CN107271576A - 测定乳制品中双氰胺残留量的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了提取乳制品中双氰胺的方法、测定乳制品中双氰胺残留量的方法及测定奶粉中双氰胺残留量的方法。提取乳制品中双氰胺的方法包括：将乳制品与水进行混合及第一静置处理，得到第一混合液；将所述第一混合液与乙酸进行混合及第二静置处理，再将得到的第二混合液进行第一离心处理，收集上清液；以及将所述上清液与乙腈进行混合及第二离心处理，得到提取液。由此，本发明的提取乳制品中双氰胺的方法能够有效地提取出双氰胺，并根据本发明的测定乳制品中双氰胺残留量的方法准确地测定出双氰胺残留量。
Description
技术领域
本发明涉及食品领域。具体地，本发明涉及测定乳制品中双氰胺残留量的方法。更具体地，本发明涉及提取乳制品中双氰胺的方法、测定乳制品中双氰胺残留量的方法、测定奶粉中双氰胺残留量的方法。
背景技术
二氰二氨(双氰胺)，是氰胺的二聚体，也是胍的氰基衍生物。化学式为C2H4N4，白色结晶粉末。双氰胺是一种复合含氮化肥的成份，可控制硝化菌的活动，使氮肥在土壤中的转化速度得到调节，减少氮的损失，提高肥料的使用效率。
双氰胺进入乳制品有两种途径：第一种可能途径是像三聚氰胺那样，被无良商家主动掺入乳制品中，以伪造蛋白质含量。这样的乳制品不仅缺乏应有营养价值，还会使婴儿发育不良，导致一系列健康问题，因此它是人们深恶痛绝的“毒奶粉”。第二种可能途径是从化肥到牧草，再到奶牛、牛奶和奶粉的食物链途径。在中国的三聚氰胺事件后，双氰胺被列入FDA的“牛奶必检项”。
然而，目前测定乳制品中双氰胺残留量的方法仍有待改进。
发明内容
本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明的一个目的在于提供提取乳制品中双氰胺的方法、测定乳制品中双氰胺残留量的方法及测定奶粉中双氰胺残留量的方法。由此，根据本发明实施例的提取乳制品中双氰胺的方法能够充分提取出双氰胺，并根据本发明实施例的测定乳制品中双氰胺残留量的方法准确地测定出双氰胺残留量。
需要说明的是，本发明是基于发明人的下列发现而完成的：
现有技术中，直接利用乙腈提取乳制品中的双氰胺时，乙腈在沉淀蛋白的同时，双氰胺也会随蛋白质一起凝结，进而导致回收率偏低，且检测结果不稳定。
有鉴于此，发明人经过大量实验发现，利用乙腈对乳制品进行提取之前，将溶于水的乳制品与乙酸进行混合，以沉淀蛋白，而双氰胺并不会与蛋白一起沉淀，从而保证乙腈能够有效地提取出双氰胺，再利用液相色谱-质谱法对提取液进行检测。由此，根据本发明实施例的提取乳制品中双氰胺的方法能够充分提取出双氰胺，并根据本发明实施例的测定乳制品中双氰胺残留量的方法准确地测定出双氰胺残留量。
为此，在本发明的第一方面，本发明提出了一种提取乳制品中双氰胺的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：将乳制品与水进行混合及第一静置处理，得到第一混合液；将所述第一混合液与乙酸进行混合及第二静置处理，再将得到的第二混合液进行第一离心处理，收集上清液；以及将所述上清液与乙腈进行混合及第二离心处理，得到提取液。发明人发现，利用乙酸预先对第一混合液进行处理，能够使蛋白质沉淀，同时双氰胺存在于上清液中，从而能够保证乙腈从上清液中提取出双氰胺，避免了蛋白质的干扰。由此，根据本发明实施例的提取乳制品中双氰胺的方法能够充分提取出双氰胺。
根据本发明的实施例，所述乙酸的浓度为50体积％。由此，根据本发明实施例的提取乳制品中双氰胺的方法能够充分提取出双氰胺。
根据本发明的实施例，所述乳制品与水的质量比为1:5～8。由此，根据本发明实施例的提取乳制品中双氰胺的方法能够充分提取出双氰胺。
根据本发明的实施例，所述乳制品与乙酸的质量比为6～8:1。由此，根据本发明实施例的提取乳制品中双氰胺的方法能够充分提取出双氰胺。
根据本发明的实施例，所述第一静置处理和第二静置处理的时间分别独立地为5～30分钟。由此，根据本发明实施例的提取乳制品中双氰胺的方法能够充分提取出双氰胺。
根据本发明的实施例，所述第一离心处理和第二离心处理的时间和转速分别独立地为5min～10min和10000rpm～12000rpm。由此，根据本发明实施例的提取乳制品中双氰胺的方法能够充分提取出双氰胺。
根据本发明的实施例，所述乳制品为奶粉。由此，根据本发明实施例的提取乳制品中双氰胺的方法能够充分提取出双氰胺。
在本发明的第二方面，本发明提出了一种测定乳制品中双氰胺残留量的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：按照前面所描述的提取乳制品中双氰胺的方法提取出乳制品中的双氰胺，得到提取液；以及利用液相色谱-质谱法对所述提取液进行检测，并基于检测结果确定乳制品中双氰胺的残留量。由此，根据本发明实施例的测定乳制品中双氰胺残留量的方法准确性高，稳定性强。
根据本发明的实施例，利用液相色谱-质谱法对所述提取液进行检测之前，将所述提取液进行过滤处理，根据本发明的优选实施例，所述过滤处理是利用0.22μm滤膜进行的。由此，根据本发明实施例的测定乳制品中双氰胺残留量的方法准确性高，稳定性强。
根据本发明的实施例，所述液相色谱-质谱法的检测条件如下：液相色谱检测条件：色谱柱：Waters ACQUITY UPLC Amide；柱温：35℃；进样体积：5μL；梯度洗脱：0～1.5min时流动相包括：90体积％的流动相A和10体积％的流动相B；1.5～3.5min时流动相包括：50体积％的流动相A和50体积％的流动相B；3.5～4.0min时流动相包括：90体积％的流动相A和10体积％的流动相B；流速：0.4ml/min，质谱检测条件：电离方式：ESI(+)；电离电压:3.0KV；源温度：120℃；去溶剂气温度：400℃；去溶剂气流量：500L/hr；采集方式：多反应监测；锥孔电压：20V；定量离子对：85>68，碰撞能量：22eV；定量离子对：85>43，碰撞能量：22eV。由此，根据本发明实施例的测定乳制品中双氰胺残留量的方法准确性高，稳定性强。
在本发明的第三方面，本发明提出了一种测定奶粉中双氰胺残留量的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：(1)将0.15g样品与0.85ml水旋涡振荡至所述样品完全溶解后，静置5min；(2)向步骤(1)所得到的混合液中加入20μl 50％乙酸，旋涡振荡并静置5min后，在12000rpm转速下离心5min；(3)吸取100μl步骤(2)所得到的上清液与900μl乙腈旋涡振荡混合，并在12000rpm转速下离心5min，将所得到的上清液经0.22μm滤器过滤后，得到待测液；(4)用液相色谱-串联质谱对所述待测液进行测定，得到待测液的峰面积，其中，液相色谱检测条件：色谱柱：Waters ACQUITY UPLC Amide；柱温：35℃；进样体积：5μL；梯度洗脱：0～1.5min时流动相包括：90体积％的流动相A和10体积％的流动相B；1.5～3.5min时流动相包括：50体积％的流动相A和50体积％的流动相B；3.5～4.0min时流动相包括：90体积％的流动相A和10体积％的流动相B；流速：0.4ml/min，质谱检测条件：电离方式：ESI(+)；电离电压:3.0KV；源温度：120℃；去溶剂气温度：400℃；去溶剂气流量：500L/hr；采集方式：多反应监测；锥孔电压：20V；定量离子对：85>68，碰撞能量：22eV；定量离子对：85>43，碰撞能量：22eV；(5)将步骤(4)所得到的待测液峰面积代入公式，计算得到样品中双氰胺的残留量，其中，计算公式为：X＝c×V×f×1000/(m×1000)，X：样品中双氰胺残留量(μg/kg)；c：测定液中双氰胺浓度(ng/mL)；V：样品定容体积(mL)；m：样品质量(g)；f：稀释因子。由此，根据本发明实施例的测定乳制品中双氰胺残留量的方法准确性高，稳定性强。
本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。
附图说明
本发明的上述和/或附加的方面和优点从结合下面附图对实施例的描述中将变得明显和容易理解，其中：
图1显示了根据本发明一个实施例的标准曲线图；以及
图2显示了根据本发明一个实施例的色谱图。
具体实施方式
下面详细描述本发明的实施例。下面描述的实施例是示例性的，仅用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。
需要说明的是，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。进一步地，在本发明的描述中，除非另有说明，“多个”的含义是两个或两个以上。
本发明提出了提取乳制品中双氰胺、测定乳制品中双氰胺残留量的方法及测定奶粉中双氰胺残留量的方法，下面将分别对其进行详细描述。
提取乳制品中双氰胺的方法
在本发明的第一方面，本发明提出了一种提取乳制品中双氰胺的方法。根据本发明的实施例，该方法包括：将乳制品与水进行混合及第一静置处理，得到第一混合液；将第一混合液与乙酸进行混合及第二静置处理，再将得到的第二混合液进行第一离心处理，收集上清液；以及将上清液与乙腈进行混合及第二离心处理，得到提取液。
现有技术中，直接将第一混合液与乙腈混合，以提取双氰胺。但是，加入乙腈后，蛋白质瞬间凝结成团，双氰胺会随蛋白质一起凝结，不易分散在上清液中，从而导致回收率偏低，且检测结果不稳定。
为此，发明人经过大量实验发现，乙腈进行提取之前，利用乙酸对第一混合液进行处理，能够使蛋白质沉淀，而双氰胺分散在上清液中，再用乙腈提取出上清液中的双氰胺，得到提取液，由此，避免了蛋白质的干扰。此外，由于乙酸和乙腈具有挥发性，便于后续的液相色谱-质谱检测。乙酸是发明人在众多沉淀蛋白的试剂中筛选得到的，而其他试剂的效果均不佳。例如，利用乙酸铅沉淀蛋白时，由于后续的质谱检测要求上样液中的溶剂尽可能为挥发性溶剂，否则会影响检测结果的准确性，还将影响质谱的使用寿命。而乙酸铅属于不挥发性盐类物质，不宜使用。利用三滤乙酸沉淀蛋白质时，由于其酸性较强，容易造成仪器的腐蚀。
根据本发明的实施例，乙酸的浓度为50体积％。发明人经过大量实验优化得到上述最优乙酸浓度。乙酸浓度过高不仅浪费试剂，而且由于乙酸强烈的刺激性味道给实验工作带来不好的影响。
根据本发明的实施例，乳制品与水的质量比为1:5～8。根据本发明的另一个实施例，乳制品与乙酸的质量比为6～8:1。由此，根据本发明实施例的测定乳制品中双氰胺残留量的方法能够准确地测定乳制品中双氰胺残留量，且结果的稳定性强。
需要说明的是，根据本发明的实施例，对于液态溶剂，如水和乙酸，为方便计算，将1mL示作1g。
根据本发明的实施例，第一静置处理和第二静置处理的时间分别独立地为5～30分钟。发明人经过大量实验优化得到最优第一和第二静置处理时间。第一静置处理的目的是使样品充分溶解。时间过短，溶解效果不佳。第二静置处理目的是使蛋白质在乙酸作用下充分变性沉淀，若静置时间过短，仍有部分蛋白质未沉淀完全，残留的蛋白质会干扰后续操作，进而影响检测结果的准确性。
根据本发明的实施例，所述第一离心处理和第二离心处理的时间和转速分别独立地为5min～10min和10000rpm～12000rpm。第一离心处理的目的是除去蛋白质，若离心时间过短，无法完全除去蛋白质，进而对后续检测造成影响。第二离心处理的目的是除去不溶于乙腈的杂质，从而能够提取出双氰胺，且提取液中杂质较少。
需要说明的是，本发明对乳制品的种类不作严格限定，根据本发明的具体实施例，乳制品为奶粉。
测定乳制品中双氰胺残留量的方法
在本发明的第二方面，本发明提出了一种测定乳制品中双氰胺残留量的方法。根据本发明的实施例，该方法包括：按照前面所描述的提取乳制品中双氰胺的方法提取出乳制品中的双氰胺，得到提取液；以及利用液相色谱-质谱法对所述提取液进行检测，并基于检测结果确定乳制品中双氰胺的残留量。由此，根据本发明实施例的测定乳制品中双氰胺残留量的方法能够准确地测定乳制品中双氰胺残留量，且结果的稳定性强。
根据本发明的实施例，利用液相色谱-质谱法对待测液进行检测之前，将提取液进行过滤处理，根据本发明的优选实施例，过滤处理是利用0.22μm滤膜进行的。过滤处理以除去粒径较大的杂质，防止其对检测结果造成影响，同时也避免了对仪器的损伤。
根据本发明的实施例，液相色谱-质谱法的检测条件如下：液相色谱检测条件：色谱柱：Waters ACQUITY UPLC Amide；柱温：35℃；进样体积：5μL；梯度洗脱：0～1.5min时流动相包括：90体积％的流动相A和10体积％的流动相B；1.5～3.5min时流动相包括：50体积％的流动相A和50体积％的流动相B；3.5～4.0min时流动相包括：90体积％的流动相A和10体积％的流动相B；流速：0.4ml/min，质谱检测条件：电离方式：ESI(+)；电离电压:3.0KV；源温度：120℃；去溶剂气温度：400℃；去溶剂气流量：500L/hr；采集方式：多反应监测；锥孔电压：20V；定量离子对：85>68，碰撞能量：22eV；定量离子对：85>43，碰撞能量：22eV。在此最优检测条件下，双氰胺色谱峰明显，且周围无杂峰干扰，由此，能够更加准确地测定乳制品中双氰胺残留量。
本领域技术人员能够理解的是，前面针对提取乳制品中双氰胺的方法所描述的特征和优点，同样适用于该测定乳制品中双氰胺残留量的方法，在此不再赘述。
测定奶粉中双氰胺残留量的方法
在本发明的第三方面，本发明提出了一种测定奶粉中双氰胺残留量的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：(1)将0.15g样品与0.85ml水旋涡振荡至所述样品完全溶解后，静置5min；(2)向步骤(1)所得到的混合液中加入20μl 50％乙酸，旋涡振荡并静置5min后，在12000rpm转速下离心5min；(3)吸取100μl步骤(2)所得到的上清液与900μl乙腈旋涡振荡混合，并在12000rpm转速下离心5min，将所得到的上清液经0.22μm滤器过滤后，得到待测液；(4)用液相色谱-串联质谱对待测液进行测定，得到待测液的峰面积，其中，液相色谱检测条件：色谱柱：Waters ACQUITY UPLC Amide；柱温：35℃；进样体积：5μL；梯度洗脱：0～1.5min时流动相包括：90体积％的流动相A和10体积％的流动相B；1.5～3.5min时流动相包括：50体积％的流动相A和50体积％的流动相B；3.5～4.0min时流动相包括：90体积％的流动相A和10体积％的流动相B；流速：0.4ml/min，质谱检测条件：电离方式：ESI(+)；电离电压:3.0KV；源温度：120℃；去溶剂气温度：400℃；去溶剂气流量：500L/hr；采集方式：多反应监测；锥孔电压：20V；定量离子对：85>68，碰撞能量：22eV；定量离子对：85>43，碰撞能量：22eV；(5)将步骤(4)所得到的待测液峰面积代入公式，计算得到样品中双氰胺的残留量，其中，计算公式为：X＝c×V×f×1000/(m×1000)，X:样品中双氰胺残留量(μg/kg)；c:测定液中双氰胺浓度(ng/mL)；V：样品定容体积(mL)；m：样品质量(g)；f：稀释因子。由此，根据本发明实施例的测定乳制品中双氰胺残留量的方法准确性高，稳定性强。
下面将结合实施例对本发明的方案进行解释。本领域技术人员将会理解，下面的实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件的，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
实施例1
在该实施例中，按照下列步骤测定奶粉中双氰胺残留量的方法：
(1)准确称取0.15g样品到2ml离心管中，加入0.85ml超纯水，旋涡使其完全溶解，静置5min。
(2)向步骤(1)所得到的混合液中加入20μl 50％乙酸，旋涡并静置5min，12000rpm转速下离心5min。
(3)吸取100μl步骤(2)所得到的上清液到另一个2ml离心管中，并加入900μl乙腈后旋涡，12000rpm转速下离心5min，收集上清液，并将其经0.22μm滤器过滤后，得到待测液。
(4)用液相色谱-串联质谱对待测液进行测定，得到待测液的峰面积。
其中，
液相色谱检测条件：
色谱柱：Waters ACQUITY UPLC Amide；
柱温：35℃；
进样体积：5μL；
梯度洗脱：0～1.5min，90体积％流动相A和10体积％流动相B；1.5～3.5min，50体积％流动相A和50体积％流动相B；3.5～4.0min，90体积％流动相A和10体积％流动相B；
流速：0.4ml/min，
质谱检测条件：
电离方式：ESI(+)；
电离电压:3.0KV；
源温度：120℃；
去溶剂气温度：400℃；
去溶剂气流量：500L/hr；
采集方式：多反应监测；
锥孔电压：20V；
定量离子对：85>68，碰撞能量：22eV；
定量离子对：85>43，碰撞能量：22eV。
(5)分别用空白基质溶液配制浓度为0ng/ml、2.5ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL、50ng/mL、100ng/mL的六个浓度梯度的双氰胺标准工作液，按照步骤(4)的仪器条件进行检测，以待测物定量离子的峰面积Y对其质量浓度X(μg/L)得到双氰胺的标准曲线(如图1所示)，其相关系数大于0.99，说明线性关系良好，可以使用外标法的标准曲线进行样品校正。
(6)将步骤(4)所得到的待测液峰面积代入公式，计算得到样品中双氰胺的残留量。
其中，计算公式为：
X:样品中双氰胺残留量(μg/kg)；
c:测定液中双氰胺浓度(ng/mL)；
V：样品定容体积(mL)；
m：样品质量(g)；
f：稀释因子。
实施例2
在该实施例中，按照下列步骤测定回收率：
(1)将不含双氰胺的牛奶与双氰胺含量分别为50μg/kg、100μg/kg和250μg/kg的标准品进行混合，得到加标样品1、加标样品2和加标样品3。
(2)按照实施例1的方法分别测定不同加标样品中双氰胺残留量，并根据下列公式计算得到回收率。
具体地，计算公式为：回收率(％)＝加标样品中双氰胺残留量的实际测定值/加标样品中双氰胺残留量的理论值。
表2给出了牛奶中双氰胺回收率及精密度检测结果。可以看出，回收率在80～110％范围内，符合要求，说明本发明的方法准确性高。相对标准偏差在4.2％～6.1％范围内，说明其精密度较高。图2显示了加标样品1所得到的色谱图。由图中可以看出，双氰胺色谱峰周围无明显杂峰干扰，进而保证了检测结果的准确性。
实施例3
在该实施例中，按照下列步骤测定回收率：
(1)将不含双氰胺的奶粉与双氰胺含量分别为400μg/kg、800μg/kg和2000μg/kg的标准品进行混合，得到加标样品4、加标样品5和加标样品6。
(2)按照实施例1的方法分别测定不同加标样品中双氰胺残留量，并根据下列公式计算得到回收率。
具体地，计算公式为：回收率(％)＝加标样品中双氰胺残留量的实际测定值/加标样品中双氰胺残留量的理论值。
表3给出了奶粉中双氰胺回收率及精密度检测结果。可以看出，回收率在80～110％范围内，符合要求，说明本发明的方法准确性高。相对标准偏差在4％～6％范围内，说明其精密度较高。
表2牛奶中双氰胺回收率及精密度检测
表3奶粉中双氰胺回收率及精密度检测
对比例1
在该对比例中，按照实施例1的方法测定奶粉中双氰胺残留量，区别在于，
直接进行步骤(3)的操作，即直接向0.1克奶粉中加入900μl乙腈后旋涡，再进行后续操作。
对比例2
在该对比例中，按照实施例1的方法测定奶粉中双氰胺残留量，区别在于，
不含步骤(2)。
对比例1和2的检测结果如表4所示，可以看出，对比例1和2的方法的准确性和精密度均较低。
表4不同提取方法测定双氰胺对比
在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。
尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。
Claims (9)
1.一种测定奶粉中双氰胺残留量的方法，其特征在于，包括：
(1)将0.15g样品与0.85ml水旋涡振荡至所述样品完全溶解后，静置5min；
(2)向步骤(1)所得到的混合液中加入20μl 50％乙酸，旋涡振荡并静置5min后，在12000rpm转速下离心5min；
(3)吸取100μl步骤(2)所得到的上清液与900μl乙腈旋涡振荡混合，并在12000rpm转速下离心5min，将所得到的上清液经0.22μm滤器过滤后，得到待测液；
(4)用液相色谱-串联质谱对所述待测液进行测定，得到待测液的峰面积，
其中，
液相色谱检测条件：
色谱柱：Waters ACQUITY UPLC Amide；
柱温：35℃；
进样体积：5μL；
梯度洗脱：0～1.5min时流动相包括：90体积％的流动相A和10体积％的流动相B；1.5～3.5min时流动相包括：50体积％的流动相A和50体积％的流动相B；3.5～4.0min时流动相包括：90体积％的流动相A和10体积％的流动相B；
流速：0.4ml/min，
质谱检测条件：
电离方式：ESI(+)；
电离电压：3.0KV；
源温度：120℃；
去溶剂气温度：400℃；
去溶剂气流量：500L/hr；
采集方式：多反应监测；
锥孔电压：20V；
定量离子对：85>68，碰撞能量：22eV；
定量离子对：85>43，碰撞能量：22eV；
(5)将步骤(4)所得到的待测液峰面积代入公式，计算得到样品中双氰胺的残留量，其中，计算公式为：X＝c×V×f×1000/(m×1000)，
X：样品中双氰胺残留量(μg/kg)；
c：测定液中双氰胺浓度(ng/mL)；
V：样品定容体积(mL)；
m：样品质量(g)；
f：稀释因子。
2.一种提取乳制品中双氰胺的方法，其特征在于，包括：
将乳制品与水进行混合及第一静置处理，得到第一混合液；
将所述第一混合液与乙酸进行混合及第二静置处理，再将得到的第二混合液进行第一离心处理，收集上清液；以及
将所述上清液与乙腈进行混合及第二离心处理，得到提取液。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，
所述乙酸的浓度为50体积％，
任选地，所述乳制品与水的质量比为1:5～8，
任选地，所述乳制品与乙酸的质量比为6～8:1。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述第一静置处理和第二静置处理的时间分别独立地为5～30分钟。
5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述第一离心处理和第二离心处理的时间和转速分别独立地为5min～10min和10000rpm～12000rpm。
6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述乳制品为奶粉。
7.一种测定乳制品中双氰胺残留量的方法，其特征在于，包括：
按照权利要求2～6任一项所述的方法提取出乳制品中的双氰胺，得到提取液；以及
利用液相色谱-质谱法对所述提取液进行检测，并基于检测结果确定乳制品中双氰胺的残留量。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，利用液相色谱-质谱法对所述提取液进行检测之前，将所述提取液进行过滤处理，
优选地，所述过滤处理是利用0.22μm滤膜进行的。
9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述液相色谱-质谱法的检测条件如下：
液相色谱检测条件：
色谱柱：Waters ACQUITY UPLC Amide；
柱温：35℃；
进样体积：5μL；
梯度洗脱：0～1.5min时流动相包括：90体积％的流动相A和10体积％的流动相B；1.5～3.5min时流动相包括：50体积％的流动相A和50体积％的流动相B；3.5～4.0min时流动相包括：90体积％的流动相A和10体积％的流动相B；
流速：0.4ml/min，
质谱检测条件：
电离方式：ESI(+)；
电离电压：3.0KV；
源温度：120℃；
去溶剂气温度：400℃；
去溶剂气流量：500L/hr；
采集方式：多反应监测；
锥孔电压：20V；
定量离子对：85>68，碰撞能量：22eV；
定量离子对：85>43，碰撞能量：22eV。
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2016
- 2016-04-08 CN CN201610219215.1A patent/CN107271576A/zh active Pending
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