CN111601807A

CN111601807A - Menin-mll相互作用的外型-氮杂螺抑制剂

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Publication number: CN111601807A
Application number: CN201880082454.4A
Authority: CN
Inventors: 戴学东; O.A.G.凯罗勒; D.J.克罗斯基; 蔡伟; 付利强; 孔令龙; 刘颖涛; 万昭奎; B.莫什豪泽, (原姓:赫尔克特); V.潘德; J.P.爱德华兹; A.N.帕特里克; P.R.安格博德; V.S.彭赛列
Original assignee: Janssen Pharmaceutica NV
Current assignee: Janssen Pharmaceutica NV
Priority date: 2017-12-20
Filing date: 2018-12-19
Publication date: 2020-08-28
Anticipated expiration: 2038-12-19
Also published as: JP2021506882A; AU2018389145B2; RU2020123548A; WO2019120209A1; US20230039917A1; AU2018389145A1; MA51337A; JP7307729B2; IL275457A; EP3728260A1; MX2020006594A; BR112020012461A2; RU2020123548A3; KR20200101389A; CN111601807B; EP3728260A4; CA3083624A1

Abstract

提供了具有式(I)的化合物，包含此类化合物的药物组合物，以及它们作为menin/MLL蛋白质/蛋白质相互作用抑制剂用于治疗如下疾病：如，癌症、骨髓增生异常综合症(MDS)和糖尿病的用途。

Description

MENIN-MLL相互作用的外型-氮杂螺抑制剂

技术领域

本发明涉及用于在哺乳动物中进行治疗和/或预防的药物试剂，包含此类化合物的药物组合物，以及它们作为menin/MLL蛋白质/蛋白质相互作用抑制剂用于治疗如下疾病：例如，癌症、骨髓增生异常综合症(MDS)和糖尿病的用途。

背景技术

影响混合谱系白血病基因(MLL；MLL1；KMT2A)的染色体重排导致所有年龄组的侵袭性急性白血病，并且仍然主要表现为强调迫切需要新颖治疗方法的不治之症。携带这些MLL染色体易位的急性白血病代表淋巴、骨髓或双表型疾病，并且在成人急性白血病中占5％至10％，并且在婴儿中占大约70％(Marschalek，Br J Haematol2011.152(2),141-54；Tomizawa等人，Pediatr Blood Cancer[儿科血液与癌症]2007.49(2),127-32)。

MLL是在赖氨酸4(H3K4)上甲基化组蛋白H3并在多蛋白复合物中起作用的组蛋白甲基转移酶。使用Mll1的可诱导的功能丧失等位基因表明，Mll1在维持造血干细胞(HSC)和发育B细胞中起重要作用，尽管其组蛋白甲基转移酶活性对于造血是非必要的(Mishra等人，CellRep[细胞报告]2011.7(4),1239-47)。

迄今已报道MLL与多于60种不同配偶体进行融合，并与白血病的形成/进展有关(Meyer等人,Leukemia[白血病]2013.27,2165-2176)。有趣的是，MLL的SET(Su(var)3-9，zeste的增强子和trithorax)结构域不保留在嵌合蛋白中，而是被融合配偶体替换(Thiel等人,Bioessays[生物学分析]2012.34,771-80)。通过融合配偶体募集染色质修饰酶如Dot1L和/或pTEFb复合物导致包括作为最突出的HOXA基因(例如HOXA9)和HOX辅因子MEIS1的MLL靶基因的增强的转录和转录延伸。这些基因的异常表达反过来又阻断造血分化并增强增殖。

由多发性内分泌肿瘤1型(MEN1)基因编码的menin被普遍表达，并且主要位于细胞核中。已经显示与许多蛋白质相互作用，并且因此涉及多种细胞过程。对menin最佳理解的功能是其作为MLL融合蛋白的致癌辅因子的作用。Menin与保留在所有融合蛋白、MBM1(menin结合基序1)和MBM2中的MLL的N端片段内的两种基序相互作用(Thiel等人,Bioessays[生物测定]2012.34,771-80)。Menin/MLL相互作用导致了用于晶状体上皮衍生的生长因子(LEDGF)的新的相互作用表面的形成。尽管MLL直接与LEDGF结合，但是menin对于MLL和LEDGF之间稳定的相互作用以及经由LEDGF的PWWP结构域的MLL复合物的基因特异性染色质募集是必须的(Cermakova等人,Cancer Res[癌症研究]2014.15,5139-51；Yokoyama&Cleary,Cancer Cell[癌症细胞]2008.8,36-46)。此外，许多遗传学研究已经显示，menin是严格要求通过MLL融合蛋白进行致癌性转化，表明menin/MLL相互作用是有吸引力的治疗靶。例如，Men1的条件性缺失预防异位表达MLL融合的骨髓祖细胞中的白血病发生(Chen等人,Proc Natl Acad Sci[美国国家科学院院刊]2006.103,1018-23)。类似地，通过功能缺失突变的menin/MLL融合相互作用的遗传破坏消除了MLL融合蛋白的致癌特性，阻断了体内白血病的发展，并释放了MLL转化的白血病母细胞的分化阻滞。这些研究还表明，要求menin通过MLL融合蛋白维持HOX基因表达是必需的(Yokoyama等人,Cell[细胞]2005.123,207-18)。另外，已经开发了表明这种蛋白/蛋白相互作用的药物性的menin/MLL相互作用的小分子抑制剂，并且还证明了在AML的临床前模型中的功效(Borkin等人,Cancer Cell[癌症细胞]2015.27,589-602；Cierpicki和Grembecka,Future Med Chem[未来医药化学]2014.6,447-462)。连同在正常造血期间，menin不是MLL1的必需辅因子(Li等人,Blood[血液]2013.122,2039-2046)的观察结果一起，这些数据证实了menin/MLL相互作用的破坏用于治疗MLL重排的白血病和其他具有活性HOX/MEIS1基因标记的癌症是有希望的新治疗方法。例如，在MLL基因的5'区域内的内部部分串联重复(PTD)代表主要发生在从头性和继发性AML以及骨髓发育不良综合征中的另一个主要畸变。尽管MLL-PTD的分子机制和生物学功能尚未得到充分的了解，但影响menin/MLL相互作用的新治疗靶向策略也可证明在MLL-PTD相关的白血病治疗中有效。此外，已经示出去势抗性前列腺癌依赖于menin/MLL相互作用(Malik等人,Nat Med[自然医学杂志]2015.21,344-52)。

若干参考文献描述了靶向menin-MLL相互作用的抑制剂：WO2011029054，J MedChem[医药化学杂志]2016,59,892-913描述了噻吩并嘧啶和苯二氮卓衍生物的制备；WO2014164543描述了噻吩并嘧啶和噻吩并吡啶衍生物；Nature Chemical Biology[自然化学生物学]2012年3月,8,277-284和Ren,J.等人Bioorg Med Chem Lett[生物有机和药物化学通讯](2016),26(18),4472-4476描述了噻吩并嘧啶衍生物；J Med Chem[医药化学杂志]2014,57,1543-1556描述了羟基-和氨甲基哌啶衍生物；Future Med Chem[未来医药化学]2014,6,447-462综述了小分子和模拟肽化合物；WO 2016/195776描述了呋喃并[2,3-d]嘧啶、9H-嘌呤、[1,3]噁唑并[5,4-d]嘧啶、[1,3]噁唑并[4,5-d]嘧啶、[1,3]噻唑并[5,4-d]嘧啶、噻吩并[2,3-b]吡啶和噻吩并[2,3-d]嘧啶衍生物；并且WO 2016/197027描述了5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶、5,6,7,8-四氢吡啶并[4,3-d]嘧啶、吡啶并[2,3-d]嘧啶和喹啉衍生物；以及WO2016040330描述了噻吩并嘧啶和噻吩并吡啶化合物。WO 2017192543描述了作为Menin抑制剂的哌啶。WO 2017112768、WO 2017207387、WO 2017214367、WO 2018053267和WO 2018024602描述了menin-MLL相互作用的抑制剂。WO 2017161002和WO 2017161028描述了menin-MLL的抑制剂。WO 2018050686、WO 2018050684和WO 2018109088描述了menin-MLL相互作用的抑制剂。

发明说明

本发明涉及新颖的具有式(I)的化合物，

以及其互变异构体和立体异构形式，其中

R¹选自由以下组成的组：CH₃、CH₂F、CHF₂和CF₃；

Y¹是N或CR^y；

当Y¹代表N时，R²选自由以下组成的组：氢、CH₃、-OCH₃、-NH₂和-NH-CH₃；

当Y¹代表CR^y时，R²是氢；

R^y选自由以下组成的组：氢，氰基和任选地被羟基、-O-C_1-4烷基或-O-C_3-6环烷基取代的C_1-4烷基；

Y²是CH₂或O；

A是共价键或-CR^15aR^15b-；

R^15a和R^15b各自独立地选自由以下组成的组：氢或C_1-4烷基；

Q是氢或任选地被苯基取代的C_1-4烷基；

--L-R³选自(a)、(b)、(c)、(d)、(e)或(f)：

(a)--L-R³是-NR^AR^1A，其中

R^A选自由以下组成的组：氢；环丙基；任选地被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-4烷基：氟和-CN；和被选自由以下组成的组的取代基取代的C_2-4烷基：-OR^3a和-NR^4aR^4aa；

R^1A选自由以下组成的组：任选地被一个、两个或三个氟取代基取代的C_1-6烷基；和被选自由以下组成的组的取代基取代的C_2-6烷基：-OR^1a和-NR^2aR^2aa，

其中R^1a、R^2a、R^2aa、R^3a、R^4a和R^4aa各自独立地选自由以下组成的组：氢、C_1-4烷基和环丙基；

或

(b)L选自由以下组成的组：-N(R^B)-、-N(R^B)-CR^1BR^1BB-、和-(NR^B)-CHR^1B-CHR^2B-；并且R³选自由以下组成的组：Ar；Het¹；Het²；Het³；R¹⁷；和7元至10元饱和螺碳二环系统；其中

R^B选自由以下组成的组：氢；环丙基；任选地被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-4烷基：氟和-CN；和被选自由以下组成的组的取代基取代的C_2-4烷基：-OR^1b和-NR^2bR^2bb；其条件是当R³是R¹⁷时，R^B是氢；

其中

R^1b、R^2b和R^2bb各自独立地选自由以下组成的组：氢、C_1-4烷基和环丙基；

R^1B选自由以下组成的组：氢；卤代；C_3-6环烷基；

任选地被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-4烷基：氟、羟基和-CN；被选自由以下组成的组的取代基取代的C_2-4烷基：-OR^4B和-NR^5BR^5BB；和含有至少一个氮、氧或硫原子的C-连接的4元至7元非芳香族杂环基；并且R^1BB选自由以下组成的组：氢和甲基；或R^1B和R^1BB连同它们所附接的碳一起形成C_3-6环烷基或含有至少一个氮、氧或硫原子的C-连接的4元至7元非芳香族杂环基；

R^2B选自由以下组成的组：氢；-OR^6B；-NR^7BR^7BB；CF₃，任选地被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-4烷基：氟、-CN、-OR^4B和-NR^5BR^5BB；和含有至少一个氮、氧或硫原子的C-连接的4元至7元非芳香族杂环基；其中

R^4B、R^5B、R^5BB、R^6B、R^7B和R^7BB各自独立地选自由以下组成的组：氢；任选地被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-4烷基：氟、-CN和-C(＝O)NR^9BR^9BB；和被选自由以下组成的组的取代基取代的C_2-4烷基：-OR^10B和-NR^11BR^11BB；其中

R^9B、R^9BB、R^10B、R^11B和R^11BB各自独立地选自由以下组成的组：氢；C_1-4烷基；和含有至少一个氮、氧或硫原子的C-连接的4元至7元非芳香族杂环基；

或

(c)--L-R³选自由以下组成的组：-N(R^C)-COR^5C；和-N(R^C)-SO₂-R^13C，其中

R^C选自由以下组成的组：氢；环丙基；任选地被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-4烷基：氟和-CN；和被选自由以下组成的组的取代基取代的C_2-4烷基：-OR^1c和-NR^2cR^2cc；

R^5C和R^13C各自独立地选自由以下组成的组：氢；Ar；Het¹；Het²；Het³；R¹⁷；7元至10元饱和螺碳二环系统；和任选地被-NR^2cR^2cc、Ar、Het¹或Het²取代的C_1-4烷基；其中

R^1c、R^2c和R^2cc各自独立地选自由以下组成的组：氢和C_1-4烷基；

或

(d)L选自-N(R^D)-CR^1DR^1DD-和-N(R^D)-CR^1DR^1DD-CR^2DR^2DD-；其中

R^D选自由以下组成的组：氢；任选地被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-4烷基：氟和-CN；和被选自以下的取代基取代的C_2-4烷基：-OR^1d和-NR^2dR^2dd；其中

R^1d、R^2d和R^2dd各自独立地选自由以下组成的组：氢和C_1-4烷基；

R^1D、R^1DD、R^2D和R^2DD各自独立地选自由以下组成的组：氢和C_1-4烷基；并且

R³选自由以下组成的组：

其中

R^3D、R^4D和R^5D各自独立地选自由以下组成的组：

任选地被-OH、-OC_1-6烷基或-NH₂取代基取代的C_1-6烷基；

或

(e)--L-R³是

其中

R^E选自由以下组成的组：氢和C_1-4烷基；

R^1E选自由以下组成的组：氢、氟和C_1-4烷基；并且

R^2E选自由以下组成的组：氟、-OC_1-4烷基和任选地被1、2或3个氟取代基取代的C_1-4烷基；或R^1E和R^2E与相同的碳原子结合并一起形成C_3-5环烷基或C-连接的含有氧原子的4元至6元杂环基；并且

R^3E选自由以下组成的组：氢；任选地被氟或-CN取代基取代的C_1-4烷基；和被选自由以下组成的组的取代基取代的C_2-4烷基：-OR^4E和-NR^5ER^5EE；其中

R^4E、R^5E和R^5EE各自独立地选自由以下组成的组：氢；任选地被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-4烷基：氟、-CN和-C(＝O)NR^6ER^6EE；被选自由以下组成的组的取代基取代的C_2-4烷基：-OR^7E和-NR^8ER^8EE；和含有至少一个氮、氧或硫原子的C-连接的4元至7元非芳香族杂环基；其中

R^6E、R^6EE、R^7E、R^8E和R^8EE各自独立地选自由以下组成的组：氢和C_1-4烷基；

或

(f)--L-R³是基团

Ar是任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代的苯基：卤代、-CN、-OR⁴、-NR⁵R^5’、-C(＝O)NR⁵R^5’、Het⁴、-O-Het⁴、-NR⁵-Het⁴、-C(＝O)-Het⁴、-S(＝O)₂-Het⁴、-S(＝O)₂-NR⁵R^5’、-S(＝O)₂-C_1-4烷基、R¹⁴、CF₃、任选地被-CN取代的C_3-5环烷基、和任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个或两个取代基取代的C_1-4烷基：氟、Het⁴、-CN、-OR⁶、-NR⁷R^7’、-S(＝O)₂-C_1-4烷基和-C(＝O)NR⁸R^8’；

Het¹是选自由以下组成的组的单环杂芳基：吡啶基，2-、4-、5-或6-嘧啶基，吡嗪基，哒嗪基，呋喃基，噻吩基，吡咯基，吡唑基，咪唑基，4-或5-噻唑基，异噻唑基，和异噁唑基；其各自可以任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代：卤代、-CN、-OR⁴、-NR⁵R^5’、-C(＝O)NR⁵R^5’、-C(＝O)-Het⁴和任选地被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-4烷基：氟、-CN、-OR⁶、Het²、-NR⁷R^7’和-C(＝O)NR⁸R^8’；并且

Het²是任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代的非芳香族杂环基：卤代、-CN、-C(＝O)-C_1-6烷基、-C(＝O)Ar、-C(＝O)Het¹、-C(＝O)Het²、-OR⁴、-NR⁵R^5’和任选地被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-4烷基：氟、-CN、-OR⁶、-NR⁷R^7’、R¹²和-C(＝O)NR⁸R^8’；

其中

R¹²是含有至少一个氮、氧或硫原子的C-连接的4元至7元非芳香族杂环基；

R⁴、R⁵、R^5'、R⁶、R⁷、R^7'、R⁸和R^8'各自独立地选自由以下组成的组：氢；-C(＝O)-C_1-4烷基；-S(＝O)₂-C_1-4烷基；

任选地被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-4烷基：氟、-CN、-C(＝O)-C_1-4烷基、-S(＝O)₂-C_1-4烷基、R^11”、R¹⁶和-C(＝O)NR⁹R^9’；

被三个氟原子取代的C_1-4烷基；和

被选自由以下组成的组的取代基取代的C_2-4烷基：-OR¹⁰和-NR¹¹R^11’；其中

R⁹、R^9’、R¹⁰、R¹¹、R^11’和R^11”各自独立地选自由以下组成的组：氢；C_1-4烷基；-S(＝O)₂-C_1-4烷基；和含有至少一个氮、氧或硫原子的C-连接的4元至7元非芳香族杂环基，其中所述杂环基任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代：-S(＝O)₂-C_1-4烷基、卤代、氰基和任选地被-O-C_1-4烷基取代的C_1-4烷基；

R¹⁶是含有至少一个N原子和任选地一个选自氮、氧和硫的另外的杂原子的N-连接的4元至7元非芳香族杂环基，其中所述杂环基任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代：-S(＝O)₂-C_1-4烷基、卤代、氰基和任选地被-O-C_1-4烷基取代的C_1-4烷基；

R¹⁴是含有至少一个氮原子和任选地1、2或3个各自独立地选自氮、氧和硫的另外的杂原子的5元单环杂芳基；

Het³选自由以下组成的组：式(b-1)和(b-2)：

环B是苯基；

X¹代表CH₂、O或NH；

X²代表NH或O；

X³代表NH或O；

X⁴代表CH或N；

X⁵代表CH或N；

其中在(b-1)或(b-2)的5元环中的一个C原子或一个N原子，包括在X¹、X²、X³、X⁴和X⁵的定义中的适合的C原子和N原子，可以被一个或当可能时被两个C_1-4烷基基团取代，所述基团任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代：卤代、氰基、-C(＝O)NR⁵R^5’和Het⁴；

Het⁴是含有至少一个氮、氧或硫原子的4元至7元非芳香族杂环基，其中所述杂环基任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代：卤代、-CN、氧代、-C(＝O)NR⁵R^5’、-O-C_1-4烷基、-S(＝O)₂-C_1-4烷基和任选地被-O-C_1-4烷基取代的C_1-4烷基；

R¹⁷是任选地被选自由以下组成的组的一个或多个取代基取代的C_3-6环烷基：卤代、-CN、-OR⁴、-NR⁵R^5’、-C(＝O)NR⁵R^5’和任选地被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-4烷基：氟、-CN、-OR⁶、-NR⁷R^7’和-C(＝O)NR⁸R^8’；

n1、n2和m1各自独立地选自1和2；

m2是0或1；

及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

本发明还涉及药物组合物，所述药物组合物包含治疗有效量的具有式(I)的化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，和药学上可接受的载体或赋形剂。

另外，本发明涉及具有式(I)的化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，用于作为药物使用，并且涉及具有式(I)的化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，用于在治疗或预防癌症、骨髓增生异常综合征(MDS)和糖尿病中使用。

在特定的实施例中，本发明涉及具有式(I)的化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，用于在治疗或预防癌症中使用。

在具体的实施例中，所述癌症选自：白血病、骨髓瘤或实体瘤癌症(例如，前列腺癌、肺癌、乳癌、胰腺癌、结肠癌、肝癌、黑色素瘤和胶质母细胞瘤等)。在一些实施例中，白血病包括急性白血病、慢性白血病、骨髓白血病、髓性白血病、成淋巴细胞白血病、淋巴细胞白血病、急性髓性白血病(AML)、慢性髓性白血病(CML)、急性成淋巴细胞白血病(ALL)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、T细胞前淋巴细胞白血病(T-PLL)、大颗粒淋巴细胞白血病、毛细胞白血病(HCL)、MLL-重排白血病、MLL-PTD白血病、MLL增加的白血病、MLL-阳性白血病，展示HOX/MEIS1基因表达标记等的白血病。

本发明还涉及具有式(I)的化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物与另外的药物试剂的组合的用途，所述用途用于在治疗或预防癌症、骨髓增生异常综合征(MDS)和糖尿病中使用。

此外，本发明涉及用于制备根据本发明的药物组合物的方法，其特征在于将药学上可接受的载体与治疗有效量的具有式(I)的化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物充分混合。

本发明还涉及包含具有式(I)的化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物以及另外的药物试剂的产品，作为用于同时、单独或连续用于治疗或预防癌症、骨髓增生异常综合征(MDS)和糖尿病的组合制剂。

另外，本发明涉及治疗或预防温血动物的细胞增殖疾病的方法，所述方法包括向所述动物施用有效量的如本文定义的具有式(I)的化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物、或如本文定义的药物组合物或组合。

具体实施方式

如本文使用的术语‘卤代’或‘卤素’代表氟、氯、溴以及碘。

如本文使用的前缀‘C_x-y’(其中x和y是整数)是指一个给定基团中碳原子的数目。因此，C_1-6烷基基团含有从1至6个碳原子等等。

如本文用作基团或基团的一部分的术语‘C_1-4烷基’代表具有从1到4个碳原子的直链或支链饱和烃基团，如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基等。

如本文用作基团或基团的一部分的术语‘C_2-4烷基’代表具有从2个至4个碳原子的直链或支链饱和烃基团，如乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基等。

如本文用作基团或基团的一部分的术语‘C_1-6烷基’代表具有从1个至6个碳原子的直链或支链饱和烃基团，如关于C_1-4烷基定义的基团以及正戊基、正己基、2-甲基丁基等。

如本文用作基团或基团的一部分的术语‘C_2-6烷基’代表具有从2个至6个碳原子的直链或支链饱和烃基团，如关于C_2-4烷基定义的基团以及正戊基、正己基、2-甲基丁基等。

如本文用作基团或基团的一部分的术语‘C_3-5环烷基’定义了饱和的、具有从3个到5个碳原子的环状烃基团，如环丙基、环丁基和环戊基。如本文用作基团或基团的一部分的术语‘C_3-6环烷基’定义了饱和的、具有从3个到6个碳原子的环状烃基团，如环丙基、环丁基、环戊基和环己基。

技术人员将清楚的是，S(＝O)₂、(SO₂)或SO₂代表磺酰基部分。

技术人员将清楚的是，CO或C(＝O)代表羰基部分。

技术人员将清楚的是，-N(R^B)-或-(NR^B)-代表

如本文使用的‘螺碳二环’系统是环状碳系统，其中两个环在单个原子处连接。7元至10元饱和螺碳二环系统的实例包括，但不限于

等。

通常，每当术语‘取代的’用于本发明时，除非另外指明或从上下文是清楚的，它意在表示在使用‘取代的’这种表述中表示的原子或基团上的一个或多个氢(特别是从1至4个氢、更特别是从1至3个氢、优选是1或2个氢、更优选是1个氢)被选自所表示组的选择项替换，其条件是未超过正常的化合价，并且所述取代导致了化学上稳定的化合物(即足够稳健以承受从反应混合物分离至有用的纯度的化合物)。

每当在(b-1)或(b-2)的5元环中的一个C原子或一个N原子被一个或在可能的情况下两个取代基取代时，那些取代基可以替换与碳或氮原子结合的任何氢原子，包括在X¹、X²、X³、X⁴和X⁵的定义中的NH、CH和CH₂基团。

技术人员将清楚的是，例如当L是在--L-R³的(b)选项中的-N(R^B)-CR^1BR^1BB-时，这意指被R^B取代的氮原子附接至变量A。这与L的其他定义(例如像-(NR^B)-CHR^1B-CHR^2B-(被附接至变量A的R^B取代的氮原子)、-N(R^D)-CR^1DR^1DD-(被附接至变量A的R^D取代的氮原子)、-N(R^D)-CR^1DR^1DD-CR^2DR^2DD-(被附接至变量A的R^D取代的氮原子))，或在所述范围内L的其他类似的定义类似。

技术人员将清楚的是当A是共价键时，式(I)被限制为式(I-x)，其中所有变量是如本文定义的：

取代基和/或变量的组合是可容许的，只要此类组合产生化学上稳定的化合物即可。“稳定的化合物”意在表示足够稳健以经受住从反应混合物分离到有用的纯度程度的化合物。

技术人员将理解，当原子或基团被‘取代基’取代时，是指所提及的原子或基团被选自指定基团的一个取代基取代。

技术人员将理解术语‘任选地取代的’意指使用‘任选地取代的’表示的原子或基团可以是或可以不是取代的(这分别表示取代的或未取代的)。

当一个部分上存在两个或更多个取代基时，在可能的情况下并且除非另外指明或从上下文是清楚的，这些取代基可以替换相同原子上的氢，或者这些取代基可以替换在所述部分不同原子上的氢原子。

本领域技术人员将清楚的是，除非另外指明或从上下文是清楚的，杂环基基团上的取代基可以替换环碳原子上或环杂原子上的任何氢原子(例如，氮原子上的氢可以被取代基替换)。

在本发明的上下文中，如果没有另外说明‘饱和’意指‘完全饱和’。

‘非芳香族基团’包含无芳香族性质的不饱和环系统，部分饱和和完全饱和的碳环和杂环系统。术语‘部分饱和’是指其中一种或多种环结构含有至少一个多重键(例如C＝C，N＝C键)的环。术语‘完全饱和’是指其中环原子之间不存在多重键的环。因此，除非另外说明，‘非芳香族杂环基’是具有例如3个至12个环成员，更通常是5个至10个环成员的非芳香族单环或二环系统。单环基团的实例是含有4个至7个环成员，更通常是5个或6个环成员的基团。二环基团的实例是含有7个至12、8个至12个，更通常是9个或10个环成员的那些。

如果没有另外说明或从上下文是清楚的，技术人员将理解‘非芳香族杂环基’含有至少一个杂原子，如N、O或S。

含有选自氮、氧或硫(N、O、S)的至少一个杂原子的单环杂环基系统的非限制性实例包括，但不限于4元至7元杂环基系统，如氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、吡咯烷基、四氢呋喃基、哌啶基、哌嗪基、吡喃基、二氢吡喃基、四氢吡喃基、吗啉基、硫代吗啉基，和四氢-2H-硫代吡喃基1,1-二氧化物，特别是氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、吡咯烷基、四氢呋喃基、哌啶基、哌嗪基、吡喃基、二氢吡喃基、四氢吡喃基、吗啉基，以及硫代吗啉基。

含有选自氮、氧或硫(N、O、S)的至少一个杂原子的二环杂环基系统的非限制性实例包括，但不限于八氢-1H-吲哚基、二氢吲哚基、

除非另外说明，每个可以通过任何可用的环碳原子(C-连接的)或氮原子(N-连接的)结合至具有式(I)的分子的剩余部分，并且在可能的情况下在根据实施例的碳原子和/或氮原子上可以任选地被取代。例如Het²和Het⁴可以C-连接或N-连接至具有式(I)的分子的剩余部分。

如本文单独使用或用作另一个基团的一部分的术语‘含有至少一个氮、氧或硫原子的C-连接的4元至7元杂环基’定义含有至少一个氮、氧或硫原子的，具有从4至7个如上定义的环成员的，通过可用的碳原子结合的饱和环状烃基团。将清楚的是，如本文单独使用或作为另一个基团的一部分使用的术语‘含有一个氧原子的C-连接的4元至6元杂环基’定义含有氧原子的、具有从4个至6个如上定义的环成员的，通过可用的碳原子结合的饱和环状烃基团(例如像氧杂环丁烷基、四氢呋喃基、和四氢吡喃基)。

类似的，将清楚的是，如本文单独使用或用作另一个基团的一部分的术语‘含有至少一个氮、氧或硫原子的C-连接的4元至7元非芳香族杂环基’定义为含有至少一个氮、氧或硫原子的，具有从4至7个如上定义的环成员的，通过可用的碳原子结合的非芳香族环状烃基团。将清楚的是，如本文单独使用或作为另一个基团的一部分使用的术语‘含有氧原子的C-连接的4元至6元非芳香族杂环基’定义含有一个氧原子的、具有从4个至6个如上定义的环成员的，通过可用的碳原子结合的非芳香族环状烃基团(例如像氧杂环丁烷基、四氢呋喃基、和四氢吡喃基)。

类似的，将清楚的是，如本文单独使用或用作另一个基团的一部分的术语‘含有至少一个N原子和任选地一个选自氮、氧和硫的另外的杂原子的N-连接的4元至7元非芳香族杂环基’定义为含有至少一个N原子和任选地一个选自氮、氧和硫的另外的杂原子的，具有从4至7个如上定义的环成员的，通过可用的氮原子结合的非芳香族环状烃基团。如果没有另外说明，应当理解5元单环杂芳基基团(如在R¹⁴的定义中)为芳香族并且适当时可以通过任何可用的环碳或氮原子附接至具有式(I)分子的剩余部分。优选地经由碳原子。含有至少一个氮原子和任选地1、2或3个另外的杂原子(各自独立地选自氮、氧和硫)的5元单环杂芳基的非限制性实例包括但不限于吡唑基、咪唑基、三唑基、噁唑基、异噻唑基或噻唑基。

每当取代基由化学结构代表时，‘---’代表附接到具有式(I)的分子的剩余部分的键。

绘制在环系统中的线(如‘---’)表示所述键可以附接到任何适合的环原子上。

例如当Het³是(b-1)，其中环B是苯基时

此涵盖以下环系统中的任一个

例如当Het³是(b-2)，其中环B是苯基时

此涵盖以下环系统中的任一个

如果没有另外说明，Het¹、Het²和Het⁴可以通过任何可用的环碳或氮原子适当地附接至具有式(I)分子的剩余部分。

将清楚的是，在可能的情况下饱和环部分可以在碳原子和氮原子上都具有取代基，除非另外指明或从上下文是清楚的。

当任何变量在任何成分中出现多于一次时，每条定义是独立的。

当任何变量在任何式(例如式(I))中出现多于一次时，每条定义是独立的。

如本文使用的术语“受试者”是指是或已经是治疗、观察或实验的对象的动物，优选是哺乳动物(例如猫、狗、灵长类动物或人类)，更优选是人。

如本文使用的术语“治疗有效量”意指活性化合物或药物试剂引发组织系统(动物或人)的生物或医药应答的量，所述生物或医药应答正为研究者、兽医、医药医生或其他临床医生所寻求，包括所治疗的疾病或障碍的症状的减轻或逆转。

术语“组合物”旨在涵盖包含指定量的指定成分的产品，以及任何直接或间接由指定量的指定成分的组合产生的产品。

如本文使用的术语“治疗”旨在是指其中可能减缓、中断、遏制或阻止疾病的进展的所有过程，但未必表示所有症状都全部消除。

如本文使用的术语“(本)发明的一种或多种化合物”或“根据(本)发明的一种或多种化合物”意在包括具有式(I)的化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

如本文使用的具有仅显示为实线并且不显示为实楔形键或虚楔形键的键的任何化学式，或另外表示为围绕一个或多个原子具有特别构型(例如R，S)的化学式，考虑每种可能的立体异构体，或两种或更多种立体异构体的混合物。

在上文和下文中，术语“一种或多种具有式(I)的化合物”意在包括其互变异构体和其立体异构体形式。

术语“立体异构体”、“立体异构形式”或“立体化学异构形式”在上文或下文中可互换地使用。

本发明包括本发明的化合物呈纯立体异构体形式或呈两种或更多种立体异构体的混合物形式的所有立体异构体。

对映异构体为彼此不可重叠的镜像的立体异构体。对映异构体对的1:1混合物是外消旋体或外消旋混合物。

阻转异构体(atropisomer)(或限制构型异构体(atropoisomer))是具有特定空间构型的立体异构体，所述特定空间构型由大空间位阻所致的围绕单键受限制的旋转所产生。具有式(I)的化合物的所有阻转异构形式旨在包括在本发明的范围内。

非对映异构体(或非对映异构体)为非对映异构体的立体异构体，即它们不以镜像形式相关。如果化合物含有双键，则这些取代基可以呈E或Z构型。

二价环状饱和或部分饱和基团上的取代基可以具有顺式构型或反式构型；例如，如果化合物含有二取代的环烷基基团，则这些取代基可以呈顺式构型或反式构型。

因此，本发明包括对映异构体、阻转异构体、非对映异构体、外消旋体、E异构体、Z异构体、顺式异构体、反式异构体及其混合物，只要化学上可能即可。

所有那些术语(即对映异构体、阻转异构体、非对映异构体、外消旋体、E异构体、Z异构体、顺式异构体、反式异构体及其混合物)的含义为技术人员所已知。

绝对构型是根据卡恩-英戈尔德-普雷洛格(Cahn-Ingold-Prelog)系统指定的。不对称原子处的构型由R或S指定。绝对构型未知的已拆分的立体异构体可以根据它们旋转平面偏振光的方向而由(+)或(-)指定。例如，绝对构型未知的已拆分的对映异构体可以根据它们旋转平面偏振光的方向而由(+)或(-)指定。

当鉴定具体的立体异构体时，这意指所述立体异构体基本上不含其他立体异构体，即与少于50％、优选地少于20％、更优选地少于10％、甚至更优选地少于5％，特别是少于2％并且最优选地少于1％的其他立体异构体相关联。因此，当具有式(I)的化合物例如被指定为(R)时，这意指所述化合物基本上不含(S)异构体；当具有式(I)的化合物例如被指定为E时，这意指所述化合物基本上不含Z异构体；当具有式(I)的化合物例如被指定为顺式时，这意指所述化合物基本上不含反式异构体。

一些根据式(I)的化合物还能以其互变异构形式存在。尽管在以上式(I)中未明确表示，但是此类形式在它们可能存在的情况下旨在包括在本发明的范围内。由此得出，单一化合物可以按立体异构和互变异构形式存在。

药学上可接受的盐包括酸加成盐和碱加成盐。可以通过常规手段，例如通过使游离酸或游离碱形式与一个或多个当量的适当的碱或酸、任选地在溶剂中或在其中所述盐不可溶的介质中进行反应，之后使用标准技术(例如，在真空中，通过冷冻干燥或通过过滤)去除所述溶剂或所述介质来形成此类盐。盐还可以通过将以盐形式的本发明的化合物的反离子与另一种反离子进行交换来制备，例如使用适合的离子交换树脂。

如在上文或下文中所提及的药学上可接受的盐意在包含具有式(I)的化合物及其溶剂化物能够形成的有治疗活性的无毒的酸盐和碱盐形式。

适当的酸包含例如，无机酸，如氢卤酸(例如盐酸或氢溴酸)、硫酸、硝酸、磷酸以及类似酸；或有机酸，例如像乙酸、丙酸、羟基乙酸、乳酸、丙酮酸、草酸(即乙二酸)、丙二酸、琥珀酸(即丁二酸)、马来酸、富马酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、环己氨磺酸、水杨酸、对氨基水杨酸、双羟萘酸以及类似酸。相反地，可以通过用适当的碱处理将所述盐形式转化为游离碱形式。

还可以通过用适当的有机和无机碱处理将含有酸性质子的具有式(I)的化合物及其溶剂化物转化为它们的无毒金属或胺盐形式。

适当的碱盐形式包含例如铵盐，碱金属及碱土金属盐例如锂、钠、钾、铯、镁、钙盐等，与有机碱(例如伯、仲及叔脂族及芳族胺，如甲胺、乙胺、丙胺、异丙胺、四丁胺异构体、二甲胺、二乙胺、二乙醇胺、二丙胺、二异丙胺、二正丁胺、吡咯烷、哌啶、吗啉、三甲胺、三乙胺、三丙胺、奎宁环、吡啶、喹啉和异喹啉)的盐；苯乍生、N-甲基-D-葡糖胺、海巴明盐、以及与氨基酸(例如像精氨酸、赖氨酸等)的盐。相反地，可以通过用酸处理将所述盐形式转化成游离酸形式。

术语溶剂化物包含具有式(I)的化合物能够形成的其溶剂加成形式以及其盐。此类溶剂加成形式的实例是例如水合物、醇化物等。

如在以下描述的方法中制备的本发明的化合物可以合成为对映异构体的混合物形式，特别是对映异构体的外消旋混合物，这些对映异构体可以根据本领域中已知的拆分程序相互分离。分离具有式(I)的化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物的对映异构形式的方式涉及使用手性固定相的液相色谱。所述纯立体化学异构形式还可以来源于适当原材料的相应的纯立体化学异构形式，其条件是反应立体定向地发生。优选地，如果具体的立体异构体是所希望的，则所述化合物将通过立体定向制备方法来合成。这些方法将有利地采用对映异构体纯的原材料。

本发明还包含本发明的同位素标记的化合物，这些同位素标记的化合物与本文列举的那些相同，但是事实上一个或多个原子被原子质量或质量数不同于自然中通常发现(或自然中发现的最多的那一个)的原子质量或质量数的原子所替换。

如本文所指定的任何具体的原子或元素的所有同位素和同位素混合物都被认为是在本发明的化合物的范围之内，不论是天然存在的或是合成产生的，不论具有天然丰度或呈同位素富集的形式。可以包含在本发明的化合物中的示例性同位素包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯和碘的同位素，如²H、³H、¹¹C、¹³C、¹⁴C、¹³N、¹⁵O、¹⁷O、¹⁸O、³²P、³³P、³⁵S、¹⁸F、³⁶Cl、¹²²I、¹²³I、¹²⁵I、¹³¹I、⁷⁵Br、⁷⁶Br、⁷⁷Br、和⁸²Br。优选地，放射性同位素选自由以下组成的组：²H、³H、¹¹C和¹⁸F。更优选地，放射性同位素是²H。特别地，氘化的化合物旨在包括在本发明的范围内。

本发明的某些同位素标记的化合物(例如，用³H和¹⁴C标记的那些)例如在底物组织分布测定中可以是有用的。氚化(³H)和碳-l4(¹⁴C)同位素是有用的，因为它们易于制备和检测。此外，用更重同位素(如氘)(即，²H)取代可以提供由于更大的代谢稳定性而产生的某些治疗优点(例如，增加的体内半衰期或降低的剂量需求)并且因此在一些环境下可以是优选的。因此，在本发明的特定的实施例中，R²选自氢或氘，特别是氘。正电子发射同位素(如¹⁵O、¹³N、¹¹C和¹⁸F)对于正电子发射断层术(PET)研究是有用的。癌症中的PET成像在帮助定位和鉴定肿瘤、对疾病分阶段并确定适合的治疗方法中有效用。人癌细胞过量表达许多潜在的疾病特异性分子靶的受体或蛋白质。以高亲和力和特异性结合肿瘤细胞上的此类受体或蛋白质的放射标记的示踪剂具有诊断成像和靶向放射性核素治疗的巨大潜力(Charron,Carlie L.等人Tetrahedron Lett.[四面体通讯]2016,57(37),4119-4127)。另外，靶特异性PET放射性示踪剂可以用作生物标志物来检查和评估病理学，例如通过测量靶标表达和治疗反应(Austin R.等人Cancer Letters[癌症通讯](2016),doi：10.1016/j.canlet.2016.05.008)。

本发明特别涉及如本文定义的具有式(I)的化合物、及其互变异构体和立体异构形式，其中

R¹选自由以下组成的组：CH₃、CH₂F、CHF₂和CF₃；

Y¹是N或CR^y；

当Y¹代表CR^y时，R²是氢；

Y²是CH₂或O；

A是共价键或-CR^15aR^15b-；

R^15a和R^15b各自独立地选自由以下组成的组：氢或C_1-4烷基；

Q是氢或任选地被苯基取代的C_1-4烷基；

--L-R³选自(a)、(b)、(c)、(d)、(e)或(f)：

(a)--L-R³是-NR^AR^1A，其中

或

其中

R^1B选自由以下组成的组：氢；卤代；C_3-6环烷基；

或

(d)L选自-N(R^D)-CR^1DR^1DD-和-N(R^D)-CR^1DR^1DD-CR^2DR^2DD-；其中

R³选自由以下组成的组：

其中

R^3D、R^4D和R^5D各自独立地选自由以下组成的组：

任选地被-OH、-OC_1-6烷基或-NH₂取代基取代的C_1-6烷基；

或

(e)--L-R³是

其中

R^E选自由以下组成的组：氢和C_1-4烷基；

R^1E选自由以下组成的组：氢、氟和C_1-4烷基；并且

或

(f)--L-R³是基团

其中

R⁴、R⁵、R^5'、R⁶、R⁷、R^7'、R⁸和R^8'各自独立地选自由以下组成的组：氢；-C(＝O)-C_1-4烷基；-S(＝O)₂-C_1-4烷基；任选地被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-4烷基：氟、-C(＝O)-C_1-4烷基、-S(＝O)₂-C_1-4烷基、R^11”、R¹⁶和-C(＝O)NR⁹R^9’；和被选自由以下组成的组的取代基取代的C_2-4烷基：-OR¹⁰和-NR¹¹R^11’；其中

Het³选自由以下组成的组：式(b-1)和(b-2)：

环B是苯基；

X¹代表CH₂、O或NH；

X²代表NH或O；

X³代表NH或O；

X⁴代表CH或N；

X⁵代表CH或N；

n1、n2和m1各自独立地选自1和2；

m2是0或1；

及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

R¹是CF₃；

Y¹是N；

Y²是CH₂；

A是共价键或-CR^15aR^15b-；

R^15a和R^15b是氢；

Q是氢；

--L-R³选自(a)、(b)、(c)、(d)、(e)或(f)：

(a)--L-R³是-NR^AR^1A，其中

R^A选自由以下组成的组：氢和C_1-4烷基；

R^1A是C_1-6烷基；

或

(b)L选自由以下组成的组：-N(R^B)-和-N(R^B)-CR^1BR^1BB；并且R³选自由以下组成的组：Ar；Het¹；Het²；Het³；和R¹⁷；特别地，R³选自由以下组成的组：Ar；Het¹；Het³；和R¹⁷；其中

R^B选自由以下组成的组：氢和C_1-4烷基；

R^1B选自由以下组成的组：氢和C_1-4烷基；并且

R^1BB选自由以下组成的组：氢和甲基；或R^1B和R^1BB连同它们所附接的碳一起形成C_3-6环烷基；

或

(c)--L-R³选自由以下组成的组：-N(R^C)-COR^5C；和

-N(R^C)-SO₂-R^13C，其中

R^C选自由以下组成的组：氢和C_1-4烷基；

R^5C和R^13C各自独立地选自由以下组成的组：Ar；和任选地被Het²取代的C_1-4烷基；

Ar是任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代的苯基：卤代、-CN、-OR⁴、-NR⁵R^5’、-C(＝O)NR⁵R^5’、Het⁴、-O-Het⁴、-C(＝O)-Het⁴、-S(＝O)₂-Het⁴、-S(＝O)₂-NR⁵R^5’、-S(＝O)₂-C_1-4烷基、R¹⁴、CF₃、任选地被-CN取代的C_3-5环烷基、和任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个或两个取代基取代的C_1-4烷基：Het⁴、-CN、-OR⁶、-NR⁷R^7’、-S(＝O)₂-C_1-4烷基和-C(＝O)NR⁸R^8’；

Het¹是选自由以下组成的组的单环杂芳基：吡啶基，2-、4-、5-或6-嘧啶基，吡嗪基，哒嗪基，吡唑基和咪唑基；其各自可以任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代：-CN、-OR⁴、-C(＝O)NR⁵R⁵'、-C(＝O)-Het⁴和任选地被-C(＝O)NR⁸R^8’取代的C_1-4烷基；并且

Het²是非芳香族杂环基；

其中

任选地被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-4烷基：-CN、R^11”和R¹⁶；

被三个氟原子取代的C_1-4烷基；和

R¹⁰、R¹¹、R^11’和R^11”各自独立地选自由以下组成的组：氢；C_1-4烷基；-S(＝O)₂-C_1-4烷基；和含有至少一个氮、氧或硫原子的C-连接的4元至7元非芳香族杂环基，其中所述杂环基任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代：-S(＝O)₂-C_1-4烷基和C_1-4烷基；

R¹⁶是含有至少一个N原子和任选地一个选自氮、氧和硫的另外的杂原子的N-连接的4元至7元非芳香族杂环基，其中所述杂环基任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代：-S(＝O)₂-C_1-4烷基；

Het³选自由以下组成的组：式(b-1)和(b-2)：

环B是苯基；

X¹代表CH₂、O或NH；

X²代表NH或O；

X³代表NH或O；

X⁴代表CH或N；

X⁵代表CH或N；

Het⁴是含有至少一个氮、氧或硫原子的4元至7元非芳香族杂环基，其中所述杂环基任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代：-CN、氧代、-C(＝O)NR⁵R^5’、-O-C_1-4烷基、-S(＝O)₂-C_1-4烷基和任选地被-O-C_1-4烷基取代的C_1-4烷基；

R¹⁷是任选地被选自由以下组成的组的一个或多个取代基取代的C_3-6环烷基：-NR⁵R^5’；

n1、n2和m1各自独立地选自1和2；

m2是0或1；

及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

R¹选自由以下组成的组：CH₃、CH₂F、CHF₂和CF₃；

Y¹是N或CR^y；

当Y¹代表CR^y时，R²是氢；

Y²是CH₂或O；

A是共价键；

Q是氢或任选地被苯基取代的C_1-4烷基；

--L-R³选自(a)、(b)、(c)、(d)、(e)或(f)：

(a)--L-R³是-NR^AR^1A，其中

或

其中

R^1B选自由以下组成的组：氢；卤代；C_3-6环烷基；

或

(d)L选自-N(R^D)-CR^1DR^1DD-和-N(R^D)-CR^1DR^1DD-CR^2DR^2DD-；其中

R³选自由以下组成的组：

其中

R^3D、R^4D和R^5D各自独立地选自由以下组成的组：

任选地被-OH、-OC_1-6烷基或-NH₂取代基取代的C_1-6烷基；

或

(e)--L-R³是

其中

R^E选自由以下组成的组：氢和C_1-4烷基；

R^1E选自由以下组成的组：氢、氟和C_1-4烷基；并且

或

(f)--L-R³是基团

其中

R⁴、R⁵、R^5'、R⁶、R⁷、R^7'、R⁸和R^8'各自独立地选自由以下组成的组：氢；-C(＝O)-C_1-4烷基；-S(＝O)₂-C_1-4烷基；任选地被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-4烷基：氟、-C(＝O)-C_1-4烷基、-S(＝O)₂-C_1-4烷基、R^11”、R¹⁶和-C(＝O)NR⁹R^9’；和被选自由以下组成的组的取代基取代的C_2-4烷基：-OR¹⁰和-NR¹¹R^11'；其中

R⁹、R^9’、R¹⁰、R¹¹、R^11’和R^11”各自独立地选自由以下组成的组：氢；C_1-4烷基；-S(＝O)₂-C_1-4烷基；和含有至少一个氮、氧或硫原子的C-连接的4元至7元非芳香族杂环基，其中所述杂环基任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代：-S(＝O)₂-C_1-4烷基、卤代、氰基、和任选地被-O-C_1-4烷基取代的C_1-4烷基；

Het³选自由以下组成的组：式(b-1)和(b-2)：

环B是苯基；

X¹代表CH₂、O或NH；

X²代表NH或O；

X³代表NH或O；

X⁴代表CH或N；

X⁵代表CH或N；

n1、n2和m1各自独立地选自1和2；

m2是0或1；

及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

R¹选自由以下组成的组：CH₃、CH₂F、CHF₂和CF₃；

Y¹是N或CR^y；

当Y¹代表CR^y时，R²是氢；

Y²是CH₂或O；

A是-CR^15aR^15b-；

R^15a和R^15b各自独立地选自由以下组成的组：氢或C_1-4烷基；

Q是氢或任选地被苯基取代的C_1-4烷基；

--L-R³选自(a)、(b)、(c)、(d)、(e)或(f)：

(a)--L-R³是-NR^AR^1A，其中

或

其中

R^1B选自由以下组成的组：氢；卤代；C_3-6环烷基；

或

(d)L选自-N(R^D)-CR^1DR^1DD-和-N(R^D)-CR^1DR^1DD-CR^2DR^2DD-；其中

R³选自由以下组成的组：

其中

R^3D、R^4D和R^5D各自独立地选自由以下组成的组：

任选地被-OH、-OC_1-6烷基或-NH₂取代基取代的C_1-6烷基；

或

(e)--L-R³是

其中

R^E选自由以下组成的组：氢和C_1-4烷基；

R^1E选自由以下组成的组：氢、氟和C_1-4烷基；并且

或

(f)--L-R³是基团

其中

Het³选自由以下组成的组：式(b-1)和(b-2)：

环B是苯基；

X¹代表CH₂、O或NH；

X²代表NH或O；

X³代表NH或O；

X⁴代表CH或N；

X⁵代表CH或N；

n1、n2和m1各自独立地选自1和2；

m2是0或1；

及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

R¹选自由以下组成的组：CH₃、CH₂F、CHF₂和CF₃；

Y¹是N；

R²选自由以下组成的组：氢、CH₃、-OCH₃、-NH₂和-NH-CH₃；

Y²是CH₂；

A是共价键或-CR^15aR^15b-；

R^15a和R^15b各自独立地选自由以下组成的组：氢或C_1-4烷基；

Q是氢；

--L-R³选自(a)、(b)或(c)：

(a)--L-R³是-NR^AR^1A，其中

或

其中

R^1B选自由以下组成的组：氢；卤代；C_3-6环烷基；

或

(c)--L-R³选自由以下组成的组：-N(R^C)-COR^5C；并且-N(R^C)-SO₂-R^13C，其中

其中

Het³选自由以下组成的组：式(b-1)和(b-2)：

环B是苯基；

X¹代表CH₂、O或NH；

X²代表NH或O；

X³代表NH或O；

X⁴代表CH或N；

X⁵代表CH或N；

n1、n2和m1各自独立地选自1和2；

m2是0或1；

及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

R¹选自由以下组成的组：CH₃、CH₂F、CHF₂和CF₃；

Y¹是N；

R²选自由以下组成的组：氢、CH₃、-OCH₃、-NH₂和

-NH-CH₃；

Y²是CH₂；

A是共价键；

Q是氢；

--L-R³选自(a)、(b)或(c)：

(a)--L-R³是-NR^AR^1A，其中

或

其中

R^1B选自由以下组成的组：氢；卤代；C_3-6环烷基；

或

其中

Het³选自由以下组成的组：式(b-1)和(b-2)：

环B是苯基；

X¹代表CH₂、O或NH；

X²代表NH或O；

X³代表NH或O；

X⁴代表CH或N；

X⁵代表CH或N；

n1、n2和m1各自独立地选自1和2；

m2是0或1；

及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

R¹选自由以下组成的组：CF₃；

Y¹是N；

R²选自由以下组成的组：氢、-OCH₃、-NH₂和-NH-CH₃；

Y²是CH₂；

A是共价键或-CR^15aR^15b-；

R^15a和R^15b是氢；

Q是氢；

--L-R³选自(a)、(b)或(c)：

(a)--L-R³是-NR^AR^1A，其中

R^A选自由以下组成的组：氢；或C_1-4烷基；

R^1A是C_1-6烷基；

或

(b)L选自由以下组成的组：-N(R^B)-和-N(R^B)-CR^1BR^1BB-；并且R³选自由以下组成的组：Ar；Het¹；Het²；Het³；和R¹⁷；其中

R^B是氢；

R^1B选自由以下组成的组：氢；和C_1-4烷基；并且

或

R^C选自由以下组成的组：氢；和C_1-4烷基；

R^5C和R^13C各自独立地选自由以下组成的组：氢；Ar；Het³；和任选地被Het²取代的C_1-4烷基；

Ar是任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代的苯基：卤代、-CN、-OR⁴、-NR⁵R^5’、-C(＝O)NR⁵R^5’、Het⁴、-O-Het⁴、-NR⁵-Het⁴、-C(＝O)-Het⁴、-S(＝O)₂-Het⁴、-S(＝O)₂-NR⁵R^5’、-S(＝O)₂-C_1-4烷基、R¹⁴、CF₃、任选地被-CN取代的C_3-5环烷基、和任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个或两个取代基取代的C_1-4烷基：Het⁴、-CN、-OR⁶、-S(＝O)₂-C_1-4烷基和-C(＝O)NR⁸R^8’；

Het¹是选自由以下组成的组的单环杂芳基：吡啶基、2-嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基和吡唑基；其各自可以任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代：-CN、-OR⁴、-C(＝O)NR⁵R⁵'、-C(＝O)-Het⁴和C_1-4烷基；并且

Het²是任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代的非芳香族杂环基：任选地被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-4烷基：氟；

其中

R⁴、R⁵、R^5’、R⁶、R⁸和R^8’各自独立地选自由以下组成的组：氢；-C(＝O)-C_1-4烷基；-S(＝O)₂-C_1-4烷基；任选地被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-4烷基：-S(＝O)₂-C_1-4烷基和R¹⁶；和被选自由以下组成的组的取代基取代的C_2-4烷基：-OR¹⁰和-NR¹¹R¹¹'；其中

R¹⁰、R¹¹和R^11’各自独立地选自由以下组成的组：氢；C_1-4烷基；-S(＝O)₂-C_1-4烷基；和含有至少一个氮、氧或硫原子的C-连接的4元至7元非芳香族杂环基，其中所述杂环基任选地被一个、两个或三个-S(＝O)₂-C_1-4烷基取代基取代；

R¹⁶是含有至少一个N原子和任选地一个选自氮、氧和硫的另外的杂原子的N-连接的4元至7元非芳香族杂环基，其中所述杂环基任选地被一个、两个或三个-S(＝O)₂-C_1-4烷基取代基取代；

Het³选自由以下组成的组：式(b-1)和(b-2)：

环B是苯基；

X¹代表CH₂、O或NH；

X²代表NH或O；

X³代表NH或O；

X⁴代表CH或N；

X⁵代表CH或N；

Het⁴是含有至少一个氮、氧或硫原子的4元至7元非芳香族杂环基，其中所述杂环基任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代：

-CN、氧代、-C(＝O)NR⁵R^5’、-O-C_1-4烷基、-S(＝O)₂-C_1-4烷基和任选地被-O-C_1-4烷基取代的C_1-4烷基；

R¹⁷是任选地被一个或多个-NR⁵R^5’取代基取代的C_3-6环烷基；

n1、n2和m1各自独立地选自1和2；

m2是0或1；

及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

R¹选自由以下组成的组：CF₃；

Y¹是N；

R²选自由以下组成的组：氢、-OCH₃和-NH-CH₃；

Y²是CH₂；

A是共价键或-CR^15aR^15b-；

R^15a和R^15b是氢；

Q是氢；

--L-R³选自(a)、(b)或(c)：

(a)--L-R³是-NR^AR^1A，其中

R^A是C_1-4烷基；

R^1A是C_1-6烷基；

或

(b)L选自由以下组成的组：-N(R^B)-和-N(R^B)-CR^1BR^1BB-；并且R³选自由以下组成的组：Ar；Het¹；Het³；和R¹⁷；其中

R^B是氢；

R^1B是氢；并且

R^1BB选自由以下组成的组：氢和甲基；

或

R^C选自由以下组成的组：氢；和C_1-4烷基；

Ar是任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代的苯基：卤代、-CN、-OR⁴、-NR⁵R^5’、-C(＝O)NR⁵R^5’、Het⁴、-O-Het⁴、-NR⁵-Het⁴、-C(＝O)-Het⁴、R¹⁴、CF₃和任选地被一个或两个-CN取代基取代的C_1-4烷基；

Het¹是选自由以下组成的组的单环杂芳基：吡啶基和吡唑基；其各自可以任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代：-C(＝O)NR⁵R^5’和C_1-4烷基；并且

Het²是非芳香族杂环基；

其中

R⁴、R⁵和R^5’各自独立地选自由以下组成的组：氢；-S(＝O)₂-C_1-4烷基；任选地被R¹⁶取代基取代的C_1-4烷基；和被选自由以下组成的组的取代基取代的C_2-4烷基：-OR¹⁰和-NR¹¹R^11'；其中

R¹⁰、R¹¹和R^11’各自独立地选自由以下组成的组：氢；和C_1-4烷基；

R¹⁶是含有至少一个N原子和任选地一个选自氮、氧和硫的另外的杂原子的N-连接的4元至7元非芳香族杂环基；

Het³选自由以下组成的组：式(b-1)和(b-2)：

环B是苯基；

X¹代表O或NH；

X²代表NH；

X³代表NH；

X⁴代表N；

X⁵代表CH；

其中在(b-1)或(b-2)的5元环中的一个C原子或一个N原子，包括在X¹、X²、X³、X⁴和X⁵的定义中的适合的C原子和N原子，可以被一个或当可能时被两个C_1-4烷基基团取代，所述基团任选地被一个、两个或三个氰基取代基取代；

Het⁴是含有至少一个氮、氧或硫原子的4元至7元非芳香族杂环基，其中所述杂环基任选地被一个、两个或三个C_1-4烷基取代基取代；

n1、n2和m1各自独立地选自1和2；

m2是0或1；

及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

R¹是CF₃；

Y¹是N；

R²选自由以下组成的组：氢、-OCH₃和-NH-CH₃；

Y²是CH₂；

A是共价键；

Q是氢；

--L-R³选自(a)、(b)或(c)：

(a)--L-R³是-NR^AR^1A，其中

R^A是C_1-4烷基；

R^1A是C_1-6烷基；

或

(b)L选自由以下组成的组：-N(R^B)-和-N(R^B)-CR^1BR^1BB-；并且R³选自由以下组成的组：Ar；Het³；和R¹⁷；其中

R^B是氢；

R^1B是氢；并且

R^1BB选自由以下组成的组：氢和甲基；

或

R^C选自由以下组成的组：氢；和C_1-4烷基；

Ar是任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代的苯基：卤代、-CN、-OR⁴、-NR⁵R^5’、-C(＝O)NR⁵R^5’、Het⁴、-O-Het⁴、-NR⁵-Het⁴、R¹⁴、CF₃和任选地被一个或两个-CN取代基取代的C_1-4烷基；

其中

R⁴、R⁵和R^5’各自独立地选自由以下组成的组：氢；-S(＝O)₂-C_1-4烷基；和被选自由以下组成的组的取代基取代的C_2-4烷基：-OR¹⁰、-NR¹¹R^11’和R¹⁶；

其中

Het³选自由以下组成的组：式(b-1)：

环B是苯基；

X¹代表O或NH；

X²代表NH；

其中在(b-1)的5元环中的一个N原子，包括在X¹和X²的定义中的适合的N原子，可以被一个C_1-4烷基基团取代；

n1、n2和m1各自独立地选自1和2；

m2是0或1；

及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

R¹是CF₃；

Y¹是N；

R²选自由以下组成的组：氢、-OCH₃和-NH-CH₃；

Y²是CH₂；

A是共价键；

Q是氢；

--L-R³是(b)：

(b)L选自由以下组成的组：-N(R^B)-和-N(R^B)-CR^1BR^1BB-；并且R³选自由以下组成的组：Ar和Het³；其中

R^B是氢；

R^1B是氢；并且

R^1BB选自由以下组成的组：氢；

Ar是任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代的苯基：卤代、-OR⁴、-C(＝O)NR⁵R^5'、Het⁴、-O-Het⁴、-NR⁵-Het⁴、R¹⁴和任选地被一个或两个-CN取代基取代的C_1-4烷基；

其中

其中R¹⁶是含有至少一个N原子和任选地一个选自氮、氧和硫的另外的杂原子的N-连接的4元至7元非芳香族杂环基；

Het³选自由以下组成的组：式(b-1)：

环B是苯基；

X¹代表O或NH；

X²代表NH；

Het⁴是含有至少一个氮、氧或硫原子的4元至7元非芳香族杂环基，其中所述杂环基被一个、两个或三个C_1-4烷基取代基取代；

n1、n2和m1各自独立地选自1和2；

m2是0或1；

及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

R¹选自由以下组成的组：CH₃、CH₂F、CHF₂和CF₃；

Y¹是N或CR^y；

当Y¹代表N时，R²选自由以下组成的组：氢、CH₃、

-OCH₃、-NH₂和-NH-CH₃；

当Y¹代表CR^y时，R²是氢；

Y²是CH₂或O；

A是共价键或-CR^15aR^15b-；

R^15a和R^15b各自独立地选自由以下组成的组：氢或C_1-4烷基；

Q是氢或任选地被苯基取代的C_1-4烷基；

--L-R³选自(a)、(b)、(c)、(d)、(e)或(f)：

(a)--L-R³是-NR^AR^1A，其中

R^1A选自由以下组成的组：任选地被一个、两个或三个氟取代基取代的C_1-6烷基；和被选自由以下组成的组的取代基取代的C_2-6烷基：-OR^1a和-NR^2aR^2aa，其中R^1a、R^2a、R^2aa、R^3a、R^4a和R^4aa各自独立地选自由以下组成的组：氢、C_1-4烷基和环丙基；

或

(b)L选自由以下组成的组：-N(R^B)-、-N(R^B)-CR^1BR^1BB-、和-(NR^B)-CHR^1B-CHR^2B-；并且R³选自由以下组成的组：Ar；Het¹；Het²；Het³；和7元至10元饱和螺碳二环系统；其中

R^B选自由以下组成的组：氢；环丙基；任选地被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-4烷基：氟和-CN；和被选自由以下组成的组的取代基取代的C_2-4烷基：-OR^1b和-NR^2bR^2bb；

其中

R^1B选自由以下组成的组：氢；卤代；C_3-6环烷基；

或

R^5C和R^13C各自独立地选自由以下组成的组：氢；Ar；Het¹；Het²；Het³；7元至10元饱和螺碳二环系统；和任选地被-NR^2cR^2cc、Ar、Het¹或Het²取代的C_1-4烷基；其中

或

(d)L选自-N(R^D)-CR^1DR^1DD-和-N(R^D)-CR^1DR^1DD-CR^2DR^2DD-；其中

R³选自由以下组成的组：

其中

R^3D、R^4D和R^5D各自独立地选自由以下组成的组：

任选地被-OH、-OC_1-6烷基或-NH₂取代基取代的C_1-6烷基；

或

(e)--L-R³是

其中

R^E选自由以下组成的组：氢和C_1-4烷基；

R^1E选自由以下组成的组：氢、氟和C_1-4烷基；并且

或

(f)--L-R³是基团

Ar是任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代的苯基：卤代、-CN、-OR⁴、-NR⁵R^5’、-C(＝O)NR⁵R^5’、-S(＝O)₂-NR⁵R^5’、-S(＝O)₂-C_1-4烷基、R¹⁴、CF₃、任选地被-CN取代的C_3-5环烷基、和任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个或两个取代基取代的C_1-4烷基：氟、-CN、-OR⁶、-NR⁷R^7’、-S(＝O)₂-C_1-4烷基和-C(＝O)NR⁸R^8’；

Het¹是选自由以下组成的组的单环杂芳基：吡啶基，2-、4-、5-或6-嘧啶基，吡嗪基，哒嗪基，呋喃基，噻吩基，吡咯基，吡唑基，咪唑基，4-或5-噻唑基，异噻唑基，和异噁唑基；其各自可以任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代：卤代、-CN、-OR⁴、-NR⁵R^5’、-C(＝O)NR⁵R^5’和任选地被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-4烷基：氟、-CN、-OR⁶、Het²、-NR⁷R^7’和-C(＝O)NR⁸R^8’；并且

其中

Het³选自由以下组成的组：式(b-1)和(b-2)：

环B是苯基；

X¹代表CH₂、O或NH；

X²代表NH或O；

X³代表NH或O；

X⁴代表CH或N；

X⁵代表CH或N；

其中在(b-1)或(b-2)的5元环中的一个C原子或一个N原子，包括在X¹、X²、X³、X⁴和X⁵的定义中的适合的C原子和N原子，可以被一个或当可能时被两个C_1-4烷基基团取代，所述基团任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代：卤代、氰基和-C(＝O)NR⁵R^5’；

n1、n2和m1各自独立地选自1和2；

m2是0或1；

及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

R¹选自由以下组成的组：CH₃、CH₂F、CHF₂和CF₃；

Y¹是N或CR^y；

当Y¹代表N时，R²选自由以下组成的组：氢、CH₃、

-OCH₃、-NH₂和-NH-CH₃；

当Y¹代表CR^y时，R²是氢；

Y²是CH₂或O；

A是共价键或-CR^15aR^15b-；

R^15a和R^15b各自独立地选自由以下组成的组：氢或C_1-4烷基；

Q是氢或任选地被苯基取代的C_1-4烷基；

--L-R³选自(a)、(b)、(c)、(d)、(e)或(f)：

(a)--L-R³是-NR^AR^1A，其中

或

R^B选自由以下组成的组：氢；环丙基；任选地被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-4烷基：氟和-CN；和被选自由以下组成的组的取代基取代的C_2-4烷基：-OR^1b和-NR^2bR^2bb；其中

R^1B选自由以下组成的组：氢；卤代；C_3-6环烷基；

或

(d)L选自-N(R^D)-CR^1DR^1DD-和-N(R^D)-CR^1DR^1DD-CR^2DR^2DD-；其中

R³选自由以下组成的组：

其中

R^3D、R^4D和R^5D各自独立地选自由以下组成的组：

任选地被-OH、-OC_1-6烷基或-NH₂取代基取代的C_1-6烷基；

或

(e)--L-R³是

其中

R^E选自由以下组成的组：氢和C_1-4烷基；

R^1E选自由以下组成的组：氢、氟和C_1-4烷基；并且

或

(f)--L-R³是基团

Ar是任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代的苯基：卤代、-CN、-OR⁴、-NR⁵R^5’、-C(＝O)NR⁵R^5’、-S(＝O)₂-NR⁵R^5’、R¹⁴、CF₃和任选地被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-4烷基：氟、-CN、-OR⁶、-NR⁷R^7’和-C(＝O)NR⁸R^8’；

Het¹是选自由以下组成的组的单环杂芳基：吡啶基，4-、5-或6-嘧啶基，吡嗪基，哒嗪基，呋喃基，噻吩基，吡咯基，吡唑基，咪唑基，4-或5-噻唑基，异噻唑基，和异噁唑基；其各自可以任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代：卤代、-CN、-OR⁴、-NR⁵R⁵'和任选地被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-4烷基：氟、-CN、-OR⁶、Het²、-NR⁷R^7’和-C(＝O)NR⁸R^8’；并且

其中

R⁴、R⁵、R⁵'、R⁶、R⁷、R⁷'、R⁸和R⁸'各自独立地选自由以下组成的组：氢；-S(＝O)₂-C_1-4烷基；任选地被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-4烷基：氟、-C(＝O)-C_1-4烷基、-S(＝O)₂-C_1-4烷基、R^11”和-C(＝O)NR⁹R^9’；和被选自由以下组成的组的取代基取代的C_2-4烷基：-OR¹⁰和-NR¹¹R^11'；其中

R⁹、R^9’、R¹⁰、R¹¹、R^11’和R^11”各自独立地选自由以下组成的组：氢；C_1-4烷基；和含有至少一个氮、氧或硫原子的C-连接的4元至7元非芳香族杂环基；

Het³选自由以下组成的组：式(b-1)和(b-2)：

环B是苯基；

X¹代表CH₂、O或NH；

X²代表NH或O；

X³代表NH或O；

X⁴代表CH或N；

X⁵代表CH或N；

其中在(b-1)或(b-2)的5元环中的一个C原子或一个N原子，包括在X¹、X²、X³、X⁴和X⁵的定义中的适合的C原子和N原子，可以被一个或当可能时被两个C_1-4烷基基团取代，所述基团任选地被一个、两个或三个卤素原子取代；

n1、n2和m1各自独立地选自1和2；

m2是0或1；

及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

R¹选自由以下组成的组：CH₃、CH₂F、CHF₂和CF₃；

Y¹是N或CR^y；

当Y¹代表CR^y时，R²是氢；

Y²是CH₂或O；

A是共价键；

Q是氢或任选地被苯基取代的C_1-4烷基；

--L-R³选自(a)、(b)、(c)、(d)、(e)或(f)：

(a)--L-R³是-NR^AR^1A，其中

或

R^1B选自由以下组成的组：氢；卤代；C_3-6环烷基；

或

R^5C和R^13C各自独立地选自由以下组成的组：氢；Ar；Het¹；Het²；Het³；7元至10元饱和螺碳二环系统；并且

任选地被-NR^2cR^2cc、Ar、Het¹或Het²取代的C_1-4烷基；其中

或

(d)L选自-N(R^D)-CR^1DR^1DD-和-N(R^D)-CR^1DR^1DD-CR^2DR^2DD-；其中

R³选自由以下组成的组：

其中

R^3D、R^4D和R^5D各自独立地选自由以下组成的组：

任选地被-OH、-OC_1-6烷基或-NH₂取代基取代的C_1-6烷基；

或

(e)--L-R³是

其中

R^E选自由以下组成的组：氢和C_1-4烷基；

R^1E选自由以下组成的组：氢、氟和C_1-4烷基；并且

或

(f)--L-R³是基团

Het¹是选自由以下组成的组的单环杂芳基：吡啶基，4-、5-或6-嘧啶基，吡嗪基，哒嗪基，呋喃基，噻吩基，吡咯基，吡唑基，咪唑基，4-或5-噻唑基，异噻唑基，和异噁唑基；其各自可以任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代：卤代、-CN、-OR⁴、-NR⁵R^5'和任选地被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-4烷基：氟、-CN、-OR⁶、Het²、-NR⁷R^7’和-C(＝O)NR⁸R^8’；并且

其中

R⁴、R⁵、R^5'、R⁶、R⁷、R^7'、R⁸和R^8'各自独立地选自由以下组成的组：氢；-S(＝O)₂-C_1-4烷基；任选地被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-4烷基：氟、-C(＝O)-C_1-4烷基、-S(＝O)₂-C_1-4烷基、R^11”和-C(＝O)NR⁹R^9’；和被选自由以下组成的组的取代基取代的C_2-4烷基：-OR¹⁰和-NR¹¹R^11'；其中

Het³选自由以下组成的组：式(b-1)和(b-2)：

环B是苯基；

X¹代表CH₂、O或NH；

X²代表NH或O；

X³代表NH或O；

X⁴代表CH或N；

X⁵代表CH或N；

n1、n2和m1各自独立地选自1和2；

m2是0或1；

及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

R¹选自由以下组成的组：CH₃、CH₂F、CHF₂和CF₃；

Y¹是N或CR^y；

当Y¹代表CR^y时，R²是氢；

Y²是CH₂或O；

A是-CR^15aR^15b-；

R^15a和R^15b各自独立地选自由以下组成的组：氢或C_1-4烷基；特别地，R^15a和R^15b是氢；

Q是氢或任选地被苯基取代的C_1-4烷基；

--L-R³选自(a)、(b)、(c)、(d)、(e)或(f)：

(a)--L-R³是-NR^AR^1A，其中

或

(b)L选自由以下组成的组：-N(R^B)-、-N(R^B)-CR^1BR^1BB-和-(NR^B)-CHR^1B-CHR^2B-；并且R³选自由以下组成的组：Ar；Het¹；Het²；Het³；和7元至10元饱和螺碳二环系统；其中

R^1B选自由以下组成的组：氢；卤代；C_3-6环烷基；

或

R^5C和R^13C各自独立地选自由以下组成的组：氢；Ar；Het¹；Het²；Het³；7元至10元饱和螺碳二环系统；和

任选地被-NR^2cR^2cc、Ar、Het¹或Het²取代的C_1-4烷基；其中

或

(d)L选自-N(R^D)-CR^1DR^1DD-和-N(R^D)-CR^1DR^1DD-CR^2DR^2DD-；其中

R³选自由以下组成的组：

其中

R^3D、R^4D和R^5D各自独立地选自由以下组成的组：

任选地被-OH、-OC_1-6烷基或-NH₂取代基取代的C_1-6烷基；

或

(e)--L-R³是

其中

R^E选自由以下组成的组：氢和C_1-4烷基；

R^1E选自由以下组成的组：氢、氟和C_1-4烷基；并且

或

(f)--L-R³是基团

其中

Het³选自由以下组成的组：式(b-1)和(b-2)：

环B是苯基；

X¹代表CH₂、O或NH；

X²代表NH或O；

X³代表NH或O；

X⁴代表CH或N；

X⁵代表CH或N；

n1、n2和m1各自独立地选自1和2；

m2是0或1；

及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

R¹是CF₃；

Y¹是N；

R²选自由以下组成的组：氢、CH₃和-NH₂；

Y²是CH₂；

A是共价键或-CR^15aR^15b-；

R^15a和R^15b是氢；

Q是氢；

--L-R³选自(a)、(b)、(c)：

(a)--L-R³是-NR^AR^1A，其中

R^A是氢；

R^1A是C_1-6烷基；

或

(b)L选自由以下组成的组：-N(R^B)-和-N(R^B)-CR^1BR^1BB-；并且

R³选自由以下组成的组：Ar；Het¹；和Het³；其中

R^B是氢；

R^1B选自由以下组成的组：氢和C_1-4烷基；并且

R^1BB选自由以下组成的组：氢和甲基；

或R^1B和R^1BB连同它们所附接的碳一起形成C_3-6环烷基；

或

R^C选自由以下组成的组：氢和C_1-4烷基；

R^5C和R^13C各自独立地选自由以下组成的组：Ar；Het³；和任选地被Het²取代的C_1-4烷基；

Ar是任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代的苯基：卤代、-CN、-NR⁵R^5’、-C(＝O)NR⁵R^5’、R¹⁴、CF₃和任选地被-CN取代基取代的C_1-4烷基；

Het¹是任选的被一个、两个或三个C_1-4烷基取代基取代的吡唑基；并且

Het²是非芳香族杂环基；

其中

R⁵和R^5’各自独立地选自由以下组成的组：氢；-S(＝O)₂-C_1-4烷基；和C_1-4烷基；

R¹⁴是吡唑基，特别是经由C-原子附接至分子的剩余部分的吡唑基；

Het³选自由以下组成的组：式(b-1)和(b-2)：

环B是苯基；

X¹代表O或NH；

X²代表NH；

X³代表NH或O；

X⁴代表CH或N；

X⁵代表CH或N；

n1、n2和m1各自独立地选自1和2；

m2是0或1；

及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

R¹是CF₃；

Y¹是N；

R²是氢；

Y²是CH₂；

A是共价键或-CR^15aR^15b-；

R^15a和R^15b是氢；

Q是氢；

--L-R³选自(a)、(b)、(c)：

(a)--L-R³是-NR^AR^1A，其中

R^A是氢；

R^1A是C_1-6烷基；

或

(b)L选自由以下组成的组：-N(R^B)-和-N(R^B)-CR^1BR^1BB-；并且

R³选自由以下组成的组：Ar；Het¹；和Het³；其中

R^B是氢；

R^1B是氢；并且

R^1BB选自由以下组成的组：氢和甲基；

或

R^C选自由以下组成的组：氢和C_1-4烷基；

Het²是非芳香族杂环基；

其中

Het³选自由以下组成的组：式(b-1)和(b-2)：

环B是苯基；

X¹代表O或NH；

X²代表NH；

X³代表NH；

X⁴代表N；

X⁵代表CH；

n1、n2和m1各自独立地选自1和2；

m2是0或1；

及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

R¹是CF₃；

Y¹是N；

R²是氢；

Y²是CH₂；

A是共价键；

Q是氢；

--L-R³是(b)：

(b)L选自由以下组成的组：-N(R^B)-和-N(R^B)-CR^1BR^1BB-；并且

R³选自由以下组成的组：Ar和Het³；其中

R^B是氢；

R^1B是氢；并且

R^1BB是氢；

Ar是任选地被C_1-4烷基取代的苯基，所述C_1-4烷基任选地被-CN取代基取代；

Het³是(b-1)：

环B是苯基；

X¹代表O；

X²代表NH；

n1是1；

n2和m1各自独立地选自1和2；

m2是0或1；

及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

R¹是CF₃；

Y¹是CR^y；

R²选自由以下组成的组：氢、-OCH₃和-NH-CH₃；

R^y是氢；

Y²是CH₂；

A是共价键；

Q是氢；

--L-R³是(b)：

(b)L选自由以下组成的组：-N(R^B)-和-N(R^B)-CR^1BR^1BB-；

并且R³选自由以下组成的组：Ar；Het¹；和Het³；其中

R^B是氢；

R^1B是氢；并且

R^1BB是氢；

Ar是任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代的苯基：卤代、-OR⁴、-C(＝O)NR⁵R^5'、Het⁴、-O-Het⁴、-NR⁵-Het⁴和任选地被一个或两个-CN取代基取代的C_1-4烷基；

Het¹是吡啶基，其可以任选地被一个、两个或三个-C(＝O)NR⁵R^5’取代基取代；

其中

R⁴、R⁵和R^5’各自独立地选自由以下组成的组：氢；被R¹⁶取代基取代的C_1-4烷基；和被选自由以下组成的组的取代基取代的C_2-4烷基：-OR¹⁰和-NR¹¹R^11'；其中

Het³选自由以下组成的组：式(b-1)：

环B是苯基；

X¹代表O或NH；

X²代表NH；

其中在(b-1)的5元环中的一个C原子或一个N原子，包括在X¹和X²的定义中的适合的C原子和N原子，可以被一个或当可能时被两个C_1-4烷基基团取代，所述基团任选地被一个、两个或三个氰基取代基取代；

n1、n2和m1各自独立地选自1和2；

m2是0或1；

及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

本发明的另一个实施例涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中

R¹是CF₃；

R²是氢；

Y¹是N；

Y²是CH₂。

R¹是CF₃；

R²是氢；

Y¹是N。

本发明的另一个实施例涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中A是共价键。

本发明的另一个实施例涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中A是-CR^15aR^15b-。

本发明的另一个实施例涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中A是-CR^15aR^15b-；R^15a和R^15b是氢。

本发明的另一个实施例涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中R^15a和R^15b是氢。

在一个实施例中，本发明涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中--L-R³选自(a)、(b)、(c)、(d)或(e)。

在一个实施例中，本发明涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中--L-R³是(a)。

在一个实施例中，本发明涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中--L-R³是(b)。

在一个实施例中，本发明涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中--L-R³是(c)。

在一个实施例中，本发明涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中--L-R³是(d)。

在一个实施例中，本发明涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中--L-R³是(e)。

在一个实施例中，本发明涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中--L-R³是(f)。

在一个实施例中，本发明涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中--L-R³是(b)；

R³选自由以下组成的组：Ar；Het³；R¹⁷；和7元至10元饱和螺碳二环系统；

Ar是任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代的苯基：卤代、-CN、-OR⁴、-NR⁵R^5’、-C(＝O)NR⁵R^5’、Het⁴、-O-Het⁴、-NR⁵-Het⁴、-C(＝O)-Het⁴、-S(＝O)₂-Het⁴、-S(＝O)₂-NR⁵R^5’、-S(＝O)₂-C_1-4烷基、R¹⁴、CF₃和任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个或两个取代基取代的C_1-4烷基：氟、-CN、-OR⁶、-NR⁷R^7’、-S(＝O)₂-C_1-4烷基和-C(＝O)NR⁸R^8’；

R⁴、R⁵、R^5'、R⁶、R⁷、R^7'、R⁸和R^8'各自独立地选自由以下组成的组：氢；-C(＝O)-C_1-4烷基；-S(＝O)₂-C_1-4烷基；任选地被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-4烷基：氟、-C(＝O)-C_1-4烷基、-S(＝O)₂-C_1-4烷基、R^11”和-C(＝O)NR⁹R^9’；和被选自由以下组成的组的取代基取代的C_2-4烷基：-OR¹⁰、-NR¹¹R^11’和R¹⁶；

其中

R⁹、R^9’、R¹⁰、R¹¹、R^11’和R^11”各自独立地选自由以下组成的组：氢；C_1-4烷基；和-S(＝O)₂-C_1-4烷基；

Het³选自由以下组成的组：式(b-1)：

环B是苯基；

X¹代表O或NH；

X²代表NH；

其中在(b-1)或(b-2)的5元环中的一个N原子，包括在X¹和X²的定义中的适合的N原子，可以被一个或在可能的情况下两个C_1-4烷基基团取代；

R¹⁷是任选地被选自由以下组成的组的一个或多个取代基取代的C_3-6环烷基：卤代、-CN、-OR⁴、-NR⁵R^5’、-C(＝O)NR⁵R^5’和任选地被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-4烷基：氟、CN、-OR⁶、-NR⁷R^7’和-C(＝O)NR⁸R^8’。

其中

Het³选自由以下组成的组：式(b-1)：

环B是苯基；

X¹代表O或NH；

X²代表NH；

R¹⁷是任选地被选自由以下组成的组的一个或多个取代基取代的C_3-6环烷基：卤代、-CN、-OR⁴、-NR⁵R^5’、-C(＝O)NR⁵R^5’和任选地被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-4烷基：氟、-CN、-OR⁶、-NR⁷R^7’和-C(＝O)NR⁸R^8’。

R³选自由以下组成的组：Ar；和7元至10元饱和螺碳二环系统。

R³是Ar。

R³是Ar；

Ar是任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代的苯基：卤代、-CN、-OR⁴、-NR⁵R^5’、-C(＝O)NR⁵R^5’、-S(＝O)₂-NR⁵R^5’、-S(＝O)₂-C_1-4烷基、CF₃和任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个或两个取代基取代的C_1-4烷基：氟、-CN、-OR⁶、-NR⁷R^7’、-S(＝O)₂-C_1-4烷基和-C(＝O)NR⁸R^8’。

R³是Ar；

Ar是任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代的苯基：卤代、-CN、-OR⁴、-NR⁵R^5’、-C(＝O)NR⁵R^5’、-S(＝O)₂-NR⁵R^5’、-S(＝O)₂-C_1-4烷基、CF₃和任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个或两个取代基取代的C_1-4烷基：氟、-CN、-OR⁶、-NR⁷R^7’、-S(＝O)₂-C_1-4烷基和-C(＝O)NR⁸R^8’；

R⁴、R⁵、R^5'、R⁶、R⁷、R^7'、R⁸和R^8'各自独立地选自由以下组成的组：氢；-C(＝O)-C_1-4烷基；-S(＝O)₂-C_1-4烷基；任选地被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-4烷基：氟、-C(＝O)-C_1-4烷基、-S(＝O)₂-C_1-4烷基、R^11”和-C(＝O)NR⁹R^9’；和被选自由以下组成的组的取代基取代的C_2-4烷基：-OR¹⁰和-NR¹¹R^11'；其中

R⁹、R^9’、R¹⁰、R¹¹、R^11’和R^11”各自独立地选自由以下组成的组：氢；C_1-4烷基；和-S(＝O)₂-C_1-4烷基。

在一个实施例中，本发明涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中n1是2，n2是1，m1是1，且m2是0。

在一个实施例中，本发明涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中n1是1，n2是1，m1是1，且m2是1。

在一个实施例中，本发明涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中Het²是吗啉基，特别是1-吗啉基。

在一个实施例中，本发明涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中Het²是吗啉基，特别是1-吗啉基；

如在任何其他实施例中所定义的任选地被取代。

在一个实施例中，本发明涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中Het²是单环非芳香族杂环基。

在一个实施例中，本发明涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中Het²是如在任何其他实施例中所定义的任选地被取代的单环非芳香族杂环基。

在一个实施例中，本发明涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中Het²是二环非芳香族杂环基。

在一个实施例中，本发明涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中Het²是如在任何其他实施例中所定义的任选地被取代的二环非芳香族杂环基。

在一个实施例中，本发明涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中Het³选自

其中X¹、X²、X³、X⁴和X⁵是如在任何其他实施例中所定义的，并且其可以如在任何其他实施例中所定义的被取代。

X¹代表CH₂、O或NH；

X²代表NH或O；

X³代表NH或O；

X⁴代表CH或N；

X⁵代表CH或N；

其中在5元环中的一个C原子或一个N原子，包括在X¹、X²、X³、X⁴和X⁵的定义中的适合的C原子和N原子，可以被一个或当可能时被两个C_1-4烷基基团取代，所述基团任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代：卤代、氰基、-C(＝O)NR⁵R^5’和Het⁴。

其中X¹和X²是如在任何其他实施例中所定义的，并且其可以如在任何其他实施例中所定义的被取代。

X¹代表CH₂、O或NH；

X²代表NH或O；

其中在5元环中的一个C原子或一个N原子，包括在X¹和X²的定义中的适合的C原子和N原子，可以被一个或当可能时被两个C_1-4烷基基团取代，所述基团任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代：卤代、氰基、-C(＝O)NR⁵R^5’和Het⁴。

其中X³、X⁴和X⁵是如在任何其他实施例中所定义的，并且其可以如在任何其他实施例中所定义的被取代。

X³代表NH或O；

X⁴代表CH或N；

X⁵代表CH或N；

其中在5元环中的一个C原子或一个N原子，包括在X³、X⁴和X⁵的定义中的适合的C原子和N原子，可以被一个或当可能时被两个C_1-4烷基基团取代，所述基团任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代：卤代、氰基、-C(＝O)NR⁵R^5’和Het⁴。

在一个实施例中，本发明涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中Het⁴总是被取代。

在一个实施例中，本发明涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中Het⁴是含有至少一个氮、氧或硫原子的4元至7元非芳香族杂环基，其中所述杂环基被一个、两个或三个C_1-4烷基取代基取代。

在一个实施例中，本发明涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中Het⁴是吗啉基、咪唑烷基、哌啶基、吗啉基或噁唑烷基；特别是1-吗啉基、1-咪唑烷基、1-哌啶基、1-吗啉基或3-噁唑烷基。

在一个实施例中，本发明涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中Het⁴是吗啉基、咪唑烷基、哌啶基、吗啉基或噁唑烷基；特别是1-吗啉基、1-咪唑烷基、1-哌啶基、1-吗啉基或3-噁唑烷基；其各自可以如在任何其他实施例中所定义的任选地被取代。

在一个实施例中，本发明涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中Het⁴是吗啉基、咪唑烷基、哌啶基、吗啉基或噁唑烷基；特别是1-吗啉基、1-咪唑烷基、1-哌啶基、1-吗啉基或3-噁唑烷基；

其各自被一个、两个或三个各自独立地选自由以下组成的组的取代基取代：卤代、-CN、氧代、-C(＝O)NR⁵R^5’、-O-C_1-4烷基、-S(＝O)₂-C_1-4烷基和任选地被-O-C_1-4烷基取代的C_1-4烷基。

在一个实施例中，本发明涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中

Het¹是选自由以下组成的组的单环杂芳基：吡啶基，2-、4-、5-或6-嘧啶基，吡嗪基，哒嗪基，呋喃基，噻吩基，吡咯基，吡唑基，咪唑基，4-或5-噻唑基，异噻唑基，和异噁唑基；其各自可以任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代：卤代、-CN、-OR⁴、-NR⁵R^5’、-C(＝O)NR⁵R^5’和任选地被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-4烷基：氟、-CN、-OR⁶、Het²、-NR⁷R^7’和-C(＝O)NR⁸R^8’。

在一个实施例中，本发明涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中Q是氢。

当A是-CR^15aR^15b-时，Q是氢；

当A是共价键时，Q是氢或任选地被苯基取代的C_1-4烷基。

Het¹是选自由以下组成的组的单环杂芳基：吡啶基，2-、4-、5-或6-嘧啶基，吡嗪基，哒嗪基，呋喃基，噻吩基，吡咯基，吡唑基，咪唑基，4-或5-噻唑基，异噻唑基，和异噁唑基；其各自可以任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代：卤代、-CN、-OR⁴、-NR⁵R^5’、-C(＝O)NR⁵R^5’、-C(＝O)-Het⁴和任选地被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-4烷基：氟、-CN、-OR⁶、Het^2a、-NR⁷R^7’和-C(＝O)NR⁸R^8’；并且

Het²是任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代的非芳香族杂环基：卤代、-CN、-C(＝O)-C_1-6烷基、-C(＝O)Ar、-C(＝O)Het^1a、-C(＝O)Het^2a、-OR⁴、-NR⁵R^5’和任选地被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-4烷基：氟、-CN、-OR⁶、-NR⁷R^7’、R¹²和-C(＝O)NR⁸R^8’；

Het^1a是选自由以下组成的组的单环杂芳基：吡啶基，2-、4-、5-或6-嘧啶基，吡嗪基，哒嗪基，呋喃基，噻吩基，吡咯基，吡唑基，咪唑基，4-或5-噻唑基，异噻唑基和异噁唑基；

Het^2a是非芳香族杂环基。

Het¹是选自由以下组成的组的单环杂芳基：吡啶基，2-、4-、5-或6-嘧啶基，吡嗪基，哒嗪基，呋喃基，噻吩基，吡咯基，吡唑基，咪唑基，4-或5-噻唑基，异噻唑基，和异噁唑基；其各自可以任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代：卤代、-CN、-OR⁴、-NR⁵R^5’、-C(＝O)NR⁵R^5’、-C(＝O)-Het⁴和任选地被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-4烷基：氟、-CN、-OR⁶、-NR⁷R^7’和-C(＝O)NR⁸R^8’；并且

Het²是任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代的非芳香族杂环基：卤代、-CN、-C(＝O)-C_1-6烷基、-C(＝O)Ar、-OR⁴、-NR⁵R^5’和任选地被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-4烷基：氟、-CN、-OR⁶、-NR⁷R^7’、R¹²和-C(＝O)NR⁸R^8’。

当R^15a和R^15b是C_1-4烷基时，Q是氢。

在一个实施例中，本发明涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中当--L-R³是(b)时；R³选自由以下组成的组：Ar；Het¹；Het³；R¹⁷；和7元至10元饱和螺碳二环系统。

在一个实施例中，本发明涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中当--L-R³是(b)时；R³选自由以下组成的组：Ar；Het¹；Het²；Het³；和7元至10元饱和螺碳二环系统。

在一个实施例中，本发明涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中当--L-R³是(b)时；R³选自由以下组成的组：Ar；Het¹；Het³；和7元至10元饱和螺碳二环系统。

在一个实施例中，本发明涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中当--L-R³是(b)时；R³选自由以下组成的组：Ar；Het¹；Het²；R¹⁷；和7元至10元饱和螺碳二环系统。

在一个实施例中，本发明涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中当--L-R³是(b)时；R³选自由以下组成的组：Ar；Het¹；Het²；和7元至10元饱和螺碳二环系统。

在一个实施例中，本发明涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中--L-R³是(b)；并且R³选自由以下组成的组：Ar；Het¹；Het³；R¹⁷；和7元至10元饱和螺碳二环系统。

在一个实施例中，本发明涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中--L-R³是(b)；R³选自由以下组成的组：Ar；Het¹；Het²；Het³；和7元至10元饱和螺碳二环系统。

在一个实施例中，本发明涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中--L-R³是(b)；并且R³选自由以下组成的组：Ar；Het¹；Het³；和7元至10元饱和螺碳二环系统。

在一个实施例中，本发明涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中R¹⁴是含有至少一个氮原子、和任选地1个另外的杂原子(选自氮、氧和硫)的5元单环杂芳基。

X¹代表O或NH；

X²代表NH；

X³代表NH；

X⁴代表N；

X⁵代表CH。

X¹代表O或NH。

A是共价键；

--L-R³选自(a)、(b)或(c)。

A是-CR^15aR^15b-；

R^15a和R^15b各自独立地选自由以下组成的组：氢或C_1-4烷基；

--L-R³选自(a)、(b)或(c)。

在一个实施例中，本发明涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中A限于共价键，特此命名为具有式(I-x)的化合物：

其中所有变量均如针对如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的化合物或其任何子组进行定义。

在一个实施例中，本发明涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中A限于-CR^15aR^15b-，特此命名为具有式(I-xx)的化合物：

在一个实施例中，本发明涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中具有式(I)的化合物限于具有式(I-y)的化合物：

在一个实施例中，本发明涉及如在任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中具有式(I)的化合物限于具有式(I-z)的化合物：

在一个实施例中，具有式(I)的化合物选自由以下组成的组：示例性化合物中的任一者，

其互变异构体和立体异构形式，

及其游离碱、任何药学上可接受的加成盐以及溶剂化物。

以上表示的实施例的所有可能组合都视为包含在本发明的范围内。

用于制备具有式(I)的化合物的方法

在这一部分中，如在所有其他部分中，除非上下文另外指明，否则对式(I)的提及还包括如本文定义的所有其他的其子组和实例。

具有式(I)的化合物的一些典型实例的一般制备在下文以及在具体的实例中进行了描述，并且通常由可商购的或通过本领域的技术人员常用的标准合成方法制备的起始材料制备。以下方案仅意在代表本发明的实例并且决不意在限制本发明。

可替代地，还可以通过将如在下面的通用方案中描述的类似反应方案与有机化学领域的技术人员常用的标准合成方法组合来制备本发明的化合物。

技术人员将认识到，在方案中描述的反应中，尽管并不总是明确地显示，但是保护在终产物中所希望的反应性官能团(例如羟基、氨基、或羧基基团)可能是必要的，以避免它们参与所不希望的反应。例如在方案1中，在中间体(III)上的NH部分可以用叔丁氧基羰基保护基团进行保护。通常，可根据标准实践使用常规保护基团。可使用本领域已知的方法在方便的后续阶段除去保护基团。这在具体的实例中进行说明。

技术人员将认识到，在方案中描述的反应中，在惰性气氛下(例如像在N₂气氛下)进行反应或许是可取的或必要的。

技术人员将清楚的是，在反应处理(指的是分离和纯化化学反应的一种或多种产物所必须的一系列操作，例如像淬灭、柱色谱法、萃取)前，冷却反应混合物可能是必要的。

技术人员将认识到，在搅拌下加热所述反应混合物可增加反应产出。在一些反应中，可使用微波加热替换常规的加热以缩短整个反应时间。

技术人员将认识到，在以下方案中示出的化学反应的另一种顺序也可以产生所希望的具有式(I)的化合物。

技术人员将认识到，在以下方案中示出的中间体和最终化合物可以根据本领域的技术人员熟知的方法进一步功能化。本文描述的中间体和化合物可以按游离形式或呈盐形式进行分离。

方案1-16特别涉及化合物/中间体(其中变量‘A’是共价键)。

方案1

通常，具有式(I)的化合物(其中R²限于H或Me(甲基)并且Y¹限于N和C-CN，其中R^1A’选自由以下组成的组：任选地被一个、两个或三个氟取代基取代的C_0-5烷基；和被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-5烷基：-OR^1a和-NR^2aR^2aa，并且其中所有其他变量均根据本发明的范围进行定义，特此命名为具有式(I-a)的化合物)可以根据以下反应方案1制备。在方案1中，LG¹和LG²各自代表适合的离去基团，例如像卤代(适合的卤素)或甲磺酰基；PG¹代表适合的保护基团，例如像叔丁氧基羰基；R^1A-PG²代表如在式(I)中所定义的具有适当的保护基团的R^1A，例如像叔丁氧基羰基，方案1中的所有其他变量均根据本发明的范围进行定义。

在方案1中，以下反应条件适用：

1：在适合的温度(如在从室温至90℃的范围内)下，在适合的碱(例如像二异丙基乙胺或三乙胺)的存在下，在适合的溶剂(例如像乙腈或异丙醇或乙醇(EtOH)或二氯甲烷(DCM))中；

2：当PG¹是叔丁氧羰基时，在适合的温度范围(例如像从0℃至室温)下，在适合的裂解条件(例如像酸，如HCl或三氟乙酸)的存在下，在适合的溶剂(如乙腈或DCM或甲醇(MeOH))中；

可替代地，在适合的温度(例如像室温)下在适合的溶剂(如乙酸)中；

3：在适合的温度(例如像室温或90℃)下，在适合的碱(例如像碳酸钾或1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯)的存在下，在适合的溶剂(例如像乙腈或二甲亚砜(DMSO))中；

4：在适合的温度(例如像室温或90℃)下，在适合的碱(例如像碳酸钾或1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯)的存在下，在适合的溶剂(例如像乙腈或DMSO)中；

5：在适合的反应温度范围(例如像从0℃至室温)下，在适合的裂解条件(例如像酸，如HCl或三氟乳酸)的存在下，在适合的溶剂(如乙腈或DCM)中，当PG²是叔丁氧基羰基时。

6：在适合的温度(例如室温)下，在适合的还原剂(例如像三乙酰氧基硼氢化钠(NaBH(OAc)₃)、癸硼烷或硼氢化钠)的存在下，在适合的溶剂(如DCM、DCE、甲醇或四氢吡喃)中，有或没有适合的酸(例如像乙酸)；

8：在适合的温度(例如像在90℃下)下，在适合的碱(例如像二异丙基乙胺或三乙胺)的存在下，在适合的溶剂(例如像乙腈或异丙醇或DCM)中。在步骤8中，具有式(XI)的试剂是可商购的，通过技术人员已知的方法从可商购的起始材料根据方案3进行制备，例如通过适当的保护/脱保护步骤和官能团互换，从起始材料(如2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸、8-氨基-,1,1-二甲基乙基酯(CAS[1363381-61-6]))。

方案2

具有式(II)的中间体(其中R²是甲基并且Y¹是N，特此命名为具有式(XIII)的中间体)可以根据以下反应方案2制备，其中LG¹代表适合的离去基团(例如像卤代或甲磺酰基)。方案2中的所有其他变量均根据本发明的范围进行定义。

在方案2中，以下反应条件适用：

1：在适合的温度(例如像在回流温度下)下，在乙酸酐和适合的碱(例如像三甲胺)的存在下，在适合的溶剂(例如像甲苯)中；

2：在适合的温度(例如像在回流温度下)下，在适合的碱(如氢氧化钾)的存在下，在适合的溶剂(例如像EtOH)中；

3：在适合的反应条件下以形成离去基团(例如像氯)，例如通过在适合的温度(如110℃)下用三氯磷酰进行反应。

方案3

具有式(III)和(XI)的中间体(其中PG³是适合的保护基团，正交于PG¹，例如像苯甲氧基羰基)可以根据以下反应方案3制备。在方案3中所有的其他变量均如上或根据本发明的范围进行定义。

在方案3中，以下反应条件适用：

1：在适合的温度(例如80℃)下，在适合的溶剂(如EtOH或四氢呋喃(THF))中；

2：在Q与氢不同的情况下，在适合的温度(例如像0℃)下，在适合的有机锂(Q-Li)或格氏(Q-Mg-卤代)试剂(可商购的或可以通过技术人员已知的方法制备)的存在下，在适合的溶剂(例如像THF)中；

可替代地，在Q是氢的情况下，在适合的温度(例如像室温)下，在适合的还原剂(例如像三乙酰氧基硼氢化钠)的存在下，在适合的溶剂(例如像THF或MeOH)中；

在Q是氢的情况下，步骤1和2可以在相同的时间点进行；

3a：在适合的温度(例如室温)下，在适合的还原剂(例如像三乙酰氧基硼氢化钠(NaBH(OAc)₃)、癸硼烷或硼氢化钠)的存在下，在适合的溶剂(如DCM、DCE、甲醇或四氢吡喃)中，有或没有适合的酸(例如像乙酸)；

3：在适合的温度(如室温)下，在适合的碱(例如像二异丙胺)的存在下，在适合的溶剂(如DCM)中；

4：在适合的温度(例如像室温)下，在适合的催化剂(例如像钯碳(Pd/C))的存在下，在适合的氢气氛的存在下，在适合的溶剂(例如像EtOH或EtOH和THF的混合物)中；

方案4

可替代地，当Q限于氢时，具有式(III)和(XI)的中间体(特此命名为具有式(IIIa)和(XIa)的中间体)还可以根据方案4来制备。

在方案4中，以下反应条件适用：

1：在适合的温度(例如室温)下，在适合的还原剂(例如像三乙酰氧基硼氢化钠(NaBH(OAc)₃)、癸硼烷或硼氢化钠)的存在下，在适合的溶剂(例如像DCM、DCE、甲醇或四氢吡喃)中，有或没有适合的酸(例如像乙酸)；

2：在适合的温度(如室温)下，在适合的碱(例如像二异丙胺)的存在下，在适合的溶剂(如DCM)中；

3：在适合的温度(例如像室温)下，在适合的催化剂(例如像Pd/C)的存在下，在适合的氢气氛下的存在下，在适合的溶剂(例如像EtOH或EtOH和THF的混合物)中；

方案5

具有式(II)的中间体(其中R²是H，并且Y¹是C-CN，特此命名为具有式(XXVIII)的中间体)可以根据以下反应方案5制备。

在方案5中，以下反应条件适用：

1：在适合的温度(例如像135℃)下；

2：在适合的温度(例如像40℃)下，在适合的碱(例如像氢氧化锂)的存在下，在适合的溶剂(例如像THF和水的混合物)中；

3：在适合的温度(例如像135％)下，在适合的酸(如多磷酸(PPA))中；

4：在适合的温度(例如像40℃)下，在适合的碱(例如像氢氧化钠)的存在下，在适合的溶剂(例如像MeOH和水的混合物)中；

5：a)在适合的温度(例如像70℃)下，在适合的氯化试剂(例如像草酰氯)、催化量的二甲基甲酰胺的存在下，在适合的溶剂(例如像氯仿)中；

b)在适合的温度(例如像25℃)下，在氨草胶的存在下，在适合的溶剂(例如像DCM)中；

6：在适合的温度(例如像0℃)下，在适合的试剂(例如像三氟乙酸酐)、适合的碱(例如像三乙胺)的存在下，在适合的溶剂(例如像DCM)中；

方案6

通常，具有式(I)的化合物(其中R²限于H或Me并且Y¹限于N和C-CN，其中R^1A’选自由以下组成的组：任选地被一个、两个或三个氟取代基取代的C_0-5烷基；和被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-5烷基：-OR^1a和-NR^2aR^2aa，并且其中所有其他变量均根据本发明的范围进行定义，特此命名为具有式(Ib)、(Ica)和(Icb)的化合物)可以根据以下反应方案1制备。在方案6中，LG²各自代表适合的离去基团，例如像卤代或甲磺酰基；PG¹代表适合的保护基团，例如像叔丁氧基羰基；方案1中的所有其他变量均根据本发明的范围进行定义。

在方案6中，以下反应条件适用：

1：在适合的温度(例如像70℃)下，在适合的氯化试剂(例如像草酰氯)、催化量的二甲基甲酰胺的存在下，在适合的溶剂(例如像氯仿)中；

2：在适合的温度(如在从室温至90℃的范围内)下，在适合的碱(例如像二异丙基乙胺或三乙胺)的存在下，在适合的溶剂(例如像乙腈或异丙醇或EtOH或DCM)中；

3：在适合的温度(例如像室温)下，在适合的酸(例如像三氟乙酸)的存在下，在适合的溶剂(例如DCM)中；

4：在适合的温度(例如室温)下，在适合的还原剂(例如像NaBH(OAc)₃、癸硼烷或硼氢化钠)的存在下，在适合的溶剂(如DCM、DCE、甲醇或四氢吡喃)中，有或没有适合的酸(例如像乙酸)；

5：在适合的温度(例如像-78℃)下，在适合的还原剂(例如像氢化二异丁基铝)存在下，在适合的溶剂(例如像DCM)中；

6：在适合的温度(例如像0℃)下，在适合的去质子化试剂(例如像氢化钠)的存在下，在适合的溶剂(例如像THF或二甲基甲酰胺)中；

方案7

通常，具有式(I)的化合物(其中R²限于H或Me并且Y¹限于N和C-CN，并且其中所有其他变量是根据本发明的范围所定义的，特此命名为具有式(Id)、(Ie)和(If)的化合物)可以根据以下反应方案7制备。在方案7中，LG²代表适合的离去基团，例如像卤代或甲磺酰基；

本领域技术人员将认识到中间体(Vc)可以遵循与用于制备中间体(V)类似的路径制备并报告于方案1中。

在方案7中，以下反应条件适用：

1：在适合的温度(例如室温)下，在适合的还原剂(例如像NaBH(OAc)₃、癸硼烷或硼氢化钠)的存在下，在适合的溶剂(如DCM、DCE、甲醇或四氢吡喃)中，有或没有适合的酸(例如像乙酸)；

或可替代地并依次地

a)在适合的温度(例如像室温或45℃)下，在乙醇钛(IV)或异丙醇钛(IV)的存在下，在适合的溶剂(例如像四氢吡喃、DCE或DCE和MeOH的混合物)中；

b)在适合的温度(例如像室温)下，在适合的还原剂(例如像硼氢化钠、三乙酰氧基硼氢化钠或氰基硼氢化钠)的存在下，在适合的溶剂(例如像四氢吡喃、DCE或DCE和MeOH的混合物)中；

步骤a和b可以作为一锅法进行。

2：在适合的温度(例如像室温或90℃)下，在适合的碱(例如像碳酸钾或1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯)的存在下，在适合的溶剂(例如像乙腈或DMSO)中。

方案8

通常，具有式(I)的化合物(其中R²限于H或Me并且Y¹限于N和C-CN，Q限于氢，并且其中所有其他变量是根据本发明的范围所定义的，特此命名为具有式(Ih)和(Ii)的化合物)可以根据以下反应方案8制备。在方案8中，LG¹代表适合的离去基团，例如像卤代或甲磺酰基；

s

在方案8中，以下反应条件适用：

1：在适合的温度(如在从室温至90℃的范围内)下，在适合的碱(例如像二异丙基乙胺或三乙胺)的存在下，在适合的溶剂(例如像乙腈或异丙醇或EtOH或DCM)中；

2：在适合的温度(例如室温)下，在适合的还原剂(例如像NaBH(OAc)₃、癸硼烷或硼氢化钠)的存在下，在适合的溶剂(如DCM、DCE、甲醇或四氢吡喃)中，有或没有适合的酸，例如像乙酸；

或可替代地并依次地

步骤a和b可以作为一锅法进行。

方案9

通常，具有式(I)的化合物(其中R²限于H或Me，Y¹限于N和C-CN，R^3aa限于Ar；Het¹或Het³，R^3b限于Het²并且R¹⁷和R^3c限于Het¹，特此命名为具有式(Ij)、(Ik)和(Ika)的化合物)可以根据以下反应方案9制备。在方案9中，卤代代表适合的卤素原子(例如像氯、溴或碘)，卤代1代表适合的卤素原子(例如像氯或氟)并且所有其他变量均根据本发明的范围进行定义，

在方案9中，以下反应条件适用：

1：在微波辐射下，在适合的温度(例如像130℃)下，在适合的催化剂(例如像三(二亚苯基丙酮)二钯(0)，适合的配体(例如像2-(二环己基膦基)3,6-二甲氧基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯基)、适合的碱(例如像叔丁醇钠))的存在下，在适合的溶剂(例如像二噁烷)中；

2：在适合的温度(例如室温)下，在适合的还原剂(例如像NaBH(OAc)₃、癸硼烷或硼氢化钠)的存在下，在适合的溶剂(如DCM、DCE、甲醇或四氢吡喃)中，有或没有适合的酸(例如像乙酸)；

或可替代地并依次地

步骤a和b可以作为一锅法进行。

3：在适合的温度(例如像100℃)下，在适合的碱(例如像二异丙基乙胺)的存在下，在适合的溶剂(例如像异丙醇)中。

方案10

通常，具有式(I)的化合物(其中R²限于H或Me，Y¹限于N和C-CN，并且Q限于氢，特此命名为具有式(Im)的化合物)可以根据以下反应方案10制备。在方案10中，所有其他变量均是根据上述或根据本发明的范围进行定义，

在方案10中，以下反应条件适用：

或可替代地并依次地

步骤a和b可以作为一锅法进行。

2：在适合的温度范围(例如像从0℃至室温)下，在适合的裂解条件(例如像酸，如HCl或三氟乙酸)的存在下，在适合的溶剂(如乙腈或DCM或MeOH或乙酸乙酯)中；

3：在适合的温度(如在从室温至90℃的范围内)下，在适合的碱(例如像二异丙基乙胺或三乙胺)的存在下，在适合的溶剂(例如像乙腈或异丙醇或EtOH或DCM)中。

方案11

通常，具有式(I)的化合物(其中R²限于NH₂，并且Y¹限于N，特此命名为具有式(In)的化合物)可以根据以下反应方案11制备。在方案11中，所有其他变量均是根据上述或根据本发明的范围进行定义，

在方案11中，以下反应条件适用：

1：在微波辐射下，在适合的温度(例如像160℃)下，在适当的溶剂(例如像二甘醇二甲醚)中；

2：在适合的温度(例如像40℃)下，在适合的偶联剂(例如像(苯并三唑-1-基氧基)三(二甲基氨基)磷鎓六氟磷酸盐(BOP))、适合的碱(例如像1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯(DBU))的存在下，在适合的溶剂(例如像DMF)中；

3：当PG¹是叔丁氧羰基时，在适合的温度范围(例如像从0℃至室温)下，在适合的裂解条件(例如像酸，如HCl或三氟乙酸)的存在下，在适合的溶剂(如乙腈或DCM或MeOH)中；

4：在适合的温度(例如室温)下，在适合的还原剂(例如像NaBH(OAc)₃、或硼氢化钠)的存在下，在适合的溶剂(如DCM、DCE、或四氢吡喃)中，有或没有适合的酸，例如像乙酸。

方案12

通常，具有式(I)的化合物(其中R²限于NHMe，并且Y¹限于N，特此命名为具有式(Io)的化合物)可以根据以下反应方案12制备。在方案12中，所有其他变量均是根据上述或根据本发明的范围进行定义，

在方案12中，以下反应条件适用：

1：在适合的温度(范围从-60℃至180℃)下，在适合的试剂(例如像氯磺酰异氰酸酯或尿素)的存在下；

2：在适合的温度(如115℃)下，在适合的氯化试剂(例如像三氯磷酰)中；

3：在适合的温度(如在从室温至90℃的范围内)下，在适合的碱(例如像二异丙基乙胺或三乙胺)的存在下，在适合的溶剂(例如像乙腈或异丙醇或EtOH或DCM)中；

4：在或不在微波辐射下，在适合的温度(例如像100℃)下，在适合的溶剂(例如像THF或二甲基甲酰胺)中；

5：当PG¹是叔丁氧羰基时，在适合的温度范围(例如像从0℃至室温)下，在适合的裂解条件(例如像酸，如HCl或三氟乙酸)的存在下，在适合的溶剂(如乙腈或DCM或MeOH)中；

6：在适合的温度(例如室温)下，在适合的还原剂(例如像NaBH(OAc)₃、或硼氢化钠)的存在下，在适合的溶剂(如DCM、DCE、或四氢吡喃)中，有或没有适合的酸(例如像乙酸)；

方案13

通常，具有式(I)的化合物(其中R²限于OMe，并且Y¹限于N，其中R^1A’选自由以下组成的组：任选地被一个、两个或三个氟取代基取代的C_0-5烷基；和被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-5烷基：-OR^1a和-NR^2aR^2aa，特此命名为具有式(Ip)的化合物)可以根据以下反应方案13制备。在方案13中，所有其他变量均是根据上述或根据本发明的范围进行定义，

在方案13中，以下反应条件适用：

1：在适合的温度(例如像100℃或110℃)下，在适合的催化剂(例如像乙酸钯)、适合的配体(例如像2,2'-双(二苯基磷基)-1,1'-二萘基)、适合的碱(例如像碳酸铯)，在适合的溶剂(例如像甲苯)中；

2：当PG¹是叔丁氧羰基时，在适合的温度范围(例如像从0℃至室温)下，在适合的裂解条件(例如像酸，如HCl或三氟乙酸)的存在下，在适合的溶剂(如乙腈或DCM或MeOH)中；

3：在适合的温度(例如室温)下，在适合的还原剂(例如像NaBH(OAc)₃、或硼氢化钠)的存在下，在适合的溶剂(如DCM、DCE、或四氢吡喃)中，有或没有适合的酸，例如像乙酸。

方案14

通常，具有式(I)的化合物(其中R²限于H或Me，并且Y¹限于N和C-CN，并且其中R³限于

特此命名为具有式(Iq)的化合物)可以根据以下反应方案14制备。在方案14中，所有其他变量均是根据上述或根据本发明的范围进行定义。

本领域技术人员将认识到中间体(Va)可以遵循与用于制备中间体V类似的路径制备并报告于方案1中。

在方案14中，以下反应条件适用：

1：在适合的温度(例如像室温)下，在适合的酸偶联剂(例如像1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-苯并三唑鎓六氟磷酸盐(1-)3-氧化物(HBTU)或1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(HATU))的存在下，在适合的碱(例如像N-乙基-N-(1-甲基乙基)-2-丙胺(DIPEA))的存在下，在适当的溶剂(如N,N-二甲基甲酰胺(DMF))中；。

方案15

通常，具有式(I)的化合物(其中R²限于H或Me，并且Y¹限于N和C-CN，特此命名为具有式(Ir)的化合物)可以根据以下反应方案15制备。在方案15中，所有其他变量均是根据上述或根据本发明的范围进行定义，

在方案15中，以下反应条件适用：

1：在适合的温度(例如室温)下，在适合的碱(例如像碳酸钾或三乙胺)的存在下，在适合的溶剂(例如像乙腈或DCM)中。

本领域技术人员将认识到中间体(Vb)可以遵循与用于制备中间体V类似的路径制备并报告于方案1中。

方案16

通常，具有式(I)的化合物(其中R²限于H或Me，并且Y¹限于N和C-CN，特此命名为具有式(Is)的化合物)可以根据以下反应方案16制备。在方案16中，所有其他变量均是根据上述或根据本发明的范围进行定义。

在方案16中，以下反应条件适用：

1：在(LXa)的情况下，在适合的温度下，在适合的碱(例如像三乙胺)的存在下；在适合的溶剂(例如像DCM)中；

在(LXb)的情况下，在适合的温度(例如像室温)下，在适合的酸偶联剂(例如像1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-苯并三唑鎓六氟磷酸盐(1-)3-氧化物(HBTU)或1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(HATU)或N-(3-二甲基氨基丙基)-N'-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDCI))的存在下，任选地在适合的试剂(例如像1-羟基苯并三唑)的存在下，在适合的碱(例如像N-乙基-N-(1-甲基乙基)-2-丙胺(DIPEA)或三乙胺)的存在下，在适合的溶剂(如N,N-二甲基甲酰胺(DMF)或DCM)中。

本领域技术人员将认识到方案15和16中描绘的转化可以应用于其他中间体(例如像方案13中描绘的中间体(LVII))。

方案17-19特别涉及化合物/中间体(其中变量‘A’是-CR^15aR^15b-。

方案17

通常，具有式(I)的化合物(其中Q、R^15a和R^15b限于H，并且Y¹限于N和C-CN，特此命名为具有式(It)的化合物)可以根据以下反应方案17制备。在方案17中，所有其他变量均是根据上述或根据本发明的范围进行定义，

在方案17中，以下反应条件适用：

1：在适合的温度(如在0℃和室温之间的范围)下，在适合的还原剂(例如像氢化铝锂)的存在下，在适合的溶剂(例如像四氢呋喃)中；

2：在适合的温度(例如像-78℃)下，在适合的试剂(例如像草酰氯、二甲亚砜)的存在下、在适合的碱(例如像三乙胺)的存在下，在适合的溶剂(例如像二氯甲烷)中；

3：在适合的温度(例如像室温)下，在适合的还原剂(例如像氰基硼氢化钠)的存在下，有或没有适合的酸(例如像乙酸)，在适合的溶剂(例如像甲醇)中；

4：在适合的温度(例如像室温)下，在适合的酸(例如像三氟乙酸)的存在下，在适合的溶剂(例如像二氯甲烷或乙酸乙酯)中；

5：在适合的温度(如在从室温至90℃的范围内)下，在适合的碱(例如像二异丙基乙胺或三乙胺)的存在下，在适合的溶剂(例如像乙腈或异丙醇或乙醇(EtOH)或二氯甲烷(DCM))中。

方案18

通常，具有式(I)的化合物(其中R^15a和R^15b限于H，并且Y¹限于N和C-CN，特此命名为具有式(Iu)的化合物)可以根据以下反应方案18制备。在方案18中，所有其他变量均是根据上述或根据本发明的范围进行定义，

在方案18中，以下反应条件适用：

1：在适合的温度(在从-78℃至室温的范围内)下，在适合的去质子化试剂(例如像氢化钠或二异丙氨基锂)的存在下，在适合的溶剂(例如像四氢呋喃)中；

2：在适合的温度(如在0℃和室温之间的范围)下，在适合的还原剂(例如像氢化铝锂)的存在下，在适合的溶剂(例如像四氢呋喃)中；

3：在适合的温度(例如像-78℃)下，在适合的试剂(例如像草酰氯、二甲亚砜)的存在下、在适合的碱(例如像三乙胺)的存在下，在适合的溶剂(例如像二氯甲烷)中；

4：在适合的温度(例如像室温)下，在适合的还原剂(例如像氰基硼氢化钠)的存在下，有或没有适合的酸(例如像乙酸)，在适合的溶剂(例如像甲醇)中；

5：在适合的温度(例如像室温)下，在适合的酸(例如像三氟乙酸)的存在下，在适合的溶剂(例如像二氯甲烷或乙酸乙酯)中；

6：在适合的温度(如在从室温至90℃的范围内)下，在适合的碱(例如像二异丙基乙胺或三乙胺)的存在下，在适合的溶剂(例如像乙腈或异丙醇或乙醇(EtOH)或二氯甲烷(DCM))中。

方案19

通常，具有式(I)的化合物(其中Q限于H，并且Y¹限于N和C-CN，特此命名为具有式(Iv)的化合物)可以根据以下反应方案19制备。在方案19中，卤代是适合的卤素，LG³是适合的离去基团(例如像甲磺酰基或4-甲苯磺酰基)，并且所有其他变量均是根据上述或根据本发明的范围进行定义，

在方案19中，以下反应条件适用：

1：在适合的温度(例如在从室温至60℃的范围内)下，在适合的碱(例如像氢氧化锂或氢氧化钠)的存在下；在适合的溶剂(例如像四氢呋喃和水的混合物)中；

2：在适合的温度(例如像室温)下，在适合的酸偶联剂(例如像1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-苯并三唑鎓六氟磷酸盐(1-)3-氧化物(HBTU)或1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(HATU))的存在下，在适合的碱(例如像N-乙基-N-(1-甲基乙基)-2-丙胺(DIPEA))的存在下，在适当的溶剂(如N,N-二甲基甲酰胺(DMF))中；

3：在适合的温度(例如像-78℃、0℃或室温)下，在适合的溶剂(例如像四氢呋喃)中；

4：在适合的温度(例如像-78℃、0℃或室温)下，在适合的溶剂(例如像四氢呋喃)中；

5：在适合的温度(例如像室温)下，在适合的碱(例如像三乙胺或二异丙胺)、在适合的溶剂(例如像四氢呋喃或二氯甲烷)的存在下；

6：在适合的温度(例如像室温)下，在适合的还原剂(例如像氰基硼氢化钠)的存在下，有或没有适合的酸(例如像乙酸)，在适合的溶剂(例如像甲醇)中；

7：在适合的温度(例如像室温)下，在适合的酸(例如像三氟乙酸)的存在下，在适合的溶剂(例如像二氯甲烷或乙酸乙酯)中；

8：在适合的温度(如在从室温至90℃的范围内)下，在适合的碱(例如像二异丙基乙胺或三乙胺)的存在下，在适合的溶剂(例如像乙腈或异丙醇或乙醇(EtOH)或二氯甲烷(DCM))中。

技术人员将意识到，方案1至16的化学还可以应用于方案17至19中描绘的中间体。

将理解的是，在存在适当官能团的情况下，具有不同式的化合物或用于其制备的任何中间体可以通过一种或多种标准合成方法采用缩合、取代、氧化、还原或裂解反应来进一步衍生。具体取代方法包括常规烷基化、芳基化、杂芳基化、酰化、磺酰化、卤化、硝化、甲酰化以及偶合程序。

具有式(I)的化合物能以对映异构体的可以遵循领域已知的拆分程序与彼此分离的外消旋混合物形式合成。具有式(I)的外消旋化合物(含有基础氮原子)可以通过与适合的手性酸反应而转化成相应的非对映异构盐形式。所述非对映异构盐形式接着例如通过选择性或分步结晶而分离，并且对映异构体通过碱由其释放。分离具有式(I)的化合物的对映异构形式的替代性方式涉及使用手性固定相的液相色谱法。所述纯立体化学异构形式还可以来源于适当原材料的相应的纯立体化学异构形式，其条件是反应立体定向地发生。

在制备本发明化合物的过程中，对中间体的远端官能团(例如伯胺或仲胺)的保护可能是必要的。对这种保护的需要将取决于远端官能团的性质和制备方法的条件。适合的氨基保护基(NH-Pg)包括乙酰基、三氟乙酰基、叔丁氧基羰基(Boc)、苯甲氧基羰基(CBz)以及9-芴基亚甲基氧基羰基(Fmoc)。对这种保护的需要易于由本领域的技术人员确定。关于保护基团及其用途的一般说明，参见T.W.Greene和P.G.M.Wuts,Protective Groups inOrganic Synthesis[有机合成中的保护基团],第4版,威利出版社(Wiley),新泽西州霍博肯(Hoboken，New Jersey),2007年。

药理学

已经发现，本发明的化合物阻断了menin与MLL蛋白质和致癌MLL融合蛋白的相互作用。因此，根据本发明的化合物和包含此类化合物的药物组合物可用于治疗或预防(特别是治疗)如癌症、骨髓增生异常综合征(MDS)和糖尿病等疾病。

特别地，根据本发明的化合物及其药物组合物可用于治疗或预防癌症。根据一个实施例，可以受益于用本发明的menin/MLL抑制剂治疗的癌症包含白血病、骨髓瘤或实体瘤癌症(例如，前列腺癌、肺癌、乳癌、胰腺癌、结肠癌、肝癌、黑色素瘤和胶质母细胞瘤等)。在一些实施例中，白血病包括急性白血病、慢性白血病、骨髓白血病、髓性白血病、成淋巴细胞白血病、淋巴细胞白血病、急性髓性白血病(AML)、慢性髓性白血病(CML)、急性成淋巴细胞白血病(ALL)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、T细胞前淋巴细胞白血病(T-PLL)、大颗粒淋巴细胞白血病、毛细胞白血病(HCL)、MLL-重排白血病、MLL-PTD白血病、MLL增加的白血病、MLL-阳性白血病，展示HOX/MEIS1基因表达标记等的白血病。

因此，本发明涉及具有式(I)的化合物、其互变异构体和立体异构形式以及其药学上可接受的盐和溶剂化物，用于作为药物使用。

本发明还涉及具有式(I)的化合物、其互变异构体或立体异构形式或其药学上可接受的盐或溶剂化物或根据本发明的药物组合物的用途，用于制造药物。

本发明还涉及根据本发明的具有式(I)的化合物、其互变异构体或立体异构形式，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，或药物组合物，用于在治疗、预防、改善、控制或降低哺乳动物(包括人)的与menin和MLL蛋白质以及致癌MLL融合蛋白的相互作用相关的障碍的风险中使用，这些障碍的治疗或预防通过阻断menin和MLL蛋白质以及致癌MLL融合蛋白的相互作用来影响或促进。

同样，本发明涉及根据本发明的具有式(I)的化合物、其互变异构体或立体异构形式、或其药学上可接受的盐或溶剂化物，或药物组合物，用于生产用于治疗、预防、改善、控制或降低哺乳动物(包括人)的与menin和MLL蛋白质以及致癌MLL融合蛋白的相互作用相关的障碍的风险的药物的用途，这些障碍的治疗或预防通过阻断menin和MLL蛋白质以及致癌MLL融合蛋白的相互作用来影响或促进。

本发明还涉及具有式(I)的化合物、其互变异构体或立体异构形式或其药学上可接受的盐或溶剂化物，用于在治疗或预防上文中提及的疾病中任一者中使用。

本发明还涉及具有式(I)的化合物、其互变异构体或立体异构形式或其药学上可接受的盐或溶剂化物的用途，用于制造用于治疗或预防上文中提及的疾病病症中任一者的药物。

可以将本发明的化合物施用至哺乳动物(优选地人)以便治疗或预防上文中提及的疾病中任一者。

鉴于具有式(I)的化合物、其互变异构体或立体异构形式，和其药学上可接受的盐和溶剂化物的效用，提供了治疗罹患上文中提及的疾病中任一者的温血动物(包括人)的方法。

所述方法包括向温血动物(包括人)施用(即全身性或局部施用)、优选地经口施用治疗有效量的具有式(I)的化合物、其互变异构体或立体异构形式、或其药学上可接受的盐或溶剂化物。

因此，本发明还涉及用于治疗或预防上文中提及的疾病中任一者的方法，所述方法包括向有需要的患者施用治疗有效量的根据本发明的化合物。

本领域的技术人员将认识到，本发明的化合物的治疗有效量是足以具有治疗活性的量，并且这个量取决于疾病类型、治疗性配制品中化合物的浓度以及患者的病症而特别不同。一般来说，本发明的化合物以治疗剂形式施用用于治疗本文提及的障碍的量将由医生根据情况来确定。

在此类疾病的治疗中，技术人员可以从下文提供的测试结果确定有效治疗日用量。有效治疗日用量应是从约0.005mg/kg至100mg/kg体重，特别是0.005mg/kg至50mg/kg体重，特别是0.01mg/kg至50mg/kg体重，更特别是从0.01mg/kg至25mg/kg体重，优选地从约0.01mg/kg至约15mg/kg体重，更优选地从约0.01mg/kg至约10mg/kg体重，甚至更优选地从约0.01mg/kg至约1mg/kg体重，最优选地从约0.05mg/kg至约1mg/kg体重。特别的有效治疗日用量应是1mg/kg体重、2mg/kg体重、4mg/kg体重或8mg/kg体重。根据本发明的化合物(本文也称为活性成分)的达到治疗作用所需的量可以根据情况随例如具体化合物、施用途径、接受者的年龄和病症以及所治疗的具体障碍或疾病而不同。治疗方法还可包括以每天一到四次摄入之间的方案施用活性成分。在这些治疗方法中，根据本发明的化合物优选地在施用之前进行配制。如在下文中所述的，适合的药物配制品通过已知程序使用熟知并且容易可得的成分来制备。

本发明还提供了用于预防或治疗本文提及的障碍的组合物。所述组合物包含治疗有效量的具有式(I)的化合物、其互变异构体或立体异构形式、或其药学上可接受的盐或溶剂化物，以及药学上可接受的载体或稀释剂。

虽然活性成分可以单独施用，但优选地其作为药物组合物呈现。因此，本发明进一步提供了药物组合物，所述药物组合物包含根据本发明的化合物连同药学上可接受的载体或稀释剂。载体或稀释剂必须在与组合物的其他成分相容的意义上是“可接受的”并且对其接受者是无害的。

本发明的药物组合物可以通过药学领域中熟知的任何方法来制备，例如使用如Gennaro等人,Remington’s Pharmaceutical Sciences[雷明顿药物科学](第18版,MackPublishing Company[马克出版公司],1990，尤其参见Part 8:Pharmaceuticalpreparations and theirManufacture[部分8：药物制剂和其制造])中描述的方法的那些方法。治疗有效量的呈碱形式或盐形式的作为活性成分的具体化合物与药学上可接受的载体组合成紧密混合物，所述载体可以取决于给予所希望的制剂形式而采用多种多样的形式。此类药物组合物希望为适合于(优选适合于)全身性施用，如经口、经皮或肠胃外施用；或局部施用如经由吸入、鼻喷雾、滴眼剂或经由霜剂、凝胶剂、洗发剂等施用。例如，在制备呈经口剂型的组合物中，可使用任何常见药物介质，在经口液体制剂(如悬浮液、糖浆剂、酏剂、以及溶液)的情况下，使用例如像水、二醇类、油类、醇类等；或在散剂、丸剂、胶囊剂和片剂的情况下，固体载剂如淀粉、糖、高岭土、润滑剂、粘结剂、崩解剂等。片剂和胶囊剂由于其施用简易性而代表了最有利的口服剂量单位形式，在所述情况下显然采用固体药物载剂。对于肠胃外组合物而言，载体通常将至少在很大程度上含无菌水，但也可以包括其他成分例如以辅助溶解性。例如可制备可注射溶液，其中载体包含盐溶液、葡萄糖溶液或盐水和葡萄糖溶液的混合物。也可以制备可注射悬浮液，在这种情况下可以采用适当的液体载体、助悬剂等。在适合于经皮施用的组合物中，所述载体任选地包含渗透增强剂和/或适合的可湿润剂，任选地与小比例的具有任何性质的适合添加剂组合，这些添加剂不会对皮肤造成任何显著有害作用。所述添加剂可以促进向皮肤施用并且/或者可以有助于制备所希望的组合物。这些组合物能够以不同方式，例如作为透皮贴剂、作为滴剂或作为软膏剂施用。

特别有利的是，将上述药物组合物以剂量单位形式配制，以实现施用的简易性和剂量的均匀性。如本说明书和权利要求书中所用的单位剂型在本文中是指适合作为单位剂量的物理离散单位，每一单位含有经计算以与所希望的药物载体结合而产生所希望的治疗作用的预定量的活性成分。此类剂量单位形式的实例是片剂(包括刻痕或包衣片剂)、胶囊剂、丸剂、散剂包、糯米纸囊剂、可注射溶液剂或混悬剂、一茶匙的量、一汤匙的量等，以及分离的多个这些剂量单位形式。

本发明的化合物可以用于全身性施用，如经口、经皮或肠胃外施用；或局部施用如经由吸入、鼻喷雾、滴眼剂或经由霜剂、凝胶剂、洗发剂等施用。化合物优选地经口施用。施用的确切剂量和频率取决于所用的具体的具有式(I)的化合物，所治疗的具体病症，所治疗的病症的严重程度，具体患者的年龄、体重、性别、障碍程度和一般物理病症以及个体可以服用的如本领域的技术人员所熟知的其他药物。此外，显而易见的是，所述有效日用量可以降低或提高，这取决于所治疗的受试者的应答和/或取决于给出本发明的化合物处方的医生的评估。

本发明的化合物可以单独或与一种或多种另外的治疗剂组合施用。组合疗法包括施用含有根据本发明的化合物和一种或多种另外的治疗剂的单一药物剂量配制品，以及施用根据本发明的化合物和每种另外的治疗剂(呈其自身单独药物剂量配制品形式)。例如，根据本发明的化合物和治疗剂可以按一种单一经口剂量组合物(如片剂或胶囊)形式一起向患者施用，或每种试剂可以按单独经口剂量配制品形式施用。

因此，本发明的实施例涉及产品，所述产品含有根据本发明的化合物作为第一活性成分和一种或多种抗癌剂作为另一种活性成分，以组合制剂用于同时、单独或连续用于治疗罹患癌症的患者。

一种或多种其他医药剂与根据本发明的化合物可以同时施用(例如以单独组合物或整体组合物的形式)或以任一顺序相继施用。在后一种情况下，两种或更多种化合物将在一个时间段内并且以足以确保实现有利或协同作用的量和方式施用。将理解的是，组合的每种组分的优选施用方法和顺序以及对应的剂量和方案将取决于所施用的具体其他医药剂和本发明的化合物、其施用途径、所治疗的具体病症(特别是肿瘤)、以及所治疗的具体宿主。本领域的技术人员使用常规方法并根据本文所述的信息可以容易地确定最佳的施用方法和顺序以及剂量和方案。

当作为组合给出时，根据本发明的化合物与一种或多种其他抗癌剂的重量比可以由本领域的技术人员确定。如本领域的技术人员所熟知的，所述比率和确切的施用剂量和频率取决于根据本发明的特定化合物和所使用的一种或多种其他抗癌剂、正在治疗的特定病症、正在治疗的病症的严重程度，特定患者的年龄、体重、性别、饮食、施用时间和一般身体状况，施用模式以及个体可能正在服用的其他药物。此外，显而易见的是，所述有效日用量可以降低或提高，这取决于所治疗的受试者的应答和/或取决于给出本发明的化合物处方的医生的评估。本发明的具有式(I)的化合物与另一种抗癌剂的具体重量比可以在1/10至10/1、更特别是在1/5至5/1、甚至更特别是在1/3至3/1的范围内。

以下实例进一步说明了本发明。

实例

在以下实例中说明了几种用于制备本发明的化合物的方法。除非另外指明，否则所有起始材料都从商业供应商获得并且不经进一步纯化而使用，或可替代地可由技术人员通过使用熟知的方法合成。

下文，术语：‘ACN’、‘MeCN’或‘AcCN’意指乙腈，‘DCM’意指二氯甲烷，‘DEA’意指二乙胺，‘DIPEA’或‘DIEA’意指N,N-二异丙基乙胺，‘h’意指一小时或数小时，‘min’意指一分钟或数分钟，‘DMF’意指二甲基甲酰胺，‘TEA’或‘Et₃N’意指三乙胺，‘EtOAc’或‘EA’意指乙酸乙酯，‘EtOH’意指乙醇，‘HPLC’意指高效液相色谱法，‘制备型HPLC’意指制备型HPLC，‘制备型TLC’意指制备型TLC，‘iPrOH’、‘IPA’、‘ⁱPA’、‘i-PrOH’或‘ⁱPrOH’意指异丙醇，‘LC/MS’意指液相色谱/质谱，‘MeOH’意指甲醇，‘MeNH₂’意指甲胺，‘NMR’意指核磁共振，‘rt’或‘RT’意指室温，‘SFC’意指超临界流体色谱，‘AcOH’意指乙酸，‘BOC’或‘Boc’意指叔丁氧基羰基，‘EDCI’或‘EDCi’意指1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐，‘eq.’意指一个或多个当量，‘HOBT’或‘HOBt’意指N-羟基苯并三唑一水合物，‘iPrNH₂’意指异丙胺，‘PE’意指石油醚，‘NaBH(OAc)₃’意指三乙酰氧基硼氢化钠，‘R_t’意指保留时间，‘SFC’意指超临界流体色谱，‘T’意指温度，‘FA’意指甲酸，‘TFA’意指三氟乙酸，‘TFAA’意指三氟乙酸酐，‘THF’意指四氢呋喃，‘BrettPhos’意指2-(二环己基膦基)3,6-二甲氧基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯基，‘^tBuONa’或‘t-BuONa’意指叔丁醇钠，‘Ts’意指甲苯磺酰基；‘Pd₂(dba)₃’意指三(二亚苯基丙酮)二钯(0)，‘TLC’意指薄层色谱法，‘制备型TLC’意指制备型TLC，‘DCE’意指二氯乙烷，‘Et₂O’意指二乙醚，‘HBTU’意指1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-苯并三唑鎓六氟磷酸盐(1-)3-氧化物，‘SFC’意指超临界流体色谱，‘(Boc)₂O’意指二碳酸二叔丁酯，‘ee’意指对映异构体过量，‘Pd₂(dba)₃’意指三(二亚苯基丙酮)二钯，‘Pd(dppf)Cl₂’意指[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯钯(II)，‘Pd(OAc)₂’意指乙酸钯(II)，‘BINAP’意指[1,1'-联萘]-2,2'-二基双[二苯基膦](外消旋)，‘Ti(i-PrO)₄’意指异丙氧基钛，‘DMA’意指N,N-二甲基乙酰胺’，18-冠醚-6’意指1,4,7,10,13,16-六氧杂环十八烷，‘CDI’意指1,1'-羰基二咪唑，‘HATU’意指1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-1-鎓3-氧化物六氟磷酸盐，‘DMSO’意指二甲亚砜，‘FCC’意指快速柱色谱法，‘DBU’意指1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯，‘NMP’意指1-甲基-2-吡咯烷酮，‘MW’意指微波或分子量(从上下文中是清楚的)，‘T₃P’意指丙基膦酸酐，‘DME’意指1,2-二甲氧基乙烷，‘戴斯-马丁氧化剂’或‘DMP’意指1,1,1-三乙酰氧基-1,1-二氢-1,2-苯并碘酰基-3(1H)-酮，‘BPR’意指背压，‘DIBAL-H’意指二-异丁基氢化铝，‘psi’意指磅力/平方英寸，‘v/v’意指体积/体积，‘conc.’意指浓缩的，‘Ph₃P’意指三苯基膦，‘DEAD’意指偶氮二甲酸二乙酯，‘DEGDME’意指缩二乙二醇二甲醚，‘BOP’意指苯并三唑-1-基-N-氧基-三(吡咯烷基)磷鎓六氟磷酸盐，‘Hep’意指正庚烷，‘MsCl’意指甲磺酰氯，‘Zn(OAc)₂.2H₂O’意指乙酸锌二水合物，‘TMSCN’意指三甲基甲硅烷基氰化物，‘Hantzsch酯’意指1,4-二氢-2,6-二甲基-3,5-吡啶二甲酸二乙酯。

如本领域技术人员所理解的，使用所示方案合成的化合物可以作为溶剂化物(例如水合物)存在和/或含有残留溶剂或微量杂质。以盐形式分离的化合物可以是整数化学计量的，即单盐或二盐，或以中间化学计量。当在以下实验部分中的中间体或化合物被表示为“HCl盐”、“甲酸盐”或“TFA盐”，没有指示HCl、甲酸或TFA的当量数时，这意指没有确定HCl、甲酸或TFA的当量数。

当将这些混合物分离时，可以将在一些化合物中心的立体化学构型指定为“R”或“S”；对于一些化合物，当绝对立体化学是未确定的(即使这些键被立体定向地绘制出)，尽管化合物本身已被分离为单一的立体异构体并且是对映异构体纯的，将在指定中心处的立体化学构型指定为“*R”(首先在合成方案描述的柱条件的情况下并且当仅存在或指定一种立体中心时从柱中洗脱出来)或“*S”(第二次在合成方案描述的柱条件的情况下并且当仅存在或指定一种立体中心时从柱中洗脱出来)。

例如，将清楚的是，化合物46

是

对于其中两个立体中心的立体化学构型由*(例如，*R或*S)表示的化合物，尽管化合物本身已被分离为单一的立体异构体并且是对映异构体纯的，但这些立体中心的绝对立体化学是未确定的(即使键被立体定向性地绘制出)。在这种情况下，在相同的化合物中，第一个立体中心的构型独立于第二个立体中心的构型。

例如，对于化合物3

这意指所述化合物是

如上文所提及的，二价环状饱和或部分饱和基团上的取代基可以具有顺式构型或反式构型；例如，如果化合物含有二取代的环烷基基团，则这些取代基可以呈顺式构型或反式构型。

对于一些具有式(I)的化合物，含有Y²的环是环丁基(Y²是CH₂，m1是1，m2是0)或环己基(Y²是CH₂，m1是2，m2是1)。此类化合物的螺部分的立体化学构型可以指示为‘顺式或反式’或‘反式或顺式’。这意指尽管化合物本身已被分离为单一异构体，但是螺部分的绝对立体化学构型是不确定的。

例如，如下化合物

是

以上关于立体化学构型的段落还适用于中间体。

如本文使用的术语“对映异构体纯的”意指产物含有至少按重量计80％的一种对映异构体和按重量计20％或更少的另一种对映异构体。优选地所述产物含有至少按重量计90％的一种对映异构体和按重量计10％或更少的另一种对映异构体。在最优选的实施例中，术语“对映异构体纯的”意指组合物含有至少按重量计99％的一种对映异构体和1％或更少的另一种对映异构体。

技术人员将意识到，即使在下面的实验方案中没有明确提及的情况下，典型地在柱色谱纯化之后，收集所希望的级分并蒸发溶剂。

在由L1代表的螺环中没有指示立体化学的情况下，这意指它是立体异构体的混合物，除非另外指明或从上下文是清楚的。

当用‘RS’指定立体中心时，这意指在指定中心获得了外消旋混合物(或外消旋物)，除非另外指明。在此实验部分的上下文中‘外消旋混合物’(或‘外消旋物’)意指以如经由本文描述的分析型手性HPLC方法确定比率的混合物，典型地在40/60至60/40比率的范围内、优选地在45/55至55/45比率的范围内、更优选地在从48/52至52/48比率的范围内、最优选地50/50比率。

在以下实验部分所提及的纯度是基于HPLC(254nm或214nm)的结果。

A.中间体的制备

对于在下一反应步骤中用作粗品或用作部分纯化中间体的中间体，在一些情况下，在下一反应步骤中未提及这种中间体的摩尔量，或者在以下描述的反应方案中指示这种中间体的可替代估计摩尔量或理论摩尔量。

实例A1

中间体1的制备

向叔丁基(2-氮杂螺[3.4]辛-6-基)氨基甲酸酯(2.70g，11.9mmol)在异丙醇(20mL)中的溶液中添加DIPEA(4.60g，35.8mmol)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(3.00g，11.9mmol)。在室温下搅拌5h后，将反应混合物用水(50mL)稀释并用EtOAc(50mL x 3)萃取。将有机相用盐水洗涤、经Na₂SO₄干燥并浓缩。将粗产物用柱色谱法进行纯化以给出中间体1(4.30g)。

中间体2的制备

向中间体1(4.60g，10.4mmol)在MeOH(10mL)中的溶液中添加浓HCl(5.0mL)。在室温下搅拌1h后，将混合物浓缩以给出呈HCl盐的中间体2(3.0g)，将其不经进一步纯化而直接用于下一步骤。

通过与用于制备中间体2所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，制备下表中的中间体。

实例A2

中间体4的制备

将2-氮杂螺[3.4]辛-6-酮三氟乙酸盐(中间体16b)(180mg)、DIPEA(486mg，3.76mmol)和2-丙醇(5mL)添加至50mL圆底烧瓶中。将反应混合物用4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(190mg，0.752mmol)处理后在20℃下搅拌12h。然后将混合物倾倒进水(10mL)中并用乙酸乙酯(10mL x 2)萃取。将有机萃取物用盐水(10mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩以得到粗产物，将粗产物通过快速柱色谱法(洗脱液：石油醚：乙酸乙酯从1:0至0:1)进行纯化以得到呈黄色油状物的中间体4(140mg，49.1％产率)。

通过与以上所述用于制备中间体4的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，制备下表中的中间体。

中间体4的替代制备

将中间体16(215mg，1.33mmol)，4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(269mg，1.07mmol)和DIPEA(516.5mg，4.0mmol)在异丙醇(10mL)中稀释。将反应在80℃下搅拌12h。将溶剂去除以得到黄色固体，将其用硅胶柱色谱法(梯度洗脱液：DCM/MeOH从100/0至10:1)进行纯化以得到200mg(43％)呈黄色固体的中间体4。

通过与替代制备中间体4的类似的反应方案，也由各自的起始材料开始，可替代地制备中间体5。

中间体16的制备

将2-Boc-6-氧代-2-氮杂螺[3.4]辛烷(300mg，1.33mmol)添加至在二噁烷(4mL)中的4NHCl中。将反应在室温下搅拌1h。将溶剂蒸发至干燥，产生280mg的HCl盐的中间体16。

技术人员将理解，中间体16的TFA盐也可以以类似的方式(TFA盐是中间体16b)获得。

实例A3

中间体6的制备

向叔丁基8-氨基-2-氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸酯(300mg，1.18mmol)在MeOH(10mL)中的溶液中添加苯甲醛(125mg，1.18mmol)并将混合物在室温下搅拌2h。然后将NaBH₃CN(148mg，2.36mmol)添加至混合物中并在室温下搅拌过夜。将混合物浓缩，用EtOAc和H₂O稀释，分离并且用EtOAc萃取两次。将合并的萃取物在真空中浓缩以得到中间体6(360mg，88.6％产率)，将其不经进一步纯化而原样用于下一步骤。

中间体7的制备

向中间体6(360mg，1.05mmol)在MeOH(5mL)中的溶液中添加浓HCl(3mL)。在室温下搅拌1h后，将混合物浓缩，用EtOAc稀释并用H₂O洗涤，合并萃取物并浓缩以给出呈HCl盐(216mg)的中间体7，将其不经进一步纯化而原样用于下一步骤。

通过与用于制备中间体7所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，制备下表中的中间体。

实例A4

中间体9的制备

在0℃下，向叔丁基2-甲酰基-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸酯(200mg，0.836mmol)和苯胺(78mg，0.836mmol)在MeOH(5mL)中的溶液中添加CH₃COOH(5mg)和NaBH₃CN(158mg，2.51mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜。将反应用NH₄Cl溶液稀释，用EA萃取，用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。将残余物通过柱色谱法(PE/EA＝10/1)进行纯化以得到中间体9(230mg，76％产率)。

中间体10的制备

向中间体9(230mg，0.727mmol)在DCM(3mL)中的溶液中添加TFA(1mL)。将所得混合物在室温下搅拌1.5h，并且然后将混合物浓缩以给出呈TFA盐的中间体10(157mg，粗品)，将其不经进一步纯化而原样用于下一步骤。

通过与用于制备中间体10所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，制备下表中的中间体。对于中间体11-12-13，使用HCl脱保护Boc基团。中间体11、12和13的起始材料是经由与用于中间体9的类似的反应方案制备的。

实例A5

中间体14的制备

向叔丁基7-氨基-2-氮杂螺[4.4]壬烷-2-甲酸酯(50.0mg，0.208mmol)和TEA(63.0mg，0.624mmol)在DCM(20mL)中的溶液中添加苯磺酰氯(48.0mg，0.271mmol)。在0℃下搅拌5h后，向反应混合物中添加水(20mL)并用EtOAc(50mL x 3)萃取。将有机相用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥并浓缩，以给出粗中间体14(60mg),将其不经进一步纯化而原样用于下一步骤。

中间体15的制备

向粗中间体14(60mg)在MeOH(5mL)中的溶液中添加浓HCl(3mL)。在室温下搅拌1h后，将混合物浓缩以给出中间体15(35mg)，将其不经进一步纯化而原样用于下一步骤。

实例A6

中间体17的制备

将2,4-二氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶和叔丁基6-氮杂螺[3.4]辛-2-基氨基甲酸酯盐酸盐(2.63g，10mmol)和DIPEA(3.87g，30mmol)在异丙醇(30mL)中的混合物在室温下搅拌2小时。反应完成后，将反应混合物在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(石油醚/EtOAc＝1/1)进行纯化，以给出呈浅橙色固体的中间体17(4.7g，100％产率)。

中间体18的制备

向中间体17(954mg，2.0mmol)、Pd(OAc)₂(56.0mg，0.20mmol)、BINAP(150mg，0.24mmol)和Cs₂CO₃(978mg，3.0mmol)在甲苯(20mL)中的混合物中添加MeOH(384mg，12mmol)。在Ar下在110℃下搅拌过夜后，将混合物用H₂O(20mL)稀释并用EtOAc(20mL X 3)萃取。将合并的有机层用盐水(40mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(石油醚/EtOAc＝3/1)进行纯化，以给出呈黄色固体的中间体18(810mg，86％产率)。

中间体19的制备

将TFA(2mL)添加至中间体18(叔丁基(6-(2-甲氧基-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)-6-氮杂螺[3.4]辛-2-基)氨基甲酸酯)(400mg，0.88mmol)在DCM(2mL)中的混合物中。在室温下搅拌2h后，将反应混合物在减压下浓缩。将残余物用在MeOH(5mL)中的阿尔伯特试剂(amberlyst)A-21离子交换树脂处理10分钟，过滤并且浓缩，以给出呈白色固体的中间体19(300mg，96％产率)，将其不经进一步纯化而用于下一步骤。

中间体20的制备

将中间体17(叔丁基(6-(2-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)-6-氮杂螺[3.4]辛-2-基)氨基甲酸酯)(200mg，0.419mmol)在HCl/MeOH(4mL)中的溶液在室温下搅拌2h。将反应混合物在减压下浓缩。将残余物用离子交换树脂(阿尔伯特试剂A-21)处理，以给出中间体20(150mg)，将其不经进一步纯化而用于下一步骤。

中间体21的制备

在室温下，向中间体20(6-(2-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)-6-氮杂螺[3.4]辛-2-胺)(169mg，0.448mmol)、苯甲醛(95mg，0.895mmol)和钛酸四异丙酯(127mg，0.448mmol)在DCE(5mL)中的溶液中分批添加NaBH(OAc)₃(285mg，1.34mmol)。在室温下搅拌过夜后，将反应混合物用NaHCO₃水溶液淬灭并用DCM(20mL X 3)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，并经Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(PE/EtOAc＝3:1至1:1)进行纯化，以给出呈白色固体的中间体21(250mg)。

实例A7

中间体22的制备

向4-氨基-N-甲基苯甲酰胺(150mg，1.00mmol)在MeOH(4mL)中的溶液中添加叔丁基2-氧代-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸酯(292mg，1.3mmol)和癸硼烷(42.7mg，0.35mmol)。在室温下搅拌过夜后，将所得混合物在减压下浓缩以给出中间体22(350mg，粗品，95％产率)，将其不经进一步纯化而用于下一步骤。

中间体23的制备

向中间体22(叔丁基2-((4-(甲基氨基甲酰基)苯基)氨基)-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸酯)(350mg，粗品)在DCM(10mL)中的溶液中添加TFA(2mL)。在室温下搅拌3h后，将所得混合物在减压下浓缩以生成中间体23(250mg，粗TFA盐，98％产率)，将其不经进一步纯化而用于下一步骤。

中间体24的制备

向2,4-二氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(300mg，1.04mmol)和中间体23(250mg，粗品)在ⁱPrOH(5mL)中的混合物中添加DIPEA(404mg，3.12mmol)。在室温下搅拌过夜后，将所得混合物在减压下浓缩。将残余物通过制备型TLC(DCM:MeOH＝20:1)进行纯化，以给出中间体24(200mg，39％产率，经3步)。

实例A8

中间体25的制备

向甲基4-氨基-3-氟-N-甲基苯甲酰胺(200mg，1.19mmol)和叔丁基2-氧代-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸酯(268mg，1.19mmol)在MeOH(10mL)中的溶液中添加癸硼烷(44mg，0.357mmol)。在室温下搅拌3天后，将混合物用水(20mL)稀释并用EtOAc(50mL X 3)萃取。将有机相用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(PE/EA＝5/1)进行纯化，以给出呈白色固体的中间体25(400mg，89％产率)。

中间体26的制备

向中间体25(叔丁基2-((2-氟-4-(甲基氨基甲酰基)苯基)氨基)-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸酯)(400mg，1.06mmol)在DCM(5mL)中的溶液中添加TFA(2ml)。在室温下搅拌3h后，将混合物用NaHCO₃调节pH>7并用乙酸乙酯(100mL X 3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL X 2)洗涤，并经Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(PE/EA＝10/1)进行纯化，以得到呈油状物的中间体26(200mg，68％产率)。

实例A9

中间体27的制备

向4-氨基-3-氯-N-甲基苯甲酰胺(485mg，2.635mmol)和叔丁基2-氧代-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸酯(592mg，2.635mmol)在MeOH(10mL)中的溶液中添加癸硼烷(112mg，0.922mmol)。在室温下搅拌12h后，将混合物用水(20mL)稀释并用EtOAc(50mL X 3)萃取。将有机相用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩以给出呈黄色油状物的粗中间体27。

中间体28的制备

向中间体27(叔丁基2-((2-氯-4-(甲基氨基甲酰基)苯基)-氨基)-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸酯)(350mg，0.890mmol)在CH₂Cl₂(5mL)中的溶液中添加TFA(5mL)。在室温下搅拌3h后，将混合物在减压下浓缩，以给出中间体28(260mg，粗品)，将其不经进一步纯化而用于下一步骤。

实例A10

中间体29的制备

向叔丁基2-氨基-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸酯(200mg，0.88mmol)和6-氟烟酸甲酯(178mg，1.15mmol)在i-PrOH(2mL)中的溶液中添加DIPEA(342mg，2.65mmol)。在100℃下搅拌12h后，将混合物用水(20mL)稀释并用EtOAc(50mL x 3)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，并经Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过制备型TLC(DCM:MeOH＝30:1)进行纯化，以给出中间体29(220mg，69％产率)。

中间体30的制备

向中间体29(叔丁基2-((5-(甲氧基羰基)吡啶-2-基)氨基)-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸酯)(200mg，0.55mmol)在THF(4mL)中的溶液中添加NaOH水溶液(2N，2mL)。在80℃下搅拌2h后，将所得混合物冷却至室温，用1N HCl调节pH约4并用EtOAc(50mLX 3)萃取。将有机相用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩以生成中间体30(150mg，78％产率)。

中间体31的制备

将中间体30(6-((6-(叔丁氧基羰基)-6-氮杂螺[3.4]辛-2-基)氨基)烟碱酸)(100mg，0.288mmol)、CH₃NH₂ ^·HCl(29mg，0.432mmol)、HOBT(78mg，0.576mmol)、EDCI(110mg，0.576mmol)和DIPEA(111mg，0.864mmol)在DCM(5mL)中的溶液在室温下搅拌12h。将混合物用水(20mL)稀释，并用EtOAc(50mL X 3)萃取。将有机相用盐水洗涤、经Na₂SO₄干燥、过滤并浓缩。将粗品通过制备型TLC(DCM:MeOH＝20:1)进行纯化，以给出中间体31(100mg，97％产率)。

中间体32的制备

将中间体31(叔丁基2-((5-(甲基氨基甲酰基)吡啶-2-基)氨基)-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸酯)(100mg，0.277mmol)和TFA(2mL)在DCM(4mL)中的溶液在室温下搅拌12h。将混合物在减压下浓缩以给出中间体32(100mg，粗TFA盐)，将其不经进一步纯化而用于下一步骤。

实例A11

中间体33的制备

向叔丁基2-氧代-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸酯(2.00g，8.89mmol)在MeOH(20mL)中的溶液中添加4-氨基苯甲酸(1.20g，8.89mmol)和癸硼烷(380mg，3.11mmol)。在室温下搅拌过夜后，将混合物在减压下浓缩以生成呈无色油状物的中间体33(3.10g，100％产率)，将其不经进一步纯化而直接用于下一步骤。

中间体34的制备

向中间体33(4-((6-(叔丁氧基羰基)-6-氮杂螺[3.4]辛-2-基)氨基)苯甲酸)(3.10g，8.89mmol)在DCM(20mL)中的溶液中添加TFA(10mL)。在室温下搅拌1小时后，将混合物在减压下浓缩以生成呈棕色油状物的中间体34(2.20g，TFA盐)，将其不经进一步纯化而直接用于下一步骤。

中间体35的制备

向中间体34(4-((6-氮杂螺[3.4]辛-2-基)氨基)苯甲酸TFA盐(2.20g，8.89mmol)在i-PrOH(20mL)中的溶液中滴加4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(2.20g，8.89mmol)和DIPEA(5.70g，44.45mmol)。将所得混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物在减压下浓缩。将所得黄色油状物在NH₄Cl水溶液中稀释同时搅拌过夜。过滤悬浮液并在减压下干燥。将残余物用硅胶柱色谱法(DCM/MeOH(30/1至20/1)洗脱)进行纯化，以生成呈黄色固体的中间体35(2.30g，56％产率)。

实例A12

中间体36的制备

向4-氨基-2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)苯甲酸(450mg，粗品)在MeOH(5ml)中的溶液中添加叔丁基2-氧代-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸酯(398mg，1.77mmol)和癸硼烷(75.58mg，0.62mmol)。在室温下搅拌12h后，将混合物浓缩，用水(30mL)稀释并用乙酸乙酯(30mL X 3)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩，以给出呈黄色固体的中间体36(800mg，粗品)，将其不经进一步纯化而用于下一步骤。

中间体37的制备

向中间体36(4-((6-(叔丁氧基羰基)-6-氮杂螺[3.4]辛-2-基)氨基)-2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)苯甲酸)(800mg，粗品)在MeOH(5ml)中的溶液中添加HCl/二噁烷(10ml，4M)。在室温下搅拌3h后，将混合物在减压下浓缩，以给出呈黄色固体的中间体37(700mg，粗HCl盐)，将其不经进一步纯化而用于下一步骤。

中间体38的制备

向中间体37(4-(6-氮杂螺[3.4]辛-2-基氨基)-2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)苯甲酸HCl盐)(700mg，粗品)在ⁱPrOH(10ml)中的溶液中添加4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(480mg，1.89mmol)和DIEA(5ml)。在室温下搅拌3小时后，将所得混合物用EA(30mL)稀释，用盐水(15mL X 2)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。将残余物通过制备型TLC(DCM:MeOH＝10:1)进行纯化，以得到呈白色固体的中间体38(250mg，23％产率，经4步)。

实例A13

中间体39的制备

将4-氨基-2-溴苄腈(440mg，2.2mmol)、叔丁基2-氧代-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸酯(495mg，2.2mmol)和癸硼烷(43mg，0.35mmol)在MeOH(20mL)中的混合物在50℃下在Ar下搅拌过夜。将反应混合物在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(石油醚/EtOAc＝3/1)进行纯化，以得到呈白色固体的中间体39(406mg，45％产率)。

中间体40的制备

将中间体39(叔丁基2-((3-溴-4-氰基苯基)氨基)-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸酯)(406mg，1.0mmol)、1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶(335mg，1.5mmol)、Pd(dppf)Cl₂(73mg，0.1mmol)和Cs₂CO₃(489mg，1.5mmol)在1,4-二噁烷(20mL)和H₂O(4mL)中的混合物在110℃下搅拌过夜。将反应混合物过滤，并将滤液在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(DCM/MeOH＝20/1)进行纯化，以得到呈棕色固体的中间体40(380mg，90％产率)。

中间体41的制备

将中间体40(叔丁基2-((4-氰基-3-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)苯基)氨基)-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸酯)(380mg，0.9mmol)和Pd/C(380mg)在MeOH(20mL)中的混合物在50℃下在H₂下搅拌4h。将反应混合物过滤并浓缩滤液以得到呈橙色油状物的中间体41(340mg，粗品)。

中间体42的制备

将中间体41(叔丁基2-((4-氰基-3-(1-甲基哌啶-4-基)苯基)氨基)-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸酯)(340mg，粗品)和TFA(2mL)在DCM(2mL)中的混合物在室温下搅拌2h。将混合物在压力下浓缩以得到呈橙色油状物的中间体42(280mg，TFA盐)，将其不经进一步纯化而用于下一步骤。

实例A14

中间体43的制备

向2-羟基-4-硝基苯甲腈(500mg，3.05mmol)在50ml的CH₃CN中的溶液中添加K₂CO₃(1.30g，9.15mmol)和4-溴-1-甲基哌啶(2.20g，12.2mmol)。在80℃下搅拌过夜后，将反应混合物浓缩并将残余物通过硅胶垫(DCM/MeOH＝15:1)过滤。将滤液在减压下浓缩以生成中间体43(400mg，粗品)，将其不经进一步纯化而用于下一步骤。

中间体44的制备

向中间体43(2-((1-甲基哌啶-4-基)氧基)-4-硝基苯甲腈)(400mg，粗品)在MeOH(3mL)中的溶液中添加Pd/C(40mg)。在50℃下在H₂气氛下搅拌2h后，将反应混合物通过硅藻土垫过滤并用MeOH洗涤。将滤液在减压下浓缩以给出中间体44(500mg，70％产率，经2步)，将其不经进一步纯化而用于下一步骤。

中间体45的制备

向中间体44(4-氨基-2-((1-甲基哌啶-4-基)氧基)苯甲腈)(500mg，粗品，大约90％纯度)在MeOH(10mL)中的溶液中添加叔丁基2-氧代-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸酯(300mg，1.33mmol)和癸硼烷(56mg，0.46mmol)。在50℃下搅拌过夜后，将混合物在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(DCM/MeOH＝10/1)进行纯化，以生成中间体45(500mg)。

中间体46的制备

向中间体45(叔丁基2-((4-氰基-3-((1-甲基哌啶-4-基)氧基)苯基)氨基)-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸酯)(500mg，粗品)在DCM(10mL)中的溶液中添加TFA(2mL)。在室温下搅拌2h后，将混合物在减压下浓缩，以生成呈油状物的中间体46(500mg，粗TFA盐)。

实例A15

中间体47的制备

将叔丁基2-氧代-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸酯(CAS#：203661-71-6)(675mg，3.0mmol)、4-氨基-2-氟苯甲腈(408mg，3.0mmol)和癸硼烷(128mg，1.05mmol)在MeOH(10mL)中的混合物在50℃下搅拌过夜。反应完成后，将反应混合物在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(石油醚/EtOAc＝3/1)进行纯化，以得到呈白色固体的中间体47(500mg，48％产率)。

中间体48的制备

将中间体47(叔丁基2-((4-氰基-3-氟苯基)氨基)-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸酯)(345mg，1.0mmol)、1-甲基哌啶-4-胺(570mg，5.0mmol)和K₂CO₃(690mg，5.0mmol)在DMF(5mL)中的混合物在120℃下在密封管中在Ar下搅拌12h。反应完成后，将反应混合物浓缩并将残余物通过硅胶柱色谱法(DCM/MeOH＝10/1)进行纯化以得到呈黄色油状物的中间体48(50mg，11％产率)。

中间体49的制备

将中间体48(叔丁基2-((4-氰基-3-((1-甲基哌啶-4-基)氨基)苯基)氨基)-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸酯)(50mg，0.11mmol)和TFA(2mL)在DCM(0.5mL)中的混合物在室温下搅拌2h。反应完成后，将混合物浓缩以得到中间体49(60mg，TFA盐)，将其不经进一步纯化而用于下一步骤。

实例A16

中间体50的制备

向3-氟-4-硝基苯甲腈(3.00g，18.1mmol)和ACN(40mL)的溶液中添加TEA(10.0mL，72.2mmol)和甘氨酰胺盐酸盐(2.00g，18.1mmol)。在80℃下搅拌4h后，将混合物冷却至室温并过滤混合物以获得黄色固体，将黄色固体用水(10mL x 3)洗涤。将黄色固体在减压下浓缩至干燥，以给出呈黄色固体的粗中间体50(4.30g，92％产率)。

中间体51的制备

向中间体50(2-((4-氰基-2-硝基苯基)氨基)乙酰胺)(3.00g，11.6mmol)、DMF(124mL)和水(50mL)中的溶液中添加FeCl₃(1.77g，10.9mmol)和锌(17.8g，272mmol)。在50℃下搅拌4h后，将反应混合物过滤并将滤液用EtOAc(1000mL)稀释。将有机层用水(400mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩，以得到呈黄色固体的中间体51(3.00g，82％产率)。

中间体52的制备

将中间体51(2-((2-氨基-4-氰基苯基)氨基)乙酰胺)(1.50g，4.73mmol)、CDI(3.83g，23.6mmol)和DMF(15mL)的溶液在20℃下搅拌2h。然后将反应混合物用水(15mL)稀释并用乙酸乙酯(60mL x 3)萃取。将合并的有机相在减压下浓缩至干燥，以得到粗产物，将其通过制备型HPLC(Gilson 281，Xtimate C18 150x 25mm x5μm柱(洗脱液：8％至38％(v/v)水(0.225％FA)-ACN))进行纯化。收集纯级分并在减压下蒸发，以获得残余物，将其冻干，以得到呈白色固体的中间体52(400mg，35％产率)。

中间体53的制备

将中间体52(2-(5-氰基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)乙酰胺)(200mg，0.833mmol)、雷尼镍(100mg)、氨(2.6mL，在MeOH中的7M)和MeOH(30mL)的混合物在25℃下在H₂(40-50psi)下搅拌12h。将混合物经

过滤并将滤液在减压下浓缩，以给出呈棕色固体的中间体53(200mg，93％产率)。

实例A17

中间体54的制备

在0℃下，向化合物53(2-(2-氧代-5-(((2-(6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2-氮杂螺[3.4]辛-6-基)氨基)甲基)-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)乙酰胺)(70.0mg，0.128mmol)在DCM(3mL)中的溶液中添加Et₃N(39.0mg，0.385mmol)和(Boc)₂O(56.0mg，0.257mmol)。然后将混合物加热并在50℃下搅拌8h。将反应混合物在减压下浓缩以获得中间体54(70mg，粗品)，将其不经纯化而用于下一步骤。

中间体55的制备

在0℃下，向中间体54(叔丁基((1-(2-氨基-2-氧代乙基)-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)(2-(6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2-氮杂螺[3.4]辛-6-基)氨基甲酸酯)(70.0mg，粗品)在DCM(1.5mL)中的溶液中添加Et₃N(33.0mg，0.325mmol)。然后将TFAA(46.0mg，0.217mmol)在DCM(0.5mL)中的溶液滴加至在0℃下的溶液中。将反应在10℃下搅拌3h并在减压下浓缩以给出呈白色固体的中间体55(60mg，粗品)，将其不经进一步纯化而用于下一步骤。

实例A19

中间体58的制备

向中间体5(6-(6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)-6-氮杂螺[3.4]辛-2-酮)(1000mg，2.93mmol)、叔丁基4-氨基苯甲酸酯(750mg，3.88mmol)、氰基硼氢化钠(365mg，5.81mmol)和MeOH(28.0mL)的溶液中添加乙酸(365mg，6.08mmol)在MeOH(2.0mL)中的溶液。在40℃下搅拌14h后，将混合物在减压下浓缩，然后用水(30mL)稀释并用EtOAc(20mL x 3)萃取。将合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并在真空中浓缩，以获得粗残余物，将其通过快速柱色谱法(PE:EA从100:0至50:50)进行纯化，以给出呈橙色固体的中间体58(680mg，43％产率)。

中间体59(中间体35的TFA盐)的制备

将中间体58(叔丁基4-((6-(6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)-6-氮杂螺[3.4]辛-2-基)氨基)苯甲酸酯)(100mg，0.193mmol)、TFA(1mL)和CH₂Cl₂(1mL)的溶液在20℃下搅拌2h。然后将反应混合物在减压下浓缩至干燥，以得到呈黄色固体的粗中间体59(180mg，97％产率)。

实例A20

中间体60、61和62的制备

经由分别与用于制备中间体17、中间体18和中间体20所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，分别制备中间体60、中间体61和中间体62。

实例A21

中间体63、64和65的制备

经由分别与用于制备中间体79、中间体80和中间体17所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，分别制备中间体63、中间体64和中间体65。

实例A23

中间体66的制备

在室温下，向甲基3-氟-4-硝基苯甲酸酯(CAS#：185629-31-6)(3.00g，15.1mmol)在DMF(30mL)中的搅拌溶液中添加甲胺盐酸盐(1.20g，18.1mmol)和K₂CO₃(2.70g，19.6mmol)。将反应在室温下搅拌过夜。将反应混合物用EtOAc(200mL)稀释，用HCl水溶液(1M)(100mL)、盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，以得到中间体66(3.20g，粗品)，将其不经进一步纯化而用于下一步骤。

中间体67的制备

向中间体66(3.20g，约15.2mmol)在MeOH(32mL)中的溶液中添加10％Pd/C(320mg)。在H₂气氛下在室温下搅拌过夜后，将混合物通过SiO₂垫过滤并将滤饼用MeOH洗涤。将合并的滤液在减压下浓缩以得到中间体67(2.70g，粗品)，将其不经进一步纯化而用于下一步骤。

中间体68的制备

向中间体67(2.70g，约15.0mmol)在THF(65mL)中的搅拌溶液中在室温下添加CDI(3.60g，22.5mmol)。在70℃下搅拌过夜后，将冷却的反应混合物过滤并将滤饼用THF和石油醚洗涤。将滤饼在真空下干燥，以得到中间体68(1.80g，粗品)，将其不经进一步纯化而用于下一步骤。

中间体69的制备

向中间体68(1.80g，约8.74mmol)在干THF(180mL)中的搅拌溶液中在Ar下在-78℃下滴加DIBAL-H(在甲苯中的1.5M)(35mL，52.5mmol)。添加后，使反应温热至室温并搅拌过夜。将反应混合物冷却至0℃并且用MeOH逐滴淬灭。在室温下再搅拌15分钟后，将混合物过滤并将滤饼用MeOH洗涤。将合并的滤液用EtOAc(100mL X 2)萃取，用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩，以得到中间体69(1.10g，粗品)，将其不经进一步纯化而用于下一步骤。

中间体70的制备

向中间体69(1.10g，约6.18mmol)在干THF(110mL)中的搅拌溶液中添加戴斯-马丁氧化剂(5.20g，12.4mmol)。在室温下搅拌过夜后，将反应混合物用水稀释并用EtOAc(50mLX 3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，并在减压下浓缩。将粗产物用EtOAc(50mL X 3)洗涤，过滤并在减压下干燥，以得到呈棕色固体的中间体70(400mg，约37％产率)。

实例A24

中间体71的制备

在Ar下在室温下，向中间体60(600mg，1.26mmol)在DME(15mL)中的溶液中添加三甲基环三硼氧烷(CAS#：823-96-1)(1.26g，5.03mmol)、K₂CO₃(522mg，0.38mmol)和Pd(dppf)Cl₂(93mg，0.13mmol)。将反应在Ar下在100℃下搅拌过夜。将冷却的反应混合物用水(60mL)稀释，并用EtOAc(60mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用水(60mL X 3)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(用PE/EA(2/1，v/v)洗脱)进行纯化，以给出中间体71(390mg，68％产率)。

中间体72的制备

在室温下，向中间体71(390mg，0.86mmol)在MeOH(4mL)中的搅拌溶液中添加TFA(4mL)。在室温下搅拌2h后，将反应混合物在减压下浓缩并将残余物用离子交换树脂处理，以给出标题化合物中间体72(304mg，100％产率)，将其不经过进一步纯化而直接用于下一步骤。

实例A25

中间体73的制备

在0℃下，向中间体60(500mg，1.05mmol)在DCM(9mL)中的搅拌溶液中缓慢添加TFA(3mL)。将反应混合物在室温下搅拌3h。将反应混合物浓缩。将所希望的中间体的TFA盐用离子交换树脂处理，以给出呈黄色固体(400mg，粗品)的中间体73，将其不经过进一步纯化而直接用于下一步骤。

中间体74的制备

在0℃下，向中间体73(400mg，1.05mmol)、3-(1H-吡唑-3-基)苯甲醛(CAS#：179057-26-2)(235mg，1.36mmol)和Ti(i-PrO)₄(300mg，1.05mmol)在DCE(10mL)中的搅拌混合物中分批添加NaBH(OAc)₃(668mg，3.15mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。随后，将反应混合物用NaHCO₃水溶液淬灭，并将生成物用DCM萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。将残余物通过柱色谱法(DCM/MeOH(从50:1至30:1，v/v)洗脱)进行纯化，以给出呈白色固体的中间体74(380mg，产率：68％)。

实例A26

中间体75的制备

将中间体60(700mg，1.47mmol)在甲胺(在THF中的2M)(10mL)中的溶液中在高压釜中在100℃下搅拌过夜。将冷却的反应混合物浓缩，以给出粗制所希望的中间体75(800mg)，将其不经过进一步纯化而直接用于下一步骤。

中间体76的制备

将中间体75(800mg，粗产物，约1.70mmol)在HCl/MeOH(12mL)中的溶液中在室温下搅拌10h。将反应混合物浓缩。将粗产物用离子交换树脂处理，以给出呈黄色固体(700mg，粗产物)的所希望的中间体76，将其不经过进一步纯化而直接用于下一步骤。

实例A27

中间体77的制备

向1-苯基环丙烷-1-胺(CAS#：41049-53-0)(400mg，3mmol)和叔丁基6-氧代-2-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酸酯(CAS#：1363382-39-1)(1.0g，4.5mmol)在THF(10mL)中的搅拌混合物中在室温下添加AcOH(180mg，3mmol)。在室温下搅拌4h后，分批添加NaBH(OAc)₃(1.91g，9.01mmol)。将所得混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物用H₂O(20mL)稀释并用EtOAc(20mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(20mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(洗脱液：PE/EA＝3/1，v/v)进行纯化，以给出呈黄色胶状物的中间体77(240mg，23％产率)。

中间体78的制备

在0℃下，向中间体77(240mg，0.7mmol)在EtOAc(3mL)中的搅拌溶液中添加HCl(在1,4-二噁烷中的4M)(10mL)。在室温下搅拌2h后，将反应混合物在减压下浓缩，以给出呈黄色胶状物的中间体78(330mg，粗HCl盐)，将其不经进一步纯化而直接用于下一步骤。

实例A28

中间体79的制备

向叔丁基6-氧代-2-氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酸酯(CAS#：1363382-39-1)(225mg，1.0mmol)和2-(3-氨基苯基)乙腈(CAS#：4623-24-9)(136mg，1.03mmol)在MeOH(10mL)中的搅拌溶液中添加癸硼烷(CAS#：17702-41-9)(43mg，0.35mmol)。在室温下搅拌过夜后，将反应混合物在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(洗脱液：PE/EtOAc＝3/1，v/v)进行纯化，以得到呈白色固体的中间体79(340mg，99％产率)。

中间体80的制备

向中间体79(340mg，1.0mmol)在DCM(2mL)中的溶液中添加TFA(2mL)。在室温下搅拌过夜后，将混合物浓缩，以得到中间体80(300mg，粗TFA盐)，将其不经进一步纯化而用于下一步骤。

实例A30

中间体81的制备

向2-(3-氨基苯基)乙腈(CAS#：4623-24-9)(300mg，2.28mmol)在20wt％HCl水溶液(3mL)(用冰浴冷却)中的搅拌悬浮液中滴加NaNO₂(156mg，2.28mmol)在H₂O(3mL)中的溶液。搅拌混合物同时在冰浴中冷却2h，以得到重氮盐溶液。

向AcOH(9mL)和H₂O(2mL)(用冰浴冷却)中的搅拌溶液中鼓泡SO₂(1.16g，18.2mmol)。向所得搅拌溶液中缓慢添加CuCl(57mg，0.57mmol)和重氮盐溶液。搅拌反应混合物并用冰浴冷却1h并在室温下再冷却1h。将反应混合物倾倒进冰水中并用DCM(100mL X3)萃取。将合并的有机萃取物用饱和的NaHCO₃水溶液洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，以得到中间体81(70mg，14％产率)，将其不经进一步纯化而直接用于下一步骤。

中间体82的制备

向叔丁基7-氨基-2-氮杂螺[4.4]壬烷-2-甲酸酯(CAS#：1341037-08-8)(75mg，0.32mmol)在DCM(1mL)中的搅拌溶液中添加中间体81(70mg，0.32mmol)和Et₃N(65mg，0.64mmol)。将反应在室温下搅拌过夜。将反应混合物浓缩，以得到中间体82(130mg，粗品)，将其不经过进一步纯化而直接用于下一步骤。

中间体83的制备

向中间体82(130mg，粗产物，约0.31mmol)在MeOH(2mL)中的搅拌溶液中添加TFA(1mL)。在室温下搅拌1h后，将混合物在减压下浓缩，以给出呈棕色油状物的中间体83(150mg，粗TFA盐)，将其不经进一步纯化而直接用于下一步骤。

实例A31

中间体84和85的制备

经由分别与用于制备中间体82和中间体83所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，分别制备中间体84和中间体85(HCl盐)。将HCl用作酸替换TFA用于制备中间体85。

实例A32

中间体86的制备

向叔丁基7-氨基-2-氮杂螺[4.4]壬烷-2-甲酸酯(CAS#：1341037-08-8)(50mg，0.21mmol)在DMF(1mL)中的搅拌溶液中添加4-(氰甲基)苯甲酸(CAS#：50685-26-2)(34mg，0.21mmol)、HATU(119mg，0.31mmol)和DIPEA(54mg，0.42mmol)。将反应在室温下搅拌过夜。将反应混合物用水(50mL)稀释，并用EtOAc(50mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用水(50mL X 3)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，以给出中间体86(70mg，86％产率)，将其不经进一步纯化而直接用于下一步骤。

中间体87的制备

向中间体86(70mg，0.183mmol)在MeOH(2mL)中的搅拌溶液中添加TFA(1mL)。在室温下搅拌1h后，将反应混合物在减压下浓缩，以给出呈棕色油状物的中间体87(90mg，粗TFA盐)，将其不经进一步纯化而直接用于下一步骤。

实例A33

中间体88和89的制备

经由分别与用于制备中间体86和中间体87所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，分别制备中间体88和中间体89(TFA盐)。

实例A34

中间体90的制备

向叔丁基7-氨基-2-氮杂螺[4.4]壬烷-2-甲酸酯(CAS#：1341037-08-8)(50mg，0.21mmol)在DCM(1mL)中的搅拌溶液中添加苯甲酰氯(44mg，0.31mmol)和Et₃N(42mg，0.42mmol)。将反应在室温下搅拌过夜。将反应混合物浓缩，以给出呈棕色油状物的中间体90(70mg，粗产物，100％产率)，将其不经过进一步纯化而直接用于下一步骤。

中间体91的制备

通过与用于制备中间体87所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，制备中间体91(TFA盐)。

实例A35

中间体92的制备

向叔丁基7-氧代-2-氮杂螺[4.4]壬烷-2-甲酸酯(CAS#：1319716-42-1)(60mg，0.251mmol)和2-(4-氨基-2-氟苯基)乙腈(CAS#：180146-78-5)(38mg，0.251mmol)在MeOH(10mL)中的搅拌溶液中添加AcOH(一滴)。将反应在室温下搅拌12h。添加NaBH₃CN(32mg，0.502mmol)并将反应在室温下再搅拌2h，将反应混合物用水(20mL)稀释并用EtOAc(50mL X3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩滤液。将残余物通过硅胶色谱(PE/EA(4/1，v/v)洗脱)进行纯化，以给出呈黄色油状物的中间体92(56mg，60％)。

中间体93的制备

向中间体92(56mg，0.150mmol)在DCM(5mL)中的搅拌溶液中添加HCl/1,4-二噁烷(4M)(5mL)。将反应在室温下搅拌1h。将反应混合物浓缩，以给出中间体93(40mg，粗HCl盐)，将其不经过进一步纯化而用于下一步骤。

实例A36

中间体94、95、96、97、98和99的制备

通过使用与用于制备中间体93(经由中间体92)所述的类似的反应方案，由叔丁基7-氧代-2-氮杂螺[4.4]壬烷-2-甲酸酯(CAS#：1319716-42-1)和相应的胺开始，从步骤2中其各自的起始材料制备中间体94、95、96、97、98和99。

实例A37

中间体100的制备

向中间体35(200mg，0.43mmol)在DMF(2mL)中的搅拌溶液中添加叔丁基4-(氨基甲基)哌啶-1-甲酸酯(CAS#：144222-22-0)(92mg，0.43mmol)、HATU(196mg，0.52mmol)和DIPEA(168mg，1.29mmol)。将反应在室温下搅拌3h。将反应混合物用水(20mL)稀释，并用EtOAc(20mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用水(20mL X 3)洗涤、经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩滤液。将残余物通过硅胶色谱法(DCM/MeOH(20/1，v/v)洗脱)进行纯化，以给出中间体100(238mg，84％产率)。

中间体101的制备

向中间体100(238mg，0.36mmol)在DCM(2mL)中的搅拌溶液中添加TFA(1mL)。将反应在室温下搅拌1h。将反应混合物浓缩，以给出呈棕色油状物中间体101(218mg，粗TFA盐，100％产率)，将其不经过进一步纯化而直接用于下一步骤。

实例A38

中间体102的制备

向中间体35(300mg，0.65mmol)在DMF(10mL)中的搅拌溶液中在室温下添加HATU(247mg，0.65mmol)和DIPEA(251mg，1.95mmol)。将反应在室温下搅拌5分钟并添加叔丁基哌嗪-1-甲酸酯(CAS#：57260-71-6)(145mg，0.78mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1h。将混合物倾倒进H₂O(50mL)中并用EtOAc(50mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用H₂O、盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩滤液，以给出呈黄色油状物的中间体102(279mg，68％产率)。

实例A39

中间体103的制备

向叔丁基4-(2-氨基乙基)哌嗪-1-甲酸酯(CAS#：192130-34-0)(297mg，1.68mmol)和中间体35(600mg，1.29mmol)在DMF(4mL)中的搅拌悬浮液中在室温下添加HOBT(350mg，2.59mmol)、EDCI(498mg，2.59mmol)和DIPEA(502mg，3.89mmol)。将反应在室温下搅拌过夜。将反应混合物用饱和的NH₄Cl水溶液(50mL)稀释，沉淀固体。将所得混合物过滤。收集滤饼并干燥以给出中间体103(600mg，68％产率)。

中间体104的制备

向中间体103(600mg，0.89mmol)在MeOH(12mL)中的搅拌溶液中添加HCl/1,4-二噁烷(4M)(4mL)。将反应在室温下搅拌5h。将反应混合物浓缩，以给出中间体104(600mg，粗HCl盐)，将其不经过进一步纯化而用于下一步骤。

实例A40

中间体105和106的制备

经由分别与用于制备中间体100和中间体104所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，分别制备中间体105和中间体106(HCl盐)。

实例A41

中间体107和108的制备

经由分别与用于制备中间体100和中间体104所述的类似的反应方案，使用HCl/MeOH(3M)替换HCl/1,4-二噁烷(4M)用于Boc脱保护，由各自的起始材料开始，分别制备中间体107和中间体108(HCl盐)。

实例A42

中间体109和110的制备

中间体109的制备

将3-(N-Boc-氨基甲基)氮杂环丁烷(CAS#：91188-15-7)(300mg，1.612mmol)、甲磺酰氯(202mg，1.774mmol)和Et₃N(488mg，4.836mmol)在DCM(10mL)中的溶液在室温下搅拌3h。将反应混合物用水(20mL)稀释并用EtOAc(50mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液并将残余物通过硅胶色谱法(CH₂Cl₂/MeOH(20/1，v/v)洗脱)进行纯化，以给出呈黄色固体的中间体109(357mg，84％产率)。

中间体110的制备

向中间体109(357mg，1.352mmol)在DCM(10mL)中的搅拌溶液中添加TFA(10mL)。将反应混合物在室温下搅拌3h，并且然后浓缩，以给出中间体110(220mg，粗TFA盐)，将其不经进一步纯化而用于下一步骤。

实例A43

中间体111和112的制备

中间体111的制备

向叔丁基2-甲酰基-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸酯(CAS#：203662-55-9)(150mg，0.627mmol)和二甲胺(在MeOH中的2M)(0.63mL，1.26mmol)在MeOH(4mL)中的搅拌溶液中在室温下添加NaBH₃CN(118mg，1.88mmol)。将反应在室温下搅拌5h。将反应混合物用水(20mL)稀释并用EtOAc(50mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，以给出粗中间体111(120mg)，将其不经进一步纯化而用于下一步骤。

中间体112的制备

向粗中间体111(120mg，约0.627mmol)在MeOH(5mL)中的搅拌溶液中在室温下添加浓HCl(12M，3mL)。将反应在室温下搅拌1h。将反应混合物浓缩至干燥，得到中间体112(100mg，粗HCl盐)，将其不经过进一步纯化而用于下一步骤。

实例A44

中间体113和114的制备

中间体113的制备

向N,1-二甲基-1H-吡唑-4-胺(CAS#：948572-94-9)(50mg，0.450mmol)在MeOH(1mL)中的搅拌溶液中在室温下添加叔丁基2-甲酰基-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸酯(CAS#：203662-55-9)(162mg，0.68mmol)。将反应在室温下搅拌30分钟。添加NaBH₃CN(57mg，0.90mmol)。将反应在室温下搅拌过夜。将反应混合物用水(50mL)稀释，并用EtOAc(50mL X3)萃取。将合并的有机萃取物用水(50ml X 3)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩滤液，以给出粗中间体113(150mg)，将其不经进一步纯化而直接用于下一步骤。

中间体114的制备

向中间体113(150mg，粗产物，约0.450mmol)在MeOH(2mL)中的搅拌溶液中在室温下添加TFA(1mL)。将反应在室温下搅拌1h。将反应混合物浓缩，以给出呈棕色油状物的中间体114(160mg，粗TFA盐)，将其不经过进一步纯化而直接用于下一步骤。

实例A45

中间体115和116的制备

中间体115的制备

向叔丁基2-甲酰基-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸酯(CAS#：203662-55-9)(120mg，0.501mmol)在MeOH(3.0mL)中的搅拌溶液中在室温下添加5-氨基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(CAS#：95-23-8)(85mg，1.0mmol)和癸硼烷(11mg，0.1mmol)。将反应在室温下搅拌过夜。将反应混合物用水(10mL)稀释并用CH₂Cl₂(20mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并过滤。将滤液在真空中浓缩，以给出粗中间体115(220mg)，将其不经进一步纯化而用于下一步骤。

中间体116的制备

向中间体115(220mg，粗产物，约0.501mmol)在MeOH(4.0mL)中的搅拌溶液中添加HCl/1,4-二噁烷(4M)(4.0mL)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物在真空中浓缩，以给出所希望的中间体116(250mg，粗HCl盐)，将其不经过进一步纯化而用于下一步骤。

实例A46

中间体117和118的制备

中间体117的制备

向2-(4-氨基-2-氟苯基)乙腈(CAS#：180146-78-5)(220mg，1.47mmol)和叔丁基2-甲酰基-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸酯(CAS#：203662-55-9)(330mg，1.46mmol)在MeOH(4mL)中的搅拌溶液中在室温下添加癸硼烷(53mg，0.44mmol)。将反应在室温下搅拌8h。将反应混合物用水(20mL)稀释并用EtOAc(50mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液并将残余物通过硅胶色谱法(PE/EA(10/1，v/v)洗脱)进行纯化，以给出呈白色固体的中间体117(380mg，72％产率)。

中间体118的制备

向中间体117(380mg，1.06mmol)在DCM(2mL)中的搅拌溶液中在室温下添加HCl/1,4-二噁烷(4M)(2mL)。将反应混合物在室温下搅拌3h。将反应混合物浓缩，以得到呈白色固体的中间体118(250mg，粗HCl盐，91％产率)。

实例A47

中间体119和120的制备

中间体119的制备

向叔丁基2-甲酰基-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸酯(CAS#：203662-55-9)(225mg，1.0mmol)和2-(3-氨基苯基)乙腈(CAS#：4623-24-9)(136mg，1.03mmol)在MeOH(10mL)中的搅拌溶液中在室温下添加癸硼烷(43mg，0.35mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(PE/EtOAc(3/1，v/v)洗脱)进行纯化，以得到呈黄色固体的中间体119(340mg，99％产率)。

中间体120的制备

在室温下，向中间体119(340mg，1.0mmol)在DCM(2mL)中的搅拌溶液中添加TFA(2mL)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物浓缩，以得到中间体120(400mg，粗TFA盐)，将其不经过进一步纯化而用于下一步骤。

实例A48

中间体121和122的制备

经由分别与用于制备中间体119和中间体120所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，分别制备中间体121和中间体122。中间体122呈游离碱(将反应混合物用NaHCO₃水溶液碱化)获得。

实例A49

中间体123和124的制备

经由分别与用于制备中间体119和中间体120所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，分别制备中间体123和中间体124(TFA盐)。

实例A50

中间体125和126的制备

经由分别与用于制备中间体119和中间体112所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，分别制备中间体125和中间体126(HCl盐)。

实例A51

中间体127、128、129、130、131、132、133和134的制备

通过与用于制备中间体120或中间体116所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，从步骤2(还原性胺化并且然后脱保护)中其各自的起始材料制备中间体127、128、129、130、131、132、133和134。

实例A52

中间体135、136、137和138的制备

中间体135的制备

向5-硝基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(CAS#：93-84-5)(1.00g，5.58mmol)、2-(4-(甲磺酰基)哌嗪-1-基)乙醇(CAS：72388-13-7)(1.16g，5.58mmol)和Ph₃P(2.93g，11.16mmol)在THF(20mL)中的搅拌溶液中在Ar气氛下在0℃下添加DEAD(1.94g，11.16mmol)。将反应在Ar气氛下在室温下搅拌16h。将所得混合物浓缩并将残余物通过硅胶色谱法(PE/EA＝5/1，v/v)进行纯化，以给出不纯的所希望的产物(500mg)，将其通过制备型HPLC(Waters2767/Qda，柱：SunFire 19*250mm 10um，流动相A：0.1％TFA/H₂O，B：ACN)进一步纯化。将所得级分通过NaHCO₃(固体)碱化，用ErOAc(10mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(20mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，以给出呈白色固体的所希望的产物(两种异构体的混合物，约180mg)。然后将产物通过SFC(SFC80，Waters；IA-H(2.5*25cm，2.5*25cm，10um；A：超临界CO₂，流动相B：MeOH/NH₃(100/0.1)；A:B＝67/33；流速：60mL/min；柱温度(T)：25℃：背压(BPR)：100巴)分离，以给出呈白色固体的中间体135(86mg，4％产率，峰2)。

中间体136的制备

在室温下，向中间体135(86mg，0.233mmol)在MeOH(5mL)中的溶液中添加10％Pd/C(10mg)。将反应在H₂气氛下在室温下搅拌5h。将混合物过滤并浓缩滤液以得到呈浅黄色固体的中间体136(65mg)。

经由分别与用于制备中间体119和中间体116所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，分别制备中间体137和中间体138(HCl盐)。

实例A53

中间体139、140、141和142的制备

中间体139的制备

向叔丁基6-硝基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-甲酸酯(CAS#：438200-95-4)(630mg，2.26mmol)、2-(4-(甲磺酰基)哌嗪-1-基)乙醇(CAS#：72388-13-7)(940mg，4.52mmol)和PPh₃(11186mg，4.52mmol)在THF(30mL)中的搅拌溶液中在Ar气氛下在0℃添加DEAD(984mg，5.65mmol)。将反应混合物在Ar气氛下在50℃下搅拌过夜。将反应混合物用H₂O(50mL)稀释并用EtOAc(3X50mL)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(50mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩滤液。将残余物通过硅胶色谱法(PE:EA＝1:1，v/v)进行纯化。将级分进行浓缩。将残余物溶解在PE/EA(3/1，v/v，20mL)中，在室温下搅拌16h，在此期间，形成白色沉淀物。将混合物过滤并收集滤饼，以给出呈白色固体的中间体139(1.36g，59％产率)。

中间体140的制备

向中间体139(600mg，1.28mmol)在THF(10mL)中的搅拌溶液中在室温下添加NH₄Cl(410mg，7.68mmol)和Zn(498mg，7.68mmol)。将反应在60℃下搅拌3h。将反应混合物过滤并浓缩滤液。将残余物通过硅胶色谱法(PE:EA＝1:1)进行纯化，以得到呈白色固体的中间体140(230mg，40％产率)。

经由分别与用于制备中间体119和中间体116所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，分别制备中间体141和中间体142(HCl盐)。

实例A55

中间体146、147、148和149的制备

中间体146的制备

将2-(溴甲基)-4-硝基苯甲腈(CAS#：852203-01-1)(310mg，1.29mmol)、吗啉(336mg，3.86mmol)和K₂CO₃(532mg，3.86mmol)在CH₃CN(6mL)中的混合物在Ar下在80℃下搅拌过夜。将冷却的反应混合物过滤并浓缩滤液。将残余物通过硅胶色谱法(PE/EtOAc(从10:1至5:1，v/v)洗脱)进行纯化，以给出呈黄色固体的中间体146(300mg，94％产率)。

中间体147的制备

将中间体146(300mg，1.21mmol)和10％Pd/C(30mg)在MeOH(10mL)中的悬浮液在H₂下在30℃下搅拌2h。将反应混合物通过硅藻土过滤并浓缩滤液，以给出呈白色固体的粗中间体147(250mg，产率：95％)，将其直接用于下一步。

经由分别与用于制备中间体119和中间体120所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，分别制备中间体148和中间体149(TFA盐)。

实例A56

中间体150、151、152和153的制备

经由分别与用于制备中间体146、中间体147、中间体119和中间体120所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，分别制备中间体150、中间体151、中间体152和中间体153(TFA盐)。

实例A57

中间体154、155和156的制备

中间体154的制备

向4-氨基-2,3-二氟苯甲酸(CAS#：194804-85-8)(500mg，2.89mmol)在DMF(10mL)中的搅拌溶液中在室温下添加HOBt(585mg，4.34mmol)、EDCI(832mg，4.34mmol)、Et₃N(1.2g，11.56mmol)和甲胺盐酸盐(MeNH₂HCl)(390mg，5.78mmol)。将反应在室温下搅拌过夜。将反应混合物用水(50mL)稀释，并用EtOAc(50mL X 3)萃取。将合并的有机层用水(50mLX 3)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(DCM/MeOH(从30/1至20/1，v/v)洗脱)进行纯化，以给出呈棕色固体的中间体154(360mg，67％产率)。

经由分别与用于制备中间体119和中间体120所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，分别制备中间体155和中间体156(TFA盐)。

实例A58

中间体157、158和159的制备

中间体157的制备

将4-氨基-3,5-二氟苯甲酸(CAS#：500577-99-1)(500mg，2.89mmol)、甲胺盐酸盐(393mg，5.78mmol)、HATU(1098mg，2.89mmol)和Et₃N(875mg，8.67mmol)在THF(10mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物用水(20mL)稀释并用EtOAc(50mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液并将残余物通过硅胶色谱法(PE/EtOAc(3/1，v/v)洗脱)进行纯化，以给出呈白色固体的中间体157(400mg，74％)。

经由分别与用于制备中间体119和中间体116所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，分别制备中间体158和中间体159(HCl盐)。

实例A59

中间体160、161、162、163、164和165的制备

中间体160的制备

向甲基2-溴-4-硝基苯甲酸酯(CAS#：100959-22-6)(2.00g，7.69mmol)在1,4-二噁烷(20mL)中的溶液中添加H₂O(10mL)、Cs₂CO₃(5.00g，15.38mmol)、1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶(CAS#：454482-11-2)(2.60g，11.54mmol)和Pd(dppf)Cl₂(562mg，0.77mmol)。将反应在Ar下在90℃下搅拌2h。将冷却的反应混合物用水(200mL)稀释，并用EtOAc(200mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用水(200mLX 3)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(洗脱液：DCM/MeOH从40/1至30/1，v/v)进行纯化，以给出呈棕色油状物的中间体160(2.1g，99％产率)。

中间体161的制备

向中间体160(2.10g，7.61mmol)在THF(14mL)中的搅拌溶液中添加LiOH水溶液(2M，7mL)。将反应在50℃下搅拌3h。将反应混合物浓缩。将残余物悬浮于水(20mL)中并用HCl水溶液(5M)酸化直至pH等于4。将所得沉淀物通过过滤收集并在减压下干燥，以给出呈棕色固体的中间体161(1.10g，55％产率)。

中间体162的制备

向中间体161(500mg，1.91mmol)在DMF(20mL)中的搅拌溶液中添加甲胺盐酸盐(644mg，9.54mmol)、HATU(1.50g，3.82mmol)和DIPEA(4mL)。将反应在60℃下搅拌过夜。将冷却的反应混合物用水(50mL)稀释，并用EtOAc(50mL X 3)萃取。将合并的有机层用水(50mLX 3)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，以给出呈棕色固体的中间体162(524mg，100％产率)，将其不经进一步纯化而直接用于下一步骤。

中间体163的制备

向中间体162(715mg，2.60mmol)在MeOH(7mL)中的溶液中添加PtO₂(70mg)。将反应在H₂气氛下在室温下搅拌3h。将反应混合物过滤并用MeOH洗涤滤饼。将合并的滤液浓缩，以给出中间体163(642mg，100％产率)，将其不经进一步纯化而直接用于下一步骤。

经由分别与用于制备中间体119和中间体120所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，分别制备中间体164和中间体165(TFA盐)。

实例A60

中间体166、167、168和169的制备

中间体166的制备

向中间体161(310mg，1.34mmol)和吗啉(349mg，4.00mmol)在DMF(5mL)中的悬浮液中在室温下添加HATU(1.05g，2.67mmol)和DIPEA(861mg，6.68mmol)。将反应在室温下搅拌过夜。将反应混合物用饱和氯化铵水溶液(50mL)稀释。将沉淀固体通过过滤收集并干燥，以给出中间体166(450mg，75％纯度)。

中间体167的制备

向中间体166(300mg，粗产物，约0.89mmol)在MeOH(50mL)中的溶液中添加10％Pd/C(30mg)和PtO₂(30mg，10％)。将反应在H₂下在40℃下搅拌16h。将反应混合物过滤并浓缩滤液，以给出中间体167(400mg，不纯的)，将其不经进一步纯化而用于下一步骤。

经由分别与用于制备中间体119和中间体120所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，分别制备中间体168和中间体169(TFA盐)。

实例A61

中间体170、171和172的制备

中间体170的制备

向2-甲基-2-(4-硝基苯基)丙二腈(CAS#：70877-27-9)(350mg，粗产物)在THF(5mL)中的溶液中添加NH₄Cl(932mg，17.41mmol)和Zn(1.1g，17.41mmol)。将反应在80℃下搅拌3h。将反应混合物过滤并浓缩滤液。将深色油状物残余物通过制备型TLC(PE:EA＝1:1，v/v)进行纯化，以得到呈白色固体的中间体170(150mg)。

经由分别与用于制备中间体119和中间体120所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，分别制备中间体171和中间体172(TFA盐)。

实例A62

中间体173、174、175、176和177的制备

中间体173的制备

向2-溴-4-硝基苯甲酸(CAS#：16426-64-5)(1.23g，5mmol)在DCM(15mL)中的搅拌溶液中在室温下添加EDCI(1.43g，7.5mmol)、HOBt(1.02g，7.5mmol)、DIPEA(1.9g，15mmol)和甲胺盐酸盐(502mg，7.5mmol)。将反应在室温下搅拌12h。将反应混合物浓缩。将残余物溶解在EtOAc(20mL)中，用H₂O(10ml)和盐水(10mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液，并将残余物通过硅胶色谱法(洗脱液：PE:EA＝4:1，v/v)进行纯化以得到呈黄色固体的中间体173(1.1g，84％产率)。

中间体174的制备

向中间体173(1.1g，4.24mmol)在THF(10mL)中的搅拌溶液中在Ar下在室温下添加Et₃N(10ml)、Pd(PPh₃)₄(300mg)和N,N-二甲基丙-2-炔-1-胺(CAS#：7223-38-3)(527mg，6.36mmol)。将反应混合物在室温下搅拌24h。将反应混合物浓缩。将残余物溶解在EtOAc(20mL)中，用H₂O(10mL)和盐水(10mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并过滤。浓缩滤液并将残余物通过硅胶色谱法纯化，以得到呈白色固体的中间体174(600mg，54％产率)。

中间体175的制备

在室温下，向中间体174(600mg，2mmol)在MeOH(20mL)中的溶液中添加Pd(OH)₂(100mg)。将反应混合物在H₂(15psi)下在60℃下搅拌5h。将冷却的反应混合物过滤。浓缩滤液以给出中间体175(400mg，85％产率)。

经由分别与用于制备中间体119和中间体116所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，分别制备中间体176和中间体177(HCl盐)。

实例A63

中间体178、179、180和181的制备

经由与用于制备中间体119所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，制备中间体178。

中间体179的制备

将中间体178(561mg，1.5mmol)和NaOH(1.20g，30mmol)在THF(10mL)、H₂O(10mL)和MeOH(10mL)中的混合物在50℃下搅拌过夜。将反应混合物浓缩并用浓HCl酸化直至pH等于2。将所得混合物用EtOAc(30mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(50mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，以得到呈黄色固体的中间体179(480mg，89％产率)。

中间体180的制备

将中间体179(480mg，1.3mmol)、甲胺盐酸盐(174mg，2.6mmol)、HOBT(270mg，1.95mmol)、EDCI(384mg，1.95mmol)和Et₃N(525mg，5.2mmol)在DMF(20mL)中的混合物中在50℃下搅拌过夜。将冷却的反应混合物用H₂O(60mL)稀释并用EtOAc(30mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(50mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，以得到呈无色油状物的中间体180(410mg，84％产率)。

用于制备中间体120所述的，从各自的起始材料开始。

实例A64

中间体182、183和184的制备

经由与用于制备中间体119所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，制备中间体182。

中间体183的制备

将中间体182(300mg，0.796mmol)、N¹,N¹-二甲基乙基-1,2-二胺(700mg，7.96mmol)和K₂CO₃(329mg，2.387mmol)在DMSO(10mL)中的混合物中在室温下搅拌72h。将反应混合物浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(CH₂Cl₂/MeOH(3/1)洗脱)进行纯化，以给出呈黄色油状物的中间体183(328mg，92％产率)。

经由与用于制备中间体120所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，制备中间体184(TFA盐)。

实例A65

中间体185、186和187的制备

经由与用于制备中间体119所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，制备中间体185。

中间体186的制备

将中间体185(345mg，1.0mmol)、1-甲基哌嗪(500mg，5.0mmol)和K₂CO₃(690mg，5.0mmol)在DMF(5mL)中的混合物在120℃下在密封管中在Ar下搅拌12h。将反应混合物浓缩并将残余物通过硅胶色谱法(DCM/MeOH＝10/1，v/v)进行纯化，以得到呈黄色油状物的中间体186(60mg，14％产率)。

经由与用于制备中间体120所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，制备中间体187(TFA盐)。

实例A66

中间体188、189、190、191、192和193的制备

中间体188的制备

向2-羟基-4-硝基苯甲腈(CAS#：39835-14-8)(500mg，3.05mmol)在DMF(50mL)中的搅拌溶液中添加Cs₂CO₃(1.5g，4.57mmol)和叔丁基4-(溴甲基)哌啶-1-甲酸酯(CAS#：158407-04-6)(1.0g，3.66mmol)。将反应在120℃下搅拌过夜。将冷却的反应混合物用水(50mL)稀释，并用EtOAc(50ml X 3)萃取。将合并的有机萃取物用水(50ml X 3)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(PE/EtOAc(从5/1至3/1，v/v)洗脱)进行纯化，以给出呈黄色固体的中间体188(364mg，33％产率)。

通过与用于制备中间体120所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，制备中间体189(TFA盐)。

中间体190的制备

向中间体189(312mg，1.20mmol)在MeOH(5mL)和DCM(5mL)中的搅拌溶液中添加HCHO(在H₂O中的37％，485mg，5.98mmol)和AcOH(108mg，1.79mmol)。将所得混合物在室温下搅拌1h，之后添加NaBH(OAc)₃(507mg，2.39mmol)。将反应在室温下搅拌过夜。将反应混合物用水(50mL)稀释，并用DCM(50ml X 3)萃取。将合并的有机萃取物经无水Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩，以给出中间体190(329mg，100％产率)。

经由分别与用于制备中间体44、中间体119和中间体120所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，分别制备中间体191、中间体192和中间体193(TFA盐)。

实例A67

中间体194、195、196和197的制备

经由分别与用于制备中间体119、中间体179、中间体180和中间体120所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，分别制备中间体194、中间体195、中间体196和中间体197(TFA盐)。

实例A68

中间体198、199、200和201的制备

经由与用于制备中间体119所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，制备中间体198。

中间体199的制备

向中间体198(800mg，2.02mmol)在THF(10mL)中的搅拌溶液中在室温下添加NaOH水溶液(2M，6.0mL)。将反应在80℃下搅拌16h。将反应混合物浓缩。将生成物用HCl水溶液(1M)酸化直至pH等于4。将所得混合物过滤并干燥滤饼，以给出呈白色固体的中间体199(600mg，77％产率)，将其不经进一步纯化而用于下一步骤。

经由分别与用于制备中间体166和中间体120所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，分别制备中间体200和中间体201(TFA盐)。

实例A69

中间体202、203、204、205、206和207的制备

中间体202的制备

向丙二腈(3.0g，45.45mmol)在DMF(40mL)中的搅拌溶液中在Ar下在0℃下分部分地添加NaH(2.6g，68.18mmol)。无气体产生并且颜色从粉红色变至黄色后，将2-溴-1-氟-4-硝基苯(CAS#：701-45-1)(5.0g，22.73mmol)添加至混合物中并将混合物在80℃下搅拌过夜。将反应混合物冷却并缓慢添加HCl水溶液(5至6M)。将所得的混合物用EtOAc(500mL X3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并在真空中浓缩滤液，以得到呈棕色油状物的粗中间体202(6.2g)。将产物不进行进一步纯化而用于下一步骤。

中间体203的制备

向中间体202(6.2g，粗产物)在DMF(4mL)中的搅拌溶液中在0℃下分批添加NaH(1.3g，34.05mmol)。搅拌0.5h后，将CH₃I(3.2g，22.70mmol)添加到混合物中并将反应在80℃下搅拌过夜。将混合物冷却并用HCl水溶液(6M，100mL)稀释。将生成物用EtOAc(500mL X3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并在真空中浓缩，以得到呈棕色油状物的所希望的产物。将油状物通过硅胶柱色谱法(DCM:MeOH＝10:1，v/v)进行纯化，以得到呈黄色油状物的中间体203(4.1g，64％产率，经2步)。

经由分别与用于制备中间体170、119、160和120所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，分别制备中间体204、205、206和207(TFA盐)。

实例A70

中间体208、209、210和211的制备

经由与用于制备以下在‘使用方法’列中的中间体所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，分别制备中间体208、209、210(TFA盐)和211。

实例A71

中间体212、213和214的制备

经由与用于制备以下在‘使用方法’列中的中间体所述的类似的反应方案，分别制备中间体212、213、214(HCl盐)，

实例A72

中间体215的制备

经由与用于制备化合物249所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，制备中间体215。

实例A73

中间体216、217、218、219和220的制备

中间体216的制备

向3-氯丙-1-炔(CAS#：624-65-7)(500mg，6.7mmol)在MeCN(10mL)中的搅拌溶液中在室温下添加1-(甲磺酰基)哌嗪(CAS#：55276-43-2)(1.1g，6.7mmol)和K₂CO₃(2.8g，20.1mmol)。将反应混合物在50℃下搅拌16h并冷却至室温。然后，将反应混合物用水(100mL)稀释并用EA(100mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(100mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩滤液。将残余物通过硅胶色谱法(DCM:MeOH＝20:1至10:1，v/v)进行纯化，以给出呈白色固体的中间体216(1.1g，81％产率)。

中间体217的制备

将中间体216(1.6g，8.1mmol)、甲基2-溴-4-硝基苯甲酸酯(CAS#：100959-22-6)(2.1g，8.1mmol)、CuI(308mg，1.62mmol)、Pd(dppf)Cl₂(592mg，0.81mmol)和Et₃N(2.46g，24.3mmol)在DMF(60mL)中的混合物在60℃下搅拌16h，并冷却至室温。然后，将反应混合物过滤并浓缩滤液。将残余物用水(20mL)稀释并用EA(50mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(50mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩滤液。将残余物通过硅胶色谱法(洗脱液：PE:EA从5:1至1:1，v/v)进行纯化，以给出呈白色固体的中间体217(2.6g，84％产率)。

中间体218的制备

向中间体217(200mg，0.52mmol)在MeOH(5mL)中的溶液中在室温下添加10％Pd/C(50mg)。将反应混合物在H₂气氛下在室温下搅拌过夜。将反应混合物过滤并浓缩滤液，以给出呈白色固体的粗中间体218(200mg)，将其不经进一步纯化而直接用于下一步骤。

中间体219的制备

向中间体218(100mg，0.28mmol)在MeOH(10mL)中的搅拌溶液中在室温下添加KOH水溶液(5M)(10mL)。将反应混合物在50℃下搅拌16h。将冷却的反应混合物直接通过反相色谱(C18，100％H₂Ov/v)进行纯化，以给出呈无色油状物的中间体219(100mg，不纯的)

中间体220的制备

将中间体219(100mg，约0.3mmol)、甲胺盐酸盐(102mg，1.5mmol)、HATU(171mg，0.45mmol)和DIPEA(232mg，1.8mmol)在DMF(5mL)中的混合物在室温下搅拌16h。将反应混合物用水(50mL)稀释并用EA(10mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(50mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。将残余物通过制备型TLC(DCM:MeOH＝10:1)进行纯化，以给出呈白色固体的中间体220(30mg)。

实例A75

中间体226、227、228和229的制备

中间体226的制备

将6-氟烟酸甲酯(CAS#：1427-06-1)(106mg，0.69mmol)、叔丁基2-氨基-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸酯(CAS#：1239319-94-8)(155mg，0.69mmol)和K₂CO₃(283mg，2.06mmol)在DMF(2mL)中的混合物在120℃下搅拌过夜。将混合物倾倒进水中并用EtOAc(15mL X 3)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，以给出呈浅黄色固体的中间体226(453mg，84％产率)。

中间体227的制备

将中间体226(200mg，0.55mmol)、NaOH(90mg，1.66mmol)和THF/H₂O(5:1，6mL)的混合物在50℃下搅拌5小时。将混合物用水(5mL)稀释，并用1NHCl水溶液调节至pH＝4至5，用EtOAc(15mL X 3)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，以给出呈白色固体的中间体227(188mg，98％产率)。

中间体228的制备

向中间体227(190mg，0.55mmol)在DMF(2.5mL)中的溶液中在Ar下添加HATU(481mg，1.1mmol)和DIPEA(245mg，1.64mmol)。在室温下搅拌20min后，添加N¹,N¹-二甲基乙基-1,2-二胺(56mg，0.55mmol)。将所得混合物在室温下再搅拌30min。将混合物倾倒进水中并用EtOAc(15mL X 3)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，以给出呈棕色固体的中间体228(200mg，88％产率)。

中间体229的制备

将中间体228(200mg，0.48mmol)在4M HCl/二噁烷(2mL)中的混合物在室温下搅拌1小时。将溶剂经由真空去除，以给出呈HCl盐的标题化合物中间体229(160mg，95％产率)，将其不经过进一步纯化而用于下一步骤。

实例A77

中间体236、237、238和239的制备

中间体236的制备

在室温下，向叔丁基2-氨基-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸酯(CAS#：1239319-94-8)(1.86g，10mmol)在二噁烷(15mL)中的溶液中添加2-氯嘧啶-5-甲酸酯(CAS#：89793-12-4)(2.26g，10mmol)和DIEA(2.52g，20mmol)。在90℃下搅拌24h后，浓缩反应混合物，用H₂O(30mL)洗涤，用EA(3X10mL)萃取。将合并的有机层浓缩，以给出残余物，将其通过硅胶色谱法(PE:EA＝4:1)进行纯化，以得到呈白色固体的中间体236(1.2g，46.10％)。

中间体237的制备

向中间体236，叔丁基2-((5-(乙氧基羰基)嘧啶-2-基)氨基)-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸酯(1.2g，3.19mmol)在THF(10mL)和H₂O(10mL)中的溶液中添加LiOHH₂O(2.30g，9.57mmol)。在20℃下搅拌2h后，将混合物浓缩。将生成物通过HCl水溶液(1M)酸化直至pH等于4。收集沉淀物并干燥，以得到呈白色固体的中间体237(1.0g，90％产率)。

中间体238的制备

向中间体237、2-((6-(叔丁氧基羰基)-6-氮杂螺[3.4]辛-2-基)氨基)嘧啶-5-甲酸(720mg，3mmol)在DCM(3mL)中的溶液中添加EDCI(859mg，4.5mmol)、HOBt(612mg，4.5mmol)和DIEA(1.16g，9mmol)。在室温下搅拌12h后，将混合物浓缩，将残余物用EA(20mL)稀释，用H₂O(10ml)和盐水(10mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，以给出中间体238(500mg，69％产率)。

中间体239的制备

在25℃下，将中间体238(500mg，1.21mmol)在HCl/1.4-二噁烷(4M，10mL)中的溶液搅拌2h。将反应混合物浓缩，以给出呈黄色固体的中间体239(400mg，粗HCl盐)，将其不经过进一步纯化而用于下一步骤。

实例A78

中间体240和241的制备

中间体240的制备

将中间体237(348mg，1.0mmol)、吗啉(344mg，4.0mmol)、HOBT(203mg，1.5mmol)、EDCI(288mg.1.5mmol)和Et₃N(202mg，2.0mmol)在DMF(20mL)中的混合物在50℃下搅拌过夜。将冷却的反应混合物用H₂O(60mL)稀释并用EtOAc(30mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(50mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，以得到呈黄色油状物的中间体240(410mg，98％产率)。

中间体241的制备

将中间体240、叔丁基2-((5-(吗啉-4-羰基)嘧啶-2-基)氨基)-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸酯(410mg，0.98mmol)和TFA(2mL)在DCM(2mL)中的混合物在室温下搅拌2小时。反应完成后，将混合物浓缩以得到呈橙色油状物的中间体241(430mg，TFA盐)，将其不经进一步纯化而用于下一步骤。

实例A80

中间体243和244的制备

中间体243的制备

将中间体17(600mg，1.26mmol)、2,4,6-三甲基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三硼杂环己烷(790mg，6.30mmol)、Pd(dppf)Cl₂(88mg，0.12mmol)和Cs₂CO₃(822mg，2.52mmol)在甲苯(20mL)和H₂O(4mL)中的混合物在Ar下在110℃下搅拌2h。将冷却的反应混合物用H₂O(20mL)稀释并用EtOAc(20mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(40mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(石油醚/EtOAc＝3/1，v/v)进行纯化，以给出呈白色固体的中间体243(400mg，70％产率)。

中间体244的制备

将TFA(2mL)添加至中间体243(400mg，0.88mmol)在DCM(2mL)中的混合物中。将反应在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩。将残余物用在MeOH(5mL)中的阿尔伯特试剂A-21离子交换树脂处理10分钟，过滤并且浓缩，以给出呈白色固体的中间体244(300mg，96％产率)。

实例A81

中间体245、246、247和248的制备

中间体245的制备

向2-氰基乙酸甲酯(CAS#：105-34-0)(22.0g，220mmol)和4,4,4-三氟丁醛(CAS#：406-87-1)(25.0g，200mmol)在MeOH(16mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(42.0g，340mmol)和硫(7.1g，220mmol)。将反应在70℃下搅拌过夜。将冷却的反应混合物在减压下浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(洗脱液：PE:EA＝10:1，v/v)进行纯化，以得到呈浅黄色固体的中间体245(31.0g，64％产率)。

中间体246的制备

将中间体245(200mg，0.84mmol)和氯甲脒(CAS#：29671-92-9)(106mg，0.92mmol)在缩二乙二醇二甲醚(DGEDME)(2mL)中的悬浮液在160℃下用微波辐射搅拌3h。随后，将冷却的反应混合物用水稀释并过滤，以给出呈白色固体的中间体246(110mg)。

中间体247的制备

将中间体246(110mg，0.441mmol)、叔丁基6-氮杂螺[3.4]辛-2-基氨基甲酸酯(CAS#：1341038-64-9)(200mg，0.882mmol)、BOP(293mg，0.661mmol)和DBU(201mg，1.32mmol)在DMF/DMSO(2mL/2mL)中的溶液在60℃下搅拌2h。随后，将冷却的反应混合物用水稀释并用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩滤液。将残余物通过硅胶色谱法(DCM/MeOH(从100:1至50:1)洗脱)进行纯化，以给出呈黄色固体的中间体247(200mg，68％产率)。

中间体248的制备

将中间体247(200mg，0.437mmol)在HCl/MeOH(3M)(4mL)中的溶液在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩。将残余物用阿尔伯特试剂A-21离子交换树脂处理，以给出呈黄色固体(160mg)的中间体248，将其不经进一步纯化而用于下一步骤。

实例A82

中间体249、250和251的制备

中间体249的制备

将苯胺(100mg，1.07mmol)和叔丁基2-氧代-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸酯(CAS#：203661-71-6)(242mg，1.07mmol)的混合物溶解于DCE(4mL)中并添加Ti(i-PrO)₄(305mg，1.07mmol)。将混合物在室温搅拌2h。添加NaBH(OAc)₃(684mg，3.21mmol)。将所得混合物在室温下搅拌过夜。将混合物用水稀释并用EA(20mL x 3)萃取。将合并的有机萃取物在减压下浓缩，以给出粗中间体249，将其不经进一步纯化而用于下一步骤。

中间体250的制备

经由分别与用于制备中间体120和中间体24所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，分别制备中间体250(TFA盐)和中间体251。

实例A83

中间体252、253和254的制备

中间体252的制备

将6-氟烟酸(CAS#：403-45-2)(200mg，1.41mmol)、DIPEA(364mg，2.82mmol)、叔丁基(3-氨基丙基)氨基甲酸酯(CAS#：75178-96-0)(246mg，1.41mmol)和HATU(643mg，1.68mmol)在DMF(2mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。将混合物倾倒进水中并且用乙酸乙酯(5mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，以给出呈白色固体的中间体252(250mg，60％产率)，将其不经进一步纯化而用于下一步骤。

中间体253的制备

将中间体3(482mg，1.41mmol；TFA盐)、DIPEA(546mg，4.23mmol)和中间体252(419mg，1.41mmol)在DMSO(10mL)中的混合物在80℃下搅拌过夜。将冷却的反应混合物倾倒进水中并且过滤悬浮液。将滤饼用水洗涤，在真空下干燥，以给出呈白色固体的中间体253(448mg，51％产率)。

通过与用于制备中间体116所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，制备中间体254(HCl盐)。

实例A84

中间体255的制备

通过以下方案中指示的方法制备中间体255：

实例A85

通过以下方案中指示的方法制备中间体256：

实例A85

中间体258的制备

中间体258对应于CAS#：73778-92-4。

实例A86

中间体259和260的制备

中间体259对应于CAS#：114474-26-9。根据熟知的方法氢化硝基基团得到中间体260。

实例A87

中间体261的制备

通过类似于European Journal of Medicinal Chemistry[欧洲药物化学杂志],2011,46(7),2917-2929中描述的程序制备中间体261。

实例A88

中间体262的制备

通过以下方案中指示的方法制备中间体262：

实例A89

中间体263的制备

通过类似于European Journal of Medicinal Chemistry[欧洲药物化学杂志],2016,117,197-211中描述的程序制备中间体263。

实例A90

中间体264的制备

通过类似于Tetrahedron Letters[四面体快报],2010,51(24),3232-3235中描述的程序制备中间体264。

实例A91

中间体265的制备

中间体265对应于CAS#：99068-33-4

实例A92

中间体266的制备

通过以下方案中指示的方法使用熟知的合成程序制备中间体266

实例A93

中间体267的制备

通过以下方案中指示的方法制备中间体267：

实例A94

中间体268的制备

通过以下方案中指示的方法制备中间体268：

实例A95

中间体269的制备

通过以下方案中指示的方法制备中间体269：

实例A96

中间体270的制备

通过以下方案中指示的方法制备中间体270：

实例A97

中间体271的制备

通过类似于WO 201314162中描述的程序制备中间体271。

实例A98

中间体301、302和272的制备

通过以下方案中指示的方法从5-硝基-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮(CAS#：984-5)和溴乙酰胺(CAS#：683-57-8)制备中间体301：

通过以下方案中指示的方法从中间体301制备中间体272：

通过以下方案中指示的方法从中间体301制备中间体302：

实例A99

中间体273的制备

通过以下方案中指示的方法制备中间体273：

实例A100

中间体274的制备

通过以下方案中指示的方法制备中间体274：

实例A101

中间体275的制备

通过类似于WO 201657834中描述的程序制备中间体275。

实例A102

中间体276和277的制备

中间体276的制备

将叔丁基2-氧代-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸酯(800mg，3.55mmol)、2-(4-氨基苯基)乙腈(563mg，4.26mmol)、乙酸(426mg，7.09mmol)和乙腈(20mL)添加至40mL玻璃小瓶。将所得混合物在40℃下搅拌1小时，并且然后添加三乙酰氧基硼氢化钠(3.01g，14.2mmol)。将所得混合物在40℃下再搅拌1小时。将反应混合物倾倒进DCM(100mL)中然后用水(50mL x3)洗涤。将有机萃取物经无水Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩至干燥，以给出残余物，将其通过FCC(洗脱液：石油醚：乙酸乙酯从1:0至0:1)进行纯化，以给出呈黄色油状物的中间体276(800mg，64.5％产率)。

中间体277的制备

将叔丁基2-((4-(氰甲基)苯基)氨基)-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸酯中间体276(400mg，1.17mmol)、三氟乙酸(2mL)和干二氯甲烷(5mL)添加至100mL圆底烧瓶中。将所得的混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物在减压下浓缩，以给出呈黄色油状物的中间体277(500mg，粗TFA盐)。

实例A103-a

中间体279的制备

经由分别与用于制备化合物277和中间体120所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，分别制备中间体278和中间体279(TFA盐)。

实例A103-b

中间体280和281的制备

经由分别与用于制备中间体120和化合物377所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，分别制备中间体280(TFA盐)和中间体281。

实例A104-a

中间体282和283的制备

经由分别与用于制备中间体276和中间体80所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，分别制备中间体282和中间体283(TFA盐)。

实例A104-b

中间体284和285的制备

中间体284的制备

将2,4-二氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：2055107-43-0)(850mg，2.96mmol)、6-氮杂螺[3.4]辛-2-酮盐酸盐(479mg，2.96mmol)、N,N-二异丙基乙胺(1.92g，14.9mmol)和干THF(10mL)添加至50mL圆底烧瓶中，将其在75℃下搅拌5h。将混合物冷却至25℃并稀释到二氯甲烷(50mL)中，用水(20mL x3)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩，以给出粗产物，将其通过FCC(乙酸乙酯/石油醚＝0％至70％)进行纯化，给出呈白色粉末的中间体284(1.20g，90.0％纯度，通过¹H NMR，97.0％产率)。

中间体285的制备

将中间体284(1.20g，3.19mmol)和N-甲基2-吡咯烷酮(5mL)添加至微波管中，然后将甲胺(1.98g，63.8mmol，在乙醇中的30％-40％)添加至混合物中。在微波辐射下，将密封管在100℃下加热30min。将混合物冷却至25℃并稀释到二氯甲烷(40mL)中，用水(20mL x3)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩，以给出粗品，将其通过FCC(乙酸乙酯/石油醚＝0％至70％)进行纯化，以给出呈浅黄色粉末的中间体285(500mg，40.2％产率)。

实例A105

中间体286和287的制备

经由分别与用于制备中间体284和中间体285所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，分别制备中间体286和中间体287。

实例A106

中间体288和289的制备

中间体288的制备

将中间体245(3g，12.54mmol)溶解于MeCN(75ml)中。在25℃下，添加HCl(1,4-二噁烷)(75mL，300mmol)并在室温下搅拌1.5小时。然后将混合物在100℃下搅拌4小时。将混合物在减压下浓缩，以获得粗中间体288，将其无需进一步纯化而直接用于下一步骤。

中间体289的制备

将中间体288(4.5g，18.129mmol)添加至250mL圆底烧瓶中。将磷酰氯(40g，260.872mmol)分批添加至烧瓶中。将混合物在100℃下搅拌5h。将混合物在减压下浓缩，以给出残余物，将其溶于EtOAc(200mL)中。将EtOAc层倾倒进冰中并将pH用NaHCO₃(饱和水溶液)调节至10-11。将有机层用水(100mL x 3)、盐水(100mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩，以给出残余物，将其通过FCC(EA:PE＝0至5％)进行纯化，以给出呈黄色固体的中间体289。

实例A107

中间体290和291的制备

中间体290的制备

将叔丁基2-氨基-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸酯(CAS#：1239319-94-8)(100mg，0.442mmol)、3-苯甲腈-1-磺酰氯(178mg，0.883mmol)、N,N-二异丙基乙胺(172mg，1.33mmol)和干二氯甲烷(4mL)添加至40mL玻璃瓶中，将所得混合物在25℃下搅拌12h。将混合物稀释进二氯甲烷(50mL)中。将有机层用水(20mLx3)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩，以给出粗品，将其通过制备型TLC(石油醚/乙酸乙酯＝1/1，R_f＝0.2)进行纯化，以给出呈浅黄色粉末的中间体290(150mg，90.0％纯度，78.0％产率)。

中间体291的制备

将中间体290(150mg，0.383mmol)、乙腈(4mL)和盐酸/乙酸乙酯(10.0mL，40.0mmol)添加至100mL圆底烧瓶中，将其在25℃下搅拌1h。将混合物在减压下浓缩，以给出呈白色粉末的中间体291(120mg，HCl盐，90.0％纯度，86.0％产率)。

实例A108

中间体292和中间体293的制备

通过使用与用于制备中间体291(经由中间体290)所述的类似的反应方案，由叔丁基2-氨基-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸酯(CAS#：1239319-94-8)和相应的磺酰氯开始，从步骤2中其各自的起始材料制备中间体292(HCl盐)和293(HCl盐)。

实例A109

中间体294的制备

将搅拌棒、5-氯吡嗪-2-甲酸(800mg，5.05mmol)、甲胺盐酸盐(409mg，6.06mmol)、DIEA(2.61g，20.2mmol)和CH₂Cl₂(40mL)添加至50mL圆底烧瓶中。将混合物冷却至0℃。将T₃P(3.21g，5.05mmol，在EtOAc中的50％)添加至混合物中。将混合物在室温搅拌1小时。将反应混合物在减压下浓缩至干燥，以得到粗产物，将其通过快速柱色谱法(洗脱液：石油醚:乙酸乙酯＝1:0至4:6)进行纯化，以给出呈黄色固体的中间体294。

实例A110

中间体295的制备

经由与用于制备中间体294所述的类似的反应方案，由6-氯哒嗪-3-甲酸(CAS#：5096-73-1)和吗啉开始，制备中间体295。

实例A111

中间体296的制备

将搅拌棒、6-(6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)-6-氮杂螺[3.4]辛-2-胺盐酸盐(中间体3a)(500mg，HCl盐，1.32mmol)、2-氰基-4-氟苯甲酸甲酯(284mg，1.59mmol)、碳酸钾(365mg，2.64mmol)和二甲亚砜(6mL)添加至25mL圆底烧瓶中，将所得混合物加热并在60℃下搅拌12h。将混合物冷却至室温并悬浮于二氯甲烷(40mL)中并用水(20mL x 3)洗涤。将合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩，以给出粗品，将其通过制备型HPLC(柱：Xtimate C18 150*25mm*5um，流动相A：水(0.04％NH₃H₂O+10mMNH₄HCO₃)，流动相B：乙腈，流量：30mL/min，梯度条件从40％B至70％)进行纯化。收集纯级分并将溶剂在真空下蒸发以给出残余物。将残余物在乙腈(2mL)与水(10mL)之间分配。将溶液冻干，以给出呈白色粉末的中间体296。

实例A112

中间体297和298的制备

中间体297的制备

将叔丁基6-氧代-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸酯(CAS#：1181816-12-5)(250mg，1.18mmol)、三氟乙酸(2mL)和干二氯甲烷(2mL)添加至100mL圆底烧瓶中。将反应混合物在25℃下搅拌1小时。将混合物在减压下浓缩，以给出呈黄色油状物的中间体297(300mg，粗TFA盐)。

中间体298的制备

将中间体297(200mg，0.89mmol)、4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(224mg，0.89mmol)和干二氯甲烷(8mL)添加至40mL玻璃瓶中。将N,N-二异丙基乙胺(574mg，4.44mmol)添加至反应溶液中。将反应混合物在25℃下搅拌8小时。将反应混合物倾倒进DCM(30mL)中然后用水(20mL x 3)洗涤。将有机萃取物经无水Na₂SO₄干燥，过滤，并在减压下浓缩至干燥，以给出残余物，将其通过制备型TLC(SiO₂，PE:EtOAc＝1:1，Rf＝0.6)进行纯化，以给出呈黄色固体的中间体298(250mg，91.1％纯度，78.3％产率)。

实例A113

中间体299和300的制备

经由分别与用于制备中间体4和中间体16所述的类似的反应方案，由各自的起始材料开始，分别制备中间体299和中间体300(HCl盐)。

B.化合物的制备

实例B1

化合物1和2的制备

向中间体7(216mg)在ⁱPrOH(10mL)中的溶液中添加4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(233mg，0.88mmol)和DIPEA(457mg，3.54mmol)。在室温下搅拌2h后，将混合物浓缩，用EtOAc和H₂O稀释，将水层用EtOAc萃取两次。将合并的萃取物在真空中浓缩，并通过制备型HPLC(Waters 2767，柱：Xbridge C1819*150mm 10um，流动相A：H₂O(10mmolNH₄HCO₃)，B：ACN)进行纯化，以给出呈白色固体的化合物1(61.9mg)和呈白色固体的化合物2(99.0mg)。

化合物1 ¹H NMR MeOD-d4(400MHz):δ8.25(s,1H),7.61(s,1H),7.36-7.30(m,4H),7.26-7.23(m,1H),3.90-3.80(m,6H),3.58(s,2H),2.62-2.60(m,1H),2.10-2.00(m,2H),1.95-1.92(m,2H),1.75-1.72(m,2H),1.53-1.35(m,4H)。

化合物2 ¹H NMR MeOD-d4(400MHz):δ8.27(s,1H),7.64(s,1H),7.36-7.26(m,4H),7.26-7.25(m,1H),3.92-3.83(m,4H),3.83-3.78(m,2H),3.74(s,2H),2.60-2.56(m,1H),1.98-1.95(m,2H),1.95-1.88(m,2H),1.77-1.74(m,2H),1.50-1.43(m,2H),1.37-1.28(m,2H)。

实例B2

化合物3、4、5和6的制备

向粗中间体8(550mg)在异丙醇(6mL)中的溶液中添加DIPEA(806mg，6.25mmol)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(525mg，2.08mmol)。在室温下搅拌5h后，向反应混合物中添加水(20mL)并用EtOAc(50mL x 3)萃取。将有机相用盐水洗涤、经Na₂SO₄干燥并浓缩。将粗产物通过制备型HPLC(Waters2767/Qda，柱：WatersXbridge19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以给出两种非对映异构体。将两种非对映异构体通过SFC(条件：Waters，固定相：AD 2.5*25cm，10um，流动相：CO₂/EtOH(40％ACN，0.2％DEA)＝60/40)条件2：Waters，固定相：IA2.5*25cm，10um，流动相：CO₂/IPA(15％ACN，0.2％DEA)＝50/50)进行分离

以给出化合物3(59.8mg)、化合物4(54.9mg)、化合物5(105.9mg)和化合物6(103.6mg)。

化合物3 ¹H NMR:MeOD-d4(400MHz):δ8.30(s,1H),7.69(s,1H),7.33-7.27(m,4H),7.22-7.20(m,1H),4.05(q,J＝11.2Hz,2H),3.83-3.67(m,2H),3.66(s,2H),3.64-3.58(m,2H),3.16-3.13(m,1H),2.02-1.98(m,1H),1.95-1.86(m,2H),1.75-1.70(m,1H),1.60-1.44(m,4H)。

化合物4 ¹HNMR MeOD-d4(400MHz):δ8.28(s,1H),7.63(s,1H),7.37-7.30(m,4H),7.27-7.25(m,1H),3.92-3.84(m,4H),3.76(s,2H),3.76-3.66(m,2H),3.29-3.25(m,1H),2.11-2.06(m,4H),1.86-1.83(m,1H),1.74-1.72(m,1H),1.66-1.62(m,1H),1.57-1.51(m,2H)。

化合物5 ¹H NMRMeOD-d4(400MHz):δ8.26(s,1H),7.62(s,1H),7.35-7.29(m,4H),7.26-7.24(m,1H),3.89-3.84(m,4H),3.81-3.77(m,2H),3.74(s,2H),3.28-3.26(m,1H),2.09-2.03(m,2H),1.93-1.88(m,2H),1.86-1.83(m,1H),1.67-1.55(m,3H)。

化合物6 ¹H NMRMeOD-d4(400MHz):δ8.26(s,1H),7.62(s,1H),7.35-7.29(m,4H),7.25-7.22(m,1H),3.89-3.84(m,4H),3.81-3.78(m,2H)3.74(s,2H),3.28-3.26(m,1H),2.11-2.03(m,2H),1.94-1.89(m,2H),1.86-1.83(m,1H),1.67-1.55(m,3H)。

实例B3

化合物7的制备

向中间体2(130mg)在二噁烷(3mL)中的溶液中添加溴苯(50.0mg，0.32mmol)、^tBuONa(88.3mg，0.64mmol)、Brettphos(5mg)、Pd₂(dba)₃(5mg)。将混合物在130℃下在微波下搅拌2h。将混合物用H₂O洗涤，用EtOAc萃取两次并将有机层合并。将萃取物在真空中浓缩并通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：WatersXbridge19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以得到呈白色固体的化合物7(28.7mg)。

化合物7 ¹H NMR MeOD-d4(400MHz):):δ8.25(s,1H),7.36(s,1H),7.14-7.06(m,2H),6.70-6.58(m,3H),4.50-4.20(m,4H),3.96-3.80(m,3H),2.44-2.34(m,1H),2.24-2.10(m,2H),2.08-1.88(m,2H),1.72-1.58(m,1H)

实例B4

化合物8的制备

在室温下，向中间体3(200mg)在DCM(10mL)中的溶液中添加3-(氰甲基)苯甲酸(47.0mg，0.292mmol)和EDCI(84mg，0.438mmol)、HOBT(67.4mg，0.438mmol)、TEA(88.5mg，0.876mmol)。在室温下搅拌16h后，将混合物浓缩以给出残余物，将其通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：SunFire 19*250mm 10um，流动相A：0.1％TFA/H₂O，B：ACN)进行纯化，以给出呈淡黄色固体(TFA盐)的化合物8(110mg)。

化合物8 ¹H NMR MeOD-d4(400MHz):δ8.45(d,1H,J＝8.8Hz),7.82(s,1H),7.78-7.75(m,2H),7.51-7.43(m,2H),4.59-4.55(m,1H),4.00-3.90(m,8H),2.56-2.47(m,2H),2.36-2.18(m,4H)。

实例B5

化合物9的制备

在室温下，向中间体3(200mg)在DCM(10mL)中的溶液中添加3-(2-氰基丙-2-基)苯甲酸(55.2mg，0.292mmol)和EDCI(84mg，0.438mmol)、HOBT(67.4mg，0.438mmol)、TEA(88.5mg，0.876mmol)。在室温下搅拌16h后，将混合物浓缩以给出残余物，将其通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：SunFire 19*250mm 10um，流动相A：0.1％TFA/H₂O，B：ACN)进行纯化，以给出呈浅黄色固体(TFA盐)的化合物9(105mg)。

化合物9 ¹H NMR MeOD-d4(400MHz):δ8.43(d,1H,J＝11.2Hz),7.99(s,1H),7.81-7.70(m,3H),7.54-7.50(m,1H),4.62-4.58(m,1H),4.04-3.90(m,6H),2.60-2.50(m,2H),2.36-2.18(m,4H),1.76(s,6H)。

实例B6

化合物10、11和12的制备

在室温下，向中间体3(200mg)在DCM(10mL)中的溶液中添加4-(氰甲基)苯甲酸(47.0mg，0.292mmol)和EDCI(84mg，0.438mmol)、HOBT(67.4mg，0.438mmol)、TEA(88.5mg，0.876mmol)。在室温下搅拌16h后，将混合物浓缩以给出残余物，将其通过制备型HPLC(

2767/Qda，柱：SunFire19*250mm10um，流动相A：0.1％TFA/H₂O，B：ACN)进行纯化，以给出呈浅黄色固体(TFA盐)的化合物10(65mg)(呈TFA盐)，将其通过SFC(条件：UPC^2TM

固定相：AS，3um，3*100，流动相：CO₂/MeOH(0.3％DEA)＝70/30)进行分离，以得到呈粉红色固体的化合物11(反式或顺式)(10.7mg)(游离碱)和呈白色固体(游离碱)的化合物12(顺式或反式)(9.9mg)。

化合物10 ¹H NMR MeOD-d4(400MHz):δ8.47(d,J＝9.6Hz1H,),7.88-7.79(m,3H),7.78(d,J＝7.6Hz2H,),4.61-4.59(m,1H),4.03-3.93(m,8H),2.58-2.50(m,2H),2.36-2.20(m,4H)。

实例B8

化合物14的制备

向中间体2(100mg)在MeOH(2mL)中的溶液中添加2-氧代-1,3-二氢苯并咪唑-5-甲醛(71mg，0.44mmol)。将混合物在室温下搅拌2h。然后将NaBH₃CN(37mg，0.58mmol)添加至混合物中并在室温下搅拌过夜。将混合物浓缩，用EtOAc和H₂O稀释，分离并且用EtOAc萃取两次。将合并的萃取物在真空中浓缩并通过制备型HPLC(

2767/Qda，柱：SunFire 19*250mm10um，流动相A：0.1％甲酸/H₂O，B：ACN)进行纯化，以得到化合物14(49.1mg)(甲酸盐)。

化合物14 ¹H NMR MeOD-d4(400MHz):δ8.50(s,1H,甲酸CHO),8.29(s,1H),7.35(s,1H),7.20-7.16(m,2H),7.12-7.10(m,1H),4.39-4.30(m,4H),4.19(s,2H),3.87(q,J＝10.4Hz,2H),3.71-3.61(m,1H),2.62-2.57(m,1H),2.30-2.15(m,2H),2.12-2.01(m,2H),1.86-1.80(m,1H)。

实例B9

化合物15、55和56的制备

向2-氧代-3H-1,3-苯并噁唑-6-甲醛(300mg，粗品)在MeOH(4mL)中的溶液中添加中间体2(200mg)、AcOH(3滴)。将溶液在室温下搅拌1h，然后在0℃下允许将NaBH₃CN(115.6mg，1.84mmol)添加到溶液中并将混合物在室温下搅拌过夜。将混合物用H₂O洗涤，用EA萃取两次并合并。将有机层在真空中浓缩并通过制备型HPLC(

2767/Qda，柱：SunFire 19*250mm 10um，流动相A：0.1％甲酸/H₂O，B：ACN)进行纯化，以得到呈白色固体的化合物15(184.6mg)(甲酸盐)。将化合物15通过SFC(OJ，2.5*25cm，10um，流动相：CO₂/MeOH(0.03％DEA)＝70/30，70ml/min)进行分离，以得到化合物55(36.54mg，R_T＝1.836min13％产率)和化合物56(52.05mg，0.2甲酸，R_T＝2.175min18％产率)。

化合物15：¹H NMR MeOD-d4(400MHz):δ8.50(s,1H,甲酸CHO),8.28(s,1H),7.40(s,1H),7.35-7.31(m,2H),7.17-7.15(m,1H),4.44-4.31(m,4H),4.22(s,2H),3.87(q,J＝10.4Hz,2H),3.73-3.69(m,1H),2.63-2.57(m,1H),2.30-2.17(m,2H),2.16-2.03(m,2H),1.87-1.82(m,1H)。

化合物55：¹H NMR MeOD-d₄(400MHz):δ8.47(brs,1H),8.28(s,1H),7.40(s,1H),7.35-7.31(m,2H),7.16(d,J＝7.6Hz,1H),4.40-4.31(m,4H),4.22(s,2H),3.87(q,J＝10.4Hz,2H),3.73-3.69(m,1H),2.63-2.57(m,1H),2.30-2.17(m,2H),2.12-2.03(m,2H),1.87-1.82(m,1H)。

化合物56：¹H NMR DMSO-d₆(400MHz):δ8.33(s,1H),7.39-7.37(m,2H),7.20(d,J＝8.0Hz,1H),7.08(d,J＝7.6Hz,1H),4.31-4.12(m,5H),4.06(q,J＝11.2Hz,2H),2.24-2.20(m,1H),2.08-2.02(m,1H),1.96-1.86(m,3H),1.64-1.59(m,1H)。

实例B10

化合物16、57和58的制备

向2-氧代-3H-1,3-苯并噁唑-5-甲醛(200.0mg，1.23mmol)在MeOH(4mL)中的溶液中添加中间体2(419mg)、AcOH(3滴)。将溶液在室温下搅拌1h，然后在0℃下将NaBH₃CN(115.60mg，1.84mmol)添加至溶液中并将混合物在室温下搅拌过夜。将混合物用H₂O洗涤，用EtOAc萃取两次并合并有机层。将萃取物在真空中浓缩，并通过制备型HPLC(

2767/Qda，柱：

Xbridge19*150mm10um，流动相A：H₂O(0.1％NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以得到呈白色固体的化合物16(55.9mg)。

化合物16的替代合成：

向2-氧代-2,3-二氢苯并[d]噁唑-5-甲醛(200mg，1.23mmol)在MeOH(5mL)中的溶液中在室温下添加中间体2(503mg，1.47mmol)和AcOH(2滴)。搅拌2小时后，将NaBH(OAc)₃(522mg，2.46mmol)添加到溶液中并将获得的混合物在室温下搅拌过夜。将混合物在减压下浓缩并通过制备型HPLC(

2767/Qda，柱：SunFire 19*250mm10um，流动相A：0.1％NH₄OH/H₂O，B：ACN)进行纯化，以给出化合物16。

通过SFC(IE，2.5*25cm，10um，流动相：CO₂/MeOH＝65/35，60ml/min)分离化合物16，以得到呈白色固体的化合物57(41.81mg，6.97％，R_T＝6.248)和呈白色固体的化合物58(37.71mg，6.28％，R_T＝6.683)。

化合物16：¹H NMR MeOD-d4(400MHz):):δ8.26(s,1H),7.35(s,1H),7.19-7.08(m,3H),4.50-4.10(m,3H),3.86(q,J＝10.8Hz,2H),3.79(s,2H),3.28-3.20(m,2H),2.38-2.28(m,1H),2.16-1.90(m,3H),1.85-1.77(m,1H),1.64-1.52(m,1H)

化合物57：¹H NMR MeOH-d₄(400MHz):δ8.29(s,1H),7.36(s,1H),7.28-7.21(m,3H),4.42-4.29(m,4H),4.11(s,2H),3.87(q,J＝10.4Hz,2H),3.61-3.58(m,1H),2.56-2.51(m,1H),2.24-2.14(m,2H),2.08-1.96(m,2H),1.80-1.75(m,1H)

化合物58：¹H NMR MeOH-d₄(400MHz):δ8.29(s,1H),7.37(s,1H),7.31-7.24(m,3H),4.43-4.27(m,4H),4.20(s,2H),3.88(q,J＝10.4Hz,2H),3.71-3.67(m,1H),2.62-2.57(m,1H),2.30-2.16(m,2H),2.12-2.01(m,2H),1.88-1.80(m,1H)

实例B11

化合物17的制备

向3-(1H-吡唑-3-基)苯甲醛(200mg，1.16mmol)在1,2-二氯乙烷(4mL)中的溶液中添加中间体2(419mg)、AcOH(3滴)，并将溶液在室温下搅拌1h，然后在0℃下将NaBH(OAc)₃(390mg，1.84mmol)添加至溶液中并将混合物在室温下搅拌过夜。将混合物用H₂O洗涤，用EtOAc萃取两次并合并有机层。将萃取物在真空中浓缩并通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge19*150mm10um，流动相A：H₂O(0.1％TFA)，B：ACN)进行纯化，以得到呈白色固体的化合物17(84.0mg，TFA盐)。

化合物17 ¹H NMR DMSO-d6(400MHz):δ9.06(brs,2H),8.36(s,1H),8.00(s,1H),7.86(d,J＝8.0Hz,1H),7.79(d,J＝2.0Hz,1),7.50(t,J＝3.2Hz,1H),7.43(d,J＝7.6Hz,1H),7.39(s,1H),6.73(d,J＝2.54Hz,1H),4.30-4.20(m,5H),4.02-4.08(m,2H),3.64-3.67(m,1H),2.12(m,2H),2.11-1.96(m,4H),1.81-1.79(m,1H)

实例B12

化合物18的制备

在室温下，向中间体2(200mg)在DCM(10mL)中的溶液中添加3-(氰甲基)苯甲酸(47.0mg，0.292mmol)和EDCI(84mg，0.438mmol)、HOBT(67.4mg，0.438mmol)、TEA(88.5mg，0.876mmol)。在室温下搅拌16h后，将混合物浓缩以给出残余物，将其通过制备型HPLC(Waters2767/Qda，柱：SunFire 19*250mm 10um，流动相A：0.1％TFA/H₂O，B：ACN)进行纯化，以给出呈黄色油状物的化合物18(106mg)(TFA盐)。

化合物18 ¹H NMR MeOD-d4(400MHz):δ8.41(s,1H),7.82(s,1H),7.79-7.77(d,J＝7.6Hz,1H),7.56-7.47(m,3H),4.73-4.40(m,5H),3.98-3.91(m,4H),2.56-2.49(m,1H),2.24-2.03(m,4H),1.83-1.80(m,1H)。

实例B13

化合物19的制备

在室温下，向中间体2(200mg)在DCM(10mL)中的溶液中添加4-(氰甲基)苯甲酸(55.2mg，0.292mmol)和EDCI(84mg，0.438mmol)、HOBT(67.4mg，0.438mmol)、TEA(88.5mg，0.876mmol)。在室温下搅拌16h后，将混合物浓缩以给出残余物，将其通过制备型HPLC(Waters2767/Qda，柱：Waters Xbridge19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以给出呈浅黄色固体的化合物19(50mg)。

化合物19 ¹H NMR MeOH-d4(400MHz):δ8.27(s,1H),7.97(s,1H),7.78(d,J＝7.6Hz,1H),7.71(d,J＝8.0Hz,1H),7.54-7.50(m,1H),7.38(s,1H),4.47-4.41(m,5H),3.91-3.83(m,2H),2.51-2.46(m,1H),2.22-2.17(m,2H),2.07-2.01(m,2H),1.81-1.76(m,7H)。

实例B14

化合物20的制备

在室温下，向中间体2(200mg)在DCM(10mL)中的溶液中添加4-(氰甲基)苯甲酸(47.0mg，0.292mmol)和EDCI(84mg，0.438mmol)、HOBT(67.4mg，0.438mmol)、TEA(88.5mg，0.876mmol)。在室温下搅拌16h后，将混合物浓缩以给出残余物，将其通过制备型HPLC(Waters2767/Qda，柱：SunFire19*250mm10um，流动相A：0.1％TFA/H₂O，B：ACN)进行纯化，以给出呈黄色油状物的化合物20(65mg)(TFA盐)。

化合物20 ¹H NMR MeOH-d4(400MHz):δ8.42(s,1H),7.85(d,J＝8.0Hz,2H),7.51(s,1H),7.46(d,J＝8.4Hz,2H),4.45-4.41(m,5H),4.00-3.91(m,4H),2.54-2.48(m,1H),2.22-2.03(m,4H),1.83-1.77(m,1H)。

实例B16

化合物22、23和24的制备

在室温下，向中间体3(200mg)在DCM(8mL)中的溶液中添加苯磺酰氯(52.0mg，0.292mmol)和TEA(88.5mg，0.876mmol)。在室温下搅拌16h后，将混合物浓缩以给出残余物，将其通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：SunFire 19*250mm 10um，流动相A：0.1％TFA/H₂O，B：ACN)进行纯化，以给出呈黄色固体的化合物22(50mg，35.48％产率)(TFA盐)。通过SFC(条件：SFC80(Waters)，固定相：OJ2.5*25cm，10um，流动相：CO₂/MeOH(0.1％DEA)＝75/25)分离化合物22，以得到呈粉红色固体的化合物23(反式或顺式)(游离碱)(3.99mg)和呈白色固体的化合物24(顺式或反式)(游离碱)(8.26mg)。

化合物22 ¹H NMR MeOH-d4(400MHz):δ8.43(d,J＝6.0Hz,1H),7.87-7.84(m,2H),7.77-7.71(m,1H),7.63-7.52(m,3H),3.98-3.75(m,7H),2.29-1.91(m,6H)。

实例B17

化合物22的替代制备及转化为化合物25和26

在0℃下，向中间体3(400mg)和TEA(177mg，1.75mmol)在DCM(20mL)中的溶液中添加苯磺酰氯(133mg，0.76mmol)。在0℃搅拌2h后，将反应混合物添加水(20mL)并用DCM(50mLx 3)萃取。将有机相用盐水洗涤、经Na₂SO₄干燥并浓缩。将粗产物通过制备型TLC纯化，以给出化合物22(280mg)。

在0℃下，向化合物22(280mg)和K₂CO₃(240mg，1.74mmol)在DMF(20mL)中的溶液中添加碘甲烷(247mg，1.74mmol)。在0℃下搅拌2h后，将反应混合物添加水(20mL)并用EA(50mL x3)萃取。将有机相用盐水洗涤、经Na₂SO₄干燥并浓缩。将粗产物通过制备型HPLC(Waters2767/Qda，柱：SunFire 19*250mm 10um，流动相A：0.1％TFA/H₂O，B：ACN)进行纯化，以给出100mg外消旋产物。将外消旋产物通过SFC(条件：SFC80(Waters)，固定相：AS2.5*25cm，10um，流动相：CO₂/MeOH(0.3％DEA)＝60/40)进行分离，以给出呈白色固体的化合物25(反式或顺式)(45.50mg，97.5％纯度)，和呈白色固体的化合物26(顺式或反式)(48.52mg，99.3％纯度)。

化合物25 ¹H NMR MeOD-d4(400MHz):δ8.27(s,1H),7.81-7.79(m,2H),7.65-7.63(m,2H),7.60-7.57(m,2H),4.12(m,1H),3.91-3.86(m,3H),3.83-3.79(m,3H),2.71(s,3H),2.24-2.19(m,4H),2.03(m,2H)。

化合物26 ¹H NMR MeOD-d4(400MHz):δ8.25(s,1H),7.82-7.79(m,2H),7.65-7.64(m,1H),7.62-7.58(m,3H),4.10-4.08(m,1H),3.89-3.81(m,4H),3.73(m,2H),2.72(s,3H),2.31-2.26(m,2H),2.15-2.10(m,4H)。

实例B18

化合物27、28和29的制备

在室温下，向4-(甲磺酰胺基)苯甲酸(100mg，0.292mmol)在DCM(10mL)中的溶液中添加中间体3(63mg)和EDCI(84mg，0.438mmol)、HOBT(67.4mg，0.438mmol)、TEA(88.5mg，0.876mmol)。在室温下搅拌16h后，将混合物浓缩以给出残余物，将其通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge19*150mm10um，流动相A：H₂O(0.1％NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以给出呈浅黄色固体的化合物27(55mg)。通过SFC(条件：SFC80(Waters),固定相：OJ2.5*25cm，10um，流动相：CO₂/MeOH(0.3％DEA)＝70/30)分离化合物27(26.4mg)的一部分，以得到呈粉红色固体的化合物28(反式或顺式)(6.88mg)和呈白色固体的化合物29(顺式或反式)(9.91mg)。

化合物27 ¹H NMR meOH-d4(400MHz):δ8.29(d,J＝6.4Hz,1H),7.82(d,J＝6.4Hz,2H),7.68-7.62(m,1H),7.30(d,J＝8.4Hz,2H),4.60-4.56(m,1H),3.96-3.83(m,6H),3.02(s,3H),2.54-2.46(m,2H),2.30-2.12(m,4H)。

实例B19

化合物30的制备

向3-(1H-吡唑-3-基)苯甲酸(130mg，0.69mmol)在DCM(10mL)中的溶液中添加中间体2(340mg)和EDCI(197mg，1.0mmol)、HOBT(139mg，1.0mmol)、DIPEA(267mg，2.07mmol)，在室温下搅拌12h后，将混合物浓缩，用EtOAc和H₂O稀释，将水层用EA萃取两次。将合并的萃取物浓缩，并通过制备型HPLC(Waters2767/Qda，柱：Waters Xbridge19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％HCOOH)，B：ACN)进行纯化，以给出呈白色固体的化合物30(50.1mg)(甲酸盐)。

化合物30 ¹H NMR DMSO-d₆(400MHz)：δ13.0(brs,1H),8.51-8.48(m,2H,甲酸CHO),8.25(s,1H),7.93-7.91(m,1H),7.81-7.74(m,2H),7.50-7.43(m,2H),6.77(s,1H),4.38-4.20(m,4H),4.09-4.01(m,2H),2.38-2.31(m,1H),2.11-1.91(m,5H),1.73-1.63(m,1H)

实例B20

化合物31、32、33和34的制备

向中间体11(517mg(粗产物))在异丙醇(15mL)中的溶液中添加4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(369mg，1.459mmol)和DIPEA(753mg，5.836mmol)。在室温下搅拌2h后，将混合物浓缩，并将残余物通过柱色谱法(PE/EA＝1/1)进行纯化，以得到非外消旋产物(418mg)，将其通过SFC(条件：SFC80(Waters)，固定相：IE2.5*25cm，10um，流动相：CO₂/EtOH(15％ACN)＝65/35)进行分离，以得到化合物31(81.7mg)、化合物32(52.8mg)、化合物33(60.8mg)和化合物34(60.8mg)。

化合物31 ¹H NMR MeOD-d4(400MHz):δ8.27(s,1H),7.64(s,1H),7.10-7.06(m,2H),6.65-6.57(m,3H),4.00-3.85(m,5H),3.72-3.50(m,2H),2.24-2.19(m,2H),2.09-2.04(m,2H),1.80-1.73(m,1H),1.70-1.59(m,3H)。

化合物32 ¹H NMR MeOD-d4(400MHz):δ8.27(s,1H),7.64(s,1H),7.10-7.06(m,2H),6.65-6.57(m,3H),4.00-3.85(m,5H),3.72-3.50(m,2H),2.24-2.19(m,2H),2.09-2.04(m,2H),1.80-1.73(m,1H),1.70-1.59(m,3H)。

化合物33 ¹H NMR MeOD-d4(400MHz):δ8.26(s,1H),7.61(s,1H),7.11-7.07(m,2H),6.66-6.58(m,3H),3.96-3.82(m,7H),2.24-2.19(m,2H),2.09-2.04(m,2H),1.80-1.73(m,1H),1.70-1.59(m,3H)。

化合物34 ¹H NMR MeOD-d4(400MHz):δ8.26(s,1H),7.61(s,1H),7.10-7.06(m,2H),6.66-6.58(m,3H),3.98-3.82(m,7H),2.24-2.19(m,2H),2.09-2.04(m,2H),1.80-1.73(m,1H),1.70-1.59(m,3H)。

实例B21

化合物35的制备

将中间体3(131mg)、溴苯(50mg，0.32mmol)、Pd₂(dba)₃(5mg，10％)、BrettPhos(5mg，10％)和^tBuONa(92mg，0.95mmol)在二噁烷(3mL)中的混合物在微波辐射下在130℃下搅拌2h。将反应用水稀释，并用EtOAc(50mL X 3)萃取。将有机相用盐水洗涤、经Na₂SO₄干燥并浓缩。将粗产物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以给出呈黄色固体的化合物35(42.26mg)。

化合物35 ¹H NMR DMSO-d6(400MHz):δ8.32(d,J＝4.8Hz,1H),7.72(d,J＝14.8Hz,1H),7.08-7.03(m,2H),6.52-6.50(m,3H),5.89-5.85(m,1H),4.05(q,J＝10.8Hz,2H),3.92-3.87(m,2H),3.80-3.75(m,2H),3.25(m,1H),2.46-2.41(m,2H),211-2.09(m,1H),2.07-2.02(m,1H),1.96-1.87(m,2H)。

实例B22

化合物36和37的制备

在0℃下，向中间体3(400mg)和TEA(354mg，3.50mmol)在DCM(20mL)中的溶液中添加苯甲酰氯(163mg，1.17mmol)。在0℃搅拌2h后，将反应混合物添加水(20mL)并用DCM(50mLx 3)萃取。将有机相用盐水洗涤、经Na₂SO₄干燥并浓缩。将粗产物通过制备型HPLC(Waters2767/Qda，柱：Waters Xbridge19*150mm10um，流动相A：H₂O(0.1％NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以给出120mg的残余物，将其通过SFC(条件：SFC80(Waters)，固定相：OJ2.5*25cm，10um，流动相：CO₂/MeOH(0.3％DEA)＝60/40)进行分离，以给出呈白色固体的化合物36(30.92mg，98.8％纯度)和呈白色固体的化合物37(43.84mg，99.5％纯度)。

化合物36 ¹H NMR MeOD-d4(400MHz):δ8.29(s,1H),7.83-7.81(m,2H),7.67(s,1H),7.54-7.51(m,1H),7.47-7.43(m,2H),4.61-4.57(m,1H),3.96-3.93(m,2H),3.90-3.85(m,4H),2.56-2.51(m,2H),2.27-2.22(m,2H),2.16-2.08(m,2H)。

化合物37 ¹H NMR MeOD-d4(400MHz):δ8.27(s,1H),7.83-7.81(m,2H),7.62(s,1H),7.54-7.51(m,1H),7.47-7.43(m,2H),4.61-4.57(m,1H),3.91-3.88(m,3H),3.86-3.83(m,3H),2.52-2.47(m,2H),2.30-2.28(m,2H),2.27-2.25(m,2H)。

实例B23

化合物38的制备

向中间体10(157mg(粗品))在异丙醇(5mL)中的溶液中添加4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(184mg，0.727mmol)和DIPEA(0.48mL，2.91mmol)。在室温下搅拌2h后，将混合物浓缩，将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：WatersXbridge19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％NH₄OH)，B：ACN)进行纯化。收集所希望的级分并蒸发溶剂，以给出化合物38(109.5mg，99.2％纯度)。

化合物38 ¹H NMR CDCl₃(400MHz):δ8.42(d,J＝3.2Hz,1H),7.34(d,J＝4.0Hz,1H),7.19-7.16(m,2H),6.72-6.69(m,1H),6.62-6.59(m,2H),3.84-3.80(m,3H),3.72(s,1H),3.62(q,J＝10.4Hz,2H),3.21-3.18(m,2H),2.66-2.60(m,1H),2.27-2.01(m,4H),1.91-1.83(m,2H)

实例B24

化合物39的制备

向粗中间体15(35mg，0.125mmol)在异丙醇(6mL)中的溶液中添加DIPEA(48mg，0.375mmol)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(32mg，0.125mmol)。在室温下搅拌5h后，向反应混合物中添加水(20mL)并用EtOAc(50mL x 3)萃取。将有机相用盐水洗涤、经Na₂SO₄干燥并浓缩。将粗产物通过制备型HPLC(Waters2767/Qda，柱：SunFire 19*250mm 10um，流动相A：0.1％TFA/H₂O，B：ACN)进行纯化。收集所希望的级分并蒸发溶剂，以给出化合物39(35.1mg，98.70％纯度)。

化合物39 ¹H NMR DMSO-d₆(400MHz):δ8.36(s,1H),7.82-7.80(m,3H),7.70(s,1H),7.62-7.56(m,3H),4.07(q,J＝10.8Hz,2H),3.63-3.60(m,3H),3.58-3.55(m,2H),2.37(m,1H),1.84-1.72(m,3H),1.68-1.64(m,1H),1.54-1.44(m,3H)。

实例B25

化合物40的制备

向粗中间体12(120mg)在异丙醇(6mL)中的溶液中添加DIPEA(129mg，1.004mmol)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(84mg，0.334mmol)。在室温下搅拌5h后，向反应混合物中添加水(20mL)并用EtOAc(50mL x 3)萃取。将有机相用盐水洗涤、经Na₂SO₄干燥并浓缩。将粗产物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：SunFire19*250mm 10um，流动相A：0.1％TFA/H₂O，B：ACN)进行纯化，以给出化合物40(66.8mg)。

化合物40 ¹H NMR DMSO-d₆(400MHz):δ9.06(brs,1H),8.34(d,J＝3.6Hz,1H),7.69(d,J＝13.6Hz,1H),4.06(q,J＝10.8Hz,2H),3.87-3.67(m,4H),3.52-3.44(m,1H),3.26-3.19(m,1H),3.13-3.03(m,1H),2.76-2.66(m,1H),2.63-2.61(m,3H),2.26-2.05(m,3H),2.00-1.81(m,3H),1.23-1.1(m,6H)。

实例B26

化合物41的制备

向粗中间体13(50mg)在异丙醇(6mL)中的溶液中添加DIPEA(84mg，0.652mmol)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(55mg，0.217mmol)。在室温下搅拌5h后，向反应混合物中添加水(20mL)并用EtOAc(50mL x 3)萃取。将有机相用盐水洗涤、经Na₂SO₄干燥并浓缩。将粗产物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：WatersXbridge19*150mm10um，流动相A：H₂O(0.1％NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以给出化合物41(50mg，98.71％纯度)。

化合物41 ¹H NMR MeOD-d₄(400MHz):δ8.25(s,1H),7.61(s,1H),7.17-7.13(m,2H),6.75-6.72(m,2H),6.65-6.61(m,1H),3.90-3.78(m,5H),3.78-3.73(m,1H),3.42-3.39(m,2H),2.92(s,3H),2.80-2.72(m,1H),2.16-2.08(m,3H),2.07-1.98(m,1H),1.97-1.90(m,2H)。

实例B27

化合物42的制备

将中间体4(70.0mg，0.205mmol)、DL-α-甲基苄胺(62.1mg，0.512mmol)、CH₃COOH(0.1mL)和DCM(5mL)添加至50mL圆底烧瓶中。将反应混合物用三乙酰氧基硼氢化钠(174mg，0.821mmol)处理并在20℃下搅拌2小时。将反应混合物用水(20mL)稀释，用DCM(20mL x 2)萃取，用盐水洗涤并经Na₂SO₄干燥。将有机层过滤并在减压下浓缩，以给出粗产物，将其通过制备型HPLC条件：(Xtimate C18 150*25mm*5um，流速：22ml/min，流动相A：水(0.225％FA)-ACN，流动相B：乙腈，梯度：23％-53％(％B))进行纯化。收集所希望的级分并在真空中蒸发以去除CH₃CN。将残余物冻干以生成化合物42(甲酸盐)(34.1mg，白色固体)。

化合物41 ¹H NMR DMSO-d₆(400MHz):δ8.32-8.29(m,1H),7.40-7.30(m,5H),7.26-7.20(m,1H),4.40-3.90(m,6H),3.84-3.75(m,1H),2.94-2.87(m,1H),2.06-1.94(m,2H),1.84-1.65(m,3H),1.54-1.35(m,1H),1.30-1.25(m,3H)

实例B28

化合物43的制备

将中间体4(70.0mg，0.205mmol)、1-甲基-1H-吡唑-4-胺(49.8mg，0.513mmol)、CH₃COOH(0.1mL)和DCM(5mL)添加至50mL圆底烧瓶中。将反应混合物用三乙酰氧基硼氢化钠(174mg，0.821mmol)处理并在20℃下搅拌2小时。将反应混合物用水(20mL)稀释，用DCM(20mL x 2)萃取，用盐水洗涤并经Na₂SO₄干燥。将有机层过滤并在减压下浓缩，以给出粗产物，将其通过制备型HPLC条件：(Xtimate C18 150*25mm*5um，流速：22ml/min，流动相A：水(0.225％FA)-ACN，流动相B：乙腈，梯度：18％-48％(％B))进行纯化。收集所希望的级分并在真空中蒸发以去除CH₃CN。将残余物冻干以生成化合物43(28.6mg，31.5％产率，白色固体)。

化合物43 ¹H NMR DMSO-d₆(400MHz):δ8.32(s,1H),7.41(s,1H),7.06(s,1H),6.93(s,1H),4.41-3.96(m,6H),3.69(s,3H),3.47-3.46(m,1H),2.28-2.17(m,1H),2.09-1.85(m,3H),1.83-1.74(m,1H),1.56-1.46(m,1H)。

实例B29

化合物44的制备

将搅拌棒、中间体5(110mg，0.322mmol)、2-(4-氨基苯基)乙腈(51.1mg，0.387mmol)、乙酸(一滴)、三乙酰氧基硼氢化钠(342mg，1.61mmol)和干二氯甲烷(5mL)添加至40mL玻璃瓶中，将其在40℃下搅拌12小时。将混合物用水(50mL)处理并将水层用二氯甲烷(20mL x 3)萃取。将合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩，以给出粗产物，将其通过制备型TLC(洗脱液：乙酸乙酯)进行纯化，以给出残余物。将残余物在乙腈(2mL)与水(10mL)之间分配。将溶液冻干，以给出呈浅黄色粉末的化合物44(54.2mg，35.7％产率)。

化合物44 ¹H NMR DMSO-d₆(400MHz):δ8.36-8.30(m,1H),7.77-7.66(m,1H),7.07-7.00(m,2H),6.57-6.50(m,2H),6.03(t,J＝7.2Hz,1H),4.12-4.02(m,2H),3.96-3.67(m,7H),2.50-2.40(m,2H),2.17-1.84(m,4H)。

实例B30

化合物45、46和47的制备

将中间体4(200mg，0.575mmol)、苄胺(62mg，0.575mmol)、DIPEA(175mg，1.73mmol)和NaBH(OAc)₃(609mg，2.48mmol)添加至DCE(8mL)中。将反应在室温下搅拌过夜。将溶剂去除以得到清洁油状物。将此油状物通过制备型高效液相色谱法(柱：XtimateC18 150*25mm*5um，条件：水(0.05％氢氧化铵，v/v)/ACN从60/40至30/70)进行纯化。收集纯级分并将溶剂在真空下蒸发以得到清洁油状物。向此油状物中添加15mL的HCl 12N和5mL ACN。将溶剂冻干，产生75mg的化合物45(HCl盐)。将化合物45(60.5mg)经由色谱法，经由手性SFC(固定相：Chiralpak Ad-H 5μm250*30mm，流动相：CO₂/MeOH(0.3％iPrNH₂)：60/40)分离。收集纯级分并将溶剂在真空下蒸发，以给出20mg的对映异构体A和24mg的对映异构体B(不够纯的)。将对映异构体A溶解于2mL的ACN并在10℃下滴加3当量的HCl 4N(15μL，0.18mmol)。然后，添加Et₂O，并且30min后，将溶液蒸发至干燥。添加Et₂O并将沉淀物过滤并干燥，给出15mg的化合物46(HCl盐)。将对映异构体B(24mg)通过硅胶色谱法经由反相(固定相：YMC-actus TriartC18 10μm30*150mm，流动相：NH₄HCO₃0.2％/ACN：梯度从60/40至0/100)进行纯化。将残余物用Et₂O吸收，并蒸发至干燥产生12mg的化合物47(游离碱)。

化合物47 ¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆):δppm8.31(s,1H)7.41(s,1H)7.28-7.37(m,4H)7.18-7.25(m,1H)4.05(q,J＝11.0Hz,2H)3.68(br s,2H)3.11(br s,1H)2.43-2.48(m,4H)1.98-2.13(m,3H)1.75-1.89(m,3H)1.44-1.54(m,1H)

实例B31

化合物48的制备

将中间体5(400mg，0.791)、苄胺(85mg，0.791mmol)、DIPEA(240mg，2.37mmol)和NaBH(OAc)₃(838mg，3.96mmol)添加至DCE(15mL)中。将反应在室温下搅拌过夜。将溶剂去除以得到清洁油状物。将此油状物通过制备型高效液相色谱法(柱XtimateC18 150*25mm*5um，条件：水(0.05％氢氧化铵v/v)/ACN：梯度从50/50至40/60)进行纯化。收集纯级分并将溶剂在真空下蒸发。将水层用乙腈/水20/80冻干，产生75mg的化合物48(28％产率)。

实例B32

化合物49和50的制备

将中间体5(558mg；1.63mmol)、异丁胺(151μL；1.76mmol)和AcOH(33.5μL；0.586mmol)在DCE(5mL)中的混合物在50℃下搅拌2小时。将反应混合物冷却至室温，并添加NaBH(OAc)₃(372mg；1.76mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜，倾倒进10％的K₂CO₃水溶液中，并用DCM萃取。将有机层倾析，经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH，24g；流动相：梯度从0％MeOH，100％DCM至10％MeOH，90％DCM)进行纯化。收集纯级分并蒸发至干燥，产生550mg(84％)呈异构体60/40混合物的化合物49。通过溶解50mg的在Et₂O中的化合物49并通过添加在1,4-二噁烷中的HCl 4N制备盐酸盐。沉淀物的过滤产生56mg的呈异构体60/40混合物的化合物50(HCl盐)。

通过使用与用于制备化合物50所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备化合物51。

实例B33

化合物53的制备

向中间体4(2-(6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2-氮杂螺[3.4]辛-6-酮)(165mg，0.435mmol)、中间体53(2-(5-(氨基甲基)-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-1-基)乙酰胺)(170mg，0.656mmol)、氰基硼氢化钠(60.6mg，0.964mmol)和MeOH(12mL)的溶液中添加CH₃COOH(57.9mg，0.964mmol)在MeOH(3mL)中的溶液。在45℃下搅拌12小时后，将反应混合物在减压下浓缩至干燥，以得到粗产物，将其通过制备型HPLC(Gilson281，Xtimate C18150x 25mm x5μm柱，流动相A：水(0.225％FA)，B：ACN)进行纯化。收集纯级分并在减压下蒸发，以获得残余物，将其冻干，以给出呈白色粉末的化合物53(200mg，84.3％产率)。

¹H NMR MeOD-d₄(400MHz):δ8.40(br s,1H),8.29(s,1H),7.35(s,1H),7.25(s,1H),7.22(d,J＝8.4Hz,1H),7.10(d,J＝8.0Hz,1H),4.58(s,2H),4.51-4.25(m,4H),4.23(s,2H),3.88(q,J＝11.6Hz,2H),3.77-3.66(m,1H),2.60(dd,J＝8.4,13.6Hz,1H),2.35-2.14(m,2H),2.13-2.02(m,2H),1.95-1.74(m,1H)。

实例B34

化合物54的制备

在室温下，向中间体2(2-(6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2-氮杂螺[3.4]辛-6-胺HCl盐)(200mg)在MeOH(6mL)中的溶液中添加1-甲基-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-甲醛(134mg，0.76mmol)和AcOH(3滴)。将混合物在室温下搅拌2小时，然后添加NaBH₃CN(73mg，1.16mmol)并将混合物在室温下搅拌过夜。将混合物在残余物下浓缩并通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge20*150mm 10um，流动相A：0.1％NH₃.H₂O，B：ACN)进行纯化，以得到呈浅黄色固体的化合物54(78.71mg)。

¹H NMR MeOD-d₄(400MHz):δ8.29(s,1H),7.36(s,1H),7.27-7.25(m,2H),7.19(d,J＝8.8Hz,1H),4.40-4.31(m,4H),4.22(s,2H),3.88(q,J＝10.4Hz,2H),3.73-3.69(m,1H),3.40(s,3H),2.63-2.58(m,1H),2.29-2.16(m,2H),2.12-2.02(m,2H),1.87-1.83(m,1H)

实例B35

化合物59和60的制备

向中间体19(6-(2-甲氧基-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)-6-氮杂螺[3.4]辛-2-胺)(150mg，0.42mmol)、苯甲醛(58mg，1.3mmol)和钛酸四异丙酯(488mg，1.72mmol)在MeOH(5mL)中的溶液中添加NaBH(OAc)₃(267mg，1.26mmol)。在室温下搅拌1小时后，将反应混合物用H₂O(5mL)淬灭并用DCM(10mL X 2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：SunFire 19*250mm10um，流动相A：0.1％TFA/H₂O，B：ACN)进行纯化，以得到顺式和反式的混合物(120mg，62％产率)。将混合物通过SFC(OJ，3*100cm，3um，流动相：CO₂/MeOH(0.02％DEA)＝80/20，1.8ml/min)进行分离。收集所希望的级分并蒸发溶剂，以得到化合物59(35mg，R_T＝1.107min，TFA盐，反式或顺式)和化合物60(48mg，R_T＝1.377min，顺式或反式，40.0％产率)。

化合物59：¹H NMR MeOD-d₄(400MHz)：δ7.54(s,1H),7.50-7.48(m,5H),4.13(s,2H),4.00(s,3H),3.98-3.94(m,5H),3.81(q,J＝10.4Hz,2H),2.55-2.49(m,2H),2.34-2.28(m,2H),2.19-2.15(m,2H)。

化合物60：¹H NMR MeOD-d₄(400MHz):δ7.46(s,1H),7.35-7.24(m,5H),3.94(s,3H),3.80-03.69(m,8H),3.38-3.36(m,1H),2.31-2.26(m,2H),2.12-1.92(m,4H)。

实例B36

化合物61和62的制备

将中间体21(N-苄基-6-(2-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)-6-氮杂螺[3.4]辛-2-胺)(250mg，0.535mmol)在甲胺/THF(4mL)中的溶液在密封管中在100℃下搅拌16小时。将反应混合物浓缩并通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：WatersXbridge19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以给出呈白色固体的顺式和反式的混合物(100mg)。将混合物通过SFC(OJ-H，2.5*25cm，10um，流动相：CO₂/MeOH(NH₃)＝80/20，70ml/min)进行分离。收集所希望的级分并蒸发溶剂，以得到化合物61(32.20mg，R_T＝1.083min，13％产率，反式或顺式)和化合物62(37.8mg，R_T＝1.559min，15％产率，顺式或反式)。

化合物61：¹H NMR MeOD-d₄(400MHz):δ7.34-7.25(m,6H),3.76-3.65(m,8H),3.40-3.35(m,1H),2.90(s,3H),2.33-2.28(m,2H),2.02-1.94(m,2H),1.93-1.88(m,2H)。

化合物62：¹H NMR MeOD-d₄(400MHz)：δ7.35-7.24(m,6H),3.78-3.72(m,2H),3.69-3.64(m,6H),3.38-3.34(m,1H),2.90(s,3H),2.30-2.25(m,2H),2.04-2.02(m,2H),1.96-1.91(m,2H)。

实例B37

化合物63的制备

向中间体3(6-(6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)-6-氮杂螺[3.4]辛-2-胺TFA盐)(200mg)在1,4-二噁烷(2mL)中的溶液中添加2-(4-溴-3-氟苯基)乙腈(250mg，1.170mmol)、t-叔丁醇钠(168mg，1.775mmol)、BrettPhos(30mg，0.056mmol)和Pd₂(dba)₃(53mg，0.056mmol)。将所得混合物用Ar鼓泡并密封在微波管中。在140℃下在微波下加热2小时后。将混合物冷却至室温，倾倒于进(100mL)中并用乙酸乙酯(100mL X 3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL X 2)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge20*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％NH₃.H₂O)，B：ACN)进行纯化。收集所希望的级分并蒸发溶剂，以得到化合物63(23.45mg)。

化合物63：¹H NMR MeOD-d₄(400MHz):δ8.29(d,J＝7.6Hz,1H),7.67-7.63(m,1H),6.98-6.96(m,2H),6.70-6.64(m,1H),4.07-3.99(m,1H),3.94-3.83(m,6H),3.74(s,2H),2.61-2.53(m,2H),2.20-2.03(m,4H)。

实例B38

化合物64和65的制备

将中间体24((6-(2-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)-6-氮杂螺[3.4]辛-2-基)氨基)-N-甲基苯甲酰胺)(200mg，0.393mmol)在CH₃NH₂(5mL，2NinTHF)中的溶液在100℃下搅拌16小时。在减压下浓缩后，将残余物通过制备型TLC(DCM:MeOH＝15:1)进行纯化以给出反式和顺式的混合物(150mg)。将混合物通过SFC(OJ-H，2.5*25cm，10um，流动相：CO₂/MeOH＝65/35，50ml/min)进行分离，以得到呈白色固体的化合物64(52.16mg，26％，反式或顺式)和呈白色固体的化合物65(45.70mg，23％，顺式或反式)。

化合物64：¹H NMR MeOD-d₄(400MHz):δ7.61(d,J＝8.4Hz,2H),7.33(s,1H),6.57(d,J＝8.4Hz,2H),4.05-4.01(m,1H),3.84-3.82(m,2H),3.74-3.65(m,4H),2.91(s,3H),2.87(s,3H),2.55-2.51(m,2H),2.16-2.13(m,2H),2.04-1.99(m,2H)。

化合物65：¹H NMR DMSO-d₆(400MHz):δ7.96(d,J＝4.4Hz,1H),7.59(d,J＝8.4Hz2H),7.43(s,1H),6.52-6.44(m,4H),4.09-3.68(s,7H),3.17(d,J＝5.2Hz,2H),2.79-2.71(m,6H),1.98-1.89(m,4H)。

实例B39

化合物66和67的制备

向中间体26(4-((6-氮杂螺[3.4]辛-2-基)氨基)-3-氟-N-甲基苯甲酰胺)(200mg，0.722mmol)在iPrOH(4mL)中的溶液中添加DIPEA(279mg，2.17mmol)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(182mg，0.722mmol)。在室温下搅拌12小时后，将混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：WatersXbridge19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％NH₄OH)，B：ACN)进行纯化并用离子交换树脂处理，以得到顺式和反式的混合物。将混合物通过SFC(AD-H，3*25cm，5um，流动相：CO₂/ⁱPrOH(0.1％DEA)＝60/40，50ml/min)进行分离，以得到呈白色固体的化合物66(143mg，40％产率，反式或顺式)和呈白色固体的化合物67(44mg，12％产率，顺式或反式)。

化合物66：¹H NMR(400MHz,MeOD-d₄):δ8.30(s,1H),7.68(s,1H),7.52-7.45(m,2H),6.68(t,J＝8.6Hz,1H),4.16-4.08(m,1H),3.96-3.80(m,6H),2.88(s,3H),2.65-2.60(m,2H),2.14-2.09(m,4H)。

化合物67：¹H NMR(400MHz,MeOD-d₄):δ8.28(s,1H),7.63(s,1H),7.53-7.44(m,2H),6.70(t,J＝8.4Hz,1H),4.17-4.07(m,1H),3.92-3.84(m,6H),2.88(s,3H),2.60-2.55(m,2H),2.23-2.12(m,4H)。

实例B40

化合物68和69的制备

向中间体28(260mg，粗品)在异丙醇(10mL)中的溶液中添加4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(224mg，0.887mmol)和DIPEA(343mg，2.662mmol)。在室温下搅拌12h后，将混合物倾倒进水(30mL)中并用EtOAc(30mL X 3)萃取。将合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过硅胶柱色谱法(PE/EA＝3/1)进行纯化。收集所希望的级分并蒸发溶剂，以给出顺式和反式异构体的混合物(260mg)。将混合物通过SFC(AD-H，3*25cm，5um，流动相：CO₂/ⁱPrOH(0.1％DEA)＝60/40，50ml/min)进行分离，以得到化合物68(95.75mg，反式或顺式)和化合物69(40.27mg，顺式或反式)。

化合物68：¹H NMR DMSO-d₆(400MHz):δ8.33(s,1H),8.19-8.16(m,1H),7.77-7.73(m,2H),7.65-7.62(m,1H),6.69(d,J＝8.8Hz,1H),5.92(d,J＝6.4Hz,1H),4.12-4.02(m,3H),3.89-3.73(m,4H),2.73(d,J＝4.4Hz,3H),2.53-2.50(m,2H),2.14-2.03(m,4H)。

化合物69：¹H NMR DMSO-d₆(400MHz):δ8.32(s,1H),8.19-8.16(m,1H),7.77(d,J＝1.6Hz,1H),7.69-7.65(m,2H),6.70(d,J＝8.8Hz,1H),5.90(d,J＝6.4Hz,1H),4.09-4.02(m,3H),3.77(br s,4H),2.73(d,J＝4.4Hz,3H),2.46-2.44(m,2H),2.19-2.14(m,4H)。

实例B41

化合物70、71和72的制备

向中间体32(6-(6-氮杂螺[3.4]辛-2-基氨基)-N-甲基烟酰胺TFA盐)(100mg)在异丙醇(5mL)中的溶液中添加DIPEA(230mg，1.78mmol)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(90mg，0.357mmol)。在室温下搅拌12小时后，将混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge19*150mm10um，流动相A：H₂O(0.1％TFA)，B：ACN)进行纯化，并且然后用离子交换树脂处理。收集所希望的级分并蒸发溶剂，以得到呈白色固体的化合物70(123.82mg，TFA盐；反式和顺式的混合物)。将混合物通过SFC(AD-H，2.5*25cm，10um，流动相：CO₂/MeOH＝60/40，60ml/min)进行分离。收集所希望的级分并蒸发溶剂，以得到化合物71(16.02mg，反式或顺式)和化合物72(20.2mg，顺式或反式)。

化合物70：¹H NMR MeOD-d₄(400MHz):δ8.47(d,J＝6.4Hz,1H),8.38-8.36(m,1H),8.25(d,J＝9.6Hz,1H),7.80-7.78(m,1H),7.08-7.05(m,1H),4.43-4.39(m,1H),4.07-3.93(m,6H),2.93(s,3H),2.75-2.67(m,2H),2.35-2.25(m,4H)。

化合物71：¹H NMR MeOD-d₄(400MHz):δ8.45(d,J＝2.0Hz,1H),8.29(s,1H),7.84-7.81(m,1H),7.66(s,1H),6.50(d,J＝8.4Hz,1H),4.43-4.41(m,1H),3.95-3.84(m,6H),2.87(s,3H),2.61-2.56(m,2H),2.11-2.04(m,4H)。

化合物72：¹H NMR MeOD-d₄(400MHz):δ8.46(d,J＝2.4Hz,1H),8.27(s,1H),7.84-7.81(m,1H),7.62(s,1H),6.50(d,J＝8.8Hz,1H),4.47-4.39(m,1H),3.91-3.81(m,6H),2.87(s,3H),2.57-2.52(m,2H),2.22-2.20(m,2H),2.12-2.07(m,2H)。

实例B42

化合物73、74和75的制备

向中间体35(4-((6-(6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)-6-氮杂螺[3.4]辛-2-基)氨基)苯甲酸)(500mg，1.08mmol)在THF(5mL)中的溶液中添加N¹,N¹-二甲基乙基-1,2-二胺(143mg，1.62mmol)、HOBT(219mg，1.62mmol)、EDCI(311mg，1.62mmol)和Et₃N(163mg，1.62mmol)。将所得混合物在室温下搅拌过夜。在减压下浓缩后，将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：WatersXbridge19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％NH₄OH)，B：ACN)进行纯化。收集所希望的级分并蒸发溶剂，以给出呈顺式和反式异构体混合物(170mg)的化合物73，将其通过SFC(AD-H，3*25cm，5um，流动相：CO₂/ⁱPrOH(0.1％DEA)＝60/40，50ml/min)进行分离，以得到化合物74(70mg，12％产率，反式或顺式)和化合物75(38mg，7％产率，顺式或反式)。

化合物74：¹H NMR MeOD-d₄(400MHz):δ8.29(s,1H),7.67-7.63(m,3H),6.58(d,J＝8.4Hz,2H),4.09-4.02(m,1H),3.94-3.84(m,6H),3.50(t,J＝6.4Hz,2H),2.64-2.58(m,4H),2.37(s,6H),2.11(br s,2H),2.04-1.99(m,2H)。

化合物75：¹H NMR MeOD-d₄(400MHz):δ8.27(s,1H),7.66-7.63(m,3H),6.58(d,J＝8.4Hz,2H),4.07-4.03(m,1H),3.91-3.82(m,6H),3.52(t,J＝6.4Hz,2H),2.70(t,J＝6.4Hz,2H),2.59-2.54(m,2H),2.43(s,6H),2.20(br s,2H),2.08-2.03(m,2H)。

实例B43

化合物76和77的制备

向中间体38(250mg，0.45mmol)在DMF(10ml)中的溶液中添加甲胺(HCl盐，30.4mg)、DIPEA(1ml)和HATU(205mg，0.54mmol)。在室温下搅拌3小时后，将溶液浓缩并用EA(15mL)稀释。将有机层用盐水(15mL X 2)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：SunFire 19*250mm 10um，流动相A：0.1％TFA/H₂O，B：ACN)进行纯化，然后通过SFC(OJ，2.5*25cm，10um，流动相：CO₂/MeOH(0.1％NH₃)＝70/30，50ml/min)进行分离，以得到呈白色固体的化合物76(13.08mg，反式或顺式)和呈白色固体的化合物77(11.17mg，顺式或反式)。

化合物76：¹H NMR MeOD-d₄(400MHz):δ8.29(s,1H),7.72(d,J＝8.8Hz,1H),7.67(s,1H),6.27-6.24(m,1H),6.19(d,J＝2.0Hz,1H),4.19(t,J＝5.2Hz,2H),4.07-4.06(m,1H),3.95-3.85(m,6H),2.88(s,3H),2.79-2.77(m,2H),2.64-2.59(m,2H),2.35(s,6H),2.12(br s,2H),2.05-2.00(m,2H)

化合物77：¹H NMR MeOD-d₄(400MHz):δ8.27(s,1H),7.71(d,J＝8.8Hz,1H),7.63(s,1H),6.27-6.25(m,1H),6.20(d,J＝2.0Hz,1H),4.22(t,J＝5.2Hz,2H),4.08-4.04(m,1H),3.91-3.82(m,6H),2.88(s,3H),2.81(br s,2H),2.60-2.54(m,2H),2.39(s,6H),2.08(br s,2H),2.06-2.02(m,2H)

实例B44

化合物78、79和80的制备

将中间体42(4-(6-氮杂螺[3.4]辛-2-基氨基)-2-(1-甲基哌啶-4-基)苯甲腈TFA盐)(280mg)、4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(227mg，0.9mmol)和DIPEA(387mg，3.0mmol)在iPrOH(10mL)中的混合物在室温下搅拌2小时。将反应混合物浓缩并将残余物通过制备型HPLC(安捷伦(Agilent)G6120B G1315D DADVL检测器和G4260B ELSD，Xbridge C18 5mm 150*4.6mm，流动相A：在水中的NH₄OH 0.1％，B：在CH₃CN中的NH₄OH0.1％)进行纯化。收集所希望的级分并蒸发溶剂，以得到呈白色固体的呈顺式和反式异构体混合物(87mg)的化合物78。通过SFC(IA，2.5*25cm，10um，流动相：CO₂/EtOH(0.05％DEA)＝75/25，50ml/min)分离化合物78，以得到呈白色固体的化合物79(16mg，反式或顺式)和呈白色固体的化合物80(20mg，顺式或反式)。

化合物79：¹H NMR MeOD-d₄(400MHz):δ8.30(s,1H),7.68(s,1H),7.35(d,J＝8.8Hz,1H),6.52-6.45(m,2H),4.09-3.80(m,7H),3.04-3.01(m,2H),2.85-2.75(m,1H),2.63-2.58(m,2H),2.34(s,3H),2.27-2.00(m,6H),1.87-1.75(m,4H)。

化合物80：¹H NMR MeOD-d₄(400MHz):δ8.27(s,1H),7.63(s,1H),7.36(d,J＝8.8Hz,1H),6.53-6.46(m,2H),4.07-3.79(m,7H),3.05-3.02(m,2H),2.84-2.76(m,1H),2.59-2.54(m,2H),2.36(s,3H),2.24-2.18(m,4H),2.08-2.03(m,2H),1.85-1.78(m,4H)。

实例B45

化合物81的制备

向中间体46(4-((6-氮杂螺[3.4]辛-2-基)氨基)-2-((1-甲基哌啶-4-基)氧基)苯甲腈TFA盐)(500mg)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(300mg，1.19mmol)在iPrOH(10mL)中的混合物中添加DIPEA(767mg，5.95mmol)。在室温下搅拌过夜后，将混合物在减压下浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge19*150mm10um，流动相A：H₂O(0.1％TFA)，B：ACN)进行纯化。收集所希望的级分并蒸发溶剂，以得到呈TFA盐的(142mg)。

化合物81：¹H NMR MeOD-d₄(400MHz):δ8.46-8.43(m,1H),7.78-7.76(m,1H),7.33-7.30(m,1H),6.30-6.20(m,2H),4.92-4.88(m,0.5H),4.54-4.48(m,0.5H),4.24-3.74(m,9H),3.55-2.98(m,4H),2.92-2.90(m,1H),2.65-2.59(m,2H),2.28-2.02(m,8H)。

实例B46

化合物82的制备

将中间体49(4-(6-氮杂螺[3.4]辛-2-基氨基)-2-((1-甲基哌啶-4-基)氨基)苯甲腈TFA盐)(60mg)、4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(28mg，0.11mmol)和DIPEA(43mg，0.33mmol)在ⁱPrOH(5mL)中的混合物在室温下搅拌2小时。反应完成后，将反应混合物浓缩并将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：SunFire19*250mm 10um，流动相A：0.1％TFA/H₂O，B：ACN)进行纯化。收集所希望的级分并蒸发溶剂，以得到呈黄色固体的化合物82(34mg，TFA盐)。

化合物82：¹H NMR MeOD-d₄(400MHz):δ8.29-8.27(m,1H),7.67-7.63(m,1H),7.15-7.12(m,1H),6.03-6.00(m,1H),5.88-5.86(m,1H),3.93-3.70(m,8H),3.50-3.38(m,2H),3.16-3.04(m,2H),2.84-2.82(m,3H),2.63-2.51(m,2H),2.27-2.03(m,6H),1.86-1.72(m,2H)。

实例B47

化合物83和84的制备

向中间体35(4-((6-(6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)-6-氮杂螺[3.4]辛-2-基)氨基)苯甲酸)(300mg，0.65mmol)、2-氨基乙烷-1-醇(74mg，1.3mmol)在DMF(5mL)中的溶液中添加HATU(246mg，0.65mmol)和DIPEA(251mg，1.95mmol)。在室温下搅拌3小时后，将反应混合物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge19*150mm10um，流动相A：H₂O(0.1％NH₄OH)，B：ACN)进行纯化。收集所希望的级分并蒸发溶剂，以给出呈白色固体的顺式和反式异构体的混合物(100mg，40％产率)。通过SFC(AD-H，2.5*25cm，10um，流动相：CO₂/EtOH(15％ACN)＝60/40，50ml/min)分离此顺式和反式异构体的混合物，以得到呈白色固体的化合物83(40mg，80％产率；反式或顺式)和呈白色固体的化合物84(37mg，74％产率；顺式或反式)。

化合物83：¹H NMR MeOD-d₄(400MHz):δ8.29(s,1H),7.67-7.63(m,3H),6.58(d,J＝8.8Hz,2H),4.13-4.01(m,1H),3.93-3.88(m,6H),3.68(t,J＝5.9Hz,2H),3.46(t,J＝5.9Hz,2H),2.63-2.57(m,2H),2.11(br s,2H),2.04-1.99(m,2H)。

化合物84：¹H NMR MeOD-d₄(400MHz):δ8.29(s,1H),7.67-7.64(m,3H),6.59(d,J＝8.8Hz,2H),4.13-4.01(m,1H),3.94-3.88(m,6H),3.69(t,J＝6.0Hz,2H),3.47(t,J＝6.0Hz,2H),2.59-2.55(m,2H),2.22(br s,2H),2.08-2.03(m,2H)。

实例B48

化合物85和86的制备

向中间体35(4-((6-(6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)-6-氮杂螺[3.4]辛-2-基)氨基)苯甲酸)(300mg，0.65mmol)、2-甲氧基乙烷-1-胺(197mg，1.3mmol)在DMF(5mL)中的溶液中添加HATU(246mg，0.65mmol)和DIPEA(251mg，1.95mmol)。在室温下搅拌3小时后，将反应混合物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％NH₄OH)，B：ACN)进行纯化。收集所希望的级分并蒸发溶剂，以给出呈白色固体的顺式和反式的混合物(100mg，30％产率)。通过SFC(AD-H，3*25cm，5um，流动相：CO₂/ⁱPrOH(0.1％DEA)＝60/40，50ml/min)分离此顺式和反式异构体的混合物，以得到呈白色固体的化合物85(35mg，70％产率；反式或顺式)和呈白色固体的化合物86(33.67mg，67％产率；顺式或反式)。

化合物85：¹H NMR MeOD-d₄(400MHz):δ8.27(s,1H),7.64-7.62(m,3H),6.58(d,J＝8.4Hz,2H),4.09-4.01(m,1H),3.91-3.83(m,6H),3.58-3.48(m,4H),3.37(s,3H),2.59-2.54(m,2H),2.21(br s,2H),2.102-2.03(m,2H)。

化合物86：¹H NMR MeOD-d₄(400MHz):δ8.29(s,1H),7.67-7.62(m,3H),6.58(d,J＝8.4Hz,2H),4.09-4.00(m,1H),3.94-3.84(m,6H),3.57-3.44(m,4H),3.37(s,3H),2.62-2.57(m,2H),2.11(br s,2H),2.04-1.99(m,2H)。

实例B49

化合物87和88的制备

将中间体35(4-((6-(6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)-6-氮杂螺[3.4]辛-2-基)氨基)苯甲酸)(300mg，0.649mmol)、2-吗啉代乙烷-1-胺(85mg，0.649mmol)、EDCI(125mg，0.649mmol)、HOBT(88mg，0.649mmol)和TEA(197mg，0.1.95mmol)在DCM(5mL)中的溶液在室温下搅拌8小时。将溶液浓缩并用EA(15mL)稀释。将有机层用盐水(15mL X 2)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge19*150mm10um，流动相A：H₂O(0.1％NH₄OH)，B：ACN)进行纯化并用离子交换树脂处理，以得到顺式和反式异构体的混合物(200mg)，将其通过SFC(AD-H，2.5*25cm，10um，流动相：CO₂/EtOH(0.1％DEA)＝60/40，50ml/min)进行分离，以得到呈白色固体的化合物87(60mg，16％产率；反式或顺式)和呈白色固体的化合物88(6mg，2％产率；顺式或反式)。

化合物87：¹H NMR MeOD-d₄(400MHz):δ8.29(s,1H),7.67(s,1H),7.62(d,J＝8.8Hz,2H),6.58(d,J＝8.4Hz,2H),4.08-4.04(m,1H),3.94-3.84(m,6H),3.71(t,J＝4.6Hz,4H),3.51(t,J＝6.8Hz,2H),2.62-2.57(m,8H),2.12(br s,2H),2.05-2.00(m,2H)

化合物88：¹H NMR MeOD-d₄(400MHz):δ8.27(s,1H),7.64-7.62(m,3H),6.59(d,J＝8.8Hz,2H),4.07-4.03(m,1H),3.91-3.83(m,6H),3.70(t,J＝4.6Hz,4H),3.50(t,J＝6.8Hz,2H),2.60-2.54(m,8H),2.21(br s,2H),2.06-2.03(m,2H)

实例B50

化合物89、90和91的制备

向中间体5(160mg，0.469mmol)、5-氨基-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(122mg，0.750mmol)、氰基硼氢化钠(58.9mg，0.937mmol)和MeOH(12mL)的溶液中添加AcOH(56.3mg，0.937mmol)在MeOH(4mL)中的溶液。在45℃下搅拌12小时后，将反应混合物在减压下浓缩至干燥，以得到粗产物，将其用水(5mL)稀释并用乙酸乙酯(20mL x 3)萃取。将合并的有机层在减压下浓缩至干燥以得到粗产物，将其通过制备型HPLC(Gilson 281，XtimateC18 150x 25mm x 5μm，流动相A：水(0.225％甲酸)，B：ACN)进行纯化。收集纯级分并在减压下蒸发，以获得残余物，将其冻干，以得到呈白色固体的化合物89(73.2mg，30％产率)。将化合物89通过SFC(Amylose-C，3*25cm，10um，流动相：CO₂/IPA(0.1％NH₃·H₂O)＝45/55，70ml/min)进一步分离。收集纯级分并在真空下蒸发。将获得的残余物冻干，以给出呈白色粉末的化合物90(21.64mg，35％产率；反式或顺式)和呈白色粉末的化合物91(19.69mg，32％产率；顺式或反式)。

化合物89：¹H NMR DMSO-d₆(400MHz):δ10.45(s,1H),8.38-8.31(m,1H),7.75-7.70(m,1H),6.80-6.77(m,1H),6.24-6.22(m,2H),5.59(br s,1H),4.11-4.03(m,2H),3.87-3.75(m,5H),3.17(s,3H),2.47-2.36(m,2H),2.11-1.86(m,4H)。

化合物90：

¹H NMR DMSO-d₆(400MHz):δ10.46(s,1H),8.32(s,1H),7.70(s,1H),6.79(d,J＝8.8Hz,1H),6.24-6.22(m,2H),5.60-5.58(m,1H),4.07(q,J＝11.2Hz,2H),3.89-3.76(m,5H),3.17(s,3H),2.44-2.37(m,2H),2.33(br s,2H),1.94-1.89(m,2H)

化合物91：¹H NMR DMSO-d₆(400MHz):δ10.46(s,1H),8.33(s,1H),7.75(br s.,1H),6.78(d,J＝8.8Hz,1H),6.24-6.22(m,2H),5.61(d,J＝6.4Hz1H),4.07(q,J＝10.8Hz,2H),3.91-3.78(m,5H),3.17(s,3H),2.47-2.40(m,2H),2.01(br s,2H),1.90-1.86(m,2H)

实例B51

化合物92的制备

向中间体5(150mg，0.439mmol)、4-(1H-吡唑-3-基)苯胺(105mg，0.660mmol)、氰基硼氢化钠(55.2mg，0.878mmol)和干甲醇(10mL)的溶液中添加乙酸(52.8mg，0.879mmol)在甲醇(2mL)中的溶液。在45℃下搅拌6h后，将混合物在室温下冷却并且用水(20mL)稀释。通过饱和的碳酸氢钠调节混合物以获得pH＝8并用DCM(20mL x 3)萃取。将合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩，以给出粗产物，将其通过制备型HPLC(Gilson 281，柱：菲罗门(Phenomenex)Gemini 150*25mm*10um，流动相A：水(0.05％氢氧化铵v/v)，流动相B：ACN)进行纯化。收集纯级分并在真空下蒸发，以给出残余物，将其冻干，以给出呈浅黄色粉末的化合物92(99.0mg，46％产率)。

化合物92：¹H NMR DMSO-d₆(400MHz):δ12.93(br s.,0.5H),12.59(br s.,0.5H),8.34(d,J＝6.0Hz,1H),7.75-7.51(m,4H),6.57(d,J＝8.0Hz,2H),6.46(br s.,1H),6.19-6.03(m,1H),4.11-3.77(m,7H),2.49-2.46(m,2H),2.08-1.93(m,4H)。

实例B52

化合物93、94和95的制备

向中间体5(6-(6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)-6-氮杂螺[3.4]辛-2-酮)(200mg，0.586mmol)、4-氨基-N-甲基苯甲酰胺(132mg，0.879mmol)、氰基硼氢化钠(73.6mg，1.17mmol)和MeOH(20mL)的溶液中添加AcOH(70.4mg，1.17mmol)在MeOH(5mL)中的溶液。在45℃下搅拌12h后，将反应混合物在减压下浓缩至干燥，以得到粗产物，将其通过制备型HPLC(Gilson 281，柱：Agela ASB150x 25mm x 5μm柱，流动相A：水(0.05％HCl)，B：ACN))进行纯化。收集纯级分并在减压下蒸发，以给出残余物，将其冻干，以给出呈顺式和反式异构体混合物(173.9mg，61％产率)的化合物93。将混合物通过SFC(AS-H，3*25cm，5um，流动相：CO₂/EtOH(0.1％NH₃·H₂O)＝55/45，40ml/min)分离。收集纯级分并在减压下蒸发，以获得残余物，将其冻干，以给出呈白色固体的化合物94(36.83mg，23％产率；反式或顺式)和呈白色固体的化合物95(48.21mg，30％产率；顺式或反式)。

化合物93：¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.65-8.55(m,1H),8.04-7.86(m,3H),7.55-7.33(m,2H),4.46-4.13(m,3H),4.12-3.82(m,4H),2.93(s,3H),2.71-2.42(m,4H),2.39-2.31(m,1H),2.28-2.19(m,1H)。

化合物94：¹H NMR DMSO-d₆(400MHz):δ8.32(s,1H),7.99-7.96(m,1H),7.70(s,1H),7.60(d,J＝8.8Hz,2H),6.51(d,J＝8.8Hz,2H),6.45(d,J＝6.4Hz,1H),4.36-3.75(m,7H),2.72(d,J＝4.4Hz,3H),2.47-2.44(m,2H),2.12(br s,2H),1.99-1.95(m,2H)。

化合物95：¹H NMR DMSO-d₆(400MHz):δ8.33(d,J＝5.6Hz,1H),7.99-7.97(m,1H),7.74(s,1H),7.60(d,J＝8.8Hz,2H),6.53-6.47(m,2H),4.11-3.76(m,7H),2.72(d,J＝4.4Hz,3H),2.58-2.51(m,2H),2.02(br s,2H),1.95-1.90(m,2H)。

实例B53

化合物96、97和98的制备

向中间体4(200mg，0.586mmol)、4-氨基-N-甲基苯甲酰胺(132mg，0.879mmol)、氰基硼氢化钠(73.6mg，1.17mmol)和MeOH(20mL)的溶液中添加CH₃COOH(70.4mg，1.17mmol)在MeOH(6mL)中的溶液。在45℃下搅拌12小时后，将反应混合物在减压下浓缩至干燥，以得到粗产物，将其通过制备型HPLC(Gilson 281，Xtimate C18 150x 25mm x 5μm柱(洗脱液：30％至60％(v/v)水(0.225％FA)-ACN))进行纯化。收集纯级分并在减压下蒸发，以获得残余物，将其冻干，以给出化合物96(150mg)(白色固体)。将化合物96通过SFC(Amylose-C，3*25cm，10um，流动相：CO₂/EtOH(0.1％NH₃·H₂O)＝45/55，80ml/min)进一步分离。收集纯级分并在减压下去除挥发物，以获得残余物，然后将其冻干，以给出呈白色固体的化合物97(38.8mg，14％产率)和呈白色固体的化合物98(41.2mg，15％产率)。

化合物96：¹H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.26(s,1H),7.65-7.59(m,2H),7.37(s,1H),6.65-6.60(m,2H),4.52-4.15(m,4H),4.00-3.90(m,1H),3.90-3.81(m,2H),2.87(s,3H),2.47-2.37(m,1H),2.28-2.12(m,2H),2.08-1.90(m,2H),1.73-1.61(m,1H)。

化合物97：¹H NMR DMSO-d₆(400MHz):δ8.26(s,1H),7.65-7.58(m,2H),7.37(s,1H),6.68-6.55(m,2H),4.53-4.06(m,4H),4.01-3.90(m,1H),3.90-3.78(m,2H),2.87(s,3H),2.48-2.36(m,1H),2.28-2.10(m,2H),2.08-1.90(m,2H),1.73-1.59(m,1H)。

化合物98：¹H NMR DMSO-d₆(400MHz):δ8.26(s,1H),7.66-7.56(m,2H),7.37(s,1H),6.66-6.57(m,2H),4.58-4.03(m,4H),3.99-3.90(m,1H),3.90-3.81(m,2H),2.87(s,3H),2.49-2.35(m,1H),2.30-2.11(m,2H),2.09-1.89(m,2H),1.76-1.51(m,1H)。

实例B54

化合物99的制备

向中间体55(40.0mg，粗品)在DCM(0.5mL)中的溶液中添加TFA(0.1mL，1.35mmol)。在10℃下搅拌2小时后，用饱和的NaHCO₃(5mL)将反应混合物调节至pH＝6-7，然后用水(10mL)稀释并用DCM(15mL x 3)萃取。将合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩，以获得粗产物，将其通过制备型HPLC(Gilson281，柱：Xtimate C18 150*25mm*5um，流动相A：水(0.225％甲酸)，B：ACN)进行纯化。收集所希望的级分并蒸发溶剂，以给出呈白色固体的化合物99(8.35mg，甲酸盐)。

化合物99：¹H NMR DMSO-d₆(400MHz):δ11.18(br s,1H),8.28(s,1H),8.23(s,1H),7.37(s,1H),7.19(d,J＝8.4Hz,1H),7.07-7.05(m,2H),5.03(s,2H),4.07-3.98(m,6H),3.75(s,2H),3.17-3.14(m,1H),2.14-2.09(m,1H),2.05-1.97(m,1H),1.84-1.78(m,3H),1.53-1.47(m,1H)。

实例B56

化合物102和103的制备

将中间体5(6-(6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)-6-氮杂螺[3.4]辛-2-酮)(300mg，0.880mmol)、N-((1R,4R)-4-氨基环己基)甲烷磺酰胺(169mg，0.880mmol)和钛酸四异丙酯(1.25g，4.40mmol)在MeOH(5mL)中的溶液在50℃下搅拌3h。随后将混合物冷却至室温并添加NaBH₃CN(110mg，1.76mmol)。将混合物在室温下再搅拌3h，并且然后倾倒进水(10mL)中并用HCl(1M)调节ph<7。将混合物用EtOAc(50mL X 3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL X 2)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩。将残余物通过快速(DCM:MeOH＝10:1，v/v)进行纯化，以得到顺式和反式异构体的混合物(在螺部分)(180mg，游离碱)。将混合物通过SFC(AD-H，2.5*25cm，10um，流动相：CO₂/MeOH(0.03％DEA)＝80/20，50ml/min)分离，以得到呈白色固体的化合物102(50.0mg)和呈白色固体的化合物103(16.8mg)。

化合物102：¹H NMR MeOD-d₄(400MHz):δ8.27(s,1H),7.64(s,1H),3.91-3.83(m,6H),3.55-3.50(m,1H),3.20-3.14(m,1H),2.93(s,3H),2.53-2.48(m,1H),2.41-2.35(m,2H),2.05-1.92(m,8H),1.37-1.22(m,4H)

化合物103：¹H NMR MeOD-d₄(400MHz):δ8.27(s,1H),7.61(s,1H),3.86(q,J＝10.8Hz,4H),3.75(br s,2H),3.48-3.44(m,1H),3.20-3.14(m,1H),2.93(s,3H),2.48-2.45(m,1H),2.11(br s,2H),2.04-2.01(m,2H),1.97-1.92(m,4H),1.37-1.16(m,4H)

实例B57

化合物104和105的制备

在0℃下，将中间体59(4-((6-(6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)-6-氮杂螺[3.4]辛-2-基)氨基)苯甲酸TFA盐)(160mg)和DMF(8mL)的溶液添加哌嗪-2-酮盐酸盐(56.7mg，0.415mmol)、DIEA(179mg，1.39mmpl)和HATU(158mg，0.416mmol)。将反应物混合物温热至室温并搅拌2h。然后将反应混合物在减压下浓缩至干燥，以得到粗产物，将其通过制备型HPLC(Gilson 281，柱：Xtimate C18 150x 25mm x 5μm柱，流动相A：水(0.225％FA)，B：ACN)进行纯化。将纯级分冻干以给出呈白色固体的顺式和反式的混合物(70mg，77％产率)，将其通过SFC(AS，3*25cm，10um，流动相：CO₂/MeOH(0.1％NH₃.H₂O)＝55/45，70ml/min)进行分离。收集纯级分并将挥发物在减压下去除，以获得两种残余物，将其冻干以给出呈白色固体的化合物104(4.76mg，6.77％产率)和呈白色固体的化合物105(4.36mg)。

化合物104：¹H NMR DMSO-d₆(400MHz):δ8.32(s,1H),8.08(s,1H),7.71(s,1H),7.24(d,J＝8.4Hz,2H),6.55(d,J＝8.4Hz,2H),6.49(d,J＝6.0Hz,1H),4.13-3.92(m,6H),3.92-3.67(m,3H),3.67-3.61(m,2H),3.25-3.19(m,2H),2.47-2.43(m,2H),2.19-2.07(m,2H),2.02-1.93(m,2H)

化合物105：¹H NMR DMSO-d₆(400MHz):δ8.33(s,1H),8.08(s,1H),7.74(s,1H),7.23(d,J＝8.8Hz,2H),6.54(d,J＝8.4Hz,2H),6.51(d,J＝6.4Hz,1H),4.13-3.93(m,6H),3.93-3.67(m,3H),3.67-3.58(m,2H),3.25-3.18(m,2H),2.56-2.52(m,2H),2.06-1.99(m,2H),1.96-1.88(m,2H)

实例B58

化合物106的制备

将中间体5(6-(6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)-6-氮杂螺[3.4]辛-2-酮)(136mg，0.398mmol)、N-((1R,4R)-4-(氨基甲基)环己基)乙烷磺酰胺三氟乙酸(200mg，0.598mmol)、N,N-二异丙基乙胺(155mg，1.20mmol)和干DCM(10mL)的溶液在25℃下搅拌2h并且然后添加三乙酰氧基硼氢化钠(338mg，1.60mmol)。在25℃下搅拌8h后，将反应混合物用DCM(30mL)稀释并用水(20mL x 3)洗涤。将有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩，以给出残余物，将其通过制备型HPLC(Gilson 281，柱：Xtimate C18150x 25mm x5μm柱，流动相A：水(0.225％甲酸)，B：ACN)进行纯化。收集纯级分并将溶剂在真空下蒸发以给出残余物，将其冻干以给出呈白色粉末的化合物106(163.08mg，73.8％产率)。

化合物106：¹H NMR DMSO-d₆(400MHz):δ8.32(s,1H),7.74-7.65(m,1H),7.06-6.99(m,1H),4.06(q,J＝10.8Hz,2H),3.95-3.43(m,8H),3.07-2.92(m,3H),2.36-2.15(m,4H),2.10-1.97(m,2H),1.93-1.84(m,2H),1.84-1.75(m,2H),1.54-1.40(m,1H),1.27-1.14(m,5H),1.06-0.90(m,2H)。

实例B59

化合物107的制备

向中间体5(6-(6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)-6-氮杂螺[3.4]辛-2-酮)(250mg，0.549mmol)、1-(4-氨基苄基)咪唑烷-2-酮(100mg，0.523mmol)、氰基硼氢化钠(70.0mg，1.11mmol)和MeOH(18.0mL)的溶液中添加乙酸(70.0mg，1.17mmol)在MeOH(2.0mL)中的溶液。在40℃下搅拌14h后，将混合物倾倒进水(15mL)中并通过DCM(10mL x 3)萃取。将合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并在真空中浓缩，以获得粗残余物，将其通过制备型HPLC(Gilson 281，柱：Xtimate C18 150x 25mm x 5μm柱，流动相A：水(0.225％FA)，B：ACN)进行纯化。收集纯级分并冻干，以给出呈白色粉末的化合物107(46.2mg，16％产率)。

化合物107：¹H NMR DMSO-d₆(400MHz):δ8.36-8.27(m,1H),7.78-7.64(m,1H),7.01-6.86(m,2H),6.54-6.42(m,2H),6.36-6.25(m,1H),5.94-5.83(m,1H),4.18-3.97(m,4H),3.95-3.58(m,5H),3.21-2.99(m,4H),2.60-2.56(m,2H),2.16-1.86(m,4H)。

实例B60

化合物108和化合物109的制备

将中间体2(100mg，粗HCl盐，0.29mmol)和2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-甲醛(CAS#：106429-59-8)(71mg，0.44mmol)在MeOH(2mL)中的溶液在室温下搅拌2h。添加NaBH₃CN(37mg，0.58mmol)并将反应在室温下搅拌过夜。将反应混合物用H₂O稀释并用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge 19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％TFA)，B：ACN)进行纯化，以给出外消旋化合物14(49mg，TFA盐)。将获得的外消旋化合物14通过SFC(SFC80，Waters，IC2.5*25cm，10um，A：超临界CO₂，B：MeOH/DEA＝100/0.03；A:B＝70/30；流速：70mL/min；柱温度(T)：25℃；背压(BPR)：100巴)进行分离，以给出呈白色固体的化合物108(呈TFA盐的12mg，6.8％产率)和呈白色固体的化合物109(呈TFA盐的13mg，7.3％产率)。

实例B61

化合物110和化合物111的制备

向中间体2(150mg，粗HCl盐，约0.44mmol)在MeOH(3mL)中的搅拌溶液中在室温下添加中间体70(185mg，纯度：约50％，约0.53mmol)和AcOH(3滴)。搅拌2h后，添加NaBH₃CN(55.30mg，0.88mmol)并将反应在室温下搅拌过夜。将反应混合物浓缩并将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：SunFire 19*250mm10um，流动相A：0.1％TFA/H₂O，B：ACN)进行纯化并将获得的外消旋物通过SFC(SFC80，Waters；AD2.5*25cm，10um；A：超临界CO₂，流动相B：MeOH；A:B＝70/30；流速：60mL/min；柱温度(T)：25℃；背压(BPR)：100巴)进行分离，以得到呈白色固体的化合物110(38.78mg，17％产率)和呈白色固体的化合物111(24.88mg，11％产率)。

实例B62

化合物112和化合物113的制备

将中间体78(330mg，粗HCl盐)、4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(212mg，0.84mmol)和DIPEA(271mg，2.10mmol)在i-PrOH(10mL)中的混合物在室温下搅拌2h。将反应混合物在减压下浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters2767/Qda，柱：SunFire 19*250mm10um，流动相A：0.1％TFA/H₂O，B：ACN)进行纯化，以给出所希望的外消旋产物。将外消旋物通过SFC(SFC80，Waters；OJ-H2.5*25cm，10um；A：超临界CO₂，流动相B：MeOH；A:B＝70/30；流速：70mL/min；柱温度(T)：25℃；背压(BPR)：100巴)进行分离，以给出呈白色固体的化合物112(63.38mg，19％产率)和呈白色固体的化合物113(46.77mg，14％产率)。

实例B63

化合物114的制备

向中间体80(300mg，粗TFA盐，约0.84mmol)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(252mg，1.0mmol)在i-PrOH(10mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(387mg，3.0mmol)。在室温下搅拌2h后，将反应混合物用H₂O(5mL)处理，过滤。将滤饼通过制备型HPLC(安捷伦G6120B G1315D DADVL检测器和G4260B ELSD，Xbridge C18 5mm150*4.6mm，流动相A：在水中的NH₄OH 0.1％，B：在CH₃CN中的NH₄OH 0.1％)进行纯化，以得到呈白色固体的化合物114(200mg，52％产率)。

实例B64

化合物115和化合物116的制备

向中间体62(100mg，0.268mmol)、3-(1H-吡唑-3-基)苯甲醛(CAS#：179057-26-2)(56mg，0.32mmol)和Ti(i-PrO)₄(76mg，0.27mmol)在DCE(5mL)中的搅拌混合物中在室温下分批添加NaBH(OAc)₃(171mg，0.81mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应用NaHCO₃水溶液淬灭并将生成物用DCM萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。将粗产物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge 19*150mm10um，流动相A：H₂O(0.1％ NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以给出呈白色固体的外消旋物(80mg)。将外消旋物通过SFC(仪器：Waters-SFC80；柱：IA-H(2.5*25cm，10um)；流动相A：超临界CO₂，流动相B：MeOH；A:B＝60/40以70mL/min；循环时间：18min；注射体积：3.5mL；检测器波长：214nm；柱温度(T)：25℃；BPR：100巴)进行分离，以得到化合物115(25.8mg，18％产率)和化合物116(27.90mg，19％产率)。

实例B65

化合物117的制备

向中间体62(120mg，0.32mmol)、2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-甲醛(CAS#：106429-59-8)(104mg，0.64mmol)和Ti(i-PrO)₄(92mg，0.32mmol)在DCE/DMSO(6mL/2mL)中的搅拌混合物中在0℃下分批添加NaBH(OAc)₃(205mg，0.97mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应用NaHCO₃水溶液淬灭并将生成物用DCM萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge 19*150mm10um，流动相A：H₂O(0.1％ TFA)，B：ACN)进行纯化，以给出呈白色固体的化合物117(22mg TFA盐，产率：13％)。

实例B66

化合物118的制备

向中间体72(150mg，0.421mmol)在DCE(2mL)中的搅拌溶液中在室温下添加3-(1H-吡唑-3-基)苯甲醛(CAS#：179057-26-2)(108mg，0.63mmol)和Ti(i-PrO)₄(120mg，0.42mmol)。将反应在室温下搅拌30分钟。添加NaBH₃CN(54mg，0.84mmol)。将反应在室温下搅拌过夜。将反应混合物在减压下浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge19*150mm10um，流动相A：H₂O(0.1％TFA)，B：ACN)进行纯化，以给出所希望的外消旋产物(120mg，TFA盐)。将外消旋物通过SFC(SFC80，Waters，AD-H 2.5*25cm，10um，A：超临界CO₂，B：EtOH/ACN＝85/15；A:B＝55/45；流速：50mL/min；柱温度(T)：25℃；BPR：100巴)进行分离，以得到化合物118(28mg TFA盐，10％产率)。

实例B67

化合物119的制备

向中间体72(250mg，0.70mmol)在DCE(2.5mL)中的搅拌溶液中添加2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-甲醛(CAS#：106429-59-8)(170mg，1.06mmol)、DMSO(0.5mL)和Ti(i-PrO)₄(200mg，0.70mmol)。将混合物搅拌30分钟。添加NaBH(OAc)₃(295mg，1.40mmol)。将反应在室温下搅拌过夜。将反应混合物在减压下浓缩并将残余物通过制备型HPLC(Waters2767/Qda，柱：Waters Xbridge19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％TFA)，B：ACN)进行纯化，以得到化合物119(156mg TFA盐，44％产率)。

实例B68

化合物120的制备

向中间体76(250mg，0.67mmol)、2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-甲醛(CAS#：106429-59-8)(218mg，1.35mmol)和Ti(i-PrO)₄(192mg，0.67mmol)在DCE/DMSO(6mL/2mL)中的搅拌混合物中在0℃下分批添加NaBH(OAc)₃(428mg，2.02mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应用NaHCO₃水溶液淬灭并将生成物用DCM萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％TFA)，B：ACN)进行纯化，以给出呈白色固体的化合物120(60mg，TFA盐，产率：17％)。

实例B69

化合物121和化合物122的制备

将中间体74(160mg，0.300mmol)和CuSO₄·5H₂O(8mg，0.030mmol)在甲胺(在THF中的2M)(2mL)中的悬浮液在密封容器中在100℃下搅拌过夜。将反应混合物浓缩。将残余物通过柱色谱法(DCM/MeOH(从50:1至15:1，v/v)洗脱)进行纯化，以给出呈黄色固体的所希望产物的外消旋物。将外消旋物通过SFC(仪器：Waters-SFC80；柱：OJ-H(2.5*25cm，10um)；流动相A：超临界CO₂，流动相B：MeOH；A:B＝80/20以80mL/min；循环时间：8.5min；注射体积：1.3mL；检测器波长：214nm；柱温度(T)：25℃；BPR：100巴)进行分离，以得到化合物121(32.9mg，20％产率)和化合物122(31.3mg，19％产率)。

实例B70

化合物123的制备

将中间体65(400mg，0.786mmol)在MeNH₂(在THF中的2M)(10mL)中的溶液在100℃下搅拌过夜。将冷却的反应混合物浓缩。将残余物通过制备型TLC(DCM:MeOH＝15:1，v/v)进行纯化，以给出化合物123(180mg，45％产率)。

实例B71

化合物124的制备

向中间体83(150mg，粗TFA盐，约0.31mmol)在i-PrOH(1mL)中的搅拌溶液中添加4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(79mg，0.31mmol)和DIPEA(202mg，1.57mmol)。在室温下搅拌过夜后，将反应混合物在减压下浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge 19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％ TFA)，B：ACN)进行纯化，以得到呈白色固体的化合物124(85mg，TFA盐，约42％产率，经2步)。

实例B72

化合物125的制备

将中间体85(50mg，粗HCl盐，约0.107mmol)、DIPEA(70mg，0.55mmol)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(27mg，0.11mmol)在干i-PrOH(1mL)中的溶液在室温下搅拌过夜。将反应混合物浓缩并将残余物通过制备型HPLC(Waters2767/Qda，柱：Waters Xbridge 19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％TFA)，B：ACN)进行纯化，以给出呈白色固体的化合物125(28mg，呈TFA盐，约40％产率，经2步)。

实例B73

化合物126的制备

向中间体87(90mg，粗TFA盐，约0.183mmol)在i-PrOH(1mL)中的搅拌溶液中添加4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(46mg，0.18mmol)和DIPEA(202mg，1.57mmol)。将反应在室温下搅拌过夜。将反应混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters2767/Qda，柱：Waters Xbridge 19*150mm10um，流动相A：H₂O(0.1％TFA)，B：ACN)进行纯化，以得到呈白色固体的化合物126(66mg，TFA盐，58％产率，经2步)。

实例B74

化合物127的制备

向中间体89(80mg，粗TFA盐，0.175mmol)在i-PrOH(2mL)中的搅拌溶液中添加4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(45mg，0.18mmol)和DIPEA(114mg，0.89mmol)。将反应在室温搅拌。将反应混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters2767/Qda，柱：Waters Xbridge19*150mm10um，流动相A：H₂O(0.1％TFA)，B：ACN)进行纯化，以得到呈白色固体的化合物127(61mg，TFA盐，56％产率，经2步)。

实例B75

化合物128的制备

向中间体91(100mg，粗TFA盐，约0.203mmol)在i-PrOH(1mL)中的搅拌溶液中添加4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(53mg，0.21mmol)和DIPEA(135mg，1.05mmol)。将反应在室温下搅拌过夜。将反应混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge19*150mm10um，流动相A：H₂O(0.1％TFA)，B：ACN)进行纯化，以得到呈白色固体的化合物128(69mg，TFA盐，59％产率，经2步)。

实例B76

化合物129的制备

向中间体93(40mg，粗HCl盐，约0.146mmol)在i-PrOH(10mL)中的溶液中添加DIPEA(56mg，0.438mmol)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(36mg，0.146mmol)。将反应在室温下搅拌3h。将反应混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：SunFire 19*250mm 10um，流动相A：0.1％TFA/H₂O，B：ACN)进行纯化，以得到化合物129(18mg，25％产率)。

实例B77

化合物130的制备

向中间体94(88mg，粗HCl盐，约0.310mmol)在i-PrOH(5mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(80mg，0.930mmol)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(78mg，0.310mmol)。将反应在室温下搅拌3h。将反应混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％NH₄OH)，B：ACN)进行纯化并将获得的产物用离子交换树脂进一步处理，以得到化合物130(95.53mg，61％产率)。

实例B78

化合物131的制备

向中间体95(44mg，粗HCl盐，约0.156mmol)在i-PrOH(10mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(60mg，0.409mmol)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(39mg，0.154mmol)。将反应在室温下搅拌3h。将反应混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge 19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％NH₄OH)，B：ACN)进行纯化并将获得的产物用离子交换树脂处理，以得到化合物131(43.22mg，75％产率)。

实例B79

化合物132的制备

向中间体96(35mg，粗HCl盐，约0.145mmol)在i-PrOH(5mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(56mg，0.435mmol)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(37mg，0.145mmol)。将反应在室温下搅拌3h。将反应混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge 19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％NH₄OH)，B：ACN)进行纯化并将获得的产物用离子交换树脂处理，以得到化合物132(27.8mg，40％产率，甲酸盐)。

实例B80

化合物133的制备

向中间体97(58mg，粗HCl盐，约0.212mmol)在i-PrOH(5mL)中的溶液中添加DIPEA(82mg，0.634mmol)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(53mg，0.212mmol)。将反应在室温下搅拌3h。随后，将反应混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters2767/Qda，柱：Waters Xbridge19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％NH₄OH)，B：ACN)进行纯化并将获得的产物用离子交换树脂处理，以得到化合物133(32.5mg，31％产率)。

实例B81

化合物134、化合物135、化合物136和化合物137的制备

向中间体97a(1.3g，粗TFA盐，约3.202mmol)在i-PrOH(10mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(1.24g，9.615mmol)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(808mg，3.205mmol)。将反应在室温下搅拌3h。将反应混合物浓缩。将残余物通过硅胶色谱(PE/EA(5/1，v/v)洗脱)进行纯化，以给出化合物133(701mg)。将外消旋物通过SFC(SFC80，Waters；IA-H2.5*25cm，10um；A：超临界CO₂，流动相B：EtOH/ACN＝85/15；A:B＝63/37；流速：50mL/min；柱温度(T)：25℃；BPR：100巴)进行分离，以得到化合物134(105.15mg，6.7％产率)、化合物135(76.2mg，4.8％产率)、化合物136(79.30mg，5.0％产率)和化合物137(84.5mg，5.3％产率)。

实例B82

化合物138的制备

向中间体98(88mg，粗HCl盐，约0.312mmol)在i-PrOH(10mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(120mg，0.936mmol)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(78mg，0.312mmol)。将反应在室温下搅拌3h。将反应混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge19*150mm10um，流动相A：H₂O(0.1％ NH₄OH)，B：ACN)进行纯化并将获得的产物用离子交换树脂处理，以得到化合物138(70.1mg，45％产率，甲酸盐)。

实例B83

化合物139、化合物140、化合物141和化合物142的制备

向中间体98a(1.0g，粗TFA盐，约2.395mmol)在i-PrOH(10mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(928mg，7.191mmol)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(604mg，2.397mmol)。将反应在室温下搅拌12h。将反应混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以得到外消旋化合物138(488mg)。将外消旋物通过SFC(SFC80，Waters；OJ-H 0.46*15cm，2ul；HEP:EtOH(0.05％DEA)＝60/40；流速：70g/min；柱温度(T)：25℃；BPR：100巴)进行分离，得到化合物139(48.2mg，4.0％产率)、化合物140(25.3mg，2.1％产率)、化合物141(92.6mg，7.7％产率)和化合物142(126.2mg，10％产率)。

实例B84

化合物143的制备

向中间体99(120mg，粗TFA盐，约0.338mmol)在i-PrOH(10mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(182mg，1.41mmol)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(118mg，0.47mmol)。将反应在室温下搅拌12h。将反应混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge 19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％NH₄OH)，B：ACN)进行纯化并将获得的产物用离子交换树脂进一步处理，以得到化合物143(34.16mg，15％产率)。

实例B85

化合物144、145、146和147的制备

向中间体99(287mg，粗TFA盐，1.125mmol)在i-PrOH(10mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(435mg，3.376mmol)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(283mg，1.125mmol)。将反应在室温下搅拌12h。将反应混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge 19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以得到外消旋化合物143(280mg)。将外消旋物通过SFC(SFC80，Waters；IA-H2.5*25cm，10um；A：超临界CO₂，流动相B：EtOH/IPA＝38.3/61.7；A:B＝60/40；流速：70g/min；柱温度(T)：25℃；BPR：100巴)进行分离，以得到化合物144(18.9mg，14％产率)、化合物145(16.2mg，11％产率)、化合物146(21.7mg，16％产率)和化合物147(17.0mg，12％产率)。

实例B86

化合物35、149和150的制备

将中间体3(131mg，0.38mmol)、溴苯(CAS#：108-86-1)(50mg，0.32mmol)、Pd₂(dba)₃(5mg)、BrettPhos(5mg)和t-BuONa(92mg，0.95mmol)在1,4-二噁烷(3mL)中的混合物在130℃下用微波辐射搅拌2h。将冷却的反应混合物用水稀释并用EtOAc(50mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：WatersXbridge 19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以给出呈黄色固体的化合物35(顺式和反式的混合物)(42.3mg，23％产率)。将化合物35(顺式和反式的混合物)(18mg)通过SFC(ChiralCel OJ-H大赛璐化学有限公司，I.D.250*30mm，5um，A：超临界CO₂，B：MeOH(0.1％DEA)；A:B＝60/40；流速：50mL/min；柱温度(T)：38℃；喷嘴压力：100巴；喷嘴温度：60℃；蒸发器温度：20℃；微调器温度：25℃；波长：220nm)进行分离，以给出呈白色固体的化合物149(反式或顺式)(5mg，27％产率)和呈白色固体的化合物150(顺式或反式)(6mg，33％产率)。

实例B87

化合物151的制备

在Ar下在室温下，向中间体3(300mg，0.88mmol，TFA盐)在1,4-二噁烷(3mL)中的溶液中添加2-溴吡啶(CAS#：109-04-6)(157mg，1.0mmol)、t-BuONa(192mg，2.00mmol)、BrettPhos(48mg，0.09mmol)和Pd₂(dba)₃(82mg，0.09mmol)。将反应混合物在Ar气氛下在110℃下搅拌12h。将反应混合物冷却至室温，用水稀释并用EtOAc(100mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(50mL X 2)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩滤液。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：SunFire 19*250mm 10um，流动相A：0.1％NH₃H₂O B：ACN)进行纯化，以得到化合物151(25.06mg，6.7％产率)。

实例B88

化合物152和化合物153的制备

在Ar下在室温下，向中间体3(300mg，0.88mmol，TFA盐)在1,4-二噁烷(3mL)中的溶液中添加3-溴吡啶(CAS#：626-55-1)(158mg，1.0mmol)、t-BuONa(192mg，2.00mmol)、BrettPhos(48mg，0.09mmol)和Pd₂(dba)₃(82mg，0.09mmol)。将反应混合物在Ar下在110℃下搅拌12h。将反应混合物冷却至室温，用水稀释并用EtOAc(10mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(25mL X 2)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：SunFire 19*250mm 10um，流动相A：0.1％TFA/H₂O，B：ACN)进行纯化，以给出所希望的产物(顺式和反式的混合物)。将获得的产物通过SFC(SFC80，Waters；OJ2.5*25cm，10um；A：超临界CO₂，流动相B：EtOH/ACN＝85/15；A:B＝60/40；流速：70mL/min；柱温度(T)：25℃；BPR：100巴)进行分离，以得到化合物152(反式或顺式)(8.8mg，2.3％产率)和化合物153(顺式或反式)(19.8mg，5.3％产率)。

实例B89

化合物154和化合物155的制备

在Ar下在室温下，向中间体3(300mg，0.88mmol，TFA盐)在1,4-二噁烷(3mL)中的溶液中添加4-溴吡啶(CAS#：1120-87-2)(157mg，1.0mmol)、t-BuONa(192mg，2.00mmol)、BrettPhos(48mg，0.09mmol)和Pd₂(dba)₃(82mg，0.09mmol)。将反应在Ar下在110℃下搅拌12h。将反应混合物冷却至室温，倾倒进水(10mL)中并用EtOAc(20mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(50mL X 2)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩滤液。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：SunFire 19*250mm 10um，流动相A：0.1％ TFA/H₂O，B：ACN)进行纯化，以给出所希望的产物(顺式和反式的混合物)。将获得的产物通过SFC(SFC80，Waters；OJ2.5*25cm，10um；A：超临界CO₂，流动相B：EtOH/ACN＝85/15；A:B＝60/40；流速：80mL/min；柱温度(T)：25℃；BPR：100巴)进行分离，以得到化合物154(反式或顺式)(14.19mg，3.8％产率)和化合物155(顺式或反式)(14.95mg，4.0％产率)。

实例B90

化合物156的制备

在Ar下在室温下，向中间体3(300mg，0.88mmol，TFA盐)在1,4-二噁烷(3mL)中的溶液中添加1-溴-2-氟苯(CAS#：1072-85-1)(175mg，1.0mmol)、t-BuONa(192mg，2.00mmol)、BrettPhos(48mg，0.09mmol)和Pd₂(dba)₃(82mg，0.09mmol)。将反应在Ar气氛下在130℃下搅拌12h。将反应混合物冷却至室温，用水(20mL)稀释并用EtOAc(20mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(10mL X 2)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩滤液。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：SunFire 19*250mm 10um，流动相A：0.1％NH₃/H₂O，B：ACN)进行纯化，以得到化合物156(顺式和反式的混合物)(65.00mg，97％产率)。

实例B91

化合物157的制备

在Ar下在室温下，向中间体3(300mg，0.88mmol，TFA盐)在1,4-二噁烷(3mL)中的溶液中添加1-溴-3-氟苯(CAS#：1073-06-9)(175mg，1.0mmol)、t-BuONa(192mg，2.00mmol)、BrettPhos(48mg，0.09mmol)和Pd₂(dba)₃(82mg，0.09mmol)。将反应在Ar气氛下在110℃下搅拌2h。将反应混合物冷却至室温，倾倒进水(50mL)中并用EtOAc(50mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(50mL X 2)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩滤液。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：SunFire 19*250mm10um，流动相A：0.1％ NH₃H₂O，B：ACN)进行纯化，以得到呈白色固体的化合物157(顺式和反式的混合物)(45.8mg，96％)。

实例B92

化合物158的制备

在Ar下在室温下，向中间体3(300mg，0.88mmol，TFA盐)在1,4-二噁烷(3mL)中的溶液中添加1-溴-4-氟苯(CAS#：460-00-4)(175mg，1.0mmol)、t-BuONa(192mg，2.00mmol)、BrettPhos(48mg，0.09mmol)和Pd₂(dba)₃(82mg，0.09mmol)。将反应在Ar气氛下在110℃下搅拌12h。将反应混合物冷却至室温，用水(50mL)稀释并用EtOAc(50mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(50mL X 2)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩滤液。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：SunFire 19*250mm 10um，流动相A：0.1％NH₃·H₂O，B：ACN)进行纯化，以得到化合物158(顺式和反式的混合物)(58.7mg，15％产率)。

实例B93

化合物159的制备

将中间体3(200mg，0.584mmol，TFA盐)、1-溴-2-氯苯(112mg，0.584mmol)、Pd₂(dba)₃(53mg，0.058mmol)，BrettPhos(31mg，0.058mmol)和t-BuONa(168mg，1.754mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的混合物在120℃下在微波辐射下搅拌2h。将冷却的反应混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge 19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％ NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以得到化合物159(顺式和反式的混合物)(46.9mg，17％)。

实例B94

化合物160的制备

将中间体3(200mg，0.584mmol，TFA盐)、1-溴-3-氯苯(112mg，0.584mmol)、Pd₂(dba)₃(53mg，0.058mmol)，BrettPhos(31mg，0.058mmol)和t-BuONa(168mg，1.754mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的混合物在120℃下在微波辐射下搅拌2h。将冷却的反应混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge 19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％ NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以得到化合物160(顺式和反式的混合物)(53.8mg，20％产率)。

实例B95

化合物161的制备

将中间体3(300mg，0.877mmol，TFA盐)、1-溴-4-氯苯(CAS#：106-39-8)(168mg，0.877mmol)、Pd₂(dba)₃(80mg，0.088mmol)、Brettphos(47mg，0.088mmol)和K₂CO₃(363mg，2.631mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的混合物在Ar下在80℃下搅拌过夜。将冷却的反应混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge 19*150mm10um，流动相A：H₂O(0.1％ NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以得到化合物161(顺式和反式的混合物)(39.7mg，10％产率)。

实例B96

化合物162的制备

在微波管中，向中间体3(220mg，0.64mmol，TFA盐)在1,4-二噁烷(2mL)中的溶液中添加2-溴苄腈(CAS#：2042-37-7)(351mg，1.93mmol)、Cs₂CO₃(629mg，1.93mmol)、BrettPhos(34mg，0.06mmol)和Pd₂(dba)₃(59mg，0.06mmol)。将反应混合物用Ar鼓泡并且然后将反应混合物在100℃下用微波辐射搅拌2h。将冷却的反应混合物用水(20mL)稀释并用EtOAc(20mLX 3)萃取。将合并的有机萃取物用水(20mL X 3)洗涤、经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩滤液。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge 19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％ TFA)，B：ACN)进行纯化，以得到化合物162(顺式和反式的混合物)(72mg，TFA盐，25％产率)。

实例B97

化合物163的制备

在微波管中，向中间体3(200mg，0.584mmol，TFA盐)在1,4-二噁烷(2mL)中的溶液中添加3-溴苄腈(CAS#：6952-59-6)(319mg，1.75mmol)、Cs₂CO₃(572mg，1.75mmol)、BrettPhos(50mg，0.06mmol)和Pd₂(dba)₃(50mg，0.09mmol)。将反应混合物用Ar鼓泡并且然后将反应混合物在100℃下用微波辐射搅拌2h。将冷却的反应混合物用水(20mL)稀释并用EtOAc(20mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用水(20mL X 3)洗涤、经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩滤液。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge 19*150mm10um，流动相A：H₂O(0.1％TFA)，B：ACN)进行纯化，以得到化合物163(顺式和反式的混合物)(206mg，TFA盐，63％产率)。

实例B98

化合物164的制备

在Ar下在室温下，向中间体3(300mg，0.88mmol，TFA盐)在1,4-二噁烷(3mL)中的溶液中添加4-溴苄腈(CAS#：623-00-7)(479mg，2.63mmol)、Cs₂CO₃(858mg，2.63mmol)、BrettPhos(75mg，0.08mmol)和Pd₂(dba)₃(76mg，0.14mmol)。将反应混合物在Ar下在80℃下搅拌2h。将冷却的反应混合物用水(30mL)稀释并用EtOAc(30ml X 3)萃取。将合并的有机萃取物用水(30mL X 3)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩滤液。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％ NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以得到化合物164(顺式和反式的混合物)(266mg，68％产率)。

实例B99

化合物165的制备

将中间体3(200mg，0.58mmol，TFA盐)、1-溴-2-甲基苯(CAS#：95-46-5)(300mg，1.75mmol)、Pd₂(dba)₃(30mg)、BrettPhos(30mg)和t-BuONa(168mg，1.75mmol)在1,4-二噁烷(5mL)中的混合物在110℃下用微波辐射搅拌2h。将冷却的反应混合物用水稀释并用EtOAc(50mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩滤液。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge 20*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％ NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以给出呈白色固体的化合物165(顺式和反式的混合物)(33.3mg，13％产率)。

实例B100

化合物166的制备

将中间体3(200mg，0.584mmol，TFA盐)、1-溴-3-甲基苯(CAS#：591-17-3)(300mg，1.75mmol)、Pd₂(dba)₃(30mg)、BrettPhos(30mg)和t-BuONa(168mg，1.75mmol)在1,4-二噁烷(5mL)中的混合物在110℃下用微波辐射搅拌2h。将冷却的反应混合物用水稀释并用EtOAc(50mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩滤液。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：制备型C18 OBD 19*250mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％TFA)，B：ACN)进行纯化，以给出呈无色油状物的化合物166(顺式和反式的混合物)(101.0mg，TFA盐，31％产率)。

实例B101

化合物167的制备

将中间体3(200mg，0.58mmol，TFA盐)、1-溴-4-甲基苯(CAS#：106-38-7)(300mg，1.75mmol)、Pd₂(dba)₃(30mg)、BrettPhos(30mg)和t-BuONa(168mg，1.75mmol)在1,4-二噁烷(5mL)中的混合物在110℃下用微波辐射搅拌2h。将反应混合物用水稀释并用EA(50mL X 3)萃取。将冷却的反应混合物用水稀释并用EtOAc(50mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩滤液。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge 20*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％ NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以给出呈白色固体的化合物167(顺式和反式的混合物)(45.9mg，18％产率)。

实例B102

化合物168的制备

在微波管中，向中间体3(200mg，0.584mmol，TFA盐)在1,4-二噁烷(2mL)中的溶液中添加2-(4-溴-2-氟苯基)乙腈(CAS#：114897-91-5)(250mg，1.170mmol)、t-BuONa(168mg，1.775mmol)、BrettPhos(30mg，0.056mmol)和Pd₂(dba)₃(53mg，0.056mmol)。将所得混合物用Ar鼓泡并将反应在140℃下用微波辐射搅拌2h。将冷却的反应混合物用水稀释并用EtOAc(100mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(50mL X 2)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩滤液。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：SunFire19*250mm 10um，流动相A：0.1％ TFA/H₂O，B：ACN)进行纯化，以得到化合物168(顺式和反式的混合物)(9.5mg，TFA盐，2.7％产率)。

实例B103

化合物169和化合物170的制备

将中间体3(300mg，0.877mmol，TFA盐)、2-(4-溴苯基)-2-甲基丙腈(CAS#：101184-73-0)(196mg，0.877mmol)、Pd₂(dba)₃(80mg，0.087mmol)、BrettPhos(47mg，0.087mmol)和K₂CO₃(363mg，2.632mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的混合物在100℃下用微波辐射搅拌2h。将冷却的反应混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：WatersXbridge19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以得到所希望的产物(顺式和反式的混合物)(90mg)。将获得的产物通过SFC(SFC80，Waters；OD-H 2.5*25cm，10um；A：超临界CO₂，流动相B：MeOH＝100；A:B＝70/30；流速：60mL/min；柱温度(T)：25℃；背压(BPR)：100巴)进行分离，以得到化合物169(23.6mg，11％产率)和化合物170(顺式或反式)(39.1mg，18％产率)。

实例B104

化合物171和化合物172的制备

将中间体3(300mg，0.877mmol，TFA盐)、1-(4-溴苯基)环丙基腈(CAS#：124276-67-1)(195mg，0.877mmol)、Pd₂(dba)₃(80mg，0.087mmol)、BrettPhos(47mg，0.087mmol)和K₂CO₃(363mg，2.631mmol)在1,4-二噁烷(5mL)中的混合物在Ar下在70℃下搅拌12h。将冷却的反应混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters2767/Qda，柱：Waters Xbridge 19*150mm10um，流动相A：H₂O(0.1％NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以得到所希望的产物(顺式和反式的混合物)(188mg)。将获得的产物通过SFC(SFC80，Waters；OD-H2.5*25cm，10um；A：超临界CO₂，流动相B：MeOH＝100；A:B＝67/33；流速：70g/min；柱温度(T)：25℃；背压(BPR)：100巴)进行分离，以得到化合物171(反式或顺式)(36.7mg，17％产率)和化合物172(顺式或反式)(23.3mg，11％产率)。

实例B105

化合物173的制备

在密封的容器中在室温下，向中间体3(200mg，0.584mmol，TFA盐)在1,4-二噁烷(2mL)中的溶液中添加2-(3-溴苯基)乙腈(CAS#：31938-07-5)(230mg，1.170mmol)、t-BuONa(168mg，1.775mmol)、BrettPhos(30mg，0.056mmol)和Pd₂(dba)₃(53mg，0.056mmol)。将容器用Ar鼓泡，密封并将反应混合物在130℃下搅拌过夜。将冷却的反应混合物用水稀释并用EtOAc(100mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(50mL X 2)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩滤液。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge20*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％ NH₃·H₂O)，B：ACN)进行纯化，以得到化合物173(顺式和反式的混合物)(9.9mg，3.7％产率)。

实例B106

化合物174和化合物175的制备

将中间体3(300mg，0.876mmol，TFA盐)、5-氰基-2-氟吡啶(CAS#：3939-12-6)(107mg，0.88mmol)和DIPEA(341mg，2.64mmol)在i-PrOH(10mL)中的混合物在90℃下搅拌16h。将冷却的反应混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：SunFire19*250mm 10um，流动相A：0.1％ TFA/H₂O，B：ACN)进行纯化，得到所希望的产物(顺式和反式的混合物)。将获得的产物通过SFC(SFC80，Waters；AD-H 2.5*25cm，10um；A：超临界CO₂，流动相B：MeOH；A:B＝60/40；流速：60mL/min；柱温度(T)：25℃；背压(BPR)：100巴)进行分离，以给出呈白色固体的化合物174(反式或顺式)(58mg，14％产率)和呈白色固体的化合物175(顺式或反式)(55mg，14％产率)。

实例B107

化合物176的制备

将中间体3(300mg，0.88mmol，TFA盐)、2-氰基-5-氟吡啶(CAS#：327056-62-2)(107mg，0.88mmol)和DIPEA(341mg，2.64mmol)在n-BuOH(10mL)中的混合物在120℃下搅拌16h。将冷却的反应混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters2767/Qda，柱：SunFire19*250mm 10um，流动相A：0.1％ TFA/H₂O，B：ACN)进行纯化。将级分通过NaHCO₃(固体)碱化，用EtOAc(30mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(20mL X 2)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩滤液。将残余物冻干以给出呈白色固体的化合物176(顺式和反式的混合物)(55mg，14％产率)。

实例B108

化合物177的制备

向中间体101(152mg，粗TFA盐，约0.27mmol)在DCM(2mL)中的搅拌溶液中添加Et₃N(110mg，1.09mmol)。将所得混合物用冰浴冷却并缓慢添加甲磺酰氯(38mg，0.33mmol)。将反应在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters2767/Qda，柱：Waters Xbridge 19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％TFA)，B：ACN)进行纯化，以给出呈白色固体的化合物177(顺式和反式的混合物)(23mg，TFA盐，13％产率)。

实例B109

化合物178和化合物179的制备

将中间体35(400mg，0.86mmol)、DIPEA(210mg，1.7mmol)、1-(甲磺酰基)哌嗪(CAS#：55276-43-2)(200mg，1.2mmol)和HATU(460mg，1.2mmol)在DMF(5mL)中的溶液在室温下搅拌过夜。将粗产物直接通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％ NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以给出所需产物(顺式和反式的混合物)(90mg)。将获得的产物通过SFC(SFC80，Waters；AS-H2.5*25cm，10um，A：超临界CO₂，B：MeOH/0.1％ NH₃；A:B＝65/35；流速：50mL/min；柱温度(T)：25℃；BPR：100巴)进行分离，以给出呈白色固体的化合物178(反式或顺式)(20mg，3.8％产率)和呈白色固体的化合物179(顺式或反式)(70mg，13％产率)。

实例B110

化合物180的制备

向中间体35(150mg，0.32mmol)在THF(2mL)中的搅拌溶液中添加N,N,N'-三甲基乙二胺(CAS#：142-25-6)(50mg，0.49mmol)、HOBt(66mg，0.49mmol)、EDCI(93mg，0.49mmol)和Et₃N(49mg，0.49mmol)。将所得混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters2767/Qda，柱：Waters Xbridge 19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％TFA)，B：ACN)进行纯化，以得到呈白色固体的化合物180(顺式和反式的混合物)(65mg TFA盐，36％产率)。

实例B111

化合物181和化合物182的制备

向中间体35(300mg，0.65mmol)和N-(2-氨基乙基)甲烷磺酰胺(CAS#：83019-89-0)(180mg，1.3mmol)在DMF(5mL)中的搅拌溶液中添加HATU(246mg，0.65mmol)和DIPEA(251mg，1.95mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3h。所得混合物直接通过制备型HPLC(Waters2767/Qda，柱：Waters Xbridge 19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％ NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以给出呈白色固体的所希望的产物(顺式和反式的混合物)(60mg，13％产率)。将获得的产物通过SFC(分离条件：柱：AD-H大赛璐化学有限公司，250*30mmI.D.，5um；流动相A：超临界CO₂，流动相B：EtOH(0.1％DEA)＝60/40，以50mL/min，检测器波长：254nm；柱温度：25℃)进行分离，以给出呈白色固体的化合物181(反式或顺式)(17.8mg，4.7％产率)和呈白色固体的化合物182(顺式或反式)(13.5mg，3.6％产率)。

实例B112

化合物183和化合物184的制备

向中间体35(300mg，0.65mmol)和4-甲氧基哌啶(CAS#：4045-24-3)(150mg，1.3mmol)在DMF(5mL)中的搅拌溶液中添加HATU(246mg，0.65mmol)和DIPEA(251mg，1.95mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3h。将所得混合物直接通过制备型HPLC(Waters2767/Qda，柱：Waters Xbridge 19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％ NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以给出呈黄色油状物的所希望的产物(顺式和反式的混合物)(122mg，32％产率)。将获得的产物通过SFC(SFC80，Waters；OJ-H(2.5*25cm，10um；A：超临界CO₂，流动相B：MeOH；A:B＝80/20；流速：60mL/min；柱温度(T)：25℃；背压(BPR)：100巴)进行分离，以给出呈白色固体的化合物183(反式或顺式)(63.7mg，17％产率)和呈白色固体的化合物184(顺式或反式)(36.7mg，10％产率)。

实例B113

化合物185和化合物186的制备

向中间体35(300mg，0.65mmol)和N-(3-氨基丙基)甲烷磺酰胺(CAS#：88334-76-3)(197mg，1.3mmol)在DMF(5mL)中的搅拌溶液中添加HATU(246mg，0.65mmol)和DIPEA(251mg，1.95mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3h。将所得混合物直接通过制备型HPLC(Waters2767/Qda，柱：Waters Xbridge 19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％ NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以给出呈黄色油状物的所希望的产物(顺式和反式的混合物)(100mg，26％产率)。将获得的产物通过SFC(分离条件：柱：AD-H大赛璐化学有限公司，250*30mm I.D.，5um；流动相A：超临界CO₂，流动相B：EtOH(0.1％DEA)＝60/40，以50mL/min，检测器波长：254nm；柱温度：25℃)进行分离，以给出呈白色固体的化合物185(反式或顺式)(40.6mg，11％产率)和呈白色固体的化合物186(顺式或反式)(12.2mg，3.2％产率)。

实例B114

化合物187和化合物188的制备

在室温下，将中间体102(279mg，0.44mmol)在HCl/MeOH(3M)(3mL)中的溶液搅拌16h。将溶剂通过浓缩去除。将残余物悬浮于H₂O(50mL)中并通过饱和的NaHCO₃水溶液碱化至pH等于8。将生成物用EtOAc(50mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩滤液。将残余物通过制备型HPLC(Waters2767/Qda，柱：SunFire 19*250mm10um，流动相A：0.1％TFA/H₂O，B：ACN)进行纯化，以给出呈黄色油状物的所希望的产物(顺式和反式的混合物)(61mg)。将获得的产物通过SFC(SFC80，Waters；AD-H2.5*25cm，10um；A：超临界CO₂，流动相B：EtOH/ACN＝85/15；A:B＝60/40；流速：50mL/min；柱温度(T)：25℃；背压(BPR)：100巴)进行分离，以得到呈浅黄色固体的化合物187(反式或顺式)(18.9mg，8.0％产率)和呈黄色油状物的化合物188(顺式或反式)(2.0mg，0.86％产率)。

实例B115

化合物189和化合物190的制备

在0℃下，向中间体104(600mg，粗HCl盐，约0.89mmol)和Et₃N(2mL)在DCM(4mL)中的悬浮液中滴加甲磺酰氯(2mL)。将所得混合物在室温下搅拌2h。将反应混合物在减压下浓缩。将残余物通过制备型TLC(DCM/MeOH＝15:1，v/v)进行纯化，以给出所希望的产物(顺式和反式的混合物)。将获得的产物通过SFC(SFC80，Waters，OD-H(2.5*25cm，10um)A：超临界CO₂，B：MeOH(0.1％ NH₃)；A:B＝65/35；流速：50mL/min；柱温度(T)：25℃；BPR：100巴)进行分离，以得到化合物189(反式或顺式)(9.6mg，1.6％产率)和化合物190(顺式或反式)(72.6mg，12％产率)。

实例B116

化合物191的制备

在0℃下，向中间体106(100mg，粗HCl盐，约0.174mmol)在DCM(4mL)中的搅拌溶液中添加甲磺酰氯(20mg，0.174mmol)和DIPEA(0.1mL)。将反应在室温下搅拌2h。将所得混合物浓缩并将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：SunFire 19*250mm 10um，流动相A：0.1％ NH₃·H₂O/H₂O，B：ACN)进行纯化，以得到呈白色固体的化合物191(在螺部分顺式和反式的混合物)(75mg，产率：66％)。

实例B117

化合物192的制备

在0℃下，向中间体108(190mg，粗HCl盐，约0.32mmol)和Et₃N(97mg，0.96mmol)在DCM(5mL)中的搅拌混合物中添加甲磺酰氯(36mg，0.32mmol)。将反应在室温下搅拌2h。将反应混合物用水(20mL)淬灭并用DCM(20mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩滤液。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：SunFire19*250mm10um，流动相A：0.1％TFA/H₂O，B：ACN)进行纯化以给出呈白色固体的化合物192(在螺部分顺式和反式的混合物)(43.1mg，TFA盐，12％产率)。

实例B118

化合物193的制备

在室温下，将中间体35(150mg，0.32mmol)、1-二甲基氨基-2-丙胺(CAS#：108-15-6)(40mg，0.39mmol)、EDCI(92mg，0.48mmol)、HOBT(65mg，0.48mmol)和DIPEA(124mg，0.0.96mmol)在DMF(2mL)中的混合物搅拌16h。随后，将反应混合物通过制备型HPLC(Waters2767/Qda，柱：SunFire 19*250mm 10um，流动相A：0.1％ FA/H₂O，B：ACN)进行纯化，以给出呈白色固体的化合物193(在螺部分顺式和反式的混合物)(43.59mg，甲酸盐，23％产率)。

实例B119

化合物194和化合物195的制备

将中间体110(220mg，1.341mmol)、中间体35(619mg，1.341mmol)、HATU(509mg，1.341mmol)和Et₃N(406mg，4.024mmol)在THF(10mL)中的混合物在室温下搅拌3h并浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge 19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％ NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以得到所希望的产物(顺式和反式的混合物)(200mg)。将获得的产物通过SFC(SFC80，Waters；AD-H(2.5*25cm，10um；A：超临界CO₂，流动相B：EtOH/ACN＝85/15；A:B＝60/40；流速：50g/min；柱温度(T)：25℃；背压(BPR)：100巴)进行分离，以得到化合物194(反式或顺式)(79.5mg，19％产率)和化合物195(顺式或反式)(21.1mg，5.1％产率)。

实例B120

化合物196的制备

在室温下，向粗中间体112(100mg，粗HCl盐，约0.627mmol)在i-PrOH(6mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(243mg，1.88mmol)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(158mg，0.62mmol)。将反应在室温下搅拌5h。将反应混合物倾倒进水(20mL)中并用EtOAc(50mL X 3)萃取。将有机相用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge 20*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％ FA)，B：ACN)进行纯化，以给出化合物196(顺式和反式的混合物)(33.61mg，0.94当量甲酸盐，12％产率，经3步)(通过¹H NMR确定甲酸的当量)。

实例B121

化合物197的制备

在室温下，向中间体114(160mg，粗TFA盐，约0.450mmol)在i-PrOH(2mL)中的搅拌溶液中添加4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(113mg，0.45mmol)和DIPEA(290mg，2.25mmol)。将反应在室温下搅拌过夜。将反应混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％TFA)，B：ACN)进行纯化，以得到呈白色固体的化合物197(顺式和反式的混合物)(132mgTFA盐，51％产率，经3步)。

实例B122

化合物198的制备

在室温下，向中间体116(250mg，粗HCl盐，约0.501mmol)在i-PrOH(5.0mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(260mg，2.0mmol)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(100mg，0.4mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物浓缩并将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge 19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％ TFA)，B：ACN)进行纯化，以得到呈白色固体的化合物198(顺式和反式的混合物)(71mg，TFA盐，23％产率，经3步)。

实例B123

化合物199和化合物200的制备

在室温下，向中间体118(250mg，粗HCl盐，约0.965mmol)在i-PrOH(5mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(373mg，2.896mmol)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(243mg，0.965mmol)。将反应在室温下搅拌过夜。将反应混合物浓缩。将残余物通过快速色谱法(洗脱液：PE/EA＝3:1，v/v)进行纯化，以得到化合物168的游离碱形式(顺式和反式的混合物)(220mg)。将获得的产物通过SFC(SFC80，Waters；AD-H 2.5*25cm，10ul；超临界CO₂：MeOH＝60/40；流速：60mL/min；柱温度(T)：35℃；BPR：100巴)进行分离，以得到呈白色固体的化合物199(90mg，19％产率)和化合物200(67mg，14％产率)。

实例B124

化合物201和化合物202的制备

在室温下，向中间体120(400mg，粗TFA盐，约1.0mmol)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(252mg，1.0mmol)在i-PrOH(5mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(387mg，3.0mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h。将反应混合物用H₂O(5mL)稀释并过滤。将滤饼通过制备型HPLC(Xbridge C18 5mm150*4.6mm，流动相A：在水中的NH₄OH 0.1％，B：在CH₃CN中的NH₄OH 0.1％)进行纯化，以得到呈白色固体的化合物173(顺式和反式的混合物)(300mg，66％产率，经3步)。将获得的产物通过SFC(Waters-SFC80；AD-H，10um，2.5*25cm；流动相A：超临界CO₂，流动相B：MeOH/NH₃；A:B＝60/40；流速：50mL/min；柱温度(T)：25℃；BPR：100巴)进行分离，以得到呈白色固体的化合物201(反式或顺式)(92mg，30％产率)和呈白色固体的化合物202(顺式或反式)(90mg，30％产率)。

实例B125

制备化合物203、化合物204和化合物205

向中间体122(140mg，0.505mmol)在i-PrOH(5mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(195mg，1.51mmol)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(127mg，0.505mmol)。将反应在室温下搅拌过夜。将反应混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以得到化合物203(顺式和反式的混合物)(206mg，81％产率)。

将获得的化合物203(顺式和反式的混合物)(80mg)通过SFC(SFC80，Waters；AD-H2.5*25cm，10ul；超临界CO₂：MeOH＝60/40；流速：60mL/min；柱温度(T)：25℃；BPR：100巴)进行分离，以得到呈白色固体的化合物204(反式或顺式)(19.2mg，24％产率)和化合物205(顺式或反式)(15.3mg，19％产率)。

实例B126

化合物206的制备

在室温下，向中间体124(226mg，0.89mmol)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(252mg，1.0mmol)(224mg，0.89mmol)在i-PrOH(4mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(574mg，4.45mmol)。将所得混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge 19*150mm10um，流动相A：H₂O(0.1％ NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以得到呈白色固体的化合物206(顺式和反式的混合物)(157mg，37％产率)。

实例B127

化合物207的制备

在室温下，向中间体126(450mg，粗品)在i-PrOH(5mL)中的搅拌溶液中添加4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(252mg，1.0mmol)(254mg，1.00mmol)和DIPEA(217mg，1.68mmol)。将反应在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩并将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：SunFire 19*250mm 10um，流动相A：0.1％NH₄OH/H₂O，B：ACN)进行纯化，以得到呈白色固体的化合物207(顺式和反式的混合物)(52.8mg，11％产率，经3步)。

实例B128

化合物208和化合物209的制备

在室温下，向中间体127(161mg，粗TFA盐，约0.59mmol)在i-PrOH(2mL)中的搅拌溶液中滴加4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(148mg，0.59mmol)和DIPEA(381mg，2.95mmol)。将所得混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：WatersXbridge 19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％ NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以给出所希望的产物(顺式和反式的混合物)(160mg)。将获得的产物通过SFC(SFC80，Waters，IE-H 2.5*25cm，10um，A：超临界CO₂，B：EtOH/ETOH/DEA＝75/25/0.1；A:B＝60/40；流速：70mL/min；柱温度(T)：25℃；背压(BPR)：100巴)进行分离，以得到化合物208(反式或顺式)(38mg，13％产率)和化合物209(顺式或反式)(83mg，28％产率)。

实例B129

化合物210和化合物211的制备

在室温下，向中间体128(300mg，粗HCl盐，约2.25mmol)在i-PrOH(5mL)中的搅拌溶液中添加4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(274.9mg，1.09mmol)和DIPEA(3ml)，将混合物在室温下搅拌3h并浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：SunFire 19*250mm 10um，流动相A：0.1％TFA/H₂O，B：ACN)进行纯化，以给出顺式和反式的混合物。将获得的产物通过SFC(SFC80，Waters；OJ 2.5*25cm，10um；A：超临界CO₂，流动相B：MeOH；A:B＝70/30；流速：70mL/min；柱温度(T)：25℃；BPR：100巴)进行分离，以得到化合物210(反式或顺式)(76.0mg，16％产率)和化合物211(顺式或反式)(73.0mg，15％产率)。

实例B130

化合物212和化合物213的制备

向中间体129(300mg，粗HCl盐，约1.09mmol)在i-PrOH(15mL)中的搅拌溶液中在室温下添加DIPEA(1mL)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(274mg，1.09mmol)。将反应在50℃下搅拌1h。将所得混合物浓缩并将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：SunFire 19*250mm 10um，流动相A：0.1％NH₃·H₂O/H₂O，B：ACN)进行纯化，以给出呈白色固体的顺式和反式的混合物(50mg，9.3％产率)。将获得的产物通过SFC(SFC80，Waters；IA-H 2.5*25cm，10um；A：超临界CO₂，流动相B：MeOH；A:B＝65/35；流速：50mL/min；柱温度(T)：25℃；BPR：100巴)进行分离，以得到呈白色固体的化合物212(反式或顺式)(24mg，48％产率)和呈白色固体的化合物213(顺式或反式)(24mg，48％产率)。

实例B131

化合物214的制备

在室温下，向中间体130(586mg，粗HCl盐，约2.0mmol)在i-PrOH(5mL)中的搅拌溶液中添加4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(310mg，2.0mmol)、DIPEA(1mL)。将反应混合物在室温下搅拌2h并且然后浓缩，并将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：SunFire 19*250mm 10um，流动相A：0.1％TFA/H₂O，B：ACN)进行纯化，以得到化合物214(顺式和反式的混合物)(297mg，29％产率)。

实例B132

化合物215的制备

在室温下，向中间体131(80mg，粗TFA盐，约0.42mmol)在i-PrOH(3mL)中的搅拌溶液中添加4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(86mg，0.34mmol)和DIPEA(80mg，0.62mmol)。将反应在室温下搅拌1h。将反应混合物浓缩并将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：SunFire 19*250mm 10um，流动相A：0.1％ TFA/H₂O，B：ACN)进行纯化，以得到呈白色固体的化合物215(顺式和反式的混合物)(33.84mg，TFA盐，17％产率)。

实例B133

化合物216的制备

在室温下，向中间体132(129mg，粗TFA盐，约0.501mmol)在i-PrOH(10mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(194mg，1.505mmol)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(126mg，0.501mmol)。将反应混合物在室温下搅拌12h。将反应混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge 19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％ NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以给出呈黄色固体的化合物216(顺式和反式的混合物)(67.20mg，28％产率)。

实例B134

化合物217和化合物218的制备

将中间体133(450mg，粗HCl盐，约1.65mmol)，4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(543mg，2.15mmol)和DIPEA(925mg，7.16mmol)在i-PrOH(5mL)中的混合物在室温下搅拌16h。将反应混合物浓缩并将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：SunFire 19*250mm 10um，流动相A：0.1％TFA/H₂O，B：ACN)进行纯化，以给出所希望的产物(顺式和反式的混合物)。将获得的产物通过SFC(SFC80，Waters；OJ-H2.5*25cm，10um；A：超临界CO₂，流动相B：MeOH；A:B＝70/30；流速：50mL/min；柱温度(T)：25℃；BPR：100巴)进行分离，以得到呈白色固体的化合物217(反式或顺式)(11.95mg，TFA盐，1.3％产率，经3步)和呈白色固体的化合物218(顺式或反式)(8.83mg，1.0％产率，经3步)。

实例B135

化合物219和化合物220的制备

向中间体134(380mg，1.08mmol)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(273mg，1.08mmol)在i-PrOH(5mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(698mg，5.41mmol)。将所得混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％TFA)，B：ACN)进行纯化，以给出所希望的产物(顺式和反式的混合物)(247mg，TFA盐)。将获得的产物通过SFC(SFC80，Waters；OJ-H 2.5*25cm，10um；A：超临界CO₂，B：MeOH；A:B＝75/25；流速：70mL/min；柱温度(T)：25℃；背压(BPR)：100巴)进行分离，以得到化合物219(反式或顺式)(79mg，12％产率)和化合物220(顺式或反式)(97mg，TFA盐，15％产率)。

实例B136

化合物221的制备

向中间体138(55mg，粗HCl盐，约0.12mmol)在i-PrOH(3mL)中的搅拌溶液中添加4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(30.24mg，0.12mmol)和DIPEA(0.05mL)。将反应混合物在50℃下搅拌5h。将反应混合物浓缩并将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：SunFire 19*250mm 10um，流动相A：0.1％ NH₃·H₂O/H₂O，B：ACN)进行纯化，以得到呈白色固体的化合物221(顺式和反式的混合物)(8mg，10％产率)。

实例B137

化合物222的制备

在室温下，向中间体142(220mg，粗HCl盐，约0.28mmol)在i-PrOH(3mL)中的搅拌溶液中添加4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(135mg，0.54mmol)和DIPEA(126mg，0.98mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1h。将反应混合物浓缩并将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：SunFire19*250mm 10um，流动相A：0.1％ NH₄OH/H₂O，B：ACN)进行纯化，以得到呈白色固体的化合物222(顺式和反式的混合物)(34.1mg，18％产率，经2步)。

实例B138

化合物223的制备

向中间体145(500mg，粗TFA盐，约1.53mmol)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(300mg，1.19mmol)在i-PrOH(10mL)中的搅拌混合物中添加DIPEA(767mg，5.95mmol)。将反应在室温下搅拌过夜。将反应混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge 19*150mm10um，流动相A：H₂O(0.1％TFA)，B：ACN)进行纯化，以得到化合物223(顺式和反式的混合物)(142mg，TFA盐，约13％产率，经4步)。

实例B139

化合物224的制备

将中间体149(380mg，1.17mmol)、4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(265mg，1.05mmol)和DIPEA(604mg，4.68mmol)在i-PrOH(6mL)中的混合物在55℃下搅拌3h。LC-MS指示形成了所希望的质量峰。将反应混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以给出呈白色固体的化合物224(顺式和反式的混合物)(45mg，7.1％产率)。

实例B140

化合物225的制备

在室温下，将中间体153(250mg，粗TFA盐，约0.341mmol)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(150mg，0.595mmol)在i-PrOH(10mL)中的混合物中添加DIPEA(230mg，1.78mmol)。将反应在室温下搅拌过夜。将反应混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％ NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以得到呈白色固体的化合物225(顺式和反式的混合物)(36mg，18％产率，经2步)。

实例B141

化合物226和化合物227的制备

在室温下，向中间体156(286mg，粗TFA盐，约0.97mmol)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(244mg，0.97mmol)在i-PrOH(5mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(624mg，4.84mmol)。将所得混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge 19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％ NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以给出所希望的产物(顺式和反式的混合物)(270mg)。将获得的产物通过SFC(SFC80，Waters；IC 2.5*25cm，10um；A：超临界CO₂，B：MeOH；A:B＝75/25；流速：50mL/min；柱温度(T)：25℃；背压(BPR)：100巴)进行分离，以得到化合物226(反式或顺式)(86mg，17％产率)和化合物227(顺式或反式)(114mg，23％产率)。

实例B142

化合物228和化合物229的制备

向中间体159(200mg，粗HCl盐，0.678mmol)在i-PrOH(4mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(262mg，2.03mmol)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(171mg，0.678mmol)。将反应在室温下搅拌12h。将反应混合物浓缩。将残余物通过快速色谱法(PE/EtOAc＝1:1，v/v)进行纯化，以获得顺式和反式的混合物(300mg)。将获得的产物通过SFC(SFC80，Waters；OJ-H2.5*25cm，10ul；A：超临界CO2:MeOH＝75/25；流速：65mL/min；柱温度(T)：25℃；BPR：100巴)进行分离，以得到呈白色固体的化合物228(反式或顺式)(110mg，31％产率)和化合物229(顺式或反式)(82mg，23％产率)。

实例B143

化合物230和化合物231的制备

向中间体165(117mg，0.44mmol)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(83mg，0.44mmol)在i-PrOH(2mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(212mg，2.20mmol)。将反应在室温下搅拌过夜。将反应混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge19*150mm10um，流动相A：H₂O(0.1％NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以给出所希望的产物(顺式和反式的混合物)(70mg)。将获得的产物通过SFC(SFC80，Waters，IC 2.5*25cm，10um，A：超临界CO₂，B：EtOH/ACN＝84:16(0.1％NH₃)；A:B＝75/25；流速：70mL/min；柱温度(T)：25℃；背压(BPR)：100巴)进行分离，以得到化合物230(反式或顺式)(29mg，11％产率)和化合物231(顺式或反式)(24mg，9.5％产率)。

实例B144

化合物232和化合物233的制备

向中间体169(130mg，0.317mmol)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(80mg，0.317mmol)在i-PrOH(5mL)中的搅拌混合物中添加DIPEA(123mg，0.952mmol)。将反应在室温下搅拌过夜。将反应混合物浓缩。将残余物通过制备型TLC(DCM/MeOH＝15:1，v/v)进行纯化，以给出所希望的产物(顺式和反式的混合物)。将获得的产物通过SFC(仪器：Waters-SFC80；柱：AD-H(2.5*25cm，10um)；流动相A：超临界CO₂，流动相B：EtOH/ACN＝85/15(0.1％NH₃)；A:B＝70/30以60mL/min；检测器波长：214nm；柱温度(T)：25℃；背压(BPR)：100巴)进行分离，以给出化合物232(反式或顺式)(13.6mg)和化合物233(顺式或反式)(12.9mg)。

实例B145

化合物234和化合物235的制备

向中间体172(200mg，粗TFA盐，约0.736mmol)在i-PrOH(3mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(275mg，2.13mmol)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(198mg，0.79mmol)。将反应在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge 19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以得到所希望的产物(顺式和反式的混合物)(90mg)。将获得的产物通过SFC(SFC80，Waters；AD-H 2.5*25cm，10um；A：超临界CO₂，B：MeOH/NH₃；A:B＝70/30；流速：55mL/min；柱温度(T)：25℃；BPR：100巴)进行分离，以得到呈白色固体的化合物234(反式或顺式)(42.9mg，11％产率，经2步)和呈白色固体的化合物235(顺式或反式)(39.3mg，10％产率，经2步)。

实例B146

化合物236的制备

在室温下，向中间体177(50mg，粗HCl盐，约0.67mmol)在i-PrOH(5mL)中的搅拌溶液中添加4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(37mg，0.15mmol)和DIPEA(1mL)。将反应混合物在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩并将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：SunFire19*250mm10um，流动相A：0.1％TFA/H₂O，B：ACN)进行纯化。将残余物碱化，以得到呈游离碱的化合物236(顺式和反式的混合物)(11.5mg，15％产率，经2步)。

实例B147

化合物237和化合物238的制备

在室温下，将中间体181(200mg，粗TFA盐，约0.55mmol)、4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(139mg，0.55mmol)和DIPEA(213mg，1.65mmol)在i-PrOH(10mL)中的混合物搅拌2h。将反应混合物浓缩并将残余物通过制备型HPLC(Xbridge C18 5mm 150*4.6mm，流动相A：在水中的NH₄OH 0.1％，B：在CH₃CN中的NH₄OH0.1％)进行纯化，以得到呈白色固体的所希望的产物(顺式和反式的混合物)(210mg，78％产率)。将获得的产物通过SFC(SFC80，Waters；OD-H(2.5*25cm，10um)；A：超临界CO₂，流动相B：MeOH；A:B＝75/25；流速：60mL/min；柱温度(T)：25℃；背压(BPR)：100巴)进行分离，以得到呈白色固体的化合物237(反式或顺式)(94mg)和呈白色固体的化合物238(顺式或反式)(98mg)。

实例B148

化合物239的制备

在室温下，向中间体184(131mg，粗TFA盐，约0.379mmol)在i-PrOH(10mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(147mg，1.139mmol)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(95.5mg，0.379mmol)。将反应在室温下搅拌12h。将反应混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge 19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％ NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以给出呈黄色固体的化合物239(顺式和反式的混合物)(14.3mg，6.7％)。

实例B149

化合物240的制备

在室温下，将中间体187(80mg，粗TFA盐，约0.14mmol)、4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(35mg，0.14mmol)和DIPEA(54mg，0.42mmol)在i-PrOH(5mL)中的混合物搅拌2h。反应完成后，将反应混合物浓缩并将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：SunFire 19*250mm 10um，流动相A：0.1％TFA/H₂O，B：ACN)进行纯化，以得到呈灰白色固体的化合物240(顺式和反式的混合物)(41mg，TFA盐，54％产率)。

实例B150

化合物241的制备

向中间体193(97mg，粗TFA盐，约0.28mmol)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(69mg，0.28mmol)在i-PrOH(3mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(177mg，1.38mmol)。将所得混合物在室温下搅拌过夜。将混合物在减压下浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以得到呈白色固体的化合物241(顺式和反式的混合物)(40mg，25％产率)。

实例B151

化合物242和化合物243的制备

在室温下，将中间体197(200mg，粗TFA盐，约0.435mmol)、4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(124mg，0.49mmol)和DIPEA(213mg，1.65mmol)在i-PrOH(10mL)中的混合物搅拌2h。将反应混合物浓缩并将残余物通过制备型HPLC(安捷伦G6120B G1315D DADVL检测器和G4260B ELSD，Xbridge C18 5mm 150*4.6mm，流动相A：在水中的NH4OH0.1％，B：在CH₃CN中的NH₄OH 0.1％)进行纯化，以得到呈白色固体的所希望的产物(顺式和反式的混合物)(200mg，74％产率)。将获得的产物通过SFC(SFC80，Waters；OJ-H(2.5*25cm，10um)；A：超临界CO₂，流动相B：EtOH/ACN/NH₃＝85/15/0.1；A:B＝80/20；流速：50mL/min；柱温度(T)：25℃；背压(BPR)：100巴)进行分离，以得到呈白色固体的化合物242(反式或顺式)(76mg，38.0％产率)和呈白色固体的化合物243(顺式或反式)(68mg，34.0％产率)。

实例B152

化合物244和化合物245的制备

在室温下，向中间体201(500mg，粗TFA盐，约0.886mmol)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(223mg，0.886mmol)在i-PrOH(5mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(343mg，2.65mmol)。将反应在室温下搅拌过夜。将反应混合物浓缩。将残余物通过制备型TLC(DCM/MeOH＝20:1，v/v)进行纯化，以给出所希望的产物(顺式和反式的混合物)。将获得的产物通过SFC(SFC80，Waters，IA 2.5*25cm，10um，A：超临界CO₂，B：MeOH；A:B＝60/40；流速：40mL/min；柱温度(T)：25℃；背压(BPR)：100巴)进行分离，以得到化合物244(反式或顺式)(制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：SunFire 19*250mm 10um，流动相A：0.1％TFA/H₂O，B：ACN)后113mg，TFA盐)和化合物245(顺式或反式)(115mg)。

实例B153

化合物246和化合物247的制备

向中间体207(200mg，粗TFA盐，约0.409mmol)在i-PrOH(3mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(137mg，0.11mmol)和4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(148mg，0.59mmol)。将反应在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩并将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge 19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以得到顺式和反式的混合物(100mg)。将获得的产物通过SFC(SFC80，Waters；IA-H 2.5*25cm，10um；A：超临界CO₂，B：EtOH/NH₃；A:B＝70/30；流速：50mL/min；柱温度(T)：25℃；背压(BPR)：100巴)进行分离，以得到呈白色固体的化合物246(反式或顺式)(43.8mg，8.5％产率，经3步)和呈白色固体的化合物247(顺式或反式)(45.2mg，8.7％产率，经3步)。

实例B154

化合物248的制备

将中间体211(225mg，0.322mmol)在MeNH₂(在THF中的2M)(5mL)中的溶液在100℃下在微波辐射下搅拌24h。将冷却的反应混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters2767/Qda，柱：Waters Xbridge 19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％ NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以得到呈粉红色固体的化合物248(顺式和反式的混合物)(73.1mg，32％产率)。

实例B155

化合物249的制备

向4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(300mg，1.82mmol)和中间体214(100mg，粗HCl盐，约0.182mmol)在i-PrOH(3mL)中的搅拌溶液中添加DIPEA(60mg，0.468mmol)。将反应在室温下搅拌12h。将反应混合物浓缩并将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge19*250mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以给出化合物249(顺式和反式的混合物)(42.6mg，41％产率，TFA盐)。

实例B156

化合物250的制备

将中间体215(160mg，228mmol)在甲胺(在THF中的2.0M)(4mL)中的溶液在100℃下在密封容器中搅拌过夜。将冷却的反应混合物浓缩并将残余物通过制备型HPLC(Waters2767/Qda，柱：Waters Xbridge 19*250mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％ TFA)，B：ACN)进行纯化，以给出化合物250(顺式和反式的混合物)(14mg，8.8％产率，TFA盐)。

实例B157

化合物251的制备

向中间体220(30mg，0.08mmol)和中间体5(27mg，0.08mmol)在MeOH(5mL)中的搅拌溶液中在室温下添加癸硼烷(5mg，0.04mmol)。将反应混合物在室温下搅拌16h。将反应混合物浓缩并将残余物通过制备型HPLC纯化，以给出呈白色固体的化合物251(顺式和反式的混合物)(9.2mg，16％产率)。

实例B159

化合物253和化合物254的制备

将229(150mg，0.47mmol)、4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(119mg，0.47mmol)和DIPEA(121mg，0.94mmol)在ⁱ-PrOH(3mL)中的混合物在室温下搅拌40min。将反应混合物在减压下浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：WatersXbridge20*150mm 10um，流动相A：0.1％ NH₃H₂O，B：ACN)进行纯化，以给出呈白色固体的顺式和反式的混合物(90mg，36％产率)。将获得的产物通过SFC(分离条件：仪器：Waters-SFC80，柱：AD-H(2.5*25cm，10um)，流动相A：超临界CO₂，流动相B：MeOH/0.1％NH₃，A:B＝60/40以50mL/min，循环时间：15min，注射体积：3ml，检测器波长：254nm，柱温度：25℃，背压：100巴)进行分离，以给出呈白色固体的化合物253(35mg，反式或顺式)和呈白色固体的化合物254(53mg，顺式或反式)。

实例B161

化合物257的制备

向中间体239、2-(6-氮杂螺[3.4]辛-2-基氨基)-N-甲基嘧啶-5-甲酰胺(40mg，粗品)在IPA(10mL)中的溶液中添加4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)-噻吩并[2,3-d]嘧啶(38.6mg，0.15mmol)、Et₃N(30.9mg，0.30mmol)。在室温下搅拌3h后。将混合物浓缩并将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：SunFire 19*250mm 10um，流动相A：0.1％ TFA/H₂O，B：ACN)进行纯化，以给出化合物257(顺式和反式的混合物)(15.72mg，TFA盐，22％产率，经2步)。

实例B162

化合物258和化合物259的制备

在室温下，将中间体241(430mg，粗TFA盐)、4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)-噻吩并[2,3-d]嘧啶(247mg，0.98mmol)和DIEA(379mg，2.94mmol)在i-PrOH(10mL)中的混合物搅拌2h。反应完成后，将反应混合物浓缩并将残余物通过制备型HPLC(安捷伦G6120BG1315D DADVL检测器和G4260B ELSD，Xbridge C18 5mm 150*4.6mm，流动相A：在水中的NH₄OH 0.1％，B：在CH₃CN中的NH₄OH0.1％)进行纯化，以得到呈白色固体的顺式和反式的混合物(350mg，67％产率)。将顺式和反式的混合物通过SFC(SFC80，Waters；AS-H(2.5*25cm，10um)；A：超临界CO₂，流动相B：MeOH；A:B＝80/20；流速：50mL/min；柱温度(T)：25℃；BPR：100巴)进行分离，以得到呈白色固体的化合物258(反式或顺式)(120mg，R_t＝2.654min)和呈白色固体的化合物259(顺式或反式)(130mg，R_t＝3.371min)。

实例B163

化合物260a的制备

在0℃下，向中间体3(400mg，粗TFA盐，约1.17mmol)和Et₃N(354mg，3.50mmol)在DCM(20mL)中的搅拌溶液中添加苯甲酰氯(163mg，1.17mmol)。将反应在0℃下搅拌2h。将反应混合物用水(20mL)稀释并用DCM(50mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％ NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以给出呈白色固体的所希望的化合物260a(120mg，22％产率)。

实例B164

化合物261和化合物262的制备

向中间体244(150mg，0.42mmol)、苯甲醛(58mg，1.3mmol)和Ti(i-PrO)₄(488mg，1.72mmol)在MeOH(5mL)中的搅拌溶液中添加NaBH(OAc)₃(267mg，1.26mmol)。将反应在室温下搅拌1h。将反应混合物用H₂O(5mL)淬灭，并用DCM(10mL X 2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，干燥(无水Na₂SO₄)，过滤并浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：SunFire19*250mm 10um，流动相A：0.1％ TFA/H₂O，B：ACN)进行纯化并将获得的产物用在MeOH(5mL)中的阿尔伯特试剂A-21离子交换树脂处理10min并过滤。浓缩滤液以得到所希望的产物(顺式和反式的混合物)(120mg)。将获得的产物通过SFC(SFC80，Waters；AD(2.5*25cm，10um)；A：超临界CO₂，流动相B：EtOH/ACN＝85/15；A:B＝60/40；流速：70mL/min；以25℃表示柱温度(T)；BPR：100巴)进行分离，以得到化合物261(反式或顺式)(46mg，38％产率)和化合物262(顺式或反式)(32mg，26％产率)。

实例B165

化合物263的制备

向中间体248(160mg，0.448mmol)、苯甲醛(95mg，0.895mmol)和Ti(i-PrO)₄(127mg，0.448mmol)在DCE/DMSO(6mL/1mL)中的搅拌混合物中在室温下分批添加NaBH(OAc)₃(285mg，1.34mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物用NaHCO₃水溶液淬灭并用DCM萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge 19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％ NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以给出呈白色固体的化合物263(顺式和反式的混合物)(20mg)。

实例B166

化合物264和化合物265的制备

将中间体244(150mg，0.42mmol)、溴苯(198mg，1.26mmol)、BrettPhos(30mg，0.06mmol)、Pd₂(dba)₃(30mg，0.03mmol)和t-BuONa(161mg，0.84mmol)在1,4-二噁烷(4mL)中的混合物在130℃下，用微波辐射搅拌2h。将冷却的反应混合物用H₂O(10mL)稀释，并用EtOAc(20mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(20mL X 2)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Xbridge C18 5mm 150*4.6mm，流动相A：在水中的NH₄OH 0.1％，B：在CH₃CN中的NH₄OH 0.1％)进行纯化，以得到所希望的产物(顺式和反式的混合物)(115mg)。将获得的产物通过SFC(UPC²，Waters；IE，5um，4.6*250(Daicel)；流动相：CO₂/EtOH/ACN/DEA 60/34/6/0.08；以2.8mL/min表示流速；以35℃表示柱温；以100巴表示BPR)进行分离，以得到化合物264(反式或顺式)(9mg，7.8％产率)和化合物265(顺式或反式)(20mg，17％产率)。

实例B167

化合物266和化合物267的制备

将中间体19(150mg，0.40mmol)、溴苯(198mg，1.26mmol)、BrettPhos(30mg，0.06mmol)、Pd₂(dba)₃(30mg，0.03mmol)和t-BuONa(161mg，0.84mmol)在1,4-二噁烷(4mL)中的混合物在130℃下，用微波辐射搅拌2h。将冷却的反应混合物用水(10mL)稀释并用EtOAc(20mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(20mL X 2)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Xbridge C18 5mm 150*4.6mm，流动相A：在水中的NH₄OH0.1％，B：在CH₃CN中的NH₄OH 0.1％)进行纯化，以得到所希望的产物(顺式和反式的混合物)(150mg)。将获得的产物通过SFC(SFC80，Waters，IE-H 2.5*25cm，10um；A：超临界CO₂，B：MeOH；A:B＝60/40；流速：80mL/min；柱温度(T)：25℃；BPR：100巴)进行分离，以得到化合物266(反式或顺式)(75mg，50％产率)和化合物267(顺式或反式)(20mg，13％产率)。

实例B168

化合物268和化合物269的制备

将中间体251(400mg，0.883mmol)在CH₃NH₂(在THF中的2M)(10mL)中的混合物密封并在100℃下搅拌过夜。将混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：Waters Xbridge19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％ TFA)，B：ACN)进行纯化，以给出所希望的产物(顺式和反式的混合物)。将获得的产物通过SFC(SFC80，Waters；OD2.5*25cm，10um；A：超临界CO₂，流动相B：EtOH/ACN＝85/15；A:B＝60/40；流速：50g/min；柱温度(T)：35℃；背压(BPR)：100巴)进行分离，以得到呈白色固体的化合物268(反式或顺式)(61.1mg，15％产率)和呈白色固体的化合物269(顺式或反式)(82.9mg，20％产率)。

实例B169

化合物270的制备

在Ar下，在室温下，向中间体208(270mg，0.67mmol)、中间体3(230mg，0.67mmol，TFA盐)、Cs₂CO₃(655mg，2.0mmol)和BrettPhos(72mg，0.13mmol)在1,4-二噁烷(5mL)中的混合物中添加Pd(dba)₂(61mg，0.06mmol)。将混合物在Ar下在90℃下搅拌16h。将冷却的反应混合物过滤并浓缩滤液。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：WatersXbridge19*150mm 10um，流动相A：H₂O(0.1％ NH₄OH)，B：ACN)进行纯化，以给出呈白色固体的化合物270(顺式和反式的混合物)(60mg，13％产率)。

实例B170

化合物271的制备

向中间体20(200mg，0.54mmol)在i-PrOH(3mL)中的搅拌溶液中在室温下添加6-氟烟腈(CAS#：3939-12-6)(65mg，0.54mmol)和DIPEA(208mg，1.62mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌过夜。将冷却的反应混合物浓缩并将残余物通过制备型HPLC(Waters2767/Qda，柱：SunFire 19*250mm 10um，流动相A：0.1％NH₄OH/H₂O，B：ACN)进行纯化，以得到呈白色固体的化合物271(顺式和反式的混合物)(36.5mg，21％产率，经4步)。

实例B171

化合物272和化合物273的制备

在50℃下，将中间体5(300mg，0.880mmol)、顺式-N-4-氨基环己基)-甲烷-磺酰胺(CAS#：1259021-50-5)(169mg，0.880mmol)和Ti(i-PrO)₄(1250mg，4.40mmol)在MeOH(5mL)中的混合物搅拌3h。然后在室温下添加NaBH₃CN(110mg，1.76mmol)。将反应在室温下搅拌3h。添加HCl水溶液(1M)至pH<7。将生成物用EtOAc(50mL X 3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(50mL X 2)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法(洗脱液：DCM:MeOH＝10:1，v/v)进行纯化，以得到所希望的产物(在螺部分顺式和反式的混合物)(180mg)。将获得的产物通过SFC(SFC80，Waters；AD-H0.46*15cm，2um；HEP:ETOH(0.1％DEA)＝60:40；流速：50mL/min；柱温度(T)：25℃；以100巴表示的BPR)进行分离，以得到呈白色固体的化合物272(在螺部分的反式或顺式)(40mg，8.8％产率)和化合物273(在螺部分的顺式或反式)(35mg，7.7％产率)。

实例B172

化合物274和化合物275的制备

在0℃下，向中间体254(414mg，0.80mmol)在DCM(20mL)中的搅拌混合物中滴加Et₃N(1.5ml)和MsCl(183mg，1.6mmol)。将所得混合物在室温下搅拌4h。将反应混合物用水(40mL)稀释并用EA(30ml X 2)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤两次，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。将残余物用制备型HPLC(Waters2767/Qda，柱：Waters Xbridge 20*150mm10um，流动相A：0.1％NH₃H₂O，B：ACN)进行纯化，以给出呈白色固体的所希望的产物(顺式和反式的混合物)(130mg)。将获得的产物通过SFC(Waters-SFC80柱：OJ(2.5*25cm，10um)流动相A：超临界CO₂流动相B：MeOH/0.01％NH₃A：B＝80/20以60mL/min，检测器波长：214nm，柱温度(T)：25℃；BPR：100巴)进行分离以给出呈白色固体的化合物274(反式或顺式)(35mg，7％产率)和呈白色固体的化合物275(顺式或反式)(60mg，12％产率)。

实例B173

化合物276的制备

将2-(6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2-氮杂螺[3.4]辛-6-酮(中间体4)(180mg，0.53mmol)、2-苯基丙-2-胺(85.6mg，0.63mmol)、乙酸(95.0mg，1.58mmol)和1,2-二氯乙烷(10mL)添加至微波管中。将所得混合物在100℃下经由微波辐射加热20分钟并冷却至约25℃，然后添加三乙酰氧基硼氢化钠(335mg，1.58mmol)。将所得混合物在100℃下经由微波辐射再加热20分钟。将反应混合物冷却至25℃，并倾倒进二氯甲烷(30mL)中然后用水(20mL X 3)洗涤。将有机萃取物经无水Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩至干燥以给出残余物，将其通过反相色谱(柱：菲罗门Gemini150*25mm*10um，流动相A：水(0.05％氢氧化铵v/v)-ACN，流动相B：乙腈，流速：25mL/min，梯度条件从50％B至80％)进行纯化。收集纯级分并将溶剂在真空下蒸发。将残余物在乙腈(2mL)与水(10mL)之间分配。将混合物冻干以给出呈黄色粘性油状物的化合物276(外消旋物)(8.3mg，3.39％产率)。

实例B174

化合物277的制备

2-(6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2-氮杂螺[3.4]辛-6-酮(中间体4)(110mg，0.32mmol)、1H-吡唑-4-胺(32.1mg，0.39mmol)、乙酸(0.1mL)和干DCM(5mL)添加至100mL圆底烧瓶中。将所得混合物在40℃下搅拌1h。然后将三乙酰氧基硼氢化钠(273mg，1.29mmol)添加至所述混合物中。将所得混合物在40℃下再搅拌1h。将反应混合物倾倒进DCM(30mL)中然后用水(20mL x3)洗涤。将有机萃取物经无水Na₂SO₄干燥，过滤，在减压下浓缩至干燥以给出残余物，将其通过制备型TLC(SiO₂，二氯甲烷：甲醇＝10:1，Rf＝0.5)进行纯化，以给出呈白色固体的化合物277(外消旋物)(34.6mg，25.2％产率)。

实例B175

化合物278的制备

2-(6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2-氮杂螺[3.4]辛-6-酮(中间体4)(100mg，0.293mmol)、2-(4-氨基苯基)乙腈(58.1mg，0.440mmol)、分子筛、乙酸(0.1mL)和乙腈(5mL)添加至40mL玻璃瓶中，将所得混合物在40℃下搅拌2h。然后将三乙酰氧基硼氢化钠(248mg，1.17mmol)添加至所述混合物中，将其在40℃下再搅拌2h。将混合物悬浮在水(50mL)中并将水层用DCM(20mL x3)萃取。将合并的有机层干燥(无水Na₂SO₄)，过滤并在减压下浓缩以给出粗产物，将其通过制备型HPLC经(柱：DuraShell 150*25mm*5um，流动相A：水(10mM NH₄HCO₃)进行纯化，流动相B：乙腈，流量：25mL/min，梯度条件从40％B至70％)。收集纯级分并将溶剂在真空下蒸发。将残余物在乙腈(2mL)与水(10mL)之间分配。将溶液冻干以给出呈黄色粉末的化合物278(外消旋物)(36.8mg，26.6％产率)。

实例B176

化合物279的制备

将2-(6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2-氮杂螺[3.4]辛-6-酮(中间体4)(244mg，0.72mmol)、4-氨基-N-甲基苯磺酰胺(200mg，1.07mmol)、氰基硼氢化钠(90mg，1.43mmol)和干甲醇(9.5mL)添加至40mL玻璃瓶中，并且然后添加在干甲醇(0.5mL)中的乙酸(86.0mg，1.43mmol)。将所得混合物在45℃下搅拌8h。将混合物在减压下浓缩以给出残余物，将其溶解在DCM(30mL)中，然后用水洗涤(20mL x 3)。将有机萃取物经无水Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩至干燥以给出残余物，将其通过制备型HPLC纯化(柱：Xbridge150*30mm*10um，流动相A：水(0.05％氢氧化铵v/v)-ACN，流动相B：乙腈，流速：25mL/min，梯度条件从35％ B至65％)。收集纯级分并将溶剂在真空下蒸发。将残余物在CH₃CN(2mL)和水(10mL)之间分配。将混合物冻干以给出呈白色粉末的化合物279(外消旋物)(115.0mg，29.9％产率)。

从中间体4和相应的胺开始，通过使用如在以下表中所指示的，与用于制备化合物276、化合物277或化合物279所使用的类似还原氨化方法制备以下化合物；使用了以下4种溶剂之一：DCM、DCE、MeOH、MeCN。

实例B177

化合物305的制备

将由6-(6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)-6-氮杂螺[3.4]辛-2-酮(中间体5)(160mg，0.469mmol)、5-氨基吡啶-2(1H)-酮(82.6mg，0.750mmol)、氰基硼氢化钠(58.9mg，0.937mmol)和MeOH(17mL)组成的溶液混合物用AcOH(56.3mg，0.937mmol)在MeOH(3mL)中的溶液处理并将所述溶液在45℃下搅拌12h。将反应溶液冷却至室温并在减压下浓缩至干燥以得到粗产物，将其通过制备型HPLC(Xtimate C18 150 x 25mm x 5μm柱(洗脱液：16％至46％(v/v)水(0.225％FA)-ACN))进行纯化。将纯级分在减压下浓缩并且然后悬浮于水(10mL)中。将混合物冻干以得到不纯的产物。然后将所述不纯的产物通过制备型HPLC(Agela ASB 150x 25mm x 5μm柱(洗脱液：25％至50％(v/v)水(0.05％HCl)-ACN))进行纯化。将纯级分在减压下浓缩并且然后悬浮于水(10mL)中。将混合物冻干以得到呈白色固体(16.2mg，7.8％产率)的化合物305(顺式和反式的混合物)。

从中间体5和相应的胺开始，通过使用如在以下表中所指示的，与用于制备化合物276、化合物277或化合物279所使用的类似还原氨化方法制备以下化合物；使用以下4种溶剂中的一种：DCM、DCE、MeOH、MeCN。

实例B179

化合物377、化合物378和化合物379的制备

将中间体246(100mg，0.40mmol)和1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯(214mg，1.41mmol)溶解于40mL玻璃小瓶中的乙腈(8mL)中。5分钟后，添加BOP(177mg，0.40mmol)。将所得混合物搅拌5分钟并且然后添加中间体277(297mg，粗TFA盐，0.63mmol)。将所得混合物在50℃下搅拌8小时。将反应混合物倾倒进DCM(30mL)中然后用水(20mL x 3)洗涤。将有机萃取物经无水Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩至干燥以给出残余物，将其通过制备型HPLC纯化(柱：Xtimate C18 150*25mm*5um，流动相A：水(0.225％ FA)-ACN，流动相B：乙腈，流速：22mL/min，梯度条件从32％B至62％)。收集纯级分并将溶剂在真空下蒸发。将残余物在乙腈(2mL)与水(10mL)之间分配。将混合物冻干以给出呈黄色固体的化合物377(顺式和反式的混合物；在HNMR中通过HCOOH的CHO基团残留信号测定0.5HCOOH)(13.4mg，6.79％产率)。

通过超临界流体色谱将化合物377(100mg，0.19mmol)进行分离(分离条件：YMCCHIRAL Amylose-C(250mm*30mm，10um)流动相：A：超临界CO2，B：0.1％NH₃H₂O EtOH，A：B＝50:50以70mL/min；柱温：38℃；喷嘴压力：100巴；喷嘴温度：60℃；蒸发器温度：20℃；微调器温度：25℃；波长：220nm)进行纯化。收集纯级分并在真空下蒸发溶剂。将残余物在CH₃CN(2mL)和水(10mL)之间分配。将溶液冻干以给出呈白色粉末的化合物378(反式或顺式)(35.8mg，38.0％产率)和粗化合物379。

将粗化合物379通过制备型HPLC经(柱：Xtimate C18 150*25mm*5um，流动相A：水(0.225％甲酸)-ACN，流动相B：乙腈，流速：25mL/min，梯度条件从28％B至58％)进行纯化。收集纯级分并将溶剂在真空下蒸发。将残余物在CH₃CN(2mL)和水(10mL)之间分配。将混合物冻干以给出呈白色粉末的化合物379(顺式或反式；甲酸盐)(17.12mg，17.0％产率)。

实例B180

化合物380的制备

经由以上用于制备化合物377所述的类似的反应方案，从各起始材料开始，制备化合物380。

实例B181

化合物381、化合物382和化合物383的制备

将中间体281(250mg，0.700mmol)、5-氨基-1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮(CAS#：95-23-8)(157mg，1.05mmol)、氰基硼氢化钠(88.2mg，1.40mmol)和干甲醇(9.5mL)添加至40mL玻璃瓶中，并且然后添加在干甲醇(0.5mL)中的乙酸(84.3mg，1.40mmol)。将所得的混合物加热并在45℃下搅拌8小时。将混合物冷却至室温并在减压下浓缩以给出残余物，将其溶解在二氯甲烷(30mL)然后用水洗涤(20mL x 3)。将有机萃取物经无水Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩至干燥以给出残余物，将其通过制备型HPLC(柱：Xtimate C18 150*25mm*5um，流动相A：水(0.225％FA)-ACN，流动相B：乙腈，流速：25mL/min，梯度条件从15％B至45％)进行纯化。收集纯级分并将溶剂在真空下蒸发。将残余物在CH₃CN(2mL)和水(10mL)之间分配。将混合物冻干以给出呈白色粉末的所需的化合物381(顺式和反式的混合物；甲酸盐)(62.4mg，16.1％产率)。通过SFC进一步分离获得的化合物381，得到化合物382(反式或顺式)和化合物383(顺式或反式)。

实例B182

化合物384、化合物385和化合物386的制备

经由以上用于制备化合物381所述的类似的反应方案，从各起始材料开始，制备化合物384(甲酸盐)。

通过SFC进一步分离获得的化合物384(顺式和反式的混合物)，得到化合物385(反式或顺式)和化合物386(顺式或反式)。

实例B183

化合物387、化合物388和化合物389的制备

经由以上用于制备化合物377所述的类似的反应方案，从各起始材料开始，制备化合物387。

通过SFC进一步分离获得的化合物387(顺式和反式的混合物)，得到化合物388(反式或顺式)和化合物389(顺式或反式)。

实例B184

化合物390、化合物391和化合物392的制备

将中间体285(150mg，0.405mmol)、2-(4-氨基苯基)乙腈(CAS#：3544-25-0)(80.8mg，0.611mmol)、氰基硼氢化钠(51.0mg，0.812mmol)和干甲醇(12mL)添加至40mL玻璃瓶中，然后在混合物中添加在甲醇(1mL)中的乙酸(50.0mg，0.833mmol)。将所得混合物在45下搅拌36h。将混合物悬浮于水(20mL)中，通过添加饱和的碳酸氢钠溶液将水层调节pH＝8，用二氯甲烷(20mL x 3)萃取。将合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩以给出粗产物，将其通过制备型HPLC(柱：菲罗门Gemini 150*25mm*10um，流动相A：水(0.05％氢氧化铵v/v)，流动相B：乙腈，流速：25mL/min，梯度条件从50％ B至80％)进行纯化。收集纯级分并将溶剂在真空下蒸发以给出残余物。将残余物在乙腈(2mL)与水(10mL)之间分配。将溶液冻干以给出呈浅色粉末状的化合物390(顺式和反式的混合物)(123.7mg，62.5％产率)。

通过SFC进一步分离获得的化合物390，得到化合物391(反式或顺式)和化合物392(顺式或反式)。

从中间体285、中间体287和相应的胺开始，通过使用与用于制备化合物279所使用的类似还原氨化方法制备以下化合物；使用以下4种溶剂中的一种：DCM、DCE、MeOH、MeCN。

实例B185

化合物403的制备

将搅拌棒、中间体289(67.2mg，0.252mmol)、中间体283(100mg，0.360mmol)、N,N-二异丙基乙胺(233mg，1.80mmol)和乙腈(5mL)添加至40mL玻璃瓶中，将其在25℃下搅拌2h。将混合物稀释到DCM(50mL)中并用水(20mLx 3)萃取，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩以给出粗产物，将粗产物通过制备型TLC(乙酸乙酯/甲醇＝25/1，Rf＝0.3)进行纯化，以给出呈白色粉末的化合物403(外消旋物)(25.1mg，95.1％纯度，14.1％产率)。

实例B186

化合物404的制备

经由以上用于制备化合物403所述的类似的反应方案，从各起始材料开始，制备化合物404(顺式和反式的混合物)。

实例B187

化合物405和化合物406的制备

将顺式-2,6-二甲基吗啉(25.0mg，0.217mmol)添加至由中间体59(50.0mg，0.087mmol)、HATU(60.0mg，0.158mmol)、DIEA(45.0mg，0.348mmol)和DCM(4.0mL)组成的混合物中。将所得混合物在25℃下搅拌16小时。将混合物倾倒进水(15mL)中并通过DCM(10mLx 3)萃取。将合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗残余物通过制备型HPLC用菲罗门Gemini150*25mm*10um(洗脱液：水(0.05％氢氧化铵v/v)-ACN从45％至75％)进行纯化。将产物悬浮于水(50mL)中并且然后冻干以得到呈白色粉末的在螺部分呈顺式和反式混合物的产物(18.0mg，37％产率)。

将两个批次的在螺部分呈顺式和反式混合物的产物合并并通过SFC(分离条件：YMC CHIRAL Amylose-C(250mm*30mm，10um，流动相：A：超临界CO₂，B：0.1％NH₃H₂O IPA，A:B＝60:40以50mL/min；柱温：38℃；喷嘴压力：100巴；喷嘴温度：60℃；蒸发器温度：20℃；微调器温度：25℃；波长：220nm)进一步分离。收集两种纯级分并将溶剂在真空下蒸发。将两种残余物分别重悬浮于水(10mL)中并将所得混合物冻干以给出呈白色固体的化合物405(在螺环部分的反式或顺式)(9.2mg23％产率)和呈白色固体的化合物406(在螺部分的顺式或反式)(17.5mg，44％产率)。

从中间体59和相应的胺开始，通过使用与用于制备化合物405所使用的类似方法制备以下化合物。

实例B188

化合物415的制备

将4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)(92.5mg，0.366mmol)、中间体291(120mg，粗HCl盐，0.366mmol)、N,N-二异丙基乙胺(238mg，1.84mmol)和乙腈(5mL)添加至40mL玻璃瓶中，将其在25℃下搅拌2h。将混合物稀释到DCM(50mL)中并用水(20mL x 3)萃取，将有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩以给出粗产物，将粗产物通过制备型TLC(乙酸乙酯/甲醇＝25/1，R_f＝0.3)进行纯化，以给出残余物。将残余物在乙腈(2mL)与水(10mL)之间分配。将溶液冻干以给出呈白色粉末的化合物415(顺式和反式的混合物)(145.6mg，77.3％产率)。

经由与用于制备化合物415所使用的类似方法，从4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(CAS#：1628317-85-0)和相应的胺开始，制备化合物416和化合物417。

实例B189

化合物418和化合物419的制备

将中间体294(200mg，1.16mmol)、6-(6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)-6-氮杂螺[3.4]辛-2-胺中间体3a(395mg，HCl盐，0.730mmol)、N,N-二异丙基乙胺(746mg，5.77mmol)和n-BuOH(2mL)添加至10mL小瓶中。将混合物在微波下在140℃下辐射5h。将混合物冷却至室温，将其通过制备型HPLC使用Boston Prime C18150x 30mm x 5μm柱(洗脱液：32％至62％(v/v)水(0.05％氢氧化铵v/v)-ACN)进行纯化，以得到纯产物。将产物悬浮于水(10mL)和ACN(5mL)中，将混合物使用干冰/乙醇冷冻，并且然后冻干以得到呈白色固体的顺式和反式的混合物。

将获得的顺式和反式的混合物(200mg，0.419mmol)通过SFC(分离条件：柱：DAICELCHIRALPAK AD 250x 30mm，10μm；流动相：A：超临界CO₂，B：EtOH(0.1％ NH₃.H₂O)，A:B＝60:40以70mL/min；)进行分离。收集纯级分并将挥发物在减压下去除。将残余物在CH₃CN(2mL)和水(8mL)之间分配。将混合物使用干冰/乙醇冷冻，并且然后冻干以得到两种呈白色固体的化合物418和化合物419。

从中间体3和中间体295开始，通过与用于制备化合物418和419所使用的类似方法制备化合物420和化合物421。

实例B190

化合物422的制备

将搅拌棒、甲基2-氰基-4-((6-(6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)-6-氮杂螺[3.4]辛-2-基)氨基)苯甲酸酯(中间体296)(60.0mg，0.120mmol)和在乙醇中的甲胺(4.0mL，在乙醇中的30％)添加至8mL玻璃瓶中，将所得混合物加热并在45℃下搅拌8h。将混合物冷却至室温并在减压下浓缩以给出粗品，将其通过制备型HPLC(柱：Boston PrimeC18 150*30mm 5um，流动相A：水(0.04％ NH₃H₂O+10mM NH₄HCO₃)，流动相B：乙腈，流量：25mL/min，梯度条件从43％B至73％)进行纯化。收集纯级分并将溶剂在真空下蒸发以给出残余物。将残余物在乙腈(2mL)与水(10mL)之间分配。将溶液冻干以给呈黄色粉末的化合物422(顺式和反式的RS混合物)(5.43mg，通过LCMS的93.68％纯度，8.50％产率)。

实例B191

化合物423的制备

将搅拌棒、2-(6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷-6-酮(中间体298)(150mg，0.46mmol)、(4-氨基苯基)(吗啉基)甲烷(CAS#：51207-86-4)(142mg，0.69mmol)、氰基硼氢化钠(57.6mg，0.92mmol)和干甲醇(9.5mL)添加至40mL玻璃瓶中，并且然后添加在干甲醇(0.5mL)中的乙酸(55.0mg，0.92mmol)。将反应混合物加热至45℃并搅拌8小时。将反应混合物用DCM(50mL)稀释，并用水(20mL x 3)洗涤。将有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩，以给出残余物，将其通过制备型HPLC(柱：Xtimate C18150*25mm*5um，流动相A：水(0.225％ FA)，流动相B：乙腈，流速：25mL/min，梯度条件从28％B至58％)进行纯化。收集纯级分并将溶剂在真空下蒸发。将残余物在CH₃CN(2mL)和水(10mL)之间分配。将混合物冻干以给出呈白色粉末的化合物423(94.35mg，98.7％纯度，39.3％产率)。

实例B192

化合物428的制备

从中间体300和苯甲醛开始，经由在以下表中所指示的，与用于制备化合物48所使用的类似方法，制备化合物428。

C.化合物的转化

实例C1

化合物52的制备

将化合物50(100mg，0.251mmol)、3-吗啉丙酸氢溴酸(72mg，0.3mmol)、HBTU(95mg，0.251mmol)和DIPEA(216μL；1.255mmol)在DMF(4mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。所述反应混合物倾倒进10％ K₂CO₃水溶液中并用EtOAc萃取。将有机层倾析，用水然后盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH，10g；流动相：梯度从0％ NH₄OH，0％MeOH，100％ DCM至1％ NH₄OH，10％ MeOH，90％ DCM)进行纯化。收集含有产物的级分，并蒸发至干燥产生110mg不纯残余物。通过硅胶色谱法(不规则SiOH，10g；流动相：梯度从0％ NH₄OH，0％ MeOH，100％DCM至0.7％ NH₄OH，7％ MeOH，93％DCM)进行第二纯化。收集纯级分并蒸发至干。将残余物由水/ACN(80/20；10mL)冷冻干燥产生呈70/30异构体混合物的82mg(60％)的化合物52。

实例C2

化合物25和26的制备

参见实例B17中化合物22至化合物25和26的转化。

实例C3

化合物424的制备

将化合物341(80mg，0.178mmol)和吡啶盐酸盐(800mg，6.923mmol)的混合物在茄型烧瓶中在200℃下加热1h。将混合物冷却至25℃并添加DCM(50mL)。将有机层用水(30mL x3)、盐水(30mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩以给出残余物，将其通过制备型HPLC(柱：菲罗门Gemini 150*25mm*10um，流动相A：水(0.05％氢氧化铵v/v)，流动相B：乙腈，流速：22mL/min，梯度条件从25％ B至55％)进行纯化。收集纯级分并将溶剂在真空下蒸发以给出呈白色固体的化合物424(顺式和反式的混合物)。

实例C4

化合物425的制备

将搅拌棒、化合物415(顺式和反式的混合物)(100mg，0.197mmol)、碳酸钾(273mg，1.98mmol)和干二甲基甲酰胺(4mL)添加至10mL圆底烧瓶中，然后将碘甲烷(20.0g，141mmol)滴加至混合物中，将所得混合物在25℃下搅拌18h。将混合物悬浮于水(50mL)中，将水层用DCM(20mL x 3)萃取。将合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并在减压下浓缩，以给出粗品，将其通过制备型TLC(石油醚/乙酸乙酯＝1/1，R_f＝0.4)进行纯化，以给出残余物。将残余物在乙腈(2mL)与水(10mL)之间分配。将溶液冻干以给出呈白色粉末的化合物425(顺式和反式的混合物)(33.2mg，98.7％产率，31.9％产率)。

实例C5

化合物426和化合物427的制备

分别从化合物416和417开始，经由与用于制备化合物425所使用的类似方法，分别制备化合物426和427。

实例C6

化合物376的制备

通过以下方案中指示的方法，从化合物340制备化合物376：

实例C7

化合物260的制备

在0℃下，向化合物260a(350mg，0.78mmol)和K₂CO₃(269mg，1.95mmol)在DMF(4mL)中的搅拌溶液中滴加CH₃I(167mg，1.18mmol)。将反应在室温下搅拌过夜。将反应混合物过滤并浓缩。将残余物通过制备型HPLC(Waters 2767/Qda，柱：SunFire 19*250mm10um，流动相A：0.1％ TFA/H₂O，B：ACN)进行纯化，以得到呈黄色固体的所希望的化合物260(顺式和反式的混合物)(63.9mg，TFA盐，17％产率)。

分析部分

LCMS(液相色谱法/质谱法)

通用程序

使用LC泵、二极管阵列(DAD)或UV检测器以及如在对应的方法中所指定的柱进行高效液相色谱法(HPLC)测量。如果必要的话，包括其他检测器(参见下文的方法表格)。

将来自柱的流带至配置有大气压离子源的质谱仪(MS)。设置调谐参数(例如扫描范围、停留时间等)以便获得允许鉴定化合物的标称单一同位素分子量(MW)的离子在技术人员的知识内。利用适当的软件进行数据采集。

通过其实验保留时间(R_t)和离子描述化合物。如果未在数据表中不同地指定，那么报道的分子离子对应于[M+H]⁺(质子化的分子)和/或[M-H]^-(去质子的分子)。在化合物不是直接可电离的情况下，指定加合物类型(即[M+NH₄]⁺、[M+HCOO]^-等)。对于具有多种同位素模式的分子(Br、Cl等)来说，报道的值是针对最低同位素质量获得的值。获得的所有结果具有通常与所使用的方法相关的实验不确定性。

在下文中，“SQD”意指单四极检测器，“RT”室温，“BEH”桥连的乙基硅氧烷/二氧化硅杂合体，“HSS”高强度二氧化硅，“DAD”二极管阵列检测器。

表1a：LCMS方法代码(以mL/min表示流量；以℃表示柱温度(T)；以分钟表示运行时间)。“TFA”意指三氟乙酸；

表1a(续)

表1b：LCMS和熔点数据。Co.No.意指化合物编号；R_t意指保留时间(以min计)。

表1b(续)

表1b(续)

分析型手性HPLC

用于SFC方法的通用程序

使用分析型超临界流体色谱(SFC)系统来进行SFC测量，所述系统由以下构成：用于递送二氧化碳(CO₂)和改性剂的二元泵、自动进样器、柱温箱、配备有经得起400巴的高压流动池的二极管阵列检测器。如果配置有质谱仪(MS)，来自所述柱的流被引至所述(MS)。设置调谐参数(例如扫描范围、停留时间等)以便获得允许鉴定化合物的标称单一同位素分子量(MW)的离子在技术人员的知识内。利用适当的软件进行数据采集。

手性HPLC方法

用于手性HPLC方法的通用程序

如在对应的方法中指定的，使用手性高效液相色谱法(手性HPLC)系统进行手性HPLC测量，所述系统由以下构成：LC泵、二极管阵列(DAD)或UV检测器和手性柱。利用适当的软件进行数据采集。

下表中的方法代码15、18、39和57是指手性HPLC方法。

表2a.分析型SFC方法和手性HPLC(方法代码15和18)(以mL/min表示流速；以℃表示柱温度(T)；以分钟表示运行时间，以巴表示背压(BPR)(除非另外指明)。“ACN”意指乙腈；“MeOH”意指甲醇；“EtOH”意指乙醇；“DEA”意指二乙胺。下表中使用的所有其他使用的缩写词如前文的定义)

表2a(续)

表2a(续)

表2a(续)

表2b.SFC数据。(异构体洗脱顺序，在所述条件下‘A’在‘B’之前洗脱，‘B’在‘C’之前洗脱，‘C’在‘D’之前洗脱)

表2b(续)

表2b(续)

表2b(续)

旋光度(OR)

将旋光度用偏振计341(珀金埃尔默公司(Perkin Elmer))进行测量。使偏振光通过样品，路径长度为1分米并且样品浓度为0.2至0.4克/100毫升。将小瓶中2mg至4mg的产物称重，然后用1ml至1.2ml的光谱溶剂(例如DMF)溶解。将池充满溶液，并在20℃的温度下放入偏振计中。OR以0.004°的精度读取。

浓度的计算：重量以克x 100/体积(以ml计)

[α]_d ²⁰：(旋光读数x 100)/(1.000dm x浓度)。

^d是钠D线(589纳米)。

表：OR数据：温度：20℃；‘conc’意指浓度(g/100mL)；‘OR’意指旋光度；“DMF”意指N,N-二甲基甲酰胺

NMR方法

对于一些化合物，使用以下仪器进行NMR实验：Bruker Avance500光谱仪(配备有具有z梯度的Bruker 5mm BBFO探头，并且针对质子在500MHz下工作，以及针对碳在125MHz下工作)，或使用Bruker Avance DRX 400光谱仪(使用内部氘锁并配备有具有z梯度的反向双重共振(¹H、¹³C、SEI)探头，并且针对质子在400MHz下工作，以及针对碳在100MHz下工作)。化学位移(δ)以百万分率(ppm)报告。J值以Hz表示。

可替代地，一些NMR试验使用以下仪器进行：在环境温度下(298.6K)使用BrukerAvance III 400光谱仪，使用内部氘锁，并且配备有具有z梯度的5mm PABBO BB-探头，并且针对质子在400MHz下工作，并且针对碳在100MHz下工作。化学位移(δ)以百万分率(ppm)报告。J值以Hz表示。

药理学部分

1)Menin/MLL荧光偏振测定

向非表面结合，黑色384孔微量滴定板上添加在DMSO中的50nL 160X测试化合物和在测定缓冲液(40mM Tris·HCl，pH 7.5，50mMNaCl，1mM DTT(二硫苏糖醇)和0.001％吐温20)中的4μL 2X menin。在环境温度下，将测试化合物和menin孵育10min之后，添加在测定缓冲液中的4μL 2X FITC-MBM1肽(FITC-β-丙氨酸-SARWRFPARPGT-NH₂)，在1000rpm将微量滴定板离心1min，并且将测定混合物在环境温度下孵育15min。在环境温度下，通过用BMGPherastar板读数仪(ex.485nm/em.520nm)测量FITC标记的荧光偏振(FP)来确定在测定混合物中存在的menin·FITC-MBM1复合物的相对量。在结合测定中试剂的终浓度是在测定缓冲液中100nMmenin、5nM FITC-MBM1肽和0.625％ DMSO。使用11个点，三倍连续稀释方案，在31μM处开始进行测试化合物的剂量-应答滴定。

根据以下公式1通过首先计算在每个化合物浓度处的％抑制来确定化合物效能：

％抑制＝((HC-LC)-(FP^化合物-LC))/(HC-LC)*100 (公式1)

其中化合物的饱和浓度存在或缺失的情况下测定的LC和HC是FP值，所述化合物与FITC-MBM1竞争对menin结合，并且在测试化合物的存在下用FP^化合物测量FP值。HC和LCFP值代表至少16个重复/板的平均值。对于每种测试化合物，对比测试化合物浓度的对数绘制％抑制值，并且IC₅₀值来源于将这些数据根据公式2拟合：

％抑制＝底部+(顶部-底部)/(1+10^((logIC₅₀-log[cmpd])*h)) (公式2)

其中底部和顶部分别是剂量-应答曲线的较低和较高的渐近线，IC₅₀是产生50％信号抑制的化合物浓度，并且h是希尔系数。

2)menin/MLL均相时间分辨荧光(HTRF)测定

向未经处理的，白色384-孔微量滴定板中添加在DMSO中的40nL 200X测试化合物和在测定缓冲液(40mM Tris·HCl，pH 7.5，50mMNaCl，1mM DTT和0.05％Pluronic F-127)中的4μL 2X铽螯合标记的menin(见下文用于制备)。在环境温度下，将测试化合物和铽螯合标记的menin孵育5min之后，添加在测定缓冲液中的4μL 2XFITC-MBM1肽(FITC-β-丙氨酸-SARWRFPARPGT-NH₂)，在1000rpm下将微量滴定板离心1min，并且将测定混合物在环境温度下孵育15min。在环境温度下，使用BMG Pherastar板读数仪(ex.337nm/铽em.490nm/FITCem.520nm)，通过测量铽/FITC供体/受体荧光对的均相时间分辨荧光(HTRF)来确定存在于测定混合物中的menin·FITC-MBM1复合物的相对量。将荧光共振能量转移(HTRF值)度表示为FITC的荧光发射强度和铽荧光(F^em520nm/F^em490nm)的比率。在结合测定中试剂的终浓度是在测定缓冲液中100pM铽螯合标记的menin(位置1)或600pM铽螯合标记的menin(位置2)、75nM FITC-MBM1肽和0.5％ DMSO。使用11个点，三倍连续稀释方案，典型地在25μM(位置1)处开始或典型地在10μM(位置2)处开始进行测试化合物的剂量-应答滴定。

％抑制＝((HC-LC)-(HTRF^化合物-LC))/(HC-LC)*100(公式1)

其中化合物的饱和浓度存在或缺失的情况下测定的LC和HC是HTRF值，所述化合物与FITC-MBM1竞争对menin结合，并且在测试化合物的存在下用HTRF^化合物测量HTRF值。HC和LCHTRF值代表至少16个重复/板的平均值。对于每种测试化合物，对比测试化合物浓度的对数绘制％抑制值，并且IC₅₀值来源于将这些数据根据公式2拟合：

％抑制＝底部+(顶部-底部)/(1+10^((logIC₅₀-log[cmpd])*h))(公式2)

Menin的铽穴状化合物标记的制备：将Menin(a.a.1-610-6xhis标签)用铽穴状化合物标记如下。将2mg Menin的缓冲液交换为1x磷酸盐缓冲盐水。在室温，将16uM Menin用4倍摩尔过量的NHS-铽穴状化合物(浠思生物测定技术有限公司(Cisbio Bioassays)，贝德福德，马萨诸塞州)孵育2小时。将经标记的蛋白质通过经Superdex200Increase 10/300GL柱，以0.75ml/min运行反应从游离标记中纯化澄清。收集峰级分，等分并且在-80℃冷冻。

MENIN蛋白质序列(SEQ ID NO:1)：

3a)增殖测定A

在人白血病细胞系中评价menin/MLL蛋白质/蛋白质相互作用抑制剂测试化合物的抗增殖效应。细胞系MV-4-11和MOLM14分别带有MLL易位并且表达MLL融合蛋白MLL-AF4和MLL-AF9，以及来自第二个等位基因的野生型蛋白质。因此，MLL重排的细胞系MV-4-11和MOLM14展示干细胞样HOXA/MEIS1基因表达标记。将K562用作含有两种MLL野生型等位基因的对照细胞系，以便于排除显示一般细胞毒性效应的化合物。

将MV-4-11和MOLM14在补充有10％胎牛血清(海克隆公司(HyClone))、2mM L-谷氨酰胺(西格玛奥德里奇公司(Sigma Aldrich))和50μg/ml庆大霉素(博科公司(Gibco))的RPMI-1640(西格玛奥德里奇公司)中进行培养。将K562在补充有20％胎牛血清(海克隆公司(HyClone))、2mM L-谷氨酰胺(西格玛奥德里奇公司(Sigma Aldrich))和50μg/ml庆大霉素(博科公司(Gibco))的RPMI-1640(西格玛奥德里奇公司)中进行培养。在培养过程中将细胞保持在30万至250万细胞/ml，并且传代数不超过25。

为了评价抗增殖效应，将1,500MV-4-11、300MOLM14或750K562细胞以200μl介质/孔接种在96孔圆底，超低附接板中(科斯塔尔(Costar)，目录编号7007)。基于生长曲线选择细胞接种数，以确保贯穿实验中的线性增长。在不同的浓度下添加测试化合物，并且将DMSO含量标准化至0.3％。在37℃和5％CO₂下将细胞孵育8天。通过活细胞成像(IncuCyteZOOM，埃森生物公司(Essenbio)，4x物镜)实时监测球体样生长，持续8天每四小时获取一次图像。使用整合的分析工具确定作为球体尺寸度量的融合度(％)。

为了确定测试化合物随时间的累积效应，计算在融合度对时间的图的曲线下面积(AUC)。在实验的开始(t＝0)将融合度用作用于AUC计算的基线。

根据以下方法计算绝对IC₅₀值：

％对照＝(AUC样品/AUC对照)*100

AUC对照＝对照值的平均AUC(不含有化合物/DMSO的细胞作为运载体对照)

使用最小二乘法(普通)拟合方法将非线性曲线拟合应用于％对照对比化合物浓度的图。基于此，计算绝对IC₅₀值(引起相对于运载体对照50％的抗增殖效应的测试化合物的半最大抑制浓度)。

3b)增殖测定B

为了评价抗增殖效应，将1,500MV-4-11、300MOLM14细胞或750K562细胞以200μl介质/孔接种在96孔圆底，超低附接板中(科斯塔尔(Costar)，目录编号7007)。基于生长曲线选择细胞接种数，以确保贯穿实验中的线性增长。在不同的浓度下添加测试化合物，并且将DMSO含量标准化至0.3％。在37℃和5％CO₂下将细胞孵育8天。通过活细胞成像(IncuCyteZOOM，埃森生物公司(Essenbio)，4x物镜)实时测量球体样生长，在第8天获取图像。使用整合的分析工具确定作为球体尺寸度量的融合度(％)。

为了确定测试化合物随时间的效应，计算每个孔中作为球体尺寸度量的融合度。用于在实验的开始时(t＝0)用做参考化合物最高剂量的融合度的基线被用作用于计算的基线。

绝对IC₅₀值计算为如下融合度中百分比的变化：

LC＝低对照：细胞用1μM的细胞毒性剂星形孢菌素处理

HC＝高对照：平均融合度(％)(DMSO处理的细胞)

％效应＝100-(100*(样品-LC)/(HC-LC))

为了确定IC50，使用具有可变斜率的S形拟合并将最大值固定到100％且最小值固定到0％，将曲线拟合到％效应相对于Log10化合物浓度的图。

表4a.在Menin/MLL均相时间分辨荧光(HTRF)测定(2)中的生物学数据。

NT：未测试

表4b.在增殖测定(3)中的生物学数据。

Claims

1.一种具有式(I)的化合物

或其互变异构体或立体异构形式，其中

R¹选自由以下组成的组：CH₃、CH₂F、CHF₂和CF₃；

Y¹是N或CR^y；

当Y¹代表CR^y时，R²是氢；

Y²是CH₂或O；

A是共价键或-CR^15aR^15b-；

R^15a和R^15b各自独立地选自由以下组成的组：氢或C_1-4烷基；

Q是氢或任选地被苯基取代的C_1-4烷基；

--L-R³选自(a)、(b)、(c)、(d)、(e)或(f)：

(a)--L-R³是-NR^AR^1A，其中

或

其中

R^1B选自由以下组成的组：氢；卤代；C_3-6环烷基；任选地被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-4烷基：氟、羟基和-CN；被选自由以下组成的组的取代基取代的C_2-4烷基：-OR^4B和-NR^5BR^5BB；和含有至少一个氮、氧或硫原子的C-连接的4元至7元非芳香族杂环基；并且R^1BB选自由以下组成的组：氢和甲基；或R^1B和R^1BB连同它们所附接的碳一起形成C_3-6环烷基或含有至少一个氮、氧或硫原子的C-连接的4元至7元非芳香族杂环基；

或

(d)L选自-N(R^D)-CR^1DR^1DD-和-N(R^D)-CR^1DR^1DD-CR^2DR^2DD-；其中

R³选自由以下组成的组：

其中

R^3D、R^4D和R^5D各自独立地选自由以下组成的组：任选地被-OH、-OC_1-6烷基或-NH₂取代基取代的C_1-6烷基；

或

(e)--L-R³是

其中

R^E选自由以下组成的组：氢和C_1-4烷基；

R^1E选自由以下组成的组：氢、氟和C_1-4烷基；并且

或

(f)--L-R³是基团

其中

R⁴、R⁵、R^5'、R⁶、R⁷、R^7'、R⁸和R^8'各自独立地选自由以下组成的组：氢；-C(＝O)-C_1-4烷基；-S(＝O)₂-C_1-4烷基；任选地被选自由以下组成的组的取代基取代的C_1-4烷基：氟、-CN、-C(＝O)-C_1-4烷基、-S(＝O)₂-C_1-4烷基、R^11”、R¹⁶和-C(＝O)NR⁹R^9’；

被三个氟原子取代的C_1-4烷基；和

Het³选自由以下组成的组：式(b-1)和(b-2)：

环B是苯基；

X¹代表CH₂、O或NH；

X²代表NH或O；

X³代表NH或O；

X⁴代表CH或N；

X⁵代表CH或N；

n1、n2和m1各自独立地选自1和2；

m2是0或1；

或其药学上可接受的盐或溶剂化物。

2.如权利要求1所述的化合物，其中

R¹选自由以下组成的组：CH₃、CH₂F、CHF₂和CF₃；

Y¹是N或CR^y；

当Y¹代表CR^y时，R²是氢；

Y²是CH₂或O；

A是共价键或-CR^15aR^15b-；

R^15a和R^15b各自独立地选自由以下组成的组：氢或C_1-4烷基；

Q是氢或任选地被苯基取代的C_1-4烷基；

--L-R³选自(a)、(b)、(c)、(d)、(e)或(f)：

(a)--L-R³是-NR^AR^1A，其中

或

R^1B选自由以下组成的组：氢；卤代；C_3-6环烷基；

或

任选地被-NR^2cR^2cc、Ar、Het¹或Het²取代的C_1-4烷基；其中

或

(d)L选自-N(R^D)-CR^1DR^1DD-和-N(R^D)-CR^1DR^1DD-CR^2DR^2DD-；其中

R³选自由以下组成的组：

其中

或

(e)--L-R³是

其中

R^E选自由以下组成的组：氢和C_1-4烷基；

R^1E选自由以下组成的组：氢、氟和C_1-4烷基；并且

或

(f)--L-R³是基团

其中

Het³选自由以下组成的组：式(b-1)和(b-2)：

环B是苯基；

X¹代表CH₂、O或NH；

X²代表NH或O；

X³代表NH或O；

X⁴代表CH或N；

X⁵代表CH或N；

n1、n2和m1各自独立地选自1和2；

m2是0或1。

3.如权利要求1或2所述的化合物，其中

R¹是CF₃；

Y¹是N；

R²是氢；

Y²是CH₂；

A是共价键或-CR^15aR^15b-；

R^15a和R^15b是氢；

Q是氢；

--L-R³选自(a)、(b)、(c)：

(a)--L-R³是-NR^AR^1A，其中

R^A是氢；

R^1A是C_1-6烷基；

或

(b)L选自由以下组成的组：-N(R^B)-和-N(R^B)-CR^1BR^1BB-；并且

R³选自由以下组成的组：Ar；Het¹；和Het³；其中

R^B是氢；

R^1B是氢；并且

R^1BB选自由以下组成的组：氢和甲基；

或

R^C选自由以下组成的组：氢和C_1-4烷基；

Het²是非芳香族杂环基；

其中

Het³选自由以下组成的组：式(b-1)和(b-2)：

环B是苯基；

X¹代表O或NH；

X²代表NH；

X³代表NH；

X⁴代表N；

X⁵代表CH；

n1、n2和m1各自独立地选自1和2；

m2是0或1。

4.如权利要求1所述的化合物，其中

R¹是CF₃；

Y¹是N；

Y²是CH₂；

R^15a和R^15b是氢；

Q是氢；

--L-R³选自(a)、(b)、(c)、(d)、(e)或(f)：

(a)--L-R³是-NR^AR^1A，其中

R^A选自由以下组成的组：氢和C_1-4烷基；

R^1A是C_1-6烷基；

或

R^B选自由以下组成的组：氢和C_1-4烷基；

R^1B选自由以下组成的组：氢和C_1-4烷基；并且

或

R^C选自由以下组成的组：氢和C_1-4烷基；

Het¹是选自由以下组成的组的单环杂芳基：吡啶基，2-、4-、5-或6-嘧啶基，吡嗪基，哒嗪基，吡唑基和咪唑基；其各自可以任选地被各自独立地选自由以下组成的组的一个、两个或三个取代基取代：-CN、-OR⁴、-C(＝O)NR⁵R^5'、-C(＝O)-Het⁴和任选地被-C(＝O)NR⁸R^8’取代的C_1-4烷基；并且

Het²是非芳香族杂环基；

其中

被三个氟原子取代的C_1-4烷基；和

R¹⁷是任选地被选自由以下组成的组的一个或多个取代基取代的C_3-6环烷基：-NR⁵R^5’。

5.如权利要求1所述的化合物，其中A是共价键。

6.如权利要求1所述的化合物，其中A是-CR^15aR^15b-。

7.一种药物组合物，所述药物组合物包含如权利要求1至6中任一项所述的化合物及药学上可接受的载体或稀释剂。

8.一种用于制备如权利要求6所述的药物组合物的方法，所述方法包括：将药学上可接受的载体与治疗有效量的如权利要求1至6中任一项所述的化合物混合。

9.如权利要求1至6中任一项所述的化合物或如权利要求7所述的药物组合物，用于作为药物使用。

10.如在权利要求1至6中任一项所述的化合物或如权利要求6所述的药物组合物用于在预防或治疗癌症、骨髓增生异常综合症(MDS)和糖尿病中使用。

11.如权利要求10所述使用的化合物或药物组合物，其中癌症选自：白血病、骨髓瘤或实体瘤癌症，如前列腺癌、肺癌、乳癌、胰腺癌、结肠癌、肝癌、黑色素瘤和胶质母细胞瘤。

12.如权利要求11所述使用的化合物或药物组合物，其中所述白血病选自：急性白血病、慢性白血病、骨髓白血病、髓性白血病、成淋巴细胞白血病、淋巴细胞白血病、急性髓性白血病(AML)、慢性髓性白血病(CML)、急性成淋巴细胞白血病(ALL)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、T细胞前淋巴细胞白血病(T-PLL)、大颗粒淋巴细胞白血病、毛细胞白血病(HCL)、MLL-重排白血病、MLL-PTD白血病、MLL增加的白血病、MLL-阳性白血病，以及展示HOX/MEIS1基因表达标记的白血病。

13.一种治疗或预防选自癌症、骨髓增生异常综合症(MDS)和糖尿病的障碍的方法，所述方法包括对其有需要的受试者施用治疗有效量的如在权利要求1至6中任一项所述的化合物或在权利要求7中所述的药物组合物。

14.如权利要求13所述的方法，其中所述障碍是癌症。

15.如权利要求14所述的方法，其中癌症选自：白血病、骨髓瘤或实体瘤癌症，如前列腺癌、肺癌、乳癌、胰腺癌、结肠癌、肝癌、黑色素瘤和胶质母细胞瘤。

16.如权利要求14或15所述的方法，其中所述白血病选自：急性白血病、慢性白血病、骨髓白血病、髓性白血病、成淋巴细胞白血病、淋巴细胞白血病、急性髓性白血病(AML)、慢性髓性白血病(CML)、急性成淋巴细胞白血病(ALL)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、T细胞前淋巴细胞白血病(T-PLL)、大颗粒淋巴细胞白血病、毛细胞白血病(HCL)、MLL-重排白血病、MLL-PTD白血病、MLL增加的白血病、MLL-阳性白血病，以及展示HOX/MEIS1基因表达标记的白血病。