BR112020018767A2 - inibidores de secreção de proteínas à base de triazaciclododecansulfonamida (tcd) - Google Patents

Abstract

“inibidores de secreção de proteínas à base de triazaciclododecansulfonamida (“tcd”) a presente invenção se refere a inibidores de secreção de proteínas à base de triazaciclododecansulfonamida (tcd), tais como inibidores de sec61, métodos para sua preparação, composições farmacêuticas relacionadas e métodos para usar os mesmos. por exemplo, são fornecidos no presente documento compostos de fórmula (i) e sais e composições farmaceuticamente aceitáveis que incluem os mesmos. os compostos divulgados no presente documento podem ser usados, por exemplo, no tratamento de doenças, incluindo inflamação e/ou câncer.

Description

“INIBIDORES DE SECREÇÃO DE PROTEÍNAS À BASE DE TRIAZACICLODODECANSULFONAMIDA (“TCD”)” ANTECEDENTES CAMPO DA INVENÇÃO

[0001] A presente divulgação refere-se a inibidores de secreção de proteínas à base de triazaciclododecansulfonamida (“TCD”), incluindo métodos de fabricação e uso dos mesmos.

INCORPORAÇÃO A TÍTULO DE REFERÊNCIA DE MATERIAL ENVIADO ELETRONICAMENTE

[0002] Este pedido contém, como uma parte separada da divulgação, uma Listagem de Sequência em forma legível por computador (nome do arquivo: 40056_SeqListing.txt; 20.275 bytes; criado em 14 de fevereiro de 2019) que está incorporada a título de referência em sua totalidade.

DESCRIÇÃO DA TECNOLOGIA RELACIONADA

[0003] A translocação de proteínas para o retículo endoplasmático (“ER”) constitui a primeira etapa de secreção de proteínas. A importação de proteína ER é essencial em todas as células eucarióticas e é particularmente importante nas células tumorais de crescimento rápido. Assim, o processo de secreção de proteínas pode servir como alvo tanto para potenciais fármacos contra o câncer quanto para fatores de virulência bacteriana. Consultar Kalies and Römisch, Traffic, 16 (10): 1.027 a 1.038 (2015).

[0004] O transporte de proteínas para o ER é iniciado no citosol quando os peptídeos-sinal hidrofóbicos do terminal N se projetam a partir do ribossomo. A ligação de partícula de reconhecimento de sinal (“SRP”) à sequência de sinal permite o direcionamento do complexo de ribossomo-cadeia nascente-SRP para a membrana de ER, em que o contato de SRP com seu receptor desencadeia a transferência do peptídeo-sinal para Sec61. Sec61 é um translocador de proteína de membrana de ER (também conhecido como translocon) que tem a forma de donut com 3 subunidades principais (heterotriméricas). Isso inclui um “plugue”, que bloqueia o transporte para dentro ou para fora do ER. O tampão é deslocado quando a região hidrofóbica de um polipeptídeo nascente interage com a região de “costura” de Sec61, permitindo a translocação do polipeptídeo para o lúmen de ER. Em mamíferos, apenas proteínas curtas (< 160 aminoácidos) podem entrar no ER pós-tradução, e proteínas menores que 120 aminoácidos são obrigadas a usar essa via. Parte da competência de translocação é mantida pela ligação da calmodulina à sequência-sinal. Após a chegada ao canal de Sec61, o peptídeo-sinal ou âncora- sinal intercala entre os domínios de transmembrana (“TMDs”) 2 e 7 de Sec61α, que formam a porção lateral do portão, permitindo que o canal se abra para proteínas secretoras solúveis. Como o canal Sec61 consiste em 10 TMDs (Sec61α) circundados por uma pinça hidrofóbica formada por Sec61γ, a abertura do canal depende de mudanças conformacionais que envolvem praticamente todos os TMDs.

[0005] A inibição de transporte de proteínas através da membrana de ER tem o potencial de tratar ou prevenir doenças, tal como o crescimento de células cancerosas e inflamação. Os inibidores de secreção conhecidos, que variam de amplo espectro a altamente específico de substrato, podem interferir em virtualmente qualquer estágio desse processo de várias etapas, e até mesmo com o transporte de antígenos endocitosados para o citosol para apresentação cruzada. Esses inibidores interagem com o peptídeo-sinal, caperonas ou o canal de Sec61 para bloquear a ligação de substrato ou para prevenir as mudanças conformacionais necessárias para a importação de proteínas para o ER. Exemplos de inibidores de secreção de proteínas incluem inibidores de calmodulina (por exemplo, E6 Berbamina e Ofiobolina A), Lantânio, esteróis, ciclodepsipeptídeos (por exemplo, HUN-7293, CAM741, NFI028, Cotrainsina, Apratoxina A, Decatransina, Valinomicina), CADA, Micolactona, Eyarestatina I (“ESI”) e Exotoxina A. No entanto, os inibidores de secreção acima sofrem de um ou mais dentre os seguintes: falta de seletividade para o canal de Sec61, fabricação desafiadora devido à complexidade estrutural e administração limitada de peso molecular, biodisponibilidade e distribuição.

[0006] Assim, existe a necessidade de novos inibidores de secreção de proteínas de moléculas pequenas.

SUMÁRIO

[0007] Em um aspecto, é fornecido no presente documento um composto de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: (I) em que: cada um dentre Ra e Rb é independentemente H ou C1- 3alquila; R1 é H, OH, C1-3alquila, OC1-3alquila, =CH2 ou =NOR5; ou R1 é C3- 6cicloalquila ou C3-6heterocicloalquila e forma um grupo espiro com o carbono de anel ao qual é fixado; cada um dentre R1a e R1b é, independentemente, H ou C1- 3alquila; R2 é C1-6alquila, N(R5)2, C3-8cicloalquila, C3-9heterocicloalquila, C3- 9heterocicloalquenila ou C6-10arila; R3 é H, C1-6alquila, C3-8cicloalquila, C3- 8cicloalquenila, C3-7heterocicloalquila, C6-10arila, ou C2-6heteroarila; R4 é C3- 8cicloalquila, C3-9heterocicloalquila, C6-10arila ou C2-9heteroarila; cada R5 é independentemente H, C1-3alquila, ou C0-2alquileno-C6-10arila; X está ausente, C1- 3alquila, C=O, ou (C=O)O; Y é SO ou SO2; cada grupo heterocicloalquila, heterocicloalquenila e heteroarila tem independentemente 1, 2 ou 3 heteroátomos de anel selecionados a partir de N, O e S.

[0008] Em algumas modalidades, cada Y é SO. Em várias modalidades, cada Y é SO2.

[0009] Em vários casos, Ra é H. Em alguns casos, Ra é C 1-3alquila. Em algumas modalidades, Ra é CH3. Em algumas modalidades, Rb é H. Em várias modalidades, Rb é C1-3alquila. Em vários casos, Rb é CH3. Em vários casos, cada um dentre Ra e Rb é H.

[0010] Em alguns casos, R1 é H, OH, ou =NOR5. Em vários casos, cada R5 é independentemente H, C1-3alquila ou C0-2alquileno-C6-10arila. Em alguns casos, R5 é H ou CH3. Em algumas modalidades, R1 é C1-3alquila ou OC1- 3alquila. Em várias modalidades, R1 é CH3 ou OCH3. Em alguns casos, R1 é CH3 e exibe estereoquímica S. Em várias modalidades, R1 é C3-6cicloalquila ou C3- 6heterocicloalquila e forma um grupo espiro com o carbono de anel ao qual está ligado. Em alguns casos, R1 juntamente com o átomo do anel ao qual está ligado forma , ou . Em vários casos, R1 é = CH2.

[0011] Em alguns casos, cada um dentre R1a e R1b é H. Em alguns casos, pelo menos um dentre R1a e R1b é C1-3alquila. Em alguns casos, cada um dentre R1a e R1b é CH3.

[0012] Em algumas modalidades, R2 é C1-6alquila ou N(R5)2. Em vários casos, cada R5 compreende, independentemente, H, C1-3alquila ou benzila. Em várias modalidades, R2 é Et, iPr, N(CH3)2, , , ou . Em alguns casos, R2 compreende C3-8cicloalquila. Em vários casos, R2 compreende ciclopentila ou ciclo-hexila. Em algumas modalidades, R2 representa C3-9heterocicloalquila ou C3-9heterocicloalquenila. Em diversas modalidades, R2 compreende oxetanila, azetidinila, tetra-hidrofuranila, pirrolidinila, tetra-hidropiranila, piranila, piperidinila, piperazinila, azepanila, morfolinila ou tetra-hidropiridinila. Em várias modalidades, a C3-9heterocicloalquila ou C3-9heterocicloalquenila compreende uma ponte ou um grupo espiro. Em alguns casos, a C3-9heterocicloalquila que   , e R6 é C1-6alquila, C3- 8cicloalquila ou C6-10arila. Em alguns casos, R6 é fenila opcionalmente substituída por um a três grupos selecionados independentemente a partir de halo, C 1- 3alquila, C1-3alcóxi e CN. Em vários casos, R2 

    

  ,  ,

   

  

    

  

   ,

  ,  

   

   

 ,  

   

   

   

  

  

  

  

  , 

,  

       ,        . Em alguns casos, R2         . Em vários casos, R2 é C6-10arila. Em algumas modalidades, R é ou .

[0013] Em várias modalidades, X está ausente. Em algumas modalidades, R3 compreende C1-6alquila ou H. Em alguns casos, R3 é 2- metilbutila, isopropila, isopentila, CH2CH2OCH3, CH2C(CH3)2CN, CH2CF3 ou CH2CH2CF3. Em vários casos, R3 é isobutila.

[0014] Em algumas modalidades, X- é C1-3alquileno. Em alguns casos, X é CH2, CH2CH2 ou CH(CH3). Em vários casos, R3 compreende C3- 8cicloalquila, C3-8cicloalquenila, C3-7heterocicloalquila, C6-10arila ou C2- 6heteroarila. Em algumas modalidades, R3 compreende ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclo-hexila, ciclopentenila, ciclo-hexenila, tetra-hidropiranila, fenila, pirrolila, pirazolila, imidazolila, tetrazolila, furanila, tiofenila, tiazolila, oxazolila, isoxazolila, pirazolila, oxazolila, isoxazolila ou pirimidinila. Em várias modalidades, X-R3 é selecionado a partir do grupo que consiste em , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , e . Em alguns casos, X-R 3 é , , ou . Em alguns casos, X-R3 é ou .

[0015] Em algumas modalidades, X é C=O ou (C=O)O. Em várias modalidades, R3 compreende C1-6alquila ou C6-10arila. Em alguns casos, X-R3 é

, ou .

[0016] Em vários casos, R4 compreende C3-8cicloalquila ou C3- 9heterocicloalquila. Em algumas modalidades, R4 é ou . Em várias modalidades, R4 compreende C6-10arila ou C2-9heteroarila e R4 é opcionalmente substituído por um ou três grupos independentemente selecionados a partir de halo, C1-3alquila, C1-3alcóxi, C(O)N(RN)2 e N(RN)2, e cada RN é independentemente H ou C1-3alquila. Em algumas modalidades, R4 é selecionado a partir do grupo que consiste em , , , , , , , , , , , , e . Em várias modalidades, R4 é .

[0017] Em algumas modalidades, Ra, Rb, R1a e R1b são, cada um, H; R1 é =CH2 ou CH3; R2 é , , , , , ,

, , ou ; X-R3 é isobutila, , , ou ; R4 é ; e cada Y é SO2.

[0018] Em algumas modalidades, R1 está em uma configuração (S).

[0019] Também são fornecidos no presente documento os compostos listados na Tabela A, na Tabela B e seus sais farmaceuticamente aceitáveis. Em algumas modalidades, é fornecido no presente documento um composto selecionado a partir do grupo que consiste em: , ,

,

, , ,

,

,

e .

[0020] É ainda fornecida no presente documento uma composição farmacêutica que compreende um composto de Fórmula (I), um composto listado na Tabela A, um composto listado na Tabela B, ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos e um carreador farmaceuticamente aceitável.

[0021] Também é fornecido no presente documento um método para inibir secreção de proteínas em uma célula, que compreende colocar a célula em contato com o composto ou sal de Fórmula (I), o composto listado na Tabela A ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, um composto listado na Tabela B ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou a composição farmacêutica aqui descrita em uma quantidade eficaz para inibir a secreção. Em alguns casos, o contato compreende administrar o composto ou a composição a um sujeito.

[0022] É ainda fornecido no presente documento um método para tratar a inflamação em um sujeito que compreende administrar ao sujeito uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto ou sal de Fórmula (I), um composto listado na Tabela A ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, um composto listado na Tabela B ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou a composição farmacêutica aqui descrita.

[0023] Também é fornecido no presente documento um método para tratar ou prevenir câncer ou condições pré-cancerosas em um sujeito, que compreende administrar ao sujeito uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto ou sal de Fórmula (I), um composto listado na Tabela A ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, um composto listado na Tabela B ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ou a composição farmacêutica aqui descrita.

[0024] Outros aspectos e vantagens serão evidentes para aqueles de habilidade comum na técnica a partir de uma revisão da descrição detalhada a seguir, tomada em conjunto com os desenhos. A descrição a seguir inclui modalidades específicas com o entendimento de que a divulgação é ilustrativa, e não se destina a limitar a invenção às modalidades específicas descritas no presente documento.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

[0025] A Figura 1 retrata os dados de eficácia de B16F10 para o composto A87 em comparação com uma terapia anti-PD-1. O composto A87 exibiu eficácia superior com dosagem uma vez por semana sobre a terapia anti- PD-1 no modelo refratário com relação à inibição de crescimento tumoral e percentual de peso corporal.

[0026] Outros aspectos e vantagens ficarão evidentes para os indivíduos de habilidade na técnica a partir de uma revisão da descrição detalhada a seguir. Embora os compostos e métodos divulgados no presente documento sejam susceptíveis a modalidades em várias formas, a descrição a seguir inclui modalidades específicas com o entendimento de que a divulgação é ilustrativa e não se destina a limitar a invenção às modalidades específicas aqui descritas.

DESCRIÇÃO DETALHADA

[0027] São fornecidos no presente documento compostos que inibem a secreção de proteínas. Os compostos descritos no presente documento podem ser usados para tratar ou prevenir doenças associadas à secreção excessiva de proteínas, tais como inflamação e câncer, melhorando a qualidade de vida dos indivíduos afetados.

[0028] Os compostos descritos no presente documento têm uma estrutura de Fórmula (I)

(I) em que os substituintes são descritos em detalhes abaixo.

[0029] Sem estar vinculado a qualquer teoria específica, os compostos descritos no presente documento inibem a secreção de proteínas ligando-se a e desativando-se componentes do translocon, incluindo, mas sem limitação, Sec61, e em alguns casos, interrompendo-se em uma sequência de interações de forma específica entre a sequência de sinalização nascente de proteínas traduzidas com componentes do translocon incluindo, mas sem limitação, Sec61. Os compostos descritos no presente documento podem se ligar especificamente à sequência-sinal com pouca ou nenhuma interação com o próprio translocon.

[0030] Os compostos descritos no presente documento podem inibir vantajosamente a secreção de TNF com uma IC50 de até 5 µM, ou até de 3 µM ou até 1 µM. Em vários casos, os compostos divulgados no presente documento podem inibir a secreção de IL-2 com uma IC50 de até 5 µM, ou até 3 µM ou até 1 µM. Em alguns casos, os compostos divulgados no presente documento podem inibir a secreção de PD-1 com uma IC50 de até 5 µM, ou até 3 µM ou até 1 µM.

[0031] Os compostos descritos no presente documento são eficazes na redução do crescimento tumoral e do peso corporal. Por exemplo, o composto A87 mostrou eficácia superior na redução do crescimento do tumor com dosagem uma vez por semana em um modelo refratário em comparação com a terapia anti-PD-1. Consultar a seção de Exemplos e a Figura 1.

DEFINIÇÕES QUÍMICAS

[0032] Conforme usado no presente documento, “alquila” se refere a grupos hidrocarbonetos saturados de cadeia linear e ramificada que contêm um a trinta átomos de carbono, por exemplo, um a vinte átomos de carbono ou um a dez átomos de carbono. O termo Cn significa que o grupo alquila tem “n” átomos de carbono. Por exemplo, C4alquila se refere a um grupo alquila que tem 4 átomos de carbono. C1-7alquila se refere a um grupo alquila que tem um número de átomos de carbono, abrangendo toda a faixa (isto é, 1 a 7 átomos de carbono), bem como todos os subgrupos (por exemplo, 1 a 6, 2 a 7, 1 a 5, 3 a 6, 1, 2, 3, 4, 5, 6 e 7 átomos de carbono). Os exemplos não limitantes de grupos alquila incluem, metila, etila, n-porpila, isopropila, n-butila, sec-butil (2- metilpropila), t-butil (1,1-dimetiletila), 3,3-dimetilpentila e 2-etil-hexila. Salvo quando indicado de outro modo, um grupo alquila pode ser um grupo alquila não substituído ou um grupo alquila substituído.

[0033] Conforme usado no presente documento, o termo “alquileno” se refere a um radical alifático saturado bivalente. O termo Cn significa que o grupo alquileno tem “n” átomos de carbono. Por exemplo, C1-6alquileno se refere a um grupo alquileno que tem um número de átomos de carbono que abrangem toda a faixa, bem como todos os subgrupos, conforme descrito anteriormente para grupos “alquila”.

[0034] Conforme usado no presente documento, o termo “alquenila” é definido de forma idêntica a “alquila”, exceto por conter pelo menos uma ligação dupla carbono-carbono e ter dois a trinta átomos de carbono, por exemplo, dois a vinte átomos de carbono ou dois a dez átomos de carbono. O termo Cn significa que o grupo alquenila tem “n” átomos de carbono. Por exemplo, C4 alquenila se refere a um grupo alquenila que possui 4 átomos de carbono. C2-7alquenila se refere a um grupo alquenila que tem um número de átomos de carbono que abrange toda a faixa (isto é, de 2 a 7 átomos de carbono), bem como todos os subgrupos (por exemplo, 2 a 6, 2 a 5, 3 a 6, 2, 3, 4, 5, 6 e 7 átomos de carbono). Grupos alquenila especificamente contemplados incluem etenila, 1-propenila, 2-propenila e butenila. A menos que indicado de outra forma,

um grupo alquenila pode ser um grupo alquenila não substituído ou um grupo alquenila substituído.

[0035] Conforme usado no presente documento, o termo “cicloalquila” se refere a um hidrocarboneto cíclico alifático. O termo Cn significa que o grupo cicloalquila tem “n” átomos de carbono. Por exemplo, C5 cicloalquila se refere a um grupo cicloalquila que possui 5 átomos de carbono no anel. C5-8 cicloalquila se refere a grupos cicloalquila que têm um número de átomos de carbono que abrange toda a faixa (isto é, 5 a 8 átomos de carbono), bem como todos os subgrupos (por exemplo, 5 a 6, 6 a 8, 7 a 8, 5 a 7, 5, 6, 7 e 8 átomos de carbono). Exemplos não limitantes de grupos cicloalquila incluem ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclo-hexila, ciclo-heptila e ciclo-octila. A menos que indicado de outra forma, um grupo cicloalquila pode ser um grupo cicloalquila não substituído ou um grupo cicloalquila substituído.

[0036] Conforme usado no presente documento, o termo “cicloalquenila” é definido de forma semelhante a “cicloalquila”, exceto por conter pelo menos uma ligação dupla carbono-carbono, mas não é aromática. O termo Cn significa que o grupo cicloalquenila tem “n” átomos de carbono. Por exemplo, C5 cicloalquenila se refere a um grupo cicloalquenila que tem 5 átomos de carbono no anel. C5-8 cicloalquenila se refere a grupos cicloalquenila que têm um número de átomos de carbono que abrange toda a faixa (isto é, 5 a 8 átomos de carbono), bem como todos os subgrupos (por exemplo, 5 a 6, 6 a 8, 7 a 8, 5 a 7, 5, 6, 7 e 8 átomos de carbono). Exemplos não limitantes de grupos cicloalquenila incluem ciclopropenila, ciclobutenila, ciclopentenila, ciclo-hexenila, ciclo-heptenila e ciclo-octenila. A menos que indicado de outra forma, um grupo cicloalquenila pode ser um grupo cicloalquenila não substituído ou um grupo cicloalquenila substituído.

[0037] Conforme usado no presente documento, o termo “heterocicloalquila” é definido de forma semelhante a cicloalquila, exceto que o anel contém um a três heteroátomos selecionados independentemente a partir de oxigênio, nitrogênio ou enxofre. Exemplos não limitantes de grupos heterocicloalquila incluem piperdina, tetra-hidrofurano, tetra-hidropirano, di- hidrofurano, morfolina, oxazepanila e similares. Os grupos cicloalquila e heterocicloalquila podem ser sistemas de anéis saturados ou parcialmente insaturados opcionalmente substituídos com, por exemplo, um a três grupos independentemente selecionados a partir de alquila, alquilenoOH, C(O)NH2, NH2, oxo (=O), arila, haloalquila, halo e OH. Grupos heterocicloalquila opcionalmente podem ser ainda N-substituídos conforme descrito no presente documento.

[0038] Conforme usado no presente documento, o termo “arila” se refere a sistemas de anel aromático carbocíclico monocíclico ou policíclico (por exemplo, bicíclico fundido e tricíclico fundido). Exemplos de grupos arila incluem, mas sem limitação, fenila, naftila, tetra-hidronaftila, fenantrenila, bifenilenila, indanila, indenila, antracenila, fluorenila, tetralinila. A menos que indicado de outra forma, um grupo arila pode ser um grupo arila não substituído ou um grupo arila substituído.

[0039] Conforme usado no presente documento, o termo “heteroarila” se refere a sistemas de anéis aromáticos monocíclicos ou policíclicos (por exemplo, bicíclico e tricíclico fundido), em que um a quatro átomos de anel são selecionados a partir de oxigênio, nitrogênio ou enxofre, e os átomos de anel restantes são carbono, sendo o dito sistema de anel unido ao restante da molécula por qualquer um dos átomos de anel. Exemplos não limitantes de grupos heteroarila incluem, mas sem limitação, piridila, piridazinila, pirazinila, pirimidinila, pirrolila, pirazolila, imidazolila, tiazolila, tetrazolila, oxazolila, iso-oxazolila, tiadiazolila, oxadiazolila, furanila, tienila, quinolinila, isoquinolinila, benzoxazolila, benzimidazolila, benzofuranila, benzotiazolila, triazinila, triazolila, purinila, pirazinila, purinila, indolinila, ftalzinila, indazolila, quinolinila, isoquinolinila, cinolinila, quinazolinila, naftiridinila, piridopiridinila, indolila, 3H-indolila, pteridinila e quinooxalinila. A menos que indicado de outra forma, um grupo heteroarila pode ser um grupo heteroarila não substituído ou um grupo heteroarila substituído.

[0040] Conforme usado no presente documento, o termo “hidróxi” ou “hidroxila”, conforme usado no presente documento, se refere ao grupo “-OH”.

[0041] Conforme usado no presente documento, o termo “alcóxi” ou “alcoxila” se refere a um grupo “-O-alquila”.

[0042] Conforme usado no presente documento, o termo “halo” é definido como flúor, cloro, bromo e iodo.

[0043] Conforme usado no presente documento, o termo “carbóxi” ou “carboxila” se refere a um grupo “–COOH”.

[0044] Conforme usado no presente documento, o termo “amino” se refere a um grupo -NH2 ou -NH-, em que qualquer hidrogênio pode ser substituído por um grupo alquila, cicloalquila, arila, heteroarila ou heterocicloalquila.

[0045] Conforme usado no presente documento, o termo “sulfonila” se refere a um grupo .

[0046] Um grupo funcional “substituído” (por exemplo, uma alquila, alquilenila, cicloalquila, arila ou heteroarila substituída) é um grupo funcional que tem pelo menos um radical hidrogênio que é substituído por um radical não hidrogênio (isto é, um substituinte). Exemplos de radicais não hidrogênio (ou substituintes) incluem, mas sem limitação, alquila, cicloalquila, alquenila, cicloalquenila, alquinila, éter, arila, heteroarila, heterocicloalquila, hidroxila, óxi (ou oxo), alcoxila, éster, tioéster, acila, carboxila, ciano, nitro, amino, sulfidrila e halo. Quando um grupo alquila substituído inclui mais de um radical diferente de hidrogênio, os substituintes podem estar ligados ao mesmo carbono ou a dois ou mais átomos de carbono diferentes.

INIBIDORES DE SECREÇÃO DE PROTEÍNAS

[0047] Em um aspecto, os compostos da divulgação têm uma estrutura de Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo:

(I) em que: cada um dentre Ra e Rb independentemente H ou C1-3 alquila; R1 é H, OH, C1-3alquila, OC1-3alquila, =CH2 ou =NOR5; ou R1 é C3- 6cicloalquila ou C3-6heterocicloalquila e forma um grupo espiro com o carbono do anel ao qual é fixado; cada um dentre R1a e R1b é independentemente H ou C1-3alquila; R2 é C1-6alquila, N(R5)2, C3-8cicloalquila, C3-9heterocicloalquila, C3- 9heterocicloalquenila ou C6-10arila; R3 é H, C1-6alquila, C3-8cicloalquila, C3-8cicloalquenila, C3- 7heterocicloalquila, C6-10arila ou C2-6heteroarila; R4 é C3-8cicloalquila, C3-9heterocicloalquila, C6-10arila ou C2-9 heteroarila; cada R5 é independentemente H, C1-3alquila ou C0-2alquileno-C6- 10arila; X está ausente, C1-3alquileno, C=O ou (C=O)O; Y é SO ou SO2; cada grupo heterocicloalquila, heterocicloalquenila e heteroarila tem, independentemente, 1, 2 ou 3 heteroátomos no anel selecionados a partir de N, O e S.

[0048] Em algumas modalidades, cada Y é SO. Em várias modalidades, cada Y é SO2.

[0049] Em vários casos, Ra é H. Em alguns casos, Ra é C 1-3alquila. Em algumas modalidades, Ra é CH3. Em algumas modalidades, Rb é H. Em várias modalidades, Rb é C1-3alquila. Em vários casos, Rb é CH3. Em alguns casos, tanto Ra quanto Rb são H.

[0050] Em alguns casos, R1 é H, OH, ou =NOR5. Em vários casos, R5 é H ou CH3. Portanto, os grupos R1 adequados podem incluir H, OH, = NOH e = NORCH3. Em algumas modalidades, R1 é C1-3alquila ou OC1-3alquila. Por exemplo, R1 pode ser CH3 ou OCH3. Em alguns casos, R1 é CH3 e exibe estereoquímica S. Em várias modalidades, R1 é C3-6cicloalquila ou C3- 6heterocicloalquila e forma um grupo espiro com o carbono de anel ao qual está ligado. Os grupos espiro R1 adequados podem incluir , e . Em vários casos, R1 é = CH2. Em algumas modalidades, cada um dentre R1a e R1b é H. Em algumas modalidades, pelo menos um dentre R1a e R1b é C1-3alquila. Em algumas modalidades, cada um dentre R1a e R1b é CH3. Em algumas modalidades, Ra é H, Rb é H e R1 é CH3. Em várias modalidades, Ra é CH3, Rb é H e R1 é H. Em alguns casos, Ra é H, Rb é CH3 e R1 é H. Em vários casos, Ra é CH3, Rb é H e R1 é CH3. Em algumas modalidades, Ra é H, Rb é CH3 e R1 é CH3. Em várias modalidades, Ra é CH3, Rb é CH3 e R1 é H.

[0051] Em algumas modalidades, R2 é C1-6alquila ou N(R5)2. Em alguns casos, cada R5 compreende, independentemente, H, C1-3alquila ou benzila. Os grupos R2 adequados podem incluir Et, iPr, N(CH3)2, , , e . Em alguns casos, R2 compreende C3-8cicloalquila. Em vários casos, R2 compreende ciclopentila ou ciclo-hexila. Em algumas modalidades, R2 representa C3-9heterocicloalquila ou C3-9heterocicloalquenila. Em diversas modalidades, R2 compreende oxetanila, azetidinila, tetra-hidrofuranila, pirrolidinila, tetra-hidropiranila, piranila, piperidinila, piperazinila, azepanila, morfolinila ou tetra-hidropiridinila. Em várias modalidades, a C3-9heterocicloalquila ou C3-9heterocicloalquenila compreende uma ponte ou um grupo espiro. Em alguns casos, a C3-9heterocicloalquila que compreende uma ponte ou um grupo espiro é selecionado a partir do grupo que consiste em , e , e R6 é C1-6alquila, C3- 8cicloalquila ou C6-10arila.

Em alguns casos, R6 é fenila opcionalmente substituída por um a três grupos selecionados independentemente a partir de halo, C1- 3alquila, C1-3alcóxi e CN.

Exemplos de grupos R2 adequados incluem

, , , , ,

, , , , , ,

, , , ,

, , , ,

, , , ,

, , , ,

, , , ,

, , , ,

, , , ,

, , , ,

, , , , ,

, , , ,

, , , ,

, , , ,

, , ,

, , ,

, , , ,

, , ,

, , ,

, , , , , , , , , , , , , , , e . Em alguns casos, R2 é selecionado a partir do grupo que consiste em , , , , , , , e . Em vários casos, R2 é C6-10arila. Em algumas modalidades, R2 é , ou .

[0052] Em várias modalidades, X está ausente. Em algumas modalidades, R3 compreende C1-6alquila ou H. Em alguns casos, R3 é C1-6alquila,

tal como metila, etila, propila, butila, pentila ou hexila. Em alguns casos, R3 é 2- metilbutila, isopropila, isopentila, CH2CH2OCH3, CH2C(CH3)2CN, CH2CF3 ou CH2CH2CF3. Em vários casos, R3 é isobutila.

[0053] Em algumas modalidades, X- é C1-3alquileno. Em alguns casos, X é CH2, CH2CH2 ou CH(CH3). Em vários casos, R3 compreende C3- 8cicloalquila, C3-8cicloalquenila, C3-7heterocicloalquila, C6-10arila ou C2- 6heteroarila. Em algumas modalidades, R3 compreende ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclo-hexila, ciclopentenila, ciclo-hexenila, tetra-hidropiranila, fenila, pirrolila, pirazolila, imidazolila, tetrazolila, furanila, tiofenila, tiazolila, oxazolila, isoxazolila, pirazolila, oxazolila, isoxazolila ou pirimidinila. Exemplos de X-R3 adequado incluem , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , e . Em alguns casos, X-R3 é , , ou . Em alguns casos, X-R3 é ou .

[0054] Em algumas modalidades, X é C=O ou (C=O)O. Em várias modalidades, R3 compreende C1-6alquila ou C6-10arila. Em alguns casos, X-R3 é , ou .

[0055] Em vários casos, R4 compreende C3-8cicloalquila ou C3-9 heterocicloalquila, tal como ou . Em várias modalidades, R4 compreende C6-10arila ou C2-9heteroarila e R4 é opcionalmente substituído por um ou três grupos independentemente selecionados a partir de halo, C1-3alquila, C1-3alcóxi, C(O)N(RN)2 e N(RN)2, e cada RN é independentemente H ou C1- 3alquila. Em algumas modalidades, R4 é selecionado a partir do grupo que consiste em , , , , , , , , , , , , e . Em várias modalidades, R4 é .

[0056] Em algumas modalidades, Ra, Rb, R1a e R1b são, cada um, H, R1 é =CH2 ou CH3; R2 é , , , , , ,

, , ou ; X-R3 é isobutila, , , ou ; R4 é ; e cada Y é SO2. Em alguns casos, R1 está em uma configuração (S). Em alguns casos, são fornecidos no presente documento compostos que compreendem uma estrutura ou , em que R2 é , , , , , ou , e R3 é ciclobutila, ciclopentila ou ciclo-hexila.

[0057] Exemplos de compostos de Fórmula (I) são mostrados na Tabela A, como compostos A1 a A210, ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos. Em alguns casos, o composto é um composto A1 a A151, ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

TABELA A

N.º Estrutura

A5

A1

A6

A2

A7 A3

A4 A8

A9 A14

A10 A15

A11 A16

A12 A17

A13 A18

A19 A23

A24 A20

A25 A21

A26 A22

A27

A28 A33

A29 A34

A30 A35

A31 A36

A32 A37

A38 A43

A39 A44

A40

A46

A41

A47

A42 A48

A49 A54

A50

A55

A51

A56

A52

A57

A53

A58

A59 A64

A60 A65

A61 A66

A67 A63

A68

A69 A74

A70 A75

A71 A76

A72

A77

A73

A78 A83

A79 A84

A80 A85

A81 A86

A82

A87 A91

A88 A92

A89 A93

A90 A94

A95 A99

A96 A100

A97 A101

A98

A102

A108 A103

A104 A109

A105 A110

A106

A111

A107

A116 A112

A113 A117

A114 A118

A115 A119

A120 A125

A126 A121

A127 A122

A123 A128

A124 A129

A130 A135

A131 A136

A132 A137

A133

A138

A134 A140

A141 A146

A142 A147

A143 A148

A144 A149

A145 A150

A151 A155

A152 A156

A157 A153

A160

A154

A165

A161

A166

A162

A167

A163

A168

A164 A169

A170 A174

A171 A175

A172 A176

A177 A173

A178

A179 A184

A180

A185

A181

A187

A182

A188

A183

A189 A193

A190 A194

A191 A195

A192 A196

A197

A202 A198

A203

A199

A204

A200

A205

A201

A208 A206 A209 A207 A210

[0058] Em algumas modalidades, os compostos da divulgação incluem ,

, ,

, ,

,

, , , e ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.

[0059] Compostos adicionais da divulgação são mostrados na Tabela B como compostos B1 a B22, ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos. Em alguns casos, o composto é um composto de B1 a B20 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

TABELA B N.º Estrutura N.º Estrutura B1 B2

N.º Estrutura N.º Estrutura

B3 B8

B4 B9

B5 B10

B11

B12 B6

B13 B7

N.º Estrutura N.º Estrutura B18 B14 B19 B15 B20 B21 B16 B22 B17

[0060] As estruturas químicas com um ou mais estereocentros retratados com ligações tracejadas e em negrito (isto é, e ) se destinam a indicar a estereoquímica absoluta do estereocentro (ou estereocentros) presente na estrutura química. Ligações simbolizadas por uma linha simples não indicam uma estereopreferência. A menos que indicado de outra forma, as estruturas químicas que incluem um ou mais estereocentros que são ilustrados no presente documento, sem indicar estereoquímica absoluta ou relativa, abrangem todas as formas estereoisoméricas possíveis do composto (por exemplo, diastereômeros, enantiômeros) e misturas dos mesmos. Estruturas com uma única linha em negrito ou tracejada, e pelo menos uma linha simples adicional, abrangem uma única série enantiomérica de todos os diastereômeros possíveis.

SÍNTESE DE INIBIDORES DE SECREÇÃO DE PROTEÍNAS

[0061] Os compostos fornecidos no presente documento podem ser sintetizados com o uso de técnicas convencionais, materiais de partida conhecidos pelos indivíduos versados na técnica. Em geral, os compostos fornecidos no presente documento são convenientemente obtidos por meio de métodos de síntese química orgânica padrão.

SÍNTESE DE COMPOSTOS FINAIS

[0062] Em alguns casos, os compostos descritos no presente documento podem ser sintetizados reagindo-se um cloreto de sulfonila que tem um grupo R2 desejado com propano-1,3-diamina, e reagindo-se o produto resultante com um aldeído que tem um grupo R3 desejado para formar o composto de propil amina N-substituída. Um grupo propil amino pode ser introduzido na propil amina N-substituída na posição R4 por meio da reação com 2-(3-bromopropil)isoindolina-1,3-diona seguida por hidrazina, e um grupo R4 desejado pode ser acoplado ao composto reagindo-se o composto com um cloreto de sulfonila funcionalizado com o grupo R4 desejado. Por fim, o composto pode ser ciclizado através de um agente de ciclização com um grupo R 1 desejado, tal como 3-cloro-2-clorometil-1-propano, dietanossulfonato de 2- metilpropano-1,3-di-ila, dietanossulfonato de ciclopropano-1,1-di-ilbis(metileno),

1,3-dicloropropano ou 1,4-diclorobutano.

[0063] Em algumas modalidades, os compostos que têm um grupo metileno em R1 podem ser sintetizados acoplando-se um grupo (3- aminopropil)propano-1,3-diamina derivatizado com os grupos R3 e R4 desejados com um cloreto de R2-sulfamoíla desejado ou grupo R2-cloreto de sulfanila e, em seguida, reagindo-se o composto resultante com 3-cloro-2-clorometil-1-propano para formar o composto de triazaciclododecansulfonamida desejado, conforme exemplificado pela Via 1 na seção de Exemplos.

[0064] Em várias modalidades, compostos que têm um grupo metileno em R1 podem ser sintetizados acoplando-se butano-1,3-diamina protegida com um aldeído que tem um grupo R3 desejado para formar uma 3- (azanoil)-N-butan-1-amina, reagindo-se o grupo amino na posição R2 com um grupo cloro funcionalizado com um grupo R2 desejado, introduzindo-se um grupo propil amino na 3-(azanoil)-N-butan-1-amina na posição R4 através da reação com 2-(3-bromopropil)isoindolina-1,3-diona seguida por hidrazina, reagindo-se o grupo amino resultante na posição R4 com um grupo cloro funcionalizado com um grupo R4 desejado e, em seguida, reagindo-se o composto resultante com 3- cloro-2-clorometil-1-propano para formar o composto de triazaciclododecansulfonamida desejado, conforme exemplificado pela Via 2 na seção de Exemplos.

[0065] Em alguns casos, os compostos que têm um grupo espiro em R1 podem ser sintetizados reagindo-se um grupo N-(3- (azanoil)propil)propano-1,3-diamino derivatizado com os grupos R2, R3 e R4 desejados com 1,1-di-ilbis(metileno)dietanossulfonato derivatizado com o grupo espiro desejado, conforme exemplificado pelas Vias 3, 8 e 9 na seção de Exemplos.

[0066] Em vários casos, os compostos fornecidos no presente documento podem ser sintetizados reduzindo-se um grupo benzila em R2 em N- (3-(azanoil)propil)propano-1,3-diamino funcionalizado com os grupos R3 e R4 desejados e, em seguida, reagindo-se o produto resultante com um aldeído desejado derivatizado com um grupo R2 desejado (por exemplo, dimetil ciclo- hexila), conforme exemplificado pela Via 4 na seção de Exemplos.

[0067] Em algumas modalidades, os compostos que têm um grupo carboxilato em R2 podem ser preparados reagindo-se o grupo triazaciclododensulfonila derivatizado com os grupos R1, R3 e R4 desejados com um grupo alquila desejado e trifosgênio sob condições básicas, conforme exemplificado pela Via 5 na seção de Exemplos.

[0068] Em várias modalidades, os compostos que têm grupo piperidinila em R2 podem ser preparados reagindo-se com DBU/mercaptoetanol um composto de triazaciclododensulfonila que tem os grupos R1, R3 e R4 desejados e funcionalizados em R2 com um grupo nitrofenila e, em seguida, acoplando-se os produto com cloreto de piperidinil sulfonila, conforme exemplificado pela Via 6 na seção de Exemplos.

[0069] Em algumas modalidades, os compostos que têm um grupo hidrogênio em R1 podem ser sintetizados acoplando-se N-(3- (azanoil)propil)propano-1,3-diamino funcionalizado com os grupos R2, R3 e R4 desejados com 1,3-dicloropropano ou 1,4-diclorobutano, conforme exemplificado pela Via 7 e Via 17 na seção de Exemplos.

[0070] Em alguns casos, os compostos que têm um grupo clorofenilmetanona em R2 podem ser sintetizados reagindo-se triazaciclododensulfonila funcionalizada com os grupos R1, R3 e R4 desejados com cloreto de 4-clorobenzoíla sob condições básicas, conforme exemplificado pela Via 10 na seção de Exemplos.

[0071] Em vários casos, os compostos que têm um grupo 4- (dimetilamino)-2-metilbenzila em R4 e um grupo espiro em R1 podem ser preparados reagindo-se um composto de N-(3-(azanoil)propil)propano-1,3- diamino funcionalizado com os grupos R2 e R3 desejados com cloreto de 4- (dimetilamino)-2-metilbenzenossulfonila e, em seguida, ciclizando-se o composto por meio de acoplamento com 1,1-di-ilbis(metileno)dietanossulfonato derivatizado com o grupo espiro desejado com o uso dos métodos anteriormente descritos no presente documento, conforme exemplificado pela Via 11 na seção de Exemplos.

[0072] Em algumas modalidades, os compostos descritos no presente documento podem ser preparados reagindo-se um cloreto de sulfonila com um grupo R2 desejado com propano-1,3-diamina, e reagindo-se o produto resultante com um aldeído que tem um grupo R3 desejado para formar um composto de 3-(azanoil)-N-butan-1-amina. Um grupo propil amino pode ser introduzido na 3-(azanoil)-N-butan-1-amina na posição R4 por meio de reação com 2-(3-bromopropil)isoindolina-1,3-diona seguida por hidrazina, e um grupo R4 desejado pode ser acoplado ao composto reagindo-se o composto com o cloreto de sulfonila desejado (por exemplo, cloreto de 4- (dimetilamino)-2- metilbenzenossulfonila). Por fim, o composto pode ser ciclizado por meio de um agente de ciclização apropriado, tais como 3-cloro-2-clorometil-1-propano, dietanossulfonato de 2-metilpropano-1,3-di-ila, ciclopropano-1,1-di- ilbis(metileno)dietanossulfonato, 1,3-dicloropropano ou 1,4-diclorobutano, conforme descrito anteriormente no presente documento, conforme exemplificado pela Via 12 na seção de Exemplos.

[0073] Em várias modalidades, os compostos que têm um grupo 4- fenilpiperidinail-1-il sulfonila em R2 podem ser sintetizados reagindo-se um grupo triazaciclododensulfonila funcionalizada com os grupos R1, R3 e R4 desejados com trifluorometanossulfonato de 3-metil-1-((4-fenilpiperidin-1-il)sulfonil)-1H- imidazol-3-io, conforme exemplificado pela Via 14 na seção de Exemplos.

[0074] Em alguns casos, os compostos que têm um grupo 4- fenilpiperidinail-1-il sulfonila em R2 podem ser sintetizados reagindo-se N-(3- (azanoil)propil)propano-1,3-diamino funcionalizado com os grupos R3 e R4 desejados com trifluorometanossulfonato de 3-metil-1-((4-fenilpiperidin-1- il)sulfonil)-1H-imidazol-3-io e, em seguida, ciclizando-se o composto com um agente de ciclização apropriado, tal como dietanossulfonato de 2-metilpropano- 1,3-di-ila, 3-cloro-2-clorometil-1-propano, ciclopropano-1,1-di- ilbis(metileno)dietanossulfonato, 1,3-dicloropropano ou 1,4-diclorobutano,

conforme descrito anteriormente no presente documento, conforme exemplificado pela Via 15 na seção de Exemplos. Compostos análogos que têm um grupo metila adjacente ao nitrogênio de R4 podem ser sintetizados de forma similar com o uso de 3-cloro-2-(clorometil)prop-1-eno, conforme exemplificado pela Via 18 na seção de Exemplos.

[0075] Em alguns casos, os compostos que têm um grupo álcool para R1 podem ser sintetizados ciclizando-se um composto de N-(3- (azanoil)propil)propano-1,3-diamino com 1,3-dicloropropan-2-ol protegido sob condições básicas, conforme exemplificado pela Via 19 na seção de Exemplos. O grupo álcool em R1 pode ser metilado por meio de reação com MeI e NaH em tolueno, conforme exemplificado pela Via 21 na seção de exemplos. O grupo álcool em R1 pode ser oxidado em uma carbonila por meio da reação com periodinano de Dess-Martin, conforme exemplificado pela Via 22 na seção de exemplos. O grupo carbonila em R1 pode reagir com cloridrato de hidroxilamina para formar o composto oxima, conforme exemplificado pela Via 25 na seção de Exemplos.

[0076] Em vários casos, os compostos que têm um grupo S-metila em R1 podem ser sintetizados reagindo-se um grupo amino funcionalizado com um grupo R2 desejado com trifluorometanossulfonato de 2,3-dimetil-1-((2-metil- 1H-imidazol-1-il)sulfonil)-1H-imidazol-3-io, seguido por CF3SO3Me, para formar trifluorometanossulfonato de 2,3-dimetil-1H-imidazol-3-io funcionalizado com um grupo R2 desejado. O produto pode ser reagido com (R)-N-(3-amino-2- metilpropila) funcionalizada com um grupo R4 desejado para a forma (S)-N,N’- (2-metilpropano-1,3-diamino) funcionalizado com os grupos R2 e R4 desejados. O produto resultante pode, então, ser reagido com bis(azanodi-il)(propano-3,1- di-il)dimetanossulfonato funcionalizado com um grupo R3 desejado para resultar no composto desejado, conforme exemplificado pela Via 27 na seção de Exemplos.

SÍNTESE DE INTERMEDIÁRIOS

[0077] Os intermediários usados para preparar os compostos descritos no presente documento também podem ser preparados por métodos padrão conhecidos pelos versados na técnica, conforme descrito nos Exemplos, seção abaixo (por exemplo, Via 13, Via 16, Via 20, Via 24, Via 26, Via 28, Via 30, Via 31, Via 32, Via 33).

MÉTODOS DE USO

[0078] Os compostos divulgados no presente documento (por exemplo, os compostos de Fórmula (I), os compostos listados nas Tabelas A e B e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos acima mencionados) podem inibir a secreção de proteínas de uma proteína de interesse. Os compostos divulgados no presente documento podem interferir com a maquinaria de secreção de proteínas Sec61 de uma célula. Em alguns casos, um composto, conforme divulgado no presente documento, inibe a secreção de um ou mais dentre TNFα, VCAM, PRL, IL-2, INFg, CD4, insulina e PD-1 (camundongo e/ou ser humano), ou cada um dentre TNFα, VCAM, PRL, IL-2, INFg, CD4, insulina e PD-1 (camundongo e/ou ser humano). Em alguns casos, um composto, conforme divulgado no presente documento, pode inibir a secreção de uma proteína de ponto de verificação ou inibir a secreção de uma proteína de superfície celular, proteína associada ao retículo endoplasmático ou proteína secretada envolvida na regulação de respostas imunes antitumorais. Em vários casos, um composto divulgado no presente documento pode inibir a secreção de um ou mais dentre PD-1, PD-L1, TIM-1, LAG-3, CTLA4, BTLA, OX-40, B7H1, B7H4, CD137, CD47, CD96, CD73, CD40, VISTA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4, TGFRβ e combinações dos mesmos. A atividade de secreção de proteínas pode ser avaliada da maneira descrita na seção de Exemplos abaixo.

[0079] Conforme usado no presente documento, o termo “inibidor” se destina a descrever um composto que bloqueia ou reduz uma atividade de um alvo farmacológico (por exemplo, um composto que inibe a função de Sec61 na via de secreção de proteínas). Um inibidor pode atuar com inibição competitiva, sem competição ou não competitiva. Um inibidor pode se ligar de forma reversível ou irreversível e, portanto, o termo inclui compostos que são substratos suicidas de uma proteína ou enzima. Um inibidor pode modificar um ou mais sítios no sítio ativo da proteína ou próximo ao mesmo, ou pode causar uma mudança conformacional em outro local da enzima. O termo inibidor é usado mais amplamente no presente documento do que a literatura científica, de modo a abranger também outras classes de agentes farmacologicamente ou terapeuticamente úteis, tais como agonistas, antagonistas, estimulantes, cofatores e similares.

[0080] Assim, são fornecidos no presente documento métodos para inibir a secreção de proteínas em uma célula. Nesses métodos, uma célula é colocada em contato com um composto descrito no presente documento (por exemplo, um composto de Fórmula (I) ou um composto listado na Tabela A ou B, e sais farmaceuticamente aceitáveis dos itens acima mencionados), ou formulação farmacêutica dos mesmos, em uma quantidade eficaz para inibir a secreção da proteína de interesse. Em algumas modalidades, a célula é contactada in vitro. Em várias modalidades, a célula é contactada in vivo. Em várias modalidades, o contato inclui a administração do composto ou formulação farmacêutica a um sujeito.

[0081] As consequências biológicas de inibição de Sec61 são inúmeras. Por exemplo, a inibição de Sec61 foi sugerida para o tratamento ou prevenção de inflamação e/ou câncer em um sujeito. Portanto, as formulações farmacêuticas para compostos específicos de Sec61 fornecem um meio para administrar um fármaco a um sujeito e tratar essas condições. Conforme usado no presente documento, os termos “tratar”, “tratamento” e similares se referem à eliminação, redução ou melhora de uma doença ou condição e/ou sintomas associados às mesmas. Embora não seja excluído, o tratamento de uma doença ou condição não requer que a doença, condição ou sintomas associados às mesmas sejam completamente eliminados. Conforme usado no presente documento, “tratar”, “em tratamento”, “tratamento” e similares podem incluir “tratamento profilático”, que se refere à redução da probabilidade de desenvolver novamente uma doença ou condição, ou de uma recorrência de uma doença ou condição previamente controlada, em um sujeito que não tem, mas tem risco de ou está suscetível a, desenvolver novamente uma doença ou condição ou uma recorrência da doença ou condição.

O termo “tratar” e sinônimos contempla administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da divulgação a um indivíduo que necessita de tal tratamento.

Dentro do significado da invenção, “tratamento” também inclui profilaxia de recidiva ou profilaxia de fase, bem como o tratamento de sinais, sintomas e/ou disfunções agudos ou crônicos.

O tratamento pode ser orientado sintomaticamente, por exemplo, para suprimir os sintomas.

O mesmo pode ser efetuado durante um curto período de tempo, pode ser orientado a médio prazo ou pode ser um tratamento a longo prazo, por exemplo, no contexto de uma terapia de manutenção.

Conforme usado no presente documento, os termos “prevenir”, “que previne (ou previnem)”, “prevenção”, são reconhecidos na técnica e quando usados em relação a uma condição, tal como uma recorrência local (por exemplo, dor), uma doença, tal como câncer, um complexo de síndrome, tal como insuficiência cardíaca, ou qualquer outra condição médica, é bem compreendido na técnica, e inclui a administração de uma composição que reduz a frequência de, ou retarda o início de, sintomas de uma condição médica em um sujeito em relação a um sujeito que não recebe a composição.

Assim, a prevenção de câncer inclui, por exemplo, reduzir o número de crescimentos cancerosos detectáveis em uma população de pacientes que recebem um tratamento profilático em relação a uma população de controle não tratada e/ou retardar o aparecimento de crescimentos cancerosos detectáveis em uma população tratada em comparação com uma população de controle não tratada, por exemplo, por uma quantidade estatisticamente e/ou clinicamente significativa.

A prevenção de uma infecção inclui, por exemplo, reduzir o número de diagnósticos da infecção em uma população tratada em comparação com uma população de controle não tratada e/ou retardar o início dos sintomas da infecção em uma população tratada em comparação com uma população de controle não tratada.

A prevenção de dor inclui, por exemplo, reduzir a magnitude ou, alternativamente,

retardar as sensações de dor experimentadas por sujeitos em uma população tratada em comparação com uma população de controle não tratada. Conforme usado no presente documento, os termos “paciente” e “sujeito” podem ser usados indistintamente e significam animais, tais como cães, gatos, vacas, cavalos e ovelhas (isto é, animais não humanos) e seres humanos. Pacientes específicos são mamíferos (por exemplo, seres humanos). O termo paciente inclui os sexos masculino e feminino.

[0082] A inibição de secreção de proteínas inflamatórias mediada por Sec61 (por exemplo, TNFα) pode interromper a sinalização de inflamação. Assim, é fornecido no presente documento um método para tratar inflamação em um sujeito administrando-se ao sujeito uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto descrito no presente documento (isto é, um composto de Fórmula (I) ou um composto listado na Tabela A ou B, ou um sal farmaceuticamente aceitável dos itens acima mencionados).

[0083] Além disso, a viabilidade das células cancerosas depende do aumento da secreção de proteínas no ER para a sobrevivência. Portanto, a inibição não seletiva ou parcialmente seletiva de secreção de proteína mediada por Sec61 pode inibir o crescimento tumoral. Alternativamente, no cenário de imunoncologia, os inibidores seletivos de secreção de proteínas de ponto de verificação imunológico segregadas ou transmembranares (por exemplo, PD-1, TIM-3, LAG3, etc.) podem resultar na ativação do sistema imunológico contra vários cânceres.

[0084] Consequentemente, também é fornecido no presente documento um método para tratar câncer em um sujeito administrando-se ao sujeito uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto descrito no presente documento (por exemplo, um composto de Fórmula (I), um composto listado na Tabela A ou B, ou um sal farmaceuticamente aceitável dos itens mencionados anteriormente). Os cânceres especificamente contemplados que podem ser tratados com o uso dos compostos e composições descritos no presente documento incluem, mas sem limitação, melanoma, mieloma múltiplo,

próstata, pulmão, carcinoma de pulmão de células não pequenas, carcinoma de células escamosas, leucemia, leucemia mieloide aguda, leucemia mieloide crônica, linfoma, linfoma anaplásico de células grandes transformado por NPM/ALK, linfoma difuso de células grandes B, tumores neuroendócrinos, mama, linfoma de células do manto, carcinoma de células renais, rabdomiossarcoma, câncer de ovário, câncer endometrial, carcinoma de células pequenas, adenocarcinoma, carcinoma gástrico, carcinoma hepatocelular, câncer pancreático, carcinoma de tireoide, linfoma anaplásico de células grandes, hemangioma, câncer de cabeça e pescoço, bexiga e câncer colorretal. Em alguns casos, o câncer é um tumor sólido. Em vários casos, o câncer é câncer de cabeça e pescoço, carcinoma de células escamosas, carcinoma gástrico ou câncer pancreático.

[0085] Os compostos descritos no presente documento também são contemplados para serem usados na prevenção e/ou tratamento de uma infinidade de doenças, incluindo, mas sem limitação, doenças proliferativas, doenças neurotóxicas/degenerativas, condições isquêmicas, doenças autoimunes e autoinflamatórias, inflamação, doenças relacionadas ao sistema imunológico, HIV, cânceres, rejeição de enxerto de órgão, choque séptico, infecções virais e parasitárias, condições associadas a acidose, degeneração macular, condições pulmonares, doenças de perda muscular, doenças fibróticas, doenças de crescimento ósseo e capilar.

[0086] Exemplos de condições ou doenças hiperproliferativas incluem retinopatia diabética, degeneração macular, nefropatia diabética, glomeruloesclerose, nefropatia por IgA, cirrose, atresia biliar, insuficiência cardíaca congestiva, esclerodermia, fibrose induzida por radiação e fibrose pulmonar (doença pulmonar idiopática, fibrose, doença vascular do colágeno, sarcoidose, doenças pulmonares intersticiais e distúrbios pulmonares extrínsecos).

[0087] As doenças inflamatórias incluem condições agudas (por exemplo, bronquite, conjuntivite, miocardite, pancreatite) e crônicas (por exemplo, colecistite crônica, bronquiectasia, estenose da válvula aórtica, reestenose, psoríase e artrite), juntamente com condições associadas à inflamação, tais como fibrose, infecção e isquemia.

[0088] Os distúrbios de imunodeficiência ocorrem quando uma parte do sistema imunológico não está funcionando corretamente ou não está presente. Os mesmos podem afetar linfócitos B, linfócitos T ou fagócitos e ser hereditários (por exemplo, deficiência de IgA, imunodeficiência combinada grave (SCID), displasia tímica e granulomatosa crônica) ou adquiridos (por exemplo, síndrome da imunodeficiência adquirida (AIDS), vírus da imunodeficiência humana (HIV) e imunodeficiências induzidas por fármacos). As condições imunológicas incluem distúrbios alérgicos, tais como alergias, asma e dermatite atópica como eczema.Outros exemplos de tais condições relacionadas ao sistema imunológico incluem lúpus, artrite reumatoide, esclerodermia, espondilite anquilosante, dermatomiosite, psoríase, esclerose múltipla e doença intestinal inflamatória (tais como colite ulcerativa e doença de Crohn).

[0089] A rejeição de enxerto de tecido/órgão ocorre quando o sistema imunológico ataca por engano as células que estão sendo introduzidas no corpo do hospedeiro. A doença do enxerto contra hospedeiro (GVHD), resultante do transplante alogênico, surge quando as células T do tecido do doador vão para o ataque e atacam os tecidos do hospedeiro. Em todas as três circunstâncias, doença autoimune, rejeição de transplante e GVHD, a modulação do sistema imunológico pelo tratamento do sujeito com um composto ou composição da divulgação pode ser benéfica.

[0090] Também é fornecido um método para tratar uma doença autoimune em um paciente que compreende administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto descrito no presente documento. Uma “doença autoimune”, conforme usado no presente documento, é uma doença ou distúrbio que surge e é dirigida contra os próprios tecidos de um indivíduo. Exemplos de doenças autoimunes incluem, mas sem limitação, respostas inflamatórias, tais como doenças inflamatórias da pele, incluindo psoríase e dermatite (por exemplo, dermatite atópica); esclerodermia sistêmica e esclerose; respostas associadas à doença inflamatória intestinal (tal como doença de Crohn e colite ulcerativa); síndrome de dificuldade respiratória (incluindo síndrome de dificuldade respiratória de adulto (ARDS)); dermatite; meningite; encefalite; uveíte; colite; glomerulonefrite; condições alérgicas, tais como eczema e asma, e outras condições que envolvem infiltração de células T e respostas inflamatórias crônicas; aterosclerose; deficiência de adesão de leucócitos; artrite reumatoide; lúpus eritematoso sistêmico (LES); diabetes mellitus (por exemplo, diabetes mellitus Tipo I ou diabetes mellitus dependente de insulina); esclerose múltipla; síndrome de Reynaud; tireoidite autoimune; encefalomielite alérgica; síndrome de Sjorgen; diabetes juvenil; e respostas imunes associadas à hipersensibilidade aguda e retardada mediada por citocinas e linfócitos T tipicamente encontrados em tuberculose, sarcoidose, polimiosite, granulomatose e vasculite; anemia perniciosa (doença de Addison); doenças que envolvem diapedese de leucócitos; distúrbio inflamatório do sistema nervoso central (SNC); síndrome de lesão de múltiplos órgãos; anemia hemolítica (incluindo, mas sem limitação, crioglobinemia ou anemia Coombs positiva); miastenia grave; doenças mediadas por complexos antígeno-anticorpo; doença antimembranar basal glomerular; síndrome antifosfolipídica; neurite alérgica; doença de Graves; síndrome miastênica de Lambert-Eaton; penfigoide bolhoso; pênfigo; poliendocrinopatias autoimunes; Doença de Reiter; síndrome do homem rígido; Doença de Behçet; arterite de células gigantes; nefrite de complexo imune; Nefropatia por IgA; Polineuropatias IgM; púrpura trombocitopênica imune (PTI) ou trombocitopenia autoimune. Compostos fornecidos no presente documento podem ser úteis para o tratamento de condições associadas à inflamação, incluindo, mas sem limitação, COPD, psoríase, asma, bronquite, enfisema e fibrose cística.

[0091] Também é fornecido no presente documento o uso de um composto conforme aqui divulgado para o tratamento de doenças neurodegenerativas. Doenças e condições neurodegenerativas incluem, mas sem limitação, acidente vascular cerebral, dano isquêmico ao sistema nervoso, trauma neural (por exemplo, dano cerebral percussivo, lesão da medula espinhal e dano traumático ao sistema nervoso), esclerose múltipla e outras neuropatias imunomediadas (por exemplo, síndrome de Guillain-Barre e suas variantes, neuropatia axonal motora aguda, polineuropatia desmielinizante inflamatória aguda e síndrome de Fisher), complexo de demência de HIV/AIDS, axonomia, neuropatia diabética, doença de Parkinson, doença de Huntington, esclerose múltipla, bacteriana, parasitária, meningite fúngica e viral, encefalite, demência vascular, demência de múltiplos infartos, demência de corpo de Lewy, demência do lóbulo frontal, tal como doença de Pick, demências subcorticais (tal como Huntington ou paralisia supranuclear progressiva), síndromes de atrofia cortical focal (tal como afasia primária), demências tóxicas metabólicas (tal como hipotireoidismo crônico ou deficiência de B12) e demências causadas por infecções (tal como sífilis ou meningite crônica).

[0092] Orientação adicional para o uso de compostos e composições descritos no presente documento (por exemplo, um composto de Fórmula (I), um composto listado na Tabela A ou B, ou um sal farmaceuticamente aceitável dos anteriores) para inibir a secreção de proteínas pode ser encontrada na seção de Exemplos, abaixo.

FORMULAÇÕES FARMACÊUTICAS E ADMINISTRAÇÃO

[0093] Os métodos fornecidos no presente documento incluem a fabricação e o uso de composições farmacêuticas, que incluem um ou mais dos compostos fornecidos neste documento. Também estão incluídas as próprias composições farmacêuticas. As composições farmacêuticas incluem tipicamente um carreador farmaceuticamente aceitável. Assim, são fornecidas no presente documento formulações farmacêuticas que incluem um composto aqui descrito (por exemplo, um composto de Fórmula (I), um composto listado na Tabela A ou B, ou um sal farmaceuticamente aceitável do anterior), conforme descrito anteriormente neste documento, e um ou mais carreadores farmaceuticamente aceitáveis.

[0094] A expressão “farmaceuticamente aceitável” é empregada no presente documento de modo a se referir a ligantes, materiais, composições e/ou formas de dosagem que são, dentro do escopo de julgamento médico adequado, adequados para uso em contato com os tecidos de seres humanos e animais sem excesso de toxicidade, irritação, resposta alérgica ou outro problema ou complicação, proporcional a uma razão de benefício/risco razoável.

[0095] A frase “carreador farmaceuticamente aceitável”, conforme usado no presente documento, significa um material, composição ou veículo farmaceuticamente aceitável, tal como uma carga, diluente, excipiente, solvente ou material de encapsulação líquido ou sólido. Conforme usado no presente documento, a linguagem “carreador farmaceuticamente aceitável” inclui tampão, água esterilizada para injeção, solventes, meios de dispersão, revestimentos, agentes antibacterianos e antifúngicos, agentes isotônicos e retardantes de absorção, e similares, compatíveis com a administração farmacêutica. Cada carreador deve ser “aceitável” no sentido de ser compatível com os outros ingredientes da formulação e não prejudicial para o paciente. Alguns exemplos de materiais que podem servir como carreadores farmaceuticamente aceitáveis incluem: (1) açúcares, tais como lactose, glicose e sacarose; (2) amidas, tais como amido de milho, amido de batata e β-ciclodextrina substituída ou não substituída; (3) celulose e derivados da mesma, tais como carboximetilcelulose de sódio, etilcelulose e acetato de celulose; (4) tragacanto em pó; (5) malte; (6) gelatina; (7) talco; (8) excipientes, tais como manteiga de cacau e ceras de supositórios; (9) óleos, tais como óleo de amendoim, óleo de semente de algodão, óleo de cártamo, óleo de gergelim, azeite, óleo de milho e óleo de soja; (10) glicóis, tais como propilenoglicol; (11) polióis, tais como glicerina, sorbitol, manitol e polietilenoglicol; (12) ésteres, tais como oleato de etila e laurato de etila; (13) ágar; (14) agentes tamponantes, tais como hidróxido de magnésio e hidróxido de alumínio; (15) ácido algínico; (16) água livre de pirogênios; (17) solução salina isotônica; (18) solução de Ringer; (19) álcool etílico; (20) soluções de tampão de fosfato; e (21) outras substâncias compatíveis não tóxicas empregadas em formulações farmacêuticas. Em determinadas modalidades, as composições farmacêuticas fornecidas no presente documento são não pirogênicas, isto é, não induzem elevações de temperatura significativas quando administradas a um paciente.

[0096] O termo “sal farmaceuticamente aceitável” se refere aos sais de adição de ácido inorgânico e orgânico relativamente não tóxicos de um composto fornecido no presente documento. Esses sais podem ser preparados in situ durante o isolamento e a purificação finais de um composto fornecido no presente documento, ou reagindo-se separadamente o composto em sua forma de base livre com um ácido orgânico ou inorgânico adequado e isolando o sal assim formado. Os sais representativos incluem o bromidrato, cloridrato, sulfato, bissulfato, fosfato, nitrato, acetato, valerato, oleato, palmitato, estearato, laurato, benzoato, lactato, fosfato, tosilato, citrato, maleato, fumarato, succinato, tartarato, naftilato, mesilato, gluco-heptonato, lactobionato, sais de laurilsulfonato e sais de aminoácidos e similares. (Consultar, por exemplo, Berge et al. (1977) “Pharmaceutical Salts”, J. Pharm. Sci. 66: 1 a 19).

[0097] Em algumas modalidades, um composto fornecido no presente documento pode conter um ou mais grupos funcionais ácidos e, assim, tem capacidade para formar sais farmaceuticamente aceitáveis com bases farmaceuticamente aceitáveis. O termo “sais farmaceuticamente aceitáveis” nesses casos se refere aos sais de adição de base inorgânicos e orgânicos relativamente não tóxicos de um composto fornecido no presente documento. Esses sais também podem ser preparados in situ durante o isolamento e purificação final do composto, ou reagindo-se separadamente o composto purificado em sua forma de ácido livre com uma base adequada, tal como o hidróxido, carbonato ou bicarbonato de um cátion de metal farmaceuticamente aceitável, com amônia, ou com uma amina orgânica primária, secundária ou terciária farmaceuticamente aceitável. Sais alcalinos ou alcalinoterrosos representativos incluem os sais de lítio, sódio, potássio, cálcio, magnésio e alumínio e similares. Aminas orgânicas representativas úteis para a formação de sais de adição de base incluem etilamina, dietilamina, etilenodiamina, etanolamina, dietanolamina, piperazina e similares (consultar, por exemplo, Berge et al., supra).

[0098] Agentes umectantes, emulsificantes e lubrificantes, tais como lauril sulfato de sódio e estearato de magnésio, bem como agentes corantes, agentes de liberação, agentes de revestimento, agentes edulcorantes, aromatizantes e perfumantes, conservantes e antioxidantes também podem estar presentes nas composições.

[0099] As composições preparadas conforme descrito no presente documento podem ser administradas em várias formas, dependendo do distúrbio a ser tratado e da idade, condição e peso corporal do paciente, como é bem- conhecido na técnica. Por exemplo, quando as composições são administradas por via oral, podem ser formuladas como comprimidos, cápsulas, grânulos, pós ou xaropes; ou para administração parenteral, as mesmas podem ser formuladas como injeções (intravenosa, intramuscular ou subcutânea), preparações para infusão em gotas ou supositórios. Para aplicação pela via da membrana mucosa oftálmica, podem ser formuladas como colírios ou pomadas para os olhos. Essas formulações podem ser preparadas por meios convencionais em conjunto com os métodos descritos no presente documento e, se desejado, o ingrediente ativo pode ser misturado com qualquer aditivo ou excipiente convencional, tal como um aglutinante, um agente desintegrante, um lubrificante, um corretivo, um agente solubilizante, um auxiliar de suspensão, um agente emulsionante ou um agente de revestimento.

[00100] Os níveis de dosagem reais dos ingredientes ativos nas composições farmacêuticas fornecidas no presente documento podem ser variados de modo a obter “quantidade terapeuticamente eficaz”, que é uma quantidade do ingrediente ativo eficaz para atingir a resposta terapêutica desejada para um determinado paciente, composição e modo de administração, sem ser tóxico para o paciente.

[00101] A concentração de um composto fornecido no presente documento em uma mistura farmaceuticamente aceitável variará dependendo de vários fatores, incluindo a dosagem do composto a ser administrado, as características farmacocinéticas do composto (ou compostos) empregado e da via de administração. Em algumas modalidades, as composições fornecidas no presente documento podem ser fornecidas em uma solução aquosa que contém cerca de 0,1 a 10% de p/v de um composto aqui divulgado, entre outras substâncias, para administração parenteral. As faixas de dosagem típicas podem incluir de cerca de 0,01 a cerca de 50 mg/kg de peso corporal por dia, administrados em 1 a 4 doses divididas. Cada dose dividida pode conter compostos iguais ou diferentes. A dosagem será uma quantidade terapeuticamente eficaz dependendo de vários fatores incluindo a saúde geral de um paciente e a formulação e via de administração do composto (ou compostos) selecionado.

[00102] Podem ser preparadas formas de dosagem ou composições que contêm um composto, conforme descrito no presente documento, na faixa de 0,005% a 100% com o equilíbrio feito a partir de um carreador não tóxico. Os métodos de preparação dessas composições são conhecidos pelos versados na técnica. As composições contempladas podem conter de 0,001% a 100% de ingrediente ativo, em uma modalidade de 0,1 a 95%, em outra modalidade de 75 a 85%. Embora a dosagem varie dependendo dos sintomas, idade e peso corporal do paciente, da natureza e gravidade do distúrbio a ser tratado ou prevenido, da via de administração e da forma do fármaco, em geral, uma dosagem diária de 0,01 a 2.000 mg do composto é recomendada para um paciente humano adulto e pode ser administrada em uma dose única ou em doses divididas. A quantidade de ingrediente ativo que pode ser combinada com um material carreador para produzir uma forma de dosagem única será geralmente a quantidade do composto que produz um efeito terapêutico.

[00103] Nas jurisdições que proíbem o patenteamento de métodos que são praticados no corpo humano, o significado de “administração” de uma composição a um ser humano deve se restringir à prescrição de uma substância controlada que um sujeito humano se autoadministrará por qualquer técnica (por exemplo, por via oral, inalação, aplicação tópica, injeção, inserção etc.). Deve ser feita a interpretação sensata mais ampla que seja consistente com as leis ou regulamentos que definem a matéria patenteável. Em jurisdições que não proíbem o patenteamento de métodos praticados no corpo humano, a “administração” de composições inclui tanto métodos praticados no corpo humano quanto também as atividades anteriores.

OUTRAS MODALIDADES

[00104] Deve ser entendido que, embora a divulgação seja lida em conjunto com a descrição detalhada da mesma, a descrição acima mencionada se destina a ilustrar e não limitar o escopo da divulgação, que é definido pelo escopo das reivindicações anexas. Outros aspectos, vantagens e modificações estão dentro do escopo das reivindicações a seguir.

EXEMPLOS

[00105] Os exemplos a seguir são fornecidos a título de ilustração e não devem limitar o escopo da invenção.

[00106] O material de partida foi sintetizado com o uso do método descrito em J. Med. Chem. 2016, 59, 2.633 a 2.647. A N-(3-((3- aminopropil)(ciclo-hexilmetil)amino)propil)-4-metilbenzenossulfonamida (0,200 g, 0,523 mmol) em DCM (2,0 ml) foi adicionado DIEA (2 eq, 1,05 mmol, 179 µl) seguido por cloreto de piperidina-1-sulfonila (0,096 g, 0,523 mmol). Após 16 h, a reação foi resfriada bruscamente com bicarbonato de sódio (sat.), extraída com DCM, seca com sulfato de sódio, filtrada e concentrada.

[00107] À N-(3-((ciclo-hexilmetil)(3-((4- metilfenil)sulfonamido)propil)amino)propil)piperidina-1-sulfonamida bruta em DMF (10 ml) foi adicionado NaH (2,5 eq, 1,31 mmol, 0,052 g de uma dispersão a 60% em óleo mineral. A mistura foi agitada durante 1 h, em seguida, foi aquecida a 85 °C e 3-cloro-2-clorometil-1-propano (0,9 eq, 0,471 mmol, 55 µl dissolvidos em 0,5 ml de DMF) foi adicionado ao longo de 4 h. Após aquecimento durante 16 h, a mistura foi resfriada até a temperatura ambiente, diluída com salmoura e água, extraída com acetato de etila (3X), lavada com salmoura, seca com sulfato de sódio, filtrada e concentrada. A cromatografia em coluna flash (de 0 a 60% de hexanos/acetato de etila + 1% de DEA) forneceu o produto de base livre.

[00108] À base livre foi adicionado éter dietílico (1,0 ml) para dissolver e HCl (a 4 N em dioxano, 1,046 mmol, 262 µl). O sal de HCl foi filtrado e seco sob alto vácuo para fornecer o composto A5. MS(EI) para C29H48N4O4S2, encontrado 581 [M+H]+.

[00109] Os seguintes compostos foram sintetizados de maneira similar: N.º IUPAC [M+H]+ 9-(ciclo-hexilmetil)-1-(etanossulfonil)- A6 5-(4-metilbenzenossulfonil)-3- 526 metilideno-1,5,9-triazaciclododecano 9-(ciclo-hexilmetil)-1-(4- metilbenzenossulfonil)-3-metilideno- A7 540 5-(propano-2-sulfonil)-1,5,9- triazaciclododecano

1-(ciclo-hexanossulfonil)-9-(ciclo- hexilmetil)-5-(4- A8 580 metilbenzenossulfonil)-3-metilideno- 1,5,9-triazaciclododecano Via 2

[00110] A (3-aminobutil)carbamato de terc-butila (2,5 g, 13,3 mmols) em DCM (12,5 ml), Na2CO3 sat. (12,5 ml) e NaCl sat. (12,5 ml) foi adicionado TsCl (13,3 mmols, 2,54 g). Após 1 h, a camada orgânica foi lavada com salmoura, seca com sulfato de sódio, filtrada e concentrada para fornecer (3-((4- metilfenil)sulfonamido)butil)carbamato de terc-butila que foi transportado sem purificação adicional.

[00111] Ao tosilato (13,3 mmols) foram adicionados TFA (66,5 mmol, 5,09 ml) e DCM (5,09 ml). Após 2 h, a reação foi concentrada, diluída com NaOH (1N, 30 ml), extraída com DCM (3X30 ml), seca com sulfato de sódio,

filtrada e concentrada para fornecer a amina.

[00112] À amina (10,94 mmols) foram adicionados tolueno (49 ml) e ciclo-hexanocarboxaldeído (1,34 g, 12,0 mmols). A mistura foi refluxada com um aparelho dean stark durante a noite (temperatura externa de 185 °C), em seguida, concentrada, diluída com etanol (absoluto, 19 ml) e NaBH 4 (0,827 g, 21,8 mmols) foi adicionado em porções enquanto a temperatura interna foi mantida a < 20 °C. Após agitação durante 2 h, a mistura foi diluída com água (10 ml), agitada durante 20 min, extraída com DCM (3X), lavada com salmoura, seca com sulfato de sódio, filtrada e concentrada para fornecer a amina. A amina foi diluída com éter dietílico (20 ml) e HCl (conc., aproximadamente 0,3 ml) foi adicionada gota a gota. O sal de HCl rachou dentro de 5 min e foi filtrado com o uso de éter dietílico para lavar. O produto foi seco sob vácuo durante a noite para fornecer cloridrato de N-(4-((ciclo-hexilmetil)amino)butan-2-il)-4- metilbenzenossulfonamida.

[00113] Ao sal de HCl (3,5 mmol) foram adicionados acetonitrila (9 ml), carbonato de sódio (0,99 g, 9,2 mmols), LiI (0,114 g) e 3-bromopropilftalimida (2,30 g). A mistura foi aquecida até 70 °C durante 5 h, altura em que foi filtrada e concentrada. A ftalimida bruta foi transportada sem purificação adicional.

[00114] À ftalimida (3,5 mmols) foram adicionados monoidrato de hidrazina (4,2 ml) e etanol (15 ml). Após aquecimento a 80 °C durante 30 min, a reação foi concluída e o precipitado foi filtrado lavando com etanol. O filtrado foi concentrado e diluído com HCl (a 2 N, 30 ml) e, então, deixado em repouso por 1 h. À mistura aquosa foi adicionado NaOH (a 1 N) para basificar para pH 10. A mistura foi, então, extraída com DCM (3X), seca com sulfato de sódio, filtrada e concentrada para fornecer N-(4-((3-aminopropil)(ciclo-hexilmetil)amino)butan-2- il)-4-metilbenzenossulfonamida bruta.

[00115] À amina (695 mg, 1,76 mmol) foram adicionados DCM (9 ml), Na2CO3 sat. (9 ml),sat. NaCl sat. (9 ml), TsCl (1,76 mmol, 336 mg). Após agitação durante 1 h, a mistura foi extraída com DCM (3X), seca com sulfato de sódio, filtrada e concentrada para fornecer a base livre. O sal de HCl foi produzido diluindo-se a base livre em éter dietílico (50 ml) e adicionando-se HCl (conc., 300 µl). Depois de colocar sob alto vácuo durante 2 h, o sal de HCl (1,02 g) foi coletado.

[00116] Ao sal de HCl (0,400 g, 0,683 mmol) em DMF (14 ml) foi adicionado NaH (3,5 eq, 2,39 mmols, 60% de dispersão em óleo mineral, 80,3 mg). Após agitação durante 1 h, 3-cloro-2-clorometil-1-propano (0,9 eq, 0,615 mmol, 71 µl em 7 ml de DMF) foi adicionado gota a gota ao longo de 3 h. Após aquecimento por mais 2 h, a mistura foi resfriada até a temperatura ambiente, diluída com salmoura, água e acetato de etila. A mistura foi extraída com acetato de etila (2X), lavada com salmoura, seca com sulfato de sódio, filtrada e concentrada. A cromatografia em coluna flash (de 0 a 90% de hexanos/acetato de etila + 1% de DEA) forneceu o produto. O sal de HCl foi formado diluindo-se a base livre em éter dietílico (20 vol.) e adicionando-se HCl (a 4 N em dioxano, 4 eq) para fornecer cloridrato de 5-(ciclo-hexilmetil)-2-metil-11-metileno-1,9- ditosil-1,5,9-triazaciclododecano, composto B1. MS(EI) para C32H47N3O4S2, encontrado 602 [M+H]+.

[00117] Os seguintes compostos foram sintetizados de maneira similar: N.º IUPAC [M+H]+ 1-(ciclo-hexilmetil)-3-metil-5,9- bis(4-metilbenzenossulfonil)-7- B2 602 metilideno-1,5,9- triazaciclododecano N,N-dimetil-4-{[5-(4- metilbenzenossulfonil)-3- A9 metilideno-9-[(oxan-4-il)metil]- 619 1,5,9-triazaciclododecan-1- il]sulfonil}anilina

Via 3

[00118] A N-(3-((ciclo-hexilmetil)(3-((4- metilfenil)sulfonamido)butil)amino)propil)-4-metilbenzenossulfonamida (0,099 mmol) em DMF (10,0 ml) foi adicionado hidreto de sódio (0,350 mmol de uma dispersão a 60% em óleo mineral). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 30 min, em seguida, aquecida até 80 °C antes de ciclopropano-1,1-di- ilbis(metileno)dietanossulfonato (0,099 mmol dissolvido em 1,0 ml de DMF) ao longo de 2 h. Após agitação por mais 4 h a 80 °C, a mistura foi resfriada até a temperatura ambiente, resfriada bruscamente com salmoura, extraída com acetato de etila (3X). Os produtos orgânicos combinados foram lavados com salmoura (2X), secos com sulfato de sódio, filtrados e concentrados. A cromatografia em coluna flash (0 a 60% de hexanos (1% de DEA)/acetato de etila) forneceu o produto de base livre que foi dissolvido em éter dietílico (2 ml) e HCl (0,1 ml de uma solução a 4 N em 1,4-dioxano) foi adicionado. A mistura foi concentrada para fornecer cloridrato de 4-{[9-(ciclo-hexilmetil)-13-(4- metilbenzenossulfonil)-5,9,13-triazaspiro[2.11]tetradecan-5-il]sulfonil}-N,N- dimetilanilina, composto A11. MS(EI) para C33H50N4O4S2, encontrado 631 [M+H]+.

Via 4

[00119] O material de partida foi sintetizado com o uso do método descrito em J. Med. Chem. 2016, 59, 2.633 a 2.647. Ao material de partida (0,327 mmol) em metanol (2,0 ml) sob argônio foi adicionado Pd/C (20 mg). Estabeleceu-se uma atmosfera de hidrogênio e a mistura foi agitada à temperatura ambiente. Após 3 h, a reação foi filtrada e purificada por cromatografia em coluna flash (0 a 80% de hexanos (1% de DEA)/acetato de etila) para fornecer o produto.

[00120] Ao material de partida (0,028 mmol) foi adicionado tolueno (5 ml) seguido pelo aldeído (0,028 mmol). A mistura foi agitada durante 3 h ao refluxo e depois concentrada. À imina foi adicionado etanol seguido por boro- hidreto de sódio. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 30 min, em seguida, diluída com água (1 ml), extraída com DCM (3X1ml), seca com sulfato de sódio, filtrada e concentrada. O produto foi purificado por cromatografia em coluna flash (0 a 60% hexanos (1% de DEA)/acetato de etila).

A base livre foi diluída com éter etílico (1 ml) e foi adicionado HCl (7 µl, a 4 N em dioxano). A mistura foi filtrada para fornecer cloridrato de 4-((9-((4,4-dimetilciclo- hexil)metil)-3-metileno-5-tosil-1,5,9-triazaciclododecan-1-il)sulfonil)-N,N- dimetilanilina (composto A10). MS(EI) para C34H52N4O4S2, encontrado 645 [M+H]+. Via 5

[00121] Para trifosgênio (0,0316 mmol, 9,4 mg) em DCM (100 µl) foi adicionado 1-propanol (0,190 mmol 14 µl). Após agitação durante 45 min, essa solução foi adicionada à amina (0,0158 mmol, 8,2 mg), DIEA (0,126 mmol, 22 µl) e DCM (100 µl). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h, em seguida, purificada diretamente por cromatografia em coluna flash (de 0 a 70% de hexanos/acetato de etila) para fornecer 5-((4-(dimetilamino)fenil)sulfonil)-7- metileno-9-tosil-1,5,9-triazaciclododecano-1-carboxilato de propila (composto A12). MS(EI) para C29H42N4O6S2, encontrado 607 [M+H]+.

Via 6

[00122] O material de partida, 4-((9-(ciclo-hexilmetil)-3-metileno-5- ((2-nitrofenil)sulfonil)-1,5,9-triazaciclododecano-1-il)sulfonil)-N,N-dimetilanilina, foi sintetizado com o uso de um método similar descrito na Via 2 substituindo com os cloretos de sulfonila apropriados.

[00123] Ao material de partida (1,09 g, 1,68 mmol) em ACN (12,3 ml) foi adicionado DBU (0,780 ml, 5,22 mmols) seguido por 2-mercaptoetanol (0,135 ml, 1,92 mmol). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 h, em seguida, foi adicionada uma alíquota adicional de 2-mercaptoetanol (1,14 eq). Após agitação por mais 2 h, a mistura foi concentrada e purificada diretamente por FCC (de 0 a 100% de hexanos (1% de DEA)/acetato de etila). 4-((9-(ciclo-hexilmetil)-3-metileno-1,5,9-triazaciclododecan-1-il)sulfonil)-N,N- dimetilanilina.

[00124] À amina (70 mg, 0,152 mmol) em DCM (2 ml) foi adicionado

DIEA (0,303 mmol, 52 µl) seguido por cloreto de piperidina-1-sulfonila (0,152 mmol, 28 mg). Depois de deixar em repouso durante a noite, a reação foi purificada diretamente por cromatografia em coluna flash (hexanos (1% de DEA)/acetato de etila, 0 a 60%). O sal de HCl do produto foi produzido dissolvendo-se a base livre em éter dietílico (1 ml) e adicionando-se HCl (a 4 N em dioxano, 38 µl). O filtrado foi coletado para fornecer cloridrato de 4-((9-(ciclo- hexilmetil)-3-metileno-5-(piperidin-1-ilsulfonil)-1,5,9-triazaciclododecan-1- il)sulfonil)-N,N-dimetilanilina (composto A15). MS(EI) para C30H51N5O4S2, encontrado 610 [M+H]+.

[00125] Os seguintes compostos foram sintetizados de maneira similar: N.º IUPAC [M+H]+ 9-(ciclo-hexilmetil)-5-[4- (dimetilamino)benzenossulfonil]-N,N-dimetil-3- A16 570 metilideno-1,5,9-triazaciclododecano-1- sulfonamida 4-{[9-(ciclo-hexilmetil)-3-metilideno-5-(piperidina- A13 1-sulfonil)-1,5,9-triazaciclododecan-1-il]sulfonil}- 610 N,N-dimetilanilina Via 7

[00126] O material de partida, N-(3-((ciclo-hexilmetil)(3-((4- (dimetilamino)fenil)sulfonamido)propil)amino)propil)-4- metilbenzenossulfonamida, foi sintetizado com o uso do mesmo método descrito na Via 1 substituindo pelo cloreto de sulfonila apropriado.

[00127] À diamina (49 mg, 0,087 mmol) em DMF (2,5 ml) foi adicionado NaH (0,22 mmol, 9 mg). Após agitação durante 30 min à temperatura ambiente, 1,3-dicloropropano (0,087 mmol, 8,3 µl em 0,5 ml de DMF) foi adicionado lentamente ao longo de 1 h ao mesmo tempo em que se aquece a 80 °C. Após 3 h, a mistura foi resfriada à temperatura ambiente, diluída com salmoura (10 ml), água (5 ml) e acetato de etila (10 ml). A camada aquosa foi extraída com acetato de etila (3 X 5 ml), os produtos orgânicos foram combinados e lavados com salmoura (1 X 5 ml), secos com sulfato de sódio e concentrados. A cromatografia em coluna flash (de 0 a 50% de hexanos (1% de DEA)/acetato de etila) forneceu o produto de base livre que foi convertido no sal de HCl com a adição de éter (1 ml) e, em seguida, HCl (20 µl, a 4 N em dioxano). O filtrado foi coletado e concentrado para fornecer 4-((5-(ciclo-hexilmetil)-9-tosil- 1,5,9-triazaciclododecan-1-il)sulfonil)-N,N-dimetilanilina (composto A14). MS(EI) para C31H48N4O4S2, encontrado 605 [M+H]+.

[00128] O composto a seguir foi sintetizado de maneira similar: N.º IUPAC [M+H]+ 4-{[10-(ciclo-hexilmetil)-14-(piperidina-1-sulfonil)- A17 2-oxa-6,10,14-triazaespiro[3.11]pentadecan-6- 640 il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina

Via 8

[00129] O material de partida foi sintetizado com o uso do método descrito em J. Med. Chem. 2006, 49, 1.291 a 1.312. A N1-(3-aminopropil)-N1- benzilpropano-1,3-diamina (363 mg, 1,64 mmol) em DCM (2 ml) foi adicionado DIEA (1,14 ml, 6,56 ml), em seguida, o cloreto de sulfonila (345 µl, 2,46 mmols). A solução foi deixada em repouso durante a noite à temperatura ambiente. A concentração e a purificação por cromatografia em coluna flash (de 0 a 80% hexanos (1% de DEA)/acetato de etila) forneceu o produto.

[00130] Ao material de partida (260 mg, 504 µl) em DMF (20 ml) foi adicionado NaH (50 mg de uma dispersão a 60% em óleo mineral, 1,26 mmol). A mistura foi agitada a 80 °C durante 20 min, em seguida, o bis-sulfonato (144 mg, 504 µl) foi adicionado ao longo de 1 h. Após aquecimento durante 4 h, a reação foi concluída e foi diluída com acetato de etila (40 ml) e salmoura (40 ml), extraída com acetato de etila (2 X 20 ml). Os produtos orgânicos combinados foram lavados com salmoura (20 ml), secos com sulfato de sódio, filtrados e concentrados. A cromatografia em coluna flash (hexanos (1% de DEA)/acetato de etila de 0 a 50%) forneceu o produto que foi diluído com éter etílico (5 ml) e foi adicionado HCl (a 4 N em dioxano, 100 µl). A mistura foi concentrada, lavada com éter dietílico e seca para fornecer cloridrato de 9-benzil-5,13-bis(piperidin- 1-ilsulfonil)-5,9,13-triazaespiro[2.11]tetradecano (composto A18). MS(EI) para C28H47N5O4S2, encontrado 581 [M+H]+. Via 9

[00131] O material de partida, N-(3-((3-aminopropil)(ciclo- hexilmetil)amino)propil)-4-(dimetilamino)benzenossulfonamida, foi sintetizado com o uso de um método similar ao descrito na Via 2.

[00132] A N-(3-((3-aminopropil)(ciclo-hexilmetil)amino)propil)-4- (dimetilamino)benzenossulfonamida (559 mg, 1,36 mmol) em DCM (2 ml) foi adicionado DIEA (0,71 ml, 4,08 mmols) em seguida o cloreto de sulfonila (250 mg, 1,36 mmol). A solução foi deixada em repouso durante a noite à temperatura ambiente. A concentração e a purificação por cromatografia em coluna flash (de 0 a 80% hexanos (1% de DEA)/acetato de etila) forneceu o produto.

[00133] A ciclização de N-(3-((ciclo-hexilmetil)(3-((4- (dimetilamino)fenil)sulfonamido)propil)amino)propil)piperidina-1-sulfonamida e a formação de sal foi realizada de maneira similar à Via 8 para fornecer cloridrato de 4-((9-(ciclo-hexilmetil)-13-(piperidin-1-ilsulfonil)-5,9,13- triazaespiro[2.11]tetradecan-5-il)sulfonil)-N,N-dimetilanilina (composto A19) MS(EI) para C31H53N5O4S2, encontrado 624 [M+H]+.

[00134] Os compostos a seguir foram sintetizados de maneira similar. A ciclização dos compostos A25, A26, A27, A28 e A29 foi realizada com o uso de NMP como solvente. N.º IUPAC [M+H]+ 4-{[9-(ciclo-hexilmetil)-13-[(2-metilpiperidin-1- A20 il)sulfonil]-5,9,13-triazaespiro[2.11]tetradecan- 638 5-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[9-(ciclo-hexilmetil)-13-[(3-metilpiperidin-1- A21 il)sulfonil]-5,9,13-triazaespiro[2.11]tetradecan- 638 5-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[9-(ciclo-hexilmetil)-13-[(4-metilpiperidin-1- A22 il)sulfonil]-5,9,13-triazaespiro[2.11]tetradecan- 638 5-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[9-(ciclo-hexilmetil)-13-(pirrolidina-1- A23 sulfonil)-5,9,13-triazaespiro[2.11]tetradecan-5- 610 il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[8-(ciclo-hexilmetil)-4-(piperidina-1-sulfonil)- B3 1,4,8-triazacicloundecan-1-il]sulfonil}-N,N- 584 dimetilanilina 4-{[7-(ciclo-hexilmetil)-3-(piperidina-1-sulfonil)- B4 570 1,3,7-triazecan-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[13-(azepano-1-sulfonil)-9-(ciclo-hexilmetil)- A25 638 5,9,13-triazaespiro[2.11]tetradecan-5-

il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[9-(ciclo-hexilmetil)-13-[(4,4-dimetilpiperidin- 1-il)sulfonil]-5,9,13- A26 652 triazaespiro[2.11]tetradecan-5-il]sulfonil}-N,N- dimetilanilina 4-{[9-(ciclo-hexilmetil)-13-[(4-metoxipiperidin-1- A27 il)sulfonil]-5,9,13-triazaespiro[2.11]tetradecan- 654 5-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 1-{[9-(ciclo-hexilmetil)-13-[4- (dimetilamino)benzenossulfonil]-5,9,13- A28 640 triazaespiro[2.11]tetradecan-5- il]sulfonil}piperidin-4-ol 4-{[9-(ciclo-hexilmetil)-13-[(4-fenilpiperidin-1- A29 il)sulfonil]-5,9,13-triazaespiro[2.11]tetradecan- 700 5-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina Via 10

[00135] À amina (67 mg, 0,14 mmol) em DCM (12 ml) foi adicionado DIEA (35 mg, 0,27 mmol) seguido por cloreto de 4-clorobenzoíla (24 mg, 0,14 mmol). Após permanecer à temperatura ambiente durante 30 min, a reação foi resfriada bruscamente com bicarbonato de sódio (sat.), extraída com DCM (3X), seca com sulfato de sódio e filtrada. A cromatografia em coluna flash (0 a 60%

de hexanos (1% de DEA)/acetato de etila) forneceu (5,13-bis(piperidin-1- ilsulfonil)-5,9,13-triazaespiro[2.11]tetradecan-9-il)(4-clorofenil)metanona (composto A24). MS(EI) para C28H44ClN5O5S2, encontrado 630 [M+H]+. Via 11

[00136] A uma solução de N,N-3-trimetilanilina (1,35 g, 10,0 mmols) em CHCl3 (4 ml) foi adicionado ácido clorossulfônico (4 ml). A mistura de reação foi aquecida até 80 °C por 18 horas. A mistura foi resfriada até a temperatura ambiente e diluída com DCM (20 ml). A mistura resultante foi vertida em água gelada (30 ml) e depois ajustada a pH = 7 a aproximadamente 8 com Na2CO3 aquoso saturado. A camada orgânica foi separada, lavada com NaHCO3 aquoso saturado, seca sobre Na2SO4 anidro e concentrada. O resíduo foi recristalizado a partir de éter de petróleo/EtOAc (10:1, 10 ml) para fornecer cloreto de 4- (dimetilamino)-2-metilbenzenossulfonila. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,88 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 6,53 (m, 2H), 3,09 (s, 6H), 2,70 (s, 3H).

[00137] 4-{[9-(ciclo-hexilmetil)-13-(piperidina-1-sulfonil)-5,9,13- triazaspiro[2.11]tetradecan-5-il]sulfonil}-N,N,3-trimetilanilina foi preparada seguindo o procedimento descrito na Via 12 para fornecer o composto A30. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 9,57 (br s, 1H), 7,50 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 6,85 (m, 2H), 3,95 (br s, 1H), 2,89 a aproximadamente 3,55 (m, 24H), 1,45 a aproximadamente 1,90 (m, 15H), 1,28 (m, 4H), 0,95 (m, 2H), 0,66 (br s, 4H). MS(EI) para C32H55N5O4S2, encontrado 638 [M+H]+.

[00138] O composto a seguir foi sintetizado de maneira similar: N.º IUPAC [M+H]+ RMN de 1H RMN de 1H (400 MHz, 5-(ciclo-hexanossulfonil)-9- DMSO-d6): δ 9,46 (br s, (ciclo-hexilmetil)-13-(piperidina- A41 587 1H), 3,37 a 2,95 (m, 15H), 1-sulfonil)-5,9,13- 2,01 a 1,01 (m, 33H), 0,95 triazaespiro[2.11]tetradecano (m, 2H), 0,73 (m, 4H).

Via 12

[00139] A uma solução de cloreto de piperidina-1-sulfonila (68,3 g,

0,37 mol) em tolueno (350 ml) foi adicionada gota a gota uma solução de propano-1,3-diamina (83,4 g, 1,12 mol) em tolueno (150 ml). A mistura de reação foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. A pasta resultante foi filtrada e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em sílica gel (DCM/MeOH = 50:1 a 20:1) para fornecer N-(3- aminopropil)piperidina-1-sulfonamida.RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 3,17 (m, 6H), 2,88 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 1,65 (m, 6H), 1,54 (m, 2H).

[00140] Uma mistura de N-(3-aminopropil)piperidina-1-sulfonamida (22,62 mmols) e ciclo-hexanocarbaldeído (2,8 g, 24,89 mmols) em tolueno (90,0 ml) foi aquecida sob refluxo durante a noite com remoção de água por meio de um aparelho Dean-Stark. A mistura foi resfriada até a temperatura ambiente e concentrada sob vácuo. O produto resultante foi dissolvido em etanol (35 ml) e NaBH4 foi adicionado (1,66 g, 43,7 mmols). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A reação foi resfriada bruscamente com HCl aquoso a 2 N (30 ml) e depois ajustada a pH = 10 com NaOH aquoso. A mistura resultante foi extraída com acetato de etila (50 ml) e a camada orgânica foi concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre gel de sílica (DCM/MeOH = 50:1 a 40:1) para fornecer N-(3-(ciclo- hexilmetilamino)propil)piperidina-1-sulfonamida. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 3,17 (m, 6H), 2,78 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 2,45 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 1,75 (m, 12H), 1,44 (m, 1H), 1,23 (m, 3H), 0,96 (m, 2H). MS(EI) para C15H31N3O2S, encontrado 318 [M+H]+.

[00141] A uma solução de N-(3-(ciclo- hexilmetilamino)propil)piperidina-1-sulfonamida (2,8 g, 8,83 mmols) em CH3CN (50 ml) foram adicionados Na2CO3 (0,97 g, 9,19 mmols), LiI (0,28 g, 2,12 mmol) e 3-bromopropilftalimida (5,66 g, 21,19 mmols). A mistura de reação foi aquecida sob refluxo durante a noite. A mistura foi resfriada até a temperatura ambiente e filtrada. O filtrado foi concentrado e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (EtOAc/éter de petróleo = 1:3) para fornecer N-(3-((ciclo- hexilmetil)(3-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)propil)amino)propil)piperidina-1-

sulfonamida. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,85 (m, 2H), 7,73 (m, 2H), 5,82 (br s, 1 H), 3,68 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 3,17 (m, 6H), 2,46 (m, 4H), 2,14 (m, 2H), 1,82 (m, 2H), 1,67 (m 12H), 1,45 (m, 3H), 1,18 (m, 2H), 0,87 (m, 2H).

[00142] A uma solução de N-(3-((ciclo-hexilmetil)(3-(1,3- dioxoisoindolin-2-il)propil) amino)propil)piperidina-1-sulfonamida (500 mg, 0,10 mmol) em EtOH (5 ml) foi adicionado NH2NH2 (1,5 ml, 2,55 mmols). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi diluído com acetato de etila (20 ml). A mistura resultante foi lavada com água (2 x 10 ml). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro e concentrada para fornecer N-(3-((3- aminopropil)(ciclo-hexilmetil)amino)propil)piperidina-1-sulfonamida (380 mg, quantitativo). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 3,17 (m, 6H), 2,78 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 2,45 (m, 4H), 2,14 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 1,82 (m, 2H), 1,67 (m 12H), 1,45 (m, 3H), 1,18 (m, 2H), 0,87 (m, 2H). MS(EI) para C18H38N4O2S, encontrado 375 [M+H]+.

[00143] A uma solução de N-(3-((3-aminopropil)(ciclo- hexilmetil)amino)propil)piperidina-1-sulfonamida (2,42 g, 6,49 mmols) e DIEA (1,31 g, 10,3 mmol) em DCM (50 ml) foi adicionado o cloreto de sulfonila (1,69 g, 7,13 mmols). A mistura de reação foi agitada em RT por 2 h. A mistura foi lavada com água (50 ml). A fase orgânica foi seca sobre Na 2SO4 anidro e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (MeOH/DCM = 1:80 a 1:30) para fornecer N-(3-((ciclo-hexilmetil)(3-(4- (dimetilamino)-2-fluorofenilsulfonamido)propil)amino)propil)piperidina-1- sulfonamida. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,66 (m, 1H), 6,43 (m, 2H), 5,58 (br s, 2H), 3,15 (m, 6H), 3,03 (s, 6H), 2,99 (br s, 2H) 2,46 (br s, 4H), 2,12 (br s, 2H), 1,30 a aproximadamente 1,70 (m, 18H), 1,21 (m, 4H), 0,82 (m, 2H). MS(EI) para C26H46FN5O4S2, encontrado 575 [M+H]+.

[00144] A uma solução de N-(3-((ciclo-hexilmetil)(3-(4- (dimetilamino)-2-fluorofenilsulfonamido)propil)amino)propil)piperidina-1- sulfonamida (2,28 g, 3,97 mmols) em DMF (20 ml) foi adicionado hidreto de sódio

(400 mg, 3,97 mmols). A mistura foi agitada durante 30 min à temperatura ambiente. Ciclopropano-1,1-di-ilbis(metileno)dietanossulfonato (1,3 g, 3,97 mmols) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada a 80 °C durante 2 h. A mistura foi resfriada à temperatura ambiente e vertida em água (150 ml). A mistura resultante foi extraída com acetato de etila (100 ml). A camada orgânica foi lavada com água (50 ml × 2), seca sobre sulfato de sódio anidro e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre gel de sílica (EtOAc/éter de petróleo = 1:15 a 1:8) para fornecer a base livre que foi dissolvida em éter (5 ml). Foi adicionado ácido clorídrico (1,5 ml ou uma solução a 3 N em 1,4-dioxano) e a mistura foi agitada durante 0,5 h. O solvente foi removido sob vácuo e o resíduo foi triturado com éter três vezes para fornecer o composto A40. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 9,89 (br s, 1H), 7,54 (m, 1H), 6,63 (m, 2H), 3,67 (br s, 1H), 3,55 a 2,89 (m, 23H), 1,90 a 1,45 (m, 15H), 1,28 (m, 4H), 0,95 (m, 2H), 0,69 (m, 4H). MS(EI) para C31H52FN5O4S2, encontrado 643 [M+H]+.

[00145] Os seguintes compostos foram sintetizados de maneira similar: N.º IUPAC [M+H]+ RMN de 1H RMN de 1H (400 MHz, DMSO- d6): δ 9,75 (br s, 1H), 7,73 (d, J 9-(ciclo-hexilmetil)-5-(4- = 8,8 Hz, 2H), 7,16 (d, J = 8,8 metoxibenzenossulfonil)-13- A31 611 Hz, 2H), 3,85 (s, 3H), 3,55 a (piperidina-1-sulfonil)-5,9,13- 2,89 (m, 18H), 1,90 a 1,45 (m, triazaespiro[2.11]tetradecano 15H), 1,28 (m, 4H), 0,95 (m, 2H), 0,66 (m, 4H). 9-(ciclo-hexilmetil)-5-(3- RMN de 1H (400 MHz, DMSO- metoxibenzenossulfonil)-13- d6): δ 9,89 (br s, 1H), 7,57 (m, A32 611 (piperidina-1-sulfonil-5,9,13- 1H), 7,32 (m, 2H), 7,23 (s, 1H), triazaespiro[2.11]tetradecano 3,85 (s, 3H), 3,55 a 2,89 (m,

18H), 2,04 a 1,45 (m, 15H), 1,28 (m, 4H), 0,95 (m, 2H), 0,67 (m, 4H). RMN de 1H (400 MHz, DMSO- d6): δ 9,35 (br s, 1H), 7,80 (m, 9-(ciclo-hexilmetil)-5-(2- 1H), 7,68 (m, 1H), 7,28 (m, 1H), metoxibenzenossulfonil)-13- 7,13 (m, 1H), 3,89 (s, 3H), 3,55 A33 611 (piperidina-1-sulfonil)-5,9,13- a 2,89 (m, 18H), 1,90 a 1,45 (m, triazaespiro[2.11]tetradecano 15H), 1,28 (m, 4H), 0,95 (m, 2H), 0,66 (br s, 2H), 0,51 (br s, 2H). RMN de 1H (400 MHz, DMSO- 5-(benzenossulfonil)-9-(ciclo- d6): δ 10,26 (br s, 1H), 7,76 (m, hexilmetil)-13-(piperidina-1- A34 581 4H), 3,41 a 2,89 (m, 18H), 1,90 sulfonil)-5,9,13- a 1,45 (m, 15H), 1,28 (m, 4H), triazaespiro[2.11]tetradecano 0,95 (m, 2H), 0,73 (br s, 4H). Via 13

[00146] A trifluorossulfonato de 1-((1H-imidazol-1-il)sulfonil)-3-metil- 1H-imidazol-3-io (1,69 g, 4,65 mmols, referência: J. Org. Chem. 2002, 68, 115 a 119) e 4-fenilpiperidina (750 mg, 4,65 mmols) foi adicionado ACN (16 ml) e a solução foi deixada repousar por 2 h, em seguida, concentrada e purificada diretamente por cromatografia em coluna flash (de 0 a 80% de hexanos/acetato de etila) para fornecer o produto.

[00147] A 1-((1H-imidazol-1-il)sulfonil)-4-fenilpiperidina (600 mg,

2,06 mmols) em DCM a 0 °C foi adicionado triflato de metila (0,23 ml, 2,06 mmols) ao longo de 5 min. Depois de deixar repousar por 30 min, a mistura foi concentrada para fornecer trifluorometanossulfonato de 3-metil-1-((4- fenilpiperidin-1-il)sulfonil)-1H-imidazol-3-io que foi transportado sem purificação adicional. MS(EI) para C15H20N3O2S, encontrado 307 [M]+.

[00148] Os seguintes compostos foram sintetizados de maneira semelhante: Trifluorometanossulfonato de 1-((8-cloro-3,4-di-hidroisoquinolin- 2(1H)-il)sulfonil)-3-metil-1H-imidazol-3-io (intermediário para o composto A51). Trifluorometanossulfonato de 1-((7-cloro-3,4-di-hidroisoquinolin- 2(1H)-il)sulfonil)-3-metil-1H-imidazol-3-io (intermediário para o composto A52). Trifluorometanossulfonato de 1-((6-cloro-3,4-di-hidroisoquinolin- 2(1H)-il)sulfonil)-3-metil-1H-imidazol-3-io (intermediário para o composto A53). Trifluorometanossulfonato de 1-((5-cloro-3,4-di-hidroisoquinolin- 2(1H)-il)sulfonil)-3-metil-1H-imidazol-3-io (intermediário para o composto A54). Trifluorometanossulfonato de 1-((6-fluoro-3,4-di-hidroisoquinolin- 2(1H)-il)sulfonil)-3-metil-1H-imidazol-3-io (intermediário para o composto A59). Trifluorometanossulfonato de 1-((6-bromo-3,4-di-hidroisoquinolin- 2(1H)-il)sulfonil)-3-metil-1H-imidazol-3-io (intermediário para o composto A60). Cloridrato de trifluorometanossulfonato de 1-((4-isopropoxipiperidin- 1-il)sulfonil)-3-metil-1H-imidazol-3-io (intermediário para o composto A66). Trifluorometanossulfonato de 1-((4-(ciclopent-1-en-1-il)-3,6-di- hidropiridin-1(2H)-il)sulfonil)-3-metil-1H-imidazol-3-io (intermediário para o composto A67). Trifluorometanossulfonato de 1-((4-(ciclo-hex-1-en-1-il)-3,6-di- hidropiridin-1(2H)-il)sulfonil)-3-metil-1H-imidazol-3-io (intermediário para o composto A68). Trifluorometanossulfonato de 1-((4-(3-clorofenil)-3,6-di-hidropiridin- 1(2H)-il)sulfonil)-3-metil-1H-imidazol-3-io (intermediário para o composto A69). Trifluorometanossulfonato de 1-((4-(2-clorofenil)-3,6-di-hidropiridin-

1(2H)-il)sulfonil)-3-metil-1H-imidazol-3-io (intermediário para o composto A73). Trifluorometanossulfonato de 1-((4-(4-clorofenil)-3,6-di-hidropiridin- 1(2H)-il)sulfonil)-3-metil-1H-imidazol-3-io (intermediário para o composto A74). Trifluorometanossulfonato de 1-((4-(1H-pirazol-1-il)piperidin-1- il)sulfonil)-3-metil-1H-imidazol-3-io (intermediário para o composto A79). Trifluorometanossulfonato de 1-((4-(benzo[d]oxazol-2-il)piperidin-1- il)sulfonil)-3-metil-1H-imidazol-3-io (intermediário para o composto A80). Trifluorometanossulfonato de 3-metil-1-((4-(pirimidin-2-il)piperidin-1- il)sulfonil)-1H-imidazol-3-io (intermediário para o composto A81). Trifluorometanossulfonato de 1-((2-cloro-7,8-di-hidro-1,6-naftiridin-6 (5H)-il)sulfonil)-3-metil-1H-imidazol-3-io (intermediário para o composto A82). Trifluorometanossulfonato de 1-((5-cloroisoindolin-2-il)sulfonil)-3- metil-1H-imidazol-3-io (intermediário para o composto A89). Via 14

[00149] A 4-((9-(ciclo-hexilmetil)-3-metileno-1,5,9- triazaciclododecan-1-il)sulfonil)-N,N-dimetilanilina (97 mg, 0,21 mmol) em ACN (0,8 ml) foi adicionado trifluorometanossulfonato de 3-metil-1-((4-fenilpiperidin-1- il)sulfonil)-1H-imidazol-3-io (95 mg, 0,21 mmol) e a mistura foi aquecida até 80 °C por 8 h, em seguida, concentrada e purificada diretamente por cromatografia em coluna flash (de 0 a 70% de hexanos (1% de DEA)/acetato de etila) para fornecer a base livre. À mesma adicionou-se éter dietílico (5 ml) e HCl (52 µl de um HCl a 4 N em 1,4-dioxano) e a mistura foi deixada em repouso por 10 min,

em seguida, concentrada para fornecer cloridrato de 4-{[9-(ciclo-hexilmetil)-3- metilideno-5-[(4-fenilpiperidin-1-il)sulfonil]-1,5,9-triazaciclododecan-1-il]sulfonil}- N,N-dimetilanilina (composto A35). MS(EI) para C36H55N5O4S2, encontrado 686 [M+H]+.

[00150] Os seguintes compostos foram sintetizados de maneira similar: N.º IUPAC [M+H]+ 4-{[9-(ciclo-hexilmetil)-3-metilideno-5-[(4-fenilpiperazin- A36 1-il)sulfonil]-1,5,9-triazaciclododecan-1-il]sulfonil}-N,N- 687 dimetilanilina 4-{[9-(ciclo-hexilmetil)-3-metilideno-5-[(4-fenoxipiperidin- A37 1-il)sulfonil]-1,5,9-triazaciclododecan-1-il]sulfonil}-N,N- 702 dimetilanilina 4-{[9-(ciclo-hexilmetil)-3-metilideno-5-[(3-fenilpiperidin-1- A38 il)sulfonil]-1,5,9-triazaciclododecan-1-il]sulfonil}-N,N- 686 dimetilanilina 1-{[9-(ciclo-hexilmetil)-5-[4- A39 (dimetilamino)benzenossulfonil]-3-metilideno-1,5,9- 635 triazaciclododecan-1-il]sulfonil}piperidina-4-carbonitrila 4-{[5-(ciclo-hexilmetil)-9-[(4-fenilpiperidin-1-il)sulfonil]- A42 674 1,5,9-triazaciclododecan-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[9-(ciclo-hexilmetil)-3-metilideno-5-{[(3S)-3- A43 fenilpiperidin-1-il]sulfonil}-1,5,9-triazaciclododecano-1- 686 il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[9-(ciclo-hexilmetil)-5-{[(3R)-3-metil-4-fenilpiperazin- A46 1-il]sulfonil}-3-metilideno-1,5,9-triazaciclododecan-1- 701 il]sulfonil}-N, N-dimetilanilina 4-{[9-(ciclo-hexilmetil)-5-{[(3S)-3-metil-4-fenilpiperazin- A47 701 1-il]sulfonil}-3-metilideno-1,5,9-triazaciclododecan-1-

il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina

4-{[9-(ciclo-hexilmetil)-5-[4- A48 (dimetilamino)benzenossulfonil]-3-metilideno-1,5,9- 701 triazaciclododecan-1-il]sulfonil}-1-fenilpiperazin-2-ona 4-{[9-(ciclo-hexilmetil)-3-metilideno-5-{[(3R)-3- A49 fenilpiperidin-1-il]sulfonil}-1,5,9-triazaciclododecano-1- 686 il]sulfonil}-N, N-dimetilanilina

4-{[9-(ciclo-hexilmetil)-3-metilideno-5-(1,2,3,4-tetra- A50 hidroisoquinolina-2-sulfonil)-1,5,9-triazaciclododecan-1- 658 il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina

Via 15

[00151] A N-(3-((3-aminopropil)(ciclo-hexilmetil)amino)propil)-4- (dimetilamino)benzenossulfonamida (838 mg, 1,84 mmol) em ACN (5 ml) foi adicionado trifluorometanossulfonato de 3-metil-1-((4-fenilpiperidin-1-il)sulfonil)- 1H-imidazol-3-io (838 mg, 1,84 mmol) e a mistura foi aquecida até 80 °C por 8 h, concentrada e purificada diretamente por cromatografia em coluna flash (0 a 70% de hexanos (1% de DEA)/acetato de etila) para fornecer o produto. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,68 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,33 (m, 5H), 6,68 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 5,75 (br s, 2H), 3,84 (m, 2H), 3,18 (m, 2H), 3,05 (s, 6H), 2,91 (m, 4H), 2,65 (m, 1H), 2,43 (m, 4H), 2,08 (m, 2H), 1,73 (m, 12H), 1,40 (m, 1H), 1,15 (m, 4H),

0,85 (m, 2H).

[00152] A 4-((9-(ciclo-hexilmetil)-3-metil-5-((4-fenilpiperidin-1- il)sulfonil)-1,5,9-triazaciclododecano-1-il)sulfonil)-N,N-dimetilanilina (123 mg, 0,194 mmol) em NMP (10 ml) foi adicionado hidreto de sódio (19 mg de uma dispersão a 60% em óleo mineral, 0,485 mmol) ao longo de 20 min. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos e depois a 80 °C durante mais 20 minutos. O bis-sulfonato foi, então, adicionado ao longo de 1 h. Após 8 h a 80 °C, a mistura foi resfriada até a temperatura ambiente, diluída com salmoura e acetato de etila, extraída com acetato de etila (3X), os produtos orgânicos combinados foram lavados com salmoura (3X), secos com sulfato de sódio, filtrados e concentrados. A cromatografia em coluna flash (0 a 50% de hexanos (1% de DEA)/acetato de etila) forneceu a base livre. A base livre foi convertida no sal de HCl com a adição de éter etílico (5 ml) e HCl (a 4 N em dioxano, 50 µl). A concentração após 10 min forneceu cloridrato de 4-{[9-(ciclo- hexilmetil)-3-metil-5-[(4-fenilpiperidin-1-il)sulfonil]-1,5,9-triazaciclododecan-1- il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina (composto A44). MS(EI) para C36H57N5O4S2, encontrado 688 [M+H]+.

[00153] O composto a seguir foi sintetizado de maneira similar: N.º IUPAC [M+H]+ N-{3-[(ciclo-hexilmetil)(3-{[(4-fenilpiperidin-1- B7 il)sulfonil]amino}propil)amino]propil}-4- 634 (dimetilamino)benzeno-1-sulfonamida Via 16

[00154] A 1,1-bis(hidroximetil)ciclopropano (5,00, 49,0 mmols) em acetona (20 ml) foi adicionado TEA (2,2 eq, 108 mmols) e a mistura foi resfriada até 0 a 5 °C. Cloreto de etanossulfonila foi adicionado a uma taxa para manter a temperatura interna abaixo de 10 °C (por aproximadamente 1 h). Após agitação por mais 2 h à temperatura ambiente, a mistura foi diluída com 150 ml de água, extraída com acetato de etila (2 X 50 ml), lavada com salmoura, seca com sulfato de sódio, filtrada e concentrada para fornecer o produto. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 4,16 (s, 4H), 3,20 (m, 4H), 1,46 (t, J = 7,2 Hz, 6H), 0,83 (s, 4H). MS(EI) para C9H18O6S2, encontrado 287 [M+H]+.

[00155] O composto a seguir foi sintetizado de maneira similar para dietanossulfonato de 2-metilpropano-1,3-di-ila (intermediário para o composto A44). Via 17

[00156] A N-(3-((ciclo-hexilmetil)(3-((4- (dimetilamino)fenil)sulfonamido)propil)amino)propil)-4-fenilpiperidina-1- sulfonamida (89 mg, 0,14 mmol) em NMP (7 ml) foi adicionado NaH (14 mg de uma dispersão a 60% em óleo mineral, 0,35 mmol) em porções durante 20 min. A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 30 min, então, 80 °C por 20 min. O dicloreto foi, então, adicionado e a mistura foi aquecida até 80 °C. Após 8 h a 80 °C, a mistura foi resfriada até a temp. ambiente, diluída com salmoura e acetato de etila, extraída com acetato de etila (3X), os produtos orgânicos combinados foram lavados com salmoura (3X), secos com sulfato de sódio, filtrados e concentrados. A cromatografia em coluna flash (0 a 50% de hexanos (1% de DEA)/acetato de etila) proporcionou o produto. O produto foi convertido no sal de HCl com a adição de éter etílico (5 ml) e HCl (a 4 N em dioxano, 35 µl). A mistura foi concentrada para fornecer cloridrato de 4-{[5-(ciclo-hexilmetil)-9-[(4- fenilpiperidin-1-il)sulfonil]-1,5,9-triazaciclotridecan-1-il]sulfonil}-N,N- dimetilanilina (composto B5). MS(EI) para C36H57N5O4S2, encontrado 688 [M+H]+.

[00157] Os seguintes compostos foram sintetizados de maneira similar: N.º IUPAC [M+H]+ 4-{[(11Z)-5-(ciclo-hexilmetil)-9-[(4-fenilpiperidin-1- B8 il)sulfonil]-1,5,9-triazaciclotridec-11-en-1-il]sulfonil}-N,N- 686 dimetilanilina 4-{[(11E)-5-(ciclo-hexilmetil)-9-[(4-fenilpiperidin-1- B9 il)sulfonil]-1,5,9-triazaciclotridec-11-en-1-il]sulfonil}-N,N- 686 dimetilanilina

Via 18

[00158] N-(4-((3-aminopropil)(ciclo-hexilmetil)amino)butan-2-il)-4- (dimetilamino)benzenossulfonamida foi sintetizada seguindo a Via 2 com substituição do cloreto de sulfonila apropriado.

[00159] 4-((5-(ciclo-hexilmetil)-2-metil-11-metileno-9-((4- fenilpiperidin-1-il)sulfonil)-1,5,9-triazaciclododecan-1-il)sulfonil)-N,N- dimetilanilina foi sintetizada após o procedimento descrito na Via 15 que substitui por 3-cloro-2-(clorometil)prop-1-eno para fornecer 4-((5-(ciclo-hexilmetil)-2-metil- 11-metileno-9-((4-fenilpiperidin-1-il)sulfonil)-1,5,9-triazaciclododecan-1- il)sulfonil)-N,N-dimetilanilina (composto B6). MS(EI) para C37H57N5O4S2, encontrado 700 [M+H]+.

[00160] Os seguintes compostos foram sintetizados de maneira similar:

N.º IUPAC [M+H]+ RMN de 1H 4-{[5-(ciclo-hexilmetil)-2-metil- 11-metilideno-9-[(4- B19 fenilpiperidin-1-il)sulfonil]- 700 1,5,9-triazaciclododecano-1- il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-({5-[(8-cloro-1,2,3,4-tetra- hidroisoquinolin-2-il)sulfonil]- 9-(ciclo-hexilmetil)-3- A51 692 metilideno-1,5,9- triazaciclododecan-1- il}sulfonil)-N,N-dimetilanilina 4-({5-[(7-cloro-1,2,3,4-tetra- hidroisoquinolin-2-il)sulfonil]- 9-(ciclo-hexilmetil)-3- A52 692 metilideno-1,5,9- triazaciclododecan-1- il}sulfonil)-N,N-dimetilanilina RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,59 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,15 4-({5-[(6-cloro-1,2,3,4-tetra- (m, 2H), 7,04 (m, 1H), 6,70 (d, J hidroisoquinolin-2-il)sulfonil]- = 8,8 Hz, 2H), 5,25 (s, 1H), 5,13 9-(ciclo-hexilmetil)-3- (s, 1H), 4,34 (s, 2H), 4,12 (s, A53 692 metilideno-1,5,9- 2H), 4,10 (s, 2H), 3,51 (m, 6H), triazaciclododecan-1- 3,05 (s, 6H), 2,88 (m, 4H), 2,41 il}sulfonil)-N,N-dimetilanilina (m, 2H), 2,25 (m, 2H), 1,95 (m, 2H), 1,85 (m, 2H), 1,67 (m, 6H), 1,23 (m, 4H), 0,85 (m, 1H).

4-({5-[(5-cloro-1,2,3,4-tetra- hidroisoquinolin-2-il)sulfonil]- 9-(ciclo-hexilmetil)-3- A54 692 metilideno-1,5,9- triazaciclododecan-1- il}sulfonil)-N,N-dimetilanilina 4-({5-[(6-cloro-1,2,3,4-tetra- hidroisoquinolin-2-il)sulfonil]- 9-(ciclo-hexilmetil)-3- A56 metilideno-1,5,9- 710 triazaciclododecan-1- il}sulfonil)-3-fluoro-N,N- dimetilanilina 4-[(5-{[4-(2- clorofenil)piperidin-1- il]sulfonil}-9-(ciclo-hexilmetil)- A57 720 3-metilideno-1,5,9- triazaciclododecano-1- il)sulfonil]-N,N-dimetilanilina 4-[(5-{[4-(3- clorofenil)piperidin-1- il]sulfonil}-9-(ciclo-hexilmetil)- A58 720 3-metilideno-1,5,9- triazaciclododecano-1- il)sulfonil]-N,N-dimetilanilina 4-{[9-(ciclo-hexilmetil)-5-[(6- fluoro-1,2,3,4-tetra- A59 676 hidroisoquinolin-2-il)sulfonil]- 3-metilideno-1,5,9-

triazaciclododecan-1- il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-({5-[(6-bromo-1,2,3,4-tetra- hidroisoquinolin-2-il)sulfonil]- 9-(ciclo-hexilmetil)-3- A60 736 metilideno-1,5,9- triazaciclododecan-1- il}sulfonil)-N,N-dimetilanilina 4-{[9-(ciclo-hexilmetil)-5-[(4- ciclopentilpiperidin-1- A64 il)sulfonil]-3-metilideno-1,5,9- 678 triazaciclododecan-1- il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[9-(ciclo-hexilmetil)-5-[(4- ciclo-hexilpiperidin-1- A65 il)sulfonil]-3-metilideno-1,5,9- 692 triazaciclododecano-1- il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[9-(ciclo-hexilmetil)-3- metilideno-5-{[4-(propan-2- A66 iloxi)piperidin-1-il]sulfonil}- 668 1,5,9-triazaciclododecan-1- il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[9-(ciclo-hexilmetil)-5-{[4- (ciclopent-1-en-1-il)-1,2,3,6- tetra-hidropiridin-1-il]sulfonil}- A67 674 3-metilideno-1,5,9- triazaciclododecan-1- il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina

4-[(5-{[4-(ciclo-hex-1-en-1-il)- 1,2,3,6-tetra-hidropiridin-1- il]sulfonil}-9-(ciclo-hexilmetil)- A68 688 3-metilideno-1,5,9- triazaciclododecan-1- il)sulfonil]-N,N-dimetilanilina 4-[(5-{[4-(3-clorofenil)-1,2,3,6- tetra-hidropiridin-1-il]sulfonil}- 9-(ciclo-hexilmetil)-3- A69 718 metilideno-1,5,9- triazaciclododecano-1- il)sulfonil]-N,N-dimetilanilina 2-{[9-(ciclo-hexilmetil)-5-[4- (dimetilamino)benzenossulfo nil]-3-metilideno-1,5,9- A70 triazaciclododecan-1- 683 il]sulfonil}-1,2,3,4-tetra- hidroisoquinolina-6- carbonitrila 4-{[9-(ciclo-hexilmetil)-5-[(6- metóxi-1,2,3,4-tetra- hidroisoquinolin-2-il)sulfonil]- A71 688 3-metilideno-1,5,9- triazaciclododecan-1- il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-[(5-{[4-(4- clorofenil)piperidin-1- A72 720 il]sulfonil}-9-(ciclo-hexilmetil)- 3-metilideno-1,5,9-

triazaciclododecano-1- il)sulfonil]-N,N-dimetilanilina 4-[(5-{[4-(2-clorofenil)-1,2,3,6- tetra-hidropiridin-1-il]sulfonil}- 9-(ciclo-hexilmetil)-3- A73 718 metilideno-1,5,9- triazaciclododecano-1- il)sulfonil]-N,N-dimetilanilina 4-[(5-{[4-(4-clorofenil)-1,2,3,6- tetra-hidropiridin-1-il]sulfonil}- 9-(ciclo-hexilmetil)-3- A74 718 metilideno-1,5,9- triazaciclododecano-1- il)sulfonil]-N,N-dimetilanilina 4-{[9-(ciclo-hexilmetil)-3- metilideno-5-{[4-(oxan-4- A78 il)piperidin-1-il]sulfonil}-1,5,9- 694 triazaciclododecan-1- il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[9-(ciclo-hexilmetil)-3- metilideno-5-{[4-(1H-pirazol- A79 1-il)piperidin-1-il]sulfonil}- 676 1,5,9-triazaciclododecan-1- il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-[(5-{[4-(1,3-benzoxazol-2- il)piperidin-1-il]sulfonil}-9- A80 (ciclo-hexilmetil)-3- 727 metilideno-1,5,9- triazaciclododecano-1-

il)sulfonil]-N,N-dimetilanilina 4-{[9-(ciclo-hexilmetil)-3- metilideno-5-{[4-(pirimidin-2- A81 il)piperidin-1-il]sulfonil}-1,5,9- 688 triazaciclododecan-1- il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-({5-[(2-cloro-5,6,7,8-tetra- hidro-1,6-naftiridin-6- il)sulfonil]-9-(ciclo-hexilmetil)- A82 693 3-metilideno-1,5,9- triazaciclododecan-1- il}sulfonil)-N,N-dimetilanilina (3Z)-9-(ciclo-hexilmetil)-1-[4- (dimetilamino)benzenossulfo nil]-N-metóxi-5-[(4- A88 717 fenilpiperidin-1-il)sulfonil]- 1,5,9-triazaciclododecano-3- imina RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,61 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,39 4-[(5-{[4-(2- (m, 2H), 7,05 (m, 2H), 6,82 (d, J clorofenil)piperazin-1- = 8,8 Hz, 2H), 5,35 (m, 2H), il]sulfonil}-9-(ciclo-hexilmetil)- 4,10 (m, 2H), 3,41 (m, 6H), 3,10 A83 721 3-metilideno-1,5,9- (m, 4H), 3,05 (s, 6H), 2,88 (m, triazaciclododecano-1- 2H), 2,41 (m, 3H), 2,21 (m, 4H), il)sulfonil]-N,N-dimetilanilina 2,01 (m, 3H), 1,85 (m, 6H), 1,55 (m, 11H), 1,15 (m, 9H), 0,82 (m, 3H). A84 4-[(5-{[4-(3- 721 RMN de 1H (400 MHz, CDCl3):

clorofenil)piperazin-1- δ 7,59 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,18 il]sulfonil}-9-(ciclo-hexilmetil)- (m, 1H), 6,85 (m, 3H), 6,78 (d, J 3-metilideno-1,5,9- = 8,8 Hz, 2H), 5,25 (m, 2H), triazaciclododecano-1- 4,10 (m, 2H), 3,51 (m, 2H), 3,20 il)sulfonil]-N,N-dimetilanilina (m, 10H), 3,05 (s, 6H), 2,88 (m, 2H), 2,41 (m, 2H), 2,01 (m,2H), 1,85 (m, 4H), 1,65 (m, 6H), 1,25 (m, 5H), 0,82 (m, 1H). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,59 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,26 4-[(5-{[4-(4- (d, J = 8,0 Hz, 2H), 6,87 (d, J = clorofenil)piperazin-1- 8,0 Hz, 2H), 6,70 (d, J = 8,8 Hz, il]sulfonil}-9-(ciclo-hexilmetil)- 2H), 5,25 (m, 2H), 4,10 (m, 2H), A85 721 3-metilideno-1,5,9- 3,51 (m, 2H), 3,20 (m, 10H), triazaciclododecano-1- 3,05 (s, 6H), 2,88 (m, 2H), 2,41 il)sulfonil]-N,N-dimetilanilina (m, 2H), 2,01 (m,2H), 1,85 (m, 4H), 1,65 (m,6H), 1,27 (m, 5H), 0,85 (m, 1H). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,59 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,25 4-({5-[(5-cloro-2,3-di-hidro- (m, 4H), 6,68 (d, J = 8,8 Hz, 1H-isoindol-2-il)sulfonil]-9- 2H), 5,28 (s, 1H), 5,12 (s, 1H), (ciclo-hexilmetil)-3- A89 678 4,64 (m, 4H), 4,12 (s, 2H), 3,45 metilideno-1,5,9- (m, 4H), 3,05 (s, 6H), 2,88 (m, triazaciclododecan-1- 2H), 2,25 (m, 2H), 1,95 (m, 2H), il}sulfonil)-N,N-dimetilanilina 1,65 (m, 8H), 1,23 (m, 8H), 0,85 (m, 1H).

Via 19

[00161] A N-(3-((ciclo-hexilmetil)(3-((4- (dimetilamino)fenil)sulfonamido)propil)amino)propil)-4-fenilpiperidina-1- sulfonamida (33 mg, 0,052 mmol) em NMP (3 ml) foi adicionado hidreto de sódio (4,6 mg de uma dispersão a 60% em óleo mineral, 0,11 mmol). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos e depois a 80 °C durante mais 20 minutos. O dicloreto (19 mg, 0,052 mmol) foi, então, adicionado. Após 2 h a 80 °C, a mistura foi resfriada à temperatura ambiente, diluída com salmoura e acetato de etila, extraída com acetato de etila (3X), os produtos orgânicos combinados foram lavados com salmoura (3X), secos com sulfato de sódio, filtrados e concentrados. A cromatografia em coluna flash (0 a 50% hexanos (1% de DEA)/acetato de etila) forneceu 9-(ciclo-hexilmetil)-1-[4- (dimetilamino)benzenossulfonil]-5-[(4-fenilpiperidin-1-il)sulfonil]-1,5,9- triazaciclododecan-3-ol (composto A55). MS(EI) para C35H55N5O5S2, encontrado 690 [M+H]+. Via 20

[00162] A uma solução de 3-fluoro-4-iodoanilina (1,11 g, 4,68 mmols) em acetonitrila (15,00 ml) foram adicionados formaldeído aquoso a 37% (8,0 ml, 99,9 mmols) e cianoboro-hidreto de sódio (1,88 g, 29,97 mmols). Em seguida, foi adicionado ácido acético (1 ml) gota a gota ao longo de 10 min e a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. NaOH aquoso (a 1 N, 30 ml) foi adicionado e a mistura resultante foi extraída com acetato de etila (50 ml). Os produtos orgânicos foram lavados com salmoura, secos sobre sulfato de sódio anidro e concentrados para fornecer 3-fluoro-4- iodo-N,N-dimetilanilina. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,47 (m, 1H), 6,43 (m, 1H), 6,28 (m, 1H), 2,94 (s, 6H).

[00163] A uma solução de 3-fluoro-4-iodo-N,N-dimetilanilina (500 mg, 1,89 mmol) em éter (5 ml) foi adicionado n-BuLi (0,8 ml, 1,89 mmol) a -78 °C. A mistura foi agitada durante 0,5 h a essa temperatura. Foi adicionado dicloreto de sulfurila (405 mg, 3 mmols) e a mistura de reação foi agitada durante 1 h. A reação foi resfriada bruscamente com água (10 ml) e, então, ajustada a pH = 8 com NaHCO3 aquoso saturado. A mistura resultante foi extraída com acetato de etila (10 ml). A fase orgânica foi separada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre gel de sílica para fornecer cloreto de 4-(dimetilamino)-2-fluorobenzeno-1-sulfonila. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,73 (m, 1H), 6,43 (m, 2H), 3,15 (s, 3H). Via 21

[00164] A 9-(ciclo-hexilmetil)-1-((4-(dimetilamino)fenil)sulfonil)-5- ((4-fenilpiperidin-1-il)sulfonil)-1,5,9-triazaciclododecan-3-ol (30 mg, 0,043 mmol) em tolueno (0,5 ml) foi adicionado NaH (1,6 mg de uma dispersão a 60% em óleo mineral, 0,065 mmol) seguido por iodometano (14 µl, 0,22 mmol). Após agitação durante 1 h, a mistura foi resfriada bruscamente com água, extraída com DCM

(2X), os produtos orgânicos foram combinados e secos com sulfato de sódio, filtrados e concentrados. A cromatografia em coluna flash (0 a 50% de hexanos/acetato de etila + 1% de DEA) forneceu 4-{[9-(ciclo-hexilmetil)-3-metóxi- 5-[(4-fenilpiperidin-1-il)sulfonil]-1,5,9-triazaciclododecan-1-il]sulfonil}-N,N- dimetilanilina (composto A61). MS(EI) para C36H57N5O5S2, encontrado 704 [M+H]+. Via 22

[00165] A 9-(ciclo-hexilmetil)-1-((4-(dimetilamino)fenil)sulfonil)-5- ((4-fenilpiperidin-1-il)sulfonil)-1,5,9-triazaciclododecan-3-ol (171 mg, 0,248 mmol) foi adicionado DCM (10 ml) seguido por periodinano de Dess-Martin (126 mg, 0,297 mmol). A mistura foi deixada em repouso por 2 h à temperatura ambiente, em seguida, foi concentrada e purificada diretamente por FCC (0 a 60% de hexanos (1% de DEA)/acetato de etila) para fornecer 9-(ciclo-hexilmetil)- 1-((4-(dimetilamino)fenil)sulfonil)-5-((4-fenilpiperidin-1-il)sulfonil)-1,5,9- triazaciclododecan-3-ona (composto B20). MS(EI) para C35H53N5O5S2, encontrado 688 [M+H]+.

Via 23

[00166] A 4-((5-((6-bromo-3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-il)sulfonil)- 9-(ciclo-hexilmetil)-3-metileno-1,5,9-triazaciclododecan-1-il)sulfonil)-N,N- dimetilanilina (70 mg, 0,095 mmol) em DMF (0,7 ml) foi adicionada água (0,1 ml), ácido fenilborônico (13 mg, 0,10 mmol), Pd(dppf)Cl2-DCM (7,8 mg, 0,001 mmol) e carbonato de sódio (30 mg, 0,29 mmol). A mistura foi aquecida até 80 °C durante 1 h, em seguida, diluída com salmoura, extraída com acetato de etila (2X), seca com sulfato de sódio, filtrada e concentrada. A cromatografia em coluna flash (0 a 50% de hexanos (1% de DEA)/acetato de etila) forneceu 4-((9- (ciclo-hexilmetil)-3-metileno-5-((6-fenil-3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-il)sulfonil)- 1,5,9-triazaciclododecan-1-il)sulfonil)-N,N-dimetilanilina (composto A63). MS(EI) para C40H53N5O4S2, encontrado 734 [M+H]+.

Via 24

[00167] A uma mistura de ciclopentanona (5,50 g, 65,5 mmols) e Na2CO3 (10,4 g, 98,2 mmols) em DCM (130 ml) foi adicionado Tf2O (18,6 g, 72,0 mmols) a -20 °C. A mistura de reação foi deixada aquecer até a temperatura ambiente e agitada durante a noite. O sólido foi removido por filtração e o filtrado foi concentrado para fornecer trifluorometanossulfonato de ciclopentenila.

[00168] Uma solução de trifluorometanossulfonato de ciclopentenila (7,7 g, 35,6 mmols) em 1,4-dioxano (105 ml) e água (50 ml) foi desgaseificada e, em seguida, preenchida com argônio. 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3-dioxolan-2-il)- 5,6-di-hidropiridina-1(2H)-carboxilato de terc-butila (6,0 g, 19,4 mmols), Pd(PPh3)4 (1,02 g, 0,88 mmol) e carbonato de sódio (10,3 g, 97,1 mmols) foram adicionados. A mistura de reação foi agitada durante a noite a 90 °C e depois resfriada até a temperatura ambiente. A mistura foi vertida em água e extraída com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre Na2SO4 anidro e concentradas sob pressão reduzida. A purificação por cromatografia em coluna flash em gel de sílica (acetato de etila/hexanos = 1:99 a 5:95) forneceu 4-ciclopentenil-5,6-di-hidropiridina-1(2H)- carboxilato de terc- butila. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 5,73 (br s, 1H), 5,56 (br s, 1H), 4,00 (br s, 2H), 3,45 (br s, 2H), 2,47 (m, 4H), 2,33 (br s, 2H), 1,94 (m,

2H), 1,48 (s, 9H).

[00169] A uma solução de 4-ciclopentenil-5,6-di-hidropiridina-1(2H)- carboxilato de terc-Butila (3,3 g, 15,3 mmols) em metanol (30 ml) foi adicionado Pd/C (0,6 g). A mistura foi hidrogenada sob pressão de 103,4 kPa (15 psi) durante 5 h. A mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para fornecer 4-ciclopentilpiperidina-1-carboxilato de terc-butila.

[00170] A uma solução de 4-ciclopentilpiperidina-1-carboxilato de terc-butila (2,9 g, 11,5 mmols) em acetato de etila (15 ml) foi adicionado EtOAc/HCl (a 4 N, 20 ml). A mistura foi agitada durante 2 h e o solvente foi removido. O produto resultante foi lavado com éter para fornecer cloridrato de 4- ciclopentilpiperidina. RMN de 1H (400 MHz, D2O): δ 3,25 (m, 2H), 2,75 (m, 2H), 1,84 (m, 2H), 1,61 (m, 2H), 1,45 (m, 8H), 0,96 (m, 2H).

[00171] Cloridrato de 4-ciclopentilpiperidina (1,4 g, 9,5 mmols) e trifluorometanossulfonato de 1-(1H -imidazol-1-ilsulfonil)-3-metil-1H-imidazol-3- io (3,45 g, 9,5 mmols) foram misturados em CH3CN (20 ml). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. O solvente foi removido. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (EtOAc/éter de petróleo = 1:9 a 1:3) para fornecer 1-(1H-Imidazol-1-ilsulfonil)-4-ciclopentilpiperidina. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,91 (s, 1H), 7,24 (s, 1H), 7,14 (s, 1H), 3,87 (m, 2H), 2,51 (m, 2H), 1,83 (m, 4H), 1,54 (m, 5H), 1,33 (m, 2H), 1,08 (m, 3H).

[00172] A uma solução de 1-(1H-Imidazol-1-ilsulfonil)-4- ciclopentilpiperidina (500 mg, 1,8 mmol) em DCM (5 ml) foi adicionado MeOTf (0,3 g, 1,8 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. O solvente foi removido e o produto resultante foi lavado com éter para fornecer trifluorometanossulfonato de 1-((4-ciclopentilpiperidin-1- il)sulfonil)-3-metil-1H-imidazol-3-io. RMN de 1H (400 MHz, CD3OD): δ 9,59 (s, 1H), 8,02 (s, 1H), 7,78 (s, 1H), 4,00 (s, 3H), 3,95 (m, 2H), 2,87 (m, 2H), 1,81 (m, 4H), 1,54 (m, 6H), 1,23 (m, 4H).

[00173] Os compostos a seguir foram sintetizados de maneira similar: trifluorometanossulfonato de 1-((4-ciclo-hexilpiperidin-1-il)sulfonil)-

3-metil-1H-imidazol-3-io (Intermediário para o composto A65).Trifluorometanossulfonato de 3-metil-1-((4-(tetra-hidro-2H-piran-4- il)piperidin-1-il)sulfonil)-1H-imidazol-3-io (intermediário para o composto A78). Via 25

[00174] A 9-(ciclo-hexilmetil)-1-((4-(dimetilamino)fenil)sulfonil)-5- ((4-fenilpiperidin-1-il)sulfonil)-1,5,9-triazaciclododecan-3-ona (19 mg, 0,028 mmol) em DCM (0,5 ml) e metanol (0,05 ml) foram adicionados cloridrato de hidroxilamina (5,8 mg, 0,083 mmol) e acetato de sódio (6,8 mg, 0,083 mmol). A mistura foi agitada durante 6 h à temperatura ambiente, em seguida, concentrada e purificada por cromatografia em coluna flash (0 a 60% de hexanos (1% de DEA)/acetato de etila) para fornecer 9-(ciclo-hexilmetil)-1-((4- (dimetilamino)fenil)sulfonil)-5-((4-fenilpiperidin-1-il)sulfonil)-1,5,9- triazaciclododecan-3-ona oxima (composto A75). MS(EI) para C35H54N6O5S2, encontrado 703 [M+H]+.

Via 26

[00175] Uma solução de 1-cloro-2-iodobenzeno (5,0 g, 21,1 mmols) em DMF (150 ml) foi desgaseificada e depois preenchida com argônio. 4- (4,4,5,5-tetrametil-1,3-dioxolan-2-il)-5,6-di-hidropiridina-1(2H )-carboxilato de terc-butila (7,13 g, 23,0 mmols), Pd(dppf)Cl2 (1,7 g, 2,1 mmols) e carbonato de potássio (8,69 g, 63,0 mmols) foram adicionados. A mistura de reação foi agitada durante a noite a 110 °C e, em seguida, resfriada até a temperatura ambiente. A mistura foi vertida em água e extraída com acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre Na2SO4 anidro e concentradas sob pressão reduzida. A purificação por cromatografia em coluna flash em gel de sílica (acetato de etila/hexanos = 1:9 a 1:4) forneceu 4-(2- clorofenil)-5,6-di-hidropiridina-1(2H)-carboxilato de terc-butila. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,37 (m, 1H), 7,18 (m, 3H), 5,67 (m, 1H), 4,06 (m, 2H), 3,64 (m, 2H), 2,46 (br s, 2H), 1,51 (s, 9H).

[00176] A uma solução de 4-(2-clorofenil)-5,6-di-hidropiridina-1(2H)- carboxilato de terc-butila (2,0 g, 6,8 mmols) em MeOH (20 ml) foi adicionado HCl/MeOH (3M, 20 ml). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2h. A solução resultante de cloridrato de 4-(2-clorofenil)-1,2,3,6-tetra- hidropiridina foi usada diretamente na etapa seguinte.

[00177] À solução de cloridrato de 4-(2-clorofenil)piperidina em

MeOH/HCl foi adicionado PtO2 (0,1 g). A mistura foi hidrogenada à temperatura ambiente sob 103,4 kPa (15 psi) durante 3 h. O catalisador foi removido por filtração e o filtrado foi concentrado para fornecer o produto. RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6): δ 9,19 (br s, 2H), 7,37 (m, 1H), 7,36 (m, 4H), 3,44 (m, 1H), 3,33 (m, 2H), 3,08 (m, 2H), 1,95 (m, 4H).

[00178] A base livre (0,95 g, 4,8 mmols) e trifluorometanossulfonato de 1-(1H-imidazol-1-ilsulfonil)-3-metil-1H-imidazol-3-io (1,76 g, 4,8 mmols) foram misturados em CH3CN (10 ml). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. O solvente foi removido e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica para fornecer 1-(1H-imidazol-1- ilsulfonil)-4-(2-clorofenil)piperidina. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): 8,01 (s, 1H), 7,36 (m, 2H), 7,18 (m, 4H), 4,07 (m, 2H), 3,06 (m, 1H), 2,74 (m, 2H), 1,99 (m, 2H), 1,81 (m, 2H).

[00179] A uma solução de 1-(1H-imidazol-1-ilsulfonil)-4-(2- clorofenil)piperidina (501 mg, 1,5 mmol) em DCM (5 ml) foi adicionado MeOTf (0,27 g, 1,63 mmol). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. O solvente foi removido. O produto resultante foi lavado com éter para fornecer trifluorometanossulfonato de 1-((4-(2-clorofenil)piperidin-1-il)sulfonil)-3- metil-1H-imidazol-3-io (intermediário para o composto A57). RMN de 1H (400 MHz, CD3OD): δ 9,65 (s, 1H), 8,08 (s, 1H), 7,82 (s, 1H), 7,39 (m, 4H), 4,16 (m, 2H), 4,02 (s, 3H), 3,31 (m, 3H), 2,03 (m, 2H), 1,85 (m, 2H).

[00180] Os compostos a seguir foram sintetizados de maneira similar: trifluorometanossulfonato de 1-((4-(3-clorofenil)piperidin-1-il)sulfonil)-3- metil-1H-imidazol-3-io (intermediário para o composto A58). Trifluorometanossulfonato de 1-((4-(4-clorofenil)piperidin-1-il)sulfonil)- 3-metil-1H-imidazol-3-io (intermediário para o composto A72).

Via 27

[00181] A uma solução de 2-(3-clorofenil)etanamina (149 g, 0,95 mol) e TEA (144 g, 1,42 mol) em DCM (1,5 l) foi adicionado gota a gota carbonocloridrato de etila (107 g, 1,14 mol) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada durante 3 h e, em seguida, lavada com HCl aquoso a 1 N (1 l) e NaHCO3 aquoso saturado (600 ml). A camada de DCM foi seca sobre sulfato de sódio anidro e concentrada para fornecer 3-clorofenetilcarbamato de metila. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,27 (m, 3H), 7,08 (m, 1H), 4,77 (m, 1H), 3,78 (s, 3H), 3,44 (m, 2H), 2,80 (m, 2H).

[00182] 3-clorofenetilcarbamato de metila (193 g, 0,9 mol) foi dissolvido em CF3SO3H (1,36 kg). A mistura foi aquecida até 120 °C durante a noite. A mistura foi resfriada até a temperatura ambiente e, então, vertida em água gelada (4 l). O produto resultante foi coletado por filtração e lavado com éter para fornecer 6-cloro-3,4-di-hidroisoquinolin-1(2H)-ona. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 8,01 (m, 1H), 7,35 (m, 1H), 7,25 (m, 2H), 6,21 (br s, 1H), 3,60 (m, 2H), 3,01 (m, 2H).

[00183] A uma solução de 6-cloro-3,4-di-hidroisoquinolin-1(2H)-ona (33 g, 182 mmols) em THF (330 ml) foi adicionado gota a gota BH3-Me2S (73 ml, 729 mmols). A mistura de reação foi refluxada durante a noite. A mistura foi resfriada até a temperatura ambiente e, então, resfriada bruscamente com HCl aquoso a 6N (300 ml). O THF foi removido sob pressão reduzida e a solução restante foi refluxada durante a noite. A mistura foi concentrada para um certo volume e em seguida basificada com NaOH aquoso a 2 N. A mistura resultante foi extraída com DCM. A camada de DCM foi seca sobre sulfato de sódio anidro e concentrada para fornecer 6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina.

[00184] A uma solução de 6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina (18,5 g, 0,11 mol) em CH3CN (180 ml) foi adicionado o composto trifluorometanossulfonato de 2,3-dimetil-1-((2-metil-1H-imidazol-1-il)sulfonil)-1H- imidazol-3-io (43,5 g, 0,11 mol, Referência: J. Org. Chem. 2002, 68, 115 a 119.). A mistura de reação foi agitada durante a noite a 30 °C. O solvente foi removido e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica (EtOAc /éter de petróleo = 1:1) para fornecer 6-cloro-2-(2-metil-1H-imidazol-1-ilsulfonil)- 1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,21 (m, 1H), 7,18 (s, 1H), 7,02 (m, 1H), 6,94 (m, 1H), 4,45 (s, 2H), 3,62 (m, 2H), 2,92 (m, 2H), 2,67 (s, 3H).

[00185] A uma solução de 6-cloro-2-(2-metil-1H -imidazol-1- ilsulfonil)-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina (25,5 g, 82 mmols) em DCM (260 ml) foi adicionado CF3SO3Me (13,45 g, 82 mmols). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. O solvente foi removido e o resíduo foi lavado com éter para fornecer trifluorometanossulfonato de 1-(6-cloro-3,4-di- hidroisoquinolin-2(1H)-ilsulfonil)-2,3-dimetil-1H-imidazol-3-io.

[00186] A uma solução de trifluorometanossulfonato de 1-(6-cloro- 3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-ilsulfonil)-2,3-dimetil-1H -imidazol-3-io (8,7 g, 18,4 mmols) em CH3CN (100 ml) foi adicionado (R)-N-(3-amino-2-metilpropil)-4- (dimetilamino)benzenossulfonamida (5,0 g, 18,4 mmols). A mistura de reação foi agitada durante a noite a 30 °C. O solvente foi removido e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre gel de sílica (EtOAc/éter de petróleo = 1:3 a 1:1) para fornecer (S)-6-cloro-N-(3-((4-(dimetilamino))fenil)sulfonamido)-2- metilpropil)-3,4-di-hidroisoquinolina-2(1H)-sulfonamida (composto B10). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,85 (m, 2H), 7,43 (m, 2H), 7,18 (m, 2H), 7,03 (m, 1H), 4,35 (s, 2H), 3,48 (m, 2H), 3,18 (s, 6H), 3,15 (m, 1H), 2,95 (m, 6H), 2,85 (m, 1H), 1,89 (m, 1H), 0,89 (m, 3H).

[00187] (S)-6-Cloro-N-(3-((4-(dimetilamino)fenil)sulfonamido)-2- metilpropil)-3,4-di-hidroisoquinolina-2(1H)-sulfonamida (300 mg, 0,6 mmol) foi dissolvido em NMP (3 ml) e NaH (60%, 96 mg, 2,4 mmols) foi adicionado. A mistura foi agitada durante 30 min à temperatura ambiente e, então, aquecida até 80 °C durante 20 min. A mistura foi resfriada até a temperatura ambiente. Uma solução de ((ciclo-hexilmetil)azanediil)bis(propano-3,1-di- il)dimetanossulfonato (231 mg, 0,6 mmol) em NMP (1 ml) foi adicionada. A mistura de reação foi aquecida até 80 °C durante 1 h, em seguida, resfriada até a temperatura ambiente e resfriada bruscamente com água (10 ml). A mistura resultante foi extraída com acetato de etila (15 ml). O extrato foi lavado com salmoura e concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre gel de sílica (EtOAc/éter de petróleo = 1:8 a 1:3) para fornecer o composto A87. MS(EI) para C34H52ClN5O4S2, encontrado 695 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,59 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,15 (m, 2H), 7,00 (m, 1H), 6,68 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 4,34 (m, 2H), 3,71 (m, 2H), 3,45 (m, 2H), 3,17 (m, 3H), 3,05 (s, 6H), 2,88 (m, 4H), 2,25 (m, 2H), 2,15 (m, 6H), 1,95 (m, 2H), 1,65 (m, 8H), 1,23 (m, 6H), 0,95 (m, 5H).

[00188] Os seguintes compostos foram sintetizados de maneira similar:

N.º IUPAC [M+H]+ RMN de 1H N-[(2R)-3-{[(6-cloro-1,2,3,4-tetra- hidroisoquinolin-2-il)sulfonil]amino}-2- B11 501 metilpropil]-4-(dimetilamino)benzeno-1- sulfonamida 4-{[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-3-metil-5- {[(3S)-3-fenilpirrolidin-1-il]sulfonil}-1,5,9- A90 674 triazaciclododecan-1-il]sulfonil}-N,N- dimetilanilina 4-{[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-3-metil-5- {[(3R)-3-fenilpirrolidin-1-il]sulfonil}-1,5,9- A91 674 triazaciclododecan-1-il]sulfonil}-N,N- dimetilanilina 4-{[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-3-metil-5-[(4- fenoxipiperidin-1-il)sulfonil]-1,5,9- A92 704 triazaciclododecano-1-il]sulfonil}-N,N- dimetilanilina 4-{[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-3-metil-5-{[4- (pirimidin-2-il)piperazin-1-il]sulfonil}- A93 691 1,5,9-triazaciclododecano-1-il]sulfonil}- N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-5-{[4-(2- fluorofenil)piperazin-1-il]sulfonil}-3-metil- A94 707 1,5,9-triazaciclododecan-1-il]sulfonil}- N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-5-{[4-(3- fluorofenil)piperazin-1-il]sulfonil}-3-metil- A95 707 1,5,9-triazaciclododecan-1-il]sulfonil}- N,N-dimetilanilina

4-{[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-5-{[4-(4- fluorofenil)piperazin-1-il]sulfonil}-3-metil- A96 707 1,5,9-triazaciclododecan-1-il]sulfonil}- N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-3-metil-5-{[4- (2-metilfenil)piperazin-1-il]sulfonil}-1,5,9- A97 703 triazaciclododecan-1-il]sulfonil}-N,N- dimetilanilina 4-{[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-3-metil-5-{[4- (3-metilfenil)piperazin-1-il]sulfonil}-1,5,9- A98 703 triazaciclododecan-1-il]sulfonil}-N,N- dimetilanilina

4-{[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-3-metil-5-{[4- (4-metilfenil)piperazin-1-il]sulfonil}-1,5,9- A99 703 triazaciclododecan-1-il]sulfonil}-N,N- dimetilanilina

4-{[(3S)-5-[(4-benzoilpiperazin-1- il)sulfonil]-9-(ciclo-hexilmetil)-3-metil- A100 717 1,5,9-triazaciclododecano-1-il]sulfonil}- N,N-dimetilanilina

4-{[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-3-metil-5-[(3- fenilazetidin-1-il)sulfonil]-1,5,9- A101 660 triazaciclododecano-1-il]sulfonil}-N,N- dimetilanilina

4-{[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-5-{[4-(4- fluoro-2-metilfenil)piperazin-1-il]sulfonil}- A102 721 3-metil-1,5,9-triazaciclododecano-1- il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,60 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,33 (m, 5H), 6,82 (m, 2H), 6,82 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 4-{[(3R)-9-(ciclo-hexilmetil)-3-metil-5- 3,77 (m, 4H), 3,28 [(4-fenilpiperidin-1-il)sulfonil]-1,5,9- (m, 1H), 3,18 (m, A76 688 triazaciclododecano-1-il]sulfonil}-N,N- 3H), 3,05 (m, 6H), dimetilanilina 2,88 (s, 4H), 2,61 (m, 1H), 2,41 (m, 1H), 2,21 (m, 4H), 2,01 (m, 3H), 1,85 (m, 8H), 1,25 (m, 6H), 0,93 (m, 3H), 0,82 (m, 4H).

RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,60 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,33 (m, 5H), 6,82 (m, 2H), 6,82 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 4-{[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-3-metil-5-[(4- 3,77 (m, 4H), 3,28 fenilpiperidin-1-il)sulfonil]-1,5,9- (m, 1H), 3,18 (m, A77 688 triazaciclododecano-1-il]sulfonil}-N,N- 3H), 3,05 (m, 6H), dimetilanilina 2,88 (s, 4H), 2,61 (m, 1H), 2,41 (m, 1H), 2,21 (m, 4H), 2,01 (m, 3H), 1,85 (m, 8H), 1,25 (m, 6H), 0,93 (m, 3H), 0,82 (m, 4H). Via 28

[00189] A uma solução de benzilamina (37,7 g, 0,350 mol) em CH3CN (1 l) foram adicionados 3-cloropropan-1-ol (100 g, 1,06 mol) e Na2CO3 (131 g, 1,24 mol). A mistura de reação foi refluxada durante 50 h e, então, resfriada até a temperatura ambiente. A mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica (MeOH/DCM = 1:99 a 3:97) para fornecer 3,3’-(benzilazanodi- il)dipropan-1-ol. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,34 (m, 5H), 3,70 (m, 4H), 3,61 (s, 2H), 3,48 (s, 2H), 2,68 (m, 4H), 1,78 (m, 4H).

[00190] A uma solução de 3,3’-(benzilazanodi-il)dipropan-1-ol (55 g) em MeOH (500 ml) foi adicionado Pd/C (10 g). A mistura foi hidrogenada à temperatura ambiente sob pressão de 15 kg durante 6 h. A mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado para fornecer 3,3’-azanedi-ildipropan-1-ol. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 3,78 (m, 4H), 3,46 (s, 2H), 2,84 (m, 4H), 1,75 (m, 4H).

[00191] A uma solução de 3,3’-azanedi-ildipropan-1-ol (15 g, 113 mmols) em DCM (300 ml) foram adicionados ciclo-hexanocarbaldeído (18,8 g, 141 mmols) e NaBH(OAc)3 (72,5 g, 0,34 mol). A mistura foi agitada durante 0,5 h e foi adicionado HOAc (20,4 g, 0,34 mol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi resfriada bruscamente com água (150 ml) e, então, ajustada a pH = 12 com NaOH. A camada orgânica foi separada, seca sobre sulfato de sódio anidro e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre gel de sílica (MeOH/DCM = 3:97 a 1:9) para fornecer 3,3’-((ciclo-hexilmetil)azanodi-il)bis(propan-1-ol). RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 3,75 (m, 4H), 2,64 (m, 4H), 2,18 (m, 2H), 1,75 (m, 9H), 1,55 (m, 1H), 1,21 (m, 3H), 0,89 (m, 1H).

[00192] A uma solução do composto 3,3’-((ciclo-hexilmetil)azanedi- il)bis(propan-1-ol)(1,2 g, 5,2 mmols) e TEA (1,0 g, 10,4 mmols) em DCM (15 ml) foi adicionado MsCl (1,18 g, 10,4 mmols) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada durante 4 h e, então, resfriada bruscamente com água (15 ml). A camada de DCM foi separada, seca sobre sulfato de sódio anidro e concentrada para fornecer o composto ((ciclo-hexilmetil)azanodi-il)bis(propano-3,1-di- il)dimetanossulfonato. O dimesilato foi usado imediatamente sem purificação adicional.

Via 29

[00193] A uma solução de propano-1,3-diamina (100 g, 1,35 mol) em THF (800 ml) foi adicionada uma solução de Boc 2O (73,6 g, 0,34 mol) em THF (200 ml) a 0 aproximadamente 10 °C. A mistura de reação foi agitada durante 3 h e foi adicionada água (1 l). A mistura resultante foi extraída com acetato de etila (500 ml x 2). As camadas orgânicas foram combinadas e concentradas até um volume de 400 ml. Foi adicionado hexano (300 ml) e à solução resultante foi adicionado ácido oxálico aquoso a 15% (1 l). A mistura foi agitada durante 0,5 h. A camada orgânica foi decantada e a camada aquosa foi ajustada para pH = 10 com NaOH aquoso a 3N. A mistura resultante foi extraída com DCM (600 ml × 2). Os extratos combinados foram secos sobre sulfato de sódio anidro e concentrados para fornecer 3-aminopropilcarbamato de terc- butila. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 5,03 (br s, 1H), 3,23 (br s, 2H), 2,69 (m,

2H), 1,71 (m, 2H), 1,44 (s, 9H).

[00194] Trietilamina (4,70 g, 46,5 mmols) foi adicionada gota a gota a uma mistura agitada de 3-bromopropilcarbamato de benzila (4,2 g, 15,5 mmols) para fornecer 3-aminopropilcarbamato de terc-butila (2,7 g, 15,5 mmols) em DMF (50 ml) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi aquecida até 70 °C por 1 hora. A maior parte do DMF foi removida sob vácuo e a mistura restante foi diluída com água (120 ml) e lavada com éter (150 ml × 4) para remover a maior parte do subproduto dialquilado. A camada aquosa foi ajustada a pH = 11 com NaOH aquoso a 1 N e extraída com éter (200 ml). O extrato foi lavado com água (150 ml × 3) para remover 3-aminopropilcarbamato de terc-butila não reagido, seco com sulfato de sódio anidro e concentrado para fornecer (3-((3- (((benzilóxi)carbonil)amino)propil)amino)propil)carbamato de terc-butila. RMN de 1H(400 MHz, CDCl3): δ 7,36 (m, 5H), 5,60 (br s, 1H), 5,11 (m, 3H), 3,30 (m, 2H), 3,20 (m, 2H), 2,68 (m, 4H), 1,70 (m, 5H), 1,44 (s, 9H).

[00195] A uma solução de (3-((3- (((benziloxi)carbonil)amino)propil)amino)propil)carbamato de terc-butila (100 mg, 0,27 mmol) em DCM (5 ml) foi adicionado ciclo-hexanocarbaldeído (31 mg, 0,27 mmol) e HOAc (30 mg, 1,1 mmol). A mistura foi agitada durante 0,5 h e NaBH(OAc)3 (235 g, 1,1 mmol) foi adicionado em uma porção. A mistura de reação foi agitada por 4 h. A análise de TLC mostrou 50% de conversão e outra porção de ciclo-hexano carbaldeído (15 mg, 0,13 mmol) foi adicionada. A mistura de reação foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. Água (10 ml) foi adicionada para resfriar bruscamente a reação e a mistura foi ajustada a pH = 2 por adição de HOAc. A mistura foi agitada durante mais 0,5 h e depois ajustada a pH = 12 com NaOH aquoso (a 1N). A camada orgânica foi separada e concentrada para fornecer (3-((3(((benzilóxi)carbonil)amino)propil)(ciclo- hexilmetil)amino)propil)carbamato de terc-butila. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,27 (m, 5H), 6,12 (br s, 1H), 5,55 (br s, 1H), 5,01 (s, 3H), 3,34 (m, 2H), 3,18 (m, 2H), 3,08 (m, 2H), 2,80 (m, 4H), 1,65 (m, 9H), 1,44 (s, 9H), 1,12 (m, 6H).

[00196] A uma solução de (3-((3-

(((benzilóxi)carbonil)amino)propil)(ciclo-hexilmetil)amino)propil)carbamato de terc-butila (0,50 g, 1,1 mmol) em MeOH (5 ml) foi adicionado Pd/C (0,1 g). A mistura foi hidrogenada sob pressão de 103,4 kPa (15 psi) durante 3 h. A mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado para fornecer (3-((3-aminopropil)(ciclo- hexilmetil)amino)propil)carbamato de terc-butila. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 5,78 (br s, 1H), 3,19 (br s, 2H), 2,78 (m, 2H), 2,40 (m, 4H), 2,13 (m, 2H), 1,98 (br s, 2H), 1,67 (m, 9H), 1,44 (s, 9 H), 1,12 (m, 4H), 0,89 (m, 2H).

[00197] A uma solução de (3-((3-aminopropil)(ciclo- hexilmetil)amino)propil)carbamato de tert-butila (1,2 g, 3,7 mmols) em CH3CN (10 ml) foi adicionado 3-metil-1-(4-fenilpiperidin-1-ilsulfonil)-1H-imidazol-3-io (1,47 g, 3,7 mmols). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. O solvente foi removido e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica para fornecer 3-((ciclo-hexilmetil)(3-(4- fenilpiperidina-1-sulfonamido)propil)amino)propilcarbamato de terc-butila.

[00198] A uma solução de 3-((ciclo-hexilmetil)(3-(4-fenilpiperidina-1- sulfonamido)propil)amino)propilcarbamato de terc-butila (0,85 g, 1,5 mmol) em DCM (15 ml) foi adicionado TFA (10 ml). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 3 h. O solvente foi removido e o resíduo foi dissolvido em DCM (50 ml). A solução foi basificada com NaOH aquoso a 1 N. A camada de DCM foi seca sobre Na2SO4 anidro e concentrada para fornecer N-(3-((3- aminopropil)(ciclo-hexilmetil)amino)propil)-4-fenilpiperidina-1-sulfonamida.

[00199] A uma solução de N-(3-((3-aminopropil)(ciclo- hexilmetil)amino)propil)-4-fenilpiperidina-1-sulfonamida (90 mg, 0,20 mmol) em DCM (5 ml) foi adicionado TEA (40 mg, 0,4 mmol). A mistura foi resfriada até 0 °C e uma solução de cloreto de 4-(dimetilamino)-2,6-difluorobenzeno-1-sulfonila (60 mg, 0,24 mmol) em DCM (1 ml) foi adicionada. A mistura de reação foi agitada em RT por 2 h. A mistura foi diluída com DCM (30 mL) e depois lavada com água (20 ml). A camada orgânica foi seca sobre Na 2SO4 anidro e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre gel de sílica para fornecer N-(3-((ciclo-hexilmetil)(3-(4- (dimetilamino)fenilsulfonamido)propil)amino)propil)-4-fenilpiperidina-1- sulfonamida.

[00200] A uma solução de N-(3-((ciclo-hexilmetil)(3-(4- (dimetilamino)fenilsulfonamido)propil)amino)propil)-4-fenilpiperidina-1- sulfonamida (80 mg, 0,123 mmol) em NMP (2 ml) foi adicionado NaH (12 mg, 0,29 mmol). A mistura foi aquecida até 80 °C durante 0,5 h. A mistura foi resfriada até a temperatura ambiente e uma solução de 3-cloro-2-(clorometil)prop-1-eno (15 mg, 0,12 mmol) em NMP (0,1 ml) foi adicionada. A mistura de reação foi aquecida até 80 °C por 2 horas. A mistura foi resfriada até a temperatura ambiente e foi adicionada água (20 ml). A mistura resultante foi extraída com acetato de etila (15 ml). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica (acetato de etila/hexano = 10:30 a 20:10) para fornecer o composto A86. MS(EI) para C36H53F2N5O4S2, encontrado 733 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,31 (m, 5H), 6,18 (m, 2H), 5,25 (m, 2H), 4,05 (s, 2H), 3,87 (m, 4H), 3,20 (m, 4H), 3,05 (s, 6H), 2,88 (m, 2H), 2,41 (m, 4H), 2,05 (m, 5H), 1,75 (m, 9H), 1,27 (m, 6H), 0,85 (m, 2H). Via 30

[00201] A uma solução de 3,5-difluoro-4-iodo-N,N-dimetilanilina (500 mg, 1,77 mmol) em éter (5 ml) foi adicionado gota a gota n-BuLi (0,71 ml, 1,77 mmol) a -78 °C. A mistura foi agitada durante 0,5 h a -78 °C. Foi adicionado dicloreto de sulfurila (358 mg, 1,5 mmol). A mistura de reação foi agitada durante mais 0,5 h. A mistura foi resfriada bruscamente com água (10 ml) e, então, extraída com acetato de etila (15 ml). A camada orgânica foi seca sobre Na 2SO4 anidro e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna em gel de sílica para fornecer o produto bruto, que foi posteriormente recristalizado a partir de hexano/EtOAc (10:1) para fornecer cloreto de 4-(dimetilamino)-2,6- difluorobenzeno-1-sulfonila. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 6,21 (s, 1H), 6,18 (s, 1H), 3,09 (s, 6H). Via 31

[00202] A uma suspensão de 1,3-dicloropropan-2-ona (5,0 g, 39,5 mmols) em H2O (50 ml) foi adicionado cloridrato de O-metil-hidroxilamina (3,5 g, 41,5 mmols) e a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 1 h. A camada orgânica foi separada, diluída com éter e concentrada sob vácuo (< 30 °C) para fornecer 1,3-dicloropropan-2-ona O-metil oxima. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 4,33 (s, 2H), 4,27 (s, 2H), 3,94 (s, 3H). Via 32

[00203] A (S)-6-cloro-N-(3-((4-(dimetilamino)fenil)sulfonamido)-2- metilpropil)-3,4-di-hidroisoquinolina-2(1H)-sulfonamida (100,0 mg, 0,200 mmol) em NMP seco (3 ml) a 0 °C foi adicionado NaH (24,0 mg, 0,600 mmol) e a mistura foi agitada à temp. ambiente por 20 min e passou de uma mistura turva para quase transparente durante esse tempo. Iodometano (27 µl, 0,440 mmol) foi adicionado e a mistura foi deixada a agitar à temperatura ambiente por 1 h e não progrediu além da conclusão de aproximadamente 50%, então, a mesma quantidade de NaH e iodeto de metila foi adicionada novamente e a reação foi concluída após mais uma hora à temperatura ambiente. Salmoura (10 ml) e EA (10 ml) foram adicionados. A camada aquosa foi extraída com EA (1 X 5 ml) e os produtos orgânicos foram combinados, lavados com salmoura (3 X 10 ml),

secos com sulfato de sódio, filtrados e concentrados. FCC (hexanos/EA a 0 a 70%) forneceu o composto B12. MS(EI) para C23H33ClN4O4S2, encontrado 529 [M+H]+. Via 33

[00204] A uma solução de metacrilato de metila (300 g, 3,0 mols) em MeOH (1,5 l) foi adicionada (S )-1-feniletanamina (363 g, 3 mols). A mistura de reação foi refluxada durante 5 dias. A mistura foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre gel de sílica (EtOAc/éter de petróleo = 1:9 a 1:1) para fornecer 2-metil-3-((S)-1-feniletilamino)propanoato de metila. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,25 (m, 5H), 3,75 (m, 1H), 3,69 (s, 3H), 2,75 (m, 3H), 1,39 (m, 1H), 1,28 (m, 3H), 1,09 (m, 3H).

[00205] A uma solução de 2-metil-3-((S)-1- feniletilamino)propanoato de metila (440 g, 1,99 mol) em acetona (6 l) foi adicionado TsOH-H2O (378 g, 1,99 mol). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h. O sólido precipitado foi coletado por filtração e seco para fornecer um sal (300 g) que foi suspenso em acetona (2 l) e refluxado durante 1 h. A mistura foi resfriada até a temperatura ambiente e o precipitado resultante foi coletado por filtração para fornecer um sal que foi suspenso em DCM (2 l) e K2CO3 aquoso saturado (1,5 l). A mistura foi agitada durante 0,5 h e o sólido foi dissolvido. A camada de DCM foi separada, seca sobre Na 2SO4 anidro e concentrada para fornecer 2-metil-3-((S)-1-feniletilamino)propanoato de (R)- metila.

[00206] A uma solução de 2-metil-3-((S)-1- feniletilamino)propanoato de (R)-metila (140 g, 0,630 mol) em MeOH (1,4 l) foram adicionados HOAc (30 ml) e Pd/C (15 g). A mistura foi hidrogenada sob pressão de 20 kg a 60 °C por 6 h. O catalisador foi removido por filtração e o filtrado foi concentrado para fornecer 3-amino-2-metilpropanoato de (R)-metila. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 5,09 (br, 3H), 3,72 (s, 3H), 3,05 (m, 1H), 2,93 (m, 1H), 2,75 (m, 1H), 1,23 (d, J = 7,2 Hz, 3H).

[00207] A uma solução de 3-amino-2-metilpropanoato de (R)-metila (112 g, 0,63 mol) em diclorometano (1 l) foram adicionados TEA (160 g, 1,58 mol) e Boc2O (152 g, 0,69 mol) a 0 a aproximadamente 5 °C. A mistura de reação foi deixada aquecer até a temperatura ambiente e agitada durante a noite. A mistura foi lavada com água (1 l), HCl aquoso a 2N (1 l) e NaHCO3 aquoso saturado (1 l), respectivamente. A camada orgânica foi seca sobre Na 2SO4 anidro e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna sobre gel de sílica para fornecer 3-(terc-butoxicarbonilamino)-2-metilpropanoato de (R)-metila. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 4,94 (br s, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,31 (m, 2H), 2,70 (m, 1H), 1,52 (s, 9H), 1,18 (d, J = 7,2 Hz, 3H).

[00208] A uma solução de 3-(terc-butoxicarbonilamino)-2- metilpropanoato de (R)-metila (6 g, 51,3 mmols) em THF (60 ml) foi adicionado LiBH4 (1,12 g, 102 mmols). A mistura de reação foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. A mistura foi resfriada bruscamente com água (30 ml) seguida pela adição de HCl aquoso a 1 N para ajustar o pH = 2 a aproximadamente 3. A mistura resultante foi extraída com acetato de etila e o extrato foi lavado com NaHCO3 aquoso saturado, seco sobre Na2SO4 anidro e concentrado para fornecer (R)-terc-butil-3-hidróxi-2-metilpropilcarbamato. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 3,57 (m, 1H), 3,37 (m, 2H), 3,05 (m, 1H), 1,77 (m, 1H), 1,48 (s, 9H), 0,88 (d, J = 7,2 Hz, 3H).

[00209] A uma solução de 3-hidroxi-2-metilpropilcarbamato de (R)- terc-butila (2,5 g, 13,2 mmols) em tolueno (25 ml) foram adicionados PPh 3 (4,15 g, 15,8 mmols) e isoindolina-1,3-diona (2,72 g, 18,5 mmols). A mistura foi resfriada até 0 a aproximadamente 5 °C e DIAD (3,2 g, 15,8 mmols) foi adicionado gota a gota. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 3 h. O sólido precipitado foi removido por filtração e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica (EtOAc/éter de petróleo = 1:9 a 1:1) para fornecer 3-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)-2- metilpropilcarbamato de (R)-terc- butila. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,85 (m, 2H), 7,47 (m, 2H), 5,23 (br s, 1H), 3,64 (m, 2H), 3,03 (br s, 2H), 2,13 (m, 1H), 1,43 (s, 9H), 0,96 (d, J = 6,4 Hz, 3H).

[00210] A uma solução de 3-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)-2- metilpropilcarbamato de (R)-terc- butila (40 g, 8,83 mmols) em MeOH (200 ml) foi adicionada solução de metilamina (7,8 g, 30% em MeOH). A mistura de reação foi aquecida até 60 °C por 6 horas. O solvente foi removido sob pressão reduzida. O resíduo foi suspenso em éter (300 ml) e depois agitado durante 0,5 h. O sólido foi removido por filtração e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para fornecer 3-amino-2-metilpropilcarbamato de (S)-terc-butila.

[00211] A uma solução de 3-amino-2-metilpropilcarbamato de (S)- terc-butila (12,5 g, 66,5 mmols) em DCM (250 ml) foi adicionado TEA (10,3 g, 101,7 mmols). A mistura foi resfriada até 0 a aproximadamente 5 °C e cloreto de 4-(dimetilamino)benzeno-1-sulfonila (16 g, 72 mmols) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 3 h. A mistura foi lavada com água e a fase orgânica foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica (EtOAc/éter de petróleo = 1:9 a 3:7) para fornecer 3-(4-(dimetilamino)fenilsulfonamido)-2- metilpropilcarbamato de (R)-terc-butila. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,70 (d,

J = 8,8 Hz, 2H), 6,71 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 5,45 (m, 1H), 4,72 (m, 1H), 3,18 (m, 1H), 3,04 (s, 6H), 2,98 (m, 2H), 2,75 (m, 1H), 1,78 (m, 1H), 1,41 (s, 9H), 0,87 (m, J = 6,8 Hz, 3H).

[00212] A uma solução de 3-(4-(dimetilamino)fenilsulfonamido)-2- metilpropilcarbamato de (R)-terc-butila (21 g, 59,3 mmols) em MeOH (150 ml) foi adicionado MeOH/HCl a 4 N (150 ml). A mistura foi agitada durante 3 h à temperatura ambiente. O solvente foi removido sob pressão reduzida. O sólido resultante foi suspenso em DCM (200 ml) e foi adicionado K 2CO3 aquoso saturado (150 ml). A mistura foi agitada durante 5 minutos e a camada orgânica foi separada, seca sobre Na2SO4 anidro, e concentrada para fornecer o composto (R)-N-(3-amino-2-metilpropil)-4-(dimetilamino)benzenossulfonamida. RMN de ¹H (400 MHz, CDCl3) δ 7,70 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 6,68 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 3,04 (s, 6H), 2,98 (m, 1H), 2,75 (m, 2H), 2,58 (m, 1H), 1,78 (m, 2H), 0,87 (m, J = 7,2 Hz, 3H).

[00213] Com o uso de um método similar, sintetizou-se (S)-N-(3- amino-2-metilpropil)-4-(dimetilamino)benzenossulfonamida (intermediário para o composto A76). Via 34

[00214] A 6-cloro-N-((R)-3-((4-(dimetilamino)fenil)sulfonamido)-2- metilpropil)-1,2,3,4-tetra-hidronaftaleno-2-sulfonamida (100 mg, 200 µM) em NMP seco (4 ml) a 0 °C foi adicionado NaH (24 mg, 600 µmols) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 20 min, tempo durante o qual mudou de uma mistura turva para quase transparente. O dicloreto (21,3 µl, 200 µmols) foi adicionado e a mistura foi aquecida até 80 °C. Após 40 min, a reação foi resfriada bruscamente com salmoura e a camada aquosa foi extraída com acetato de etila (2X), os produtos orgânicos combinados foram lavados com salmoura (3X), secos com sulfato de sódio, filtrados e concentrados. Cromatografia em coluna (de 0 a 50% hexanos + 1% de dietilamina)/acetato de etila) forneceu o produto (composto B21). MS(EI) para C25H35ClN4O4S2, encontrado 555 [M+H]+. Via 35

[00215] A uma solução de 1-(4-fluoro-2-metoxifenil)piperazina (1,4 g, 6,8 mmols) em CH3CN (15 ml) foi adicionado trifluorometanossulfonato de 1- (1H-imidazol-1-ilsulfonil)-3-metil-1H-imidazol-3-io (2,7 g, 6,8 mmols). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi, então, concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer 1-((1H-imidazol-1-il)sulfonil)-4-(4-fluoro-2-metoxifenil)piperazina.

[00216] A uma solução de 1-((1H-imidazol-1-il)sulfonil)-4-(4-fluoro- 2-metoxifenil)piperazina (0,92 g, 2,7 mmols) em DCM (10 ml) foi adicionado CF3SO3Me (0,45 g, 2,7 mmols) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 5 h, em seguida, concentrada, e o produto resultante foi lavado com éter para fornecer trifluorometanossulfonato de 1-((4- (4-fluoro-2-metoxifenil)piperazin-1-il)sulfonil)-3-metil-1H-imidazol-3-io.

[00217] A uma solução de (R)-N-(3-amino-2-metilpropil)-4- (dimetilamino)benzenossulfonamida (0,6 g, 2,2 mmols) em CH3CN (6 ml) foi adicionado trifluorometanossulfonato de 1-((4-(4-fluoro-2-metoxifenil)piperazin- 1-il)sulfonil)-3-metil-1H-imidazol-3-io (1,1 g, 2,2 mmols). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer (S)-N-(3-((4- (dimetilamino)fenil)sulfonamido)-2-metilpropil)-4-(4-fluoro-2- metoxifenil)piperazina-1-sulfonamida.

[00218] A uma solução de (S)-N-(3-((4- (dimetilamino)fenil)sulfonamido)-2-metilpropil)-4-(4-fluoro-2- metoxifenil)piperazina-1-sulfonamida (771 mg, 1,42 mmol) em NMP (7 ml) foi adicionado NaH (140 mg, 3,48 mmols, a 60%). A mistura foi agitada por 0,5 h em 80 °C. A mistura foi resfriada até 70 °C e ((ciclo-hexilmetil)azanodi- il)bis(propano-3,1-di-il)dimetanossulfonato (820 mg, 2,1 mmol) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada por 2 h em 70 °C, em seguida, resfriada e derramada em água. A mistura resultante foi extraída com acetato de etila. O extrato foi concentrado e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (éter de petróleo/EtOAc = 10:1) para fornecer o composto A137. MS(EI) para C36H57FN6O5S2, encontrado 737 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,62 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,16 (m, 2H), 7,05 (m, 1H), 6,86 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 4,35 (m, 2H), 3,62 (m, 4H), 3,19 (m, 2H), 3,04 (s, 6H), 2,87 (m 4H), 2,46 (m, 5H), 1,92 (m,

1H), 1,79 (m, 2H), 1,66 (m, 4H).

[00219] Os seguintes compostos foram sintetizados de maneira similar: N.º IUPAC [M+H]+ 4-{[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-5-[4- (dimetilamino)benzenossulfonil]-3-metil-1,5,9- A153 714 triazaciclododecan-1-il]sulfonil}piperazina-1-carboxilato de terc-butila 2-(4-{[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-5-[4- A118 (dimetilamino)benzenossulfonil]-3-metil-1,5,9- 715 triazaciclododecan-1-il]sulfonil}piperazin-1-il)benzonitrila 4-{[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-5-{[4-(2-metoxifenil)piperazin-1- A154 il]sulfonil}-3-metil-1,5,9-triazaciclododecan-1-il]sulfonil}- 720 N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-3-metil-5-(piperazina-1-sulfonil)- A155 613 1,5,9-triazaciclododecano-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-5-{[4-(2,6-dimetilfenil)piperazin- A119 1-il]sulfonil}-3-metil-1,5,9-triazaciclododecano-1-il]sulfonil}- 717 N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-5-[(6-etil-1,2,3,4-tetra- A136 hidroisoquinolin-2-il)sulfonil]-3-metil-1,5,9- 688 triazaciclododecano-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-5-{[6-(4-fluoro-2-metilfenil)-2,6- A161 diazaspiro[3.3]heptan-2-il]sulfonil}-3-metil-1,5,9- 733 triazaciclododecan-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-5-{[(2S)-4-(4-fluoro-2-metilfenil)- A162 2-metilpiperazin-1-il]sulfonil}-3-metil-1,5,9- 735 triazaciclododecan-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina A163 4-{[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-5-{[(2R)-4-(4-fluoro-2-metilfenil)- 735

2-metilpiperazin-1-il]sulfonil}-3-metil-1,5,9- triazaciclododecan-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-3-metil-5-[(5-metil-1,2,3,4-tetra- A166 hidroisoquinolin-2-il)sulfonil]-1,5,9-triazaciclododecano-1- 674 il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-5-[(5-metóxi-1,2,3,4-tetra- A138 hidroisoquinolin-2-il)sulfonil]-3-metil-1,5,9- 690 triazaciclododecano-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 2-{[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-5-[4- (dimetilamino)benzenossulfonil]-3-metil-1,5,9- A151 685 triazaciclododecan-1-il]sulfonil}-1,2,3,4-tetra- hidroisoquinolina-5-carbonitrila 4-{[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-3-metil-5-[(1-metil-1,2,3,4-tetra- A170 hidroisoquinolin-2-il)sulfonil]-1,5,9-triazaciclododecano-1- 674 il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-3-metil-5-[(3-metil-1,2,3,4-tetra- A172 hidroisoquinolin-2-il)sulfonil]-1,5,9-triazaciclododecano-1- 674 il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-3-metil-5-({4-[2- A173 (trifluorometóxi)fenil]piperazin-1-il}sulfonil)-1,5,9- 773 triazaciclododecano-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-5-{[4-(3,4-difluoro-2- A174 metoxifenil)piperazin-1-il]sulfonil}-3-metil-1,5,9- 755 triazaciclododecan-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-5-{[4-(3-fluoro-2- A175 metoxifenil)piperazin-1-il]sulfonil}-3-metil-1,5,9- 737 triazaciclododecano-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-5-{[4-(5-fluoro-2- A176 737 metoxifenil)piperazin-1-il]sulfonil}-3-metil-1,5,9-

triazaciclododecano-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-5-{[(3R)-4-(4-fluoro-2- A177 metoxifenil)-3-metilpiperazin-1-il]sulfonil}-3-metil-1,5,9- 751 triazaciclododecan-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-5-{[3-(4-fluoro-2- A178 metoxifenil)azetidin-1-il]sulfonil}-3-metil-1,5,9- 708 triazaciclododecano-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-5-[(5-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-2- A181 il)sulfonil]-9-(ciclo-hexilmetil)-3-metil-1,5,9- 694 triazaciclododecano-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina (3S)-N-benzil-9-(ciclo-hexilmetil)-5-[4- A187 (dimetilamino)benzenossulfonil]-3-metil-1,5,9- 634 triazaciclododecano-1-sulfonamida 4-{[(3S)-5-{[4-(2-clorofenil)piperazin-1-il]sulfonil}-9-(ciclo- A198 hexilmetil)-3-metil-1,5,9-triazaciclododecan-1-il]sulfonil}- 723 N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-5-{[4-(4-metoxifenil)piperazin-1- A199 il]sulfonil}-3-metil-1,5,9-triazaciclododecan-1-il]sulfonil}- 719 N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-5-{[4-(3-metoxifenil)piperazin-1- A201 il]sulfonil}-3-metil-1,5,9-triazaciclododecan-1-il]sulfonil}- 719 N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-5-{[4-(3-fluoro-4- A202 metoxifenil)piperazin-1-il]sulfonil}-3-metil-1,5,9- 737 triazaciclododecano-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-5-{[4-(2-cloro-4-fluorofenil)piperazin-1-il]sulfonil}-9- A206 (ciclo-hexilmetil)-3-metil-1,5,9-triazaciclododecano-1- 741 il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina A147 4-{[(4S)-5-[(6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-2- 694 il)sulfonil]-9-(ciclo-hexilmetil)-4-metil-1,5,9- triazaciclododecano-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[(4R)-5-[(6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-2- A148 il)sulfonil]-9-(ciclo-hexilmetil)-4-metil-1,5,9- 694 triazaciclododecano-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[(2S)-5-[(6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-2- A150 il)sulfonil]-9-(ciclo-hexilmetil)-2-metil-1,5,9- 694 triazaciclododecano-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[(2R)-5-[(6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-2- A149 il)sulfonil]-9-(ciclo-hexilmetil)-2-metil-1,5,9- 694 triazaciclododecano-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-5-[(6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-2- A190 il)sulfonil]-9-[(1S)-1-ciclo-hexiletil]-3-metil-1,5,9- 708 triazaciclododecan-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-5-[(6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-2- A191 il)sulfonil]-9-[(1R)-1-ciclo-hexiletil]-3-metil-1,5,9- 708 triazaciclododecan-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-9-[(1S)-1-ciclo-hexiletil]-5-{[(3R)-4-(4-fluoro-2- A207 metoxifenil)-3-metilpiperazin-1-il]sulfonil}-3-metil-1,5,9- 765 triazaciclododecan-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina N,N-dimetil-4-{[(3S)-3-metil-9-[(1S)-1-feniletil]-5-(1,2,3,4- A205 tetra-hidroisoquinolina-2-sulfonil)-1,5,9-triazaciclododecan- 668 1-il]sulfonil}anilina

Via 36

[00220] A uma solução de 2-((terc- butoxicarbonilamino)metil)butanoato de (R)-metila (4,8 g, 20,8 mmols) em THF (50 ml) foi adicionado LiBH4 (0,7 g, 33 mmols). A mistura de reação foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. A mistura foi resfriada bruscamente com água (30 ml) seguido pela adição de HCl aquoso a 1 N gota a gota para ajustar o pH = 2 a aproximadamente 3. A mistura resultante foi extraída com acetato de etila e o extrato foi lavado com NaHCO3 aquoso saturado, seco sobre sulfato de sódio anidro e concentrado para fornecer 2-(hidroximetil)butilcarbamato de (R)- terc-butila.

[00221] A uma solução de 2-(hidroximetil)butilcarbamato de (R)- terc-butila (3,4 g, 16,7 mmols) em tolueno (40 ml) foi adicionado PPh 3 (6,2 g, 17,4 mmols) e isoindolina-1,3-diona (3,7 g, 25 mmols). A mistura foi resfriada até 0 a aproximadamente 5 °C e DIAD (4,3 g, 22 mmols) foi adicionado gota a gota. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 3 h. O precipitado resultante foi filtrado e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (éter de petróleo/EtOAc = 9:1 a 1:1) para fornecer 1-(4-

fluoro-2-metoxifenil)-4-(2-metil-1H-imidazol-1-ilsulfonil)piperazina.

[00222] A uma solução de 1-(4-fluoro-2-metoxifenil)-4-(2-metil-1H- imidazol-1-ilsulfonil)piperazina (3,8 g, 11,4 mmols) em EtOH (70 ml) foi adicionado hidrato de hidrazina (1,1 g, 80%). A mistura de reação foi refluxada durante 6 h. O produto resultante foi filtrado e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em NaOH aquoso a 1 N (20 ml) e depois extraído com DCM (50 ml). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro e concentrada para fornecer 2-(aminometil)butilcarbamato de (S)- terc-butila.

[00223] A uma solução de 2-(aminometil)butilcarbamato de (S)-terc- butila (1,87 g, 9,2 mmols) em DCM (20 ml) foi adicionado TEA (1,01 g, 10,1 mols). A mistura foi resfriada até 0 a aproximadamente 5 °C e cloreto de 4- (dimetilamino)benzeno-1-sulfonila (2,0 g, 9,2 mmols) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 3 h. A mistura foi lavada com água e depois concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (éter de petróleo/EtOAc = 9:1 a 7:3) para fornecer 2-((4- (dimetilamino)fenilsulfonamido)metil)butilcarbamato de (R)-terc-butila.

[00224] A uma solução de 2-((4- (dimetilamino)fenilsulfonamido)metil)butilcarbamato de (R)-terc-butila (2,9 g, 7,5 mmols) em MeOH (10 ml) foi adicionado HCl/MeOH a 4 N (15 ml). A mistura foi agitada durante 3 h à temperatura ambiente. O solvente foi removido sob pressão reduzida. O produto resultante foi suspenso em DCM (100 ml) e foi adicionado K2CO3 aquoso saturado (450 ml). A mistura foi agitada durante 5 min. A camada de DCM foi separada, seca sobre sulfato de sódio anidro e concentrada para fornecer (R)-N-(2-(aminometil)butil)-4- (dimetilamino)benzenossulfonamida.

[00225] A uma solução de (R)-N-(2-(aminometil)butil)-4- (dimetilamino)benzenossulfonamida (0,9 g, 3,2 mmols) em CH3CN (9 ml) foi adicionado trifluorometanossulfonato de 1-((6-cloro-3,4-di-hidroisoquinolin- 2(1H)-il)sulfonil)-2,3-dimetil-1H-imidazol-3-io (0,59 g, 3,2 mmol). A mistura de reação foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. A mistura foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (éter de petróleo/EtOAc = 8:1 a 2:1) para fornecer (S)-6-cloro-N-(2-((4- (dimetilamino)fenilsulfonamido)metil)butil)-3,4-di-hidroisoquinolina-2 (1H)- sulfonamida.

[00226] A uma solução de (S)-6-cloro-N-(2-((4- (dimetilamino)fenilsulfonamido)metil)butil)-3,4-di-hidroisoquinolina-2(1H )- sulfonamida (0,8 g, 1,5 mmol) em NMP (3 ml) foi adicionado NaH (159 mg, 3,9 mmols, a 60%). A mistura foi agitada por 0,5 h a 80 °C. A mistura foi resfriada até 70 °C e ciclopropano-1,1-di-ilbis(metileno)dimetanossulfonato (510 mg, 2,0 mmols) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada por 2 h a 70 oC. O solvente foi removido e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (éter de petróleo/EtOAc = 15:1) para fornecer o composto A182. LC-MS: m/z 708,2 [M+H]+. RMN de 1H(400 MHz, CDCl3): δ 7,59 (m, 2H), 7,15 (m, 2H), 7,05 (m, 1H), 6,68 (m, 2H), 4,34 (m, 2H), 3,55 (m, 4H), 3,19 (m, 6H), 3,04 (s, 6H), 2,87 (m, 4H), 2,15 (m, 4H), 1,89 (m, 10H), 1,32 (m, 8H), 0,88 (m, 3H). Via 37

[00227] A (S)-5-((6-cloro-3,4-di-hidroisoquinolin-2(1H)-il)sulfonil)-9- ((4-(dimetilamino)fenil)sulfonil)-7-metil-1,5,9-triazaciclododecano-1-carboxilato de benzila (25 mg) foi adicionado HBr (33% em ácido acético, 0,5 ml). Após 30 min à temperatura ambiente, a mistura foi diluída com éter dietílico e água

(mistura de 1:1, 10 ml) e a camada orgânica foi removida. A camada aquosa foi lavada com éter dietílico (1X5 ml), basificada com NaOH (a 4 N) a pH a aproximadamente 12, em seguida extraída com DCM (3X2 ml). Os produtos orgânicos foram secos com sulfato de sódio, filtrados e concentrados. A adição de hexanos (aproximadamente 2 ml) seguida pela concentração foi usada para facilitar a precipitação do produto. A secagem sob vácuo forneceu o composto A183. MS(EI) para C27H40ClN5O4S2, encontrado 598 [M+H]+. Via 38

[00228] A uma solução de 3,3’-azanodi-ildipropan-1-ol (1,0 g, 7,5 mmols) em DCM (20 ml) foi adicionado isobutiraldeído (1,22 g, 11,3 mmols). A mistura foi agitada durante 30 min à temperatura ambiente. Foi adicionado ácido acético (1,8 g, 30,1 mmols) e a mistura foi agitada durante mais 30 min. Triacetoxiboroidreto de sódio (6,40 g, 30,1 mmol) foi, então, adicionado, e a mistura de reação foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. A mistura foi ajustada a pH = 1 a 2 com HCl aquoso a 3 N e, então, agitada durante 1 h. À mistura foi adicionado NaOH aquoso a 20% (para ajustar o pH a 10 a 11), em seguida, foi extraído com DCM (50 ml). O extrato foi lavado com salmoura, seco sobre sulfato de sódio anidro e concentrado para fornecer 3,3’-(isobutilazanodi- il)bis(propan-1-ol).

[00229] A uma solução de 3,3’-(isobutilazanodi-il)bis(propan-1-ol) (780 mg, 4,1 mmols) em DCM (10 ml) foi adicionado NEt3 (820 mg, 8,2 mmols).

MsCl (935 mg, 8,2 mmols) foi, então, adicionado lentamente a 0 °C. A mistura de reação foi agitada durante 30 min à temperatura ambiente. A mistura foi diluída com DCM (20 ml) e depois lavada com água (25 ml). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro e concentrada para fornecer 3,3’- (Isobutilazanodi-il)bis(propano-3,1-di-il)dimetanossulfonato.

[00230] A uma solução de (S)-6-cloro-N-(3-((4- (dimetilamino)fenil)sulfonamido)-2-metilpropil)-3,4-di-hidroisoquinolina-2(1H)- sulfonamida (0,515 g, 1,03 mmol) em N-metilpirrolidona seca foi adicionado NaH (0,25 g, 2,26 mmols) à temperatura ambiente. A mistura foi aquecida até 80 °C com agitação durante 30 min e depois resfriada até a temperatura ambiente. 3,3’- (Isobutilazanodi-il)bis(propano-3,1-di-il)dimetanossulfonato (0,5 g, 1,5 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi aquecida até 80 °C durante 2 h. A reação foi resfriada bruscamente com água, então, extraída com acetato de etila. O extrato foi seco sobre sulfato de sódio anidro e concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna flash para gerar o composto A152. MS (EI) para C31H48ClN5O4S2, encontrado 654,4 [M+H]+.RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,59 (d, 2H), 7,16 (m, 2H), 7,04 (m, 1H), 6,69 (d, 2H), 4,32 (m, 2H), 3,60 (m, 4H), 3,31 (m, 3H), 3,04 (s, 6H), 2,90 (m, 4H), 2,27 (m, 4H), 1,93 (m, 2H), 1,79 (m, 1H), 0,87 (m, 9H).

[00231] Os seguintes compostos foram sintetizados de maneira similar: N.º IUPAC [M+H]+ 4-{[(3S)-5-[(6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-2- A123 il)sulfonil]-3-metil-9-(3-metilbutil)-1,5,9-triazaciclododecan- 668 1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-5-[(6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-2- A156 il)sulfonil]-3-metil-9-[(3-metilfenil)metil]-1,5,9- 702 triazaciclododecan-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina A131 4-{[(3S)-5-[(6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-2- 702 il)sulfonil]-3-metil-9-[(4-metilfenil)metil]-1,5,9- triazaciclododecan-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-5-[(6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-2- A157 il)sulfonil]-9-(ciclopentilmetil)-3-metil-1,5,9- 680 triazaciclododecano--1-il]sulfonil-N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-5-[(6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-2- A106 il)sulfonil]-3-metil-9-(2-metilbutil)-1,5,9-triazaciclododecan- 668 1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-5-[(6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-2- A108 il)sulfonil]-9-(ciclobutilmetil)-3-metil-1,5,9- 666 triazaciclododecano-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-5-[(6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-2- A134 il)sulfonil]-9-(2-ciclo-hexiletil)-3-metil-1,5,9- 708 triazaciclododecan-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-5-[(6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-2- A122 il)sulfonil]-9-(2-ciclopropiletil)-3-metil-1,5,9- 666 triazaciclododecan-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-5-[(6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-2- A120 il)sulfonil]-9-(2-ciclopentiletil)-3-metil-1,5,9- 694 triazaciclododecan-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-5-[(6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-2- A165 il)sulfonil]-3-metil-9-(3,3,3-trifluoropropil)-1,5,9- 694 triazaciclododecan-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-5-[(6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-2- A141 il)sulfonil]-3-metil-9-(propan-2-il)-1,5,9-triazaciclododecan- 640 1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-5-[(6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-2- A176 il)sulfonil]-9-[(ciclopent-1-en-1-il)metil]-3-metil-1,5,9- 678 triazaciclododecan-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina

4-{[(3S)-5-[(6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-2- A135 il)sulfonil]-9-[(ciclohex-1-en-1-il)metil]-3-metil-1,5,9- 692 triazaciclododecan-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-5-[(6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-2- A167 il)sulfonil]-3-metil-9-(2,2,2-trifluoroetil)-1,5,9- 680 triazaciclododecan-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-5-[(6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-2- A169 il)sulfonil]-9-[(3,3-difluorociclobutil)metil]-3-metil-1,5,9- 702 triazaciclododecan-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-5-[(6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-2- A133 il)sulfonil]-3-metil-9-[(2-metilfenil)metil]-1,5,9- 702 triazaciclododecan-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-5-[(6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-2- A140 il)sulfonil]-9-(2-metoxietil)-3-metil-1,5,9-triazaciclododecan- 656 1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-5-[(6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-2- A125 il)sulfonil]-3-metil-9-[(1,3-oxazol-2-il)metil]-1,5,9- 679 triazaciclododecan-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-5-[(6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-2- A124 il)sulfonil]-3-metil-9-[(1,2-oxazol-3-il)metil]-1,5,9- 679 triazaciclododecan-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-5-[(6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-2- A183 il)sulfonil]-3-metil-1,5,9-triazaciclododecan-1-il]sulfonil}- 598 N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-5-[(6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-2- A185 il)sulfonil]-9-[(4,4-difluorociclo-hexil)metil]-3-metil-1,5,9- 730 triazaciclododecan-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-5-[(6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-2- A107 668 il)sulfonil]-9-(2,2-dimetilpropil)-3-metil-1,5,9-

triazaciclododecan-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 4-{[(3S)-5-[(6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-2- A204 il)sulfonil]-9-[(4-fluorociclo-hexil)metil]-3-metil-1,5,9- 712 triazaciclododecan-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina Via 39

[00232] A uma mistura de 4-fluoro-2-metoxianilina (25,0 g, 177 mmols), K2CO3 (36,7 g, 266 mmols) e NaI (10,6 g, 0,07 mmol) em i-PrOH (250 ml) foi adicionado cloridrato de bis(2-cloroetil)amina (47 g, 177 mmols). A mistura de reação foi refluxada durante a noite. O solvente foi removido e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (éter de petróleo/EtOAc = 10:1) para fornecer 1-(4-fluoro-2-metoxifenil)piperazina. MS: m/z 212,36 [M+H]+.

[00233] Uma solução de 1-(4-fluoro-2-metoxifenil)piperazina (4,0 g, 19 mmols) em MeCN (40 ml) foi adicionado 2,3-dimetil-1-(2-metil-1H-imidazol-1- ilsulfonil)-1H-imidazol-3-io (7,5 g, 19 mmols). A mistura de reação foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. O solvente foi removido e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (éter de petróleo/EtOAc = 20:1) para fornecer 1-(4-fluoro-2-metoxifenil)-4-(2-metil-1H -imidazol-1-ilsulfonil)piperazina. MS: m/z 355,36 [M+H]+.

[00234] A uma solução de 1-(4-fluoro-2-metoxifenil)-4-(2-metil-1H - imidazol-1-ilsulfonil)piperazina (6,0 g, 17 mmols) em DCM (60 ml) adicionou-se CF3SO3Me (2,78 g, 17 mmols). A mistura de reação foi agitada durante 2 h à temperatura ambiente. O solvente foi removido e o resíduo foi lavado com éter para fornecer trifluorometanossulfonato de 1-(4-(4-fluoro-2-metoxifenil)piperazin- 1-ilsulfonil)-2,3-dimetil-1H-imidazol-3-io.

[00235] A uma solução de trifluorometanossulfonato de 1-(4-(4- fluoro-2-metoxifenil)piperazin-1-ilsulfonil)-2,3-dimetil-1H-imidazol-3-io (740 mg, 2,3 mmols) em CH3CN (8 ml) foi adicionado 3-((3-aminopropil)(ciclo- hexilmetil)amino)propilcarbamato de terc-butila (1,17 g, 2,3 mmols). A mistura de reação foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. A mistura foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (éter de petróleo/EtOAc = 8:1 a 2:1) para fornecer terc-butil-3-((ciclo-hexilmetil)(3-(4-(4- fluoro-2)-metoxifenil)piperazina-1-sulfonamido)propil)amino)propilcarbamato.

[00236] A uma solução de 3-((ciclo-hexilmetil)(3-(4-(4-fluoro-2- metoxifenil)piperazina-1-sulfonamido)propil)amino)propilcarbamato de terc- butila (600 mg, 1 mmol) em DCM (30 ml) foi adicionado TFA (30 ml). A mistura foi agitada durante 2 h à temperatura ambiente. O solvente foi removido e o resíduo foi dissolvido em acetato de etila, em seguida lavou-se com NaHCO3 aquoso saturado. A fase orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro e concentrada para fornecer N-(3-((3-aminopropil)(ciclo-hexilmetil)amino)propil)-4-

(4-fluoro-2-metoxifenil)piperazina-1-sulfonamida.

[00237] A uma solução de N-(3-((3-aminopropil)(ciclo- hexilmetil)amino)propil)-4-(4-fluoro-2-metoxifenil)piperazina-1-sulfonamida (416 mg, 0,83 mmol) em DCM (5 ml) foi adicionado Et3N (170 mg, 1,66 mmol) e cloreto de 4-(dimetilamino)benzenossulfonila (365 mg, 1,66 mmol). A mistura de reação foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. A mistura foi concentrada e purificada por cromatografia em coluna (éter de petróleo/EtOAc = 8:1 a 2:1) para fornecer N-(3-((ciclo-hexilmetil)(3-(4- (dimetilamino)fenilsulfonamido)propil)amino)propil)-4-(4-fluoro-2- metoxifenil)piperazina-1-sulfonamida.

[00238] A uma solução de N-(3-((ciclo-hexilmetil)(3-(4- (dimetilamino)fenilsulfonamido)propil)amino)propil)-4-(4-fluoro-2- metoxifenil)piperazina-1-sulfonamida (320 mg, 0,45 mmol) em NMP (3 ml) foi adicionado NaH (53 mg, 1,32 mmol, 60% de dispersão). A mistura foi agitada por 0,5 h em 80 °C, então, resfriada até 70 °C e ciclopropano-1,1-di- ilbis(metileno)dimetanossulfonato (170 mg, 0,66 mmol) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada por 2 h a 70 oC. O solvente foi removido e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (éter de petróleo/EtOAc = 15:1) para fornecer o composto A193. MS(EI) para C37H57FN6O5S2, encontrado 745,0 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): d 7,57 (t, 2H), 6,64 (t, 1H), 6,63 (br s, 4H), 3,86 (s, 3H), 3,19 (m, 4H), 3,04 (m, 8H), 2,87 (m, 12H), 2,36 (m, 2H), 1,56 (m, 15H), 0,43 (m, 4H). Via 40

[00239] A uma solução de 3-amino-2-metilpropilcarbamato de (S)- terc-butila (4,0 g, 21,3 mmols) em THF (20 ml) e água (20 ml) foi adicionado CbzOSu (5,83 g, 23,5 mmols). NaOH aquoso (a 4 N) foi adicionado para ajustar o pH = 11. A mistura de reação foi agitada em RT por 2 h. A mistura foi diluída com água (15 ml) e, então, extraída com acetato de etila (50 ml). A fase orgânica foi lavada com HCl aquoso a 1 N, seca sobre sulfato de sódio anidro e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer benzil terc-butil (2-metilpropano-1,3-di-il)(S)-dicarbamato.

[00240] A uma solução de benzil terc-butil (2-metilpropano-1,3-di- il)(S)-dicarbamato (4,5 g, 14,0 mmols) em DCM (25 ml) foi adicionado TFA (20 ml). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 3 h. A mistura foi concentrada e o resíduo foi dissolvido em DCM (50 ml). A solução resultante foi lavada com solução aquosa saturada de K2CO3 e a camada de DCM foi seca sobre sulfato de sódio anidro e concentrada para fornecer 3-amino-2- metilpropilcarbamato de (R)-benzila.

[00241] A uma solução de 3-amino-2-metilpropilcarbamato de (R)- benzila (2,7 g, 12,2 mmols) em CH3CN (25 ml) foi adicionado 1-(6-cloro-3,4-di- hidroisoquinolin-2(1H)-ilsulfonil)-2,3-dimetil-1H-imidazol-3-io (5,7 g, 12,2 mmols). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer 3-(6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina-2-sulfonamido)-2-metil propilcarbamato de (S)-benzila.

[00242] 3-(6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina-2-sulfonamido)-2- metil propilcarbamato de (S)-Benzila (2,7 g, 6,0 mmols) foi dissolvido em HBr (48%)/HOAc (20 ml). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h. A mistura foi diluída com água (100 ml) e depois lavada com éter (50 ml). A camada aquosa foi basificada com NaOH até pH = 10. A mistura resultante foi extraída com DCM (100 ml). A camada de DCM foi seca sobre sulfato de sódio anidro e concentrada para fornecer (S)-N-(3-amino-2-metilpropil)-6-cloro-3,4-di- hidroisoquinolina-2(1H)-sulfonamida.

[00243] A uma solução de (S)-N-(3-amino-2-metilpropil)-6-cloro-3,4- di-hidroisoquinolina-2(1H)-sulfonamida (0,6 g, 1,9 mmol) e TEA (270 mg, 2,7 mmols) em DCM (6 ml) foi adicionado cloreto de benzo[d]isoxazol-5-sulfonila (420 mg, 1,9 mmol) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada em RT por 2 h. A mistura foi lavada com água e depois concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer (S)-N-(3-(6-cloro-1,2,3,4-tetra- hidroisoquinolina-2-sulfonamido)-2-metilpropil)benzo[d]isoxazol-5-sulfonamida.

[00244] A uma solução de (S)-N-(3-(6-cloro-1,2,3,4-tetra- hidroisoquinolina-2-sulfonamido)-2-metilpropil)benzo[d]isoxazol-5-sulfonamida (0,61 g, 1,22 mmol) em NMP (6 ml) foi adicionado NaH (122 mg, 3,05 mmols, a 60%). A mistura foi agitada por 0,5 h a 80 °C. A mistura foi resfriada até 70 °C e 3,3’-(ciclo-hexilmetilazanodi-il)bis(propano-3,1-di-il)dimetanossulfonato (0,74 g, 1,83 mmol) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada por 2 h a 70 oC. A mistura foi resfriada e vertida em água. A mistura resultante foi extraída com acetato de etila. A fase orgânica foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (éter de petróleo/EtOAc = 12:1) para fornecer o composto A180. LC-MS (ESI): m/z 692,2 [M+H]+. RMN de 1H(400 MHz, CDCl3): δ 7,84 (S, 1H), 7,61 (m, 1H), 7,13 (m, 3H), 6,69 (m, 2H), 4,32 (m, 2H), 3,66 (m,

5H), 3,21 (m, 5H), 2,91 (m, 4H), 2,77 (m, 4H), 1,91 (m, 4H), 1,57 (m, 6H), 1,13 (m, 6H), 0,89 (m, 3H).

[00245] Os seguintes compostos foram sintetizados de maneira similar: N.º IUPAC [M+H]+ 3-{[(3S)-5-[(6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-2- A168 il)sulfonil]-9-(ciclo-hexilmetil)-3-metil-1,5,9- 694 triazaciclododecano-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina 6-cloro-2-{[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-3-metil-5- A171 fenilmetanossulfonil-1,5,9-triazaciclododecan-1-il]sulfonil}- 665 1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina 4-{[(3S)-5-[(6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-2- A179 il)sulfonil]-9-(ciclo-hexilmetil)-3-metil-1,5,9- 722 triazaciclododecano-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilbenzamida (3S)-N-benzil-9-(ciclo-hexilmetil)-5-[4- A184 (dimetilamino)benzenossulfonil]-N,3-dimetil-1,5,9- 648 triazaciclododecano-1-sulfonamida 6-cloro-2-{[(3S)-9-(ciclohexilmetil)-3-metil-5-[(1-metil-1H- A188 indol-5-il)sulfonil]-1,5,9-triazaciclododecano-1-il]sulfonil}- 704 1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina (3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-5-[4- A189 (dimetilamino)benzenossulfonil]-N-[(4-etilfenil)metil]-3- 662 metil-1,5,9-triazaciclododecano-1-sulfonamida N-{4-[({[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-5-[4- (dimetilamino)benzenossulfonil]-3-metil-1,5,9- A192 705 triazaciclododecan-1-il]sulfonil}amino)metil]fenil}-N- metilacetamida

Via 41

[00246] A uma suspensão de Mg (4,4 g, 181 mmols) em THF (200 ml) foi adicionado 1-bromo-2-metoxibenzeno (40 g, 214 mmols). A mistura foi agitada a 80 °C durante 0,5 h. A mistura foi resfriada até 0 °C e uma solução de 3-oxopiperidina-1-carboxilato de terc-butila (35,5 g, 181 mmols) em THF foi adicionada. A mistura de reação foi agitada em RT por 2 h. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer 3-hidróxi-3-(2- metoxifenil)piperidina-1-carboxilato de terc-butila. RMN de 1H(400 MHz, CDCl3): δ 7,48 (m, 1H), 7,32 (m, 1H), 6,98 (m, 2H), 4,08 (m, 1H), 3,96 (s, 3H), 3,82 (m, 1H), 3,31 (s, 1H), 2,98 (m, 1H), 2,25 (m, 1H), 1,99 (m, 2H), 1,62 (m, 2H), 1,63 (m, 9H).

[00247] Uma solução de 3-hidróxi-3-(2-metoxifenil)piperidina-1- carboxilato de terc-butila (23,0 g, 75 mmols) e trietilsilano (44 ml) em DCM (230 ml) foi resfriada até -30 °C e TFA (27 ml) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada a -30 °C por 2,5 h e, em seguida, deixada aquecer até a temperatura ambiente e agitada por mais 3,5 h. A mistura foi vertida em água gelada e a solução foi ajustada a pH = 9 com hidróxido de sódio aquoso saturado. A mistura resultante foi extraída três vezes com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio anidro e concentradas. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer 3-(2-metoxifenil)piperidina.

[00248] Uma solução de 3-(2-metoxifenil)piperidina (6,5 g, 34 mmols) e ácido D- tartárico (5,1 g, 34 mmols) em MeOH (25 ml) foi refluxada durante 2 h. A mistura foi resfriada até a temperatura ambiente e filtrada para fornecer o sal de tartarato. Esse sal tartarato foi recristalizado duas vezes em MeOH e, então, tratado com NaOH aquoso. A mistura resultante foi extraída com DCM. A camada de DCM foi seca sobre sulfato de sódio anidro e concentrada para fornecer (S)-3-(2-metoxifenil)piperidina.

[00249] Uma solução de (S)-3-(2-metoxifenil)piperidina (500 mg, 2,6 mmols) e trifluorometanossulfonato de 2,3-dimetil-1-((2-metil-1H-imidazol-1- il)sulfonil)-1H-imidazol-3-io (1,1 g, 2,7 mmols) em MeCN (15 ml) foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. O solvente foi removido. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (éter de petróleo/EtOAc = 20:1) para fornecer (S)-3-(2-metoxifenil)-1-((2-metil-1H -imidazol-1-il)sulfonil)piperidina. LC- MS (ESI): m/z 336,06 [M+H]+.

[00250] A uma solução de (S)-3-(2-metoxifenil)-1-((2-metil-1H- imidazol-1-il)sulfonil)piperidina (800 g, 2,4 mmols) em DCM (10 ml) adicionou-se CF3SO3Me (398 mg, 2,4 mmols). A mistura de reação foi agitada durante 2 h à temperatura ambiente. O solvente foi removido e o resíduo foi lavado com éter para fornecer trifluorometanossulfonato de (S)-1-(3-(2-metoxifenil)piperidin-1-il)- 2,3-dimetil-1H -imidazol-3-io.

[00251] A uma solução de trifluorometanossulfonato de

(S)-1-(3-(2-metoxifenil)piperidin-1-il)-2,3-dimetil-1 H -imidazol-3-io (1 g, 2 mmols) em CH3CN (24 ml) foi adicionada (R)-N-(3-amino-2-metilpropil)-4- (dimetilamino)benzenossulfonamida (0,55 g, 2 mmols). A mistura de reação foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. A mistura foi concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (éter de petróleo/EtOAc = 8:1 a 2:1) para fornecer (S)-N-((S)-3-((4-(dimetilamino)fenil)sulfonamido)-2- metilpropil)-3-(2-metoxifenil)piperidina-1-sulfonamida.

[00252] A uma solução de (S)-N-((S)-3-((4- (dimetilamino)fenil)sulfonamido)-2-metilpropil)-3-(2-metoxifenil)piperidina-1- sulfonamida (454 mg, 0,86 mmol) em NMP (14 ml) foi adicionado NaH (104 mg, 2,6 mmols, 60%). A mistura foi agitada por 0,5 h a 80 °C. A mistura foi resfriada até 70 °C e ((ciclo-hexilmetil)azanodi-il)bis(propano-3,1-di-il)dimetanossulfonato (500 mg, 1,3 mmol) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada por 2 h a 70 oC. A mistura foi resfriada até 0 a 5 °C e despejada na água. A mistura resultante foi extraída com acetato de etila. A fase orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro e concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa para fornecer o composto A210. LC-MS (ESI): m/z 718,17 [M+H]+. RMN de 1H(400 MHz, CDCl3): δ 7,60 (m, 2H), 7.23 (m, 2H), 6,95(m, 2H), 6,68 (m, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,73 (m, 5H), 3,26 (m, 4H), 3,12 (s, 6H), 2,76 (m, 5H), 2,36 (m, 4H), 1,76 (m, 9H), 1,33 (m, 10H), 0,86 (m, 6H).

[00253] O composto a seguir foi sintetizado de maneira similar: N.º IUPAC [M+H]+ 4-{[(3S)-9-(ciclo-hexilmetil)-5-{[(3S)-3-(4- A208 metoxifenil)piperidin-1-il]sulfonil}-3-metil-1,5,9- 718 triazaciclododecano-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina

Via 42

[00254] A uma solução de 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan- 2-il)-5,6-di-hidropiridina-1(2H)-carboxilato de terc-butila (10,92 g, 35 mmols), 1- bromo-3-metoxibenzeno (6,6 g, 35 mmols) e Cs2CO3 (3,44 g, 106 mmols) em 1,4-dioxano (50 ml) e H2O (10 ml) adicionou-se Pd(dppf)Cl2 (1,32 g, 1,75 mmol). A mistura de reação foi agitada durante a noite a 80 °C. O solvente foi removido. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (éter de petróleo/EtOAc = 10:1) para fornecer 3-(3-metoxifenil)-5,6-di-hidropiridina-1(2H)-carboxilato de terc- butila. LC-MS (ESI): m/z 290,12 [M+H]+. RMN de 1H(400 MHz, CDCl3): δ 7,26 (m, 1H), 6,96 (m, 1H), 6,89 (s, 1H), 6,81(m, 1H), 6,19 (s, 1H), 4,25 (s, 2H), 3,81 (s, 3H), 3,54 (m, 2H), 2,30 (s, 2H), 1,49 (s, 9H).

[00255] A uma solução de 3-(3-metoxifenil)-5,6-di-hidropiridina- 1(2H)-carboxilato de terc-butila (9,46 g, 32 mmols) em MeOH (75 ml) e EtOAc

(25 ml) foi adicionado Pd/C (2 g). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 4 h sob atmosfera de H2. A mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado para fornecer 3-(3-metoxifenil)piperidina-1-carboxilato de terc-butila. RMN de 1H(400 MHz, CDCl3): δ 7,25 (m, 1H), 6,81 (m, 3H), 3,99 (m, 2H), 3,73 (s, 3H), 2,65 (m, 1H), 2,55 (m, 1H), 2,50 (m, 2H), 1,98 (m,1H), 1,65 (m, 2H), 1,44 (s, 9H).

[00256] Uma solução de 3-(3-metoxifenil)piperidina-1-carboxilato de terc-butila(7,85 g, 27 mmols) em HCl/MeOH (80 ml) foi agitada à temperatura ambiente por 4 h. A mistura foi tratada com água e, em seguida, ajustada a pH = 12 com NaOH aquoso a 3 N. A mistura resultante foi extraída com EtOAc (100 ml × 2). Os extratos combinados foram secos sobre sulfato de sódio anidro e concentrados para fornecer 3-(3-metoxifenila). LC-MS (ESI): m/z 192,09 [M+H]+.

[00257] A uma solução de ácido D-(-)-tartárico (2,5 g, 16,7 mmols) em MeOH (12,5 ml) foi adicionada 3-(3-metoxifenil)piperidina (3,2 g, 16,7 mmols). A mistura foi agitada a 80 °C por 24 h, em seguida, resfriada à temperatura ambiente. O precipitado resultante foi coletado por filtração e depois recristalizado três vezes a partir de MeOH para fornecer (S)-3-(3- metoxifenil)piperidina.

[00258] A uma solução de (S)-3-(3-metoxifenil)piperidina (1,28 g, 6,7 mmols) em CH3CN (10 ml) foi adicionado trifluorometanossulfonato de 1-(1H- imidazol-1-ilsulfonil)-3-metil-1H-imidazol-3-io (2,87 g, 7,3 mmols). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. O solvente foi removido. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (éter de petróleo/EtOAc = 9:1 a 8:2) para fornecer (S)-3-(3-metoxifenil)-1-(2-metil-1H - imidazol-1-ilsulfonil)piperidina. RMN de 1H(400 MHz, CDCl3): δ 7,27 (m, 1H), 7,21 (s, 1H), 6,93 (s, 1H), 6,79 (m, 2H), 6,72 (s, 1H), 3,93 (m, 2H), 3,82 (s, 3H), 2,68 (m, 1H), 2,65 (m, 2H), 2,62 (s, 3H), 2,06 (m, 1H), 1,95 (m, 1H), 1,82 (m, 1H), 1,62 (m, 1H).

[00259] A uma solução de (S)-3-(3-metoxifenil)-1-(2-metil-1H- imidazol-1-ilsulfonil)piperidina (1,6 mg, 4,7 mmols) em DCM (20 ml) foi adicionado CF3CO2Me (782 mg, 4,7 mmols). A mistura de reação foi agitada em

RT por 2 h. O solvente foi removido. O produto resultante foi lavado com éter para fornecer trifluorometanossulfonato de (S)-1-(3-(3-metoxifenil)piperidin-1- ilsulfonil)-2,3-dimetil-1H-imidazol-3-io.

[00260] A uma solução de trifluorometanossulfonato de (S)-1-(3-(3- metoxifenil)piperidin-1-ilsulfonil)-2,3-dimetil-1H-imidazol-3-io (1,1 g, 2,2 mmols) em CH3CN (11 ml) foi adicionada (R)-N-(3-amino-2-metilpropil)-4- (dimetilamino)benzenossulfonamida (896 mg, 33 mmols). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. O solvente foi removido. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna para fornecer (S)-N-((S)-3-(4- (dimetilamino)fenilsulfonamido)-2-metilpropil)-3-(3-metoxifenil)piperidina-1- sulfonamida. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,68 (m, 2H), 7,28 (m, 1H), 6,85 (m, 1H), 6,80 (m, 2H), 6,68 (m, 2H), 4,81 (m, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,76 (m, 2H), 3,12 (m, 1H), 3,07(s, 6H), 2,82 (m, 4H), 2,11 (m, 1H), 1,93 (m, 2H), 1,77 (m, 1H), 1,29 (m, 3H), 0,91 (m, 3H).

[00261] A uma solução de (S)-N-((S)-3-(4- (dimetilamino)fenilsulfonamido)-2-metilpropil)-3-(3-metoxifenil)piperidina-1- sulfonamida (550 mg, 1,05 mmol) em NMP (6 ml) foi adicionado hidreto de sódio (75,6 mg, 3,15 mmols). A mistura foi agitada por 30 min a 80 °C. A mistura foi resfriada até 70 °C e uma solução de ((ciclo-hexilmetil)azanodi-il)bis(propano- 3,1-di-il)dimetanossulfonato (606 mg, 1,57 mmol) em NMP (3 ml) foi adicionada. A mistura de reação foi agitada a 70 °C por 1 h. A mistura foi resfriada à temperatura ambiente e vertida em água (10 ml). A mistura resultante foi extraída com acetato de etila (20 ml). A camada orgânica foi lavada com água (15 ml × 2), seca sobre sulfato de sódio anidro e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (EtOAc/éter de petróleo = 1:15 a 1:5) para fornecer o composto A20. LC-MS (ESI): m/z 719,2 [M+H]+. RMN de 1H(400 MHz, CDCl3): δ 7,61 (m, 2H), 7,28 (m, 2H), 6,84 (m, 3H), 6,70 (m, 2H), 3,83 (s, 3H), 3,70 (m, 2H), 3,55 (m, 2H), 3,30 (m, 1H), 3,11(s, 9H), 2,79 (m, 5H), 2,41 (m, 1H), 2,33 (m, 3H), 2,05 (m, 8H), 1,67 (m, 4H), 1,27 (m, 7H), 0,94 (m, 3H), 0,85 (m, 2H). Via 43

[00262] A uma solução de (S)-N-(3-((4- (dimetilamino)fenil)sulfonamido)-2-metilpropil)-4-(4-fluoro-2- metoxifenil)piperazina-1-sulfonamida (900 mg, 1,65 mmol) em NMP (5 ml) foi adicionado NaH (198 mg, 4,92 mmols, a 60%). A mistura foi agitada por 0,5 h a 80 °C. A mistura foi resfriada até 70 °C e (S)-3,3’-(1-ciclo-hexiletilazanodi- il)bis(propano-3,1-di-il)dimetanossulfonato (844 mg, 2,49 mmols) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada por 2 h em 70 °C, em seguida, a 0 a 5 °C e vertida em água. A mistura resultante foi extraída com acetato de etila. O extrato foi concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (éter de petróleo/EtOAc = 15:1) para fornecer o composto A203. LC-MS (ESI): m/z 751,33 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,68 (m, 2H), 6,92 (m, 1H), 6,78 (m, 4H), 3,92 (s, 4H), 3,86 (m, 1H), 3,62 (m, 1H), 3,40 (m, 2H), 3,19 (m, 3H), 3,04 (s, 9H), 2,87 (m 2H), 2,26 (m, 3H), 1,92 (m, 3H), 1,79 (m, 4H), 1,66 (m, 2H), 1,54 (m, 2H), 1,38 (m, 4H), 1,26 (m, 5H), 0,98 (m, 3H), 0,83 (m, 4H).

[00263] Os seguintes compostos foram sintetizados de maneira similar: N.º IUPAC [M+H]+ 4-{[(1S,12R)-10-[(6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-2- il)sulfonil]-6-(ciclo-hexilmetil)-2,6,10- B22 706 triazabiciclo[10.2.0]tetradecan-2-il]sulfonil}-N,N- dimetilanilina 4-{[(3S,7S,11S)-5-[(6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-2- A160 il)sulfonil]-9-(ciclo-hexilmetil)-3,7,11-trimetil-1,5,9- 722 triazaciclododecan-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina

4-{[(3S,7R,11S)-5-[(6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-2- B16 il)sulfonil]-9-(ciclo-hexilmetil)-3,7,11-trimetil-1,5,9- 722 triazaciclododecan-1-il]sulfonil}-N,N-dimetilanilina Via 44

[00264] A uma solução de 1-bromo-4-fluoro-2-metoxibenzeno (910 mg, 4,4 mmols) e KHMDS a 1M (18 ml, 18 mmols) em 1,4-dioxano (9 ml) foi adicionado (3R,5R)-3,5-dimetilpiperazina-1-carboxilato de terc-butila (950 mg, 4,4 mmols). A mistura de reação foi agitada a 100 °C por 3 horas. O solvente foi removido e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (éter de petróleo/EtOAc = 20:1) para fornecer (3R,5R)-4-(3-fluoro-5-metoxifenil)-3,5- dimetilpiperazina-1-carboxilato de terc-butila. LC-MS (ESI): m/z 339,0 [M+H]+.

[00265] A uma solução de (3R,5R)-4-(3-fluoro-5-metoxifenil)-3,5- dimetilpiperazina-1-carboxilato de terc-butila (800 mg, 2,4 mmols) em DCM (4 ml) foi adicionado TFA (4 ml). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h. O solvente foi removido. O resíduo foi dissolvido em DCM (50 ml) e depois lavado com K2CO3 aquoso saturado. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro e concentrada para fornecer (2R,6R)-1-(3-metóxi-5- metilfenil)-2,6-dimetilpiperazina.

[00266] A uma solução de (2R,6R)-1-(3-metóxi-5-metilfenil)-2,6- dimetilpiperazina (500 mg, 2,1 mmols) em MeCN (5 ml) foi adicionado trifluorometanossulfonato de 2,3-dimetil-1-((2-metil-1H-imidazol-1-il)sulfonil)-1H- imidazol-3-io (825 mg , 2,1 mmols). A mistura de reação foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. O solvente foi removido. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (éter de petróleo/EtOAc = 20:1) para fornecer (2R,6R)-1-(3-fluoro-5-metoxifenil)-2,6-dimetil-4-((2-metil-1H-imidazol-1- il)sulfonil)piperazina. LC-MS (ESI): m/z 383,53 [M+H]+.

[00267] A uma solução de (2R,6R)-1-(3-metóxi-5-metilfenil)-2,6- dimetilpiperazina (450 mg, 1,2 mmol) em DCM (5 ml) adicionou-se CF3SO3Me (193 mg, 1,2 mmol). A mistura de reação foi agitada durante 2 h à temperatura ambiente. O solvente foi removido e o resíduo foi lavado com éter para fornecer trifluorometanossulfonato de 1-(((3R,5R)-4-(3-fluoro-5-metoxifenil)-3,5- dimetilpiperazin-1-il)sulfonil)-2,3-dimetil-1H-imidazol-3-io.

[00268] A uma solução de trifluorometanossulfonato de 1-(((3R,5R)- 4-(3-fluoro-5-metoxifenil)-3,5-dimetilpiperazin-1-il)sulfonil)-2,3-dimetil-1H- imidazol-3-io (500 mg, 0,91 mmol) em CH3CN (5 ml) foi adicionado (R)-N-(3- amino-2-metilpropil)-4-(dimetilamino)benzenossulfonamida (248 mg, 0,91 mmol). A mistura de reação foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. A mistura foi concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (éter de petróleo/EtOAc = 8:1 a 2:1) para fornecer (2S,6S)-N-((S)-3-((4- (dimetilamino)fenil)sulfonamido)-2-metilpropil)-4-(3-fluoro-5-metoxifenil)-2,6- dimetilpiperazina-1-sulfonamida. LC-MS (ESI): m/z 572,4 [M+H]+.

[00269] A uma solução de (2S,6S)-N-((S)-3-((4- (dimetilamino)fenil)sulfonamido)-2-metilpropil)-4-(3-fluoro-5-metoxifenil)-2,6-

dimetilpiperazina-1-sulfonamida (430 mg, 0,75 mmol) em NMP (4 ml) foi adicionado NaH (91 mg, 2,3 mmols, 60%). A mistura foi agitada por 0,5 h a 80 °C. A mistura foi resfriada até 70 °C e ((ciclo-hexilmetil)azanodi-il)bis(propano- 3,1-di-il)dimetanossulfonato (435 mg, 1,1 mmol) foi adicionado. A mistura de reação foi agitada por 2 h a 70 oC. O solvente foi removido e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (éter de petróleo/EtOAc = 15:1) para fornecer o composto A200. LC-MS (ESI): m/z 764,3 [M+H]+. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,60 (d, 2H), 6,69 (d, 2H), 6,32 (d, 3H), 3,78 (s, 3H), 3,06 (q, 2H), 3,04 (s, 8H), 3,00 (s, 2H), 2,87 (d, 2H), 2,76 (s, 2H), 2,34 (br s, 4H), 2,09 (br s, 2H), 1,33 (s, 17H), 1,04 (d, 7H), 0,93 (d, 3H). (S)-3,3’-(1-CICLO-HEXILETILAZANODI-IL)DIPROPAN-1-OL (INTERMEDIÁRIO PARA COMPOSTOS A203, A190, A207)

[00270] A uma solução de (S)-1-ciclo-hexiletanamina (4,0 g, 31,46 mmols) em metanol (50 ml) foi adicionado acrilato de metila (8,1 g, 94,38 mmols). A mistura de reação foi agitada por 72 h a 45 °C. A mistura foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (EtOAc/éter de petróleo = 30:1) para fornecer 3,3’-(1-ciclo-hexiletilazanodi-il)dipropanoato de (S)-dimetila.

[00271] A uma solução de 3,3’-(1-ciclo-hexiletilazanodi- il)dipropanoato de (S)-dimetila (4,0 g, 13,37 mmols) em THF (50 ml) foi adicionado LiBH4 (1,45 g, 66,84 mmols). A mistura de reação foi agitada a 60 °C por 2 horas. A mistura foi resfriada até 0 a 5 °C e resfriada bruscamente com água (30 ml). A mistura foi ajustada a pH = 3 com ácido clorídrico aquoso a 1 N e agitada durante 30 minutos. A mistura resultante foi lavada com diclorometano. A camada aquosa foi ajustada a pH = 9 a 10 com carbonato de sódio aquoso saturado e depois extraída com DCM (3X). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio anidro e concentradas para fornecer (S)-3,3’-

(1-ciclo-hexiletilazanodi-il)dipropan-1-ol. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 3,66 (s, 1H), 2,82 (m, 2H), 2,42 (m, 2H), 2,21 (m, 1H), 1,96 (m, 2H), 1,67 (m, 4H), 1,22 (m, 4H), 0,91 (m, 3H), 0,81 (m, 1H), 0,72 (m, 1H).

[00272] Os seguintes compostos foram sintetizados de maneira similar: (R)-3,3’-(1-ciclo-hexiletilazanodi-il)dipropan-1-ol (intermediário para o composto A191) e (S)-3,3’-((1-feniletil)azanodi-il)bis(propan-1-ol) (intermediário para o composto A205) 6-CLORO-N-(((1R,2S)-2-(4- (DIMETILAMINO)FENILSULFONAMIDO)CICLOBUTIL)METIL)-3,4-DI- HIDROISOQUINOLINA-2(1H)-SULFONAMIDA (INTERMEDIÁRIO PARA O COMPOSTO B22)

[00273] A uma suspensão de cis-3-oxabiciclo[3.2.0]heptano-2,4- diona (32,8 g, 200 mmols) e quinina (71,4 g, 220 mmols) em tolueno (1 l) foi adicionado álcool benzílico (64,9 g, 600 mmols) gota a gota durante um período de 0,5 h a -55 °C. A mistura de reação foi agitada a -55 °C por 96 h. A solução clara resultante foi concentrada até a secura e o resíduo foi dissolvido em éter dietílico (1,2 l). A solução foi lavada com HCl aquoso a 2N (1 l), a camada orgânica foi extraída com bicarbonato de sódio aquoso saturado (500 × 5 ml), e as fases aquosas combinadas resultantes foram lavadas com éter dietílico (500 ml) para remover os vestígios de álcool benzílico. A fase aquosa foi acidificada com HCl aquoso a 8 N , então, extraída com DCM (1,0 l × 2). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio anidro e concentradas para fornecer ácido (1S,2R)-2(benziloxicarbonil)ciclobutanocarboxílico .

[00274] A uma solução de ácido (1S,2R)-2- (benziloxicarbonil)ciclobutanocarboxílico (40,1 g, 171,4 mmols) e trietilamina (26,0 g, 257 mmols) em dicloroetano (400 ml) foi adicionado gota a gota DPPA (51,8 g, 188,5 mmols) a 0 °C. A mistura foi agitada durante 2 h à temperatura ambiente e depois lavada com água e seca sobre NaSO 4 anidro. À solução orgânica foi adicionado BnOH (18,5 g, 171 mmols) e trietilamina (34,6 g, 342 mmols). A mistura de reação foi refluxada durante a noite e, em seguida, diluída com DCM (500 ml). A mistura foi lavada com HCl aquoso a 1 N (1 l) e NaHCO3 aquoso saturado. A fase orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro, concentrada e purificada por cromatografia em coluna para fornecer 2- (benziloxicarbonilamino)ciclobutanocarboxilato de (1R,2S)-benzila.

[00275] A uma solução de 2- (benziloxicarbonilamino)ciclobutanocarboxilato de (1R,2S)-benzila (20 g, 59 mmols) em THF (100 ml) foi adicionado NaOH aquoso a 4 N (50 ml) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. A mistura foi diluída com água (30 ml) e depois lavada com éter (50 ml × 2). A camada aquosa foi acidificada com HCl aquoso a 3N e extraída com acetato de etila. Os extratos foram secos sobre sulfato de sódio anidro e concentrados para fornecer ácido (1R,2S)-2-(benziloxicarbonilamino)ciclobutanocarboxílico. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,34 (m, 5H), 5,12 (m, 2H), 4,62 (m, 1H), 3,58 (m, 1H), 2,28 (m, 2H), 1,89 (m, 2H).

[00276] A uma solução de ácido (1R,2S)-2- (benziloxicarbonilamino)ciclobutanocarboxílico (4,0 g, 16,1 mmols) e K2CO3 (4,4 g, 32 mmols) em DMF (40 ml) foi adicionado MeI (2,96 g, 20,8 mmols). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi vertida em água (150 ml) e depois extraída com éter (200 ml). A fase orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer 2- (benziloxicarbonilamino)ciclobutanocarboxilato de (1R,2S)-metila. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,34 (m, 5H), 5,69 (m, 1H), 5,08 (s, 2H), 4,62 (m, 1H), 3,66 (s, 3H), 3,38 (m, 1H), 2,32 (m, 2H), 1,99 (m, 2H).

[00277] A uma solução de 2- (benziloxicarbonilamino)ciclobutanocarboxilato de (1R,2S)-metila (8,9 g, 33,8 mmols) em MeOH (250 ml) foi adicionado NaOMe (9,1 g, 169 mmols). A mistura foi aquecida até 45 °C durante 4 h, em seguida, resfriada até 0 °C e HOAc (10,2 g, 169 mmols) foi adicionado gota a gota. A mistura foi, então, vertida em água (500 ml) e extraída com acetato de etila (300 ml). O extrato foi lavado com solução aquosa saturada de NaHCO3 e seco sobre sulfato de sódio anidro. A solução orgânica foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer 2- (benziloxicarbonilamino)ciclobutanocarboxilato de (1S,2S)-metila. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,34 (m, 5H), 5,08 (m, 3H), 4,38 (m, 1H), 3,72 (s, 3H), 3,38 (m, 1H), 2,32 (m, 2H), 1,89 (m, 2H).

[00278] A uma solução de (1S,2S)-2- (benziloxicarbonilamino)ciclobutanocarboxilato (1,3 g, 4,9 mmols) em THF (10 ml) foi adicionado LiBH4 (0,38 g, 9,8 mmols). A mistura de reação foi agitada durante 3 h à temperatura ambiente, em seguida, vertida em água (15 ml) e extraída com acetato de etila. A fase orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro e concentrada para fornecer (1S,2S)-2-(hidroximetil)ciclobutilcarbamato de benzila. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,34 (m, 5H), 5,08 (m, 3H), 3,72 (m, 1H), 3,57 (m, 2H), 2,32 (m, 2H), 1,89 (m, 2H), 1,45 (m, 1H).

[00279] A uma solução de (1S,2S)-2- (hidroximetil)ciclobutilcarbamato de benzila (1,1 g, 4,94 mmols), PPh3 (1,5 g, 5,9 mmols) e isoindolina-1,3-diona (1,0 g, 6,9 mmols) em tolueno (10 ml) foi adicionado DIAD (1,2 g, 5,9 mmols) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada por 3 h. O precipitado foi removido por filtração e o filtrado foi concentrado e purificado por cromatografia em coluna para fornecer (1S,2R)-2-((1,3- dioxoisoindolin-2-il)metil)ciclobutilcarbamato de benzila.

[00280] A uma solução de (1S,2R)-2-((1,3-dioxoisoindolin-2- il)metil)ciclobutilcarbamato de benzila (2,0 g, 5,5 mmols) em EtOH (40 ml) foi adicionado hidrato de hidrazina (0,64 g). A mistura foi refluxada durante 3 h. A mistura foi resfriada, filtrada e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi dissolvido em HCl aquoso a 1N (30 ml) e depois lavado com éter (20 ml). A camada aquosa foi ajustada a pH = 10. A mistura resultante foi extraída com DCM (50 ml × 2). Os produtos orgânicos combinados foram secos sobre sulfato de sódio anidro e concentrados para fornecer (1S,2R)-2-(aminometil)ciclobutilcarbamato de benzila.

[00281] A uma solução de (1S,2R)-2- (aminometil)ciclobutilcarbamato de benzila (0,8 g, 3,4 mmols) em CH3CN (10 ml) foi adicionado trifluorometanossulfonato de 1-((6-cloro-3,4-di-hidroisoquinolin- 2(1H)-il)sulfonil)-2,3-dimetil-1H-imidazol-3-io (2,4 g, 5,12 mmols). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer (1S,2R)-2-((6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina-2- sulfonamido)metil)ciclobutilcarbamato de benzila.

[00282] A solução de HBr a 40% em HOAc (10 ml) foi adicionado (1S,2R)-2-((6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina-2- sulfonamido)metil)ciclobutilcarbamato de benzila (1,2 g, 2,6 mmols). A mistura foi agitada durante 3 h, em seguida, vertida em água (50 ml) e lavada com éter. A camada aquosa foi ajustada a pH = 10 com NaOH aquoso a 8 N. A mistura foi extraída com DCM (50 ml). A fase orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro e concentrada para fornecer N-(((1R,2S)-2-aminociclobutil)metil)-6-cloro-3,4-di- hidroisoquinolina-2(1H)-sulfonamida.

[00283] A uma solução de N-(((1R,2S)-2-aminociclobutil)metil)-6- cloro-3,4-di-hidroisoquinolina-2(1H)-sulfonamida (0,66 g, 2,0 mmols) e NEt3 (350 mg, 3,5 mmols) em DCM (5 ml) foi adicionado cloreto de 4- (dimetilamino)benzenossulfonila (426 mg, 2,0 mmols) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 2 h, em seguida, concentrada. O resíduo foi dissolvido em DCM e lavado com água. A fase orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro e concentrada para fornecer 6-cloro-N-(((1R,2S)-2-(4- (dimetilamino)fenilsulfonamido)ciclobutil)metil)-3,4-di-hidroisoquinolina-2(1H)- sulfonamida. RMN de 1H (400 MHz, CDCl3): δ 7,77 (m, 2H), 7,18 (m, 2H), 7,05 (m, 1H), 6,75 (m, 2H), 5,28 (m, 1H), 5,05 (m, 1H), 4,36 (s, 2H), 3,50 (m, 2H), 3,35 (m, 1H), 3,15 (m, 1H), 3,09 (s, 6H), 2,92 (m, 3H), 2,42 (m, 1H), 2,03 (m, 1H), 1,65 (m, 2H), 1,25 (m, 1H). METANOSSULFONATO DE (S)-3-((CICLO-HEXILMETIL)((R)-2- METIL-3-(METILSULFONILOXI)PROPIL)AMINO)-2-METILPROPILA (INTERMEDIÁRIO PARA O COMPOSTO A178)

[00284] A uma solução de 3-hidróxi-2-metilpropanoato de (S)-metila (4,0 g, 25,42 mmols) e trietilamina (5,3 g, 50,84 mmol) em DCM (60 ml) foi adicionado lentamente cloreto de metanossulfonila (5,6 g, 10,20 mmols) a 0 a 5 °C. A mistura de reação foi agitada por 1 h a essa temperatura sob atmosfera de

N2. A mistura foi, então, diluída com DCM (100 ml) e lavada com água (50 ml). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro e concentrada para fornecer 2-metil-3-(metilsulfoniloxi)propanoato de (S)-metila.

[00285] A uma solução de cloridrato de 2-aminopropanoato de (R)- metila (1,60 g, 10,20 mmols) em acetonitrila (200 ml) foi adicionado 2-metil-3- (metilsulfoniloxi)propanoato de (S)-metila (4,2 g, 21,43 mmols) e carbonato de potássio (4,20 g, 30,60 mmols). A mistura de reação foi refluxada durante 16 h, em seguida, filtrada e o filtrado foi concentrado para fornecer 2,2’-azanodi- ilbis(metileno)dipropanoato de (2R,2'S)-dimetila.

[00286] A uma solução de 2,2’-azanodi-ilbis(metileno)dipropanoato de (2R,2'S)-dimetila (650 mg, 3,0 mmols) em DCM (10 ml) foi adicionado ciclo- hexanocarbaldeído (336 mg, 3,0 mmols) e triacetoxiboroidreto de sódio (954 mg, 4,50 mmols). A mistura de reação foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. A mistura foi resfriada bruscamente com água e ajustada para pH =

10. A mistura resultante foi extraída com DCM. O extrato foi concentrado e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer 2,2’-(ciclo- hexilmetilazanodi-il)bis(metileno)dipropanoato de (2R,2'S)-dimetila.

[00287] A uma solução de 2,2’-(ciclo-hexilmetilazanodi- il)bis(metileno)dipropanoato de (2R,2'S)-dimetila (350 mg, 1,28 mmol) em THF (10 ml) foi adicionado LiBH4 (486 mg, 12,80 mmols). A mistura de reação foi agitada a 80 °C durante a noite. A mistura foi resfriada e resfriada bruscamente com água. A mistura resultante foi ajustada a pH = 5 com ácido clorídrico aquoso a 1 N e agitada durante 0,5 h, em seguida, ajustada a pH = 10 e extraída três vezes com acetato de etila. Os produtos orgânicos combinados foram secos sobre sulfato de sódio anidro e concentrados para fornecer (2R,2'S)-2,2’-(ciclo- hexilmetilazanodi-il)bis(metileno)dipropan-1-ol.

[00288] A uma solução de (2R,2’S)-2,2’-(ciclo-hexilmetilazanodi- il)bis(metileno)dipropan-1-ol (153 mg, 0,59 mmol) e trietilamina (0,12 g, 1,2 mmol) em DCM (5 ml) foi adicionado MsCl (135 mg, 1,18 mmol) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada durante 30 min à temperatura ambiente. A mistura foi diluída com DCM (15 ml) e depois lavada com água (20 ml × 2). Os produtos orgânicos foram secos sobre sulfato de sódio anidro e concentrados para fornecer metanossulfonato de (S)-3-((ciclo-hexilmetil)((R)-2-metil-3- (metilsulfonilóxi)propil)amino)-2-metilpropila. MS (EI): C17H35NO6S2, encontrado 414 [M+H]+.

[00289] O seguinte composto foi sintetizado de uma maneira similar: (2S,2’S)-((ciclo-hexilmetil)azanodi-il)bis(2-metilpropano-3,1-di- il)dimetanossulfonato (intermediário para o composto A160). (R)-6-CLORO-N-(4-(4 (DIMETILAMINO) FENILSULFONAMIDO) BUTAN-2-IL)-3,4-DI-HIDROISOQUINOLINA-2(1H)-SULFONAMIDA (INTERMEDIÁRIO PARA O COMPOSTO A148)

[00290] Uma solução de 1-cianopropan-2-ilcarbamato de (R)-terc- butila (13,0 g, 71 mmols) em etanol (250 ml) saturado com amônia anidra foi tratada com Raney-Ni (24 g) sob 379,21 Kpa (55 psi) de H2 durante a noite. A mistura foi filtrada através de uma almofada de celite e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer 4- aminobutan-2-ilcarbamato de (R)-terc-Butila.

[00291] A uma solução de 4-aminobutan-2-ilcarbamato de (R)-terc- butila (2,5 g, 13,3 mmols) e trietilamina (1,33 g, 13,3 mmols) em DCM (25 ml) foi adicionada lentamente uma solução de cloreto de 4-(dimetilamino)benzeno-1- sulfonila (2,93 g, 13,3 mmols) em DCM (15 ml) a 0 a 5 °C. A mistura de reação foi agitada por 1 h a essa temperatura sob atmosfera de N2. A mistura foi diluída com DCM (50 ml) e lavada com água (30 ml). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna para fornecer 4-(4-(dimetilamino)fenilsulfonamido)butan-2-ilcarbamato de (R)-terc-butila.

[00292] A uma solução de 4-(4- (dimetilamino)fenilsulfonamido)butan-2-ilcarbamato de (R)-terc-butila (1,2 g, 3,2 mmols) em DCM (15 ml) foi adicionado TFA (7 ml). A mistura foi agitada durante 2 h e o solvente foi removido. O resíduo foi dissolvido em DCM (30 ml) e depois lavado com NaHCO3 aquoso saturado. A fase orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro e concentrada para fornecer (R)-N-(3-aminobutil)-4- (dimetilamino)benzenossulfonamida (0,88 g, quantitativo).

[00293] A uma solução de (R)-N- (3-aminobutil)-4- (dimetilamino)benzenossulfonamida (0,88 g, 4,0 mmols) em CH3CN (10 ml) foi adicionada 6-cloro-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina (1,98 g, 4,0 mmols). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna para fornecer (R)-6-cloro-N-(4-(4-(dimetilamino)fenilsulfonamido)butan-2-il)-3,4-di- hidroisoquinolina-2(1H)-sulfonamida.

[00294] Os compostos a seguir foram sintetizados de maneira similar: (S)-6-cloro-N-(4-((4-(dimetilamino)fenil)sulfonamido)butan-2-il)-3,4-di- hidroisoquinolina-2(1H)-sulfonamida (Intermediário para o composto A147); (S)- 6-cloro-N-(3-((4-(dimetilamino)fenil)sulfonamido)butil)-3,4-di-hidroisoquinolina- 2(1H)-sulfonamida (Intermediário para o composto A150); e (R)-6-cloro-N-(3-((4- (dimetilamino)fenil)sulfonamido)butil)-3,4-di-hidroisoquinolina-2(1H)- sulfonamida (Intermediário para o composto A149) (R)-1-(4-FLUORO-2-METOXIFENIL)-2-METILPIPERAZINA (INTERMEDIÁRIO PARA O COMPOSTO A177)

[00295] A (R)-3-metilpiperazina-1-carboxilato de terc-butila (5,37 g, 26,8 mmols) e 1-bromo-4-fluoro-2-metoxibenzeno (5,00 g, 24,4 mmols) em tolueno (50 ml) foi adicionado terc-butóxido sódico (4,69 g, 48,8 mmols) seguido por BrettPhos paladaciclo G3 (66,4 mg, 0,0732 mmol). A mistura foi vedada sob nitrogênio e agitada a 100 °C e após 1 h a mistura foi resfriada à temperatura ambiente, diluída com acetato de etila e água. A camada orgânica foi seca com sulfato de sódio, filtrada e concentrada. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna (0 a 40%, acetato de etila/hexanos) para fornecer o produto. MS(EI) para C17H25FN2O3, encontrado 325 [M+H]+.

[00296] A (R)-4-(4-fluoro-2-metoxifenil)-3-metilpiperazina-1- carboxilato de terc-butila (0,51 g, 1,6 mmol) foi adicionado HCl (1,6 ml, a 4 N em dioxano) e a mistura foi deixada em repouso à temperatura ambiente por 16 h, em seguida, diluída com água (5 ml) e acetato de etila (5 ml). A camada orgânica foi removida e lavada com água (1 X 5 ml). As camadas aquosas combinadas foram lavadas com acetato de etila (1 X 5 ml), basificadas com NaOH (a 5 N a pH a aproximadamente 12), extraídas com DCM (3 X 5 ml), secas com sulfato de sódio, filtradas e concentradas para fornecer (R)-1-(4-fluoro-2-metoxifenil)-2- metilpiperazina que foi utilizada sem purificação adicional. MS(EI) para C12H17FN2O, encontrado 225 [M+H]+.

[00297] Os seguintes compostos foram sintetizados de maneira similar: 1-(4-fluoro-2-metoxifenil)piperazina (Intermediário para A137) 1-(2-metoxifenil)piperazina (Intermediário A154)

2-(piperazin-1-il)benzonitrila (Intermediário para A118) 1-(2,6-dimetilfenil)piperazina (Intermediário para A119) 2-(4-fluoro-2-metil)-2,6-diazaspiro[3.3]heptano (Intermediário para A161) (S)-1-(4-fluoro-2-metilfenil)-3-metilpiperazina (Intermediário para A162) (R)-1-(4-fluoro-2-metilfenil)-3-metilpiperazina (Intermediário para A163) 1-(2-(trifluorometoxi)fenil)piperazina (Intermediário para A173) 1-(3,4-difluoro-2-metoxifenil)piperazina (Intermediário para A174) 1-(3-fluoro-2-metoxifenil)piperazina (Intermediário para A175) 1-(5-fluoro-2-metoxifenil)piperazina (Intermediário para A176) 1-(2-clorofenil)piperazina (Intermediário para A198) 1-(4-metoxifenil)piperazina (Intermediário para A199) 1-(3-metoxifenil)piperazina (Intermediário para A201) 1-(3-fluoro-4-metoxifenil)piperazina (Intermediário para A202) 1-(2-cloro-4-fluorofenil)piperazina (Intermediário para A206) (S)-1-(3-fluoro-5-metoxifenil)-2-metilpiperazina (Intermediário para A194) (R)-1-(3-fluoro-5-metoxifenil)-2-metilpiperazina (Intermediário para A195) (2S,6R)-1-(3-fluoro-5-metoxifenil)-2,6-dimetilpiperazina (Intermediário para A197) (2R,6R)-1-(3-fluoro-5-metoxifenil)-2,6-dimetilpiperazina (Intermediário para A200)

ENSAIOS ENSAIO DE PD1-SS-GLUC INDUZIDO POR DOX

[00298] As células Flp-In 293 T-RExTM foram transfectadas com o plasmídeo pcDNATM5/FRT/TO inserido com o cDNA que codifica a Gaussia Luciferase fundido à extremidade 3’ do cDNA que codifica a sequência- sinal PD1 mais 10 aminoácidos (N- MQIPQAPWPVVWAVLQLGWRPGWFLDSPDR-C) (SEQ ID NO: 1). As células transfectadas foram selecionadas para resistência aos marcadores selecionáveis Higromicina e Blasticidina para criar uma linhagem celular estável que continha o inserto de cDNA de PD1-ss+10aa/Gaussia Luciferase cuja expressão foi regulada sob o sistema T-RExTM. No dia anterior ao ensaio, as células foram tripsinizadas e plaqueadas em placas de cultura de tecidos de 384 poços. No dia seguinte, diluições de compostos em DMSO/meios que contêm doxiciclina foram adicionadas aos poços e incubadas a 37 °C, 5% de CO2. 24 horas depois, o substrato de coelenterazina foi adicionado a cada poço e o sinal de luciferase foi quantificado com o uso de Tecan Infinite M1000 Pro para determinação de potência.

[00299] Os resultados para os compostos selecionados fornecidos no presente documento são mostrados na Tabela 1, abaixo. Para estruturas químicas que incluem um ou mais estereoisômeros, mas são ilustradas sem indicar estereoquímica, os dados do ensaio se referem a uma mistura de estereoisômeros. ENSAIO DE PD1-FL-GLUC INDUZIDO POR DOX

[00300] Células Flp-In 293 T-RExTM foram transfectadas com plasmídeo pcDNATM5/FRT/TO inserido com cDNA que codifica Firefly Luciferase fundido à extremidade 3’ de cDNA que codifica PD1 de comprimento total (aminoácidos 1 a 288). As células transfectadas foram selecionadas quanto à resistência aos marcadores selecionáveis Higromicina e Blasticidina para criar uma linhagem celular estável que continha a inserção de cDNA PD1-FL/Firefly Luciferase, cuja expressão foi regulada sob o sistema T-RExTM. No dia anterior ao ensaio, as células foram tripsinizadas e plaqueadas em placas de cultura de tecidos de 384 poços. No dia seguinte, diluições de compostos em DMSO/meios que contêm doxiciclina foram adicionadas aos poços e incubadas a 37 °C, 5% de CO2. 24 horas depois, o substrato de coelenterazina foi adicionado a cada poço e o sinal de luciferase foi quantificado com o uso de Tecan Infinite M1000 Pro para determinação de potência.

[00301] Os resultados para os compostos selecionados fornecidos no presente documento são mostrados na Tabela 1, abaixo. Para estruturas químicas que incluem um ou mais estereoisômeros, mas são ilustradas sem indicar estereoquímica, os dados do ensaio se referem a uma mistura de estereoisômeros. ENSAIO DE TNFΑ-FL-GLUC INDUZIDO POR DOX

[00302] As células Flp-In 293 T-RExTM foram transfectadas com o plasmídeo pcDNATM5/FRT/TO inserido com o cDNA que codifica a Gaussia Luciferase fundido com a extremidade 3’ do cDNA que codifica o TNFα de comprimento total (aminoácidos 1 a 233). As células transfectadas foram selecionadas quanto à resistência aos marcadores selecionáveis Higromicina e Blasticidina para criar uma linhagem celular estável que continha a inserção de cDNA de TNFα-FL/Gaussia Luciferase cuja expressão foi regulada sob o sistema T-RExTM. No dia anterior ao ensaio, as células foram tripsinizadas e plaqueadas em placas de cultura de tecidos de 384 poços. No dia seguinte, diluições de compostos em DMSO/meios que contêm doxiciclina foram adicionadas aos poços e incubadas a 37 °C, 5% de CO2. 24 horas depois, o substrato de coelenterazina foi adicionado a cada poço e o sinal de luciferase foi quantificado com o uso de Tecan Infinite M1000 Pro para determinação de potência.

[00303] Os resultados para os compostos selecionados fornecidos no presente documento são mostrados na Tabela 1, abaixo. Para estruturas químicas que incluem um ou mais estereoisômeros, mas são ilustradas sem indicar estereoquímica, os dados do ensaio se referem a uma mistura de estereoisômeros. ENSAIO DE IL2-FL-GLUC INDUZIDO POR DOX

[00304] As células Flp-In 293 T-RExTM foram transfectadas com o plasmídeo pcDNATM 5/FRT/TO inserido com o cDNA que codifica a Gaussia Luciferase fundido com a extremidade 3’ do cDNA que codifica a IL-2 de comprimento total (aminoácidos 1 a 153). As células transfectadas foram selecionadas quanto à resistência aos marcadores selecionáveis Higromicina e Blasticidina para criar uma linhagem celular estável que continha o inserto de cDNA de IL-2-FL/Gaussia Luciferase cuja expressão foi regulada sob o sistema

T-RExTM. No dia anterior ao ensaio, as células foram tripsinizadas e plaqueadas em placas de cultura de tecidos de 384 poços. No dia seguinte, diluições de compostos em DMSO/meios que contêm doxiciclina foram adicionadas aos poços e incubadas a 37 °C, 5% de CO2. 24 horas depois, o substrato de coelenterazina foi adicionado a cada poço e o sinal de luciferase foi quantificado com o uso de Tecan Infinite M1000 Pro para determinação de potência.

[00305] Os resultados para os compostos selecionados fornecidos no presente documento são mostrados na Tabela 1, abaixo. Para estruturas químicas que incluem um ou mais estereoisômeros, mas são ilustradas sem indicar estereoquímica, os dados do ensaio se referem a uma mistura de estereoisômeros. ENSAIO DE HER3-SS-GLUC INDUZIDO POR DOX

[00306] As células Flp-In 293 T-RExTM foram transfectadas com o plasmídeo pcDNATM 5/FRT/TO inserido com o cDNA que codifica a Gaussia Luciferase fundido com a extremidade 3’ do cDNA que codifica a sequência-sinal de HER3 mais 4 aminoácidos (N-MRANDALQVLGLLFSLARGSEVG-C) (SEQ ID NO: 2). As células transfectadas foram selecionadas quanto à resistência aos marcadores selecionáveis Higromicina e Blasticidina para criar uma linhagem celular estável que continha o inserto de cDNA de HER3-ss+4aa/Gaussia Luciferase, cuja expressão foi regulada sob o sistema T-RExTM. No dia anterior ao ensaio, as células foram tripsinizadas e plaqueadas em placas de cultura de tecidos de 384 poços. No dia seguinte, diluições de compostos em DMSO/meios que contêm doxiciclina foram adicionadas aos poços e incubadas a 37 °C, 5% de CO2. 24 horas depois, o substrato de coelenterazina foi adicionado a cada poço e o sinal de luciferase foi quantificado com o uso de Tecan Infinite M1000 Pro para determinação de potência.

[00307] Os resultados para os compostos selecionados fornecidos no presente documento são mostrados na tabela abaixo. Para estruturas químicas que incluem um ou mais estereoisômeros, mas são ilustradas sem indicar estereoquímica, os dados do ensaio se referem a uma mistura de estereoisômeros. TABELA PARA ATIVIDADE DE HER3 Induzível por Induzível por Induzível por Dox em 24 h - Dox em 24 h - Dox em 24 h - Her3 (ss+4) Her3 (ss+4) Her3 (ss+4) N.º N.º N.º Gluc Gluc Gluc 293FRT/TO: 293FRT/TO: 293FRT/TO: IC50 média (nM) IC50 média (nM) IC50 média (nM) A122 110,63 A188 88,04 A201 211,04 A120 31,42 A189 959,52 A202 129,54 A137 10,85 A190 35,6 A203 34,13 A151 276,03 A191 116,79 A204 134,41 A177 10,86 A192 1.709,12 A205 230,38 A179 399,69 A193 50,85 A206 38,19 A124 912,67 A194 303,25 A207 17,98 A182 203,11 A195 381,8 A208 427,53 A183 2.145,26 A196 78,19 A209 497,91 A184 155,56 A197 77,48 A210 342,58 A185 85,5 A198 44,08 B22 57,77 A107 44,21 A199 131,52 A187 802,1 A200 29,08 ENSAIO DE VIABILIDADE CELULAR DE H929

[00308] A linhagem celular de mieloma múltiplo humano NCI-H929 foi cultivada em meio Advanced RPMI 1640 (Gibco®) suplementado com 6% de soro fetal bovino, Glutamina a 2 mM e Penicilina/Estreptomicina a 1x. No dia do ensaio, as células foram ressuspensas em meio RPMI 1640 suplementado com 10% de soro fetal bovino, Glutamina a 2 mM e Penicilina/Estreptmicina a 1x e plaqueadas em placas de cultura de tecido de 384 poços e tratadas com diluições de composto em DMSO/meios. As placas foram incubadas a 37 °C, 5% de CO2 durante 48 horas. Após 48 horas, CellTiter-Glo® (Promega) foi adicionado a cada poço e o sinal da luciferase foi quantificado com o uso de Tecan Infinite M1000 Pro para determinação da viabilidade celular.

[00309] Os resultados para os compostos selecionados fornecidos no presente documento são mostrados na Tabela 1, abaixo. Para estruturas químicas que incluem um ou mais estereoisômeros, mas são ilustradas sem indicar estereoquímica, os dados do ensaio se referem a uma mistura de estereoisômeros. ENSAIO DE VIABILIDADE CELULAR DE U266

[00310] A linhagem celular de mieloma múltiplo humano U266B1 foi cultivada em meio RPMI 1640 suplementado com soro fetal bovino a 10%, Glutamina a 2 mM e Penicilina/Estreptomicina a 1x. As células foram plaqueadas em cultura de tecidos de 384 poços e tratadas com diluições de compostos em DMSO/meio. As placas foram incubadas a 37 °C, 5% de CO2 durante 48 horas. Após 48 horas, CellTiter-Glo® (Promega) foi adicionado a cada poço e o sinal da luciferase foi quantificado com o uso de Tecan Infinite M1000 Pro para determinação da viabilidade celular.

[00311] Os resultados para os compostos selecionados fornecidos no presente documento são mostrados na Tabela 1, abaixo. Para estruturas químicas que incluem um ou mais estereoisômeros, mas são ilustradas sem indicar estereoquímica, os dados do ensaio se referem a uma mistura de estereoisômeros.

ENSAIOS DE ESTABILIDADE DE MICROSSOMAS IN VITRO

[00312] Fosfato de potássio (423 µl de uma solução a 0,1 M) foi adicionado a tubos de poços profundos com 8 tiras, seguido por microssomas humanos, de camundongo, rato ou macaco (25 µl de uma solução de 20 mg/ml). Os tubos foram, então, colocados em gelo e o artigo de teste (2 µl de uma solução a 0,25 mM em DMSO) foi adicionado. A mistura foi pré-incubada a 37 °C durante 3 a 5 minutos (agitando a 150 rpm), em seguida, a reação foi iniciada pela adição de 50 µl de NADPH. Uma alíquota de amostras (100 µl) foi coletada em 0 e 30 min e 200 µl de uma mistura de acetonitrila que contém IS (composto 914) foram adicionados para resfriar bruscamente a reação. Após centrifugação durante 10 min a 4.000 rpm, em uma solução mista de 20 ml do sobrenadante (20 µl) mais 100 µl ACN/H2O (1:1) foram injetados para análise por LC-MS/MS. A estabilidade de microssoma hepático é avaliada pela % restante do composto em 30 min, que é calculada com o uso da seguinte equação: [(AUCanalitoT = 30/AUCIS)/(AUCanalitoT = 0/AUCIS)]*100

[00313] Os resultados para os compostos selecionados fornecidos no presente documento são mostrados na Tabela 1, abaixo. Para estruturas químicas que incluem um ou mais estereoisômeros, mas são ilustradas sem indicar estereoquímica, os dados do ensaio se referem a uma mistura de estereoisômeros. ENSAIO DE SEQUÊNCIA-SINAL INDUZIDO POR DOX EXPRESSO TRANSIENTEMENTE-GLUC

[00314] As células Flp-In 293 T-RExTM foram transfectadas com 500 ng de plasmídeos pcDNATM5/FRT/TO inseridos com o cDNA que codifica a Gaussia Luciferase fundido com a extremidade 3’ do cDNA que codifica as sequências-sinal alvo mais 10 aminoácidos. As células transfectadas foram incubadas durante a noite, em seguida, as células foram tripsinizadas e plaqueadas em placas de cultura de tecidos de 384 poços. No dia seguinte, diluições de compostos em DMSO/meios que contêm doxiciclina foram adicionadas aos poços e incubadas a 37 °C, 5% de CO2. 24 horas depois, o substrato de coelenterazina foi adicionado a cada poço e o sinal de luciferase foi quantificado com o uso de Tecan Infinite M1000 Pro para determinação de potência.

Alvo Sequência de peptídeo-sinal +10 Aminoácidos A87 A137 A151

MGLSTVPDLLLPLVLLELLVGIYPSGVIG LVPHLGDREK TNFR1 307 152 1.625 (SEQ ID NO: 3) (SEQ ID NO: 4)

MAPVAVWAALAVGLELWAAAHA LPAQVAFTPY TNFR2 564 186 2.114 (SEQ ID NO: 5) (SEQ ID NO: 6)

MTPGKTSLVSLLLLLSLEAIVKA GITIPRNPGC IL-17a 447 216 1.816 (SEQ ID NO: 7) (SEQ ID NO: 8)

MGAARSPPSAVPGPLLGLLLLLLGVLAP

LRLLDHRALV IL-17Ra GGAS 424 176 1.862 (SEQ ID NO: 10) (SEQ ID NO: 9)

MLGSRAVMLLLLLPWTAQG RAVPGGSSPA IL-23a 567 223 1.924 (SEQ ID NO: 11) (SEQ ID NO: 12) IL-12b MCHQQLVISWFSLVFLASPLVA IWELKKDVYV 155 74 913 (p40) (SEQ ID NO: 13) (SEQ ID NO: 14)

MNQVTIQWDAVIALYILFSWCHG GITNINCSGH IL-23R 111 47 666 (SEQ ID NO: 15) (SEQ ID NO: 16)

MNSFSTSAFGPVAFSLGLLLVLPAAFPA

VPPGEDSKDV IL-6 P 66 38 437 (SEQ ID NO: 18) (SEQ ID NO: 17)

MLAVGCALLAALLAAPGAA LAPRRCPAQE IL-6R 78 48 445 (SEQ ID NO: 19) (SEQ ID NO: 20)

MLTLQTWLVQALFIFLTTESTG ELLDPCGYIS GP130 201 161 969 (SEQ ID NO: 21) (SEQ ID NO: 22)

MKVLLRLICFIALLISS LEADKCKERE IL-1R1 374 282 1.474 (SEQ ID NO: 23) (SEQ ID NO: 24)

MLRLYVLVMGVSA FTLQPAAHTG IL-1R2 23 17 168 (SEQ ID NO: 25) (SEQ ID NO: 26)

IL-1Ra

MEICRGLRSHLITLLLFLFHSETIC RPSGRKSSKM (isoform 111 47 666 (SEQ ID NO: 27) (SEQ ID NO: 28) a 1) IL-2Ra MDSYLLMWGLLTFIMVPGCQA ELCDDDPPEI 159 55 876 (CD25) (SEQ ID NO: 29) (SEQ ID NO: 30)

MASPFALLMVLVVLSCKSSCSLG CDLPETHSLD IFN-a1 128 57 820 (SEQ ID NO: 31) (SEQ ID NO: 32)

MALTFALLVALLVLSCKSSCSVG CDLPQTHSLG IFN-a2 51 44 404 (SEQ ID NO: 33) (SEQ ID NO: 34)

MALSFSLLMAVLVLSYKSICSLG CDLPQTHSLG IFN-a4 221 89 1.129 (SEQ ID NO: 35) (SEQ ID NO: 36)

MTNKCLLQIALLLCFSTTALS MSYNLLGFLQ IFN-b 818 288 4.305 (SEQ ID NO: 37) (SEQ ID NO: 38)

MMVVLLGATTLVLVAVAPWVLSAAAG

KNLKSPQKVE IFNAR1 G 14 6 145 (SEQ ID NO: 40) (SEQ ID NO: 39)

MLLSQNAFIFRSLNLVLMVYISLVFG ISYDSPDYTD IFNAR2 133 42 778 (SEQ ID NO: 41) (SEQ ID NO: 42)

MACLGFQRHKAQLNLATRTWPCTLLFF

KAMHVAQPAV CTLA-4 LLFIPVFC 259 112 1.145 (SEQ ID NO: 44) (SEQ ID NO: 43)

MRIFAVFIFMTYWHLLNA FTVTVPKDLY PD-L1 56 19 366 (SEQ ID NO: 45) (SEQ ID NO: 46)

MWEAQFLGLLFLQPLWVAPVKPLQPG

VPVVWAQEGA LAG3 AE 75 48 464 (SEQ ID NO: 48) (SEQ ID NO: 47)

MFSHLPFDCVLLLLLLLLTRS SEVEYRAEVG TIM3 282 132 1.354 (SEQ ID NO: 49) (SEQ ID NO: 50)

MRWCLLLIWAQGLRQAPLASG MMTGTIETTG TIGIT 162 79 737 (SEQ ID NO: 51) (SEQ ID NO: 52)

MEKKWKYCAVYYIIQIHFVKG VWEKTVNTEE CD96 12 7 107 (SEQ ID NO: 53) (SEQ ID NO: 54)

MGVPTALEAGSWRWGSLLFALFLAASL

FKVATPYSLY VISTA GPVAA 211 150 911 (SEQ ID NO: 56) (SEQ ID NO: 55)

MLRRRGSPGMGVHVGAALGALWFCLT

LEVQVPEDPV B7H3 GA 27 9 201 (SEQ ID NO: 58) (SEQ ID NO: 57)

MCPRAARAPATLLLALGAVLWPAAGA WELTILHTND CD73 58 44 375 (SEQ ID NO: 59) (SEQ ID NO: 60)

MGTSHPAFLVLGCLLTGLSLILC QLSLPSILPN PDGFRa 90 37 565 (SEQ ID NO: 61) (SEQ ID NO: 62)

MQSKVLLAVALWLCVETRA ASVGLPSVSL VGFR2 684 213 2.591 (SEQ ID NO: 63) (SEQ ID NO: 64)

MTILGTTFGMVFSLLQVVSG ESGYAQNGDL IL-7R 58 16 392 (SEQ ID NO: 65) (SEQ ID NO: 66)

MRPSGTAGAALLALLAALCPASRA LEEKKVCQGT EGFR 60 47 412 (SEQ ID NO: 67) (SEQ ID NO: 68)

MRANDALQVLGLLFSLARG SEVGNSQAVC HER3 89 57 522 (SEQ ID NO: 69) (SEQ ID NO: 70)

MNFLLSWVHWSLALLLYLHHAKWSQA APMAEGGGQN VEGF 111 51 645 (SEQ ID NO: 71) (SEQ ID NO: 72)

TACE

MRQSLLFLTSVVPFVLA PRPPDDPGFG (ADAM1 66 40 391 (SEQ ID NO: 73) (SEQ ID NO: 74) 7)

MVLLRVLILLLSWAAGMGG QYGNPLNKYI ADAM10 231 127 849 (SEQ ID NO: 75) (SEQ ID NO: 76)

ENSAIO DE CITOCINAS DE CÉLULAS MONONUCLEARES DE SANGUE PERIFÉRICO HUMANO (PBMC)

[00315] PBMCs humanas foram isoladas de modo fresco a partir de coletas de sangue total de 3 dadores normais com o uso de centrifugação em gradiente de densidade seguida por lise de glóbulos vermelhos. As PBMCs de cada doador foram analisados separadamente. As células foram suspensas em meio RPMI 1640 suplementado com 5% de soro fetal bovino, L-glutamina a 2 mM, HEPES a 10 mM e Penicilina/Estreptomicina a 1x. As PBMCs foram semeadas a 200.000 células/poço em placas de fundo redondo de 96 poços, sem estimulação ou com estimulação por lipopolissacarídeo (LPS, 1 g/ml) ou anticorpos contra CD3 humana (ligado à placa, 2 g/ml) e CD28 humana (solúvel, 2 g/ml). Diluições em série de composto em DMSO/meios foram adicionadas simultaneamente e as PBMC foram incubadas a 37 °C, 5% de CO 2 durante 24 horas. Após 24 horas, as placas foram centrifugadas e metade do volume do sobrenadante removida para análise de citocinas por imunoensaio eletroquimioluminescente (U-PLEX® Biomarker Multiplex, Meso Scale Discovery). Para análise de viabilidade, CellTiter-Glo® (Promega) foi adicionado ao material remanescente em cada poço e quantificado por meio de leitor de placas luminescentes.

IC50 média (nM) [Condição de A87 A137 A133 A177 Estimulação] GM-CSF [Anti-CD3/CD28] 165 25 404 19 IFNγ [Anti-CD3/CD28] 152 21 234 19 IL-1b [LPS] > 25.000 > 25.000 > 25.000 > 25.000 IL-2 [Anti-CD3/CD28] 31 8 197 10 IL-6 [LPS] 61 12 193 24 IL-23 [LPS] 200 79 1.054 54 TNFα [Anti-CD3/CD28] 82 17 216 13 Viabilidade CellTiter-Glo [Sem > 25.000 > 25.000 > 25.000 > 25.000 Estimulação] ESTUDO DE EFICÁCIA: EFEITO DO COMPOSTO A87 NO CRESCIMENTO DO TUMOR E PESO CORPORAL EM UM MODELO B16F10 EM COMPARAÇÃO COM A TERAPIA ANTI-PD-1.

[00316] Camundongos C57BL/6 fêmeas (de 7 a 8 semanas de idade) foram injetados no flanco por via subcutânea com 5 x 106 células B16F10 em 0,1 ml no Dia 0. No Dia 3, o composto A87 formulado em 10% de ETOH/10% de Kolliphor EL foi administrado IV 30 mg/kg de QW, IV 10 mg/kg de D1D2, ou IP 15 mg/kg de QOD. O tratamento com anticorpo anti-PD1 (RMP1-14 de Bioxcell, 200 µg) foi administrado ip em um cronograma de dose QODx3. O tamanho do tumor foi monitorado com um paquímetro digital (Fowler) a cada 2 a 3 dias até atingir o tamanho de 1,5 a 2,0 cm e expresso em volume (comprimento x largura x altura). B16F10, uma linhagem de melanoma, foi obtida junto à ATCC. Os camundongos C57/BL6 foram adquiridos junto aos laboratórios de Charles rivers.

TABELA 1. ATIVIDADES DE COMPOSTOS Estabilidade de Microssoma Induzível por Hepático - % Induzível por Induzível por Induzível por Viabilidade Viabilidade Dox em 24 h - restante após 30 Dox em 24 h - Dox em 24 h - Dox em 24 h - Celltiter-Glo Celltiter-Glo PD1FLFluc min com NADPH N.º PD1ssGluc TNFaFLGluc IL2FLGluc de H929 em de U266 em 293FRT/TO: (%) 293FRT/TO: 293FRT/TO: 293FRT/TO: 48 h : EC50 48 h : EC50 IC50 média (nM) Camundongo IC50 média (nM) IC50 média (nM) IC50 média (nM) média (nM) média (nM) Rato Macaco Ser humano 0,21 0,12 A1 1.026,3 1.396,1 I.A. 1.170,58 I.A.

I.A. 0,18 0,18 0,09 0,59 A2 344,75 807,39 I.A. 10.141 I.A. 0,09 0,04 0,09 0,37 A3 241,49 637,58 11.412 5.080,51 I.A. 0,83 0,25 0,56 1,17 A4 93,87 310,79 3.763,69 1.220,45 I.A. 1,17 0,25 0,27 0,24 A5 651,38 I.A. 8.429,37 I.A. 0,31 0,24 0,12 0,17 A6 4.747,33 I.A. 24.073,2 I.A. 0,44 0,53 0,17 0,23 A7 2.314,7 I.A. 22.428,6 I.A. 0,99 0,29 0,17 0,61 A8 2.681,93 I.A.

I.A.

I.A. 0,19 0,09

Estabilidade de Microssoma Induzível por Hepático - % Induzível por Induzível por Induzível por Viabilidade Viabilidade Dox em 24 h - restante após 30 Dox em 24 h - Dox em 24 h - Dox em 24 h - Celltiter-Glo Celltiter-Glo PD1FLFluc min com NADPH N.º PD1ssGluc TNFaFLGluc IL2FLGluc de H929 em de U266 em 293FRT/TO: (%) 293FRT/TO: 293FRT/TO: 293FRT/TO: 48 h : EC50 48 h : EC50 IC50 média (nM) Camundongo IC50 média (nM) IC50 média (nM) IC50 média (nM) média (nM) média (nM) Rato Macaco Ser humano 0,34 0,14 A9 1.106,83 I.A.

I.A.

I.A. 0,66 0,09 0,2 8,85 A10 123,42 4.687,09 2.863,07 I.A. 0,14 0,77 0,18 0,17 A11 365,31 865,78 I.A. 623,7 I.A.

I.A. 0,08 0,21 0,1 0,07 A12 857,59 I.A.

I.A.

I.A. 0,22 0,11 0,04 0,1 A13 25,01 1.471,73 987,14 I.A. 0,1 0,65 5,39 1,13 A14 640,11 1.234,03 I.A. 1.163,27 I.A.

I.A. 1,4 0,08 0,29 0,061 A15 95,1 3.063,1 2.955,87 14.604,7 0,13 0,07 2,09 2,62 A16 108,07 6.341,65 4.977,83 I.A. 41,1 0,11

Estabilidade de Microssoma Induzível por Hepático - % Induzível por Induzível por Induzível por Viabilidade Viabilidade Dox em 24 h - restante após 30 Dox em 24 h - Dox em 24 h - Dox em 24 h - Celltiter-Glo Celltiter-Glo PD1FLFluc min com NADPH N.º PD1ssGluc TNFaFLGluc IL2FLGluc de H929 em de U266 em 293FRT/TO: (%) 293FRT/TO: 293FRT/TO: 293FRT/TO: 48 h : EC50 48 h : EC50 IC50 média (nM) Camundongo IC50 média (nM) IC50 média (nM) IC50 média (nM) média (nM) média (nM) Rato Macaco Ser humano 0,41 1,06 A17 942,97 I.A.

I.A.

I.A. 0,36 0,49 0,05 0,11 A18 I.A.

I.A.

I.A. 15.473,2 0,05 0,04 0,24 0,1 A19 325,83 I.A.

I.A. 21.895,5 0,08 0,05 0,07 0,19 A20 206,77 I.A. 12.798,2 I.A. 0,06 0,05 1,77 0,62 A21 184,02 10.002,6 8.288,81 I.A. 0,11 0,14 0,12 0,4 A22 155,66 404,42 6.377,93 370,18 6.673,8 I.A. 0,11 0,16 0,17 0,13 A23 758,88 I.A.

I.A.

I.A. 0,03 0,04 0,13 0,04 A24 I.A.

I.A. I.A.

I.A. 0,03 0,03

Estabilidade de Microssoma Induzível por Hepático - % Induzível por Induzível por Induzível por Viabilidade Viabilidade Dox em 24 h - restante após 30 Dox em 24 h - Dox em 24 h - Dox em 24 h - Celltiter-Glo Celltiter-Glo PD1FLFluc min com NADPH N.º PD1ssGluc TNFaFLGluc IL2FLGluc de H929 em de U266 em 293FRT/TO: (%) 293FRT/TO: 293FRT/TO: 293FRT/TO: 48 h : EC50 48 h : EC50 IC50 média (nM) Camundongo IC50 média (nM) IC50 média (nM) IC50 média (nM) média (nM) média (nM) Rato Macaco Ser humano 0,32 4,16 A25 435,17 I.A.

I.A.

I.A. 0,2 0,12 3,4 1,84 A26 224,49 I.A. 16.068,5 I.A. 0,13 6,65 2,15 0,98 A27 492,55 I.A.

I.A.

I.A. 2,07 2,52 0,06 0,14 A28 5.251,11 I.A. 10.426 I.A. 0,06 -- 32,4 43,3 A29 241,1 591,29 I.A. 446,59 I.A.

I.A. 19,5 39,6 0,35 0,28 A30 792,84 I.A.

I.A.

I.A. 0,03 0,12 0,25 0,09 A31 619,25 I.A.

I.A.

I.A. 0,03 0,05 0,51 0,27 A32 I.A.

I.A. I.A.

I.A. 0,09 0,06

Estabilidade de Microssoma Induzível por Hepático - % Induzível por Induzível por Induzível por Viabilidade Viabilidade Dox em 24 h - restante após 30 Dox em 24 h - Dox em 24 h - Dox em 24 h - Celltiter-Glo Celltiter-Glo PD1FLFluc min com NADPH N.º PD1ssGluc TNFaFLGluc IL2FLGluc de H929 em de U266 em 293FRT/TO: (%) 293FRT/TO: 293FRT/TO: 293FRT/TO: 48 h : EC50 48 h : EC50 IC50 média (nM) Camundongo IC50 média (nM) IC50 média (nM) IC50 média (nM) média (nM) média (nM) Rato Macaco Ser humano 0,08 0,13 A33 I.A.

I.A. I.A.

I.A. 0,07 0,05 0,24 0,12 A34 I.A.

I.A. I.A.

I.A. 0,09 0,03 20,9 30 A35 83,03 243,99 > 11.897,98 I.A.

I.A. 13,6 24,8 1,85 0,94 A36 118,49 319,35 > 21.809,41 300,59 > 15.385,93 I.A. 1,54 6,69 6,03 13,5 A37 202,16 I.A.

I.A.

I.A. 5,69 8,26 12,6 24,2 A38 75,12 5.490,99 > 11.844,59 I.A. 9,04 11,4 0,26 6 A39 761,18 I.A.

I.A. 10.421,2 0,11 0,05 0,19 0,12 A40 308,26 > 15.070,18 I.A.

I.A. 0,04 0,04

Estabilidade de Microssoma Induzível por Hepático - % Induzível por Induzível por Induzível por Viabilidade Viabilidade Dox em 24 h - restante após 30 Dox em 24 h - Dox em 24 h - Dox em 24 h - Celltiter-Glo Celltiter-Glo PD1FLFluc min com NADPH N.º PD1ssGluc TNFaFLGluc IL2FLGluc de H929 em de U266 em 293FRT/TO: (%) 293FRT/TO: 293FRT/TO: 293FRT/TO: 48 h : EC50 48 h : EC50 IC50 média (nM) Camundongo IC50 média (nM) IC50 média (nM) IC50 média (nM) média (nM) média (nM) Rato Macaco Ser humano 0,2 0,14 A41 17.532,8 I.A.

I.A.

I.A. 0,1 0,08 0,79 7,69 A42 696,43 I.A.

I.A.

I.A. 0,81 2,65 20,1 22,3 A43 46,87 160,55 1.208,05 132,63 2.974,53 I.A. 12 15,4 43,8 54 A44 132,1 12.652,5 I.A.

I.A. 38 47,6 3,63 4,46 A46 50,13 1.758,33 3.336,62 I.A. 1,44 6,12 5,68 10,7 A47 258,84 I.A.

I.A.

I.A. 1,68 12,6 0,07 0,4 A48 991,35 I.A.

I.A.

I.A. 0,1 0,19 11,8 16,4 A49 407,05 I.A.

I.A.

I.A. 9,36 3,5

Estabilidade de Microssoma Induzível por Hepático - % Induzível por Induzível por Induzível por Viabilidade Viabilidade Dox em 24 h - restante após 30 Dox em 24 h - Dox em 24 h - Dox em 24 h - Celltiter-Glo Celltiter-Glo PD1FLFluc min com NADPH N.º PD1ssGluc TNFaFLGluc IL2FLGluc de H929 em de U266 em 293FRT/TO: (%) 293FRT/TO: 293FRT/TO: 293FRT/TO: 48 h : EC50 48 h : EC50 IC50 média (nM) Camundongo IC50 média (nM) IC50 média (nM) IC50 média (nM) média (nM) média (nM) Rato Macaco Ser humano 70,1 3,6 A50 22,21 74,12 660,73 56,97 1.007,74 6.536,29 0,79 1,32 28 34,7 A51 61,36 3.068,97 6.153,41 I.A. 23,6 26,7 29,3 40,1 A52 45,56 1.035,16 2.105,88 I.A. 38,3 31 39,2 50,5 A53 35,33 1.014,07 1.717,71 > 10.260,36 39 38 34,6 42,4 A54 26,51 952,37 1.907,23 I.A. 30,5 33,8 1,18 0,97 A55 1.540,39 I.A.

I.A.

I.A. 0,34 4,87 53,2 57,3 A56 32,76 1.255,87 1.634,05 I.A. 42,6 44,5 60,2 84 A57 73,41 7.807,65 I.A.

I.A. 28,5 31,9

Estabilidade de Microssoma Induzível por Hepático - % Induzível por Induzível por Induzível por Viabilidade Viabilidade Dox em 24 h - restante após 30 Dox em 24 h - Dox em 24 h - Dox em 24 h - Celltiter-Glo Celltiter-Glo PD1FLFluc min com NADPH N.º PD1ssGluc TNFaFLGluc IL2FLGluc de H929 em de U266 em 293FRT/TO: (%) 293FRT/TO: 293FRT/TO: 293FRT/TO: 48 h : EC50 48 h : EC50 IC50 média (nM) Camundongo IC50 média (nM) IC50 média (nM) IC50 média (nM) média (nM) média (nM) Rato Macaco Ser humano 72,8 66,7 A58 72,14 8.500,05 I.A.

I.A. 53,1 31,6 3,73 3,9 A59 24,23 615,54 1.442,63 I.A. 1,94 1,89 60,8 50,3 A60 18,54 886,17 1.483,8 I.A. 38,7 46,7 17,9 19,6 A61 955,94 I.A.

I.A.

I.A. 8,96 13,3 85,2 88,2 A63 43,65 1.873,85 7.433,97 I.A. 84,4 76,4 53,1 63,1 A64 74,98 3.293,48 6.402,59 I.A. 48 53,3 73,4 78 A65 153,77 8.715,63 I.A.

I.A. 57,8 53,1 0,02 0,39 A66 187,59 3.495,74 9.211 I.A. 0,35 0,13

Estabilidade de Microssoma Induzível por Hepático - % Induzível por Induzível por Induzível por Viabilidade Viabilidade Dox em 24 h - restante após 30 Dox em 24 h - Dox em 24 h - Dox em 24 h - Celltiter-Glo Celltiter-Glo PD1FLFluc min com NADPH N.º PD1ssGluc TNFaFLGluc IL2FLGluc de H929 em de U266 em 293FRT/TO: (%) 293FRT/TO: 293FRT/TO: 293FRT/TO: 48 h : EC50 48 h : EC50 IC50 média (nM) Camundongo IC50 média (nM) IC50 média (nM) IC50 média (nM) média (nM) média (nM) Rato Macaco Ser humano 28 45,4 A67 40,77 937,29 2.398,75 I.A. 27,6 33,2 55,1 57,1 A68 156,12 6.440,61 I.A.

I.A. 57,1 50,5 64,6 74,3 A69 136,39 I.A.

I.A.

I.A. 58,2 63 3,14 6,75 A70 46,08 1.301,94 3.023,7 I.A. 3,26 1,36 11,5 17,2 A71 63,32 2.014,74 7.724,78 I.A. 6,75 5,55 43,3 54,6 A72 96,18 6.972,14 10.286,3 I.A. 53,2 62,5 16,3 71,5 A73 37,27 1.861,53 3.471,61 I.A. 25,4 18,2 53,7 55,7 A74 77,38 257,97 I.A. 248,26 I.A.

I.A. 60,6 56,3

Estabilidade de Microssoma Induzível por Hepático - % Induzível por Induzível por Induzível por Viabilidade Viabilidade Dox em 24 h - restante após 30 Dox em 24 h - Dox em 24 h - Dox em 24 h - Celltiter-Glo Celltiter-Glo PD1FLFluc min com NADPH N.º PD1ssGluc TNFaFLGluc IL2FLGluc de H929 em de U266 em 293FRT/TO: (%) 293FRT/TO: 293FRT/TO: 293FRT/TO: 48 h : EC50 48 h : EC50 IC50 média (nM) Camundongo IC50 média (nM) IC50 média (nM) IC50 média (nM) média (nM) média (nM) Rato Macaco Ser humano 2,75 7,54 A75 104,41 255,94 3782,3 233,05 3.029,96 I.A. 0,28 3,08 28,6 33,9 A76 I.A.

I.A. I.A. I.A. I.A.

I.A. 35,7 53,1 37,3 32,5 A77 95,05 338 5.544,21 359,68 4.012,61 I.A. 20,8 30,1 0,15 0,25 A78 359,83 I.A.

I.A.

I.A. 0,11 0,2 10,6 0,1 A79 408,23 I.A.

I.A.

I.A. 0,06 0,16 13,4 14,1 A80 272,95 I.A.

I.A.

I.A. 2,56 10,8 0,12 0,12 A81 476,93 I.A.

I.A.

I.A. 0,03 0,2 0,08 0,16 A82 30,52 1.547,55 2.298,14 I.A. 0,23 0,3

Estabilidade de Microssoma Induzível por Hepático - % Induzível por Induzível por Induzível por Viabilidade Viabilidade Dox em 24 h - restante após 30 Dox em 24 h - Dox em 24 h - Dox em 24 h - Celltiter-Glo Celltiter-Glo PD1FLFluc min com NADPH N.º PD1ssGluc TNFaFLGluc IL2FLGluc de H929 em de U266 em 293FRT/TO: (%) 293FRT/TO: 293FRT/TO: 293FRT/TO: 48 h : EC50 48 h : EC50 IC50 média (nM) Camundongo IC50 média (nM) IC50 média (nM) IC50 média (nM) média (nM) média (nM) Rato Macaco Ser humano 23,4 47,6 A83 28,17 961,05 959,61 I.A. 34,9 39,3 68,3 67,3 A84 175,94 I.A.

I.A.

I.A. 65,8 60,6 52,2 64,9 A85 87,46 I.A.

I.A.

I.A. 42,9 25,6 34,1 39,9 A86 428,72 I.A. 394,88 5.625,91 I.A. 29,2 41,3 49,6 43,6 A87 19,15 492,19 50,23 223,57 I.A. 32,7 39,7 15,9 15,2 A88 4.330,54 I.A.

I.A. I.A.

I.A. 1,33 11,7 17,1 22,2 A89 82,05 1.208,13 186,53 1.751,25 I.A. 13,5 18,5 28,2 20,2 A90 207,02 2.413,57 493,18 3.786,86 I.A. 14,1 20,1

Estabilidade de Microssoma Induzível por Hepático - % Induzível por Induzível por Induzível por Viabilidade Viabilidade Dox em 24 h - restante após 30 Dox em 24 h - Dox em 24 h - Dox em 24 h - Celltiter-Glo Celltiter-Glo PD1FLFluc min com NADPH N.º PD1ssGluc TNFaFLGluc IL2FLGluc de H929 em de U266 em 293FRT/TO: (%) 293FRT/TO: 293FRT/TO: 293FRT/TO: 48 h : EC50 48 h : EC50 IC50 média (nM) Camundongo IC50 média (nM) IC50 média (nM) IC50 média (nM) média (nM) média (nM) Rato Macaco Ser humano 25,4 21,6 A91 193,42 2.459,27 376,81 3.011,92 14.653,1 21,8 23,7 40,8 51,8 A92 304,02 I.A. 518,65 I.A.

I.A. 40,4 44,3

0,4 A93 670,27 I.A. 911,37 10.427,9 I.A. 0,51 0,18 0,84 45,7 45,5 A94 36,37 550,17 78,29 800,16 I.A. 30,3 42,1 54,2 43,1 A95 198,02 4.897,04 390,92 6.711,7 I.A. 46,1 43,9 37,6 41,9 A96 121,85 1.847,65 231,78 5.104,13 I.A. 32,8 40,5 77,7 71,4 A97 41,78 565,68 87,04 725,76 I.A. 66,1 71,1 55,2 32,8 A98 201,79 7.335,28 351,2 I.A.

I.A. 26,9 57,5

Estabilidade de Microssoma Induzível por Hepático - % Induzível por Induzível por Induzível por Viabilidade Viabilidade Dox em 24 h - restante após 30 Dox em 24 h - Dox em 24 h - Dox em 24 h - Celltiter-Glo Celltiter-Glo PD1FLFluc min com NADPH N.º PD1ssGluc TNFaFLGluc IL2FLGluc de H929 em de U266 em 293FRT/TO: (%) 293FRT/TO: 293FRT/TO: 293FRT/TO: 48 h : EC50 48 h : EC50 IC50 média (nM) Camundongo IC50 média (nM) IC50 média (nM) IC50 média (nM) média (nM) média (nM) Rato Macaco Ser humano 60,8 50,8 A99 115,58 3.535,19 349,8 I.A.

I.A. 37 41,9 0,1 2,18 A100 1.150,93 I.A. 1.560,04 I.A.

I.A. 0,04 0,22 20,8 25,4 A101 220,23 3.425,89 564,3 I.A.

I.A. 18,8 30,2 86,6 101,9 A102 33,39 477,31 90,53 558,29 I.A. 70 62,3 42,2 36,5 A103 445,68 I.A. 698,23 I.A.

I.A. 38,5 31,6 8,81 18,9 A106 52,35 1.118,61 126,18 902,63 I.A. 30,7 7,18 16,1 19,3 A107 26,11 609,25 72,97 1.176,64 I.A. 25,0 83,9 0,62 2,05 A108 29,58 546,31 68,29 420,52 I.A. 0,88 1,06

Estabilidade de Microssoma Induzível por Hepático - % Induzível por Induzível por Induzível por Viabilidade Viabilidade Dox em 24 h - restante após 30 Dox em 24 h - Dox em 24 h - Dox em 24 h - Celltiter-Glo Celltiter-Glo PD1FLFluc min com NADPH N.º PD1ssGluc TNFaFLGluc IL2FLGluc de H929 em de U266 em 293FRT/TO: (%) 293FRT/TO: 293FRT/TO: 293FRT/TO: 48 h : EC50 48 h : EC50 IC50 média (nM) Camundongo IC50 média (nM) IC50 média (nM) IC50 média (nM) média (nM) média (nM) Rato Macaco Ser humano 22,1 18,3 A118 67,79 2.093,86 172,7 5.345,11 I.A. 14,7 14,2 50,8 66,1 A119 52,34 1.077,79 170,3 7.675,81 I.A. 53,9 71,7 19,2 28,5 A120 15,58 238,67 27,34 672,16 I.A. 16,3 4,78 36,4 0,17 A122 51,93 885,26 134,57 2.420,21 I.A. 0,15 0,38 6,13 7,41 A123 13,98 424,92 45,93 834,51 I.A. 3,47 5,02 1,01 1,25 A124 606,76 I.A. 802,05 I.A.

I.A. 1,91 18,9 0,14 0,37 A125 829,42 11.524,98 1.090,55 I.A.

I.A. 8,67 0,2 101 73,9 A131 145,44 2.403,07 426,19 4.744,68 I.A. 70,2 84,5

Estabilidade de Microssoma Induzível por Hepático - % Induzível por Induzível por Induzível por Viabilidade Viabilidade Dox em 24 h - restante após 30 Dox em 24 h - Dox em 24 h - Dox em 24 h - Celltiter-Glo Celltiter-Glo PD1FLFluc min com NADPH N.º PD1ssGluc TNFaFLGluc IL2FLGluc de H929 em de U266 em 293FRT/TO: (%) 293FRT/TO: 293FRT/TO: 293FRT/TO: 48 h : EC50 48 h : EC50 IC50 média (nM) Camundongo IC50 média (nM) IC50 média (nM) IC50 média (nM) média (nM) média (nM) Rato Macaco Ser humano 82,2 87,3 A133 36,84 748,55 134,51 5.121,95 I.A. 67,3 71,3 27,9 41,3 A134 11,04 309,22 27,28 540,66 I.A. 9,76 31,9 26,1 56,3 A135 21,58 625,08 48,58 1.239,26 I.A. 39,2 9,36 14,3 26,6 A136 26,46 543,65 101,39 1.726,93 I.A. 23,2 65,3 28 31,6 A137 8,30 191,24 21,45 281,93 I.A. 14,2 48,8 13,2 17,1 A138 73,91 947,28 156,27 2.396,92 I.A. 12,5 8,84 3,68 0,56 A140 491,56 3.009,42 808,08 I.A.

I.A. 1,56 0,41 0,48 1,14 A141 431,02 4235,2 862,9 9.106,16 I.A. 0,66 0,26

Estabilidade de Microssoma Induzível por Hepático - % Induzível por Induzível por Induzível por Viabilidade Viabilidade Dox em 24 h - restante após 30 Dox em 24 h - Dox em 24 h - Dox em 24 h - Celltiter-Glo Celltiter-Glo PD1FLFluc min com NADPH N.º PD1ssGluc TNFaFLGluc IL2FLGluc de H929 em de U266 em 293FRT/TO: (%) 293FRT/TO: 293FRT/TO: 293FRT/TO: 48 h : EC50 48 h : EC50 IC50 média (nM) Camundongo IC50 média (nM) IC50 média (nM) IC50 média (nM) média (nM) média (nM) Rato Macaco Ser humano 16 22,6 A142 38,25 741,05 67,02 1.446,85 I.A. 3,89 11,8 0,74 1,16 A147 4.122,89 I.A.

I.A. I.A.

I.A. 0,99 2,76 1,59 1,29 A148 925,61 I.A. 1.117,32 I.A.

I.A. 0,67 0,52 0,83 0,47 A149 I.A.

I.A. I.A. I.A.

I.A. 0,96 0,44 1,38 2,02 A150 30,29 467,79 41,34 2.000,66 I.A. 2,2 4,6 4,55 4,2 A151 152,57 1.216,54 305,64 2.711,98 I.A. 3,98 4,28 5,06 3,6 A152 81,5 1.028,9 173,82 2.171,97 I.A. 3,22 3,69 0,87 6,23 A153 1.293,98 I.A. 1.255,35 I.A.

I.A. 1,26 2,57

Estabilidade de Microssoma Induzível por Hepático - % Induzível por Induzível por Induzível por Viabilidade Viabilidade Dox em 24 h - restante após 30 Dox em 24 h - Dox em 24 h - Dox em 24 h - Celltiter-Glo Celltiter-Glo PD1FLFluc min com NADPH N.º PD1ssGluc TNFaFLGluc IL2FLGluc de H929 em de U266 em 293FRT/TO: (%) 293FRT/TO: 293FRT/TO: 293FRT/TO: 48 h : EC50 48 h : EC50 IC50 média (nM) Camundongo IC50 média (nM) IC50 média (nM) IC50 média (nM) média (nM) média (nM) Rato Macaco Ser humano 17,5 12,3 A154 14,94 504,45 58,66 749,43 I.A. 10,2 7,33 16,8 38,8 A155 1.350,05 3.484,03 7.795,99 I.A. 4,86 17,8 75,6 82,1 A156 92,46 1.825,18 206,72 3.707,48 I.A. 80,6 81,3 23,3 32,2 A157 23,33 584,47 77,41 858,16 I.A. 27,3 21,1 61,3 51,1 A160 152,83 10.687,02 452,72 I.A.

I.A. 46,1 71,8 26,5 27,3 A161 577,46 I.A. 725,52 I.A.

I.A. 16,7 20,2 62,5 69,6 A162 101,25 6.263,53 200,98 I.A.

I.A. 60,3 70,5 72,8 54,9 A163 55,56 1.928,36 81,21 13.622,1 I.A. 57,5 64,2

Estabilidade de Microssoma Induzível por Hepático - % Induzível por Induzível por Induzível por Viabilidade Viabilidade Dox em 24 h - restante após 30 Dox em 24 h - Dox em 24 h - Dox em 24 h - Celltiter-Glo Celltiter-Glo PD1FLFluc min com NADPH N.º PD1ssGluc TNFaFLGluc IL2FLGluc de H929 em de U266 em 293FRT/TO: (%) 293FRT/TO: 293FRT/TO: 293FRT/TO: 48 h : EC50 48 h : EC50 IC50 média (nM) Camundongo IC50 média (nM) IC50 média (nM) IC50 média (nM) média (nM) média (nM) Rato Macaco Ser humano 69,0 57,9 A164 454,69 I.A. 974,47 I.A.

I.A. 40,9 64,8 14,9 11,9 A165 131,14 1.857,05 293,51 4.086,76 I.A. 12,8 2,23 26,4 31,3 A166 16,68 278,28 30,25 547,83 I.A. 18,7 14,0 18,3 9,19 A167 200,61 2.656,44 412,45 6.495,51 I.A. 73 5,68 42 42,1 A168 1.491,98 I.A. 1.144,17 I.A.

I.A. 73 25,7 22,5 13,1 A169 81,52 1.048,04 192,27 3.272,71 I.A. 4,23 34,7 3,65 10,8 A170 56,13 797,63 133,66 1.775,44 I.A. 1,37 7,2 0,91 0,90 A171 I.A.

I.A. I.A. I.A.

I.A. 0,26 0,60

Estabilidade de Microssoma Induzível por Hepático - % Induzível por Induzível por Induzível por Viabilidade Viabilidade Dox em 24 h - restante após 30 Dox em 24 h - Dox em 24 h - Dox em 24 h - Celltiter-Glo Celltiter-Glo PD1FLFluc min com NADPH N.º PD1ssGluc TNFaFLGluc IL2FLGluc de H929 em de U266 em 293FRT/TO: (%) 293FRT/TO: 293FRT/TO: 293FRT/TO: 48 h : EC50 48 h : EC50 IC50 média (nM) Camundongo IC50 média (nM) IC50 média (nM) IC50 média (nM) média (nM) média (nM) Rato Macaco Ser humano 3,65 2,23 A172 29,18 436,2 66,4 1.750,08 I.A. 2,63 3,46 49,2 53,8 A173 78,83 5.638,24 248,3 I.A.

I.A. 55,9 56,1 36,9 44,4 A174 15,79 565,56 53,31 1.861,24 I.A. 28,4 41,7 6,73 6,28 A175 9,35 393,21 40,35 1.436,98 I.A. 2,27 4,26 32,4 23,0 A176 17,11 631,2 62,1 3.109,99 I.A. 15,2 31,9 11,6 14,5 A177 4,95 154,54 12,57 179,88 I.A. 2,8 13,7 22,8 29,2 A178 134,76 4.820,51 255,26 I.A.

I.A. 25,8 24,0 0,5 0,18 A179 269,79 3.249,91 72,57 11.347,74 I.A. 0,26 0,04

Estabilidade de Microssoma Induzível por Hepático - % Induzível por Induzível por Induzível por Viabilidade Viabilidade Dox em 24 h - restante após 30 Dox em 24 h - Dox em 24 h - Dox em 24 h - Celltiter-Glo Celltiter-Glo PD1FLFluc min com NADPH N.º PD1ssGluc TNFaFLGluc IL2FLGluc de H929 em de U266 em 293FRT/TO: (%) 293FRT/TO: 293FRT/TO: 293FRT/TO: 48 h : EC50 48 h : EC50 IC50 média (nM) Camundongo IC50 média (nM) IC50 média (nM) IC50 média (nM) média (nM) média (nM) Rato Macaco Ser humano 0,44 1,97 A180 2.742,03 I.A. 13.843,24 20.179,62 I.A. 0,08 0,80 17,1 22,0 A181 38,69 983,85 122,41 1.479,93 I.A. 27,9 23,3 61,7 41,9 A182 78,84 1.957,98 255,55 I.A.

I.A. 41,5 53,7 7,39 3,17 A183 1.443,55 2.524,48 6116,1 I.A. 0,75 10,1 5,64 7,47 A184 100,13 1.079,53 232,68 6.916,08 I.A. 1,23 2,56 30,1 37,8 A185 43,18 573,1 85,38 1.468,19 I.A. 10,0 21,8 0,03 0,07 A187 427,09 6.171,01 1087,5 3.866,88 I.A. 0,15 0,05 4,48 27,8 A188 38,94 714,46 99,28 1.555,52 I.A. 12,4 27

Estabilidade de Microssoma Induzível por Hepático - % Induzível por Induzível por Induzível por Viabilidade Viabilidade Dox em 24 h - restante após 30 Dox em 24 h - Dox em 24 h - Dox em 24 h - Celltiter-Glo Celltiter-Glo PD1FLFluc min com NADPH N.º PD1ssGluc TNFaFLGluc IL2FLGluc de H929 em de U266 em 293FRT/TO: (%) 293FRT/TO: 293FRT/TO: 293FRT/TO: 48 h : EC50 48 h : EC50 IC50 média (nM) Camundongo IC50 média (nM) IC50 média (nM) IC50 média (nM) média (nM) média (nM) Rato Macaco Ser humano 0,14 0,07 A189 512,4 8.138,23 1.358,47 10.609,19 I.A. 0,01 0,06 69,3 85,3 A190 16,23 294,54 45,7 867,11 I.A. 71,6 74,1 55,3 65,0 A191 57,62 1.095,62 144,64 6.734,93 I.A. 68,3 48,6 0,18 0,08 A192 1.153,54 I.A. 2.332,92 9.362,89 I.A. 0,10 0,02 10,1 11,3 A193 23,8 748,16 81,77 6.806,9 I.A. 7,72 34,2 68,5 59,2 A194 261,32 I.A. 401,51 I.A.

I.A. 65,0 63,6 58,5 63,3 A195 210,96 11.201,43 668,05 I.A.

I.A. 32,8 53,6 A196 30,96 1.474,7 104,78 I.A.

I.A. 65,4 76,6 A197 34,25 666,07 95,53 4.125,97 I.A. 92,8 70,7

Estabilidade de Microssoma Induzível por Hepático - % Induzível por Induzível por Induzível por Viabilidade Viabilidade Dox em 24 h - restante após 30 Dox em 24 h - Dox em 24 h - Dox em 24 h - Celltiter-Glo Celltiter-Glo PD1FLFluc min com NADPH N.º PD1ssGluc TNFaFLGluc IL2FLGluc de H929 em de U266 em 293FRT/TO: (%) 293FRT/TO: 293FRT/TO: 293FRT/TO: 48 h : EC50 48 h : EC50 IC50 média (nM) Camundongo IC50 média (nM) IC50 média (nM) IC50 média (nM) média (nM) média (nM) Rato Macaco Ser humano 68,2 61,4 A198 18,54 372,95 53,28 1.170,31 I.A. 65,1 39,2 23,7 28,3 A199 80,8 1.420,53 162,14 I.A.

I.A. 25,5 8,0 71,9 83,1 A200 11,23 284,85 27,87 435,72 I.A. 73,9 78,1 39,1 35,4 A201 117,7 7.086,36 282,88 I.A.

I.A. 26,5 32,8 55,0 50,8 A202 56,59 2.052,14 175,52 2.914,63 I.A. 38,3 13,3 80,3 78,7 A203 14,76 434,38 30,44 396,26 I.A. 77,9 83,4 62,6 58,3 A204 58,42 981,88 157,89 1.487,11 I.A. 49,7 48,4 38,9 38,7 A205 128,76 1.806,9 305,32 2.362,23 I.A. 31,7 37,2

Estabilidade de Microssoma Induzível por Hepático - % Induzível por Induzível por Induzível por Viabilidade Viabilidade Dox em 24 h - restante após 30 Dox em 24 h - Dox em 24 h - Dox em 24 h - Celltiter-Glo Celltiter-Glo PD1FLFluc min com NADPH N.º PD1ssGluc TNFaFLGluc IL2FLGluc de H929 em de U266 em 293FRT/TO: (%) 293FRT/TO: 293FRT/TO: 293FRT/TO: 48 h : EC50 48 h : EC50 IC50 média (nM) Camundongo IC50 média (nM) IC50 média (nM) IC50 média (nM) média (nM) média (nM) Rato Macaco Ser humano 84,3 80,5 A206 17,37 395,41 38,95 657,05 I.A. 65 54,7 84,3 98,8 A207 7,93 221,47 10,6 105,74 I.A. 63,0 62,7 51,8 68,9 A208 343 I.A. 615,95 I.A.

I.A. 37,5 23,3 31,8 44,7 A209 326,73 I.A. 672,98 I.A.

I.A. 45,7 22,6 76,0 54,6 A210 202,76 I.A. 446,86 I.A.

I.A. 55,4 47,4 0,02 0,01 B1 423,7 I.A.

I.A.

I.A. 0,02 0,04 0,55 1,46 B2 1.721,99 I.A.

I.A.

I.A. 0,23 0,35 0,15 0,1 B3 7.382,27 I.A. 9.441,64 12.597,4 0,08 0,26

Estabilidade de Microssoma Induzível por Hepático - % Induzível por Induzível por Induzível por Viabilidade Viabilidade Dox em 24 h - restante após 30 Dox em 24 h - Dox em 24 h - Dox em 24 h - Celltiter-Glo Celltiter-Glo PD1FLFluc min com NADPH N.º PD1ssGluc TNFaFLGluc IL2FLGluc de H929 em de U266 em 293FRT/TO: (%) 293FRT/TO: 293FRT/TO: 293FRT/TO: 48 h : EC50 48 h : EC50 IC50 média (nM) Camundongo IC50 média (nM) IC50 média (nM) IC50 média (nM) média (nM) média (nM) Rato Macaco Ser humano 2,21 2,79 B4 I.A.

I.A.

I.A. 16.627,8 1,7 12,1 0,24 7,08 B5 1.497,99 I.A.

I.A.

I.A. 0,21 0,54 81,8 13,2 B6 416,05 I.A.

I.A.

I.A. 4,57 7,66 1,47 0,58 B7 6.900,19 24.323 6.858,59 7.481,69 0,04 0,03 17,1 23,8 B8 I.A.

I.A. I.A.

I.A. 15,5 22,1 0,36 3,74 B9 3.642,93 I.A.

I.A.

I.A. 0,26 0,49 B10 16.476,4 I.A. 6.923,68 I.A.

I.A.

B11 I.A.

I.A. I.A. I.A. I.A.

B12 5.655,74 I.A.

I.A. I.A.

I.A. 58,4 72,3 B16 449,25 13.885 825,91 I.A.

I.A. 44,7 55,2

Estabilidade de Microssoma Induzível por Hepático - % Induzível por Induzível por Induzível por Viabilidade Viabilidade Dox em 24 h - restante após 30 Dox em 24 h - Dox em 24 h - Dox em 24 h - Celltiter-Glo Celltiter-Glo PD1FLFluc min com NADPH N.º PD1ssGluc TNFaFLGluc IL2FLGluc de H929 em de U266 em 293FRT/TO: (%) 293FRT/TO: 293FRT/TO: 293FRT/TO: 48 h : EC50 48 h : EC50 IC50 média (nM) Camundongo IC50 média (nM) IC50 média (nM) IC50 média (nM) média (nM) média (nM) Rato Macaco Ser humano 13,5 15,7 B19 220,99 15.364,2 I.A.

I.A. 0,98 9,46 3,41 11,1 B20 794,07 I.A.

I.A.

I.A. 1,73 5,43 0,16 0,06 B21 3.951,77 I.A.

I.A. I.A.

I.A. 0,03 0,17 8,31 10,1 B22 31,31 519,36 80,48 1.648,2 I.A. 1,77 1,77

*I.A. significa IC50 ou EC50 de mais do que 25 µM

Claims (78)

REIVINDICAÇÕES

1. Composto de Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: caracterizado pelo fato de que: cada um dentre Ra e Rb é independentemente H ou C1-3alquila; R1 é H, OH, C1-3alquila, OC1-3alquila, =CH2 ou =NOR5; ou R1 é C3- 6cicloalquila ou C3-6heterocicloalquila e forma um grupo espiro com o carbono de anel ao qual é fixado; cada um dentre R1a e R1b é independentemente H ou C1-3 alquila; R2 é C1-6alquila, N(R5)2, C3-8cicloalquila, C3-7heterocicloalquila, C3- 7heterocicloalquenila ou C6-10arila; R3 é H, C1-6alquila, C3-8cicloalquila, C3-8cicloalquenila, C3- 7heterocicloalquila, C6-10arila ou C2-6heteroarila; R4 é C3-8cicloalquila, C3-9heterocicloalquila, C6-10arila ou C2- 6heteroarila; cada R5 é independentemente H, C1-3alquila ou C0-2alquileno-C6- 10arila; X é ausente, C1-3alquileno, C=O ou (C=O)O; Y é SO ou SO2; cada grupo heterocicloalquila, heterocicloalquenila e heteroarila tem, independentemente, 1, 2 ou 3 heteroátomos de anel selecionados a partir de N, O e S.

2. Composto ou sal, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que cada Y é SO.

3. Composto ou sal, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que cada Y é SO2.

4. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que Ra é H.

5. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que Ra é C1-3alquila.

6. Composto, de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que Ra é CH3.

7. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado pelo fato de que Rb é H.

8. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado pelo fato de que Rb é C1-3alquila.

9. Composto, de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo fato de que Ra é CH3.

10. Composto ou sal, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracterizado pelo fato de que R1 é H, OH ou =NOR5.

11. Composto ou sal, de acordo com a reivindicação 10, caracterizado pelo fato de que R5 é H ou CH3.

12. Composto ou sal, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracterizado pelo fato de que R1 é C1-3alquila ou OC1- 3alquila.

13. Composto ou sal, de acordo com a reivindicação 12, caracterizado pelo fato de que R1 é CH3 ou OCH3.

14. Composto ou sal, de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que R1 é CH3 e exibe estereoquímica S.

15. Composto ou sal, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracterizado pelo fato de que R 1 é C3-6cicloalquila ou C3- 6heterocicloalquila e forma um grupo espiro com o carbono de anel ao qual está ligado.

16. Composto ou sal, de acordo com a reivindicação 15, caracterizado pelo fato de que R1 juntamente com o átomo de anel ao qual está ligado forma , , ou .

17. Composto ou sal, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracterizado pelo fato de que R1 é =CH2.

18. Composto ou sal, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 17, caracterizado pelo fato de que cada um dentre R 1a e R1b é H.

19. Composto ou sal, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 17, caracterizado pelo fato de que pelo menos um dentre R 1a e R1b é C1-3alquila.

20. Composto ou sal, de acordo com a reivindicação 19, caracterizado pelo fato de que cada um dentre R1a e R1b é CH3.

21. Composto ou sal, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 20, caracterizado pelo fato de que R2 é C1-6alquila ou N(R5)2.

22. Composto ou sal, de acordo com a reivindicação 21, caracterizado pelo fato de que cada R5 compreende, independentemente, H, C1- 3alquila ou benzila.

23. Composto ou sal, de acordo com a reivindicação 21, caracterizado pelo fato de que R2 é Et, iPr, N(CH3)2, , , , .

24. Composto ou sal, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 20, caracterizado pelo fato de que R2 compreende C3- 8cicloalquila.

25. Composto ou sal, de acordo com a reivindicação 24, caracterizado pelo fato de que R2 compreende ciclopentila ou ciclo-hexila.

26. Composto ou sal, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 20, caracterizado pelo fato de que R2 é C3-9heterocicloalquila ou C3-9heterocicloalquenila.

27. Composto ou sal, de acordo com a reivindicação 26, caracterizado pelo fato de que R2 compreende oxetanila, azetidinila, tetra- hidrofuranila, pirrolidinila, tetra-hidropiranila, piranila, piperidinila, piperazinila, azepanila, morfolinila ou tetra-hidropiridinila.

28. Composto ou sal, de acordo com a reivindicação 26, caracterizado pelo fato de que a C3-7heterocicloalquila ou C3- 7heterocicloalquenila compreende uma ponte ou um grupo espiro.

29. Composto, de acordo com a reivindicação 28, caracterizado pelo fato de que a C3-9heterocicloalquila que compreende uma ponte ou um grupo espiro é selecionada a partir do grupo que consiste em , e , e R6 é C1-6alquila, C3-8cicloalquila ou C6-10arila.

30. Composto, de acordo com a reivindicação 29, caracterizado pelo fato de que R6 é fenila opcionalmente substituída por um a três grupos independentemente selecionados a partir de halo, C1-3alquila, C1-3alcóxi e CN.

31. Composto ou sal, de acordo com a reivindicação 27, caracterizado pelo fato de que R2 é selecionado a partir do grupo que consiste em , , , , , , , , , , , , , ,

, , , ,

, , , ,

, , , ,

, , , ,

, , , ,

, , , ,

, , , , ,

, , , ,

, , , ,

, , , ,

, , , ,

, , ,

, , ,

, , ,

, , , ,

, , ,

, , , ,

, , ,

, , ,

, , , , , , e .

32. Composto ou sal, de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que R2 é selecionado a partir do grupo que consiste em , , , , , , , e .

33. Composto ou sal, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 20, caracterizado pelo fato de que R2 é C6-10arila.

34. Composto ou sal, de acordo com a reivindicação 33, caracterizado pelo fato de que R2 é , ou .

35. Composto ou sal, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 34, caracterizado pelo fato de que X está ausente.

36. Composto ou sal, de acordo com a reivindicação 35, caracterizado pelo fato de que R3 compreende C1-6alquila ou H.

37. Composto ou sal, de acordo com a reivindicação 36, caracterizado pelo fato de que R3 é 2-metilbutila, isopropila, isopentila, CH2CH2OCH3, CH2C(CH3)2CN, CH2CF3 ou CH2CH2CF3.

38. Composto ou sal, de acordo com a reivindicação 37, caracterizado pelo fato de que R3 é isobutila.

39. Composto ou sal, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 34, caracterizado pelo fato de que X é C1-3alquileno.

40. Composto ou sal, de acordo com a reivindicação 39, caracterizado pelo fato de que X é CH2, CH2CH2 ou CH(CH3).

41. Composto ou sal, de acordo com a reivindicação 39 ou 40, caracterizado pelo fato de que R3 compreende C3-8cicloalquila, C3- 8cicloalquenila, C3-7heterocicloalquila, C6-10arila ou C2-6heteroarila.

42. Composto ou sal, de acordo com a reivindicação 41, caracterizado pelo fato de que R3 compreende ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclo-hexila, ciclopentenila, ciclo-hexenila, tetra-hidropiranila, fenila, pirrolila, pirazolila, imidazolila, tetrazolila, furanila, tiofenila, tiazolila, oxazolila, isoxazolila, oxadiazolila, tiadiazolila piridinila, pirazinila ou pirimidinila.

43. Composto ou sal, de acordo com a reivindicação 42, caracterizado pelo fato de que X-R3 é selecionado a partir do grupo que consiste em , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , e .

44. Composto ou sal, de acordo com a reivindicação 43, caracterizado pelo fato de que X-R3 é , , ou .

45. Composto ou sal, de acordo com a reivindicação 44, caracterizado pelo fato de que X-R3 é ou .

46. Composto ou sal, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 34, caracterizado pelo fato de que X é C=O ou (C=O)O.

47. Composto ou sal, de acordo com a reivindicação 46, caracterizado pelo fato de que R3 compreende C1-6alquila ou C6-10arila.

48. Composto ou sal, de acordo com a reivindicação 47, caracterizado pelo fato de que X-R3 é , ou .

49. Composto ou sal, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 48, caracterizado pelo fato de que R4 compreende C3- 8cicloalquila ou C3-9heterocicloalquila.

50. Composto ou sal, de acordo com a reivindicação 49, caracterizado pelo fato de que R4 é ou .

51. Composto ou sal, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 48, caracterizado pelo fato de que R4 compreende C6-10arila ou C2-9heteroarila, e R4 é opcionalmente substituído por um a três grupos independentemente selecionados a partir de halo, C 1-3alquila, C1-3alcóxi, C(O)N(RN)2 e N(RN)2 e cada RN é independentemente H ou C1-3alquila.

52. Composto ou sal, de acordo com a reivindicação 51, caracterizado pelo fato de que R4 é selecionado a partir do grupo que consiste em , , , , , , , , , , , , e .

53. Composto ou sal, de acordo com a reivindicação 52, caracterizado pelo fato de que R4 é .

54. Composto ou sal, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que: Ra, Rb, R1a e R1b são, cada um, H; R1 é =CH2 ou CH3; R2 é , , , , , ,

, , ou ; X-R3 é isobutila, , , ou ; R4 é ;e cada Y é SO2.

55. Composto ou sal, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 54, caracterizado pelo fato de que R1 está em uma configuração (S).

56. Composto caracterizado pelo fato de que é listado na Tabela A, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

57. Composto ou sal, de acordo com a reivindicação 56, caracterizado pelo fato de que o composto é selecionado a partir do grupo que consiste em:

,

,

,

, , ,

,

,

e .

58. Composto caracterizado pelo fato de que é selecionado a partir de um composto listado na Tabela B, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

59. Composição farmacêutica caracterizada pelo fato de que compreende o composto ou sal, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 58, e um carreador farmaceuticamente aceitável.

60. Método para inibir a secreção de proteínas em uma célula caracterizado pelo fato de que compreende colocar a célula em contato com o composto ou sal, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 58, ou a composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 59, em uma quantidade eficaz para inibir a secreção.

61. Método, de acordo com a reivindicação 60, caracterizado pelo fato de que a proteína é uma proteína de ponto de verificação.

62. Método, de acordo com a reivindicação 60, caracterizado pelo fato de que a proteína é uma proteína de superfície celular, proteína associada ao retículo endoplasmático ou proteína secretada envolvida na regulação da resposta imunológica antitumoral.

63. Método, de acordo com a reivindicação 60, caracterizado pelo fato de que a proteína é pelo menos uma dentre PD-1, PD-L1, TIM-1, LAG-3, CTLA4, BTLA, OX-40, B7H1, B7H4, CD137, CD47, CD96, CD73, CD40, VISTA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4, TGFRβ e combinações das mesmas.

64. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 60 a 63, caracterizado pelo fato de que o contato compreende administrar o composto ou a composição a um sujeito.

65. Método para tratar inflamação em um sujeito, caracterizado pelo fato de que compreende administrar ao sujeito uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto ou sal, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 58, ou a composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 59.

66. Método para tratar ou prevenir câncer ou uma condição pré- cancerosa em um sujeito, caracterizado pelo fato de que compreende administrar ao sujeito uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto ou sal, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 58 ou a composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 59.

67. Método, de acordo com a reivindicação 66, caracterizado pelo fato de que o câncer é melanoma, mieloma múltiplo, câncer de próstata, câncer de pulmão, câncer pancreático, carcinoma de células escamosas, leucemia, linfoma, um tumor neuroendócrino, câncer de bexiga ou câncer colorretal.

68. Método, de acordo com a reivindicação 66, caracterizado pelo fato de que o câncer é carcinoma de células não pequenas de pulmão, carcinoma de células escamosas, leucemia, leucemia mieloide aguda, leucemia mieloide crônica, linfoma, linfoma anaplásico de células grandes transformado por NPM/ALK, linfoma difuso de células B grandes, tumores neuroendócrinos, câncer de mama, linfoma de células do manto, carcinoma de células renais, rabdomiossarcoma, câncer de ovário, câncer de endométrio, carcinoma de células pequenas, adenocarcinoma, carcinoma gástrico, carcinoma hepatocelular, câncer pancreático, carcinoma de tireoide, linfoma anaplásico de células grandes, hemangioma ou câncer de cabeça e pescoço.

69. Método, de acordo com a reivindicação 66, caracterizado pelo fato de que o câncer é um tumor sólido.

70. Método, de acordo com a reivindicação 66, caracterizado pelo fato de que o câncer é câncer de cabeça e pescoço, carcinoma de células escamosas, carcinoma gástrico ou câncer pancreático.

71. Método para tratar uma doença autoimune em um sujeito, caracterizado pelo fato de que compreende administrar ao sujeito uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto ou sal, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 58, ou a composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 59.

72. Método, de acordo com a reivindicação 71, caracterizado pelo fato de que a doença autoimune é psoríase, dermatite, esclerodermia sistêmica, esclerose, doença de Crohn, colite ulcerativa; síndrome de dificuldade respiratória, meningite; encefalite; uveíte; colite; glomerulonefrite; eczema, asma, inflamação crônica; aterosclerose; deficiência de adesão de leucócitos; artrite reumatoide; lúpus eritematoso sistêmico (SLE); diabetes mellitus; esclerose múltipla; Síndrome de Reynaud; tireoidite autoimune; encefalomielite alérgica; Síndrome de Sjorgen; diabetes juvenil; tuberculose, sarcoidose, polimiosite, granulomatose e vasculite; anemia perniciosa (doença de Addison); doenças que envolvem diapedese de leucócitos; distúrbio inflamatório do sistema nervoso central (SNC); síndrome de lesão de múltiplos órgãos; anemia hemolítica; miastenia grave; doenças mediadas por complexo antígeno- anticorpo; doença antimembrana basal glomerular; síndrome antifosfolipídica; neurite alérgica; doença de Graves; síndrome miastênica de Lambert-Eaton; penfigoide bolhoso; pênfigo; poliendocrinopatias autoimunes; doença de Reiter; síndrome do homem rígido; doença de Behçet; arterite de células gigantes;

nefrite de complexo imunológico; nefropatia de IgA; polineuropatias de IgM; púrpura trombocitopênica imunológica (ITP) ou trombocitopenia autoimune.

73. Método para tratar uma doença relacionada ao sistema imunológico em um sujeito, caracterizado pelo fato de que compreende administrar ao sujeito uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto ou sal, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 58, ou a composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 59.

74. Método, de acordo com a reivindicação 73, caracterizado pelo fato de que a doença relacionada ao sistema imunológico é artrite reumatoide, lúpus, doença inflamatória do intestino, esclerose múltipla ou doença de Crohn.

75. Método para tratar doenças neurodegenerativas em um sujeito, caracterizado pelo fato de que compreende administrar ao sujeito uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto ou sal, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 58, ou a composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 59.

76. Método, de acordo com a reivindicação 75, caracterizado pelo fato de que a doença neurodegenerativa é a esclerose múltipla.

77. Método para tratar uma doença inflamatória em um sujeito, caracterizado pelo fato de que compreende administrar ao sujeito uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto ou sal, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 58, ou a composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 59.

78. Método, de acordo com a reivindicação 77, caracterizado pelo fato de que a doença inflamatória é bronquite, conjuntivite, miocardite, pancreatite, colecstite crônica, bronquiectasia, estenose da válvula aórtica, reestenose, psoríase ou artrite.