DE60111752T2

DE60111752T2 - 7-oxopyridoryrimidine

Info

Publication number: DE60111752T2
Application number: DE60111752T
Authority: DE
Inventors: Bartolome Humberto ARZENO; Jeffrey Jian CHEN; Patrick James DUNN; Michael David GOLDSTEIN; Anne Julie LIM
Original assignee: F Hoffmann La Roche AG
Current assignee: F Hoffmann La Roche AG
Priority date: 2000-08-31
Filing date: 2001-08-22
Publication date: 2006-05-04
Anticipated expiration: 2021-08-23
Also published as: PA8527401A1; CN1721412A; KR100582325B1; UY26920A1; ES2243568T3; EP1315727A2; AU1214702A; ZA200301078B; BR0113590A; AR033996A1; DE60111752D1; CN100358892C; JP4146721B2; WO2002018379A3; CA2420122A1; JP2004507540A; CN1303072C; KR20030022423A; WO2002018379A2; PE20020524A1

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft 7-Oxo-pyridopyrimidine. Insbesondere stellt die vorliegende Erfindung 2,6-disubstituierte 7-Oxo-pyrido[2,3-d]pyrimidine, ein Verfahren für deren Herstellung, pharmazeutische Präparate, umfassend dieselben und Verfahren für die Verwendung derselben bereit.
Bei Mitogen aktivierten Proteinkinasen (MAP) handelt es sich um eine Familie von prolinspezifischen Serin/Threonin-Kinasen, die ihre Substrate durch duale Phosphorylierung aktivieren. Die Kinasen werden durch eine Vielfalt von Signalen, einschließlich ernährungsbedingtem und osmotischem Stress, UV-Licht, Wachstumsfaktoren, Endotoxin und inflammatorischen Zytokinen aktiviert. Eine Gruppe von MAP-Kinasen ist die p38-Kinasegruppe, welche verschiedene Isoformen (z.B. p38α, p39β, p38γ und p38δ) einschließt. Die p38-Kinasen sind ebenso wie andere Kinasen für die Phosphorylierung und Aktivierung von Transkriptionsfaktoren verantwortlich und werden durch physischen und chemischen Stress, proinflammatorische Zytokine und ein bakterielles Lipopolysaccharid aktiviert.
Als wesentlich wichtiger hat sich herausgestellt, dass die Produkte der p38-Phosphorylierung die Produktion von inflammatorischen Zytokinen, einschließlich TNF und IL-1 und Cyclooxygenase-2 vermitteln. Jedes dieser Zytokine ist mit zahlreichen Krankheitsstadien und Beschwerden in Zusammenhang gebracht worden. Zum Beispiel ist TNF-α ein Zytokin, das in erster Linie durch aktivierte Monozyten und Makrophagen hergestellt wird. Es wurde impliziert, dass seine übermäßige oder ungeregelte Produktion eine kausale Rolle in der Pathogenese von rheumatoider Arthritis spielt. Vor kurzem hat sich gezeigt, dass die Inhibition der TNF Produktion eine breite Anwendung bei der Behandlung von Entzündung, Reizkolon, multipler Sklerose und Asthma aufweist.
TNF ist auch mit viralen Infektionen wie, zum Beispiel HIV, Influenzavirus und Herpesvirus, einschließlich Herpes simplex Virustyp-1 (HSV-1), Herpes simplex Virustyp-2 (HSV-2), Cytomegalievirus (CMV), Varicella-Zoster-Virus (VZV), Epstein-Barr Virus, menschlichem Herpesvirus-6 (HHV-6), menschlichem Herpesvirus-7 (HHV-7), menschlichem Herpesvirus-8 (HHV-8), Pseudorabies und Rhinotracheitis in Zusammenhang gebracht worden.
Gleichermaßen wird IL-1 durch aktivierte Monozyten und Makrophagen hergestellt und spielt eine Rolle in vielen pathophysiologischen Reaktionen, einschließlich rheumatoider Arthritis, Fieber und Reduktion der Knochenresorption.
Zusätzlich ist die Beteiligung von p38 mit einem Schlaganfall, Alzheimer-Krankheit, Osteoarthrose, Lungenverletzung, septischem Schock, Angiogenese, Dermatitis, Psoriasis und atopischer Dermatitis in Zusammenhang gebracht worden, siehe z.B. J. Exp. Opin. Ther. Patents, (2000) 10(1).
Gewisse Pyrido[2,3-d]pyrimidine werden in WO 96/34867 als Inhibitoren der Protein-Tyrosinkinasen, welche die zelluläre Proliferation vermitteln, offenbart.
Die Inhibition dieser Zytokine durch Inhibition der p38-Kinase ist bei der Kontrolle, Abschwächung und Milderung von vielen dieser Krankheitzuständen von Vorteil.
Eine Ausführungsform der vorliegenden Erfindung stellt Verbindungen der Formel:
bereit,
ein Prodrug oder ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon, in welchem:
R¹ Wasserstoff oder Alkyl ist;
R² -CR'R''-R^a (wobei R' und R'' Wasserstoff, Hydroxyalkyl oder Alkyl sind, wobei mindestens einer davon Alkyl oder Hydroxyalkyl ist, und R^a Hydroxyalkyl ist), R^x-S(O)₂-R^y (wobei R^x Alkyl ist und R^y Alkenyl ist), Alkoxy-substituiertes Alkyl, Heterocyclylalkyl oder C₄-C₅ Cycloalkyl ist, wobei die Hydroxygruppen in R² jeweils unabhängig in Form eines Ester-, eines Carbamat-, eines Carbonat- oder eines Sulfonatderivats vorliegen können; oder
R¹ und R² zusammen mit dem Stickstoffatom, an welches sie gebunden sind, ein Heterocyclyl bilden;
R³ Wasserstoff, Alkyl, Cycloalkyl, Aryl, Aralkyl, Halogenalkyl, Heteroalkyl, Cycnoalkyl, Amino, Monoalkylamino, Dialkylamino, Alkylen-C(O)-R (wobei R Wasserstoff, Alkyl, Hydroxy, Alkoxy, Amino, Monoalkylamino oder Dialkylamino ist) oder Acyl ist; und
Ar¹ Aryl ist.
Die Verbindungen der Formel I und deren Salze, die vorstehend erwähnt werden, sind Inhibitoren von Protein-Kinasen und zeigen in vivo gegenüber p38 eine wirksame Aktivität. Deshalb können die Verbindungen zur Behandlung von Krankheiten verwendet werden, die durch proinflammatorische Zytokine wie zum Beispiel TNF und IL-1 übertragen werden.
So stellt eine andere Ausführungsform der vorliegenden Erfindung Verfahren zur Behandlung von p38 vermittelten Erkrankungen oder Beschwerden bereit, bei denen eine therapeutisch wirksame Menge einer Verbindung der Formel I an einen Patienten verabreicht wird, der einer derartigen Behandlung bedarf.
Noch eine andere Ausführungsform der vorliegenden Erfindung stellt Verfahren zur Herstellung der vorstehend beschriebenen Verbindungen bereit.
Jedoch noch eine andere Ausführungsform der vorliegenden Erfindung stellt Verfahren zur Herstellung von Medikamenten bereit, die zur Behandlung von p38 vermittelten Erkrankungen und Beschwerden nützlich sind.
Wenn nicht anders angegeben, haben die nachstehenden in der Beschreibung und den Ansprüchen verwendeten Begriffe die nachstehend angegebenen Bedeutungen:
„Acyl" bedeutet einen Rest -C(O)R, wobei R Wasserstoff, Alkyl, Cycloalkyl, Cycloalkylalkyl, Phenyl oder Phenylalkyl ist, wobei Alkyl, Cycloalkyl, Cycloalkylalkyl und Phenylalkyl wie hier definiert sind. Repräsentative Beispiele schließen ein, aber sind nicht auf Formyl, Acetyl, Cylcohexylcarbonyl, Cyclohexylmethylcarbonyl, Benzoyl, Benzylcarbonyl und dergleichen beschränkt.
„Acylamino" bedeutet einen Rest -NR'C(O)R, wobei R' Wasserstoff oder Alkyl ist, und R Wasserstoff, Alkyl, Cycloalkyl, Cycloalkylalkyl, Phenyl oder Phenylalkyl ist, wobei Alkyl, Cycloalkyl, Cycloalkylalkyl und Phenylalkyl wie hier definiert sind. Repräsentative Beispiele schließen ein, aber sind nicht auf Formylamino, Acetylamino, Cylcohexylcarbonylamino, Cyclohexylmethylcarbonylamino, Benzoylamino, Benzylcarbonylamino und dergleichen beschränkt.
„Alkoxy" bedeutet einen Rest -OR, wobei R ein Alkyl, z.B. Methoxy, Ethoxy, Propoxy, Butoxy und dergleichen wie hier definiert ist.
„Alkyl" bedeutet einen linearen gesättigten einwertigen Kohlenwasserstoffrest mit ein bis sechs Kohlenstoffatomen oder einen verzweigten gesättigten einwertigen Kohlenwasserstoffrest mit drei bis sechs Kohlenstoffatomen, z.B. Methyl, Ethyl, Propyl, 2-Propyl, n-Butyl, iso-Butyl, tert-Butyl, Pentyl und dergleichen.
„Alkylen" bedeutet einen linearen gesättigten zweiwertigen Kohlenwasserstoffrest mit ein bis sechs Kohlenstoffatomen oder einen verzweigten gesättigten zweiwertigen Kohlenwasserstoffrest mit drei bis sechs Kohlenstoffatomen, z.B. Methylen, Ethylen, 2,2-Dimethylethylen, Propylen, 2-Methylpropylen, Butylen, Pentylen und dergleichen.
„Alkylthio" bedeutet einen Rest -SR, wobei R ein Alkyl, z.B. Methylthio, Ethylthio, Propylthio, Butylthio und dergleichen wie vorstehend definiert ist.
„Aryl" bedeutet einen einwertigen monocyclischen oder bicyclischen aromatischen Kohlenwasserstoffrest, welcher gegebenenfalls unabhängig mit einem oder mehreren Substituenten, vorzugsweise ein, zwei oder drei Substituenten, bevorzugt ausgewählt aus Alkyl, Hydroxy, Alkoxy, Halogenalkyl, Halogenalkoxy, Heteroalkyl, Halogen, Nitro, Cyano, Amino, Monoalkylamino, Dialkylamino, Methylendioxy, Ethylendioxy und Acyl substituiert ist. Spezifischer schließt der Begriff Aryl ein, aber ist nicht auf Phenyl, Chlorphenyl, Methoxyphenyl, 1-Naphthyl, 2-Naphthyl und die Derivate davon oder Fluorphenyl oder noch spezifischer Chlorphenyl oder Fluorphenyl beschränkt.
„Cycloalkyl" bedeutet einen gesättigten einwertigen cyclischen Kohlenwasserstoffrest mit drei bis sieben, vorzugsweise 3 bis 5 Ringkohlenstoffatomen, z.B. Cyclopropyl, Cyclobutyl, Cyclohexyl, 4-Methylcyclohexyl und dergleichen, vorzugsweise Cyclopropyl, Cyclobutyl oder Cyclohexyl.
„Dialkylamino" bedeutet einen Rest -NRR', wobei R und R' unabhängig ein Alkyl, Hydroxyalkyl, Cycloalkyl oder Cycloalkylalkylrest wie hier definiert darstellen. Repräsentative Beispiele schließen ein, aber sind nicht auf Dimethylamino, Methylethylamino, Di(1-methylethyl)amino, (Cyclohexyl)(methyl)amino, (Cyclohexyl)(ethyl)amino, (Cyclohexyl)(propyl)amino, (Cyclohexylmethyl)(methyl)amino, (Cyclohexylmethyl)(ethyl)amino und dergleichen beschränkt.
Der Begriff „die Hydroxygruppen in R² können jeweils unabhängig in Form eines Ester-, eines Carbamat-, eines Carbonat- oder eines Sulfonatderivats vorliegen" bedeutet, dass Hydroxygruppe(n) (-OH), welche in dem Rest R² vorliegen, unabhängig als R^a-C(=O)-O-, R^aR^bN-C(=O)-O-, R^a-O-C(=O)-O- beziehungsweise R^a-SO₂-O- derivatisiert werden können, wobei R^a und R^b unabhängig Wasserstoff, Alkyl, Aryl oder Aralkyl wie hier definiert sind.
„Halogen" bedeutet Fluor, Chlor, Brom oder Iod, vorzugsweise Fluor und Chlor.
„Haloalkyl" bedeutet Alkyl substituiert mit einem oder mehreren denselben oder verschiedenen Halogenatomen, z.B. -CH₂Cl, -CF₃, -CH₂CF₃, -CH₂CCl₃ und dergleichen.
Wie hier definiert bedeutet „Heteroalkyl" einen Alkylrest, wobei ein, zwei oder drei Wasserstoffatome durch einen Substituenten ersetzt worden sind, unabhängig ausgewählt aus -OR^a, -NR^bR^c und -S(O)_nR^d (wobei n eine ganze Zahl von 0 bis 2 ist), mit der Maßgabe, dass die Bindung des Heteroalkylrests durch ein Kohlenstoffatom erfolgt, wobei R^a Wasserstoff, Acyl, Alkyl, Cycloalkyl oder Cycloalkylalkyl ist; R^b und R^c unabhängig voneinander Wasserstoff, Acyl, Alkyl, Cycloalkyl oder Cycloalkylalkyl sind oder R^b und R^c zusammen Cycloalkyl oder Arylcycloalkyl bilden; und wenn n 0 ist, R^d Wasserstoff, Alkyl, Cycloalkyl oder Cycloalkylalkyl ist, und wenn n 1 oder 2 ist, R^d Alkyl, Cycloalkyl, Cycloalkylalkyl, Amino, Acylamino, Monoalkylamino oder Dialkylamino ist. Repräsentative Beispiele schließen ein, aber sind nicht auf 2-Hydroxyethyl, 3-Hydroxypropyl, 2-Hydroxy-1-hydroxymethylethyl, 2,3-Dihydroxypropyl, 1-Hydroxymethylethyl, 3-Hydroxybutyl, 2,3-Dihydroxybutyl, 2-Hydroxy-1-methylpropyl, 2-Aminoethyl, 3-Aminopropyl, 2-Methylsulfonylethyl, Aminosulfonylmethyl, Aminosulfonylethyl, Aminosulfonylpropyl, Methylaminosulfonylmethyl, Methylaminosulfonylethyl, Methylaminosulfonylpropyl und dergleichen beschränkt.
„Heterocyclyl" bedeutet einen gesättigten oder ungesättigten nicht aromatischen cyclischen Rest von 3 bis 8 Ringatomen, in welchen ein oder zwei Ringatome Heteroatome sind, ausgewählt aus N, O oder S(O)_n (wobei n eine ganze Zahl von 0 bis 2 ist), die restlichen Ringatome C sind. Spezifischer bedeutet „Heterocyclyl" einen gesättigten nicht aromatischen cyclischen Rest von 5 bis 6, vorzugsweise sechs Ringatomen, in welchen ein oder zwei Ringatome, vorzugsweise ein Ringatom N- ist/sind, die restlichen Ringatome C-Atome sind. Der Heterocyclylring kann gegebenenfalls unabhängig mit ein, zwei oder drei Substituenten, ausgewählt aus Alkyl, Halogenalkyl, Heteroalkyl, Halogen, Nitro, Cyano, Cyanoalkyl, Hydroxy, Alkoxy, Amino, Monoalkylamino, Dialkylamino, Aralkyl, -(X)_n-C(O)R (wobei X O oder NR' ist, n 0 oder 1 ist, R Wasserstoff, Alkyl, Halogenalkyl, Hydroxy (wenn n 0 ist), Alkoxy, Amino, Monoalkylamino, Dialkylamino oder gegebenenfalls substituiertes Phenyl, und R' H oder Alkyl ist), -Alkylen-C(O)R (wobei R OR oder NR'R'' ist und R Wasserstoff, Alkyl oder Haloalkyl ist, und R' und R'' unabhängig Wasserstoff oder Alkyl sind), -Alkylen-S(O)_n-R^a (wobei n 0, 1 oder 2, vorzugsweise 0 ist, und R^a Alkyl ist) oder -S(O)_n-R (wobei n eine ganze Zahl von 0 bis 2 ist), so dass, wenn n 0 ist, R Wasserstoff, Alkyl, Cycloalkyl oder Cycloalkylalkyl ist und wenn n 1 oder 2 ist, R Alkyl, Cycloalkyl, Cycloalkylalkyl, Amino, Acylamino, Monoalkylamino oder Dialkylamino ist, substituiert sein. Spezifischer schließt der Begriff Heterocycyl ein, aber ist nicht auf Tetrahydropyranyl, Piperidino, N-Methylperidin-3-yl, Piperazino, N-Methylpyrrolidin-3-yl, 3-Pyrrolidino, Morpholino, Thiomorpholino, Thiomorpholino-1-oxid, Thiomorpholino-1,1-dioxid, Pyrrolinyl, Imidazolinyl, N-Methansulfonylpiperidin-4-yl und die Derivate davon, bevorzugt Piperidinyl beschränkt. Bevorzugt wird „Heterocyclyl" an dem Heteroatom mit einem Substituenten substituiert, ausgewählt aus Alkyl, bevorzugt substituiertes Alkyl, wobei die Substitution Amino, Carbonyl, z.B. Mono- oder bevorzugt Dialkylaminocarbonyl, z.B. Dimethylaminocarbonyl, Carboxyl oder Alkyloxycarbonyl, z.B. Methoxycarbonyl ist.
„Heterocyclylalkyl" bedeutet einen Rest -R^aR^b, wobei R^a ein Alkylenrest wie vorstehend definiert ist, und R^b ein Heterocyclylrest ist, mit der Maßgabe, dass R^b über ein Kohlenstoffatom des Heterocyclylringes, z.B. Tetrahydropyran-2-ylmethyl, 2- oder 3-Piperidinylmethyl und dergleichen an R^a gebunden ist.
Wie hier definiert bedeutet „Hydroxyalkyl" einen Alkylrest, welcher mit ein oder mehreren, bevorzugt ein, zwei oder drei, stärker bevorzugt ein oder zwei Hydroxygruppen substituiert ist, mit der Maßgabe, dass dasselbe Kohlenstoffatom nicht mehr als eine Hydroxygruppe trägt und die Substituenten von R² bevorzugt wie in den Beispielen 7–18 und in den Verbindungen 7, 12, 13, 24 und 25 von Tabelle 1 definiert sind. Repräsentative Beispiele schließen ein, aber sind nicht auf Hydroxymethyl, 2-Hydroxyethyl, 2-Hydroxypropyl, 3-Hydroxypropyl, 1-(Hydroxymethyl)-2-methylpropyl, 2-Hydroxyeutyl, 3-Hydroxyeutyl, 4-Hydroxybutyl, 2,3-Dihydroxypropyl, 2-Hydroxy-1-hydroxymethylethyl, 2,3-Dihydroxybutyl, 3,4-Dihydroxybutyl und 2-(Hydroxymethyl)-3-hydroxypropyl, vorzugsweise 2-Hydroxyethyl, 2,3-Dihydroxypropyl und 1-(Hydroxymethyl)-2-hydroxyethyl beschränkt. Demgemäß, wie hier verwendet, wird der Begriff „Hydroxyalkyl" verwendet, um eine Teilmenge von Heteroalkylresten zu definieren.
„Abgangsgruppe" hat die Bedeutung, die herkömmlich in der synthetischen, organischen Chemie damit verbunden wird, d.h. ein Atom oder eine Gruppe die geeignet ist, durch ein Nukleophil ersetzt zu werden und schließt Halogen (wie Chlor, Brom und Iod), Alkansulfonyloxy, Arensulfonyloxy, Alkylcarbonyloxy (z.B. Acetoxy) Arylcarbonyloxy, Mesyloxy, Tosyloxy, Trifluormethansulfonyloxy, Aryloxy (z.B. 2,4-Dinitrophenoxy), Methoxy, N,O-Dimethylhydroxylamino und dergleichen ein.
„Monoalkylamino" bedeutet einen Rest -NHR, wobei R ein Alkyl, Hydroxyalkyl, Cycloalkyl oder Cycloalkylalkylrest, z.B. Methylamino, (1-Methylethyl)amino, Hydroxymethylamino, Cyclohexylamino, Cyclohexylmethylamino, Cyclohexylethylamino und dergleichen wie vorstehend definiert ist.
„Gegebenenfalls substituiertes Phenyl" bedeutet einen Phenylring, welcher gegebenenfalls unabhängig mit einem oder mehreren Substituenten, vorzugsweise einem oder zwei Substituenten substituiert ist, ausgewählt aus Alkyl, Hydroxy, Alkoxy, Halogenalkyl, Halogenalkoxy, Heteroalkyl, Halogen, Nitro, Cyano, Amino, Methylendioxy, Ethylendioxy und Acyl, vorzugsweise einem Phenylring, welcher mit einem Substituenten, welcher bevorzugt Halogen, z.B. Fluor oder Chlor ist, substituiert ist.
„Pharmazeutisch verträglicher Exzipient" bedeutet einen Exzipienten, der bei der Herstellung eines Arzneimittels nützlich ist, das im Allgemeinen sicher, nicht giftig und weder biologisch noch sonst unerwünscht ist und einen Exzipienten beinhaltet, der für die tierärztliche Verwendung wie auch menschliche pharmazeutische Verwendung verträglich ist. Ein „pharmazeutisch verträglicher Exzipient" wie in der Beschreibung und Ansprüchen verwendet, schließt beides, ein und mehr als einen derartigen Exzipienten, ein.
„Pharmazeutisch verträgliches Salz" einer Verbindung bedeutet ein Salz, das pharmazeutisch verträglich ist und das die gewünschte pharmakologische Wirkung der Ausgangsverbindung aufweist. Derartige Salze schließen: (1) Säureadditionssalze, die mit anorganischen Säuren wie Salzsäure, Bromwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Salpetersäure, Phosphorsäure und dergleichen gebildet werden; oder mit organischen Säuren wie Essigsäure, Propionsäure, Hexansäure, Cyclopentanpropionsäure, Glykolsäure, Brenztraubensäure, Milchsäure, Malonsäure, Bernsteinsäure, Äpfelsäure, Maleinsäure, Fumarsäure, Weinsäure, Zitronensäure, Benzoesäure, 3-(4-Hydroxybenzoyl)benzoesäure, Zimtsäure, Mandelsäure, Methansulfonsäure, Ethansulfonsäure, 1,2-Ethandisulfonsäure, 2-Hydroxyethansulfonsäure, Benzolsulfonsäure, 4-Chlorbenzolsulfonsäure, 2-Naphthalinsulfonsäure, 4-Toluolsulfonsäure, Kampfersulfonsäure, 4-Methylbicyclo[2.2.2]oct-2-en-1-carbonsäure, Glucoheptonsäure, 3-Phenylpropionsäure, Trimethylessigsäure, tert.-Butylessigsäure, Laurylschwefelsäure, Gluconsäure, Glutaminsäure, Hydroxynaphthoesäure, Salizylsäure, Stearinsäure, Muconsäure und dergleichen gebildet werden; oder (2) Salze, die gebildet werden, wenn ein in der Ausgangsverbindung vorliegendes, saures Proton, entweder durch ein Metallion, z.B. ein Alkalimetallion, ein Erdalkaliion oder ein Aluminiumion ersetzt wird; oder mit einer organischen Base wie Ethanolamin, Diethanolamin, Triethanolamin, Tromethamin, N-Methylglucamin und dergleichen koordiniert, ein.
Die Begriffe „Pro-Drug" und „Prodrug" werden hier austauschbar verwendet und beziehen sich auf jede Verbindung, welche in vivo ein wirksames Ausgangs-Arzneimittel, gemäß der Formel I freisetzt, wenn ein derartiges Prodrug an einen Säuger verabreicht wird. Prodrugs einer Verbindung der Formel I werden durch Modifizierung einer oder mehrerer in der Verbindung der Formel I vorliegenden funktionellen Gruppe(n) auf eine derartige Weise hergestellt, dass die Modifizierungen) in vivo gespalten werden kann können, um die Ausgangsverbindung freizusetzen. Prodrugs schließen Verbindungen der Formel I ein, wobei ein Hydroxy, Amino, Sulfhydryl, Carboxy oder Carbonylrest in einer Verbindung der Formel I an einen Rest gebunden ist, der in vivo gespalten werden kann, um den freien Hydroxyl-, Amino- beziehungsweise Sulfhydrylrest wieder herzustellen. Beispiele von Prodrugs schließen ein, aber sind nicht auf Ester (z.B. Acetat, Dialkylaminoacetate, Formiate, Phosphate, Sulfate und Benzoatderivate), Sulfonate und Carbamate (z.B. N,N-Dimethylaminocarbonyl) von funktionellen Hydroxyresten, Esterreste (z.B. Ethylester, Morpholinoethanolester) von funktionellen Carboxylresten, N-Acylderivate (z.B. N-Acetyl), N-Mannich Basen, Schiff'sche Basen und Enantiomere von funktionellen Aminoresten, Oxime, Acetale, Ketale und Enolester von funktionellen Ketonen und Aldehydresten in Verbindungen der Formel I und dergleichen beschränkt, siehe Bundegaard, H. „Design of Prodrugs" S. 1–92, Elesevier, New York-Oxford (1985).
„Schutzgruppe" bezieht sich auf eine Gruppierung von Atomen, die, wenn sie an eine reaktive Gruppe in einem Molekül gebunden sind, ihre Reaktivität maskiert, verringert oder unterdrückt. Beispiele von Schutzgruppen können in T. W. Green und P. G. Futs, Protective Groups in Organic Chemistry, (Wiley, 2. Ausgabe, 1991) und Harrison und Harrison et al., Compendium of Synthetic Organic Methods, Bd. 1–8 (John Wiley und Söhne, 1971–1996) gefunden werden. Repräsentative Aminoschutzgruppen schließen Formyl, Acetyl, Trifluoracetyl, Benzyl, Benzyloxycarbonyl (CBZ), tert-Butoxycarbonyl (Boc), Trimethylsilyl (TMS), 2-Trimethylsilylethansulfonyl (SES), Trityl und substituierte Tritylgruppen, Allyloxycarbonyl, 9-Fluorenylmethyloxycarbonyl (FMOC), Nitroveratryloxycarbonyl (NVOC) und dergleichen ein. Repräsentative Hydroxyschutzgruppen schließen jene ein, wobei die Hydroxygruppe entweder acyliert oder alkyliert wird wie Benzyl und Tritylether wie auch Alkylether, Tetrahydropyranylether, Trialkylsilylether und Allylether.
„Behandeln" oder „Behandlung" einer Erkrankung beinhaltet: (1) Vorbeugung der Erkrankung, d.h. Bewirken, dass sich die klinischen Symptome der Erkrankung in einem Säuger, welcher der Erkrankung ausgesetzt ist oder dafür anfällig sein kann, aber der jetzt noch keine Symptome der Erkrankung verspürt oder zeigt, nicht entwickeln; (2) Verhinderung der Erkrankung, d.h. Verhinderung oder Verringerung der Entwicklung der Erkrankung oder ihrer klinischen Symptome; oder (3) Linderung der Erkrankung, d.h. Bewirkung einer Regression der Erkrankung oder ihrer klinischen Symptome.
„Eine therapeutisch wirksame Menge" bedeutet die Menge an Verbindung, die, wenn sie an einen Säuger zur Behandlung einer Erkrankung verabreicht wird, ausreichend ist, um eine derartige Behandlung für die Erkrankung zu beeinflussen. Die „therapeutisch wirksame Menge" wird variieren, abhängig von der Verbindung, der Erkrankung und ihrer Schwere und dem Alter, Gewicht u.s.w. des zu behandelnden Säugers.
Der Begriff „Behandeln", „Kontaktieren" oder „Umsetzen" bedeutet, wenn er eine chemische Umsetzung betrifft, ein Zugeben oder Mischen von zwei oder mehreren Reagenzien unter passenden Bedingungen, um das angezeigte und/oder gewünschte Produkt herzustellen. Es ist selbstverständlich, dass sich die Umsetzung, welche das angezeigte und/oder gewünschte Produkt herstellt, nicht notwendigerweise direkt aus der Kombination zweier anfänglich zugegebener Reagenzien ergibt, d.h. hier können eine oder mehrere Zwischenstufen auftreten, welche in dem Gemisch hergestellt werden, welche schlussendlich zu der Bildung des angezeigten und/oder gewünschten Produkts führen.
Im Falle der Zeichnungen von Strukturformeln in der vorliegenden Beschreibung wird „N" nur mit einer oder zwei Bindungen zu dem Rest der Struktur gezeigt oder „O" wird nur mit einer Bindung zu dem Rest der Struktur gezeigt, dem Fachmann ist selbstverständlich, dass im Falle von „N" zwei oder ein „H"-Atome) beziehungsweise im Falle von „O" ein „H"-Atom in der Formel vorlieg(t,en), aber von dem Computerprogramm, das zur Zeichnung der Strukturen verwendet wurde, z.B. ISIS draw, nicht gezeigt werden. Deshalb stellt „-N" „-NH₂" dar, „-N-" stellt „-NH-" dar, und „-O" stellt „-OH" dar.
Eine Ausführungsform der vorliegenden Erfindung stellen Verbindungen der Formel:
bereit,
wobei:
R¹ Wasserstoff oder Alkyl ist;
R² -CR'R''-R^a (wobei R' und R'' Wasserstoff, Hydroxyalkyl oder Alkyl sind, wobei mindestens einer davon Alkyl oder Hydroxyalkyl ist, und R^a Hydroxyalkyl ist), R^x-S(O)₂-R^y (wobei R^x Alkyl ist und R^y Alkenyl ist), Alkoxy-substituiertes Alkyl, Heterocyclylalkyl oder C₄-C₅ Cycloalkyl ist, wobei die Hydroxygruppen in R² jeweils unabhängig in Form eines Ester-, eines Carbamat-, eines Carbonat- oder eines Sulfonatderivats vorliegen können; oder
R¹ und R² zusammen mit dem Stickstoffatom, an welches sie gebunden sind, ein Heterocyclyl bilden;
R³ Wasserstoff, Alkyl, Amino, Monoalkylamino, Dialkylamino, Cycloalkyl, Aryl, Aralkyl, Halogenalkyl, Heteroalkyl, Cycnoalkyl, Alkylen-C(O)-R (wobei R Wasserstoff, Alkyl, Hydroxy, Alkoxy, Amino, Monoalkylamino oder Dialkylamino ist) oder Acyl ist; und
Ar¹ Aryl ist.
Besonders bevorzugte Verbindungen der Formel I sind jene der Formel II:
wobei n 1 oder 2, vorzugsweise 1 ist und X Wasserstoff, Alkyl, Halogen, Nitro, Cyano oder Methoxy, vorzugsweise Halogen ist.
Stärker bevorzugte Verbindungen der Formel I sind jene der Formel III:
In Bezug auf Verbindungen der Formel I, II oder III:
R¹ ist bevorzugt Wasserstoff oder Methyl. Stärker bevorzugt ist R¹ Wasserstoff.
R² der Verbindungen der Formel I ist bevorzugt -CR'R''-R^a (wobei R' und R'' Wasserstoff, Hydroxyalkyl oder Alkyl sind, wobei mindestens einer davon Alkyl oder Hydroxyalkyl ist, und R^a Hydroxyalkyl ist), Alkoxy-substituiertes Alkyl, R^x-SO₂-R^y (wobei R^x Alkyl ist und R^y Alkenyl ist), C₄-C₅ Cycloalkyl oder (N-substituiertes Piperidin-4-yl)methyl und stärker bevorzugt -CR'R''-R^a (wie vorstehend definiert) oder (N-substituiertes Piperidin-4-yl)methyl, speziell (N-substituiertes Piperidin-4-yl)methyl, wobei die Substitution bevorzugt wie in den vorstehenden Definitionen angezeigt ist, wobei die Hydroxygruppen in R² jeweils unabhängig in Form eines Ester-, eines Carbamat-, eines Carbonat- oder eines Sulfonatderivats vorliegen können. Noch stärker bevorzugt ist R² (1,1-Dimethyl-2-hydroxy)ethyl, (1,2-Dimethyl-2-hydroxy)propyl, (N-Methylpiperidin-4-yl), [1-Dimethylacetamidopiperidin-4-yl]methyl, [1-Carboxymethylpiperidin-4-yl]methyl, (1,1-Dimethyl-2-hydroxy)ethyl, (1-Methyl-3-hydroxy)propyl, (1-Methyl-1-hydroxymethyl-2-hydroxy)ethyl, [1,1-Di(hydroxymethyl)]propyl, (1-Hydroxymethyl-2-methyl)propyl, (1-Hydroxymethyl)propyl, (1-Hydroxymethyl-2,2-dimethyl)propyl, (1-Hydroxymethyl-3-methyl)butyl, (2-Hydroxy)propyl, (1-Methyl-2-hydroxy)ethyl, (1-Hydroxymethyl-2-methyl)butyl, 2-Hydroxyethyl, 2-Hydroxy-2-methylpropyl, 5-Hydroxypentyl, 2-Hydroxybutyl, 1-(Hydroxymethyl)-2-hydroxyethyl, 2,3-Dihydroxypropyl, [1-Carbomethoxymethylpiperidin-4-yl]methyl oder [1-Carboxymethylpiperidin-4-yl]methyl oder {1-Methyl, 2-Methyl, 2-[Methyldisulfon]}ethyl, wobei die Hydroxygruppen in R² jeweils unabhängig in Form eines Ester-, eines Carbamat-, eines Carbonat- oder eines Sulfonatderivats vorliegen können.
In einer anderen Ausführungsform bilden R¹ und R² vorzugsweise zusammen mit dem Stickstoffatom, an welches sie gebunden sind, ein -Alkylen-S(O)_n-R^a-substituiertes Heterocyclyl (wobei n 0, 1 oder 2, vorzugsweise 0 ist, und R^a Alkyl ist). Stärker bevorzugt bilden R¹ und R² zusammen mit dem Stickstoffatom, an welches sie gebunden sind, ein -Alkylen-S(O)_n-R^a substituiertes Aziridinyl, wobei n bevorzugt 0 ist.
R³ ist bevorzugt Wasserstoff, Alkyl, Amino, Monoalkylamino, Dialkylamino, Halogenalkyl, Cycloalkyl, Cyanomethyl, Heteroalkyl, Aryl, Aralkyl oder Alkylen-C(O)-R (wobei R Wasserstoff, Alkyl, Hydroxy, Alkoxy, Amino, Monoalkylamino oder Dialkylamino ist). R³ ist stärker bevorzugt Wasserstoff, Alkyl, Amino, Cycloalkyl oder Aryl, hauptsächlich Wasserstoff, Alkyl oder Aryl. R³ kann bevorzugt auch Wasserstoff, Amino, Methyl, 2,2,2-Trifluorethyl, Cyclopropyl, Cyanomethyl, 2-Hydroxyethyl, 4-Fluorphenyl, Benzyl, Carboxymethyl oder Methoxycarbonylmethyl sein. Noch stärker bevorzugt ist R³ Wasserstoff, Methyl, 4-Fluorphenyl, Amino oder Cyclopropyl, hauptsächlich Wasserstoff, Methyl oder 4-Fluorphenyl.
In einer weiteren Ausführungsform stellt die vorliegende Erfindung Verbindungen der Formel:
bereit,
wobei:
R¹ Wasserstoff oder Alkyl ist;
R² -CR'R''-R^a (wobei R' und R'' Wasserstoff oder Alkyl sind, wobei mindestens einer davon Alkyl ist und R^a Hydroxyalkyl ist) oder Heterocyclylalkyl ist;
R³ Wasserstoff, Alkyl, Cycloalkyl, Aryl, Aralkyl, Halogenalkyl, Heteroalkyl, Cyanoalkyl, Alkylen-C(O)-R (wobei R Wasserstoff, Alkyl, Hydroxy, Alkoxy, Amino, Monoalkylamino oder Dialkylamino ist) oder Acyl ist; und
Ar¹ Aryl ist.
Besonders bevorzugte Verbindungen dieser Ausführungsform der vorliegenden Erfindung sind jene der Formel II:
wobei n 1 oder 2, bevorzugt 1 ist, und X Wasserstoff, Alkyl, Halogen, Nitro, Cyano oder Methoxy, bevorzugt Halogen ist.
Stärker bevorzugte Verbindungen dieser Ausführungsform der vorliegenden Erfindung sind jene der Formel III:
In Bezug auf Verbindungen der Formel I dieser Ausführungsform der vorliegenden Erfindung:
R¹ ist bevorzugt Wasserstoff oder Methyl. Stärker bevorzugt ist R¹ Wasserstoff.
R² ist bevorzugt -CR'R''-R^a (wobei R' und R'' Wasserstoff oder Alkyl sind, wobei mindestens einer davon Alkyl ist, und R^a Hydroxyalkyl ist);
oder (N-substituiertes Piperidin-4-yl)methyl. Stärker bevorzugt ist R² (1,1-Dimethyl-2-hydroxy)ethyl, (1,2-Dimethyl-2-hydroxy)propyl, (N-Methylpiperidin-4-yl)methyl, [1-Dimethylacetamidopiperidin-4-yl]methyl, [1-Carboxymethylpiperidin-4-yl]methyl oder [1-Carboxymethoxymethylpiperidin-4-yl]methyl.
R³ ist bevorzugt Wasserstoff, Alkyl, Halogenalkyl, Cycloalkyl, Cyanomethyl, Heteroalkyl, Aryl, Aralkyl oder Alkylen-C(O)-R (wobei R Wasserstoff, Alkyl, Hydroxy, Alkoxy, Amino, Monoalkylamino oder Dialkylamino ist). Stärker bevorzugt ist R³ Wasserstoff, Methyl, 2,2,2-Trifluorethyl, Cyclopropyl, Cyanomethyl, 2-Hydroxyethyl, 4-Fluorphenyl, Benzyl, Carboxymethyl oder Methoxycarbonylmethyl. Noch stärker bevorzugt ist R³ Wasserstoff oder Methyl.
In einer noch weiteren Ausführungsform stellt die vorliegende Erfindung Verbindungen der Formel I, II oder III, wie hier vorstehend definiert, bereit, wobei R² Heterocyclylalkyl ist und/oder R³ Amino ist, mit den Definitionen und Bevorzugungen gegenüber Heterocyclylalkyl und Amino mit R¹ und Ar¹ wie hier vorstehend angegeben.
Es sollte selbstverständlich sein, dass, wenn R³ Wasserstoff ist, die Verbindungen in der nachstehenden tautomeren Form vorliegen können:
So schließt die vorliegende Erfindung zusätzlich zu den vorstehend beschriebenen Verbindungen alle tautomeren Formen ein. Weiter schließt die vorliegende Erfindung auch alle pharmazeutisch verträglichen Salze jener Verbindungen mit den Prodrug der Verbindungen und alle Stereoisomere, entweder in einer reinen chiralen Form oder in einem racemischen Gemisch oder anderen Formen oder Gemischen ein.
Noch weiter werden Kombinationen der bevorzugten, vorstehend beschriebenen Gruppen andere bevorzugte Ausführungsformen bilden; so sind zum Beispiel bevorzugte Substituenten R¹, R² und R³ der Formel I auch bevorzugte Substituenten der Verbindungen der Formeln Π und III.
Einige der repräsentativen Verbindungen der Formel I werden in der nachstehenden Tabelle 1 gezeigt.
Tabelle 1. Repräsentative Verbindungen der Formel I
Der IC₅₀ von Verbindungen der Formel I beträgt in dem in vitro p38 Assay weniger als 10 μM, vorzugsweise weniger als 5 μM, stärker bevorzugt weniger als 2 μM, und am stärksten bevorzugt weniger als 1 μM. Insbesondere Verbindungen der Formel I in Tabelle I weisen in dem in vitro p38 Assay einen IC₅₀ von etwa 0,712 μM bis etwa 0,001 μM auf.
Die erfindungsmäßigen Verbindungen können in nicht solvatisierten Formen wie auch solvatisierten Formen, einschließlich hydratisierten Formen vorkommen. Im Allgemeinen sind die solvatisierten Formen, einschließlich hydratisierten Formen äquivalent zu den nicht solvatisierten Formen und sollen innerhalb des Bereichs der vorliegenden Erfindung eingeschlossen sein. Weiter schließt die vorliegende Erfindung, wie vorstehend angegeben, auch alle pharmazeutisch verträglichen Salze jener Verbindungen zusammen mit den Prodrug-Formen der Verbindungen und aller Stereoisomere entweder in einer reinen chiralen Form oder in einem racemischen Gemisch oder einer anderen Form eines Gemischs ein.
Die erfindungsmäßigen Verbindungen sind fähig, weiterhin pharmazeutisch verträgliche Säureadditionssalze zu bilden. Alle diese Formen liegen innerhalb des Bereichs der vorliegenden Erfindung.
Pharmazeutisch verträgliche Säureadditionssalze der erfindungsmäßigen Verbindungen schließen Salze, die sich von anorganischen Säuren wie Salz-, Salpeter-, Phosphor-, Schwefel-, Bromwasserstoff-, Iodwasserstoff-, Phosphonsäure und dergleichen ableiten, wie auch den Salzen, die sich von organischen Säuren wie aliphatischen Mono- und Dicarbonsäuren, Phenyl substituierten Alkansäuren, Hydroxyalkansäuren, Alkandisäuren, aromatischen Säuren, aliphatischen und aromatischen Sulfonsäuren u.s.w. ableiten, ein. Derartige Salze schließen so Sulfat, Pyrosulfat, Bisulfat, Sulfit, Bisulfit, Nitrat, Phosphat, Monohydrogenphosphat, Dihydrogenphosphat, Metaphosphat, Pyrophosphat, Chlorid, Bromid, Iodid, Acetat, Propionat, Caprylat, Isobutyrat, Oxalat, Malonat, Succinat, Suberat, Sebacat, Fumarat, Maleat, Mandelat, Benzoat, Chlorbenzoat, Methylbenzoat, Dinitrobenzoat, Phthalat, Benzolsulfonat, Toluolsulfonat, Phenylacetat, Citrat, Lactat, Maleat, Tartrat, Methansulfonat und dergleichen ein. Auch betrachtet werden Salze von Aminosäuren wie Arginat und dergleichen und Gluconat, Galacturonat (siehe zum Beispiel Berge et al., „Pharmaceutical Salts" J. of Pharmaceutical Science, 1977, 66, 1–19).
Die Säureadditionssalze basischer Verbindungen können durch Kontaktieren der freien Basenform mit einer ausreichenden Menge der gewünschten Säure hergestellt werden, um das Salz auf herkömmliche Weise herzustellen. Die freie Basenform kann durch Kontaktieren der Salzform mit einer Base und Isolierung der freien Base auf herkömmliche Weise regeneriert werden. Die freien Basenformen können sich in gewissen physikalischen Eigenschaften wie Löslichkeit in polaren Lösungsmitteln ein wenig von ihren jeweiligen Salzformen unterscheiden, aber andererseits sind die Salze zu ihrer jeweiligen freien Base in Sinne der vorliegenden Erfindung äquivalent.
Pharmazeutisch verträgliche Basenadditionssalze können mit Metallionen oder Aminen wie Alkali- und Erdalkalimetallionen oder organischen Aminen gebildet werden. Beispiele für Metallionen, welche als Kationen verwendet werden, schließen Natrium, Kalium, Magnesium, Calcium und dergleichen ein. Beispiele für geeignete Amine sind N,N'-Dibenzylethylendiamin, Chlorprocain, Cholin, Diethanolamin, Ethylendiamin, N-Methylglucamin und Procain (siehe zum Beispiel Berge et al., „Pharmaceutical Salts" J. of Pharmaceutical Science, 1977, 66, 1–19).
Die Basenadditionssalze von sauren Verbindungen können durch Kontaktieren der freien Säureform mit einer ausreichenden Menge der gewünschten Base hergestellt werden, um das Salz auf herkömmliche Weise herzustellen. Die freie Säureform kann durch Kontaktieren der Salzform mit einer Säure und Isolierung der freien Säure auf herkömmliche Weise regeneriert werden. Die freien Säureformen können sich in gewissen physikalischen Eigenschaften wie Löslichkeit in polaren Lösungsmitteln ein wenig von ihren jeweiligen Salzformen unterscheiden, aber andererseits sind die Salze zu ihrer jeweiligen freien Säure in Sinne der vorliegenden Erfindung äquivalent.
Die erfindungsmäßigen Verbindungen können durch eine Vielfalt von Verfahren, unter Verwendung von Verfahren, die den Fachleuten wohlbekannt sind, hergestellt werden. In einer Ausführungsform der vorliegenden Erfindung wird ein Verfahren zur Herstellung von Verbindungen der Formel I in nachstehendem Schema 1 gezeigt.
Schema 1
Behandlung einer Verbindung der Formel Ia (kann einfach durch Verfahren, die auf dem Fachgebiet bekannt sind, hergestellt werden oder kann von Quellen gekauft werden, die dem Fachmann bekannt sind) mit einem primären Amin (R³-NH₂) liefert eine Verbindung der Formel Ib. Diese Umsetzung wird günstigerweise in einem Lösungsmittel, welches unter den Reaktionsbedingungen inert ist, vorzugsweise einem halogenierten aliphatischen Kohlenwasserstoff, hauptsächlich Dichlormethan, einem gegebenenfalls halogenierten aromatischen Kohlenwasserstoff, einem offenkettigen oder cyclischen Ether (z.B. Tetrahydrofuran), einem Formamid oder einem niederen Alkanol durchgeführt. Passenderweise wird die Umsetzung bei etwa –20°C bis etwa 120°C durchgeführt.
Die Reduktion einer Verbindung der Formel Ib liefert einen Alkohol der Formel Ic. Diese Reduktion wird typischerweise unter Verwendung von Lithiumaluminiumhydrid auf eine Art und Weise (z.B. in einem Lösungsmittel, welches unter den Reduktionsbedingungen inert ist, vorzugsweise einem offenkettigen oder cyclischen Ether, hauptsächlich Tetrahydrofuran, bei etwa –20°C bis etwa 70°C, vorzugsweise bei etwa 0°C bis etwa Raumtemperatur), die den Fachleuten wohlbekannt ist, durchgeführt.
Die Oxidation eines Alkohols der Formel Ic in der nächsten Stufe liefert ein Carboxaldehyd der Formel Id. Die Oxidation wird typischerweise mit Mangandioxid durchgeführt, obwohl auch zahlreiche andere Verfahren verwendet werden können (siehe zum Beispiel Advanced Organic Chemistry, 4. Aufl., March, John Wiley & Sons, New York (1992)). Abhängig vom verwendeten Oxidationsmittel wird die Umsetzung günstigerweise in einem Lösungsmittel, welches unter den speziellen Oxidationsbedingungen inert ist, vorzugsweise einem halogenierten aliphatischen Kohlenwasserstoff, hauptsächlich Dichlormethan oder einem gegebenenfalls halogenierten aromatischen Kohlenwasserstoff durchgeführt. Passenderweise wird die Oxidation bei etwa 0°C bis etwa 60°C durchgeführt.
Die Umsetzung eines Carboxaldehyd der Formel Id mit einem Aryl-substituierten Acetat Ar¹-CH₂-CO₂R (wobei R ein Alkylrest ist) in Gegenwart einer Base liefert eine Verbindung der Formel Ie. Jede relativ nicht-nukleophile Base, einschließlich Carbonate wie Kaliumcarbonat, Lithiumcarbonat und Natriumcarbonat; Bicarbonate wie Kaliumbicarbonat, Lithiumbicarbonat und Natriumbicarbonat; Amine wie sekundäre und tertiäre Amine; und Harz-gebundene Amine wie 1,3,4,6,7,8-Hexahydro-2H-pyrimido[1,2-a]pyrimidin kann verwendet werden. Um die Produktausbeute zu erhöhen und/oder die Reaktionsgeschwindigkeit zu erhöhen, kann das bei der Umsetzung gebildete Wasser durch ein azeotropes Gemisch entfernt werden. Günstigerweise wird die Umsetzung in einem Lösungsmittel, welches unter den Reaktionsbedingungen relativ polar aber inert ist, vorzugsweise ein Amid wie Dimethylformamid, N-substituiertes Pyrrolidinon, hauptsächlich 1-Methyl-2-pyrrolidinon und bei einer Temperatur von etwa 70°C bis etwa 150°C, hauptsächlich bei oder nahe der Rückflusstemperatur des Lösungsmittels durchgeführt, um bei der bekannten azeotropen Entfernung des Wassers mitzuhelfen.
Oxidation von Ie mit einem Oxidationsmittel wie 3-Chlorperbenzoesäure (d.h. MCPBA) und Oxone^® liefert ein Sulfon (If), welches zu einer Vielfalt von Zielverbindungen umgewandelt werden kann. Typischerweise wird die Oxidation von Ie in einem Lösungsmittel, welches unter den Oxidationsbedingungen inert ist, durchgeführt. Wenn zum Beispiel MCPBA als Oxidationsmittel verwendet wird, ist das Lösungsmittel vorzugsweise ein halogenierter aliphatischer Kohlenwasserstoff, hauptsächlich Chloroform. Wenn Oxone^® als Oxidationsmittel verwendet wird, kann das Lösungsmittel Wasser oder ein Gemisch aus einem organischen Lösungsmittel (wie Acetonitril) und Wasser sein. Die Reaktionstemperatur hängt von dem verwendeten Lösungsmittel ab. Bei einem organischen Lösungsmittel beträgt die Reaktionstemperatur im Allgemeinen etwa –20°C bis etwa 50°C, vorzugsweise etwa 0°C bis etwa Raumtemperatur. Wenn Wasser als Lösungsmittel verwendet wird, beträgt die Reaktionstemperatur im Allgemeinen etwa 0°C bis etwa 50°C, vorzugsweise etwa 0°C bis etwa Raumtemperatur. In einer anderen Ausführungsform kann die Oxidation unter katalytischen Bedingungen mit Reagenzien auf Rhenium/Peroxid-Basis durchgeführt werden. Siehe zum Beispiel "Oxidation of Sulfoxides by Hydrogen Peroxide, Catalyzed by Methyltrioxorhenium(VII)", Lahti, David W.; Espenson, James H, Inorg. Chem. 2000, 39 (10) S. 2164–2167; "Rhenium oxo complexes in catalytic oxidations", Catal. Today, 2000, 55(4), S. 317–363 und "A Simple and Efficient Method for the Preparation of Pyridine N-Oxides", Coperet, Christophe; Adolfsson, Hans; Khuong, Tinh-Alfredo V.; Yudin, Andrei K.; Sharpless, K. Barry, J. Org. Chem, 1998, 63 (5), S. 1740–1741, die hier zur Gänze durch Bezugnahme aufgenommen sind.
Umsetzung von Verbindung If mit einem Amin (R²-NH₂) liefert die Verbindungen der Formel I' (d.h. Verbindungen I, wobei R¹ Wasserstoff ist). Weitere Alkylierung von I' liefert dann Verbindungen der Formel I, wobei R¹ kein Wasserstoff ist. Die Umsetzung kann in Gegenwart oder Abwesenheit eines Lösungsmittels durchgeführt werden. Günstigerweise wird die Umsetzung bei Temperaturen von etwa 0°C bis etwa 200°C, stärker bevorzugt etwa Raumtemperatur bis etwa 150°C durchgeführt. In einer anderen Ausführungsform kann in einigen Fällen, anstatt der Verwendung des Sulfons If, das Sulfid Ie oder das entsprechende Sulfoxid direkt mit einem Amin (R¹-NH₂) umgesetzt werden, um die Verbindungen der Formel I' zu liefern. Weiter kann If auch direkt mit einem Amin R¹R²NH alkyliert werden, um eine Verbindung der Formel I zu liefern, wobei R¹ und R² so sind, wie in der Zusammenfassung der Erfindung beschrieben.
Demgemäß stellt die vorliegende Erfindung ein Verfahren zur Herstellung von Verbindungen der Formel I durch Behandeln einer Verbindung der allgemeinen Formel Ie oder If mit einem Amin (R¹-NH₂) und gegebenenfalls Umsetzen des so erhaltenen Produkts mit R¹-L, wobei R¹ vorstehend definiert ist, aber Wasserstoff ausschließt, und L eine Abgangsgruppe ist, bereit.
In einer anderen Ausführungsform kann der Carboxaldehyd der Verbindung der Formel Ie, wie in nachstehendem Schema II gezeigt, hergestellt werden, welches die Notwendigkeit einer Esterreduktion und Alkoholoxidation wie in Schema I ausschließt.
Behandlung einer Verbindung der Formel II-a (wobei R^a jeweils unabhängig Alkyl ist) (kann einfach durch Verfahren, die auf dem Fachgebiet bekannt sind, hergestellt werden oder kann von Quellen, die dem Fachmann bekannt sind, gekauft werden) mit einem Alkylformiat (z.B. Methylformiat) in Gegenwart einer Base liefert eine Verbindung der Formel II-b (wobei M ein Metall ist). Diese Umsetzung wird günstigerweise in einem Temperaturbereich von etwa 0°C bis etwa 100°C durchgeführt. Typischerweise werden ein Ether wie THF und andere Lösungsmittel, welche bei den Reaktionsbedingungen inert sind, verwendet. Geeignete Basen schließen Alkoxide wie tert-Butoxide und andere relativ nicht nukleophile Basen ein, die fähig sind, die Verbindung der Formel II-a zu deprotonieren.
Cyclisierung einer Verbindung der Formel II-b mit Thioharnstoff in Gegenwart einer Base liefert ein Pyrimidin der Formel II-c. Typischerweise wird diese Cyclisierungsreaktion in einem alkoholischen Lösungsmittel unter Rückflusserhitzen unter Verwendung eines entsprechenden Alkoxids als Base durchgeführt.
Alkylierung einer Verbindung der Formel II-c mit einem Alkylierungsmittel R-X¹ (wobei R ein Alkylrest ist und X¹ eine Abgangsgruppe wie Halogenid ist) in Gegenwart einer Base liefert dann eine Verbindung der Formel II-d. Geeignete Basen schließen relativ nicht nukleophile Basen, einschließlich Carbonate wie Kaliumcarbonat, Lithiumcarbonat und Natriumcarbonat; und Bicarbonate wie Kaliumbicarbonat, Lithiumbicarbonat und Natriumbicarbonat ein. Günstigerweise wird die Umsetzung in einem relativ polaren Lösungsmittel, dass unter den Reaktionsbedingungen inert ist, vorzugsweise Aceton, Dimethylformamid (DMF) oder Methylpyrrolidinon (MP) durchgeführt.
Umsetzung einer Verbindung der Formel II-d mit einem Aryl-substituierten Acetat Ar¹-CH₂-CO₂R (wobei R ein Alkylrest ist) unter ähnlichen Bedingungen, wie sie für die Herstellung einer Verbindung der Formel Ie in vorstehendem Schema I beschrieben werden, liefert dann eine Verbindung der Formel II-e. Während die Alkylierung einer Verbindung der Formel II-c im Allgemeinen vor der Umsetzung mit einem Aryl-substituierten Acetat durchgeführt wird, ist die Reihenfolge dieser zwei Umsetzungen nicht entscheidend und kann umgekehrt werden. So kann eine Verbindung der Formel II-c mit einem Aryl-substituierten Acetat Ar¹-CH₂-CO₂R umgesetzt werden, und das so erhaltene Produkt kann mit einem Alkylierungsmittel R-X¹ alkyliert werden, um eine Verbindung der Formel II-e zu liefern.
Alkylierung der Amingruppe einer Verbindung der Formel II-e mit einem Alkylierungsmittel R³-X² (wobei R³ wie vorstehend definiert ist und X² eine Abgangsgruppe wie Halogenid ist) liefert dann eine Verbindung Ie, welche weiter zu einer Verbindung der Formel I', wie in Schema I beschrieben, umgewandelt werden kann.
So stellt eine andere Ausführungsform der vorliegenden Erfindung ein Verfahren zur Herstellung einer Pyrimidinverbindung der Formel II-c durch Umsetzung eines Acetats der Formel II-a mit einem Alkylformiat und Umsetzung des so erhaltenen Produkts mit einem Thioharnstoff bereit.
Noch eine andere Ausführungsform der vorliegenden Erfindung stellt ein Verfahren zur Herstellung einer Verbindung der Formel II-e durch Umsetzung einer Verbindung der Formel II-c mit einem Alkylierungsmittel oder einem Aryl-substituierten Acetat und Umsetzung des so erhaltenen Produkts mit einem Aryl-substituierten Acetat beziehungsweise einem Alkylierungsmittel bereit.
Einem Fachmann sollte es selbstverständlich sein, dass gewisse Änderungen an den vorstehenden Schemen beabsichtigt und innerhalb des Bereichs der vorliegenden Erfindung sind. Zum Beispiel werden gewisse Schritte die Verwendung von Schutzgruppen für funktionelle Reste, die mit speziellen Reaktionsbedingungen nicht kompatibel sind, zur Folge haben.
Die erfindungsmäßigen Verbindungen können als Medikamente, z.B. in Form von pharmazeutischen Präparaten verwendet werden. Die pharmazeutischen Präparate können enteral, z.B. oral in Form von Tabletten, überzogenen Tabletten, Dragees, harten und weichen Gelatinekapseln, Lösungen, Emulsionen oder Suspensionen, nasal, z.B. in Form von Nasensprays oder rektal, z.B. in Form von Suppositorien verabreicht werden. Jedoch können sie auch parenteral, z.B. in Form von Injektionslösungen verabreicht werden.
Die Verbindungen der Formel I und deren vorstehend erwähnten pharmazeutisch verträglichen Salze können mit pharmazeutisch inerten, organischen oder anorganischen Träger für die Herstellung von pharmazeutischen Präparaten verarbeitet werden. Lactose, Maisstärke oder Derivate davon, Talk, Stearinsäure oder ihre Salze und dergleichen können zum Beispiel als derartige Träger für Tabletten, überzogene Tabletten, Dragees, harte Gelatinekapseln verwendet werden. Geeignete Träger für weiche Gelatinekapseln sind zum Beispiel pflanzliche Öle, Wachse, Fette, halbfeste und flüssige Polyole und dergleichen; abhängig von der Natur des Wirkstoffs werden jedoch gewöhnlich im Falle von weichen Gelatinekapseln keine Träger benötigt. Geeignete Träger zur Herstellung von Lösungen und Sirupe sind zum Beispiel Wasser, Polyole, Saccharose, Invertzucker, Glucose und dergleichen. Geeignete Träger für Suppositorien sind zum Beispiel natürliche oder gehärtete Öle, Wachse, Fette, dickflüssige oder flüssige Polyole und dergleichen.
Die pharmazeutischen Präparate können auch Konservierungsmittel, Lösungsvermittler, Stabilisatoren, Netzmittel, Emulgatoren, Süßstoffe, farbgebende Stoffe, Geschmackstoffe, Salze zur Variierung des osmotischen Drucks, Puffer, Maskierungsmittel oder Antioxidanzien enthalten. Sie können auch therapeutisch wertvolle Substanzen, andere als die Verbindungen der Formel I und deren vorstehend erwähnte pharmazeutisch verträgliche Salze enthalten.
Medikamente, welche eine erfindungsmäßige Verbindung zusammen mit einem verträglichen pharmazeutischen Trägermaterial enthalten, sind auch Gegenstand der vorliegenden Erfindung, wie ein Verfahren zur Herstellung von derartigen Medikamenten, welches das Überführen einer oder mehrerer dieser Verbindungen oder Salze und, falls gewünscht, einer oder mehrerer anderer therapeutisch wertvollen Substanzen in eine galenische Verabreichungsform zusammen mit einem verträglichen pharmazeutischen Träger umfasst.
Wie vorstehend erwähnt, können die erfindungsmäßigen Verbindungen entsprechend der Erfindung als therapeutische Wirkstoffe, hauptsächlich als Phlogistika oder zur Vorbeugung von Transplantatabstoßung im Anschluss an eine Transplantationsoperation verwendet werden. Die Dosierung kann innerhalb großer Bereiche variieren und wird natürlich an die individuellen Erfordernisse in jedem speziellen Fall angepasst werden. Im Allgemeinen sollte im Falle einer Verabreichung an Erwachsene eine passende Tagesdosierung etwa 0,1 mg/kg bis etwa 100 mg/kg, vorzugsweise etwa 0,5 mg/kg bis etwa 5 mg/kg betragen. Die Tagesdosierung kann als eine Einzeldosis oder in Teildosen verabreicht werden und außerdem kann die obere Dosierungsgrenze, auf die vorstehend hingewiesen wurde, überschritten werden, wenn festgestellt wird, dass dies erforderlich ist.
Abschließend ist die Verwendung der erfindungsmäßigen Verbindungen zur Herstellung von Medikamenten, hauptsächlich bei der Behandlung oder Vorbeugung von entzündlichen, immunologischen, onkologischen, bronchopulmonalen, dermatologischen und kardiovaskulären Störungen, bei der Behandlung von Asthma, Störungen des Zentralnervensystems oder diabetischen Komplikationen oder zur Vorbeugung einer Transplantatabstoßung im Anschluss an eine Transplantationsoperation auch eine Aufgabe der Erfindung.
Die erfindungsmäßigen Verbindungen würden nützlich sein zur, aber nicht beschränkt auf die Behandlung jeder Störung oder Krankheitsstadium in einem Menschen oder anderen Säuger, welche durch übermäßige oder nicht regulierte TNF oder p38-Kinaseproduktion durch einen derartigen Säuger verschlimmert oder verursacht wird. Demgemäß stellt die vorliegende Erfindung ein Verfahren zur Behandlung einer Cytokin vermittelten Erkrankung bereit, welches die Verabreichung einer wirksamen Cytokin hemmenden Menge einer erfindungsmäßigen Verbindung umfasst.
Erfindungsmäßige Verbindungen würden nützlich sein zur, aber nicht beschränkt auf die Behandlung einer Entzündung in einer Testperson und zur Verwendung als Antipyretika zur Behandlung von Fieber. Erfindungsmäßige Verbindungen würden nützlich sein, Arthritis, einschließlich aber nicht beschränkt auf rheumatoide Arthritis, Spondylarthropathien, Gichtarthritis, Osteoarthrose, systemischen Lupus erythematodes und juvenile Arthritis, Osteoarthrose, Gichtarthritis und andere arthritische Zustände zu behandeln. Derartige Verbindungen würden zur Behandlung von pulmonalen Störungen oder Lungenentzündung, einschließlich ARDS, Lungensarkoidose, Asthma, Silikose und chronisch entzündlichen Erkrankung der Lunge nützlich sein. Die Verbindungen sind auch zur Behandlung von viralen und bakteriellen Infektionen, einschließlich Sepsis, septischem Schock, Gram-negativer Sepsis, Malaria, Meningitis, Kachexie neben einer Infektion oder Malignom, Kachexie neben einem erworbenen Immundefektsyndrom (AIDS), AIDS, ARC (AIDS verwandter Komplex), Pneumonie und Herpesvirus nützlich. Die Verbindungen sind auch zur Behandlung von Knochenresorptionserkrankungen wie Osteoporose, Endotoxinschock, toxischem Schocksyndrom, Reperfusionsschaden, Autoimmunerkrankung, einschließlich Graft-verus-Host-Reaktion und Homotransplantationsabstoßungen, kardiovaskulären Erkrankungen, einschließlich Atherosklerose, Thrombose, dekompensierter Herzinsuffizienz und kardialem Reperfusionsschaden, renalem Reperfusionsschaden, Lebererkrankung und Nephritis und Myalgien aufgrund einer Infektion nützlich.
Die Verbindungen sind auch zur Behandlung von Alzheimer-Krankheit, Influenza, multipler Sklerose, Krebs, Diabetes, systemischem Lupus erythematodes (SLE), Hautkrankheiten wie Psoriasis, Ekzem, Verbrennungen, Dermatitis, Keloidbildung und Narbengewebebildung nützlich. Erfindungsmäßige Verbindungen würden auch nützlich sein, gastrointestinale Zustände wie entzündliche Darmerkrankungen, Morbus Crohn, Gastritis, Reizkolon und Colitis ulcerosa zu behandeln. Die Verbindungen würden auch bei der Behandlung von Augenerkrankungen wie Retinitis, Retinopathien, Uveitis, okularer Photophobie und einer akuten Verletzung des Augengewebes nützlich sein. Erfindungsmäßige Verbindungen würden auch bei der Behandlung von Angiogenese, einschließlich Neoplasie; Metastase; ophthalmologischen Zuständen wie Hornhauttransplantatabstoßung, Augenrevaskularisierung, Netzhautrevaskularisierung, einschließlich Revaskularisierung in Folge einer Verletzung oder Infektion, diabetischer Retinose, retrolentaler Fibroplasie und neovaskulärem Glaukom; ulzerösen Erkrankungen wie Magengeschwür; pathologischen, aber nicht malignen Zuständen wie Hämangiome, einschließlich infantiler Hämangiome, Angiofibrom des Nasenrachenraums und aseptischer Knochennekrose; diabetischer Nephropathie und Myokardiopathie; und Störungen des weiblichen Fortpflanzungssystems wie Endometriose nützlich sein. Die erfindungsmäßigen Verbindungen können auch zur Verhinderung der Cyclooxygenase-2-Produktion nützlich sein.
Abgesehen davon, dass sie bei der Behandlung von Menschen nützlich sind, sind diese Verbindungen auch zur tierärztlichen Behandlung von Haustieren, exotischen Tieren und Nutztieren, einschließlich Säugetieren, Nagetieren und dergleichen nützlich. Stärker bevorzugte Tiere schließen Pferde, Hunde und Katzen ein.
Die vorliegenden Verbindungen können auch in Co-Therapien, teilweise oder vollständig, an Stelle von anderen herkömmlichen Phlogistika wie zusammen mit Steroiden, Cyclooxygenase-2-Inhibitoren, NSAIDs, DMARDS, immunosuppressiven Mitteln, 5-Lipoxygenase-Inhibitoren, LTB₄-Antagonisten und LTA₄-Hydrolase Inhibitoren verwendet werden.
Der Begriff „TNF übertragene Störung" betrifft, wie hier verwendet, eine und alle Störungen und Krankheitsstadien, in welchen TNF eine Rolle spielt, entweder durch Kontrolle von TNF selbst, oder durch TNF, das die Freisetzung anderer Monokine wie, aber nicht beschränkt auf, IL-1, IL-6 oder IL-8 bewirkt. Ein Krankheitsstadium, in welchem zum Beispiel IL-1 eine Hauptkomponente ist, und dessen Produktion oder Wirkung, als Reaktion auf TNF erschwert oder sezerniert wird, würde deshalb als TNF übertragene Störung betrachtet werden.
Der Begriff „p38 übertragene Störung" verweist, wie hier verwendet, auf eine und alle Störungen und Krankheitsstadien, in welchen p38 eine Rolle spielt, entweder durch Kontrolle von p38 selbst oder durch p38, das die Freisetzung eines anderen Faktors wie, aber nicht beschränkt auf, IL-1, IL-6 oder IL-8 bewirkt. Ein Krankheitsstadium, in welchem zum Beispiel IL-1 eine Hauptkomponente ist, und dessen Produktion oder Wirkung, als Reaktion auf p38 erschwert oder sezerniert wird, würde deshalb als p38 übertragene Störung betrachtet werden.
Weil TNF-β eine nahe strukturelle Homologie mit TNF-α (auch als Cachectin bekannt) aufweist, und weil jedes ähnliche biologische Reaktionen verursacht und an den selben zellulären Rezeptor bindet, wird die Synthese von sowohl TNF-α als auch TNF-β durch die erfindungsmäßigen Verbindungen inhibiert und werden hier so zusammen als „TNF", wenn nicht speziell anders beschrieben, bezeichnet.
Beispiele: Beispiel 1: Sulfon 1
Dieses Beispiel erläutert die Herstellung von Sulfon 1 aus Ethyl-4-chlor-2-methylthiopyrimidin-5-carboxylat.
Stufe 1.1 Herstellung von Ethyl-4-methylamino-2-methylthiopyrimidin-5-carboxylat
Eine Lösung von 20 g (86 mmol) Ethyl-4-chlor-2-methylthiopyrimidin-5-carboxylat (Aldrich Chemical Co., Milwaukee, Wisconsin, USA) in 250 ml Dichlormethan wurde auf 0°C abgekühlt und langsam mit 35 ml (281 mmol) einer 33% Lösung von Methylamin in Ethanol behandelt. Nach 30 minütigem Rühren wurden 150 ml Wasser zugegeben, und die Phasen wurden getrennt. Die organische Phase wurde über Magnesiumsulfat getrocknet und filtriert. Das Filtrat wurde unter verringertem Druck eingedampft, um 19 g (97%) Ethyl-4-methylamino-2-methylthiopyrimidin-5-carboxylat als weißen Feststoff zu ergeben.
Stufe 1.2 Herstellung von 4-Methylamino-2-methylthiopyrimidin-5-methanol
Lithiumaluminiumhydrid (9 g, 237 mmol) wurde in 300 ml trockenem Tetrahydrofuran gerührt und tropfenweise mit einer Lösung von 34 g (143 mmol) Ethyl-4-methylamino-2-methylthiopyrimidin-5-carboxylat in 300 ml trockenem Tetrahydrofuran behandelt und für 15 Minuten stehen gelassen. Das Gemisch wurde in Eis abgekühlt und tropfenweise mit 18 ml Wasser vorsichtig behandelt. Eine Natriumhydroxidlösung (36 ml, 2 M) wurde tropfenweise zugegeben, gefolgt von 48 ml Wasser. Die so erhaltene Suspension wurde für 17 Stunden bei Raumtemperatur gerührt und dann filtriert. Der Filtrierrückstand wurde zweimal mit 100 ml Ethylacetat gewaschen. Das Filtrat und die Waschungen wurden vereinigt und unter verringertem Druck eingedampft. Der Rückstand wurde in 200 ml Dichlormethan/Hexan (2:1) suspendiert, und der Feststoff wurde filtriert und getrocknet, um 23,5 g (86%) 4-Methylamino-2-methylthiopyrimidin-5-methanol als gelben Feststoff zu ergeben.
Stufe 1.3 Herstellung von 4-Methylamino-2-methylthiopyrimidin-5-carboxaldehyd
4-Methylamino-2-methylthiopyrimidin-5-methanol (20 g, 108 mmol) und 1 l Dichlormethan wurden unter Rühren vereinigt und mit 87 g (1 mol) Mangandioxid behandelt. Die so erhaltene Suspension wurde für 24 Stunden gerührt und dann durch ein Filtermittel filtriert. Der Filtrierrückstand wurde mit 100 ml Dichlormethan gewaschen, und das vereinigte Filtrat und die Waschungen wurden unter verringertem Druck eingedampft, um 15,8 g (80%) 4-Methylamino-2-methylthiopyrimidin-5-carboxaldehyd als weißen Feststoff zu ergeben.
Stufe 1.4
Zu einem Gemisch aus 3,3 g (18,1 mmol) 4-Methylamino-2-methylthiopyrimidin-5-carboxaldehyd, 4,0 g (20,1 mmol) Ethyl-2-chlorphenylacetat in 30 ml NMP wurden 1,5 g eines Harzes, Polymer gebundenen 1,3,4,6,7,8-Hexahydro-2H-pyrimido-[1,2-a]-pyrimidin, gegeben. Das Reaktionsgemisch wurde auf 120°C erwärmt. Nach 48 h wurde das Reaktionsgemisch auf Raumtemperatur abgekühlt und filtriert. Das Harz wurde mit NMP und Ethylacetat gewaschen. Das Filtrat wurde mit Wasser verdünnt und filtriert. Das Produkt wurde durch Filtration und durch Extraktion des Filtrats mit Ethylacetat isoliert. Das Produkt wurde mit 5% wässriger HCl und Wasser gewaschen und getrocknet, um 4,0 g Sulfid zu ergeben (Massenspek. MH⁺ = 318, Schmp. 193,0–193,4).
Stufe 1.5
Eine Lösung von 13,5 g (42,5 mmol) Sulfid in Chloroform wurde in Eis abgekühlt und mit 20,5 g (91 mmol) 3-Chlorperbenzoesäure behandelt. Das Gemisch wurde bei Raumtemperatur für 16 Stunden gerührt und mit einer gesättigten, wässrigen Natriumbicarbonatlösung verdünnt. Die Phasen wurden getrennt. Die organische Phase wurde über Magnesiumsulfat getrocknet und filtriert. Das Filtrat wurde unter verringertem Druck aufkonzentriert, und das Produkt wurde in Ethylether gerührt, filtriert und getrocknet, um 13,1 g Sulfon 1 zu ergeben (Massenspek. MH⁺ = 350, Schmp. 232,6–232,8).
Beispiel 2 Sulfon 2
Dieses Beispiel erläutert die Herstellung von 6-(2-Chlorphenyl)-2-methansulfonylpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ol beginnend mit Ethyl-4-chlor-2-methylthiopyrimidin-5-carboxylat.
Stufe 2.1 Herstellung von Ethyl-4-amino-2-methylthiopyrimidin-5-carboxylat
Eine Lösung von Ethyl-4-chlor-2-methylthiopyrimidin-5-carboxylat (25,4 g, 106 mmol, Aldrich Chemical Co., Milwaukee, Wisconsin, USA) in 300 ml Tetrahydrofuran wurde mit 50 ml Triethylamin und 40 ml wässrigem Ammoniumhydroxid behandelt. Nach 4 stündigem Rühren wurden 300 ml Wasser zugegeben, und die Phasen wurden getrennt. Die organische Phase wurde mit 300 ml Kochsalzlösung gewaschen, im Vakuum aufkonzentriert, in Methylenchlorid gelöst, über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum aufkonzentriert, um 16,5 g (95%) Ethyl-4-amino-2-methylthiopyrimidin-5-carboxylat als weißen Feststoff zu ergeben.
Stufe 2.2 Herstellung von 4-Amino-2-methylthiopyrimidin-5-methanol
Zu einer 0°C Lösung von Lithiumaluminiumhydrid (175 ml, 175 mmol) in Diethylether wurde tropfenweise über einen Zeitraum von 1,5 Stunden eine Lösung von 4-Amino-2-methylthiopyrimidin-5-carboxylat (34,7 g, 163 mmol) in 500 ml trockenem Tetrahydrofuran gegeben. Das Reaktionsgemisch wurde langsam auf Raumtemperatur erwärmt und dann vor dem vorsichtigen Quenschen mit 7 ml Wasser, 7 ml 2 M Natriumhydroxidlösung, gefolgt von 14 ml Wasser zurück auf 0°C abgekühlt. Die so erhaltene Suspension wurde filtriert, und der Rückstand wurde mit 2 × 300 ml Ethylacetat gewaschen. Die Filtrate wurden vereinigt und aufkonzentriert, um 23,0 g (83%) 4-Amino-2-methylthiopyrimidin-5-methanol als weißen Feststoff zu ergeben.
Stufe 2.3 Herstellung von 4-Amino-2-methylthiopyrimidin-5-carboxaldehyd
Ein Suspension von 4-Amino-2-methylthiopyrimidin-5-methanol (21,8 g, 128 mmol) in 800 ml Methylenchlorid wurde mit aktiviertem Manganoxidpulver (63,0 g, 725 mmol) behandelt. Das Reaktionsgemisch wurde für 18 Stunden gerührt, dann durch eine Celite-Unterlage filtriert. Der feste Rückstand wurde wiederholt mit einer Lösung von heißem Methylenchlorid und Methanol gewaschen. Die Filtrate wurden vereinigt und aufkonzentriert, um 17,5 g (81%) 4-Amino-2-methylthiopyrimidin-5-carboxaldehyd als weißen Feststoff zu ergeben.
Stufe 2.4 Herstellung von 6-(2-Chlorphenyl)-2-methylthio-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ol
Zu einer Lösung von 4-Amino-2-methylthiopyrimidin-5-carboxaldehyd (21,7 g, 128 mmol) und Ethyl-2-chlorphenylacetat (31,3 g, 158 mmol) in 250 ml trockenem 1-Methyl-2-pyrrolidinon wurde (63,0 g, 491 mmol) Kaliumcarbonat gegeben. Das Reaktionsgemisch wurde bei 95°C für 16 Stunden gerührt und mittels DC (20:80 Ethylacetat/Hexane) kontrolliert. Zusätzliche 12,0 g (60 mmol) Ethyl-2-chlorphenylacetat wurden zugegeben, und das Reaktionsgemisch wurde bei 95°C für weitere 16 Stunden gerührt. Das Reaktionsgemisch wurde abgekühlt und filtriert. Die filtrierten Feststoffe wurden mit Ethylacetat gewaschen. Die Filtrate wurden vereinigt und mit 400 ml Wasser und 300 ml Ethylacetat verdünnt.
Die Phasen wurden getrennt, und die organische Phase wurde mit Kochsalzlösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum, bis sich ein gelber Niederschlag bildete, aufkonzentriert. Die Feststoffe wurden mit Ethylacetat gewaschen und getrocknet, um eine geringfügige Menge an Produkt zu ergeben.
Der größte Teil an Produkt blieb in der wässrigen Phase und fiel langsam beim Stehen lassen aus. Die so erhaltene Suspension, die sich bildete, wurde filtriert und mit Wasser und Ethylacetat gewaschen. Dieses Verfahren wurde sechsmal wiederholt und lieferte eine Gesamtmenge von 31,9 g (82%) 6-(2-Chlorphenyl)-2-methansulfonyl-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ol. Massenspek. M⁺ = 303, Schmp. = 234,5–235,3°C.
Stufe 2.5 Herstellung von 6-(2-Chlorphenyl)-2-methansulfonyl-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ol
Zu einer Lösung von 6-(2-Chlorphenyl)-2-methylthio-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ol (25,2 g, 82,9 mmol) wurde eine Aufschlämmung von Oxone^TM (105 g, 171 mmol) in 200 ml Wasser gegeben. Das Reaktionsgemisch wurde für 5 Stunden gerührt, filtriert und im Vakuum aufkonzentriert.
Die so erhaltene Aufschlämmung wurde filtriert, und die gesammelten Feststoffe wurden aufeinander folgend viermal mit Wasser gewaschen und getrocknet, um 23,2 g (83%) 6-(2-Chlorphenyl)-2-methansulfonyl-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-ol als hellgelben Feststoff zu ergeben. Massenspek. MH⁺ = 336, Schmp. = 215,1–221,1°C.
Beispiel 3
Dieses Beispiel erläutert die Herstellung von 6-(2-Chlorphenyl)-2-[(1-methylpiperidin-4-ylmethyl)amino]-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on.
Das Sulfon 2 (0,5 g, 1,49 mmol) wurde mit 1-Methyl-4-aminomethylpiperidin (0,57 g, 4,47 mmol) vereinigt. Das Gemisch wurde auf 110°C erwärmt und für 2 Stunden gerührt. Die Umsetzung wurde auf Raumtemperatur abgekühlt, und der Rückstand wurde in Methanol/Dichlormethan gelöst und säulenchromatographisch auf Kieselgel in 10% Methanol/Dichlormethan gereinigt. Die Fraktionen, die das Produkt enthielten, wurden vereinigt und aufkonzentriert. Der so erhaltene Rückstand wurde in 15 ml 10% Methanol/Dichlormethan gelöst und mit 1 Äquivalent 1 M HCl in Ether behandelt. Die Lösung wurde zu einem Rückstand aufkonzentriert und in Ether verrieben. Der Feststoff wurde filtriert und getrocknet, um 0,25 g 6-(2-Chlorphenyl)-2-[(1-methylpiperidin-4-ylmethyl)amino]-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on, HC-Salz zu ergeben. Massenspek. MH⁺ = 383, Schmelzpt. = 213–220°C.
Beispiel 4
Stufe 4.1 Herstellung von 4B
Zu einer Lösung von Verbindung 4A (4,704 g, 18,94 mmol) in DMF (30 ml) wurde Natriumcarbonat (2,2 g, 1,1 äq), gefolgt von 2-Chlor-N,N-dimethylacetamid (2,14 ml, 1,1 äq) gegeben. Das so erhaltene Gemisch wurde für 18 Stunden bei Raumtemperatur kräftig gerührt. Ein DC zeigte, dass mehr als 50% Startmaterial zurückblieb, so wurde die Umsetzung für zusätzlich 24 Stunden auf 80°C erwärmt. Noch einmal zeigte eine DC-Analyse, dass eine beträchtliche Menge an Startmaterial zurückblieb, so wurde das Gemisch auf Raumtemperatur abgekühlt und dann wurde zusätzliches 2-Chlor-N,N-dimethylacetamid (0,58 ml, 0,3 äq) zugegeben. Die Umsetzung wurde für weitere 4,5 Stunden auf 80°C erwärmt, wobei durch DC-Analyse angezeigt wurde, dass sehr wenig Startmaterial zurückblieb.
Dann wurden Ethylacetat (150 ml) und Wasser (50 ml) zugegeben, und das Gemisch wurde verteilt, und die Phasen wurden getrennt. Die wässrige Phase wurde weiter mit Ethylacetat (1 × 50 ml) extrahiert, und die vereinigten organischen Phasen wurden mit Kochsalzlösung (3 × 35 ml) gewaschen. Die organische Phasen wurden vereinigt, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und aufkonzentriert und unter Vakuum getrocknet, um 9,9 g des Rohprodukts zu ergeben. Reinigung mittels Flashchromatographie unter Verwendung von Kieselgel und Gradientenelution (reines Dichlormethan zu 10% Methanol in Dichlormethan) lieferte Verbindung 4B (3,91 g) als dicken Sirup. MH⁺ = 334.
Stufe 4.2 Herstellung von 4C
Die Verbindung 4B wurde in Ethanol (120 ml) aufgenommen, und Stickstoffgas wurde für 5 Minuten sacht über die Lösung geperlt. Dann wurde 10% Palladium auf Aktivkohle (1,5 g) zugegeben, und das Gemisch wurde unter 1 Atmosphäre Wasserstoffgas gesetzt und bei Raumtemperatur für 18 Stunden gerührt. Eine DC-Analyse zeigte, dass die Umsetzung beendet war, so wurde das Gemisch durch eine 2,5 cm Celite-Unterlage filtriert. Das Filtrat wurde aufkonzentriert und unter Vakuum getrocknet, um die Verbindung 4C, 4-Aminomethyl-1-dimethylaminocarbonylmethyl-piperidin (2,15 g) als Öl zu liefern. (M + H)⁺ = 200.
Stufe 4.3 Herstellung von 4
Das Sulfon 2 (200 mg, 0,614 mmol), die Verbindung 4C (367 mg, 3 äq) und N-Methylpyrrolidinon (0,3 ml) wurden in einem 10 ml Kolben gemischt und unter Rühren auf 110°C erwärmt. Nach 5 Minuten verwandelte sich das flüssige Gemisch in einen Feststoff und gemäß DC-Analyse war die Umsetzung beendet. Das Reaktionsgemisch wurde abgekühlt und Methanol (20 ml) wurde zugegeben. Der Niederschlag wurde zerkleinert und dann filtriert, um ein weißes Pulver (235 mg) zu ergeben. Schmp. = 263,1–263,5°C, (M + H)⁺ = 455. Dieses freie Amin (230 mg) wurde in Dichlormethan (50 ml) und Methanol (50 ml) gelöst, und HCl-Gas wurde für 15 Minuten durch die Lösung geperlt. Das Gefäß wurde fest verschlossen und für 2 Stunden gerührt. Dann wurde das Lösungsmittel unter verringertem Druck bei 50°C entfernt und mit Dichlormethan zweimal zusammen eingedampft. Das so erhaltene HCl-Salz wurde unter Vakuum bei 56°C für 8 Stunden getrocknet, um die Verbindung 4 (276 mg) als grauweißen Feststoff zu ergeben. Schmp. = 211,8–212,8°C, (M + H)⁺ = 455 (freie Base).
Beispiel 5
Stufe 5.1 Herstellung von 5A
Die Verbindung 4A (4,632 g, 18,65 mmol) wurde in Dimethylformamid (30 ml) gelöst. Zu dieser Lösung wurde Natriumcarbonat (2,17 g, 1,1 äq) und t-Butylbromacetat (3 ml, 1,1 äq) gegeben. Das so erhaltene Gemisch wurde für 18 Stunden bei Raumtemperatur kräftig gerührt. Eine DC-Analyse zeigte, dass sehr wenig Startmaterial vorhanden war. Ethylacetat (100 ml) und Wasser (100 ml) wurden zu der Umsetzung gegeben, und das Gemisch wurde verteilt, und die Phasen wurden getrennt. Die wässrige Phase wurde mit Ethylacetat (2 × 100 ml) weiter extrahiert. Die organischen Phasen wurden vereinigt, mit Wasser (1 × 75 ml) und Kochsalzlösung (1 × 75 ml) gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert, und unter Vakuum aufkonzentriert und getrocknet, um 6,5 g des Rohprodukts zu ergeben. Eine Reinigung mittels Flashchromatographie auf Kieselgel unter Verwendung von 3% Methanol in Dichlormethan als Eluenten ergab 5A (3,95 g) als dicken Sirup, (M + H)⁺ = 363.
Stufe 5.2 Herstellung von 5B
Die Verbindung 5A (3,95 g, 10,9 mmol) wurde in Ethanol (125 ml) gelöst und Stickstoffgas wurde für 5 Minuten sacht über das Gemisch geleitet, dann wurde 10% Palladium auf Aktivkohle (1,5 g) zugegeben. Das so erhaltene Gemisch wurde unter 1 Atmosphäre Wasserstoffgas gesetzt und für 18 Stunden gerührt. Eine DC-Analyse zeigte auf, dass die Umsetzung beendet war, und die Umsetzung wurde durch eine 2,5 cm Celite-Unterlage filtriert. Das Filtrat wurde unter Vakuum aufkonzentriert und getrocknet, um die Verbindung 5B, 4-Aminomethyl-1-tert-butyloxycarbonylmethylpiperidin als farbloses Öl (2,26 g) zu liefern. (M + H)⁺ = 229.
Stufe 5.3 Herstellung von Verbindung 5
Das Sulfon 2 (200 mg, 0,614 mmol), Verbindung 5B (420 mg, 3 äq), und N-Methylpyrrolidinon wurden in einem 10 ml Kolben gemischt und unter Rühren auf 110°C erwärmt. Das flüssige Gemisch wurde nach etwa 10 Minuten halbfest. Das Gemisch wurde für weitere 20 Minuten gerührt und eine DC-Analyse zeigte, dass die Umsetzung beendet war. Dann wurden 15 ml Ethylacetat und 100 ml Hexan zu dem Reaktionsgemisch gegeben. Das abgeschiedene Produkt wurde zerkleinert und filtriert, um ein weißes Pulver zu liefern. Das Pulver wurde mit 60 ml Hexan gewaschen und Vakuum getrocknet, um 270 mg des freien Amin-t-butylesters als weißes Pulver zu ergeben. Schmp. = 217,6–220,0°C, (M + H)⁺ = 484. Das freie Amin wurde in Dioxan (100 ml) gelöst, und HCl-Gas wurde für 15 Minuten durch die Lösung geperlt, was eine homogene Lösung zur Folge hatte. Das Gefäß wurde fest verschlossen und bei Raumtemperatur für 18 Stunden gerührt. Der so erhaltene Niederschlag wurde filtriert und bei 56°C für 8 Stunden getrocknet, um das HCl-Salz 11 (200 mg) zu ergeben. Schmp. = 235,3–237,9°C, (M + H)⁺ = 428 (freie Aminocarbonsäure).
Beispiel 6
Stufe 6.1 Herstellung von 6A
Die Verbindung 4A (4,889 g, 19,69 mmol) wurde in Dimethylformamid (30 ml) gelöst, und Natriumcarbonat (2,3 g, 1,1 äq) wurde zugegeben, gefolgt von 2-Bromacetamid (2,99 g, 1,1 äq), und das so erhaltene Gemisch wurde bei Raumtemperatur für 18 Stunden kräftig gerührt. Eine DC-Analyse zeigte, dass die Umsetzung fast beendet war. Ethylacetat (150 ml) und Wasser (50 ml) wurden zugegeben, und das Gemisch wurde verteilt, und die Phasen wurden getrennt. Die organische Phase wurde mit Wasser (2 × 50 ml) und Kochsalzlösung (1 × 75 ml) gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert, aufkonzentriert und Vakuum getrocknet, um einen Feststoff zu liefern. Hexan (300 ml) wurde zu dem Rückstand gegeben, und die Feststoffe wurden zerkleinert und gut gemischt. Die überstehende Flüssigkeit wurde dann dekantiert. Dieses Verfahren wurde wieder mit 300 ml Hexan wiederholt. Der Rückstand wurde unter Vakuum getrocknet, um ein weißes Pulver 6A (3,13 g) zu ergeben. (M + H)⁺ = 306.
Stufe 6.2 Herstellung von 6B
Die Verbindung 6A (3,1 g, 10,2 mmol) wurde in Ethanol (250 ml) gelöst und Stickstoffgas wurde für 5 Minuten sacht durch das Gemisch geperlt. Ein Gemisch aus 10% Palladium auf Aktivkohle (1,45 g) wurde zugegeben. Das so erhaltene Gemisch wurde unter 1 Atmosphäre Wasserstoff gesetzt und für 18 Stunden gerührt. Das Gemisch wurde durch eine 2,5 cm Celite-Unterlage filtriert. Das Filtrat wurde unter verringertem Druck bei 40°C aufkonzentriert und unter Vakuum getrocknet, um die Verbindung 6B (1,77 g) als klebrigen weißen Feststoff zu ergeben. (M + H)⁺ = 172.
Stufe 6.3 Herstellung von der Verbindung 6
Das Sulfon 2 (400 mg, 1,23 mmol), die Verbindung 6B (630 mg, 3 äq) und N-Methylpyrrolidinon (0,3 ml) wurden in einem 25 ml Kolben gemischt, und das Gemisch wurde unter Rühren für 30 Minuten auf 110°C erwärmt. Das flüssige Gemisch wurde fest, und eine DC-Analyse zeigte, dass die Umsetzung beendet war. Das Reaktionsgemisch wurde mit etwa 20 ml Methanol verdünnt, und der weiße Feststoff wurde filtriert und getrocknet, um 410 mg des freien Amins des primären Amids zu ergeben. Schmp. = 244,6–245,9°C, (M + H)⁺ = 427. Dieses freie Amin des primären Amids wurde dann in Methanol (100 ml) gelöst, und HCl-Gas wurde für 10 Minuten durch die Lösung geperlt. Das Gefäß wurde dann fest verschlossen und bei Raumtemperatur für 3 Tage gerührt. Das Lösungsmittel wurde bei 40°C unter verringertem Druck entfernt, und dann wurden 10 ml Methanol zu dem Rückstand gegeben. Zu der so erhaltenen Lösung wurde Tetrahydrofuran (100 ml) gegeben, und der gebildete Niederschlag, wurde filtriert und gesammelt, um die Verbindung 6 als grauweißes Pulver (250 mg) zu ergeben. Schmp. = 220,0–221,1°C, (M + H)⁺ = 442 (freies, Methylester).
Beispiel 7
Zu einer Lösung von Verbindung 9B (0,28 g, 2 mmol) in Acetonitril (5 ml) wurde bei Raumtemperatur TMSCN (0,8 ml, 3 äq) gegeben. Das so erhaltene Gemisch wurde, bis das Gemisch wurde, unter Rühren auf 80°C erwärmt. Dann wurde Sulfon 1 (0,35 g, 1 mmol) zugegeben, und die Umsetzung wurde bei 80°C für 40 Minuten gerührt. Die Umsetzung wurde mit Methanol (10 ml) gequenscht und für 5 Minuten gerührt. Nach einem Aufkonzentrieren bei 50°C unter verringertem Druck wurden Ethylacetat (35 ml) und Wasser (25 ml) zu dem Rückstand gegeben. Die organische Phase wurde abgetrennt, mit Wasser (2 × 25 ml) und Kochsalzlösung (1 × 25 ml) gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert, aufkonzentriert und getrocknet, um 408 mg des Rohmaterials zu ergeben. Eine Reinigung mittels präparativer Dünnschichtchromatographie lieferte das Amin als grauweißes Pulver (299 mg). (M + H)⁺ = 373, Schmp. = 91,4–93,2°C. Das freie Amin wurde in Ethylacetat (10 ml) gelöst und unter Rühren wurde bei Raumtemperatur eine Lösung von 1 M HCl in Diethylether (1,2 ml, 1,5 äq) zugegeben. Nach 30 minütigem Rühren wurde das Lösungsmittel bei 55°C unter verringertem Druck entfernt. Eine weitere 6 stündige Aufkonzentration bei 56°C im Hochvakuum ergab Verbindung 7 als grauweißes Pulver (275 mg). (M + H)⁺ = 373, Schmp. = 178,0–181,5°C.
Beispiel 8
Dieses Beispiel erläutert die Herstellung von 6-(2-Chlorphenyl)-2-[(1,1-dimethyl-2-hydroxyethyl)amino]-8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-on.
Ein Gemisch aus 0,350 g (1,0 mmol) Sulfon 1 und 0,445 g (5,0 mmol) wurde bei 120°C für 1 Stunde gerührt und dann auf Raumtemperatur abgekühlt. Das Rohprodukt wurde säulenchromatographisch (5% Methanol/Dichlormethan) gereinigt, um das gewünschte Produkt als Schaum zu ergeben. Der Rückstand wurde in Methanol und Zugabe von Salzsäure (1,0 M/Et₂O, 1 Äquivalent) suspendiert, für 20 Minuten gerührt und unter verringertem Druck aufkonzentriert. Der Rückstand wurde in einem Gemisch aus MeOH/Et₂O für 1 Stunde gerührt, und das Produkt wurde filtriert, um einen weißen Feststoff zu liefern. Ausbeute 190 mg. Schmp. 228,6–228,9°C (HCl-Salz).
Beispiel 9
Zu einer Lösung von Verbindung 9B (Chem. Pharm. Bull. 45, 1997, 185–188) (0,28 g, 2 mmol) in Acetonitril (4 ml) wurde bei Raumtemperatur TMSCN (0,8 ml, 3 äq) gegeben. Das so erhaltene Gemisch wurde, bis das Gemisch homogen wurde, auf 80°C erwärmt.
Dann wurde 9A (0,4 g, 1 mmol) zu dem Reaktionsgemisch gegeben und bei 80°C für 35 Minuten gerührt. Das Reaktionsgemisch wurde auf Raumtemperatur abgekühlt und 15 ml Methanol wurden zugegeben und für 5 Minuten gerührt. Das Reaktionsgemisch wurde bei 50°C unter verringertem Druck aufkonzentriert. Der Rückstand wurde mit Ethylacetat (35 ml) und Wasser (25 ml) verdünnt. Die organische Phase wurde abgetrennt, mit Wasser (1 × 25 ml) und Kochsalzlösung (1 × 25 ml) gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und aufkonzentriert, um 445 mg des Rohmaterials zu ergeben. Eine Reinigung mittels präparativer Dünnschichtchromatographie, Eluieren mit 50% Ethylacetat in Hexan ergab das freie Amin als grauweißes Pulver (242 mg).
(M + H)⁺ = 453, Schmp. = 204,7–206,0°C. Das freie Amin wurde bei Raumtemperatur in Ethylacetat (15 ml) gelöst, und eine Lösung von 1 M HCl in Diethylether (0,6 ml, 1,5 äq) wurde zugegeben. Das so erhaltene Gemisch wurde für 2 Stunden gerührt. Das Lösungsmittel wurde bei 50°C unter verringertem Druck entfernt, und der so erhaltene Feststoff wurde bei 56°C unter Vakuum getrocknet, um Verbindung 9 als grauweißes Pulver (219 mg) zu ergeben. (M + H)⁺ = 453, Schmp. = 142,0–149,0°C.
Beispiel 10
Ein Gemisch aus Sulfon 1 (250 mg, 0,71 mmol) und 2-Amino-2-methyl-1,3-propandiol (150 mg, 1,4 mmol) in 1-Methyl-2-pyrrolidinon (0,25 ml) wurde bei 80°C für 12 h gerührt und dann auf Raumtemperatur abgekühlt. Wasser (1 ml) wurde zugegeben, und die Suspension wurde für 30 min gerührt, filtriert, und der Niederschlag wurde mit Wasser gewaschen, getrocknet und in Methanol suspendiert. Die Suspension wurde wieder filtriert und getrocknet, um 83 mg des gewünschten Produkts 10 zu ergeben. Massenspek. MH⁺ = 374, Schmp. 200–210.
Beispiel 11
Ein Gemisch aus Sulfon 1 (250 mg, 0,71 mmol) und 2-Amino-2-ethyl-1,3-propandiol (170 mg, 1,4 mmol) in 1-Methyl-2-pyrrolidinon (0,25 ml) wurde bei 80°C für 12 h gerührt und dann auf Raumtemperatur abgekühlt. Wasser (1 ml) wurde zugegeben, und die Suspension wurde für 30 min gerührt, filtriert, und der Niederschlag wurde mit Wasser gewaschen, getrocknet und in Methanol suspendiert. Die Suspension wurde wieder filtriert und getrocknet, um 83 mg des gewünschten Produkts 11 zu ergeben. Massenspek. MH⁺ = 388, Schmp. 98,1–102.
Beispiel 12
Ein Gemisch aus Sulfon 1 (250 mg, 0,71 mmol) und (S)-(+)-2-Amino-3-methyl-1-butanol (147 mg, 1,4 mmol) in 1-Methyl-2-pyrrolidinon (0,25 ml) wurde bei 80°C für 12 h gerührt und dann auf Raumtemperatur abgekühlt. Wasser (1 ml) wurde zugegeben, und die Suspension wurde für 30 min gerührt, filtriert, und der Niederschlag wurde mit Wasser gewaschen, getrocknet und in Methanol suspendiert. Die Suspension wurde wieder filtriert und getrocknet, um 90 mg des gewünschten Produkts 12 zu ergeben. Massenspek. MH⁺ = 372, Schmp. 167,1–169,1.
Beispiel 13
Ein Gemisch aus Sulfon 1 (250 mg, 0,71 mmol) und (S)-(+)-2-Amino-1-butanol (127 mg, 1,4 mmol) in 1-Methyl-2-pyrrolidinon (0,25 ml) wurde bei 80°C für 12 h gerührt und dann auf Raumtemperatur abgekühlt. Wasser (1 ml) wurde zugegeben, und die Suspension wurde für 30 min gerührt, filtriert, und der Niederschlag wurde mit Wasser gewaschen, getrocknet und in Methanol suspendiert. Die Suspension wurde wieder filtriert und getrocknet, um 105 mg des gewünschten Produkts 13 zu ergeben. Massenspek. MH⁺ = 358, Schmp. 170,5–172,1.
Beispiel 14
Ein Gemisch aus Sulfon 1 (250 mg, 0,71 mmol) und (S)-tert-Leucinol (167 mg, 1,4 mmol) in 1-Methyl-2-pyrrolidinon (0,25 ml) wurde bei 80°C für 12 h gerührt und dann auf Raumtemperatur abgekühlt. Wasser (1 ml) wurde zugegeben, und die Suspension wurde für 30 min gerührt, filtriert, und der Niederschlag wurde mit Wasser gewaschen, getrocknet und in Methanol suspendiert. Die Suspension wurde wieder filtriert und getrocknet, um 116 mg des gewünschten Produkts 14 zu ergeben. Massenspek. MH⁺ = 386, Schmp. 171,2–174,0.
Beispiel 15
Ein Gemisch aus Sulfon 1 (250 mg, 0,71 mmol) und (R)-(–)-Leucinol (167 mg, 1,4 mmol) in 1-Methyl-2-pyrrolidinon (0,25 ml) wurde bei 80°C für 12 h gerührt und dann auf Raumtemperatur abgekühlt. Wasser (1 ml) wurde zugegeben, und die Suspension wurde für 30 min gerührt, filtriert, und der Niederschlag wurde mit Wasser gewaschen, getrocknet und in Methanol suspendiert. Die Suspension wurde wieder filtriert und getrocknet, um 178 mg des gewünschten Produkts 15 zu ergeben. Massenspek. MH⁺ = 386, Schmp. 173,1–176,2.
Beispiel 16
Ein Gemisch aus Sulfon 1 (250 mg, 0,71 mmol) und (S)-(+)-2-Amino-1-propanol (107 mg, 1,4 mmol) in 1-Methyl-2-pyrrolidinon (0,25 ml) wurde bei 80°C für 12 h gerührt und dann auf Raumtemperatur abgekühlt. Wasser (1 ml) wurde zugegeben, und die Suspension wurde für 30 min gerührt, filtriert, und der Niederschlag wurde mit Wasser gewaschen, getrocknet und in Methanol suspendiert. Die Suspension wurde wieder filtriert und getrocknet, um 87 mg des gewünschten Produkts 16 zu ergeben. Massenspek. MH⁺ = 344, Schmp. 131,1–132,2.
Beispiel 17
Ein Gemisch aus Sulfon 1 (250 mg, 0,71 mmol) und (S)-(+)-Isoleucinol (167 mg, 1,4 mmol) in 1-Methyl-2-pyrrolidinon (0,25 ml) wurde bei 80°C für 12 h gerührt und dann auf Raumtemperatur abgekühlt. Wasser (1 ml) wurde zugegeben, und die Suspension wurde für 30 min gerührt, filtriert, und der Niederschlag wurde mit Wasser gewaschen, getrocknet und in Methanol suspendiert. Die Suspension wurde wieder filtriert und getrocknet, um 200 mg des gewünschten Produkts 17 zu ergeben. Massenspek. MH⁺ = 386, Schmp. 140,1–143,6.
Beispiel 18
Ein Gemisch aus Sulfon 1 (250 mg, 0,71 mmol) und Serinol (130 mg, 1,4 mmol) in 1-Methyl-2-pyrrolidinon (0,25 ml) wurde bei 80°C für 12 h gerührt und dann auf Raumtemperatur abgekühlt. Wasser (1 ml) wurde zugegeben, und die Suspension wurde für 30 min gerührt, filtriert, und der Niederschlag wurde mit Wasser gewaschen, getrocknet und in Methanol suspendiert. Die Suspension wurde wieder filtriert und getrocknet, um 179 mg des gewünschten Produkts 18 zu ergeben. Massenspek. MH⁺ = 360, Schmp. 155,8–157,3.
Beispiel 19
Dieses Beispiel erläutert ein alternatives Verfahren zur Herstellung von 6-(2-Chlorphenyl)-8-methyl-2-methylthio-8-hydropyridino[2,3-d]pyrimidin-7-on (VI)
Herstellung von 3,3-Diethoxy-2-formylpropionnitril Kaliumsalz (II)
Zu einer gerührten Lösung von 3,3-Diethoxypropannitril (I, 283,80 g, 1,98 mol) und Methylformiat (148,80 g, 2,48 mol) in wasserfreiem THF (1,1 l) wurde bei 10°C 1,0 M Kalium-tert-butoxid in THF (2,2 l, 2,2 mol) gegeben. Die Temperatur wurde während der 45 minütigen Zugabe im Bereich von 10°C bis 15°C gehalten. Im Anschluss an die Zugabe wurde die so erhaltene Aufschlämmung 2 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt.
Hexan (400 ml) wurde dann zugegeben, und das Rühren wurde für weitere 20 min. fortgesetzt. Die Aufschlämmung wurde filtriert und der Kuchen mit 1/1 Hexan/THF gewaschen und bei 60°C über Nacht in einem Vakuumofen getrocknet. Die Ausbeute eines hell-gelbbraunen Pulvers betrug 302,5 Gramm (73,0%). ¹H-NMR (CD₃OD) stimmte mit der gewünschten Struktur II überein.
Herstellung von 4-Amino-2-sulfanylpyrimidin-5-carbaldehyd (III)
Eine Aufschlämmung von Thioharnstoff (92,8 g, 1,22 mol) in Ethanol (90 ml) wurde unter Rückfluss erwärmt und kräftig gerührt. Zu dieser Aufschlämmung wurde eine Suspension von 3,3-Diethoxy-2-formylpropionnitril Kaliumsalz II (222,20 g, 1,06 mol) in 25% Natriummethoxid/Methanol (85,5 ml, 0,37 mol) und Ethanol (285 ml) in fünf Aliquoten über einen Zeitraum von 10 Minuten gegeben, während die Rückflussbedingungen beibehalten wurden (in einer anderen Ausführungsform kann die spätere Aufschlämmung auf 50°C erwärmt werden, um eine homogene Lösung für die Zugabe zu ergeben). Ein zusätzlicher Teil Ethanol (150 ml) wurde, um das Rühren zu erleichtern, zugegeben. Die dicke Aufschlämmung nahm im Anschluss an die Zugabe eine hellgelbe Farbe an und wurde unter Rückfluss für eine zusätzliche Stunde gehalten. Das Gemisch wurde dann abgekühlt und auf einem Rotationsverdampfer zur beinahe Trockne eingedampft. Der Rückstand wurde in Wasser (940 ml) gelöst. Das Rohprodukt wurde aus der Lösung durch Zugabe von 30% Essigsäure (280 ml) ausgefällt und durch Filtration unter Verwendung eines mittleren Filtrationstrichters mit Sinterglasfritte isoliert. Der Kuchen wurde mit Wasser (800 ml) gewaschen. Eine Reinigung durch Verreibung mit heißem Wasser (1 l) für 30 min., gefolgt von Abkühlen und Filtration ergab nach einem Trocknen in einem Vakuumofen bei 60°C über Nacht (nachfolgende Herstellungen haben gezeigt, dass dieses Verreiben nicht notwendig ist) 118,9 Gramm (72,3%) des Produkts als hellgelben Feststoff. Ein HPLC ergab eine Reinheit von 98,67%. ¹H-NMR (DMSO-d₆) stimmt mit der gewünschten Struktur III überein.
Herstellung von 4-Amino-2-methylthiopyrimidin-5-carbaldehyd (IV)
Zu einer Lösung von 4-Amino-2-sulfanylpyrimidin-5-carbaldehyd III (100,00 g, 644,4 mmol) und 325 Mesh Kaliumcarbonat (178,10 g, 1,29 mol) in Aceton (1,5 L) wurde während 20 Minuten unter leichtem Kühlen Iodmethan (128,10 g, 902,2 mmol) tropfenweise gegeben. Das Gemisch wurde bei Raumtemperatur über das Wochenende gerührt. Ein DC zeigte zurückbleibendes III und ein zusätzliches Aliquot Iodmethan (8 ml) wurde zugegeben, und das Rühren wurde über Nacht fortgesetzt. Ein DC zeigte wieder, dass einiges III zurückblieb und eine zusätzliche Portion Iodmethan (8 ml) wurde zugegeben, und das Rühren wurde für einen Zeitraum von weiteren 24 Stunden fortgesetzt. Ein HPLC zeige 95,9% S-alkyliertes Produkt und 3,7% der Verbindung III. Das Reaktionsgemisch wurde auf einem Rotationsverdampfer zur beinahe Trockne abgezogen. Wasser (1 l) wurde zu dem Rückstand gegeben, und das Produkt wurde durch Filtration gesammelt und mit Wasser (200 ml) gewaschen. Das Produkt wurde bei 60°C über Nacht im Vakuumofen getrocknet. Ausbeute betrug 103,37 Gramm (94,8%). Ein HPLC zeigte 95,8% IV und 4,2% III.
Herstellung von 6-(2-Chlorphenyl)-2-methylthio-8-hydropyridino[2,3-d]pyrimidin-7-on (V)
Ein Gemisch aus IV (10,00 g, 59,1 mmol), Ethyl-2-(2-chlorphenyl)acetat (14,40 g 71,8 mmol), NMP (115 ml) und 325 Mesh Kaliumcarbonat (29,00 g, 209,8 mmol) wurde über Nacht auf 95°C erwärmt. Das Reaktionsgemisch wurde abgekühlt und mit Wasser (800 ml) verdünnt. Die so erhaltene Aufschlämmung wurde über Nacht gerührt und filtriert, um das Produkt (V) zu isolieren. Der Filterkuchen wurde mit Wasser gewaschen und bei 60°C in einem Vakuumofen über Nacht getrocknet. Die isolierte Ausbeute betrug 14,9 Gramm (83,0%) eines dunkelbraunen Feststoffs. Eine HPLC-Analyse zeigte eine Reinheit von 98,3%.
Herstellung von 6-(2-Chlorphenyl)-8-methyl-2-methylthio-8-hydropyridino[2,3-d]pyrimidin-7-on (VI)
Ein Gemisch aus V (0,25 g, 0,82 mmol), NMP (5 ml), Kaliumcarbonat (0,11 g, 0,82 mmol) und Iodmethan (0,14 g, 0,96 mmol) wurde unter Stickstoff bei Raumtemperatur über Nacht gerührt. Wasser (15 ml) wurde zugegeben, und das Rühren wurde für 24 Stunden fortgesetzt. Die Aufschlämmung wurde filtriert, und der Filterkuchen wurde mit Wasser (10 ml) gewaschen. Ein HPLC zeigte eine Reinheit von 97,8%.
Beispiel 20
Dieses Beispiel erläutert ein Assayprotokoll zur Bestimmung einer in vitro Inhibition von p-38 (MAP) Kinase.
Die p-38 MAP-Kinase Inhibitoraktivität der Verbindungen dieser Erfindung wurde in vitro durch Messung des γ-Phosphattransfers von γ-³³P-ATP zu Myelin Basic Protein (MBP) durch p-38 Kinase unter Verwendung einer geringfügigen Abwandlung des in Ahn, N. G.; et al. J. Biol. Chem. Vol. 266(7), 4220–4227, (1991) beschriebenen Verfahren bestimmt.
Die phosphorylierte Form der rekombianten p38 MAP-Kinase wurde mit SEK-1 und MEKK in E. Coli exprimiert und dann durch Affinitätschromatographie unter Verwendung einer Nickel-Säule gereinigt.
Die phosphorylierte p38 MAP-Kinase wurde in Kinase Puffer (20 mM 3-(N-Morpholino)propansulfonsäure, pH 7,2, 25 mM β-Glycerinphosphat, 5 mM Ethylenglycerin-bis(beta-aminoethylether)-N,N,N'N'-tetraessigsäure, 1 mM Natriumvanadat, 1 mM Dithiothreitol, 40 mM Magnesiumchlorid) verdünnt. Die in DMSO gelöste Testverbindung oder nur DMSO (Kontrolle) wurde zugegeben, und die Proben wurden für 10 min. bei 30°C inkubiert. Die Reaktion der Kinase wurde durch Zugabe eines Substratcocktails, der MBP und γ-³³P-ATP enthielt, initiiert. Nach Inkubation für zusätzliche 20 min. bei 30°C wurde die Umsetzung durch Zugabe von 0,75% Phosphorsäure abgebrochen. Das phosphorylierte MBP wurde dann von dem restlichen γ-³³P-ATP unter Verwendung einer Phosphocellulosemembran (Millipore, Bedford, MA) abgetrennt und unter Verwendung eines Szintillationszählers (Packard, Meriden, CT) quantifiziert.
Die erfindungsmäßigen Verbindungen waren in diesem Assay aktiv. Die p-38 Inhibitoraktivitäten (ausgedrückt als IC₅₀, die Konzentration, die 50% Inhibition des untersuchten p-38 Enzyms verursacht) einiger erfindungsmäßigen Verbindungen sind:
Beispiel 21
Dieses Beispiel erläutert ein in vitro Assay, um die Inhibition der LPS induzierten TNF-α Produktion in THP1 Zellen abzuschätzen.
Die Fähigkeit der erfindungsmäßigen Verbindungen die TNF-α Freisetzung zu inhibieren, wurde unter Verwendung einer geringfügigen Abwandlung der in Blifeld, et al. Transplantation, 51: 498–503 (1991) beschriebenen Verfahren bestimmt.
(a) Einführung der TNF Biosynthese:
THP-1 Zellen wurden in einem Kulturmedium [RPMI (Gibco-BRL, Gailthersburg, MD), das 15% fötales Rinderserum, 0,02 mM 2-Mercaptoethanol enthielt] bei einer Konzentration von 2,5 × 10⁶ Zellen/ml suspendiert und dann auf 96 Wellplatten (0,2 ml Aliquote in jedem Well) aufgebracht. Die Testverbindungen wurden in DMSO gelöst und dann mit dem Kulturmedium verdünnt, so dass die endgültige DMSO Konzentration 5% betrug. Fünfundzwanzig μL Aliquote der Testlösung oder nur Medium mit DMSO (Kontrolle) wurden zu jedem Well gegeben. Die Zellen wurden bei 37°C für 30 min. inkubiert. LPS (Sigma, St. Louis, MO) wurde zu den Wells bis zu einer endgültigen Konzentration von 0,5 μg/ml gegeben, und die Zellen wurden für zusätzliche 2 h inkubiert. Am Ende der Inkubationsperiode wurden die Kultur-Flüssigkeitsüberstände gesammelt, und die Menge an vorliegendem TNF-α wurde unter Verwendung eines nachstehend beschriebenen ELISA-Assay bestimmt.
(b) ELISA Assay:
Die Menge an vorliegendem, menschlichem TNF-α wurde durch ein spezifisches Trapping ELISA Assay unter Verwendung von zwei anti-TNF-α Antikörpern (2TNF-H12 und 2TNF-H34), wie in Reimund, J. M., et al. GUT. Vol. 39 (5), 684–689 (1996) beschrieben, bestimmt.
Polystyrol 96-Wellplatten wurden mit 50 μL Antikörper 2TNF-H12 in PBS (10 μg/ml) pro Well bestrichen und in einer befeuchteten Kammer bei 4°C über Nacht inkubiert.
Die Platten wurden mit PBS gewaschen und dann mit 5% fettfreier Trockenmilch in PBS für 1 Stunde bei Raumtemperatur deaktiviert und mit 0,1% BSA (Rinderserum Albumin) in PBS gewaschen.
TNF Standards wurden von einer Vorratslösung von menschlichem rekombinantem TNF-α (R & D Systems, Minneapolis, MN) hergestellt. Die Konzentration der Standards in dem Assay begann bei 10 ng/ml, gefolgt von 6 halbe log Serienverdünnungen.
Fünfundzwanzig μL Aliquote der vorstehenden Kultur-Flüssigkeitsüberstände oder TNF Standards oder nur Medium (Kontrolle) wurden mit 25 μL Aliquoten des biotinylierten monoklonalen Antikörpers 2TNF-H34 (2 μg/ml in PBS, das 0,1% BSA enthielt) gemischt und dann zu jedem Well gegeben. Die Proben wurden bei Raumtemperatur für 2 h unter sanftem Schütteln inkubiert und dann 3-mal mit 0,1% BSA in PBS gewaschen. 50 μL Peroxidase-Streptavidin (Zymed, S. San Francisco, CA) Lösung, die 0,416 μg/ml Peroxidase-Streptavidin und 0,1% BSA in PBS enthielt, wurde zu jedem Well gegeben. Die Proben wurden für eine zusätzliche Stunde bei Raumtemperatur inkubiert und dann 4-mal mit 0,1% BSA in PBS gewaschen. Fünfzig μL O-Phenylendiaminlösung (1 μg/ml O-Phenylendiamin und 0,03% Wasserstoffperoxid in 0,2 M Citratpuffer pH 4,5) wurde zu jedem Well gegeben, und die Proben wurden bei Raumtemperatur für 30 min. im Dunkeln inkubiert. Die optische Dichte der Probe und der Referenz wurden bei 450 nm beziehungsweise 650 nm gelesen. TNF-α Mengen wurden von einer grafischen Darstellung, die die optische Dichte bei 450 nm zu der verwendeten Konzentration in Zusammenhang bringt, bestimmt.
Der IC₅₀ Wert wurde als Konzentration der Testverbindung definiert, entsprechend der halben maximalen Reduktion in der 450 nm Absorption.
Beispiel 22
Dieses Beispiel erläutert ein in vivo Assay, um die Inhibition der LPS induzierter TNF-α Produktion in Mäusen (oder Ratten) abzuschätzen.
Die Fähigkeit der erfindungsmäßigen Verbindungen die TNF-α Freisetzung in vivo zu inhibieren, wurde unter Verwendung einer geringfügigen Abwandlung der in Zanetti, et al., J. Immunol., 148: 1890 (1992) und Sekut, et al., J. Lab. Clin. Med., 124: 813 (1994) beschriebenen Verfahren bestimmt.
Weibliche BALB/c Mäuse, die 18–21 Gramm wogen (Charles River, Hollister, CA, USA), wurden für eine Woche akklimatisiert. Gruppen, die aus 8 Mäusen bestanden, wurden jeweils entweder mit den Testverbindungen, die in einem wässrigen Vehikel suspendiert oder gelöst waren, das 0,9% Natriumchlorid, 0,5% Natriumcarboxymethylcellulose, 0,4% Polysorbat 80, 0,9% Benzylalkohol (CMC Vehikel) enthielt oder nur Vehikel (Kontrollgruppe) oral dosiert. Nach 30 min. wurden den Mäusen intraperitoneal 20 μg LPS (Sigma, St. Louis, MO, USA) injiziert. Nach 1,5 h wurden die Mäuse durch CO₂ Inhalation geopfert, und das Blut wurde durch Herzpunktion geerntet. Das Blut wurde durch Zentrifugieren bei 15 600 × G für 5 min. geklärt, und die Seren wurden zu sauberen Röhrchen transferiert und bei –20°C, bis zur TNF-α Analyse mittels ELISA Assay, dem Herstellerprotokoll folgend, (Biosource International, Camarillo, CA, USA) eingefroren.

Claims

Verbindung der Formel:
wobei: R¹ Wasserstoff oder Alkyl ist; R² -CR'R''-R^a ist (wobei R' und R'' Wasserstoff, Hydroxyalkyl oder Alkyl sind, wobei mindestens einer davon Alkyl oder Hydroxyalkyl ist, und R^a Hydroxyalkyl ist), wobei die Hydroxygruppen in R² jeweils unabhängig in Form eines Ester-, eines Carbamat-, eines Carbonat- oder eines Sulfonatderivats vorliegen können; R³ Wasserstoff, Alkyl, Amino, Monoalkylamino, Dialkylamino, Cycloalkyl, Aryl, Aralkyl, Halogenalkyl, Heteroalkyl, Cyanoalkyl, Alkylen-C(O)-R (wobei R Wasserstoff, Alkyl, Hydroxy, Alkoxy, Amino, Monoalkylamino oder Dialkylamino ist) oder Acyl ist; Ar¹ Aryl ist; „Aryl" einen monovalenten monocyclischen oder bicyclischen aromatischen Kohlenwasserstoffrest bedeutet, welcher gegebenenfalls unabhängig mit einem, zwei oder drei Substituenten substituiert ist, ausgewählt aus Alkyl, Hydroxy, Alkoxy, Halogenalkyl, Halogenalkoxy, Heteroalkyl, Halogen, Nitro, Cyano, Amino, Monoalkylamino, Dialkylamino, Methylendioxy, Ethylendioxy und Acyl; „Acyl" einen Rest -C(O)R bedeutet, wobei R Wasserstoff; Alkyl, Cycloalkyl, Cycloalkylalkyl, Phenyl oder Phenylalkyl ist; „Heteroalkyl" einen Alkylrest wie hier definiert bedeutet, wobei eines, zwei oder drei Wasserstoffatome durch einen Substituenten ersetzt worden sind; unabhängig ausgewählt aus -OR^a, -NR^bR^c und -S(O)_nR^d (wobei n eine ganze Zahl von 0 bis 2 ist), mit der Maßgabe, dass die Bindung des Heteroalkylrests durch ein Kohlenstoffatom erfolgt, wobei R^a Wasserstoff, Acyl, Alkyl, Cycloalkyl oder Cycloalkylalkyl ist; R^b und R^c unabhängig voneinander Wasserstoff, Acyl, Alkyl, Cycloalkyl oder Cycloalkylalkyl sind oder R^b und R^c zusammen Cycloalkyl oder Arylcycloalkyl bilden; und wenn n 0 ist, R^d Wasserstoff, Alkyl, Cycloalkyl oder Cycloalkylalkyl ist, und wenn n 1 oder 2 ist, R^d Alkyl, Cycloalkyl, Cycloalkylalkyl, Amino, Acylamino, Monoalkylamino oder Dialkylamino ist; „Cycloalkyl" einen gesättigten einwertigen cyclischen Kohlenwasserstoffrest mit drei bis sieben Ringkohlenstoffatomen betrifft; und „Alkyl" einen linearen gesättigten einwertigen Kohlenwasserstoffrest mit ein bis sechs Kohlenstoffatomen oder einen verzweigten gesättigten einwertigen Kohlenwasserstoffrest mit drei bis sechs Kohlenstoffatomen bedeutet, oder ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon.
Verbindung nach Anspruch 1, wobei Ar¹ ein gegebenenfalls substituiertes Phenyl ist.
Verbindung nach Anspruch 2, wobei Ar¹ ein Phenylrest ist, welcher unabhängig mit einem oder zwei Halogenatomen, Alkylresten oder Methoxygruppen substituiert ist.
Verbindung nach Anspruch 3, wobei Ar¹ 2-Chlorphenyl, 2-Methylphenyl oder 2-Methoxyphenyl ist.
Verbindung nach Anspruch 4 der Formel:
Verbindung nach einem der Ansprüche 2 bis 5, wobei R¹ Wasserstoff oder Methyl ist.
Verbindung nach Anspruch 6, wobei R² (1,1-Dimethyl-2-hydroxy)ethyl oder (1,2-Dimethyl-2-hydroxy)propyl ist, wobei die Hydroxygruppen in R² jeweils unabhängig in Form eines Ester-, eines Carbamat-, eines Carbonat- oder eines Sulfonatderivats vorliegen können.
Arzneimittel, umfassend einen pharmazeutisch verträglichen Exzipienten und eine Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 7.
Verfahren zur Herstellung einer Verbindung nach Anspruch 1, umfassend die Schritte des Kontaktierens einer Verbindung der Formel Ig:
mit einem Amin der Formel R¹R²NH unter Bedingungen, die ausreichen, um eine Verbindung der Formel I:
herzustellen, wobei: R¹, R², R³ und Ar¹ wie in Anspruch 1 definiert sind; n eine ganze Zahl von 0 bis 2 ist; und R⁶ ein Alkylrest ist.
Verfahren nach Anspruch 9, wobei n 1 ist.
Verfahren nach Anspruch 9, wobei n 2 ist.
Verfahren zur Herstellung eines Pyrimidins der Formel:
umfassend: (a) Kontaktieren eines Acetals der Formel NC-CH₂-CH(OR^a)₂ mit einem Alkylformiat der Formel HCO₂R in Gegenwart einer Kondensationsbase unter Bedingungen, die ausreichen, um ein kondensiertes Produkt herzustellen; und (b) Kontaktieren des kondensierten Produkts mit Thioharnstoff in Gegenwart einer Cyclisationsbase unter Bedingungen, die ausreichen, um das Pyrimidin der Formel II-c herzustellen, wobei R und R^a jeweils unabhängig Alkyl sind.
Verfahren nach Anspruch 12, wobei die Kondensationsbase ein tert.-Butoxid ist.
Verfahren nach Anspruch 12, wobei die Cyclisationsbase ein Alkoxid ist.
Verfahren zur Herstellung eines Pyridopyrimidins der Formel:
umfassend: (a) Kontaktieren eines Pyrimidins der Formel:
mit einem Alkylierungsmittel der Formel R-X¹ in Gegenwart einer Alkylierungsbase unter Bedingungen, die ausreichen, um ein alkyliertes Pyrimidin der Formel:
herzustellen, und (b) Kontaktieren des alkylierten Pyrimidins der Formel II-d mit einem Arylacetat der Formel Ar¹-CH₂-CO₂R in Gegenwart einer Cyclisationsbase unter Bedingungen, die ausreichen, um das Pyridopyrimidin der Formel II-e herzustellen; oder (a) Kontaktieren des Pyrimidins der Formel II-c mit dem Arylacetat der Formel Ar¹-CH₂-CO₂R in Gegenwart einer Cyclisationsbase unter Bedingungen, die ausreichen, um ein Thiolpyridopyrimidin der Formel:
herzustellen, und (b) Kontaktieren des Thiolpyridopyrimidins der Formel III mit dem Alkylierungsmittel der Formel R-X¹ in Gegenwart einer Alkylierungsbase, unter Bedingungen, die ausreichen, um das Pyridopyrimidin der Formel II herzustellen, wobei X¹ eine Abgangsgruppe ist; R jeweils unabhängig Alkyl ist; Ar¹ Aryl ist.
Verfahren nach Anspruch 15, wobei X¹ ein Halogenid ist.
Verfahren nach Anspruch 15, ferner umfassend Kontaktieren des Pyridopyrimidins der Formel II mit einem Stickstoff-Alkylierungsmittel der Formel R³-X² unter Bedingungen, die ausreichen, um ein N-substituiertes Pyridopyrimidin der Formel:
herzustellen, wobei R³ Alkyl, Amino, Monoalkylamino, Dialkylamino, Cycloalkyl, Aralkyl, Halogenalkyl, Heteroalkyl, Cyanoalkyl, Alkylen-C(O)-R' (wobei R' Wasserstoff, Alkyl, Hydroxy, Alkoxy, Amino, Monoalkylamino oder Dialkylamino ist) oder Acyl ist; X² eine Abgangsgruppe ist; und Ar¹ und R wie in Anspruch 15 definiert sind.
Verfahren nach Anspruch 17, wobei X² ein Halogenid ist.
Verbindungen nach einem der Ansprüche 1 bis 7 als therapeutische Wirkstoffe.
Verwendung einer oder mehrerer Verbindungen nach einem der Ansprüche 1 bis 7 zur Herstellung eines Medikaments zur Vorbeugung oder Behandlung von Arthritis, Morbus Crohn, Alzheimer, Reizkolon, ARDS oder chronisch-obstruktiver Lungenerkrankung.
Verbindung nach Anspruch 1 mit der Formel
und pharmazeutisch verträgliche Salze davon.
Verbindung nach Anspruch 1 mit der Formel
und pharmazeutisch verträgliche Salze davon.
Verbindung nach Anspruch 1 mit der Formel
und pharmazeutisch verträgliche Salze davon.