CN116492338A - 吲哚并吡啶类衍生物在制备抑制mdsl/skm1并治疗骨髓增生异常综合征中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于药物领域，具体公开了一种吲哚并吡啶类衍生物在制备抑制MDSL和/或SKM1的药物的应用，所述的吲哚并吡啶类衍生物为具有式1结构的化合物及其药学上可接受的盐、酰胺、酯、结晶、溶剂化合物、共晶中的至少一种；所述的R1、R2独自为C1～C4的烷基；所述的R3为卤素；所述的R4为H或C1～C4的烷基。本发明提供了一种全新的式1化合物用于抑制MDSL和/或SKM1的全新治疗用途，并进一步发现，所述的式1基于结构以及基团的联合协同，可以基于全新的作用机制实现MDSL和/或SKM1的高效抑制。
Description
技术领域
本发明属于化合物制药用途领域，具体涉及吲哚并吡啶类衍生物在制备治疗骨髓增生异常综合征药物中的应用。
背景技术
骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome，MDS)是一组克隆性异质性造血干/祖细胞疾病，其特征是一系或多系血细胞发育异常，无效造血。MDS是最常见的老年血液系统恶性肿瘤之一，发病率约为7/10万，且随着年龄的增长发病率明显增高。目前临床上MDS治疗手段和疗效有限，仅有造血干细胞移植可能治愈该病，但治疗风险高，花费巨大，难以满足临床需求。其他治疗如DNA甲基转移酶抑制剂阿扎胞苷、地西他滨；免疫调节药物如来那度胺；促红细胞成熟剂罗特西普等仅能改善部分患者造血功能，延缓疾病进展，无法改变患者最终死亡的结局。目前仍然不可治愈。
发明内容
针对现有技术存在的空白，本发明提供一种吲哚并吡啶类衍生物在制备抑制MDSL和/或SKM1并治疗MDS药物的应用。
本发明第二目的在于，提供一种包含所述吲哚并吡啶类衍生物并治疗MDS的药物组合物。
一种吲哚并吡啶类衍生物在制备抑制MDSL和/或SKM1的药物的应用，所述的吲哚并吡啶类衍生物为具有式1结构的化合物及其药学上可接受的盐、酰胺、酯、结晶、溶剂化合物、共晶中的至少一种；
所述的R1、R2独自为C1～C4的烷基；
所述的R3为卤素；
所述的R4为H或C1～C4的烷基。
本发明提供了一种全新的式1化合物用于抑制MDSL和/或SKM1的全新治疗用途，并进一步发现，所述的式1基于结构以及基团的联合协同，可以基于全新的作用机制实现MDSL和/或SKM1的高效抑制。
本发明中，所述的R1、R2为碳数为1～4的直链或者支链烷基，优选为甲基或乙基。
所述的R3为卤素，所述的卤素例如为F、Cl、Br或I,，优选为Cl。
优选地，所述的R4为H。
本发明中，将所述的吲哚并吡啶类衍生物用于制备通过调节MYB表达和上调Bcl-2表达、下调裂解caspase 3和裂解PARP，从而促进细胞凋亡抑制MDSL和/或SKM1的药物。本发明研究发现，针对MDSL和/或SKM1的抑制问题，所述的式1可以基于全新的作用机制实现其良好的抑制。
本发明所述的应用，将所述的吲哚并吡啶类衍生物制备用于抑制MDSL和/或SKM1从而治疗骨髓增生异常综合征的药物。
本发明所述的应用，将所述的吲哚并吡啶类衍生物和药学上可接受的辅料联合，制得药学上可接受的剂型，例如，所述的剂型例如为口服或注射给药剂型。
本发明还提供了一种抑制MDSL和/或SKM1的药物，包含药学有效量的所述的吲哚并吡啶类衍生物。所述的抑制MDSL和/或SKM1的药物进一步可以为治疗骨髓增生异常综合征的药物。
有益效果
本发明提供了一种全新的式1化合物用于抑制MDSL和/或SKM1的全新治疗用途，并进一步发现，所述的式1基于结构以及基团的联合协同，可以基于全新的作用机制实现MDSL和/或SKM1的高效抑制，可用于骨髓增生异常综合征的治疗。
附图说明
图1为实施例1手工计数方法检测式1-A对MDS细胞株MDSL和SKM1细胞增殖能力的影响；*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001；
图2为实施例2采用CCK-8法检测式1-A对MDS细胞株MDSL和SKM1细胞存活率的影响；*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001；
图3为实施例3采用软琼脂克隆方法检测式1-A对MDS细胞株MDSL和SKM1细胞增殖能力的影响；*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001；
图4为实施例4采用活性氧检测方法检测不同浓度的式1-A对MDS细胞株MDSL和SKM1细胞活性氧水平的影响；*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。
图5为实施例5式1-A对MDS细胞株MDSL和SKM1细胞Myb、Bcl-2、caspase 3和PARP表达的影响图。
具体实施方式
下面列举实施例并结合附图对本发明进行详细说明，但本发明不受这些实施例的限制。
本发明以下案例中，所述的吲哚并吡啶类衍生物选用典型的式1-A，其为R1、R2为甲基、R3为Cl、R4为H的式1化合物。
实施例1
本实施例采用手工计数方法检测式1-A对MDS细胞株MDSL和SKM1细胞增殖能力的影响。
实验步骤：
(1)收集对数生长期的MDS细胞株，调整细胞悬液浓度，每孔加入1mL，12孔板铺板，使待测细胞密度为1*105个/mL；
(2)设置不同的药物浓度和处理时间。
(3)每24h进行一次手工计数，统计结果。
实验结果如图1所示。结果表明，MDS细胞株对于式1-A敏感，能够有效影响细胞的增殖能力，具有浓度和时间依赖性。统计学分析具有极显著性差异。
实施例2
本发明实施例采用CCK-8法检测式1-A对MDS细胞株细胞活率的影响。
实验步骤：
(1)收集对数生长期的MDS细胞，调整细胞悬液浓度，每孔加入100μL，96孔板铺板，使待测细胞密度为1*105个/mL；
(2)设置不加细胞只有培基的调零组以及加入溶剂组，每个浓度设置3-5个平行孔；
(3)设置不同的药物浓度和处理时间，置于5％CO2，37℃细胞培养箱中培养；
(4)特定时间点到达后，每孔加入10μL CCK-8溶液，置于37℃条件下避光孵育2小时，用酶标仪在450nm波长处测量各孔的OD值，进行统计学分析，计算细胞相对存活率。
实验结果如图2所示。结果表明，式1-A制剂对MDS细胞具有增殖抑制效果，统计学分析具有显著性差异。
实施例3；
本实施例采用软琼脂克隆方法检测式1-A对MDS细胞株MDSL和SKM1细胞增殖能力的影响。
实验步骤：
(1)收集对数生长期的MDS细胞株，调整细胞悬液浓度，每孔加入特定的软琼脂凝胶，形成双层软琼脂培养基，12孔板铺板，使待测细胞密度为3000个/mL；
(2)设置不加细胞只有培基的调零组以及加入溶剂组，每个浓度设置3个平行孔；
(3)置于5％CO2，37℃细胞培养箱中，培养约14天；
(4)每孔加入200μL MTT溶液，置于37℃条件下避光孵育2小时，扫描结果，进行统计学分析，计算克隆数量差异。
实验结果如图3所示。结果表明，式1-A制剂对MDS细胞具有克隆形成抑制效果，具有浓度依赖性，统计学分析具有显著性差异。
实施例4
本发明实施例采用活性氧检测方法检测不同浓度的式1-A对MDS细胞株MDSL和SKM1细胞活性氧水平的影响。
实验步骤：
(1)收集对数生长期的MDS细胞株，调整细胞悬液浓度，每孔加入1mL，12孔板铺板，使待测细胞密度为1×105个/mL；
(2)设置不同的药物浓度和处理时间。
(3)收集每个时间点的细胞，300g，4℃离心5min收集细胞，用预冷的DPBS洗涤细胞两次，每次均在300g，4℃离心5min，收集1-5×105个细胞；
(4)加入100μL用1640稀释的ROS探针重悬细胞，轻轻混匀；
(5)避光，37℃反应30分钟；
(6)将其转移至流式管中，用流式细胞仪检测细胞内ROS情况，最好在25分钟内完成检测，以免探针影响细胞活性。
实验结果如图4所示。结果表明，式1-A制剂对MDS细胞具有ROS影响效果，具有浓度依赖性，统计学分析具有显著性差异。
实施例5
本发明实施例采用Western方法检测不同浓度的式1-A对MDS细胞株MDSL和SKM1细胞myb、Bcl-2、caspase 3和PARP表达的影响。
实验步骤：
(1)提取总蛋白
各处理组收集1×107个细胞，2000rpm离心5min，弃上清。DPBS洗涤细胞，离心5min，弃上清。RIPA细胞裂解液裂解细胞，置冰上，然后置摇床摇动30min。超声破碎细胞，4℃，13800rpm，离心15min。转移上清液于一新的提前预冷的EP管中，-80℃保存。
(2)BCA法测蛋白浓度
按BufferA:Buffer B＝50:1比例配制工作液，充分混匀后，向96孔板中每孔加入200μL。配置浓度分别为1、0.5、0.25、0.125、0.0625g/L的标准蛋白液，再用DPBS稀释蛋白样品十倍。每组设三个平行孔，每孔上样20μL。37℃避光孵育30min。使用酶标仪测OD值，绘制标准蛋白浓度曲线，计算各样品蛋白浓度。
(3)SDS-PAGE电泳
在电泳槽中装配好电泳装置，倒入1×电泳液。拔下聚丙烯酰胺凝胶梳齿，混合蛋白样品和loading buffer，100℃煮10min，用10μL量程移液枪在凝胶孔中点样。接通电源，电压设置为60V，按下启动键开始电泳，待蛋白Marker跑过浓缩胶后，电压改为100V继续电泳。
(4)电转
裁取一张大小约6cm×8cm的NC膜，电泳结束后取出凝胶，切除上层浓缩胶。在盘中倒入一部分1×电转液，打开夹子，夹子黑色面置于下层，依次铺上一张海绵垫，滤纸，NC膜，胶，滤纸，另一张海绵垫，合上夹子，夹紧。将夹子放进电转槽中，在电转槽中加满电转液，电转槽中放两个冰袋，再将电转槽放入一个稍大的塑料泡沫盒中，取适量冰覆盖电转槽，电压设置为100V，按下启动键开始电转，电转1.5h。
(5)免疫反应及显影
电转结束后，裁取相应目的条带，再将目的条带放进加了封闭液的盒子里，室温摇床封闭2h。PBST溶液洗涤3次，每次10min。加入相应的一抗稀释液，4℃摇床缓慢摇动孵育过夜。次日回收一抗，用PBST洗涤NC膜三次，每次10min。洗膜结束后，向盒中加入4ml封闭液，同时向封闭液中加入2μl二抗，室温孵育2h。PBST溶液洗涤3次，每次10min。滴加显影液，使用Bio-rad化学发光系统、image软件显影，得到蛋白表达结果。
Claims (10)
1.一种吲哚并吡啶类衍生物在制备抑制MDSL和/或SKM1的药物的应用，其特征在于，所述的吲哚并吡啶类衍生物为具有式1结构的化合物及其药学上可接受的盐、酰胺、酯、结晶、溶剂化合物、共晶中的至少一种；
所述的R1、R2独自为C1～C4的烷基；
所述的R3为卤素；
所述的R4为H或C1～C4的烷基。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的R1、R2为甲基或乙基。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的R3为Cl。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的R4为H。
5.如权利要求1～4任一项所述的应用，其特征在于，将所述的吲哚并吡啶类衍生物用于制备通过调节MYB表达和上调Bcl-2表达、下调裂解caspase3和裂解PARP，从而促进细胞凋亡抑制MDSL和/或SKM1的药物。
6.如权利要求1～5任一项所述的应用，其特征在于，所述的药物为治疗骨髓增生异常综合征的药物。
7.如权利要求1～6任一项所述的应用，其特征在于，将所述的吲哚并吡啶类衍生物和药学上可接受的辅料联合，制得药学上可接受的剂型。
8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，所述的剂型为口服或注射给药剂型。
9.一种抑制MDSL和/或SKM1的药物，其特征在于，包含药学有效量的权利要求1～8任一项所述应用中所述的吲哚并吡啶类衍生物。
10.如权利要求9所述的抑制MDSL和/或SKM1的药物，其特征在于，为治疗骨髓增生异常综合征的药物。
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Citations (3)
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|---|---|---|---|---|
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| CN113337602A (zh) * | 2020-03-02 | 2021-09-03 | 苏州亚盛药业有限公司 | Mdm2抑制剂的治疗方法和生物标志物 |
| US11541116B1 (en) * | 2022-01-07 | 2023-01-03 | Kojin Therapeutics, Inc. | Methods and compositions for inducing ferroptosis in vivo |
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Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109906081A (zh) * | 2016-09-01 | 2019-06-18 | 加莱拉实验室有限责任公司 | 利用五氮杂大环络合物和抗坏血酸类化合物的联合癌症疗法 |
| CN113337602A (zh) * | 2020-03-02 | 2021-09-03 | 苏州亚盛药业有限公司 | Mdm2抑制剂的治疗方法和生物标志物 |
| US11541116B1 (en) * | 2022-01-07 | 2023-01-03 | Kojin Therapeutics, Inc. | Methods and compositions for inducing ferroptosis in vivo |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| RUDY BIRSEN等: "APR-246 induces early cell death by ferroptosis in acute myeloid leukemia", 《HAEMATOLOGICA》, vol. 107, no. 2, 1 February 2022 (2022-02-01), pages 403 - 416 * |
| 程霖: "RSL3诱导急性白血病细胞及其耐药细胞株发生铁死亡的作用及机制研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库医药卫生科技辑》, no. 06, 15 June 2021 (2021-06-15), pages 072 - 74 * |
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