Nothing Special   »   [go: up one dir, main page]

EA022084B1 - Спирооксетановые производные урацилсодержащих нуклеозидов - Google Patents

Спирооксетановые производные урацилсодержащих нуклеозидов Download PDF

Info

Publication number
EA022084B1
EA022084B1 EA201171406A EA201171406A EA022084B1 EA 022084 B1 EA022084 B1 EA 022084B1 EA 201171406 A EA201171406 A EA 201171406A EA 201171406 A EA201171406 A EA 201171406A EA 022084 B1 EA022084 B1 EA 022084B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
compounds
formula
alkyl
compound
hydrogen
Prior art date
Application number
EA201171406A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201171406A1 (ru
Inventor
Тим Хьюго Мария Йонкерс
Пьер Жан-Мари Бернар Рабуассон
Коэн Вандик
Стивен Морис Паула Ван Хоф
Лили Ху
Абделлах Тахри
Original Assignee
ЯНССЕН ПРОДАКТС, Эл.Пи.
Медивир Аб
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by ЯНССЕН ПРОДАКТС, Эл.Пи., Медивир Аб filed Critical ЯНССЕН ПРОДАКТС, Эл.Пи.
Publication of EA201171406A1 publication Critical patent/EA201171406A1/ru
Publication of EA022084B1 publication Critical patent/EA022084B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/06—Pyrimidine radicals
    • C07H19/10—Pyrimidine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/06—Pyrimidine radicals
    • C07H19/067—Pyrimidine radicals with ribosyl as the saccharide radical
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/50—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines
    • A61K31/503—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines spiro-condensed
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7068—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid
    • A61K31/7072—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid having two oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. uridine, uridylic acid, thymidine, zidovudine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D493/00—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system
    • C07D493/02—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D493/10—Spiro-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H15/02—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures
    • C07H15/04—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures attached to an oxygen atom of the saccharide radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H15/18—Acyclic radicals, substituted by carbocyclic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/06—Pyrimidine radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H21/00—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids
    • C07H21/02—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids with ribosyl as saccharide radical

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)

Abstract

Раскрыты соединения формулы (I)включая их любые возможные стереоизомеры, где Rпредставляет собой монофосфатную, дифосфатную или трифосфатную сложноэфирную группу или Rпредставляет собой группу формулыRпредставляет собой необязательно замещенный фенил или нафтил; Rпредставляет собой водород или C-C-алкил; R' представляет собой водород или C-C-алкил; или один из Rи R' принимает также значение фенил; Rпредставляет собой C-C-алкил или бензил; или их фармацевтически приемлемая соль или сольват; фармацевтическая композиция на их основе и применение соединений I в качестве ингибиторов вируса HCV.

Description

Изобретение относится к спирооксетановым производным урацилсодержащих нуклеозодов, которые являются ингибиторами вируса гепатита С (НСУ).
НСУ представляет собой одноцепочечный (+)РНК вирус, принадлежащий к семейству вирусов Р1аущтйае, к роду гепатовирусов. Фрагмент Ν85Β полигена РНК кодирует РНК-зависимую РНКполимеразу (ΡάΡρ), которая необходима для репликации вируса. Как последствие первоначальной острой инфекции, у большинства инфицированных пациентов развивается хронический гепатит из-за того, что происходит репликация НСУ преимущественно в гепатоцитах, но без явного цитопатического проявления. В частности, недостаток интенсивного ответного действия Т-лимфоцитов и сильная предрасположенность вируса к мутации, по всей видимости, способствуют высокой скорости развития хронического инфекционного процесса. Хронический гепатит может развиваться в фиброз печени, приводящий к циррозу, конечной стадии заболевания печени, и НСС (гепатоклеточную карциному), что делает его основной причиной необходимости трансплантации печени. Существует шесть основных генотипов НСУ и более 50 подтипов, которые географически по-разному распределены. НСУ генотипа 1 представляет собой преобладающий генотип в Европе и США. Экстенсивная генетическая гетерогенность НСУ обусловливает существенные осложнения при диагностике и изучении симптомов течения болезни, возможно объясняя трудности в создании вакцины и недостаточную действенность существующей в настоящее время терапии.
Передача НСУ может происходить при контакте с зараженной кровью или препаратами крови, например, вследствие переливания крови или внутривенного применения лекарственного препарата. Внедрение диагностических тестов, применяемых при скрининге крови, приводит к тенденции понижения числа случаев постинфузионного НСУ. Несмотря на то что обеспечивается медленное развитие конечной стадии заболевания печени, существующие инфекции будут оставаться, представляя собой серьезную медицинскую проблему и экономическое бремя на десятилетия.
Существующая в настоящее время терапия НСУ основывается на (пегилированном) интерферонеальфа (ΙΡΝ-α) в комбинации с рибавирином. Эта комбинированная терапия дает поддерживающий вирусологический контроль у более чем 40% пациентов, инфицированных НСУ генотипа 1, и приблизительно у 80% пациентов, инфицированных НСУ генотипов 2 и 3. Кроме ограниченной эффективности против НСУ генопипа 1, эта комбинированная терапия имеет существенные побочные эффекты и плохо переносима многими пациентами. Большинство побочных эффектов включает подобные гриппу симптомы, гематологические нарушения и психоневрологические симптомы. Следовательно, существует потребность в более эффективных, удобных и лучше переносимых методах лечения.
Опыт применения лекарственных препаратов против Н1У, в частности ингибиторов Н1У протеазы, указывает, что недостаточно оптимальная фармакокинетика и сложный режим дозировки незамедлительно приводят к неумышленным неудачам в соблюдении терапевтических рекомендаций. Это, в свою очередь, означает, что на 24 часу самая низшая точка концентрации (минимум концентрации в плазме) для соответствующих лекарственных препаратов при Н1У состоянии часто опускается ниже 1С90 или ЕБ9о предельной величины для большей части суток. Следует принять во внимание, что на 24 часу самый низший уровень значений, по крайней мере, для 1С50, и более реально для 1С90 или ЕБ90, весьма важен для сдерживания проявления ускользнувших от лекарственного препарата мутантов. Достижение необходимой фармакокинетики и метаболизма лекарственного препарата, которые обеспечивают такие самые низшие уровни значений, определяют точные перспективы дизайна лекарственного препарата.
ΡάΡρ, кодируемый фрагментом Ν85Β, является существенным для репликации одноцепочечной (+)РНК НСУ генома. Этот фермент вызывает особый интерес у специалистов в области медицинской химии. Известны как нуклеозидные, так и ненуклеозидные ингибиторы Ν85Β. Нуклеозидные ингибиторы могут действовать как терминатор цепи биосинтеза или как конкурентный ингибитор, или обоими способами. Чтобы быть активными, нуклеозидные ингибиторы должны поглощаться клеткой и превращаться ίη νινο в трифосфаты. Это превращение в трифосфаты обычно осуществляется посредством клеточных киназ, которые привносят дополнительные структурные требования к потенциальному ингибитору нуклеозидной полимеразы. Кроме того, это ограничивает прямую оценку нуклеозидов в качестве ингибиторов репликации НСУ при испытаниях на клетках, способных к фосфорилированию ш зйи.
Несколько попыток было предпринято для выявления нуклеозидов, являющихся ингибиторами НСУ ΡάΡρ, но несмотря на то, что для небольшого количества соединений начали проводить клинические испытания, ни одно соединение не прошло до конца регистрации. В числе проблем, из-за которых нуклеозиды, имеющие своей мишенью НСУ, сталкиваются с трудностями их продвижения, представляются следующие: токсичность, мутагенность, отсутствие селективности, низкая эффективность, низкая биологическая доступность, недостаточно оптимальные режимы дозировки и получающиеся в результате большие масса таблетки и стоимость товара.
Существует потребность в ингибиторах НСУ, которые могут преодолеть недостатки существующей в настоящее время терапии НСУ, такие как побочные эффекты, ограниченная эффективность, возникновение устойчивости и отсутствие соблюдения режима терапии, а также и способствовать устойчивому вирусологическому ответу.
- 1 022084
Настоящее изобретение касается группы ингибирующих НСУ производных 1-(8-гидрокси-7(гидроксиметил)-1,6-диоксаспиро[3.4]октан-5-ил)пиримидин-2,4-диона с полезными свойствами, касающимися одного или нескольких нижеприведенных параметров: антивирусная эффективность, благоприятный профиль развития устойчивости, отсутствие токсичности и генотоксичности, подходящие фармакокинетика и фармакодинамика, и простота приготовления препарата и введения. Спирооксетановые производные нуклеозидов, а именно 1-(2-О,2-С-этано-в-О-рибофуранозил)тимин и 1-(2-О,2-С-этано-в-Орибофуранозил)урацил, описаны в Огд. Вюшо1. Сйеш., 2003, 3514-3526. Эти соединения тестировали против Н1У, но не было обнаружено активности.
Соединения изобретения также могут быть перспективны благодаря тому факту, что у них отсутствует активность против других вирусов, а именно против Н1У. Н1У-инфицированные пациенты часто страдают от сопутствующих инфекций, таких как НСУ. Лечение таких пациентов с помощью ингибитора НСУ, который также ингибирует и Н1У, может привести к появлению устойчивых к Н1У штаммов.
Описание сущности изобретения
В одном аспекте настоящее изобретение предоставляет соединения, которые могут быть представлены формулой (I)
включая их любые возможные стереоизомеры, где
К4 представляет собой монофосфатную, дифосфатную или трифосфатную сложноэфирную группу или К4 представляет собой группу формулы
О
К7 представляет собой фенил, необязательно замещенный 1 или 2 заместителями, каждый из которых, независимо друг от друга, выбирают из галогена или С1-С6-алкила, или К7 представляет собой нафтил;
К8 представляет собой водород или С1-С6-алкил;
К8 представляет собой водород или С1-С6-алкил или один из К8 и К8 принимает также значение фенил;
К9 представляет собой С1-С6-алкил или бензил, или их фармацевтически приемлемая соль или сольват.
В другом аспекте изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей противовирусно эффективное количество соединения формулы (I) и фармацевтически приемлемый носитель.
Дополнительно, в другом аспекте изобретение касается применения соединений формулы (I), как указано в этом документе, в качестве ингибитора вируса НСУ. Группа -НН-С(К8)(К8')-С(=О)- может образовать аминокислотный остаток, который включает природные и неприродные аминокислотные остатки. Преимущественно интересными являются глицин (С1у) и диметилглицин (Эшд). Также представляют интерес такие аминокислотные остатки, в которых К8 представляет собой водород. Когда в последнем случае К8 отличен от водорода, аминокислотный остаток имеет хиральный центр и конфигурация при ассиметрическом атоме углерода может быть соответствующей Ь-аминокислоте. Примеры включают остатки аланина (А1а), валина (Уа1), изолейцина (Не), α-аминобутановой кислоты (АВА, также называемой как 2-аминомасляная кислота или этилглицин), фенилаланина (РНс) и фенилглицина (РНд). а именно Ь-А1а, Ь-Уа1, Ь-11е, Ь-АВА, Ь-Рйе и Ь-Рйд.
Подгруппы соединений формулы (I) представляют собой такие соединения формулы (I) или подгруппы соединений формулы (I), как определено в этом документе, в которых К4 представляет собой группу формулы
Ва к* ?к7
--УАг о
Подгруппы соединений формулы (I) представляют собой такие соединения формулы (I) или подгруппы соединений формулы (I), как определено в этом документе, в которых:
(а) К7 представляет собой фенил, необязательно замещенный галогеном или одной или двумя С1 -С6алкильными группами, или К7 представляет собой нафтил;
(В) К7 представляет собой фенил или нафтил.
Подгруппы соединений формулы (I) представляют собой такие соединения формулы (I) или под- 2 022084 группы соединений формулы (I), как определено в этом документе, в которых К8 представляет собой водород и К8 представляет собой водород или С1-С6-алкил.
Подгруппы соединений формулы (I) представляют собой такие соединения формулы (I) или подгруппы соединений формулы (I), как определено в этом документе, в которых К8 представляет собой водород, и К8 представляет собой метил или этил.
Подгруппы соединений формулы (I) представляют собой такие соединения формулы (I) или подгруппы соединений формулы (I), как определено в этом документе, в которых К9 представляет собой нбутил или бензил.
(ί) К9 представляет собой С3-С7циклоалкил.
Представляют интерес соединения 12а, 12с, 126 и 12к:
либо в свободной форме (т.е. не в форме соли) этих соединений, либо в виде их фармацевтически приемлемых кислотно-аддитивных солей.
Соединения формулы (I) имеют несколько центров хиральности, а именно при атомах углерода 1', 3' и 4'. Несмотря на то что стереохимия у этих атомов углерода определена, соединения могут демонстрировать по крайней мере 75%, предпочтительно по крайней мере 90%, а также в дополнение до 95% или до 98% энантиомерной чистоты для каждого хирального центра.
Хиральность также может иметь место в заместителях, таких, для которых К4 представляет собой кв В0, ОК7 о
который может иметь хиральность у атома углерода, несущего К8 (когда К8 и К8 различны), и у атома фосфора. Фосфорный хиральный центр может быть представлен как Кр, или как 8Р, или как смесь таких стереоизомеров, включая рацематы. Диастереомеры, происхождение которых возможно в результате наличия хирального фосфорного центра и хирального атома углерода, также могут существовать.
Как указано выше, соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль или сольват применяются в качестве ингибитора вируса НСУ. Типичные генотипы НСУ в соответствии с изобретением включают генотип 1В (преобладающий в Европе) или 1а (преобладающий в Северной Америке). Соединения формулы (I) представлены в виде определенного стереоизомера, за исключением стереоизомеризации при фосфорном атоме фосфорамидатной группы. Абсолютную конфигурацию таких соединений можно определить, используя способы, известные в данной области техники, такие как, например, дифракция рентгеновских лучей или ЯМР, и/или по причастности к исходным веществам с известной стереохимией. Фармацевтические композиции в соответствии с изобретением предпочтительно будут включать стереоизомерно чистые формы указанного стереоизомера индивидуального соединения формулы (I).
- 3 022084
Стереоизомерно чистые формы соединений и промежуточных продуктов, упоминаемых в этом документе, определяются как изомеры, по существу, свободные от других энантиомерных или диастереомерных форм таких же базовых молекулярных структур указанных соединений или промежуточных продуктов. А именно, термин стереоизомерно чистые имеет отношение к соединениям или к промежуточным продуктам, имеющим стереоизомерный избыток, по крайней мере, от 80% (т.е. минимум 90% одного изомера и максимум 10% других возможных изомеров) и до стереоизомерного избытка 100% (т.е. 100% одного изомера и полное отсутствие других), более конкретно, имеет отношение к соединениям или к промежуточным продуктам, имеющим стереоизомерный избыток от 90 и до 100%, еще более конкретно, к имеющим стереоизомерный избыток от 94 и до 100% и наиболее конкретно, к имеющим стереоизомерный избыток от 97 и до 100% или от 98 до 100%. Термины энантиомерно чистые и диастереоизомерно чистые следует понимать аналогичным образом, но в таком случае как имеющие отношение к энантиомерному избытку и к диастереоизомерному избытку, соответственно, при анализе смеси.
Чистые стереоизомерные формы соединений и промежуточных продуктов этого изобретения могут быть получены посредством применения методик, известных в данной области техники. Например, энантиомеры могут быть отделены один от другого посредством селективной кристаллизации их диастереомерных солей с оптически активными кислотами или основаниями. Их примеры представляют собой винную кислоту, дибензоилвинную кислоту, дитолилвинную кислоту и камфорсульфоновую кислоту.
Альтернативно, энантиомеры могут быть разделены хроматографическими методами с использованием хиральных неподвижных фаз. Указанные химически чистые стереоизомерные формы также могут быть получены из соответствующих химически чистых стереоизомерных форм подобранных исходных веществ, при условии, что реакция протекает стереоспецифично.
Предпочтительно, в том случае, если необходим определенный стереоизомер, указанное соединение синтезируют посредством стереоспецифических способов получения. Для этих способов предпочтительно использовать энантиомерно чистые исходные вещества.
Диастереомерные рацематы соединений формулы (I) могут быть получены в разделенном виде посредством общепринятых способов. Подходящие физические способы разделения, которые успешно могут быть использованы, представляют собой, например, селективную кристаллизацию и хроматографию, например колоночную хроматографию.
Фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли включают терапевтически активные нетоксичные формы соединений формулы (I), полученные в виде кислотно-аддитивных солей или основноаддитивных солей. Представляют интерес и свободные, т.е. несолевые формы соединений формулы (I) или какой-либо подгруппы соединений формулы (I), указанных в этом документе.
Фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли могут быть обычно получены посредством обработки основной формы подходящей кислотой. Подходящие кислоты включают, например, неорганические кислоты, такие как галогенводородные кислоты, например, хлористо-водородная или бромисто-водородная кислота, серная, азотная, фосфорная и им подобные кислоты; или органические кислоты, такие как, например, уксусная, пропионовая, гидроксиуксусная, молочная, пировиноградная, щавелевая (т.е. этандиовая), малоновая, янтарная (т.е. бутандиовая кислота), малеиновая, фумаровая, яблочная (т.е. гидроксибутандиовая кислота), винная, лимонная, метансульфоновая, этансульфоновая, бензолсульфоновая, п-толуолсульфоновая, цикламовая кислота, салициловая, п-аминосалициловая, памовая кислота и им подобные кислоты. И наоборот, указанные солевые формы при обработке подходящим основанием могут быть превращены в свободные основные формы.
Соединения формулы (I), содержащие кислотный протон, могут также быть превращены в их нетоксичные аддитивные солевые формы металла или амина посредством обработки подходящими органическими или неорганическими основаниями. Подходящие основные солевые формы включают, например, аммонийные соли, соли щелочного или щелочно-земельного металла, например литиевые, натриевые, калиевые, магниевые, кальциевые соли и им подобные, соли с органическими основаниями, например бензатиновые, Ν-метил-Э-глюкаминовые, гидрабаминовые соли и соли с аминокислотами, такими как, например, аргинин, лизин и им подобные.
Термин сольваты охватывает любые фармацевтически приемлемые сольваты, которые соединения формулы (I), а также и их соли способны образовать. Такие сольваты представляют собой, например, гидраты, алкоголяты, например этаноляты, пропаноляты и им подобные.
Некоторые соединения формулы (I) также могут существовать в виде их таутомерных форм. Например, таутомерные формы амидных групп (-Τ'(=Ο)-ΝΗ-) представляют собой иминоспирты (-С(ОН)=Ю), которые могут стать более стабильными в кольцевых структурах ароматического характера. Уридиновое основание представляет собой пример такой формы. Такие формы, несмотря на то что они точно не указаны в структурных формулах, представленных в этом документе, подразумеваются включенными в объем настоящего изобретения.
Как используется в этом документе, С1-С4алкил, как группа или часть группы, обозначает насыщенные линейные или с разветвленной цепью углеводородные радикалы, имеющие от 1 до 4 атомов углерода, такие как, например, метил, этил, 1-пропил, 2-пропил, 1-бутил, 2-бутил, 2-метил-1-пропил, 2метил-2-пропил. С1-С6алкил охватывает С1-С4-алкильные радикалы и их более высшие гомологи, име- 4 022084 ющие 5 или 6 атомов углерода, такие как, например, 1-пентил, 2-пентил, 3-пентил, 1-гексил, 2-гексил, 2метил-1-бутил, 2-метил-1-пентил, 2-этил-1-бутил, З-метил-2-пентил и им подобные. Среди С1-С6-алкилов представляют интерес Ц-Сд-алкилы. Ц-Сю-алкил охватывает С1-С6-алкильные радикалы и их более высшие гомологи, имеющие 7, 8, 9 или 10 атомов углерода, такие как, например, гептил, 2-гептил, 3гептил, 2-метилгексил, октил, 2-октил, 3-октил, нонил, 2-нонил, 3-нонил, 2-бутилпентил, децил, 2-децил и им подобные. Среди Ц-С^-алкилов представляют интерес С4-С6-алкил, С1-С2-алкил, обозначаемые как метил и этил.
С4-С6-алкокси обозначает радикал -О-С4-С6-алкил, в котором С4-С6-алкил представляет собой такой, как определено выше. Примеры С4-С6-алкокси представляют собой метокси, этокси, н-пропокси или изопропокси.
С3-С6-циклоалкил включает циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил. Вызывающий интерес представляет собой циклопропил.
Термин С3-С6-алкенил, как группа или часть группы, обозначает насыщенные линейные и с разветвленной цепью углеводородные радикалы, имеющие насыщенные углерод-углеродные связи и, по крайней мере, одну двойную связь, и имеющие от 3 до 6 атомов углерода, такие как, например, 1пропенил, 2-пропенил (или аллил), 1-бутенил, 2-бутенил, 3-бутенил, 2-метил-2-пропенил, 2-пентенил, 3пентенил, 2-гексенил, 3-гексенил, 4-гексенил, 2-метил-2-бутенил, 2-метил-2-пентенил и им подобные. Среди С3-С6-алкенилов представляет интерес С3-С4-алкенил. Среди С3-С6-алкенилов или С3-С4алкенилов представляют интерес такие радикалы, которые имеют одну двойную связь.
Термин галоген является общим для фтора, хлора, брома и йода.
В одном варианте осуществления изобретения термин фенил-С1-С6-алкил представляет собой бензил.
Как используется в этом документе, термин (=О) или оксо образует карбонильный фрагмент в том случае, когда присоединен к углеродному атому. Следует заметить, что атом может быть замещен оксо-группой, только когда валентность этого атома дает такую возможность.
Термин монофосфатный, дифосфатный или трифосфатный сложный эфир относится к группам:
О 0 0 000
II II II II II II _о-Гон -о-Го-Гон -О-Го-Го-Гон
ОН , ОН ОН } он он он
В том случае, когда положение радикала в молекулярном фрагменте не определено (например, заместитель в фениле) или представлено связями, жестко не закрепленными, тогда такой радикал может быть расположен на любом атоме такого фрагмента, если получающаяся в результате структура представляет собой химически стабильную. В том случае, когда возможность перемены расположения в молекуле присутствует более чем в одном варианте, тогда каждое определенное расположение обеспечивается независимо.
Всякий раз, когда используется в этом документе, термин соединения формулы (I) или представленные здесь соединения или аналогичные термины, подразумевается, что он включает соединения формулы (I), включая возможные стереоизомерные химические формы и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты.
Соединения формулы (I) или любой подгруппы формулы (I) могут быть изотопно-меченными, т.е. один или несколько атомов могут быть заменены на изотоп, отличающийся от такового обычного, обнаруженного в природе. Примеры таких изотопов включают изотопы водорода, такие как 2Н и 3Н; углерода, такие как ПС, 13С и 14С; азота, такие как 13Ν и 15Ν; кислорода, такие как 15О, 17О и 18О; фосфора, такие как 31Р и 32Р, серы, такой как 35§; фтора, такой как 18Р; хлора, такой как 36С1; брома, такие как 75Вг, 76Вг,
82 123
Вг и Вг; и йода, такие как I, 1251 и 1311. Изотопно-меченные соединения могут быть получены 41, посредством таких способов, которые аналогичны способам, описанным в этом документе, при использовании соответствующих изотопно-меченных реагентов или исходных веществ, или посредством методик, известных в данной области техники. Выбор изотопа, включаемого в изотопно-меченное соединение, зависит от конкретного применения этого соединения. Например, для проведения биологических испытаний распределения в тканях используют включение таких радиоактивных изотопов, как 3Н или 14С. Для приборов, получающих изображение за счет радиоактивного излучения, будет пригоден пози11 18 13 15 трон-излучающий изотоп, такой как С, Ρ, N или О. Включение дейтерия может обеспечить большую метаболическую стабильность, приводящую в результате, например, к возрастанию ш νίνο периода полувыведения соединения или к снижению требуемой дозировки.
Методики синтеза.
Исходное вещество 1-[(4К,5К,7К,8К)-8-гидрокси-7-(гидроксиметил)-1,6-диокса-спиро[3.4]октан-5ил]пиримидин-2,4(1Н,3Н)-дион 10 может быть получено нижеописанным путем. Промежуточный продукт 4 может быть получен, как описано в Огд. ЬеИ, 2007, 9, 3009-3012, и введен в реакцию с аллилмагнийбромидом, с получением промежуточного продукта 5. Гидроксильная группа в последнем бензоилируется с помощью бензоилхлорида в присутствии основания, например триалкиламина, такого как триэтиламин или НЮдиметилпиридин-4-амин (ОМАР), в результате получается промежуточный продукт 6.
- 5 022084
Последний промежуточный продукт активируют с помощью кислоты Льюиса, а именно с помощью 8пС1.-|. и вводят в реакцию с силилированным урацилом, полученным, например, при реакции урацила с Ы,О-бис-[триметилсилил]ацетамидом (Β8Ά). Эта реакция приводит к промежуточному продукту 7, в котором двойную связь в аллильной группе окисляют до альдегида тетраоксидом осмия в присутствии перйодата, этот альдегид впоследствии восстанавливают до соответствующего спирта 8. Мезилирование последнего с помощью мезилхлорида в присутствии основания, например пиридина, с последующей обработкой сильным основанием, таким как гидрид натрия, в результате приводит к образованию оксетана. Удаление бензильных групп из 9, например, с помощью водорода в присутствии катализатора на основе благородного металла, например гидроксида палладия, приводит к получению промежуточного продукта 10. Последний может быть введен в реакцию со сложным эфиром амида хлорфосфорной кислоты 11а или 11В в присутствии основания, например Ν-метилимидазола (ΝΜΙ).
оз В8* О*7
II н о о
Па
Вышеописанные реакции иллюстративно представлены на нижеприведенной схеме.
Сложный эфир амида хлорфосфорной кислоты 11а или 11В может быть получен реакцией спирта 1а с Р0С13 в присутствии основания, полученный таким образом фосфорилдихлорид 1В далее взаимодействует с аминокислотой 1с или Ы.
- 6 022084
110
В следующем аспекте настоящее изобретение имеет отношение к фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество соединения формулы (I), как указано в этом документе, и фармацевтически приемлемый носитель. Указанная композиция может содержать от 1 до 50% или от 10 до 40% соединения формулы (I), и оставшаяся часть композиции приходится на указанный носитель. Терапевтически эффективное количество в этом контексте представляет собой количество, достаточное для воздействия в профилактических целях против инфекции НСУ, с целью ингибирования НСУ, стабилизации состояния или ослабления инфекции НСУ у инфицированных пациентов или у субъектов, подверженных риску инфицирования. И еще в следующем аспекте это изобретение имеет отношение к способу получения фармацевтической композиции, как указано в этом документе, который включает тщательное смешивание фармацевтически приемлемого носителя с терапевтически эффективным количеством соединение формулы (I), как указано в этом документе.
Соединения формулы (I) или любые их подгруппы могут быть технологически переработаны в различные фармацевтические формы для их введения. В качестве подходящих композиций можно перечислить все композиции, обычно применяемые для систематически вводимых лекарственных средств. Для получения фармацевтических композиций этого изобретения эффективное количество индивидуального соединения, необязательно в виде солевой формы или металлокомплекса, в качестве активного ингредиента объединяется с добавляемым путем тщательного смешивания фармацевтически приемлемым носителем, причем этот носитель может быть в широко разнообразных формах, в зависимости от формы лекарственного средства, необходимой для введения. Такие фармацевтические композиции желательны в виде единичной дозированной формы, удобной, в частности, для перорального, ректального, чрескожного введения или для парентеральной инъекции. Например, при получении композиций в виде дозированной формы для перорального введения можно применять любую общепринятую фармацевтическую среду, такую как, например, вода, гликоли, масла, спирты и им подобные, в случае пероральных жидких препаратов, таких как суспензии, сиропы, эликсиры, эмульсии и растворы; или твердые носители, такие как крахмалы, сахара, каолин, лубриканты, связующие вещества, дезинтегрирующие агенты и им подобные - в случае порошков, пилюль, капсул и таблеток. Из-за простоты их введения таблетки и капсулы представляют собой обладающие наибольшим преимуществом пероральные единичные дозированные формы, в случае которых естественно применяются твердые фармацевтические носители. Для парентеральных композиций носитель, как правило, будет включать стерильную воду, по крайней мере, в качестве наибольшей своей составляющей части, тем не менее могут быть включены и другие ингредиенты, например, для увеличения солюбилизации. Растворы для инъекций, например, могут быть приготовлены таким образом, что в них носитель включает солевой раствор, раствор глюкозы или смесь раствора солевого и раствора глюкозы. Суспензии для инъекций также могут быть получены, в этом случае могут применяться подходящие жидкие носители, суспендирующие агенты и им подобные вещества. Также учитываются твердые формы препаратов, предназначенные для превращения в жидкую форму препарата непосредственно перед применением. В композициях, подходящих для введения через кожу, носитель необязательно включает вещество, увеличивающее проникновение, и/или подходящий увлажняющий агент, необязательно объединенный с подходящими вспомогательными веществами любой природы при их небольшом количественном содержании, причем эти вспомогательные вещества не привносят выраженного вредного воздействия на кожу. Соединения настоящего изобретения могут также вводиться посредством пероральной ингаляции или инсуффляции в форме раствора, суспензии или сухого порошка с использованием какой-либо системы доставки в соответствии с известным уровнем техники.
Особо предпочтительной представляется разработка технологии получения вышеупомянутых фармацевтических композиций в виде единичной дозированной формы для простоты введения и для равномерности дозирования. Единичная дозированная форма, как используется в этом документе, обозначает физически дискретные единицы, подходящие в качестве унитарных дозировок, причем каждая единица содержит заранее определенное количество активного ингредиента, рассчитанное, чтобы вызвать требуемый терапевтический эффект в сочетании с соответствующим фармацевтическим носителем. Примеры таких единичных дозированных форм представляют собой таблетки (включая таблетки с насечкой или покрытые оболочкой таблетки), капсулы, пилюли, суппозитории, пакетики с порошком, пластинки, растворы или суспензии для инъекций и им подобные, и их сегрегированные множенные единицы.
Соединения формулы (I) проявляют активность против НСУ и могут применяться при лечении и профилактике инфекции НСУ или заболеваний, связанных с НСУ. Последние включают прогрессирую- 7 022084 щий фиброз печени, воспаление и некроз, ведущие к циррозу, последней стадии заболевания печени, и гепатоцеллюлярную карциному (НСС). Более того, ряд соединений этого изобретения, как предполагается, активны против подвергшихся мутации штаммов НСУ. Кроме того, многие соединения этого изобретения демонстрируют благоприятный фармакокинетический профиль и обладают привлекательными свойствами в отношении биодоступности, включая приемлемый период полувыведения, ЛИС (площадь под кривой) и максимальные значения, и отсутствующие неблагоприятные явления, такие как недостаточно быстрое проявление действия и задержка нахождения в тканях.
Противовирусная активность ш νίΐτο, против НСУ, для соединений формулы (I) может быть протестирована на клеточной модели НСУ в системе контроля репликации, основываясь на публикации ЬоЬтапп е! а1. (1999), §с1еисе 285:110-113, с последующими модификациями, описанными в работе Кпсуст е! а1. (2001), 1оита1 о£ У1то1о§у 75: 4614-4624 (включены в этот документ путем ссылки), что далее представлено в разделе примеров. Эта модель, несмотря на то что она не является всеохватывающей моделью инфекции НСУ, представляет собой широко признанную в качестве существующей на данный момент надежной и эффективной модели автономной репликации РНК НСУ. Следует принять во внимание, что важно видеть различие между соединениями, которые специфически вмешиваются в функционирование НСУ, и теми соединениями, которые оказывают влияние в виде цитотоксических или цитостатических эффектов на модели репликации НСУ, и результатом этого является процесс уменьшения биосинтеза РНК НСУ или/и концентрации связанного с этим фермента. Биологические испытания, известные в области определения цитотоксичности на клеточном уровне, базируются, например, на активности митохондриальных ферментов с использованием красителей, флуоресцирующих при окислительновосстановительных процессах, таких как резазурин. Более того, прибор для подсчета клеток показывает наличие характеристики неселективного ингибирования активности связанного с этим гена, такого как ген люциферазы светлячка. Подходящие типы клеток, которые можно снабдить посредством стабильной трансфекции геном-репортером люциферазы, у которого экспрессия зависит от конститутивноактивного генного промотера, и такие клетки можно использовать как счетчик, производящий отбор с исключением неселективных ингибиторов.
Благодаря их противо-НСУ свойствам, соединения формулы (I), включая любые возможные стереоизомеры, их фармацевтически приемлемые аддитивные соли или сольваты, представляют собой пригодные к применению для лечения теплокровных животных, и в особенности, людей, инфицированных НСУ, и для профилактики инфекций НСУ. Соединения настоящего изобретения, следовательно, могут применяться в качестве лекарственного средства, а именно в качестве противо-НСУ или НСУингибирующего лекарственного средства. Настоящее изобретение также связано с применением настоящих соединений в производстве лекарственного средства для лечения или профилактики инфекции НСУ. В другом дополнительном аспекте настоящее изобретение связано со способом лечения теплокровных животных, и в особенности человека, инфицированных НСУ или рискующих стать инфицированными НСУ, причем указанный способ включает введение противо-НСУ эффективного количества соединения формулы (I), как указано в этом документе. Указанное применение в качестве лекарственного средства или способ лечения включает в себя систематическое введение НСУ-инфицированным пациентам или субъектам, подверженным инфекции НСУ, количества средства, эффективного для противодействия условиям, связанным с инфекцией НСУ.
В общем случае предполагается, что противовирусное эффективное суточное количество должно составлять от приблизительно 1 до приблизительно 200 мг/кг, или приблизительно от 5 до приблизительно 175 мг/кг, или приблизительно от 10 до приблизительно 150 мг/кг, или приблизительно от 20 до приблизительно 100 мг/кг, или приблизительно от 50 до приблизительно 75 мг/кг массы тела. Средняя величина суточных доз может быть получена путем умножения этих суточных количеств приблизительно на 70. Может быть целесообразным вводить необходимую дозу в виде двух, трех, четырех или в виде большего количества суб-доз с определенными интервалами в течение дня. Указанные суб-дозы могут быть произведены в виде единичных дозированных форм, например, содержащих приблизительно от 1 до приблизительно 5000 мг, или приблизительно от 50 до приблизительно 3000 мг, или приблизительно от 100 до приблизительно 1000 мг, или приблизительно от 200 до приблизительно 600 мг, или приблизительно от 100 до приблизительно 400 мг активного ингредиента на единичную дозированную форму.
Используемый здесь термин приблизительно имеет значение, хорошо известное специалисту в данной области техники. В некоторых конкретных вариантах осуществления изобретения термин приблизительно может быть пропущен и тогда имеют в виду точное количество. В других примерах осуществления изобретения термин приблизительно обозначает, что число, следующее за термином приблизительно, попадает в диапазон ±15%, или в диапазон ±10%, или в диапазон ±5%, или в диапазон ±1% от указанного числового значения.
- 8 022084
Примеры
Нижеприведенные схемы предназначены всего лишь для иллюстративных целей и не предназначены для ограничения объема изобретения.
Результаты анализа с помощью сочетания методов жидкостной хроматографии и массспектрометрии (ЬС-Μδ) получали с использованием какого-либо из нижеприведенных методов. Данные ЯМР-спектров получали на спектрофотометре Вгикег 400 МГц.
ВЭЖХ, условия проведения А: система: ^а!ег8 АШапсе 2695;
колонка: ^а!ег8 ХТегга 2,5 мкм 4,6x50 мм; температура колонки: 55°С; скорость элюирования: 2 мл/мин;
подвижная фаза А: 10 мМ ацетата аммония+0,1% НСООН в Н2О; подвижная фаза В: СΗзСΝ
Время % А % В
0,00 85 15
3,00 5 95
4,20 5 95
4,30 85 15
5,40 85 15
ВЭЖХ, условия проведения В:
система: ^а!ег8 АШапсе 2695;
колонка: НурегсагВ 3 мкм 4,6x50 мм; температура колонки: 50°С; скорость элюирования: 2 мл/мин; подвижная фаза А: 10 мМ ацетата аммония в Η2Ο/ΟΗ^Ν 1/9; подвижная фаза В: 10 мМ ацетата аммония в Η2Ο^Η^Ν 9/1
Время % А % в
0,00 0 100
3,00 100 0
4,20 100 0
4,30 0 100
5,40 0 100
Пример 1: (2§,3К,4К,5К)-3-аллил-4-(бензилокси)-5-(бензилоксиметил)-2-метокситетрагидрофуран3-ол (5)
В атмосфере аргона к раствору 4 (полученному согласно Огд. ЬеШ, 2007, 9, 3009-3012) в сухом тетрагидрофуране (ТГФ; 400 мл) при -78°С добавляли аллилмагнийбромид (400 мл, 400 ммоль, 1,0 М в диэтиловом эфире). После перемешивания реакционной массы при -78°С в течение 4 ч реакционную массу оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакцию осторожно гасили с помощью насыщенного водного раствора хлорида аммония. Смесь экстрагировали дихлорметаном и органический слой промывали соляным раствором. Растворитель удаляли и остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (600 г силикагеля), элюируя в градиенте от 15 до 20% этилацетата в гексане, получали реакционный продукт 5 в виде бесцветного масла (32,9 г, 70%).
ВЭЖХ, условия проведения А, время удерживания: 2,97 мин, т//=402 (Μ+ΝΗ4)+.
Ή-ЯМР (400 МГц, СЭСЕ) δ м.д. 7,38-7,20 (м, 10Н), 5,84-5,97 (м, 1Н), 5,12 (д, 1Н, 1=10,2 Гц), 5,01 (д, 1Н, 1=17,2 Гц), 4,74 (д, 1Н, 1=12,3 Гц), 4,56 (с, 1Н), 4,53-4,40 (м, 3Н), 4,05-4,11 (м, 1Н), 3,32-3,53 (м, 4Н), 3,44 (с, 3Н), 2,37 (дд, 1Н, 1=14,3, 6,7 Гц), 2,25 (дд, 1Н, 1=14,3, 7,6 Гц).
Пример 2: (2§,3К,4К,5К)-3-аллил-4-(бензилокси)-5-(бензилоксиметил)-2-метокситетрагидрофуран3-илбензоат (6)
К раствору соединения 5 (26,6 г, 69,2 ммоль) в сухом дихлорметане (500 мл) при комнатной температуре добавляли ЮЮдиметилпиридин-4-амин (ΌΜΑΡ; 2,113 г, 17,30 ммоль), триэтиламин (217 мл, 1557 ммоль) и бензоилхлорид (18,05 мл, 156 ммоль). Через 1 ч добавляли дополнительно бензоилхлорид (6 мл) и ΌΜΑΡ (2,1 г). Смесь перемешивали в течение 5 дней.
- 9 022084
Реакционную смесь затем перемешивали с 1н. НС1 и экстрагировали дихлорметаном. Органические слои объединяли и промывали насыщенным водным раствором ЫаНСОз, затем следовала промывка солевым раствором. После сушки с помощью Мд§О4, фильтрования и упаривания летучих компонентов полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (400 г силикагеля), элюируя сначала гептаном и затем смесью, содержащей до 15% этилацетата в гептане, получали реакционный продукт в виде масла (в виде смеси с соединением 5). Смесь еще раз очищали, используя в качестве элюента СН2С12 (400 г силикагеля). Чистые фракции собирали и промежуточный продукт 6 получали в виде бесцветного масла (13,05 г, 39%).
ВЭЖХ, условия проведения А, время удерживания: 3,41 мин, т//=457 (М-ОМе)+.
1Н-ЯМР (400 МГц, СПС13) δ м.д. 8,1 (д, 2Н, 1=7,9 Гц), 7,68-7,28 (м, 13Н), 5,84-5,77 (м, 1Н), 5,12 (д, 1Н, 1=16 Гц), 4,95 (д, 1Н, 1=16 Гц), 4,92 (д, 1Н, 1=12,3 Гц), 4,56 (д, 1Н, 1=12,3 Гц), 4,48 (д, 1Н, 6 Гц), 4,40 (д, 1Н, 1=11,6 Гц), 4,2 (м, 1Н), 3,85 (д, 1Н, 1=6,2 Гц), 3,53 (д, 1Н, 1=10,8 Гц), 3,7 (с, 3Н), 3,45 (дд, 1Н, 1=10,8, 6,2 Гц), 3,25 (дд, 1Н, 1=15,5, 7,3 Гц), 2,45 (дд, 1Н, 1=15,5, 7,3 Гц).
Пример 3: 1-[(2К,3К,4К,5К)-3-аллил-4-(бензилокси)-5-(бензилоксиметил)-3-гидрокситетрагидрофуран-2-ил]пиримидин-2,4(1Н,3Н)-дион (7)
бис-(Триметилсилил)ацетамид (В8А; 29,2 мл, 118 ммоль) добавляли к смеси соединения 6 (14,0 г, 23,1 ммоль) и урацила (5,99 г, 53,4 ммоль) в безводном ацетонитриле (300 мл). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 1 ч и прозрачный раствор оставляли охлаждаться до комнатной температуры. Хлорид олова (11,55 мл, 99 ммоль) добавляли по каплям при комнатной температуре и смесь далее перемешивали в течение 1 ч-. Смесь затем перемешивали при кипении с обратным холодильником в течение 1,5 ч и снова охлаждали до комнатной температуры. Этилацетат (250 мл) добавляли, затем добавляли насыщенный водный раствор ЫаНСО3 (250 мл) и смесь перемешивали в течение 15 мин. После фильтрования через целит органический слой отделяли и промывали насыщенным водным раствором ЫаНСО3 (250 мл). Объединенный водный слой экстрагировали этилацетатом (250 мл) и объединенный органический слой сушили (Мд§О4), фильтровали и упаривали досуха при пониженном давлении. Полученное в результате желтое масло растворяли в метаноле и добавляли 25% метанолят натрия (25 мл). Перемешивание продолжали в течение ночи. Дополнительно добавляли 25% метанолят натрия (15 мл) и перемешивание продолжали в течение ночи. Добавляли уксусную кислоту (30 мл) и растворитель удаляли. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии с элюентом, изменяющимся от гептан/этилацетат, 50:50 до 100% этилацетата. Промежуточный продукт 7 (9,38 г, 76%) был получен в виде бесцветного масла.
ВЭЖХ, условия проведения А, время удерживания: 2,49 мин, т//=465 (М+Н)+.
’Н-ЯМР (400 МГц, СПС13) δ м.д. 8,39 (1Н, ΝΉ), 7,75 (д, 1Н, 1=8,0 Гц), 7,22-7,43 (м, 10Н), 6,05 (с, 1Н), 5,71-5,84 (м, 1Н), 5,35 (д, 1Н, 1=8,0 Гц), 5,00-5,11 (м, 2Н), 4,70 (д, 1Н, 1=11,5 Гц), 4,53 (д, 1Н, 1=11,5 Гц), 4,47 (д, 1Н, 1=11,1 Гц), 4,47 (д, 1Н, 1=11,1 Гц), 4,11-4,16 (м, 1Н), 4,04 (д, 1Н, 1=8,0 Гц), 3,81-3,87 (м, 1Н), 3,45-3,52 (м, 1Н), 3,17 (шир.с, ОН), 2,15-2,33 (м, 2Н).
Пример 4: 1-[(2К,3К,4К,5К)-4-(бензилокси)-5-(бензилоксиметил)-3-гидрокси-3-(2-гидроксиэтил)тетрагидрофуран-2-ил]пиримидин-2,4(1Н,3Н)-дион (8)
К перемешиваемому раствору 7 (7,8 г, 16,79 ммоль) в смеси ТГФ (10 мл) и Н2О (10 мл) добавляли перйодат натрия (11,17 г, 52,2 ммоль), затем добавляли тетраоксид осмия(УШ) (2 мл, 2,5 мас./об.% в трет-бутаноле, 0,168 ммоль) и перемешивание продолжали в течение 2 ч при комнатной температуре. Добавляли воду (100 мл) и проводили экстракцию этилацетатом (2x50 мл). Органический слой промывали насыщенным водным раствором ΝаНСО3 (2x30 мл). Объединенный водный слой экстрагировали этилацетатом и объединенный органический слой сушили над №28О4, фильтровали и упаривали досуха при пониженном давлении. Полученное масло растворяли в смеси ТГФ (100 мл) и Н2О (20 мл) и добавляли натрийборгидрид (1,361 г, 36,0 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, после чего добавляли воду (100 мл) и проводили экстракцию этилацетатом (2x50 мл). Объединенный органический слой промывали насыщенным водным раствором ΝаНСО3, объединенные водные слои экстрагировали этилацетатом, объединенные органический слой сушили над №28О4, фильтровали и упаривали досуха при пониженном давлении. Полученное масло очищали с помощью колоночной
- 10 022084 хроматографии, элюируя (0-10% (об./об.) метанолом в СН2С12, затем следовало изократическое элюирование 10% смесью), что позволяло получить реакционный продукт 8 в виде белой пенообразной пленки (4,8 г, 57%).
ВЭЖХ, условия проведения А, время удерживания: 2,12 мин, т//=469 (М+Н)+.
Ή-ЯМР (400 МГц, СОСУ) δ м.д. 9,85 (1Н, ЫН), 7,85 (д, 1Н, 1=8,0 Гц), 7,22-7,43 (м, 10Н), 6,05 (с,
1Н), 5,35 (д, 1Н, 1=8,0 Гц), 4,75 (д, 1Н, 1=11,5 Гц), 4,53 (д, 1Н, 1=11,5 Гц), 4,45 (д, 1Н, 1=11,3 Гц), 4,35 (д, 1Н, 1=11,3 Гц), 4,27 (д, 1Н, 1=6,6 Гц), 4,2 (с, 1Н), 4,1, (д, 1Н, 1=6,6 Гц), 3,95 (д, 1Н, 1=10,8 Гц), 3,75-3,7 (м, 1Н), 3,62 (д, 1Н, 1=10,8 Гц), 3,17 (шир.с, ОН), 1,8-1,7 (м, 2Н).
Пример 5: 1-[(4К,5К,7К,8К)-8-(бензилокси)-7-(бензилоксиметил)-1,6-диоксаспиро[3,4]октан-5ил]пиримидин-2,4(1Н,3Н)-дион (9)
Метансульфонилхлорид (0,800 мл, 0,34 ммоль) добавляли к соединению 8 (4,32 г, 9,22 ммоль) в сухом пиридине (100 мл). Через 1 ч 15 мин добавляли дополнительно 0,1 экв. метансульфонилхлорида и далее смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 45 мин. Затем добавляли небольшое количество метанола и смесь упаривали досуха. Остаток растворяли в этилацетате (100 мл) и промывали насыщенным раствором ЫаНСО3 (2x50 мл). Объединенный водный слой экстрагировали этилацетатом. Объединенный органический слой затем сушили над Ыа28О4 и концентрировали в вакууме. Полученный остаток растворяли в сухом ТГФ и сразу же добавляли 95% ЫаН (932 мг, 36,9 ммоль) при комнатной температуре. После перемешивания в течение 2 ч при комнатной температуре реакционную смесь выливали в насыщенный водный раствор КН4С1 (30 мл), затем добавляли СН2С12 (250 мл). Отделенный органический слой промывали насыщенным водным раствором ЫаНСО3 (2x100 мл) и объединенный водный слой экстрагировали СН2С12 (250 мл). Объединенный органический слой сушили над (Ыа28О4), фильтровали и упаривали досуха при пониженном давлении. Полученный остаток очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя сначала гептаном, затем этилацетатом, что позволяло получить соединение 9 (3,27 г, 79%) в виде пенообразной пленки.
ВЭЖХ, условия проведения А, время удерживания: 2,33 мин, т//=451 (М+Н)+.
Ή-ЯМР (400 МГц, СОСУ) δ м.д. 2,20-2,38 (м, 1Н), 2,38-2,52 (м, 1Н), 3,62-3,73 (м, 1Н), 3,89-4,13 (м, 3Н), 4,38-4,56 (м, 3Н), 4,56-4,68 (м, 1Н), 4,70-4,88 (м, 2Н), 5,25 (д, 1=8,00 Гц, 1Н), 6,25 (с, 1Н), 7,18-7,47 (м, 10Н), 7,87 (д, 1=8,20 Гц, 1Н), 8,90 (шир.с, 1Н).
Пример 6: 1-[(4К,5К,7К,8К)-8-гидрокси-7-(гидроксиметил)-1,6-диоксаспиро [3,4]октан-5ил]пиримидин-2,4(1Н,3Н)-дион (10)
Смесь соединения 9 (50 мг, 0,111 ммоль) в метаноле (1 мл) и Рб(ОН)2 (8 мг) перемешивали в атмосфере водорода при комнатной температуре. Через 4 ч еще дополнительно добавляли Рб(ОН)2 (30 мг) и метанол (1 мл). Смесь интенсивно перемешивали в атмосфере Н2 в течение ночи. Катализатор удаляли фильтрованием через декалит и растворитель удаляли упариванием. Полученный в результате остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле, элюируя 10% метанолом в зтилацетате, получая промежуточный продукт 10 в виде белого порошка (16,8 мг; 56%).
ВЭЖХ, условия проведения В, время удерживания: 1,98 мин, т//=271 (М+Н)+.
Ή-ЯМР (400 МГц, 1ГО) δ м.д. 7,65 (д, 1Н, 1=8,0 Гц), 6,11 (с, 1Н), 5,82 (д, 1Н, 1=8,0 Гц), 4,46-4,61 (м, 2Н), 4,06-4,13 (м, 1Н), 3,87-3,95 (м, 1Н), 3,69-3,77 (м, 2Н), 2,62-2,73 (м, 1Н), 2,48-2,58 (м, 1Н).
Пример 7: метил-2-(хлор(фенокси)фосфориламино)-2-метилпропионат (11)
Раствор фенилдихлорфосфата (1,0 экв., 13,0 ммоль, 1,9 мл) и метил-а-аминоизобутирата гидрохло- 11 022084 рида (1,0 экв., 13,0 ммоль, 2,0 г) в СЩСБ (80 мл) охлаждали до -80оС. Сухой Ν,Ν-диизопропилэтиламин (ΌΙΡΕΑ; 2,0 экв., 26,0 ммоль, 4,3 мл) добавляли по каплям. Через 2 ч реакционную массу нагревали до комнатной температуры и растворитель удаляли при пониженном давлении. Добавляли сухой диэтиловый эфир, осадок отфильтровывали и дважды промывали сухим диэтиловым эфиром в атмосфере аргона. Фильтрат упаривали досуха, получая соединение 11, которое хранили в виде 0,90 М раствора в сухом тетрагидрофуране (ТГФ) при -18°С.
Пример 8: метил 2-[[[(4К,5К,7К,8К)-5-(2,4-диоксо-3,4-дигидропиримидин-1(2Н)-ил)-8-гидрокси-1,6диоксаспиро[3.4]октан-7-ил]метокси](фенокси)фосфориламино]-2-метилпропаноат (12е)
К раствору соединения 10 (1,0 экв., 0,28 ммоль, 75 мг) в сухом ТГФ (3 мл) добавляли 1метилимидазол (ΝΜΙ; 12,0 экв., 3,33 ммоль, 0,27 мл) при комнатной температуре. Раствор промежуточного продукта 11 (1,4 экв., 0,39 ммоль, 0,43 мл) добавляли по каплям и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь трижды промывали 0,5 М НС1. Органический слой сушили над М§§04 и концентрировали в вакууме. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюент: 0-10% метанол в СН2С12), получая соединение 12е (24 мг, выход 15%, чистота 95%) в виде смеси диастереомеров.
ВЭЖХ, условия проведения А, время удерживания: 1,49 мин, т//=526 (М+Н)+.
!Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-Д6) δ м.д. 1,33 (с, 3Н), 1,37 (с, 3Н), 2,42-2,43 (м, 2Н), 3,56 (с, 3Н), 3,703,79 (м, 1Н), 3,80-3.88 (м, 0,4Н), 3,88-3,96 (м, 0,6Н), 4,09-4,20 (м, 1Н), 4,26-4,48 (м, 3Н), 5,50-5,56 (м, 1Н), 5,61-5,69 (м, 1Н), 5,88-5,97 (м, 1Н), 5,97-6,04 (м, 1Н), 7,12-7,24 (м, 3Н), 7,31-7,41 (м, 2Н), 7,44 (д, 1=8,22 Гц, 0,4Н), 7,52 (д, 1=8,02 Гц, 0,6Н), 11,49 (шир.с, 1Н).
Пример 9.
Используя методику, аналогичную вышеизложенной, были получены нижеперечисленные соединения.
В каждом случае анализ выполняли для смесей диастереомеров.
ВЭЖХ, условия проведения А, время удерживания: 2,00 мин, т//=602 (М+Н)+.
!Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 0,71-0,83 (м, 3Н), 1,45-1,73 (м, 2Н), 2,33-2,48 (м, 2Н), 3,59-3,80 (м, 2Н), 3,79-3,96 (М, 1Н), 4,04-4,19 (М, 1Н), 4,24-4,47 (м, 3Н), 4,98-5,14 (м, 2Н), 5,47-5,57 (м, 1Н), 5,585,73 (м, 1Н), 5,96-6,03 (м, 1Н), 5,96-6,03 (м, 1Н), 7,09-7,22 (м, 3Н), 7,27-7,39 (м, 7Н), 7,44 (д, 1=8,02 Гц, 0,5Н), 7,48 (д, 1=8,22 Гц, 0,5Н), 11,50 (шир.с, 1Н).
ВЭЖХ, условия проведения А, время удерживания: 1,92 мин, т//=588 (М+Н)+.
!Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 1,19-1,29 (м, 3Н), 2,38-2,46 (м, 2Н), 3,53-3,97 (м, 3Н), 4,06-4,20 (м, 1Н), 4,26-4,46 (м, 3Н), 5,05-5,14 (м, 2Н), 5,49-5,59 (м, 1Н), 5,61-5,73 (м, 1Н), 5,88-6,05 (м, 1Н), 6,076,18 (м, 1Н), 7,09-7,23 (м, 3Н), 7,30-7,40 (м, 7Н), 7,43-7,51 (м, 1Н), 11,51 (шир.с, 1Н).
- 12 022084
ВЭЖХ, условия проведения А, время удерживания: 2,00 мин, μ/ζ=568 (М+Н)+.
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-йб) δ м.д. 0,79-0,93 (м, 9Н), 1,20-1,32 (м, ЗН), 2,33-2,50 (м, 2Н), 3,63-3,70 (м, 1Н), 3,71-3,80 (м, 2Н), 3,80-3,93 (м, 2Н), 4,04-4,21 (м, 1Н), 4,23-4,46 (м, 3Н), 5,49-5,59 (м, 1Н), 5,585,72 (м, 1Н), 5,94-6,03 (м, 1Н), 6,02-6,14 (м, 1Н), 7,11-7,25 (м, 3Н), 7,32-7,39 (м, 2Н), 7,41-7,53 (м, 1Н), 11,51 (шир.с, 1Н).
ВЭЖХ, условия проведения А, время удерживания: 1,88 мин, ιη/ζ=554 (М+Н)+.
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6) δ м.д. 0,77-0,93 (м, 3Н), 1,14-1,25 (м, 3Н), 1,24-1,37 (м, 2Н), 1,41-1,62 (м, 2Н), 2,35-2,47 (м, 2Н), 3,63-3,92 (м, 3Н), 3,92-4,06 (м, 2Н), 4,05-4,21 (м, 1Н), 4,23-4,46 (м, 3Н), 5,485,59 (м, 1Н), 5,59-5,72 (м, 1Н), 5,89-6,15 (м, 2Н), 7,09-7,25 (м, 3Н), 7,31-7,41 (м, 2Н), 7,43-7,52 (м, 1Н), 11,51 (шир.с, 1Н).
ВЭЖХ, условия проведения А, время удерживания: 3,46 мин, ιη/ζ=644 (М+Н)+.
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6) δ м.д. 11,37-11,61 (1Н, м), 7,40-7,46 (1Н, м), 7,27-7,39 (5Н, м), 7,097,19 (2Н, м), 6,89-6,96 (1Н, м), 6,07-6,20 (1Н, м), 5,98-6,03 (1Н, м), 5,58-5,72 (1Н, м), 5,45-5,52 (1Н, м), 5,02-5,15 (2Н, м), 4,23-4,45 (3Н, м), 4,05-4,18 (1Н, м), 3,82-3,98 (2Н, м), 3,69-3,78 (1Н, м), 3,13-3,26 (1Н, м), 2,37-2,47 (2Н, м), 2,15-2,23 (3Н, м), 1,24-1,32 (3Н, м), 1,06-1,15 (6Н, м).
ВЭЖХ, условия проведения А, время удерживания: 2,08 и 2,21 мин (обнаруживали индивидуальные диастереомеры), ιη/ζ=540 (М+Н)+.
Ή-ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6) δ м.д. 11,39-11,60 (1Н, м), 7,44-7,52 (1Н, м), 7,31-7,40 (2Н, м), 7,127,24 (3Н, м), 5,95-6,07 (2Н, м), 5,59-5,71 (1Н, м), 5,51-5,58 (1Н, м), 4,78-4,91 (1Н, м), 4,26-4,44 (3Н, м), 4,06-4,20 (1Н, м), 3,84-3,95 (1Н, м), 3,68-3,83 (2Н, м), 2,37-2,58 (2Н, м), 1,16-1,25 (3Н, м), 1,11-1,16 (6Н, м).
- 13 022084
ВЭЖХ, условия проведения А, время удерживания: 3,03 мин, т//=650 (М+Н)+.
!Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-Н6) δ м.д. 11,34-11,62 (1Н, м), 7,05-7,46 (16Н, м), 6,71-6,84 (1Н, м), 5,956,03 (1Н, м), 5,56-5,71 (1Н, м), 5,46-5,53 (1Н, м), 4,95-5,16 (3Н, м), 4,23-4,45 (3Н, м), 4,05-4,21 (1Н, м), 3,77-3,88 (1Н, м), 3,68-3,77 (1Н, м), 2,35-2,45 (2Н, м).
ВЭЖХ, условия проведения А, время удерживания: 2,38 и 2,48 мин (обнаруживали индивидуальные диастереомеры), т//=554 (М+Н)+.
!Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 11,38-11,61 (1Н, м), 7,43-7,53 (1Н, м), 7,31-7,41 (2Н, м), 7,117,25 (3Н, м), 5,90-6,06 (2Н, м), 5,59-5,71 (1Н, м), 5,50-5,59 (1Н, м), 4,79-4,93 (1Н, м), 4,27-4,46 (3Н, м), 4,03-4,21 (1Н, м), 3,82-3,95 (1Н, м), 3,68-3,81 (1Н, м), 3,52-3,66 (1Н, м), 2,38-2,51 (2Н, м), 1,44-1,72 (2Н, м), 1,09-1,21 (6Н, м), 0,72-0,89 (3Н, м).
ВЭЖХ, условия проведения А, время удерживания: 2,84 и 2,94 мин (обнаруживали индивидуальные диастереомеры), т//=622 (М+Н)+.
!Н-ЯМР (400 МГц, СОСЕ) δ м.д. 1,38 (д, Л=8,59 Гц, 3Н), 2,38-2,57 (м, 1Н), 2,66-2,84 (м, 1Н), 3,25 (Вг, с, 1Н), 3,78 (Вг, с, 1Н), 3,81-3,94 (м, 1Н), 3,95-4,15 (м, 2Н), 4,23-4,42 (м, 1Н), 4,42-4,58 (м, 2Н), 4,60-4,72 (м, 1Н), 5,14 (с, 2Н), 5,68 (д, Л=8,00 Гц, 1Н), 6,07 (с, ОН), 7,01-7,19 (м, 2Н), 7,20-7,43 (м, 7Н), 8,76 (шир.с, 1Н).
ВЭЖХ, условия проведения А, время удерживания: 3,06 мин, т//=638 (М+Н)+.
!Н-ЯМР (400 МГц, СПС'Р) δ м.д. 1,23-1,41 (м, 2Н), 1,66 (шир.с, ОН), 1,93 (шир.с, 1Н), 2,37 (м,
1=12,56, 12,56, 8,63, 6,24 Гц, 1Н), 2,54-2,75 (м, 1Н), 3,44-3,67 (м, 1Н), 3,78 (дд, 1=9,27, 1,85 Гц, 1Н), 3,86- 14 022084
4,03 (м, ΙΗ), 4,05-4,17 (м, ΙΗ), 4,18-4,28 (м, ΙΗ), 4,31-4,41 (м, ΙΗ), 4,41-4,66 (м, ЗН), 4,96-5,16 (м, 2Н), 5,32 (д, 1=8,20 Гц, ОН), 5,44 (д, 1=8,20 Гц, ОН), 6,11 (с, 1Н), 7,08 (д, 1=8,19 Гц, ОН), 7,18-7,41 (м, 6Н), 7,44-7,57 (м, ЗН), 7,64 (д, 1=8,00 Гц, 1Н), 7,78-7,89 (м, 1Н), 8,01-8,18 (м, 1Н), 9,37 (шир.с, 1Н).
ВЭЖХ, условия проведения А, время удерживания: 2,48 и 2,59 мин (обнаруживали индивидуальные диастереомеры), т//=554 (М+Н)+.
Ή-ЯМР (400 МГц, С1ХГ) δ м.д. 0,92 (д, 1=5,46 Гц, 5Н), 1,28-1,45 (м, 2Н), 1,48-2,02 (м, 2Н), 2,382,56 (м, 1Н), 2,64-2,87 (м, 1Н), 3,67-4,17 (м, 5Н), 4,28-4,58 (м, 2Н), 4,66 (шир.с, 1Н), 5,60-5,70 (м, Н), 6,19 (с, 1Н), 7,10-7,49 (м, 6Н), 8,56 (шир.с, 1Н).
ВЭЖХ, условия проведения А, время удерживания: 2,61 мин, т//=608 (М+Н)+.
Ή-ЯМР (400 МГц, СИСЬ) δ м.д. 2,40-2,56 (м, 1Н), 2,67-2,82 (м, 1Н), 3,29 (шир.с, 1Н), 3,71-3,97 (м, 4Н), 3,97-4,10 (м, 1Н), 4,32-4,44 (м, 1Н), 4,45-4,59 (м, 2Н), 4,61-4,70 (м, 1Н), 5,16 (с, 2Н), 5,68 (д, 1=7,80 Гц, 1Н), 6,10 (д, 1=6,44 Гц, 1Н), 7,10-7,19 (м, 2Н), 7,24-7,30 (м, 3Н), 7,30-7,42 (м, 5Н), 8,82 (шир.с, 1Н).
Биологические примеры
Проведение исследования репликона.
Соединения формулы (I) проверяли на наличие активности при ингибировании репликации РНК НСУ в биологических испытаниях на клетках. Испытания использовали для демонстрации того, что соединения формулы (I) ингибируют клеточную репликацию для содержащей НСУ клеточной линии, также известной как НСУ репликоны. Испытания на клетках основывались на экспрессии гена в составе бицистронной конструкции, как описано в работе Ьойшаии е! а1. (1999), §аеисе νοί. 285 рр. 110-113, с использованием модификаций, описанных в работе Кпсдсг е! а1. (2001), 1оита1 о£ У1го1оду 75: 4614-4624, при стратегии многоцелевого скрининга.
По сути дела, способ заключался в следующем. При биологических испытаниях использовали устойчиво трансфецированную клеточную линию Ний-7 1ис/иео (далее в этом документе обозначаемую как Ний-Ьис). Эта клеточная линия содержит кодирующую РНК экспрессируемую бицистронную конструкцию, включающую Νδ3-Νδ5Β фрагменты дикого типа немутантного НСУ типа 1Ь. полученные при трансляции на участке внутренней посадки рибосомы (ΙΚΕδ) из вируса энцефаломиокардита (ЕМСУ), находящиеся перед участком репортерного гена (ΡίΓ-люциферазы), и участок гена селектируемого маркера (пеок, неомицинфосфотрансферазы). На ограничивающих конструкцию 5'- и 3'-концах содержатся ΝΤΚ (нетранслируемые участки) генома НСУ генотипа 1Ь. Функционирующая культура клеток, содержащих репликон, в присутствии 0418 (пеок) зависит от процесса репликации РНК вируса НСУ. Устойчиво трансфецированные репликоном клетки, в которых экспрессируется НСУ РНК, имеющая высокий уровень автономной репликации, кодирующая, помимо всего прочего, люциферазу, применяли для скрининга антивирусных свойств соединений.
Содержащие репликон клетки высевали в 384-луночные планшеты в присутствии тестируемых и контрольных соединений, которые добавляли в различных концентрациях. Далее проводили инкубацию в течение трех дней, НСУ репликацию определяли с помощью измерения активности люциферазы (используя стандартные субстраты и реагенты для анализа люциферазы, и микропланшетную установку для визуализации Регкш Е1шег У1етеЬих™ иЙгаНТ§). Содержащие репликон клетки в контрольных культурах имели высокий уровень экспрессии гена люциферазы в отсутствии какого-либо ингибитора. Ингибитор- 15 022084 ную активность соединения в отношении активности люциферазы контролировали на клетках НиЬ-Ьис, обеспечивая возможность построения графической зависимости доза - характеристика получаемой активности для каждого тестируемого соединения. Величины ЕС50 рассчитывали, эти величины представляют собой количество соединения, требуемое для снижения уровня определяемой люциферазной активности на 50%, или, более конкретно, представляют способность генетически связанного с НСУ репликона РНК к репликации.
Результаты.
Таблица показывает результаты анализа репликона (ЕС50/ репликон) и результаты анализа цитотоксичности (СС50 (мкМ) (НиН-7)), полученные для соединений вышеприведенных примеров. Кроме того, указана Н1У активность (ЕС50 Н1У (мкМ)) и клеточная токсичность для Н1У клеточной линии (СС50 (мкМ) (МТ-4)).
Номер соединения ЕС5о (мкМ) НОТ СС5о {мкМ) (НиЬ-7) ЕС50 (мкМ) Ηΐν СС50 (мкМ) (МТ-4)
12а 3,4 >98 >98 >98
12Ь 3,7 >98 >98 >98
12с 5,6 >98 >98 >93
12ά 5,5 >98 >98 >98
12е 23,4 >98 >98 >98
12£ 8,7 18,7 >98 1,3
12д 17,8 >98 >98 >98
12Н 79,64 >88 >98 >98
121 >96 >98 >98 >98
123 0,7 >98 >98 >98
12к 2,0 >98 >76,8 >98
121 0,44 >98 >98 >98
12т 7,17 >98 >98 >98
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

Claims (10)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Соединение формулы (I) включая его любые возможные стереоизомеры, где К4 представляет собой монофосфатную, дифосфатную или трифосфатную сложноэфирную группу или К4 представляет собой группу формулы к® ?*7 'ίο
    К7 представляет собой фенил, необязательно замещенный 1 или 2 заместителями, каждый из которых, независимо друг от друга, выбирают из галогена или С1-С6-алкила, или К7 представляет собой нафтил;
    К8 представляет собой водород или С1-С6-алкил;
    К8 представляет собой водород или С1-С6-алкил или один из К8 и К8 принимает также значение фенил;
    К9 представляет собой С1-С6-алкил или бензил, или его фармацевтически приемлемая соль или сольват.
  2. 2. Соединение по п.1, где К4 представляет собой группу формулы
    В9 γ' -Ν'
  3. 3. Соединение по любому из пп.1, 2, где К7 представляет собой фенил, необязательно замещенный галогеном или одной или двумя С1-С6-алкильными группами, или К7 представляет собой нафтил.
    - 16 022084
  4. 4. Соединение по любому из пп.1, 2, где Ρ7 представляет собой фенил или нафтил.
  5. 5. Соединение по любому из пп.1-4, где Ρ8 представляет собой водород и Ρ8 представляет собой водород или С1-С6-алкил.
  6. 6. Соединение по любому из пп.1-5, где Ρ8 представляет собой водород и Ρ8 представляет собой метил или этил.
  7. 7. Соединение по любому из пп.1-6, где Ρ9 представляет собой н-бутил или бензил.
  8. 8. Соединение по п.1, где соединение формулы (I) представляет собой:
  9. 9. Фармацевтическая композиция, содержащая противовирусно эффективное количество соединения формулы (I) по любому из пп.1-8 и фармацевтически приемлемый носитель.
  10. 10. Применение соединения по любому из пп.1-8 в качестве ингибитора вируса НСУ.
EA201171406A 2009-05-14 2010-05-11 Спирооксетановые производные урацилсодержащих нуклеозидов EA022084B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP09160215 2009-05-14
PCT/EP2010/056438 WO2010130726A1 (en) 2009-05-14 2010-05-11 Uracyl spirooxetane nucleosides

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201171406A1 EA201171406A1 (ru) 2012-05-30
EA022084B1 true EA022084B1 (ru) 2015-10-30

Family

ID=40823307

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201171406A EA022084B1 (ru) 2009-05-14 2010-05-11 Спирооксетановые производные урацилсодержащих нуклеозидов

Country Status (39)

Country Link
US (2) US8481510B2 (ru)
EP (2) EP2511282B1 (ru)
JP (2) JP5778135B2 (ru)
KR (1) KR101806837B1 (ru)
CN (1) CN102439024B (ru)
AP (1) AP2783A (ru)
AR (1) AR076579A1 (ru)
AU (1) AU2010247439B2 (ru)
BR (1) BRPI1010579A2 (ru)
CA (1) CA2760329C (ru)
CL (1) CL2011002859A1 (ru)
CO (1) CO6440533A2 (ru)
CR (1) CR20120297A (ru)
CY (2) CY1114081T1 (ru)
DK (2) DK2511282T3 (ru)
EA (1) EA022084B1 (ru)
EC (1) ECSP11011461A (ru)
ES (2) ES2411086T3 (ru)
HK (1) HK1166326A1 (ru)
HN (1) HN2011003014A (ru)
HR (2) HRP20130554T1 (ru)
IL (1) IL215955A (ru)
JO (1) JO3027B1 (ru)
ME (1) ME01478B (ru)
MX (1) MX2011012027A (ru)
MY (1) MY157018A (ru)
NI (1) NI201100197A (ru)
NZ (1) NZ596073A (ru)
PL (2) PL2430035T3 (ru)
PT (2) PT2430035E (ru)
RS (1) RS52822B (ru)
SG (1) SG175981A1 (ru)
SI (2) SI2430035T1 (ru)
SM (2) SMT201300078B (ru)
TW (1) TWI461432B (ru)
UA (1) UA105790C2 (ru)
UY (1) UY32642A (ru)
WO (1) WO2010130726A1 (ru)
ZA (1) ZA201108309B (ru)

Families Citing this family (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8173621B2 (en) 2008-06-11 2012-05-08 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside cyclicphosphates
EP2376515A1 (en) 2008-12-23 2011-10-19 Pharmasset, Inc. Synthesis of purine nucleosides
JO3027B1 (ar) 2009-05-14 2016-09-05 Janssen Products Lp نيوكليوسيدات يوراسيل سبيرواوكسيتان
DK2638054T3 (en) * 2010-11-10 2015-03-09 Janssen Products Lp URACYLSPIROOXETANNUCLEOSIDE PHOSPHORAMIDATES
US9006209B2 (en) 2010-11-10 2015-04-14 Janssen Products, Lp Uracyl spirooxetane nucleoside phosphoramidates
JP6069215B2 (ja) * 2010-11-30 2017-02-01 ギリアド ファーマセット エルエルシー 化合物
AU2015252113B2 (en) * 2010-11-30 2017-05-04 Gilead Pharmasset Llc Compounds
US8877733B2 (en) * 2011-04-13 2014-11-04 Gilead Sciences, Inc. 1′-substituted pyrimidine N-nucleoside analogs for antiviral treatment
US8980865B2 (en) 2011-12-22 2015-03-17 Alios Biopharma, Inc. Substituted nucleotide analogs
JP6140815B2 (ja) * 2012-05-25 2017-05-31 ヤンセン・サイエンシズ・アイルランド・ユーシー ウラシルスピロオキセタンヌクレオシド
RU2621709C2 (ru) 2013-03-08 2017-06-07 Наньцзин Саньхоме Фармасьютикал Ко., Лтд. Новое фосфорамидатное производное нуклеозида и его применение
WO2014169278A1 (en) 2013-04-12 2014-10-16 Achillion Pharmaceuticals, Inc. Highly active nucleoside derivative for the treatment of hcv
CN104231023B (zh) * 2013-06-06 2019-02-05 南京汇诚制药有限公司 三环稠杂环类核苷氨基磷酸酯化合物、其制备方法及应用
KR20160090798A (ko) * 2013-11-28 2016-08-01 얀센 사이언시즈 아일랜드 유씨 Hcv의 뉴클레오시드 저해제의 결정 형태
NZ773652A (en) 2015-03-06 2024-08-30 Atea Pharmaceuticals Inc Β-d-2’-deoxy-2’-α-fluoro-2’-β-c-substituted-2-modified-n6-substituted purine nucleotides for hcv treatment
LU100724B1 (en) 2016-07-14 2018-07-31 Atea Pharmaceuticals Inc Beta-d-2'-deoxy-2'-alpha-fluoro-2'-beta-c-substituted-4'-fluoro-n6-substituted-6-amino-2-substituted purine nucleotides for the treatment of hepatitis c virus infection
SI3512863T1 (sl) 2016-09-07 2022-04-29 Atea Pharmaceuticals, Inc. 2'-substituirani-N6-substituirani purinski nukleotidi za zdravljenje virusa RNA
US10519186B2 (en) 2017-02-01 2019-12-31 Atea Pharmaceuticals, Inc. Nucleotide hemi-sulfate salt for the treatment of hepatitis C virus
EP4335496A2 (en) 2018-01-10 2024-03-13 Nucorion Pharmaceuticals, Inc. Phosphor(n)amidatacetal and phosph(on)atalcetal compounds
CN112351799A (zh) 2018-04-10 2021-02-09 阿堤亚制药公司 具有硬化的hcv感染患者的治疗
MX2022000573A (es) 2019-07-17 2022-02-10 Nucorion Pharmaceuticals Inc Compuestos ciclicos de desoxirribonucleotido.
US10874687B1 (en) 2020-02-27 2020-12-29 Atea Pharmaceuticals, Inc. Highly active compounds against COVID-19
US20230201236A1 (en) * 2020-04-14 2023-06-29 Janssen Pharmaceuticals, Inc. Spirocyclic nucleoside analogues for the treatment of hepatitis e

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006012078A2 (en) * 2004-06-24 2006-02-02 Merck & Co., Inc. Nucleoside aryl phosphoramidates for the treatment of rna-dependent rna viral infection
WO2007020193A2 (en) * 2005-08-15 2007-02-22 F. Hoffmann-La Roche Ag Antiviral phosphoramidates of 4 ' -substituted pronucleotides
WO2007095269A2 (en) * 2006-02-14 2007-08-23 Merck & Co., Inc. Nucleoside aryl phosphoramidates for the treatment of rna-dependent rna viral infection

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1355916B1 (en) * 2001-01-22 2007-01-10 Merck & Co., Inc. Nucleoside derivatives as inhibitors of rna-dependent rna viral polymerase
PA8852101A1 (es) * 2008-12-08 2010-07-27 Medivir Ab Nucleótidos uracil ciclopropílicos
JO3027B1 (ar) * 2009-05-14 2016-09-05 Janssen Products Lp نيوكليوسيدات يوراسيل سبيرواوكسيتان

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006012078A2 (en) * 2004-06-24 2006-02-02 Merck & Co., Inc. Nucleoside aryl phosphoramidates for the treatment of rna-dependent rna viral infection
WO2007020193A2 (en) * 2005-08-15 2007-02-22 F. Hoffmann-La Roche Ag Antiviral phosphoramidates of 4 ' -substituted pronucleotides
WO2007095269A2 (en) * 2006-02-14 2007-08-23 Merck & Co., Inc. Nucleoside aryl phosphoramidates for the treatment of rna-dependent rna viral infection

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
BABU, B. RAVINDRA ET AL.: "2'-Spiro ribo- and arabinonucleosides: synthesis, molecular modelling and incorporation into oligodeoxynucleotides", ORGANIC & BIOMOLECULAR CHEMISTRY, 1(20), 3514-3526 CODEN: OBCRAK; ISSN: 1477-0520, 2003, XP002536360, cited in the application *

Also Published As

Publication number Publication date
ES2411086T3 (es) 2013-07-04
KR20120018355A (ko) 2012-03-02
TW201100442A (en) 2011-01-01
TWI461432B (zh) 2014-11-21
ECSP11011461A (es) 2012-02-29
CY1114081T1 (el) 2016-07-27
AU2010247439B2 (en) 2014-09-25
EP2511282A1 (en) 2012-10-17
CY1115383T1 (el) 2017-01-04
CO6440533A2 (es) 2012-05-15
ES2477598T3 (es) 2014-07-17
US20130217648A1 (en) 2013-08-22
JP2012526764A (ja) 2012-11-01
AR076579A1 (es) 2011-06-22
NZ596073A (en) 2013-02-22
DK2430035T3 (da) 2013-05-27
RS52822B (en) 2013-10-31
EP2511282B1 (en) 2014-04-02
PT2430035E (pt) 2013-05-22
CN102439024A (zh) 2012-05-02
US20120065156A1 (en) 2012-03-15
AU2010247439A1 (en) 2011-12-01
US8481510B2 (en) 2013-07-09
ME01478B (me) 2014-04-20
SI2511282T1 (sl) 2014-09-30
AP2011005958A0 (en) 2011-10-31
EP2430035B1 (en) 2013-04-03
SG175981A1 (en) 2011-12-29
JP5778135B2 (ja) 2015-09-16
SMT201300078B (it) 2013-09-06
DK2511282T3 (da) 2014-07-07
EA201171406A1 (ru) 2012-05-30
EP2430035A1 (en) 2012-03-21
UA105790C2 (ru) 2014-06-25
HRP20130554T1 (en) 2013-07-31
JP2015180692A (ja) 2015-10-15
PL2430035T3 (pl) 2013-08-30
MY157018A (en) 2016-04-15
HRP20140605T1 (hr) 2014-09-26
IL215955A (en) 2015-03-31
MX2011012027A (es) 2012-02-28
HN2011003014A (es) 2014-06-30
CA2760329C (en) 2017-10-31
SI2430035T1 (sl) 2013-08-30
BRPI1010579A2 (pt) 2016-03-15
CN102439024B (zh) 2014-09-17
ZA201108309B (en) 2013-04-24
WO2010130726A1 (en) 2010-11-18
IL215955A0 (en) 2012-01-31
CR20120297A (es) 2012-10-25
JO3027B1 (ar) 2016-09-05
US8933052B2 (en) 2015-01-13
PL2511282T3 (pl) 2014-09-30
CA2760329A1 (en) 2010-11-18
KR101806837B1 (ko) 2017-12-08
AP2783A (en) 2013-10-31
CL2011002859A1 (es) 2012-07-20
SMT201400085B (it) 2014-09-08
HK1166326A1 (en) 2012-10-26
PT2511282E (pt) 2014-07-11
NI201100197A (es) 2012-05-28
UY32642A (es) 2010-11-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA022084B1 (ru) Спирооксетановые производные урацилсодержащих нуклеозидов
RU2553656C2 (ru) Фосфорамидатные производные нуклеозидов
US9012428B2 (en) Uracyl spirooxetane nucleoside phosphoramidates
EP2638053B1 (en) Uracyl spirooxetane nucleoside phosphoramidates
JP5624029B2 (ja) シクロプロピルポリメラーゼ阻害剤
EA027929B1 (ru) Нуклеозиды на основе урацила и спирооксетана
KR20110104000A (ko) 우라실 사이클로프로필 뉴클레오티드
EP2166016A1 (en) Phosphoramidate Derivatives of Nucleosides

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM