CN111344297B

CN111344297B - 作为抗癌剂的环二核苷酸

Info

Publication number: CN111344297B
Application number: CN201880072986.XA
Authority: CN
Inventors: B·E·芬克; D·S·多德; Y·赵; L·Y·秦; Z·鲁安; L·S·哈里克里希南; M·G·卡马乌
Original assignee: Bristol Myers Squibb Co
Current assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 2017-10-10
Filing date: 2018-10-09
Publication date: 2023-10-20
Anticipated expiration: 2038-10-09
Also published as: JP2020536897A; JP7212683B2; WO2019074887A1; KR20200061399A; US11660311B2; US20220117995A1; CN111344297A; EP3694867A1

Abstract

本发明涉及式(I)的化合物，其中所有取代基如本文所定义，以及包含本发明的化合物的药学上可接受的组合物，以及使用所述组合物治疗各种病症的方法。

Description

作为抗癌剂的环二核苷酸

相关申请的交叉引用

本申请为2018年10月9日提交的国际专利申请PCT/US2018/054944的根据35U.S.C.§371的国家阶段申请，本申请要求保护2017年10月10日提交的美国临时申请序列号62/570,386的权益，其全部公开内容通过引用并入本文。

技术领域

本发明提供了新型的化合物，包含所述化合物的药物组合物以及使用它们的方法，例如，将其用于某些癌症的治疗或预防，以及涉及其在治疗中的用途。

背景技术

免疫疗法是医学治疗领域中一个迅速发展的领域，其中患者的免疫系统被有意激活、抑制或以其它方式调节以产生积极的治疗效果。免疫治疗剂包括细胞、抗原、抗体、核酸、蛋白质、肽、天然存在的配体和合成制备的分子。细胞因子是小的糖蛋白分子，以其在通过复杂信号网络引起免疫响应中的作用而闻名。细胞因子作为免疫治疗剂已被研究，但是它们的直接给药受到许多因素的阻碍，包括它们在血液中的半衰期短，这只能通过频繁且经常地高剂量给药来补偿。一种非常有前景的方法是细胞因子诱导，其中用免疫调节剂治疗患者，所述免疫调节剂触发其体内产生一种或多种在治疗上有益的细胞因子。

产生细胞因子的一种试剂是衔接蛋白STING(干扰素基因刺激物，也称为MPYS、TMEM173、MITA和ERIS)。STING是位于内质网的细胞内受体。激动剂与STING的结合激活了信号传导途径，最终实现了I型IFN的诱导，这些I型IFN被分泌并保护了分泌细胞和附近的细胞。可通过两种不同的途径激活STING，每种途径都涉及不同类型的环二核苷酸(“CDN”)激动剂。在第一种途径中，激动剂是细菌病原体用作第二信使的外源性CDN(Burdette等人，2013)。在第二种途径中，酶环状GMP-AMP合酶(cGAS)检测胞质DNA，并作为响应合成CDN，该CDN用作内源性STING激动剂(Ablasser等人，2013；Gao等人，2013；Sun等人，2013)。

STING的激活导致IRF3和NF-κB途径的上调，从而导致干扰素-β和其它细胞因子的诱导。STING对病原体或宿主来源的胞质DNA的响应至关重要。

两种外源性细菌STING激动剂CDN是3’3’-cGAMP和c-GMP。cGAS生产的内源性STING激动剂CDN是2’3’-cGAMP。细菌CDN的特征是两个3'5'磷酸二酯桥，而cGAS生产的CDN的特征是一个2'5'和一个3'5'磷酸二酯桥。简而言之，前面的CDN称为3’3’CDN，而后者称为2’3’CDN。由于历史原因，3’3’CDN也被称为“规范”形式，而2’3’CDN被称为“非规范”形式。

除了保护生物体免于病原体感染外，据报道，STING激活还对治疗炎性疾病以及当前特别受关注的领域-癌症有益。合成CDN与癌症疫苗STINGVAX的组合在多种治疗模型中均显示出增强的抗肿瘤功效(Fu等人，2015)。据报道，仅在小鼠模型中给药STING激动剂即可显示出强大的抗肿瘤免疫功效(Corrales等人，2015a)。有关STING在感染、炎症和/或癌症中的作用的综述，请参见Ahn等人，2015；Corrales等人，2015b和2016；和Barber 2015。

因此，本发明提供新型的环二核苷酸，其可用于治疗癌症。

发明内容

本申请提供式(I)的化合物

其中

X各自独立地为O或S；

X₁、X₂、X₃和X₄各自独立地为O或NH；

R¹和R²独立地为

其前提为R¹和R²之一必须为

Z¹为N或CR^a；

Z²为NR^b；

R^a为H、卤素、被0-6个R⁵取代的C_1-6烷基、被0-6个R⁵取代的C_3-6环烷基、CN、NO₂、OH、OR^a1、SR^a1、-C(O)NR^a1R^a1、-COOR^a1、-OC(O)R^a1、-OC(O)NR^a1R^a1、-NR^a1R^a1、-NR^a1C(O)R^a1、-NR^a1COOR^a1、-NR^a1C(O)NR^a1R^a1、-NR^a1S(O)₂R^a1、-NR^a1S(O)₂NR^a1R^a1、-S(O)R^a1、-S(O)NR^a1R^a1、-S(O)₂R^a1或S(O)₂NR^a1R^a1；

R^b为H、被0-6个R⁵取代的C_1-6烷基、被0-6个R⁵取代的C_3-6环烷基、-C(O)R^a1、-C(O)NR^a1R^a1、-S(O)₂R^a1或S(O)₂NR^a1R^a1；

R^a1为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

R³和R⁴独立地为H、CH₃、卤素、NH₂或OH；

R^3a和R^4a独立地为H、CH₃、卤素、NH₂或OH；或

R³和R^3a或R⁴和R^4a可独立地一起形成3-4元碳环；或

R³和R^3a或R⁴和R^4a可独立地一起形成C＝CH₂取代基；

R⁵为H、卤素、被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基、CN、NO₂、OH、OR^a1、SR^a1、-C(O)NR^a1R^a1、-COOR^a1、-OC(O)R^a1、-OC(O)NR^a1R^a1、-NR^a1R^a1、-NR^a1C(O)R^a1、-NR^a1COOR^a1、-NR^a1C(O)NR^a1R^a1、-NR^a1S(O)₂R^a1、-NR^a1S(O)₂NR^a1R^a1、-S(O)R^a1、-S(O)NR^a1R^a1、-S(O)₂R^a1或S(O)₂NR^a1R^a1；

R^5a为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

R⁶为H、卤素、被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基、CN、NO₂、OH、OR^a1、SR^a1、-C(O)NR^a1R^a1、-COOR^a1、-OC(O)R^a1、-OC(O)NR^a1R^a1、-NR^a1R^a1、-NR^a1C(O)R^a1、-NR^a1COOR^a1、-NR^a1C(O)NR^a1R^a1、-NR^a1S(O)₂R^a1、-NR^a1S(O)₂NR^a1R^a1、-S(O)R^a1、-S(O)NR^a1R^a1、-S(O)₂R^a1或S(O)₂NR^a1R^a1；

R⁸为H、卤素、被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基、CN、NO₂、OH、OR^a1、SR^a1、-C(O)NR^a1R^a1、-COOR^a1、-OC(O)R^a1、-OC(O)NR^a1R^a1、-NR^a1R^a1、-NR^a1C(O)R^a1、-NR^a1COOR^a1、-NR^a1C(O)NR^a1R^a1、-NR^a1S(O)₂R^a1、-NR^a1S(O)₂NR^a1R^a1、-S(O)R^a1、-S(O)NR^a1R^a1、-S(O)₂R^a1或S(O)₂NR^a1R^a1；

Y为CR⁵或N；

m为0、1、2或3；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在另一个方面，提供一种药物组合物，其包含本发明的化合物或其药学上可接受的盐以及一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

在另一个方面，提供治疗癌症的方法，该方法包括向有此需要的受试者给药治疗有效量的STING的激活剂(式I)。

具体实施方式

在本发明的第1方面中，提供式(I)的化合物

其中

X各自独立地为O或S；

X₁、X₂、X₃和X₄各自独立地为O或NH；

R¹和R²独立地为

其前提为R¹和R²之一必须为

Z¹为N或CR^a；

Z²为NR^b；

R^a1为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

R³和R⁴独立地为H、CH₃、卤素、NH₂或OH；

R^3a和R^4a独立地为H、CH₃、卤素、NH₂或OH；或

R³和R^3a或R⁴和R^4a可独立地一起形成3-4元碳环；或

R³和R^3a或R⁴和R^4a可独立地一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

Y为CR⁵或N；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的第2方面中，提供式(I)的化合物

其中

X为S；

X₁、X₂、X₃和X₄各自独立地为O或NH；

R¹和R²独立地为

其前提为R¹和R²之一必须为

Z¹为N或CR^a；

Z²为NR^b；

R^a1为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

R³和R⁴独立地为H、CH₃、卤素、NH₂或OH；

R^3a和R^4a独立地为H、CH₃、卤素、NH₂或OH；或

R³和R^3a或R⁴和R^4a可独立地一起形成3-4元碳环；或

R³和R^3a或R⁴和R^4a可独立地一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

Y为CR⁵或N；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的第3方面中，提供式(I)的化合物，其中

其中

X为O；

X₁、X₂、X₃和X₄各自独立地为O或NH；

R¹和R²独立地为

其前提为R¹和R²之一必须为

Z¹为N或CR^a；

Z²为NR^b；

R^a1为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

R³和R⁴独立地为H、CH₃、卤素、NH₂或OH；

R^3a和R^4a独立地为H、CH₃、卤素、NH₂或OH；或

R³和R^3a或R⁴和R^4a可独立地一起形成3-4元碳环；或

R³和R^3a或R⁴和R^4a可独立地一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

Y为CR⁵或N；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的第4方面中，提供下式的化合物

其中

X₁、X₂、X₃和X₄各自独立地为O或NH；

R¹和R²独立地为

其前提为R¹和R²之一必须为

Z¹为N或CR^a；

Z²为NR^b；

R^a1为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

R³和R⁴独立地为H、CH₃、卤素、NH₂或OH；

R^3a和R^4a独立地为H、CH₃、卤素、NH₂或OH；或

R³和R^3a或R⁴和R^4a可独立地一起形成3-4元碳环；或

R³和R^3a或R⁴和R^4a可独立地一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

Y为CR⁵或N；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的第5方面中，提供下式的化合物

其中

X₁、X₂、X₃和X₄各自独立地为O或NH；

R¹和R²独立地为

其前提为R¹和R²之一必须为

Z¹为N或CR^a；

Z²为NR^b；

R^a1为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

R³和R⁴独立地为H、CH₃、卤素、NH₂或OH；

R^3a和R^4a独立地为H、CH₃、卤素、NH₂或OH；或

R³和R^3a或R⁴和R^4a可独立地一起形成3-4元碳环；或

R³和R^3a或R⁴和R^4a可独立地一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

Y为CR⁵或N；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的第6方面中，提供下式的化合物

其中

X各自独立地为O或S；

R¹和R²独立地为

其前提为R¹和R²之一必须为

Z¹为N或CR^a；

Z²为NR^b；

R^a1为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

R³和R⁴独立地为H、CH₃、卤素、NH₂或OH；

R^3a和R^4a独立地为H、CH₃、卤素、NH₂或OH；或

R³和R^3a或R⁴和R^4a可独立地一起形成3-4元碳环；或

R³和R^3a或R⁴和R^4a可独立地一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

Y为CR⁵或N；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的第7方面中，提供下式的化合物

其中

X为S；

R¹和R²独立地为

其前提为R¹和R²之一必须为

Z¹为N或CR^a；

Z²为NR^b；

R^a1为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

R³和R⁴独立地为H、CH₃、卤素、NH₂或OH；

R^3a和R^4a独立地为H、CH₃、卤素、NH₂或OH；或

R³和R^3a或R⁴和R^4a可独立地一起形成3-4元碳环；或

R³和R^3a或R⁴和R^4a可独立地一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

Y为CR⁵或N；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的第8方面中，提供下式的化合物

其中

X为O；

R¹和R²独立地为

其前提为R¹和R²之一必须为

Z¹为N或CR^a；

Z²为NR^b；

R^a1为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

R³和R⁴独立地为H、CH₃、卤素、NH₂或OH；

R^3a和R^4a独立地为H、CH₃、卤素、NH₂或OH；或

R³和R^3a或R⁴和R^4a可独立地一起形成3-4元碳环；或

R³和R^3a或R⁴和R^4a可独立地一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

Y为CR⁵或N；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的第9方面中，提供下式的化合物

其中

X各自独立地为O或S；

X¹、X₂、X₃和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²独立地为

其前提为R¹和R²之一必须为

Z¹为N或CR^a；

Z²为NR^b；

R^a1为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

R³和R^4a独立地为H、CH₃、卤素、NH₂或OH；

R^5a为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

Y为CR⁵或N；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的第10方面中，提供下式的化合物

其中

X为S；

X¹、X₂、X₃和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²独立地为

其前提为R¹和R²之一必须为

Z¹为N或CR^a；

Z²为NR^b；

R^a1为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

R³和R^4a独立地为H、CH₃、卤素、NH₂或OH；

R^5a为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

Y为CR⁵或N；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的第11方面中，提供下式的化合物

其中

X为O；

X¹、X₂、X₃和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²独立地为

其前提为R¹和R²之一必须为

Z¹为N或CR^a；

Z²为NR^b；

R^a1为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

R³和R^4a独立地为H、CH₃、卤素、NH₂或OH；

R^5a为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

Y为CR⁵或N；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的第12方面中，提供下式的化合物

其中

X¹、X₂、X₃和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²独立地为

其前提为R¹和R²之一必须为

Z¹为N或CR^a；

Z²为NR^b；

R^a1为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

R³和R^4a独立地为H、CH₃、卤素、NH₂或OH；

R^5a为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

Y为CR⁵或N；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的第13方面中，提供下式的化合物

其中

X¹、X₂、X₃和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²独立地为

其前提为R¹和R²之一必须为

Z¹为N或CR^a；

Z²为NR^b；

R^a1为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

R³和R^4a独立地为H、CH₃、卤素、NH₂或OH；

R^5a为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

Y为CR⁵或N；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的第14方面中，提供下式的化合物

其中

X为S；

X¹、X₂、X₃和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²独立地为

其前提为R¹和R²之一必须为

Z¹为N或CR^a；

Z²为NR^b；

R^a1为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

R^5a为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

Y为CR⁵或N；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的第15方面中，提供下式的化合物

其中

X为O；

X¹、X₂、X₃和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²独立地为

其前提为R¹和R²之一必须为

Z¹为N或CR^a；

Z²为NR^b；

R^a1为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

R^5a为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

Y为CR⁵或N；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的第16方面中，提供下式的化合物

其中

X¹、X₂、X₃和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²独立地为

其前提为R¹和R²之一必须为

Z¹为N或CR^a；

Z²为NR^b；

R^a1为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

R^5a为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

Y为CR⁵或N；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的第17方面中，提供下式的化合物

其中

X¹、X₂、X₃和X⁴各自独立地为O或NH；

R¹和R²独立地为

其前提为R¹和R²之一必须为

Z¹为N或CR^a；

Z²为NR^b；

R^a1为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

R^5a为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

Y为CR⁵或N；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的第18方面中，提供下式的化合物

其中

Z¹为N或CR^a；

R^a1为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

Y为CR⁵或N；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的第19方面中，提供下式的化合物

其中

Z¹为N或CR^a；

R^a1为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

Y为CR⁵或N；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的第20方面中，提供下式的化合物

其中

R^a1为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

Y为CR⁵或N；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的第21方面中，提供下式的化合物

其中

Z¹为N或CR^a；

R^a1为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

Y为CR⁵或N；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的第22方面中，提供下式的化合物

其中

Z¹为N或CR^a；

R^a1为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

Y为CR⁵或N；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的第23方面中，提供下式的化合物

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的第24方面中，提供下式的化合物

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的第25方面中，提供下式的化合物

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一个方面中，提供下式的化合物

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一个方面中，提供下式的化合物

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一个方面中，提供下式的化合物

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一个方面中，提供下式的化合物

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一个方面中，提供下式的化合物

其中

X各自独立地为O或S；

R¹和R²独立地为

其前提为R¹和R²之一必须为

Z¹为N或CR^a；

Z²为NR^b；

R^a1为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

R³为H、CH₃、卤素、NH₂或OH；

R^3a为H、CH₃、卤素、NH₂或OH；或

R³和R^3a可一起形成3-4元碳环；或

R³和R^3a可一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

Y为CR⁵或N；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在本发明的另一个方面中，提供下式的化合物

其中

X各自独立地为O或S；

R¹和R²独立地为

其前提为R¹和R²之一必须为

Z¹为N或CR^a；

Z²为NR^b；

R^a1为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

R⁴为H、CH₃、卤素、NH₂或OH；

R^4a为H、CH₃、卤素、NH₂或OH；或

R⁴和R^4a可一起形成3-4元碳环；或

R⁴和R^4a可一起形成C＝CH₂取代基；

R^5a为H或被0-6个R⁵取代的C_1-3烷基；

Y为CR⁵或N；

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在另一个方面中，提供选自在第1方面的范围内的示例性实施例的化合物或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

在另一个方面中，提供一种在以上任何方面的范围内的化合物的任何子集列表中选择的化合物。

在另一个方面中，提供化合物，其为

(1S,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-9-氟-18-羟基-17-{9-氧代-3H,4H,9H-咪唑并[1,2-a]嘌呤-3-基}-3,12-二硫烷基-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-3,12-二酮，

(1S,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-9-氟-3,12,18-三羟基-17-{9-氧代-3H,4H,9H-咪唑并[1,2-a]嘌呤-3-基}-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-3,12-二酮，

(1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-9,18-二氟-3,12-二羟基-17-{3H-咪唑并[2,1-f]嘌呤-3-基}-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-3,12-二酮，

1-[(1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-17-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-9,18-二氟-3,12-二氧代-3,12-二硫烷基-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0⁶ ^,10]十八烷-8-基]-1H-1,2,3-苯并三唑-4-甲酰胺，

(1S,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-9-氟-18-羟基-17-{4-氧代-1H,4H,5H-咪唑并[2,1-b]嘌呤-1-基}-3,12-二硫烷基-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-3,12-二酮，

5-[(1R,6R,8S,9S,10S,15R,17R,18R)-17-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-18-氟-9-羟基-3,12-二氧代-3,12-二硫烷基-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-8-基]-1H-吡唑-3-甲酰胺，

1-[(1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-17-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-9,18-二氟-3,12-二羟基-3,12-二氧代-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-8-基]-1H-1,2,3-苯并三唑-4-甲酰胺，

1-[(1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-17-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-9,18-二氟-3,12-二羟基-3-氧代-12-亚硫烷基-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-8-基]-1H-1,2,3-苯并三唑-4-甲酰胺，

1-[(1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-9,18-二氟-3,12-二羟基-17-{3H-咪唑并[2,1-f]嘌呤-3-基}-3,12-二氧代-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-8-基]-1H-1,2,3-苯并三唑-4-甲酰胺，

(1S,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-9-氟-12,18-二羟基-3-硫烷基-17-{3H-[1,2,4]三唑并[3,2-f]嘌呤-3-基}-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-3,12-二酮，

(1S,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-9-氟-3,12,18-三羟基-17-{3H-[1,2,4]三唑并[3,2-f]嘌呤-3-基}-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-3,12-二酮，

12(1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-9,18-二氟-3,12-二硫烷基-17-{3H-[1,2,4]三唑并[3,2-f]嘌呤-3-基}-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-3,12-二酮，

(1S,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-9-氟-12,18-二羟基-17-(4-硝基-1H-1,2,3-苯并三唑-1-基)-3-硫烷基-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-3,12-二酮，

(1S,8R,9R,10S,15R,17R,18R)-8-(2-氨基-6-氧代-6,9-二氢-1H-嘌呤-9-基)-17-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-3,9,18-三羟基-12-硫烷基-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-3,12-二酮，

(1S,6R,8R,9R,10S,15R,17R,18R)-8-(2-氨基-6-氧代-6,9-二氢-1H-嘌呤-9-基)-3,9,18-三羟基-17-{3H-咪唑并[2,1-f]嘌呤-3-基}-12-硫烷基-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-3,12-二酮，

(1S,6R,8R,9R,10S,15R,17R,18R)-3,9,18-三羟基-17-{3H-咪唑并[2,1-f]嘌呤-3-基}-8-{9-氧代-3H,4aH,5H,9H,9aH-咪唑并[1,2-a]嘌呤-3-基}-12-硫烷基-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-3,12-二酮，

(1S,6R,8R,9R,10S,15R,17R,18R)-3,9,12,18-四羟基-8-{3H-咪唑并[2,1-f]嘌呤-3-基}-17-(6-氧代-6,9-二氢-1H-嘌呤-9-基)-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-3,12-二酮，

(1S,6R,8R,9R,10S,15R,17R,18R)-3,9,12,18-四羟基-8,17-双({3H-咪唑并[2,1-f]嘌呤-3-基})-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-3,12-二酮，

(1R,6R,8R,9R,10S,15R,17R,18R)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-18-氟-3,9,12-三羟基-17-{3H-咪唑并[2,1-f]嘌呤-3-基}-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-3,12-二酮，或

(1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-9,18-二氟-17-{3H-咪唑并[2,1-f]嘌呤-3-基}-3,12-二硫烷基-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-3,12-二酮，

或其药学上可接受的盐。

在另一个方面中，提供化合物，其为

或其药学上可接受的盐。

在另一个方面中，提供化合物，其为

(1S,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-9-氟-18-羟基-17-{4-氧代-1H,4H,5H-咪唑并[2,1-b]嘌呤-1-基}-3,12-二硫烷基-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-3,12-二酮，或

或其药学上可接受的盐。

本发明的其它实施方案

在其它实施方案中，本发明提供一种药物组合物，其包含药学上可接受的载体和治疗有效量的本发明的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或溶剂合物中的至少一种。

在其它实施方案中，本发明提供用于制备本发明的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或溶剂合物的方法。

在其它实施方案中，本发明提供用于治疗和/或预防各种类型癌症的方法，包括向需要这种治疗和/或预防的患者单独给药治疗有效量的一种或多种本发明的化合物，或任选与本发明的另一种化合物和/或至少一种其它类型治疗剂组合给药。

在其它实施方案中，本发明提供用于治疗和/或预防各种类型癌症的方法，包括小细胞肺癌、非小细胞肺癌、结直肠癌、黑素瘤、肾细胞癌、头颈癌、霍奇金淋巴瘤、膀胱癌、食道癌、胃癌、卵巢癌、宫颈癌、胰腺癌、前列腺癌、乳腺癌、泌尿道癌，脑瘤例如成胶质细胞瘤，非霍奇金淋巴瘤、急性淋巴性白血病(ALL)、慢性淋巴性白血病(CLL)、急性骨髓性白血病(AML)、慢性骨髓性白血病(CML)、肝细胞癌、多发性骨髓瘤、胃肠道间质瘤、间皮瘤和其它实体瘤或其它血液学癌症。

在其它实施方案中，本发明提供用于治疗和/或预防各种类型癌症的方法，包括但不限于，小细胞肺癌、非小细胞肺癌、结直肠癌、黑素瘤、肾细胞癌、头颈癌、霍奇金淋巴瘤或膀胱癌。

在其它实施方案中，本发明提供用于治疗用途的本发明的化合物。

在其它实施方案中，本发明提供用于在治疗中同时、分开或依次使用的本发明的化合物以及其它治疗剂的组合制剂。

治疗应用

本发明的环二核苷酸在人细胞、动物细胞和人血液中体外诱导I型干扰素和/或促炎性细胞因子。这些CDN的细胞因子诱导活性需要STING的存在，正如在人或动物细胞中进行的体外实验所证实的那样。

本发明的CDN为受体STING的激动剂。

术语“激动剂”是指在体外或体内激活生物受体以引起生理反应的任何物质。

“STING”是“干扰素基因刺激物(stimulator of interferon genes)”的缩写，也称为“内质网干扰素刺激物(endoplasmic reticulum interferon stimulator，ERIS)”、“IRF3激活介体(mediator of IRF3 activation，MITA)”、“MPYS”或“跨膜蛋白173(transmembrane protein 173，TM173)”。STING是人类中的跨膜受体蛋白，由TMEM173基因编码。环二核苷酸(CDN)对STING的激活会导致IRF3和NF-κB途径的激活，因此分别导致I型干扰素和促炎性细胞因子的诱导。

本发明的另一个目的是用于人或动物的治疗的式(I)的环二核苷酸。特别地，本发明的化合物可用于人类或动物健康的治疗或诊断应用。

术语“治疗剂”是指一种或多种给药于人或动物以在该人或动物中获得某种治疗效果的物质，包括预防、治愈或减轻感染或疾病的影响，和/或改善该人或动物的健康状况。

术语“单一疗法”是指在任何临床或医学背景下使用单一物质和/或策略来治疗人或动物，与在相同的临床或医学背景下使用多种物质和/或策略来治疗人或动物相反(无论是否以任何顺序或同时使用多种物质和/或策略)。

本文中的术语“化疗剂”是指一种或多种化学物质，其被施用于人或动物以杀死肿瘤，或减慢或阻止肿瘤的生长，和/或减慢或阻止癌细胞的分裂，和/或预防或缓慢转移。通常给药化疗剂来治疗癌症，但也适用于其它疾病。

术语“化疗法”是指用一种或多种化疗剂对人或动物进行医学治疗(参见以上定义)。

术语“化学免疫疗法”是指化疗物质和/或策略以及免疫疗法物质和/或策略的组合使用，无论以任何顺序依次或并行进行。化学免疫疗法通常用于治疗癌症，但也可以用于治疗其它疾病。

术语“免疫系统”是指与预防体内感染、在感染或疾病期间保护身体、和/或在感染或疾病后帮助身体恢复健康有关的分子、物质(例如体液)、解剖结构(例如细胞，组织和器官)和生理过程的整体或任何一个或多个成分。“免疫系统”的完整定义超出了本专利的范围；但是，本领域的任何普通从业人员都应理解该术语。

术语“免疫剂”是指可与免疫系统的任何一个或多个成分相互作用的任何内源性或外源性物质。术语“免疫剂”包括抗体、抗原、疫苗及其组成成分、核酸、合成药物、天然或合成有机化合物、细胞因子、天然或修饰的细胞、其合成类似物和/或其片段。

术语“拮抗剂”是指在体外或体内抑制、抵消、下调和/或脱敏生物受体以引起生理反应的任何物质。

术语“免疫疗法”是指其中人或动物的免疫系统的一个或多个成分被故意调节以便直接或间接获得某种治疗益处的任何医学治疗，包括全身和/或局部作用以及预防性和/或治疗性作用。免疫疗法可涉及通过任何途径(例如口服、静脉内、皮肤、注射、吸入等)单独或以任何组合方式对人或动物受试者给药一种或多种免疫剂(参见上文定义)，无论是全身、局部或两者结合。

“免疫疗法”可涉及激发、增加、减少、停止、预防、阻断或以其它方式调节细胞因子的产生，和/或活化或失活细胞因子或免疫细胞，和/或调节免疫细胞的水平，和/或递送一种或多种治疗性或诊断性物质到达体内的特定位置或特定类型的细胞或组织，和/或破坏特定的细胞或组织。免疫疗法可用于达到局部作用、全身作用或两者结合。

术语“免疫抑制的”描述了其免疫系统功能性地降低、失活或否则受损的任何人或动物受试者的状态，或其中一种或多种免疫成分功能性地降低、失活或否则受损。

“免疫抑制”可为疾病、感染、力竭、营养不良、药物治疗或某些其它生理或临床状态的原因、结果或副产物。

此处同义使用的术语“免疫调节物质”、“免疫调节性物质”“免疫调节药剂”和“免疫调节剂”是指在给药人或动物后直接影响该人或动物免疫系统功能的任何物质。常见免疫调节剂的实例包括但不限于抗原、抗体和小分子药物。

术语“疫苗”是指给药人或动物的生物制剂，以引起或增强特异性免疫系统响应和/或针对该人或动物中的一种或多种抗原的保护。

术语“疫苗接种”是指用疫苗对人或动物的治疗或向人或动物给药疫苗的行为。

术语“佐剂”是指与主要治疗物质一起(以任何顺序依次或并行)一起给药的次要治疗物质，以实现某种互补的、协同的或其它有益效果，该效果是单独使用主要治疗物质无法达到的。佐剂可与疫苗、化学疗法或某些其它治疗物质一起使用。佐剂可增强主要治疗物质的功效、降低主要治疗物质的毒性或副作用，或为接受主要治疗物质的受试者提供某种保护，例如但不限于改善免疫系统的功能。

在一个实施方案中，式(I)的环二核苷酸可作为免疫疗法给药人或动物，以诱导体内产生对该人或动物治疗上有益的一种或多种细胞因子。这种类型的免疫疗法可单独使用，也可与其它治疗策略结合使用，无论以任何顺序依次使用或并行使用。它可用于预防、治愈和/或减轻该人或动物的感染或疾病的影响，和/或调节该人或动物的免疫系统以实现某些其它治疗益处。

在一个特定的实施方案中，本发明的环二核苷酸可用于免疫抑制的个体的细胞因子诱导免疫疗法。

在该实施例中，将式(I)的环二核苷酸给药免疫抑制的人或动物受试者，以诱导体内产生直接或间接增强该人或动物的免疫系统的一种或多种细胞因子。可能从这种治疗中受益的受试者包括患有自身免疫性疾病、免疫系统缺乏或缺陷、微生物或病毒感染、传染病或癌症的受试者。

因此，本发明公开了一种在免疫抑制的个体中诱导细胞因子的方法，所述方法包括向有此需要的患者给药式(I)的环二核苷酸或其药学上可接受的盐或前药。

在其它实施方案中，本发明的环二核苷酸可与化学疗法联合用于细胞因子诱导免疫疗法。在该实施例中，将式(I)的环二核苷酸与一种或多种化疗剂一起以任何顺序依次或同时给药癌症患者以阻止该患者中肿瘤的生长、缩小和/或破坏肿瘤。相比于用作单一疗法的化疗剂，由本发明化合物提供的细胞因子诱导与化疗剂提供的细胞毒性相结合而产生的化学免疫疗法对患者的毒性可较小，对患者的副作用较少，和/或显示出更好的抗肿瘤功效。

因此，本发明公开一种治疗癌症的方法，所述方法包括向有此需要的患者给药：化疗剂；和

式(I)的环二核苷酸或其药学上可接受的盐或前药。

本发明的另一个目的是用于治疗细菌感染、病毒感染或癌症的式(I)的环二核苷酸。

如本文所用，“癌症”是指受试者中以细胞生长或死亡的不受控或失调为特征的生理状况。术语“癌症”包括实体瘤和血源性肿瘤，无论是恶性还是良性的。

在一个优选的实施方案中，所述癌症选自：小细胞肺癌、非小细胞肺癌、结肠直肠癌、黑素瘤、肾细胞癌、头颈癌、霍奇金淋巴瘤或膀胱癌。

因此，本发明公开了一种用于治疗细菌感染、病毒感染或癌症的方法，所述方法包括向有此需要的患者给药式(I)的环二核苷酸或其药学上可接受的盐或前药。

本发明的另一个目的是用于治疗可通过经由STING途径诱导免疫响应而减轻的病理的式(I)的环二核苷酸。

虽然在治疗时，式(I)的化合物及其药学上可接受的盐可以化合物本身的形式给药，但更通常以药物组合物的形式提供。

药物组合物可以以包含预定量的活性成分pep单位剂量的单位剂量形式存在。优选的单位剂量组合物为包含日剂量或亚剂量或其适当分数的活性成分的那些。因此，这样的单位剂量可每天多次给药。优选的单位剂量组合物是包含如上文所述的日剂量或亚剂量(用于一天多次给药)或其适当分数的活性成分的那些。

可用本发明化合物治疗的癌症的类型包括但不限于脑癌、皮肤癌、膀胱癌、卵巢癌、乳腺癌、胃癌、胰腺癌、前列腺癌、结肠癌、血癌、肺癌和骨癌。上述癌症类型的实例包括成神经细胞瘤、肠癌诸如直肠癌、结肠癌、家族性腺瘤性息肉性癌和遗传性非息肉性结直肠癌，食管癌、唇癌、喉癌、鼻咽癌、口腔癌、唾液腺癌、腹膜癌、软组织肉瘤、尿路上皮癌、汗腺癌、胃癌、腺癌、甲状腺髓样癌、乳头状甲状腺癌、肾癌、肾实质癌、卵巢癌、宫颈癌、子宫体癌、子宫内膜癌、胰腺癌、前列腺癌、睾丸癌、乳腺癌(包括HER2阴性乳腺癌)、泌尿癌、黑素瘤、脑肿瘤诸如成胶质细胞瘤、星形细胞瘤、脑膜瘤、成神经管细胞瘤和外周神经外胚层肿瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、急性淋巴性白血病(ALL)、慢性淋巴性白血病(CLL)、急性骨髓性白血病(AML)、慢性骨髓性白血病(CML)、成人T细胞白血病淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、肝细胞瘤、多发性骨髓瘤、精原细胞瘤、骨肉瘤、软骨肉瘤、肛管癌、肾上腺皮质癌、脊索瘤、输卵管癌、胃肠道间质瘤、骨髓增生性疾病、间皮瘤、胆道癌、尤因肉瘤以及其它罕见的肿瘤类型。

本发明的化合物通过自身或与其它治疗剂或放射疗法联合使用可用于治疗某些类型的癌症。因此，在一个实施方案中，本发明的化合物与放射疗法或具有细胞生长抑制或抗肿瘤活性的第二治疗剂共同给药。适合的细胞抑制化学疗法化合物包括但不限于(i)抗代谢物；(ii)DNA-片段化剂，(iii)DNA-交联剂，(iv)嵌入剂，(v)蛋白质合成抑制剂，(vi)拓扑异构酶I毒剂，例如喜树碱或拓扑替康；(vii)拓扑异构酶II毒剂；(viii)微管导向剂；(ix)激酶抑制剂；(x)杂项研究药剂，(xi)激素和(xii)激素拮抗剂。可想到的是，本发明的化合物可与落入上述12类的任何已知药剂以及目前正在开发的任何未来药剂结合使用。特别地，可预期，本发明的化合物可与当前的护理标准以及在可预见的将来发展的任何护理标准结合使用。具体剂量和给药方案将基于医师不断发展的知识和本领域的一般技能。

本文还提供了治疗方法，其中将本发明的化合物与一种或多种免疫肿瘤药剂一起给药。本文使用的免疫肿瘤药剂，也称为癌症免疫疗法，可有效增强、刺激和/或上调受试者的免疫响应。在一个方面，与免疫肿瘤药剂一起给药本发明的化合物具有抑制肿瘤生长的协同作用。

在一个方面，本发明的化合物在给药所述免疫肿瘤药剂之前依次给药。在另一个方面，本发明的化合物与给药所述免疫肿瘤药剂并行地给药。在另一个方面，本发明的化合物在给药所述免疫肿瘤药剂之后依次给药。

在另一个方面，本发明的化合物可与免疫肿瘤药剂共同配制。

免疫肿瘤药剂包括例如小分子药物\抗体或其它生物分子。生物免疫肿瘤药剂的实例包括但不限于癌症疫苗、抗体和细胞因子。在一个方面，该抗体是单克隆抗体。在另一个方面，该单克隆抗体是人源化抗体或人抗体。

在一个方面，所述免疫肿瘤药剂为(i)刺激性(包括共刺激性)受体的激动剂，或(ii)T细胞上的抑制性(包括共抑制性)信号的拮抗剂，两者都会导致抗原特异性T细胞的增强响应(通常称为免疫检查点调节剂)。

某些刺激性和抑制性分子是免疫球蛋白超家族(IgSF)的成员。与共刺激或共抑制受体结合的重要的膜结合配体的一个重要家族为B7家族，其包括B7-1、B7-2、B7-H1(PD-L1)、B7-DC(PD-L2)、B7-H2(ICOS-L)、B7-H3、B7-H4、B7-H5(VISTA)和B7-H6。与共刺激或共抑制受体结合的膜结合配体的另一个家族是与同源TNF受体家族成员结合的分子的TNF家族，其包括CD40和CD40L、OX-40、OX-40L、CD70、CD27L、CD30、CD30L、4-1BBL、CD137(4-1BB)、TRAIL/Apo2-L、TRAILR1/DR4、TRAILR2/DR5、TRAILR3、TRAILR4、OPG、RANK、RANKL、TWEAKR/Fn14、TWEAK、BAFFR、EDAR、XEDAR、TACI、APRIL、BCMA、LTβR、LIGHT、DcR3、HVEM、VEGI/TL1A、TRAMP/DR3、EDAR、EDA1、XEDAR、EDA2、TNFR1、淋巴毒素α/TNFβ、TNFR2、TNFα、LTβR、淋巴毒素α1β2、FAS、FASL、RELT、DR6、TROY、NGFR。

在一个方面，T细胞响应可被本发明的化合物与一种或多种以下的组合刺激：(i)抑制T细胞活化的蛋白质的拮抗剂(例如，免疫检查点抑制剂)，例如CTLA-4、PD-1、PD-L1、PD-L2、LAG-3、TIM-3、半乳凝素9、CEACAM-1、BTLA、CD69、半乳凝素-1、TIGIT、CD113、GPR56、VISTA、2B4、CD48、GARP、PD1H、LAIR1、TIM-1和TIM-4，以及(ii)刺激T细胞活化的蛋白质的激动剂，例如B7-1、B7-2、CD28、4-1BB(CD137)、4-1BBL、ICOS、ICOS-L、OX40、OX40L、GITR、GITRL、CD70、CD27、CD40、DR3和CD28H。

用于治疗癌症的可与本发明的化合物组合的其它药剂包括NK细胞抑制受体的拮抗剂或NK细胞激活受体的激动剂。例如，本发明的化合物可与KIR的拮抗剂组合，例如lirilumab。

组合疗法的其它试剂包括抑制或消耗巨噬细胞或单核细胞的试剂，包括但不限于CSF-1R拮抗剂，例如CSF-1R拮抗剂抗体，包括RG7155(WO11/70024、WO11/107553、WO11/131407、WO13/87699、WO13/119716、WO13/132044)或FPA-008(WO11/140249；WO13169264；WO14/036357)。

另一个方面，本发明的化合物可与一种或多种以下药剂一起使用：结扎阳性共刺激受体的激动剂、通过抑制性受体减弱信号的阻断剂，拮抗剂以及一种或多种全身性增加抗肿瘤T细胞频率的药剂、克服肿瘤微环境中不同的免疫抑制途径(例如，阻断抑制性受体参与(例如，PD-L1/PD-1相互作用)、消耗或抑制Treg(例如，使用抗CD25单克隆抗体(例如，达克珠单抗)或通过体外抗CD25珠粒耗尽)、抑制代谢酶(例如IDO)或逆转/预防T细胞无能或耗竭)的药剂和触发先天性免疫激活和/或肿瘤部位炎症的药剂。

在一个方面，所述免疫肿瘤药剂为CTLA-4拮抗剂，例如拮抗性CTLA-4抗体。适合的CTLA-4抗体包括，例如，YERVOY(伊匹单抗)或曲美单抗。

在另一个方面，所述免疫肿瘤药剂为程序性死亡-1(PD-1)拮抗剂，例如拮抗性PD-1抗体。所述PD-1抗体可选自Opdivo(纳武单抗)、Keytruda(帕博利珠单抗)、PDR001(Novartis；参见WO2015/112900)、MEDI-0680(AMP-514)(AstraZeneca；参见WO2012/145493)、REGN-2810(Sanofi/Regeneron；参见WO2015/112800)、JS001(Taizhou Junshi)、BGB-A317(Beigene；参见WO2015/35606)、INCSHR1210(SHR-1210)(Incyte/JiangsuHengrui Medicine；参见WO2015/085847)、TSR-042(ANB001)(Tesara/AnaptysBio；参见WO2014/179664)、GLS-010(Wuxi/Harbin Gloria Pharmaceuticals)、AM-0001(Armo/Ligand)或STI-1110(Sorrento；参见WO2014/194302)。所述免疫肿瘤药剂还可包括皮地利珠单抗(CT-011)，尽管其对PD-1结合的特异性受到质疑。靶向PD-1受体的另一种方法是重组蛋白，该蛋白由与IgG1的Fc部分融合的PD-L2的胞外域(B7-DC)构成，称为AMP-224。在一个方面。

在另一个方面，所述免疫肿瘤药剂为PD-L1拮抗剂，例如拮抗性PD-L1抗体。所述PD-L1抗体选自Tecentriq(阿特珠单抗)、德瓦鲁单抗、奥伐单抗、STI-1014(Sorrento；参见WO2013/181634)或CX-072(CytomX；参见WO2016/149201)。

在另一个方面，所述免疫肿瘤药剂为LAG-3拮抗剂，例如拮抗性LAG-3抗体。适合的LAG3抗体包括，例如，BMS-986016(WO10/19570、WO14/08218)或IMP-731或IMP-321(WO08/132601、WO09/44273)。

在另一个方面，所述免疫肿瘤药剂为CD137(4-1BB)激动剂，例如激动性CD137抗体。适合的CD137抗体包括，例如，urelumab和PF-05082566(WO12/32433)。

在另一个方面，所述免疫肿瘤药剂为GITR激动剂，例如激动性GITR抗体。适合的GITR抗体包括，例如，BMS-986153、BMS-986156、TRX-518(WO06/105021、WO09/009116)和MK-4166(WO11/028683)。

在另一个方面，所述免疫肿瘤药剂为IDO拮抗剂。适合的IDO拮抗剂包括，例如，INCB-024360(WO2006/122150、WO07/75598、WO08/36653、WO08/36642)、indoximod或NLG-919(WO09/73620、WO09/1156652、WO11/56652、WO12/142237)。

在另一个方面，所述免疫肿瘤药剂为OX40激动剂，例如激动性OX40抗体。适合的OX40抗体包括，例如，MEDI-6383或MEDI-6469。

在另一个方面，所述免疫肿瘤药剂为OX40L拮抗剂，例如拮抗性OX40抗体。适合的OX40L拮抗剂包括，例如，RG-7888(WO06/029879)。

CD40激动剂，例如激动性CD40抗体。在另一个实施方案中，所述免疫肿瘤药剂为CD40拮抗剂，例如拮抗性CD40抗体。适合的CD40抗体包括，例如，鲁卡木单抗或达西珠单抗。

在另一个方面，所述免疫肿瘤药剂为CD27激动剂，例如激动性CD27抗体。适合的CD27抗体包括，例如，Varlilumab。

在另一个方面，所述免疫肿瘤药剂为MGA271(至B7H3)(WO 11/109400)。

组合治疗意在包括以依序的方式给予这些治疗剂，即其中每种治疗剂在不同的时间给药，及以基本上同时的方式给予这些治疗剂或至少两种所述治疗剂。例如通过向受试者给予具有固定比率的每种治疗剂或呈每种治疗剂的多个单一剂型形式可实现基本上同时给药。每种治疗剂的依序或基本上同时给药可通过任何适当途径来实现，其包括但不限于口服途径、静脉内途径、瘤内途径、肌内途径和通过粘膜组织直接吸收。所述治疗剂可通过相同途径或通过不同途径给药。例如，所选组合的第一治疗剂可通过静脉注射给药而所述组合的其它治疗剂可口服给药。可选择地，例如所有治疗剂可口服给药或所有治疗剂可通过静脉内注射给药。组合疗法也可包括与其它生物活性成分和非药物疗法(例如手术或放射治疗)进一步组合给予上述治疗剂。当组合治疗进一步包括非药物治疗时，非药物治疗可在任何适合的时间进行，只要实现来自治疗剂与非药物治疗的组合的共同作用的有益效果。例如，在适当的情况下，当从治疗剂的给药暂时除去非药物治疗时，可能是数天或甚至数周，仍实现有益效果。

本发明可以以其它特定形式体现而不背离其精神或基本属性。本发明涵盖本文所述的本发明的优选方面的所有组合。应当理解，本发明的任何以及所有实施方案可与任何其它实施方案或实施方案结合以描述另外的实施方案。还应理解，实施方案的每个单独的元素是其自己的独立实施方案。此外，实施方案的任何元素意在与来自任何实施方案的任何以及所有其它元素组合以描述另外的实施方案。

药物组合物和剂量

本发明还提供药学上可接收的组合物，其包含治疗有效量的与一种或多种药学上可接受的载体(添加剂)和/或稀释剂一起配制的一种或多种本文所述的固体形式，和任选的一种或多种上述的其它治疗剂。如下所述，本发明的药物组合物可以经特殊配制以固体或液体形式给药，包括适合于以下的那些：(1)口服给药，例如，灌药(水溶液或非水溶液或悬浮液)、片剂，例如针对颊、舌下和全身吸收的片剂，大丸剂、散剂、颗粒剂、糊剂，其用于舌头；(2)肠胃外给药，例如通过皮下、肌内、瘤内、静脉内或硬膜外注射，例如无菌溶液或悬浮液，或缓释制剂；(3)局部给药，例如以霜剂、软膏或控释贴剂或喷雾剂的形式施用于皮肤上；或瘤内给药。

短语“药学上可接受的”在本文中用于指如下那些化合物、物质、组合物和/或剂型：在合理医学判断的范围内，其适于与人类和动物的组织接触使用而无过高毒性、刺激性、过敏反应和/或其它问题或并发症，并与合理的益处/风险比相称。

本文使用的短语“药学上可接受的载体”意指药学上可接受的物质、组合物或媒介物，诸如液体或固体填充剂、稀释剂、赋形剂、制造助剂(例如润滑剂、滑石、硬脂酸镁、硬脂酸钙或硬脂酸锌或硬脂酸)或溶剂包囊物质，其涉及将主题化合物从一个器官或身体的部分携带或运送至另一个器官或身体的部分。每种载体在与制剂的其它成分相容和对患者无害的意义上必须是“可接受的”。

本发明的制剂包括适合于口服、肿瘤内、鼻腔、局部(包括颊和舌下)、直肠、阴道和/或肠胃外给药的那些。所述制剂可方便地以单位剂型存在，并且可通过药学领域公知的任何方法制备。可与载体材料组合以产生单一剂型的活性成分的量将根据所治疗的患者和特定的给药方式而变化。可与载体材料组合以产生单一剂型的活性成分的量通常将是产生治疗作用的化合物的量。通常，在百分之一百中，该量将为活性成分的约0.1％至约99％，优选为约5％至约70％，最优选为约10％至约30％。

在某些实施方案中，本发明的制剂包含选自环糊精、纤维素、脂质体、胶束形成剂(例如胆汁酸)和聚合物载体(例如聚酯和聚酸酐)的赋形剂；以及本发明的化合物。在某些实施方案中，上述制剂使本发明化合物具有口服生物利用度。

制备这些制剂或组合物的方法包括使本发明化合物与载体和任选的一种或多种辅助成分结合的步骤。通常，通过使本发明的化合物与液体载体、或细分的固体载体或两者均匀且紧密地结合，然后若需要，则使产品成型来制备所述制剂。

适用于口服的本发明制剂可为胶囊剂、扁囊剂、丸剂、片剂、锭剂(使用调味剂，通常是蔗糖和阿拉伯胶或西黄蓍胶)、粉剂、颗粒剂，或作为在水性或非水性液体中的溶液或悬浮液，或作为水包油或油包水液体乳剂，或作为酏剂或糖浆剂，或作为糖锭剂(使用惰性基质，例如明胶和甘油，蔗糖和阿拉伯胶)和/或作为漱口水等，其各自均含有预定量的本发明化合物作为有效成分。本发明的化合物也可以大丸剂、煎膏剂或糊剂的形式给药。

适用于肠胃外给药的本发明药物组合物包含一种或多种本发明化合物与一种或多种药学上可接受的无菌等渗水溶液或非水溶液、分散液、混悬液或乳剂或无菌粉末，它们可在使用前即被重构为无菌注射溶液或分散液，可含有糖、醇、抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂、会使制剂与预期接受者的血液等渗的溶质或悬浮剂或增稠剂。

在某些情况下，为了延长药物的作用，需要减慢皮下、瘤内或肌内注射药物的吸收。这可通过使用水溶性差的结晶或无定形材料的液体悬浮液来实现。然后，药物的吸收速率取决于其溶解速率，而溶解速率又取决于晶体尺寸和晶型。或者，通过将药物溶解或悬浮在油媒剂中来实现肠胃外给药的药物形式的延迟吸收。

通过在可生物降解的聚合物(例如聚乳酸-聚乙交酯)中形成主题化合物的微囊化基质来制备可注射的贮库形式。取决于药物与聚合物的比例以及所用特定聚合物的性质，可控制药物的释放速率。其它可生物降解的聚合物的实例包括聚(原酸酯)和聚(酸酐)。还可通过将药物截留在与身体组织相容的脂质体或微乳状液中来制备贮库形式的可注射制剂。

当将本发明的化合物作为药物向人和动物给药时，可给药其本身或作为药物组合物给药，该组合物含有例如0.1-99％(更优选10-30％)的活性成分与药学上可接受的载体。

不考虑所选择的给药路径，通过本领域技术人员已知的常规方法来将本发明的化合物(其可为适当的水合形式)和/或本发明的药物组合物配制成药用剂量形式。

可改变活性成分在本发明的药物组合物中的实际剂量水平，从而获得对于实现特定患者的期望的治疗响应、组成和给药模式有效的而对患者无毒的活性成分量。

选定的剂量水平会取决于多种因素，包括所用的特定的本发明的化合物或其酯、盐或酰胺的活性；给药路径；给药时间；所用特定化合物的排泄速率；吸收速率和程度；治疗的持续时间；与所用特定化合物组合使用的其它药物、化合物和/或物质；所治疗的患者的年龄、性别、重量、状况、一般健康和先前的就医史等医学领域公知的因素。

具有本领域普通技术的医生或兽医可容易地确定并开出有效量的所需药物组合物。例如，为了达到所期望的治疗效果，医师或兽医可在低于所需的水平开始药物组合物中所用的本发明化合物的较量，并逐步增加剂量直至实现所期望的效果。

通常，适合的日剂量的本发明的化合物将是有效产生治疗效果的最低剂量的化合物的量。此种有效剂量通常取决于上述因素。通常，本发明化合物对患者的口服、静脉内、脑室内和皮下剂量范围为每天每千克体重约0.01至约50mg。

虽然本发明的化合物可单独给药，但优选以药物制剂(组合物)形式给药化合物。

定义

除非本文另有明确说明，否则单数形式的引用也可包括复数形式。例如，“一个”和“一种”可以指一个(种)，或一个(种)或多个(种)。

除非另有说明，否则假定具有不满足化合价的任何杂原子具有足以满足化合价的氢原子。

在整个说明书和所附的权利要求书中，给定的化学式或名称应涵盖存在的所有立体和光学异构体及其中此类异构体存在的外消旋体。除非另有说明，否则所有手性(对映异构体和非对映异构体)和外消旋形式均在本发明的范围内。化合物中还可存在C＝C双键、C＝N双键、环体系等的许多几何异构体，并且在本发明中考虑了所有这些稳定的异构体。描述了本发明化合物的顺式和反式(或E-和Z-)几何异构体，并且可作为异构体的混合物或作为分离的异构体形式分离。本发明化合物可以旋光或外消旋形式分离。旋光形式可通过拆分外消旋形式或由旋光原料合成而制备。用于制备本发明的化合物及其制备的中间体的所有方法均被视为本发明的一部分。当制备对映异构体或非对映异构体产物时，它们可以通过常规方法分离，例如通过色谱法或分步结晶法分离。根据工艺条件，本发明的最终产物可以以游离(中性)或盐的形式获得。这些最终产物的游离形式和盐均在本发明的范围内。若需要，则可以将一种形式的化合物转化为另一种形式。游离碱或酸可转化为盐；盐可以转化为游离化合物或另一种盐；本发明异构化合物的混合物可以分离为单个异构体。本发明的化合物、其游离形式及其盐可以多种互变异构形式存在，其中氢原子被转位到分子的其它部分，因此分子的原子之间的化学键被重新排列。应当理解的是，所有互变异构形式，只要它们可能存在，都包括在本发明之内。

为了清楚起见并根据本领域的标准惯例，在式和表中使用符号来显示键，该键是部分或取代基与所述结构的核心/核的连接点。

另外，为清楚起见，当取代基的破折号(-)不在两个字母或符号之间时；这用于表示取代基的连接点。例如，-CONH₂通过碳原子连接。

另外，为清楚起见，当在实线末端未显示取代基时，这表示存在与该键连接的甲基(CH₃)基团。

另外，硫代磷酸酯基团可被绘制为

术语“抗衡离子”用于表示带负电荷的物质，例如氯化物、溴化物、氢氧化物、乙酸盐和硫酸盐；或带正电荷的物质，例如钠(Na+)、钾(K+)、铵((R_nNH_m+，其中n＝0-4且m＝0-4)等。

术语“吸电子基团”(EWG)是指使键极化的取代基，其使电子密度朝向自身而远离其它键合原子。EWG的实例包括但不限于，CF₃、CF₂CF₃、CN、卤素、卤代烷基、NO₂、砜、亚砜、酯、磺酰胺、甲酰胺、烷氧基、烷氧基醚、烯基、炔基、OH、C(O)烷基、CO₂H、苯基、杂芳基、-O-苯基和-O-杂芳基。EWG的优选实例包括但不限于，CF₃、CF₂CF₃、CN、卤素、SO₂(C_1-4烷基)、CONH(C_1-4烷基)、CON(C_1-4烷基)₂和杂芳基。EWG更优选的实例包括但不限于，CF₃和CN。

如本文所用，术语“胺保护基”意指有机合成领域中用于保护胺基的任何基团，其对酯还原剂、双取代肼、R4-M和R7-M、亲核试剂、肼还原剂、活化剂、强碱、有位阻的胺碱和环化剂。符合这些标准的此类胺保护基包括那些在Wuts,P.G.M.和Greene,T.W。保护基团s inOrganic Synthesis,4th Edition,Wiley(2007)和The Peptides:Analysis,Synthesis,Biology,Vol.3,Academic Press,New York(1981)中列举的，其公开内如通过引用并入本文。胺保护基的实例包括但不限于以下：(1)酰基类，例如甲酰基、三氟乙酰基、邻苯二甲酰基和对甲苯磺酰基；(2)芳族氨基甲酸酯类，例如苄基氧基羰基(Cbz)和经取代的苄基氧基羰基、1-(对-联苯基)-1-甲基乙氧基羰基和9-芴基甲基氧基羰基(Fmoc)；(3)脂族氨基甲酸酯类，例如叔丁基氧基羰基(Boc)、乙氧基羰基、二异丙基甲氧基羰基和烯丙基氧基羰基；(4)环烷基氨基甲酸酯类，例如环戊基氧基羰基和金刚烷基氧基羰基；(5)烷基类，例如三苯基甲基和苄基；(6)三烷基硅烷，例如三甲基硅烷；(7)含硫醇类，例如苯基硫基羰基和二硫代琥珀酰基；和(8)烷基类，例如三苯基甲基、甲基和苄基；和经取代的烷基类，例如2,2,2-三氯乙基、2-苯基乙基和叔丁基；和三烷基硅烷类，例如三甲基硅烷。

如本文所指，术语“取代的”是指至少一个氢原子被非氢基团取代，只要保持正常价并且该取代产生稳定的化合物即可。如本文所用，环双键是在两个相邻的环原子之间形成的双键(例如，C＝C、C＝N或N＝N)。

在本发明化合物上有氮原子(例如胺)的情况下，可通过用氧化剂(例如mCPBA和/或过氧化氢)处理将它们转化为N-氧化物，从而得到本发明的其它化合物。因此，所示和要求保护的氮原子被认为涵盖所示氮及其N-氧化物(N→O)衍生物。

当某个变量在化合物的任何成分或式中出现1次以上时，其在每次出现时的定义均独立于在其它每次出现时的定义。因此，例如，若显示一个基团被0-3个R取代，那么所述基团可任选地被最多三个R基团取代，并且在每次出现时，R是独立于R的定义选择的。仅当此类组合产生稳定的化合物时，才允许组合取代基和/或变量。

当显示出与取代基的键跨过连接环中两个原子的键时，则该取代基可与环上的任何原子键合。当列出的取代基未指明该取代基与给定式的化合物的其余部分键合的原子时，则该取代基可通过该取代基中的任何原子键合。仅当取代基和/或变量的组合产生稳定的化合物时，才允许这些组合。

本发明旨在包括存在于本发明化合物中的原子的所有同位素。同位素包括原子序数相同但质量数不同的那些原子。作为一般示例而非限制，氢的同位素包括氘和氚。氢的同位素可表示为¹H(氢)、²H(氘)和³H(氚)。它们通常也表示为D表示氘，T代表氚。在本申请中，CD₃表示其中所有氢原子都是氘的甲基。碳的同位素包括¹³C和¹⁴C。本发明的同位素标记的化合物通常可以通过本领域技术人员已知的常规技术或通过与本文所述的那些类似的方法来制备，使用适当的同位素标记的试剂代替所采用的未标记的试剂。

如本文所用，“药学上可接受的盐”是指所公开化合物的衍生物，其中母体化合物通过制备其酸或碱式盐而被修饰。药学上可接受的盐的实例包括但不限于，碱性基团例如胺的无机盐或有机酸盐；以及酸性基团例如羧酸的碱金属盐或有机盐。药学上可接受的盐包括，例如由无毒的无机或有机酸形成的母体化合物的常规无毒盐或季铵盐。例如，此类常规的无毒盐包括衍生自无机酸的盐，所述无机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸和硝酸；和由有机酸制备的盐，例如乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸，帕莫酸，马来酸，羟基马来酸，苯基乙酸，谷氨酸，苯甲酸，水杨酸，磺胺酸，2-乙酰氧基苯甲酸，富马酸，甲苯磺酸，甲磺酸，乙二磺酸，草酸和羟乙磺酸，等等。

本发明的药学上可接受的盐可通过常规化学方法由含有碱性或酸性部分的母体化合物合成。通常，可通过使这些化合物的游离酸或碱形式与化学计量的适当碱或酸在水中或在有机溶剂中或在两者的混合物中反应来制备此类盐；通常，优选非水介质，如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈。适合的盐清单见于Remington:The Science and Practiceof Pharmacy,22^nd Edition,Allen,L.V.Jr.,Ed.；Pharmaceutical Press,London,UK(2012)，其公开内容通过引用并入本文。

另外，式I化合物可具有前药形式。将在体内转化以提供生物活性剂的任何化合物(即式I化合物)是本发明范围和精神内的前药。各种形式的前药在本领域中是众所周知的。有关此类前药衍生物的实例，请参见：

a)Bundgaard,H.,ed.,Design of Prodrugs,Elsevier(1985)和Widder,K.等人，eds.,Methods in Enzymology,112:309-396,Academic Press(1985)；

b)Bundgaard,H.,Chapter 5,＂Design and Application of Prodrugs,＂ATextbook of Drug Design and Development,pp.113-191,Krosgaard-Larsen,P.等人，eds.,Harwood Academic Publishers(1991)；

c)Bundgaard,H.,Adv.Drug Deliv.Rev.,8:1-38(1992)；

d)Bundgaard,H.等人，J.Pharm.Sci.,77:285(1988)；

e)Kakeya,N.等人，Chem.Pharm.Bull.,32:692(1984)；和

f)Rautio,J(Editor).Prodrugs and Targeted Delivery(Methods andPrinciples in Medicinal Chemistry),Vol 47,Wiley-VCH,2011。

含有羧基基团的化合物可形成生理学上可水解的酯，其通过在体内水解以产生式I化合物本身而用作前药。此类前药优选口服给药，因为在许多情况下水解主要在消化酶的影响下发生。在酯本身具有活性的情况下，或者在血液中发生水解的情况下，可使用肠胃外给药。式I化合物的生理可水解酯的实例包括C_1-6烷基、C_1-6烷基苄基、4-甲氧基苄基、茚满基、邻苯二甲酰基、甲氧基甲基、C_1-6烷酰基氧基-C_1-6烷基(例如，乙酰氧基甲基、新戊酰氧基甲基或丙酰基氧基甲基)、C_1-6烷氧基羰基氧基-C_1-6烷基(例如，甲氧基羰基-氧基甲基或乙氧基羰基氧基甲基、甘氨酰基氧基甲基、苯基甘氨酰基氧基甲基、(5-甲基-2-氧代-1,3-二氧杂环戊烯-4-基)-甲基)，以及在例如青霉素和头孢菌素领域中使用的其它众所周知的生理可水解酯。此类酯可通过本领域已知的常规技术来制备。

制备前药在本领域中是众所周知的，并且在例如King,F.D.,ed.,MedicinalChemistry:Principles and Practice,The Royal Society of Chemistry,Cambridge,UK(第2版，重印，2006年)；Testa,B.等人，Hydrolysis in Drug and ProdrugMetabolism.Chemistry,Biochemistry and Enzymology,VCHA and Wiley-VCH,Zurich,Switzerland(2003)；Wermuth,C.G.,ed.,The Practice of Medicinal Chemistry,3^rdedition,Academic Press,San Diego,CA(2008)中描述。

术语“溶剂合物”意指本发明化合物与一种或多种有机或无机溶剂分子的物理缔合。该物理缔合包括氢键。在某些情况下，例如当在结晶固体的晶格中掺入一种或多种溶剂分子时，溶剂合物将能够分离。溶剂合物中的溶剂分子可以规则排列和/或无序排列存在。溶剂合物可包含化学计量或非化学计量的溶剂分子。“溶剂合物”包括溶液相和可分离的溶剂合物。示例性的溶剂合物包括但不限于水合物、乙醇合物、甲醇合物和异丙醇合物。溶剂化方法是本领域公知的。

本文使用的术语“患者”是指通过本发明的方法进行治疗的有机体。这类有机体优选包括但不限于哺乳动物(例如鼠类、猿/猴、马、牛、猪、犬、猫等)且最优选是指人类。

本文使用的术语“有效量”意指将会引起例如研究人员或临床医师所寻求的组织、系统、动物或人的生物学或医学响应的药物或药剂(即本发明化合物)的量。此外，术语“治疗有效量”意指这样的量：与未接受上述量的相应受试者相比，所述量导致改善的治疗、治愈、预防或减轻疾病、病症或副作用，或降低在疾病或病症的进展速度。有效量可以一个或多个给药、施用或剂量给予且不意欲被特定的制剂或给药途径限制。该术语还包括在其范围内的增强正常生理机能的有效量。

如本文所用，术语“治疗”包括导致病况、疾病、病症等的改善或减轻其症状的任何效果，例如，减轻、降低、调节、改善或消除。

如本文所用，术语“药物组合物”是指活性药剂与惰性或活性载体的组合，使得该组合物特别适合于体内或体外的诊断或治疗用途。

碱的实例包括但不限于，碱金属(例如钠)氢氧化物，碱土金属(例如镁)氢氧化物，氨和式NW₄ ⁺的化合物，其中W为C_1-4烷基，等等。

对于治疗用途，本发明化合物的盐被认为是药学上可接受的。但是，非药学上可接受的酸和碱的盐也可用于例如药学上可接受的化合物的制备或提纯中。

制备方法

本发明的化合物可以通过有机合成领域的技术人员众所周知的多种方法来制备。可使用以下描述的方法，以及合成有机化学领域中已知的合成方法或本领域技术人员可理解的各种变化方法来合成本发明的化合物。优选的方法包括但不限于以下描述的方法。本文引用的所有参考文献通过引用其整体并入本文。

可使用本节中描述的反应和技术来制备本发明的化合物。将反应在适合于所用试剂和材料并且适合于进行转化的溶剂中进行。另外，在下述的合成方法的描述中，应当理解的是，所有提议的反应条件，包括溶剂的选择、反应气氛、反应温度、实验的持续时间和后处理操作均被选择为对于该反应的条件标准，对此本领域技术人员应容易理解。有机合成领域的技术人员应理解的是，存在于分子各个部分上的官能团必须与所提议的试剂和反应相容。对与反应条件相容的取代基的这种限制对本领域技术人员而言是明显的，然后必须使用替代方法。有时需要作出判断以修改合成步骤的顺序，或者选择一种特定的处理方案而不是另一种，以获得所需的本发明化合物。还将认识到的是，在该领域中任何合成路线的规划中，另一个主要考虑因素是对用于保护本发明所述化合物中存在的反应性官能团的保护基团的明智选择。描述受过培训的从业人员的许多替代选择的权威著作是Greene和Wuts(Protective Groups In Organic Synthesis,Fourth Edition,Wiley和Sons,2007)。

具有式(I)的化合物可通过参考以下方案中所示的方法来制备。如其中所示，最终产物是具有与式(I)相同的结构式的化合物。应理解的是，通过适当选择具有适当取代的试剂，可以通过该方案制备式(I)的任何化合物。本领域普通技术人员可容易地选择溶剂、温度、压力和其它反应条件。起始原料是可商购的或由本领域普通技术人员立即制备的。化合物的成分如本文中或说明书中的其它地方所定义。

方案1

方案1中描述了制备本公开实施例的一种方法。该方法从核糖核苷(i)开始，其中核碱基(R¹或R²)被适当地保护，例如用苯甲酰基基团保护，且5’-羟基基团被适当地保护(PG)，例如用DMTr醚保护，且3’-位为游离羟基基团。在步骤1中，羟基基团可通过用适当的试剂处理，转化为亚磷酰胺官能团，例如在1H-咪唑-4,5-二甲腈的存在下使用2-氰基乙基N,N,N',N'-四异丙基亚磷二酰胺，得到式(ii)的化合物。在步骤2中，使用适当的试剂处理，例如使用吡啶和H-磷酸酯(iii)，在适当的溶剂中，诸如吡啶或乙腈，得到式(iv)的化合物，其在步骤3中通常无需分离使用。使用例如叔丁基氢过氧化物或DDTT氧化或硫化，得到式(v)的化合物。随后在步骤4中，在酸性条件下(例如当PG＝DMTr)除去5’-OH保护基团，得到式vi的化合物。在步骤5中，用适当的环化试剂处理化合物vi，例如用DMOCP，然后再次用DDTT硫化或用叔丁基氢过氧化物氧化，得到式vii的化合物。式(I)的化合物可在步骤6或后续步骤中通过使用本领域技术人员已知的方法除去任何剩余的保护基团来制备。

用于制备式I的化合物的替代方法描述于方案2中。

方案2

该序列从修饰的核糖核苷(ix)开始，其中核碱基(R¹或R²)被适当地保护，例如用苯甲酰基基团保护，且5’-羟基基团被适当地保护(PG)，例如用DMTr醚保护，且3’-位为亚磷酰胺官能团。在步骤1中，用丙-2-烯-1-醇处理，然后立即氧化(x＝O)，例如，用2-丁酮过氧化物氧化，得到磷酸二酯(x)。随后在步骤2中，在酸性条件下(PG＝DMTr)，除去5’-OH保护基团，得到式xi的化合物。所得式xi的化合物可与经完全保护的3’-亚磷酰胺(ii)反应，然后在步骤3中氧化，例如，用2-丁酮过氧化物氧化，得到式xii(X＝O)的化合物或可用例如DDTT处理，得到另外的式xii(X＝S)的化合物。在步骤4中，在酸性条件下从核糖-核苷中除去5’-保护基团(PG＝DMTr)，得到式xiii的化合物。在步骤5中，用适当的试剂除去烯丙基保护基团，例如用NaI或Pd(PPh₃)₄，得到式xiv的化合物。在步骤6中，用适当的环化试剂处理化合物xiv，例如用1-(均三甲苯基磺酰基)-3-硝基-1H-1,2,4-三唑，得到式xv的化合物。式xv的化合物可用适当的试剂处理，例如用叔丁基胺处理，以除去2-氰基乙基基团，并得到式xvi的化合物，可需要额外的步骤以除去剩余的保护基团。例如，用NH₄OH/MeOH处理以除去烷基或苯基羰基基团，并在采用甲硅烷基保护基团时用氟粒子处理，得到式(I)的化合物。

或者，用于制备式(I)的化合物的另外的方法示于方案3中。

方案3

该方法始于被适当取代的天然或修饰的核苷(xv)，其中核碱基(R²)被适当地保护，例如用苯甲酰基基团。在步骤1中，xv与被适当保护的取代的或修饰的含3’-亚磷酰胺官能团的核苷(xvi)反应，然后被例如2-丁酮过氧化物氧化，得到式xvii的化合物(X＝O)，或者，例如用DDTT氧化，得到另外的式xvii的化合物(X＝S)。在步骤2中，本领域技术人员可实施3’-OH的脱保护。例如，当PG₂＝酯时，用肼处理得到通式xviii的化合物。在步骤3中，在适当的溶剂中(例如乙腈或二甲基甲酰胺)，式xviii的化合物与适当的有机磷(V)试剂例如表1中所列的试剂之一反应，使用适当的碱(例如DBU)，得到式xix的化合物。在步骤4中，用例如2,2-二氯乙酸，除去5’OH保护基团(PG1＝DMTr)得到式xx的化合物。在步骤5中，在碱(例如DBU)的存在下，在适当的溶剂(例如乙腈或二甲基甲酰胺)中处理化合物xx，得到式xxi的化合物。在步骤6中，任何剩余的保护基团可在本领域技术人员已知的条件下除去，得到式xxii的化合物。

或者，用于制备本公开实施例的另外的方法在方案4中描述。

方案4

该方法始于2-(3-氯-4-羟基苯基)乙酸聚苯乙烯载体树脂(xxiii)以及天然或修饰的核糖-核苷，其中核碱基(R¹或R²)被适当地保护(PG₂或PG₃)，例如用苯甲酰基基团，且5’-羟基基团被适当地保护(PG₁)，例如用DMTr醚保护，且3’-位为亚磷酰胺官能团。在步骤1中，在适当的溶剂(例如乙腈)中，用适当的试剂(例如，1H-四唑)将核糖-核苷负载至树脂(xxiii)上，然后立即氧化，例如用诸如叔丁基氢过氧化物的试剂氧化，得到树脂xxiv。随后在步骤2中，在酸性条件下，用适当的试剂(例如Et₃N/吡啶的1:1混合物)除去氰基乙基基团和5’-OH保护基团(PG₁＝DMTr)，得到树脂xxv。所得树脂xxv可与经完全保护的2’-亚磷酰胺(xvi)在步骤3中反应，然后立即硫醇化，例如用DDTT(X＝S)硫醇化，得到树脂xxvi。

或者，用诸如叔丁基氢过氧化物的氧化剂处理得到载体树脂xxvi，其中X＝O。在步骤4中，在酸性条件下，从核糖-核苷中除去5’-保护基团(例如当PG₁＝DMTr时)得到xxvii。在步骤5中，用适当的环化试剂处理xxvii，例如用MNST处理，得到xxviii。用适当的试剂(例如Et₃N/吡啶的1:1混合物)除去氰基乙基基团，然后用适当的试剂从载体树脂上分离，例如用NH₄OH/MeOH，在步骤6中得到式xxix的化合物。两个保护基团(PG₂和PG₃＝苯酰基)与任何其它保护基团也可在相同条件下或在随后的步骤中，通过适当选择本领域技术人员已知的试剂来除去。

表1.有机磷试剂和相应的–P(V)基团

实施例

在以下实施例中进一步定义本发明。应该理解的是，这些实施例仅以举例说明的方式给出。通过以上讨论和实施例，本领域技术人员可以确定本发明的基本特征，并且在不脱离其精神和范围的情况下，可进行各种改变和修改以使本发明适应各种用途和条件。因此，本发明不受以下本文阐述的示例性实施例的限制，而是由所附权利要求书限定。

缩写

可在以下实施例分节中和本文其它地方使用以下缩写：

制备中间体I-1：膦酸氢(2R,3R,4R,5R)-5-(6-苯甲酰氨基-9H-嘌呤-9-基)-4-氟-2-(羟基甲基)四氢呋喃-3-基酯

将(2R,3R,4R,5R)-5-(6-苯甲酰氨基-9H-嘌呤-9-基)-2-((双(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-4-氟四氢呋喃-3-基2-氰基乙基二异丙基亚磷酰胺(Sigma-Aldrich，2g，2.3mmol)的ACN(5mL)溶液用水(0.05mL，2.7mmol)处理，然后用吡啶三氟乙酸盐(0.53g，2.7mmol)处理。将无色溶液搅拌10分钟。然后真空浓缩，得到浅粉色泡沫。将所得固体溶于MeCN(5mL)并浓缩至干。将所得材料再次溶于MeCN(5mL)。制备DBU(2.75mL，18.3mmol)的ACN(6mL)和硝基甲烷(1mL，18.3mmol.)的溶液。向该DBU溶液中一次性添加上述ACN溶液并将混合物搅拌20分钟。随后将反应倒入15wt％的KH₂PO₄水溶液(25mL)和2-MeTHF(20mL)中并搅拌。水层经2-MeTHF(20mL)萃取且合并的有机层用15wt％的KH₂PO₄水溶液(2x20mL)洗涤，然后用盐水溶液(20mL)洗涤。有机层经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。将所得胶状物通过用2-MeTHF(总计30-40mL/g，装入8-10mL的量)共沸蒸馏干燥。随后将粗物质溶于DCM(20mL)中。依次添加甲醇(1mL.)和二氯乙酸(0.8mL，10.8mmol)。将反应搅拌3小时。向该混合物中添加吡啶(2mL，27mmol)，然后将混合物真空浓缩至胶状的残余物。添加二甲氧基乙烷(10mL)并沉淀出白色固体。将固体通过过滤收集并再次悬浮于DME(2.5mL/g)中，小心地用药匙在过滤器中搅拌。将固体再次过滤，并再重复该操作2次，得到中间体I-1，其为白色粉末(1g，72％)。

实施例1

(1S,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-9-氟-18-羟基-17-{9-氧代-3H,4H,9H-咪唑并[1,2-a]嘌呤-3-基}-3,12-二硫烷基-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-3,12-二酮

制备中间体1A：

向含(2R,3R,4S,5R)-2-(2-氨基-6-氯-9H-嘌呤-9-基)-5-(羟基甲基)四氢呋喃-3,4-二醇(10g，33.1mmol)的AcOH/NH₄OAc缓冲液(4.5pH)(100mL)和EtOH(100mL)溶液中添加2-溴乙醛(80mL，104mmol)。将反应在37℃加热48小时。随后将滤液用固体碳酸氢铵中和至pH约7，并通过过滤收集所得固体，且固体经乙腈冲洗。在旋蒸仪上将滤液浓缩至约1/2体积，然后用乙腈(约100mL)处理，并收集第二批产物，用额外的乙腈冲洗，得到中间体1A(5g，16.27mmol，49.1％产率)，m/z(308，M+H)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ8.15(m，1H)，7.63(m，1H)，7.42(d，J＝2.5Hz，1H)，5.83(d，J＝5.8Hz，1H)，5.42(br d，J＝5.8Hz，1H)，5.21-5.07(m，2H)，4.50(q，J＝5.3Hz，1H)，4.14(br d，J＝3.9Hz，1H)，3.92(q，J＝3.8Hz，1H)，3.73-3.62(m，1H)，3.60-3.49(m，1H)。

制备中间体1B：

在旋蒸仪上，将中间体1A(4.5g，14.65mmol)溶于吡啶(50mL)中的溶液共沸至干，然后再次溶于吡啶(50mL)中，并逐滴用乙酸酐(13.82mL，146mmol)处理。将反应搅拌20小时，然后用MeOH(10mL)处理并浓缩。将材料溶于DCM(100mL)中，并用1.5N K₂HPO₄水溶液(1x50mL)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。将粗产物溶于少量的DCM并负载至40g ISCO硅胶柱上，并且使用Teledyne ISCO系统提纯，在15min内以1％-10％DCM(0.1％TEA)/MeOH的梯度洗脱，得到中间体1B(3.1g，7.15mmol，48.8％产率)，m/z(434，M+H)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ12.58-12.53(m，1H)，8.15(s，1H)，7.65(t，J＝2.2Hz，1H)，7.47(t，J＝2.5Hz，1H)，6.14(d，J＝5.9Hz，1H)，5.92(t，J＝6.0Hz，1H)，5.54(dd，J＝5.9，4.4Hz，1H)，4.46-4.26(m，3H)，2.16-2.11(m，3H)，2.04(d，J＝2.4Hz，6H)。

制备中间体1C：

向含中间体1B(2.5g，5.77mmol)，2-(4-硝基苯基)乙-1-醇(1.543g，9.23mmol)和三苯基膦(2.270g，8.65mmol)的THF(50mL)溶液中滴加DIAD(1.682mL，8.65mmol)。将反应在室温搅拌20小时，然后真空浓缩。将粗产物溶于少量的DCM中，并负载至80g ISCO硅胶柱上，并且使用Teledyne ISCO系统提纯，在30min内以5％-100％DCM/EtOAc的梯度洗脱，得到二乙酸(2R,3R,4R,5R)-2-(乙酰氧基甲基)-5-(5-(4-硝基苯乙基)-9-氧代-5,9-二氢-3H-咪唑并[1,2-a]嘌呤-3-基)四氢呋喃-3,4-二基酯，m/z(583，M+H)。将粗制的二乙酸(2R,3R,4R,5R)-2-(乙酰氧基甲基)-5-(5-(4-硝基苯乙基)-9-氧代-5,9-二氢-3H-咪唑并[1,2-a]嘌呤-3-基)四氢呋喃-3,4-二基酯再次溶于7N MeOH中的氨(50mL)并搅拌20小时。随后将反应经浓缩至约1/2体积，并用约50mL乙醚处理。通过过滤收集所得固体并用乙醚冲洗，并干燥，得到中间体1C(2.5g，5.48mmol，95％产率)，m/z(457，M+H)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ8.16-8.10(m，3H)，7.66-7.63(m，1H)，7.53-7.48(m，1H)，7.46-7.43(m，1H)，5.86-5.82(m，1H)，5.44-5.39(m，1H)，5.24-5.20(m，1H)，5.06-5.01(m，1H)，4.63-4.56(m，1H)，4.45-4.39(m，2H)，4.22-4.17(m，1H)，3.98-3.93(m，1H)，3.72-3.65(m，1H)，3.63-3.55(m，1H)，3.33-3.27(m，2H)。

制备中间体1D：

将含中间体1C(2.5g，5.48mmol)的吡啶(40mL)溶液浓缩至浓稠油状物。将油状物与额外的吡啶(40mL)第二次共沸。在氮气气氛下，将所得粘稠油状物再次溶于吡啶(30mL)，并以小分量添加4,4'-(氯(苯基)亚甲基)双(甲氧基苯)(2.227g，6.57mmol)。将反应搅拌20小时，然后在旋蒸仪上浓缩。将所得残余物用DCM(100mL)稀释并用饱和NaHCO₃水溶液溶液(25mL)和饱和NaCl水溶液洗涤，然后干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。将粗产物溶于少量的DCM并负载至40g ISCO硅胶柱上，并且使用Teledyne ISCO系统提纯，在20分钟内以5％-100％DCM/EtOAc(含0.25％TEA的DCM)的梯度洗脱，得到中间体1D(1.95g，2.57mmol，46.9％产率)，m/z(759，M+H)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ8.13-8.06(m，3H)，7.68-7.62(m，1H)，7.45-7.39(m，3H)，7.35-7.29(m，2H)，7.21-7.12(m，7H)，6.72(dd，J＝16.5，8.9Hz，4H)，5.92(d，J＝4.3Hz，1H)，5.55(d，J＝5.6Hz，1H)，5.23(d，J＝6.1Hz，1H)，4.68(q，J＝5.2Hz，1H)，4.40(q，J＝5.6Hz，1H)，4.33-4.14(m，2H)，4.10-4.04(m，1H)，3.69(s，3H)，3.68-3.66(m，3H)，3.32-3.26(m，1H)，3.22-3.13(m，3H)。

制备中间体1E：

向含中间体1D(1.43g，1.885mmol)的DMF(10mL)溶液中添加咪唑(0.642g，9.42mmol)然后添加TBS-Cl(0.312g，2.073mmol)。将反应搅拌12小时。随后将反应用乙酸乙酯(150mL)稀释，依次用水(1x50mL)、10％LiCl水溶液(2x50mL)和最后的饱和NaCl水溶液(50mL)洗涤。有机层经干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。将粗产物溶于少量的DCM并负载至经DCM(0.25％TEA)平衡的220g ISCO硅胶柱，并且使用Teledyne ISCO系统提纯，在30min内以0％-50％乙酸乙酯/DCM(0.25％TEA)的梯度洗脱，得到所需中间体1E。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ8.36-8.32(m，1H)，8.17-8.13(m，2H)，8.06(d，J＝1.6Hz，1H)，7.67-7.60(m，2H)，7.50(d，J＝1.6Hz，1H)，7.17-7.05(m，5H)，7.05-6.97(m，4H)，6.70(br d，J＝8.9Hz，2H)，6.69-6.65(m，2H)，6.31(d，J＝2.7Hz，1H)，5.75-5.74(m，1H)，5.30(d，J＝7.0Hz，1H)，4.93-4.89(m，1H)，4.82-4.69(m，2H)，4.35(br d，J＝4.8Hz，1H)，4.22-4.17(m，1H)，3.70(s，3H)，3.69(s，3H)，3.32-3.24(m，2H)，3.00(dd，J＝10.8，3.8Hz，1H)，0.81(s，9H)，0.06(s，3H)，0.01(s，3H)。

制备中间体1F：

向含中间体1E(950mg，1.0mmol)的DCM(12mL)溶液中添加2-氰基乙基N,N,N',N'-四异丙基亚磷二酰胺(0.717mL，2.176mmol)。将反应搅拌20小时，然后用额外的DCM(100mL)稀释并用饱和NaHCO₃水溶液溶液(10mL)和饱和NaCl水溶液(10mL)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。将粗产物溶于少量的DCM并负载至40g柱并且使用Teledyne ISCO系统提纯，在20分钟内以0％-50％EtOAc/DCM(0.25％TEA)的梯度洗脱，得到中间体1F(950mg，0.885mmol，81％产率)，其为非对映异构体的混合物，其离子化为m/z(990/991二异丙基胺的水解)。

制备中间体1G：

将化合物中间体1F(950mg，0.885mmol)溶于乙腈(10mL)中。该溶液经真空浓缩(35℃水浴)至浓稠油状物。所得油状物与额外的乙腈(10mL)第二次共沸，得到浓稠油状物。向该油状物中添加第三份的乙腈(5mL)并在氮气气氛下将该溶液静置。在另一个25mL圆底烧瓶中装入中间体I-1(445mg，1.018mmol))和小搅拌子。向该固体中添加吡啶(15mL)且该溶液经真空浓缩(35℃水浴)。再用额外的吡啶(10mL)重复该操作一次。然后，添加吡啶三氟乙酸盐(188mg，0.974mmol)，并再次将该溶液与额外的吡啶(10mL)共沸，并浓缩至固体。在氮气气氛下，将乙腈(10mL)添加至该固体中，以形成稍浑浊的、自由搅拌的异相混合物。搅拌该混合物，通过注射器添加如前所制备的中间体1F的溶液。所得混合物搅拌并偶尔进行超声波处理4小时，得到粗制中间体1G的溶液，m/z(1357，M+-氰基乙基)，将其直接用于后续步骤中。

制备中间体1H：

随后，将中间体1G(17mL)的粗制溶液用(E)-N,N-二甲基-N'-(3-硫代-3H-1,2,4-二噻唑-5-基)甲亚酰胺(227mg，1.106mmol)处理，并搅拌额外的25分钟。该黄色溶液经真空浓缩(36℃水浴)，得到油状物。将残余物溶于最少量的MeOH/DCM(5mL，1/1)并添加约3g的硅藻土。将自由流动的混合物在旋蒸仪上浓缩至干，以吸附粗产物混合物，并且转移至空的ISCO筒，并在ISCO反相色谱系统上使用RediSep C18，150g Gold柱提纯，使用以下条件：流速：40mL/min溶剂A：水(95％)/ACN(5％)含乙酸铵(0.05％)作为添加剂和溶剂B乙腈(95％)/水含乙酸铵(0.05％)作为添加剂。洗脱梯度为0％B，保持2柱体积，经14柱体积至100％B，得到中间体1H(600mg，0.416mmol)，m/z(1441.8，M+H)。

制备中间体1I：

将中间体1H(650mg，0.451mmol)溶于DCM(6mL)/MeOH(2mL)的混合物，并逐滴用2,2-二氯乙酸(0.179mL，2.255mmol)处理。将反应搅拌4小时，然后用吡啶(0.750mL，9.5mmol)淬灭。随后将混合物在旋蒸仪上浓缩。将残余物溶于MeOH(约2mL)中，并负载至预平衡的ISCO 50g HP Gold C-18柱上，并用溶剂A：95％水/5％ACN(添加0.01M乙酸铵)，溶剂B：95％ACN/5％水(添加0.05％乙酸铵)洗脱，其洗脱梯度为0％B持续3柱体积，经15柱体积至60％B，得到中间体1I(300mg，0.263mmol，58.4％产率)，m/z 1139(M+H)，作为两种主要非对映异构体的非对映异构混合物。

制备中间体1J和1K：

将非对映异构体的混合物1I(300mg，0.263mmol)溶于无水吡啶(20mL)。该溶液经真空浓缩(35℃水浴)至浓稠油状物。将所得油状物与额外的无水吡啶(20mL)第二次共沸，得到浓稠油状物。向该油状物中添加第三份的无水吡啶(10mL)并在氮气气氛下将该溶液静置。在另外的50mL烧瓶中，在氮气气氛下将2-氯-5,5-二甲基-1,3,2-二氧杂膦烷2-氧化物(146mg，0.790mmol)溶于无水吡啶(10mL)。在冰/NaCl浴中将溶液冷却至-5℃。在30分钟内，使用注射器向该冷却的溶液中滴加1I的吡啶溶液。将反应另外搅拌30分钟，然后在20分钟内温热至25℃。添加固体(E)-N,N-二甲基-N'-(3-硫代-3H-1,2,4-二噻唑-5-基)甲亚酰胺(81mg，0.395mmol)并将混合物另外搅拌30分钟。随后将反应用水处理(0.20mL)并真空浓缩。将残余物溶于乙腈(3mL)并在反相C-18，50g HP Gold ISCO柱上提纯，所述提纯使用溶剂A 95％水/5％ACN(添加0.01M NH₄OAc)和溶剂B 95％ACN/5％水(添加0.01M NH₄OAc)。梯度：在0％B保持3柱体积，经10柱体积至50％B。收集含有两种主要非对映异构体的级分，并冻干，得到非对映异构体1J(较快洗脱级分)和非对映异构体1K(较慢洗脱级分)(每种约100mg)，m/z(1153，M+H)。

制备中间体1L和1M：

将含吡啶(1.5mL)中的硝基甲烷(0.070mL，1.301mmol)的小瓶用DBU(0.131mL，0.867mmol)处理并搅拌10分钟。向该DBU溶液中添加含中间体1J(100mg，0.087mmol)溶于吡啶(1mL)中的溶液。将反应在30℃搅拌10小时，然后浓缩至粘稠的油状物。将该油状物溶于7N MeOH中的氨溶液(2mL，14mmol)并于密封小瓶中、在35℃加热12小时。随后将反应经浓缩至干。将残余物溶于最少量的MeOH，并在反相C-18，50g HP Gold ISCO柱上提纯，所述提纯使用溶剂A 95％水/5％ACN(添加0.01M NH₄OAc)和溶剂B95％ACN/5％水(添加0.01MNH₄OAc)。梯度：在0％B保持3柱体积，经10柱体积至50％B。收集含所需化合物的级分，并冻干，得到中间体1L(45mg，0.053mmol，61.3％产率)，m/z(847，M+H)。

使用相同的方案，但从较慢洗脱的异构体中间体1K(100mg，0.087mmol)开始，得到中间体1M(40mg，55％产率)，m/z(847，M+H)。

实施例1

向在乙腈(1mL)/吡啶(0.5mL)的混合物中的含中间体1L(90mg，0.106mmol)的溶液中添加三乙胺三氢氟酸盐(0.5mL，3mmol)。将反应在35℃加热20小时，然后通过0.45微米尼龙过滤器过滤，并提纯。使用以下条件经制备型LC/MS提纯粗物质：柱：Agilent Bonus RP，21.2x200mm，5-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈：含20-mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈：含20-mM乙酸铵的水；梯度：经20分钟0-60％B，然后在100％B保持4分钟；流速：20mL/min。合并含所需产物的级分，并通过离心蒸发干燥，得到实施例1-1(52mg，65％产率)，m/z(733，M+H)。HPLC保留时间：2.18min，使用Agilent柱Bonus RP，2.1mm x 50mm，1.8μm颗粒；流动相A：含20mM乙酸铵的水；流动相B：乙腈。温度：50℃；梯度：在0％B保持1min，然后经4分钟0％B至100％B，然后在100％B保持0.75分钟；流速：1mL/min；检测：MS和UV(220nm)。

使用类似于实施例1-1的操作将中间体1M转化为实施例1-2。HPLC保留时间：2.36min，使用Agilent柱Bonus RP，2.1mm x 50mm，1.8μm颗粒；流动相A：含20mM乙酸铵的水；流动相B：乙腈。温度：50℃；梯度：在0％B保持1min，然后经4分钟0％B至100％B，然后在100％B保持0.75分钟；流速：1mL/min；检测：MS和UV(220nm.¹H NMR(601MHz，氧化氘)δ8.30(s，1H)，8.26(s，1H)，8.11(s，1H)，7.52(d，J＝2.6Hz，1H)，7.27(d，J＝2.6Hz，1H)，6.40(d，J＝16.2Hz，1H)，6.02(s，1H)，5.58(dd，J＝51.1，4.1Hz，1H)，5.22-5.09(m，1H)，5.03(td，J＝8.9，4.8Hz，1H)，4.60–4.45(m，4H)，4.07-4.02(br m，2H)。

实施例2

(1S,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-9-氟-3,12,18-三羟基-17-{9-氧代-3H,4H,9H-咪唑并[1,2-a]嘌呤-3-基}-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-3,12-二酮

制备中间体2A：

将根据上述步骤新鲜制备的粗制的中间体1G(5mL)的乙腈/DMF溶液用2-氢过氧化-2-甲基丙烷(0.109mL，0.600mmol)处理并搅拌30分钟。将反应用亚硫酸氢钠[(100mg，溶于水(0.100mL)]淬灭并真空浓缩。将残余物再次溶于MeOH(2mL)中并添加硅藻土(2g)，并将混合物浓缩至干。将所得固体转移至空的ISCO固相筒，并在ISCO C-18 HP Gold 50g柱上提纯，使用流动相A：5:95乙腈：含0.01M乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈：含0.01M乙酸铵的水；梯度：0％B持续2柱体积，经20柱至100％B。将适当的级分合并，并浓缩，得到中间体2A(205mg，0.144mmol)。m/z：(1426，M+H)。

制备中间体2B：

将中间体2A(200mg，0.14mmol)溶于DCM(4mL)/MeOH(1mL)的混合物中，并逐滴用2,2-二氯乙酸(0.050mL，0.60mmol)处理。将反应搅拌4小时，然后用吡啶(0.1mL，1.4mmol)淬灭并在旋蒸仪上浓缩。将残余物悬浮于MeOH(约2mL)中并使用ISCO C-18 HP Gold 50gold柱提纯，使用流动相A：5:95乙腈：含0.01M乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈：含0.01M乙酸铵的水；梯度：0％B持续2柱体积，经20柱至100％B。将适当的级分合并，并浓缩，得到中间体2B(100mg，0.089mmol，63.5％产率)，m/z(1124，M+H)。

制备中间体2C：

将中间体2B(150mg，0.134mmol)溶于无水吡啶(10mL)。该溶液经真空浓缩(35℃水浴)至浓稠油状物。将所得油状物与额外的无水吡啶(10mL)第二次共沸，并浓缩至浓稠油状物。向该油状物中添加第三份的无水吡啶(10mL)并在氮气气氛下将该溶液静置。在另一个容器中，在氮气气氛下将2-氯-5,5-二甲基-1,3,2-二氧杂膦烷2-氧化物(74.0mg，0.401mmol)溶于无水吡啶(5mL)并冷却至-5℃。在30分钟内，通过注射器向冷却的溶液中添加中间体2B的吡啶溶液。在-5℃，将反应另外搅拌30分钟。移去冰浴，并在10分钟内将反应温热至室温。随后将反应冷却回-5℃并用水(0.060mL，3.4mmol)处理，然后立即添加固体碘(50mg，0.2mmol)。将反应搅拌10分钟并添加亚硫酸氢钠(50mg，0.5mmol，在0.1mL水中)。随后用旋蒸仪将反应浓缩至油状物。将残余物溶于MeOH，并在ISCO C-18 HP Gold 50g柱上提纯，使用流动相A：5:95乙腈：含0.01M乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈：含0.01M乙酸铵的水；梯度：0％B持续2柱体积，经15柱体积至100％B。将级分合并，并冻干，得到中间体2C(77mg，0.07mmol，52％产率)，m/z(1122，M+H)。

制备中间体2D：

将中间体2C(77mg，0.07mmol)溶于吡啶(0.5mL)中，并添加至预先生成的含DBU(0.2mL，1.4mmol)和硝基甲烷(0.1mL，2mmol)的吡啶(1mL)溶液中。将反应在35℃搅拌16小时，然后真空浓缩至油状物。将残余物悬浮于7N MeOH中的氨(2.5mL，18mmol)中，并在35℃、在密封小瓶中加热6小时。随后将反应真空浓缩，并使用ISCO C-18 HP Gold 50g柱提纯，使用流动相A：5:95乙腈：含0.01M乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈：含0.01M乙酸铵的水；梯度：0％B持续2柱体积，经15柱体积至50％B。将适当的级分合并，并浓缩，得到中间体2D(45mg)，m/z(815，M+H)。

实施例2

在小瓶中溶解吡啶(1mL)中的中间体2D(45mg，0.06mmol)并添加三乙胺三氢氟酸盐(0.15mL)，并将混合物在35℃搅拌16小时。将反应浓缩并再次溶于水(2mL)中，且粗物质使用以下条件经制备型LC/MS提纯：柱：Agilent Bonus RP 21.2x100mm，5-μm颗粒；流动相A：含20-mM乙酸铵的水；流动相B：乙腈；梯度：在0％B保持0-6分钟。经20分钟0％-40％B，然后在100％B保持4分钟；流速：20mL/min。合并含所需产物的级分并通过离心蒸发干燥，得到实施例2。(27mg，42％)，m/z(701，M+H)。HPLC保留时间：1.87min，使用柱：Agilent BonusRP，2.1mm x 50mm，1.8μm颗粒；流动相A：含20mM乙酸铵的水；流动相B：乙腈。温度：50℃；梯度：在0％B保持1min，然后经4分钟0％B至100％B，然后在100％B保持0.75分钟；流速：1mL/min；检测：MS和UV(220nm)。¹H NMR(400MHz，氧化氘)δ8.17(bs，2H)，8.00-7.95(m，1H)，7.46-7.41(d，J＝2.5Hz，1H)，7.18(d，J＝2.5Hz，1H)，6.33-6.30(d，J＝15.8Hz，1H)，5.94-5.88(m，1H)，5.64-5.45(m，1H)，5.04-4.97(m，1H)，4.96-4.90(m，1H)，4.90-4.82(m，1H)，4.53-4.33(m，4H)，4.10-4.01(m，2H)。

实施例3

(1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-9,18-二氟-3,12-二羟基-17-{3H-咪唑并[2,1-f]嘌呤-3-基}-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-3,12-二酮

制备中间体3A：

将(2R,3R,4R,5R)-5-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-4-氟-2-(羟基甲基)四氢呋喃-3-醇(3g，11.14mmol)溶于NaOAc缓冲液(pH＝4.5)(100mL)，并添加50％水中的2-氯乙醛(30mL，11.14mmol)，并将混合物在室温搅拌过夜。浓缩所得混合物并将残余物负载至硅藻土上，并用二氧化硅柱色谱提纯(80g柱，MeOH/DCM＝5-20％)，得到中间体3A。HPLC：保留时间＝0.37min(H₂O/含0.05％TFA的ACN，Waters Acquity HPLC BEH C18，2.1x50mm，1.7-μm颗粒，梯度＝2min，波长＝220nm)；MS(ES)：m/z＝294[M+H]⁺。

制备中间体3B：

将中间体3A(3.5g，11.93mmol)用吡啶共沸2次，并将所得残余物溶于吡啶(100mL)中。向该溶液中添加催化量的DMAP和4,4'-(氯(苯基)亚甲基)双(甲氧基苯)(5.26g，15.52mmol)。将混合物在室温搅拌3.5小时，然后添加MeOH(5mL)，并继续搅拌30分钟。随后，反应混合物经浓缩至干。将残余物溶于DCM，用饱和NaHCO₃水溶液洗涤，并浓缩。残余物经硅胶柱色谱提纯(80g柱，用EtOAc/DCM 0-100％洗脱25min，然后0-10％MeOH/DCM，25min)，得到中间体3B(5.9g，9.82mmol，82％产率)。)。HPLC：保留时间＝0.84min(H₂O/含0.05％TFA的ACN，Waters Acquity HPLC BEH C18，2.1x50mm，1.7-μm颗粒，梯度＝2min，波长＝220nm)；MS(ES)：m/z＝596[M+H]⁺。

制备中间体3C：

向中间体3B(5.9g，9.86mmol)的吡啶(50mL)溶液中添加磷酸二苯基酯(11.3mL，59.0mmol)。将反应搅拌45分钟。然后添加水(3mL)和Et₃N(3mL)，并将反应混合物搅拌15分钟。将溶液浓缩，并将残余物在DCM(200mL，含1％Et₃N)和5％NaHCO₃(150mL)之间分配。有机层用5％NaHCO₃再洗涤2次，然后浓缩。将残余物经硅胶柱色谱提纯(80g柱，MeOH/DCM含0.5％Et3N＝0-40％)，得到中间体3C(6.5g，100％产率)。HPLC：RT＝0.73min(H₂O/含0.05％TFA的ACN，Waters Acquity HPLC BEH C18，2.1x50mm，1.7-μm颗粒，梯度＝2min，波长＝220nm)；MS(ES)：m/z＝660[M+H]⁺。

制备中间体3D：

向中间体3C(2g，1.668mmol)的DCM(50mL)溶液中添加水(0.300mL，16.68mmol)，然后添加2,2-二氯乙酸(1.935g，15.01mmol)。将反应搅拌15分钟，然后添加三乙基硅烷(10mL)，并继续搅拌1小时。向反应混合物中添加吡啶(20mL)，并随后将其浓缩至干，直接用于下一步骤中。

制备中间体3E：

将(2R,3R,4R,5R)-5-(6-苯甲酰氨基-9H-嘌呤-9-基)-2-((双(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-4-氟四氢呋喃-3-基(2-氰基乙基)二异丙基亚磷酰胺(1.75g，2.002mmol)与ACN(2x20mL)共蒸发，溶于乙腈(20mL)并浓缩至约4mL。向溶液中添加分子筛。在另外的烧瓶中，将中间体3D(0.60g，1.67mmol)与ACN(2x20mL)共蒸发。将残余物再次溶于乙腈(20mL)中，并浓缩至约10mL的溶液。将上述干燥的(2R,3R,4R,5R)-5-(6-苯甲酰氨基-9H-嘌呤-9-基)-2-((双(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-4-氟四氢呋喃-3-基(2-氰基乙基)二异丙基亚磷酰胺的溶液通过套管添加至中间体3D的混合物中。将反应混合物搅拌10分钟，然后添加5.5M癸烷中的叔丁基氢过氧化物(0.485mL，5.01mmol)，并将所得混合物搅拌30分钟。随后将反应冷却至0℃并用硫代硫酸钠(1.055g，6.67mmol)的H₂O(4mL)溶液处理。随后，将所得混合物浓缩，并将残余物溶于DCM(50mL)中，并用水(0.300mL，16.68mmol)处理，然后添加2,2-二氯乙酸(1.935g，15.01mmol)。将反应搅拌15分钟，然后添加吡啶(20mL)并将所得混合物浓缩。粗产物经C18反相制备型HPLC提纯(150g柱，用0-95％水性NH₄OAc中的ACN洗脱)。合并所需级分，并冻干，得到中间体3E。HPLC:保留时间＝0.68min(H₂O/含0.05％TFA的ACN，Waters Acquity HPLC BEH C18，2.1x50mm，1.7-μm颗粒，梯度＝2min，波长＝220nm)；MS(ES)：m/z＝846[M+H]⁺。

制备中间体3F：

将中间体3E(50mg，0.058mmol)与吡啶(30mL)共蒸发2次。将残余物再次溶于吡啶(30mL)中，并浓缩至约15mL。向该溶液中添加2-氯-5,5-二甲基-1,3,2-二氧杂膦烷2-氧化物(53.4mg，0.289mmol)。将反应搅拌8分钟，然后添加水(0.037mL，2.026mmol)，立即接着添加碘(44.1mg，0.17mmol)。将所得混合物搅拌30分钟，然后用亚硫酸氢钠(30.1mg，0.289mmol)的水(3mL)溶液淬灭，然后浓缩。将残余物用反相(C-18)色谱提纯并用0-50％水性NH₄OAc中的ACN洗脱，得到中间体3F。HPLC:保留时间＝0.52min(H₂O/含0.05％TFA的ACN，Waters Acquity HPLC BEH C18，2.1x50mm，1.7-μm颗粒，梯度＝2min，波长＝220nm)；MS(ES)：m/z＝844[M+H]⁺。

实施例3

将中间体3F(53mg，0.062mmol)用33％EtOH中的MeNH₂处理。将反应搅拌3.5小时，然后浓缩。将粗物质使用以下条件用制备型LC/MS提纯：柱：Agilent Bonus RP21.2x100mm，5-μm颗粒；流动相A：含20-mM乙酸铵的水；流动相B：乙腈；梯度：在0％B保持0-6分钟。经20分钟0％-40％B，然后在100％B保持4分钟；流速：20mL/min。合并含所需产物的级分并干燥，得到实施例3。HPLC:保留时间＝1.997min(Agilent Bonus RP，2.1mm x50mm，1.8μm颗粒；流动相A：含20mM乙酸铵的水；流动相B：乙腈。温度：50℃；梯度：在0％B保持1min，然后经4分钟0％B至100％B，然后在100％B保持0.75分钟；流速：1mL/min；检测：MS和UV(220nm))MS(ES)：m/z＝687[M+H]⁺。

实施例4

1-[(1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-17-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-9,18-二氟-3,12-二氧代-3,12-二硫烷基-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0⁶ ^,10]十八烷-8-基]-1H-1,2,3-苯并三唑-4-甲酰胺

制备中间体4A：

在氮气气氛下、在室温，将乙酸(3R,4R,5R)-4-(苄基氧基)-5-(苄基氧基甲基)-3-氟四氢呋喃-2-基酯(Journal of the American Chemical Society，2005，127，10879)(2.1g，5.64mmol)和羧酸1H-苯并[d][1,2,3]三唑-7-甲基酯(1.0g，5.64mmol)悬浮于乙腈(30mL)中，然后滴加全氯锡烷(0.661mL，5.64mmol)。将反应搅拌16小时。将混合物用饱和NaHCO₃水溶液碱化，然后用EtOAc(30mL x 3)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，在Na₂SO₄上干燥，然后浓缩。将残余物在二氧化硅柱(40g)上提纯，0-60％EtOAc/己烷，得到中间体4A(2.2g，4.48mmol，79％产率)。¹H NMR(499MHz，氯仿-d)δ8.06(dd，J＝7.3，0.9Hz，1H)，7.93-7.83(m，1H)，7.46(dd，J＝8.2，7.3Hz，1H)，7.41-7.26(m，5H)，7.24-7.12(m，3H)，7.09-6.96(m，2H)，6.59-6.47(m，1H)，5.97-5.74(m，1H)，4.79(d，J＝11.6Hz，1H)，4.67(d，J＝11.9Hz，2H)，4.55-4.47(m，1H)，4.29(d，J＝4.6Hz，2H)，4.08(s，3H)，3.70-3.58(m，1H)，3.53-3.41(m，1H)。MS(ES)：m/z＝492.3[M+H]⁺。

制备中间体4B：

向冷却至-78℃的DCM(30mL)中的中间体4A(2.5g，5.09mmol)逐滴添加三氯硼烷(40.7mL，40.7mmol)。将反应在该温度搅拌4小时，然后添加额外的三氯硼烷(2当量)。在额外的2小时后，将反应小心地用NaHCO₃水溶液在低温淬灭。将所得混合物用DCM(3x30mL)萃取，合并的有机层用盐水洗涤，在Na₂SO₄上干燥，过滤然后浓缩至干。将残余物在ISCO柱上提纯，用0-10％MeOH/DCM洗脱，得到中间体4B(1.0g，3.21mmol，63.2％产率)。MS(ES)：m/z＝312.1[M+H]⁺。

制备中间体4C：

向在DCM(20mL)和吡啶(2mL)中的中间体4B(1g，3.21mmol)添加4,4'-(氯(苯基)亚甲基)双(甲氧基苯)(1.31g，3.9mmol)。将反应在室温搅拌4小时。随后将混合物用DCM(60mL)稀释并用水(50mL)洗涤。将有机层用盐水洗涤，在Na₂SO₄上干燥，然后浓缩至干。将残余物在ISCO柱(24g)上提纯，用0-100％EtOAc/己烷洗脱，得到中间体4C(1.96g，3.19mmol，99％产率)。MS(ES)：m/z＝614.2[M+H]⁺。

制备中间体4D：

向中间体4C(1.96g，3.19mmol)的无水DCM(20mL)溶液中添加1.0M1H-咪唑-4,5-二甲腈(2.24mL，2.24mmol)的乙腈溶液，然后逐滴添加3-((双(二异丙基氨基)膦烷基)氧基)丙腈(1.16g，3.83mmol)。将混合物在室温搅拌6小时。随后将混合物用DCM(30mL)稀释，用饱和NaHCO₃水溶液洗涤，在Na₂SO₄上干燥，然后过滤并浓缩至干。将残余物在ISCO柱(40g)上提纯，用0-60％EtOAc/己烷(w/0.5％Et₃N)洗脱，得到中间体4D(2.2g，2.70mmol，85％产率)，其为非对映异构体的混合物。MS(ES)：m/z＝814.3[M+H]⁺。

制备中间体4E：

将中间体4D(732mg，0.90mmol)溶于乙腈(4.0mL)。该溶液经真空浓缩至干(90mbar，32℃水浴)并将该操作重复2次。然后依次添加分子筛(100mg)以及乙腈(2.0mL)。将该溶液密封并在氮气气氛下静置一旁。在另外的烧瓶中，将中间体I-1(492mg，0.90mmol)悬浮于吡啶(4.0mL)中。该悬浮液经真空浓缩(20mbar，32℃水浴)。然后，添加吡啶2,2,2-三氟乙酸盐(261mg，1.350mmol)和小搅拌子，并将混合物与吡啶(4.0mL)共沸额外的2次。在最后一次共沸时，将溶液均质化并将其浓缩至约0.4mL的体积。然后在剧烈搅拌下，添加无水乙腈(6.0mL)以形成浓浆。用正压氮气管线，通过套管添加先前制备的中间体4D。含中间体4D的小瓶经乙腈(1.0mL)冲洗，并添加至混合物中，用于定量转移。然后反应经超声处理30分钟。随后将混合物在室温搅拌2小时。然后添加(E)-N,N-二甲基-N'-(3-硫代-3H-1,2,4-二噻唑-5-基)甲亚酰胺(203mg，0.99mmol)并将反应搅拌10分钟。将黄色溶液小心地真空浓缩(120mbar，36℃水浴)。所得固体用Et₂O洗涤。然后将固体溶于MeOH(2mL)并过滤。向滤液添加Et₂O(15mL)并通过过滤收集所得固体。经分离的材料随后被悬浮于DCM(10mL)中，并添加三乙基硅烷(1440μl，9.0mmol)，然后添加2,2-二氯乙酸(232mg，1.80mmol)。1小时后，将反应浓缩并将残余物研磨，通过过滤收集并用Et₂O(2mL x 3)洗涤。经分离的固体随后在反相ISCO 50g柱上提纯，在12min内用0-90％B的梯度洗脱，起始保持5min，(A：含0.1％乙酸铵的水，B：95％乙腈/5％含0.1％乙酸铵的水)，得到中间体4E(170mg，0.19mmol，21％产率)。MS(ES)：m/z＝880.5[M+H]⁺。

制备中间体4F：

将中间体4E(170mg，0.19mmol)与吡啶(2mL)共沸2次，然后将残余物溶于吡啶(5mL)。随后在剧烈搅拌下，将该溶液滴加至2-氯-5,5-二甲基-1,3,2-二氧杂膦烷2-氧化物(107mg，0.58mmol)的DCM(20mL)溶液中。20分钟后，添加(E)-N,N-二甲基-N'-(3-硫代-3H-1,2,4-二噻唑-5-基)甲亚酰胺(44mg，0.21mmol)，然后添加水(0.1mL)并将混合物另外搅拌30分钟。将所得混合物用DCM(20mL)稀释并用盐水洗涤。有机层经干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。将残余物在反相ISCO 50g柱上提纯，在12分钟内用0-90％B洗脱，起始保持5min(A：含0.1％乙酸铵的水，B：95％乙腈/5％含0.1％乙酸铵的水)，得到中间体4F(42mg，0.05mmol，24％产率)。MS(ES)：m/z＝894.5[M+H]⁺。

实施例4

将中间体4F(41mg，0.05mmol)溶于7N氨/MeOH(3mL)并在50℃搅拌3小时。随后将反应真空浓缩。将残余物溶于3mL的水中，并在手性制备型HPLC上提纯(柱：Xselect RP PrepC18 OBD柱，5μm，19X150mm；流速：20.0mL/min；流动相：A：100mM NH₄OAc(pH 7)；B：乙腈)，得到实施例4的四种非对映异构体。

实施例4-1：(2.2mg)¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ8.92(s，1H)，8.37(d，J＝8.3Hz，1H)，8.25(s，1H)，8.10(d，J＝7.3Hz，1H)，7.75-7.66(m，1H)，6.86(d，J＝19.0Hz，1H)，6.42(d，J＝15.5Hz，1H)，6.19-5.93(m，1H)，5.76-5.52(m，1H)，5.51-5.29(m，1H)，5.25-5.06(m，1H)，4.61-4.46(m，2H)，4.46-4.36(m，1H)，4.28-4.18(m，1H)，4.18-4.10(m，1H)，4.10-3.99(m，1H)。MS(ES)：m/z＝722.2[M+H]⁺。

实施例4-2：(2.7mg)¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ8.57(s，1H)，8.41(d，J＝8.3Hz，1H)，8.25(s，1H)，8.09(d，J＝7.1Hz，1H)，7.73(dd，J＝8.3，7.5Hz，1H)，6.87(d，J＝18.8Hz，1H)，6.40(d，J＝17.0Hz，1H)，5.79(dd，J＝8.5，4.3Hz，1H)，5.66(dd，J＝9.2，4.2Hz，1H)，5.42(br d，J＝17.9Hz，1H)，5.25-5.07(m，1H)，4.65(br d，J＝12.0Hz，1H)，4.52-4.38(m，2H)，4.25(br d，J＝11.2Hz，1H)，4.15-3.99(m，2H)。MS(ES)：m/z＝722.3[M+H]⁺。

实施例4-3：(6.2mg)¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ8.98(s，1H)，8.31-8.18(m，2H)，8.11(d，J＝7.2Hz，1H)，7.70(dd，J＝8.3，7.5Hz，1H)，6.80(d，J＝19.6Hz，1H)，6.42(d，J＝15.8Hz，1H)，6.38-6.18(m，1H)，5.54-5.39(m，1H)，5.37-5.21(m，1H)，5.19-5.08(m，1H)，4.60-4.47(m，2H)，4.45-4.35(m，2H)，4.25-4.09(m，1H)，4.00(br d，J＝10.8Hz，1H)。MS(ES)：m/z＝722.2[M+H]⁺。

实施例4-4：(5.5mg)¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ8.62(s，1H)，8.27-8.22(m，2H)，8.10(d，J＝7.3Hz，1H)，7.70(dd，J＝8.3，7.5Hz，1H)，6.84-6.80(d，1H)，6.43-6.38(d，1H)，6.01-5.88(d，J＝4.4Hz，1H)，5.56-5.38(m，2H)，5.21-5.07(m，1H)，4.65-4.59(m，1H)，4.48-4.34(m，3H)，4.10-3.99(m，2H)。MS(ES)：m/z＝722.3[M+H]⁺。

实施例5

(1S,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-9-氟-18-羟基-17-{4-氧代-1H,4H,5H-咪唑并[2,1-b]嘌呤-1-基}-3,12-二硫烷基-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-3,12-二酮

制备中间体5A：

向含(2R,3R,4S,5R)-2-(2-氨基-6-(4-硝基苯乙氧基)-9H-嘌呤-9-基)-5-(羟基甲基)四氢呋喃-3,4-二醇(J.Org.Chem.2014，79，3311)(5.5g，12.7mmol)的EtOH(50mL)溶液中添加NH₄OAC/AcOH缓冲液(pH 4.5)(50mL，12.72mmol)并将混合物在35℃加热24小时。真空除去约2/3的溶剂，并将反应用固体碳酸氢铵中和至pH 7。添加乙腈(约200mL)，得到产物的沉淀，其为白色固体。过滤固体，并用乙腈冲洗并干燥，得到约2g的产物。将滤液再次浓缩，得到浆液。将该浆液用额外的乙腈(100mL)和少量的MeOH(10mL)稀释，过滤并用乙腈冲洗。将固体合并，得到中间体5A(3.4g，7.45mmol，59％产率)，m/z(557，M+H)。

制备中间体5B：

将含中间体5A(2.4g，5.26mmol)的吡啶(40mL)溶液使用旋蒸仪共沸(2x)，然后在氮气气氛下再次溶于吡啶(40mL)，并用4,4'-氯(苯基)亚甲基)双(甲氧基苯)(2.23g，6.57mmol)以小分量处理。将反应搅拌20小时，然后添加MeOH(2mL)，并将反应在旋蒸仪上浓缩(水浴温度约40℃)。将残余物溶于DCM(100mL)中，并用1.5M KHPO₄水溶液洗涤并浓缩。将残余物在用1％DCM中的TEA预处理的40g ISCO柱上提纯并用1％DCM中的TEA/MeOH(2％至20％)洗脱，得到中间体5B(3.1g，4.09mmol,78％产率)，m/z(759，M+H)。

制备中间体5C：

向含中间体5B(3.8g，5.01mmol)的DMF(15mL)的溶液中添加TBDMS-Cl(0.830g，5.51mmol)然后添加咪唑(1.36g，20.0mmol)。将反应搅拌20小时，用水稀释并用乙酸乙酯(100mL x 2)萃取。合并萃取物，并用水性10％LiCl(2x50mL)和饱和NaCl水溶液洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。将混合物溶于少量的DCM中，并在经含0.25％TEA的DCM预平衡的ISCO330g柱上提纯。由2％至45％DCM(0.25％TEA)/乙酸乙酯梯度，得到中间体5C(1g)，m/z(873，M+H)。

制备中间体5D：

将中间体5C(470mg，0.54mmol))溶于DCM(10mL)中，并在氮气气氛下添加1H-咪唑-4,5-二甲腈(70mg，0.6mmol)，然后添加3-((双(二异丙基氨基)膦烷基)氧基)丙腈(0.36mL，1.08mmol)。将反应搅拌20小时，用额外的DCM(50mL)稀释，倒入分液漏斗并用10％NaHCO₃水溶液(25mL)洗涤。水层经额外的DCM(20mL)萃取，与其它萃取物合并，干燥(Na₂SO₄)，过滤并浓缩。将粗产物溶于少量的DCM并在经0.25％DCM中的TEA平衡的24g ISCO硅胶柱上提纯，并用Teledyne ISCO系统提纯，在15分钟内以0％-50％0.25％DCM中的TEA/乙酸乙酯的梯度洗脱，得到中间体5D(540mg，0.5mmol，92％产率)，其为非对映异构体的混合物，m/z(990/991，M+H)。

制备中间体5E：

将中间体5D(535mg，0.50mmol)的乙腈(5mL)的溶液真空浓缩(35℃水浴)，得到浓稠油状物。将所得油状物从乙腈(5mL)中第二次共沸，并浓缩至浓稠油状物。向该油状物中添加第三份的乙腈(5mL)。将中间体I-1(240mg，0.55mmol)的吡啶(5mL)的溶液真空浓缩(35℃水浴)。用额外部分的吡啶(5mL)重复该操作2次。添加吡啶三氟乙酸盐(110mg，0.0.55mmol)和小的搅拌子，并将化合物与吡啶(5mL)再次共沸。添加乙腈(2.5mL)以形成稍微浑浊的溶液。通过注射器添加该搅拌的、如前所制备的中间体5D的乙腈(5mL)溶液。烧瓶经额外的乙腈(0.5mL)冲洗，用于定量转移。将混合物搅拌3小时，然后通过添加((二甲基氨基-亚甲基)氨基)-3H-1,2,4-二噻唑啉-3-硫酮(130mg，0.63mmol)淬灭。将溶液搅拌1小时，并浓缩至几乎干燥。将黄色残余物溶于最少量的MeOH/DCM(5mL，1/1)并添加约3g的硅藻土。在旋蒸仪上将混合物浓缩至干以吸附粗产物混合物，并且转移至空的ISCO筒上，在ISCO反相色谱系统上使用RediSep C18，150g Gold柱提纯，使用以下条件：流速：40mL/min，溶剂A：水(95％)/ACN(5％)含乙酸铵(0.05％)作为添加剂和溶剂B乙腈(95％)/水含乙酸铵(0.05％)作为添加剂。洗脱梯度为0％B，保持2柱体积，经14柱体积至100％B，得到(2R,3R,4R,5R)-5-(6-苯甲酰氨基-9H-嘌呤-9-基)-2-((((((2R,3R,4R,5R)-2-((双(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(4-(4-硝基苯乙氧基)-1H-咪唑并[2,1-b]嘌呤-1-基)四氢呋喃-3-基)氧基)(2-氰基乙氧基)硫代磷酰基)氧基)甲基)-4-氟四氢呋喃-3-基膦酸氢酯(400mg，0.277mmol，55.7％产率)。m/z(1442，M+H)。向中间体添加二氯甲烷(5mL)，然后添加MeOH(0.5mL)并最后滴加2,2-二氯乙酸(0.120mL，1.25mmol)。将反应用吡啶(160μL，2.0mmol)淬灭并真空浓缩(约40℃)。将所得油状物与ACN(2x20mL)共沸，然后再次溶于约2mL的ACN(95％)/H₂O(5％，0.1％NH₄OAc)混合物中。将溶液负载至ISCO Gold C-18 150g反相柱上，并从0％B至100％B(溶剂A(90％水，10％CH₃CN，5mmol NH₄OAc)洗脱，溶剂B(10％水，90％CH₃CN，5mmol NH₄OAc)。将含一对所需非对映异构体的级分收集浓缩，得到中间体5E(220mg，0.19mmol，70％产率)，m/z(1140，M+H)。

制备中间体5F：

将中间体5E(465mg，0.41mmol)溶于无水吡啶(10mL)中，并在旋蒸仪上浓缩。将油状物再次溶于额外的无水吡啶(10mL)中，并再次浓缩至油状物。再次重复该操作一次，并将所得油状物再次溶于无水吡啶(10mL)中，并保持在氮气气氛下。在氮气气氛下，将吡啶(15mL)中的2-氯-5,5-二甲基-1,3,2-二氧杂膦烷2-氧化物(225mg，1.2mmol)在冰/NaCl泥浴中冷却至-5℃。在30分钟内，向该冷却的溶液中通过注射器添加(缓慢滴加)中间体5F的吡啶溶液。将反应另外搅拌30分钟，温热至室温(20min)并添加(E)-N,N-二甲基-N'-(3-硫代-3H-1,2,4-二噻唑-5-基)甲亚酰胺(105mg，0.5mmol)，并将混合物搅拌30分钟。随后将反应用水(0.10mL)处理，搅拌30分钟。然后真空浓缩。将残余物溶于ACN(3mL)中，并在反相C-18，50g Gold ISCO柱上提纯。溶剂A 95％水/5％ACN/0.01mM NH₄OAc；溶剂B 95％ACN/5％水/0.01mM NH₄OAc。梯度：在0％B保持3柱体积，并经10柱体积0％B至50％B。收集含有所有四种非对映异构体的级分，合并，并冻干，得到中间体5F(400mg，85％产率)，m/z(1154，M+H)，为非对映异构体的混合物。

制备中间体5G：

将含吡啶(1mL)中的硝基甲烷(400μl，7.42mmol)的小瓶用DBU(784μl，5.20mmol)处理并搅拌10分钟。向该DBU溶液中添加中间体5F(400mg，0.347mmol)溶于吡啶(1mL)中的溶液。将反应在30℃搅拌10小时，然后浓缩至浓稠的油状物。将该油状物溶于7N MeOH中的氨溶液(2mL，14mmol)并在密封小瓶中、在35℃加热12小时。随后将反应经浓缩至干。将残余物溶于最少量的MeOH并在反相C-18，50g HP Gold ISCO柱上提纯，所述提纯使用溶剂A(95％水/5％ACN(添加0.01M NH₄OAc))和溶剂B(95％ACN/5％水(添加0.01M NH₄OAc))。梯度：在0％B保持3柱体积，经10柱体积至50％B。收集含所需化合物的级分并浓缩，得到中间体5G(150mg，0.177mmol，51.1％产率)，m/z(847，M+H)，为非对映异构体的混合物。

实施例5

将来自中间体5G(200mg，0.236mmol)的非对映异构体在吡啶(2mL)中的混合物用三乙胺三氢氟酸盐(0.385mL，2.362mmol)处理。将反应在35℃加热20小时，然后通过0.45微米尼龙过滤器过滤并浓缩。将残余物溶于最少量的MeOH中，并在反相C-18，50g HP GoldISCO柱上提纯，所述提纯使用溶剂A 95％水/5％ACN(添加0.01M NH₄OAc)和溶剂B 95％ACN/5％水(添加0.01M NH₄OAc)。梯度：在0％B保持3柱体积，经10柱体积至50％B。收集含所需化合物的级分，并冻干，得到粗制实施例5，为一种主要的非对映异构体以及其他次要的异构体。将粗制实施例5进一步通过制备型LC/MS用以下条件提纯：柱：Agilent Bonus RP，21.2x200mm，5-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈：含20-mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈：含20-mM乙酸铵的水；梯度：经20分钟0-60％B，然后在100％B保持4分钟；流速：20mL/min。合并含所需产物的级分，并通过离心蒸发干燥，得到实施例5(60mg，0.078mmol，33％产率)，m/z(733，M+H)。保留时间：0.43min(ACQUITYBEH C18 1.7μm；流动相A：含0.05％TFA的水；流动相B：含0.05％TFA的乙腈。温度：50℃；梯度：经1.5分钟2％B至98％B，然后在98％B保持0.3分钟；流速：0.8mL/min；检测：MS和UV(220nm)。测量的质量：733.23。¹H NMR(400MHz，氧化氘)δ8.27-8.25(m，1H)，8.18-8.16(m，1H)，8.05-8.02(m，1H)，7.81-7.78(m，1H)，7.22-7.20(m，1H)，6.39-6.30(m，2H)，5.61-5.46(m，1H)，5.04-4.92(m，2H)，4.55-4.45(m，4H)，4.36-4.29(m，1H)，4.18-4.11(m，2H)。

实施例6

5-[(1R,6R,8S,9S,10S,15R,17R,18R)-17-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-18-氟-9-羟基-3,12-二氧代-3,12-二硫烷基-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-8-基]-1H-吡唑-3-甲酰胺

制备中间体6A：

向烧瓶中添加二苯甲酸(2S,3R,4R,5R)-2-乙酰氧基-5-((苯甲酰基氧基)甲基)四氢呋喃-3,4-二基酯(40g，79mmol)和无水二氯甲烷(80mL)。向所得澄清溶液中添加三甲基甲硅烷基氰化物(14.9mL，111mmol)并将混合物在冰水浴中冷却。在30分钟内，向冷却的溶液中添加BF₃.OEt₂(10.1mL，79mmol)。将所得深色溶液温热至室温并搅拌20小时。随后将反应混合物小心地倒入冰冷的碳酸钠(6.7g，80mmol)的水(500mL)溶液中。向所得乳液添加EtOAc(400mL)，并将混合物搅拌然后通过硅藻土垫过滤。将双相的滤液转移至分液漏斗中。分离各相。水层经EtOAc(2x200mL)萃取。将合并的有机物用饱和水性碳酸氢钠洗涤，然后用盐水洗涤，随后经硫酸钠干燥并浓缩。所得棕色油状物经硅胶色谱使用0-50％己烷中的EtOAc提纯。得到中间体6A(29.9g，80％产率)，其为无色固体。LCMS：m/z 472.2(M+H)；保留时间：1.11min；LCMS分析方法A。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.17-8.11(m，2H)，8.00-7.91(m，4H)，7.65-7.53(m，3H)，7.51-7.35(m，6H)，6.02(t，J＝4.8Hz，1H)，5.87(t，J＝5.5Hz，1H)，4.99(d，J＝4.4Hz，1H)，4.80-4.69(m，2H)，4.67-4.56(m，1H)。

分析LCMS方法A

Waters Acquity UPLC BEH C18(2.1x50mm)，1.7微米；溶剂A＝100％含0.05％TFA的水；溶剂B＝100％含0.05％TFA的乙腈；梯度＝经1分钟2-98％B，然后在98％B保持0.5分钟；流速：0.8mL/min；检测：UV于220nm。

制备中间体6B：

以下操作自Schneller，Synthesis 1991，747进行调整。向烧瓶中添加硼氢化钠(3.60g，95mmol)和无水THF(25mL)，并将所得悬浮液在冰水浴中冷却。向所得冷却的悬浮液中滴加TFA(6.84mL，89mmol)，然后滴加中间体6A(29.9g，63.4mmol)的THF(75mL)溶液。将所得反应混合物温热至室温并搅拌20小时。随后将反应混合物在冰水浴中冷却并通过滴加水淬灭。浓缩所得混合物以除去THF。向所得残余物添加水(200mL)并将混合物用DCM(2x250mL)萃取。合并的有机物用水(2x250mL)和盐水(1x100mL)洗涤，然后经硫酸钠干燥并浓缩。该粗制中间体6B(约30g)被原样用于下一步骤中。LCMS：m/z 476.2(M+H)，保留时间：0.88min；LCMS分析方法A。

制备中间体6C：

向粗制中间体6B(29.3g，61.6mmol)添加无水四氢呋喃(200mL)、三乙胺(15.46mL，111mmol)和乙酸酐(9.30mL，99mmol)以及DMAP(0.075g，0.616mmol)。将所得反应混合物在室温搅拌5小时。将反应混合物在冰-水浴中冷却，然后用甲醇淬灭并浓缩。将残余物溶于甲苯(750mL)，用1N HCl(2x200mL)、饱和碳酸氢钠(2x200mL)和盐水(1x200mL)洗涤。有机层经硫酸钠干燥并浓缩。将残余物经硅胶色谱提纯，使用0-100％己烷中的EtOAc，得到中间体6C(14.66g，46.0％产率)。LCMS：m/z 518.2(M+H)。保留时间：1.02min；LCMS分析方法A。¹H NMR(499MHz，氯仿-d)δ8.14-8.10(m，2H)，8.00-7.93(m，4H)，7.63-7.46(m，5H)，7.41-7.35(m，4H)，6.04(br t，J＝5.4Hz，1H)，5.71(dd，J＝5.7，4.1Hz，1H)，5.37(dd，J＝7.2，5.9Hz，1H)，4.76(dd，J＝11.9，2.9Hz，1H)，4.67-4.50(m，2H)，4.50-4.34(m，1H)，3.69-3.56(m，2H)，1.87(s，3H)。

制备中间体6D：

向中间体6C(4.64g，8.97mmol)添加甲醇钠(0.5M，于MeOH中，55.0mL，27.5mmol)并将反应混合物在室温搅拌1.5小时。用1N HCl将反应混合物中和至pH约6.5，然后真空浓缩。将粗物质再次溶于水(50mL)中，并用DCM(25mL x 2)洗涤。水相经真空浓缩，然后溶于无水EtOH中，以沉淀出盐然后过滤。将滤液浓缩至淡黄色油状物，然后与甲苯(3x20mL)共蒸发，并真空干燥，得到中间体6D(7.5g)，将其用于下一步骤无需进一步提纯。LCMS：m/z 206.1(M+H)。保留时间：0.27min；LCMS分析方法A。

制备中间体6E：

在氮气下，将粗制中间体6D(4.5g，11.67mmol)悬浮于DMSO(23.4mL)中并添加粉末化的KOH(0.786g，14.01mmol)，并将混合物在室温搅拌15分钟。随后将反应混合物冰-水浴中冷却至15℃，并滴加(氯甲基)苯(1.61mL，14.0mmol)。在冰/水浴中，在15℃搅拌反应混合物过夜，然后倒在冰-水上，并搅拌30分钟。混合物经甲苯(100mL x 3)萃取，且有机相经MgSO₄干燥，过滤并浓缩至淡黄色油状物。将粗物质在ISCO柱(80g)上提纯，并用0-80％DCM-EtOAc梯度洗脱，得到中间体6E(4.0g，8.41mmol，72.0％产率)。LCMS：m/z 476.3(M+H)。保留时间：1.07min；LCMS分析方法A。¹H NMR(499MHz，DMSO-d₆)δ7.80(t，J＝5.8Hz，1H)，7.36-7.27(m，15H)，4.56-4.47(m，6H)，4.04(br d，J＝4.6Hz，2H)，3.95-3.88(m，2H)，3.84-3.77(m，1H)，3.57-3.42(m，2H)，3.28-3.22(m，1H)，3.12(dt，J＝13.8，6.0Hz，1H)，1.76(s，3H)。

制备中间体6F：

将乙酸钠(6.90g，84mmol)和中间体6E(4g，8.41mmol)在DCM(112mL)中的混合物冷却至0℃。用气态N₂O₄/NO₂向反应混合物中通气约20分钟，直至反应混合物一直保持黄色。在0℃继续搅拌2小时。随后将反应混合物倒入冰水(200mL)中，并用DCM(200mL x 2)萃取。随后用冰的饱和NaHCO₃(200mL)洗涤有机层，然后用冰冷水(200mL)洗涤，并经MgSO₄干燥。将混合物过滤并将滤液浓缩。在冰水浴中，将材料真空干燥1小时，然后溶于冷的乙醚(28mL)中。添加KOH(9M，15mL，135mmol)冷的水溶液并将反应混合物在0℃搅拌45分钟。然后添加10mL的冷的乙醚和5mL的冷水，并继续搅拌15分钟。随后用冷的乙醚(50mL)和冷水(100mL)稀释反应混合物。分离有机相，并用冷水(50mL)洗涤。将有机相短暂剧烈旋过KOH片，然后倒入预先用干醚润湿的无水MgSO₄上，然后快速过滤到含有丙酸甲酯(0.919g，10.93mmol)的烧瓶中。将反应混合物在室温搅拌30分钟。随后用EtOAc(100mL)稀释反应混合物，依次用水和盐水洗涤并在Na₂SO₄上干燥，过滤并浓缩，得到粗制中间体6F(4.3g，97％产率)，将其用于下一步骤无需进一步提纯。LCMS：m/z 529.1(M+H)，保留时间：1.09min；LCMS分析方法A。¹H NMR(499MHz，氯仿-d)δ7.39-7.28(m，13H)，7.25-7.21(m，2H)，6.59(s，1H)，5.22(d，J＝2.4Hz，1H)，4.69-4.62(m，3H)，4.61-4.54(m，1H)，4.48(d，J＝11.7Hz，2H)，4.34(d，J＝11.7Hz，1H)，4.28(dt，J＝7.6，2.2Hz，1H)，4.13(dd，J＝7.5，4.4Hz，1H)，3.93(s，3H)，3.92(d，J＝2.6Hz，1H)，3.87(dd，J＝10.7，2.7Hz，1H)，3.57(dd，J＝10.7，1.8Hz，1H)。

制备中间体6G₁和6G₂：

向冷却至15℃的中间体6F(4.45g，8.41mmol)的THF(34mL)溶液中添加NaH(0.51g，12.62mmol)。10分钟后，滴加SEM-Cl(2.24mL，12.62mmol)并将反应混合物温热至室温1小时。随后用水处理反应混合物然后浓缩。将粗物质用DCM稀释，并依次用NH₄Cl和盐水洗涤。有机相经MgSO₄干燥，过滤并真空浓缩，得到无色油状物，其在ISCO 80g GOLD柱上提纯，用0-40％EtOAc-己烷洗脱，得到中间体6G1(0.52g，0.789mmol，9.38％产率)。LCMS：m/z 659.3(M+H)。保留时间：1.31min；LCMS分析方法A。¹H NMR(499MHz，氯仿-d)δ7.35-7.24(m，15H)，6.88(s，1H)，5.86-5.71(m，2H)，5.15(d，J＝5.0Hz，1H)，4.65-4.49(m，6H)，4.32(dt，J＝5.7，4.0Hz，1H)，4.13(t，J＝5.1Hz，1H)，4.05-4.00(m，1H)，3.84(s，3H)，3.71-3.64(m，1H)，3.62-3.54(m，3H)，0.88(ddd，J＝9.0，7.3，0.8Hz，2H)，-0.06(s，8H)和中间体6G2(3.2g，4.86mmol，57.8％产率)。LCMS：m/z 659.3(M+H)，保留时间：1.29min；LCMS分析方法A。¹HNMR(499MHz，氯仿-d)δ7.35-7.24(m，13H)，7.24-7.20(m，2H)，6.75(s，1H)，5.61(d，J＝11.0Hz，1H)，5.51(d，J＝10.8Hz，1H)，5.23(d，J＝6.4Hz，1H)，4.64-4.51(m，4H)，4.51-4.44(m，2H)，4.30(q，J＝4.0Hz，1H)，4.12-4.02(m，2H)，3.62-3.49(m，3H)，0.86-0.80(m，2H)，-0.05(s，7H)。

制备中间体6H：

将中间体6G2(2.9g，4.40mmol)的乙醇(58.7mL)和环己烯(29.3mL)的溶液用氮气冲洗。将PdOH₂(0.618g，0.880mmol)添加至反应混合物。将反应混合物加热回流(80℃)3小时，然后将硅藻土添加至反应混合物中，并将混合物过滤。滤饼用EtOH洗涤并将滤液浓缩。粗产物在12g ISCO柱上提纯并用0-100％的梯度冲洗；溶剂A＝DCM以及溶剂B＝20％DCM中的MeOH，得到中间体6H(1.32g，3.40mmol，77％产率)。LCMS：m/z 389.1(M+H)，保留时间：0.77min；LCMS分析方法A。¹H NMR(499MHz，氯仿-d)δ6.88(s，1H)，5.75(d，J＝11.1Hz，1H)，5.55(d，J＝11.1Hz，1H)，4.98(d，J＝7.0Hz，1H)，4.38-4.24(m，1H)，4.15-4.07(m，2H)，3.94(s，3H)，3.93-3.89(m，1H)，3.76(ddd，J＝12.1，8.3，3.5Hz，1H)，3.70-3.61(m，1H)，3.59(d，J＝5.0Hz，1H)，2.87(d，J＝3.8Hz，1H)，2.58(dd，J＝8.3，4.5Hz，1H)，0.99-0.83(m，2H)，-0.01(s，9H)。

制备中间体6I：

将中间体6H(1.32g，3.40mmol)溶于吡啶(5mL x 3)中，并在旋蒸仪上浓缩至干。添加DMTr-Cl(1.900g，5.61mmol)、MAP(0.062g，0.510mmol)和吡啶(68.0mL)，并将反应混合物在室温搅拌过夜。随后将反应混合物用甲醇(1mL)处理然后浓缩至干。将残余物溶于DCM并用饱和水性碳酸氢钠溶液洗涤。有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，得到粗产物，将其在ISCO柱(40g)上提纯，用0-100％EtOAc-己烷(含0.5％TEA)的梯度洗脱，得到中间体6I(1.75g，2.53mmol，74.6％产率)。LCMS：m/z 691.3(M+H)。保留时间：1.13min；LCMS分析方法A。¹H NMR(499MHz，氯仿-d)δ7.49-7.43(m，2H)，7.39-7.33(m，4H)，7.33-7.29(m，2H)，7.27-7.20(m，1H)，6.97(s，1H)，6.88-6.83(m，4H)，5.62(s，2H)，4.99(d，J＝6.5Hz，1H)，4.25(dd，J＝5.6，3.8Hz，1H)，4.21-4.15(m，2H)，3.95(s，3H)，3.82(s，6H)，3.72-3.62(m，2H)，3.42-3.32(m，2H)，1.03-0.94(m，1H)，0.92-0.82(m，2H)，0.02(s，9H)。

制备中间体6J1和6J2：

向搅拌中的中间体6I(1.75g，2.53mmol)和1H-咪唑(0.517g，7.60mmol)的无水DMF(30mL)溶液中逐滴添加无水DMF(30mL)中的叔丁基氯二甲基硅烷(0.458g，3.04mmol)。将反应混合物在室温搅拌过夜。随后，将反应混合物用DCM(200mL)稀释并用水洗涤，然后依次用10％LiCl以及饱和NaHCO₃和饱和NaCl水溶液洗涤，并在Na₂SO₄上干燥。过滤反应混合物并将滤液浓缩。将粗物质在ISCO 24g Gold柱上提纯，用0-50％梯度洗脱；溶剂A＝0.5％己烷中的TEA；溶剂B＝0.5％乙酸乙酯中的TEA，在20％保持8分钟。首先洗脱中间体6J1(0.34g，24％产率)。¹H NMR(499MHz，氯仿-d)δ7.44(d，J＝7.3Hz，2H)，7.32(dd，J＝9.0，2.1Hz，4H)，7.29-7.24(m，2H)，7.24-7.15(m，1H)，6.89(s，1H)，6.84-6.80(m，4H)，5.72(d，J＝10.8Hz，1H)，5.55(d，J＝11.0Hz，1H)，5.03(d，J＝6.8Hz，1H)，4.44(dd，J＝6.8，5.3Hz，1H)，4.21-4.05(m，2H)，3.93(s，3H)，3.80(d，J＝0.9Hz，6H)，3.65-3.55(m，2H)，3.40(dd，J＝10.4，3.1Hz，1H)，3.26(dd，J＝10.3，4.0Hz，1H)，2.65(d，J＝3.8Hz，1H)，0.89(s，2H)，-0.02(s，9H)。其次洗脱中间体6J2(0.75g，24％产率)。¹H NMR(499MHz，氯仿-d)δ7.44(dd，J＝8.6，1.3Hz，2H)，7.34(dd，J＝9.1，2.0Hz，4H)，7.31-7.26(m，2H)，7.26-7.20(m，1H)，6.96(s，1H)，6.84(dd，J＝8.9，0.7Hz，4H)，5.74(d，J＝11.0Hz，1H)，5.66(d，J＝11.0Hz，1H)，5.03(d，J＝6.2Hz，1H)，4.28-4.23(m，1H)，4.23-4.17(m，1H)，4.06(q，J＝3.4Hz，1H)，3.94(s，3H)，3.81(d，J＝0.8Hz，6H)，3.63(td，J＝8.2，1.5Hz，2H)，3.39(dd，J＝10.7，3.3Hz，1H)，3.19(dd，J＝10.7，4.3Hz，1H)，2.85(d，J＝7.3Hz，1H)，0.89(s，2H)，0.01--0.01(m，9H)。

制备中间体6K：

将中间体6J1(0.92g，1.143mmol)与CH₃CN(2x5mL)共蒸发，并溶于CH₂Cl₂(23mL)中。将1H-咪唑-4,5-二甲腈(0.135g，1.14mmol)作为CH₃CN(5mL)的溶液添加，然后在氮气下，通过注射器滴加3-((双(二异丙基氨基)膦烷基)氧基)丙腈(0.726mL，2.285mmol)。在氮气气氛下，将反应在室温搅拌过夜。用EtOAc(100mL)稀释反应混合物，用饱和NaHCO₃水溶液(25mL)和盐水(25mL)洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤，并真空浓缩。将粗产物溶于少量的20％乙酸乙酯/己烷中，并在ISCO 24g柱上提纯，用0-30％梯度洗脱：溶剂A＝0.5％己烷中的TEA；溶剂B＝0.5％乙酸乙酯中的TEA，得到中间体6K(1.0g，87％产率)，其为白色固体。

制备中间体6L：

将中间体I-1(16.95mg，0.030mmol)与吡啶(2x3mL)共沸，然后与MeCN(2x3mL)共沸。将混合物溶于DMF(0.5mL)和乙腈(4mL)中。向该溶液中一次性添加与MeCN预-共沸的中间体6K(30mg，0.030mmol)，并真空干燥过夜，为固体，然后添加吡啶2,2,2-三氟乙酸盐(5.76mg，0.030mmol)。在氮气气氛下，将反应混合物在室温搅拌1小时。添加(E)-N,N-二甲基-N'-(3-硫代-3H-1,2,4-二噻唑-5-基)甲亚酰胺(6.43mg，0.031mmol)，并在氮气气氛下将反应混合物在室温搅拌20分钟。将反应混合物通过硅藻土的小垫过滤，且用EtOAc洗涤滤饼。浓缩滤液然后再次溶于EtOAc中，用10％LiCl水溶液(3x10mL)洗涤，然后用盐水洗涤。有机相经干燥(Na₂SO₄)，并真空浓缩至黄色残余物。将残余物与MeCN共沸数次然后再次溶于DCM中，并浓缩。将粗物质溶于DCM(4mL)中，并用2,2-二氯乙酸(0.012mL，0.149mmol)逐滴处理。将反应混合物搅拌30分钟，然后用过量的吡啶淬灭，随后真空浓缩。将残余物与MeCN共沸至淡黄色固体，用乙醚将其洗涤数次并干燥过夜，得到中间体6L(20mg，62.6％)，为两种非对映异构体的混合物。LCMS，[M+H]⁺＝1071。

制备中间体6M：

将中间体6L(55mg，0.051mmol)与无水吡啶(5mL x 2)共沸，然后溶于无水吡啶(10mL)和THF(40.0mL)中。在快速搅拌下，向该溶液中一次性添加2-氯-5,5-二甲基-1,3,2-二氧杂膦烷2-氧化物(28.4mg，0.154mmol)，并将溶液搅拌30分钟。将反应用(E)-N,N-二甲基-N'-(3-硫代-3H-1,2,4-二噻唑-5-基)甲亚酰胺(12.65mg，0.062mmol)处理然后在室温搅拌20分钟。随后将混合物过滤，并用水(0.050mL，2.76mmol)处理，并在室温搅拌30分钟。过滤混合物，并用饱和水性碳酸氢钠淬灭，然后浓缩。将所得残余物再次溶于EtOAc中，并用饱和水性碳酸氢钠洗涤。水溶液经乙酸乙酯(3x5mL)萃取3次。将合并的有机层真空浓缩至黄色固体，其在ISCO 4g硅胶柱上提纯：溶剂A＝DCM；溶剂B＝20％DCM中的MeOH，得到中间体6M(50mg，90％)，为四种非对映异构体的混合物。

实施例6

将非对映异构体的混合物，中间体6M(50mg，90％)悬浮于MeOH(2mL)和27％NH₄OH(2mL)中，并在55℃搅拌2小时。随后，反应混合物经浓缩并与甲苯共沸，得到灰白色固体，用乙醚(4x4mL)将其洗涤。将固体真空干燥过夜，然后用20％DCM中的TFA处理并在室温搅拌45分钟。将反应混合物浓缩至干，然后依次与MeOH(4x4mL)和乙醚(2x5mL)共沸，形成浅黄色固体。将固体收集，用乙醚(4x2mL)洗涤然后溶于MeCN中，并浓缩至干。添加三乙胺三氢氟酸盐(0.4mL，2.46mmol)，并将反应混合物在45℃加热1小时。随后将反应混合物用乙酸铵缓冲液(2M约10mL)中和至约pH 6.5，然后冻干至干。使用以下条件经制备型LC/MS提纯粗物质：柱：Agilent Bonus RP，200mm x 21.2mm，5-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈：含20-mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈：含20-mM乙酸铵的水；梯度：在0％B保持6分钟，经20分钟0-25％B，然后在100％B保持4分钟；流速：20mL/min；柱温：25℃。MS信号触发级分收集。将含所需产物的级分合并，并通过离心蒸发干燥，得到四种非对映异构体：实施例6-1、6-2、6-3和6-4。

实施例6-1：0.7mg。分析LCMS方法B：测量的质量：667.9；保留时间：1.92min。

实施例6-2：2.6mg。分析LCMS方法B：测量的质量：668.88；保留时间：1.96min。

实施例6-3：2.2mg。分析LCMS方法B：测量的质量：668.93；保留时间：2.09min。

实施例6-4：1mg。分析LCMS方法B：测量的质量：668.88；保留时间：2.2min。

分析LCMS方法B

柱：Agilent Bonus RP，2.1mm x 50mm，1.8μm颗粒；流动相A：含20mM乙酸铵的水；流动相B：乙腈。温度：50℃；梯度：在0％B保持1min，然后经4分钟0％B至100％B，然后在100％B保持0.75分钟；流速：1mL/min；检测：MS和UV(220nm)。

实施例7

1-[(1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-17-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-9,18-二氟-3,12-二羟基-3,12-二氧代-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-8-基]-1H-1,2,3-苯并三唑-4-甲酰胺

制备中间体7A：

将(2R,3R,4R,5R)-5-(6-苯甲酰氨基-9H-嘌呤-9-基)-2-((双(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-4-氟四氢呋喃-3-基(2-氰基乙基)二异丙基亚磷酰胺(Sigma-Aldrich，5g，5.71mmol)与5mL的无水乙腈共沸。然后添加0.2g的分子筛和乙腈(15mL)。向该混合物中添加丙-2-烯-1-醇(0.663g，11.42mmol)并将混合物在室温搅拌30分钟。向反应混合物中添加1H-四唑(0.800g，11.42mmol)，并将反应在室温另外搅拌30分钟。随后向反应中添加2-氢过氧化-2-((2-氢过氧化丁烷-2-基)过氧基)丁烷(2.40g，11.42mmol)并继续搅拌30分钟。随后将反应通过硅藻土过滤并将滤液浓缩。将残余物溶于DCM(15mL)中，并滴加2,2-二氯乙酸(4.42g，34.2mmol)。搅拌30分钟后，将反应混合物用饱和NaHCO₃水溶液处理，然后用DCM(30mL x 3)萃取。合并的有机层经Na₂SO₄干燥并真空浓缩。将残余物在硅胶上提纯(0-10％MeOH/DCM)，得到中间体7A(2.86g，5.23mmol，92％产率)。MS(ES)：m/z＝547.15[M+H]⁺。

制备中间体7B和中间体8A：

将中间体7A(376mg，0.688mmol)和1H-四唑(96mg，1.376mmol)在小烧瓶中共混，并与5mL的无水乙腈共沸3次。然后在氮气下添加分子筛(300mg)和乙腈(10mL)并将该混合物(I)在室温搅拌30分钟。将小瓶中的中间体4D(560mg，0.688mmol)与2mL的乙腈共沸3次，然后添加100mg的分子筛和乙腈(2mL)并将该混合物(II)在室温搅拌30分钟。在N₂正压下，将混合物II滴加至混合物I中。为了达到完整的转移，将含II的小瓶用1mL的ACN冲洗并添加至混合物I中。将反应在室温搅拌60分钟。将一半的反应混合物(6.5mL)通过注射器转移至含搅拌子的20mL小瓶中，并添加2-氢过氧化-2-((2-氢过氧化丁烷-2-基)过氧基)丁烷(145mg，0.688mmol)，并使所得混合物在室温搅拌30分钟。然后通过硅藻土将其过滤并将滤液浓缩。将残余物溶于DCM(5mL)中，并滴加2,2-二氯乙酸(266mg，2.064mmol)。搅拌30分钟后,用饱和NaHCO₃水溶液碱化反应混合物，然后用DCM(30mL x 3)萃取。合并的有机层经Na₂SO₄干燥并真空浓缩。将残余物在硅胶上提纯(40g)，用0-10％MeOH/DCM洗脱，得到中间体7B(204mg，0.206mmol，29.9％产率)。MS(ES)：m/z＝973.7[M+H]⁺。向另一半的混合物添加(E)-N,N-二甲基-N'-(3-硫代-3H-1,2,4-二噻唑-5-基)甲亚酰胺(85mg，0.413mmol)，并且在室温将其搅拌30分钟。然后反应混合物通过硅藻土过滤并将滤液浓缩。将残余物溶于DCM(5mL)中，并滴加2,2-二氯乙酸(266mg，2.064mmol)。搅拌30分钟后，将反应混合物用饱和NaHCO₃水溶液碱化，然后用DCM(30mL x 3)萃取。合并的有机层经Na₂SO₄干燥并真空浓缩。将残余物在硅胶上提纯(40g)，用0-10％MeOH/DCM洗脱，得到中间体8A(178mg，0.171mmol，25％产率)。MS(ES)：m/z＝989.3[M+H]⁺。

制备中间体7C：

向中间体7B(204mg，0.210mmol)的丙酮(5mL)溶液中添加碘化钠(314mg，2.10mmol)。将所得黄色溶液加热至50℃3小时。随后除去溶剂，并将残余物在硅胶柱(24g)上提纯，用0-20％MeOH/DCM洗脱，得到中间体7C(130mg，0.139mmol，67％产率)。MS(ES)：m/z＝933.5[M+H]⁺。

制备中间体7D：

将中间体7C(130mg，0.139mmol)用2mL的吡啶共沸。然后将其溶于无水吡啶(100mL)，并在N₂气氛下添加1-(均三甲苯基磺酰基)-3-硝基-1H-1,2,4-三唑(206mg，0.697mmol)。将反应在室温搅拌60小时，然后真空除去溶剂。向残余物中添加10mL的水，并用DCM(15mL x 3)将其萃取。合并的有机层经干燥，然后浓缩。将残余物在二氧化硅柱(24g)上提纯，用0-10％MeOH/DCM洗脱，得到中间体7D(82mg，0.090mmol，65％)。MS(ES)：m/z＝915.4[M+H]⁺。

实施例7

将中间体7D(82mg，0.090mmol)溶于4mL的3.5N MeOH并加热至50℃2小时。随后在37℃将反应继续过夜，然后浓缩。将残余物溶于3mL的水并经制备型HPLC提纯(柱：XselectRP Prep C18 OBD柱，5μm，19X150mm；流速：20.0mL/min；流动相：A：100mM NH₄OAc(pH 7)；B：乙腈)，得到实施例7(27mg)。¹H NMR(499MHz，甲醇-d₄)δ8.59(s，1H)，8.28-8.21(m，2H)，8.12(dd，J＝7.2，0.7Hz，1H)，7.71(dd，J＝8.4，7.3Hz，1H)，6.85(d，1H)，6.43(d，1H)，6.06-5.96(d，J＝4.3Hz，1H)，5.49-5.32(m，2H)，5.14-4.98(m，1H)，4.51-4.43(m，2H)，4.38(br d，J＝9.4Hz，1H)，4.30-4.23(m，1H)，4.19-4.13(m，1H)，4.11-4.06(m，1H)。MS(ES)：m/z＝690.3[M+H]⁺。

实施例8

1-[(1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-17-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-9,18-二氟-3,12-二羟基-3-氧代-12-亚硫烷基-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-8-基]-1H-1,2,3-苯并三唑-4-甲酰胺

制备中间体8B：

依据在制备中间体7C中描述的操作，由中间体8A(178mg，0.180mmol)得到中间体8B(92mg，0.097mmol，54％产率)。MS(ES)：m/z＝949.4[M+H]⁺。

制备中间体8C：

依据在制备中间体7D中描述的操作，由中间体8B(92mg，0.097mmol)得到中间体8C(42mg，0.045mmol，46％产率)。MS(ES)：m/z＝931.4[M+H]⁺。

实施例8

将中间体8C(42mg，0.045mmol)溶于2mL的7N MeOH，并加热至50℃5小时。然后将反应混合物浓缩。将残余物溶于3mL的水并经制备型HPLC提纯(柱：Xselect RP Prep C18 OBD柱，5μm，19X150mm；流速：20.0mL/min；流动相：A：100mM NH₄OAc(pH 7)；B：乙腈)，得到实施例8-1(4.2mg)¹H NMR(499MHz，甲醇-d₄)δ8.95(s，1H)，8.24(s，1H)，8.20-8.18(m，1H)8.11(dd，J＝7.3，0.7Hz，1H)，7.80-7.62(m，1H)，6.80(d，J＝19.8Hz，1H)，6.43(d，1H)，40-6.23(m，1H)，5.55-5.37(m，1H)，5.37-5.17(m，1H)，5.10-4.98(m，1H)，4.56-4.51(m，1H)，4.51-4.43(m，1H)，4.43-4.39(m，1H)，4.35-4.25(m，1H)，4.19-4.10(m，1H)，4.10-3.98(m，1H)。MS(ES)：m/z＝706.2[M+H]⁺和实施例8-2(6.1mg)¹H NMR(499MHz，甲醇-d₄)δ8.62(s，1H)，8.30-8.22(s，1H)，8.22-8.17(m，1H)，8.11(d，J＝7.1Hz，1H)，7.76-7.65(m，1H)，6.83(d，J＝19.2Hz，1H)，6.41(d，J＝17.2Hz，1H)，6.12-5.91(m，1H)，5.61-5.32(m，2H)，5.10-4.98(m，1H)，4.67-4.57(m，1H)，4.49-4.35(m，2H)，4.29-4.19(m，1H)，4.14-3.99(m，2H)。MS(ES)：m/z＝706.2[M+H]⁺。

实施例9

1-[(1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-9,18-二氟-3,12-二羟基-17-{3H-咪唑并[2,1-f]嘌呤-3-基}-3,12-二氧代-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-8-基]-1H-1,2,3-苯并三唑-4-甲酰胺

将实施例7(10mg，0.015mmol)溶于2mL的NaOAc/HOAc缓冲液(pH4-4.5)中，然后添加2-氯乙醛(5.25mg，0.044mmol，65％按重量计，于水中)。将混合物加热至30℃48小时。将混合物过滤，然后经制备型HPLC提纯(柱：Agilent Bonus RP 21.2x100mm，5-μm；流速：20.0mL/min；流动相：A：20mM NH₄OAc；B：乙腈)，得到实施例9(8.1mg)。MS(ES)：m/z＝714.0[M+H]⁺。保留时间2.04min。(柱：Agilent Bonus RP，2.1mm x 50mm，1.8μm颗粒；流动相A：含20mM乙酸铵的水；流动相B：乙腈。温度：50℃；梯度：在0％B保持1min，然后经4分钟0％B至100％B，然后在100％B保持0.75分钟；流速：1mL/min)。

实施例10

(1S,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-9-氟-12,18-二羟基-3-硫烷基-17-{3H-[1,2,4]三唑并[3,2-f]嘌呤-3-基}-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-3,12-二酮

制备中间体10A：

向5mL的MeOH中的(2R,3R,4S,5R)-2-(6-氯-9H-嘌呤-9-基)-5-(羟基甲基)四氢呋喃-3,4-二醇(Sigma Aldrich，2g，6.98mmol)添加2mL的水合肼(65％，水性，按重量计)。将反应在室温搅拌2小时。收集沉淀的白色固体，并用MeOH(2mL x 2)洗涤，然后经真空干燥。将经干燥的固体悬浮于10mL的原甲酸三甲氧基酯中，并在100℃加热过夜。真空除去溶剂。将残余物溶于10mL的MeOH和2mL的1N HCl中，并在50℃加热3小时。随后将混合物浓缩，并将固体用NaHCO₃水溶液(5mL)和水(2mL x 3)洗涤，然后干燥，得到中间体10A(1.4g，69％产率)，其为白色固体。¹H NMR(499MHz，甲醇-d₄)δ9.50(s，1H)，8.75(s，1H)，8.53(s，1H)，6.27(d，J＝5.0Hz，1H)，4.72(m，1H)，4.46-4.36(m，1H)，4.19(d，J＝4.1Hz，1H)，3.92(d，J＝3.2Hz，1H)，3.84(d，J＝3.6Hz，1H)。MS(ES)：m/z＝293.0[M+H]⁺。

制备中间体10B：

向10mL的吡啶and 2mL的DMF中的中间体10A(1.4g，4.79mmol)添加4,4'-(氯(苯基)亚甲基)双(甲氧基苯)(1.8g，5.27mmol)。2小时后，添加额外的4,4'-(氯(苯基)亚甲基)双(甲氧基苯)(1.8g，5.27mmol)并将混合物另外搅拌1小时。随后向反应中添加2mL的MeOH并将其另外搅拌10分钟。然后将混合物浓缩，并再次溶于50mL的EtOAc中，用NaHCO₃水溶液和盐水洗涤，然后浓缩。将残余物在二氧化硅(40g)上提纯，用0-100％EtOAc/己烷(w 0.5％TEA)洗脱，得到中间体10B(1.9g，68％产率)。¹H NMR(499MHz，氯仿-d)δ9.09(s，1H)，8.44(s，1H)，8.31(s，1H)，7.41(dd，J＝8.3，1.3Hz，2H)，7.32-7.29(m，4H)，7.27-7.22(m，2H)，7.21-7.18(m，1H)，6.79(dd，J＝9.1，1.1Hz，4H)，6.19(d，J＝5.1Hz，1H)，4.86(m，1H)，4.51(m，1H)，4.37(d，J＝3.8Hz，1H)，3.78(s，6H)，3.56-3.50(m，1H)，3.42(dd，J＝10.6，4.2Hz，1H)。MS(ES)：m/z＝595.2[M+H]⁺。

制备中间体10C和10D：

向20mL的DCM中的中间体10B(1.9g，3.20mmol)添加1H-咪唑(0.65g，9.59mmol)和叔丁基氯二甲基硅烷(0.53g，3.51mmol)。将反应在室温搅拌6小时，然后用50mL的DCM将其稀释，用NaHCO₃水溶液和盐水洗涤，在Na₂SO₄上干燥并浓缩。将残余物在二氧化硅(40g)上提纯，用0-100％EtOAc/己烷(w/0.5％TEA)洗脱，得到：

中间体10C(0.4g，0.56mmol，18％产率)。¹H NMR(499MHz，氯仿-d)δ9.10(s，1H)，8.47(s，1H)，8.34(s，1H)，7.48(d，J＝7.2Hz，2H)，7.36(d，J＝8.2Hz，5H)，7.27-7.17(m，1H)，6.90-6.76(m，5H)，6.19(d，J＝5.5Hz，1H)，5.02(t，J＝5.2Hz，1H)，4.45-4.37(m，1H)，4.34(d，J＝3.2Hz，1H)，3.56(d，J＝3.0Hz，1H)，3.46(d，J＝3.8Hz，1H)，2.73(br s，1H)。MS(ES)：m/z＝709.4[M+H]⁺，和

中间体10D(0.8g，1.13mmol，35％产率)。¹H NMR(499MHz，氯仿-d)δ9.17(s，1H)，8.47(s，1H)，8.36(s，1H)，7.47-7.39(m，2H)，7.37-7.30(m，5H)，7.27-7.18(m，1H)，6.91-6.74(m，5H)，6.15(d，J＝5.0Hz，1H)，4.75(d，J＝6.6Hz，1H)，4.58(dd，J＝5.4，4.2Hz，1H)，4.25(d，J＝3.8Hz，1H)，3.57(dd，J＝10.7，3.5Hz，1H)，3.33(dd，J＝10.7，4.1Hz，1H)，3.03(d，J＝7.0Hz，1H)。MS(ES)：m/z＝709.4[M+H]⁺。

制备中间体10E：

向10mL的DCM中的中间体10C(0.4g，0.56mmol)添加1M 1H-咪唑-4,5-二甲腈(0.395mL，0.395mmol)的乙腈溶液,然后添加3-((双(二异丙基氨基)膦烷基)氧基)丙腈(0.20g，0.68mmol)。将反应在室温搅拌16小时，然后用30mL的DCM将其稀释，用NaHCO₃水性洗涤，在Na₂SO₄上干燥，然后浓缩至干。将残余物在二氧化硅上提纯(12g)，用0-100％EtOAc/己烷(含0.5％TEA，且柱装填有含0.5％TEA的己烷)洗脱，得到中间体10E(0.41g，0.45mmol，80％产率)。MS(ES)：m/z＝826.5[M+H]⁺(流动相中含TFA)。MS(ES)：m/z＝909.2[M+H]⁺(流动相中含乙酸铵)。

制备中间体10F：

将带有搅拌子的50mL烧瓶中的中间体7A(120mg，0.220mmol)and1H-四唑(30.8mg，0.440mmol)与ACN(2mL x 3)共沸。然后，添加100mg的分子筛和4mL的ACN并将该混合物(I)在室温搅拌30分钟。将20mL小瓶中的中间体10E(200mg，0.220mmol)与ACN(2mL x 2)共沸。然后，添加100mg的分子筛和1mL的ACN并将该混合物(II)在室温搅拌30分钟。在N₂正压下，将混合物II添加至混合物I。为了达到完整的转移，含(II)的小瓶经1mL的ACN冲洗，并添加至混合物I中。将反应在室温搅拌2小时。添加(E)-N,N-二甲基-N'-(3-硫代-3H-1,2,4-二噻唑-5-基)甲亚酰胺(49.7mg，0.242mmol)，并将反应另外搅拌30分钟。随后将反应过滤，并将滤液浓缩。将残余物溶于10mL的DCM中，并滴加2,2-二氯乙酸(170mg，1.320mmol)。搅拌30分钟后，将反应用30mL的DCM稀释，用NaHCO₃洗涤，在Na₂SO₄上干燥，然后浓缩。将残余物在二氧化硅(24g)上提纯，用0-10％MeOH/DCM洗脱，得到中间体10F(120mg，0.111mmol，50％产率)。MS(ES)：m/z＝1084.5[M+H]⁺。

制备中间体10G：

依据在制备中间体7C中描述的操作，由中间体10F(120mg，0.111mmol)得到中间体10G(74mg，0.071mmol，64％产率)。MS(ES)：m/z＝1044.5[M+H]⁺。

制备中间体10H：

依据在制备中间体7C中描述的操作，由中间体10G(74mg，0.071mmol)得到中间体10H(46mg，0.045mmol，63％产率)。MS(ES)：m/z＝1026.4[M+H]⁺。

实施例10

将中间体10H(46mg，0.045mmol)溶于2mL的7N NH₃/MeOH并加热至50℃5小时。然后反应浓缩并将残余物悬浮于纯三乙胺三氢氟化物(0.4mL)并在37℃搅拌14小时。将混合物用2mL的2N乙酸铵溶液淬灭并搅拌10分钟。然后将其过滤，并用制备型HPLC提纯(柱：Xselect RP Prep C18 OBD柱，5μm，19X150mm；流速：20.0mL/min；流动相：A：100mM NH₄OAc(pH 7)；B：乙腈)，得到一对非对映异构体：实施例10-1(6.4mg)¹H NMR(499MHz，甲醇-d₄)¹HNMR(499MHz，甲醇-d₄)δ9.45(s，1H)，8.85(s，1H)，8.73(s，1H)，8.48(s，1H)，8.21(s，1H)，6.42(d，J＝15.6Hz，1H)，6.32(d，J＝1.4Hz，1H)，5.46-5.28(m，1H)，5.25-5.17(m，1H)，5.10-4.98(m，1H)，4.52(br d，J＝11.8Hz，1H)，4.44(br d，J＝9.7Hz，3H)，4.21-4.10(m，2H)，3.73(dt，J＝13.2，6.6Hz，1H)。MS(ES)：m/z＝702.2[M+H]⁺，以及实施例10-2(5.3mg)¹HNMR(499MHz，甲醇-d₄)δ9.49(s，1H)，8.72(s，1H)，8.45(s，1H)，8.43(s，1H)，8.16(s，1H)，6.35(d，J＝16.8Hz，1H)，6.28(d，1H)，5.55-5.32(m，1H)，5.21(td，J＝9.0，4.5Hz，1H)，5.15-5.00(m，1H)，4.60(br d，J＝12.0Hz，1H)，4.50-4.38(m，3H)，4.21-4.00(m，2H)，3.74(m，1H)MS(ES)：m/z＝702.2[M+H]⁺。

实施例11

(1S,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-9-氟-3,12,18-三羟基-17-{3H-[1,2,4]三唑并[3,2-f]嘌呤-3-基}-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-3,12-二酮

制备中间体11A：

将带有搅拌子的50mL烧瓶中的中间体7A(72mg，0.13mmol)和1H-四唑(18.49mg，0.264mmol)与ACN(2mL x 3)共沸。然后，添加100mg的分子筛和4mL的ACN并将该混合物(I)在室温搅拌30分钟。将20mL小瓶中间体10E(120mg，0.13mmol)与ACN(2mL x 2)共沸。然后，添加100mg的分子筛和1mL的ACN并将该混合物(II)在室温搅拌30分钟。在N₂正压下，将混合物II添加至混合物I。为了达到完整的转移，含(II)的小瓶经1mL的ACN冲洗，并添加至混合物(I)中。将反应在室温搅拌2小时。随后添加2-氢过氧化-2-((2-氢过氧化丁烷-2-基)过氧基)丁烷(41.6mg，0.198mmol)，并将反应另外搅拌30分钟。随后将混合物过滤，并将滤液浓缩。将残余物溶于10mL的DCM，并滴加2,2-二氯乙酸(102mg，0.79mmol)。搅拌30分钟后，将反应用30mL的DCM稀释，用NaHCO₃洗涤，在Na₂SO₄上干燥，然后浓缩。将残余物在二氧化硅(24g)上提纯，用0-10％MeOH/DCM洗脱，得到中间体11A(50mg，0.047mmol，36％产率)。MS(ES)：m/z＝1068.4[M+H]⁺。

制备中间体11B：

依据在制备中间体7C中描述的操作，由中间体11A(50mg，0.047mmol)得到中间体11B(46mg，0.045mmol，96％产率)。MS(ES)：m/z＝1028.6[M+H]⁺。

制备中间体11C：

依据在制备中间体7D中描述的操作，由中间体11B(46mg，0.045mmol)得到中间体11C(46mg，0.046mmol，100％产率)。MS(ES)：m/z＝1010.3[M+H]⁺。

实施例11

依据在制备实施例10-1和实施例10-2中描述的操作，由中间体11C(46mg，0.046mmol)得到实施例11(10.6mg)。¹H NMR(499MHz，甲醇-d₄)δ9.49(s，1H)，8.72(s，1H)，8.46(s，1H)，8.43(s，1H)，8.17(s，1H)，6.36(d，J＝17.0Hz，1H)，6.29(d，J＝1.1Hz，1H)，5.61-5.37(m，1H)，5.21-5.02(m，2H)，δ4.87(br d，J＝4.6Hz，1H)4.52-4.34(m，4H)，4.21-4.09(m，2H)。MS(ES)：m/z＝686.2[M+H]⁺。

制备磷(V)试剂

根据2018年4月13日提交的USSN 62/657551中提供的操作，制备制备实施例12中使用的磷(V)试剂(试剂1-2)。

实施例12

(1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-9,18-二氟-3,12-二硫烷基-17-{3H-[1,2,4]三唑并[3,2-f]嘌呤-3-基}-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-3,12-二酮

制备中间体12A：

向10mL的DCM中的(2R,3R,4R,5R)-5-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-4-氟-2-(羟基甲基)四氢呋喃-3-醇(0.6g，2.23mmol)添加1H-咪唑(0.455g，6.69mmol)和叔丁基氯二甲基硅烷(1.0g，6.69mmol)。将反应在室温搅拌5小时。然后，混合物用30mL的DCM稀释，用NaHCO₃水溶液、水和盐水洗涤，然后在Na₂SO₄上干燥，随后浓缩。将粗物质溶于30mL的DCM中,在N₂中冷却至0℃，并滴加氯三甲基硅烷(2.26mL，17.8mmol)。20分钟后，滴加叔丁基亚硝酸盐(2.47mL，18.7mmol)。将反应缓慢温热，然后在室温搅拌16小时。将混合物用NaHCO₃水溶液淬灭，用水和盐水洗涤，在Na₂SO₄上干燥，然后将其浓缩，得到粗制中间体12A约1.1g。MS(ES)：m/z＝517.2[M+H]⁺。

制备中间体12B：

将粗制中间体12A(约1.1g)溶于2mL的MeOH，添加水合肼(1mL，65％水性，按重量计)并将混合物在室温搅拌1小时。然后混合物用20mL的DCM稀释，用水(10mL x 2)和盐水洗涤，在Na₂SO₄上干燥，然后浓缩。将残余物溶于10mL的原甲酸三甲氧基酯并在100℃加热2小时。真空除去溶剂，并将粗品在二氧化硅(24g)上提纯，用0-5％MeOH/DCM洗脱，得到中间体12B(0.7g，1.34mmol，60.1％产率)。¹H NMR(499MHz，氯仿-d)δ9.02(s，1H)，8.91(s，1H)，8.44(s，1H)，6.44(dd，J＝14.8，2.7Hz，1H)，5.29-5.13(m，1H)，4.65(ddd，J＝16.1，6.1，4.4Hz，1H)，4.26-4.20(m，1H)，4.07(dd，J＝11.7，2.5Hz，1H)，3.85(dd，J＝11.7，2.3Hz，1H)，0.95(d，J＝8.3Hz，18H)，0.19-0.11(m，12H)。MS(ES)：m/z＝523.2[M+H]⁺。

制备中间体12C：

向10mL的THF中的中间体12B(0.7g，1.34mmol)添加四丁基氟化铵(1M，于THF中，0.67mL，0.67mmol)。将反应在室温搅拌20小时。将混合物与5g二氧化硅共蒸发，然后将其在24g二氧化硅柱上提纯，用0-10％MeOH/DCM(w/0.25％TEA)洗脱，得到中间体12C(0.31g，1.054mmol，79％产率)。¹H NMR(499MHz，甲醇-d₄)δ9.49(s，1H)，8.76(s，1H)，8.51(s，1H)，6.61-6.43(m，1H)，5.51(m，1H)，4.78-4.59(m，1H)，4.25-4.10(m，1H)，4.03-3.94(m，1H)，3.88-3.75(m，1H)。MS(ES)：m/z＝295.0[M+H]⁺。

制备中间体12D：

向5mL的吡啶中的中间体12C(0.8g，2.72mmol)添加4,4'-(氯(苯基)亚甲基)双(甲氧基苯)(1.20g，3.53mmol)并将混合物在室温搅拌16小时。然后，添加1mL的MeOH并将反应另外搅拌10分钟。除去溶剂，并将残余物在二氧化硅(24g)上提纯，用0-5％MeOH/DCM(含0.25％TEA)洗脱，得到中间体12D(1.1g，1.84mmol，68％产率)。MS(ES)：m/z＝597.2[M+H]⁺。

制备中间体12E：

向DCM(20mL)中的中间体12D(0.72g，1.207mmol)添加4-氧代戊酸酐(0.388g，1.810mmol)，然后添加催化量的DMAP(20mg)。将反应在室温搅拌2小时。随后将混合物用20mL的DCM稀释，用NaHCO₃水溶液和盐水洗涤，在Na₂SO₄上干燥，然后浓缩。将残余物溶于20mL的DCM，并添加三乙基硅烷(0.702g，6.03mmol)，然后添加2,2-二氯乙酸(0.47g，3.62mmol)。将反应在室温搅拌1小时。随后将混合物用饱和NaHCO₃水溶液和盐水洗涤，然后在Na₂SO₄上干燥，并浓缩至干。将残余物在二氧化硅(24g)上提纯，用0-10％MeOH/DCM洗脱，得到中间体12E(0.47g，1.20mmol，99％产率)。¹H NMR(499MHz，氯仿-d)δ9.31(s，1H)，8.51(s，1H)，8.35(s，1H)，6.46-6.25(m，1H)，5.94-5.65(m，2H)，4.47(dd，J＝3.2，1.7Hz，1H)，4.15(br d，J＝7.2Hz，1H)，4.05(br d，J＝12.9Hz，1H)，3.97-3.84(m，1H)，3.02-2.57(m，4H)，2.25(s，3H)。MS(ES)：m/z＝393.1[M+H]⁺。

制备中间体12F：

将带有搅拌子的50mL烧瓶中的中间体12E(0.47g，1.2mmol)和5-(ethylthio)-1H-四唑(0.32g，2.45mmol)用4mL的乙腈共沸3次。然后，在N₂气氛下添加100mg的分子筛和4mL的无水乙腈。将该混合物(I)在室温搅拌30分钟。将20mL小瓶中的(2R,3R,4R,5R)-5-(6-苯甲酰氨基-9H-嘌呤-9-基)-2-((双(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-4-氟四氢呋喃-3-基(2-氰基乙基)二异丙基亚磷酰胺(Sigma Aldrich，1.50g，1.71mmol)用2mL的乙腈共沸2次。然后，添加100mg的分子筛和2mL的ACN。将该混合物(II)在室温搅拌30分钟。在N₂正压下，将混合物II添加至混合物I中。为了达到完整的转移，含(II)的小瓶经1mL的ACN冲洗并添加至混合物(I)中。随后将反应在室温搅拌16小时。然后，添加(E)-N,N-二甲基-N'-(3-硫代-3H-1,2,4-二噻唑-5-基)甲亚酰胺(0.28g，1.35mmol)并将反应另外搅拌10分钟。随后过滤黄色溶液并将滤液用30mL的EtOAc稀释，用NaHCO₃水溶液洗涤，在Na₂SO₄上干燥并浓缩。将残余物在二氧化硅(24g)上提纯，用0-100％EtOAc/己烷(含0.5％TEA)洗脱，得到中间体12F(1.02g，0.89mmol，74％产率)，其为一对非对映异构体。MS(ES)：m/z＝1146.2[M+H]⁺。

制备中间体12G：

将AcOH(6mL)和吡啶(4mL)中的中间体12F(1.02g，0.89mmol)用水合肼(0.13mL，2.67mmol，65％水性，按重量计)处理。在室温15分钟后，完成反应。添加戊烷-2,4-二酮(0.27g，2.67mmol)，并将混合物另外搅拌10min。随后将反应用DCM(20mL)稀释，用NaHCO₃水溶液洗涤，在Na₂SO₄上干燥，然后浓缩。粗品在二氧化硅(24g)上提纯，用0-10％MeOH/DCM洗脱，得到中间体12G(0.7g，0.67mmol，75％产率)。MS(ES)：m/z＝1048.1[M+H]⁺。

制备中间体12H：

向中间体12G(175mg，0.167mmol)和试剂1(149mg，0.334mmol)的乙腈(4mL)溶液中添加DBU(0.050mL，0.334mmol)。将反应在室温搅拌20分钟。然后，添加2,2-二氯乙酸(215mg，1.670mmol)，并随后将混合物在室温搅拌30分钟。然后将混合物浓缩，并将残余物用二氧化硅快速柱色谱(24g)提纯，用0-30％MeOH/DCM洗脱，得到中间体12H(90mg，0.091mmol，54％产率)。MS(ES)：m/z＝992.1[M+H]⁺。

制备中间体12I：

将中间体12H(90mg，0.091mmol)悬浮于乙腈(4mL)中。添加DBU(0.045mL，0.18mmol)，且反应混合物变为均相。将反应在室温搅拌1小时。随后将反应经浓缩并将残余物用乙醚(10mL x 2)研磨。将粗物质在反相ISCO柱上提纯(100g Gold C18柱，A：0.01nMNH₄OAc；B：95％ACN中的0.01nM NH₄OAc和5％H₂O)，得到中间体12I(55mg，0.067mmol，74％产率)。MS(ES)：m/z＝823.8[M+H]⁺。

实施例12

依据在制备实施例10-1和10-2中描述的操作，由中间体12I(55mg，0.067mmol)得到实施例12的两种非对映异构体。

实施例12-1：(8.5mg)¹H NMR(499MHz，甲醇-d₄)δ9.40(s，1H)，8.93(s，1H)，8.84(s，1H)，8.47(s，1H)，8.21(s，1H)，6.59(d，J＝16.6Hz，1H)，6.39(d，J＝15.5Hz，1H)，6.02-5.86(m，1H)，5.80-5.63(m，1H)，5.41-5.25(m，1H)，5.19-5.07(m，1H)，4.59-4.43(m，4H)，4.19-4.06(m，2H)。MS(ES)：m/z＝720.3[M+H]⁺。

实施例12-2：(6.0mg)¹H NMR(499MHz甲醇-d₄)δ9.57-9.42(s，1H)，8.81(s，1H)，8.68(s，1H)，8.48(s，1H)，8.14(s，1H)，6.54(d，J＝17.0Hz，1H)，6.35(d，J＝15.5Hz，1H)，6.21-6.01(m，1H)，5.44-5.26(m，2H)，5.23-5.10(m，1H)，4.65(br d，J＝12.3Hz，1H)，4.51(br d，J＝10.3Hz，2H)，4.43(br d，J＝9.2Hz，1H)，4.11(dd，J＝11.7，3.9Hz，1H)，4.05(dd，J＝11.8，4.1Hz，1H)。MS(ES)：m/z＝720.3[M+H]⁺。

制备中间体12J：

依据在制备中间体12H中描述的操作，中间体12G(300mg，0.286mmol)与试剂2(256mg，0.573mmol)反应，得到中间体12J(216mg，0.22mmol，76％产率)。MS(ES)：m/z＝992.1[M+H]⁺。

制备中间体12K：

依据在制备中间体12I中描述的操作，由中间体12J(216mg，0.22mmol)得到中间体12K(152mg，0.19mmol，85％产率))。MS(ES)：m/z＝823.8[M+H]⁺。

实施例12-3和12-4

依据在制备实施例12-1和12-2中描述的操作，由中间体12K(192mg，0.233mmol)得到实施例12的另外两种的非对映异构体。

实施例12-3：(20mg)¹H NMR(499MHz，甲醇-d₄)δ9.48(s，1H)，8.91(s，1H)，8.46(s，1H)，8.41(s，1H)，8.17(s，1H)，6.55(d，J＝15.9Hz，1H)，6.31(d，J＝16.5Hz，1H)，5.96-5.74(m，1H)，5.68-5.50(m，1H)，5.40-5.27(m，1H)，5.22-5.03(m，1H)，4.66(br d，J＝12.2Hz，1H)，4.58-4.38(m，3H)，4.23-3.97(m，2H)。MS(ES)：m/z＝720.3[M+H]⁺。

实施例12-4：(13.6mg)¹H NMR(499MHz，甲醇-d₄)δ9.56-9.25(s，1H)，8.51(s，1H)，8.34(s，1H)，8.14(s，1H)，7.98(s，1H)，6.39(d，J＝15.3Hz，1H)，6.14(d，J＝15.6Hz，1H)，6.04-5.86(m，1H)，5.63-5.42(m，2H)，5.39-5.22(m，1H)，4.67-4.51(m，3H)，4.45(br d，J＝9.1Hz，1H)，4.04(dt，J＝12.7，6.5Hz，2H)。MS(ES)：m/z＝720.3[M+H]⁺。

实施例13

(1S,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-9-氟-12,18-二羟基-17-(4-硝基-1H-1,2,3-苯并三唑-1-基)-3-硫烷基-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-3,12-二酮

制备中间体13A：

步骤1：

将浓H₂SO₄(150mL)中的1H-苯并[d][1,2,3]三唑(5g，42.0mmol)冷却至0℃。在20分钟内，以小分量添加硝酸钾(8.49g，84mmol)。然后将反应加热至60℃1.5小时。将混合物冷却至室温，然后倒在100g的冰上。温热至室温后，收集固体并用水(10mL x 3)洗涤。将固体用50mL的饱和NaHCO₃水溶液处理，并搅拌5分钟。所得固体收集并用水(10mL x 3)和己烷(10mL x 3)洗涤，然后真空干燥，得到所需产物(5.82g，84％产率)。LCMS：M/Z 165.00(M+H)，¹H NMR(499MHz，氯仿-d)δ13.10(br s，1H)，8.55(d，J＝8.2Hz，1H)，8.49(dd，J＝7.8，0.7Hz，1H)，7.62(t，J＝8.1Hz，1H)。

步骤2：

向三乙酸(2S,3R,4R,5R)-5-(乙酰氧基甲基)四氢呋喃-2,3,4-三基酯(10g，31.4mmol)和4-硝基-1H-苯并[d][1,2,3]三唑(5.16g，31.4mmol)的50mL DCM溶液中逐滴添加全氯锡烷(1.47mL，12.6mmol)。将反应混合物在室温搅拌16小时。向反应中缓慢添加300mL的饱和NaHCO₃水溶液。随后将混合物用DCM(300mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，在Na₂SO₄上干燥并浓缩。将残余物在二氧化硅上提纯，用0-50％EtOAc/己烷洗脱，得到所需的二乙酸(2R,3R,4R,5R)-2-(乙酰氧基甲基)-5-(4-硝基-1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-基)四氢呋喃-3,4-二基酯(5.7g，43％)。LCMS：M/Z 422.85(M+H)，¹H NMR(499MHz，DMSO-d₆)δ8.52(d，J＝8.4Hz，1H)，8.39(d，J＝7.6Hz，1H)，7.89(t，J＝7.9Hz，1H)，6.97(d，J＝3.0Hz，1H)，6.15(dd，J＝5.4，3.0Hz，1H)，5.76-5.71(m，1H)，4.59-4.55(m，1H)，4.34(dd，J＝12.3，3.2Hz，1H)，4.13(dd，J＝12.5，4.6Hz，1H)，2.14(s，6H)，1.86(s，3H)。

步骤3：

将氨气通入二乙酸(2R,3R,4R,5R)-2-(乙酰氧基甲基)-5-(4-硝基-1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-基)四氢呋喃-3,4-二基酯(4g，9.5mmol)的30mL MeOH溶液中15分钟，然后将混合物在室温搅拌16小时。随后浓缩反应混合物。将残余物与5mL的吡啶共沸，然后溶于20mL的吡啶中。添加4,4'-(氯(苯基)亚甲基)双(甲氧基苯)(3.85g，11.36mmol)并将反应在室温搅拌6小时。随后将反应用1mL的MeOH淬灭并另外搅拌10分钟。随后混合物经真空浓缩并将残余物在二氧化硅上提纯，用0-100％EtOAc/己烷洗脱，得到中间体13A(3.7g，5.56mmol，59％产率)。

制备中间体13B：

步骤1：

向中间体13A(3.7g，6.18mmol)的25mL无水吡啶溶液中添加1H-咪唑(1.262g，18.54mmol)，然后逐滴添加叔丁基氯二甲基硅烷(0.978g，6.49mmol)。将反应在室温搅拌6小时，然后用1mL的MeOH淬灭，并继续另外搅拌10分钟。随后反应混合物经浓缩并将残余物在硅胶上提纯(用0-60％EtOAc/己烷洗脱)，得到两种异构体：(2R,3R,4R,5R)-2-((双(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(4-硝基-1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-基)四氢呋喃-3-醇(异构体1)(1.6g，2.24mmol，36％产率)，¹H NMR(499MHz，氯仿-d)δ9.26-9.18(m，1H)，8.28(s，1H)，7.48(d，J＝7.3Hz，2H)，7.39-7.29(m，6H)，7.27-7.22(m，1H)，7.09-7.05(m，1H)，6.88-6.83(m，4H)，6.74(d，J＝7.0Hz，1H)，6.67(d，J＝4.9Hz，1H)，4.67(t，J＝5.0Hz，1H)，4.34-4.31(m，1H)，4.27-4.22(m，1H)，3.81(d，J＝0.9Hz，6H)，3.57-3.47(m，2H)，2.70(d，J＝5.0Hz，1H)，0.92-0.87(m，9H)，0.07-0.04(m，3H)，0.02--0.02(m，3H)，以及(2R,3R,4S,5R)-5-((双(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(4-硝基-1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-基)四氢呋喃-3-醇(异构体2)(2.1g，2.95mmol，48％产率)¹H NMR(499MHz，氯仿-d)δ8.28(d，J＝7.5Hz，1H)，8.23(d，J＝8.2Hz，1H)，7.58(t，J＝7.8Hz，1H)，7.20-7.09(m，9H)，6.73-6.68(m，4H)，6.43(d，J＝2.4Hz，1H)，5.15-5.11(m，1H)，4.91-4.87(m，1H)，4.33-4.29(m，1H)，3.78(d，J＝2.6Hz，6H)，3.41(dd，J＝10.8，2.7Hz，1H)，3.12-3.07(m，2H)，2.07(s，1H)，1.55(s，12H)，1.29(t，J＝7.2Hz，1H)，0.91(s，9H)，0.12(s，3H)，0.02--0.04(m，3H)。

步骤2：

向(2R,3R,4R,5R)-2-((双(4甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-(4-硝基-1H-苯并[d][1,2,3]三唑-1-基)四氢呋喃-3-醇(异构体1，步骤1)(1.3g，1.824mmol)的无水DCM(15mL)溶液中添加1.0M的1H-咪唑-4,5-二甲腈(1.459mL，1.824mmol)乙腈溶液，然后逐滴添加3-((双(二异丙基氨基)膦烷基)氧基)丙腈(0.82g，2.74mmol)。添加完成后，将混合物物在室温搅拌10小时。随后将混合物用MeOH(2mL)淬灭然后用100mL的DCM稀释，用饱和NaHCO₃水溶液洗涤，经MgSO₄干燥，然后浓缩至干。将残余物用硅胶柱色谱提纯(40g柱，用0-80％EtOAc/己烷/含0.5％Et3N洗脱)，得到中间体13B(1.4g，1.533mmol，84％产率)。m/z 830.0(M+H)，(在LCMS上用流动相中的TFA水解)。

制备中间体13C：

将中间体13B(5g，5.71mmol)与5mL的无水乙腈共沸。然后添加0.2g的分子筛和乙腈(15mL)。向该混合物中添加丙-2-烯-1-醇(0.663g，11.42mmol)并将混合物在室温搅拌30分钟。向反应混合物中添加1H-四唑(0.800g，11.42mmol)并将反应在室温另外搅拌30分钟。随后向反应中添加2-氢过氧化-2-((2-氢过氧化丁烷-2-基)过氧基)丁烷(2.40g，11.4mmol)并继续搅拌30分钟。然后将反应通过硅藻土过滤并将滤液浓缩。将残余物溶于DCM(15mL)，并滴加2,2-二氯乙酸(4.42g，34.2mmol)。搅拌30分钟后，将反应混合物用饱和NaHCO₃水溶液处理，然后用DCM(30mL x 3)萃取。合并的有机层经Na₂SO₄干燥并真空浓缩。将残余物在硅胶上提纯(用0-10％MeOH/DCM洗脱)，得到中间体13C(2.86g，5.23mmol，92％产率)m/z547.2(M+H)。

制备中间体13D：

将中间体13C(182mg，0.33mmol)和1H-四唑(78mg，1.11mmol)在无水ACN(5mL)中的混合物浓缩至干(重复2次)。将中间体13B(250mg，0.278mmol)溶于ACN(5mL)并浓缩至干(重复2次)。然后将分子筛(0.5g)和乙腈(10mL)添加至中间体13B中，并将该溶液随后添加至无水ACN(2mL)中的中间体13C中。将反应在室温搅拌90分钟，然后添加(E)-N,N-二甲基-N'-(3-硫代-3H-1,2,4-二噻唑-5-基)甲亚酰胺(114mg，0.56mmol)。将反应保持搅拌30分钟。随后将反应通过硅藻土过滤并减压浓缩。将残余物溶于DCM(5mL)中，然后滴加2,2-二氯乙酸(0.138mL，1.66mmol)。反应混合物浓缩，然后与MeOH共沸数次。将粗产物中间体13D直接用于下一步骤中。m/z 1088.6(M+H)。

制备实施例13E：

向粗制中间体13D的丙酮(2mL)溶液中添加碘化钠(0.21g，1.39mmol)。将混合物在50℃搅拌2小时。随后将混合物浓缩至干并将残余物用硅胶柱色谱提纯，用0-40％DCM中的MeOH洗脱，得到中间体13E(200mg，69％产率，3个步骤)。LCMS(ES，m/z)：1048.4[M+H]⁺。

制备中间体13F：

向1-(均三甲苯基磺酰基)-3-硝基-1H-1,2,4-三唑(283mg，0.95mmol)的吡啶(5mL)溶液中逐滴添加中间体13E(200mg，0.19mmol)的吡啶(2mL)溶液。将混合物在室温搅拌过夜。减压浓缩混合物并随后将残余物用硅胶柱色谱提纯，用0-15％DCM中的MeOH洗脱，得到产物中间体13F(146mg，74％)。LCMS(ES，m/z)：1030.4[M+H]⁺。

实施例13

将中间体13F(146mg)溶于7N氨/MeOH(3mL)，然后在50℃加热10小时。混合物浓缩至干在氮气流中。所得固体悬浮于三乙胺三氢氟酸盐(0.5mL)中，并在37℃加热2小时。向反应中添加2M乙酸铵溶液(2mL)并继续搅拌20分钟。随后将混合物过滤并经制备型HPLC色谱提纯(条件：柱：Xselect RP Prep C18 OBD，柱，5μm，19X150mm，流速：20.0mL/min，流动相：A：100mM NH₄OAc(pH 4.7)；B：乙腈)，得到两种立体异构体：实施例13-1(9.3mg，14.7％产率)。m/z：706.1(M+H)。¹H NMR(499MHz，甲醇-d₄)δ8.85(s，1H)，8.54(d，J＝8.34Hz，1H)，8.32(d，J＝7.63Hz，1H)，8.26(s，1H)，7.75(t，J＝8.11Hz，1H)，6.55(d，J＝2.27Hz，1H)，6.42(dd，J＝16.47Hz，1H)，5.42(br d，J＝3.22Hz，1H)，5.28-5.36(m，6H)，5.13-5.25(m，1H)，5.01-5.12(m，2H)，4.39-4.59(m，3H)，4.32(br d，J＝11.56Hz，1H)，4.06-4.21(m，2H)。实施例13-2(8mg，12.0％产率)。¹H NMR(499MHz，甲醇-d₄)δ8.57d，1H)，8.51(d，1H)，8.31(d，J＝7.75Hz，1H)，8.22(s，1H)，7.74(t，J＝8.05Hz，1H)，6.55(s，1H)，6.43(d，1H)，5.51(s，2H)，5.46(br s，2H)，5.36(br s，3H)，5.20(br s，6H)，5.00-5.11(m，10H)，4.61(br d，J＝11.68Hz，20H)，4.42(br d，J＝10.61Hz，10H)，4.30(br d，J＝11.32Hz，5H)，4.01-4.18(m，9H)。m/z：706.1(M+H)。

实施例14

4-[(1R,6R,8S,9S,10S,15R,17R,18R)-17-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-18-氟-3,9-二羟基-3,12-二氧代-12-硫烷基-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-8-基]吡啶-2-甲酰胺

制备中间体14A：

在氮气气氛下，向二苯甲酸(2S,3R,4R,5R)-2-乙酰氧基-5-((苯甲酰基氧基)甲基)四氢呋喃-3,4-二基酯(10g，19.82mmol)的30mL DCM溶液中添加三甲基硅烷甲腈(3.47mL，27.8mmol)，然后添加三氟化硼二乙醚合物(2.45mL，19.82mmol)。将反应混合物在室温搅拌14小时。向该反应混合物中添加100mL的饱和NaHCO₃水溶液，并继续在室温搅拌30分钟。混合物经EtOAc(100mL x 3)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，然后经Na₂SO₄干燥。随后将混合物真空浓缩并将残余物在硅胶色谱上提纯(80g柱，0-50％EtOAc/己烷)，得到中间体14A(7.56g，81％产率)。¹H NMR(499MHz，氯仿-d)δ8.17-8.09(m，2H)，8.04-7.90(m，4H)，7.63-7.55(m，3H)，7.51-7.34(m，6H)，6.03(dd，J＝5.3，4.5Hz，1H)，5.88(t，J＝5.5Hz，1H)，5.00(d，J＝4.4Hz，1H)，4.81-4.72(m，2H)，4.64(d，J＝8.4Hz，1H)。

制备中间体14B：

向中间体14A(15g，31.8mmol)的AcOH(40mL)溶液中添加氯化氢(5.30mL，63.6mmol)。将反应混合物加热至120℃40分钟。随后将混合物浓缩至干，然后经硅胶色谱提纯(120g柱，0-60％EtOAc/己烷)，得到中间体14B(12.6g，25.7mmol，81％产率)。保留时间＝0.73min(H₂O/含0.05％TFA的MeOH，Shimadzu HPLC Xterra-S5-C18 4.6x50mm，梯度＝4min，波长＝220nm)；MS(ES)：m/z＝490[M+H]⁺。

制备中间体14C：

将(4,4'-二-叔丁基-2,2'-联吡啶)双[3,5-二氟-2-[5-三氟甲基-2-吡啶基-κN)苯基-κC]铱(III)六氟磷酸盐(0.24g，0.24mmol)、氯化镍(II)乙二醇二甲基醚配合物(0.260g，1.19mmol)和4,4'-二-叔丁基-2,2'-联吡啶(0.32g，1.19mmol)添加至装有磁力搅拌子的50mL小瓶中。然后，添加中间体14B(5.81g，11.85mmol)，然后添加4-溴皮考啉酸甲基酯(3.07g，14.22mmol)和Cs₂CO₃(6.18g，18.95mmol)。随后将小瓶放置在氮气下，并添加无水DMA(118mL)。随后将溶液用氮气脱气15分钟。随后将小瓶密封，并将盖子用封口膜密封。将小瓶放置在距离34W蓝色LED约8cm处，且LED直射在小瓶的侧面。随后将反应搅拌72小时。将粗制反应混合物随后倒入水(100mL)和乙酸乙酯(100mL)的混合物中。水层经乙酸乙酯萃取3次，然后用水洗涤合并的有机层，经Na₂SO₄干燥，并浓缩。产物随后经柱色谱提纯(120g柱，0-80％EtOAc/己烷，40min)，得到中间体14C(2.8g，4.81mmol，41％产率)。¹H NMR(499MHz，氯仿-d)δ8.66(dd，J＝0.61，5.02Hz，1H)，8.29(s，1H)，7.93-8.07(m，6H)，7.65(d，J＝5.13Hz，1H)，7.49-7.56(m，3H)，7.28-7.41(m，6H)，5.74(t，J＝5.33Hz，1H)，5.54(t，J＝5.71Hz，1H)，5.38(d，J＝5.94Hz，1H)，4.91(dd，J＝3.04，12.17Hz，1H)，4.79(td，J＝3.39，5.10Hz，1H)，4.70(dd，J＝3.65，12.17Hz，1H)，1.21(t，J＝7.15Hz，1H)。

制备中间体14D：

向中间体14C(2.7g，4.59mmol)添加20mL的无水MeOH和6mL的甲醇钠(5.96mL，2.98mmol)。将混合物搅拌14小时，然后用Dowex 50W-X8H+树脂中和。将混合物过滤并用MeOH洗涤，然后将滤液浓缩至干。在0℃，向粗制中间体的吡啶(20mL)溶液中缓慢添加DCM(5mL)中的(氯(4-甲氧基苯基)亚甲基)二苯(1.67g，4.70mmol)。随后将混合物在室温搅拌过夜。然后除去溶剂并将残余物倒入水(100mL)和乙酸乙酯(100mL)的混合物中。水层经乙酸乙酯萃取3次，然后用盐水洗涤合并的有机层，经Na₂SO₄干燥，并浓缩。随后将粗制反应用柱色谱(40g柱，0-10％MeOH/DCM)提纯得到中间体14D。(1.1g，45％产率)。¹H NMR(499MHz，氯仿-d)δ8.69(d，J＝4.71Hz，1H)，8.32(s，1H)，7.67(d，J＝4.93Hz，1H)，7.41-7.51(m，3H)，7.22-7.38(m，9H)，6.87(s，1H)，6.85(s，1H)，4.87(d，J＝6.79Hz，1H)，4.07-4.27(m，3H)，4.02(s，1H)，3.93(s，2H)，3.80-3.84(m，3H)，3.55(t，J＝1.00Hz，1H)，3.52(d，J＝3.34Hz，1H)，3.38(br d，J＝3.55Hz，1H)。

制备中间体14E和14F：

向中间体14D(1.1g，2.03mmol)和咪唑(0.42g，6.09mmol)的DCM溶液中缓慢添加TBS-Cl(0.337g，2.234mmol)。将混合物搅拌5小时，然后向反应混合物中添加5mL的MeOH。将混合物搅拌1小时，然后蒸发至干。粗物质直接经二氧化硅色谱提纯(40g柱，0-100％EtOAc/己烷)，得到：

中间体14E(445mg，0.678mmol，33.4％产率)。¹H NMR(499MHz，甲醇-d₄)δ8.67(d，J＝5.02Hz，1H)，8.49(s，1H)，7.75(dd，J＝1.05，5.02Hz，1H)，7.42-7.55(m，4H)，7.22-7.40(m，8H)，6.86-6.93(m，2H)，4.90-4.92(m，1H)，4.25(dd，J＝5.02，8.05Hz，1H)，4.19(br d，J＝2.19Hz，1H)，4.05-4.14(m，1H)，4.00(s，1H)，3.80-3.81(m，3H)，3.74-3.75(m，3H)，3.58(dd，J＝2.72，10.56Hz，1H)，3.14-3.32(m，2H)，0.83-0.93(m，9H)，-0.05--0.02(m，3H)，-0.12--0.10(m，3H)，和

中间体14F(418mg，0.637mmol，31.4％产率)。¹H NMR(499MHz，甲醇-d₄)δ8.66(dd，J＝0.63，5.02Hz，1H)，8.49(s，1H)，7.78(d，J＝5.19Hz，1H)，7.43-7.54(m，4H)，7.22-7.39(m，8H)，6.89(s，1H)，6.88(s，1H)，4.89-4.92(m，1H)，4.07-4.21(m，3H)，3.90-4.05(m，1H)，3.79-3.81(m，3H)，3.75-3.78(m，2H)，3.58(dd，J＝2.87，10.61Hz，1H)，3.13-3.32(m，1H)，0.88-0.88(m，1H)，0.86-0.88(m，8H)，0.17(br d，J＝11.50Hz，1H)，0.06-0.08(m，3H)，-0.02-0.00(m，3H)。

制备中间体14G：

向中间体14E(445mg，0.68mmol)的无水DCM(10mL)溶液中添加1.0M的1H-咪唑-4,5-二甲腈(0.543mL，0.543mmol)的乙腈溶液，然后逐滴添加3-((双(二异丙基氨基)膦烷基)氧基)丙腈(0.409g，1.36mmol)。添加完成后，将混合物物在室温搅拌10小时。将混合物用MeOH(2mL)淬灭然后用100mL的DCM稀释，用饱和NaHCO₃水溶液洗涤，经MgSO₄干燥，然后浓缩至干。残余物经硅胶柱色谱提纯(40g柱，0-50％EtOAc/DCM/含0.5％Et3N)，得到中间体14G(449mg，0.52mmol，77％产率)。

制备中间体14H：

将中间体13C(158mg，0.29mmol)和1H-四唑(92mg，1.31mmol)在无水ACN(5mL)中的混合物浓缩至干(重复2次)。将中间体14G(225mg，0.263mmol)溶于ACN(5mL)并浓缩至干(重复2次)。然后，将分子筛(0.5g)和乙腈(10mL)添加至中间体14B中，且随后将该溶液添加至无水ACN(2mL)中的中间体13C中。将反应在室温搅拌90分钟，然后添加(E)-N,N-二甲基-N'-(3-硫代-3H-1,2,4-二噻唑-5-基)甲亚酰胺(108mg，0.53mmol)。将反应保持搅拌10小时。随后将反应通过硅藻土过滤，并减压浓缩。将残余物溶于DCM(5mL)中，然后滴加2,2-二氯乙酸(0.130mL，1.58mmol)。将反应混合物浓缩，然后与MeOH共沸数次。粗产物经硅胶色谱提纯(12g柱，0-20％MeOH/DCM，15min)得到中间体14H(70mg，25％产率)，将其直接用于下一步骤中。m/z 1061.4(M+H)。

制备中间体14I：

向中间体14H(70mg)的丙酮(2mL)溶液中添加碘化钠(0.118g，0.79mmol)。将混合物在50℃搅拌2小时。随后将混合物浓缩至干并将残余物用硅胶柱色谱提纯，用0-40％DCM中的MeOH洗脱，得到中间体14I(30mg，44％产率)。LCMS(ES，m/z)：1021.4[M+H]⁺。

制备中间体14J：

向1-(均三甲苯基磺酰基)-3-硝基-1H-1,2,4-三唑(87mg，0.29mmol)的吡啶(3mL)溶液中逐滴添加中间体14I(30mg，0.029mmol)的吡啶(2mL)溶液。将混合物在室温搅拌过夜。将混合物减压浓缩并随后将残余物经硅胶柱色谱提纯，用0-15％DCM中的MeOH洗脱，得到产物，中间体14J(25mg，85％)。LCMS(ES，m/z)：1003.4[M+H]⁺。

实施例14

将中间体14J(25mg)溶于7N氨/MeOH(2mL)中，然后在50℃加热10小时。随后，混合物在氮气流中经浓缩至干。将所得固体悬浮于三乙胺三氢氟酸盐(0.5mL)中并在37℃加热2小时。向反应随后添加2M乙酸铵溶液(2mL)并继续搅拌20分钟。随后将混合物过滤并经制备型HPLC色谱提纯(条件：Agilent Zorbax Eclipse Plus C18 Prep柱，5μm，21.2X250mm，流速：20mL/min，流动相：A：100mM NH₄OAc(pH 6.5)；B：乙腈)，得到实施例14(0.7mg)。m/z：664.4(M+H)。¹H NMR(499MHz，甲醇-d₄)δ8.59-8.62(m，1H)，8.47-8.52(m，1H)，8.24-8.30(m，1H)，8.06-8.11(m，1H)，7.85-7.90(m，1H)，6.36-6.42(m，1H)，5.30-5.46(m，1H)，4.96-5.00(m，3H)，4.56-4.64(m，2H)，4.31-4.43(m，2H)，4.18-4.28(m，2H)，4.03-4.13(m，2H)。

实施例15

(1S,8R,9R,10S,15R,17R,18R)-8-(2-氨基-6-氧代-6,9-二氢-1H-嘌呤-9-基)-17-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-3,9,18-三羟基-12-硫烷基-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-3,12-二酮

步骤1：

将PL-FMP树脂(2-(4-甲酰基-3-甲氧基苯氧基)乙基聚苯乙烯，85g，1.00mmol/g负载，约85mmol，100-200目，Novabiochem)用约600mL DMF(N，N-二甲基甲酰胺)在室温溶胀，然后排出过量的溶剂。在添加额外的400mL的DMF后，将苯基甲胺(21.43g，200mmol)和乙酸(18mL，9.43mmol)(3％x600mL＝18.5mL)添加至反应容器中。搅拌10分钟后，添加三乙酰氧基硼氢化钠(33.9g，160mmol)。将反应搅拌过夜。树脂随后用以下洗涤顺序洗涤：DMF(1x)，然后用THF/H₂O/AcOH(6:3:1)、DMF、DCM(3x/次)，用5％DCM中的Et₃N 3次，最后用MeOH，然后在室温真空干燥过夜，得到树脂15A(负载：0.87mmol/g)。

向6-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)己酸(14.40g，40.8mmol)和HATU(15.49g，40.8mmol)的DMF(60mL)溶液中添加预溶胀的树脂15A(负载：0.87mmol/g，23.3g的树脂)，然后添加DIEA(11.39mL，65.2mmol)。将混合物搅拌10小时。树脂批次用以下洗涤顺序洗涤：DMF、DCM、DMF、MeOH、DCM和DMF(每种2x)。将树脂随后用20％DMF中的哌啶处理(3x，5min/次)。将树脂依次用DMF和DCM(2x)洗涤，并干燥，得到树脂15B。(0.76mmol/g负载)。

将树脂15B(16mmol，25g，0.76mmol/g负载)用无水DMF(2x)在氮气下溶胀，悬浮于额外的无水DMF(100mL)和2-(3-氯-4-羟基苯基)乙酸(8956mg，48.0mmol)中，并添加DIEA(13.97mL，80mmol)。将混合物搅拌数分钟，然后添加HATU(18.3g，48.0mmol)并继续搅拌10小时。树脂批次用以下洗涤顺序洗涤：DMF、DCM、THF、MeOH和THF。然后，树脂用20/40/40mL的1N NaOH/MeOH/THF处理过夜。树脂随后用MeOH/水(2x)、THF/水(2x)、THF(2x)、DCM(4x)和Et₂O洗涤然后干燥，得到树脂15C。(负载：约0.70mmol/g)。

步骤2：

将(2R,3R,4R,5R)-5-(6-苯甲酰氨基-9H-嘌呤-9-基)-2-((双(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氢呋喃-3-基(2-氰基乙基)二异丙基亚磷酰胺(4.5g，4.55mmol)与无水丙酮共蒸发数次，然后溶于DCM(23mL)中。在无水条件下，将树脂15C(3.5mmol，5g树脂，负载：0.7mmol/g)用无水乙腈(2x30mL)在氮气下溶胀，然后添加上述亚磷酰胺和1H-四唑(1.23g，17.50mmol)的无水乙腈(30mL)溶液。将反应混合物在室温搅拌2小时，在氮气下用无水DCM(3x)洗涤，并添加无水DCM(20mL)。添加2-丁酮过氧化物(4.41g，21.00mmol)并将混合物搅拌40分钟。树脂随后用DCM(4x)洗涤并干燥。树脂通过用含N-Me-咪唑(3当量)的DCM(20mL)中的1:1Ac₂O/吡啶(10mL)处理30分钟加盖。随后，将树脂用3％DCM中的2,2-二氯乙酸(3x5min/次)处理以除去DMTr。树脂用DCM(3x)、MeCN(2x)、DCM(2x)和无水MeCN(2x)洗涤。最后，将树脂用Et₃N/吡啶处理。负载树脂随后用DCM(3x)、MeCN(2x)、DCM(2x)和无水MeCN(2x)洗涤，然后真空干燥，得到树脂15D。

步骤3：

将中间体15E(ARKPHARMINC，WO 02/18405 A2，0.34g，0.35mmol)与无水乙腈共蒸发数次，然后溶于无水DCM(25mL)中。在无水条件下，在氮气下将树脂15D(0.175mmol)用无水乙腈(6mL)溶胀2次。向树脂添加1H-四唑(1.05mmol)的无水CH₃CN(3mL)溶液，然后添加中间体15E的上述溶液。将反应混合物在室温搅拌3小时。在氮气下，树脂用无水DCM(3x)y洗涤，悬浮于无水DCM(10mL)，并添加DDTT(0.52mmol)。将反应在室温搅拌40分钟。随后，将树脂用DCM(2x)、CH₃CN(2x)、DCM(3x)和Et₂O(2x)洗涤，然后真空干燥。树脂随后用DCM中的1:1Ac₂O/DIEA混合物(20当量)处理20分钟，然后用DCM(3x)和CH₃CN(3x)洗涤，然后用3％DCM中的2,2-二氯乙酸处理(3x，每次10min)以除去DMTr基团。树脂随后用DCM、DMF、DCM和CH₃CN(每种3x)洗涤然后真空干燥。树脂随后用0.1M的MSNT溶液处理(2x4h，1x12h)。树脂随后用DCM、吡啶、DCM和CH₃CN(每种2x)洗涤然后用TEA/吡啶(1:1)处理(3x1小时)。最后，树脂用DCM、DMF、DCM和ACN洗涤(每种3x)，然后干燥。树脂随后用NH₄OH(33％)/MeOH(1:1比率，8mL)在55℃处理10小时。除去溶剂并将残余物用三乙胺三氢氟酸盐(0.35mL，2.15mmol)在37℃处理3小时。将混合物用乙酸铵(1.0M，2mL)淬灭，并随后将混合物在35℃剧烈搅拌30分钟。冷却至室温后，将溶液过滤，且滤液使用以下条件经制备型LC/MS提纯：柱：Agilent BonusRP 21.2x100mm，5-μm颗粒；流动相A：含20-mM乙酸铵的水；流动相B：乙腈；梯度：在0％B保持0-6分钟.0％-25％B over 16分钟，然后保持在100％B 4分钟；流速：20mL/min。合并含所需产物的级分并通过离心蒸发干燥，得到实施例15。LCMS，[M+H]^-＝691.1。保留时间＝1.9min。(柱：Agilent Bonus RP，2.1mm x 50mm，1.8μm颗粒；流动相A：含20mM乙酸铵的水；流动相B：乙腈。温度：50℃；梯度：在0％B保持1min，然后经4分钟0％B至100％B，然后在100％B保持0.75分钟；流速：1mL/min)。

实施例16

(1S,6R,8R,9R,10S,15R,17R,18R)-8-(2-氨基-6-氧代-6,9-二氢-1H-嘌呤-9-基)-3,9,18-三羟基-17-{3H-咪唑并[2,1-f]嘌呤-3-基}-12-硫烷基-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-3,12-二酮

(1S,6R,8R,9R,10S,15R,17R,18R)-3,9,18-三羟基-17-{3H-咪唑并[2,1-f]嘌呤-3-基}-8-{9-氧代-3H,4aH,5H,9H,9aH-咪唑并[1,2-a]嘌呤-3-基}-12-硫烷基-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-3,12-二酮

将实施例15(14.79mg，0.021mmol)溶于NaOAc/HOAc缓冲液(1mL，pH＝4.5)并添加2-氯乙醛(50％，在水中，0.321mmol)，并将混合物在室温搅拌48小时。使用以下条件经制备型LC/MS提纯粗物质：柱：Agilent Bonus RP，200mm x 21.2mm，5-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈：含20-mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈：含20-mM乙酸铵的水；梯度：保持在0％B 6分钟，经20分钟0-25％B，然后在100％B保持4分钟；流速：20mL/min；柱温：25℃。MS信号触发级分收集。合并含所需产物的级分并通过离心蒸发干燥，得到实施例16(1.6mg)。LC/MS，m/z714.9(M+1)。保留时间：2.07min，LC/MS(Agilent Bonus RP，2.1mm x 50mm，1.8μm颗粒；流动相A：含20mM乙酸铵的水；流动相B：乙腈。温度：50℃；梯度：在0％B保持1min，然后经4分钟0％B至100％B，然后在100％B保持0.75分钟；流速：1mL/min；检测)。还分离出实施例17(0.8mg)。LC/MS，m/z 738.0(M+1)。保留时间：1.96min。(Agilent Bonus RP，2.1mm x 50mm，1.8μm颗粒；流动相A：含20mM乙酸铵的水；流动相B：乙腈。温度：50℃；梯度：在0％B保持1min，然后经4分钟0％B至100％B，然后在100％B保持0.75分钟；流速：1mL/min；检测)

实施例18

(1S,6R,8R,9R,10S,15R,17R,18R)-3,9,12,18-四羟基-8-{3H-咪唑并[2,1-f]嘌呤-3-基}-17-(6-氧代-6,9-二氢-1H-嘌呤-9-基)-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-3,12-二酮

将(1S,6R,8R,9R,10S,15R,17R,18R)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-3,9,12,18-四羟基-17-(6-氧代-6,9-二氢-1H-嘌呤-9-基)-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-3,12-二酮(J.Med Chem.，2016，59，10253)(8.3mg，0.013mmol)溶于NaOAc缓冲液(0.4mL，pH＝4.5)中。添加50％水中的2-氯乙醛溶液(40μL，0.013mmol)并将混合物在室温搅拌过夜。使用以下条件经制备型LC/MS提纯粗物质：柱：Agilent Bonus RP，200mm x 21.2mm，5-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈：含20-mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈：含20-mM乙酸铵的水；梯度：保持在0％B 6分钟，经20分钟0-40％B，然后在100％B保持4分钟；流速：20mL/min；合并含所需产物的级分并干燥，得到实施例18。HPLC保留时间＝1.89min(Agilent Bonus RP，2.1mm x50mm，1.8μm颗粒；流动相A：含20mM乙酸铵的水；流动相B：乙腈。梯度：在0％B保持1min，然后经4分钟0％B至100％B，然后在100％B保持0.75分钟；流速：1mL/min；检测：MS和UV(220nm))，MS(ES)：m/z＝684[M+H]⁺。

实施例19

(1S,6R,8R,9R,10S,15R,17R,18R)-3,9,12,18-四羟基-8,17-双({3H-咪唑并[2,1-f]嘌呤-3-基})-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-3,12-二酮

将(1S,6R,8R,9R,10S,15R,17R,18R)-8,17-双(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-3,9,12,18-四羟基-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ5,12λ5-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-3,12-二酮(Synthesis，2006，24，4230)(15mg，0.023mmol)溶于NaOAc缓冲液(1.5mL，pH＝4.5)中。添加50％2-氯乙醛的水(0.5mL，0.58mmol)溶液并将混合物在室温搅拌过夜。粗物质使用以下条件经制备型LC/MS提纯：柱：Agilent Bonus RP，200mm x 21.2mm，5-μm颗粒；流动相A：5:95乙腈：含20-mM乙酸铵的水；流动相B：95:5乙腈：含20-mM乙酸铵的水；梯度：保持在0％B6分钟，经20分钟0-40％B，然后在100％B保持4分钟；流速：20mL/min；合并含所需产物的级分并干燥，得到实施例19。HPLC保留时间＝1.98min(Agilent Bonus RP，2.1mm x 50mm，1.8μm颗粒；流动相A：含20mM乙酸铵的水；流动相B：乙腈。梯度：在0％B保持1min，然后经4分钟0％B至100％B，然后在100％B保持0.75分钟；流速：1mL/min；检测：MS和UV(220nm))，MS(ES)：m/z＝707[M+H]⁺。

实施例20

(1R,6R,8R,9R,10S,15R,17R,18R)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-18-氟-3,9,12-三羟基-17-{3H-咪唑并[2,1-f]嘌呤-3-基}-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-3,12-二酮

制备中间体20A：

将(2R,3R,4R,5R)-5-(6-苯甲酰氨基-9H-嘌呤-9-基)-2-((双(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氢呋喃-3-基(2-氰基乙基)二异丙基亚磷酰胺(Organic Process Research&Development 2000，4，175-181)(360mg，0.364mmol)与乙腈(10mL)共蒸发3次，最后1次剩余约3mL的溶剂。向溶液中添加分子筛(10块)。将中间体3D(100mg，0.28mmol)溶于DMF(4mL)，并添加ACN(4mL)。将混合物浓缩以除去大部分的ACN。然后，添加分子筛(100mg)并将混合物搅拌10分钟。通过套管向混合物添加上述干燥的(2R,3R,4R,5R)-5-(6-苯甲酰氨基-9H-嘌呤-9-基)-2-((双(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)四氢呋喃-3-基(2-氰基乙基)二异丙基亚磷酰胺，并将混合物搅拌30分钟。添加1H-四唑(58.8mg，0.84mmol)，且混合物经超声处理，并搅拌1小时，然后添加2-丁酮过氧化物(111μL，0.560mmol)并继续搅拌30分钟。将反应混合物过滤并将滤液浓缩至约5mL的体积。将溶液直接负载至C18柱(50g，ISCOGold，用0-95％水性NH₄OAc中的ACN洗脱)，得到中间体20A(105mg，30％产率)。HPLC保留时间＝0.93min(H₂O/含0.05％TFA的ACN，Waters Acquity HPLC BEH C18，2.1x50mm，1.7-μm颗粒，梯度＝2min，波长＝220nm)；MS(ES)：m/z＝1260[M+H]⁺。

制备中间体20B：

向中间体20A(105mg，0.083mmol)的DCM(2mL)溶液中添加三乙基硅烷(0.080mL，0.500mmol)，然后添加2,2-二氯乙酸(0.021mL，0.25mmol)。将混合物在室温搅拌1小时，然后添加吡啶(3mL)并将混合物浓缩。将残余物与吡啶(3x20mL)共蒸发，最后1次约15mL的溶剂。向该溶液中添加2-氯-5,5-二甲基-1,3,2-二氧杂膦烷2-氧化物(76mg，0.410mmol)，并将反应搅拌8分钟，然后添加水(0.052mL，2.87mmol)，立即接着添加碘(62.4mg，0.246mmol)。将反应搅拌30分钟，然后用亚硫酸氢钠的水(3mL)溶液(42.6mg，0.410mmol)淬灭然后浓缩。残余物经反相(C18)色谱提纯并用5-95％水性10mM NH₄OAc中的ACN洗脱，得到中间体20B(47mg，60％)。HPLC保留时间＝0.75min(H₂O/含0.05％TFA的ACN，WatersAcquity HPLC BEH C18，2.1x50mm，1.7-μm颗粒，梯度＝2min，波长＝220nm)；MS(ES)：m/z＝956[M+H]⁺。

实施例20

将中间体20B(47mg，0.049mmol)用33％EtOH中的MeNH₂(3mL)处理并搅拌3小时。将反应混合物浓缩至干，并将残余物用TEA·3HF(1mL)处理，加热至50℃3.5小时，然后冷却至室温。将反应用1M NH₄HCO₃中和。溶液经制备型LC/MS提纯，使用以下条件：柱：AgilentBonus RP 21.2x100mm，5-μm颗粒；流动相A：含20-mM乙酸铵的水；流动相B：乙腈；梯度：在0％B保持0-6分钟。经16分钟0％-25％B，然后保持在100％B 4分钟；流速：20mL/min。合并含所需产物的级分并干燥，得到实施例20。HPLC保留时间＝1.96min(Agilent Bonus RP，2.1mm x 50mm，1.8μm颗粒；流动相A：含20mM乙酸铵的水；流动相B：乙腈。温度：50℃；梯度：在0％B保持1min，然后经4分钟0％B至100％B，然后在100％B保持0.75分钟；流速：1mL/min；检测：MS和UV(220nm))MS(ES)：m/z＝685[M+H]⁺。

实施例21

(1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-9,18-二氟-17-{3H-咪唑并[2,1-f]嘌呤-3-基}-3,12-二硫烷基-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-3,12-二酮

制备中间体21A：

将(2R,3R,4R,5R)-5-(6-苯甲酰氨基-9H-嘌呤-9-基)-2-((双(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-4-氟四氢呋喃-3-基(2-氰基乙基)二异丙基亚磷酰胺(956mg，1.09mmol)与ACN(2x10mL)共蒸发，然后溶于乙腈(10mL)并浓缩至约4mL。向溶液中添加分子筛在另外的烧瓶中，将中间体3D(300mg，0.84mmol)与ACN(2x10mL)共蒸发。将残余物再次溶于乙腈(10mL)并浓缩至约4mL。将上述干燥的(2R,3R,4R,5R)-5-(6-苯甲酰氨基-9H-嘌呤-9-基)-2-((双(4-甲氧基苯基)(苯基)甲氧基)甲基)-4-氟四氢呋喃-3-基(2-氰基乙基)二异丙基亚磷酰胺溶液通过套管添加至中间体3D的混合物中。所得溶液经超声处理并搅拌约30分钟，然后添加(E)-N,N-二甲基-N'-(3-硫代-3H-1,2,4-二噻唑-5-基)甲亚酰胺(345mg，1.68mmol)并继续搅拌30分钟。随后将混合物浓缩，然后用MeOH处理。通过过滤除去所得固体，且滤液经C18反相色谱(50g Gold柱，用5-95％水性NH₄OAc中的ACN洗脱)提纯。将所需级分合并，并冻干，得到中间体21A(280mg，28.6％)。HPLC保留时间＝0.86min和0.88min(H₂O/含0.05％TFA的ACN，Waters Acquity HPLC BEH C18，2.1x50mm，1.7-μm颗粒，梯度＝2min，波长＝220nm)；MS(ES)：m/z＝1164[M+H]⁺。

制备中间体21B：

向中间体21A(280mg，0.241mmol)的DCM(4mL)溶液中添加2滴水和三乙基硅烷(0.19mL，1.20mmol)，然后添加2,2-二氯乙酸(0.199mL，2.41mmol)，并将混合物在室温搅拌1.5小时。随后用吡啶(3mL)淬灭反应，然后浓缩。将残余物与吡啶共蒸发1次。随后将残余物溶于30mL的吡啶中，并浓缩至约20mL的体积。随后向溶液中添加2-氯-5,5-二甲基-1,3,2-二氧杂膦烷2-氧化物(222mg，1.20mmol)。将混合物搅拌8分钟，然后添加H₂O(0.15mL，8.42mmol)，随后立即添加(E)-N,N-二甲基-N'-(3-硫代-3H-1,2,4-二噻唑-5-基)甲亚酰胺(148mg，0.722mmol)。将混合物搅拌1小时，然后浓缩，并与甲苯共沸以除去过量的吡啶。将残余物经硅胶柱色谱提纯(24g，MeOH/DCM＝0-30％，在30％保持10分钟)，得到中间体21B。HPLC保留时间＝0.66min和0.68min(H₂O/含0.05％TFA的ACN，Waters Acquity HPLC BEHC18，2.1x50mm，1.7-μm颗粒，梯度＝2min，波长＝220nm)；MS(ES)：m/z＝876[M+H]⁺。

实施例21

将中间体21B用MeOH(10mL)和浓NH₄OH(15mL)处理。将溶液在室温搅拌5小时，然后浓缩。粗物质使用以下条件经制备型LC/MS提纯：柱：Agilent Bonus RP 21.2x100mm，5-μm颗粒；流动相A：含20-mM乙酸铵的水；流动相B：乙腈；梯度：在0％B保持0-6分钟。经20分钟0％-40％B，然后在100％B保持4分钟；流速：20mL/min。合并含所需产物的级分并干燥。得到四种异构体。

实施例21-1：2.4mg，HPLC保留时间＝2.61min(Agilent Bonus RP，2.1mm x 50mm，1.8μm颗粒；流动相A：含20mM乙酸铵的水；流动相B：乙腈。温度：50℃；梯度：在0％B保持1min，然后经4分钟0％B至100％B，然后在100％B保持0.75分钟；流速：1mL/min；检测：MS和UV(220nm))MS(ES)：m/z＝719[M+H]⁺。

实施例21-2：32.4mg，HPLC保留时间＝2.73min(Agilent Bonus RP，2.1mm x50mm，1.8μm颗粒；流动相A：含20mM乙酸铵的水；流动相B：乙腈。温度：50℃；梯度：在0％B保持1min，然后经4分钟0％B至100％B，然后在100％B保持0.75分钟；流速：1mL/min；检测：MS和UV(220nm))MS(ES)：m/z＝719[M+H]⁺。

实施例21-3：3.9mg，HPLC保留时间＝2.77min(Agilent Bonus RP，2.1mm x 50mm，1.8μm颗粒；流动相A：含20mM乙酸铵的水；流动相B：乙腈。温度：50℃；梯度：在0％B保持1min，然后经4分钟0％B至100％B，然后在100％B保持0.75分钟；流速：1mL/min；检测：MS和UV(220nm))MS(ES)：m/z＝719[M+H]⁺。

实施例21-4：27.5mg，HPLC保留时间＝2.97min(Agilent Bonus RP，2.1mm x50mm，1.8μm颗粒；流动相A：含20mM乙酸铵的水；流动相B：乙腈。温度：50℃；梯度：在0％B保持1min，然后经4分钟0％B至100％B，然后在100％B保持0.75分钟；流速：1mL/min；检测：MS和UV(220nm))MS(ES)：m/z＝719[M+H]⁺。

生物活性的评估

STING THP1报告基因测定方案

THP1-Dual^TM细胞通过两种诱导型报告基因构建物的稳定整合而衍生自人THP-1单核细胞。为此，THP1-Dual^TM细胞通过评估分泌的萤光素酶(Lucia)的活性来监测SEAP和IRF途径的活性，从而可以同时研究NF-κB途径。当使用SEAP检测试剂QUANTI-Blue^TM 和萤光素酶检测试剂QUANTI-Luc^TM 时，两种报告蛋白都可以在细胞培养上清液中轻松测量。

THP1-Dual^TM细胞响应STING激动剂而诱导NF-κB的激活。在用STING激动剂(例如cGAMP)刺激后，它们还会触发IRF途径。在这里，THP-1-Dual细胞用于评估STING结合物在细胞水平上的功能。

将化合物在DMSO中的系列稀释液以100nl/孔的量添加到小体积384孔板中，使用ECHO声学分配器(Labcyte，型号550)在细胞悬浮液中达到100μM的最终起始浓度。在用于SEAP分析的小体积384孔黑壁透明底部组织培养板(Corning，目录号3542)并用于萤光素酶分析的小体积固体白色板(Corning，目录号3826)上，在含有10％人血浆的RPMI培养基(Gibco，目录号11875)中，将THP-1Dual^TMSTING报告细胞(Invivogen，目录号THPD-nfis的双细胞)以每孔10μL的15,000个细胞的浓度添加到具有化合物的板上。保留板的一列用于以100μM的cGAMP进行处理用于100％激活计算，并保留一列不进行任何处理(仅DMSO)用于基线激活。然后将平板在5％CO₂的37℃温育箱中温育20小时。

在SEAP测定中，将5μl的2x QuantiBlue(Invivogen，目录号Rep-qb2)添加至384孔装有THP1细胞的黑色板中，并在37℃温育2小时。在Envision(Perkin Elmer)上以620nm波长(OD620)读取板。在萤光素酶测定中，将5μl的Quantiluc(Invivogen，Rep-qlc2)加入装有THP1细胞的白色384孔板中，并在5分钟时在Envision(Perkin Elmer)上使用发光方案(RLU)读取。对于两种细胞系，通过用100μM的cGAMP(Invivogen，目录号TLRL-NACGA23-5)刺激的THP-1Dual STING细胞的值(RLU)确定100％活化。

STING HTRF结合测定

时间分辨的基于FRET的竞争结合测定用于评估测试物与STING WT和STING AQ的结合。将浓度为20nM的带有His标记的STING细胞质结构域(WT或AQ)与2.5nM Tb标记的抗His抗体、测试化合物和荧光素标记的cGAMP类似物探针(BioLog目录号C195)(浓度为200nM(STING WT)或40nM(STING AQ))在含有0.005％Tween-20和0.1％BSA的PBS中孵育1小时。使用EnVision微孔板读数器测量495nm和520nm处的荧光，以定量Tb标记的抗His抗体和荧光素标记的探针之间的FRET。将背景定义为在不存在STING蛋白的情况下获得的信号，并将背景扣除的FRET比标准化为在不存在测试化合物的情况下获得的最大信号。这些值被转换为抑制百分数。确定了11种浓度的测试化合物的抑制百分比。使用4参数对数方程计算IC₅₀以拟合数据，其定义为将探针的特异性结合降低50％所需的竞争测试化合物的浓度。

STING WT：His-TVMV-S-hSTING(155-341)-H232R

STING AQ：His-TVMV-S-hSTING(155-341)-G230A-R293Q

序列表

<110> 百时美施贵宝公司

<120> 作为抗癌剂的环二核苷酸

<130> 13016-WO-PCT

<150> US 62/570,386

<151> 2017-10-10

<160> 2

<170> PatentIn版本3.5

<210> 1

<211> 210

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 智人

<400> 1

Met Gly Ser Ser His His His His His His Ser Ser Gly Glu Thr Val

1 5 10 15

Arg Phe Gln Gly His Met Ser Val Ala His Gly Leu Ala Trp Ser Tyr

20 25 30

Tyr Ile Gly Tyr Leu Arg Leu Ile Leu Pro Glu Leu Gln Ala Arg Ile

35 40 45

Arg Thr Tyr Asn Gln His Tyr Asn Asn Leu Leu Arg Gly Ala Val Ser

50 55 60

Gln Arg Leu Tyr Ile Leu Leu Pro Leu Asp Cys Gly Val Pro Asp Asn

65 70 75 80

Leu Ser Met Ala Asp Pro Asn Ile Arg Phe Leu Asp Lys Leu Pro Gln

85 90 95

Gln Thr Gly Asp Arg Ala Gly Ile Lys Asp Arg Val Tyr Ser Asn Ser

100 105 110

Ile Tyr Glu Leu Leu Glu Asn Gly Gln Arg Ala Gly Thr Cys Val Leu

115 120 125

Glu Tyr Ala Thr Pro Leu Gln Thr Leu Phe Ala Met Ser Gln Tyr Ser

130 135 140

Gln Ala Gly Phe Ser Arg Glu Asp Arg Leu Glu Gln Ala Lys Leu Phe

145 150 155 160

Cys Arg Thr Leu Glu Asp Ile Leu Ala Asp Ala Pro Glu Ser Gln Asn

165 170 175

Asn Cys Arg Leu Ile Ala Tyr Gln Glu Pro Ala Asp Asp Ser Ser Phe

180 185 190

Ser Leu Ser Gln Glu Val Leu Arg His Leu Arg Gln Glu Glu Lys Glu

195 200 205

Glu Val

210

<210> 2

<211> 210

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 智人

<400> 2

Met Gly Ser Ser His His His His His His Ser Ser Gly Glu Thr Val

1 5 10 15

Arg Phe Gln Gly His Met Ser Val Ala His Gly Leu Ala Trp Ser Tyr

20 25 30

Tyr Ile Gly Tyr Leu Arg Leu Ile Leu Pro Glu Leu Gln Ala Arg Ile

35 40 45

Arg Thr Tyr Asn Gln His Tyr Asn Asn Leu Leu Arg Gly Ala Val Ser

50 55 60

Gln Arg Leu Tyr Ile Leu Leu Pro Leu Asp Cys Gly Val Pro Asp Asn

65 70 75 80

Leu Ser Met Ala Asp Pro Asn Ile Arg Phe Leu Asp Lys Leu Pro Gln

85 90 95

Gln Thr Ala Asp Arg Ala Gly Ile Lys Asp Arg Val Tyr Ser Asn Ser

100 105 110

Ile Tyr Glu Leu Leu Glu Asn Gly Gln Arg Ala Gly Thr Cys Val Leu

115 120 125

Glu Tyr Ala Thr Pro Leu Gln Thr Leu Phe Ala Met Ser Gln Tyr Ser

130 135 140

Gln Ala Gly Phe Ser Arg Glu Asp Arg Leu Glu Gln Ala Lys Leu Phe

145 150 155 160

Cys Gln Thr Leu Glu Asp Ile Leu Ala Asp Ala Pro Glu Ser Gln Asn

165 170 175

Asn Cys Arg Leu Ile Ala Tyr Gln Glu Pro Ala Asp Asp Ser Ser Phe

180 185 190

Ser Leu Ser Gln Glu Val Leu Arg His Leu Arg Gln Glu Glu Lys Glu

195 200 205

Glu Val

210

Claims

1.化合物，其为

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

2.化合物，其为

或其药学上可接受的盐、互变异构体或立体异构体。

3.化合物，其为

1-[(1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-17-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-9,18-二氟-3,12-二氧代-3,12-二硫烷基-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-8-基]-1H-1,2,3-苯并三唑-4-甲酰胺，

1-[(1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-17-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-9,18-二氟-3,12-二羟基-3-氧代-12-亚硫烷基-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0⁶ ^,10]十八烷-8-基]-1H-1,2,3-苯并三唑-4-甲酰胺，

1-[(1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-9,18-二氟-3,12-二羟基-17-{3H-咪唑并[2,1-f]嘌呤-3-基}-3,12-二氧代-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0⁶ ^,10]十八烷-8-基]-1H-1,2,3-苯并三唑-4-甲酰胺，

(1R,6R,8R,9R,10R,15R,17R,18R)-8-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)-9,18-二氟-3,12-二硫烷基-17-{3H-[1,2,4]三唑并[3,2-f]嘌呤-3-基}-2,4,7,11,13,16-六氧杂-3λ⁵,12λ⁵-二磷杂三环[13.3.0.0^6,10]十八烷-3,12-二酮，

或其药学上可接受的盐。

4.一种药物组合物，其包含根据权利要求1-3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐以及一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

5.根据权利要求1-3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗疾病和病况的药物中的用途，其中STING的调节适用于所述疾病和病况。

6.根据权利要求1-3中任一项所述的一种或多种化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗癌症的药物中的用途。

7.根据权利要求6所述的用途，其中所述癌症是小细胞肺癌、非小细胞肺癌、结直肠癌、黑素瘤、肾细胞癌、头颈癌、霍奇金淋巴瘤、膀胱癌、食道癌、胃癌、卵巢癌、宫颈癌、胰腺癌、前列腺癌、乳腺癌、泌尿道癌、诸如成胶质细胞瘤的脑肿瘤、非霍奇金淋巴瘤、急性淋巴性白血病(ALL)、慢性淋巴性白血病(CLL)、急性骨髓性白血病(AML)、慢性骨髓性白血病(CML)、肝细胞癌、多发性骨髓瘤、胃肠道间质瘤、间皮瘤和其它实体瘤或其它血液学癌症。

8.根据权利要求7所述的用途，其中所述癌症是小细胞肺癌、非小细胞肺癌、结直肠癌、黑素瘤、肾细胞癌、头颈癌、霍奇金淋巴瘤或膀胱癌。

9.根据权利要求1-3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于在受试者中治疗癌症的药物中的用途，其中所述治疗包括给药根据权利要求1-3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其与一种或多种免疫肿瘤药剂联合给药。

10.根据权利要求1-3中任一项所述的化合物，或其药学上可接受的盐在制备用于治疗罹患癌症的受试者的药物中的用途，其中所述治疗包括向所述受试者给药

a)根据权利要求1-3中任一项所述的化合物，或其药学上可接受的盐，和

b)抗癌剂，其为抗体或其抗原结合部分，可特异性结合程序性死亡-1(PD-1)受体并抑制PD-1活性。

11.根据权利要求10所述的用途，其中所述抗-PD-1抗体为纳武单抗或帕博利珠单抗。

12.根据权利要求11所述的用途，其中所述抗-PD-1抗体为纳武单抗。