CN118975979A

CN118975979A - 稳定的肽组合物

Info

Publication number: CN118975979A
Application number: CN202411078100.6A
Authority: CN
Inventors: 戈登·W·劳瑞; 马克·G·奥德里奇; 米歇尔·卡朋特; 托马斯·R·加德克; 保罗·A·拉斯卡
Original assignee: Tearsolutions Inc; University of Virginia Patent Foundation
Current assignee: Tearsolutions Inc; UVA Licensing and Ventures Group
Priority date: 2017-02-21
Filing date: 2018-02-20
Publication date: 2024-11-19

Abstract

本申请总体上涉及包含低水平的缓冲剂和螯合剂的稳定的肽组合物和试剂盒、以及使用所述肽组合物和试剂盒的方法。

Description

稳定的肽组合物

相关技术描述

多肽越来越被视为潜在的治疗剂。因此，在药学研究与开发中对于多肽的探索存在着增加的兴趣。然而，众所周知，多肽难以配制，并且用于保存或稳定此类制剂的添加剂导致例如不期望的副作用。

发明概述

对于这样的肽组合物存在着未满足的需求：所述肽组合物提供治疗量的肽，在室温下是稳定的，并且仅含有痕量的稳定剂和/或防腐剂或者完全不含有稳定剂和/或防腐剂。为了满足此类需求和其它需求，本申请的若干实施方案提供稳定的多肽组合物。有利地，在一些实施方案中，肽(或肽的组合)在本申请的组合物中是稳定的，从而允许在延长时间段内的长期储存和/或递送。因此，这些肽组合物在非冷冻温度下是稳定的，无需重构，并且在一系列的温度(包括在0-30℃范围内的温度)下是起作用的。实际上，本申请的某些实施方案部分基于以下令人惊讶的和出乎意料的发现：包含与低水平的柠檬酸盐缓冲剂组合的低水平的EDTA的稀释肽组合物在室温储存后仍然是有效的，即使此类组合物含有显著低于通常存在于多肽组合物中的添加剂水平亦如此。

一些实施方案提供组合物(例如，液体组合物)，其包含下列组分、由下列组分组成、或者基本上由下列组分组成：约0.00001％-0.1％、0.001％-0.1％(例如，0.01％或0.005％或0.001％)的多肽或其药学上可接受的盐；约0.03％-3％(例如，0.2888％)的缓冲剂；无或者约0.0001％-0.01％(例如，0％或0.001％)的EDTA二钠；无或者约0.005％-0.5％(例如，0％或0.05％)的泰洛沙泊和氯化钠(例如，0.5％)；其中该组合物的pH为约6.2至约6.8，并且该组合物的渗透压为约150-500mOsm/kg或更高(例如，250至350mOsm/kg)。液体组合物包括但不限于：组合、混合物、溶液、凝胶组合物和软膏。

在一些实施方案中，缓冲剂是柠檬酸盐缓冲剂。在一些实施方案中，柠檬酸盐缓冲剂包含约0.001％-0.1％(例如，0.0098％)的无水柠檬酸和约0.02％-2％(例如，0.279％)的柠檬酸钠二水合物。在一些实施方案中，组合物的pH为约6.5。

在一些实施方案中，组合物的渗透压为约280至约320mOsm/kg。在一些实施方案中，组合物的渗透压为约300mOsm/kg。在一些实施方案中，NaCl的量为0.4％和0.6％(例如，约0.5％)。

在一些实施方案中，组合物还包含对羟基苯甲酸酯，如对羟基苯甲酸甲酯(例如，0.04％或以下)。在替代实施方案中，不包含对羟基苯甲酸酯或其它防腐剂。在一些实施方案中，组合物还包含亚氯酸钠。

一些实施方案提供试剂盒，包含多个无菌的一次性使用的容器，其中每个容器包括用于容纳所述组合物的器皿。在一些实施方案中，容器包含约0.03mL至约1mL(例如，0.040mL、0.050mL、0.060mL、0.070mL、0.075mL、0.1mL、0.15mL、0.2mL、0.25mL、0.3mL、0.35mL、0.4mL、0.45mL、0.5mL、0.6mL、0.7mL、0.8mL、0.9mL)的组合物。在一些实施方案中，容器用于每日使用、每周使用或更长期使用。在一个实施方案中，使用1mL-30mL的容器。在一些实施方案中，容器是滴瓶或者凝胶/软膏管。在一些实施方案中，容器包括用于密封所述器皿的可移除的密封顶部和使所述器皿与所述密封顶部互相连接的颈部。

在一些实施方案中，容器由下列材料中的一种或多种制成：聚氯乙烯、聚丙烯、聚对苯二甲酸乙二醇酯、聚对苯二甲酸乙二醇酯G、高密度聚乙烯、低密度聚乙烯、聚对苯二甲酸丁二醇酯、聚氨酯、聚乙烯醋酸乙烯酯、硅酮、丙烯腈丁二烯苯乙烯、聚四氟乙烯、聚碳酸酯、聚苯乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯、聚砜、聚偏氯乙烯、或者它们的组合。在一些实施方案中，提供可降低组合物与容器内表面的粘附的玻璃容器和表面。

在一些实施方案中，多肽是具有SEQ ID NO：1的Lacripep^TM或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，多肽具有选自SEQ ID NO：2-9的序列、或其药学上可接受的盐、或其一个片段或多个片段。在一些实施方案中，多肽或其药学上可接受的盐具有与SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2-9至少约80％、85％、90％、95％、或98％的序列同源性。

一些实施方案提供给药方法，其包括从一次性使用的容器向眼睛局部应用组合物(如液体滴眼液)。一些实施方案提供给药方法，其包括从一次性使用的容器向眼睛局部应用组合物(如无菌无防腐剂的液体滴眼液)。

一些实施方案提供治疗干眼和/或原发性干燥综合征的方法，其包括将本文中所公开的组合物给药至患有干眼和/或原发性干燥综合征的对象的眼睛，其中多肽或其药学上可接受的盐的量为0.005％或0.01％，其中多肽具有由Ac-Lys-Gln-Phe-Ile-Glu-Asn-Gly-Ser-Glu-Phe-Ala-Gln-Lys-Leu-Leu-Lys-Ly s-Phe-Ser-NH2组成的序列，其中“Ac”代表乙酰基并且C末端被酰胺化(SEQ ID NO：1)，并且其中将一滴组合物以每日多达三次给药至对象的眼睛。在一些实施方案中，与开始治疗前的基线测量相比，在至少2周的治疗后、或者在至少4周的治疗后、或者在从4周的治疗开始至少6周后，给药改善对象眼睛中的荧光素角膜染色(FCS)总评分(NEI/行业研讨会(Industry Workshop)0-15量表)。在一些实施方案中，给药改善下列中的一种或多种：

与视觉模拟量表的基线相比，在至少2周的治疗后、或者在至少4周的治疗后的眼干燥；

与开始治疗前的基线测量相比，在至少2周的治疗后的SANDE(总体评分SANDE-1)；

与开始治疗前的基线测量相比，在至少2周的治疗后SANDE(总体评分SANDE-1)的平均评分；

与开始治疗前的基线测量相比，在至少2周的治疗后个体症状评估(瞬时的)；

与开始治疗前的基线测量相比，在至少2周的治疗后个体症状评估的平均评分(反映的)；

与开始治疗前的基线测量相比，在至少2周的治疗后对象眼睛中的LGCS；

与开始治疗前的基线测量相比，在至少2周的治疗后对象眼睛中的麻醉泪液分泌试验(Schirmer test)；

与开始治疗前的基线测量相比，在至少2周的治疗后对象眼睛中的TFBUT；

与开始治疗前的基线测量相比，在至少2周的治疗后对象眼睛中的FCS；

与开始治疗前的基线测量相比，在至少2周的治疗后、或者在至少4周的治疗后、或者在4周治疗后的1周的SANDE(SANDE-1的总体评分)；

与开始治疗前的基线测量相比，在至少2周的治疗后、或者在至少4周的治疗后、或者在4周治疗后的1周的个体症状(瞬时的)；

与开始治疗前的基线测量相比，在至少2周的治疗后、或者在至少4周的治疗后、或者在4周治疗后的1周(总体评分SANDE-2)的平均评分；

与开始治疗前的基线测量相比，在至少2周的治疗后、或者在至少4周的治疗后、或者在4周治疗后的1周个体症状评估的平均评分(反映的)；

与开始治疗前的基线测量相比，在至少2周的治疗后、或者在至少4周的治疗后的FCS和SANDE-1及个体症状评估(瞬时的)；

与开始治疗前的基线测量相比，在至少2周的治疗后、或者在至少4周的治疗后的LGCS；

与开始治疗前的基线测量相比，在至少2周的治疗后、或者在至少4周的治疗后的麻醉泪液分泌试验结果；

与开始治疗前的基线测量相比，在至少2周的治疗后、或者在至少4周的治疗后、或者在4周治疗后的1周的TFBUT。

在一些实施方案中，将组合物给药至一组对象不会导致不良事件发生率在统计学上高于将安慰剂给药至类似组的对象的不良事件发生率。在一些实施方案中，将组合物给药至一组对象不会导致严重不良事件发生率在统计学上高于将安慰剂给药至类似组的对象的严重不良事件发生率。在一些实施方案中，多肽或其药学上可接受的盐的浓度为约0.005％。在一些实施方案中，多肽或其药学上可接受的盐的浓度为约0.01％。在一些实施方案中，对象符合所有下列标准：

年龄为18岁或以上；

有按照美国-欧洲共识小组干燥综合征标准记录的原发性干燥综合征的先前病史或者当前诊断，具有6个总标准中的4个或者4种体征中的3种；

如果对象正在接受用于干燥综合征治疗的全身(口服)治疗，则对象必须在正好在之前的90天接受被定义为相同治疗的稳定的全身治疗；

有干眼相关的眼部症状史，并且在过去的120天内自我报告使用了非处方眼部润湿剂；并且

在开始治疗前，符合所有下列标准：

(a)在国立眼科研究所(NEI)/行业研讨会量表中，荧光素角膜染色(FCS)总评分≥4且<15(其中0＝未染色)；

(b)使用SANDE问卷的症状评分≥40；

(c)麻醉泪液分泌试验评分≤5mm润湿/5min；

(d)使用NEI/行业研讨会量表的丽丝胺绿结膜染色(LGCS)总评分≥5(其中0＝未染色)；

其中在随访时，对象必须在至少一只且相同的眼睛中符合所有4种标准。

在一些实施方案中，对象不符合一种或多种下列标准：

任何活动性传染性眼部病况；

单眼或最佳矫正视力(BCVA)，必要时使用矫正镜片，为+1.0logMAR或更差，，如由早期治疗糖尿病视网膜病变研究(ETDRS)评估的；

与干眼综合征无关的眼部炎症病况(例如，结膜炎、角膜炎、前睑炎等)；

瘢痕性眼表疾病的临床证据，如瘢痕性眼类天疱疮或Stevens-Johnson综合征；

在用组合物治疗期间，不能暂停任何局部眼科药物(包括局部环孢菌素、和/或局部皮质类固醇)的使用；

在开始用组合物治疗前的60天内已使用(局部眼用环孢菌素)；

在开始用组合物治疗前的30至60天内、或者60天内，已使用(局部眼用立他司特)；

在上区NEI/行业研讨会量表中对象的眼睛的荧光素角膜染色(FCS)总评分＝15或评分＝3，或者对象的眼睛具有扩散汇合染色的FCS、、丝状或明显的上皮缺损；

在开始治疗的365天内具有活动性疱疹性角膜炎或者已有疱疹性角膜炎的爆发，或者对象正在使用针对疱疹性疾病的长期口服抗病毒药；

在治疗期间不能暂停隐形眼镜的使用以及避免隐形眼镜的使用；

具有除原发性干燥综合征外的胶原血管病、自身免疫性疾病或风湿性疾病(例如，狼疮、类风湿关节炎等)的病史；

具有前膜营养不良的病史或者当前患有前膜营养不良；

已进行了角膜移植或类似的角膜手术(DALK、DSEK、DMEK等)；

已使用或者预计使用胺碘酮；

在开始治疗前的30天内改变下列的剂量或者预计对下列的剂量进行改变：四环素、ω-3或ω-6；

在开始治疗前的60天内和/或在治疗期间，改变下列的剂量或者预计对下列的剂量进行改变：抗胆碱能药物、抗抑郁药、口服避孕药、异维A酸、口服全身用皮质类固醇、口服全身用免疫抑制剂；

在开始治疗前的30天内和/或在研究期间已使用局部眼用抗组胺药、眼用、吸入或鼻内皮质类固醇、局部或口服肥大细胞稳定剂、口服抗组胺药、局部或鼻血管收缩剂、局部眼用非甾体抗炎药、局部眼用抗生素；

在对象的眼睛中并且在过去的90天内已进行泪点烧灼术或者在开始治疗前对泪点塞进行改变(插入或移除)；

在对象的眼睛中已进行角膜屈光手术(LASIK、PRK、RK)；

在开始治疗前的365天内具有在眼表或眼睑上进行任何手术操作的病史，以及在开始治疗前的90天内具有眼内手术的病史；

怀孕或疑似怀孕；

正在哺乳或计划哺乳；和

在开始治疗的30天内已参与装置或试验药物研究或临床试验。

在本文公开的任何组合物、试剂盒或方法的一些实施方案中，多肽具有由Ac-Lys-Gln-Phe-Ile-Glu-Asn-Gly-Ser-Glu-Phe-Ala-Gln-Lys-Leu-Leu-Lys-Ly s-Phe-Ser-NH2组成的序列，其中“Ac”代表乙酰基并且C-末端被酰胺化(SEQ ID NO：1)。在本文公开的任何组合物、试剂盒或方法的一些实施方案中，多肽或其药学上可接受的盐的量为0.01％或0.005％。在一些实施方案中，与开始治疗前的基线测量的比较反而或者还包括使用多肽的治疗相对于媒介物对照的比较。在本文公开的任何组合物、试剂盒或方法的一些实施方案中，组合物不含有泰洛沙泊。在本文公开的任何组合物、试剂盒或方法的一些实施方案中，组合物不含有EDTA。在本文公开的任何组合物、试剂盒或方法的一些实施方案中，在将所述组合物在5±3℃或25±2℃和25±5％的相对湿度下储存1周后，在所述组合物中，所述组合物保持至少约99.0％的未降解形式的多肽。在本文公开的任何组合物、试剂盒或方法的一些实施方案中，在将组合物在25±2℃和25±5％的相对湿度下储存2周后，在所述组合物中，所述组合物保持至少约99.0％的未降解形式的多肽。在本文公开的任何组合物、试剂盒或方法的一些实施方案中，在将组合物在5±3℃或25±2℃和25±5％的相对湿度下储存1月后，在所述组合物中，所述组合物保持至少约99.0％的未降解形式的多肽。在本文公开的任何组合物、试剂盒或方法的一些实施方案中，在将组合物在5±3℃储存2个月后，组合物保持至少约99.0％的在所述组合物中的未降解形式的多肽。在本文公开的任何组合物、试剂盒或方法的一些实施方案中，在将组合物在5±3℃或-20±5℃储存3个月后，在所述组合物中，所述组合物保持至少约99.0％的未降解形式的多肽。在本文公开的任何组合物、试剂盒或方法的一些实施方案中，在将组合物在5±3℃下储存4个月后，在所述组合物中，所述组合物保持至少约99.0％的未降解形式的多肽。在本文公开的任何组合物、试剂盒或方法的一些实施方案中，在将组合物在5±3℃储存5个月后，在所述组合物中，所述组合物保持至少约99.0％的未降解形式的多肽。在本文公开的任何组合物、试剂盒或方法的一些实施方案中，在所述组合物中，所述组合物保持至少约99.5％、99.9％、或99.95％的未降解形式的多肽。在本文公开的任何组合物、试剂盒或方法的一些实施方案中，在将组合物在5±3℃储存12个月后，在所述组合物中，所述组合物保持至少约80％或90％的未降解形式的多肽。

附图简述

图1显示Lacripep^TM(SEQ ID NO：1)(0.001％)在磷酸盐缓冲盐水(PBS)pH 4.5和7.0中的稳定性。在60℃下，在时间为0(上图)和2周后(下图)，通过MALDI TOF质谱法对Lacripep^TM溶液进行分析。2周后，通过消耗在pH 4.5和7.0两种溶液中的Lacripep^TM峰，对应于降解产物的在993.9(m/e)处的峰(用箭头表示)变得明显。在pH 4.5的溶液中在约2270(m/e)处(用箭头表示)观察到另外的降解产物。

图2显示Lacripep^TM(SEQ ID NO：1)(0.001％)在pH 6和6.5的柠檬酸盐缓冲剂中的优越的稳定性。在60℃下，在时间0(上图)和2周后(下图)，通过MALDI TOF质谱法对Lacripep^TM溶液进行分析。2周后，Lacripep^TM峰(用箭头表示)的强度没有变化，并且较低的质荷比的峰无显著增加。

发明详述

定义

以下是对在本文中所使用术语的说明性定义。除非另有明确说明，本文中所使用的所有技术和科学术语具有与本领域普通技术人员根据整个说明书进行阅读时通常所理解的相同的含义。除非另有说明，所有专利、申请、公开的申请和本文提及的其它出版物通过引用整体并入。

本文使用的术语“约”是指相对于参考数量、数值、数字、频率、百分比、量、或重量变化+/-10％的数量、数值、数字、频率、百分率、量、或重量。

除非另有说明，当在本申请中使用百分比(％)数值时，该值是指重量/重量百分比数值。

本文中所使用的术语“张度剂”应给予其通常的含义，并且应包括其主要目的是改变组合物的渗透压的材料。合适的张度剂包括但不限于：丙二醇、聚乙二醇、氯化钠、氯化钾、氯化镁、氯化钙、单糖(如右旋糖、果糖、半乳糖)、和/或简单的多元醇类(如糖醇甘露醇、山梨糖醇、木糖醇、乳糖醇、异麦芽酮糖醇、麦芽糖醇、氢化淀粉水解物、甘油、及前述的组合。

本文中所使用的术语“稳定剂”应给予其通常的含义，并且应包括抑制与肽的化学反应的材料。稳定剂可包括例如抗氧化剂，如焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠、乙酰半胱氨酸、丁基羟基茴香醚、丁基羟基甲苯以及前述的组合。

本文中所使用的术语“表面活性剂”应给予其通常的含义，并且应包括两亲分子，这意味着它们含有疏水基团(尾部)和亲水基团(头部)。因此，表面活性剂含有水不溶性(或油溶性)组分和水溶性组分。本文中所使用的表面活性剂可以是洗涤剂、润湿剂、乳化剂、起泡剂、或分散剂。在一些实施方案中，多肽可以起表面活性剂的作用。

本文中所使用的术语“螯合剂”应给予其通常的含义，并且应包括可以与金属离子形成两个或更多个键的化合物(即，多齿配体)。螯合剂包括但不限于：乙二胺四乙酸(EDTA)、乙二胺、氨基酸(如谷氨酸和组氨酸)、有机二元酸(如草酸、丙二酸、等)以及前述的药学上可接受的盐。在若干实施方案中，螯合剂是EDTA或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，多肽可以起螯合剂的作用。

本文中所使用的术语“粘度构建剂”应给予其通常的含义，并且应包括影响组合物的粘度(厘泊，或Cp)的材料。粘度增强剂的实例包括但不限于：多糖，如透明质酸及其盐、硫酸软骨素及其盐、葡聚糖、纤维素家族的各种聚合物(及它们的衍生物)、乙烯基聚合物和丙烯酸聚合物。粘度构建剂的非限制性实例包括聚乙烯醇(PVA)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、聚乙二醇(PEG)和聚丙烯酸(PAA)。

本文中所使用的术语“眼科上可接受的”应给予其通常的含义，并且应包括与眼组织相容的材料；即，当与眼组织接触时，它不导致显著的或过度的不利影响。

本文中所使用的术语“稳定的”、“稳定性”或“稳定化的”应给予它们的通常的含义，并且应包括可增强多肽的一级、二级和/或三级结构的产物和组合物。在一些实施方案中，在给定的时间段后，稳定化的组合物可具有可接受百分比的肽降解、或聚集产物。这些肽降解产物可以是例如肽的氧化和/或水解的结果。

本文中所使用的术语“肽”、“多肽”和“蛋白质”可互换地使用，并且应给予其通常的含义。除非从上下文中明了，上述术语包括具有通过肽键连接的至少两个氨基酸的聚合物。因此，这些术语包括寡肽、类似物、衍生物、乙酰化衍生物、糖基化衍生物、聚乙二醇化衍生物等。

术语“药学上可接受的盐”应给予其通常含义，并且应包括这样的化合物的盐，其不导致对将其所给药的生物体的显著刺激并且不消除或显著降低化合物的生物活性和特性。在一些实施方案中，化合物的盐可增强化合物的生物活性和特性。在其它实施方案中，该盐可另外地增强化合物的结构完整性或化学稳定性。在一些实施方案中，该盐是化合物的酸加成盐。药用盐可以通过使化合物与无机酸，如氢卤酸，(例如盐酸或氢溴酸)、硫酸、硝酸、或磷酸反应而获得。药用盐也可以通过使化合物与有机酸(如脂肪族或芳香族羧酸或磺酸，例如甲酸、醋酸、丁二酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、烟酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸或萘磺酸)反应而获得。药用盐也可以通过如下方法而获得：使化合物与碱反应以形成盐，如铵盐、碱金属盐(如钠盐或钾盐)、碱土金属盐(如钙盐或镁盐)、有机碱(如二环己胺、N-甲基-D-葡糖胺、三(羟甲基)甲胺、C₁-C₇烷基胺、环己烷、三乙醇胺、乙二胺)的盐、及与氨基酸(如精氨酸和赖氨酸)的盐。在一些实施方案中，多肽是醋酸盐。

在若干实施方案中的优势

如上文和本文中所描述的，本申请的若干实施方案提供在室温下稳定的组合物。在若干实施方案中，组合物具有降低水平的稳定剂和其它添加剂，其可导致不期望的副作用，然而仍提供期望的稳定性。在一些实施方案中，组合物提供在眼睛、鼻腔、口、上皮和其它组织中长达1、3、6、12、24和48小时的稳定性。在一些实施方案中，将组合物配制成使得在施用至眼睛或其它区域之后一些或全部的成分不蒸发，被吸收、被排出或以其它方式被消除，反而保持稳定并且保持有活性达若干小时(例如，1-3小时、3-6小时、6-12小时、12-24小时和在其中的范围)。在一些实施方案中，组合物包含肽例如Lacripep^TM或者本文中所确定的其它序列，其中将该肽应用至眼睛，并且肽被并入覆盖眼睛的泪液的脂质层、或者在泪液的脂质组分与水组分的界面，其中肽使泪液稳定并且保持在泪液中达至少1-3小时、至少3-6小时、或至少12-24小时、或大于24小时的时段。在若干实施方案中，此特征是尤其有利的，因为它允许活性成分(如肽)长时间保持稳定和有效。在一些实施方案中，减少的给药频率导致成分对身体敏感区域(如眼睛)的总体降低的总负荷。

尽管在本文中的若干实施方案中提供肽，但除了肽以外还可将其它化合物用作活性成分或其它化合物可用作代替肽的活性成分。

肽是高度选择性的且有效的，同时相对地安全且有良好的耐受性。肽尤其适合于本文中所描述的组合物，因为相对于某些基于小分子的治疗剂，肽可能是化学上和物理上不稳定的。例如，肽易于水解、氧化和聚集。多肽组合物通常是含有活性肽连同许多稳定剂、防腐剂和用于保持肽功效的其它试剂的水溶液。稳定剂、防腐剂和其它试剂可保持多肽的化学和/或结构完整性，因而保留其功效。某些添加剂(如稳定剂和防腐剂)可能导致不期望的副作用，包括超敏反应、瘙痒、及刺痛或灼烧感。然而，为了使肽的保质期最大化并保持功效，在大多数肽组合物中需要导致不期望结果的量的这些添加剂。甚至在具有所有这些添加剂的组合物中，通常必须将肽治疗剂加以冷冻，从而使运输变得困难，并且即使在冷冻情况下，该肽治疗剂仍然具有短的保质期。此外，当随时间推移肽发生降解和/或聚集(特别是当从冷藏取出到室温供使用时通过加热和冷却)，副产物可能不仅是无活性的，而且它们可能是有毒的和/或免疫原性的。配制者可尝试通过增加组合物中活性肽的量而提高肽组合物的效能。然而，增加的肽浓度也会增加肽聚集和失活的发生率。

因此，本文中的若干实施方案提供如下的肽组合物，其提供治疗量的肽，在室温下为稳定的，并且含有减少(例如，仅痕量)的稳定剂和/或防腐剂或者完全没有稳定剂和/或防腐剂。在一些实施方案中，肽选自：(a)氨基酸序列KQFIENGSEFAQKLLKKFS、Ac-KQFIENGSEFAQKLLKKFS-NH₂或Ac-Lys-Gln-Phe-Ile-Glu-Asn-Gly-Ser-Glu-Phe-Ala-Gln-Lys-Leu-Leu-Lys-Lys-Phe-Ser-NH₂，其中“Ac”代表乙酰基并且C末端被酰胺化(SEQ IDNO：1)，在本文中也被称为“Lacripep^TM”；以及(b)氨基酸序列KQFIENGSEFAQKLLKKFSLLKPWA、Ac-KQFIENGSEFAQKLLKKFSLLKPWA-NH₂、或Ac-Lys-Gln-Phe-Ile-Glu-Asn-Gly-Ser-Glu-Phe-Ala-Gln-Lys-Leu-Leu-Lys-Lys-Phe-Ser-Leu-Leu-Lys-Pro-Trp-Ala-NH₂，其中“Ac”代表乙酰基并且C末端被酰胺化(SEQ ID NO：2)。在其它实施方案中，肽具有下列之一的氨基酸序列或其片段，任选地具有乙酰化的N末端和/或酰胺化的C末端：

<210>SEQ ID NO：3

<211>长度：138

<212>类型：PRT

<213>生物体：智人

<400>序列：3

<210>SEQ ID NO：4<211>长度：119

<212>类型：PRT

<213>生物体：智人<400>序列：4

<210>SEQ ID NO：5<211>长度：114

<212>类型：PRT

<213>生物体：智人<400>序列：5

<210>SEQ ID NO：6<211>长度：114

<212>类型：PRT

<213>生物体：智人<400>序列：6

<210>SEQ ID NO：7<211>长度：109

<212>类型：PRT

<213>生物体：智人

<400>序列：7

<210>SEQ ID NO：8

<211>长度：104

<212>类型：PRT

<213>生物体：智人

<400>序列：8

<210>SEQ ID NO：9

<211>长度：14

<212>类型：PRT

<213>生物体：智人

<400>序列：9

<400>SEQUENCE:9

在若干实施方案中，肽由氨基酸序列Ac-KQFIENGSEFAQKLLKKFS-NH₂或Ac-Lys-Gln-Phe-Ile-Glu-Asn-Gly-Ser-Glu-Phe-Ala-Gln-Lys-Leu-Leu-Lys-Ly s-Phe-Ser-NH₂代表，其中“Ac”代表乙酰基并且C末端被酰胺化(SEQ ID NO：1)。在一些实施方案中，肽是Lacripep^TM。在一些实施方案中，肽是SEQ ID NO：1-9中的任意一个或多个。

缓冲剂和pH

缓冲剂使溶液的pH稳定化，即，当把酸性或碱性材料添加到溶液中时抵抗pH的变化。用于本发明组合物的合适的缓冲剂包括但不限于：甘氨酸盐酸盐、醋酸钠、磷酸盐缓冲盐水(PBS)(包括磷酸一氢盐和磷酸二氢盐)、柠檬酸盐缓冲剂(柠檬酸和柠檬酸钠)、磷酸盐-柠檬酸盐缓冲剂、三(羟基甲基)氨基甲烷(Tris)、碳酸盐缓冲剂(碳酸钠和碳酸氢钠)、硼酸盐缓冲剂、及它们的组合。

在一些实施方案中，缓冲剂包括醋酸钠、磷酸盐缓冲盐水(PBS)、柠檬酸盐缓冲剂(柠檬酸和柠檬酸钠)和磷酸盐-柠檬酸盐缓冲剂中的一种或多种。在一些实施方案中，缓冲剂选自醋酸钠、磷酸盐缓冲盐水(PBS)、柠檬酸盐缓冲剂(柠檬酸和柠檬酸钠)和磷酸盐-柠檬酸盐缓冲剂。

在一些实施方案中，缓冲剂的量限于小于0.1、0.2、0.3、或0.4％，或者在由任意两个前述值所限定的范围内。

在一个实施方案中，缓冲剂是柠檬酸盐缓冲剂(柠檬酸和柠檬酸钠)。在一个实施方案中，仅有的缓冲剂是柠檬酸盐缓冲剂，并且无其它缓冲剂存在于组合物中。

在一些实施方案中，组合物的pH为6至7.4、6.1至7.3、6.2至7.2、6.3至7.1、6.4至7.0、6.5至6.9、6.6至6.8，或者其间的任意pH。

在一些实施方案中，组合物的pH为或为约6、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7、7.1、7.2、7.3、7.4，或者在由任意两个前述值所限定的范围。

在一个实施方案中，组合物的pH为或为约6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、或6.8。

必要时，可以通过添加酸或碱的溶液来调节组合物的pH。可使用任何酸或碱，其缀合物是眼科上可接受的。酸包括例如盐酸，碱包括例如氢氧化钠和氢氧化钾。

螯合剂

在一些实施方案中，组合物还包含一种或多种螯合剂。在一些实施方案中，螯合剂选自乙二胺四乙酸、乙二胺四乙酸二钠(EDTA)、乙二胺、氨基酸(如谷氨酸和组氨酸)、有机二酸(如草酸、丙二酸、丁二酸等)、3-二巯基丙磺酸(DMPS)、α-硫辛酸(ALA)、2,3-二巯基丙磺酸(DMPS)、呋喃硫胺(TTFD)、青霉胺、二巯基丁二酸(DMSA)、它们的组合、及前述的药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，螯合剂，作为非限制性实例EDTA或其药学上可接受的盐以0.0001％至0.1％、0.0005％至0.05％、0.0006％至0.04％、0.0007％至0.003％、0.0008％至0.002％、0.0009％至0.001％，或者其中含有的任何值或者其中的范围存在。在一些实施方案中，螯合剂以或小于0.1％、0.09％、0.08％、0.07％、0.06％、0.05％、0.04％、0.03％、0.02％、0.01％、0.009％、0.008％、0.007％、0.006％、0.005％、0.004％、0.003％、0.002％、0.001％、0.0009％、0.0008％、0.0007％、0.0006％、0.0005％、0.0004％、0.0003％、0.0002％、或0.0001％，或者在由任意两个前述值所限定的范围内的量存在。

在一些实施方案中，螯合剂，如EDTA或其它，或其药学上可接受的盐以小于约0.05％或小于约0.005％(例如，以约0.001％)存在。

稳定剂

缓冲剂和螯合剂可以通过保持pH并减少金属离子介导的肽降解而使组合物的肽成分稳定。在一些实施方案中，除了缓冲剂和/或螯合剂外，组合物还包含一种或多种肽稳定剂。在一些实施方案中，除了缓冲剂和/或螯合剂外，一种或多种稳定剂选自二糖、多糖(例如，透明质酸)、多元醇、糖醇、氨基酸、蛋白质(例如，血清白蛋白)、及它们的组合。在一些实施方案中，稳定剂的非限制性例包括海藻糖、蔗糖、甘露醇、山梨糖醇、聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯80、组氨酸、甘氨酸、和精氨酸、及它们的组合。在一个实施方案中，除了缓冲剂和/或螯合剂外，组合物不包含稳定剂。

多肽降解

多肽易于发生物理和化学降解，例如聚集、剪切、氧化、脱酰胺、和水解。实际上，液体肽组合物在制造和储存期间具有物理和化学不稳定性的高风险。减少多肽降解对于最初含有非常少量的特定肽的稀释肽制剂尤其重要。即使最初少量中的极少量的损失也可显著影响组合物的功效。

在一些实施方案中，通过高效液相色谱法(HPLC)测定组合物稳定性。在一些实施方案中，利用高效液相色谱-质谱法(HPLC-MS)测定组合物稳定性。

在一些实施方案中，在组合物的密封容器已在室温下于暗处或者暴露于光下达数天、数周或数月(例如，1-24天或月，例如1、2、3，4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24天或月)之后，测定组合物稳定性。

在一些实施方案中，在组合物的密封容器已在2至8℃，例如5℃或者其间的任意值的温度下于暗处或暴露于光下达数天、数周或数月(例如，1-24天或月，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24天或月)之后，测定组合物稳定性。

在一些实施方案中，在组合物的密封容器已在-10至-30℃例如-25℃或者在其间的任意值的温度下于暗处或暴露于光下达数天、数周或数月(例如，1-24天或月，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24天或月)之后，测定组合物稳定性。

在一些实施方案中，在组合物的密封容器已处于暗处或暴露于光下，并且从2至8℃(储存)或其间的任意值移至室温达5分钟，每日一次、二次、或三次达1-60天之后，测定组合物稳定性。

在一些实施方案中，在暴露于上文和本文中所描述的一个或多个条件之后，组合物提供完整的、未降解的或非聚集形式的多肽或其药学上可接受的盐的初始量或活性的至少99.99％、99.95％、99.9％、99％、98％、97％、96％、95％、94％、93％、92％、91％、90％、89％、88％、87％、86％、85％、84％、83％、82％、81％、80％、79％、78％、77％、76％、75％、74％、73％、72％、71％、70％、或者其间的任意值。在一个实施方案中，完整的多肽或其药学上可接受的盐的量或活性为初始量的至少80％、85％、90％或95％。在一些实施方案中，完整的多肽或其药学上可接受的盐的量或活性为初始量的至少97％。

在一些实施方案中，在暴露于上文和本文中所描述的一个或多个条件之后，组合物包含不超过30％、29％、28％、27％、26％、25％、24％、23％、22％、21％、20％、19％、18％、17％、16％、15％、14％、13％、12％、11％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％或者在由任意两个前述值所限定范围内的肽聚集产物或肽降解产物。在一些实施方案中，组合物包含不超过约15％、或者不大于20％的无活性肽。

在一些实施方案中，在暴露于上文和本文中所描述的一个或多个条件之后，组合物包含不超过30％、29％、28％、27％、26％、25％、24％、23％、22％、21％、20％、19％、18％、17％、16％、15％、14％、13％、12％、11％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％或者在由任意两个前述值所限定范围内的肽降解产物和肽聚集产物的总量。

在一些实施方案中，组合物包含与非常低水平的螯合剂组合的非常低水平的缓冲剂。在一些实施方案中，缓冲剂是柠檬酸盐缓冲剂并且螯合剂是EDTA。低水平的柠檬酸盐缓冲剂(例如，0.012％至0.020％)与EDTA(例如，0.0005％至0.005％)的组合提供使含有低水平肽(例如，0.001至0.01％)的组合物稳定的令人惊讶的和出乎意料的益处。此类稳定化的组合物通过减少肽的聚集和降解，从而保持肽组合物的功效并减少不期望的分解产物在组合物中的累积来提供肽组合物在制造、运输、储存和使用中的优势。

在一些实施方案中，稳定化的组合物降低分解和/或聚集产物的形成速率。

在一些实施方案中，肽是Lacripep^TM。在一些实施方案中，稳定化的组合物包含小于约5％、4％、3％、2％、或约1％的总降解产物。在一些实施方案中，稳定化的组合物包含不超过0.25％、0.5％、0.75％、1.0％、1.25％、1.5％、1.75％、或2.0％的任何单一降解产物。在一些实施方案中，稳定化的组合物包含小于约5％、4％、3％、2％、或约1％的总降解产物以及不超过0.25％、0.5％、0.75％、1.0％、1.25％、1.5％、1.75％、或2.0％的任何单一降解产物。

在一些实施方案中，聚集产物包括二聚体、三聚体、四聚体、或更高级的肽聚集体。

防腐剂

在一些实施方案中，组合物还包含一种或多种防腐剂以防止微生物在组合物中的生长。在一些实施方案中，组合物还包含一种或多种防腐剂，以保持组合物的无菌性。在一些实施方案中，组合物还包含一种或多种防腐剂以防止微生物的生长并保持组合物的无菌性。然而，在许多实施方案中，以减少的量提供防腐剂。在一些实施方案中，一种或多种防腐剂选自苯扎氯铵、氯化十六烷基吡啶、氯丁醇、苯度氯铵溴化物(benzododeciniumbromide)、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、苯乙醇、过硼酸钠、乙二胺四乙酸二钠、氯丁醇、山梨酸、苄索氯铵、醋酸钠、聚季铵盐-1、硝酸苯汞、硼酸苯汞、丙酸钠、氯己定、硫柳汞、及它们的组合。在一些实施方案中，组合物不含有防腐剂。在一些实施方案中，组合物不含有可检测水平的防腐剂。在一些实施方案中，多肽可以是自身防腐的，即，无需另外的防腐剂来保持组合物的无菌性。

在一些实施方案中，防腐剂以0.0001％至1％、0.01％至0.9％、0.05％至0.8％、0.1％至0.7％、0.2％至0.3％、0.4％至0.5％，或者在其中所包含的任意值的量存在。在一些实施方案中，防腐剂以或以小于1％、0.9％、0.8％、0.7％、0.6％、0.5％、0.4％、0.3％、0.2％、0.1％、0.09％、0.08％、0.07％、0.06％、0.05％、0.04％、0.03％、0.02％、0.01％、0.009％、0.008％、0.007％、0.006％、0.005％、0.004％、0.003％、0.002％、或0.001％，或者在由任意两个前述值所限定范围内的量而存在。

在一些实施方案中，组合物是无菌的。在一些实施方案中，组合物是在无菌环境中由无菌成分所制成。在一些实施方案中，在包装之前对组合物进行灭菌。在一些实施方案中，通过下列步骤中的一个或多个对组合物进行灭菌：(1)将一种或多种季铵氯化物添加到组合物中；(2)使组合物暴露于电离辐射；(3)将组合物过滤；(4)在包装后使组合物暴露于电离辐射；及前述的任意组合。在一些实施方案中，过滤包括使组合物通过过滤器(包括但不限于具有聚二氟乙烯的0.22微米过滤器、或者其它合适的膜(例如，聚醚砜))。

在一些实施方案中，以抑菌和/或杀菌的量提供肽。在一些实施方案中，当把一滴、两滴或三滴的组合物给药至眼睛的表面时，在组合物中所提供肽的量是抑菌和/或杀菌的。在一些实施方案中，肽对于革兰氏阳性和/或革兰氏阴性细菌是抑菌和/或杀菌的，例如当给药至眼睛时。在一些实施方案中，在标准细菌学测定中，相对于不含有肽的对照组合物，在组合物中肽的量足以将细菌生长抑制至少20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％或90％。在一些实施方案中，细菌学测定的细菌选自铜绿假单胞菌、大肠杆菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、或者它们的组合。在一些实施方案中，细菌学测定选自细菌生长测定、SYTOX Green测定、孔扩散测定、肉汤或琼脂稀释测定、时间-杀菌测试、抗菌梯度测定、ATP生物发光测定、或碘化丙啶流式细胞术测定。在一些实施方案中，以抑菌和/或杀菌的量提供的肽是Lacripep^TM。

在一些实施方案中，细菌学测定是USP<51>章节测定或者FDA授权的测定。例如，最初产品容器容纳有肽溶液，用准备且标准化的接种物之一(例如，铜绿假单胞菌、大肠杆菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、或它们的组合)对每个容器进行接种并混合。悬浮接种物的体积应当为产品体积的约0.5％至1.0％，并且紧接在接种之后试验制备物的浓度为1×10⁵至1×10⁶菌落形成单位(CFU)/mL产品(如通过例如平板计数法、或另一微生物计数试验所测量的)。

将接种的容器在在受控制的环境中于22.5±2.5℃进行温育，并且以规定的间隔(例如7天、14天和28天)进行取样。在各取样中，记录外观的任何变化并且测定CFU/mL。CFU/mL的log₁₀值的变化提供在对数减少方面随时间推移的变化。对于细菌，该产品提供在第7天相对于最初计算的计数的不小于1.0的对数减少，在第14天相对于最初计数的不小于3.0的对数减少，在第28天没有相对于第14天计数的增加，并且没有酵母菌和霉菌相对于最初计数的增加。在一些实施方案中，以抑菌和/或杀菌量所提供的肽是Lacripep^TM。

表面活性剂

在一些实施方案中，组合物还包含一种或多种表面活性剂。在一些实施方案中，一种或多种表面活性剂选自洗涤剂、润湿剂、乳化剂、起泡剂、分散剂、及它们的组合。

在一些实施方案中，表面活性剂是阴离子型表面活性剂。阴离子型表面活性剂在它们的头部含有阴离子官能团，如硫酸盐、磺酸盐、磷酸盐和羧酸盐。在一些实施方案中，表面活性剂是硫酸酯、磺酸酯或磷酸酯，例如硫酸酯。在一些实施方案中，表面活性剂选自十二烷基硫酸铵和十二烷基硫酸钠，例如十二烷基硫酸钠(也称为SDS，十二烷基硫酸钠)或由以上组成。在一些实施方案中，表面活性剂是烷基醚硫酸盐，如选自聚氧乙烯烷基硫酸钠(也被称为十二烷基醚硫酸钠)和肉豆蔻醇聚醚硫酸钠盐或由以上组成。在一些实施方案中，表面活性剂是多库酯钠(如琥珀酸二异辛酯磺酸钠)、全氟辛烷磺酸盐(PFOS)、全氟丁烷磺酸盐、直链烷基苯磺酸盐(LAB)。在一些实施方案中，表面活性剂是羧酸盐如烷基羧酸盐(皂类)，例如硬脂酸钠；月桂酰肌氨酸钠和基于羧酸盐的氟表面活性剂，如全氟壬酸盐、全氟辛酸盐(PFOA或PFO)。在一些实施方案中，多肽有助于组合物的表面活性剂性质。

在一些实施方案中，表面活性剂是阳离子型表面活性剂，其电荷可以是pH依赖性的，如伯胺、仲胺或叔胺，例如奥替尼啶二盐酸盐；或者可包含永久带电的季铵阳离子，如烷基三甲基铵盐，例如十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)或十六烷基三甲基氯化铵(CTAC)；氯化十六烷基吡啶(CPC)；苯扎氯铵(BAC)；苄索氯铵(BZT)；5-溴-5-硝基-1,3-二噁烷；二甲基双十八烷基氯化铵；或者双十八烷基二甲基溴化铵(DODAB)。在一些实施方案中，表面活性剂是两性离子型表面活性剂(即，同时连接到同一分子的阳离子和阴离子中心)。阳离子部分可以是基于伯胺、仲胺或叔胺或季铵的阳离子。阴离子部分可以是更多变的，并且包括磺酸盐，如在CHAPS(3-[(3-胆酰胺基丙基)二甲氨基]-1-丙磺酸盐)中。其它阴离子基团是磺基甜菜碱，如椰油酰胺丙基羟基磺基甜菜碱；甜菜碱，例如椰油酰胺丙基甜菜碱；磷酸酯，例如卵磷脂。在一些实施方案中，表面活性剂可以是非离子型表面活性剂(不带电荷)。

许多长链醇表现出一些表面活性剂性质，并且在本文以一些实施方案中的组合物的一部分提供。其中显著的是脂肪醇十六烷醇、十八烷醇和十六十八醇(主要由十六烷醇和十八烷醇组成)及油醇。其它的表面活性剂包括椰油酰胺MEA、椰油酰胺DEA、十二烷基二甲胺氧化物和聚氧化乙烯牛脂胺(POEA)。非离子型表面活性剂的实例包括聚氧乙二醇烷基醚，如辛乙二醇单十二烷基醚或者戊乙二醇单十二烷基醚；聚氧丙二醇烷基醚；葡萄糖苷烷基醚，如癸基葡萄糖苷、十二烷基葡萄糖苷或辛基葡萄糖苷；聚氧乙二醇辛基酚醚，如Triton X-100；聚氧乙二醇烷基酚醚，如壬苯醇醚-9；甘油烷基酯，如甘油月桂酸酯；聚氧乙二醇脱水山梨醇烷基酯(聚山梨醇酯)；脱水山梨醇烷基酯(司盘类)；聚乙二醇与聚丙二醇的嵌段共聚物、或者泊洛沙姆。

在一些实施方案中，组合物可以含有本领域中已知量的人工泪液中所发现的一个或多个成分，包括但不限于：羧甲基纤维素、聚乙烯醇、羟丙基甲基纤维素(又名HPMC或羟丙甲纤维素)、羟丙基纤维素、羟乙基纤维素(HEC)和透明质酸(又名玻尿酸，HA)、及它们的组合。在一些实施方案中，组合物不含有任何前述的人工泪液成分。

在一些实施方案中，表面活性剂是另一种肽或蛋白质。在一些实施方案中，作为一个非限制性实例，表面活性剂是人血清白蛋白。在一些实施方案中，作为另一个非限制性实例，表面活性剂是Lacripep^TM。

在若干实施方案中，表面活性剂是泰洛沙泊(甲醛；环氧乙烷；4-(2,4,4-三甲基戊-2-基)苯酚)。在一个实施方案中，仅有的表面活性剂是泰洛沙泊，并且无其它表面活性剂存在于组合物中。

在一些实施方案中，表面活性剂(作为一个非限制性实例泰洛沙泊)以0.01％至1％、0.05％至0.9％、0.1％至0.8％、0.2％至0.7％、0.3％至0.6％、0.4％或0.5％，或者其中所包含的任意值的量存在。在一些实施方案中，表面活性剂以或小于1％、0.9％、0.8％、0.7％、0.6％、0.5％、0.4％、0.3％、0.2％、0.1％、0.09％、0.08％、0.07％、0.06％、0.05％、0.04％、0.03％、0.02％、0.01％、0.009％、0.008％、0.007％、0.006％、0.005％、0.004％、0.003％、0.002％或0.001％或者在由任意两个前述值所限定范围内的量存在。

在一些实施方案中，组合物不含有表面活性剂。在一些实施方案中，组合物不含有可检测水平的表面活性剂。

张度剂和渗透压

在一些实施方案中，组合物还包含一种或多种张度剂。此类张度剂是具有张度调节作用的任何多肽或缓冲剂。在一些实施方案中，一种或多种张度剂选自丙二醇、聚乙二醇、氯化钠、氯化钾、氯化镁、氯化钙、单糖(如右旋糖、果糖、半乳糖)、和/或简单的多元醇(如糖醇、甘露醇、山梨糖醇、木糖醇、乳糖醇、异麦芽酮糖醇、麦芽糖醇、氢化淀粉水解物、甘油、及它们的组合)。

在一些实施方案中，一种或多种张度剂选自氯化钠、氯化钾、氯化镁、氯化钙、右旋糖、甘露醇、及它们的组合。

在一些实施方案中，张度剂是氯化钠。在一些实施方案中，氯化钠以0.01％至1％、0.05％至0.9％、0.1％至0.8％、0.2％至0.75％、0.3％至0.7％、0.4％至0.6％、或者其中所包含的任意值的量存在。在一些实施方案中，氯化钠以或以约1％、0.95％、0.9％、0.85％、0.8％、0.75％、0.7％、0.65％、0.6％、0.55％、0.5％、0.45％、0.4％、0.35％、0.3％、0.25％、0.2％、0.15％、0.1％、0.09％、0.08％、0.07％、0.06％、0.05％、0.04％、0.03％、0.02％、或0.01％，或者由任意两个前述值所限定范围内的量存在。

在一些实施方案中，仅有的张度剂是氯化钠，并且无其它张度剂存在于组合物中。

在一些实施方案中，将张度剂(作为一个非限制性实例氯化钠)添加到组合物中以将渗透压调节到期望水平。在一些实施方案中，组合物的渗透压为约150至约400mOsm/kg、约170至约380mOsm/kg、约190至约360mOsm/kg、约210至约340mOsm/kg、约230至约320mOsm/kg、约250至约300mOsm/kg、约270至约280mOsm/kg、或者其间的任意值。在一些实施方案中，组合物的渗透压为约250至约350mOsm/kg、约260至约340mOsm/kg、约270至约330mOsm/kg、约280至约320mOsm/kg、约290至约310mOsm/kg，或者其间的任意值。

在一些实施方案中，组合物的渗透压为或为约150mOsm/kg、160mOsm/kg、170mOsm/kg、180mOsm/kg、190mOsm/kg、200mOsm/kg、210mOsm/kg、220mOsm/kg、230mOsm/kg、240mOsm/kg、250mOsm/kg、260mOsm/kg、270mOsm/kg、280mOsm/kg、290mOsm/kg、300mOsm/kg、310mOsm/kg、320mOsm/kg、330mOsm/kg、340mOsm/kg、或350mOsm/kg，或者在由任意两个前述值所限定的范围内。

在一些实施方案中，组合物的渗透压为约280mOsm/kg至约320mOsm/kg。在一个实施方案中，组合物的渗透压为约300mOsm/kg。在一些实施方案中，用NaCl将溶液的渗透压调节到期望水平。在一个实施方案中，组合物与人泪液等渗或几乎等渗。

多肽和其它成分

在一些实施方案中，多肽或其药学上可接受的盐具有10至150个氨基酸；10至50个氨基酸；100至150个氨基酸；30至70个氨基酸；或者在其中所包含的任意数量的氨基酸。在一些实施方案中，多肽或其药学上可接受的盐具有10至30个氨基酸、11至29个氨基酸、12至28个氨基酸、13至27个氨基酸、14至26个氨基酸、15至25个氨基酸、16至24个氨基酸、17至23个氨基酸、18至22个氨基酸、19至21个氨基酸；或者在其中所包含的任意数量的氨基酸。在一些实施方案中，多肽或其药学上可接受的盐的长度为或为约5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、或50个氨基酸，或者在由任意两个前述值所限定范围内的氨基酸。

在一些实施方案中，多肽或其药学上可接受的盐的C末端被酰胺化。在一些实施方案中，多肽或其药学上可接受的盐的N末端被乙酰化。在一些实施方案中，多肽或其药学上可接受的盐的一个或多个侧链被乙酰化。在一些实施方案中，多肽或其药学上可接受的盐的一个或多个侧链被酰胺化。在一些实施方案中，多肽或其药学上可接受的盐的N末端被乙酰化，并且多肽或其药学上可接受的盐的C末端被酰胺化。

在一些实施方案中，多肽或其药学上可接受的盐包括以下的氨基酸序列，由以下的氨基酸序列组成，或者基本上由以下的氨基酸序列组成：Ac-Lys-Gln-Phe-Ile-Glu-Asn-Gly-Ser-Glu-Phe-Ala-Gln-Lys-Leu-Leu-Lys-Ly s-Phe-Ser-Leu-Leu-Lys-Pro-Trp-Ala-NH₂(SEQ ID NO：2)，其中“Ac”代表乙酰基并且C末端被酰胺化(用“NH₂”表示)。在一些实施方案中，多肽或其药学上可接受的盐包括氨基酸序列：Ac-Lys-Gln-Phe-Ile-Glu-Asn-Gly-Ser-Glu-Phe-Ala-Gln-Lys-Leu-Leu-Lys-Ly s-Phe-Ser-NH₂(SEQ ID NO：1)，其中“Ac”代表乙酰基并且C末端被酰胺化(用“NH₂”表示)。在一些实施方案中，多肽或其药学上可接受的盐包含以下、由以下组成、或者基本上由以下组成：选自SEQ ID NO：3-9的序列、或其片段或药学上可接受的盐。

在一些实施方案中，组合物中多肽或其药学上可接受的盐的量为或为约0.0001％至1％、0.0005％至0.5％、0.001％至0.1％、0.005％至0.05％、0.006％至0.04％、0.007％至0.03％、0.008％至0.02％、或0.009％至0.01％。在一个实施方案中，多肽或其药学上可接受的盐以约0.003％至0.09％(例如，0.005％、0.01％，0.02％、0.03％和它们的范围)的量存在于组合物中。

在一些实施方案中，多肽或其药学上可接受的盐以、以约、大于或小于0.0001、0.00025、0.0005、0.00075、0.001、0.002、0.003、0.004、0.005、0.006、0.007、0.008、0.009、0.010、0.011、0.012、0.013、0.014、0.015、0.020、0.030、0.040、0.050、0.060、0.070、0.080、0.090、0.10、0.20、0.30、0.40、0.50、0.60、0.70、0.80、0.90、或1.0％、或者由任意两个前述值所限定范围的量存在于组合物中。

在一些实施方案中，组合物是无菌的水性组合物，其包含以下、由以下组成、或者基本上由以下组成：约0.001％至约0.05％的多肽如Lacripep^TM、或本文中所确定的其它肽、或其药学上可接受的盐；约0.001％至约0.015％的无水柠檬酸；约0.02％至约0.40％的柠檬酸钠二水合物；约0.0005％至约0.005％的EDTA二钠；约0.005％至约0.15％的泰洛沙泊；和任选地约0.005％至约0.1％的对羟基苯甲酸甲酯；其中用NaOH或HCl将组合物的pH调节到pH约6.2至pH约6.8，并且用NaCl将组合物的渗透压调节到约250至约350mOsm/kg。在一些实施方案中，NaCl的量为约0.1％至约1％。在一个实施方案中，组合物不包含对羟基苯甲酸甲酯。在一个实施方案中，组合物仅由列出的成分所组成，并且不含有任何另外的活性成分、剂辅料(例如，粘度构建剂、缓冲剂、螯合剂、稳定剂、防腐剂、表面活性剂、和张度剂)、载体或稀释剂。

在一些实施方案中，组合物是无菌的水性组合物，其包含以下、由以下组成或者基本上由以下组成：约0.01％±0.001％的多肽，如Lacripep^TM、或本文中所确定的其它肽、或其药学上可接受的盐；约0.0098％±0.001％的无水柠檬酸；约0.279％±0.028％的柠檬酸钠二水合物；约0.001％±0.0001％的EDTA二钠；约0.05％±0.005％的泰洛沙泊；约0.04％±0.004％的对羟基苯甲酸甲酯；其中用NaOH或HCl将组合物的pH调节到约6.2至约6.8，并且用NaCl将组合物的渗透压调节到约250至约350mOsm/kg。在一些实施方案中，NaCl的量为约0.50％±0.05％。在一个实施方案中，组合物不包含对羟基苯甲酸甲酯。

在一些实施方案中，组合物是无菌的水性组合物，其包含以下、由以下组成或者基本上由以下组成：约0.005％±0.0005％的多肽，如Lacripep^TM、或本文中所确定的其它肽、或其药学上可接受的盐；约0.0098％±0.001％的无水柠檬酸；约0.279％±0.028％的柠檬酸钠二水合物；约0.001％±0.0001％的EDTA二钠；约0.05％±0.005％的泰洛沙泊；约0.04％±0.004％的对羟基苯甲酸甲酯；其中用NaOH或HCl将组合物的pH调节到约6.2至约6.8，并且用NaCl将组合物的渗透压调节到约250至约350mOsm/kg。在一些实施方案中，NaCl的量为约0.50％±0.05％。在一个实施方案中，组合物不包含对羟基苯甲酸甲酯。

在一些实施方案中，组合物是无菌的水性组合物，其包含：约0.001％±0.0001％的多肽，如Lacripep^TM、或本文中所确定的其它肽、或其药学上可接受的盐；约0.0098％±0.001％的无水柠檬酸；约0.279％±0.028％的柠檬酸钠二水合物；约0.001％±0.0001％的EDTA二钠；约0.05％±0.005％的泰洛沙泊；约0.04％±0.004％的对羟基苯甲酸甲酯；其中用NaOH或HCl将组合物的pH调节到约6.2至约6.8，并且用NaCl将组合物的渗透压调节到约250至约350mOsm/kg。在一些实施方案中，NaCl的量为约0.50％±0.05％。在一个实施方案中，组合物不包含对羟基苯甲酸甲酯。

在一些实施方案中，包括但不限于上文的无菌组合物，多肽是具有SEQ ID NO：1的Lacripep^TM或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，多肽是具有SEQ ID NO：2的多肽或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，多肽是这样的多肽，其具有选自SEQ ID NO：3-9的序列、或其药学上可接受的盐或一个片段或多个片段。

在一些实施方案中，包括但不限于上文的无菌组合物，组合物的pH为约6.5至约6.6。

在一些实施方案中，包括但不限于上文的无菌组合物，组合物的渗透压为约280至约320mOsm/kg。在一些实施方案中，组合物的渗透压为约300mOsm/kg。

在一些实施方案中，组合物是无菌的水性组合物，其包含：约0.01％±0.001％的Lacripep^TM(SEQ ID NO.1)或本文中所确定的其它肽；约0.0098％±0.001％的无水柠檬酸；约0.279％±0.028％的柠檬酸钠二水合物；约0.001％±0.0001％的EDTA二钠；约0.05％±0.005％的泰洛沙泊；其中用NaOH或HCl将组合物的pH调节到约6.2至约6.8，并且用NaCl将组合物的渗透压调节到约250至约350mOsm/kg。在一些实施方案中，NaCl的量约为0.50％±0.05％。

在一些实施方案中，组合物是无菌的水性组合物，其包含：约0.005％±0.0005％的Lacripep^TM(SEQ ID NO.1)或本文中所确定的其它肽；约0.0098％±0.001％的无水柠檬酸；约0.279％±0.028％的柠檬酸钠二水合物；约0.001％±0.0001％的EDTA二钠；约0.05％±0.005％的泰洛沙泊；其中用NaOH或者HCl将组合物的pH调节到约6.2至约6.8，并且用NaCl将组合物的渗透压调节到约250至约350mOsm/kg。在一些实施方案中，NaCl的量为约0.50％±0.05％。

在一些实施方案中，组合物是无菌的水性组合物，其包含约0.001％±0.0001％的Lacripep^TM(SEQ ID NO.1)或本文中所确定的其它肽；约0.0098％±0.001％的无水柠檬酸；约0.279％±0.028％的柠檬酸钠二水合物；约0.001％±0.0001％的EDTA二钠；约0.05％±0.005％的泰洛沙泊；其中用NaOH或HCl将组合物的pH调节到约6.2至约6.8，并且用NaCl将组合物的渗透压调节到约250至约350mOsm/kg之。在一些实施方案中，NaCl的量为约0.50％±0.05％。

在一个实施方案中，包括但不限于上文的无菌组合物，该组合物仅由所列出成分所组成，并且不含有任何其它活性成分、辅料(例如，粘度构建剂、缓冲剂、螯合剂、稳定剂、防腐剂、表面活性剂、和张度剂)、载体或稀释剂。在一些实施方案中，任何一个或多个所列出成分的量以所列出量的±5％和/或±1％的量提供。

在一些实施方案中，本文中所公开的组合物以溶液、凝胶或软膏制备。与溶液相比，凝胶或软膏在提供与眼睛接触较长时间段的组合物中是有利的，或者提供其它益处。因此，在一个实施方案中，当对象将入睡时，或者当对象的眼睛将闭合很长的时间(例如，1、2、3、4、5或更多小时)时，将组合物应用至对象时，凝胶或软膏是有用的。基于使用者偏好，可以在其它时间使用凝胶或软膏。

非限制性的示例性组合物(其可以用于本文中所公开的方法和试剂盒中)包括在表1.1、表1.2、表1.3和表1.4中的下列组合物。

表1.1

表1.2

表1.3

表1.4

表1.1-表1.4中的组合物的实施方案还包括如下的组合物，其中公开成分的量在公开量的±1％的范围内、在公开量的±2％的范围内、在公开量的±3％的范围、在公开量的±4％的范围内、或者在公开量的±5％的范围内。在一些实施方案中，在将表1.1-表1.4中的组合物在-20±5℃、5±3℃或25±2℃和25±5％的相对湿度下储存至少1周或2周、1个月、2个月、3个月、4个月或5个月后，在该组合物中，该组合物保持至少约99.0％、99.9％、99.95％、或99.99％的最初未降解形式的SEQ ID NO：1的Lacripep多肽。在一些实施方案中，在将表1.1-表1.4中的组合物在-20±5℃或5±3℃的温度下储存至少12个月后，在该组合物中，该组合物保持至少约80％或90％的最初未降解形式的SEQ ID NO：1的Lacripep多肽。在一些实施方案中，表1.1-表1.4中的组合物含有约0.2-0.8％或约0.5％的NaCl。

其它的治疗成分

在一些实施方案中，除了本文中所公开的多肽外，组合物还包含一个或多个另外的治疗剂。这些治疗剂可以包含本领域技术人员已知用于干眼和相关综合征和病况(包括干燥综合征)治疗的物质。另外的治疗成分可以治疗疾病、综合征或病况，或者可以缓解与疾病、综合征或病况相关的症状。另外治疗剂的非详尽列表包括：胆碱能药物(例如，毛果芸香碱、西维美林)、环孢菌素、立他司特、地塞米松(或其它皮质类固醇，如泼尼松龙)、包含或不含硫酸软骨素的透明质酸(及其衍生物)、Cyclokat、SI-614、skQ1、顺式-UCA、CycloASol、RGN-259、地夸磷索、阿那白滞素、托法替尼、EBI-005、EGP-437、KP-121、MIM-D3、OTX-DP、瑞巴派特(OPC-12759)、和RU-101。在一些实施方案中，另外的治疗剂是Xiidra(立他司特，SAR-1118)。在一些实施方案中，一种或多种另外的治疗剂以多肽的盐提供。含有羧甲基纤维素、聚乙烯醇、羟丙基甲基纤维素(又名HPMC或羟丙甲纤维素)、羟丙基纤维素、乙二醇聚合物、和透明质酸(又名玻尿酸，HA)中的一种或多种的人工泪液和其它润滑剂以及泪液软膏(如白凡士林、矿物油和类似的润滑剂)也可以包括在组合物中。可以以已知的治疗量或亚治疗量包括这些另外的治疗剂。

容器和试剂盒

在一些实施方案中，在包含一个或多个多次使用容器的试剂盒中提供组合物。在一些实施方案中，多次使用容器包括保护帽和贮液瓶，其中帽经由柔性连接件连接到底部。封堵塞被布置在保护帽上表面的中部。圆锥形或其它合适形状的液体出口被布置在瓶盖的中部并且与保护帽的封堵塞严密地配合。因此，可将无菌组合物置于容器中用于多次使用。

在一些实施方案中，容器中的组合物的量为或为约：0.1-0.5、0.5-1.0、1-2、2-5、5-10、10-20、20-30、或30-60mL或者其间的范围。容器可以是瓶子、管、小瓶或其它合适的容器。多次使用容器可附有针对12小时、24小时、2-7天的周期、1个月的周期或者直到指定的有效期的使用说明。一次性使用的容器可适用于一只眼睛或两只眼睛的单个应用周期。

在一些实施方案中，在包含一次性使用的容器的试剂盒中提供组合物。在一些实施方案中，在包含多个一次性使用的容器的试剂盒中提供组合物。在一些实施方案中，一次性使用的容器包括：用于容纳液体的器皿、用于密封所述器皿的可移除的密封顶部和任选地使所述器皿与所述密封顶部互相连接的颈部。在若干实施方案中，提供包含多个一次性使用的容器连同使用说明书的试剂盒。

在一些实施方案中，容器包含药学上惰性的材料。在一些实施方案中，容器包含玻璃、聚氯乙烯、聚丙烯、聚对苯二甲酸乙二醇酯、聚对苯二甲酸乙二醇酯、聚对苯二甲酸乙二醇酯G、高密度聚乙烯、低密度聚乙烯、聚对苯二甲酸丁二醇酯、聚氨酯、聚乙烯醋酸乙烯酯、硅酮、丙烯腈丁二烯苯乙烯、聚四氟乙烯、聚碳酸酯、聚苯乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯、聚砜、聚偏氯乙烯、或者它们的组合。

在一些实施方案中，容器包含聚氯乙烯、聚丙烯、低密度聚乙烯、聚氨酯、聚乙烯醋酸乙烯酯、硅酮、或者它们的组合。

在一些实施方案中，容器中组合物的量为或为约0.02mL、0.05mL至1mL、0.1mL至0.95mL、0.15mL至0.8mL、0.2mL至0.85mL、0.25mL至0.8mL、0.3mL至0.75mL、0.35mL至0.7mL、0.4mL至0.65mL、0.45mL至0.6mL、0.5mL至0.55mL、或者其间的任意量。

在一些实施方案中，容器中组合物的量为或为约0.02mL、0.025mL、0.030mL、0.035mL、0.040mL、0.045mL、0.050mL、0.055mL、0.060mL、0.065mL、0.070mL、0.075mL、0.1mL、0.15mL、0.2mL、0.25mL、0.3mL、0.35mL、0.4mL、0.45mL、0.5mL、0.55mL、0.6mL、0.65mL、0.7mL、0.75mL、0.8mL、0.85mL、0.9mL、0.95mL、或1mL、或者在由任意两个前述值所限定范围内的量。

眼科给药和其它给药

在一些实施方案中，将组合物局部地给药至眼睛。在一些实施方案中，将组合物给药至罹患任何形式的干眼、或与干燥综合征相关的干眼(或其它症状，如口干)的个体用于对其进行治疗。在一些实施方案中，组合物作为含漱液、药片、贴剂、喷雾剂或锭剂给药至口腔。本文中所描述的组合物可以以液体(溶液、凝胶、软膏等)或者以其它合适的形式(如粉剂或贴剂、药片等)提供。在一些实施方案中，本文中所描述的组合物用于实现下列中的一种或多种：恢复基底撕裂、流涎、一般粘膜和眼表湿润；恢复眼表和粘膜内稳态，迅速但短暂地促进自噬以消除在眼睛和其它器官中的压力、应激或退行性疾病；减轻炎症、促进伤口愈合(如角膜屈光手术或口腔伤口愈合)、使泪液脂质层稳定并阻抑细菌感染。

在一些实施方案中，向眼睛局部地给药包括将一滴或多滴的组合物给药至眼睛的表面。例如，在一个实施方案中，指导使用者应用至眼睛表面，而不应用至隐形眼镜)。在其它实施方案中，滴剂(或其它应用)适合于在佩戴隐形眼镜的同时进行给药。在一些实施方案中，组合物以作为单滴被递送至各眼睛的单剂量从容器中进行给药。在一些实施方案中，滴剂的体积为约0.020mL至约0.050mL、或者其间的任意体积。在一些实施方案中，滴剂为约0.035mL。

在一些实施方案中，将组合物给药至眼睛改善干眼或干燥综合征的一种或多种患者报告的症状或临床体征。可以通过下列中的一种或多种评估干眼症状或体征的改善：

·荧光素角膜染色(FCS)(按区域划分0至3个量表，5个区域，总计0-15个量表，使用NEI/行业研讨会量表)

·丽丝胺绿结膜染色(LGCS)(按区域划分0至3个量表，总计0-18量级，使用NEI/行业研讨会量表)

·麻醉泪液分泌试验(在5分钟内润湿的mm)

·泪膜破裂时间(秒数)

·在视觉模拟量表中由患者报告且制表为从基线开始的平均变化的眼干燥

·干眼相关的眼部症状问卷(SANDE：干眼症状的发生频率和严重程度)，(Schaumberg D等人.Development and Validation of a Short Global Dry EyeSymptom Index.The Ocular Surface.2007年1月，第5卷；第1期；第50-57页，在此将其通过引用整体并入)。

在一些实施方案中，组合物是无菌的水性组合物，其包含以下、由以下组成、或者基本上由以下组成：约0.001％至约0.05％的Lacripep^TM(SEQ ID NO.1)或本文中所确定的其它肽；约0.001％至约0.015％的无水柠檬酸；约0.02％至约0.40％的柠檬酸钠二水合物；约0.0005％至约0.005％的EDTA二钠；约0.005％至约0.15％的泰洛沙泊、和约0.005％至约0.1％的对羟基苯甲酸甲酯；其中用NaOH或HCl将组合物的pH调节到pH约6.2至pH约6.8，并且用NaCl将组合物的渗透压调节到约250至约350mOsm/kg。在一些实施方案中，NaCl的量为约0.1％至约1％。在一个实施方案中，组合物不包含对羟基苯甲酸甲酯。在一个实施方案中，组合物仅由列出的成分所组成，并且不含有任何另外的活性成分、辅料(例如，粘度构建剂、缓冲剂、螯合剂、稳定剂、防腐剂、表面活性剂、和张度剂)、载体或稀释剂。

在一些实施方案中，组合物是无菌的水性组合物，其包含以下、由以下组成、或者基本上由以下组成：约0.001％至约0.05％的Lacripep^TM(SEQ ID NO.1)或本文中所确定的其它肽；约0.001％至约0.015％的无水柠檬酸；约0.02％至约0.40％的柠檬酸钠二水合物；约0.0005％至约0.005％的EDTA二钠；和约0.005％至约0.15％的泰洛沙泊；其中用NaOH或HCl将组合物的pH调节到pH约6.2至pH约6.8，并且用NaCl将组合物的渗透压调节到约250至约350mOsm/kg。在一些实施方案中，NaCl的量为约0.1％至约1％。在一个实施方案中，组合物仅由列出的成分所组成，并且不含有任何另外的活性成分、辅料(例如，粘度构建剂、缓冲剂、螯合剂、稳定剂、防腐剂、表面活性剂、和张度剂)、载体或稀释剂。

在一些实施方案中，组合物是无菌的水性组合物，其包含约0.01％±0.001％的Lacripep^TM(SEQ ID NO.1)或者本文中所确定的其它肽；约0.0098％±0.001％的无水柠檬酸；约0.279％±0.028％的柠檬酸钠二水合物；约0.001％±0.0001％的EDTA二钠；约0.05％±0.005％的泰洛沙泊；其中用NaOH或HCl将组合物的pH调节到约6.2至约6.8，并且用NaCl将组合物的渗透压调节到约250至约350mOsm/kg。在一些实施方案中，NaCl的量为约0.50％±0.05％。

在一些实施方案中，组合物是无菌的水性组合物，其包含：约0.005％±0.0005％的Lacripep^TM(SEQ ID NO.1)或本文中所确定的其它肽；约0.0098％±0.001％的无水柠檬酸；约0.279％±0.028％的柠檬酸钠二水合物；约0.001％±0.0001％的EDTA二钠；约0.05％±0.005％的泰洛沙泊；其中用NaOH或HCl将组合物的pH调节到约6.2至约6.8，并且用NaCl将组合物的渗透压调节到约250至约350mOsm/kg。在一些实施方案中，NaCl的量为约0.50％±0.05％。

在一些实施方案中，组合物是无菌的水性组合物，其包含约0.001％±0.0001％Lacripep^TM(SEQ ID NO.1)或本文中所确定的其它肽；约0.0098％±0.001％的无水柠檬酸；约0.279％±0.028％的柠檬酸钠二水合物；约0.001％±0.0001％的EDTA二钠；约0.05％±0.005％的泰洛沙泊；其中用NaOH或HCl将组合物的pH调节到约6.2至约6.8，并且用NaCl将组合物的渗透压调节到约250至约350mOsm/kg。在一些实施方案中，NaCl的量为约0.50％±0.05％。

一些实施方案包括一种治疗干眼和/或原发性干燥综合征的方法；其包括将本文中所公开的组合物给药至患有干眼和/或原发性干燥综合征的对象的眼睛。在一个实施方案中，本文中所描述的组合物用于治疗干燥综合征。在一些实施方案中，本文中所描述的组合物用于治疗符合一种或多种下列标准的对象：

I.眼部症状

o有干眼的症状达至少3个月

o眼睛中有异物感

o每天使用3次或更多次的人工泪液

II.口腔症状

o有口干的症状达至少3个月

o复发的或持续肿胀的唾液腺

o吞咽干食物时需要液体

III.眼部体征

o异常麻醉泪液分泌试验(无麻醉；≤5mm/5分钟)

o眼睛表面的阳性活体染料染色

IV.组织病理学

o唇部活检显示局灶性淋巴细胞性涎腺炎(灶性评分≥1/4mm²)

V.口腔体征

o未刺激的全体唾液流量(在15分钟内≤1.5mL)

o异常腮腺造影

o异常唾液腺扫描

VI.自身抗体

o抗SSA(Ro)(抗干燥综合征相关的抗原A)或抗SSB(La)(抗干燥综合征相关的抗原B)、或两者。

在一个实施方案中，本文中所描述的组合物用于治疗具有来自上文6种类别中每一种的至少一种标准的对象。在一些实施方案中，组合物中的多肽或其药学上可接受的盐是Lacripep^TM(具有由Ac-Lys-Gln-Phe-Ile-Glu-Asn-Gly-Ser-Glu-Phe-Ala-Gln-Lys-Leu-Leu-Lys-Lys-Phe-Ser-NH₂所组成的序列，其中“Ac”代表乙酰基并且C末端以0.005％或0.01％的量被酰胺化(SEQ ID NO：1))。在一些实施方案中，除了多肽(例如Lacripep^TM)外，眼用溶液还包含柠檬酸(约0.0098％无水的)、柠檬酸钠(约0.279％的脱水柠檬酸钠)、EDTA二钠(约0.001％)、NaCl(到约300mOsm/kg)、泰洛沙泊(约0.05％)、NaOH(到约pH 6.5)、纯化水，USP。为了评估功效，一些实施方案采用安慰剂，其包含媒介物眼用溶液且不含多肽。在一些实施方案中，将一滴组合物以每日多达三次给药至对象的眼睛。在一些实施方案中，与开始治疗前的基线测量相比，在至少2周的治疗后、或者在至少4周的治疗后、或者在从4周的治疗开始至少6周后，给药改善对象眼睛中的FCS总体评分(NEI/行业研讨会0-15量表)。在一些实施方案中，给药改善下列中的一种或多种：

与视觉模拟量表的基线相比，在至少2周的治疗后、或者在至少4周的治疗后的眼睛干燥；

与开始治疗前的基线测量相比，在至少2周的治疗后的个体症状评估(瞬时的)；

与开始治疗前的基线测量相比，在至少2周的治疗后在所述对象的眼睛中的LGCS；

与开始治疗前的基线测量相比，在至少2周的治疗后在所述对象的眼睛中的麻醉泪液分泌试验；

与开始治疗前的基线测量相比，在至少2周的治疗后在所述对象的眼睛中的TFBUT；

与开始治疗前的基线测量相比，在至少2周的治疗后在所述对象的眼睛中的FCS；

与开始治疗前的基线测量相比，在至少2周的治疗后、或者在至少4周的治疗后或者在4周治疗后的1周(总体评分SANDE-2)的平均评分；

与开始治疗前的基线测量相比，在至少2周的治疗后、或者在至少4周的治疗后、或者在4周治疗后的1周的个体症状评估的平均评分(反映的)；

与开始治疗前的基线测量相比，在至少2周的治疗后、或者在至少4周的治疗后的FCS和SANDE1及个体症状评估(瞬时的)；

在一些实施方案中，比较反而或者还包括与媒介物对照的比较。

在一个实施方案中，下列药物/疗法中的任何一种或多种不与本文中所描述的组合物共同给药，并且在一个实施方案中，将下列药物/疗法中的任何一种或多种与本文中所描述的组合物共同给药：

眼科药物(任何局部眼部药物)，包括处方药和非处方[OTC]药

隐形眼镜

在治疗开始前的365天内任何眼表或眼睑手术操作，或者在治疗开始前的90天内的眼内手术

胺碘酮

局部眼用抗组胺药

眼用、吸入或鼻内皮质类固醇

局部或口服肥大细胞稳定剂

口服抗组胺药

局部或鼻用血管收缩剂

局部眼用非甾体抗炎药(NSAID)

局部眼用抗生素

在治疗前的60天内和/或在治疗期间：局部环孢菌素、局部立他司特在治疗前的90天内和/或在治疗期间：泪点烧灼术或者对泪点塞进行改变(插入或移除)或鼻泪管手术。

用于眼科疱疹性疾病的长期口服抗病毒药物。

实施例

以下是本文中所描述的一些实施方案的非限制性实例。

实施例1：肽组合物稳定性

在-20℃、5℃、25℃/25％的相对湿度或者25℃/60％的相对湿度下，在1周、2周、1个月、2个月、3个月、4个月、和12个月测试若干Lacripep^TM(SEQ ID NO.1)眼用制剂的稳定性。将这些制剂示于表1.5中，并且将稳定性数据示于表2(将降解产物表示为Lacripep^TM的初始量的w/w百分比)和表3(12个月数据)中。在所有测试条件下，每种制剂均保持澄清的无色溶液，并且包装不会泄漏或变色。

表1. 5-用于稳定性研究的Lacripep^TM制剂

表2-Lacripep^TM制剂稳定性、pH和降解产物％w/w

表3-在12个月，5℃下的Lacripep^TM制剂稳定性

RRT＝相对保留时间

实施例2.比较性肽稳定性

在pH 4.5和7.0的PBS中(图1)以及在pH 6.0和6.5的柠檬酸盐缓冲剂中(图2)评估Lacripep^TM(SEQ ID NO.1)稳定性。Lacripep^TM的初始浓度为0.001％，并且每个试验在60℃运行。在实验的开始(第0周，图1和图2的上图)和在2周后(第2周，图1和图2的下图)，利用MALDI TOF质谱法评估稳定性。在pH 4.5和7.0的PBS中2周后，在Lacripep^TM峰中观察到显著的降解(大箭头)，如新的较低m/e峰，例如在993.9(m/e)处(小箭头，图1的下图)，的出现所表明的。相比之下，在pH 6.0和6.5的柠檬酸盐缓冲剂中2周后，没有Lacripep^TM的峰强度的变化(大箭头)，或者任何新的较低m/e峰的出现(图2，下图)。这表明在柠檬酸盐缓冲剂中肽稳定性的出乎意料的改善。

实施例3：组合物制造过程

表4总结了下述的过程。

在适当尺寸的制造容器中，添加无菌纯化水(部分I)和对羟基苯甲酸甲酯。在螺旋桨混合的情况下，将该混合物加热至65℃±5℃直到对羟基苯甲酸甲酯溶解并得到澄清的溶液，然后除去加热。必要时，为了获得澄清的溶液，可将该混合物加热至高达80℃±2℃。

在进一步连续的螺旋桨混合的情况下，添加柠檬酸、柠檬酸钠、和EDTA二钠。混合直到所有三种成分均溶解，获得澄清的溶液并且该溶液的温度低于22℃±2℃。

在进一步连续螺旋桨混合的情况下，添加泰洛沙泊和Lacripep^TM(SEQ ID NO.1)并混合直到获得澄清的溶液。

必要时，用10％NaOH(水溶液)或10％HCl(水溶液)将本体溶液的pH调节到6.5±0.3。混合直到溶液均匀。

必要时，用25％NaCl(水溶液)将该溶液的渗透压调节到300±20mOsm/kg。

添加纯化水(部分II)至该批次中以将该批次适量地加至100％。用螺旋桨混合直到溶液均匀。

表4-过程(A)

实施例4.组合物制造过程、无防腐剂的组合物

表5中总结了下述的过程。

在适当尺寸的制造容器中，添加纯化水(部分I)。

在连续螺旋桨混合的情况下，添加柠檬酸、柠檬酸钠和EDTA二钠。混合直到所有三种成分均溶解，获得澄清的溶液并且该溶液的温度低于22℃±2℃。

必要时，用25％NaCl(水溶液)将溶液的渗透压调节到300±20mOsm/kg。

表5.过程(B)

实施例5.组合物制造过程

表6总结了下述的过程。

在适当尺寸的制造容器中，添加纯化水(部分I)。在连续螺旋桨混合的情况下，添加柠檬酸、柠檬酸钠和EDTA二钠。混合直到所有三种成分均溶解，获得澄清的溶液并且该溶液的温度低于22℃±2℃。

在进一步连续螺旋桨混合的情况下，添加泰洛沙泊和Lacripep^TM(SEQ ID NO.1)并混合直到获得澄清的溶液。必要时，用10％NaOH(水溶液)或10％HCl(水溶液)将本体溶液的pH调节到6.5±0.3。混合直到溶液均匀。

表6.过程(C)

例如，组合物包含小于0.05％的活性成分，如多肽(例如，0.001-0.02％、0.001-0.05％)或其药学上可接受的盐；和下列中的一种或多种：(i)小于0.6％的缓冲剂(例如，0.001-.3％、0.001-0.6％)；(ii)小于0.01％的EDTA二钠(例如，0％、0.001-.005％，0.001-0.01％)；和(iii)小于0.1％的泰洛沙泊(例如，0％、0.001-0.05％、0.001-0.1％)以及任选的其它成分。

此外，尽管为了清楚和理解的目的已通过例示和实例对前述内容进行了详细描述，但本领域技术人员应当理解的是，在不背离本公开的精神的情况下可以进行多种修改。因此，应当清楚地理解的是，本文中所公开的形式仅是说明性的，而并非旨在限制本公开的范围，而是还涵盖与本发明实施方案的真实范围和精神相伴的所有修改和替代。

除非另有明确说明，在本申请中所使用的术语和短语及它们的变型，特别是在所附权利要求中，应当被解释为是开放式的而不是限制性的。作为前述的实例，术语“包括”应当被解读为意为“包括但没有限制”、“包括但不限于”等。

不定冠词“一个/一种(a)”或“一个/一种(an)”不排除多个/多种。数字前“约”的使用包括数字本身。例如，“约5”为“5”提供表达支持。

Claims

1.液体组合物，包含：

0.00001-0.1％、或0.001-0.05％的多肽或其药学上可接受的盐；

0.01-0.6％的缓冲剂；

无或0.0005-0.01％的EDTA二钠；

无或0.01-0.1％的泰洛沙泊；

和氯化钠；

其中所述组合物的pH为6.2至约6.8，并且所述组合物的渗透压为约250至350mOsm/kg。

2.根据权利要求1所述的组合物，

其中所述多肽或其药学上可接受的盐为0.01％或0.005％；

其中所述缓冲剂为0.25-0.31％、或0.2888％；

其中所述EDTA二钠为0.001％；

其中所述泰洛沙泊为0.05％；

其中所述组合物的pH为6.2至约6.8，并且所述组合物的渗透压为约250至350mOsm/kg；

其中所述多肽是具有SEQ ID NO：1的Lacripep或其药学上可接受的盐。

3.根据权利要求1至2中任一项所述的组合物，其中所述缓冲剂是柠檬酸盐缓冲剂。

4.根据利要求3所述的组合物，其中所述柠檬酸盐缓冲剂包含0.0098％的无水柠檬酸和0.279％的柠檬酸钠二水合物。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的组合物，其中所述组合物的pH为约6.5。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的组合物，其中所述组合物的渗透压为280至320mOsm/kg。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的组合物，其中所述组合物的渗透压为300mOsm/kg。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的组合物，其中NaCl的量为0.4％和0.6％。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的组合物，其中NaCl的量为0.5％。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的组合物，其中所述组合物还包含0.04％的对羟基苯甲酸甲酯。

11.根据权利要求1至10中任一项所述的组合物，其中所述组合物是无菌的。

12.试剂盒，其包含多个一次性使用的容器，其中每个容器包括用于容纳权利要求1至11中任一项所述组合物的器皿。

13.根据权利要求12所述的试剂盒，其中所述容器包含约0.05mL至约1mL的所述组合物。

14.根据权利要求12至13中任一项所述的试剂盒，其中所述容器包括用于密封所述器皿的可移除的密封顶部和使所述器皿与所述密封顶部互相连接的颈部。

15.根据权利要求14所述的试剂盒，其中所述可移除的密封顶部一旦被移除就不能再密封所述器皿。

16.根据权利要求12至15中任一项所述的试剂盒，其中所述容器包含聚氯乙烯、聚丙烯、聚对苯二甲酸乙二醇酯、聚对苯二甲酸乙二醇酯、聚对苯二甲酸乙二醇酯G、高密度聚乙烯、低密度聚乙烯、聚对苯二甲酸丁二醇酯、聚氨酯、聚乙烯醋酸乙烯酯、硅酮、丙烯腈丁二烯苯乙烯、聚四氟乙烯、聚碳酸酯、聚苯乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯、聚砜、聚偏氯乙烯、或者它们的组合。

17.给药方法，包括将一滴或多滴的权利要求1至11中任一项所述的组合物局部应用至眼睛。

18.根据权利要求17所述的方法，其中所述给药还包括从来自权利要求12至16中任一项所述的一次性使用的容器向所述眼睛局部应用所述组合物的液滴。

19.权利要求1至11中任一项所述的组合物用于治疗干眼的用途。

20.权利要求1至11中任一项所述的组合物用于治疗干燥综合征的一种或多种症状的用途。

21.局部组合物，包含：

0.005-0.05％的多肽以及下列中的一种或多种：

0.1-0.6％的缓冲剂；

0.0005-0.01％的EDTA二钠；

0.01-0.1％的泰洛沙泊；

和氯化钠；

其中所述组合物是溶液、凝胶或软膏。

22.根据权利要求21所述的组合物，其中所述多肽以0.001至0.01％的量提供。

23.根据权利要求21或22所述的组合物，其中所述多肽是泪液糖蛋白或其片段。

24.根据权利要求21至23所述的组合物，其中所述多肽是SEQ ID NO：1-9中的任一种。

25.根据权利要求21至24所述的组合物，其中所述多肽是Lacripep。

26.根据权利要求21至25所述的组合物，其用于治疗干眼或干燥综合征的一种或多种症状。

27.治疗干眼和/或原发性干燥综合征的方法，包括将前述权利要求中任一项所述的组合物给药至患有干眼和/或原发性干燥综合征的对象的眼睛；

其中所述多肽或其药学上可接受的盐的量为0.005％或0.01％；

其中所述多肽具有由Ac-Lys-Gln-Phe-Ile-Glu-Asn-Gly-Ser-Glu-Phe-Ala-Gln-Lys-Leu-Leu-Lys-Lys-Phe-Ser-NH₂组成的序列，其中“Ac”代表乙酰基并且C末端被酰胺化(SEQID NO：1)；

并且其中将一滴所述组合物以每日多达三次给药至所述对象的眼睛。

28.根据权利要求27所述的方法，其中与开始治疗前的基线测量相比，在至少2周的治疗后、或者在至少4周的治疗后、或者在从4周的治疗开始至少6周后，所述给药改善所述对象的眼睛中的FCS总评分(NEI/行业研讨会0-15量表)。

29.根据权利要求27至28所述的方法，其中所述给药改善下列中的一种或多种：

30.根据权利要求27至29中任一项所述的方法，其中将所述组合物给药至一组对象不会导致不良事件发生率显著高于将安慰剂给药至类似组的对象的不良事件发生率。

31.根据权利要求27至29中任一项所述的方法，其中将所述组合物给药至一组对象不会导致不良事件发生率在统计学上高于将安慰剂给药至类似组的对象的不良事件发生率。

32.根据权利要求27至29中任一项所述的方法，其中将所述组合物给药至一组对象不会导致严重不良事件发生率在统计学上高于将安慰剂给药至类似组的对象的严重不良事件发生率。

33.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述多肽或其药学上可接受的盐的浓度为约0.005％。

34.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述多肽或其药学上可接受的盐的浓度为约0.01％。

35.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述对象符合所有下列标准：

年龄为18岁或以上；

如果所述对象正在接受用于干燥综合征治疗的全身(口服)治疗，则所述对象必须正好在之前的90天接受被定义为相同治疗的稳定的全身治疗；

在开始治疗前，符合所有下列标准：

(b)使用SANDE问卷的症状评分≥40；

(c)麻醉泪液分泌试验评分≤5mm润湿/5min；

(d)使用NEI/行业研讨会量表的丽丝胺绿结膜染色(LGCS)总评分

≥5(其中0＝未染色)；

其中在随访时，所述对象必须在至少一只且相同的眼睛中符合所有4种标准。

36.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述对象不符合一种或多种下列标准：

任何活动性传染性眼部病况；

单眼或最佳矫正视力(BCVA)，必要时使用矫正镜片，为+1.0logMAR或更差，如由早期治疗糖尿病视网膜病变研究(ETDRS)评估的；

在用所述组合物治疗期间，不能暂停任何局部眼科药物(包括局部环孢菌素)的使用；

在开始用所述组合物治疗前的60天内已使用(局部眼用环孢菌素)；

在开始用所述组合物治疗前的60天内已使用(局部眼用立他司特)；

在上区NEI/行业研讨会量表中所述对象的眼睛的荧光素角膜染色(FCS)总评分＝15或评分＝3，或者所述对象的眼睛具有扩散汇合染色的、丝状或明显的上皮缺损；

在治疗期间不能暂停隐形眼镜的使用和避免隐形眼镜的使用；

具有前膜营养不良的病史或者当前患有前膜营养不良；

已进行了角膜移植或类似的角膜手术(DALK、DSEK、DMEK等)；

已使用或预计使用胺碘酮；

在所述对象的眼睛中并且在过去的90天内已进行泪点烧灼术或者在开始治疗前对泪点塞进行改变(插入或移除)；

在所述对象的眼睛中已进行角膜屈光手术(LASIK、PRK、RK)；

怀孕或疑似怀孕；

正在哺乳或计划哺乳；和

37.根据前述权利要求中任一项所述的组合物、试剂盒或方法，其中所述多肽具有由Ac-Lys-Gln-Phe-Ile-Glu-Asn-Gly-Ser-Glu-Phe-Ala-Gln-Lys-Leu-Leu-Lys-Lys-Phe-Ser-NH₂组成的序列，其中“Ac”代表乙酰基并且C末端被酰胺化(SEQ ID NO：1)。

38.根据前述权利要求中任一项所述的组合物、试剂盒或方法，其中所述多肽或其药学上可接受的盐的量为0.01％或0.005％。

39.根据前述权利要求中任一项所述组合物、试剂盒或方法，其中与开始治疗前的基线测量的比较反而或者还包括使用所述多肽的治疗相对于媒介物对照的比较。

40.根据前述权利要求中任一项所述的组合物、试剂盒或方法，其中所述组合物包含：

0.001-0.05％的多肽或其药学上可接受的盐；

0.01-0.6％的缓冲剂；

0.0005-0.01％的EDTA二钠；

0.01-0.1％的泰洛沙泊，

和氯化钠；

41.根据权利要求40所述的组合物、试剂盒或方法，

其中所述多肽或其药学上可接受的盐为0.01％；

其中所述缓冲剂为0.2888％；

其中所述EDTA二钠为0.001％；

其中所述泰洛沙泊为0.05％，

42.根据前述权利要求中任一项所述的组合物、试剂盒或方法，其中所述组合物不含有泰洛沙泊。

43.根据前述权利要求中任一项所述的组合物、试剂盒或方法，其中所述组合物不含有EDTA。

44.根据前述权利要求中任一项所述的组合物、试剂盒或方法，其中在将所述组合物在5±3℃或25±2℃和25±5％的相对湿度下储存1周后，在所述组合物中，所述组合物保持至少约99.0％的未降解形式的多肽。

45.根据前述权利要求中任一项所述的组合物、试剂盒或方法，其中在将所述组合物在25±2℃和25±5％的相对湿度下储存2周后，在所述组合物中，所述组合物保持至少约99.0％的未降解形式的多肽。

46.根据前述权利要求中任一项所述的组合物、试剂盒或方法，其中在将所述组合物在5±3℃或25±2℃和25±5％的相对湿度下储存1个月后，在所述组合物中，所述组合物保持至少约99.0％的未降解形式的多肽。

47.根据前述权利要求中任一项所述的组合物、试剂盒或方法，其中在将所述组合物在5±3℃储存2个月后，在所述组合物中，所述组合物保持至少约99.0％的未降解形式的多肽。

48.根据前述权利要求中任一项所述的组合物、试剂盒或方法，其中在将所述组合物在5±3℃或-20±5℃储存3个月后，在所述组合物中，所述组合物保持至少约99.0％的未降解形式的多肽。

49.根据前述权利要求中任一项所述的组合物、试剂盒或方法，其中在将所述组合物在5±3℃储存4个月后，在所述组合物中，所述组合物保持至少约99.0％的未降解形式的多肽。

50.根据前述权利要求中任一项所述的组合物、试剂盒或方法，其中在将所述组合物在5±3℃储存5个月后，在所述组合物中，所述组合物保持至少约99.0％的未降解形式的多肽。

51.根据权利要求44至50中任一项所述的组合物、试剂盒或方法，其中在所述组合物中，所述组合物保持至少约99.5％的未降解形式的多肽。

52.根据权利要求44至50中任一项所述的组合物、试剂盒或方法，其中在所述组合物中，所述组合物保持至少约99.9％的未降解形式的多肽。

53.根据权利要求44至50中任一项所述的组合物、试剂盒或方法，其中在所述组合物中，所述组合物保持至少约99.95％的未降解形式的多肽。

54.根据前述权利要求中任一项所述的组合物、试剂盒或方法，其中在将所述组合物在5±3℃储存12个月后，在所述组合物中，所述组合物保持至少约80％的未降解形式的多肽。

55.根据权利要求54所述的组合物、试剂盒或方法，其中在所述组合物中，所述组合物保持至少约90％的未降解形式的所述多肽。