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CN114271428A - 一种利用微生物发酵降解辣木叶过敏原的方法 - Google Patents

一种利用微生物发酵降解辣木叶过敏原的方法 Download PDF

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CN114271428A
CN114271428A CN202111671186.XA CN202111671186A CN114271428A CN 114271428 A CN114271428 A CN 114271428A CN 202111671186 A CN202111671186 A CN 202111671186A CN 114271428 A CN114271428 A CN 114271428A
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CN
China
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moringa oleifera
oleifera leaf
allergen
moringa
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CN202111671186.XA
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English (en)
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胡永金
高艳
薛桥丽
田洋
杜欢
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Yunnan Agricultural University
Original Assignee
Yunnan Agricultural University
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Publication date
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Abstract

本发明公开了一种利用微生物发酵降解辣木叶过敏原的方法,包括以下步骤:S1、发酵菌悬液制备,选用发酵菌种进行培养,活化2~3次后得到培养液,将培养液离心,倾去上清,用无菌生理盐水冲洗沉淀两次,再用无菌水稀释,调整浓度得到发酵菌悬液;S2、微生物发酵,向辣木叶粉中加入蒸馏水,作为辣木叶粉发酵种子液,然后接入发酵菌悬液,调节初始pH值为5.0~9.0,在温度为30~40℃条件下,培养3~7d得到辣木叶发酵液;S3、冷冻干燥,辣木叶发酵液经过冷冻干燥技术处理后,得到过敏蛋白降解的发酵辣木叶粉。本发明利用微生物发酵降解辣木叶过敏蛋白,短时间发酵即可达到降解辣木叶过敏原的目的,有效降低了生产成本。

Description

一种利用微生物发酵降解辣木叶过敏原的方法
技术领域
本发明涉及食品加工技术领域,特别涉及一种利用微生物发酵降解辣木叶过敏原的方法。
背景技术
辣木是一种新资源全营养食品,应用研究广泛。辣木叶作为一种优质的蛋白来源,其蛋白含量丰富,但消化利用率较差,极易引起腹泻、皮肤瘙痒、眼皮红肿等过敏现象的发生。因此,辣木叶脱敏技术的研究显得尤为重要。
降解过敏原的方法有很多,主要分为物理法、化学法、生物法。常采用的物理法有高压蒸汽法和辐照法,其中高压蒸汽法主要是通过高压改变过敏原的二级、三级结构,其过敏原性降低,但是该方法在处理过程中会造成其他营养成分的损失,并且耗能较高,设备昂贵,不适于大批量生产;辐照法主要是通过辐照使食物中的蛋白质发生碎裂、交联、聚集来改变蛋白质的构象,从而调节过敏原的免疫反应,但该法改变效果不明显,消费者对辐照技术也还存在安全担忧。化学法通常是通过添加某种物质使其与致敏原结合形成抗消化的复合物,该复合物在肠道中不能被消化吸收,从而避免了过敏现象的发生,该法大大降低食物的营养成分,不消化物的大量积累极易引起人肠道不适。生物法主要包括基因工程、育种、酶水解、微生物发酵,其中基因工程主要是通过转基因技术去除过敏蛋白,该法过敏蛋白去除彻底,但可能使食物丧失原本风味,育种主要是通过杂交手段培育出致敏性较低的品种,存在周期较长得缺点,酶水解法主要是通过酶分解致敏原蛋白,破坏其抗原决定簇,或通过酶作用使蛋白质之间相互交联,使得致敏原蛋白的抗原决定簇被覆盖无法与抗体结合,从而降低致敏性,酶处理方式温和,一般不产生有害物质,但成本较高。因此需要一种周期短、成本低、能够有效降解辣木叶过敏原的方法。
发明内容
本发明的目的是提供一种利用微生物发酵降解辣木叶过敏原的方法,利用微生物发酵降解辣木叶过敏蛋白,短时间发酵即可达到降解辣木叶过敏原的目的,有效降低了生产成本。
本发明的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的:
一种利用微生物发酵降解辣木叶过敏原的方法,包括以下步骤:
S1、发酵菌悬液制备
选用发酵菌种进行培养,活化2~3次后得到培养液,将培养液离心,倾去上清,用无菌生理盐水冲洗沉淀两次,再用无菌水稀释,调整浓度得到发酵菌悬液;
S2、微生物发酵
向辣木叶粉中加入蒸馏水,作为辣木叶粉发酵种子液,然后接入发酵菌悬液,调节初始pH值为5.0~9.0,在温度为30~40℃条件下,培养3~7d得到辣木叶发酵液;
S3、冷冻干燥
辣木叶发酵液经过冷冻干燥技术处理后,得到过敏蛋白降解的发酵辣木叶粉。
进一步优选的,步骤S1中发酵菌种选用发酵乳杆菌、植物乳杆菌、棉籽糖乳球菌或纳豆芽孢杆菌中的一种,培养条件为37℃静置培养24h。
进一步优选的,步骤S1中发酵菌种选用酿酒酵母或鲁氏酵母中的一种,培养条件为30℃培养36h。
进一步优选的,步骤S1中发酵菌种选用毛霉40899,培养条件为30℃培养96h。
进一步优选的,步骤S1中,离心转速为4000~8000r/min,温度为4℃,离心时长为10~30min。
进一步优选的,步骤S1中,发酵菌悬液的浓度为1.0×106~1.0×109CFU/mL。
进一步优选的,步骤S2中,辣木叶粉中加入的无菌水量,为辣木叶粉质量的6-10倍,辣木叶粉培养液中接入1%-6%(v/v,按辣木叶粉培养液体积百分比计)的发酵菌悬液。
与现有技术相比,本发明具有以下有益效果:
其一、以辣木叶粉为发酵基质,利用微生物发酵降解辣木叶过敏蛋白。
其二、本发明获得的微生物发酵方法,短时间发酵即可达到降解辣木叶过敏原的目的。
其三、本发明能够降低辣木叶引起的过敏现象,解决辣木叶蛋白利用率低的现状。
其四、本发明降低了生产成本,提高辣木叶的利用价值。
附图说明
图1是本发明的操作流程示意图。
具体实施方式
为了使本技术领域的人员更好地理解本发明的技术方案,下面结合实施例对本发明作进一步的详细描述。本领域技术人员将会理解,下列实施例仅用于说明本发明,而不应视为限定本发明的范围。
实施例1
一种利用微生物发酵降解辣木叶过敏原的方法,包括以下步骤:
S1、发酵菌悬液制备
发酵乳杆菌在37℃温度下静置培养24h,活化2次后得到培养液,将培养液于4000r/min,温度4℃条件,离心30min,倾去上清,用无菌生理盐水冲洗沉淀两次,再用无菌水稀释,调整浓度为1.0×109的发酵菌悬液;
S2、微生物发酵
向辣木叶粉中加入6倍质量的蒸馏水,作为辣木叶粉发酵种子液,然后接入1%(v/v,按辣木叶粉培养液体积百分比计)的发酵菌悬液,调节初始pH值为6.0,在温度为40℃条件下,培养7d得到辣木叶发酵液;
S3、冷冻干燥
辣木叶发酵液经过冷冻干燥技术处理后,得到过敏蛋白降解的发酵辣木叶粉。
实施例2
一种利用微生物发酵降解辣木叶过敏原的方法,包括以下步骤:
S1、发酵菌悬液制备
植物乳杆菌在37℃温度下静置培养24h,活化2次后得到培养液,将培养液于5000r/min,温度4℃条件,离心27min,倾去上清,用无菌生理盐水冲洗沉淀两次,再用无菌水稀释,调整浓度为1.0×108的发酵菌悬液;
S2、微生物发酵
向辣木叶粉中加入7倍质量的蒸馏水,作为辣木叶粉发酵种子液,然后接入2%(v/v,按辣木叶粉培养液体积百分比计)的发酵菌悬液,调节初始pH值为6.5,在温度为35℃条件下,培养6d得到辣木叶发酵液;
S3、冷冻干燥
辣木叶发酵液经过冷冻干燥技术处理后,得到过敏蛋白降解的发酵辣木叶粉。
实施例3
一种利用微生物发酵降解辣木叶过敏原的方法,包括以下步骤:
S1、发酵菌悬液制备
棉籽糖乳球菌在37℃温度下静置培养24h,活化3次后得到培养液,将培养液于5000r/min,温度4℃条件,离心27min,倾去上清,用无菌生理盐水冲洗沉淀两次,再用无菌水稀释,调整浓度为1.0×106的发酵菌悬液;
S2、微生物发酵
向辣木叶粉中加入7倍质量的蒸馏水,作为辣木叶粉发酵种子液,然后接入3%(v/v,按辣木叶粉培养液体积百分比计)的发酵菌悬液,调节初始pH值为6.5,在温度为30℃条件下,培养6d得到辣木叶发酵液;
S3、冷冻干燥
辣木叶发酵液经过冷冻干燥技术处理后,得到过敏蛋白降解的发酵辣木叶粉。
实施例4
一种利用微生物发酵降解辣木叶过敏原的方法,包括以下步骤:
S1、发酵菌悬液制备
纳豆芽孢杆在37℃温度下静置培养24h,活化3次后得到培养液,将培养液于6000r/min,温度4℃条件,离心24min,倾去上清,用无菌生理盐水冲洗沉淀两次,再用无菌水稀释,调整浓度为1.0×107的发酵菌悬液;
S2、微生物发酵
向辣木叶粉中加入8倍质量的蒸馏水,作为辣木叶粉发酵种子液,然后接入3%(v/v,按辣木叶粉培养液体积百分比计)的发酵菌悬液,调节初始pH值为7.0,在温度为40℃条件下,培养5d得到辣木叶发酵液;
S3、冷冻干燥
辣木叶发酵液经过冷冻干燥技术处理后,得到过敏蛋白降解的发酵辣木叶粉。
实施例5
一种利用微生物发酵降解辣木叶过敏原的方法,包括以下步骤:
S1、发酵菌悬液制备
酿酒酵母在30℃温度下培养36h,活化3次后得到培养液,将培养液于7000r/min,温度4℃条件,离心20min,倾去上清,用无菌生理盐水冲洗沉淀两次,再用无菌水稀释,调整浓度为1.0×107的发酵菌悬液;
S2、微生物发酵
向辣木叶粉中加入9倍质量的蒸馏水,作为辣木叶粉发酵种子液,然后接入4%(v/v,按辣木叶粉培养液体积百分比计)的发酵菌悬液,调节初始pH值为6.5,在温度为40℃条件下,培养4d得到辣木叶发酵液;
S3、冷冻干燥
辣木叶发酵液经过冷冻干燥技术处理后,得到过敏蛋白降解的发酵辣木叶粉。
实施例6
一种利用微生物发酵降解辣木叶过敏原的方法,包括以下步骤:
S1、发酵菌悬液制备
鲁氏酵母在30℃温度下培养36h,活化3次后得到培养液,将培养液于7000r/min,温度4℃条件,离心15min,倾去上清,用无菌生理盐水冲洗沉淀两次,再用无菌水稀释,调整浓度为1.0×106的发酵菌悬液;
S2、微生物发酵
向辣木叶粉中加入9倍质量的蒸馏水,作为辣木叶粉发酵种子液,然后接入5%(v/v,按辣木叶粉培养液体积百分比计)的发酵菌悬液,调节初始pH值为6.5,在温度为40℃条件下,培养3d得到辣木叶发酵液;
S3、冷冻干燥
辣木叶发酵液经过冷冻干燥技术处理后,得到过敏蛋白降解的发酵辣木叶粉。
实施例7
一种利用微生物发酵降解辣木叶过敏原的方法,包括以下步骤:
S1、发酵菌悬液制备
毛霉40899培养条件为30℃培养96h,活化2次后得到培养液,将培养液于8000r/min,温度4℃条件,离心10min,倾去上清,用无菌生理盐水冲洗沉淀两次,再用无菌水稀释,调整浓度为1.0×106的发酵菌悬液;
S2、微生物发酵
向辣木叶粉中加入10倍质量的蒸馏水,作为辣木叶粉发酵种子液,然后接入6%(v/v,按辣木叶粉培养液体积百分比计)的发酵菌悬液,调节初始pH值为5.0,在温度为30℃条件下,培养3d得到辣木叶发酵液;
S3、冷冻干燥
辣木叶发酵液经过冷冻干燥技术处理后,得到过敏蛋白降解的发酵辣木叶粉。
本具体实施例仅仅是对本发明的解释,其并不是对本发明的限制,本领域技术人员在阅读完本说明书后可以根据需要对本实施例做出没有创造性贡献的修改,但只要在本发明的权利要求范围内都受到专利法的保护。

Claims (7)

1.一种利用微生物发酵降解辣木叶过敏原的方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1、发酵菌悬液制备
选用发酵菌种进行培养,活化2~3次后得到培养液,将培养液离心,倾去上清,用无菌生理盐水冲洗沉淀两次,再用无菌水稀释,调整浓度得到发酵菌悬液;
S2、微生物发酵
向辣木叶粉中加入蒸馏水,作为辣木叶粉发酵种子液,然后接入发酵菌悬液,调节初始pH值为5.0~9.0,在温度为30~40℃条件下,培养3~7d得到辣木叶发酵液;
S3、冷冻干燥
辣木叶发酵液经过冷冻干燥技术处理后,得到过敏蛋白降解的发酵辣木叶粉。
2.根据权利要求1所述的一种利用微生物发酵降解辣木叶过敏原的方法,其特征在于:步骤S1中发酵菌种选用发酵乳杆菌、植物乳杆菌、棉籽糖乳球菌或纳豆芽孢杆菌中的一种,培养条件为37℃静置培养24h。
3.根据权利要求1所述的一种利用微生物发酵降解辣木叶过敏原的方法,其特征在于:步骤S1中发酵菌种选用酿酒酵母或鲁氏酵母中的一种,培养条件为30℃培养36h。
4.根据权利要求1所述的一种利用微生物发酵降解辣木叶过敏原的方法,其特征在于:步骤S1中发酵菌种选用毛霉40899,培养条件为30℃培养96h。
5.根据权利要求1所述的一种利用微生物发酵降解辣木叶过敏原的方法,其特征在于:步骤S1中,离心转速为4000~8000r/min,温度为4℃,离心时长为10~30min。
6.根据权利要求1所述的一种利用微生物发酵降解辣木叶过敏原的方法,其特征在于:步骤S1中,发酵菌悬液的浓度为1.0×106~1.0×109CFU/mL。
7.根据权利要求1所述的一种利用微生物发酵降解辣木叶过敏原的方法,其特征在于:步骤S2中,辣木叶粉中加入的无菌水量,为辣木叶粉质量的6-10倍,辣木叶粉培养液中接入1%-6%(v/v,按辣木叶粉培养液体积百分比计)的发酵菌悬液。
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