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CN109220536A - 一种富有机硒蛹虫草的培植方法 - Google Patents

一种富有机硒蛹虫草的培植方法 Download PDF

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CN109220536A CN201811381706.1A CN201811381706A CN109220536A CN 109220536 A CN109220536 A CN 109220536A CN 201811381706 A CN201811381706 A CN 201811381706A CN 109220536 A CN109220536 A CN 109220536A
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organic selenium
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阳武雄
易思富
侯丽华
王卫
周丰
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CHANGDE YANDI BIOLOGICAL TECHNOLOGY Co Ltd
HUNAN YANDI BIOLOGICAL ENGINEERING Co Ltd
Changde Yan Di Mu Yuan Agricultural Development Co Ltd
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CHANGDE YANDI BIOLOGICAL TECHNOLOGY Co Ltd
HUNAN YANDI BIOLOGICAL ENGINEERING Co Ltd
Changde Yan Di Mu Yuan Agricultural Development Co Ltd
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Abstract

本发明公开了一种富有机硒蛹虫草的培植方法，采用蛹虫草菌种发酵的方式在菌丝体中富集有机硒，再通过在固体培养基中添加富硒农作物的方式，可以使得蛹虫草子实体在生长过程中最大化的富集有机硒。本专利方法可以避免直接采用亚硒酸钠作为原料造成安全隐患的问题，同时本发明采用双重富集有机硒的方式，所得的蛹虫草子实体中富集的有机硒含量非常高，有利于提高企业产品竞争力。

Description

一种富有机硒蛹虫草的培植方法
技术领域
本发明涉及一种富硒培植技术领域，具体为一种富有机硒蛹虫草的培植方法。
背景技术
蛹虫草因其含有丰富的虫草素、虫草酸、虫草多糖、SOD等生物活性物质，其药用价值非常显著。虫草在护肝、保肾、润肺方面具有很好的效果，同时具有抗癌、抗病毒、清除自由基的药理作用。蛹虫草中特有的虫草素，现已被NCI(美国国家癌症研究院)及美国波士顿大学用于抗白血病、癌症的三期临床。
硒是人体必备的微量元素，缺硒会导致免疫力下降，引发克山病、大骨节病、心脑血管疾病，同时缺硒也会导致精子活力不高，皮肤易衰老等症状。硒在自然界存在方式为两种：无机硒和有机硒。无机硒一般指亚硒酸钠和硒酸钠，后者是硒元素通过生物转化与氨基酸结合而成。目前公开报导硒元素只与氨基酸、多糖结合形成有机硒。硒氨酸、硒多糖不仅可以作为免疫调节剂，还可以作为抗癌、抗衰老保健品，护肤品等。
富有机硒蛹虫草是将蛹虫草作为富硒的载体，通过菌丝细胞代谢途径将硒转化结合到大分子活性物质上，形成硒氨酸、硒蛋白及硒多糖。目前公开报导的富硒蛹虫草都是在培养基中添加亚硒酸钠，而亚硒酸钠经菌丝细胞代谢后并不是百分之百的被蛹虫草子实体吸收转化成有机硒，而是形成硒氨酸(主要以硒代甲硫氨酸、硒代半胱氨酸的存在)、硒多糖、游离硒以及少量的亚硒酸钠等多种物质，而亚硒酸钠属于剧毒物质，长期食用会造成人体的毒害，因此这种直接添加亚硒酸钠的方式存在巨大的安全隐患。
发明内容
本发明的目的在于提供一种富有机硒蛹虫草的培植方法，采用植物活性硒以及酵母硒作为原料，可以避免直接采用亚硒酸钠作为原料造成安全隐患的问题，同时本发明采用双重富集有机硒的方式，所得的蛹虫草子实体中富集的有机硒含量非常高，有利于提高企业产品竞争力。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种富有机硒蛹虫草的培植方法，具体步骤如下：
(1)配置营养液：按葡萄糖2％、蛋白胨0.5％、牛肉膏0.5％、七水硫酸镁0.1％、磷酸二氢钾0.1％、维生素b10.001％、维生素b120.001％、水96.798％的比例配置发酵罐营养液；
(2)将有机硒含量为2.04×103mg/kg的富硒酵母粉添加到发酵罐营养液中，按照每10L发酵罐营养液添加1g富硒酵母粉的比例添加；
(3)将发酵罐温度设置为121℃，高温高压灭菌30分钟，然后冷却至常温；
(4)将蛹虫草液体菌种在无菌条件下按1：1000的比例接种至发酵罐中，所述蛹虫草液体菌种来源于常德炎帝生物科技有限公司的菌种库；
(5)将发酵罐温度设置为19～21℃，通气培养4～5天；
(6)将步骤(5)中发酵罐培养好的蛹虫草液体菌种涂孟加拉红平板培养基及加富PDA培养基分别检测是否有细菌、真菌的杂菌污染；
(7)配置固体培养基：取富硒农作物种子与步骤(1)中的营养液按照重量比为4：5的比例混合配置固体培养基；所述富硒农作物种子来源于常德炎帝生物科技有限公司；
(8)将固体培养基加热到102℃，常压下灭菌6小时，冷却待用；
(9)将步骤(6)检测无污染的蛹虫草液体菌种按照菌种：培养基＝2:25的比例接种至冷却好的固体培养基中，转移至暗室；
(10)设置暗室温度17～19℃，湿度70～85％，培养4～5天，待菌丝发满后转移至光照培植车间；
(11)设置光照培植车间温度19～21℃、光照强度200～500Lux、湿度65～85％，培养45～55天即可采收。
所述步骤(7)中富硒农作物种子为富硒小麦、富硒大米、富硒玉米、富硒大豆中的一种或多种。
与现有技术相比，本发明具有如下的有益效果：
(1)本发明采用蛹虫草菌种发酵的方式在菌丝体中富集有机硒，再通过在固体培养基中添加富硒农作物的方式，可以使得蛹虫草子实体在生长过程中最大化的富集有机硒。
(2)本发明采用的是植物活性硒及酵母硒作为硒源，可以解决以亚硒酸钠为原料带来的食品安全问题。
具体实施方式
下面结合具体实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1：
一种富有机硒蛹虫草的培植方法，具体步骤如下：
(1)配置营养液：按葡萄糖2000g，蛋白胨500g，牛肉膏500g，七水硫酸镁100g，磷酸二氢钾100g，维生素b11g，维生素b121g，水96.798L配置发酵罐营养液；
(2)将有机硒含量为2.04×103mg/kg的富硒酵母粉10g添加到发酵罐营养液中；
(3)将发酵罐温度设置为121℃，高温高压灭菌30分钟，然后冷却至常温；
(4)在无菌条件下接种100ml的蛹虫草液体菌种至发酵罐中，所述蛹虫草液体菌种来源于常德炎帝生物科技有限公司的菌种库；
(5)将发酵罐温度设置为19～21℃，通气培养4～5天；
(6)将步骤(5)中发酵罐培养好的蛹虫草液体菌种涂孟加拉红平板培养基及加富PDA培养基分别检测是否有细菌、真菌的杂菌污染；
(7)配置固体培养基：取富硒小麦400g与步骤(1)中的营养液500g混合配置固体培养基；所述富硒小麦来源于常德炎帝生物科技有限公司；
(8)将固体培养基加热到102℃，常压下灭菌6小时，冷却待用；
(9)将步骤(6)检测无污染的蛹虫草液体菌种按照菌种：培养基＝2:25的比例接种至冷却好的固体培养基中，转移至暗室；
(10)设置暗室温度17～19℃，湿度70～85％，培养4～5天，待菌丝发满后转移至光照培植车间；
(11)设置光照培植车间温度19～21℃、光照强度200～500Lux、湿度65～85％，培养45～55天即可采收。
实施例2：
一种富有机硒蛹虫草的培植方法，具体步骤如下：
(1)配置营养液：按葡萄糖2000g，蛋白胨500g，牛肉膏500g，七水硫酸镁100g，磷酸二氢钾100g，维生素b11g，维生素b121g，水96.798L配置发酵罐营养液；
(2)将有机硒含量为2.04×103mg/kg的富硒酵母粉10g添加到发酵罐营养液中；
(3)将发酵罐温度设置为121℃，高温高压灭菌30分钟，然后冷却至常温；
(4)在无菌条件下接种100ml的蛹虫草液体菌种至发酵罐中，所述蛹虫草液体菌种来源于常德炎帝生物科技有限公司的菌种库；
(5)将发酵罐温度设置为19～21℃，通气培养4～5天；
(6)将步骤(5)中发酵罐培养好的蛹虫草液体菌种涂孟加拉红平板培养基及加富PDA培养基分别检测是否有细菌、真菌的杂菌污染；
(7)配置固体培养基：取富硒大米400g与步骤(1)中的营养液500g混合配置固体培养基；所述富硒大米来源于常德炎帝生物科技有限公司；
(8)将固体培养基加热到102℃，常压下灭菌6小时，冷却待用；
(9)将步骤(6)检测无污染的蛹虫草液体菌种按照菌种：培养基＝2:25的比例接种至冷却好的固体培养基中，转移至暗室；
(10)设置暗室温度17～19℃，湿度70～85％，培养4～5天，待菌丝发满后转移至光照培植车间；
(11)设置光照培植车间温度19～21℃、光照强度200～500Lux、湿度65～85％，培养45～55天即可采收。
实施例3：
一种富有机硒蛹虫草的培植方法，具体步骤如下：
(1)配置营养液：按葡萄糖2000g，蛋白胨500g，牛肉膏500g，七水硫酸镁100g，磷酸二氢钾100g，维生素b11g，维生素b121g，水96.798L配置发酵罐营养液；
(2)将有机硒含量为2.04×103mg/kg的富硒酵母粉10g添加到发酵罐营养液中；
(3)将发酵罐温度设置为121℃，高温高压灭菌30分钟，然后冷却至常温；
(4)在无菌条件下接种100ml的蛹虫草液体菌种至发酵罐中，所述蛹虫草液体菌种来源于常德炎帝生物科技有限公司的菌种库；
(5)将发酵罐温度设置为19～21℃，通气培养4～5天；
(6)将步骤(5)中发酵罐培养好的蛹虫草液体菌种涂孟加拉红平板培养基及加富PDA培养基分别检测是否有细菌、真菌的杂菌污染；
(7)配置固体培养基：取富硒小麦200g、富硒玉米200g与步骤(1)中的营养液500g混合配置固体培养基；所述富硒小麦、富硒玉米来源于常德炎帝生物科技有限公司；
(8)将固体培养基加热到102℃，常压下灭菌6小时，冷却待用；
(9)将步骤(6)检测无污染的蛹虫草液体菌种按照菌种：培养基＝2:25的比例接种至冷却好的固体培养基中，转移至暗室；
(10)设置暗室温度17～19℃，湿度70～85％，培养4～5天，待菌丝发满后转移至光照培植车间；
(11)设置光照培植车间温度19～21℃、光照强度200～500Lux、湿度65～85％，培养45～55天即可采收。
下表1为本专利3个实施例与空白对照组(未加任何硒源)的硒形态分布及有机硒总含量：
表1：
注：N.D.表示未检出
根据上表1结果可知，本发明采用的培植方法获得的蛹虫草子实体中有机硒明显较空白对照组(未加任何硒源)有大幅提升，且培植出的富硒蛹虫草子实体中有机硒含量均符合湖南省最新颁布的菌类富硒标准。
此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其它实施方式。

Claims (2)

1.一种富有机硒蛹虫草的培植方法，其特征在于，具体步骤如下：
(1)配置营养液：按葡萄糖2％、蛋白胨0.5％、牛肉膏0.5％、七水硫酸镁0.1％、磷酸二氢钾0.1％、维生素b10.001％、维生素b120.001％、水96.798％的比例配置发酵罐营养液；
(2)将有机硒含量为2.04×103mg/kg的富硒酵母粉添加到发酵罐营养液中，按照每10L发酵罐营养液添加1g富硒酵母粉的比例添加；
(3)将发酵罐温度设置为121℃，高温高压灭菌30分钟，然后冷却至常温；
(4)将蛹虫草液体菌种在无菌条件下按1：1000的比例接种至发酵罐中，所述蛹虫草液体菌种来源于常德炎帝生物科技有限公司的菌种库；
(5)将发酵罐温度设置为19～21℃，通气培养4～5天；
(6)将步骤(5)中发酵罐培养好的蛹虫草液体菌种涂孟加拉红平板培养基及加富PDA培养基分别检测是否有细菌、真菌的杂菌污染；
(7)配置固体培养基：取富硒农作物种子与步骤(1)中的营养液按照重量比为4：5的比例混合配置固体培养基；所述富硒农作物种子来源于常德炎帝生物科技有限公司；
(8)将固体培养基加热到102℃，常压下灭菌6小时，冷却待用；
(9)将步骤(6)检测无污染的蛹虫草液体菌种按照菌种：培养基＝2:25的比例接种至冷却好的固体培养基中，转移至暗室；
(10)设置暗室温度17～19℃，湿度70～85％，培养4～5天，待菌丝发满后转移至光照培植车间；
(11)设置光照培植车间温度19～21℃、光照强度200～500Lux、湿度65～85％，培养45～55天即可采收。
2.根据权利要求1所述的一种富有机硒蛹虫草的培植方法，其特征在于，所述步骤(7)中富硒农作物种子为富硒小麦、富硒大米、富硒玉米、富硒大豆中的一种或多种。
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