CN1022570C - 抗病毒化合物的制备方法 - Google Patents

Abstract

一种酯化的5-丙炔基取代的嘧啶核苷和它的盐；它们在治疗或预防病毒感染中的用途；含有它们的药物制剂；以及该核苷及其盐的制备方法。

Description

本发明涉及一种酯化的5-丙炔基嘧啶核苷及其盐、该核苷及其盐在医疗中、尤其是治疗或预防病毒感染（具体讲是疱疹病毒感染）时的应用、以及该核苷及其盐的制备方法。

在DNA病毒中，疱疹病毒代表引起人体内各种病毒性疾病的病毒。疱疹病毒包括单纯性疱疹病毒（HSV）、带状水痘病毒（VZV）、巨细胞病毒（CMV）和EB病毒（EBV）。

带状水痘病毒是一种引起水痘和带状疱疹的疱疹病毒。水痘是在无免疫力宿主体内和婴幼儿体内产生的疾病的最初形式，通常为一种轻度疾病，特征是疱疹和发热。带状疱疹是发生在被病毒严重感染的成年人体内疾病的复发形式，临床表现特征为神经痛和一种单侧和皮区分布的皮肤疱疹。炎症的扩散可能导致麻痹或惊厥。如果脑膜被感染，可以导致昏迷;而VZV感染的扩散可以是致命的。

由VZV感染的临床表现也可以在免疫系统功能受到损害的病人体内观察到，这或是由于疾病本身的原因，或是由于调节免疫治疗（如器官移植后的调节免疫治疗）引起的。现在，随着获得性免疫缺陷综合症（AIDS）的出现，可以发现由于疾病使免疫系统功能受到损害的病人的数目在增加，获得性免疫缺陷综合症（AIDS）是一种使免疫系统严重衰退的疾病，它使病人易受及时感染。

巨细胞病毒（CMV）的感染可以引起对耳部和胸部感染的敏感性，使耳部及胸部不能正常发育，或引起对更严重疾病如小头、肝脾肿大、黄疸或精神发育迟缓的敏感性。特别在免疫系统功能受损的病人中，CMV感染可以是致命的。

EB病毒（EBV）引起传染性单核细胞增多症，也被认为是鼻咽癌、免疫母细胞淋巴瘤、Burkitt氏淋巴瘤和毛状粘膜白斑病的诱发剂。

欧洲专利公报272065描述了1-（β-D-阿拉伯呋喃糖基）-5-炔基嘧啶核苷及其在医疗中、特别是在治疗或预防人体病毒感染和疱疹病毒感染中药学上可接受的衍生物。

现在，我们已经发现，某些酯化的5-丙炔基取代的嘧啶核苷具有优良的口服性质，它们能提供核苷在医疗、特别是治疗人体病毒感染中的特殊价值。

由此，本发明提供了式Ⅰ化合物及其药学上可接受的盐，

式Ⅰ化合物也可被命名为5-丙-1-炔基-1-（5-O-三甲基乙酰基-β-D-阿拉伯呋喃糖基）尿嘧啶。

上述式Ⅰ表示的是化合物的酮式结构，但是应该理解，该化合物也可以其相应的烯醇互变异构体形式存在，在下文中“式Ⅰ化合物”包括其酮式和烯醇式。同样在下文中，“本发明化合物”是指式Ⅰ化合物及其生理上可接受的盐。

为了测定本发明化合物的生物利用率，对本发明化合物进行了大鼠试验，测定了口服给药后的尿回收，尿回收以给药剂量的百分比表示。尿中高浓度的母体化合物1-（β-D-阿拉伯呋喃糖基）-5-丙-1-炔基尿嘧啶表明良好的肠道吸收。与母体化 合物比较，本发明化合物的吸收增加了6倍多。

本发明化合物的改进的生物利用率提供了一种方法，这种方法能使在把本发明的化合物按一定的剂量给药后其活性母体化合物在血浆中达到高浓度，上述给药剂量明显低于达到同样高的血浆浓度时所需其母体化合物的剂量。由此明显地降低了与重复高浓度给药有关的各种副作用或长期综合症。

本发明进一步提供了：

a）用于医疗（例如，治疗或预防病毒感染，特别是疱疹病毒感染）的本发明化合物。

b）一种治疗病毒感染和疱疹病毒感染的哺乳动物（包括人体）的方法，该方法包括用抗病毒有效量的本发明化合物处理所述哺乳动物。

c）本发明化合物在生产治疗或预防病毒感染如疱疹病毒感染的药物中的应用。

本发明化合物特别适用于治疗或预防带状水痘病毒的感染及导致的如上所述的临床疾病。本发明化合物在治疗水痘和带状疱疹中是特别有益的。

可以被方便地用于医疗中的式Ⅰ化合物的药学上可接受的盐包括生理上可接受的碱盐，例如，由适当的碱如碱金属（如钠）、碱土金属（如镁）及铵和NX⁺ ₄（其中X为C_1-4烷基）盐衍生的盐。含非生理上可接受的阴离子的盐作为制备生理上可接受盐的有用中间体和/或供非治疗如体外研究用而包括在本发明的范围内。

本发明化合物可经适于所治疗的临床病例的任何给药途径施用于包括人在内的哺乳动物（“接受者”）;合适的途径包括口服、直肠给药、鼻腔给药、局部给药（包括含服或舌下给药）、阴道给药及非肠道给药（包括皮下、肌内、静脉、真皮内、鞘内及硬膜外给药）。应该理解，优选的途径可能随着（例如）接受者的年龄、体重及性别和所治疗疾病的性质和严重程度不同而变化。

治疗或预防病毒感染所需的本发明化合物的量将取决于包括所治疗的疾病的严重程度和接受者的本体在内的许多因素，这将最终由主治医生自行决定。然而，通常对每一种疾病来说，合适的有效剂量将为1-100mg/kg体重/天，更好为5-30mg/kg体重/天，最佳剂量为约15mg/kg体重/天。有效剂量可分为2、3、4或更多个分剂量在一天内以适当的时间间隔给药。这些分剂量可以以单体剂型给药，例如，每单位剂型含有10-2000mg本发明化合物，优选20-500mg，最佳为100-400mg。或者，若受者的病情需要的话，可以连续注入的形式给药。

本发明化合物可以单独地或与其它治疗剂结合来治疗或预防病毒感染，所述其它治疗剂包括，例如，用于治疗疱疹病毒感染、特别是HSV和更显著地涉及HSV（1）的感染的其它抗病毒剂如9-（2-羟基-乙氧甲基）鸟嘌呤（无环鸟苷）;用于治疗反转病毒感染、特别是人体免疫缺陷病毒（HIV）感染的3′-脱氧-3′-叠氮基胸苷（zidovudine）或2′，3′-二脱氧核苷（例如2′，3′-二脱氧胞苷、2′，3′-二脱氧次黄苷、2′，3′-二脱氧腺苷或2′，3′-二脱氧鸟苷）;干扰素，特别是2-干扰素和可溶性蛋白质如CD₄;或与本发明化合物结合后能提供有益的治疗效果的任何其它药剂如镇痛药或解热药。

最好把本发明化合物制成这样的药物制剂：它包含至少一种本发明化合物（“活性成分”）和一种或多种适用的可药用载体，以及任意的其它治疗成分。载体必须是“可接受的”，即必须与制剂中的其它成分相容且对其受者无害。

本发明的制剂包括可方便地用药学领域内公知的任一方法做成单位剂型被提供的、适于通过上述任一途径给药的那些制剂。这类方法包括把活性成分与由一种或多种辅助成分构成的载体相混合的步骤。通常，通过将活性成分和液体载体或细碎的固体载体或二者均匀地紧密地混合来制备药物制剂，需要时，可使产品成形。

适于口服给药的本发明的制剂可被做成独立的单位，如含有预定量活性成分的胶囊、扁囊剂或片剂;粉剂或粒剂;水性液体或非水性液体的溶液或悬浮液;可食性泡沫状物;或O/W型或W/O型乳剂。活性成分也可做成大丸剂或糊剂，或装在脂质体内。

片剂可以通过任意地与一种或多种辅助成分压制或模制而制成。压制片剂可将松散形式的活性成分如粉末或颗粒在合适的机器上压缩来制备，所述活性成分可任意地与粘合剂（如吡咯烷酮、明胶、羟丙甲基纤维素）、润滑剂、惰性稀释剂、崩解剂（如淀粉乙醇酸钠、交联的吡咯烷酮、交联的羧甲基纤维素钠）、表面活性剂或不散剂相结合。模制片剂的制备是通过在合适的机器上把用惰性液体稀 释剂润湿的粉状活性成分的混合物模塑来进行。药片可以随意地进行包衣或划痕，也可以用（例如）不同比例的羟丙甲基纤维素配制以提供所需的释放分布，从而使其中的活性成分缓慢地或有控制地释放，或加到液体中时是可溶的或泡腾的。

胶囊的制备可以把与任意一种或多种添加剂混合的松散的或压制的粉末填入适当的填充器中进行。合适添加剂的实例包括在片剂中所列举的粘合剂（如吡咯烷酮）、明胶、润滑剂，惰性稀释剂和崩解剂。胶囊也可以配制成含有小粒颗或独立的亚单位，以使活性成分缓慢地。或有控制地释放。这可以通过药物、助挤压剂（如微量型纤维素）和稀释剂如乳糖的湿混合物挤压或球化来完成。如此制备的球状体可以用半透膜（如乙基纤维素、Eudragit    WE    30D）包裹以产生缓慢释放的效果。

理想的可食性泡沫制剂含有：50-70%可食油，尤其是植物油，包括玉米油、花生油、向日葵油、洋橄榄油和大豆油;2-10%的一种或多种表面活性剂，尤其是卵磷脂、多元醇，多羟基聚合物酯（包括甘油脂肪酸酯、聚甘油脂肪酸酯如十甘油四油酸酯、或脱水山梨醇、脂肪酸酯如脱水山梨醇单硬脂酸酯）;1-4%适于摄食的抛射剂，主要是压缩气体抛射剂（特别是氮气、一氧化氮或二氧化碳）或气态烃（特别是丙烷、丁烷或异丁烷）;0.5-30%的一种或多种粒度在10-50μm（直径）范围内的粘度改良剂，特别是粉状糖或胶态二氧化硅;以及0.5-1%的任意的一种或多种合适的无毒着色剂、调味剂或增甜剂。在这类制剂中活性成分的浓度最好为10-46%，30%更好。上述可食性泡沫制剂可以按常规方式制备，例如将可食油、表面活性剂和任何其它可溶性成分混合，加入粘度改良剂并碾磨混合物以形成均匀的分散体或悬浮体。把活性成分掺入碾磨后的混合物中，使之均匀分散。最后，将所述混合物计量后装入合适的调剂容器中，再把计量的抛射剂掺入混合物中。

对于眼部或其它外部组织如口腔和皮肤感染，最好把药剂以含有活性成分的软膏或乳油使用，活性成分的含量可为，例如，0.075-20%（W/W），较好的是为0.2-15%（W/W），最好为0.5-10%（W/W）。若配制软膏，可把活性成分与石蜡簇的或与水混溶的软膏基一起使用，或者，把活性成分与O/W型乳膏基或W/O型乳膏基一起制成乳膏。

如果需要，乳膏基的水相可以包括，例如，至少40-45%（W/W）的多元醇，即含有两个或多个羟基的醇如丙二醇、丁-1，3-二醇、甘露醇、脱水山梨醇、甘油和聚乙二醇及其混合物。局部制剂可以包括增强活性成分通过皮肤或其它受伤区域吸收或渗透的化合物。这类皮肤渗透促进剂的实施包括二甲亚砜和其相关的类似物。

本发明乳油制剂的油相可以仅包含一种乳化剂，但是需要时可包含至少一种乳化剂和脂肪或油或二者的混合物。最好，包括一种亲水性乳化剂和一种起稳定剂作用的亲脂性乳化物。同时包括油和脂也是优选的。同时，含或不含稳定剂的乳化剂组成了所谓的乳化蜡，该乳化蜡和油和/或脂肪一起组成了所谓的形成乳油制剂油相的乳化软膏基。

适用于本发明药剂的乳化剂和乳油稳定剂包括Tween    60、Span    80、乙酰十八烷醇、十四烷醇、甘油单硬脂酸酯及硫酸月桂酯钠。

用于药剂的合适的油或脂肪的选择取决于所需的美容性质，因为活性化合物在可能用于药物乳剂的大多数油中溶解度很低。乳油最好是具有合适稠度的、非油脂性的、不污染的且可洗掉的产品，以防从管中或其它容器中漏出。可以使用直链或支链的、单或二基本烷基酯，诸如，二异己二酸酯、硬脂酸异十六烷基酯、椰子脂酸丙二醇二酯、十四烷酸异丙酯、油酸癸酯、棕榈酸异丙酯、硬脂酸丁酯、棕榈酸2-乙基己酯或称为Crodamol    CAP的支链酯混合物，后三种酯是优选酯。根据所要求的性质，可把它们单独使用或结合起来使用。或者，可以使用高熔点脂如白色软石蜡和/或液体石蜡或其它矿物油。

适于眼部局部给药的药剂还包括滴眼剂，其中的活性成分溶于或悬浮于合适的载体特别是水性溶剂中。活性成分在这类制剂中的浓度优选为0.5-20%，为0.5-10%更好，为约1.5%（W/W）最好。

适于口内局部给药的药剂包括糖锭，它包含活性成分和调味物质，通常为蔗糖和阿拉伯胶或西黄蓍胶;软锭剂，它包含活性成分和惰性物质和明胶和甘油、或蔗糖和阿拉伯胶;以及包含活性成分和合适的液体载体的漱口水。

供直肠给药的制剂可以做成含合适的、包含例 如可可脂或高级脂肪醇（如硬石蜡，欧洲药典）或甘油三酸酯和饱和脂肪酸（如Witepsol）的基的栓剂。

适用于鼻腔给药的制剂（其中的载体为固体）包括粒径为例如20-500μm的粗粉，它以用鼻吸的方式给药，即通过鼻腔从贴近鼻子的装粗末的容器中迅速吸入。作为鼻腔喷雾或滴鼻剂给药的合适制剂（其中的载体为液体）包括活性成分的水性溶液或油性溶液。

适用于阴道给药的制剂可以做成除含活性成分外还含有本领域已知的合适载体的阴道栓、塞、乳膏、胶状物、膏状物、泡沫或喷雾制剂。

适用于非肠道给药的制剂包括水性或非水性无菌注射液，它们可以含有抗氧化剂、缓冲剂、制菌剂和保持制剂与要治疗的受者的血液等渗的溶质;以及水性或非水性无菌悬浮液，它们可以包括悬浮剂和增稠剂。制剂可以配制在单剂量或多剂量容器例如密封的安瓿瓶和药瓶中，可以在仅仅需要在直接使用前加入无菌液体载体如注射用水的冷冻干燥条件下储存。临时注射液或悬浮液可从上述的无菌粉末、颗粒及片剂制备。

优选的单位剂量药剂是那些含有上述活性化合物的日剂量或分剂量或其适当分数的那些制剂。

应该理解，除了上述的具体成分外，本发明的制剂还可以包括本领域的其它常规试剂，这是从制剂的类型考虑的，例如，适于口服给药的制剂可以包括调味剂。

本发明的化合物可以通过技术上已知的制备相似化合物的任何方法（实例包括下述文献中所述的方法：英国专利1，601，020，EP公报61283和27065或Robins    M.J.和Barr，P.J.，J.Org.Chem.，（1983）48，1854-1862）以及下面实例所述的方法制备。

本发明也提供了制备本发明化合物的方法，它包括：

A.使式Ⅱ的化合物与用来在糖部分的5-位提供三甲基乙酰基的化合物反应，

B.使式Ⅲ的化合物与5-丙-1-炔基尿嘧啶反应，

式中B为嘌呤或嘧啶碱基（不是5-丙-1-炔基尿嘧啶）;以及在此之后或与此同时，可任意地把所得式Ⅰ化合物转化成它的盐，或者把所得盐转化成其它盐或式Ⅰ化合物。

按照方法A，式Ⅰ化合物可由式Ⅱ化合物制备，其制备方法描述于EP公报第272065号，例如可利用适当的酰化剂如三甲基乙酰卤（如氯化物）或三甲基乙酐对式Ⅱ化合物酰化而得到式Ⅰ化合物，在碱如吡啶或三乙胺（它们也可以作为反应溶液）存在下较为有利，温度范围在0-70℃、更好为0-30℃、而最好为0-15℃。优选的酰化剂与式Ⅱ化合物的比率为约1.2∶1（W/W）。

另外，式Ⅰ化合物可以在碱如吡啶或三乙胺（它们也可以作为反应溶剂）的存在下用三甲基乙酸的适当的酯（例如甲酯）对式Ⅱ化合物进行酯基转移反应而从式Ⅱ化合物制备。

此外，酯化反应可以（例如）在偶联剂如N，N′-二环己基碳二亚胺存在下、在催化碱如4-二甲氨基吡啶的任意存在下在溶剂（如吡啶或二甲基甲酰胺）中用上述的酰化剂进行。然后，把作为反应产物得到的酯按常规方法分离。

按照方法B，基团B最好是（在磷酸盐存在下）能够利用（例如）一种酶（如磷酸化酶）对5-丙-1-炔基尿嘧啶碱基提供酯化糖的嘌呤碱基或嘧啶碱基，pH为5.0-9.0，温度为15-90℃，优选40-60℃。

本发明的盐也可以按常规方式制备，例如，由式Ⅱ化合物与适当的碱反应形成相应的碱基盐，然后酰化。另外，盐也可由酯化的化合物与碱如氢化钠反应形成相应的钠盐而制备。本发明的其它衍生物也可用常规方法制备。

下面的实例用来说明本发明，不应认为是对本发明任何方式的限制。

实施例1

5-丙-1-炔基-1-（5-O-三甲基乙酰基-β-D-阿拉伯呋喃糖基）尿嘧啶

在0℃、干燥氮气下，于1-（β-D-阿拉伯呋喃糖基）-5-丙-1-炔基尿嘧啶（0.28g，1mmol）用EP公报第272065号所述的方法合成）在无水吡啶（5ml）中的搅拌液中用10分钟滴加三甲基乙酰氯（0.15ml，0.14g，1.2mmol）在无水二氯甲烷（5ml）中的溶液。将混合物在0℃搅拌90分钟，然后在室温下搅拌2小时。减压蒸发溶剂，并将残留的吡啶与数份乙醇（3×25ml）共蒸发，得到一油状物。在硅胶柱上层析，用8%甲醇/二氯甲烷洗脱，得到纯产物，与乙醚研制后，得到一白色固体，鉴定为标题化合物。

m.p.204-210℃。

分析计算值：C：55.74，H：6.011，N;7.65%

实验值：C：55.95，H：6.006，N：7.525%

实例2

5-丙-1-炔基-1-（5-三甲基乙酰基-β-D-阿拉伯呋喃糖基）尿嘧啶的钠盐

将氢化钠（0.05g    80%    W/V）的油性悬浮液，1.66mmol，用无水四氢呋喃洗涤数次）在无水四氢呋喃（4ml）中的悬浮液加到5-丙-1-炔基-1-（5-三甲基乙酰基-β-D-阿拉伯呋喃糖基）尿嘧啶（0.06g，1.64mmol）在无水四氢呋喃中的搅拌液中。确保水分被完全排除。1小时后蒸发溶剂，得到了0.1g所需钠盐。

实例A：眼用溶液

活性成分    0.5g

氯化钠（分析纯）    0.9g

硫柳汞    0.001g

纯化水    加至100ml

pH    调至7.5

实例B：片剂

下述制剂A、B和C是通过各种将成分与吡咯烷酮溶液做成湿颗粒，然后加入硬脂酸镁并压制制成的

制剂A

mg/片mg/片

（a）活性成分    250    250

（b）乳糖（英国药典）    210    26

（c）吡啶烷酮（英国药典）    15    9

（d）淀粉乙醇酸钠    20    12

（e）硬脂酸镁    5    3

500    300

制剂B

mg/片mg/片

（a）活性成分    250    250

（b）乳糖    150    -

（c）微晶纤维素pH101    60    26

（d）吡咯烷酮（英国药典）    15    9

（e）淀粉乙醇酸钠    20    12

（f）硬脂酸镁    5    3

500    300

制剂C

mg/片

活性成分    100

乳糖    200

淀粉    50

吡咯烷酮    5

硬脂酸镁    4

359

下述制剂和E是通过直接压制混合的各成分而制备的。制剂E中所用乳糖为直接压制型。

制剂D    mg/片

活性成分    250

预胶化淀粉NF15    150

400

制剂E

mg/片

活性成分    250

乳糖    150

微晶纤维素    100

500

制剂F（控制释放制剂）

该制剂是通过将各种成分与吡咯烷酮溶液制成湿颗粒，然后加入硬脂酸镁并压制而制备的。

mg/片

（a）活性成分    500

（b）羟丙甲基纤维素

（Methocel    K4M    Premium）    112

（c）乳糖（英国药典）    53

（d）吡咯烷酮（英国副药典）    28

（e）硬脂酸镁    7

700

经过约6-8小时，药物开始释放，12小时之后释放完全。

实例C：胶囊制剂

制剂A

将末压制的上述实例B中制剂D的各成分混合，装入由两部分组成的硬明胶胶囊中来制备胶囊制剂。按上述相似方法制备制剂B（见下）。

制剂B

mg/胶囊

（a）活性成分    250

（b）乳糖（英国药典）    143

（c）淀粉乙醇酸钠    25

（d）硬脂酸镁    2

420

制剂C

mg/胶囊

（a）活性成分    250

（b）Macrogol    400BP    350

600

将Macrogol    4000BP熔化，把活性成分分散在熔化物中，并把熔化物装入由两部分组成的硬明胶胶囊中来制备该胶囊制剂。

制剂D

mg/胶囊

活性成分    250

卵磷脂    100

花生油    100

450

将活性成分分散在卵磷脂和花生油中，并将分散体装入软的、有弹性的明胶囊中来制备本胶囊制剂。

制剂E（控制释放胶囊）

将下述（a）、（b）和（c）各成分用挤压机挤压，接着将挤压物球化并干燥，然后将干燥的小颗粒用控制释剂的膜（d）包衣，装入由两部分组成的硬明胶胶囊中，由此制备下面的控制释放胶囊制剂。

mg/胶囊

（a）活性成分    250

（b）微晶纤维素    125

（c）乳糖（英国药典）    125

（d）乙基纤维素    13

513

实例D：注射制剂

活性成分    0.200g

无菌的、无发热原的磷酸盐缓冲液（pH7.0）加至10ml

将活性成分溶于大部分磷酸盐缓冲液（35-40℃）中，然后加入剩余磷酸盐缓冲液至所需体积，并通过无菌的微孔过滤器过滤到无菌的10ml棕色玻璃药瓶（1型）中，用无菌瓶塞封口并密封。

实施例E：肌内注射剂

活性成分    0.20g

苄醇    0.10g

Glycofurol    75    1.45

注射用水    足量至    3.00ml

将活性成分溶于glycofwrol中。然后加入苄醇并使之溶解，再加水至3ml。然后将混合物通过无菌微孔过滤器过滤，密封在无菌的3ml玻璃药瓶（1型）中。

实例F：糖浆悬浮剂

活性成分    0.2500g

山梨醇溶液    1.5000g

甘油    2.0000g

可分散的纤维素    0.0750g

苯甲酸钠    0.0050g

调味剂，peach    17.42.3169    0.0125ml

纯化水    足量至    5.0000ml

将苯甲酸钠溶于一部分纯化水中，并加入山梨醇溶液。加入活性成成分，并使之分散。将增稠剂（可分散的纤维素）分散于甘油中。混合两种分散液，然后加入纯化水至所需体积。

实例H：栓剂

mg/栓

活性成分（63μm）    250

硬脂肪，

BP（Witepsol    H15-Dynamit    No    Bel）    1770

2020

＊活性成分以粉末形式使用，其中至少90%的颗粒直径为63μm或更小。

将1/5Witepsol    H15熔在汽套的最高温度为45℃的容器中。将活性成分过200μm筛，并加到熔融碱中，同时用带切头（cutting    heod）的Silverson混合，直到得到均匀的分散体。将混合物维持在45℃，于悬浮液中加入剩余的Witepsol    H15，并进行搅拌以确保均匀混合。使全部悬浮液通过250μm不锈钢筛，在不断搅拌下使之冷却到40℃。在38-40℃温度范围内，将2.02g混合物装入合适的塑料模具中。将栓剂冷却到室温。

实例H：阴道栓剂

mg/栓

活性成分63μm    250

无水右旋糖    380

土豆淀粉    363

硬脂酸镁    7

1000

将上述成分直接混合，然后将所得混合物直接压制来制备阴道栓。

实例I：局部制剂

乳油

活性成分    5.00g

甘油    2.00g

乙酰十八烷醇    6.75g

硫酸月桂酯钠    0.75g

白色软石蜡    12.50g

乳油

液体石蜡    5.00g

氯甲酚    0.10g

纯化水    加至    100.00g

将活性成分溶于纯化水和甘油的混合物中，加热至70℃。将剩余成分一起在70℃加热。将两部分合并并乳化。冷却后装入容器中。

口服生物利用率的测定：

将实例1化合物或母体化合物按50mg/kg的剂量用管饲法对Long    Evans大鼠给药。给药后收集24小时和48小时的尿液，超滤后用反相高压液相色谱法分析。实例1化合物和母体化合物的口服生物利用率表示为收集48小时后尿中排泄的1-（β-D-阿拉伯呋喃糖基）-5-丙-1-炔基尿嘧啶即母体化合物的剂量百分率。

化合物    尿回收（剂量百分率）

实例1    64.89

母体化合物    9.70

毒性：

用细胞生长抑制试验来估价细胞毒作用。将生长在96孔微量滴定盘上的Vero细胞的次生培养物暴露于药物的不同稀释液中，每天用四唑（鎓）染料（MTT）的吸收对重复培养物测定细胞成活力。96小时时抑制50%细胞成活所需的浓度记为CCID₅₀。

实例 CCID₅₀（μm）

（96小时时）

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Claims (1)

1、一种制备式Ⅰ化合物或其盐的方法，

该方法包括：

A.使式Ⅱ化合物与用来在糖部分的5-位提供三甲基乙酰基的化合物反应，

上述反应之后或与之同时可随意地把所得的式Ⅰ化合物转化成它的盐，或把所得的盐转化成不同的盐或式Ⅰ化合物。