostenida depende del sitio del implante, la velocidad y duración esperada de la liberación y la naturaleza de la afección a tratar o prevenir.

Los moduladores están generalmente presentes en una composición farmacéutica en una cantidad terapéuticamente eficaz. Una cantidad terapéuticamente eficaz es una cantidad que provoca un beneficio en el paciente apreciable, tal como curación aumentada de una enfermedad o trastorno asociado con la activación patogénica del receptor de NPY5, como se describe en este documento. Una concentración preferida es una suficiente para inhibir la unión del ligando (por ejemplo, NPY y/o PYY) al receptor de NPY5 in vitro. Se prefieren composiciones que proporcionan niveles de dosificación que varían de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 140 mg por kilogramo de peso corporal por día (aproximadamente 0,5 mg a aproximadamente 7 g por paciente humano por día). La cantidad de ingrediente activo que puede combinarse con los materiales de vehículo para producir una forma de dosificación única variará dependiendo del huésped tratado y el modo particular de administración: Las formas unitarias de dosificación generalmente contendrán de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 500 mg de un ingrediente activo. Se entenderá, sin embargo, que la dosis óptima para cualquier paciente particular dependerá de una diversidad de factores, incluyendo la actividad del compuesto especifico empleado; la edad, peso corporal, salud general, sexo y dieta del paciente; el tiempo y vía de administración; la velocidad de excreción; cualquier tratamiento simultáneo, tal como combinación de fármacos; y el tipo y gravedad de la enfermedad particular que está experimentando tratamiento. Las dosificaciones óptimas pueden establecerse usando ensayos de rutina, y procedimientos que son bien conocidos en la técnica.

Las composiciones farmacéuticas pueden estar envasadas para tratar trastornos sensibles a modulación del receptor de NPY5 (por ejemplo, tratamiento de trastornos de la alimentación tales como obesidad o bulimia, trastornos psiquiátricos, trastornos cardiovasculares tales como hipertensión o diabetes). Las composiciones farmacéuticas envasadas generalmente incluyen un recipiente que alberga una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos un modulador del receptor de NPY5 como se ha descrito en este documento e instrucciones (por ejemplo, etiqueta) que indican la composición contenida es para usarla para tratar un trastorno asociado a la activación del receptor de NPY5 en el paciente.

Procedimientos de uso

En ciertos aspectos, la presente invención proporciona procedimientos para inhibir el desarrollo de una enfermedad o trastorno asociado a la activación del receptor de NPY5. En otras palabras, los procedimientos terapéuticos proporcionados en este documento pueden usarse para tratar una enfermedad o trastorno existente, o pueden usarse para prevenir o retardar la aparición de dicha enfermedad en un paciente que está libre de una enfermedad o trastorno detectable que está asociado a la activación del receptor de NPY5. Como se usa en este documento, una enfermedad o trastorno está "asociado a la activación del receptor de NPY5" si está caracterizado por la estimulación inapropiada del receptor de NPY5, independientemente de la cantidad real de NPY presente localmente. Dichas afecciones incluyen, por ejemplo, trastornos de la alimentación (tales como obesidad, anorexia, bulimia y trastornos metabólicos), enfermedades relacionadas con el sistema nervioso central (tales como trastornos psiquiátricos), enfermedades relacionadas con la liberación anormal de hormonas (tales como diabetes) y trastornos cardiovasculares. Las enfermedades relacionadas con el sistema nervioso central incluyen infarto cerebral, neurodegeneración, epilepsia, apoplejía y afecciones relacionas con apoplejía, vasoespasmo cerebral y hemorragia, depresión, ansiedad, esquizofrenia y demencia, así como afecciones relacionadas con dolor o nocicepción. Las enfermedades relacionadas con la liberación anormal de hormonas incluyen afecciones asociadas a la liberación anormal de hormona luteinizante, hormona del crecimiento, insulina o prolactina. Los trastornos cardiovasculares incluyen cualquier trastorno o enfermedad que pertenece al corazón, vasos sanguíneos o el sistema renal, tales como hipertensión, vasoespasmo, insuficiencia cardiaca, choque, hipertrofia cardiaca, presión sanguínea aumentada, angina, infarto de miocardio, muerte cardiaca repentina, arritmia, enfermedad vascular periférica, y afecciones renales anormales tales como flujo alterado del fluido, transporte anormal de masa o fallo renal. Otras enfermedades y trastornos asociados a la activación del receptor de NPY5 incluyen afecciones relacionadas con la actividad nerviosa simpática aumentada (por ejemplo, durante o después de cirugía de la arteria coronaria, y operaciones y cirugía en el tracto gastrointestinal); enfermedades relacionas con movilidad y secreción gastrointestinal anormal (tales como formas diferentes de íleo, incontinencia urinaria y enfermedad de Crohn); enfermedades relacionadas con disfunción sexual y trastornos reproductores; afecciones o trastornos asociados a inflamación; y enfermedades respiratorias, tales como asma y afecciones relacionadas con asma y broncoconstricción. Las afecciones anteriores pueden diagnosticarse y controlarse usando criterios que se han establecido en la técnica. Los pacientes pueden incluir seres humanos, animales de compañía domésticos (mascotas, tales como perros) y animales de ganado, con dosificaciones y regímenes de tratamiento como se han descrito anteriormente.

La frecuencia de dosificación puede variar dependiendo del compuesto usado y la enfermedad particular a tratar o prevenir. En general, para el tratamiento de la mayoría de los trastornos, se prefiere un régimen de dosificación de 4 veces al día o menos. Para el tratamiento de trastornos de la alimentación, incluyendo obesidad, es particularmente preferido un régimen de dosificación de 1 ó 2 veces al día. Para el tratamiento de impotencia es deseable una única dosis que alcanza rápidamente concentraciones eficaces. Se entenderá, sin embargo, que el nivel de dosis específico para cualquier paciente particular dependerá de una diversidad de factores incluyendo la actividad del compuesto especifico empleado, la edad, peso corporal, salud general, sexo, dieta, tiempo de administración, vía de administración, y velocidad de excreción, combinación de fármaco y la gravedad de la enfermedad particular que está experimentando terapia. En general, se prefiere el uso de la dosificación mínima que es suficiente para proporcionar terapia eficaz. Los pacientes pueden controlarse generalmente para su eficacia terapéutica usando ensayos adecuados para la afección que se está tratando o previniendo, que serán familiares para los especialistas en la técnica.

En aspectos separados, la presente invención proporciona una diversidad de usos in vitro para los compuestos proporcionados en este documento. Por ejemplo, dichos compuesto pueden usarse como sondas para la detección y localización de receptores de NPY5, en muestras tales como secciones tisulares, como controles positivos en ensayos para la actividad del receptor, como patrones y reactivos para determinar la capacidad de un agente candidato de unirse al receptor de NPY5, o como radioindicadores para formación de imágenes por tomografía de emisión de positrones (PET) o para tomografía informatizada de emisión de un único fotón (SPECT). Dichos ensayos pueden usarse para caracterizar los receptores de NPY5 en sujetos vivos.

En procedimientos para determinar la presencia o ausencia de receptor de NPY5 en una muestra, puede incubarse una muestra con un compuesto proporcionado en este documento en condiciones que permiten la unión del compuesto al receptor de NPY5. Después se detecta la cantidad de compuesto unido al receptor de NPY5 en la muestra. Por ejemplo, un compuesto puede marcarse usando cualquiera de una diversidad de técnicas bien conocidas (por ejemplo, radiomarcarse con un radionúclido tal como tritio, como se describe en este documento), e incubarse con la muestra (que puede ser, por ejemplo, una preparación de células cultivadas, una preparación tisular o una fracción de las mismas). Un tiempo de incubación adecuado generalmente puede determinarse ensayando el nivel de unión que sucede durante un periodo de tiempo. Después de la incubación, se retira el compuesto no unido, y el compuesto unido se detecta usando cualquier procedimiento para el marcador empleado (por ejemplo, auto radiografía o recuento de centelleo para compuestos radiomarcados; pueden usarse procedimientos espectroscópicos para detectar colorantes, grupo luminiscentes y grupos fluorescentes). Los ensayos de detección, incluyendo autorradiografía del receptor (mapeo de receptores) de receptores de NPY5 en células cultivadas o muestras titulares pueden realizarse como se describe por Kuhar en las secciones 8.1.1 a 8.1.9 de Current Protocols in Pharmacology (1998) John Wiley & Sons, Nueva York.

Los moduladores proporcionados en este documento también pueden usarse en una diversidad de procedimientos de cultivo celular y separación celular bien conocidos. Por ejemplo, los moduladores pueden unirse a la superficie interior de una placa de cultivo tisular u otro soporte de cultivo celular, para su uso en la inmovilización de células que expresan NPY5 para exploraciones, ensayos y crecimiento en cultivo. Dicha unión puede realizarse por cualquier técnica adecuada, tal como los procedimientos descritos anteriormente, así como otras técnicas convencionales. Los moduladores también pueden usarse para facilitar la identificación celular y clasificación in vitro, permitiendo la clasificación de células que expresan NPY5. Preferiblemente, el modulador o moduladores para su uso en dichos procedimientos están marcados como se describen en este documento. En una realización preferida, se pone en contacto un modulador unido a un marcador fluorescente, tal como fluoresceína, con las células, que después se analizan por clasificación de células activadas por fluorescencia (FACS).

En otros aspectos, se proporcionan procedimientos para modular la unión de un ligando del receptor de NPY5 (tal como NPY o PYY) al receptor de NPY5 in vitro o in vivo, que comprende poner en contacto una cantidad suficiente del receptor de NPY5 con un modulador proporcionado en este documento, en condiciones adecuadas para la unión de NPY5 al receptor. Preferiblemente, en dichos procedimientos, la unión de NPY y/o PYY al receptor está inhibida por el modulador. El receptor de NPY5 puede estar presente en solución, en una preparación celular cultiva o aislada o en un paciente. En general, la cantidad de compuesto puesta en contacto con el receptor in vivo debe ser suficiente para modular la unión de NPY al receptor de NPY5 in vitro en, por ejemplo, un ensayo de unión de ligando como se describe en el Ejemplo 676. Los receptores de NPY_{5} usados para determinar la unión in vitro pueden obtenerse de una diversidad de fuentes, por ejemplo, de preparaciones de cerebro de ratas o de células que expresan receptores de NPY_{5} humanos clonados.

En este documento también se proporcionan procedimientos para modular la actividad de traducción de señales del receptor de NPY5, poniendo en contacto un receptor de NPY5, in vivo o in vitro, con una cantidad suficiente de un modulador del receptor de NPY5 como se ha descrito anteriormente, en condiciones adecuadas para la unión de NPY al receptor de NPY5. El receptor de NPY5 puede estar presente en solución, en una preparación celular cultivada o aislada o en un paciente. En general, la cantidad de un modulador que es suficiente para alterar la actividad de transducción de señales del receptor de NPY5 puede determinarse mediante el ensayo de transducción de señales del receptor de NPY5, tal como el ensayo descrito en el ejemplo 677.

Los siguientes Ejemplos se ofrecen a modo de ilustración y no a modo de limitación. Salvo que se especifique otra cosa todos los reactivos y disolventes son de calidad comercial convencional y se usan sin purificación adicional.

Ejemplos Ejemplo 1 1'-(5-Piridin-3-il-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona

Este ejemplo ilustra la preparación del compuesto representativo 1'-(5-piridin-3-il-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona.

A. 2-cloro-5-yodo-1H-bencimidazol

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Calentar una solución de 5-yodo-1,3-dihidro-bencimidazol-2-ona (6,50 g, 25,0 mmol; Feitelson y col. (1952) J. Chem. Soc. 2389) y cloruro de tetrametilamonio (1,37 g, 12,5 mmol) a 100ºC en POCl_{3} (10 ml) durante 18 horas. Después de la refrigeración, retirar el exceso de POCl_{3} al vacío y triturar el residuo en agua enfriada con hielo (200 ml). Después de agitar durante 30 minutos, filtrar el precipitado, obteniendo 2-cloro-5-yodo-1H-bencimidazol en forma de un sólido gris.

B. 1'-(5-yodo-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona

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Calentar una solución de 2-cloro-5-yodo-1H-bencimidazol (3,0 g, 10,7 mmol) y espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona (2,63 g, 12,9 mmol) en NMP seco (15 ml) a 100ºC durante 14 horas. Verter la mezcla enfriada en agua (50 ml) y extraer dos veces con EtOAc (50 ml). Lavar los extractos combinados con salmuera (30 ml), secar y evaporar al vacío. Purificar por cromatografía ultrarrápida en columna (EtOAc al 50%-hexano), obteniendo 1'-(5-yodo-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona en forma de un sólido beige.

C. 1'-(5 -Piridin-3-il-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona

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Añadir tetraquistrifenilfosfina paladio (0) (0,01 g, 0,01 mmol) a 1'-(5-yodo-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona (0,10 g,0,22 mmol) en éter dimetílico de etilenglicol (2 ml). A esta solución, añadirle ácido piridina-3-bórico (0,06 g, 0,45 mmol) y carbonato sódico acuoso (1 M, 1 ml) y calentar la reacción a 80ºC durante 2 horas. Extraer el producto con EtOAc (20 ml). Lavar los extractos combinados con salmuera (20 ml), secar sobre sulfato sódico y concentrar al vacío. Purificar por cromatografía ultrarrápida en columna (MeOH al 5%-CH_{2}Cl_{2}), obteniendo 1'-(5-piridin-3-il-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona en forma de un sólido blanco.

Ejemplo 2 Clorhidrato de 1'-(5-oxazol-2-il-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona

Este ejemplo ilustra la preparación del compuesto representativo 1'-(5-oxazol-2-il-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona.

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Añadir una solución de oxazol (0,5 ml, 7,24 mmol) en THF desoxigenado (50 ml) a -78ºC a n-butillitio 1,6 M en hexano (5 ml, 7,96 mmol). Después de agitar durante 30 minutos, añadir cloruro de cinc 1 M en Et_{2}O (22 ml, 21,7 mmol) y calentar la mezcla de reacción a 0ºC durante 2 horas. A la mezcla de reacción, añadirle primero una solución de 1'-(5-yodo-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona (3,2 g, 7,18 mmol) y después el catalizador de paladio que se prepara tratando una suspensión de (Ph_{3}P)_{2}PdCl_{2} (0,25 g, 0,36 mmol) en THF desoxigenado (50 ml) con n-butillitio 1,6 M en hexano (0,45 ml, 0,72 mmol). Calentar la mezcla de reacción a reflujo durante 20 horas. Después de enfriar a temperatura ambiente, diluir la mezcla con EtOAc (50 ml) y lavar con agua (50 ml) y NaCl acuoso saturado (50 ml). Secar la porción orgánica sobre Na_{2}SO_{4}, filtrar y concentrar. Purificar por cromatografía ultrarrápida en columna (MeOH al 5%-CH_{2}Cl_{2}), obteniendo 1'-(5-oxazol-2-il-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona en forma de un sólido blanco.

Ejemplo 3 1'-(5-Ciano-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona

Este ejemplo ilustra la preparación del compuesto representativo 1'-(5-ciano-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona.

15

Añadir cianuro de cinc (0,016 g, 0,13 mmol) y tetraquistrifenilfosfina paladio (0) (0,018 g, 0,02 mmol) a una solución de 1'-(5-yodo-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona (0,1 g, 0,22 mmol) en NMP (2 ml). Calentar la mezcla de reacción a 130ºC durante 19 horas. Después de enfriar a temperatura ambiente, diluir la mezcla con EtOAc (20 ml) y lavar con agua (20 ml) y NaCl acuoso saturado (20 ml). Secar la porción orgánica sobre Na_{2}SO_{4}, filtrar y concentrar. Purificar por TLC preparativa (EtOAc al 80%-hexano), obteniendo 1'-(5-ciano-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona en forma de un sólido blanco.

Ejemplo 4 1-(5-Acetil-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona

Este ejemplo ilustra la preparación del compuesto representativo 1'-(5-acetil-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona.

16

Añadir 1-etoxiviniltri-N-butilestaño (0,49 g, 1,35 mmol) y cloruro de bis(trifenil-fosfina)paladio (II) (0,05 g) a una solución de 1'-(5-yodo-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona (0,12 g, 0,27 mmol) en dioxano (5 ml). Calentar la mezcla de reacción a reflujo durante 12 horas. Después de enfriar a temperatura ambiente, concentrar la mezcla de reacción al vacío y añadir a una solución de HCl al 10% (2 ml) en THF (5 ml). Después de agitar durante 30 minutos, diluir la solución con EtOAc (30 ml) y lavar con NaHCO_{3} saturado (30 ml) y NaCl acuoso saturado (30 ml). Secar la porción orgánica sobre Na_{2}SO_{4}, filtrar y concentrar. Purificar por TLC preparativa (MeOH al 10%-CH_{2}Cl_{2}), obteniendo 1'-(5-acetil-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona en forma de un sólido amarillo.

Ejemplo 5 Clorhidrato de 1'-(5-trifluorometil-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona

Este ejemplo ilustra la preparación del compuesto representativo clorhidrato de 1'-(5-trifluorometil-1H-bencimida-
zol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona.

A. 2-cloro-5-trifluorometil-1H-bencimidazol

17

Calentar a reflujo 5-trifluorometil-1,3-dihidro-bencimidazol-2-ona (17 g; Meanwell y col. (1995) J. Org. Chem. 60 (6): 1565-1582) durante 14 horas en POCl_{3} (200 ml). Evaporar el disolvente al vacío y después neutralizar cuidadosamente con NaHCO_{3}saturado y extraer con EtOAc. Secar sobre Na_{2}SO_{4}, concentrar al vacío y purificar por cromatografía ultrarrápida (1:1 de hexanos/EtOAc), obteniendo 2-cloro-5-trifluorometil-1H-bencimidazol.

B. Clorhidrato de 1'-(5-trifluorometil-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona

18

Agitar 2-cloro-5-trifluorometil-1H-bencimidazol (7 g) y espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona (12,9 g) en dimetilacetamida (75 ml) a 120ºC durante 14 horas. Enfriar la mezcla y repartirla entre EtOAc y NaHCO_{3} semi-saturado, lavar varias veces con agua, secar y concentrar al vacío. Cristalizar en EtOAc/EtOH, obteniendo un sólido blanco. Purificar las aguas madre por cromatografía (1:1 de hexanos/EtOAc), obteniendo más sólido. Disolver los sólidos combinados en EtOAc y tratar con EtOAc saturado/HCl. Recoger clorhidrato de 1'-(5-trifluorometil-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona.

Ejemplo 6 Clorhidrato de 1'-(5-trifluorometilsulfonil-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona

Este ejemplo ilustra la preparación del compuesto representativo clorhidrato de 1'-(5-trifluorometilsulfonil-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona.

A.N-(4-Trifluorometilsulfonil-fenil)-acetamida

19

Calentar a reflujo 4-trifluorometilsulfonil-fenilamina (5 g) y Ac_{2}O (2,2 ml) durante 1,5 horas en HOAc (20 ml). Evaporar el disolvente al vacío y después cristalizar el residuo en EtOAc/EtOH, obteniendo N-(4-trifluorometilsulfonil-fenil)-acetamida.

B.N-(2-Nitro-4-trifluorometilsulfonil-enil)-acetamida

20

Añadir cuidadosamente N-(4-trifluorometilsulfonil-fenil)-acetamida (5 g) a HNO_{3} fumante enfriado con un baño de hielo-agua (30 ml) y agitar durante 6 horas a temperatura ambiente. Verter la mezcla en agua enfriada con hielo (500 ml) y recoger el precipitado. Purificar por cromatografía ultrarrápida (1:1 de hexanos/EtOAc), obteniendo N-(2-nitro-4-trifluorometilsulfonil-fenil)-acetamida.

C. 2-Nitro-4-trifluorometilsulfonil-fenilamina

21

Calentar a reflujo N-(2-nitro-4-trifluorometilsulfonil-fenil)-acetamida (600 mg) durante 40 minutos en HCl concentrado (15 ml) y agua (5 ml). Enfriar la mezcla a temperatura ambiente y recoger el precipitado obtenido 2-nitro-4-trifluorometilsulfonil-fenilamina.

D. 4-Trifluorometilsulfonil-benceno-1,2-diamina

22

Disolver 2-nitro-4-trifluorometilsulfonil-fenilamina (530 mg) en EtOH (50 ml) e hidrogenar sobre Pd/C (10%) durante 6 horas. Filtrar la mezcla y concentrar el filtrado al vacío, obteniendo 4-trifluorometilsulfonil-benceno-1,2-diamina.

E. 5-Trifluorometilsulfonil-1,3-dihidro-bencimidazol-2-ona

23

Calentar a reflujo 4-trifluorometilsulfonil-benceno-1,2-diamina (420 mg) y CDI (284 mg) durante 16 horas en CH_{3}CN (30 ml). Evaporar el disolvente al vacío. Purificar por cromatografía ultrarrápida (1:1 de hexanos/EtOAc), obteniendo 5-trifluorometilsulfonil-1,3-dihidro-bencimidazol-2-ona.

F. 2-Cloro-5-trifluorometilsulfonil-1H-bencimidazol

24

Calentar a reflujo 5-trifluorometilsulfonil-1,3-dihidro-bencimidazol-2-ona (380 mg) durante 8 horas en POCl_{3} (10 ml). Evaporar el disolvente al vacío y después neutralizar cuidadosamente con NaHCO_{3} saturado y extraer con EtOAc. Secar sobre Na_{2}SO_{4}, concentrar al vacío y purificar por cromatografía ultrarrápida (1:1 de hexanos/EtOAc), obteniendo 2-cloro-5-trifluorometilsulfonil-1H-bencimidazol.

G. 1'-(5-trifluorometilsulfonil-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona

25

Agitar 2-cloro-5-trifluorometilsulfonil-1H-bencimidazol (185 mg) y espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona (263 mg) en dimetilacetamida (6 ml) a 195ºC durante 1 hora. Enfriar la mezcla y repartir entre EtOAc y NaHCO_{3} semi-saturado, lavar varias veces con agua, secar y concentrar al vacío. Purificar el residuo por cromatografía (1:1 de hexanos/EtOAc), obteniendo 1'-(5-trifluorometilsulfonil-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona.

Ejemplo 7 1'-(5-(3-Metoxifenil)-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona

Este ejemplo ilustra la preparación del compuesto representativo 1'-(5-(3-metoxifenil)-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona.

A. Ácido 5-(3-metoxifenil)-2-aminobenzoico

26

\vskip1.000000\baselineskip

A una solución de ácido 5-yodo-2-aminobenzoico (2,6 g; 10 mmol) en éter dimetílico de etilenglicol (DME, 20 ml) añadirle tetraquis(trifenilfosfina)paladio (0) (150 mg) en atmósfera de argón. Después de disolver completamente el catalizador, añadir sucesivamente ácido 3-metoxibencenobórico (1,65 g; 11 mmol) y carbonato sódico (1 M en agua, 30 ml). Calentar la mezcla a 80ºC durante 1 hora. Enfriar la mezcla de reacción y después lavar con EtOAc al 50% en hexano. Filtrar la fase acuosa a través de una capa corta de celite para retirar el paladio negro y verter cuidadosamente el filtrado en ácido clorhídrico frío 3 N (25 ml) con agitación. Recoger el precipitado por filtración y secar al aire, obteniendo ácido 5-(3-metoxifenil)-2-aminobenzoico en forma de un sólido blanco.

B. 5-(3-Metoxifenil)bencimidazolidin-2-ona

27

\vskip1.000000\baselineskip

A una suspensión de ácido 5-(3-metoxifenil)-2-aminobenzoico (2,0 g) en 1,4-dioxano (20 ml) añadirle N-metilpi-
rrolidinona (NMP, 5 ml) y trietilamina (1,4 ml), seguido de azida difenilfosfórica (DPPA, 2,5 g). Después de agitar a temperatura ambiente durante 30 minutos, calentar la mezcla a 100ºC durante 2 horas, hasta que cese totalmente el desprendimiento de gas. Enfriar la mezcla a temperatura ambiente y concentrar al vacío. Disolver el residuo en MeOH y dejar en reposo durante 18 horas. Filtrar el precipitado y secar al aire, obteniendo 5-(3-metoxifenil)bencimidazolidin-2-ona en forma de un sólido amarillo pálido.

C. 2-Cloro-5-(3-metoxifenil)bencimidazol

28

\vskip1.000000\baselineskip

Calentar una mezcla de 5-(3-metoxifenil)bencimidazolidin-2-ona (1,4 g) y cloruro de tetrametilamonio (aprox. 2 g) en oxicloruro de fósforo a 100ºC durante 8 horas. Después de la refrigeración, concentrar la mezcla al vacío, triturar con agua y neutralizar con hidróxido amónico. Recoger el precipitado y secar al aire, obteniendo 2-cloro-5-(3-metoxifenil)bencimidazol.

D. 1'-(5-(3-metoxifenil)-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona

29

Agitar 2-cloro-5-(3-metoxifenil)bencimidazol (185 mg) y espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona (263 mg) en dimetilacetamida (6 ml) a 195ºC durante 1 hora. Enfriar la mezcla y repartir entre EtOAc y NaHCO_{3} semi-saturado, lavar varias veces con agua, secar y concentrar al vacío. Purificar el residuo por cromatografía (1:1 de hexanos/EtOAc), obteniendo 1'-(5-(3-metoxifenil)-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona.

Ejemplo 8 1'-(5-Fenil-1H-imidazo[4,5-b]pirazin-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona

Este Ejemplo ilustra la preparación del compuesto representativo 1'-(5-Fenil-1H-imidazo[4,5-b]pirazin-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona.

A. Hidrazida del ácido 2-amino-5-fenil-nicotínico

\vskip1.000000\baselineskip

30

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Calentar a reflujo éster metílico del ácido 3-amino-6-fenil-pirazina-2-carboxílico (1,0 g; Thompson (1988) J. Org. Chem. 53:2052) en hidrazina monohidrato (10 ml) durante 2 horas. Enfriar a temperatura ambiente y recoger la hidrazida del ácido 2-amino-5-fenil-nicotínico en forma de un sólido blanco.

B. 5-Fenil-1,3-dihidro-imidazo[4,5-b]pirazin-2-ona

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Enfriar una mezcla de hidrazida del ácido 2-amino-5-fenil-nicotínico (229 mg, 1,0 mmol) en HCl 2 N (5 ml) a 10ºC y añadir nitrito sódico (138 mg, 2,0 mmol). Dejar en agitación a 60ºC durante 20 minutos y después enfriar a temperatura ambiente. Basificar la mezcla con NaOH 1 M (10 ml) y recoger la 5-fenil-1,3-dihidro-imidazo[4,5-b]pirazin-2-ona en forma de un sólido blanco.

C. 2-Cloro-5-fenil-1H-imidazo[4,5-b]pirazina

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Calentar a reflujo una solución de 5-fenil-1,3-dihidro-imidazo[4,5-b]pirazin-2-ona (200 mg) en oxicloruro de fósforo (10 ml) durante 18 horas. Después de la refrigeración, retirar el exceso de POCl_{3} al vacío y triturar el residuo en agua enfriada con hielo (200 ml). Después de agitar durante 30 minutos, filtrar el precipitado, obteniendo 2-cloro-5-fenil-1H-imidazo[4,5-b]pirazina en forma de un sólido gris.

D. 1'-(5-Fenil-1H-imidazo[4,5-b]pirazin-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona

33

Agitar 2-cloro-5-fenil-1H-imidazo[4,5-b]pirazina (231 mg, 1 mmol) y espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona (406 mg, 2 mmol) en dimetilacetamida (5 ml) a 120ºC durante 14 horas. Enfriar la mezcla y repartir entre EtOAc y NaHCO_{3} semi-saturado, lavar varias veces con agua, secar y concentrar al vacío. Purificar por cromatografía (1:1 de hexanos/EtOAc), obteniendo 1'-(5-Fenil-1H-imidazo[4,5-b]pirazin-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona en forma de un sólido castaño.

Ejemplo 9 1'-(6-Trifluorometil-3H-imidazo[4,5-b]piridina-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona

Este ejemplo ilustra la preparación del compuesto representativo 1'-(6-trifluorometil-3H-imidazo[4,5-b]piridina-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona.

A. 5-Trifluorometil-piridina-2,3 diamina

34

Añadir Pd al 10%/C (0,5 g) a una solución de 3 nitro-5-(trifluorometil)piridina-2-amina (1,0 g, 4,83 mmol) en etanol (10 ml). Hidrogenar la mezcla a una presión de 344,737 kPa (50 psi) durante 5 horas. Filtrar la mezcla a través de celite y evaporar a sequedad a presión reducida, obteniendo 5-trifluorometil-piridina-2,3-diamina.

B. 6-Trifluorometil-1,3-dihidro-imidazo[4,5-b]piridina-2-ona

35

Añadir 1,1'-carbonildiimidazol (1,0 g, 6,17 mmol) a una solución de 5-trifluorometil-piridina-2,3-diamina (0,90 g, 5,08 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (10 ml) y agitar a temperatura ambiente durante 18 horas. Calentar la solución a reflujo durante 2 horas y filtrar el precipitado, obteniendo 6-trifluorometil-1,3-dihidro-imidazo[4,5-b]piridina-2-ona.

C. 2-Cloro-6-trifluorometil-3H-imidazo[4,5-b]piridina

36

Calentar una solución de 6-trifluorometil-1,3-dihidro-imidazo[4,5-b]piridin-2-ona (0,6 g, 2,95 mmol) y cloruro de tetrametilamonio (0,3 g) a 110ºC en oxicloruro de fósforo (10 ml) durante 10 horas. Después de la refrigeración, retirar el exceso de POCl3 al vacío y después neutralizar con NaHCO_{3} saturado y extraer con EtOAc. Secar sobre Na_{2}SO_{4} y concentrar al vacío, obteniendo 2-cloro-6-trifluorometil-3H-imidazo[4,5-b]piridina.

D. 1'-(6-trifluorometil-3H-imidazo[4,5-b]piridina-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin-3-ona

37

Calentar una solución de 2-cloro-6-trifluorometil-3H-imidazo[4,5-b]piridina (0,1 g, 0,45 mmol) y espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona (0,2 g, 0,90 mmol) en NMP seco (5 ml) a 100ºC durante 10 horas. Verter la mezcla enfriada en agua (20 ml) y extraer dos veces con EtOAc (20 ml). Lavar los extractos combinados con salmuera (20 ml), secar y evaporar al vacío. Purificar por TLC preparativa (MeOH al 4%-CH_{2}Cl_{2}), obteniendo 1'-(6-trifluorometil-3H-imidazo[4,5-b]piridina-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona en forma de un sólido amarillo.

Ejemplo 10 Clorhidrato de 6-Bromo-2-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona)-3H-imidazo[4,5-b]piridina

Este Ejemplo ilustra la preparación del compuesto representativo clorhidrato de 6-Bromo-2-(espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona)-3H-imidazo[4,5-b]piridina.

A. 6-Bromo-2-cloro-3H-imidazo[4,5-b]piridina

38

Calentar a reflujo 6-bromo-1,3-dihidro-imidazo[4,5-b]piridin-2-ona (5 g) durante 14 h en POCl_{3} (50 ml). Evaporar el disolvente al vacío y después neutralizar cuidadosamente con NaHCO_{3} saturado y extraer con EtOAc. Secar sobre Na_{2}SO_{4}, concentrar al vacío y purificar por cromatografía ultrarrápida (1:1 de hexanos/EtOAc), obteniendo 6-bromo-2-cloro-3H-imidazo[4,5-b]piridina.

B. 6-Bromo-2-(espiro[isobenzofuran-1,4'piperidin]-3-ona-3H-imidazo[4,5-b]piridina

39

Agitar 2-cloro-5-trifluorometil-1H-bencimidazol (3 g) y espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona (5,8 g) en dimetilacetamida (75 ml) a 120ºC durante 14 horas. Enfriar la mezcla y repartir entre EtOAc y NaHCO_{3} semi-saturado, lavar varias veces con agua, secar y concentrar al vacío. Cristalizar en EtOAc/EtOH, obteniendo un sólido blanco. Disolver el sólido en EtOAc y tratar con EtOAc saturado/HCl. Recoger el clorhidrato de 6-bromo-2-(espiro[isobenzofuran-1,4'piperidin]-3-ona-3H-imidazo[4,5-b]piridina.

Ejemplo 11 1'-(5-Cloro-3H-imidazo[4,5-b]piridina-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona

Este ejemplo ilustra la preparación del compuesto representativo 1'-(5-cloro-3H-imidazo[4,5-b]piridina-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona.

A. 6-Cloro-3-nitropiridin-2-il-amina

40

Añadir carbonato sódico (14 g, 130 mmol) y NH_{3} 2 M en EtOH (20 ml) a una solución de 2,6-dicloro-3-nitropiridina (10 g, 51,8 mmol) en etanol (115 ml). Calentar la mezcla a 70ºC durante 5 horas. Después de la refrigeración, retirar el exceso de etanol al vacío y triturar el residuo en agua. Después de agitar durante 15 minutos, filtrar el precipitado, obteniendo 6-cloro-3-nitropiridin-2-il-amina.

B. 6-Cloro-piridina-23-diamina

41

Añadir cinc (4,0 g) a una solución de 6-cloro-3-nitropiridin-2-il-amina (1,0 g, 5,76 mmol) en ácido acético (1,5 ml) y metanol (40 ml). Agitar la mezcla resultante a temperatura ambiente durante 18 horas y filtrar a través de una capa de celite. Evaporar el filtrado a sequedad y a presión reducida. Tratar el residuo resultante con NaOH acuoso 1 N y extraer con EtOAc. Lavar el extracto de EtOAc con agua y NaCl acuoso saturado. Separar la fase orgánica, secar sobre Na_{2}SO_{4}, filtrar y concentrar. Purificar por cromatografía ultrarrápida en columna (EtOAc al 50%-hexano), obteniendo 6-cloro-piridina-2,3-diamina.

C. 5-Cloro-1,3-dihidro-imidazol[4,5-b]piridin-2-ona

42

Añadir 1,1'-carbonildiimidazol (0,1 g, 0,70 mmol) a una solución de 6-cloro-piridina-2,3-diamina (0,1 g, 0,70 mmol) en CH_{3}CN(3 ml) y calentar a 60ºC durante 18 horas. Enfriar a temperatura ambiente y filtrar el precipitado, obteniendo 5-cloro-1,3-dihidro-imidazol[4,5-b]piridin-2-ona.

D. 2,5-Dicloro-3H-imidazo[4,5-b]piridina

43

Calentar una solución de 5-cloro-1,3-dihidro-imidazol[4,5-b]piridin-2-ona (0,07 g, 0,42 mmol) y cloruro de tetrametilamonio (0,1 g) a 115ºC en oxicloruro de fósforo (10 ml) durante 10 horas. Después de la refrigeración, retirar el exceso de POCl_{3} al vacío y después neutralizar con NaHCO_{3} saturado y extraer con EtOAc. Secar sobre Na_{2}SO_{4} y concentrar al vacío, obteniendo 2,5-dicloro-3H-imidazo[4,5-b]piridina.

E. 1'-(5-Cloro-3H-imidazo[4,5-b]piridina-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona

44

Calentar una solución de 2,5-dicloro-3H-imidazo[4,5-b]piridina (0,07 g, 0,37 mmol) y espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona (0,15 g, 0,74 mmol) en NMP seco (3 ml) a 100ºC durante 14 horas. Verter la mezcla enfriada en agua (10 ml) y extraer dos veces con EtOAc (10 ml). Lavar los extractos combinados con salmuera (10 ml), secar y evaporar al vacío. Purificar por TLC preparativa (MeOH al 5%-CH_{2}Cl_{2}), obteniendo 1'-(5-cloro-3H-imidazo[4,5-b]piridina-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona en forma de un sólido blanco.

Ejemplo 21 1'-(5-(3,5-Dimetil-isoxazol-4-il)-1H-bencimidazol-2-il]-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona

Este ejemplo ilustra la preparación del compuesto representativo 1'-(5-(3,5-dimetil-isoxazol-4-il)-1H-bencimida-
zol-2-il]-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona.

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Seguir el procedimiento C del el Ejemplo 1 usando tetraquistrifenilfosfina paladio (0,04 g, 0,034 mmol), 1'-(5-yodo-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona (0,05 g, 0,112 mmol), ácido 3,5-dimetilisoxazol-4-bórico (0,03 g, 0,229 mmol), carbonato sódico acuoso (1 M, 0,5 ml) y éter dimetílico de etilenglicol (5 ml). Calentar mezcla de reacción a 80ºC durante 24 horas. Purificar sobre una placa prep. de gel de sílice J. T. Baker (5 x 20 cm) usando metanol al 10%/CH_{2}Cl_{2}, obteniendo 1'-(5-(3,5-dimetil-isoxazol)-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona.

Espec. de masas: M+1 = 415 (AP^{+}).

La preparación de los compuestos proporcionados en este documento mediante los procedimientos mencionados anteriormente se ilustra con más detalle en los siguientes ejemplos, expuestos en al Tabla 1, que no se han construido para limitar la invención en alcance o espíritu a los procedimientos específicos y compuestos descritos en ellos. Las abreviaturas usadas comúnmente son: Ph es fenilo, Me es metilo, Et es etilo, nPr o Pr es n-propilo, iPr es isopropilo, tBu es terc-butilo, cPent es ciclopentilo, cHex es ciclohexilo, Ej. significa ejemplo.

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Ejemplo 675 Preparación de Receptores Quiméricos de NPY5

Este Ejemplo ilustra la preparación de un receptor de NPY5 representativo para su uso en ensayos descritos en este documento.

A. Clones de ADN que codifican Receptores de NPY

Se clono el receptor de Y5 humano a partir del ADN genómico usando unCebador 5' TTTTGGTTGCTGACAA
ATGTC (SEC.ID.Nº 1) y un Cebador 3' CCTTGGTAAACAGTGAGAATTATTAC (SEC.ID.Nº 2). Inicialmente se clonó el producto de PCR de longitud completa en el vector pCR 2.1 (Invitrogen, Carlsbad, CA) y después se subclonó en pBluescript SK Minus (pBSSKM, Stratagene, La Jolla CA). Esto se denominó pNN32.

Se subclonaron las bases 197 a 1433 del receptor de Y1 (numero de Acceso a Genbank M88461, SEC.ID.Nº 3) en pBSSKM y se denomino pNN22. Se fabricó un clon pBSSKM que codifica una forma truncada en 5' del receptor de Y5 con el extremo 5' delecionado de la región codificante en el sitio Nco I. Esto se denominó pNN39.

B. Receptores quiméricos

hNPY5\DeltaY1IC3 (SEC.ID.Nº 5)

Para la quimera del bucle 3 IC, de digirió pNN39 con PstI (localizado aproximadamente en los restos 748-753 de la secuencia del receptor de Y5 humano (SEC.ID.Nº 6)) y Bgl II (localizado aproximadamente en los restos 1130-1135 de la secuencia del receptor de Y5 humano) retirando las bases 753 a 1130.

La parte del bucle 3 IC de las bases 903-964 (TACGCCTAAAAAGGAGAAACAACATGATGGACAAGATGAG
AGACAATAAGTACAGGTCCAGT; SEC.ID.Nº 8) del receptor de Y5 humano, que corresponde a los aminoácidos 236-256 (IRLKRRNNMMDKMRDNKYRSS; SEC.ID.Nº 9) de la secuencia de aminoácidos del receptor de Y5 humano, se insertó en Y5 usando el oligo con sentido HY1L3S, (SEC.ID.Nº 10) y el oligo antisentido HY1L3AS (SEC.ID.Nº 11). Se calentó una mezcla de reacción que contenía los 2 oligos a 100ºC y se dejó enfriar lentamente para que hibridaran los oligos. El producto hibridado de doble hélice después se ligó en el pNN39 digerido con PstI-Bgl II produciendo el plásmido pNN100. El inserto pNN100 después se reintrodujo en el gen de Y5 humano de longitud completa (pNN32) en el sitio Cel 2 y el plásmido resultante se denominó pNN42.

(2) hNPY5\DeltaY1CT (SEC.ID.Nº 12)

Para añadir el extremo C-terminal de Y1 a Y5, se añadió un sitio Eco RI a cada gen. Para Y1, se mutaron las bases 1173 a 1178 (ACTTCC) del receptor de Y1 humano (SEC.ID.Nº 3) para crear un sitio Eco RI mediante PCR desde el cebador directo HY1R1 (SEC.ID.Nº 13) a un cebador inverso T3 (cebando desde el sitio de clonación múltiple -"MCS"- de pBSSKM). Después se aisló la cola 3' de Y1 digiriendo con Eco RI y Xba (la última encima corta la cola 3' de Y1 en el MCS de pBSSKM).

Para Y5, se mutaron las bases 1338 a 1343 (GGATTA) del receptor de Y5 humano usando el cebador inverso de PCR HY5R1 (SEC.ID.Nº 14). Este cebador se emparejó con un cebador directo que corresponde a las bases 527-551 (GCTACTGTCTGGACACTAGGTTTTG; SEC.ID.Nº 15) del receptor de Y5 humano, y se realizó la PCR con la secuencia codificante de Y5 humana como molde. La banda de PCR resultante se cortó con Pst I en el sitio Eco RI introducido.

Después se abrió pNN39 de Pst I a Xba desde el MCS de pBSSKM y el segmento de Y5 mutado de Pst I a Eco RI se mezcló con el fragmento 3' de Y1 mutado de Eco RI a Xba desde el MCS para establecer un ligamiento de tres vías. El fragmento del gen mutador resultante después se introdujo en el gen Y5 de longitud completa en el sitio Bgl 2.

(3) hNPY5\Delta1IC3/\DeltaY1CT (SEC.ID.Nº 16)

Se obtuvo el intercambio bucle 3 IC + cola CT combinando los 2 genes mutantes anteriores del siguiente modo. Se digirió hY5 (pNN32) de longitud completa con Cel 2 (localizado aproximadamente en los restos 619-625 del receptor de Y5 humano) y Xba en el vector MCS. La mutación del bucle 3 del fragmento de Cel II a Bgl II de pNN42 se combinó con la mutación de CT de pNN43 del fragmento Bgl II a Xba desde el MCS resultante en pNN44. pNN44 codifica un receptor de NPY NPY_{5}/ NPY_{1} quimérico humano, que consta de los aminoácidos N-terminales 1-442 del receptor de NPY_{5} humano y los aminoácidos C-terminales 328-384 del receptor de NPY_{1} humano. La secuencia de aminoácidos de este receptor quimérico, se menciona en este documento como hNPY5\DeltaY1IC3/\DeltaY1CT como se muestra en SEC.ID.Nº 17).

Después se digirió PNN44 con Kpn I y Xba I y subclonó en el vector de expresión comercial pBacPAK9 (Clontech, Palo Alto, CA) para la expresión en células SF9.

C. Preparaciones de Baculovirus

Se co-transfectó el vector de expresión de Baculovirus junto con ADN BACULOGOLD (BD PharMingen, San Diego, CA) en células Sf9. El sobrenadante del cultivo de células Sf9 se recogió tres días después de la transfección. El sobrenadante que contenía virus recombinante se diluyó en serie en medio de insecto TNM-FH de Hink (JRH Biosciences, Kansas City) suplementado con sales de Grace y con L-Gln 4,1 mM, 3,3 g/l de LAH, 3,3 g/l de yeastolato ultrafiltrado y suero bovino fetal inactivado por calor al 10% (a continuación "medio de insecto") y se ensayó en placa para placas recombinantes. Después de cuatro días, las placas recombinantes se seleccionaron y se recogieron en 1 ml de medio de insecto para la amplificación. Se usaron volúmenes de 1 ml cada uno de baculovirus recombinante (en el pase 0) para infectar un matraz T25 separado que contenía 2x10^{6} células Sf9 en 5 ml de medio de insecto. Después de cinco días de incubación a 27ºC, se recogió el medio sobrenadante de cada una de las infecciones de T25 para su uso como inóculo en pase 1. Dos de los siete clones de baculovirus recombinantes después se eligieron para una segunda ronda de amplificación, usando 1 ml de la solución madre en pase 1 para infectar 1x10^{8} células en 100 ml de medio de insecto dividido en 2 matraces T175. Cuarenta y ocho horas después de la infección, se recogió medio en pase 2 de cada preparación de 100 ml y se ensayó en placa para la titilación. Los sedimentos celulares de la segunda ronda de amplificación se ensayaron por afinidad de unión como se describe a continuación para verificar la expresión del receptor recombinante. Después se inicio una tercera ronda de amplificación usando un valor de M.O.I. de 0,1 para infectar un litro de células Sf9. Cuarenta horas después de la infección el medio sobrenadantes se recogió para producir una solución madre de baculovirus en pase 3 y el sedimento celular se ensayó para la afinidad de unión. El título de la solución madre de baculovirus en pase 3 se determinó por ensayo en placa y se realizó un valor de M.O.I. y un experimento de Transcurso de Tiempo de Incubación para determinar las condiciones para la expresión óptima del receptor. Los resultados del experimento de optimización del receptor muestran que un valor de M.O.I. de 0,1 y una incubación de 72 horas eran los parámetros de infección ideales para conseguir la expresión óptima del receptor de Y5 en hasta 1 litro de cultivos de infección de células Sf9.

Las células Sf9 en fase logarítmica infectadas con baculovirus recombinante que codifica el receptor de NPY NPY_{5}/NPY_{1} quimérico humano denominado hNPY5\DeltaY1IC3/\DeltaY1CT, anterior, se cultivaron en medio de insecto a 27ºC. 72 horas después de la infección, se analizó una muestra de la suspensión celular para la viabilidad por exclusión de colorante azul tripano, y las células Sf9 restantes se recogieron mediante centrifugación (3000 rpm/10/minutos/4ºC).

Ejemplo 676 Ensayo para la Actividad de Unión del Receptor de NPY5

Este Ejemplo ilustra la medida de la actividad de unión para compuestos representativos.

Las células Sf9 infectadas con baculovirus que expresan al receptor de NPY5/NPY1 quimérico humano recombinante, como se describe en el Ejemplo 675, se recogen a las 42-48 horas, momento en el cual se sedimentan lotes de 50ml de suspensión celular por centrifugación. Cada sedimento se resuspende en 30ml en tampón de homogeneización (HEPES 10 mM, sacarosa 250 mM, 0,5 \mug/ml de leupeptina, 2 \mug/ml de Aprotinina, PMSF 200 \muM y EDTA 2,5 mM, pH 7,4) y se homogeneiza usando un homogeneizador POLYTRON (ajuste 5 durante 30 segundos). El homogeneizado se centrifuga a 4ºC durante 10 minutos a 536 x g para sedimentar los núcleos. El sobrenadante que contiene membranas aisladas se decanta en un tubo de centrífuga limpio, se centrifuga en el mismo tampón a 48.000 x g durante 30 minutos a 4ºC y se resuspende en 30 ml de tampón de homogenización. Esta etapa de centrifugación y resuspensión se repite dos veces. El sedimento final se resuspende en PBS de Dulbecco enfriado en hielo que contiene EDTA 5 mM, y se almacena en alícuotas congeladas a -80ºC. La concentración proteica de la preparación de membrana resultante (preparación P2) se mide usando el ensayo de proteínas de Bradford (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA). Mediante esta medida, un cultivo de 1 litro de células típicamente produce 50-75 mg de proteína de membrana total.

Las membranas P2 purificadas se descongelan, se centrifugan y se lavan con PBS y se resuspenden por homogenización con un Dounce (mano de mortero ajustado) en tampón de ensayo (Tris(HCl) 50 mM, KCl 5 mM, NaCl_{2} 120 mM, CaCl_{2} 2 mM, MgCl_{2} 1 mM, albúmina de suero bovino al 0,1% (BSA), pH 7,4). Para el análisis de competición, se añaden membranas (5-50 \mug) a tubos de polipropileno que contienen [^{125}I]PYY (porcino) 0,050 nM y 2 \mul de compuesto de ensayo en DMSO (concentración final de 1 \muM-4 \muM). Para el ensayo de unión por saturación, se añaden membranas (5-50 \mug) a tubos de polipropileno que contienen [^{125}I]PYY (porcino; New England Nuclear Corp., Boston, MA) 0,010-0,500 nM. La unión no especifica se determina en presencia de NPY (humano; American Peptide Co., Sunnyvale, CA) 1 \muM y supone menos del 10% de la unión total. Después de una incubación de 2 horas a temperatura ambiente, la reacción se termina por filtración al vacío rápida. Las muestras se filtran sobre filtros GF/C WHATMAN prehumedecidos (en polietilenimina al 1,0% durante 2 horas antes de su uso) y se aclaran 2 veces con 5 ml de tampón de unión frío sin BSA. La radiactividad unida restante se mide por recuento gamma. Se determinan los coeficientes K_{i} y de Hill ("nH") ajustando la ecuación de Hill a los valores medidos con la ayuda del software SIGMAPLOT (SPSS In., Chicago). La afinidad de unión para compuestos proporcionados en este documento, se expresa como un valor K_{i}, que varía de aproximadamente 0,1 nanomolar a aproximadamente 10 micromolar. El más activo de estos compuestos tiene una K_{i} de menos de 100 nanomolar.

Ejemplo 677 Ensayo de Movilización de Calcio para Determinar la Modulación del Receptor de NPY5

Este Ejemplo ilustra un ensayo representativo para evaluar el efecto de compuestos sobre la transducción de señales de receptor de NPY5.

Se siembran en placas células de Melanoma Bowes transfectadas de manera estable con un vector de expresión que codifica el receptor quimérico de NPY5/NPY1 descrito anteriormente a una densidad de 26.000 células/pocillo en placas de 96 pocillos de fondo transparente de paredes negras FALCON (Nº 3904, BECTON-DICKINSON, Franklin Lakes, NJ) y se hacen crecer hasta confluencia, aproximadamente 24 horas. El medio de cultivo se vacía de la placa de 96 pocillos, y se añade un colorante sensible a calcio Fluo-3 (Molecular Probes, Eugene, OR) a cada pocillo (solución de tinción: 1 mg de FLUO-3 AM, 440 \mul de DMSO y 440 \mul de ácido plurónico al 20% en DMSO, diluido 1:2, 50 \mul de solución diluida por pocillo). Las placas se cubren con papel de aluminio y se incuban a 37ºC durante 1-2 horas. Después de la incubación, la solución de tinción se vacía de las placas, las células se lavan una vez en 100 \mul de tampón KRH (KCl 0,05 mM, NaCl 0,115 M, NaH_{2}PO_{4} 9,6 mM, MgSO_{4} 0,01 mM, HEPES 25 mM, pH 7,4) para retirar el exceso de colorante. Después del lavado, se añaden 80 \mul de tampón KRH con carbachol/Thomae (tampón KRH que contiene carbachol 1 mM, BIBP 3226 10 micromolar (Sigma RBI, St. Louis MO)) a cada pocillo. Las placas de ensayo se incuban en la oscuridad, 20 minutos.

Para medir la capacidad del compuesto de ensayo de antagonizar la respuesta de células que expresan el receptor de NPY5 a NPY, primero se determina la EC_{50} de NPY. Se añaden 20 \mul adicionales de tampón KRH/Thomae y 1 \mul de DMSO a cada pocillo de células, preparados como se ha descrito anteriormente. Se transfieren automáticamente 100 \mul de NPY humano en tampón de KRH/Thomae por el instrumento FLIPR a cada pocillo. Se usa una curva de respuesta a concentración de 8 puntos, con concentraciones finales de NPY de 1 nM a 3 \muM, para determinar la EC_{50} de NPY.

Los compuestos de ensayos se disuelven en 1 \mul de DMSO, disuelto en 20 \mul de tampón KRH con carbachol/Thomae, y se añaden a células preparadas como se ha descrito anteriormente. Se incuban las placas de 96 pocillos que contienen células preparadas y compuestos de ensayo en la oscuridad, a temperatura ambiente durante 0,5-6 horas. Es importante que la incubación no continúe después de 6 horas. Justo antes de determinar la respuesta de fluorescencia, se añaden automáticamente 100 \mul de NPY humano diluido en tampón KRH/Thomae a 2 x EC_{50} por el instrumento FLIPR a cada pocillo de la placa de 96 pocillos para un volumen de muestra final de 200 \mul y una concentración final de NPY de EC_{50}. La concentración final de los compuestos en los pocillos de ensayo está entre 1 \muM y 5 \muM. Típicamente, las células expuestas a una EC_{50} de NPY muestran una respuesta de fluorescencia de aproximadamente 10.000 Unidades de Fluorescencia Relativas. Los antagonistas del receptor de NPY5 muestran una respuesta que es significativamente inferior a las de las células de control al nivel p\leq 0,05, medido usando un ensayo paramétrico de significancia estadística. Típicamente, los antagonistas del receptor de NPY5 disminuyen la respuesta de fluorescencia con relación a las células de control en aproximadamente un 20%, preferiblemente en aproximadamente 50%, y más preferiblemente en al menos un 80% en comparación con el control coincidente.

Ejemplo 678 Antagonismo de la Ingesta de Alimentos Inducida por Polipéptido Pancreático Bovino

Este Ejemplo ilustra el uso de compuestos representativos para disminuir la ingesta de alimentos.

Se mantienen a temperatura (23 \pm 3ºC), humedad (55 \pm 15%) y ciclo de luz-oscuridad (7:00-19:00 de luz) controlados, ratas Sprague-Dawley macho de 7 semanas de edad. Las ratas se alojan individualmente con acceso ad libitum a alimento y a agua.

Las ratas se anestesian con pentobarbital sódico (50 mg/kg, i.p.). Se implanta de manera estereotáxica una cánula de guía de acero inoxidable permanente para inyección intracerebroventricular (ICV) (calibre 21, 10 mm de longitud) en el ventrículo lateral derecho. Las coordenadas estereotáxicas usadas son las siguientes: 0,9 mm posterior y 1,2 mm lateral al bregma y 0,5 mm ventral a la superficie cerebral.

Los animales se dejan recuperar al menos 6 días después de la operación antes de comenzar el experimento de alimentación. El día antes del experimento, los animales se manejan y experimentan inyección simulada, y se mide la ingesta de alimento nocturna. Las ratas que comen más de 15 g durante la noche antes del experimento se usan para el experimento de antagonismo de alimentación BPP.

Los compuestos de ensayo se suspenden en metilcelulosa al 0,5% y se administran por vía oral por sonda. La administración de los compuestos de ensayo habitualmente comienza a 10:00. El volumen de dosificación es aproximadamente 5 ml/kg. Una hora después de la administración del compuesto de ensayo, se inyecta ICV polipéptido pancreático bovino (PP bovino 50 \mug/10 \mul/1 minuto) a través de un inyector de acero inoxidable (calibre 26) unido a una microjeringa Hamilton de 50 \mul por tubos de polietileno. Se disuelve PP bovino en PBS 10 mM que contiene BSA al 0,05%. Dos horas después de la inyección se mide la ingesta de alimento para cada rata.

Los compuestos de ensayo que reducen la ingesta de alimento 2 horas después de la inyección en relación a la ingesta de alimento de animales de control (animales con inyección de PP bovino pero no un compuesto de ensayo) se identifican como compuestos que antagonizan la alimentación inducida por PP bovino.

Ejemplo 679 Modelo de Privación de Alimento

Este Ejemplo ilustra el uso de moduladores de NPY5 representativos para disminuir la ingesta de alimentos en un modelo de privación de alimento.

Se usan ratas Sprague-Dawley macho experimentalmente desnudas y experimentadas (Sasco, St. Louis, MO) que pesan 210-300 g al inicio del experimento. Los animales se alojan de tres en tres en jaulas colgantes de acero inoxidable en una instalación animal de temperatura (22ºC \pm 2º) y humedad (RH al 40-70%) controlados con un ciclo de luz-oscuridad de 12:12 horas. El alimento (Rat Chow convencional, PMI Feeds Inc., Nº 5012) y agua se administran ad limitum.

Los datos de consumo se recogen mientras los animales estaban alojados en jaulas Nalgene Metabolic (Modelo Nº 650-0100). Cada jaula está compuesta de subensamblajes fabricados de polimetilpentano transparente (PMP), policarbonato (PC), o acero inoxidable (SS). Todas las partes se desmontan para una rápida y precisa recogida de datos y para la limpieza. La jaula de plástico de forma cilíndrica y de SS completa descansa en un pie de SS y se aloja un animal.

El animal está contenido en el ensamblaje de Cámara Superior (PC) redonda (12 cm de altura y 20 cm de diámetro) y descansa en un suelo de SS. Dos subensamblajes están unidos a la Cámara Superior. El primer ensamblaje consta de una cámara de alimentación de SS (10 cm de longitud, 5 cm de altura y 5 cm de ancho) con un cajón comedero de PC unido a la parte inferior. El cajón comedero tiene dos compartimientos: un compartimiento de almacenamiento de alimento con capacidad de aproximadamente 50 g de comida de rata, y un compartimiento de vertido de alimento. El animal se deja acceder al pienso pulverizado por una abertura en el suelo de SS de la cámara de alimentación. El suelo de la cámara de alimentación no permite acceder a la comida caída en el compartimiento de vertido. El segundo ensamblaje incluye un soporte de frasco de agua, un frasco de agua de PC (capacidad de 100 ml) y un tubo de recogida de vertido de agua graduado. El soporte de frasco de agua canaliza el agua vertida en el tubo de recogida de vertido de agua.

La cámara inferior consta de un cono de separación de PMP, un embudo de recogida de PMP, un tubo de recogida de fluido (orina) de PMP, y un tubo de recogida de sólidos (heces) de PMP. El cono de separación está unido a la parte superior del embudo de recogida, que a su vez está unido a la parte inferior de la Cámara Superior. La orina se escapa del cono de separación por las paredes del embudo de recogida y en el tubo de recogida de orina. El cono de separación también separa las heces y las canaliza en el tubo de recogida de heces. El consumo de alimento, el consumo de agua, y el peso corporal se mide con una escala Ohaus Portable Advanced (precisión de \pm0,1g).

Antes del día del ensayo, los animales se habituaron a los aparatos de ensayo colocando cada animal en la jaula Metabolic durante 1 hora. En el día del experimento, a los animales se les privó de alimento la noche antes de que se pesaran y se les asignó a grupos de tratamiento. Las asignaciones se hicieron usando un procedimiento cuasi-aleatorio utilizando los pesos corporales para asegurar que los grupos de tratamiento tenían peso corporal medio similar. Después a los animales se les administra vehículo (metilcelulosa al 0,5%, MC) o modulador de NPY5. En ese momento, el cajón comedero cargado con pienso pulverizado, el frasco de agua lleno, y los tubos de recogida de orina y heces vacíos se pesaron. Dos horas después del tratamiento con modulador, cada animal se pesa y se coloca en una Jaula Metabolic. Después de una sesión de ensayo de 1 hora, los animales se retiran y se obtiene el peso corporal. Los recipientes de comida y agua después se pesan y se registran los datos.

Los moduladores de NPY5 (suspendidos en MC al 0,5%) o MC al 0,5% se administran por vía oral (PO) usando un tubo de sonda conectado a una jeringa de 3 ó 5 ml a un volumen de 10 ml/kg. Cada modulador se hace en una suspensión homogénea agitando y ultrasonicando durante al menos 1 hora antes de la dosificación.

Se representan las medias y errores típicos de la media (SEM) para el consumo de alimento, consumo de agua, y cambio de peso corporal. Se usó un análisis de una vía de la varianza usando Systat (5.2.1) para ensayar las diferencias de grupo. Un efecto significativo se define como uno que tiene un valor p de <0,5.

Los siguientes parámetros se definen: Cambio de peso corporal es la diferencia entre el peso corporal del animal inmediatamente antes de colocarlo en la jaula Metabolic y su peso corporal al final de la sesión de ensayo de una hora. Consumo de alimento es la diferencia en el peso del cajón de alimento antes del ensayo y el peso después de la sesión de ensayo de 1 hora. El consumo de agua es la diferencia en el peso del frasco de agua antes del ensayo y el peso después de la sesión de ensayo de 1 hora. Los compuestos más potentes de la invención reducen significativamente la ingesta de alimento y ganancia de peso corporal.

Descripción de la lista de secuencias

SEC.ID.Nº 1 es un cebador 5' del receptor de NPY5 humano.

SEC.ID.Nº 2 es un cebador 3' del receptor de NPY5 humano.

SEC.ID.Nº 3 es el receptor de NPY1 humano.

SEC.ID.Nº 4 es la secuencia de aminoácidos de NPY1.

SEC.ID.Nº 5 es la secuencia de ADN quimérico denominado hNPY5\DeltaY1LC3.

SEC.ID.Nº 6 es la secuencia de nucleótidos del receptor de NPY5 humano.

SEC.ID.Nº 7 es la secuencia de aminoácidos del receptor de NPY5 humano.

SEC.ID.Nº 8 es los nucleótidos 903-964 del receptor de NPY5 humano.

SEC.ID.Nº 9 es los aminoácidos 236-256 del receptor de NPY5 humano.

SEC.ID.Nº 10 es el oligo con sentido HY1L3S.

SEC.ID.Nº 11 el oligo antisentido HY1L3AS.

SEC.ID.Nº 12 es la secuencia de ADN quimérico denominado hNPY5\DeltaY1CT.

SEC.ID.Nº 13 es el cebador HY1R1.

SEC.ID.Nº 14 es el cebador HY5R1.

SEC.ID.Nº 15 es el cebador directo que corresponde a las bases 527-551 del receptor de Y5 humano.

SEC.ID.Nº 16 es la secuencia de ADN quimérico denominado hNPY5\Delta1IC3/\DeltaY1CT.

SEC.ID.Nº 17 es la secuencia de aminoácidos del receptor quimérico hNPY5\DeltaY1IC3/\DeltaY1CT.

A partir de lo anterior se apreciará que, aunque se han descrito realizaciones específicas de la invención en este documento para propósitos de ilustración, pueden hacerse diversas modificaciones sin desviarse del espíritu y alcance de la invención. Por consiguiente, la invención no está limitada excepto por las reivindicaciones adjuntas.

<110> Bakthavatchalam, Rajagopal

\hskip1.075cmBlum, Charles A

\hskip1.075cmBrielmann, Harry L

\hskip1.075cmDarrow, James W

\hskip1.075cmDe Lombaert, Stephane

\hskip1.075cmHutchison, Alan

\hskip1.075cmTran, Jennifer

\hskip1.075cmZheng, Xiaozhang

\hskip1.075cmElliott, Richard L

\hskip1.075cmHammond, Marlys

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<120> Espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-onas y 3H-espiroisobenzofuran-1,4'-piperidinas

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<130> N00.2001

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<150> US 60/254,990

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<151> 12-12-2000

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<160> 17

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<170> PatentIn versión 3.1

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<210> 1

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<211> 21

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<212> ADN

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<213> Secuencia Artificial

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<220>

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<223> CEBADOR 5' DEL RECEPTOR DE NPY5 HUMANO

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<400> 1

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\hskip-.1em\dddseqskip

ttttggttgc tgacaaatgt c

\hfill

21

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<210> 2

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<211> 26

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<212> ADN

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<213> Secuencia Artificial

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<220>

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<223> CEBADOR 3' DEL RECEPTOR DE NPY5 HUMANO

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<400> 2

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\hskip-.1em\dddseqskip

ccttggtaaa cagtgagaat tattac

\hfill

26

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<210> 3

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<211> 1605

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<212> ADN

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<213> Homo sapiens

\newpage

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<400> 3

58

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<210> 4

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<211> 384

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<212> PRT

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<213> Homo sapiens

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<400> 4

59

60

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<210> 5

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<211> 1069

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<212> ADN

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<213> Secuencia Artificial

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<220>

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<223> QUIMERA Y5/Y1

\newpage

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<400> 5

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61

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<210> 6

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<211> 1406

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<212> ADN

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<213> Homo sapiens

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<400> 6

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62

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<210> 7

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<211> 455

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<212> PRT

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<213> Homo sapiens

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<400> 7

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63

64

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<210> 8

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<211> 62

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<212> ADN

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<213> Secuencia Artificial

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<220>

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<223> NUCLEÓTIDOS 903-964 DE NPY5 HUMANO

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<400> 8

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65

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<210> 9

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<211> 21

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<212> PRT

\vskip0.400000\baselineskip

<213> Secuencia Artificial

\vskip0.400000\baselineskip

<220>

\vskip0.400000\baselineskip

<223> AMINOÁCIDOS 236-256 DE NPY5 HUMANO

\vskip0.400000\baselineskip

<400> 9

\vskip1.000000\baselineskip

\sa{Ile Arg Leu Lys Arg Arg Asn Asn Met Met Asp Lys Met Arg Asp Asn}

\sac{Lys Tyr Arg Ser Ser}

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip0.400000\baselineskip

<210> 10

\vskip0.400000\baselineskip

<211> 63

\vskip0.400000\baselineskip

<212> ADN

\vskip0.400000\baselineskip

<213> Secuencia Artificial

\vskip0.400000\baselineskip

<220>

\vskip0.400000\baselineskip

<223> CEBADOR DE Y5/Y1 QUIMÉRICO

\vskip0.400000\baselineskip

<400> 10

66

\vskip0.400000\baselineskip

<210> 11

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<211> 71

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<212> ADN

\vskip0.400000\baselineskip

<213> Secuencia Artificial

\vskip0.400000\baselineskip

<220>

\vskip0.400000\baselineskip

<223> CEBADOR DE Y5/Y1 QUIMÉRICO

\vskip0.400000\baselineskip

<400> 11

\vskip1.000000\baselineskip

67

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip0.400000\baselineskip

<210> 12

\vskip0.400000\baselineskip

<211> 1500

\vskip0.400000\baselineskip

<212> ADN

\vskip0.400000\baselineskip

<213> Secuencia Artificial

\vskip0.400000\baselineskip

<220>

\vskip0.400000\baselineskip

<223> QUIMERA Y5/Y1

\vskip0.400000\baselineskip

<400> 12

68

\vskip0.400000\baselineskip

<210> 13

\vskip0.400000\baselineskip

<211> 31

\vskip0.400000\baselineskip

<212> ADN

\vskip0.400000\baselineskip

<213> Secuencia Artificial

\vskip0.400000\baselineskip

<220>

\vskip0.400000\baselineskip

<223> CEBADOR DE R1 MUTAGÉNICO

\vskip0.400000\baselineskip

<400> 13

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip0.400000\baselineskip

\hskip-.1em\dddseqskip

gaacaaaaga attcagagag acttgcagtt c

\hfill

31

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip0.400000\baselineskip

<210> 14

\vskip0.400000\baselineskip

<211> 28

\vskip0.400000\baselineskip

<212> ADN

\vskip0.400000\baselineskip

<213> Secuencia Artificial

\vskip0.400000\baselineskip

<220>

\vskip0.400000\baselineskip

<223> CEBADOR DE R1 MUTAGÉNICO

\vskip0.400000\baselineskip

<400> 14

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip0.400000\baselineskip

\hskip-.1em\dddseqskip

cagcttgaat tccattatta agaaaccc

\hfill

28

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip0.400000\baselineskip

<210> 15

\vskip0.400000\baselineskip

<211> 25

\vskip0.400000\baselineskip

<212> ADN

\vskip0.400000\baselineskip

<213> Secuencia Artificial

\vskip0.400000\baselineskip

<220>

\vskip0.400000\baselineskip

<223> CEBADOR DE NPY5 HUMANO

\vskip0.400000\baselineskip

<400> 15

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip0.400000\baselineskip

\hskip-.1em\dddseqskip

gctactgtct ggacactagg ttttg

\hfill

25

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip0.400000\baselineskip

<210> 16

\vskip0.400000\baselineskip

<211> 1201

\vskip0.400000\baselineskip

<212> ADN

\vskip0.400000\baselineskip

<213> Secuencia Artificial

\vskip0.400000\baselineskip

<220>

\vskip0.400000\baselineskip

<223> QUIMERA Y5/Y1

\newpage

\vskip0.400000\baselineskip

<400> 16

\vskip1.000000\baselineskip

69

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip0.400000\baselineskip

<210> 17

\vskip0.400000\baselineskip

<211> 394

\vskip0.400000\baselineskip

<212> PRT

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<213> Secuencia Artificial

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<220>

\vskip0.400000\baselineskip

<223> QUIMERA Y5/Y1

\vskip0.400000\baselineskip

<400> 17

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70

71

Claims (35)

1. Un compuesto de Fórmula I:

Fórmula I

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72

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o una sal o profármaco farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que:

X es oxígeno o H_{2};

cada uno de A, D, V, W, Y y Z es independientemente CR_{1};

B es N o CR_{2};

E es N o CR_{3};

R_{1} se selecciona independientemente cada vez que está presente entre:

(i) hidrógeno, halógeno, hidroxi, amino, nitro, ciano, -C(=O)NH_{2} y -COOH; y

(ii) L-R_{A}-Q-G, en la que

L es un enlace, -O-, -C(=O)-, -OC(=O)-, -C(=O)O-, -O-C(=O)O-, -S(O)_{n}-; -NR_{B}-, -C(=O)NHR_{B}-, -NHR_{B}C(=O)-, -NR_{B}S(O)_{n}- o -S(O)_{n}NR_{B}-;

n se elige independientemente cada vez que está presente entre 0, 1 ó 2;

R_{A} es alquilo (C_{1}-C_{8}), alquenilo (C_{2}-C_{8}), alquinilo (C_{2}-C_{8}), cicloalquilo (C_{3}-C_{8}), cicloalquenilo (C_{3}-C_{8}), cicloalquinilo (C_{3}-C_{8}) o heterocicloalquilo (C_{3}-C_{8}), cada uno opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes seleccionados independientemente entre hidroxi, halógeno, amino, ciano, nitro, alquilo (C_{1}-C_{6}) y halo-alquilo (C_{1}-C_{6}).

Q es un enlace, -O-, -C(=O)-, -OC(=O)-, -C(=O)O-, -O-C(=O)O-, -S(O)_{n}-, -CHR_{B}-, -NR_{B}-, -C(=O)NHR_{B}-, -NHR_{B}C(=O)-, -NR_{B}S(O)_{n}- o -S(O)_{n}NR_{B};

R_{B} se selecciona independientemente cada vez que está presente entre hidrógeno,alquilo (C_{1}-C_{8}), cicloalquilo (C_{3}-C_{8}), cicloalquil (C_{3}-C_{8})-alquilo (C_{1}-C_{8}) y alquil (C_{1}-C_{8})-cicloalquilo (C_{3}-C_{8}) (preferiblemente hidrógeno, alquilo (C_{1}-C_{6}) o cicloalquilo (C_{5}-C_{7});

G es: hidrógeno; o

alquilo (C_{1}-C_{8}), alquenilo (C_{2}-C_{8}), alquinilo (C_{2}-C_{8}), cicloalquil (C_{3}-C_{8})-alquilo (C_{1}-C_{8}) o un grupo carbocíclico o heterocíclico de 3 a 10 miembros, cada uno opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes seleccionados independientemente entre hidroxi, halógeno, amino, ciano, nitro, alquilo (C_{1}-C_{8}), haloalquilo (C_{1}-C_{8}), alcoxi (C_{1}-C_{8}), -NH-alquilo (C_{1}-C_{8}), -N-(alquilo (C_{1}-C_{8}))_{2}, -NHC(=O)-alquilo (C_{1}-C_{8}), -N-alquil (C_{1}-C_{8})-C(=O)(alquilo), -NHS(O)_{s} alquilo (C_{1}-C_{8}), -S(O)_{s} alquilo (C_{1}-C_{8}), -S(O)_{s}NH-alquilo (C_{1}-C_{8}) y -S(O)_{s} N-(alquilo (C_{1}-C_{8}))_{2}, donde s es 0, 1 ó 2;

R_{2} y R_{3} se seleccionan independientemente cada vez que está presente entre:

(i) hidrógeno, halógeno, hidroxi, amino, nitro, ciano, -C(=O)NH_{2} y -COOH; y

(ii) T-R_{C}-U-M, en la que:

T es un enlace, -O-, -C(=O)-, -OC(=O)-, -C(=O)O-, -O-C(=O)O-, -S(O)_{n}-, -NR_{D}-, -C(=O)NHR_{D}-, - NHR_{D}C(=O)-, -NR_{D}S(O)_{n}- o -S(O)_{n}NR_{D}-;

n se elige independientemente en cada caso entre 0, 1 ó 2;

R_{C} es alquilo (C_{1}-C_{8}), alquenilo (C_{2}-C_{8}), alquinilo (C_{2}-C_{8}) o un grupo carbocíclico o heterocíclico de 3 a 10 miembros, cada uno opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes seleccionados independientemente entre hidroxi, halógeno, amino, ciano, nitro, alquilo (C_{1}-C_{6}) y haloalquilo (C_{1}-C_{6}).

U es un enlace, -O-, -C(=O)-, -OC(-O)-, -C(=O)O-, -O-C(=O)O-, -S(O)_{n}-, -CHR_{D}-, -NR_{D}-, -C(=O)NHR_{D}-, -NHR_{D}C(=O)-, -NR_{D}S(O)_{n}- o -S(O)_{n}NR_{D}-. R_{D} se selecciona independientemente cada vez que está presente entre hidrógeno, alquilo (C_{1}-C_{8}), cicloalquilo (C_{3}-C_{8}), cicloalquil (C_{3}-C_{8})-alquilo (C_{1}-C_{8}) y alquil (C_{1}-C_{8})-cicloalquilo (C_{3}-C_{8}).

M es: hidrógeno; o

alquilo (C_{1}-C_{8}), alquenilo (C_{2}-C_{8}), alquinilo (C_{2}-C_{8}) o un grupo carbocíclico o heterocíclico de 3 a 10 miembros, cada uno opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes seleccionados independientemente entre hidroxi, halógeno, amino, ciano, nitro, alquilo (C_{1}-C_{8}), halo-alquilo (C_{1}-C_{8}), alcoxi (C_{1}-C_{8}), -NH-alquilo (C_{1}-C_{8}), -N-(alquilo (C_{1}-C_{8}))_{2}, -NHC(=O)-alquilo (C_{1}-C_{8}), -N-alquil (C_{1}-C_{8})-C(=O)(alquilo), -NHS(O)_{s} alquilo (C_{1}-C_{8}), -S(O)_{s} alquilo (C_{1}-C_{8}), -S(O)_{s}NH-alquilo (C_{1}-C_{8}) y -S(O)_{s}N(alquilo (C_{1}-C_{8}))_{2}, donde s es 0, 1 ó 2.

2. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que Y y Z son ambos CH, y V y W son ambos CR_{1}.

3. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 2, en el que V, W, Y y Z son todos CH.

4. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que cada uno de A y D se seleccionan independientemente entre CH y C-halógeno.

5. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que A y D son ambos CR_{1}, B es CR_{2} y E es CR_{3}.

6. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que R_{1} se selecciona independientemente cada vez que está presente entre hidrógeno, halógeno, hidroxi, nitro, ciano, amino, alquilo (C_{1}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6}) sustituido con amino, mono- o di-alquil (C_{1}-C_{6})-amino, o alcoxi (C_{1}-C_{6}), cicloalquilo (C_{3}-C_{7}), cicloalquil (C_{3}-C_{7})-alquilo (C_{1}-C_{4}), alquenilo (C_{2}-C_{6}), cicloalquenilo (C_{3}-C_{7}), alquinilo (C_{2}-C_{6}), cicloalquinilo (C_{3}-C_{7}), haloalquilo (C_{1}-C_{6}), haloalcoxi (C_{1}-C_{6}), mono y di-alquil (C_{1}-C_{6})-amino, amino-alquilo (C_{1}-C_{6}) y mono- y dialquil (C_{1}-C_{6})-amino-alquilo (C_{1}-C_{6}).

7. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 6, en el que:

T es un enlace, -O-, -C(=O)-, -OC(=O)-, -C(=O)O-, -S(O)_{n}- o -NR_{D}-;

U es un enlace, -O-, -C(=O)-, -OC(=O)-, -C(=O)O-, -S(O)_{n}-, -CHR_{D} o -NR_{D}-, y

M es hidrógeno; o

alquilo (C_{1}-C_{6}), alquenilo (C_{2}-C_{6}), alquinilo (C_{2}-C_{6}) o un grupo carbocíclico o heterocíclico de 3 a 10 miembros, cada uno opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes seleccionados independientemente entre hidroxi, halógeno, amino, ciano, nitro, alquilo (C_{1}-C_{6}), haloalquilo (C_{1}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6}), -NH-alquilo (C_{1}-C_{6}), -N(alquilo (C_{1}-C_{8}))_{2}.

8. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que R_{1} se selecciona independientemente cada vez que está presente entre hidrógeno, metilo, etilo, metoxi, etoxi, trifluorometilo, trifluorometoxi y difluorometoxi.

9. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 6, en el que R_{2} y R_{3} se seleccionan independientemente entre:

(i) hidrógeno y halógeno; y

(ii) T-Rc, donde T es un enlace, -O-, -C(=O)-, -OC(=O)-, -C(=O)O- o -S(O)_{2}- y R_{C} es alquilo (C_{1}-C_{6}) o un anillo carbocíclico o heterocíclico de 5 ó 6 miembros, cada uno opcionalmente sustituido con 1 a 3 sustituyentes seleccionados independientemente entre hidroxilo, halógeno, ciano, alquilo (C_{1}-C_{6}) y haloalquilo (C_{1}-C_{6}).

10. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que Q es un enlace, -O- o -NR_{B}-.

11. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que G es hidrógeno o alquilo (C_{1}-C_{6}), alquenilo (C_{2}-C_{6}), alquinilo (C_{2}-C_{6}), cicloalquilo (C_{5}-C_{7}), cicloalquil (C_{5}-C_{7})-alquilo (C_{1}-C_{6}) o heterocicloalquilo (C_{5}-C_{7}), cada uno opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes seleccionados independientemente entre hidroxi, alquilo (C_{1}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6}), halógeno, amino, ciano y nitro.

12. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que:

R_{D} se selecciona independientemente cada vez que está presente entre hidrógeno, alquilo (C_{1}-C_{6}) y cicloalquilo (C_{5}-C_{7});

U es un enlace, -O-, -C(=O)-, -CHR_{D}- o -NR_{D}; y

M es hidrógeno; o

alquilo (C_{1}-C_{6}), alquenilo (C_{2}-C_{6}), alquinilo (C_{2}-C_{6}) o un grupo carbocíclico o heterocíclico de 3 a 10 miembros, cada uno opcionalmente sustituido con 1 a 5 sustituyentes seleccionados independientemente entre hidroxi, halógeno, amino, ciano, nitro, alquilo (C_{1}-C_{6}), haloalquilo (C_{1}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6}), y haloalcoxi (C_{1}-C_{6}).

13. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que

L es un enlace, -O-, -C(=O)-, -OC(=O)-, -C(=O)O- o; -NR_{B}-;

R_{B} es hidrógeno, alquilo (C_{1}-C_{8}) o cicloalquilo (C_{3}-C_{8});

Q es un enlace; y

G es hidrógeno.

14. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que Rc se selecciona entre fenilo, piridilo, tiazolilo, oxazolilo, tiadiazolilo, oxadiazolilo, pirazolilo, isoxazolilo, piperazinilo, pirimidinilo, piridazinilo, pirazinilo, piranilo, tiofenilo, furanilo, pirrolilo, imidazolilo, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo y morfolinilo, estando cada uno de ellos sustituido con 0 a 2 sustituyentes seleccionados independientemente entre hidroxi, halógeno, amino, ciano, nitro, alquilo (C_{1}-C_{6}), haloalquilo (C_{1}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6}) y halo-alcoxi (C_{1}-C_{6}).

15. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 6, en el que R_{2} y R_{3} se seleccionan independientemente cada vez que está presente:

(i) trifluorometoxi, trifluorometilo, trifluorosulfonilo, hidrógeno, halógeno, hidroxi, nitro, ciano, amino, haloalquilo y -COOH; y

(ii) benzoílo, benzhidrilo, fenoxi, benciloxi, fenilo, piridilo, tiazolilo, oxazolilo, tiadiazolilo, oxadiazolilo, pirazolilo, isoxazolilo, piperazinilo, pirimidinilo, piridazinilo, pirazinilo, piranilo, tiofenilo, furanilo, pirrolilo, imidazolilo, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo y morfolinilo, cada uno sustituido con 0 a 2 sustituyentes seleccionados independientemente entre hidroxi, halógeno, amino, ciano, nitro, alquilo (C_{1}-C_{6}), haloalquilo (C_{1}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6}) y haloalcoxi (C_{1}-C_{6}).

16. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 6, en el que:

R_{1} se selecciona independientemente cada vez que está presente entre hidrógeno, hidroxi, halógeno, alquilo (C_{1}-C_{6}), haloalquilo (C_{1}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6}) y haloalcoxi (C_{1}-C_{6});

R_{2} se selecciona independientemente cada vez que está presente entre hidrógeno, hidroxi, halógeno, alquilo (C_{1}-C_{6}), haloalquilo (C_{1}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6}) y haloalcoxi (C_{1}-C_{6}); y

R_{3} se selecciona independientemente cada vez que está presente entre hidroxi, halógeno, ciano y alquilo (C_{1}-C_{6}), cicloalquilo (C_{5}-C_{7}), haloalquilo (C_{1}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6}), haloalcoxi (C_{1}-C_{6}), alcanoílo (C_{1}-C_{6}); alcanoil (C_{1}-C_{6})-oxi, alcoxi (C_{1}-C_{6})-carbonilo, alquil (C_{1}-C_{6})-aminocarbonilo, carbamato (C_{1}-C_{6}), alquil (C_{1}-C_{6})-sulfonilo, oxadiazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, tiofenilo, triazolilo, pirimidinilo, piridinilo, pirazinilo, fenilo, bencilo, fenoxi, benciloxi y benzoílo, cada uno opcionalmente sustituido con 1 a 3 sustituyentes seleccionados independientemente entre hidroxi, halógeno, alquilo (C_{1}-C_{6}), haloalquilo (C_{1}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6}) y haloalcoxi (C_{1}-C_{6}).

17. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 6, en el que:

R_{1} se selecciona independientemente cada vez que está presente entre hidrógeno, hidroxi, halógeno, alquilo (C_{1}-C_{6}), haloalquilo (C_{1}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6}) y haloalcoxi (C_{1}-C_{6});

R_{2} se selecciona independientemente cada vez que está presente entre hidroxi, halógeno, ciano y alquilo (C_{1}-C_{6}), cicloalquilo (C_{5}-C_{7}), haloalquilo (C_{1}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6}), haloalcoxi (C_{1}-C_{6}), alcanoílo (C_{1}-C_{6}); alcanoil (C_{1}-C_{6})-oxi, alcoxi (C_{1}-C_{6})-carbonilo, alquil (C_{1}-C_{6})-aminocarbonilo, carbamato (C_{1}-C_{6}), alquil (C_{1}-C_{6})-sulfonilo, oxadiazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, tiofenilo, triazolilo, pirimidinilo, piridinilo, pirazinilo, fenilo, bencilo,fenoxi, benciloxi y benzoílo, cada uno opcionalmente sustituido con 1 a 3 sustituyentes seleccionados independientemente entre hidroxi, halógeno, alquilo (C_{1}-C_{6}), haloalquilo (C_{1}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6}) y haloalcoxi (C_{1}-C_{6}); y

R_{3} se selecciona independientemente cada vez que está presente entre hidrógeno, hidroxi, halógeno, alquilo (C_{1}-C_{6}), haloalquilo (C_{1}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6}) y haloalcoxi (C_{1}-C_{6}).

18. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que:

V, W, Y y Z son todos CR_{1}, y R_{1} se selecciona independientemente cada vez que está presente entre hidrógeno, halógeno, alquilo (C_{1}-C_{6}), haloalquilo (C_{1}-C_{6}) y alcoxi (C_{1}-C_{6});

A y D son CR_{1}, donde R_{1} se selecciona independientemente cada vez que está presente entre hidrógeno, halógeno, alquilo (C_{1}-C_{6}), haloalquilo (C_{1}-C_{6}) y alcoxi (C_{1}-C_{6}); y

B y E son CR_{2} y CR_{3}, respectivamente, donde R_{2} y R_{3} se seleccionan independientemente entre:

(i) hidrógeno, halógeno y ciano; y

(ii) alquilo (C_{1}-C_{6}), cicloalquilo (C_{3}-C_{7}), haloalquilo (C_{1}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6}), haloalcoxi (C_{1}-C_{6}), alcanoílo (C_{1}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6})-carbonilo, alquil (C_{1}-C_{6})-aminocarbonilo, alquil (C_{1}-C_{6})-sulfonilo, oxadiazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, tiofenilo, triazolilo, pirimidinilo, piridinilo, pirazinilo, fenilo, bencilo, fenoxi, benciloxi y benzoílo, cada uno está opcionalmente sustituido con 1 a 3 sustituyentes seleccionados entre halógeno y alquilo (C_{1}-C_{6}).

19. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que el compuesto se selecciona entre:

1'-(6-trifluorometil-3H-imidazo[4,5-b]piridina-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona;

1'-(7-cloro-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona;

1'-(1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona;

1'-(5-n-propilsulfonil-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona;

1'-(5-ciano-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona;

1'-(5-acetil-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona;

1'-(5-carboxi-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona, éster metílico;

1'-(5'pirazin-2-il-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona;

1'-(5'piridin-3-il-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona;

1'-(5-trifluorometoxi-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona;

1'-(5-metil-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona;

1'-(5-benzoil-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona;

1'-(5-metoxi-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona;

1'-(5-cloro-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona;

6-bromo-7-cloro-2-(espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona-3H-imidazo[4,5-b]piridina;

1'-(5-fluoro-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona;

1'-(5-metil-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona;

1'-(5-metilsulfonil-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona;

1'-(5-oxazol-2-il-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona;

1'-(5,6-difluoro-1H-benzimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona;

1'-(5-fenil-1H-imidazo[4,5-b]pirazin-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona;

1'-(5-trifluorometil-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona;

1'-(5,7-dicloro-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona;

1'-(5,6-dimetoxi-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona;

1'-(5-trifluorometilsulfonil-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona;

1'-(5-(3,5-dimetil-isoxazol-4-il)-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona;

1'-(5-etoxi-1H-bencimidazol-2-il)-espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona;

5-cloro-2-(espiro[isobenzofuran-1,4'-piperidin]-3-ona-3H-imidazo[4,5-b]piridina; y

1'-(6-yodo-1H-quinazolin-4-on-2-il)espiro[isobenzofuran-1,4'-piperiden]-3-ona.

20. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que el compuesto muestra una K_{i} de 1 micromolar o menos en un ensayo de unión de ligando al receptor de NPY5.

21. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que el compuesto muestra una K_{i} de 100 nanomolar o menos en un ensayo de unión de ligando al receptor de NPY5.

22. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que el compuesto muestra una K_{i} de 10 nanomolar o menos en un ensayo de unión de ligando al receptor de NPY5.

23. Un modulador del receptor de NPY5, que comprende un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1.

24. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en combinación con un vehículo o excipiente fisiológicamente aceptable.

25. Una composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 24, en la que la composición se formula en forma de un fluido inyectable, un aerosol, una crema, un gel, una píldora, una cápsula, un jarabe o una parche transdérmico.

26. Uso de una composición de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-22, para la preparación de un medicamento para tratar una enfermedad o trastorno asociado a la activación del receptor de NPY5.

27. Uso de una composición de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-22, para la preparación de un medicamento para tratar un trastorno de la alimentación, un trastorno psiquiátrico, un trastorno cardiovascular o diabetes.

28. Uso de una composición de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-22, para la preparación de un medicamento, en el que el medicamento se formula para administrarlo por vía oral.

29. Uso de una composición de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-22, para la preparación de un medicamento, en el que el medicamento se formula para administrarlo por vía intranasal, intravenosa o tópica.

30. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que el compuesto está radiomarcado.

31. Un procedimiento para determinar la presencia o ausencia del receptor de NPY5 en una muestra, que comprende las etapas de:

(a) poner en contacto una muestra con un agente que comprende un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 en condiciones que permiten la unión del agente al receptor de NPY5; y

(b) detectar un nivel de agente unido al receptor de NPY5, y a partir del mismo determinar la presencia o ausencia de receptor de NPY5 en la muestra.

32. Un procedimiento de acuerdo con la reivindicación 31, en el que el agente es un compuesto radiomarcado, y en el que la etapa de detección comprende las etapas de:

(i) separar el agente no unido del agente unido; y

(ii) detectar la presencia o ausencia de agente unido en la muestra.

33. Un procedimiento de acuerdo con la reivindicación 32, en el que la etapa de detección se consigue usando radiografía.

34. Un procedimiento para modular la unión de NPY al receptor de NPY5 in vitro, comprendiendo el procedimiento poner en contacto el receptor de NPY5 con un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 en condiciones y en una cantidad suficiente para modular de manera detectable la unión de NPY al receptor de NPY5.

35. Un procedimiento para modular la unión de NPY al receptor de NPY5 in vitro, comprendiendo el procedimiento poner en contacto células que expresan el receptor de NPY5 con un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 en una cantidad suficiente para modular in vitro de manera detectable la unión de NPY a las células que expresan un receptor de NPY5 clonado.