CN107812195B - (6s)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙盐的稳定药物组合物 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种稳定药物组合物，包含(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙盐结晶和/或药学上可接受的还原性物质，以及药学上可接受的辅料；其中所述还原性物质能够保护(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸及其盐不被氧化，选自维生素C及其盐、异维生素C及其盐，巯基乙醇、半胱氨酸、巯乙基磺酸、二硫苏糖醇、还原型谷胱甘肽、硫辛酸。本发明的稳定药物组合物在加工贮存时的良好稳定性，规避由于降解造成的用药风险，同时确保所述组合物中(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸的快速而可靠的释放。

Description

(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙盐的稳定药物组合物

本申请为申请日为2014.09.04，申请号为201410449805.4，发明名称为(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙盐的稳定药物组合物的中国发明专利的分案申请。

技术领域

本发明属于医药领域，具体的，本发明涉及C型(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙盐的稳定药物组合物。

背景技术

(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸是叶酸的天然活性形式，它在体内可以不经过任何代谢而直接跨越血脑屏障。更重要的是，服用(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸可以避免单纯服用叶酸造成的维生素 B12缺乏掩蔽而产生的重大风险。

众所周知，5‐甲基四氢叶酸类产品非常不稳定，极易降解，特别是对氧和水分高度敏感(A.L.Fitzhugh,Pteridines,1993,4(4),187‐191)。而制剂产品不仅需要其制备过程确保产品质量，在贮存时同样需要令人满意的稳定性。因此，从制剂角度看，将5‐甲基四氢叶酸类产品制成制剂或掺加到固体口服药物包括口服避孕药中表现了巨大的挑战。

专利US6441168报道了四种结晶5‐甲基四氢叶酸钙，大大提高了5‐甲基四氢叶酸钙的稳定性，使之能够被应用于医药或者保健食品。结晶5‐甲基四氢叶酸钙虽然稳定性大为提高，但是仍然不可避免的会被氧化。对市售制剂的调查来看，相对于5‐甲基四氢叶酸钙，其氧化杂质至少含有0.4％，甚至可达1％。

关于5‐甲基四氢叶酸的氧化降解，已经有非常多的研究(J.Agric.FoodChem.2010,58, 6190–6199，Biochem.J.(1982)206,373‐378和EFSA(2004)EFSA Journal135,1‐20。)他们的共同结论是：5‐甲基四氢叶酸的初级氧化产物是5‐甲基二氢叶酸，该物质对人体没有影响。

本发明人的另外一项研究推翻了这个结论：5‐甲基四氢叶酸的氧化产物首先是JK12A, 其结构如下：

一般说来,结构上的较大变化，将会引起生理活性的较大变化.随后的研究发现，JK12A 对T淋巴细胞增殖具有显著的抑制作用。实验结果见表X，表X中，μM是指为微摩尔浓度，OD 平均值是指光密度平均值，SD是指样本标准差，Con A是指刀豆蛋白A，CPM平均值是指³H每分脉冲数平均值。一般认为，这将引起人类免疫力的降低。

表X.

对JK12A的一项急性毒性研究发现，在2000毫克每公斤的剂量下，受试小白鼠在1分钟内均当场死亡，但解剖发现肝脏肾脏没有显著变化，可能该化合物有其他毒性靶标，且急性毒性显著。

现有技术中也报道了多种方法减缓5‐甲基四氢叶酸氧化。如CN102612358公布了一种 5‐甲基四氢叶酸盐稳定的颗粒剂，结晶5‐甲基盐用蜡包埋以增加稳定性。

CN 102813656公布了一种5‐甲基四氢叶酸盐稳定的组合物，包含一种或者多种不含巯基的氨基酸以增加稳定性。

CN101484143显示了5‐甲基四氢叶酸在片剂中的稳定性和溶出度，包括不同贮存条件下5‐甲基四氢叶酸的稳定性。在25℃60％RH(RH为相对湿度)的密闭容器中贮存6个月或12个月后，四氢叶酸分解产物的总和最多为10％，优选最多为8％，更优选最多为6％，甚至更优选最多为5％，最优选最多为4％；40℃75％相对湿度的密闭容器中贮存1、2、3个月后，四氢叶酸分解产物的总和最多为10％，优选最多为8％，更优选最多为6％，甚至更优选最多为 5％，最优选最多为4％。

上述技术虽然减缓了5‐甲基四氢叶酸的氧化进程，但还不能根本避免JK12A的危害。因此有必要形成新的发明，以提高5‐甲基四氢叶酸的稳定性，提供更为稳定、毒副作用更低、安全性更高的药物。

发明内容

在第一方面，本发明涉及包含C型(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙盐，和/或药学上可接受的还原性物质以及辅料的药物组合物。

在第二方面，本发明涉及包含本发明组合物的固体口服剂型，如片剂、胶囊剂和颗粒剂以及药囊，优选片剂，更优选薄膜衣片。

在第三方面，本发明涉及的口服避孕药通过添加还原性物质，一方面提高了(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸的稳定性，另一方面还可以降低血栓的风险。

本发明提供了一种稳定的药物组合物，其包含结晶(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙盐，和/或药学上可接受的还原性物质，以及药学上可接受的辅料；其特征在于，所述还原性物质能够保护(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸及其盐不被氧化，所述还原性物质选自维生素C及其盐、异维生素C及其盐，巯基乙醇、半胱氨酸、巯乙基磺酸、二硫苏糖醇、还原型谷胱甘肽、硫辛酸；优选维生素C，异维生素C和他们的盐，更优选维生素C和它的钠盐、钾盐、钙盐，最优选维生素C和异维生素C。

在一种实施方式中，所述药物组合物包含结晶(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙、维生素C，雌激素，孕激素；结晶(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙优选C晶型。

在一种优选的实施方式中，上述的药物组合物中所述雌激素选自：炔雌醇、美雌醇、奎雌醇、雌二醇、雌酮、雌烷、雌三醇、雌四醇和结合马雌激素；优选炔雌醇。

在一种优选的实施方式中，上述的药物组合物中所述孕激素选自：左炔诺孕酮、诺孕酯、去甲脱氢羟孕酮、地屈孕酮、屈螺酮、3‐β‐羟基去氧孕烯、3‐酮基去氧孕烯(＝依托孕烯)、17‐去乙酰基诺孕酯、19‐去甲孕酮、乙酰氧基孕烯醇酮、烯丙雌醇、amgestone、氯地孕酮、环丙孕酮、地美孕酮、去氧孕烯、地诺孕素、二氢孕酮、地美炔酮、炔孕酮、双醋炔诺醇、醋酸氟孕酮、gastrinone、孕二烯酮、孕三烯酮、羟甲基孕酮、羟孕酮、利奈孕酮(＝炔雌烯醇)、mecirogestone、甲羟孕酮、甲地孕酮、美仑孕酮、诺美孕酮、炔诺酮(＝去甲脱氢羟孕酮)、异炔诺酮、炔诺孕酮(包括d‐炔诺孕酮和dl‐炔诺孕酮)、诺孕烯酮、甲诺酮、孕酮、奎孕醇、(17α)‐17‐羟基‐11‐亚甲基‐19‐去甲孕甾‐4，15‐二烯‐20‐炔‐3‐酮、替勃龙、曲美孕酮、醋苯阿尔孕酮、奈甾酮、普美孕酮、17‐羟孕酮酯、19‐去甲‐17羟孕酮、 17α‐乙炔睾酮、17α‐乙炔基‐19‐去甲睾酮、d‐17β‐乙酰氧基‐13β‐乙基‐17α‐乙炔基甾‐4‐烯‐3‐酮肟或WO 00/66570中公开的化合物特别是tanaproget；优选屈螺酮。

在一种优选的实施方式中，上述的药物组合物中，包含含量为0.1至10mg的C型(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙；优选包含含量为0.4至1mg的C型(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙；更优选包含含量为451μg的C型(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙。

在一种优选的实施方式中，上述的药物组合物中，包含含量为0.1至200mg的还原性物质维生素C；优选含量为1至100mg的还原性物质维生素C；更优选含量为5至50mg 的还原性物质维生素C。

在一种优选的实施方式中，上述的药物组合物中，包含含量为10至50μg的炔雌醇；优选含量为10至30μg的炔雌醇；更优选含量为20μg的炔雌醇或含量为30μg的炔雌醇。

在一种优选的实施方式中，上述的药物组合物中，包含含量为0.5至5mg的屈螺酮；优选含量为2至4mg的屈螺酮；更优选含量为3mg的屈螺酮。

在一种优选的实施方式中，上述的药物组合物中，包含：

‐含量为451μg的C型(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙盐，

‐药学可接受的辅料。

在一种优选的实施方式中，上述的药物组合物中，包含：

‐含量为451μg的C型(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙盐，

‐‐含量为5mg的维生素C，

‐药学可接受的辅料。

在一种优选的实施方式中，上述的药物组合物中，包含：

‐含量为451μg的C型(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙盐，

‐含量为50mg的维生素C，

‐药学可接受的辅料。

在一种优选的实施方式中，上述的药物组合物中，包含：

‐含量为451μg的C型(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙盐，

‐含量为3mg的屈螺酮，

‐含量为20ug/30ug的炔雌醇，

‐含量为5mg的维生素C，

‐药学可接受的辅料。

在一种优选的实施方式中，上述的药物组合物中，包含：

‐含量为451μg的C型(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙盐，

‐含量为3mg的屈螺酮，

‐含量为20ug/30ug的炔雌醇，

‐含量为50mg的维生素C，

‐药学可接受的辅料。

另外一方面，上述本发明提供的稳定药物组合物为固体口服剂型，其中包含片剂、胶囊剂、颗粒剂或药囊等，以及固体复合包装形式，并包含以上所述的药物组合物。

在一种优选的实施方式中，上述的药物组合物中，所述辅料选自下组崩解剂、稀释剂(填充剂)、粘合剂、润滑剂、着色剂、矫味剂、包衣材料或其组合。

在一种优选的实施方式中，上述的药物组合物中，所述崩解剂选自下组：改性淀粉、羧甲基淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠、羧甲基纤维素钙、交联聚维酮或其组合。

在一种优选的实施方式中，上述的药物组合物中，所述稀释剂选自下组：淀粉、乳糖、甘露醇、糖粉、微晶纤维素、预胶化淀粉、磷酸氢钙或其组合；和/或所述粘合剂选自下组：淀粉浆、羟丙甲纤维素(HPMC)、羟丙纤维素(HPC)、乙基纤维素、甲基纤维素、阿拉伯胶、明胶、聚乙烯酸酯、聚乙二醇或其组合；和/或所述润滑剂选自下组：硬脂酸锌、硬脂酸、硬脂酸镁、滑石粉、微粉硅胶、氢化植物油或其组合；和/或所述包衣材料选自下组：欧巴代、捷彩、新菲尔等薄膜预混剂，或由增塑剂、成膜剂、固体添加剂和助剂四部分按照一定的配方、比例和生产工艺预先混合均匀的包衣物料。其增塑剂选自下组：邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸二甲酯(DMP)和邻苯二甲酸二丁酯(DBP)邻苯二甲酸二(2‐乙基己基) 酯(DEHP)或其组合；成膜剂选自下组：聚丙烯酸树脂、羟丙基纤维素、乙基纤维素、甲基纤维素、阿拉伯胶、明胶、聚乙烯酸酯、聚维酮、聚乙二醇或其组合；助剂选自二氧化钛、滑石粉、二氧化硅或其组合。

再一方面，本发明提供了用于制备上述药物组合物的方法系原辅料混合后直接压片法和/或(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸和维生素C在颗粒外加入并混合后压片法。

本发明人的研究发现，通过添加某些药学上可接受的还原性物质，例如维生素C、异维生素C，JK12A的C‐N环被打开，成功地将JK12A转化为5‐甲基四氢叶酸从而避免危害。其机理如下：

本发明人发现通过在组合物中添加维生素C、异维生素C可以有效的控制JK12A的含量，使之处于安全剂量，同时提高了药物组合的稳定性，防止活性成分的降解。维生素C或异维生素C可以将氧化产物JK12A还原为(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸。在常温储存条件下，添加有还原性物质的(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸或其盐的组合物与无还原性物质的(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸或其盐的组合物相比，无还原性物质的(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸或其盐的组合物的 JK12A的含量明显增加，而添加有还原性物质的(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸或其盐的组合物中 JK12A不足0.1％，甚至没有。无还原性物质的(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸或其盐的组合物的JK12A 的含量高于0.27％，而添加还原性物质的(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸或其盐的组合物的JK12A的含量不足0.03％。

事实上，长期服用避孕药的人群，体内维生素C的浓度是明显降低的。而偏低的维生素C水平将发生癌细胞增殖加快，免疫力降低，皮肤色素沉积等很多问题(首都医药，2001， 8(4)，p72)。服用屈螺酮避孕药相比上一代左炔诺孕酮，静脉血栓发生率提高近三倍(BMJ， 2011，340:d2151.)。另外有文献报道(American Heart Journal,1974,88(3),387‐388；DIABETES CARE,VOLUME 26,NUMBER 10,OCTOBER 2003)在体内维持一定量的维生素C可以对血管壁组织修复，使血管壁平滑有弹性，增大流速，不易得血栓。同时维生素C能够降低血液粘度，大大降低静脉血栓的发生率，很好的抵消屈螺酮的主要副作用。本发明人通过在处方中添加适量的维生素C，一方面提高了(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸的稳定性，另一方面还可降低静脉血栓的风险。

基于(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸与维生素C均易受湿、热、氧化的影响，因此在片剂工艺路线选择时需要尽量避免湿、热、氧的接触，本发明人通过实践经验选择了低水分且适宜于直接压片的辅料进行直接压片，并进行包衣以隔绝外界水分与氧的影响，从而提高(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸的稳定性。

专利WO2013107236A1公开的C型(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙盐与US6441168报道的I晶型相比具有更优异的化学稳定性。该晶型颗粒小，无需微粉化处理，降低了被氧化的几率。由于粒度小且分布均匀，因此其体外溶出速度提高数十倍，非常有利于人体吸收。本发明采用该C型(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙盐进行片剂制备并考察相应的稳定性与溶出度。

因此，在本发明的优选实施方案中，所述组合物包含C型(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙盐和 /或维生素C以及一种或多种药学可接受的辅料；所述避孕药组合物包含C型(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙盐、维生素C，雌激素，孕激素以及一种或多种药学可接受的辅料。所述雌激素选自：炔雌醇、美雌醇、奎雌醇、雌二醇、雌酮、雌烷、雌三醇、雌四醇和结合马雌激素；优选炔雌醇。所述孕激素选自：左炔诺孕酮、诺孕酯、去甲脱氢羟孕酮、地屈孕酮、屈螺酮、3‐β‐羟基去氧孕烯、3‐酮基去氧孕烯(＝依托孕烯)、17‐去乙酰基诺孕酯、19‐去甲孕酮、乙酰氧基孕烯醇酮、烯丙雌醇、amgestone、氯地孕酮、环丙孕酮、地美孕酮、去氧孕烯、地诺孕素、二氢孕酮、地美炔酮、炔孕酮、双醋炔诺醇、醋酸氟孕酮、gastrinone、孕二烯酮、孕三烯酮、羟甲基孕酮、羟孕酮、利奈孕酮(＝炔雌烯醇)、mecirogestone、甲羟孕酮、甲地孕酮、美仑孕酮、诺美孕酮、炔诺酮(＝去甲脱氢羟孕酮)、异炔诺酮、炔诺孕酮(包括d‐炔诺孕酮和dl‐炔诺孕酮)、诺孕烯酮、甲诺酮、孕酮、奎孕醇、(17α)‐17‐羟基‐11‐亚甲基‐19‐去甲孕甾‐4，15‐二烯‐20‐炔‐3‐酮、替勃龙、曲美孕酮、醋苯阿尔孕酮、奈甾酮、普美孕酮、17‐羟孕酮酯、19‐去甲‐17羟孕酮、17α‐乙炔睾酮、17α‐乙炔基‐19‐去甲睾酮、d‐17β‐乙酰氧基‐13β‐乙基‐17α‐乙炔基甾‐4‐烯‐3‐酮肟或WO 00/66570中公开的化合物特别是tanaproget；优选屈螺酮。

在本发明的更优选实施方案中，所述避孕药组合物包含C型(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙盐和维生素C、屈螺酮和炔雌醇以及一种或多种药学可接受的辅料。

以上所述药学可接受的辅料也可以称为载体或赋形剂。

本发明的固体药物组合物包含一种或多种药学上可接受的辅料。这些辅料可以是下述组分。例如：

‐惰性稀释剂或填充剂，

例如蔗糖、山梨糖醇、乳糖、甘露醇、微晶纤维素、淀粉、氯化钠、磷酸钠、碳酸钙、磷酸钙、硫酸钙、磷酸氢钙、预胶化淀粉或它们的组合。

‐粘合剂，

例如蔗糖、葡萄糖、山梨糖醇、阿拉伯胶、藻酸、藻酸钠、明胶、淀粉、预胶化淀粉、硅酸镁铝、羧甲基纤维素钠(CMC钠)、甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、羟丙基纤维素(HPC)、聚乙酸乙烯酯或聚乙二醇。

‐润滑剂，包括助流剂和抗结合剂，

例如硬脂酸锌、硬脂酸、硬脂酸镁、滑石粉、微粉硅胶、氢化植物油或其组合。

‐崩解剂，

例如改性淀粉、羧甲基淀粉钠、交联聚维酮、低取代羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠、羧甲基纤维素钙、交联聚维酮、微晶纤维素或其组合等。

‐表面活性剂和润湿剂，

例如天然存在的磷脂，如卵磷脂或大豆卵磷脂；环氧乙烷与例如脂肪酸、长链脂肪醇、或源自脂肪酸与己糖醇或己糖醇酐的偏酯的缩合产物，例如聚氧乙烯硬脂酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇酐单油酸酯等；或长链脂肪族磷酸酯的盐，如十二烷基硫酸钠。

‐薄膜包衣预混剂，

薄膜包衣预混剂一般由增塑剂、成膜剂、固体添加剂和助剂四部分组成，生产时将这几种物料按照一定的配方、比例和生产工艺预先混合均匀，形成一种完整的生产物料，其增塑剂选自下组：邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸二甲酯(DMP)和邻苯二甲酸二丁酯(DBP)邻苯二甲酸二(2‐乙基己基)酯(DEHP)或其组合；成膜剂选自下组：聚丙烯酸树脂、羟丙基纤维素、乙基纤维素、甲基纤维素、阿拉伯胶、明胶、聚乙烯酸酯、聚维酮、聚乙二醇或其组合；助剂选自二氧化钛、滑石粉、二氧化硅或其组合。常用来包衣的有欧巴代、捷彩、新菲尔等。本发明优选欧巴代。

可以掺加到本发明固体药物组合物中的其它药学上可接受的赋形剂的例子包括着色剂、调味剂、增塑剂、保湿剂、缓冲剂等。

在本发明高度优选的实施方案中，所述固体口服剂型是单位剂型，其中所述单位剂型是片剂、胶囊、颗粒剂或药囊的形式，优选片剂形式，更优选包衣片，最优选薄膜包衣片。所述剂型通常包含相当于0.1至10mg的C型5‐甲基‐(6S)‐四氢叶酸钙盐，优选包含相当于 0.4至1mg的C型5‐甲基‐(6S)‐四氢叶酸钙盐；更优选包含相当于451μg的C型5‐甲基‐(6S)‐四氢叶酸钙盐。包含相当于0.1至200mg的维生素C，优选相当于1mg至100mg的维生素C；更优选相当于5mg至50mg的维生素C。包含相当于0.5至5mg治疗等效量屈螺酮的量的孕激素，优选相当于2至4mg的屈螺酮；更优选相当于3mg的屈螺酮。包含相当于 10至50μg治疗等效量炔雌醇的量的雌激素；优选相当于10至30μg的炔雌醇；更优选相当于20μg的炔雌醇或30μg的炔雌醇。

因此，在本发明特别令人感兴趣的实施方案中，所述剂型包含5mg或50mg维生素C，该组方有效提高了(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸的稳定性，降低了(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙盐降解为 JK12A的风险，使得(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸或其盐的组合物中JK12A的含量不足0.05％，贮存期24个月JK12A不足0.2％；同时有效减少了(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸的总降解产物。

本发明一方面在包含C型(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙盐的组合物中通过添加还原性物质，保护了(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙盐不被氧化，从而彻底解决了(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙盐的稳定性问题。另一方面明确了组合物的配方与制备方法，采用直接压片或者(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸和维生素C在颗粒外加入并混合后压片法进行压片，并包衣。

本发明对组合物中(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸的稳定性与体外溶出与上市产品进行了比较。大量实验证明在处方中添加少量的维生素C即可阻断(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸的降解、提高稳定性；添加的维生素C除提高(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸的稳定性外还可有效降低引起血栓的风险。因此，由本发明提供的包含活性物(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸的稳定组合物在加工贮存时的良好稳定性，规避由于降解造成的用药风险，同时确保所述组合物中(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸的快速而可靠的释放。

附图说明

图1.实施例6和实施例7及Beyaz炔雌醇的溶出曲线

图2.实施例6和实施例7及Beyaz屈螺酮的溶出曲线

图3.实施例1‐7及Beyaz(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙溶出曲线

图4.图3的局部放大图

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步详细、完整地说明，但决非限制本发明，本发明也并非仅局限于实施例的内容。本领域的普通技术人员应当理解：可以对发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围内。

实施例1‐直接压片：

处方组成如下：80mg/片

制备方法如下：

1.将(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙、乳糖T80、微晶纤维素PH112、羟丙甲纤维素、交联羧甲基纤维素钠分别过60目筛；将硬脂酸镁过80目筛；

2.将上述除硬脂酸镁外的原辅料按倍比稀释法进行混合，使得混合均匀；

3.加入处方量硬脂酸镁至上述2所得混合物料中使混合均匀，并避免过度润滑。

4.按理论片重80mg/片进行压片，控制片重差异不超过10％，崩解时限小于15分钟，脆碎度小于1.0％。

5.15％欧巴代溶液进行薄膜包衣，片床温度不高于50℃，并使得包衣增重约2‐5％。

实施例2–直接压片：

处方组成如下：80mg/片

制备方法：

1.将(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙、维生素C、预胶化淀粉PC‐10、微晶纤维素PH112、羧甲淀粉钠分别过60目筛；将硬脂酸镁过80目筛；

2.将上述除硬脂酸镁外的原辅料按倍比稀释法进行混合，使得混合均匀；

3.加入处方量硬脂酸镁至上述2所得混合物料中使混合均匀，并避免过度润滑。

4.按理论片重80mg/片进行压片，控制片重差异不超过10％，崩解时限小于15分钟，脆碎度小于1.0％。

5.15％欧巴代溶液进行薄膜包衣，片床温度不超过50℃，使得包衣增重约2‐5％。

实施例3‐直接压片法

处方组成如下：80mg/片

制备方法：参照实施例1和实施例2。

实施例4‐直接压片法

处方组成如下：80mg/片

制备方法：参照实施例1和实施例2。

实施例5‐直接压片法

处方组成如下：80mg/片

制备方法：参照实施例1和实施例2。

实施例6‐湿法制粒后压片

处方组成如下：80mg/片

制备方法：

1.对C型(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙和维生素C过60目筛，将预胶化淀粉、羧甲淀粉钠、微晶纤维素过60目筛，将硬脂酸镁过80目筛；

2.将炔雌醇和屈螺酮溶解于适宜的有机溶剂(如乙醇、甲醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、异丙醇、丙酮或其混合溶剂)，优选95％以上乙醇；超声合成均一混悬液。

3.将羟丙甲纤维素溶解于上述炔雌醇、屈螺酮的有机溶剂中，使成均一溶液；

4.将预胶化淀粉、羧甲淀粉钠、微晶纤维素混合均匀；将上述步骤3的均一溶液至湿法制粒机中，快速搅拌使制成颗粒。40‐80℃干燥，使得水分不超过3％；

5.将干颗粒进行研磨，过30目筛整粒，使得颗粒分布均匀，得细颗粒。

6.将(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙和维生素C与步骤5所述细颗粒混合均匀；

7.将硬脂酸镁加入到步骤6所述混合物料中进行混合，并混合均匀。

8.按理论片重80mg/片进行压片，控制片重差异不超过10％，崩解时限小于15分钟，脆碎度小于1％。

9.采用15％欧巴代溶液进行薄膜包衣，使得包衣增重约2‐5％。

实施例7‐湿法制粒压片

处方组成如下：80mg/片

制备方法参照实施例6。

为考察(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙在含不同量维生素C处方中的稳定性，对实施例1‐实施例7 参照CN101484143分别在25℃/60％RH和40℃/75％RH、在开放和密闭容器中考察并检测稳定性。其中，缩写RH是指相对湿度(Relative Humidity)。表1、表2表3和分别列举了实施例1‐实施例7中(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙在各种条件下贮存时的稳定性，并与CN101484143中无维生素C处方进行了对比。

表1：总降解产物百分比

表2：降解产物JK12A百分比

NA：未检出

Beyaz是由拜耳公司研制的一种口服避孕药，其活性成份包括3mg屈螺酮/0.02mg炔雌醇 /0.451mg(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙。

表3：(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙的含量(％)

由表1表3可以看到，即使将片剂暴露于空气的条件下，(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙仍然在25℃获得了令人满意的稳定性。此外，在40℃(密闭容器)同样获得了令人满意的稳定性，而当片剂贮存于40℃并同时暴露于空气时，(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙则呈现明显降解。由表3结果显示长期试验25℃/60％RH(密闭)和加速试验40℃/75％RH(密闭)6个月(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙的含量无显著变化。加速试验40℃/75％RH(密闭)6个月较原研厂专利 CN101484143所述产品Beyaz稳定性显著提高。

由表1和表2可以看到，添加维生素C的片剂总降解产物和降解产物JK12A低于未添加维生素C的片剂，添加维生素C后片剂的稳定性明显提高，并贮存6个月总降解产物低于2％，降解产物JK12A远小于0.1％，较上市产品Beyaz更低。

由实施例1‐实施例7表明:本发明采用C型(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙并在配方中添加还原性物质维生素C，有效提高了(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙贮存期的稳定性，从而可以确保产品的安全性和疗效。

综上，采用本发明配方和工艺制备的片剂获得了较原研厂专利CN101484143所述产品 Beyaz更好的稳定性。

溶出度的考察：

(1).对片剂中屈螺酮和炔雌醇溶出曲线的考察：

取参比片(Beyaz)及本品(处方6和处方7)，照溶出度测定法(中国药典2010年版二部附录X C第二法)，以37℃的水(900ml)为溶出介质；转速为50rpm，依法操作，分别于 10、20、30、45分钟取溶出液10ml，并即时补充37℃溶出介质10ml。滤过，取续滤液作为供试品溶液，按照下列色谱条件测定，另取对照品溶液，同法测定。以峰面积计算出每片在各时间点的累计溶出量。

HPLC色谱条件：

色谱柱：Agilent SB‐C18(150mm*4.6mm,5μm)

流动相：乙腈：水＝55：45

检测波长：200nm(炔雌醇)、270nm(屈螺酮)(DAD检测器)

流速：1.0ml/min

柱温：22℃

进样量：100μl。

由实施例6和实施例7的溶出曲线可获知本发明所述片剂为速溶制剂，30分钟内炔雌醇和屈螺酮的溶出均大于85％(Q＝80％)，并与上市产品Beyaz中的炔雌醇和屈螺酮体外溶出进行了比较，本发明溶出与Beyaz相当，溶出相似。实施例6和实施例7及原研产品Beyaz的炔雌醇和屈螺酮体外溶出数据详见图1和图2。

(2)对片剂中(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙溶出曲线的考察：

取参比片(Beyaz)、本品(处方1‐‐处方7)，照溶出度测定法(中国药典2010年版二部附录X C第二法)，以37℃的0.03％抗坏血酸[用0.05mol/L磷酸盐缓冲液调节pH至3.5](900ml) 为溶出介质，转速为50rpm，分别于5、10、20分钟取溶出液10ml，并即时补充37℃溶出介质10ml。滤过，取续滤液作为供试品溶液，按照下列色谱条件测定，另取对照品溶液，同法测定。以峰面积计算出每片在各时间点的累计溶出量。

HPLC色谱条件：

色谱柱：Agilent SB‐C18(150mm*4.6mm,5μm)

流动相：0.05mol/L磷酸二氢钠溶液(用10％氢氧化钠溶液调节pH至6.5)：甲醇＝92:8

检测波长：290nm

流速：1.0ml/min

柱温：40℃

进样量：50μl

由实施例1至实施例7的溶出曲线可获知本发明所述片剂为速溶制剂，20分钟内(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙溶出均大于85％(Q＝80％)，并实施例1至实施例7 20分钟溶出大于90％，甚至95％。并与上市产品Beyaz中的(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙的体外溶出进行了比较，本发明的20分钟溶出与Beyaz相当。实施例1至实施例7及原研产品Beyaz的(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙体外溶出数据详见图3。

在实施例1至实施例7中，本发明提供的稳定药物组合物的配方和制备方法，该组合物能够提供(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸在贮存时的良好稳定性，25℃，60％RH贮存12个月含量不低于98％，贮存24个月含量不低于95％；以及(6S)‐5‐甲基‐四氢叶酸钙在37℃0.03％抗坏血酸水溶液(用0.05M磷酸盐缓冲液调节至pH 3.5)作为溶出介质，搅拌转速为50转，浆法，20分钟不低于85％的累积溶出量。

Claims (19)

1.一种稳定的药物组合物，其特征在于包含(6S)-5-甲基-四氢叶酸钙盐和药学上可接受的还原性物质，所述还原性物质选自维生素C 或其盐；所述组合物还包含雌激素和/或孕激素；所述 (6S)-5-甲基-四氢叶酸钙盐为0.4 至1mg；所述还原性物质为5 至50mg。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于所述还原性物质选自维生素C 或其钠盐、钾盐或钙盐。

3.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于所述还原性物质选自维生素C 或异维生素C。

4.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于所述(6S)-5-甲基-四氢叶酸钙盐为C晶型。

5.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于所述(6S)-5-甲基-四氢叶酸钙盐为451μg。

6.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于所述雌激素选自炔雌醇、美雌醇、奎雌醇、雌二醇、雌酮、雌烷、雌三醇、雌四醇或结合马雌激素。

7.根据权利要求6所述的药物组合物，其特征在于所述雌激素为炔雌醇。

8.根据权利要求6所述的药物组合物，其特征在于所述雌激素含量为10 至50μg 。

9.根据权利要求7所述的药物组合物，其特征在于所述雌激素含量为10 至30μg。

10.根据权利要求7所述的药物组合物，其特征在于所述雌激素含量为20μg至30μg。

11.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于所述孕激素选自：左炔诺孕酮、诺孕酯、去甲脱氢羟孕酮、地屈孕酮、屈螺酮、3-β-羟基去氧孕烯、3- 酮基去氧孕烯、17-去乙酰基诺孕酯、19-去甲孕酮、乙酰氧基孕烯醇酮、烯丙雌醇、amgestone、氯地孕酮、环丙孕酮、地美孕酮、去氧孕烯、地诺孕素、二氢孕酮、地美炔酮、炔孕酮、双醋炔诺醇、醋酸氟孕酮、gastrinone、孕二烯酮、孕三烯酮、羟甲基孕酮、羟孕酮、利奈孕酮、mecirogestone、甲羟孕酮、甲地孕酮、美仑孕酮、诺美孕酮、炔诺酮、异炔诺酮、炔诺孕酮、诺孕烯酮、甲诺酮、孕酮、奎孕醇、(17α)-17- 羟基-11- 亚甲基-19- 去甲孕甾-4，15- 二烯-20- 炔-3- 酮、替勃龙、曲美孕酮、醋苯阿尔孕酮、奈甾酮、普美孕酮、17- 羟孕酮酯、19- 去甲-17 羟孕酮、17α- 乙炔睾酮、17α- 乙炔基-19- 去甲睾酮或d-17β- 乙酰氧基-13β- 乙基-17α- 乙炔基甾-4-烯-3- 酮肟。

12.根据权利要求11所述的药物组合物，其特征在于所述孕激素为屈螺酮。

13.根据权利要求11所述的药物组合物，其特征在于所述孕激素含量为0.5 至5mg。

14.根据权利要求11所述的药物组合物，其特征在于所述孕激素含量为2 至4mg。

15.根据权利要求11所述的药物组合物，其特征在于所述孕激素含量为3mg。

16.权利要求1所述药物组合物及药学上可接受的辅料制备的药学上可接受的 剂型，所述剂型的单位剂型包含权利要求1所述的药物组合物。

17.根据权利要求16所述剂型，其特征在于所述剂型为固体口服剂型。

18.根据权利要求17所述剂型，其特征在于所述剂型为片剂、胶囊剂、颗粒剂或药囊。

19.根据权利要求16所述剂型，其特征在于所述辅料选自崩解剂、稀释剂、粘合剂、润滑剂、着色剂、矫味剂、包衣材料或其组合。

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