CN107828840A - 蚕蛹活性肽、组合物及制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种蚕蛹活性肽的制备方法及蚕蛹活性肽。该制备方法包括以下步骤：A、将蚕蛹粉加入水，调节pH至8～9，浸泡18～24小时，固液分离，将上清液调节pH至4～6进行沉淀，固液分离，将固体部分加入水，于75～100℃下加热15～30min，然后进行均质，将得到的混悬液调节pH至5～10，加入酶制剂进行酶解；所述酶制剂由重量比为1～2∶1～2∶1～2的风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶组成，酶解温度为40～65℃，酶解时间为1.5～8h，得到酶解液，将酶解液灭酶处理，制成蚕蛹活性肽粉。本发明的制备方法生产工艺简单，且制得的蚕蛹活性肽纯度高，短肽含量高。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体涉及一种蚕蛹活性肽、组合物及制备方法。
背景技术
我国每年鲜蛹产量高达30万吨以上。干蚕蛹中蛋白质含量达52～65％，且氨基酸种类齐全，配比均衡，必需氨基酸含量丰富，是一种优质蛋白。另外含有人体必需脂肪酸，能够溶解胆固醇，对心血管、动脉硬化、高血压、慢性肝炎等有良好的疗效。但蚕蛹蛋白水溶性差，含有异味物质与色素，特别是经水溶胀后，异味和色泽更为严重，阻碍其在食品工业中的应用。
随着蛋白质工程技术的应用，采用酶解技术制取生物活性肽及其蛋白水解物的研究和产品开发已经成为热点。目前已有部分文献报道了酶解蚕蛹蛋白质制取多肽的实验室技术。
申请号为201611197961.1的中国专利申请公开了一种蚕蛹蛋白肽粉的制备方法，首先将蚕蛹进行脱脂操作，得到脱脂的蚕蛹蛋白液；将该脱脂的蚕蛹蛋白液用10％硫酸溶液或盐酸溶液调节pH为4.0～4.2，静置，沉淀离心分离，得到蚕蛹粗分离蛋白；将该粗分离蛋白用pH、4.0～4.2的纯净水洗涤脱盐，再次静置，离心和脱盐处理，得到脱盐的蚕蛹分离蛋白；将该脱盐的蚕蛹分离蛋白加水分散，用氢氧化钠溶液调pH为9.0～9.5，升温至50～55℃，首先加入胰蛋白酶酶解40～60min，再加入木瓜蛋白酶酶解2～3h，得到蚕蛹蛋白酶解液；然后经脱色和干燥得到蚕蛹蛋白肽粉。该方法经脱脂，调节pH为酸性，分离粗蛋白，然后经脱盐，先后用胰蛋白酶和木瓜蛋白酶进行酶解，得到蚕蛹蛋白粉。
申请号为201210062890.X的中国专利申请公开了一种蚕蛹综合利用方法，其首先脱脂提取蚕蛹油后制成蚕蛹粉，首先以碱性溶液提取，得到蚕蛹蛋白溶液，然后调节pH至4.5，静置，收集沉淀，加入pH6.0的缓冲液和双氧水，加热搅拌，煮沸，重复调节pH、静置、过滤、收集沉淀的步骤，干燥后，加入缓冲液，采用蛋白水解酶进行酶解，得到蚕蛹多肽粉。其中蛋白水解酶包括胃蛋白酶、胰酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶。
上述蚕蛹蛋白粉的制备方法需要进行繁琐的脱脂、脱盐操作，工艺复杂。上述现有技术制得的蚕蛹蛋白粉的短肽含量较低，活性低；且味道偏苦，口感不佳。再者，上述现有技术制得的蚕蛹蛋白粉纯度偏低。
发明内容
本发明第一目的在于提供一种蚕蛹活性肽的制备方法，该方法工艺简单，且制得的蚕蛹活性肽活性高，无苦味。
本发明的另一目的在于提供采用上述制备方法制得的蚕蛹活性肽，该蚕蛹活性肽多肽含量高，无苦味。
本发明的再一目的在于提供一种含有蚕蛹活性肽的组合物。
本发明的又一目的在于提供所述含有蚕蛹活性肽的组合物的制备方法。
本发明的蚕蛹活性肽的制备方法，包括如下步骤：
A、将蚕蛹粉加入水，调节pH至8～9，浸泡18～24小时，固液分离，取上清液；
B、将所述上清液调节pH至4～6进行沉淀，固液分离，取固体部分；
C、将所述固体部分加入水，于75～100℃下加热15～30min，然后进行均质，得到混悬液；
D、将所述混悬液调节pH至5～10，加入酶制剂进行酶解；所述酶制剂由风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶组成，且所述风味蛋白酶、木瓜蛋白酶与中性蛋白酶的重量比为1～2∶1～2∶1～2，酶解温度为40～65℃，酶解时间为1.5～8h，得到酶解液；
E、将所述酶解液灭酶处理，然后制成蚕蛹活性肽粉。
根据本发明的制备方法，优选地，步骤B中，采用弱酸将所述上清液调节pH至4～6；所述弱酸选自醋酸、乳酸、柠檬酸中的至少一种。
根据本发明的制备方法，优选地，步骤E中，所述灭酶处理的温度为90～125℃，时间为0.5～3h。
根据本发明的制备方法，优选地，步骤E中，将所述灭酶处理后的酶解液浓缩，均质乳化，然后喷雾干燥，得到蚕蛹活性肽粉；所述喷雾干燥在80～105℃下进行。
根据本发明的制备方法，优选地，步骤E中，将所述灭酶处理后的酶解液进行离心，离心液首先经板框压滤机过滤，再经陶瓷膜过滤，得到活性肽透过液；将所述活性肽滤液浓缩，喷雾干燥，从而得到蚕蛹活性肽粉；所述喷雾干燥在80～105℃下进行；所述板框压滤机内含有组合过滤助剂，所述组合过滤助剂由活性炭、珍珠岩和硅藻土按照重量比6～7∶1～2∶2～3组成。
本发明还提供一种蚕蛹活性肽，该蚕蛹活性肽采用上述方法制备得到。
本发明还提供一种含蚕蛹活性肽的组合物，其由蚕蛹活性肽90～98重量份、桑葚1～5重量份和酸枣仁1～5重量份制成。
本发明还提供一种所述含蚕蛹活性肽的组合物的制备方法，所述制备方法包括：(1)采用上述方法制备蚕蛹活性肽粉；(2)分别将桑葚和酸枣仁制备为桑葚粉和酸枣仁粉；(3)将所述蚕蛹活性肽粉、桑葚粉和酸枣仁粉混合均匀，得到所述组合物；或者
所述制备方法包括：(1)采用上述方法制备蚕蛹活性肽粉；(2)将桑葚和酸枣仁混合后用水作为溶剂提取，提取液浓缩，干燥，粉碎，得到药材提取物；(3)将所述蚕蛹活性肽粉和药材提取物混合均匀，得到所述组合物。
本发明还提供另一种含蚕蛹活性肽的组合物，其由蚕蛹粉90～98重量份、桑葚1～5重量份和酸枣仁1～5重量份制成。
本发明还提供一种所述含蚕蛹活性肽的组合物的制备方法，包括：
A’、将蚕蛹粉加入水，调节pH至8～9，浸泡18～24小时，固液分离，取上清液；
B’、将所述上清液调节pH至4～6进行沉淀，固液分离，取固体部分；
C’、将所述固体部分加入水，于75～100℃下加热15～30min，然后进行均质，得到混悬液；
D’、将所述混悬液调节pH至5～10，加入酶制剂进行酶解；所述酶制剂由风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶组成，且所述风味蛋白酶、木瓜蛋白酶与中性蛋白酶的重量比为1～2∶1～2∶1～2；酶解温度为40-65℃，酶解时间为1.5-8h，得到酶解液；
D1’、将所述桑葚和酸枣仁加入所述酶解液中，加热回流提取，过滤，得到混合液；
E’、将所述混合液制成含蚕蛹活性肽的组合物。
本发明的制备方法省略了脱脂和脱盐步骤，工艺简单，成本低。本发明方法制得的蚕蛹活性肽短肽含量较高，且纯度高。本发明的含蚕蛹活性肽的组合物能够提高人体免疫功能，延缓衰老，且具有补肝益肾，宁心安神之效。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明，但本发明的保护范围并不限于此。
<蚕蛹活性肽的制备方法及蚕蛹活性肽>
本发明的蚕蛹活性肽的制备方法，包括如下步骤：
A、将蚕蛹粉加入水，调节pH至8～9，浸泡18～24小时，固液分离，取上清液；
B、将所述上清液调节pH至4～6进行沉淀，固液分离，取固体部分；
C、将所述固体部分加入水，于75～100℃下加热15～30min，然后进行均质，得到混悬液；
D、将所述混悬液调节pH至5～10，加入酶制剂进行酶解；所述酶制剂由风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶组成，且所述风味蛋白酶、木瓜蛋白酶与中性蛋白酶的重量比为1～2∶1～2∶1～2；酶解温度为40～65℃，酶解时间为1.5～8h，得到酶解液；
E、将所述酶解液灭酶处理，然后制成蚕蛹活性肽粉。
根据本发明的制备方法，步骤A中，所述蚕蛹粉的粒径为2～75μm。所述蚕蛹粉可以通过将干蚕蛹进行超微粉碎，然后过筛得到，例如过200～600目筛。采用本发明的粒径的蚕蛹粉，能够在后期的酶解步骤中有效提高酶解率，充分利用蚕蛹中的蛋白成分。所述浸泡优选为在搅拌下进行浸泡，从而使蚕蛹粉中的成分充分溶出。步骤A中，加水量为蚕蛹粉重量的3～10倍，优选为3～5倍。优选地，在浸泡工序完成后，进行机械搅拌，从而使液体均匀，便于离心。
步骤A中，所述固液分离方法可以为过滤、离心等，并优选为离心分离。步骤A中，浸泡过程可以加热或在常温下进行，并优选在常温下进行。通常，碱液浸泡过程中需进行加热处理；而发明人发现，在常温下浸泡即可将蚕蛹粉中的成分充分溶出，从而避免进行加热产生的额外能耗，且操作更方便。
根据本发明的制备方法，步骤B中，采用弱酸将所述上清液调节pH至4～6。所述弱酸可以选自醋酸、乳酸、柠檬酸中的至少一种。现有的蚕蛹活性肽提取方法中，考虑到调节效率，这一步骤通常采用强酸调节pH值至酸性，所述强酸例如为盐酸、硫酸等，而较少考虑酸的性质对于产品的影响；发明人发现，强酸对于蛋白质成分破坏较大，对最终得到的蚕蛹活性肽产品活性产生不利影响。而采用弱酸调节pH，使蛋白质沉淀出来，减少了对蛋白质营养物质的破坏，且最终得到的蚕蛹活性肽产品活性更好。步骤B中，优选地，所述沉淀时间为8～12h，从而保证上清液中的蛋白质成分在上述pH下充分沉淀出来。优选地，沉淀工序完成后进行机械搅拌在搅拌下进行，从而使液体均匀，便于离心。
根据本发明的制备方法，步骤C中，采用加热方法使蛋白质变性。在所述的加热条件下即能够实现蚕蛹中的蛋白质成分完全变性，且有利于后续步骤中进行充分酶解，同时且避免了化学试剂对产品的污染。在加热变形后进行均质，进一步提高了酶解效率。
根据本发明的制备方法，步骤D中，将所述混悬液调节至pH5～10，优选为pH7～9，更优选为pH7～8。本发明中，将pH调节至上述弱碱性，更有利于本发明的酶制剂进行酶解。本发明中，酶制剂由风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶按照重量比为1～2∶1～2∶1～2组成。根据本发明优选的实施方式，风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶的重量比为1.3～1.8∶1.3～1.8∶1～1.5。根据本发明一个优选的实施方式，风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶的重量比为1.5∶1.5∶1。本发明的酶解过程一次性加入上述酶制剂，并在上述pH条件下进行酶解，能够得到更佳酶解效果。本发明的酶制剂对于蚕蛹中的蛋白质成分的酶解效率高，明显高于每种酶单用，且高于现有的蚕蛹活性肽用酶。当风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶的重量比为1.5∶1.5∶1时，酶解效率最高。根据本发明的制备方法，所述酶制剂的加入量可以为所述混悬液中固形物重量的0.1～2wt％，优选为0.3～1.5wt％，更优选为0.4～1.2wt％。本发明中，酶解温度为40～65℃，酶解时间为1.5～8h；优选地，酶解温度为45～60℃，酶解时间为2～6h。在上述酶制剂的加入量、酶解时间和温度下，蚕蛹蛋白可实现有效酶解。
根据本发明的制备方法，步骤E中，所述灭酶处理的温度为90～125℃，时间为0.5～3h。步骤E中，灭酶处理后的酶解液可以采用常规方法制成蚕蛹活性肽粉。
根据本发明的一个实施方式，将所述灭酶处理后的酶解液浓缩，均质乳化，然后喷雾干燥，得到蚕蛹活性肽粉，该蚕蛹活性肽粉为全营养蚕蛹活性肽。该全营养蚕蛹活性肽产品中，肽含量≥40wt％，其中。优选地，所述喷雾干燥操作在80～105℃进行，从而有效保持蚕蛹活性肽的活性。
根据本发明另一优选的实施方式，将所述灭酶处理后的酶解液进行离心，离心液首先经板框压滤机过滤，再经陶瓷膜过滤，得到活性肽透过液；将所述活性肽滤液浓缩，喷雾干燥，从而得到蚕蛹活性肽粉，该蚕蛹活性肽粉为精制蚕蛹活性肽粉。
本发明中，所述板框压滤机内含有组合过滤助剂，所述组合过滤助剂由活性炭、珍珠岩和硅藻土组成，且活性炭、珍珠岩和硅藻土的重量比6～7∶1～2∶2～3。根据本发明的一个优选的实施方式，所述组合过滤助剂中活性炭、珍珠岩和硅藻土的重量比7∶1.5∶2。根据本发明的另一个优选的实施方式，所述组合过滤助剂中活性炭、珍珠岩和硅藻土的重量比6.7∶1.8∶2。发明人发现，现有方法制备的蚕蛹活性肽带有异味，并具有苦味，口感差；多种过滤助剂单用均难以同时将二者脱除。本发明的过滤助剂能够有效除去蚕蛹本身带有的异味和苦味，且经过本发明的过滤助剂处理后，酶解液中油脂类成分被脱除，因而前期无需进行繁琐的脱脂操作，简化了工艺流程。本发明中，所述陶瓷膜的孔径可以为20～500nm，更优选为20～300mm。采用这样的陶瓷膜孔径，能够实现酶解液的进一步精制。
经过本发明的过滤处理后，得到的精制蚕蛹活性肽粉中肽含量≥85wt％。
通常，肽的喷雾干燥操作在120～140℃进行，一般认为这样的干燥温度对于肽的活性影响不大。然而，发明人发现，现有的喷雾干燥的温度明显影响肽的活性。而本发明中，优选地，所述喷雾干燥操作在80～105℃进行，从而有效保持蚕蛹活性肽的活性。
<含蚕蛹活性肽的组合物及其制备方法>
本发明的含蚕蛹活性肽的组合物可以由蚕蛹活性肽90～98重量份、桑葚1～5重量份和酸枣仁1～5重量份制成；或者
本发明的含蚕蛹活性肽的组合物可以由蚕蛹粉90～98重量份、桑葚1～5重量份和酸枣仁1～5重量份制成。
本发明中，蚕蛹活性肽可以采用本发明的上述制备方法制备得到的。蚕蛹活性肽溶解性和消化利用率高，无依赖性，可有效提高人体内白细胞水平，从而提高人体免疫功能，延缓人体机能衰老。桑葚具有补肝益肾，滋阴养血之效，用于治疗肝肾不足和血虚精亏所致诸多病症。酸枣仁则具有养心补肝，宁心安神之效，用于治疗虚烦不眠，惊悸多梦。本发明的蚕蛹活性肽配合少量桑葚与酸枣仁，在提高人体免疫功能，延缓人体机能衰老基础上，具有补肝益肾，宁心安神之效，尤其适合老年人服用。
本发明的含蚕蛹活性肽的组合物的制备方法，可以采用多种制备方法得到。
根据本发明的一个实施方式，所述组合物的制备方法为：(1)制备蚕蛹活性肽粉；(2)分别将桑葚和酸枣仁制备为桑葚粉和酸枣仁粉；(3)将所述蚕蛹活性肽粉、桑葚粉和酸枣仁粉混合均匀，得到本发明的组合物。所述蚕蛹活性肽粉优选采用上述的制备方法制备得到。所述桑葚粉优选为将桑葚进行超微粉碎制得。所述酸枣仁粉优选为将酸枣仁进行超微粉碎制得。其中，步骤(1’)采用上述“蚕蛹活性肽的制备方法”制得，这里不再赘述。
根据本发明的另一个实施方式，所述组合物的制备方法为：(1’)制备蚕蛹活性肽粉；(2’)将桑葚和酸枣仁用水作为溶剂提取，提取液浓缩，干燥，粉碎，得到药材提取物；(3’)将所述蚕蛹活性肽粉和药材提取物混合，得到本发明的组合物。其中，步骤(1’)采用上述“蚕蛹活性肽的制备方法”制得，这里不再赘述。
本发明的含蚕蛹活性肽的组合物还可以由蚕蛹粉90～98重量份、桑葚1～5重量份和酸枣仁1～5重量份制成。
优选地，所述含蚕蛹肽的组合物的制备方法为：
A’、将蚕蛹粉加入水，调节pH至8～9，浸泡18～24小时，固液分离，取上清液；
B’、将所述上清液调节pH至4～6进行沉淀，固液分离，取固体部分；
C’、将所述固体部分加入水，于75～100℃下加热15～30min，然后进行均质，得到混悬液；
D’、将所述混悬液调节pH至5～10，加入酶制剂进行酶解；所述酶制剂由风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶组成，且所述风味蛋白酶、木瓜蛋白酶与中性蛋白酶的重量比为1～2∶1～2∶1～2；酶解温度为40-65℃，酶解时间为1.5-8h，得到酶解液；
D1’、将所述桑葚和酸枣仁加入所述酶解液中，加热回流提取，过滤，得到混合液；
E’、将所述混合液制成含蚕蛹活性肽的组合物。
其中，步骤A’～D’的具体操作和参数分别与上述“蚕蛹活性肽的制备方法”中A～D相同，这里不再赘述。
步骤D1’中，优选地，所述桑葚和酸枣仁以粉末形式加入所述酶解液中，从而提高提取率。加热回流提取时间为1～3小时，优选为1～2小时。所述过滤可采用常规过滤方法，从而滤去药渣，得到混合液。
根据本发明一个优选的实施方式，步骤E’中，可以将步骤D1’得到的混合液进行浓缩，均质乳化，然后喷雾干燥，得到全营养的含蚕蛹活性肽的组合物。优选地，所述喷雾干燥操作在80～105℃进行，从而有效保持蚕蛹活性肽的活性。所述全营养的含蚕蛹活性肽的组合物中，肽含量≥30wt％。
根据本发明另一个优选的实施方式，步骤E’中，将所述混合液进行离心，离心液首先经板框压滤机过滤，再经陶瓷膜过滤，滤液浓缩，喷雾干燥，从而得到精制的含蚕蛹活性肽的组合物。优选地，所述喷雾干燥操作在80～105℃进行，从而有效保持蚕蛹活性肽的活性。
本发明中，所述板框压滤机内含有组合过滤助剂，所述组合过滤助剂如上文所述，这里不再赘述。本发明的过滤助剂除了除去蚕蛹本身带有的异味和苦味，除去油脂类成分，还除去了混合液中的桑葚和酸枣仁中的非溶解性成分。本发明中，所述陶瓷膜的孔径可以为20～500nm，更优选为20～300mm。采用这样的陶瓷膜孔径，能够实现混合液的进一步精制。优选地，所述喷雾干燥操作在80～105℃进行，从而有效保持蚕蛹活性肽的活性。
经过本发明的过滤处理后，得到精制的含蚕蛹活性肽的组合物，肽含量≥85wt％。
以下对本发明的实施例进行详细说明，但是本发明的保护范围不受此限制。
实施例1
全营养蚕蛹活性肽的制备方法，包括以下步骤：
A、将干蚕蛹进行超微粉碎，过400目筛，得到蚕蛹粉；将蚕蛹粉加入蚕蛹粉重量4倍量的水，混合，用氢氧化钠溶液调节至pH8，浸泡20h；机械搅拌，离心，取上清液；
B、将所述上清液用醋酸溶液调节至pH5，沉淀蛋白质，机械搅拌，离心，取固体部分；
C、将所述固体部分加入水，于90℃下加热20min，然后进行均质，得到混悬液；
D、将所述混悬液调节pH至8，加入酶制剂进行酶解，得到酶解液；该酶制剂由风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶按照重量比1.5∶1.5∶1组成；酶制剂的用量为混悬液中固形物重量的0.5wt％；酶解温度为50℃，酶解时间为2h；
E、将该酶解液进行灭酶处理，灭酶温度为90℃，时间为1h；将灭酶后的酶解液浓缩，均质乳化，在中低温喷雾干燥塔内于85℃喷雾干燥，得到全营养蚕蛹活性肽粉。
实施例2
全营养蚕蛹活性肽的制备方法，包括以下步骤：
A、将干蚕蛹进行超微粉碎，过400目筛，得到蚕蛹粉；将蚕蛹粉加入蚕蛹粉重量3.5倍量的水，混合，用氢氧化钠溶液调节至pH9，浸泡20h；机械搅拌，离心，取上清液；
B、将所述上清液用醋酸溶液调节至pH6，沉淀蛋白质，机械搅拌，离心，取固体部分；
C、将所述固体部分加入水，于90℃下加热15min，然后进行均质，得到混悬液；
D、将所述混悬液调节pH至7.5，加入酶制剂进行酶解，得到酶解液；该酶制剂由风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶按照重量比1.4∶1.6∶1.2组成；酶制剂的用量为混悬液中固形物重量的0.4wt％；酶解温度为50℃，酶解时间为2h；
E、将该酶解液进行灭酶处理，灭酶温度为95℃，时间为1h；将灭酶后的酶解液浓缩，均质乳化，在中低温喷雾干燥塔内于100℃喷雾干燥，得到全营养蚕蛹活性肽粉。
实施例3
精制蚕蛹活性肽的制备方法，包括以下步骤：
A、将干蚕蛹进行超微粉碎，过400目筛，得到蚕蛹粉；将蚕蛹粉加入蚕蛹粉重量4倍量的水，混合，用氢氧化钠溶液调节至pH8，浸泡20h；机械搅拌，离心，取上清液；
B、将所述上清液用醋酸溶液调节至pH5，沉淀蛋白质，机械搅拌，离心，取固体部分；
C、将所述固体部分加入水，于90℃下加热20min，然后进行均质，得到混悬液；
D、将所述混悬液调节pH至8，加入酶制剂进行酶解，得到酶解液；该酶制剂由风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶按照1.5∶1.5∶1组成；酶制剂的用量为混悬液中固形物重量的0.5wt％；酶解温度为50℃，酶解时间为2h；
E、将该酶解液进行灭酶处理，灭酶温度为90℃，时间为1h；将灭酶后的酶解液离心，离心液经板框压滤机过滤，板框压滤机内含有过滤助剂，过滤助剂由活性炭、珍珠岩和硅藻土按照重量比7∶1.5∶2组成；再经孔径为400nm的陶瓷膜过滤，得到活性肽透过液；将该活性肽透过液浓缩，在中低温喷雾干燥塔内于85℃喷雾干燥，得到精制蚕蛹活性肽粉。
实施例4
精制蚕蛹活性肽的制备方法，包括以下步骤：
A、将干蚕蛹进行超微粉碎，过400目筛，得到蚕蛹粉；将蚕蛹粉加入蚕蛹粉重量4倍量的水，混合，用氢氧化钠溶液调节至pH8，浸泡20h；机械搅拌，离心，取上清液；
B、将所述上清液用醋酸溶液调节至pH5，沉淀蛋白质，机械搅拌，离心，取固体部分；
C、将所述固体部分加入水，于90℃下加热20min，然后进行均质，得到混悬液；
D、将所述混悬液调节pH至8，加入酶制剂进行酶解，得到酶解液；该酶制剂由风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶按照1.6∶1.6∶1.2组成；酶制剂的用量为混悬液中固形物重量的0.7wt％；酶解温度为50℃，酶解时间为2h；
E、将该酶解液进行灭酶处理，灭酶温度为90℃，时间为1h；将灭酶后的酶解液离心，离心液经板框压滤机过滤，板框压滤机内含有过滤助剂，过滤助剂由活性炭、珍珠岩和硅藻土按照重量比6.7∶1.8∶2组成；再经孔径为400nm的陶瓷膜过滤，得到活性肽透过液；将该活性肽透过液浓缩，在中低温喷雾干燥塔内于85℃喷雾干燥，得到精制蚕蛹活性肽粉。
实施例5
分别将桑葚和酸枣仁超微粉碎制成桑葚粉和酸枣仁粉。将实施例1的蚕蛹活性肽粉92重量份、桑葚粉4重量份和酸枣仁粉4份混合均匀，得到全营养的含蚕蛹活性肽的组合物。
实施例6
将桑葚3重量份和酸枣仁3重量份混合，加入水作为溶剂加热回流提取3次，每次加水量依次为桑葚和酸枣仁总重量的8倍量、6倍量、6倍量，每次提取时间依次为1.5小时、1小时、1小时，提取液浓缩，干燥，粉碎，得到药材提取物。将实施例1的蚕蛹活性肽粉94重量份和上述药材提取物混合均匀，得到全营养的含蚕蛹活性肽的组合物。
实施例7
分别将桑葚和酸枣仁超微粉碎制成桑葚粉和酸枣仁粉。将实施例3的蚕蛹活性肽粉92重量份、桑葚粉4重量份和酸枣仁粉4份混合均匀，得到本实施例的含蚕蛹活性肽的组合物。
实施例8
A’、将干蚕蛹进行超微粉碎，过400目筛，得到蚕蛹粉94重量份；将蚕蛹粉加入蚕蛹粉重量4倍量的水，混合，用氢氧化钠溶液调节至pH 8，浸泡20h；机械搅拌，离心，取上清液；
B’、将所述上清液用醋酸溶液调节至pH5，沉淀蛋白质，机械搅拌，离心，取固体部分；
C’、将所述固体部分加入水，于90℃下加热20min，然后进行均质，得到混悬液；
D’、将所述混悬液调节pH至8，加入酶制剂进行酶解，得到酶解液；该酶制剂由风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶按照1.5∶1.5∶1组成；酶制剂的用量为混悬液中固形物重量的0.5wt％；酶解温度为50℃，酶解时间为2h；
D1’、将桑葚3重量份和酸枣仁3重量份加入所述酶解液中，加热回流提取，提取时间为2h，过滤，得到混合液；
E’、将所述混合液离心，离心液经板框压滤机过滤，板框压滤机内含有过滤助剂，过滤助剂由活性炭、珍珠岩和硅藻土按照重量比7∶1.5∶2组成；再经孔径为400nm的陶瓷膜过滤，滤液浓缩，在中低温喷雾干燥塔内于85℃喷雾干燥，得到含蚕蛹活性肽的组合物。
对比例1
除了将实施例3中步骤D的酶制剂替换为由风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶按照3∶3∶1组成，其他步骤与实施例3相同。
对比例2
除了将实施例1中步骤B的醋酸溶液替换为盐酸溶液，其他步骤与对比文件1相同。
对比例3
除了将实施例3中步骤E的过滤助剂替换为同等重量的活性炭，其他步骤与实施例3相同。
对比例4
除了将实施例3中步骤E的过滤助剂替换为同等重量的珍珠岩，其他步骤与实施例3相同。
对比例5
除了将实施例3中步骤E的过滤助剂替换为同等重量的硅藻土，其他步骤与实施例3相同。
对比例6
除了将实施例3中步骤E的喷雾干燥温度设置为135℃，其他步骤与实施例3相同。
对比例7
按照申请号为201611197961.1的中国专利申请说明书实施例1的方法制备蚕蛹活性肽粉。
对比例8
按照申请号为201210062890.X的中国专利申请说明书实施例1的方法制备蚕蛹活性肽粉。
测定实施例1～4和对比例1～2、6～8中蚕蛹活性肽中肽含量结果见表1。
肽的含量测定方法为：根据GB/T 22492大豆肽粉中肽含量的测定方法进行。
苦味评价方法为：取1g蚕蛹活性肽加入10ml温水中搅拌均匀，将稀释倍数计为苦味值，计算20人的平均苦味值，结果见表2。
腥味评价方法为：评价方法为：0-无腥味；1-略有腥味；2-腥味较弱；3-有腥味；4-腥味一般；5-腥味偏重；6-腥味较重；7-腥味很重计算20人的平均腥味值，结果见表2。
表1
表2
本发明并不限于上述实施方式，在不背离本发明的实质内容的情况下，本领域技术人员可以想到的任何变形、改进、替换均落入本发明的范围。
Claims (10)
1.一种蚕蛹活性肽的制备方法，其包括如下步骤：
A、将蚕蛹粉加入水，调节pH至8～9，浸泡18～24小时，固液分离，取上清液；
B、将所述上清液调节pH至4～6进行沉淀，固液分离，取固体部分；
C、将所述固体部分加入水，于75～100℃下加热15～30min，然后进行均质，得到混悬液；
D、将所述混悬液调节pH至5～10，加入酶制剂进行酶解；所述酶制剂由风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶组成，且所述风味蛋白酶、木瓜蛋白酶与中性蛋白酶的重量比为1～2∶1～2∶1～2，酶解温度为40～65℃，酶解时间为1.5～8h，得到酶解液；
E、将所述酶解液灭酶处理，然后制成蚕蛹活性肽粉。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤B中，采用弱酸将所述上清液调节pH至4～6；所述弱酸选自醋酸、乳酸、柠檬酸中的至少一种。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤E中，所述灭酶处理的温度为90～125℃，时间为0.5～3h。
4.根据权利要求1所述的蚕蛹活性肽的制备方法，其特征在于，步骤E中，将所述灭酶处理后的酶解液浓缩，均质乳化，然后喷雾干燥，得到蚕蛹活性肽粉；所述喷雾干燥在80～105℃下进行。
5.根据权利要求1所述的蚕蛹活性肽的制备方法，其特征在于，步骤E中，将所述灭酶处理后的酶解液进行离心，离心液首先经板框压滤机过滤，再经陶瓷膜过滤，得到活性肽透过液；将所述活性肽滤液浓缩，喷雾干燥，从而得到蚕蛹活性肽粉；所述喷雾干燥在80～105℃下进行；所述板框压滤机内含有组合过滤助剂，所述组合过滤助剂由活性炭、珍珠岩和硅藻土按照重量比6～7∶1～2∶2～3组成。
6.一种蚕蛹活性肽，其特征在于，所述蚕蛹活性肽采用根据权利要求1～5任一项所述的方法制备得到。
7.一种含蚕蛹活性肽的组合物，其特征在于，所述组合物由蚕蛹活性肽90～98重量份、桑葚1～5重量份和酸枣仁1～5重量份制成。
8.根据权利要求7所述的含蚕蛹活性肽的组合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：(1)根据权利要求1～5任一项所述的方法制备蚕蛹活性肽粉；(2)分别将桑葚和酸枣仁制备为桑葚粉和酸枣仁粉；(3)将所述蚕蛹活性肽粉、桑葚粉和酸枣仁粉混合均匀，得到所述组合物；或者
所述制备方法包括：(1)根据权利要求1～5任一项所述的方法制备蚕蛹活性肽粉；(2)将桑葚和酸枣仁混合后用水作为溶剂提取，提取液浓缩，干燥，粉碎，得到药材提取物；(3)将所述蚕蛹活性肽粉和药材提取物混合均匀，得到所述组合物。
9.一种含蚕蛹活性肽的组合物，其特征在于，所述组合物由蚕蛹粉90～98重量份、桑葚1～5重量份和酸枣仁1～5重量份制成。
10.根据权利要求9所述的含蚕蛹活性肽的组合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：
A’、将蚕蛹粉加入水，调节pH至8～9，浸泡18～24小时，固液分离，取上清液；
B’、将所述上清液调节pH至4～6进行沉淀，固液分离，取固体部分；
C’、将所述固体部分加入水，于75～100℃下加热15～30min，然后进行均质，得到混悬液；
D’、将所述混悬液调节pH至5～10，加入酶制剂进行酶解；所述酶制剂由风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶组成，且所述风味蛋白酶、木瓜蛋白酶与中性蛋白酶的重量比为1～2∶1～2∶1～2；酶解温度为40-65℃，酶解时间为1.5-8h，得到酶解液；
D1’、将所述桑葚和酸枣仁加入所述酶解液中，加热回流提取，过滤，得到混合液；
E’、将所述混合液制成含蚕蛹活性肽的组合物。
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Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110477381A (zh) * | 2019-09-03 | 2019-11-22 | 广东紫薇星健康产业有限公司 | 一种具有免疫调节保健功能的白蛋白氨基酸珍珠钙口服液配方及制备方法 |
| CN111387338A (zh) * | 2020-04-08 | 2020-07-10 | 上海辰钿实业有限公司 | 一种花椒籽活性蛋白肽的制备方法 |
| CN112335888A (zh) * | 2020-11-09 | 2021-02-09 | 四川必信科技有限公司 | 海刺参鲍鱼低聚肽粉及其制备方法 |
| CN113897687A (zh) * | 2021-10-20 | 2022-01-07 | 浙江理工大学 | 一种高附加值生丝加工方法 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1896267A (zh) * | 2006-06-23 | 2007-01-17 | 浙江大学 | 利用蚕蛹制取降血压肽的方法 |
| CN101701240A (zh) * | 2009-11-12 | 2010-05-05 | 常州康和生物技术有限公司 | 利用组合酶酶解蚕蛹蛋白制取降血压肽的方法 |
| CN101748180A (zh) * | 2010-01-18 | 2010-06-23 | 山东世纪春食品有限公司 | 功能性花生小分子混合多肽及其制备方法和应用 |
| CN104789629A (zh) * | 2015-04-30 | 2015-07-22 | 中国食品发酵工业研究院 | 一种鹰嘴豆低聚肽及其制备方法 |
| CN105233246A (zh) * | 2015-11-11 | 2016-01-13 | 安徽生物肽产业研究院有限公司 | 一种用于治疗缺血性中风的土鳖虫小肽药物 |
-
2017
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Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1896267A (zh) * | 2006-06-23 | 2007-01-17 | 浙江大学 | 利用蚕蛹制取降血压肽的方法 |
| CN101701240A (zh) * | 2009-11-12 | 2010-05-05 | 常州康和生物技术有限公司 | 利用组合酶酶解蚕蛹蛋白制取降血压肽的方法 |
| CN101748180A (zh) * | 2010-01-18 | 2010-06-23 | 山东世纪春食品有限公司 | 功能性花生小分子混合多肽及其制备方法和应用 |
| CN104789629A (zh) * | 2015-04-30 | 2015-07-22 | 中国食品发酵工业研究院 | 一种鹰嘴豆低聚肽及其制备方法 |
| CN105233246A (zh) * | 2015-11-11 | 2016-01-13 | 安徽生物肽产业研究院有限公司 | 一种用于治疗缺血性中风的土鳖虫小肽药物 |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110477381A (zh) * | 2019-09-03 | 2019-11-22 | 广东紫薇星健康产业有限公司 | 一种具有免疫调节保健功能的白蛋白氨基酸珍珠钙口服液配方及制备方法 |
| CN111387338A (zh) * | 2020-04-08 | 2020-07-10 | 上海辰钿实业有限公司 | 一种花椒籽活性蛋白肽的制备方法 |
| CN112335888A (zh) * | 2020-11-09 | 2021-02-09 | 四川必信科技有限公司 | 海刺参鲍鱼低聚肽粉及其制备方法 |
| CN113897687A (zh) * | 2021-10-20 | 2022-01-07 | 浙江理工大学 | 一种高附加值生丝加工方法 |
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