DE69711845T2

DE69711845T2 - Neue tricyclische verbindungen mit ice/ced-3 protease familie-hemmenden eigenschaften

Info

Publication number: DE69711845T2
Application number: DE69711845T
Authority: DE
Inventors: S. Karanewsky; D. Linton
Original assignee: Idun Pharmaceuticals Inc
Current assignee: Idun Pharmaceuticals Inc
Priority date: 1996-09-12
Filing date: 1997-09-12
Publication date: 2002-10-31
Anticipated expiration: 2017-09-13
Also published as: AU739496B2; EP0874850A1; NZ330451A; EP0874850B1; WO1998011109A1; CA2237314A1; DE69711845D1; JP2000501428A; ATE215953T1; AU4583597A

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft neue Klassen von Verbindungen, die Inhibitoren von Interleukin-1β-umwandelndem Enzym und verwandten Proteasen sind ("ICE/ced-3-Familie von Cystein-Proteasen"). Diese Erfindung betrifft auch pharmazeutische Zusammensetzungen, die diese Verbindungen umfassen, und Verfahren zur Verwendung solcher pharmazeutischen Zusammensetzungen. Die Verbindungen, pharmazeutischen Zusammensetzungen und Verfahren dieser Erfindung sind besonders gut geeignet zum Inhibieren der Proteaseaktivität der ICE/ced-3-Familie und können folglich vorteilhafterweise als Mittel gegen durch Interleukin-1 ("IL-1") vermittelte Erkrankungen verwendet werden, einschließlich entzündlichen Erkrankungen, Autoimmunerkrankungen und neurodegenerativen Erkrankungen, und zum Inhibieren unerwünschter Apoptose in verschiedenen Erkrankungsstadien, wie etwa ischämische Verletzung des Herzens (z. B. Myokardinfarkt), des Gehirns (z. B. Schlaganfall) und der Niere (z. B. ischämische Nierenerkrankung).
Interleukin 1 ("IL-1") ist ein wichtiges entzündungsförderndes und immunregulatorisches Protein, das Fibroblastendifferenzierung und -proliferation, die Produktion von Prostaglandinen, Collagenase und Phospholipase durch Synovialzellen und Chondrozyten, Basophilen- und Eosinophilendegranulierung und Neutrophilenaktivierung stimuliert. Oppenheim, J.H. et al., Immunology Today, 7: 45-56 (1986). Als solches ist es in der Pathogenese von chronischen und akuten entzündlichen und Autoimmunerkrankungen involviert. IL-1 wird überwiegend durch Monozyten des peripheren Blutes als Teil der Entzündungsreaktion produziert. Mosley, B.S. etal., Proc. Nat. Acad. Sci., 84: 4572-4576 (1987); Lonnemann, G. et al., Eur. J. Immunol., 19: 1531-1536 (1989).
IL-1β wird als ein biologisch inaktiver Vorläufer, proIL-1β, synthetisiert. ProIL-1β wird durch eine Cystein-Protease, die als Interleukin-1β-umwandelndes Enzym ("ICE") bezeichnet wird, zwischen Asp-116 und Ala-117 gespalten, um das biologisch aktive C-terminale Fragment zu produzieren, das in Humanserum und Synovialflüssigkeit angetroffen wird. Sleath, P.R. et al., J. Biol. Chem., 265: 1426-14528 (1992); A.D. Howard et al., J. Immunol., 147: 2964-2969 (1991).
ICE ist eine Cystein-Protease, die primär in Monozyten lokalisiert ist. Zusätzlich zur Begünstigung der entzündungsfördernden und immunregulatorischen Eigenschaften von IL-1β scheint ICE, und insbesondere seine homologe, auch bei der Regulierung des Zelltodes oder Apoptose involviert zu sein. Yuan, J. et al., Cell, 75: 641-652 (1993); Miura, M. et al., Cell, 75: 653-60 (1993); Nett-Giordalisi, M.A. et al., J. Cell Biochem., 17B: 117 (1993). Insbesondere glaubt man, daß ICE oder ICE/ced-3-Homologe mit der Regulierung der Apoptose bei neudegenerativen Erkrankungen, wie etwa Alzheimer- und Parkinson- Krankheit, assoziiert sind. Marx, J. und M. Baringa, Science, 29: 760-762 (1993); Gagliardini, V. et al., Science, 263: 826-828 (1994).
Somit können Erkrankungszustände, in denen Inhibitoren der ICE/ced-3-Familie von Cystein- Proteasen als therapeutische Mittel nützlich sein können, einschließen: infektiöse Erkrankungen, wie etwa Meningitis und Salpingitis; septischer Schock, Atemwegserkrankungen; Entzündungszustände, wie etwa Arthritis, Cholangitis, Colitis, Encephalitis, Endocerolitis, Hepatitis, Pancreatitis urd Reperfusionsverletzung, ischämische Erkrankungen wie etwa Myokardinfarkt, Schlaganfall und ischämische Nierenerkrankung; Immunerkrankungen, wie etwa Überempfindlichkeit; Autoimmunerkrankungen, wie etwa Multiple Sklerose; Knochenerkrankungen; und bestimmte neurodegenerative Erkrankungen, wie Alzheimer- und Parkinson-Krankheit.
ICE-Inhibitoren stellen eine Klasse von Verbindungen dar, die für die Kontrolle der oben aufgelisteten Erkrankungszustände nützlich sind. Peptid- und Peptidyl-Inhibitoren von ICE sind beschrieben worden. Solche Inhibitoren sind jedoch typischerweise gekennzeichnet gewesen durch unerwünschte pharmakologische Eigenschaften, wie etwa schlechte orale Absorption, schlechte Stabilität und schnellen Metabolismus. Plattner, J.J. und D.W. Norbeck, in Drug Discovery Technologies, C.R. Clark und W.H. Moos, Eds. (Ellis Horwood, Chichester, England, 1990), S. 92-126. Diese unerwünschten Eigenschaften haben ihre Entwicklung zu wirksamen Arzneimitteln verhindert.
Demgemäß besteht das Bedürfnis nach Verbindungen, die die Wirkung der ICE/ced-3- Familie von Proteasen wirkungsvoll inhibieren können, zur Verwendung als Mittel zur Verhinderung unerwünschter Apoptose und zur Behandlung chronischer und akuter Formen von durch IL-1 vermittelten Erkrankungen, wie etwa entzündlichen, Autoimmun- und neurodegenerativen Erkrankungen.
Die Verbindungen dieser Erfindung umfassen ein konformationell beschränktes Dipeptid- Mimetikum. Dieses Mimetikum zeigt verbesserte Eigenschaften relativ zu seinen Peptid- Gegenstücken, wie etwa z. B. verbesserte Absorption und metabolische Stabilität, was zu erhöhter Bioverfügbarkeit führt.

ZUSAMMENFASSUNG DER ERFINDUNG

Ein Aspekt dieser Erfindung sind Verbindungen der Formel: FORMEL 1
worin:
n 1 oder 2 ist;
m 1 oder 2 ist;
A R²CO-, R³-O-CO- oder R&sup4;SO&sub2;- ist;
eine Gruppe der Formel:
wobei außerdem
R¹ ein Wasserstoffatom, Alkyl oder Phenylalhyl ist;
R² Alkyl, Cycloalkyl, (Cycloalkyl)alkyl, Phenyl, Phenylalkyl, substituiertes Phenyl, (substituiertes Phenyl)alkyl, Heteroaryl oder (Heteroaryl)alkyl ist;
R³ Alkyl, Cycloalkyl, (Cycloalkyl)alkyl, Phenylalkyl oder (substituiertes Phenyl)alkyl ist;
R&sup4; Alkyl, Cycloalkyl, (Cycloalkyl)alkyl, Phenyl, Phenylalkyl, substituiertes Phenyl, (substituiertes Phenyl)alkyl, Heteroaryl oder (Heteroaryl)alkyl ist;
R&sup5; Alkyl, Cycloalkyl, (Cycloalkyl)alkyl, Phenyl, Phenylalkyl, substituiertes Phenyl, (substituiertes Phenyl)alkyl, Heteroaryl oder (Heteroaryl)alkyl ist;
R&sup6; Alkyl, Cycloalkyl, (Cycloalkyl)alkyl, Phenylalkyl oder (substituiertes Phenyl)alkyl ist;
R&sup7; Alkyl, Cycloalkyl, (Cycloalkyl)alkyl, Phenyl, Phenylalkyl, substituiertes Phenyl, (substituiertes Phenyl)alkyl, Heteroaryl oder (Heteroaryl)alkyl ist;
R&sup8; eine Aminosäure-Seitenkette ist, ausgewählt aus der Gruppe, die aus natürlichen oder nicht-natürlichen Aminosäuren besteht;
B ein Wasserstoffatom, ein Deuteriumatom, Alkyl, Cycloalkyl, (Cycloalkyl)alkyl, Phenyl, Phenylalkyl, substituiertes Phenyl, (substituiertes Phenyl)alkyl, Heteroaryl, (Heteroaryl)alkyl oder eine Halomethyl-Gruppe ist;
eine Gruppe der Formel:
-CH&sub2;XR&sup9;;
worin R&sup9; Phenyl, substituiertes Phenyl, Phenylalkyl, (substituiertes Phenyl)alkyl, Heteroaryl oder (Heteroaryl)alkyl ist; und X ein Sauerstoff oder ein Schwefelatom ist;
eine Gruppe der Formel:
-CH&sub2;-O-CO-(Aryl);
eine Gruppe der Formel:
-CH&sub2;-O-CO-(Heteroaryl);
eine Gruppe der Formel:
-CH&sub2;-O-PO-(R¹&sup0;)R¹¹;
worin R¹&sup0; und R¹¹ unabhängig ausgewählt sind aus einer Gruppe, die aus Alkyl, Cycloalkyl, Phenyl, substituiertem Phenyl, Phenylalkyl und (substituiertes Phenyl)- alkyl besteht;
oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz derselben.
Ein weiterer Aspekt der vorliegenden Erfindung sind pharmazeutische Zusammensetzungen, die eine Verbindung der obigen Formel 1 und einen pharmazeutisch annehmbaren Trägerstoff dafür umfassen.
Ein weiterer Aspekt dieser Erfindung umfaßt ein Verfahren zur Behandlung einer Autoimmunerkrankung, welches das Verabreichen einer wirksamen Menge einer pharmazeutischen Zusammensetzung, die oben diskutiert ist, an einen Patienten umfaßt, der einer solchen Behandlung bedarf.
Noch ein weiterer Aspekt der vorliegenden Erfindung ist ein Verfahren zur Behandlung einer entzündlichen Erkrankung, welches das Verabreichen einer wirksamen Menge einer pharmazeutischen Zusammensetzung, die oben diskutiert ist, an einen Patienten umfaßt, der einer solchen Behandlung bedarf.
Ein weiterer Aspekt der vorliegenden Erfindung ist ein Verfahren zur Behandlung einer neurodegenerativen Erkrankung, welches das Verabreichen einer pharmazeutisch wirksamen Menge einer pharmazeutischen Zusammensetzung, die oben diskutiert ist, an einem Patienten umfaßt, der einer solchen Behandlung bedarf.
Noch ein weiterer Aspekt der vorliegenden Erfindung ist ein Verfahren zur Verhinderung einer ischämischen Verletzung bei einem Patienten, der an einer Erkrankung leidet, die mit ischämischer Verletzung zusammenhängt, welches das Verabreichen einer wirksamen Menge einer pharmazeutischen Zusammensetzung, die oben diskutiert ist, an einen Patienten umfaßt, der einer solchen Behandlung bedarf.

DETAILLIERTE BESCHREIBUNG

Ein Aspekt der vorliegenden Erfindung sind Verbindungen der Formel 1: FORMEL 1
worin:
n 1 oder 2 ist;
m 1 oder 2 ist;
A R²CO-, R³-O-CO- oder R&sup4;SO&sub2;- ist;
eine Gruppe der Formel:
wobei außerdem
R¹ ein Wasserstoffatom, Alkyl oder Phenylalkyl ist;
R² Alkyl, Cycloalkyl, (Cycloalkyl)alkyl, Phenyl, Phenylalkyl, substituiertes Phenyl, (substituiertes Phenyl)alkyl, Heteroaryl oder (Heteroaryl)alkyl ist;
R³ Alkyl, Cycloalkyl, (Cycloalkyl)alkyl, Phenylalkyl oder (substituiertes Phenyl)alkyl ist;
R&sup4; Alkyl, Cycloalkyl, (Cycloalkyl)alkyl, Phenyl, Phenylalkyl, substituiertes Phenyl, (substituiertes Phenyl)alkyl, Heteroaryl oder (Heteroaryl)alkyl ist;
R&sup5; Alkyl, Cycloalkyl, (Cycloalkyl)alkyl, Phenyl, Phenylalkyl, substituiertes Phenyl, (substituiertes Phenyl)alkyl, Heteroaryl oder (Heteroaryl)alkyl ist;
R&sup6; Alkyl, Cycloalkyl, (Cycloalkyl)alkyl, Phenylalkyl oder (substituiertes Phenyl)alkyl ist;
R&sup7; Alkyl, Cycloalkyl, (Cycloalkyl)alkyl, Phenyl, Phenylalkyl, substituiertes Phenyl. (substituiertes Phenyl)alkyl, Heteroaryl oder (Heteroaryl)alkyl ist;
R&sup8; eine Aminosäure-Seitenkette ist, ausgewählt aus der Gruppe, die aus natürlichen oder nicht-natürlichen Aminosäuren besteht;
B ein Wasserstoffatom, ein Deuteriumatom, Alkyl, Cycloalkyl, (Cycloalkyl)alkyl, Phenyl, Phenylalkyl, substituiertes Phenyl, (substituiertes Phenyl)alkyl, Heteroaryl, (Heteroaryl)alkyl oder Halomethyl ist;
eine Gruppe der Formel:
-CH&sub2;XR&sup9;;
worin R&sup9; Phenyl, substituiertes Phenylalkyl, Phenyl, (substituiertes Phenyl)alkyl, Heteroaryl oder (Heteroaryl)alkyl ist; und X ein Sauerstoff oder ein Schwefelatom ist;
eine Gruppe der Formel:
-CH&sub2;-O-CO-(Aryl);
eine Gruppe der Formel:
-CH&sub2;-O-CO-(Heteroaryl);
eine Gruppe der Formel:
-CH&sub2;-O-PO-(R¹&sup0;)R¹¹;
worin R¹&sup0; und R¹¹ unabhängig ausgewählt sind aus einer Gruppe, die aus Alkyl, Cycloalkyl, Phenyl, substituiertem Phenyl, Phenylalkyl und (substituiertes Phenyl)- alkyl besteht;
oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz derselben.
Wie in der obigen Formel verwendet, bedeutet der Ausdruck "Alkyl", substituiert oder unsubstituiert, eine geradkettige oder verzweigte C&sub1;- bis C&sub8;-Kohlenstoffkette, wie etwa Methyl, Ethyl, tert.-Butyl, Isopropyl, n-Octyl und dergleichen. Geeignete Substituenten schließen Carboxy, geschütztes Carboxy, Amino, geschütztes Amino, Halo, Hydroxy, geschütztes Hydroxy, Nitro, Cyano, monosubstituiertes Amino, geschütztes monosubstituiertes Amino, disubstituiertes Amino, C&sub1;- bis C&sub7;-Alkoxy, C&sub1;- bis C&sub7;-Acyl, C&sub1;- bis C&sub7;-Acyloxy und dergleichen ein.
Der Ausdruck "Cycloalkyl" bedeutet einen mono-, bi- oder tricyclischen gesättigten Ring, der vollständig gesättigt oder teilweise ungesättigt ist. Beispiele für eine solche Gruppe schließen Cyclopropyl, Cyclobutyl, Cyclopentyl, Cyclohexyl, Cycloheptyl, Adamantyl, Cyclooctyl, cis- oder trans-Decalin, Bicyclo[2.2.1]hept-2-en, Cyclohex-1-enyl, Cyclopent-1-enyl, 1,4- Cyclooctadienyl und dergleichen ein.
Der Ausdruck "(Cycloalkyl)alkyl" bedeutet die oben: definierte Alkylgruppe, substituiert mit einem der obigen Cycloalkyl-Ringe. Beispiele für eine solche Gruppe schließen (Cyclohexyl)methyl, 3-(Cyclopropyl)-n-propyl, 5-(Cyclopentyl)hexyl, 6-(Adamantyl)hexyl und dergleichen ein.
Der Ausdruck "substituiertes Phenyl" spezifiziert eine Phenylgruppe, die mit einer oder mehreren, und vorzugsweise einer oder zwei, Einheiten substituiert ist, die ausgewählt sind aus den Gruppen, die aus Halogen, Hydroxy, geschütztem Hydroxy, Cyano, Nitro, Trifluormethyl, C&sub1;- bis C&sub7;-Alkyl, C&sub1;- bis C&sub7;-Alkoxy, C&sub1;- bis C&sub7;-Acyl, C&sub1;- bis C&sub7;-Acyloxy, Carboxy, geschütztem Carboxy, Carboxymethyl, geschütztem Carboxymethyl, Hydroxymethyl, geschütztem Hydroxymethyl, Amino, geschütztem Amino, monosubstituiertem Amino, geschütztem monosubstituiertem Amino, disubstituiertem Amino, Carboxamid, geschütztem Carboxamid, N-(C&sub1;- bis C&sub6;-Alkyl)carboxamid, geschütztem N-(C&sub1;- bis C&sub6;-Alkyl)carboxamid, N,N-Di(C&sub1;- bis C&sub6;-alkyl)carboxamid, Trifluormethyl, N-((C&sub1;- bis C&sub6;-Alkyl)sulfonyl)amino, N-(Phenylsulfonyl)amino oder Phenyl, substituiert oder unsubstituiert bestehen, so daß z. B. eine Biphenyl- oder Naphthyl-Gruppe resultiert.
Beispiele für den Ausdruck "substituiertes Phenyl" schließen eine Mono- oder Di(halo)phenyl-Gruppe, wie etwa 2-, 3- oder 4-Chlorphenyl, 2,6-Dichlorphenyl, 2,5- Dichlorphenyl, 3,4-Dichlorphenyl, 2-, 3- oder 4-Bromphenyl, 3,4-Dibromphenyl, 3-Chlor-4- fluorphenyl, 2-, 3- oder 4-Fluorphenyl und dergleichen; eine Mono- oder Di(hydroxy)phenyl- Gruppe, wie etwa 2-, 3- oder 4-Hydroxyphenyl, 2,4-Dihydroxyphenyl, die Derivate derselben mit geschütztem Hydroxy und dergleichen; eine Nitrophenyl-Gruppe, wie etwa 2-, 3- oder 4- Nitrophenyl; eine Cyanophenyl-Gruppe, z. B. 2-, 3- oder 4-Cyanophenyl; eine Mono- oder Di(alkyl)phenyl-Gruppe, wie etwa 2-, 3- oder 4-Methylphenyl, 2,4-Dimethylphenyl, 2-, 3- oder 4-(Isopropyl)phenyl, 2-, 3- oder 4-Ethylphenyl, 2-, 3- oder 4-(n-Propyl)phenyl und dergleichen; eine Mono- oder Di(alkoxy)phenyl-Gruppe, z. B. 2,6-Dimethoxyphenyl, 2-, 3- oder 4-(Isopropoxy)phenyl, 2-, 3- oder 4-(tert.-Butoxy)phenyl, 3-Ethoxy-4-methoxyphenyl und dergleichen; 2-, 3- oder 4-Trifluormethylphenyl; einem Mono- oder Dicarboxyphenyl- oder (geschütztes Carboxy)phenyl-Gruppe, wie etwa 2-, 3- oder 4-Carboxyphenyl oder 2,4- Di(geschütztes Carboxy)phenyl; ein Mono- oder Di(hydroxymethyl)phenyl oder (geschütztes Hydroxymethyl)phenyl, wie etwa 2-, 3- oder 4-(geschütztes Hydroxymethyl)phenyl oder 3,4- Di(hydroxymethyl)phenyl; ein Mono- oder Di(aminomethyl)phenyl oder (geschütztes Aminomethyl)phenyl, wie etwa 2-, 3- oder 4-(Aminomethyl)phenyl oder 2,4-(geschütztes Aminomethyl)phenyl; oder ein Mono- oder Di(N-methylsulfonylamino))phenyl, wie etwa 2-, 3- oder 4-(N-(Methylsulfonylamino))phenyl, ein. Der Ausdruck "substituiertes Phenyl" repräsentiert auch disubstituierten Phenyl-Gruppen, in denen die Substituenten unterschiedlich sind, z. B. 3-Methyl-4-hydroxyphenyl, 3-Chlor-4-hydroxyphenyl, 2-Methoxy- 4-bromphenyl, 4-Ethyl-2-hydroxyphenyl, 3-Hydroxy-4-nitrophenyl, 2-Hydroxy-4- chlorphenyl und dergleichen.
Der Ausdruck "(substituiertes Phenyl)alkyl" bedeutet eine der oben substituierten Phenyl- Gruppen, gebunden an eine der oben beschriebenen Alkyl-Gruppen. Beispiele hierfür schließen solche Gruppen wie 2-Phenyl-1-chlorethyl, 2-(4'-Methoxyphenyl)ethyl, 4-(2',6'- Dihydroxyphenyl)-n-hexyl, 2-(5'-Cyano-3'-methoxyphenyl)-n-pentyl, 3-(2',6'- Dimethylphenyl)-n-propyl, 4-Chlor-3-aminobenzyl, 6-(4'-Methoxyphenyl)-3-carboxy(n- hexyl), 5-(4'-Aminomethylphenyl)-3-(aminomethyl)-n-pentyl, 5-Phenyl-3-oxo-n-pent-1-yl, (4-Hydroxynapth-2-yl)methyl und dergleichen ein.
Die Ausdrücke "Halo" und "Halogen" beziehen sich auf Fluor-, Chlor-, Brom- oder Iod- Gruppen. Es können ein oder mehrere Halogene vorliegen, die identisch oder verschieden sind. Bevorzugte Halogene sind Chlor und Fluor.
Der Ausdruck "Aryl" bezieht sich auf aromatische fünf und sechsgliedrige carbocyclische Ringe. Sechsgliedrige Ringe sind bevorzugt.
Der Ausdruck "Heteroaryl" bezeichnet fakultativ substituierte fünfgliedrige oder sechsgliedrige Ringe, die 1 bis 4 Heteroatome aufweisen, wie etwa Sauerstoff-, Schwefel- und/oder Stickstoffatome, insbesondere Stickstoff, entweder allein oder in Verbindung mit Schwefel- oder Sauerstoff-Ringatomen. Diese fünfgliedrigen oder sechsgliedrigen Ringe sind vollständig ungesättigt.
Überdies können die obigen fakultativ substituierten fünfgliedrigen oder sechsgliedrigen Ringe fakultativ an ein aromatisches fünfgliedriges oder sechsgliedriges Ringsystem kondensiert sein. Die Ringe können z. B. fakultativ an ein aromatisches fünfgliedriges oder sechsgliedriges Ringsystem kondensiert sein, wie etwa ein Pyridin- oder ein Triazol-System und vorzugsweise an einen Benzolring.
Die folgenden Ringsysteme sind Beispiele für die heterocyclischen (ob substituiert oder unsubstituiert) Reste, die mit dem Ausdruck "Heteroaryl" bezeichnet werden: Thienyl, Furyl, Pyrrolyl, Pyrrolidinyl, Imidazolyl, Isoxazolyl, Triazolyl, Thiadiazolyl, Oxadiazolyl, Tetrazolyl, Thiatriazolyl, Oxatriazolyl, Pyridyl, Pyrimidyl, Pyrazinyl, Pyridazinyl, Oxazinyl, Triazinyl, Thiadiazinyl, Tetrazolo, 1,5-[b]Pyridazinyl und Purinyl sowie benzo-kondensierte Derivate, z. B. Benzoxazolyl, Benzthiazolyl, Benzimidazolyl und Indolyl.
Substituenten für die obigen fakultativ substituierten Heteroaryl-Ringe sind von eins bis drei Halo, Trihalomethyl, Amino, geschütztes Amino, Aminosalze, monosubstituiertes Amino, disubstituiertes Amino, Carboxy, geschütztes Carboxy, Carboxylatsalze, Hydroxy, geschütztes Hydroxy, Salze einer Hydroxygruppe, Niederalkoxy, Niederalkylthio, Alkyl, substituiertes Alkyl, Cycloalkyl, substituiertes Cycloalkyl, (Cycloalkyl)alkyl, substituiertes (Cycloalkyl)alkyl, Phenyl, substituiertes Phenyl, Phenylalkyl und (substituiertes Phenyl)alkyl. Substituenten für die Heteroaryl-Gruppe sind wie zuvor definiert oder können, im Falle von Trihalomethyl, Trifluormethyl, Trichlormethyl, Tribrommethyl oder Triiodmethyl sein. Wie im Zusammenhang mit den obigen Substituenten für Heteroaryl-Ringe verwendet, bedeutet "Niederalkoxy" eine C&sub1;- bis C&sub4;-Alkoxy-Gruppe, in ähnlicher Weise bedeutet "Niederalkylthio" eine C&sub1;- bis C&sub4;-Alkylthio-Gruppe. Der Ausdruck "substituiertes Alkyl" bedeutet die oben definierte Alkyl-Gruppe, ein- bis dreimal substituiert mit einem Hydroxy, geschützten Hydroxy, Amino, geschützten Amino, Cyano, Halo, Trifluormethyl, monosubstituierten Amino, disubstituierten Amino, Niederalkoxy, Niederalkylthio, Carboxy, geschützten Carboxy oder einem Carboxy-, Amino- und/oder Hydroxysalz. Wie im Zusammenhang mit den Substituenten für die Heteroaryl-Ringe verwendet, sind die Ausdrücke "substituiertes (Cycloalkyl)alkyl" und "substituiertes Cycloalkyl" wie oben definiert mit denselben Gruppen substituiert, wie sie für eine "substituierte Alkyl"-Gruppe aufgelistet sind. Der Ausdruck "monosubstituiertes Amino" betrifft eine Amino-Gruppe mit einem Substituenten, der ausgewählt ist aus der Gruppe, die aus Phenyl, substituiertem Phenyl, Alkyl, substituiertem Alkyl, C&sub1;- bis C&sub7;-Acyl, C&sub2;- bis C&sub7;-Alkenyl, substituiertem C&sub2;- bis C&sub7;-Alkenyl, C&sub2;- bis C&sub7;-Alkinyl, C&sub7;- bis C&sub1;&sub6;-Alkylaryl, substituiertem C&sub7;- bis C&sub1;&sub6;-Alkylaryl und Heteroaryl-Gruppe besteht. Das monosubstituierte Amino kann zusätzlich eine Aminoschutzgruppe aufweisen, wie umfaßt mit dem Ausdruck "geschütztes monosubstituiertes Amino". Der Ausdruck "disubstituiertes Amino" betrifft Aminogruppen mit zwei Substituenten, die ausgewählt sind aus der Gruppe, die aus Phenyl, substituiertem Phenyl, Alkyl, substituiertem Alkyl, C&sub1;- bis C&sub7;-Acyl, C&sub2;- bis C&sub7;-Alkenyl, C&sub2;- bis C&sub7;-Alkinyl, C&sub7;- bis C&sub1;&sub6;-Alkylaryl, substituiertem C&sub7;- bis C&sub1;&sub6;-Alkylaryl und Heteroaryl besteht. Die zwei Substituenten können identisch oder verschieden sein. Der Ausdruck "Heteroaryl(alkyl)" bezeichnet eine Alkyl-Gruppe, wie oben definiert, die an irgendeiner Position mit einer Heteroaryl-Gruppe, wie oben definiert, substituiert ist.
Der Ausdruck "pharmazeutisch annehmbares Salz" umfaßt diejenigen Salze, die sich mit den Carboxylat-Anionen bilden, und schließen Salze sein, die gebildet werden mit den organischen und anorganischen Kationen, wie etwa denjenigen, die ausgewählt sind aus den Alkali- und Erdalkalimetallen (z. B. Lithium, Natrium, Kalium, Magnesium, Barium und Calcium); Ammonium; und den anorganischen Kationen (z. B. Dibenzylammonium, Benzylammonium, 2-Hydroxyethylammonium, Bis(2-hydroxyethyl)ammonium, Phenylethylbenzylammonium, Dibenzylethylendiammonium und ähnliche Kationen). Andere Kationen, die von dem obigen Ausdruck umfaßt sind, schließen die protonierte Form von Procain, Chinin und N-Methylglucosamin, die protonierten Formen von basischen Aminosäuren, wie etwa Glycin, Ornithin, Histidin, Phenylglycin, Lysin und Arginin und essigsäureähnliche Gegenionen, wie etwa Acetat und Trifluoracetat, ein. Überdies bezieht sich dieser Ausdruck auf jede zwitterionische Form der vorliegenden Verbindungen, die aus einer Carbonsäure und einer Aminogruppe gebildet sind. Ein bevorzugtes Kation für das Carboxylat-Anion ist das Natrium-Kation. Überdies schließt der Ausdruck Salze ein, die sich durch Standard-Säure-Base-Reaktionen mit basischen Gruppen (wie etwa Amino-Gruppen) bilden und schließt organische oder anorganische Säuren ein. Solche Säuren schließen Salzsäure, Schwefelsäure, Phosphorsäure, Essigsäure, Bernsteinsäure, Zitronensäure, Milchsäure, Maleinsäure, Fumarsäure, Palmitinsäure, Cholsäure, Pamoinsäure, Mucinsäure, D-Glutaminsäure, D-Camphersäure, Glutarsäure, Phthalsäure, Weinsäure, Laurinsäure, Stearinsäure, Salicylsäure, Methansulfonsäure, Benzolsulfonsäure, Sorbinsäure, Pikrinsäure, Benzoesäure, Zimtsäure und ähnliche Säuren ein.
Die Verbindungen von Formel 1 können auch als Solvate und Hydrate existieren. So können diese Verbindungen mit z. B. Hydratisierungswasser oder einem, einer Reihe von oder jeder Fraktion davon von Molekülen des Mutterlaugelösungsmittels auskristallisieren. Die Solvate und Hydrate solcher Verbindungen sind im Schutzumfang dieser Erfindung eingeschlossen.
Der Ausdruck "Carboxy-Schutzgruppe", wie hierin verwendet, betrifft eines der Esterderivate der Carbonsäure-Gruppe, die üblicherweise eingesetzt werden, um die Carbonsäure-Gruppe zu blockieren oder zu schützen, während Reaktionen an anderen funktionellen Gruppen auf der Verbindung durchgeführt werden. Beispiele für solche Carbonsäure-Schutzgruppen schließen tert.-Butyl, 4-Nitrobenzyl, 4-Methoxybenzyl, 3,4-Dimethoxybenzyl, 2,4- Dimethoxybenzyl, 2,4,6-Trimethoxybenzyl, 2,4,6-Trimethylbenzyl, Pentamethylbenzyl, 3,4- Methylendioxybenzyl, Benzhydryl, 4,4'-Dimethoxytrityl, 4,4',4"-Trimethoxytrityl, 2- Phenylpropyl, Trimethylsilyl, tert.-Butyldimethylsilyl, Phenacyl, 2,2,2-Trichlorethyl, β- (Trimethylsilyl)ethyl, β-(Di(n-butyl)methylsilyl)ethyl, p-Toluolsulfonylethyl, 4- Nitrobenzylsulfonylethyl, Allyl, Cinnamyl, 1-(Trimethylsilylmethyl)-propenyl und ähnliche Einheiten ein. Die eingesetzte Spezies der Carboxy-Schutzgruppe ist nicht kritisch, solange die derivatisierte Carbonsäure gegenüber den Bedingungen anschließender Reaktion(en) stabil ist und zum geeigneten Zeitpunkt ohne Spaltung des Restes des Moleküls entfernt werden kann. Weitere Beispiele für diese Gruppen sind zu finden in C.B. Reese und E. Haslam, "Protective Groups in Organic Chemistry", J.G.W. McOmie, Herausgeber, Plenum Press, New York, NY, 1973, Kapitel 5, bzw. T.W. Greene und P.G.M. Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis", 2. Ausgabe, John Wiley and Sons, New York, NY, 1991, Kapitel 5, von denen jedes hierin durch Bezugnahme miteinbezogen worden ist. Ein verwandter Ausdruck ist "geschütztes Carboxy", der eine Carboxy-Gruppe betrifft, die mit einer der obigen Carboxy-Schutzgruppen substituiert ist.
Der Ausdruck "Hydroxy-Schutzgruppe" betrifft leicht abspaltbare Gruppen, die an Hydroxyl- Gruppen gebunden sind, wie etwa die Tetrahydropyranyl-, 2-Methoxyprop-2-yl-, 1- Ethoxyeth-1-yl-, Methoxymethyl-, β-Methoxymethyl-, Methylthiomethyl-, tert.-Butyl-, tert.- Amyl-, Trityl-, 4-Methoxytrityl-, 4,4'-Dimethoxytrityl-, 4,4',4"-Trimethoxytrityl-, Benzyl-, Allyl-, Trimethylsilyl-, (tert.-Butyl)dimethylsilyl-, 2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl-Gruppen und dergleichen.
Weitere Beispiele für Hydroxy-Schutzgruppen sind beschrieben von C.B. Reese und E. Haslam, "Protective Groups in Organic Chemistry", J.G.W. McOmie, Herausgeber, Plenum Press, New York, NY, 1973, Kapitel 3 und 4, bzw. T.W. Greene und P.G.M. Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis", 2. Ausgabe, John Wiley and Sons, New York, NY, 1991, Kapitel 2 und 3. Eine bevorzugte Hydroxy-Schutzgruppe ist die tert.-Butylgruppe. Der verwandte Ausdruck "geschütztes Hydroxy" bezeichnet eine Hydroxy-Gruppe, die an eine der obigen Hydroxy-Schutzgruppen gebunden ist.
Der Ausdruck "Amino-Schutzgruppe", wie hierin verwendet, betrifft Substituenten der Amino-Gruppe, die üblicherweise eingesetzt werden, um die Aminofunktionalität zu blockieren oder zu schützen, während andere funktionelle Gruppen des Moleküls reagieren. Der Ausdruck "geschütztes monosubstituiertes Amino" bedeutet, daß eine Amino- Schutzgruppe am monosubstituierten Amino-Stickstoffatom vorliegt.
Beispiele für solche Amino-Schutzgruppen schließen die Formyl("For")-Gruppe, die Trityl- Gruppe, die Phthalimido-Gruppe, die Trichloracetyl-Gruppe, die Trifluoracetyl-Gruppe, die Chloracetyl-, Bromacetyl- und Iodacetyl-Gruppe, blockierende Gruppen vom Urethan-Typ, wie etwa tert.-Butoxycarbonyl ("Boc"), 2-(4-Biphenylyl)propyl-2-oxycarbonyl ("Bpoc"), 2- Phenylpropyl-2-oxycarbonyl ("Poc"), 2-(4-Xenyl)isopropoxycarbonyl, 1,1 -Diphenylethyl-1- oxycarbonyl, 1,1-Diphenylpropyl-1-oxycarbonyl, 2-(3,5-Dimethoxyphenyl)propyl-2- oxycarbonyl ("Ddz"), 2-(p-Toluyl)propyl-2-oxycarbonyl, Cyclopentanyloxycarbonyl, 1- Methylcyclopentanyloxycarbonyl, Cyclohexanyloxycarbonyl, 1-Methylcyclohexanyloxycarbonyl, 2-Methylcyclohexanyloxycarbonyl, 2-(4-Toluylsulfonyl)ethoxycarbonyl, 2- (Methylsulfonyl)ethoxycarbonyl, 2-(Triphenylphosphino)-ethoxycarbonyl, 9- Fluorenylmethoxycarbonyl ("Fmoc"), 2-(Trimethylsilyl)ethoxycarbonyl, Allyloxycarbonyl, 1- (Trimethylsilylmethyl)prop-1-enyloxycarbonyl, 5-Benzisoxalylmethoxycarbonyl, 4- Acetoxybenzyloxycarbonyl, 2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl, 2-Ethinyl-2-propoxycarbonyl, Cyclopropylmethoxycarbonyl, Isobornyloxycarbonyl, 1-Piperidyloxycarbonyl, Benzyloxycarbonyl ("Cbz"), 4-Phenylbenzyloxycarbonyl, 2-Methylbenzyloxy-carbonyl, α- 2,4,5-Tetramethylbenzyloxycarbonyl ("Tmz"), 4-Methoxybenzyloxycarbonyl, 4- Fluorbenzyloxycarbonyl, 4-Chlorbenzyloxycarbonyl, 3-Chlorbenzyloxycarbonyl, 2- Chlorbenzyloxycarbonyl, 2,4-Dichlorbenzyloxycarbonyl, 4-Brombenzyloxycarbonyl, 3- Brombenzyloxycarbonyl, 4-Nitrobenzyloxycarbonyl, 4-Cyanobenzyloxycarbonyl, 4- (Decyloxy)benzyloxycarbonyl und dergleichen; die Benzoylmethylsulfonyl-Gruppe, 2,2,5,7,8-Pentamethylchroman-6-sulfonyl-Gruppe ("PMC"), Dithiasuccinoyl ("Dts"), die 2- (Nitro)phenylsulfenyl-Gruppe ("Nps"), die Diphenylphosphinoxid-Gruppe und ähnliche Amino-Schutzgruppen ein. Die eingesetzte Spezies der Amino-Schutzgruppe ist nicht kritisch, solange die derivatisierte Amino-Gruppe gegenüber den Bedingungen der anschließenden Reaktion(en) stabil ist und zum geeigneten Zeitpunkt ohne Spaltung des Restes des Moleküls entfernt werden kann. Bevorzugte Amino-Schutzgruppen sind Boc, Cbz und Fmoc. Weitere Beispiele für Amino-Schutzgruppen, die von dem obigen Ausdruck umfaßt sind, sind in der organischen Synthese und der Peptid-Technik gut bekannt und sind z. B. von T.W. Greene und P.G.M. Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis", 2. Ausgabe, John Wiley and Sons, New York, NY, 1991, Kapitel 7, M. Bodanzsky, "Principles of Peptide Synthesis", 1. und 2. überarbeitete Ausgabe, Springer Verlag, New York, NY, 1984 und 1993, und J.M. Stewart und J.D. Young, "Solid Phase Peptide Synthesis", 2. Ausgabe, Pierce Chemical Co., Rockford, IL, 1984, E. Atherton und R.C. Shephard, "Solid Phase Peptide Synthesis - A Practical Approach" IRL Press, Oxford, England (1989), von denen jede hierin durch Bezugnahme miteinbezogen ist, beschrieben. Der verwandte Ausdruck "geschütztes Amino" definiert eine Aminogruppe, die mit einer Amino- Schutzgruppe, die oben diskutiert ist, substituiert ist.
Die Ausdrücke "natürliche und nicht-natürliche Aminosäuren" (α-Aminosäure) betrifft sowohl die natürlich vorkommenden Aminosäuren als auch andere "Nicht-Protein"-α- Aminosäuren, die üblicherweise von den Fachleuten in der Peptid-Chemie eingesetzt werden, wenn sie synthetische Analoge von natürlich vorkommenden Peptiden herstellen; einschließlich D- und L-Formen. Die natürlich vorkommenden Aminosäuren sind Glycin, Alanin, Valin, Leucin, Isoleucin, Serin, Methionin, Threonin, Phenylalanin, Tyrosin, Tryptophan, Cystein, Prolin, Histidin, Asparaginsäure, Asparagin, Glutaminsäure, Glutamin, γ-Carboxyglutaminsäure, Arginin, Ornithin und Lysin. Beispiele für "Nicht-Protein" alpha- Aminosäuren schließen Hydroxylysin, Citrullin, Kynurenin, (4-Aminophenyl)alanin, 3-(2'- Naphthyl)alanin, 3-(1'-Naphthyl)alanin, Methioninsulfon, (tert.-Butyl)alanin, (tert.- Butyl)glycin, 4-Hydroyphenylglycin, Aminoalanin, Phenylglycin, Vinylalanin, Propargylglycin, 1,2,4-Triazolo-3-alanin, Thyronin, 6-Hydroxytryptophan, 5- Hydroxythryptophan, 3-Hydroxykynurenin, 3-Aminotyrosin, Trifluormethylalanin, 2- Thienylalanin, (2-(4-Pyridyi)ethyl)cystein, 3,4-Dimethoxyphenylalanin, 3-(2'- Thiazolyl)alanin, Ibotensäure, 1-Amino-1-cyclopentancarbonsäure, 1-Amino-1- cyclopentancarbonsäure, 1-Amino-1-cyclohexancarbonsäure, Quisqualsäure, 3- (Trifluormethylphenyl)alanin, (Cyclohexyl)glycin, Thiohistidin, 3-Methoxytyrosin, Elastatinal, Norleucin, Norvalin, Alloisoleucin, Homoarginin, Thioprolin, Dehydroprolin, Hydroxyprolin, Homoprolin, α-Amino-n-buttersäure, Cyclohexylalanin, 2-Amino-3- phenylbuttersäure, Phenylalanin, substituiert an der ortho-, meta- oder para-Position der Phenyleinheit mit einem oder zweien der folgenden: ein (C&sub1;- bis C&sub4;-)alkyl, ein (C&sub1;- bis C&sub4;-)- alkoxy, Halogen- oder Nitro-Gruppen, oder substituiert mit einer Methylendioxy-Gruppe; β- 2- und 3-Thienylalanin, β-2- und 3-Furanylalanin, β-2-, 3- und 4-Pyridylalanin, β- (Benzothienyl-2- und 3-yl)alanin, β-(1- und 2-Naphthyl)alanin, O-alkylierte Derivate von Serin, Threonin oder Tyrosin, S-alkyliertes Cystein, S-alkyliertes Homocystein, O-Sulfat-, O- Phosphat- und O-Carboxylatester von Tyrosin, 3-(Sulfo)tyrosin, 3-(Carboxy)tyrosin, 3- (Phospho)tyrosin, den 4-Methansulfonsäureester von Tyrosin, 4-Methanphosphonsäureester von Tyrosin, 3,5-Diiodtyrosin, 3-Nitrotyrosin, &epsi;-Alkyllysin, und Delta-Alkylornithin ein. Jede dieser α-Aminosäuren kann mit einer Methyl-Gruppe an der Alpha-Position, einem Halogen an jedem aromatischen Rest auf der α-Amino-Seitenkette oder einer geeigneten Schutzgruppe an den O-, N- oder S-Atomen der Seitenkettenreste substituiert sein. Geeignete Schutzgruppen sind oben diskutiert.
In Abhängigkeit von der Wahl des Lösungsmittels und anderer Bedingungen, die den Fachleuten bekannt sind, können Verbindungen dieser Erfindung auch die Hemiketal-, Hemiacetal-, Ketal- oder Acetal-Form annehmen, wobei diese Formen in der vorliegenden Erfindung eingeschlossen sind.
Zusätzlich sollte man verstehen, daß die Gleichgewichtsformen der Verbindungen dieser Erfindung tautomere Formen einschließen können. Alle solche Formen dieser Verbindungen sind ausdrücklich in der vorliegenden Erfindung eingeschlossen.
Die Fachleute werden auch verstehen, daß, wenn B in Formel 1 ein Wasserstoffatom ist, ein Semicarbazon mit dem resultierenden Aldehyd gebildet werden kann. Solche Semicarbazone sind ebenfalls als Verbindungen von Formel 1 eingeschlossen, ebenso wie die pharmazeutischen Zusammensetzungen, die diese Verbindungen enthalten. Solche Semicarbazone schließen z. B. Semicarbazon-Derivate der optimalen Gruppen und Ausführungsformen der 4-Oxobutansäure-Derivate der Oxoazepinoindol- und Oxoazepinochinolin-Verbindungen ein, die unten angegeben sind.
Eine optimale Gruppe von Verbindungen von Formel 1 existiert, wenn in der obigen Formel n 1 ist und, noch mehr, wenn m 1 ist. Diese Verbindungen werden hierin als die "Oxoazepinoindol"-Verbindungen bezeichnet werden.
Eine optimale Gruppe von Oxoazepinoindol-Verbindungen existiert, wenn B in Formel 1 ein Wasserstoffatom ist, Verbindungen, die hierin als "4-Oxobutansäure-Derivate" bezeichnet werden. Eine bemerkenswerte Ausführungsform solcher 4-Oxobutansäure-Derivate tritt auf, wenn A in Formel 1 eine Gruppe der Formel R²CO- ist, noch mehr wenn R² 2-(Carboxy)eth- 1-yl, 2-(Phenyl)eth-1-yl, Methyl, Napth-1-yl oder Phenyl ist, und insbesondere wenn R¹ ein Wasserstoffatom ist. Eine weitere Ausführungsform von 4-Oxobutansäure-Derivaten existiert, wenn A eine Gruppe der Formel R&sup5;-CO-NH-CHR&sup8;-CO- ist, noch mehr wenn R&sup5; eine Methyl- Gruppe und R&sup8; eine Gruppe der Formel -CH&sub2;COOH ist, und insbesondere wenn R¹ ein Wasserstoffatom ist. Noch eine weitere Ausführungsform von bemerkenswerten 4- Oxobutansäure-Derivaten hat A als eine Gruppe der Formel R&sup6;-O-CO-NH-CHR&sup8;-CO-, wobei weiterhin R&sup6; eine Benzyl-Gruppe ist und R&sup8; eine Gruppe der Formel -CH&sub2;-COOH ist, und insbesondere wenn R¹ ein Wasserstoffatom ist. Noch eine weitere Ausführungsform der 4- Oxobutansäure-Derivate tritt auf, wenn A eine Gruppe der Formel R³-O-CO- ist, wobei R³ Benzyl ist, und insbesondere wenn R¹ ein Wasserstoffatom ist.
Eine weitere optimale Gruppe von Oxoazepinoindol-Verbindungen tritt auf, wenn B in Formel 1 eine Monofluormethyl-Gruppe ist, und diese werden somit als "Monofluormethyl- Derivate" bezeichnet. Eine bemerkenswerte Ausführungsform von Monofluormethyl- Derivaten hat A als eine Gruppe der Formel R³-O-CO-, noch mehr wenn R³ eine Benzylgruppe ist, und insbesondere wenn R¹ ein Wasserstoffatom ist.
Eine weitere optimale Gruppe von Oxoazepinoindol-Verbindungen tritt auf, wenn B in Formel 1 eine Gruppe der Formel -CH&sub2;-O-PO(R¹&sup0;)R¹¹ ist. Diese Gruppe von Verbindungen wird hierin als "Phosphinyloxy-Derivate" bezeichnet. Eine Gruppe von bemerkenswerten Phosphinyloxy-Derivaten hat R¹&sup0; und R¹¹ jeweils als Phenyl-Gruppen. Eine Ausführungsform solcher Diphenylphosphinyloxy-Verbindungen existiert, wenn A in Formel 1 eine Gruppe der Formel R³-O-CO- ist, wobei R³ Benzyl ist, und insbesondere wenn R¹ ein Wasserstoffatom ist.
Eine weitere optimale Gruppe von Verbindungen von Formel 1 existiert, wenn in der obigen Formel n 2 ist und, noch mehr, wenn m 1 ist. Diese Verbindungen werden hierin als die "Oxoazepinochinolin"-Verbindungen bezeichnet werden.
Eine beispielhaft Gruppe von Oxoazepinochinolin-Verbindungen tritt auf, wenn B in Formel 1 ein Wasserstoffatom ist, noch mehr wenn A eine Gruppe der Formel R³-O-CO- ist, wobei R³ Benzyl ist, und insbesondere wenn R¹ ein Wasserstoffatom ist.
Man sollte verstehen, daß die Verbindungen dieser Erfindung durch geeignete Funktionalität modifiziert werden können, um selektive biologische Eigenschaften zu verstärken. Solche Modifikationen sind in der Technik bekannt und schließen diejenigen ein, die die biologische Penetration in ein gegebenes biologisches System (z. B. Blut, lymphatisches System, zentrales Nervensystem) erhöhen, die orale Verfügbarkeit erhöhen, die Löslichkeit erhöhen, um Verabreichung durch Injektion zu ermöglichen, den Metabolismus verändern und die Ausscheidungsrate verändern. Zusätzlich können die Verbindungen in Pro-Drug-Form überführt werden, so daß die gewünschte Verbindung im Körper des Patienten als das Ergebnis der Wirkung metabolischer oder anderer biochemischer Prozesse am Pro-Drug geschaffen wird. Solche Beispiele für Pro-Drug-Formen schließen Ketal-, Acetal-, Oxim- und Hydrazon-Formen von Verbindungen ein, die Keton- oder Aldehyd-Gruppen enthalten, insbesondere wo sie in der A-Gruppe auftreten oder in den modifizierten Asparaginsäure- oder Glutaminsäure-Reste, die an den tricyclischen Kern der Verbindungen dieser Erfindung gebunden sind.
Die Verbindungen von Formel 1 dieser Erfindung können unter Verwendung herkömmlicher Techniken synthetisiert werden. Vorteilhafterweise werden diese Verbindungen in konventioneller Weise aus leicht verfügbaren Ausgangsmaterialien synthetisiert.
So können Verbindungen der vorliegenden Erfindung im allgemeinen durch Zusammenbringen eines tricyclischen Kerns synthetisiert werden, unten in Formel 2 angegeben: FORMEL 2
mit den modifizierten Asparaginsäure- und Glutaminsäure-Resten der Formel 3a-d:
In Gegenwart eines Standard-Peptidkopplungsmittels, wie etwa Dicyclohexylcarbodiimid(DCC)/1-Hydroxybenzotriazol (HOBt), BOP-Reagenz, pyBOP, TBTU, EEDQ, 1- Ethyl(3,3'-dimethyl-1'-aminopropyl)carbodiimid(EDAC)/HOBt und dergleichen, wie diskutiert in J. Jones, "Amino Acid and Peptide Synthesis", Steven G. Davis Ausgabe, Oxford University Press, Oxford, S. 25-41 (1992), hierin durch Bezugnahme miteinbezogen, synthetisiert werden. In der obigen Formel ist APG eine Amino-Schutzgruppe. Die Amino- Schutzgruppe wird anschließend entfernt und das resultierende Amin wird mit der substituierten Acylgruppe der Formel 4:

FORMEL 4

Rc-CO-X
oder der entsprechenden Sulfonylgruppe der Formel 5:

FORMEL 5

R&sup4;SO&sub2;-X.
zusammengebracht.
In den obigen Formeln ist R¹ wie oben definiert und Rc ist R², R³-O, R&sup4; oder jede der Seitenketten, die R&sup8; enthält, wie definiert für Gruppe A in Formel 1. Natürlich hätten solche Einheiten alle Hydroxy-, Carboxy- oder Amino-Gruppen in der geschützten Form, um die Kopplungsreaktion (Formel 3a-d), die Acylierungsreaktion (Formel 4) oder die Sulfonierungsreaktion (Formel 5) nicht zu stören. X in den obigen Formeln stellt eine leichte Abgangsgruppe für die Acylierungs- oder Sulfonierungsreaktionen dar.
In dem Fall, in dem die Kopplungsreaktion mit dem Aminoalkohol von Formel 3c durchgeführt wurde, mußte die Alkohol-Einheit vor der Entfernung der Schutzgruppen zur entsprechenden Carbonyl-Verbindung oxidiert werden. Bevorzugte Verfahren für die Oxidationsreaktion schließen Swern-Oxidation (Oxalylchlorid-Dimethylsulfoxid, Methylenchlorid bei -78ºC, gefolgt von Triethylamin); und Dess-Martin-Oxidation (Dess- Martin-Periodinan, tert.-Butanol und Methylenchlorid) ein. Die Schutzgruppen, die in den Unterstrukturen der Formel 2 und 3a-d enthalten sind, werden mit in der Technik gut bekannten Verfahren entfernt.
Der tricyclische Kern von Formel 2 wird mit in der Technik bekannten Verfahren synthetisiert. Siehe z. B. D.S. Karanewsky, U.S.-Patent Nr. 5,504,080, erteilt am 2. April 1996; J.A. Robl et al., Tetrahedron Letters, 36: 1593-1596 (1995); und 5. De Lombaert et al Tetrahedron Letters, 35: 7513-7516 (1994), von denen alle hierin durch Bezugnahme miteingezogen sind.
Die modifizierte Asparagin- oder Glutaminsäure für Formel 3a-d kann mit in der Technik gut bekannten Verfahren hergestellt werden. Siehe z. B. Europäische Patentanmeldung Nr. 519 748; PCT-Patentanmeldung Nr. PCTIEP92/024 72; PCT-Patentanmeldung Nr. PCT/US91/06595; PCT-Patentanmeldung Nr. PCT/US 91/02339; Europäische Patentanmeldung Nr. 623 592; Internationale Patentanmeldung Nr. WO93/09135; PCT- Patentanmeldung Nr. PCTIUS94/08868; Europäische Patentanmeldung Nr. 623 606 Europäische Patentanmeldung Nr. 618 223; Europäische Patentanmeldung Nr. 533 226; Europäische Patentanmeldung Nr. 528 487; Europäische Patentanmeldung Nr. 618 233; PCT- Patentanmeldung Nr. PCT/EP92/02472; Internationale Patentanmeldung Nr. WO93/09135; PCT-Patentanmeldung Nr. PCT/US93/03589; und PCT-Patentanmeldung Nr. PCT/US93/00481, von denen alle hierin durch Bezugnahme miteinbezogen sind.
Die Acyl-Gruppe von Formel 4 und die entsprechenden R&sup4;SO&sub2;-Gruppen werden ebenfalls mit in der Technik gut bekannten Verfahren synthetisiert. Siehe z. B. U.S.-Patent Nr. 5,504,080, erteilt am 2. April 1996, die hierin durch Bezugnahme miteinbezogen ist. Obgleich diese Gruppe erzeugt werden kann, wenn sie schon an einen tricyclischen Kern gebunden ist, ist es bevorzugt, daß sie intakt ist, bevor sie mit dem Kern verknüpft wird.
Wenn die Seitenketten von Formel 3 und Formel 4 oder Formel 5 an den tricyclischen Kern von Formel 2 gebunden sind, würde ein Fachmann üblicherweise alle Amino-, Hydroxy- oder Carboxy-Schutzgruppen entfernen, um die Aktivität des synthetisierten Moleküls zu verstärken.
Pharmazeutische Zusammensetzungen dieser Erfindung umfassen jede der Verbindungen von Formel 1, und pharmazeutisch annehmbare Salze derselben, mit irgendeinem pharmazeutisch annehmbaren Trägerstoff, Adjuvans oder Vehikel (im folgenden zusammen bezeichnet als "pharmazeutisch annehmbare Trägerstoffe"). Pharmazeutisch annehmbare Trägerstoffe, Adjuvantien und Vehikel, die in den pharmazeutischen Zusammensetzungen dieser Erfindung verwendet werden können, schließen, ohne Einschränkung hierauf, Ionenaustauscher, Aluminiumoxid, Aluminiumstearat, Lecithin, Serumproteine wie etwa Humanserumalbumin, Puffersubstanzen wie etwa die verschiedenen Phosphate, Glyzin, Sorbinsäure, Kaliumsorbat, partielle Glyceridmischungen von gesättigten pflanzlichen Fettsäuren, Wasser, Salze oder Elektrolyte wie etwa Protaminsulfat, Dinatriumhydrogenphosphat, Kaliumhydrogenphosphat, Natriumchlorid, Zinksalze, kolloidales Siliziumdioxid, Magnesiumtrisilikat, Polyvinylpyrrolidon, Substanzen auf Cellulosebasis, Polyethylenglykol, Natriumcarboxymethylcellulose, Polyacrylate, Wachse, Polyethylen-Polyoxypropylen- Blockpolymere, Polyethylenglykol und Wollfett ein.
Eine optimale Gruppe von pharmazeutischen Zusammensetzungen von Formel 1 existiert, wenn in der obigen Formel n 1 ist und, noch mehr, wenn m 1 ist. Diese Zusammensetzungen werden hierin als die "Oxoazepinoindol"-Zusammensetzungen bezeichnet.
Eine optimale Gruppe von Oxoazepinoindol-Zusammensetzungen existiert, wenn B in Formel 1 ein Wasserstoffatom ist, Zusammensetzungen die hierin als "4-Oxobutansäure-Derivate" bezeichnet werden. Eine bemerkenswerte Ausführungsform solcher 4-Oxobutansäure- Derivate tritt auf, wenn A in Formel 1 eine Gruppe der Formel R²CO- ist, noch mehr wenn R² 2-(Carboxy)eth-1-yl, 2-(Phenyl)eth-1-yl, Methyl, Napth-1-yl oder Phenyl ist, und insbesondere wenn R¹ ein Wasserstoffatom ist.
Eine weitere Ausführungsform von 4-Oxobutansäure-Derivaten existiert, wenn A eine Gruppe der Formel R&sup5;-CO-NH-CHR&sup8;-CO- ist, noch mehr wenn R&sup5; eine Methylgruppe ist und R&sup8; eine Formel der Gruppe -CH&sub2;COOH ist, und insbesondere wenn R¹ ein Wasserstoffatom ist. Noch eine weitere Ausführungsform von bemerkenswerten 4-Oxobutansäure-Derivaten hat A als eine Gruppe der Formel R&sup6;-O-CO-NH-CHR&sup8;-CO-, wobei außerdem R&sup6; eine Benzylgruppe ist und R&sup8; eine Gruppe der Formel -CH&sub2;-COOH ist, und insbesondere wenn R¹ ein Wasserstoffatom ist. Noch eine weitere Ausführungsform der 4-Oxobutansäure-Derivate tritt auf, wenn A eine Gruppe der Formel R³-O-CO- ist, wobei R³ Benzyl ist, und insbesondere wenn R¹ ein Wasserstoffatom ist.
Eine weitere optimale Gruppe von Oxoazepinoindol-Zusammensetzungen tritt auf, wenn B in Formel 1 eine Monofluormethyl-Gruppe ist, und diese werden somit als "Monofluormethyl- Derivate" bezeichnet. Eine bemerkenswerte Ausführungsform von Monofluormethyl- Derivaten hat A als eine Gruppe der Formel R³-O-CO-, noch mehr wenn R³ eine Benzyl- Gruppe ist und insbesondere wenn R¹ ein Wasserstoffatom ist.
Eine weitere optimale Gruppe von Oxoazepinoindol-Zusammensetzungen tritt auf, wenn B in Formel 1 eine Gruppe der Formel -CH&sub2;-O-PO(R¹&sup0;)R¹¹ ist. Diese Gruppe von Zusammensetzungen wird hierin als "Phosphinyloxy-Derivate" bezeichnet. Eine Gruppe von bemerkenswerten Phosphinyloxy-Derivaten hat R¹&sup0; und R¹¹ jeweils als Phenyl-Gruppen. Eine Ausführungsform solcher Diphenylphosphinyloxy-Zusammensetzungen existiert, in denen A in Formel 1 eine Gruppe der Formel R³-O-CO- ist, wobei R³ Benzyl ist und insbesondere wenn R¹ Wasserstoffatom ist.
Eine weitere optimale Gruppe von pharmazeutischen Zusammensetzungen von Formel 1 existiert, wenn in der obigen Formel n 2 ist und, noch mehr, wenn m 1 ist. Diese Zusammensetzungen werden hierin als die "Oxoazepinochinolin"-Zusammensetzungen bezeichnet.
Eine beispielhafte Gruppe von Oxoazepinochinolin-Zusammensetzungen tritt auf, wenn B in Formel 1 ein Wasserstoffatom ist, noch mehr wenn A eine Gruppe der Formel R³-O-CO- ist, wobei R³ Benzyl ist, und insbesondere wenn R¹ ein Wasserstoffatom ist.
Die pharmazeutischen Zusammensetzungen dieser Erfindung können oral, parenteral, durch Inhalationsspray, topisch, rektal, nasal, bukkal, vaginal oder über ein implantiertes Reservoir verabreicht werden. Orale und parenterale Verabreichung sind bevorzugt. Der Ausdruck "parenteral", wie hierin verwendet, schließt subkutane, intrakutane, intravenöse, intramuskuläre, intraartikuläre, intrasynoviale, intrasternale, intrathekale, intralesionale und intrakraniale Injektions- oder Infusionstechniken ein.
Die pharmazeutischen Zusammensetzungen können in der Form einer sterilen injizierbaren Zubereitung vorliegen, z. B. als eine sterile injizierbare wäßrige oder ölige Suspension. Diese Suspension kann gemäß in der Technik bekannten Techniken formuliert werden, unter Verwendung geeigneter Dispersions- oder Benetzungsmittel (wie etwa z. B. Tween 80) und Suspensionsmittel. Die sterile injizierbare Zubereitung kann auch eine sterile injizierbare Lösung oder Suspension in einem nicht-toxischen, parenteral annehmbaren Verdünnungsmittel oder Lösungsmittel sein, z. B. als eine Lösung in 1,3-Butandiol. Unter den annehmbaren Trägerstoffen und Lösungsmitteln, die eingesetzt werden können, sind Mannitol, Wasser, Ringer-Lösung und isotonischen Natriumchloridlösung. Zusätzlich werden herkömmlicherweise sterile, fette Öle als ein Lösungsmittel oder Suspensionsmedium eingesetzt. Für diesen Zweck kann jedes milde fette Öl eingesetzt werden, einschließlich synthetischer Mono- oder Diglyceride. Fettsäuren, wie etwa Ölsäure und ihre Glycerid- Derivate, sind bei der Herstellung von Injektionslösungen nützlich, ebenso wie dies natürliche pharmazeutisch annehmbare Öle sind wie etwa Olivenöl oder Kastoröl, insbesondere in ihren polyoxyethylierten Versionen. Diese Öllösungen oder -suspensionen können auch ein langkettiges Alkohol-Verdünnungsmittel oder -Dispersionsmittel enthalten, wie etwa Ph. Helv oder einen ähnlichen Alkohol.
Die pharmazeutischen Zusammensetzungen dieser Erfindung können oral in jeder oral annehmbaren Dosisform verabreicht werden, einschließlich, ohne Beschränkung hierauf, Kapseln, Tabletten und wäßrigen Suspensionen und Lösungen. Im Falle von Tabletten für orale Verwendung schließen Trägerstoffe, die herkömmlicherweise verwendet werden, Lactose und Maisstärke ein. Gleitmittel, wie etwa Magnesiumstearat, werden ebenfalls typischerweise zugesetzt. Für orale Verabreichung in Kapselform schließen nützliche Verdünnungsmittel Lactose und getrocknete Maisstärke ein. Wenn wäßrige Suspensionen oral verabreicht werden, wird der aktive Inhaltsstoff mit Emulgier- und Suspensionsmitteln kombiniert. Falls gewünscht können bestimmte Süß- und/oder Geschmacks- und/oder Färbestoffe zugesetzt werden.
Die pharmazeutischen Zusammensetzungen dieser Erfindung können auch in der Form von Suppositorien für rektale Verabreichung verabreicht werden. Diese Zusammensetzungen können hergestellt werden durch Vermischen einer Verbindung dieser Erfindung mit einem geeigneten nicht-irritierenden Hilfsstoff, der bei Raumtemperatur fest ist, bei Rektaltemperatur aber flüssig, und daher im Rektum schmelzen wird, um die aktiven Komponenten freizusetzen. Solche Materialien schließen, ohne Einschränkung hierauf, Kakaobutter, Bienenwachs und Polyethylenglykole ein.
Die topische Anwendung der pharmazeutischen Zusammensetzungen dieser Erfindung ist besonders nützlich wenn die gewünschte Behandlung Bereiche von Organen umfaßt, die für topische Anwendung leicht zugänglich sind. Für topische Anwendung auf der Haut sollte die pharmazeutische Zusammensetzung mit einer geeigneten Salbe formuliert werden, die die aktiven Komponenten in einem Trägerstoff suspendiert oder gelöst aufhält. Trägerstoffe für topische Anwendung der Verbindung dieser Erfindung schließen, ohne Beschränkung hierauf, Mineralöl, flüssiges Paraffin, Weißöl, Propylenglykol, Polyoxyethylen, Polyoxypropylenverbindung, Emulgierwachs und Wasser ein. Alternativ kann die pharmazeutische Zusammensetzung mit einer geeigneten Lotion oder Creme formuliert werden, die die aktive Verbindung in einem Trägerstoff suspendiert oder gelöst enthält. Geeignete Trägerstoffe schließen, ohne Beschränkung hierauf, Mineralöl, Sorbitanmonostearat, Polysorbat 60, Cetylesterwachs, Cetearylalkohol, 2-Octyldodecanol, Benzylalkohol und Wasser ein. Die pharmazeutischen Zusammensetzungen dieser Erfindung können durch rektale Suppositorienformulierung oder in einer geeigneten Einlaufformulierung auch topisch auf den unteren Darmtrakt aufgebracht werden. Topisch transdermale Pflaster sind ebenfalls in dieser Erfindung eingeschlossen.
Die pharmazeutischen Zusammensetzungen dieser Erfindung können durch nasales Aerosol oder Inhalation verabreicht werden. Solche Zusammensetzungen werden gemäß in der Kunst der pharmazeutischen Formulierung gut bekannten Techniken hergestellt und können als Lösungen in Kochsalzlösung hergestellt werden, unter Verwendung von Benzylalkohol oder anderen geeigneten Konservierungsstoffen, Absorptionsförderern, um die Bioverfügbarkeit zu erhöhen, Fluorkohlenstoffen und/oder anderen Löslichmachungs- oder Dispergiermitteln, die in der Technik bekannt sind.
Die pharmazeutischen Zusammensetzungen dieser Erfindung können in einer herkömmlichen Weise für die Behandlung von Erkrankungen eingesetzt werden, die in Säugern durch IL-1 vermittelt werden. Solche Behandlungsverfahren, ihre Dosierungsniveaus und -anforderungen können von den Fachleute aus verfügbaren Verfahren und Techniken ausgewählt werden. Zum Beispiel kann eine pharmazeutische Zusammensetzung dieser Erfindung einem Patienten, der an einer durch IL-1 vermittelten Erkrankung leidet, in einer pharmazeutisch annehmbaren Weise und in einer Menge verabreicht werden, die darin wirksam ist, die Schwere dieser Erkrankung zu lindern.
Zusätzlich können die Verbindungen dieser Erfindung in Kombination mit entweder herkömmlichen entzündungshemmenden Mitteln oder mit Matrix-Metalloprotease- Inhibitoren, Lipoxygenase-Inhibitoren und Antagonisten von Cytokinen, die von IL-1β verschieden sind, verwendet werden.
Die Verbindungen dieser Erfindung können auch in Kombination mit Immunmodulatoren (z. B. Bropirimin, anti-Human-Alpha-Interferon-Antikörper, IL-2, GM-CSF, Methioninenkephalin, Interferon-Alpha, Diethyldithiocarbamat, Tumornekrosefaktor, Naltrexonen und rEPO) oder mit Prostaglandinen verabreicht werden, um Symptome von durch IL-1 vermittelten Erkrankungen, wie etwa Entzündung, zu verhindern oder zu bekämpfen.
Wenn die Verbindungen dieser Erfindung in Kombinationstherapien mit anderen Mitteln verabreicht werden, können sie dem Patienten sequentiell oder gleichzeitig verabreicht werden. Alternativ können pharmazeutische Zusammensetzungen gemäß dieser Erfindung aus einer Kombination einer Verbindung von Formel 1 und eines weiteren therapeutischen oder prophylaktischen Mittels bestehen.
Die Erkrankungszustände, die mit den vorliegenden pharmazeutischen Zusammensetzungen behandelt oder verhindert werden können, schließen, ohne Beschränkung hierauf, entzündliche Erkrankungen, Autoimmunerkrankungen und neurodegenerative Erkrankungen ein und zur Hemmung unerwünschter Apoptose, die bei ischämischer Verletzung auftritt, wie etwa ischämische Verletzung des Herzens (z. B. Myokardinfarkt) des Gehirns (z. B. Schlaganfall) und der Niere (z. B. ischämische Nierenerkrankung). Verfahren zur Verabreichung einer wirksamen Menge der oben beschriebenen pharmazeutischen Zusammensetzungen an Säuger, hierin auch als Patienten bezeichnet, die einer solchen Behandlung bedürfen (d. h. solchen, die an entzündlichen Erkrankungen, Autoimmunerkrankungen und neurodegenerativen Erkrankungen leiden), sind zusätzliche Aspekte der vorliegenden Erfindung.
Noch ein weiterer Aspekt der vorliegenden Erfindung ist ein Verfahren zur Verhinderung ischämischer Verletzung bei einem Patienten, der an einer Erkrankung leidet, die mit ischämischer Verletzung verbunden ist, welches das Verabreichen einer wirksamen Menge einer pharmazeutischen Zusammensetzung, die oben diskutiert ist, an einen Patienten umfaßt, der einer solchen Behandlung bedarf.
Ebenso umfaßt jedes der Verfahren, die auf Verfahren zur Behandlung von entzündlichen Erkrankungen, Autoimmunerkrankungen, neurodegenerativen Erkrankungen und Verhinderung ischämischer Verletzung gerichtet sind, die Verwendung irgendeiner der optimalen Gruppen und Ausführungsformen von pharmazeutischen Zusammensetzungen, die oben angegeben sind.
Entzündliche Erkrankungen, die behandelt oder verhindert werden können, schließen z. B. septischen Schock, septisches Fieber und posttraumatische Lungeninsuffizienz ein. Autoimmun-Zielerkrankungen schließen z. B. rheumatoide Arthritis, systemischen Lupus erythematosus, Sklerodermie, chronische Schilddrüsenentzündung, Graves-Krankheit, Autoimmungastritis, insulinabhängigen Diabetes mellitus, hämolytische Autoimmunanämie, Autoimmunneutropenie, Thrombozytenpenie, chronische aktive Hepatitis, schwere Muskelschwäche und multiple Sklerose ein. Neurodegenerative Zielerkrankungen schließen z. B. amyotrophe Lateralsklerose, Alzheimer-Krankheit, Parkinson-Krankheit und primäre Lateralsklerose ein. Die pharmazeutischen Zusammensetzungen dieser Erfindung können auch verwendet werden, um die Wundheilung zu fördern. Zielerkrankungen, die mit schädlicher, somit unerwünschter Apoptose verbunden sind, mit anderen Worten, diejenigen, die mit ischämischer Verletzung verbunden sind, schließen Myokardinfarkt, Schlaganfall und ischämische Nierenerkrankung ein. Die pharmazeutischen Zusammensetzungen dieser Erfindung können auch verwendet werden, um Infektionserkrankungen zu behandeln, insbesondere diejenigen, die durch Virusinfektionen auftreten.
Der Ausdruck "wirksame Menge" betrifft Dosierungsniveaus der Größenordnung von etwa 0,05 mg bis 140 mg pro Kilogramm Körpergewicht pro Tag zur Verwendung bei der Behandlung der oben angegeben Zustände (etwa 2,5 mg bis etwa 7 g pro Patient pro Tag). Entzündung kann z. B. wirkungsvoll durch die Verabreichung von etwa 0,01 bis 50 mg der Verbindung pro Kilogramm Körpergewicht pro Tag (etwa 0,5 mg bis etwa 3,5 g pro Patient pro Tag) behandelt werden.
Die Menge der Verbindungen von Formel 1, die mit den Trägerstoffmaterialien kombiniert werden können, um eine Einzeldosisform herzustellen, wird in Abhängigkeit von dem behandelten Patienten und dem besonderen Verabreichungsmodus variieren. Zum Beispiel kann eine Formulierung, die für die orale Verabreichung an Menschen gedacht ist, von 0,5 mg bis 5 g einer Verbindung von Formel 1 enthalten, vermischt mit einer geeigneten und angemessenen Menge Trägerstoffmaterial, die von etwa 5 bis 95% der Gesamtzusammensetzung variieren kann. Einheitsdosisformen werden im allgemeinen zwischen etwa 1 mg bis etwa 500 mg einer aktiven Verbindung von Formel 1 enthalten.
Man wird jedoch verstehen, daß die spezifische "wirksame Menge" für jeden besonderen Patienten von einer Vielzahl von Faktoren abhängen wird, einschließlich der Aktivität der spezifischen eingesetzten Verbindung, dem Alter, Körpergewicht, allgemeinen Gesundheitszustand, Geschlecht, Ernährung, Verabreichungszeit, Verabreichungsweg, Ausscheidungsrate, Arzneistoffkombination und der Schwere der besonderen Erkrankung, die therapiert wird.
Obgleich sich diese Erfindung auf die Verwendung der hierin offenbarten Verbindungen zur Verhinderung und Behandlung von durch IL-1 vermittelten Erkrankungen konzentriert, können die Verbindungen dieser Erfindung auch als inhibitorische Mittel für andere Cystein- Proteasen verwendet werden.
Die Verbindungen dieser Erfindung sind auch nützlich als kommerzielle Reagentien, die sich wirkungsvoll an die ICE/ced-3-Familie von Cystein-Proteasen oder andere Cystein-Proteasen binden. Als kommerzielle Reagentien können die Verbindungen dieser Erfindung, und ihre Derivate, verwendet werden, um die Proteolyse eines Zielpeptids zu blockieren, oder können derivatisiert werden, um sich an ein stabiles Harz als ein gebundenes Substrat für Affinitätschromatographieanwendungen zu binden. Diese und weitere Verwendungen, die kommerzielle Cystein-Protease-Inhibitoren charakterisieren, werden den Fachleuten klar sein.
Für ein vollständigeres Verständnis dieser Erfindung werden die folgenden Beispiele angegeben. Diese Beispiele sind nur zu Zwecken der Veranschaulichung gedacht und sollen nicht als den Schutzumfang der Erfindung auf irgendeine Weise beschränkend angesehen werden.
In den folgenden Beispielen wurden Protonen-NMR-Spektren bei 300 MHz erhalten; chemische Verschiebungen sind feldabwärts von internem Tetramethylsilan angegeben. DARSTELLUNG 1 Darstellung von (2S-cis)-5-Benzyloxycarbonylamino-1,2,4,5,6,7-hexahydro-4- oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2-carbonsäureethylester
Zu einer Lösung von (2S-cis)-5-Amino-1,2,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2- carbonsäureethylester (0,437 g, 1,73 mmol, hergestellt wie beschrieben in Tetrahedron Letters 36, S. 1593-1596 (1995) und U.S.-Patent 5,504,080 (2. April 1996)) in Methylenchlorid (4 ml) wurde unter Rühren bei 0ºC Benzylchlorformiat (0,370 ml, 2,6 mmol) und Triethylamin (0,724 ml, 5,2 mmol) zugegeben und die resultierende Mischung wurde unter Stickstoff für 45 Minuten gerührt. Die Reaktion wurde mit Wasser gequencht, anschließend aufgeteilt zwischen Ethylacetat und 5%iger wäßriger Kaliumbisulfatlösung. Die wäßrige Phase wurde zweimal mit Ethylacetat rückextrahiert, anschließend wurden die vereinigten organischen Phasen mit gesättigter Natriumchloridlösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und bis zur Trockne eingedampft. Reinigung des Rohproduktes durch Flashchromatographie auf Silikagel (Silikagel 60Å, 230-400 Mesh ASTM, der Marke S/P) unter Elution mit Ethylacetat- Hexan (2 : 1) ergab 0,558 g (68%) Rohprodukt. Trituration mit Ethylacetat-Hexan (1 : 4) ergab 0,480 g der Titelverbindung als weißen Feststoff; Schmp. 139-140ºC. TLC (Ethylacetat- Hexan, 2 : 1): Rf = 0,6, ¹H-NMR (300 MHz, CDCl&sub3;): δ 7,35-7,30 (m, 5H), 7,02-6,94 (m, 3H), 6,17 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 4,15 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 3,46 (dd, J = 11,0, 16,7 Hz, 1H), 3,29 (m, 1H), 3,10 (d, J = 116,5, 2H), 2,35 (m, 1H), 2,16 (m, 1H), 1,23 (t, J = 7,2 Hz, 3H). DARSTELLUNG 2 Darstellung von (2S-cis)-5-Benzyloxycarbonylamino-1,2,4,5,6,7-hexahydro-4- oxoazepino [3,2,1-hi]indol-2-carbonsäure.
Zu einer Lösung von (2S-cis)-5-Benzyloxycarbonylamino-1,2,4,5,6,7-hexahydro-4- oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2-carbonsäureethylester (0,428 g, 1,05 mmol) in 1,4-Dioxan (7,5 ml) und Wasser (2,5 ml) wurde 1M wäßriges Lithiumhydroxid (1,6 ml, 1,6 mmol) zugegeben und die resultierende Mischung wurde bei Raumtemperatur unter Stickstoff für 30 Minuten gerührt. Die Reaktionsmischung wurde mit einer 5%-igen wäßrigen Kaliumbisulfat- Natriumchlorid-Lösung auf pH 3 angesäuert. Die wäßrige Phase wurde zweimal mit Ethylacetat rückextrahiert und die vereinigten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet und bis zur Trockne eingedampft, um 0,395 g (99%) der Titelverbindung als einen feinen weißen Feststoff zu liefern; Schmp.: 188-189ºC. TLC (Methylenchlorid-Methanol- Essigsäure 9 : 1 : 1): Rf = 0,55; ¹H-NMR (300 MHz, CDCl&sub3;) δ 7,34-7,26 (m, 5H), 7,07-6,97 (m, 3H), 6,08 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 5,25 (dd, J = 3,2, 9,8 Hz, 1H), 5,10 (s, 2H), 4,30 (m, 1H), 3,36 (m, 1H), 3,26 (m, 2H), 3,06 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 2,36 (m, 1H), 2,09 (m, 1H). DARSTELLUNG 3 Darstellung von (3R,S-cis)-6-Benzyloxycarbonylamino-5-oxo-2,3,4,5,6,7,8-hexahydro- 1H-azepino[3,2,1-hi]chinolin-3-carbonsäuremethylester.
Zu einer Lösung von (3R,S-cis)-6-Amino-5-oxo-2,3,4,5,6,7,8-hexahydro-1H-azepino[3,2,1- hi]chinolin-3-carbonsäuremethylester (0,570 g, 2,1 mmol, hergestellt wie beschrieben in Tetrahedron Letters 36, S. 1593-1596 (1995) und U.S.-Patent 5,504,080 (2. April 1996)) in Methylenchlorid (6 ml) wurden unter Rühren bei 0ºC Benzylchlorformiat (0,6 ml, 4,2 mmol) und Triethylamin (1,2 ml, 8,4 mmol) zugegeben und die resultierende Mischung wurde unter Stickstoff für 30 Minuten gerührt. Die Reaktion wurde mit Wasser gequencht, anschließend zwischen Ethylacetat und 5%iger wäßriger Kaliumbisulfatlösung aufgeteilt. Die wäßrige Phase wurde zweimal mit Ethylacetat rückextrahiert, anschließend wurden die vereinigten organischen Phasen mit gesättigter Natriumchloridlösung gewaschen, getrocknet (Natriumsulfat) und bis zur Trockne eingedampft. Reinigung des Rohproduktes durch Flashchromatographie auf Silikagel (Silikagel 60Å, 230-400 Mesh ASTM, der Marke S/P) unter Elution mit Ethylacetat-Hexan (2 : 1) ergab 0,643 g (76%) der Titelverbindung als einen weißen Schaum. TLC (Methylenchlorid-Methanol, 95 : 5) Rf = 0,8. ¹H-NMR (300 MHz, CDCl&sub3;) δ 7,36-7,25 (m, 5H), 7,13-7,02 (m, 3H), 5,67 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 5,02 (t, J = 9,15, 18,3 Hz, 2H), 4,34 (m, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,16 (m, 1H), 2,69-2,56 (m, 5H), 2,06 (m, 1H). Massenspektrum: m/z 408 (M + H). DARSTELLUNG 4 Darstellung von (3R,S-cis)-6-Benzyloxycarbonylamino-5-oxo-2,3,4,5,6,7,8-hexahydro- 1H-azepino[3,2,1-hi]chinolin-3-carbonsäure.
Zu einer Lösung von (3R,S-cis)-6-Benzyloxycarbonylamino-5-oxo-2,3,4,5,6,7,8-hexahydro- 1H-azepino[3,2,1-hi]chinolin-3-carbonsäuremethylester (0,622 g, 1,53 mmol) in 1,4-Dioxan (10,5 ml) und Wasser (3,5 ml) wurde 1M wäßriges Lithiumhydroxid (2,3 ml, 2,3 mmol) zugegeben und die resultierende Mischung wurde bei Raumtemperatur unter Stickstoff für 1 Stunde gerührt. Die Reaktionsmischung wurde mit einer 5%igen wäßrigen Kaliumbisulfatlösung auf ca. pH 2 angesäuert, anschließend zwischen Ethylacetat und gesättigter Natriumchloridlösung aufgeteilt. Die wäßrige Phase wurde zweimal mit Ethylacetat rückextrahiert und die vereinigten organischen Phasen wurde getrocknet (Natriumsulfat) und eingedampft, um 0,670 g der Titelverbindung zu liefern. TLC (Methylenchlorid-Methanol-Essigsäure, 32 : 1 : 1) Rf = 0,35. ¹H-NMR (300 MHz, CDCl&sub3;) δ 7,38-7,28 (m, 5H), 7,13-7,04 (m, 3H), 5,72 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 5,03 (s, 2H), 4,35 (m, 1H), 3,77-3,67 (m, 5H), 3,10 (m, 1H), 2,72-2,52 (m, 5H), 2,07 (m, 1H), 1,70 (m, 1H). DARSTELLUNG 5 Darstellung von N-(Benzyloxycarbonyl)-L-(N'-methyl-N'-methoxy)aspartamid-β-(tert.- butylester
Zu einer Lösung von N-(Benzyloxycarbonyl)-L-asparaginsäure-β-(tert.-butyl)ester (14,65 g, 45,3 mmol, Bachem) in CH&sub2;Cl&sub2; (150 ml) bei 0ºC (Eisbad) unter einer Stickstoffatmosphäre wurde 1-Hydroxybenzotriazol-Hydrat (7,29 g, 47,6 mmol, Aldrich) zugegeben, gefolgt von 1- Ethyl-3-(3',3'-dimethyl-1'-aminopropyl)carbodiimid-hydrochlorid (9,55 g, 49,8 mmol, Sigma). Nach Rühren bei 0ºC für 15 Min. wurden N,O-Dimethylhydroxylamin-Hydrochlorid (5,10 g, 52,3 mmol, Aldrich) und N-Methylmorpholin (5,8 ml, 53 mmol, Aldrich) zugegeben. Man ließ die Mischung über 3 Stunden auf Raumtemperatur erwärmen, rührte sie anschließend bei Raumtemperatur für 16 Stunden. Die Lösung wurde unter Vakuum konzentriert und der Rückstand zwischen Ethylacetat und 5%igem KHSO&sub4; (jeweils 200 ml) aufgeteilt. Die organische Phase wurden ihrerseits mit 5%iger KHSO&sub4; gesättigter Natriumbicarbonat- und gesättigter Natriumchloridlösung gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und zu einem Öl eingedampft. Das Öl wurde aus Hexan umkristallisiert, um das Titelprodukt (16,10 g, 97% Ausbeute) als einen flaumigen weißen kristallinen Feststoff zu ergeben. TLC (Ethylacetat), einzelner Fleck (UV und PMA): Rf = 0,37.
Eine zu der obigen ähnlichen Vorgehensweise ergab, ausgehend von 29,3 g N- (Benzyloxycarbonyl)-L-asparaginsäure-β-(tert.-butyl)ester (2-fache Erhöhung), 31,18 g (94% Ausbeute) des Titelproduktes. DARSTELLUNG 6 Darstellung von N-(Benzyloxycarbonyl)-L-asparaginsäure-semicarbazon-β-(tert.- butylester
Zu einer Lösung von N-(Benzyloxycarbonyl)-L-(N'-methyl-N'-methoxy)aspartamid-β-(tert.- butylester) (15,50 g, 42,3 mmol) in wasserfreiem Ether (400 ml) bei 0ºC (Eisbad) unter einer Stickstoffatmosphäre wurde tropfenweise eine 1,0 M Lösung von LiAlH&sub4; in Ether (22,0 ml, 22,0 mmol, Aldrich) mit einer solchen Geschwindigkeit zugegeben, daß die Reaktionslösungstemperatur zwischen 0-5ºC gehalten wurde (Zugabezeit 15-20 min.). Nachdem die Zugabe des Lithiumaluminiumhydrid-Reagenz abgeschlossen war, wurde die Mischung bei 0-5ºC für 1 Std. gerührt, anschließend durch die tropfenweise Zugabe einer 0,3 N KHSO&sub4;-Lösung (100 ml) gequencht. Die resultierende Mischung wurde unter Zugabe von ausreichend 5%iger KHSO&sub4;-Lösung (75 ml), um die Feststoffe zu lösen, in einen Schütteltrichter überführt. Die organische Phase wurde abgetrennt und die vereinigten wäßrigen Waschlösungen mit Ether (100 ml) rückextrahiert. Die vereinigten Etherextrakte wurden mit gesättigter NaCl-Lösung gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und im Vakuum unter minimaler Erwärmung konzentriert. TLC (Ethylacetat) : streifiger Fleck (UV und PMA) Rf = 0,48. TLC (Methanol/Methylenchlorid, 1 : 9) Hauptfleck (UV und PMA) : Rf = 0,75.
Das rohe Aldehyd wurde sofort in wäßrigem Ethanol (45 rnl Wasser/105 ml Alkohol) aufgenommen, in ein Eisbad gegeben und mit Natriumacetat (3,82 g, 46,6 mmol) und Semicarbazid-Hydrochlorid (5,20 g, 46,6 mmol, Aldrich) behandelt. Die Mischung wurde bei 0ºC (Eisbad) unter einer Stickstoffatmosphäre für 3 Std. gerührt, auf Raumtemperatur warm werden gelassen und über Nacht (16 Std.) gerührt. Ein Großteils des Ethanols wurde unter Vakuum abgezogen und der Rückstand zwischen Ethylacetat und Wasser (jeweils 100 ml) aufgeteilt. Die organische Phase wurde nacheinander mit 5%iger KHSO&sub4;-, gesättigter Natriumbicarbonat- und gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und bis zur Trockne eingedampft. Das Rohprodukt dieser Reaktion wurde mit demjenigen von zwei ähnlichen Verfahren vereinigt, die ausgingen von 15,40 g und 4,625 g N-(Benzyloxycarbonyl)-L-(N'-methyl-N'-methoxy)aspartamid-β-(tert.- butylester) (insgesamt: 35,525 g, 97 mmol), und diese vereinigten Produkte wurden durch Flashchromatographie auf Silikagel unter Elution mit Aceton/Methylenchlorid (3 : 7), anschließend Methanol-Aceton-Methylenchlorid (0,5 : 3 : 7) gereinigt, um reines Titelprodukt (27,73 g, 78,5%) als einen farblosen Schaum zu ergeben. TLC (MeOH-CH&sub2;Cl&sub2;, 1 : 9): einzelner Fleck (UV und PMA), Rf = 0,51. DARSTELLUNG 7 Darstellung des p-Toluolsulfonatsalzes des L-Asparaginsäure-semicarbazon-β-(tert.- butyl)esters
Zu einer Lösung von N-(Benzyloxycarbonyl)-L-asparaginsäure-semicarbazon-β-(tert.- butyl)ester (13,84 g, 38,0 mmol) in absolutem Ethanol (250 ml) wurde 10% Pd/C (1,50 g, Aldrich) zugegeben und die resultierende Mischung unter einer Wasserstoffatmosphäre (Ballon) gerührt, bis TLC (Methanol/Methylenchlorid, 1 : 9) vollständigen Verbrauch des Ausgangsmaterials anzeigte (60 min.). Bemerkung: Es ist wichtig, diese Reaktion eng zu verfolgen, da das Produkt überreduziert werden kann. Die Mischung wurde durch Celite filtriert und zu einem Öl eingedampft. Das Öl wurde mit Methylenchlorid (2 · 75 ml) ausgetrieben, anschließend mit Methylenchlorid/Toluol (1 : 1,75 ml), um das rohe Amin als einen weißen kristallinen Feststoff zu ergeben. TLC (EtOAc-Pyridin-AcOH-H&sub2;O; 60 : 20 : 5 : 10) einzelner Fleck (UV und PMA) Rf = 0,24. Bemerkung: In diesem TLC-System wird jegliches überreduzierte Produkt unmittelbar unterhalb des gewünschten Produktes auftauchen, Rf = 0,18 (nur PMA).
Das rohe Amin wurde in CH&sub3;CN (60 ml) aufgenommen und mit einer Lösung von p- Toluolsulfonsäure-Monohydrat (7,22 g, 38,0 mmol) in Acetonitril (60 ml) behandelt. Der kristalline Niederschlag wurde gesammelt, mit Acetonitril und Ether gewaschen und luftgetrocknet, um die Titelverbindung (13,95 g, 92% Ausbeute) als einen weißen, kristallinen Feststoff zu ergeben.
Die optische Reinheit dieses Materials wurde durch Umwandlung in das entsprechende Mosher-Amid [1,05 Äquiv. (R)-(-)-α-Methoxy-α-(trifluormethyl)phenylacetylchlorid, 2,1 Äquivalente i-Pr&sub2;NEt in CH&sub2;Cl&sub2;, Raumtemperatur, 30 min.] überprüft. Das gewünschte Produkt hat ein Duplett bei 7,13 ppm (1H, d, J = 2,4 Hz, CH=N), wobei das entsprechende Signal für sein Diastereomer bei 7,07 ppm liegt. Die optische Reinheit der aus dem obigen Verfahren erhaltenen Titelverbindung beträgt typischerweise > 95 : 5.

DARSTELLUNG 8

Assay auf Inhibition von ICE/ced-3-Protease-Familie-Aktivität

A. Bestimmung von IC&sub5;&sub0;-Werten

Fluoreszenz-Enzymassays, die die Aktivität der Verbindungen von Formel 1 nachweisen, unter Verwendung der rekombinanten ICE- und CPP32-Enzyme, wurden im wesentlichen gemäß Thornberry et al. (Nature, 356: 768: 774 (1992)) bzw. Nicholson et al. (Nature, 376: 37-43 (1995)) (hierin durch Bezugnahme miteinbezogen) in Mikrotiterplatten mit 96 Vertiefungen durchgeführt. Das Substrat ist Acetyl-Tyr-Val-Ala-Asp-Amino-5- Methylcumarin (AMC) für den ICE-Assay und Acetyl-Asp-Glu-Val-Asp-Amino-4- Methylcumarin für die CPP32-, Mch2-, Mch3- und Mch5-Assays. Enzymreaktionen wurden in ICE-Puffer (25 mM HEPES, 1 mM EDTA, 0,1% CHAPS, 10% Saccharose, pH 7,5), der 2 mM DTT enthielt, bei Raumtemperatur doppelt laufengelassen. Die Assays wurden durchgeführt durch Vermischen der folgenden Komponenten:
50 ul Enzym ICE, Mch2, Mch5, CPP32 (18,8, 38, 8,1 bzw. 0,153 nM Konzentrationen) oder Mch3 (1 Einheit) in ICE-Puffer, der entweder 8,0 (ICE, Mch2, Mch3, CPP32) oder 20 (Mch5) mM DTT enthielt; 50 ul Verbindung von Formel 1 oder ICE-Puffer (Kontrolle); und 100 ul 20 uM Substrat.
Das Enzym und die zu testende Verbindung von Formel 1 ließ man in den Mikrotiterplattenvertiefungen für 30 Minuten bei Raumtemperatur vor Zugabe von Substrat, um die Reaktion zu initiieren, vorinkubieren. Bildung von fluoreszierendem AMC-Produkt wurde für eine Stunde bei Raumtemperatur durch Messen der Fluoreszenzemission bei 460 nm unter Verwendung einer Anregungswellenlänge von 360 nm überwacht. Die Fluoreszenzveränderung in Duplikat(Kontrolle)-Vertiefungen wurde gemittelt und die Mittelwerte wurden als eine Funktion der Inhibitorkonzentration aufgetragen, um die Inhibitorkonzentration zu bestimmen, die 50% Hemmung (IC&sub5;&sub0;) erzeugt. Die Ergebnisse dieses Assays sind unten in Tabelle 1 angegeben.
Die Referenzverbindung für diesen Assay war Cbz-ValAlaAsp-H und die Werte sind in Tabelle 1 als "Referenz" bezeichnet. TABELLE 1

B. Bestimmung der Dissoziationskonstante Ki und der irreversiblen Geschwindigkeitskonstante k&sub3; für irreversible Inhibitoren

Für die irreversible Inhibition eines ICE/ced-3-Familie-Proteaseenzyms mit einem kompetetiven irreversiblen Inhibitor, unter Verwendung des durch die folgenden Formeln repräsentierten Modells:
Die Produktbildung zum Zeitpunkt t kann ausgedrückt werden als:
in der E, I, EI und E-I das aktive Enzym, den Inhibitor, den nicht-kovalenten Enzym- Inhibitor-Komplex bzw. das kovalente Enzym-Inhibitor-Addukt bezeichnen. Der Ki-Wert ist die gesamte Dissoziationskonstante der reversiblen Bindungsschritte und k&sub3; ist die irreversible Geschwindigkeitskonstante. Die [S]- und Ks-Werte sind die Substratkonzentration bzw. die Dissoziationskonstante des an das Enzym gebundenen Substrats. [E]T ist die Gesamtenzymkonzentration.
Die obigen Gleichungen wurden verwendet, um die Ki- und k&sub3;-Werte eines gegebenen Inhibitors zu bestimmen, der an eine ICE/ced-3-Familien-Protease gebunden ist. So wurde ein kontinuierlicher Assay für 60 Minuten bei verschiedenen Konzentrationen des Inhibitors und des Substrats laufengelassen. Der Assay war im wesentlichen formuliert, wie oben für die Erzeugung der Daten in Tabelle 1 beschrieben, mit der Ausnahme, daß die Reaktion durch Zugabe des Enzyms zur Substrat-Inhibitor-Mischung initiiert wurde. Die Ki- und k&sub3;-Werte wurden durch Simulieren der Produkt-AMC-Bildung als einer Funktion der Zeit gemäß Gleichung I erhalten. Die Ergebnisse dieses zweiten Assays sind unten in Tabelle 2 angegeben.
Die Referenzverbindung für diesen Assay war Cbz-ValAlaAsp-CH&sub2;F und die Werte sind in Tabelle 2 als "Referenz" bezeichnet. TABELLE 2 BEISPIEL 1 (2S-cis)-[5-Benzyloxycarbonylamino-1,2,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1-hi]indol- 2-carbonyl)amino]-4-oxo-butansäure-tert.-butylester-semicarbazon
Zu einer Lösung von (2S-cis)-5[Benzyloxycarbonylamino-1,2,4,5,6,7-hexahydro-4- oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2-carbonsäure (0,375 g, 0,989 mmol) in Methylenchlorid (7 ml) wurde unter Rühren bei 0ºC unter Stickstoff 1-Hydroxybenzotriazol-Hydrat (0,182 g, 1,19 mmol) und 1-Ethyl-3-(3',3'-dimethyl-1'-aminopropyl)carbodiimid-Hydrochlorid (0,284 g, 1,48 mmol) zugegeben. Nach 15 Minuten wurden p-Toluolsulfonatsalz von L- Asparaginsäure-semicarbazon-β-(tert.-butyl)ester (0,86 g, 0,989 mmol) und N- Methylmorpholin (0,163 ml, 1,48 mMol) zugegeben und die resultierende Reaktionsmischung ließ man innerhalb 1 Stunde auf Raumtemperatur kommen. Nach Rühren über Nacht wurde die Reaktionsmischung mit Ethylacetat verdünnt und nacheinander mit 5%iger Kaliumbisulfat- und gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen; über Natriumsulfat getrocknet und bis zur Trockne eingedampft. Reinigung des Rohproduktes durch Flashchromatographie auf Silikagel (Silikagel 60Å, 230-400 Mesh ASTM, der Marke S/P) unter Elution mit 2% Methanol-Methylenchlorid ergab 0,463 g (79%) der Titelverbindung als einen weißen Schaum. TLC (Methylenchlorid-Methanol, 9 : 1: Rf = 0,5. ¹H-NMR (300 MHz, CDCl&sub3;): δ_8,42 (s, 1H), 7,82 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,32 (m, 5H), 7,07 (m, 3H), 5,94 (d, J = 6,3 Hz, 1H), 5,26 (d, J = 9 Hz, 1H), 5,10 (s, 2H), 4,82 (m, 1H), 4,35 (m, 1H), 3,56 (d, J = 18 Hz, 1H), 3,27 (m, 2H), 3,07 (m, 1H), 2,64 (dd, J = 4,7, 15,8 Hz, 1H), 2,44 (dd, J = 6,6, 15,9 Hz, 2H), 2,22 (m, 1H), 1,30 (s, 9H). Massenspektrum: m/z 593 (M + H). BEISPIEL 2 (2-cis)-[5-Benzyloxycarbonylamino-1,2,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1hi]indol-2- carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure-semicarbazon
Zu einer Lösung von (2S-cis)-[5-Benzyloxycarbonylamino-1,2,4,5,6,7-hexahydro-4- oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2-carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure-tert.-butylestersemicarbazon (0,214 g, 0,362 mmol) in Methylenchlorid (1,5 ml) wurde Anisol (0,5 ml, 4,34 mmol) zugegeben, gefolgt von Trifluoressigsäure (0,75 ml). Nach Rühren bei Raumtemperatur unter Stickstoff für 2 Stunden wurde die Reaktionsmischung mit Methylenchlorid verdünnt und eingedampft, anschließend zweimal mit Methylenchlorid ausgetrieben, um die Titelverbindung zu ergeben (0,195 g). TLC (Methylenchlorid-Methanol, 95 : 5), Rf = 0,2. ¹H-NMR (300 MHz, CDCl&sub3;) δ_9,77 (bs, 1H), 8,32 (d, J = 12 Hz, 1H), 8,12 (d, J- 7,8 Hz, 1H), 7,31-7,27 (m, 5H), 7,13-7,04 (m, 3H), 6,64 (m, 1H), 5,32 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 5,12 (s, 2H), 4,86 (m, 1H), 4,41 (m, 1H), 3,56 (d, J = 15 Hz, 1H), 3,25 (m, 2H), 3,10 (m, 2H), 2,64 (m, 2H), 2,28 (m, 2H). BEISPIEL 3 (2S-cis)-5-[Benzyloxycarbonylamino-1,2,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1-hi]indol- 2-carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure
(2S-cis)-5-[Benzyloxycarbonylamino-1,2,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2- carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure-semicarbazon (0,195 g, 0,36 mmol) wurde mit einer 3 : 1 : 1-Lösung aus Methanol-Essigsäure-37% Formaldehyd (2 ml) behandelt und die resultierende Mischung unter Stickstoff für 1,5 Stunden gerührt. Die Reaktionsmischung wurde mit Wasser verdünnt, Methanol durch Verdampfen entfernt, anschließend die restliche Mischung lyophilisiert. Reinigung des Rohproduktes durch Flashchromatographie auf Umkehrphasengel (MCI-Gel, CHP-20P, 75-150 Mikron) unter Elution mit einem 10%-80% Methanol-Wasser-Gradienten ergab 0,073 g (42%) der Titelverbindung als einen weißen Feststoff nach Lyophilisation; Schmp. 101-104ºC. TLC (Methylenchlorid-Methanol- Essigsäure, 97 : 2,5 : 0,5) Rf = 0,45. ¹H-NMR (300 MHz, CDCl&sub3;) δ_7,45 (m, 1H), 7,30 (s, 5H), 7,07 (d, J = 3,3 Hz, 1H), 7,00 (d, J = 4,8 Hz, 2H), 6,12 (m, 1H), 5,17 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 5,07 (s, 2H), 4,49 (m, 1H), 4,28 (m, 1H), 3,46 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 3,30-3,12 (m, 2H), 3,04-2,99 (m, 1H), 2,83-2,76 (m, 1H), 2,46-2,33 (m, 2H), 2,03 (bs, 1H). Massenspektrum: m/z 480 (M + H). BEISPIEL 4 (2S-cis)-[5-Amino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2-carbonyl)- aminol-4-oxo-butansäure-tert.-butylester-semicarbazon
10% Palladium auf Kohlenstoff (0,180 g) wurde zu einer Lösung von (2S-cis)-[5- Benzyloxycarbonylamino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2-carbonyl)- amino]-4-oxo-butansäure-tert.-butylester-semicarbazon (0,308 g, 0,520 mmol) in Methanol (27 ml) zugegeben und die resultierende Mischung, wurde unter Verwendung eines Wasserstoffballons (1 atm, R.T.) für 18 Stunden hydriert. Die Mischung wurde durch Celite filtriert, bis zur Trockne eingedampft, anschließend zweimal mit Toluol ausgetrieben, um die Titelverbindung als einen schmutzig-weißen Feststoff zu ergeben (0,215 g). TLC (Methylenchlorid-Methanol, 9 : 1) Rf = 0,15. ¹H-NMR (30o MHz, CDCl&sub3;) δ 8,53 (s, 1H), 7,89 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,13 (m, 3H), 5,21 (dd, J = 2,3, 10,14 Hz, 1H), 4,82 (m, 1H), 3,52 (m, 1H), 3,24 (dd, J = 10,3, 16,3 Hz, 1H), 3,03 (m, 2H), 2,62 & 2,42 (AB, dd, J = 4,2, 7,1, 15,7 Hz, 2H), 2,19 (m, 1H), 1,32 (s, 9H). BEISPIEL 5 (2S-cis)-[5-(N-Acetyl-(S)-aspartyl-β-tert.-butylester)amino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4- oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2-carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure-tert.-butylestersemicarbazon
Zu einer Lösung von N-Acetylasparaginsäure-β-tert.-butylester (0,120 g, 0,517 mmol) in Methylenchlorid (1,5 ml) wurden unter Rühren bei 0ºC unter Stickstoff 1- Hydroxybenzotriazol-Hydrat (0,086 g, 0,564 mmol) und 1-(3-Dimethylaminopropyl)-3- ethylcarbodiimid-Hydrochlorid (0,135 g, 0,705 mmol) zugegeben. Nach 15 Minuten wurde eine Lösung von (2S-cis)-[5-Amino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2- carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure-tert.-butylester-semicarbazon (0,213 g, 0,47 mmol) in Methylenchlorid (2 ml) zugegeben und die Reaktion ließ man über 1 Stunde auf Raumtemperatur kommen. Nach Rühren über Nacht wurde die Reaktionsmischung mit Ethylacetat verdünnt und nacheinander mit 5%iger Kaliumbisulfat- und gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen; getrocknet (Natriumsulfat) und bis zu Trockne eingedampft. Reinigung des Rohproduktes durch Flashchromatographie aus Silikagel (Silikagel 60Å, 230-400 Mesh ASTM, der Marke S/P) unter Elution mit 5%, anschließend 10 % Methanol-Methylenchlorid ergab 0,126 g (41%) der Titelverbindung als einen weißen Feststoff. TLC (Methylenchlorid-Methanol, 9 : 1) Rf = 0,4. ¹H-NMR (300 MHz, CDCl&sub3;) δ 9,63 (s, 1H), 8,32 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,82 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 7,09 (m, 1H), 7,00 (m, 2H), 5,18 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 4,86 (m, 1H), 4,39 (m, 1H), 3,01 (m, 1H), 2,92 (dd, J = 4,2, 14,7 Hz, 1H), 2,68 (d, J = 12,3 Hz, 1H), 2,52 (m, 2H), 2,51 (m, 2H), 2,03 (s, 3H), 1,39 (s, 9H), 1,24 (s, 9H). BEISPIEL 6 (2S-cis)-[5-(N-Acetyl-(S)-aspartyl)amino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxaazepino[3,2,1- hi]indol-2-carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure-semicarbazon
Zu einer Lösung von (2S-cis)-[5-(N-Acetyl-(S)-aspartyl-β-tert.-butylester)amino- 1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2-carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure tert.-butylester-semicarbazon (0,117 g, 0,178 mmol) in Methylenchlorid (1 ml) wurde Anisol (0,5 ml) zugegeben, gefolgt von Trifluoressigsäure (1 ml). Nach Rühren bei Raumtemperatur unter Stickstoff für 2 Stunden wurde die Reaktionsmischung mit Methylenchlorid verdünnt und eingedampft, anschließend zweimal mit Methylenchlorid ausgetrieben, um die Titelverbindung zu ergeben (0,099 g). TLC (Methylenchlorid-Methanol-Essigsäure, 13 : 6 : 1) Rf = 0,2. Massenspektrum: m/z 560 (M + H). BEISPIEL 7 (2S-cis)-[5-(N-Acetyl-(S)-aspartyl)amino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1- hi]indol-2-carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure
(2S-cis)-[5-(N-Acetyl-(S)-aspartyl)amino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1- hi]indol-2-carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure-semicarbazon (0,097 g, 0,177 mmol) wurde mit einer 3 : 1 : 1-Lösung aus Methanol-Essigsäure-37% Formaldehyd (2 ml) behandelt und die resultierende Mischung unter Stickstoff für 1,5 Stunden gerührt. Die Reaktionsmischung wurde anschließend mit Wasser verdünnt, Methanol durch Verdampfen entfernt, anschließend die restliche Mischung lyophilisiert. Reinigung des Rohproduktes durch Flashchromatographie auf Umkehrphasengel (MCI-Gel, CHP-20P, 75-150 Mikron) unter Elution mit einem 10%-80% Methanol-Wasser-Gradienten ergab 0,050 g (56%) der Titelverbindung als einen weißen Feststoff nach Lyophilisation; Schmp. 160-175ºC (Zersetzung). TLC (Methylenchlorid-Methanol-Essigsäure, 13 : 6 : 1) Rf = 0,3. Massenspektrum: m/z 503 (M + H). BEISPIEL 8 (2S-cis)-[5-Succinylamino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2- carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure tert.-butylester-semicarbazon
Zu einer Lösung von (2S-cis)-[5-Amino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1- hi]indol-2-carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure tert.-butylester-semicarbazon (0,197 g, 0,435 mmol) in Methylenchlorid (6 ml) wurde unter Rühren bei 0ºC unter Stickstoff Bemsteinsäureanhydrid (0,057 g, 0,566 mmol) zugegeben, gefolgt von Pyridin (0,052 ml, 0,653 mmol). Nach Rühren bei Raumtemperatur unter Stickstoff für 3 Stunden wurde die Reaktionsmischung mit Ethylacetat verdünnt, nacheinander mit 5%iger Kaliumbisulfat- und gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen; getrocknet (Natriumsulfat) und bis zur Trockne eingedampft. Reinigung des Rohproduktes durch Flashchromatographie auf Silikagel (Silikagel 60Å, 230-400 Mesh ASTM, der Marke S/P) unter Elution mit 10% Methanol- Methylenchlorid, anschließend 80 : 19 : 1 Methylenchlorid-Methanol-Essigsäure, ergab 0,216 g (88%) der Titelverbindung als einen weißen Feststoff. TLC (Methylenchlorid-Methanol- Essigsäure, 8 : 1 : 1) Rf = 0,5. Massenspektrum: m/z 557 (M - H). BEISPIEL 9 (2S-cis)-[5-Succinylamino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2- carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure-semicarbazon
Zu einer Lösung von (2S-cis)-[5-Succinylamino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1- hi]indol-2-carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure-tert.-butylester-semicarbazon (0,191 g, 0,342 mmol) in Methylenchlorid (1 ml) wurde Anisol (0,5 ml) zugegeben, gefolgt von Trifluoressigsäure (1 ml). Nach Rühren bei Raumtemperatur unter Stickstoff für 2 Stunden wurde die Reaktionsmischung mit Methylenchlorid verdünnt und eingedampft, dann zweimal mit Methylenchlorid ausgetrieben, um die Titelverbindung (0,210 g) zu ergeben. TLC (Methylenchlorid-Methanol-Essigsäure, 8 : 1 : 1) Rf = 0,4. Massenspektrum: m/z 503 (M + H). BEISPIEL 10 (2S-cis)-[5-Succinylamino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2- carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure
(2S-cis)-[5-Succinylamino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2-carbonyl)- amino]-4-oxo-butansäure-semicarbazon (0,208 g, ca. 0,342 mmol) wurde mit einer 3 : 1 : 1- Lösung aus Methanol-Essigsäure-37% Formaldehyd (3 ml) behandelt und die resultierende Mischung unter Stickstoff bei 1,5 Stunden gerührt. Die Reaktionsmischung wurde anschließend mit Wasser verdünnt, Methanol durch Verdampfen entfernt, anschließend die restliche Mischung lyophilisiert. Reinigung des Rohproduktes durch Flashchromatographie auf Umkehrphasengel (MCI-Gel, CHP-20P, 75-150 Mikron) unter Elution mit einem 10%-80 % Methanol-Wasser-Gradienten ergab 0,064 g (42%) der Titelverbindung als einen weißen Feststoff nach Lyophilisation; Schmp. 145-160ºC (Zersetzung). TLC (Methylenchlorid- Methanol-Essigsäure, 8 : 1 : 1) Rf = 0,45. Massenspektrum: m/z 446 (M + H). BEISPIEL 11 (2S-cis)-[5-(N-Benzyloxycarbonyl-(S)-aspartyl-β-tert.-butylester)amino-1,2,3,4,5,6,7- hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1,-hi]indol-2-carbonyl)-amino)-4-oxo-butansäure-tert.- butylester-semicarbazon
Zu einer Lösung von N-Benzyloxycarbonyl-(S)-aspartyl-β-tert.-butylester (0,169 g, 0,521 mmol) in Methylenchlorid (1,5 ml) wurden unter Rühren bei 0ºC unter Stickstoff 1- Hydroxybenzotriazol-Hydrat (0,087 g, 0,569 mmol) und 1-(3-Dimethylaminopropyl)-3- ethylcarbodiimid-Hydrochlorid (0,136 g, 0,711 mmol) zugegeben. Nach 15 Minuten wurde eine Lösung von (2S-cis)-[5-Amino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1,-hi]indol-2- carbonyl)-amino)-4-oxo-butansäure tert.-butylester-semicarbazon (0,127 g, 0,474 mmol) in Methylenchlorid (2 ml) zugegeben und man ließ die Reaktion innerhalb 1 Stunde auf Raumtemperatur kommen. Nach Rühren über Nacht wurde die Reaktionsmischung mit Ethylacetat verdünnt und nacheinander mit 5%iger Kaliumbisulfat- und gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen; getrocknet (Natriumsulfat) und bis zur Trockne eingedampft. Reinigung des Rohproduktes durch Flashchromatographie auf Silikagel (Silikagel 60Å, 230-400 Mesh ASTM, der Marke SIP) unter Elution mit 2%, anschließend 5 % Methanol-Methylenchlorid ergab 0,244 g (67%) der Titelverbindung als einen schmutzigweißen Feststoff. TLC (Methylenchlorid-Methanol, 9 : 1) Rf = 0,55. ¹H-NMR (300 MHz, CDCl&sub3;) δ 9,13 (s, 1H), 7,85 (d, J = 6 Hz, 1H), 7,56 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 7,23 (m, 5H), 7,08 (m, 1H), 7,00 (m, 2H), 5,13 (m, 3H), 4,77 (m, 1H), 4,62 (m, 1H), 4,43 (m, 1H), 3,60 (d, J = 16 Hz, 1H), 3,22 (m, 2H), 2,98 (m, 1H), 2,83 (d, J = 15,3 Hz, 1H), 2,65 & 2,36 (AB, dd, J = 4,2, 7,7, 16,9 Hz, 2H), 2,42 (m, 1H), 2,10 (m, 1H), 1,35 (s, 9H), 1,24 (s, 9H). BEISPIEL 12 (2S-cis)-[5-(N-Benzyloxycarbonyl-(S)-aspartylamino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4- oxoazepino[3,2,1,-hi]indol-2-carbonyl)-amino)-4-oxo-butansäure-tert.-butylestersemicarbazon
Zu einer Lösung von (2S-cis)-[5-N-Benzyloxycarbonyl)-(S)-aspartyl-β-tert.-butylester)amino- 1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2-carbonyl)-amino]-4-oxo-Butansäure tert.-butylester-semicarbazon (0,217 g, 0,289 mmol) in Methylenchlorid (1 ml) wurde Anisol (0,5 ml) zugegeben, gefolgt von Trifluoressigsäure (1 ml). Nach Rühren bei Raumtemperatur unter Stickstoff für 3 Stunden wurde die Reaktionsmischung mit Methylenchlorid verdünnt und eingedampft, anschließend zweimal mit Methylenchlorid ausgetrieben, um die Titelverbindung (0,193 g) zu ergeben. TLC (Methylenchlorid-Methanol, 9 : 1) Rf = 0,35. Massenspektrum: m/z 652 (M + H). BEISPIEL 13 (2S-cis)-[5-(N-Benzyloxycarbonyl-(S)-aspartyl)amino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4- oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2-carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure
(2S-cis)-[5-(N-Benzyloxycarbonyl-(S)-aspartyl)amino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4- oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2-carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure-semicarbazon (0,191 g, 0,29 mmol) wurde mit einer 3 : 1 : 1-Lösung aus Methanol-Essigsäure-37% Formaldehyd (2 ml) behandelt und die resultierende Mischung wurde unter Stickstoff für 2 Stunden gerührt. Die Reaktionsmischung wurde anschließend mit Wasser verdünnt, Methanol durch Verdampfen entfernt, anschließend die restliche Mischung lyophilisiert. Reinigung des Rohproduktes durch Flashchromatographie auf Umkehrphasengel (MCI-Gel, CHP-20P, 75-150 Mikron) unter Elution mit einem 10%-80% Methanol-Wasser-Gradienten ergab 0,111 g (64%) der Titelverbindung als einen weißen Feststoff nach Lyophilisation; Schmp. 140-144ºC (Zersetzung). TLC (Methylenchlorid-Methanol, 9 : 1) Rf = 0,4. Massenspektrum: m/z 593 (M + H). BEISPIEL 14 (2S-cis)-[5-Dihydrocinnamylamino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1-hi]indol- 2-carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure tert.-butylester-semicarbazon
Zu einer Lösung von Dihydrozimtsäure (0,169 g, 0,521 mmol) in Methylenchlorid (1,5 ml) wurden unter Rühren bei 0ºC unter Stickstoff 1-Hydroxybenzotriazol-Hydrat (0,088 g, 0,576 mmol) und 1-(3-Dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimid-Hydrochlorid (0,127 g, 0,665 mmol) zugegeben. Nach 15 Minuten wurde eine Lösung von (2S-cis)-[5-Amino-1,2,3,4,5,6,7- hexahydro-4-oxoazepino [3,2,1-hi]indol-2-carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure-tert.- butylester-semicarbazon (0,203 g, 0,443 mmol) in Methylenchlorid (2 ml) zugegeben und man ließ die Reaktion innerhalb 1 Stunde auf Raumtemperatur kommen. Nach Rühren über Nacht wurde die Reaktionsmischung mit Ethylacetat verdünnt und nacheinander mit 5%-iger Kaliumbisulfat- und gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen; getrocknet (Natriumsulfat) und bis zur Trockne eingedampft. Reinigung des Rohproduktes durch Flashchromatographie auf Silikagel (Silikagel 60Å, 230-400 Mesh ASTM, der Marke S/P) unter Elution mit 2, anschließend 5% Methanol-Methylenchlorid ergab 0,208 g (79%) der Titelverbindung als einen schmutzig-weißen Feststoff. TLC (Methylenchlorid-Methanol, 9 : 1) Rf = 0,7. ¹H-NMR (300 MHz, CDCl&sub3;) δ 8,82 (s, 1H), 7,72 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,19 (m, 5H), 7,06 (m, 1H), 7,01 (m, 2H), 6,76 (d, J = 6,3, 1H), 5,23 (d, J = 8,4 Hz, 1HO), 4,84 (m, 1H), 4,50 (m, 1H), 3,48 (m, 1H), 3,26 (m, 2H), 3,05 (m, 1H), 2,94 (m, 2H), 2,53 (m, 4H), 2,28 (m, 1H), 2,06 (m, 1H), 1,29 (s, 9H). Massenspektrum: m/z 591 (M + H). BEISPIEL 15 (2S-cis)-5(Dihydrocinnamylamino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1-hi]indol- 2-carbonyl)-amino)-4-oxo-butansäure-semicarbazon
Zu einer Lösung (2S-cis)-[5-Dihydrocinnamylamino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4- oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2-carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure-tert.-butylestersemicarbazon (0,189 g, 0,320 mmol) in Methylenchlorid (1 ml) wurde Anisol (0,5 ml) zugegeben, gefolgt von Trifluoressigsäure (1 ml). Nach Rühren bei Raumtemperatur unter Stickstoff für 3 Stunden wurde die Reaktionsmischung mit Methylenchlorid verdünnt und eingedampft, anschließend zweimal mit Methylenchlorid ausgetrieben, um die Titelverbindung (0,183 g) zu ergeben. TLC (Methylenchlorid-Methanol, 9 : 1) Rf = 0,25. Massenspektrum: m/z 535 (M + H). BEISPIEL 16 (2S-cis)-[5-Dihydrocinnamylarnino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1-hi]indol- 2-carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure
(2S-cis)-[5-Dihydrocinnamylamino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2- carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure-semicarbazon (0,181 g, ca. 0,320 mmol) wurde mit einer 3 : 1 : 1-Lösung aus Methanol-Essigsäure-37 - % Formaldehyd (2 ml) behandelt und die resultierende Mischung unter Stickstoff für 4 Stunden gerührt. Die Reaktionsmischung wurde anschließend mit Wasser verdünnt, Methanol durch Verdampfen entfernt, anschließend die restliche Mischung lyophilisiert. Reinigung des Rohproduktes durch Flashchromatographie auf Umkehrphasengel (MCI-Gel, CHP-20P, 75-150 Mikron) unter Elution mit einem 10% -80% Methanol-Wasser-Gradienten ergab 0,075 g (47%) der Titelverbindung als einen weißen Feststoff nach Lyophilisation; Schmp. 78-81ºC. TLC (Methylenchlorid-Methanol, 9 : 1) Rf = 0,45. ¹H-NMR (300 MHz, DMSO d6) δ 8,58 (m, 1H), 8,30 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,24 (m, 5H), 7,08 (m, 2H), 6,99 (m, 1H), 5,04 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 4,39 (m, 1H), 4,19 (m, 1H), 3,46 (m, 1H), 3,05 (m, 2H), 2,93 (d, J = 16,8 Hz, 2H), 2,83 (m, 2H), 2,00 (d, J = 5,1 Hz, 2H). Massenspektrum: m/z 478 (M + H). BEISPIEL 17 (2S-cis)-[5-Acetylamino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2- carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure tert.-butylester-semicarbazon
Zu einer Lösung von (2S-cis)-[5-Amino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1- hi]indol-2-carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure tert.-butylester-semicarbazon (0,222 g, 0,490 mmol) in Pyridin (3 ml) wurde bei Raumtemperatur unter Stickstoff Essigsäureanhydrid (0,07 ml, 0,735 mmol) zugegeben. Nach Rühren über Nacht wurde die Reaktionsmischung mit Methylenchlorid verdünnt und eingedampft, um einen Schaum zu ergeben. Dieser wurde in Ethylacetat aufgenommen und nacheinander mit 5%-iger Kaliumbisulfat- und gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen; getrocknet (Natriumsulfat) und bis zur Trockne eingedampft, um 0,130 g (53%) der Titelverbindung aus einen schmutzig-weißen Feststoff zu ergeben. TLC (Methylenchlorid-Methanol, 9 : 1) Rf = 0,55. ¹H-NMR (300 MHz, CDCl&sub3;) δ 8,75 (s, 1H), 7,75 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,08 (m, 1H), 7,01 (m, 2H), 6,87 (d, J = 6,3 Hz, 1H), 5,25 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 4,84 (m, 1H), 4,52 (m, 1H), 3,50 (m, 1H), 3,28 (m, 2H), 3,02 (m, 1H), 2,55 & 2,46 (AB, dd, J = 4,2, 7,1, 15,7 Hz, 2H), 2,36 (m, 1H), 2,18 (m, 1H), 2,02 (s, 3H), 1,31 (s, 9H). BEISPIEL 18 (2S-cis)-[5-Acetylamino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2- carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure-semicarbazon
Zu einer Lösung von (2S-cis)-[5-Acetylamino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1- hi]indol-2-carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure tert.-butylester-semicarbazon (0,112 g, 0,224 mmol) in Methylenchlorid (/ml) wurde Anisol (0,5 ml) zugegeben, gefolgt von Trifluoressigsäure (1 ml). Nach Rühren bei Raumtemperatur unter Stickstoff für 2,5 Stunden wurde die Reaktionsmischung mit Methylenchlorid verdünnt und eingedampft, anschließend zweimal mit Methylenchlorid ausgetrieben, um die Titelverbindung (0,117 g) zu ergeben. TLC (Methylenchlorid-Methanol, 9 : 1) Rf = 0,15. Massenspektrum: m/z 445 (M + H). BEISPIEL 19 (2S-cis)-[5-Acetylamino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2- carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure
(2S-cis)-[5-Acetylamino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2-carbonyl)- amino]-4-oxo-butansäure-semicarbazon (0,115 g, ca. 0,224 mmol) wurde mit einer 3 : 1 : 1- Lösung aus Methanol-Essigsäure-37% Formaldehyd (2 ml) behandelt und die resultierende Mischung unter Stickstoff für 5 Stunden gerührt. Die Reaktionsmischung wurde mit Wasser verdünnt, Methanol durch Verdampfen entfernt, anschließend die restliche Mischung lyophilisiert. Reinigung des Rohproduktes durch Flashchromatographie auf Umkehrphasengel (MCI-Gel, CHP-20P, 75-150 Mikron) unter Elution mit einem 10%-80% Methanol-Wasser- Gradienten ergab 0,044 g (51%) der Titelverbindung als einen weißen Feststoff nach Lyophilisation; Schmp. 210-215ºC (Zersetzung). TLC (Methylenchlorid-Methanol- Essigsäure, 44 : 5 : 1) Rf = 0,45. Massenspektrum: m/z 388 (M + H). BEISPIEL 20 (2S-cis)-[5-(1-Naphthoyl)amino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2- carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure tert.-butylester-semicarbazon
Zu einer Lösung von 1-Naphthoesäure (0,072 g, 0,417 mmol) in Methylenchlorid (1,5 ml) wurde unter Rühren bei 0ºC unter Stickstoff 1-Hydroxybenzotriazol-Hydrat (0,077 g, 0,501 mmol) und 1-(3-Dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimid-Hydrochlorid (0,120 g, 0,626 mmol) zugegeben. Nach 15 Minuten wurde eine Lösung von (2S-cis)-[5-Amino-1,2,3,4,5,6,7- hexahydro-4-oxoazepino [3,2,1-hi]indol-2-carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure-tert.- butylester-semicarbazon (0,189 g, 0,147 mmol) in Methylenchlorid (2 ml) zugegeben und man ließ die Lösung innerhalb 1 Stunde auf Raumtemperatur kommen. Nach Rühren für insgesamt 5 Stunden wurde die Reaktionsmischung mit Ethylacetat verdünnt und nacheinander mit 5%iger Kaliumbisulfat- und gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen, getrocknet (Natriumsulfat) und bis zur Trockne eingedampft. Reinigung des Rohproduktes durch Flashchromatographie auf Silikagel (Silikagel 60Ä, 230-400 Mesh ASTM, der Marke S/P) unter Elution mit 5% Methanol-Methylenchlorid ergab 0,168 g (66%) der Titelverbindung als einen schmutzig-weißen Feststoff; Schmp. 103-105ºC (Zersetzung). TLC (Methylenchlorid-Methanol, 9 : 1) Rf = 0,6. Massenspektrum: m/z 613 (M + H). ¹H-NMR (300 MHz, CDCl&sub3;) δ 9,09 (bs, 1H), 8,38 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,82-7,93 (m, 3H), 7,70 (d, J = 6,3 Hz, 1H), 7,45-7,58 (m, 3H), 7,37 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,06-7,15 (m, 4H), 5,30 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 4,80-4,85 (m, 2H), 3,57 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 3,30-3,45 (m, 2H), 3,16 (m, 1H), 2,59-2,65 (m, 2H), 2,27-2,49 (m, 2H), 1,29 (s, 9H). BEISPIEL 21 (2S-cis)-[5-(1-Naphthoyl)amino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2- carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure-semicarbazon
Zu einer Lösung von (2S-cis)-[5-(1-Naphthoyl)amino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4- oxo azepino[3,2,1-hi]indol-2-carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure-tert.-butylestersemicarbazon (0,106 g, 0,173 mmol) in Methylenchlorid (1 ml) wurde Anisol (0,5 ml) zugegeben, gefolgt von Trifluoressigsäure (1 ml). Nach Rühren bei Raumtemperatur unter Stickstoff für 3 Stunden wurde die Reaktionsmischung in Methylenchlorid verdünnt und eingedampft, anschließend zweimal mit Methylenchlorid ausgetrieben, um die Titelverbindung (0,110 g) zu ergeben. TLC (Methylenchlorid-Methanol, 9 : 1) Rf = 0,3. BEISPIEL 22 (2S-cis)-[5-(1-Naphthoyl)amino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2- carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure
(2S-cis)-[5-(1-Naphthoyl)amino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2- carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure-semicarbazon (0,110 g, ca. 0,173 mmol) wurde mit einer 3 : 1 : 1-Lösung aus Methanol-Essigsäure-37% Formaldehyd (3 ml) behandelt und die resultierende Mischung unter Stickstoff für 5 Stunden gerührt. Die Reaktionsmischung wurde anschließend mit Wasser verdünnt, Methanol durch Verdampfen entfernt, anschließend die restliche Mischung lyophilisiert. Reinigung des Rohproduktes durch Flashchromatographie auf Silikagel (Silikagel 60Å, 230-400 Mesh ASTM, der Marke S/P) unter Elution mit einem 5%-20% Methanol-Methylenchlorid-Gradienten ergab 0,076 g (86%) der Titelverbindung als einen weißen Feststoff; Schmp. 202-203ºC (Zersetzung). TLC (Methylenchlorid-Methanol- Essigsäure, 20 : 1 : 1) Rf = 0,3. Massenspektrum: m/z 498 (M - H). ¹H-NMR (300 MHz, CDCl&sub3;) δ 9,38 (bs, 1H), 8,94 (m, 1H), 8,56 (m, 1H), 8,36 (m, 1H), 7,94-8,02 (m, 2H), 7,68 (d, J = 6,9 Hz, 1H), 7,51-7,59 (m, 3H), 7,07-7,13 (m, 2H), 6,97 (m, 1H), 5,20 (d, J = 10,5, 1 Hz), 4,67 (m, 1H), 4,15 (m, 1H), 3,49 (m, 1H), 2,95-3,23 (m, 2H), 2,53 (m, 1H), 2,22-2,34 (m, 2H). BEISPIEL 23 (2S-cis)-[5-Benzoylamino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2- carbonyl)-amino}-4-oxo-butansäure tert.-butylester-semicarbazon
Zu einer Lösung von (2S-cis)-[5-Amino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1- hi]indol-2-carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure tert.-butylester-semicarbazon (0,121 g, 0,264 mmol) in Methylenchlorid (2,5 ml) wurde unter Rühren bei 0ºC unter Stickstoff Triethylamin (0,055 ml, 0,396 mmol) zugegeben, gefolgt von Benzoylchlorid (0,037 ml, 0,317 mmol). Nach Rühren bei Raumtemperatur unter Stickstoff für 1 Stunde wurde die Reaktionsmischung mit Ethylacetat verdünnt und nacheinander mit 5%iger Kaliumbisulfat-, gesättigter Natriumbicarbonat- und gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen, getrocknet (Natriumsulfat) und bis zur Trockne eingedampft. Reinigung des Rohproduktes durch Flashchromatographie auf Silikagel (Silikagel 60Å, 230-400 Mesh ASTM, der Marke S/P) unter Elution mit 10% Hexan-Ethylacetat, 100% Ethylacetat, anschließend 10% Methanol- Ethylacetat ergab 0,073 g (49%) der Titelverbindung als einen schmutzig-weißen Feststoff. TLC (Methylenchlorid-Methanol, 9 : 1). Rf = 0,7. Massenspektrum: m/z 563 (M + H). ¹H-NMR (300 MHz, CDCl&sub3;) δ 8,61 (bs, 1H), 7,83-7,86 (m, 2H), 7,47-7,53 (m, 3H), 7,06-7,12 (m, 3H), 5,30 (dd, J = 2,2, 7,8 Hz, 1H), 4,89 (m, 1H), 4,72 (m, 1H), 3,60 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 3,36 (m, H), 3,19 (m, 1H), 2,69 (dd, J = 4,4, 11,7 Hz, 1H), 2,52 (m, 1H), 2,29 (m, 1H), 1,34 (s, 9H). BEISPIEL 24 (2S-cis)-[5-Benzoylamino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2- carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure-semicarbazon
Zu einer Lösung von (2S-cis)-[5-Benzoylamino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1- hi]indol-2-carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure-tert.-butylester-semicarbazon (0,064 g, 0,114 mmol) in Methylenchlorid (1 ml) wurde Anisol (0,5 ml) zugegeben, gefolgt von Trifluoressigsäure (1 ml). Nach Rühren bei Raumtemperatur unter Stickstoff für 2,5 Stunden wurde die Reaktionsmischung mit Ethylacetat verdünnt und eingedampft, um die Titelverbindung (0,070 g) zu ergeben. TLC (Methylenchlorid-Methanol, 4 : 1) Rf = 0,4. Massenspektrum: m/z 507 (M + H). BEISPIEL 25 (2S-cis)-[5-Benzoylamino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2- carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure
(2S-cis)-[5-Benzoylamino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2-carbonyl)- amino]-4-oxo-butansäure-semicarbazon (0,070 g, ca. 0,114 mmol) wurde mit einer 3 : 1 : 1- Lösung aus Methanol-Essigsäure-37% Formaldehyd (3 ml) behandelt und die resultierende Mischung unter Stickstoff für 3,5 Stunden gerührt. Die Reaktionsmischung wurde anschließend mit Wasser verdünnt, Methanol durch Verdampfen entfernt, anschließend die restliche Mischung lyophilisiert. Reinigung des Rohproduktes durch Flashchromatographie auf Silikagel (Silikagel 60Å, 230-400 Mesh ASTM, der Marke S/P) unter Elution mit 10 und 20% Methanol-Methylenchlorid ergab 0,042 g (82%) der Titelverbindung als einen weißen Feststoff; Schmp. 204-205ºC (Zersetzung). TLC (Methylenchlorid-Methanol, 4 : 1) Rf = 0,4. Massenspektrum: m/z 448 (M - H). ¹H-NMR (300 MHz, DMSO-d&sub6;) δ 8,84 (m, 1H), 8,53 (m, 1H), 7,91-7,95 (m, 2H), 7,46-7,58 (m, 3H), 7,11 (m, 2H), 6,99 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 5,14 (d, 10,2 Hz, 1H), 4,62 (m, 1H), 4,23 (m, 1H), 3,48 (m, 1H), 3,12-3,18 (m, 2H), 2,99 (m, 1H), 2,58 (m, 1H), 2,12-2,46 (m, 3H). BEISPIEL 26 (3R,S-cis)-6-Benzyloxycarbonylamino-5-oxo-2,3,4,5,6,7,8-hexahydro-1H-azepino[3,2,1- hi]chinolin-3-carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure tert.-butylester-semicarbazon
Zu einer Lösung von (3R,S-cis)-6-Benzyloxycarbonylamino-5-oxo-2,3,4,5,6,7,8-hexahydro- 1H-azepino[3,2,1-hi]chinolin-3-carbonsäure (0,604 g, 1,5 mmol) in Methylenchlorid (12 ml) wurden unter Rühren bei 0ºC unter Stickstoff 1-Hydroxybenzotriazol-Hydrat (0,282 g, 1,8 mmol) und 1-(3-Dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimid-Hydrochlorid (0,442 g, 3 mmol) zugegeben. Nach 15 Minuten wurden p-Toluolsulfonatsalz von L-Asparaginsäuresemicarbazon-β-tert.-butylester (0,60 g, 1,5 mmol) und N-Methylmorpholin (0,25 ml, 3 mmol) zugegeben und man ließ die Mischung innerhalb 1 Stunde auf Raumtemperatur kommen. Nach Rühren für eine zusätzliche Stunde wurde die Reaktionsmischung mit Ethylacetat verdünnt und nacheinander mit 5%iger Kaliumbisulfat- und gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen; getrocknet (Natriumsulfat) und bis zur Trockne eingedampft. Reinigung des Rohproduktes durch Flashchromatographie auf Silikagel (Silikagel 60Å, 230-400 Mesh ASTM, der Marke S/P) unter Elution mit 10% Methanol- Methylenchlorid ergab 0,523 g (56%) der Titelverbindung als einen weißen Schaum. TLC (Methylenchlorid-Methanol, 9 : 1) Rf = 0,65. ¹H-NMR (300 MHz, CDCl&sub3;) δ 9,89 (m, 1H), 7,72 (m, 1H), 7,92 (d, J = 9 Hz, 1H), 7,65 (d, J = 8,1 Hz. 1H), 7,32-7,28 (m, 5H), 7,12 (s, 1H), 7,07 (d, J = 5,7 Hz, 2H), 6,03 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 5,84 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 5,03 (s, 2H), 5,01 (m, 1H), 4,80 (m, 1H), 4,31 (m, 1H), 2,98 (m, 1H), 2,75-2,41 (m, 7H), 2,12 (m, 1H), 1,77 (m, 1H), 1,39 (s, 9H). BEISPIEL 27 (3R,S-cis)-6-Benzyloxycarbonylamino-5-oxo-2,3,4,5,6,7,8-hexahydro-1H-azepino[3,2,1- hi]chinolin-3-carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure-seinicarbazon
Zu einer Lösung von (3R,S-cis)-6-Benzyloxycarbonylamino-5-oxo-2,3,4,5,6,7,8-hexahydro- 1H-azepino[3,2,1-hi]chinolin-3-carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure-tert.-butylestersemicarbazon (0,200 g, 0,33 mmol) in Methylenchlorid (1 ml) wurde Anisol (0,5 ml, 4,62 mmol) zugegeben, gefolgt von Trifluoressigsäure (1 ml). Nach Rühren bei Raumtemperatur unter Stickstoff für 1,5 Stunden wurde die Reaktionsmischung in Methylenchlorid verdünnt und eingedampft, anschließend zweimal mit Methylenchlorid azeotropiert, um die Titelverbindung (0,248 g) zu ergeben. TLC (Methylenchlorid-Methanol-Essigsäure, 8 : 1 : 1) Rf = 0,2. Massenspektrum: m/z 549 [M - H]&supmin;. BEISPIEL 28 (3R,S-cis)-6-Benzyloxycarbonylamino-5-oxo-2,3,4,5,6,7,8-hexahydro-1H-azepino[3,2,1- hi]chinolin-3-carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure
(3R,S-cis)-6-Benzyloxycarbonylamino-5-oxo-2,3,4,5,6,7,8-hexahydro-1H-azepino[3,2,1- hi]chinolin-3-carbonyl)-amino]-4-oxo-butansäure-semicarbazon (0,245 g, ca. 0,33 mmol) wurde mit einer 3 : 1 : 1-Lösung aus Methanol-Essigsäure-37% Formaldehyd (3 ml) behandelt und die resultierende Mischung unter Stickstoff für 1,5 Stunden gerührt. Die Reaktionsmischung wurde mit Wasser verdünnt, Methanol durch Verdampfen entfernt, anschließend die restliche Mischung lyophilisiert. Reinigung des Rohproduktes durch Flashchromatographie auf Umkehrphasengel (MCI-Gel, CHP-20P, 75-150 Mikron) unter Elution mit einem 10%-80% Methanol-Wasser-Gradienten ergab 0,090 g (60%) der Titelverbindung als einen weißen Feststoff nach Lyophilisation; Schmp. 120-123ºC (Zersetzung). TLC (Methylenchlorid-Methanol-Essigsäure, 32 : 1 : 1) Rf = 0,45. ¹H-NMR (300 MHz, DMSO d6) δ 8,67 (m, 1H), 7,79 (m, 1H), 7,57 (m, 1H), 7,37-7,27 (m, 5H), 7,17-7,08 (m, 3H), 5,44 (m, 1H), 4,95 (s, 2H), 4,70 (m, 1H), 4,07 (m, 1H), 3,92 (m, 1H), 3,16 (m, 1H), 2,98 (m, 1H), 2,75-2,41 (m, 7H), 2,25 (m, 1H), 2,11 (m, 1H), 1,29 (m, 1H). Massenspektrum: m/z 492 [M - H]&supmin;. BEISPIEL 29 3{(2S-cis)-[5-Benzyloxycarbonylamino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1- hi]indol-2-carbonyl)-amino]}-5-fluor-4-hydroxy-pentansäure tert.-butylester
Zu einer Lösung von (2S-cis)-5-Benzyloxycarbonylamino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4- oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2-carbonsäure (0,373 g, 0,98 mmol) in Methylenchlorid (3 ml) wurde unter Rühren bei 0ºC unter Stickstoff 1-Hydroxybenzotriazol-Hydrat (0,151 g, 0,98 mmol) und 1-(3-Dimethylaminopropyl-3-ethylcarbodiimid-Hydrochlorid (0,283 g, 1,47 mmol) zugegeben. Nach 15 Minuten wurde 3-Amino-4-hydroxy-5-fluorpentansäure-tert.- Butylester (0,204 g, 0,98 mmol hergestellt wie beschrieben in Tetrahedron Letters 35, S. 9693-9696 (1994)) zugegeben und man ließ die Mischung innerhalb 1 Stunde auf Raumtemperatur kommen. Nach Rühren über Nacht wurde die Reaktionsmischung mit Ethylacetat verdünnt und nacheinander mit 5%-iger Kaliumsulfat- und gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen; getrocknet (Natriumsulfat) und bis zur Trockne eingedampft. Reinigung des Rohproduktes durch Flashchromatographie auf Silikagel (Silikagel 60Å, 230-400 Mesh ASTM, der Marke S/P) unter Elution mit 2% Methanol- Methylenchlorid ergab 0,383 g (68%) der Titelverbindung als einen weißen Schaum. TLC (Methylenchlorid-Methanol, 9 : 1) Rf = 0,6. ¹H-NMR (300 MHz, CDCl&sub3;) δ 7,45-7,31 (m, 5H), 7,08-7,01 (m, 3H), 6,10 (m, 1H), 5,26 (m, 1H), 5,12 (s, 2H), 4,52 (m, 1H), 4,38-4,30 (m, 2H), 4,21-4,19 (m, 2H), 4,03-3,95 (m, 2H), 3,43-3,20 (m, 4H), 3,13 (m, 2H), 2,62-2,50 (m, 2H), 2,42 (m, 1H), 1,42 (s, 4H), 1,32 (s, 5H). Massenspektrum: m/z 570 (M + H). BEISPIEL 30 3{(2S-cis)-[5-Benzyloxycarbonylamino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1- hi]indol-2-carbonyl)-amino]}-5-fluor-4-oxo-pentansäure tert.-butylester
Zu einer Lösung von 3{(2S-cis)-[5-Benzyloxycarbonylamino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4- oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2-carbonyl)-amino]}-5-fluor-4-hydroxy-pentansäure-tert.- butylester (0,114 g, 0,20 mmol) in Methylsulfoxid (1,3 ml) wurde Dess-Martin-Periodinan (0,228 g) zugegeben. Nach Rühren bei Raumtemperatur unter Stickstoff für 2 Stunden wurde eine zusätzliche Portion Dess-Martin-Periodinan (0,135 g) zugegeben, 2,5 Stunden später gefolgt von einer dritten Portion (0,10 g). Die Reaktionsmischung wurde mit Ethylacetat verdünnt und zweimal mit Wasser und gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen; getrocknet (Natriumsulfat) und bis zur Trockne eingedampft. Reinigung des Rohproduktes durch Flashchromatographie auf Silikagel (Silikagel 60Å, 230-400 Mesh ASTM, der Marke S/P) unter Elution mit 1/1 Ethylacetat-Hexane ergab 0,076 g (67%) der Titelverbindung als einen weißen Schaum. TLC (Ethylacetat-Hexane, 1 : 1) Rf = 0,6. ¹H-NMR (300 MHz, CDCl&sub3;) δ 7,58 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,34-7,30 (m, 5H), 7,07-6,99 (m, 3H), 6,06 (m, 1H), 5,23 (d, J = 12,3 Hz, 1H), 5,12 (s, 2H), 4,53 (d, J = 13,2 Hz, 1H), 4,77 (d, J = 9,9 Hz, 2H), 4,32 (m, 1H), 3,44 (dd, J = 5, 8,4 Hz, 1H), 3,32-3,21 (m, 2H), 3,06 (m, 1H), 2,9 (m, 1H), 2,62 (m, 1H), 2,41 (m, 1H), 2,17 (m, 1H), 1,39 (s, 4H), 1,29 (s, 5H). BEISPIEL 31 3{(2S-cis)-[5-Benzyloxycarbonylamino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1- hi]indol-2-carbonyl)-amino]}-5-fluor-4-oxo-pentansäure
Zu einer Lösung von 3{(2S-cis)-[5-Benzyloxycarbonylamino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4- oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2-carbonyl)-amino]}-5-fluor-4-oxo-pentansäure-tert.-butylester (0,063 g, 0,111 mmol) in Methylenchlorid (1,0 ml) wurde Anisol (0,5 ml) zugegeben, gefolgt von Trifluoressigsäure (1,0 ml). Nach Rühren bei Raumtemperatur unter Stickstoff für 2 Stunden wurde die Reaktionsmischung mit Methylenchlorid verdünnt und eingedampft, anschließend zweimal mit Methylenchlorid ausgetrieben. Der rohe Rückstand wurde mit Ethylether trituriert, um 0,030 g der Titelverbindung als einen weißen Feststoff zu ergeben; Schmp. 106-107ºC (Zersetzung). TLC (Methylenchlorid-Methanol-Essigsäure, 32 : 1 : 1) R¹ = 0,3. ¹H-NMR (300 MHz, CDCl&sub3;) δ 7,61 (m, 1H), 7, 32 (s, 5H), 7,1 (d, J = 4 Hz, 1H), 7,03 (d, J = 4 Hz, 2H), 6,17 (m, 1H), 5,22 (m, 1H), 5,10 (s, 2H), 4,75-4,70 (m, 2H), 4,32 (m, 1H), 3,5 (m, 1H), 3,31-3,15 (m, 2H), 3,03 (m, 1H), 2,93 (m, 1H), 2,69 (m, 1H), 2,36 (m, 1H), 2,12 (m, 1H). Massenspektrum: m/z 512 (M + H). BEISPIEL 32 3-[(2S-cis)-[5-Benzyloxycarbonylamino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1- hi]indol-2-carbonyl]-amino]-5-brom-4-oxo-pentansäure tert.-butylester
Zu einer Lösung von (2S-cis)-5-Benzyloxycarbonylamino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4- oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2-carbonsäure (0,302 g, 0,797 mmol) in Methylenchlorid (5,5 ml) wurde unter Rühren bei 0ºC unter Stickstoff 1-Hydroxybenzotriazol-Hydrat (0,146 g, 0,96 mmol) und 1-(3-Dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimid-Hydrochlorid (0,230 g, 1,2 mmol) zugegeben. Nach 15 Minuten wurde Asparaginsäure-α-methyl-β-tert.-butyl-diester- Hydrochlorid (0,191 g, 0,797 mmol) zugegeben, gefolgt von N-Methylmorpholin (0,13 ml, 1,2 mmol), und man ließ die Mischung innerhalb 1 Stande auf Raumtemperatur kommen. Nach Rühren über Nacht wurde die Reaktionsmischung mit Ethylacetat verdünnt und nacheinander mit 5%-iger Kaliumbisulfat- und gesättiger Natriumchlorid-Lösung gewaschen; getrocknet (Natriusulfat) und bis zur Trockne eingedampft. Reinigung des Rohproduktes durch Flashchromatographie aus Silikagel (Silikagel 60Å, 230-400 Mesh ASTM, der Marke S/P) unter Elution mit Ethylacetat-Hexan (1 : 1) ergab 0,350 g (78%) von N-[(2S-cis)-[5- Benzyloxy-carbonylamino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2- carbonyl]]asparaginsäure-α-methyl-β-tert.-butyl-diester als einen weißen Feststoff. TLC (Methylenchlorid-Methanol, 9 : 1) Rp = 0,8, Schmp. 147-148ºC (Zersetzung). ¹H-NMR (300 MHz, CDCl&sub3;): δ 7,48 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,34-7,29 (m, 5H), 7,07 (m, 1H), 7,03-6,96 (m, 2H), 6,15 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 5,28 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 5,11 (s, 2H), 4,72 (m, 1H), 4,32 (m, 1H), 3,74 (s, 3H), 3,49 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 3,31-3,20 (m, 2H), 3,05 (m, 1H), 2,72 (ABX, dd, J = 4,65, 15, 64,5 Hz, 2H), 2,43 (m, 1H), 2,15 (m, 1H), 1,30 (s, 9H).
Zu einer Lösung des obigen Produktes (0,330 g, 0,585 mmol) in 1,4-Dioxan (4,5 ml) und Wasser (1,5 ml) wurde 1M wäßriges Lithiumhydroxid (0,7 ml, 0,702 mmol) zugegeben und die resultierende Mischung wurde bei Raumtemperatur unter Stickstoff für 30 Minuten gerührt. Die Reaktionsmischung wurde mit einer 0,1N HCl-Lösung auf pH 3 angesäuert, anschließend zwischen Ethylacetat und gesättigter Natriumchlorid-Lösung aufgeteilt. Die wäßrige Phase wurde zweimal mit Ethylacetat rückextrahiert und die vereinigten organischen Phasen wurde getrocknet (Natriumsulfat) und eingedampft, um 0,275 g (85%) N-[(2S-cis)- [5-Benzyloxycarbonylamino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2- carbonyl]]asparaginsäure-β-tert.-butylester als einen weißen Schaum zu liefern. TLC (Methylenchlorid-Methanol, 9 : 1): Rf = 0,25. ¹H-NMR (300 MHz, CDCl&sub3;): δ 7,57 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,35-7,29 (m, 5H), 7,08 (m, 1H), 7,03-6,98 (m, 2H), 6,24 (d, J = 6 Hz, 1H), 5,28 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 5,11 (s, 2H), 4,73 (m, 1H), 4,35 (m, 1H), 3,48 (d, J = 16,8 Hz, 1H), 3,36-3,20 (m, 2H), 3,07 (m, 1H), 2,76 (ABX, dd, J = 4,8, 18, 66 Hz, 2H), 2,40 (m, 1H), 2,19 (m, 1H), 1,33 (s, 9H).
Zu einer Lösung des obigen Produktes (0,262 g, 0,475 mmol) in Tetrahydrofuran (3,0 ml) wurde unter Rühren bei -10ºC unter Stickstoff N-Methylmorpholin (0,114 ml, 1,05 mmol) zugegeben, gefolgt von der tropfenweisen Zugabe von Isobutylchlorformiat (0,107 ml, 0,81 mmol). Nach 40 Minuten wurden die Reaktionsmischung filtriert, die Salze mit trockenem THF gewaschen und das Filtrat auf 0ºC abgekühlt. Dieses wurde mit einer frisch zubereiteten etherischen Lösung von Diazomethan (Überschuß) behandelt. Nach Rühren der Mischung bei 0ºC für 30 Minuten wurde eine Mischung aus Bromwasserstoffsäure (48 Gew.-% -ige wäßrige Lösung)/Essigsäure (1,3 ml, 1/1) tropfenweise zugegeben. Nach Rühren für weitere 10 Minuten wurde die Reaktionsmischung mit Ethylacetat verdünnt, anschließend mit gesättigter Natriumbicarbonat- und gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen; getrocknet (Natriumsulfat) und bis zur Trockne eingedampft. Reinigung des Rohproduktes durch Flashchromatographie auf Silikagel (Silikagel 60Ä, 230-400 Mesh ASTM, der Marke S/P) unter Elution mit Ethylacetat-Hexan (1 : 1) ergab 0,200 g (67%) der Titelverbindung als einen weißen Schaum. TLC (Ethylacetat-Hexan, 1 : 1): Rf = 0,7. ¹H-NMR (300 MHz, CDCl&sub3;): δ 7,71 (d, J = 9 Hz, 1H), 7,35-7,30 (m, 5H), 7,09 (m, 1H), 7,04-7,02 (m, 2H), 6,1 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 5,28 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 5,12 (s, 2H), 4,89 (dd, J = 4,5, 15 Hz, 1H), 4,35 (m, 1H), 4,16 (s, 2H), 3,50-3,21 (m, 3H), 3,06 (m, 1H), 2,76 (ABX, dd, J = 4,65, 18, 103 Hz, 2H), 2,37 (m, 1H), 2,15 (m, 1H), 1,27 (s, 9H). Massenspektrum: m/z 626/628 (M - H). BEISPIEL 33 3-[(2S-cis)-[5-Benzyloxycarbonylamino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1- hi]indol-2-carbonyl]amino]-5-(diphenylphosphinyl)oxy-4-oxo-pentansäure-tert.- Butylester
Zu einer Lösung von 3-[(2S-cis)-[5-Benzyloxycarbonylamino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4- oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2-carbonyl]amino]-5-brom-4-oxo-pentansäure-tert.-butylester (0,069 g, 0,110 mmol) in N,N-Dimethylformamid (1,0 ml) wurde Kaliumfluorid (0,029 g, 0,495 mmol) zugegeben, gefolgt von Diphenylphosphinsäure (0,029 g, 0,139 mmol). Nach Rühren bei Raumtemperatur unter Stickstoff für 48 Stunden wurde die Reaktionsmischung mit Ethylacetat verdünnt, anschließend nacheinander mit einer verdünnten Natriumbicarbonat-Lösung, anschließend mit Wasser gewaschen; getrocknet (Natriumsulfat) und bis zur Trockne eingedampft. Reinigung des Rohproduktes durch Flashchromatographie auf Silikagel (Silikagel 60Å, 230-400 Mesh ASTM, der Marke S/P) unter Elution mit Ethylacetat-Hexan (1 : 1) ergab 0,048 g (59%) der Titelverbindung als ein klares Öl. TLC (Ethylacetat-Hexan, 2 : 1): Rf = 0,3. ¹H-NMR (300 MHz, CDCl&sub3;): δ 7,89-7,80 (m, 4H= , 7,52-7,30 (m, 11H), 7,06 (m, 1H), 7,01-6,96 (m, 2H), 6,45 (m, 1H), 5,21 (m, 1H), 5,13 (s, 2H), 4,96 (dd, J = 8,3, 18 Hz, 1H), 4,78-4,70 (m, 2H), 4,35 (m, 1H), 3,35-3,23 (m, 3H), 3,05 (m, 1H), 2,76 (ABX, dd, J = 4,65, 18, 103 Hz, 2H), 2,43 (m, 1H), 2,18 (m, 1H), 1,33 (s, 9H). BEISPIEL 34 3-[(2S-cis)-[5-Benzyloxycarbonylamino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4-oxoazepino[3,2,1- hi]indol-2-carbonyl]amino]-5-(diphenylphosphinyl)oxy-4-oxo-pentansäure
Zu einer Lösung von 3.[(2S-cis)-[5-Benzyloxycarbonylamino-1,2,3,4,5,6,7-hexahydro-4- oxoazepino[3,2,1-hi]indol-2-carbonyl] amino]-5-(diphenylphosphinyl)oxy-4-oxo-pentansäure- tert.-butylester (0,040 g, 0,054 mmol) in Methylenchlorid (1,0 ml) wurde Anisol (0,5 ml) zugegeben, gefolgt von Trifluoressigsäure (1,0 ml). Nach Rühren bei Raumtemperatur unter Stickstoff für 30 Minuten wurde die Reaktionsmischung mit Methylenchlorid verdünnt und eingedampft, anschließend zweimal mit Methylenchlorid azeotropiert. Der rohe Rückstand wurde mit Ethylether trituriert, um 0,030 g der Titelverbindung als einen weißen Feststoff zu ergeben; Schmp. 109-111ºC (Zersetzung). TLC (Methylenchlorid-Methanol, 9 : 1): Rf = 0,4. ¹H-NMR (300 MHz, CDCl&sub3;): δ 7,87-7,66 (m, 4H), 7,60-7,28 (m, 11H), 7,05-6,95 (m, 3H), 6,84 (m, 1H), 5,12 (s, 2H), 5,05 (m, 1H), 4,58 (m, 1H), 4,42-4,15 (m, 4H), 3,35-3,10 (m, 4H), 3,05 (m, 1H), 2,76 (m, 1H), 2,56 (m, 1H), 2,37 (m, 1H), 2,13 (m, 1H), 1,93 (bs, 1H). Massenspektrum: m/z 710 (M + H).

Claims

1. Verbindung der Formel

worin:

n 1 oder 2 ist;

m 1 oder 2 ist;

A R²CO-, R³-O-CO- oder R&sup4;SO&sub2;- ist;

eine Gruppe der Formel:

wobei außerdem

R¹ ein Wasserstoffatom, Alkyl oder Phenylalkyl ist;

R² Alkyl, Cycloalkyl, (Cycloalkyl)alkyl, Phenyl, Phenylalkyl, substituiertes Phenyl, (substituiertes Phenyl)alkyl, Heteroaryl oder (Heteroaryl)alkyl ist;

R³ Alkyl, Cycloalkyl, (Cycloalkyl)alkyl, Phenylalkyl oder (substituiertes Phenyl)alkyl ist;

R&sup4; Alkyl, Cycloalkyl, (Cycloalkyl)alkyl, Phenyl, Phenylalkyl, substituiertes Phenyl, (substituiertes Phenyl)alkyl, Heteroaryl oder (Heteroaryl)alkyl ist;

R&sup5; Alkyl, Cycloalkyl, (Cycloalkyl)alkyl, Phenyl, Phenylalkyl, substituiertes Phenyl, (substituiertes Phenyl)alkyl, Heteroaryl oder (Heteroaryl)alkyl ist;

R&sup6; Alkyl, Cycloalkyl, (Cycloalkyl)alkyl, Phenylalkyl oder (substituiertes Phenyl)alkyl ist;

R&sup7; Alkyl, Cycloalkyl, (Cycloalkyl)alkyl, Phenyl, Phenylalkyl, substituiertes Phenyl, (substituiertes Phenyl)alkyl, Heteroaryl oder (Heteroaryl)alkyl ist;

R&sup8; eine Aminosäure-Seitenkette ist, ausgewählt aus der Gruppe, die aus natürlichen oder nicht-natürlichen Aminosäuren besteht;

B ein Wasserstoffatom, ein Deuteriumatom, Alkyl, Cycloalkyl, (Cycloalkyl)alkyl, Phenyl, Phenylalkyl, substituiertes Phenyl, (substituiertes Phenyl)alkyl, Heteroaryl, (Heteroaryl)alkyl oder Halomethyl ist;

eine Gruppe der Formel:

-CH&sub2;XR&sup9;;

worin R&sup9; Phenyl, substituiertes Phenyl, Phenylalkyl, (substituiertes Phenyl)alkyl, Heteroaryl oder (Heteroaryl)alkyl ist; und X ein Sauerstoff oder ein Schwefelatom ist;

eine Gruppe der Formel:

-CH&sub2;-O-CO-(Aryl);

eine Gruppe der Formel:

-CH&sub2;-O-CO-(Heteroaryl);

eine Gruppe der Formel:

-CH&sub2;-O-PO-(R¹&sup0;)R¹¹;

worin R¹&sup0; und R¹¹ unabhängig ausgewählt sind aus einer Gruppe, die aus Alkyl, Cycloalkyl, Phenyl, substituiertem Phenyl, Phenylalkyl und (substituiertes Phenyl)- alkyl besteht;

oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz derselben,

wobei ein Heteroaryl ein fakultativ substituierter, fünf- oder sechsgliedriger, vollständig ungesättigter Ring mit 1 bis 4 Heteroatomen ist.

2. Verbindung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß n 1 ist.

3. Verbindung nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß m 1 ist.

4. Verbindung nach einem der vorangehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß B ein Wasserstoffatom ist.

5. Verbindung nach einem der vorangehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß A eine Gruppe mit der Formel R²CO- ist.

6. Verbindung nach einem der vorangehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß R² eine Gruppe der Formel 2-(Carboxy)eth-1-yl, 2-(Phenyl)eth-1-yl, Methyl, Naphth-1-yl oder Phenyl ist.

7. Verbindung nach einem der vorangehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß R¹ ein Wasserstoffatom ist.

8. Verbindung nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, daß A eine Gruppe der Formel:

R&sup5;-CO-NH-CHR&sup8;-CO-

ist; worin R&sup5; Methyl ist und R&sup8; eine Gruppe der Formel -CH&sub2;COOH ist.

9. Verbindung nach Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet, daß R¹ ein Wasserstoffatom ist.

10. Verbindung nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, daß A eine Gruppe der Formel R³-O-CO- ist und daß R³ Benzyl ist.

11. Verbindung nach Anspruch 10, dadurch gekennzeichnet, daß R¹ ein Wasserstoffatom ist.

12. Verbindung nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, daß A eine Gruppe der Formel:

R&sup6;-O-CO-NH-CHR&sup8;-CO-

ist; worin R&sup6; Benzyl ist und R&sup8; eine Gruppe der Formel -CH&sub2;COOH ist.

13. Verbindung nach Anspruch 12, dadurch gekennzeichnet, daß R¹ ein Wasserstoffatom ist.

14. Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, daß B eine Gruppe der Formel -CH&sub2;F ist.

15. Verbindung nach Anspruch 14, dadurch gekennzeichnet, daß A eine Gruppe der Formel R³-O-CO- ist, worin R³ Benzyl ist.

16. Verbindung nach Anspruch 15, dadurch gekennzeichnet, daß R¹ ein Wasserstoffatom ist.

17. Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, daß B eine Gruppe der Formel:

-CH&sub2;-O-PO(R¹&sup0;)R¹¹

ist.

18. Verbindung nach Anspruch 17, dadurch gekennzeichnet, daß R¹&sup0; und R¹¹ jeweils Phenyl sind.

19. Verbindung nach Anspruch 17 oder 18, dadurch gekennzeichnet, daß A eine Gruppe der Formel R³-O-CO- ist und daß R³ eine Benzylgruppe ist.

20. Verbindung nach einem der Ansprüche 17 bis 19, dadurch gekennzeichnet, daß R¹ ein Wasserstoffatom ist.

21. Verbindung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß n 2 ist.

22. Verbindung nach Anspruch 21, dadurch gekennzeichnet, daß m 1 ist.

23. Verbindung nach Anspruch 21 oder 22, dadurch gekennzeichnet, daß B ein Wasserstoffatom ist.

24. Verbindung nach einem der Ansprüche 21 bis 23, dadurch gekennzeichnet, daß A eine Gruppe mit der Formel R³-O-CO- ist und R³ eine Benzylgruppe ist.

25. Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 24, dadurch gekennzeichnet, daß R¹ ein Wasserstoffatom ist.

26. Pharmazeutische Zusammensetzung, die eine Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 25 oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz derselben und einen pharmazeutisch annehmbaren Trägerstoff umfaßt.

27. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 26 zur Verwendung in einem Verfahren zur Behandlung einer Autoimmunerkrankung, welches das Verabreichen einer wirksamen Menge der Zusammensetzung an einen Patienten umfaßt, der einer solchen Behandlung bedarf.

28. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 26 zur Verwendung in einem Verfahren zur Behandlung einer entzündlichen Erkrankung, welches das Verabreichen einer wirksamen Menge der Zusammensetzung an einen Patienten umfaßt, der einer solchen Behandlung bedarf.

29. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 26 zur Verwendung in einem Verfahren zur Behandlung einer neurodegenerativen Erkrankung, welches das Verabreichen einer wirksamen Menge der Zusammensetzung an einen Patienten umfaßt, der einer solchen Behandlung bedarf.

30. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 26 zur Verwendung in einem Verfahren zur Verhinderung einer ischämischen Verletzung bei einem Patienten, der an einer Erkrankung leidet, die mit ischämischer Verletzung zusammenhängt, welches das Verabreichen einer wirksamen Menge der Zusammensetzung an einen Patienten umfaßt, der einer solchen Behandlung bedarf.