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CN106946867B - Fxr受体调节剂及其制备方法和用途 - Google Patents

Fxr受体调节剂及其制备方法和用途 Download PDF

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CN106946867B CN201610011327.8A CN201610011327A CN106946867B CN 106946867 B CN106946867 B CN 106946867B CN 201610011327 A CN201610011327 A CN 201610011327A CN 106946867 B CN106946867 B CN 106946867B
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Abstract

本发明公开了一种FXR受体调节剂及其制备方法和用途，属于药物化学领域。本发明的具有式I结构特征的FXR受体调节剂或其药学上可接受的盐或立体异构体或溶剂化物或前药，能够与FXR(即NR1H4)受体结合，并作为FXR受体的激动剂或部分激动剂，进而能够应用于预防和治疗由FXR介导的疾病，例如慢性肝内或肝外胆汁淤积病症，由慢性胆汁淤积病症或者急性肝内胆汁淤积病症导致的肝纤维化，或者慢性乙型肝炎，或者胆囊结石，或者肝癌，或者结肠癌，或者肠道炎性疾病等。特别是其中，部分化合物，对FXR激动的EC50达到100nM以下，显示出了非常好的FXR激动活性，具有非常优越的应用前景，为临床治疗由FXR介导的疾病提供了新的药物选择。

Description

FXR受体调节剂及其制备方法和用途
技术领域
本发明涉及药物化学技术领域，特别是涉及一种FXR受体调节剂及其制备方法和用途。
背景技术
多细胞机体依赖于细胞和体室之间的高级信息传输机制，所传输的信息可以是高度复杂的，并且可以导致的改变涉及细胞分化、增殖或者再生的基因程序等。而传输所用信号(或激素)，通常为低分子量的分子，比如肽、脂肪酸或者胆固醇衍生物等。
这些信号中有许多通过最终改变特定基因的转录来产生其效果。一组经深入研究过的调节细胞对各种信号应答的蛋白质，为己知的核受体的转录因子家族，以下经常称为"NR"。该"NR"组成员包括:甾类激素、维生素D、蜕皮激素、顺式和反式维生素A酸、甲状腺激素、胆汁酸、胆固醇-衍生物、脂肪酸(及其他过氧化物酶体增值物)受体；以及所谓的孤儿受体Corphan receptors)，该孤儿受体指结构类似于该组其他成员的蛋白质，但是对其没有己知的配体。孤儿受体可能提示细胞中有未知的信号通道，或者可能是不需要配体激活就可以起作用的核受体。C D.Mangelsdorf等人发现，用这些孤儿受体中的一些进行的转录激活，可能在缺乏外源配体的情况下和/或通过起源自细胞表面的信号转导途径发生(Thenuclear receptor superfamily:the second decade",Cell 1995,83(6),835-839；REvans"The nuclear receptor superfamily:arosetta stoneforphysiology",Mol.Endocrinol.2005,19(6),1429-1438)。
通常，在NR中已经限定了三个功能区域，氨基末端区域被认为是具有一些调节功能的区域。DNA结合区域(以下简称为"DBD")，通常包括两个锌指单元，并且识别在应答基因的启动子中的特定激素应答元件(以下简称为"HRE")。在"DBD"中的特定氨基酸残基已经被DNA序列结合特异性(M.Schena,"Mammalian glucocorticoid receptor derivativesenhance transcription in yeast",Science 1988，241(4868)，965-967)。配体结合区域(以下简称为"LBD")，位于己知NR的竣基末端区域。在没有激素的情况下，LBD显示出会干扰DBD与其HRE的相互作用。激素结合似乎导致在NR中的构象变化并由此开启了这种干扰(A.Brzozowski等，"Molecular basis of agonism and antagonism in the oestrogenreceptor",Nature 1997,389(6652),753-758)。
像甾类激素的核受体调节剂，通常是通过结合到细胞内受体上并形成核受体-配体复合物来影响特定细胞的生长与功能。然后核受体-激素复合物与特定基因的控制区域内的激素应答元件(HRE)发生相互作用，从而改变特定的基因表达(A.Aranda,A.Pascual,"Nuclear hormone receptors and gene expression",Physiol.Rev.2001,81(3)，1269-1304)。
法尼酯X受体α(以下当指的是人类受体时也经常称为NR1H4)是一种原型2型核受体，其在以杂二聚体方式和法尼酶X受体一起结合到靶基因的启动子区域时激活基因(B.Forman等，"Identification of a nuclear receptor that is activated byfamesol metabolites"，Cell 1995,81(5，687-693)。NR1H4的相关生理性配体为胆汁酸(D.Parks等，"Bile acids:naturalligands for an orphan nuclear receptor",Science1999,284(5418),1365-1368；M.Makishima等，"Identification of a nuclear receptorfor bile acids",Science 1999,284(5418),1362-1365)，其中活性最好的是鹅脱氧胆酸(CDCA)，它参与调节胆汁酸体内平衡的几种基因的表达。法尼醇及其衍生物，一起被称为法尼酯，最初描述为在高浓度时激活鼠类直向同源物，但是他们没有激活人类或者鼠类受体的作用。FXR(即NR1H4受体)在肝、小肠、结肠、卵巢、肾上腺和肾中表达。除了控制细胞内的基因表达外，FXR似乎也参与旁分泌和内分泌通信(J.Holt等，"Definition of a novelgrowth factor-dependent signal cascade for the suppression of bile acidbiosynthesis",Genes Dev.2003,17(13),1581-91；T.Inagaki等，"Fibroblast growthfactor 15functions as an enterohepatic signal to regulate bile acid h
omeostasis",Cell Metab.2005,2(4),217-225)。
有一篇论文提出了FXR激活后，通过向上调整巨噬细胞中的溶酶体命运/存活因子(lysosomal fate/survival factor)Taco-2来对例如细菌或者原生动物寄生虫的感染有机体的存活产生直接影响(P.Anand等，"Downregulation of TACO gene transcriptionrestricts mycobacterial entry/survival within human macrophages",FEMSMicrobiol.Lett.2005,250(1),137-144)。这为FXR作为治疗例如肺结核、麻风病、利什曼虫病、美洲锥虫病(Chagas Disease)等的细胞内细菌性或者寄生虫性感染的药物靶标提供了依据。
发明内容
基于此，本发明的目的在于提供一种FXR受体调节剂，能够与FXR(即NR1H4)受体结合并作为FXR受体的激动剂或部分激动剂。
为实现上述目的，本发明采取以下技术方案：
具有式I结构特征的FXR受体调节剂或其药学上可接受的盐或立体异构体或溶剂化物或前药：
其中：
A选自：C或N；
P选自：C、N或O；
Q选自：C、N或O；
M选自：C或N；
R1选自：氢、1～5个R2取代或未取代的C1～C6烷基、1～5个R2取代或未取代的C2～C6链烯基、1～5个R2取代或未取代的C2～C6炔基、1～5个R2取代或未取代的C3～C6环烷基、1～5个R2取代或未取代的杂环基、1～5个R2取代或未取代的芳基、1～5个R2取代或未取代的杂芳环基；
Ar1选自：1～5个R6取代或未取代的C5～10芳基，1～5个R6取代或未取代的C5～10杂芳基；
X选自以下取代基：
c选自：0、1、2或3；
d选自：0、1、2或3；
e选自：0、1、2或3；
f选自：0、1、2或3；
m选自：1或2；
R3独立地任选自：氢、卤素、1～5个R7取代或未取代的C1～C3烷基、1～5个R7取代或未取代的C1～C3烷氧基、1～5个R7取代或未取代的C3～C6环烷基；并且两个独立地取代基R3可以与和它们连接的原子一起形成3～6元碳环、芳基、杂芳基或者杂环；
Ar2选自：1～3个R8取代或未取代的苯基、1～3个R8取代或未取代的萘基、1～3个R8取代或未取代的C5～C10单环或双环杂芳基；
R8选自：氢、卤素、C1～C4烷基、C1～C4烷氧基、C3～C5环烷基、C2～C4链烯基、C2～C4炔基、酰胺基、磺胺基、酯基、氰基、OCH2F、OCHF2、OCF3、SCF3、N(CH3)2；
Y选自：COOR4、CONR4R5、C(O)NHSO2R4、SO2NHC(O)R4、或经由C原子连接到Ar2的四氮唑；
R4、R5独立地任选自：氢、金属离子、1～5个R9取代或未取代的C1～C6烷基、1～5个R9取代或未取代的C2～C6链烯基、1～5个R9取代或未取代的C2～C6炔基、1～5个R9取代或未取代的C3～C6环烷基；
R2、R6、R7、R9独立地任选自：氢、卤素、氰基、酰胺基、磺酰胺基、氨基、酯基、硝基、C1～C3烷基、C1～C3单卤代或多卤代烷基、C1～C3烷氧基、C1～C3单卤代或多卤代烷氧基、被1～3个氟原子取代或未取代的C3～5环烷基。
在上述化合物中，优选A和M为C或N，且A和M至少有一个为C；P和Q为C、N或O，且P和Q不能同时为C。
在其中一些实施例中，A选自：C；P选自：N；Q选自：O；M选自：C。
在其中一些实施例中，Ar2选自以下基团：
R8选自：氢、卤素、C1～C4烷基、C1～C4烷氧基。
在其中一些实施例中，X选自以下取代基：
其中：c、d、e、f、R3如上所述。
在其中一些实施例中，选自具有如下通式II结构特征的化合物：
其中：
R1选自：1～5个R2取代或未取代的C3～C6环烷基；
Ar1选自：1～5个R6取代或未取代的C5～10芳基；优选1～3个R6取代或未取代的苯基或吡啶基；
X选自以下取代基：
c选自：0、1、2或3；
d选自：0、1或2；
e选自：0或1；
f选自：0或1；
R3独立地任选自：氢、卤素、1～5个R7取代或未取代的C1～C3烷基；
Ar2选自以下基团：
R8选自：氢、卤素、C1～C4烷基、C1～C4烷氧基；
Y选自：COO R4、C(O)NHSO2R4；
R4选自：氢、金属离子、1～5个R9取代或未取代的C1～C6烷基；
R2、R6、R7、R9独立地任选自：氢、卤素、氰基、硝基、C1～C3烷基、C1～C3单卤代或多卤代烷基、C1～C3烷氧基、C1～C3单卤代或多卤代烷氧基。
在其中一些实施例中，A选自：C；
P选自：N；
Q选自：O；
M选自：C；
Ar1选自：1～3个R6取代或未取代的苯基；
R6选自：卤素、被1～3个氟原子取代或未取代的C1～C3烷基，被1～3个氟原子取代或未取代的C3～5环烷基；
R1选自：环丙烷；
X选自：
c选自：0、1或2；
d选自：0、1或2；
e选自：0、1或2；
f选自：0、1或2。
在其中一些实施例中，选自如下化合物之一：
本发明还公开了上述的FXR受体调节剂的制备方法，包括以下合成路线：
路线一：
其中：A、M、P、Q、X、R1、Ar1和Ar2如上所述；
EL1选自：卤素、烷基磺酰氧基或芳基磺酰氧基；
EL2选自：卤素；
R选自：C1～C6烷基。
步骤1中，化合物Ia与Ib发生亲核取代反应得到中间体Ic。所述的亲核取代反应应用本领域的常规方法进行，例如：将化合物Ia溶于有机溶剂，加入相转移催化剂和碱性试剂，反应0.2到1小时后再加入化合物Ib，在室温到80℃条件下反应1到24小时。所述有机溶剂可为四氢呋喃、DMF、甲苯、乙腈等，优选四氢呋喃；所述相转移催化剂可为18-冠醚-6、四丁基碘化铵、四丁基硫酸氢铵等，优选18-冠醚-6；所述碱性试剂包括钠氢、叔丁醇钾、叔丁醇钠、氢氧化钠、氢氧化钾、甲醇钠、乙醇钠等，优选叔丁醇钾或叔丁醇钠。
步骤2中，将中间体Ic的保护基Boc脱去得到中间体Id，所采用的方法是本领域脱去Boc的常规方法，例如：将中间体Ic溶于有机溶剂，加入酸性试剂，在0℃到60℃反应0.5到24小时。所述有机溶剂可为二氯甲烷、二氯乙烷、氯仿、乙酸乙酯、二氧六环、四氢呋喃等，优选二氯甲烷或二氧六环；所述酸性试剂包括三氟乙酸、对甲苯磺酸、甲磺酸、盐酸、氯化氢乙酸乙酯溶液或氯化氢二氧六环溶液，优选三氟乙酸、氯化氢乙酸乙酯溶液或氯化氢二氧六环溶液。
步骤3中，中间体Id与中间体Ie可通过亲核取代反应或金属催化偶联反应得到中间体If。所述的亲核取代反应应用本领域的常规方法进行，例如：将中间体Id溶于有机溶剂，加入碱性试剂和中间体Ie，在室温到150℃条件下反应1到24小时。所述有机溶剂可为四氢呋喃、DMF、甲苯、乙腈、丙腈、NMP等，优选DMF或乙腈；所述碱性试剂包括钠氢、氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸铯、碳酸钾、碳酸钠、三乙胺、DIPEA、DBU等，优选碳酸钾、三乙胺或DIPEA；反应条件优选80℃到100℃。所述的金属催化偶联反应应用本领域的常规方法进行，例如：将中间体Id溶于有机溶剂，加入钯催化剂、膦配体、碱性试剂和中间体Ie，氮气或氩气保护，在80℃到150℃条件下反应8到48小时。所述有机溶剂可为甲苯、二甲苯、二氧六环、丙腈、NMP等，优选甲苯、二甲苯或二氧六环；所述钯催化剂可为醋酸钯、Pd2(dba)3、3nd Ruphos Pd、四(三苯基膦)钯等，优选醋酸钯或Pd2(dba)3；所述膦配体可为BINAP、Xantphos、三(叔丁基)膦、三(邻甲苯基)膦等，优选BINAP或Xantphos；所述碱性试剂可为碳酸钾、碳酸钠、碳酸铯、叔丁醇钾、叔丁醇钠等，优选碳酸铯或叔丁醇钾。
步骤4中，中间体If经水解反应可得到化合物Ig。所述水解反应可以用本领域中的常规方法进行，例如：将中间体If溶入水与任意与水互溶的有机溶剂中，在碱性条件，经室温到100℃条件下反应1-24小时。所述有机溶剂可为任意与水互溶的溶剂，优选乙醇、甲醇、四氢呋喃、二氧六环等。所用的碱可为氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钾、碳酸铯、碳酸钠等，优选氢氧化锂、氢氧化钠或氢氧化钾。
或者
路线二：
其中：A、M、P、Q、X、R1、Ar1和Ar2如上所述；
EL1选自：卤素、烷基磺酰氧基或芳基磺酰氧基；
EL2选自：卤素；
R选自：C1～C6烷基。
步骤1中，中间体Ie与中间体IIa可通过亲核取代反应或金属催化偶联反应得到中间体IIb。所述的亲核取代反应应用本领域的常规方法进行，例如：将中间体Ie溶于有机溶剂，加入碱性试剂和中间体IIa，在室温到150℃条件下反应1到24小时。所述有机溶剂可为四氢呋喃、DMF、甲苯、乙腈、丙腈、NMP等，优选DMF或乙腈；所述碱性试剂包括钠氢、氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸铯、碳酸钾、碳酸钠、三乙胺、DIPEA、DBU等，优选碳酸钾、三乙胺或DIPEA；反应条件优选80℃到100℃。所述的金属催化偶联反应应用本领域的常规方法进行，将中间体Ia溶于有机溶剂，加入钯催化剂、膦配体、碱性试剂和中间体IIa，氮气或氩气保护，在80℃到150℃条件下反应8到48小时。所述有机溶剂可为甲苯、二甲苯、二氧六环、丙腈、NMP等，优选甲苯、二甲苯或二氧六环；所述钯催化剂可为醋酸钯、Pd2(dba)3、3ndRuphos Pd、四(三苯基膦)钯等，优选醋酸钯或Pd2(dba)3；所述膦配体可为BINAP、Xantphos、三(叔丁基)膦、三(邻甲苯基)膦等，优选BINAP或Xantphos；所述碱性试剂可为碳酸钾、碳酸钠、碳酸铯、叔丁醇钾、叔丁醇钠等，优选碳酸铯或叔丁醇钾。
步骤2中，中间体IIb与中间体Ia发生亲核取代反应得到中间体If。所述的亲核取代反应应用本领域的常规方法进行，例如：将中间体IIb溶于有机溶剂，加入碱性试剂和中间体Ia，在60℃到120℃条件下反应1到24小时。所述有机溶剂可为四氢呋喃、DMF、甲苯、乙腈、丙腈等，优选乙腈、DMF；所述碱性试剂包括钠氢、叔丁醇钾、叔丁醇钠、氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钾、碳酸铯等，优选钠氢、碳酸钾。
步骤3中，中间体If经水解反应可得到化合物Ig。所述水解反应可以用本领域中的常规方法进行，例如：将中间体If溶入水与任意与水互溶的有机溶剂中，在碱性条件，经室温到100℃条件下反应1-24小时。所述有机溶剂可为任意与水互溶的溶剂，优选乙醇、甲醇、四氢呋喃、二氧六环等。所用的碱可为氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钾、碳酸铯、碳酸钠等，优选氢氧化锂、氢氧化钠或氢氧化钾。
制备得到化合物Ig后，还可通过以下线路三进行进一步反应制备衍生物：
其中，A、M、P、Q、X、R1、Ar1和Ar2如上1所述；
R’选自：氢或C1～C6烷基；
L选自：C1～C6烷基、C2～C6链烯基、C2～C6炔基、C3～C6环烷基、C(O)R6或SO2R6；
R6选自：C1～C3烷基、芳基或杂芳基。
步骤1中，化合物Ig与中间体IIIa发生缩合反应可以得到化合物IIIb。所述缩合反应可以用本领域中的常规方法进行，例如：将化合物Ig溶于有机溶剂，加入缩合剂、碱性试剂和中间体IIIa，在室温到100℃的条件下反应1到24小时。所述的有机溶剂可为二氯甲烷、二氯乙烷、氯仿、乙腈、DMF、二氧六环、四氢呋喃等，优选二氯甲烷、乙腈、DMF；所述的缩合试剂可为HATU、HBTU、EDC、HOBt、BOP、PyBOP等，优选HATU、EDC、HOBt、PyBOP；所述的碱可为三乙胺、DIPEA、DBU、吗啉、吡啶等，优选三乙胺和DIPEA。
本发明还公开了上述的FXR受体调节剂或其药学上可接受的盐或立体异构体或溶剂化物或前药在制备预防和治疗由FXR介导的疾病的药物中的应用。
在其中一些实施例中，所述由FXR介导的疾病包括：非酒精性脂肪性肝病，非酒精性脂肪肝炎，慢性肝内或肝外胆汁淤积病症，由慢性胆汁淤积病症或者急性肝内胆汁淤积病症导致的肝纤维化，慢性乙型肝炎，胆囊结石，肝癌，结肠癌，或者肠道炎性疾病。
本发明还公开了一种药物组合物，包括上述的FXR受体调节剂或其药学上可接受的盐或立体异构体或溶剂化物或前药，以及药学上可以接受的辅料或载体。
所述药学上可以接受的辅料或载体可以为赋形剂或缓释剂等。该药物组合物可以是多种形式，如片剂、胶囊剂、散剂、糖浆剂、溶液剂、混悬剂和气雾剂等，并可以存在于适宜的固体或液体载体或稀释液中。本发明的药物组合物也可以储存在适宜的注射或滴注的消毒器具中。该药物组合物中还可包含气味剂、香味剂等。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
本发明的具有式I结构特征的FXR受体调节剂或其药学上可接受的盐或立体异构体或溶剂化物或前药，能够与FXR(即NR1H4)受体结合，并作为FXR受体的激动剂或部分激动剂，进而能够应用于预防和治疗由FXR介导的疾病，例如非酒精性脂肪性肝病，非酒精性脂肪肝炎，慢性肝内或肝外胆汁淤积病症，由慢性胆汁淤积病症或者急性肝内胆汁淤积病症导致的肝纤维化，慢性乙型肝炎，胆囊结石，肝癌，结肠癌，或者肠道炎性疾病等。
特别是其中，部分化合物，对FXR激动的EC50达到100nM以下，显示出了非常好的FXR激动活性，具有非常优越的应用前景，为临床治疗由FXR介导的疾病提供了新的药物选择。
具体实施方式
本文所用“烷基”是指饱和链状烷基，“链状烷基”是指直链或支链的烷基，如C1-C6烷基是指具有1至6个碳原子的饱和直链或支链的烷基，其中直链烷基的示例包括但不限于乙基，正丙基等，支链烷基的示例包括但不限于异丙基，叔丁基等；“环烷基”是指具有环状结构的烷基，如C3-C4环烷基指具有3至4个碳原子的具有环状结构的烷基，示例包括但不限于环丙基，环丁基、甲基取代环丙基等。“烯基”是指不饱和链状烷基，如C2～C6烯基表示碳原子数为2个到6个的具有一个双键的直链或支链烯基，示例包括但不限于乙烯基、丙烯基、丁烯基、异丁烯基、戊烯基、己烯基等。
术语“杂环”代表具有5-7个成环原子、含有一到四个选自N、O、S的杂原子的饱和单环体系。示例包括但不限于：四氢呋喃、吡咯烷、哌啶、哌嗪、吗啉等。
术语“芳杂环”代表具有5-6个成环原子、含有一到四个杂原子(选自N、O、S)且遵守Hückel规则的单环体系。示例包括但不限于吡啶环、嘧啶环、哒嗪环、吡嗪环、呋喃环、噻吩环、噻唑环、噁唑环、异噁唑环、异噻唑环、咪唑环、吡唑环、三氮唑环、四氮唑环等。
术语“烷氧基”表示末端含有一个氧原子的直链或支链烷基，示例包括但不限于甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基等。
术语“取代”是指用指定取代基的基团置换特定结构中的氢基。本发明中烷基或环烷基上的取代，如没有指明发生在特定的碳原子上，则表示可以发生在任何取代基个数尚未达到饱和的碳原子上。多个取代基从同一系列中选择时，它们可以相同，也可以不同。本发明中苯环、芳杂环或者杂环上的取代，如没有指明发生在特定的原子上，则表示可以发生在任何未被除氢与外的其它原子取代的位置。多个取代基从同一系列中选择时，它们可以相同，也可以不同。
术语“溶剂化物”在文中用来描述包含本发明化合物和化学计量的一种或多种药学上可接受的溶剂分子(如乙醇)的分子络合物。当所述溶剂是水时采用术语“水合物”。
通式I中圆形虚线表示该五元环中不确定位置具有双键，整个环形成共轭体系。
通式中由环状结构外部指向环内的单线条表示具有取代基，但取代位置不固定。
本发明包括式I-II化合物的游离形式，也包括其药学上可接受的盐及立体异构体及溶剂化物和前药。可通过常规化学方法自含有碱性部分或酸性部分的本发明化合物合成本发明的药学上可接受的盐。通常，通过离子交换色谱或通过游离碱和化学计算量或过量的所需盐形式的无机或有机酸在适当溶剂或多种溶剂的组合中反应制备碱性化合物的盐。类似的，通过和适当的无机或有机碱反应形成酸性化合物的盐。
因此，本发明化合物的药学上可接受的盐包括通过碱性本发明化合物和无机或有机酸反应形成的本发明化合物的常规无毒盐。例如，常规的无毒盐包括自无机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等制备的盐，也包括自有机酸例如乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、扑酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、对氨基苯磺酸、2一乙酰氧基一苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙烷二磺酸、草酸、羟乙基磺酸、三氟乙酸等制备的盐。
如果本发明化合物为酸性的，则适当的“药学上可接受的盐”指通过药学上可接受的无毒碱包括无机碱及有机碱制备的盐。得自无机碱的盐包括铝盐、铵盐、钙盐、铜盐、铁盐、亚铁盐、锂盐、镁盐、锰盐、亚锰盐、钾盐、钠盐、锌盐等。特别优选铵盐、钙盐、镁盐、钾盐和钠盐。得自药学上可接受的有机无毒碱的盐，所述碱包括伯胺、仲胺和叔胺的盐，取代的胺包括天然存在的取代胺、环状胺及碱性离子交换树脂例如精氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱、N,N'－二苄基乙二胺、二乙胺、2一二乙基氨基乙醇、2一二甲基氨基乙醇、氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N一乙基吗啉、N一乙基哌啶、葡萄糖胺、氨基葡萄糖、组氨酸、羟钴胺、异丙基胺、赖氨酸、甲基葡萄糖胺、吗啉、哌嗪,哌啶、呱咤、多胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨基丁三醇等。
除在文献中已知的或在实验程序中例证的标准方法外，可采用如下实施例中的方法制备本发明化合物。结合下述的合成方案，能够对本发明中所述的化合物以及合成方法进行更好的理解。实例中的所有参数及其余说明，除另加说明外，都是以质量为依据的。柱层析分离所用填料若未说明均为硅胶。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。所述的合成方案描述了可以用于制备本发明中所述的化合物的方法，所述的方法仅仅是为说明目的的说明性方案描述，并不构成对本发明所具有的范围的限制。
以下实施例中所用缩写释义如下：
DMF：N,N-二甲基甲酰胺
NCS：N-氯代丁二酰亚胺
HATU：2-(7-氮杂-1H-苯并三氮唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸酯
PCC：氯铬酸吡啶盐
THF：四氢呋喃
NMP：N-甲基吡咯烷酮
Boc：叔丁氧羰基
DIPEA：N,N-二异丙基乙胺
DBU：1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯
3nd Ruphos Pd：甲磺酸(2-二环己基膦基-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯基)(2-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯
Pd2(dba)3：三(二亚苄基丙酮)二钯
BINAP：1,1’-联萘-2,2’-苯基膦
Xantphos：4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽
实施例1
3-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羰基}苯甲酸的制备。
按照以下线路进行制备：
(1)2,6-二氯苯甲醛肟的制备。
将2,6-二氯苯甲醛(5.0g,28.6mmol)溶于无水乙醇(45mL)中，室温下搅拌，依次加入NH2OH·HCl(2.3g,33.1mmol)，NaOH(1.3g，32.5mmol)和水(20mL)，90℃油浴下回流过夜。反应液冷却至室温后，旋干溶剂，加入水(100mL)，用乙酸乙酯(2×100mL)萃取，合并有机层，用饱和盐水(2×100mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，旋干，加入石油醚(100mL)，搅匀，过滤，烘干，得3.5g白色固体2,6-二氯苯甲醛肟，收率：64％。
(2)氯代2,6-二氯苯甲醛肟的制备。
将2,6-二氯苯甲醛肟(4.7g，24.7mmol)溶于DMF(40mL)中，加入NCS(3.3g，24.7mmol)，室温搅拌反应1h。将反应液倒入水(100mL)中，用乙醚(2×150mL)萃取，合并有机层，有机层用饱和盐水(3×100mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，旋干，得5.5g黄色油状物，即为氯代2,6-二氯苯甲醛肟，不纯化直接进行下一步反应。
(3)5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-甲酸乙酯的制备。
将氯代2,6-二氯苯甲醛肟(4.8g，21.1mmol)溶于Et3N(40mL)，加入3-环丙基-3-氧代丙酸乙酯(6.3g，40.6mmol)，再加入THF(20mL)，室温搅拌反应过夜。将反应液倒入水(150mL)中，用乙酸乙酯(2×150mL)萃取，有机层用饱和盐水(2×150ml)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，旋干，柱层析纯化(洗脱液：PE/EA＝100/1)得4.2g白色固体化合物，即为5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-甲酸乙酯，收率：60％。
(4)[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑4-基]甲醇的制备。
0℃，氮气保护下于250ml双口瓶中，将四氢锂铝(750mg,19.8mmol)加入无水THF(40mL)中，搅匀后滴加溶有5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-甲酸乙酯(4.15g，12.7mmol)的无水THF溶液(40mL)，继续0℃反应2h。依次滴加水(0.8mL)、15％NaOH溶液(0.8mL)和水(2.4mL)，升至室温搅拌15分钟后，硅藻土过滤，乙酸乙酯洗涤，旋干溶剂后，经柱层析纯化(洗脱液：PE/EA＝10/1)得2.8g白色固体，即为[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑4-基]甲醇，收率：78％。
(5)4-(氯甲基)-5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑的制备。
将[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑4-基]甲醇(180mg,0.63mmol)溶于DCM(5mL)，冰浴冷却，加入氯化亚砜(138μL，1.90mmol)和DMF(3滴)，室温反应1小时。旋干，经柱层析纯化得173mg淡黄色油状物，即为4-(氯甲基)-5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑，收率：91％。
(6)4-亚甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯的制备。
0℃下，向乙醚(90mL)中加入甲基三苯基溴化膦(14.7g,40.5mmol)和叔丁醇钾(4.38g,39mmol)，加完后室温搅拌2小时。反应液用冰浴冷却，将4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(5.98g,30mmol)溶于乙醚(30mL)并滴加到上述反应液中，室温反应过夜。过滤，旋干，柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝50：1)得无色油状液体5.2g，即为4-亚甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯，收率：88％。
表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:4.75(s,2H),3.43(t,J＝5.6Hz,4H),2.19(t,J＝5.6Hz,4H),1.48(s,9H)。
(7)1,2-二氯-2-氧代-7-氮杂[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯的制备。
将4-亚甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1g,5.07mmol)溶于乙醚(20mL)，加入铜锌试剂(4.4g,34.5mmol)，氮气保护、10℃下，滴加溶有三氯乙酰氯(1.84mL,16.5mmol)的DME(5mL)溶液，继续室温反应过夜。将反应液缓慢倒入-10℃的饱和食盐水(30mL)中，硅藻土过滤，乙酸乙酯(20mL×3)萃取，饱和食盐水(30mL×2)洗涤，干燥，旋干，柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝15：1)得棕色油状液体880mg，即为1,2-二氯-2-氧代-7-氮杂[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯，收率：56％。不纯化直接进行下一步反应。
(8)2-氧代-7-氮杂[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯的制备。
将1,2-二氯-2-氧代-7-氮杂[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(880mg,2.88mmol)溶于甲醇(10mL)，加入饱和氯化铵溶液(10mL)和锌粉(1.12g)，室温反应过夜。过滤，旋干，加水(20mL)，用乙酸乙酯(20mL×2)萃取，饱和食盐水(20mL x2)洗涤，有机层经无水硫酸钠干燥，旋干，柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝8：1)得无色油状物490mg，即为2-氧代-7-氮杂[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯，收率：72％。
表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:3.43(t,J＝5.6Hz,4H),2.84(s,4H),1.72(t,J＝5.6Hz,4H),1.49(s,9H)。
(9)2-羟基-7-氮杂[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯的制备。
将2-氧代-7-氮杂[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(490mg,2.05mmol)溶于甲醇(10mL)，冰浴冷却，分批加入硼氢化钠(156mg,4.10mmol)，室温反应1小时。旋干，加水(20mL)，用乙酸乙酯(20mL×2)萃取，饱和食盐水(20mL x2)洗涤，有机层经无水硫酸钠干燥，旋干，柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝3：1)得白色固体450mg，即为2-羟基-7-氮杂[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯，收率：91％。
表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:4.35(m,1H),3.33(m,4H),2.30(m,2H),1.70(m,3H),1.53(m,4H),1.47(m,9H)。
(10)2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-7-氮杂螺[3.5]-7-甲酸叔丁酯的制备。
将2-羟基-7-氮杂[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯(241mg,1mmol)溶于四氢呋喃(5mL)，加入18-冠醚-6(317mg,1.2mmol)和叔丁醇钾(135mg,1.2mmol)，室温搅拌10分钟，再加入4-(氯甲基)-5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑(302mg,1mmol)，继续室温反应过夜。将溶剂旋干，加水(20mL)，用乙酸乙酯(15mL×2)萃取，有机层经无水硫酸钠干燥，旋干，柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝10：1)得370mg淡黄色浆状物，即为2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-7-氮杂螺[3.5]-7-甲酸叔丁酯，收率：73％。
表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:7.45-7.43(m,2H),7.34(m,1H),4.17(s,2H),3.91(m,1H),3.29(t,J＝5.6Hz,2H),3.25(t,J＝5.6Hz,2H),2.15(m,1H),2.00(m,2H),1.49-1.38(m,15H),1.28(m,2H),1.14(m,2H)。
(11)4-{[7-氮杂[3.5]壬烷-2-氧基]甲基}-5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑的制备。
将2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-7-氮杂螺[3.5]-7-甲酸叔丁酯(370mg,0.37mmol)溶于二氯甲烷(5mL)，加入三氟乙酸(1mL)，室温搅拌1小时后，将反应液旋干，加入饱和碳酸氢钠(15mL)，用二氯甲烷(15mL×2)萃取，有机层经无水硫酸钠干燥，旋干得235mg黄色浆状物，即为4-{[7-氮杂[3.5]壬烷-2-氧基]甲基}-5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑，收率：80％。不纯化直接进行下一步反应。
(12)3-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羰基}苯甲酸甲酯的制备。
将4-{[7-氮杂[3.5]壬烷-2-氧基]甲基}-5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑(100mg,0.25mmol)溶于二氯甲烷(5mL)，加入间苯二甲酸单甲酯(57mg,0.32mmol)、三乙胺(104μL，0.75mmol)和HATU(131mg,0.34mmol)，室温搅拌过夜。将反应液倒入水(15mL)中，用二氯甲烷萃取(15mL×2)萃取，有机层经无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝3：1)得95mg白色固体，即为3-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羰基}苯甲酸甲酯，收率：68％。
表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.10(m,1H),8.05(m,1H),7.59(m,1H),7.51(t,J＝7.6Hz,1H),7.45-7.43(m,2H),7.39-7.35(m,1H),4.18(s,2H),3.95(m,4H),3.63(m,2H),3.22(m,2H),2.15(m,1H),2.05(m,2H),1.61-1.44(m,6H),1.29(m,2H),1.14(m,2H)。
(13)3-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羰基}苯甲酸的制备。
将3-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羰基}苯甲酸甲酯(90mg,0.16mmol)溶于四氢呋喃(2mL)、甲醇(2mL)和水(1mL)中，加入氢氧化锂一水合物(33mg,0.79mmol)，室温反应2小时。旋干，加水(15mL)，用1N HCl调pH至2左右，过滤，烘干，得75mg白色固体，即为3-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羰基}苯甲酸，即为，收率：86％。
表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.15(m,1H),8.10(m,1H),7.65(m,1H),7.54(t,J＝7.6Hz,1H),7.45-7.43(m,2H),7.38-7.34(m,1H),4.19(s,2H),3.93(m,1H),3.64(m,2H),3.25(m,2H),2.15(m,1H),2.07(m,2H),1.55-1.45(m,6H),1.28(m,2H),1.14(m,2H)。
实施例2
2-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制备。
(1)2-氨基苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯的制备。
将4-氨基苯甲酸乙酯(4.9g，30.0mmol)，硫氰酸钾(11.6g，120.0mmol)溶于乙酸(180mL)中，19℃下滴加溴素(1.5mL，30.0mmol)的乙酸(20mL)溶液，20min加完，升至室温反应过夜。将反应液倒入水(100mL)中，搅拌10分钟，滴加氨水调至pH为8左右，过滤，滤饼依次用水洗、石油醚洗，真空干燥，得黄色固体6.7g，即为2-氨基苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯，收率：100％。
表征数据为：1H NMR(400MHz,DMSO)δ:8.28(d,J＝1.6Hz,1H),7.88(s,2H),7.82(dd,J＝1.6Hz,8.4Hz,1H),7.37(d,J＝8.4Hz,1H),4.29(q,J＝7.2Hz,2H),1.32(t,J＝7.2Hz,3H)。
(2)2-氯苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯的制备。
500ml单口瓶中，加入氯化铜(6.0g，44.6mmol)、亚硝酸叔丁酯(7.1mL，59.4mmol)和乙腈(200mL)，冷至0℃，分批加入2-氨基苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯(6.6g，29.7mmol)，30分钟加完，升至室温反应过夜。硅藻土过滤，滤液滴加1N HCl(60mL)搅拌10分钟，分层，水层用乙酸乙酯萃取(100mL)，合并有机层，水洗，饱和盐水洗，Na2SO4干燥，过滤，旋干，柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝25：1)得淡黄色固物6.2g，即为2-氯苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯，收率：86％。
表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.54(d,J＝0.8Hz,1H),8.20(dd,J＝1.6Hz,8.4Hz,1H),8.01(d,J＝8.0Hz,1H),4.45(q,J＝7.2Hz,2H),1.45(t,J＝7.2Hz,3H)。
(3)2-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯的制备。
将4-{[7-氮杂[3.5]壬烷-2-氧基]甲基}-5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑(130mg,0.32mmol)溶于DMF(3mL)，加入2-氯苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯(100mg,0.42mmol)和三乙胺(89μL,0.65mmol)，100℃加热反应1小时。待反应液冷至室温，将其倒入水(20mL)中，用乙酸乙酯(15mL×2)萃取，有机层用饱和食盐水(15mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，经柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝5:1)得180mg淡黄色固体，即为2-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯，收率：93％。
表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.30(d,J＝1.6Hz,1H),8.01(dd,J＝8.4Hz,1.6Hz,1H),7.51(d,J＝8.4Hz,1H),7.46-7.44(m,2H),7.39-7.35(m,1H),4.39(q,J＝7.2Hz,2H),4.20(s,2H),3.97(m,1H),3.58(t,J＝5.6Hz,2H),3.52(t,J＝5.6Hz,2H),2.16(m,1H),2.08(m,2H),1.65-1.54(m,6H),1.29(m,2H),1.15(m,2H)。
(4)2-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制备。
将2-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯(180mg,0.29mmol)溶于四氢呋喃(2mL)、甲醇(2mL)和水(1mL)中，加入氢氧化锂一水合物(62mg,1.47mmol)，室温反应过夜。旋干，加水(15mL)，用1NHCl调pH至2左右，过滤，烘干，得146mg白色固体，即为2-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸，收率：85％。
表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.36(s,1H),8.05(m,1H),7.53(d,J＝8.4Hz,1H),7.47-7.44(m,2H),7.39-7.35(m,1H),4.20(s,2H),3.97(m,1H),3.59(m,2H),3.52(m,2H),2.16(m,1H),2.08(m,2H),1.65-1.54(m,6H),1.29(m,2H),1.15(m,2H)。
实施例3
3-{6-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑4-基]甲氧基}2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-羰基}苯甲酸的制备。
(1)6-羟基-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸叔丁酯的制备。
参照实施例1制备2-羟基-7-氮杂[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯的方法制备6-羟基-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸叔丁酯，仅是用3-氧代氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯代替4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯。
产物表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:4.20(m,1H),3.90(s,2H),3.89(s,2H),2.55(m,2H),2.09(m,2H),1.95(m,1H),1.44(s,9H)。
(2)3-{6-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑4-基]甲氧基}2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-羰基}苯甲酸的制备。
参照实施例1制备3-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑4-基]甲氧基}-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羰基}苯甲酸的方法制备3-{6-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-羰基}苯甲酸，仅是用6-羟基-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸叔丁酯代替2-羟基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯。
产物表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.31(s,1H),8.21(d,J＝8.0Hz,1H),7.92(d,J＝7.6Hz,1H),7.56(t,J＝7.6Hz,1H),7.45-7.33(m,3H),4.25-4.10(m,6H),3.83(m,1H),2.38(m,2H),2.13(m,1H),1.94(m,2H),1.28(m,2H),1.14(m,2H)。
实施例4
2-{6-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制备。
参照实施例2的方法制备，仅是用6-羟基-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸叔丁酯代替2-羟基7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯。
产物表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.38(d,J＝1.6Hz,1H),8.08(dd,J＝1.6Hz,8.4Hz,1H),7.61(d,J＝8.8Hz,1H),7.47-7.45(m,2H),7.40-7.36(m,1H),4.20(s,2H),4.17(s,2H),4.10(s,2H),3.87(m,1H),2.42(m,2H),2.15(m,1H),2.02(m,2H),1.28(m,2H),1.15(m,2H)。
实施例5
3-{8-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-羰基}苯甲酸的制备。
(1)3-苄基-3-氮杂双环[3.2.1]-8-酮的制备。
3-苄基-3-氮杂双环[3.2.1]-8-酮的合成同WO2011025690所述。将苄胺(2.68g,25mmol)溶于叔丁醇(6mL)，10℃下加入多聚甲醛(1.5g,50mmol)、浓盐酸(2.37mL,27.5mmol)和环戊酮(5.46g,65mmol)，80℃反应3小时。冷却，旋干，加丙酮(30mL)，过滤得3.58g白色固体。于100mL单口瓶中加入乙酸(20mL)、浓盐酸(1.25mL,13.5mmol)和多聚甲醛，加热至95℃。将上述所得固体溶于乙酸(20mL)并滴加至上述反应液中，半小时加完，并继续反应1小时。冷却，旋除溶剂，加水(30mL)和二氯甲烷(30mL)，用氢氧化钠溶液调pH至10，分层，水层用二氯甲烷(30mL×2)萃取，合并有机层，无水硫酸钠干燥，旋干，柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝25：1)得无色油状液体2.21g，即为3-苄基-3-氮杂双环[3.2.1]-8-酮，收率：41％。
表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:7.38-7.26(m,5H),3.62(s,2H),3.00(m,2H),2.57(m,2H),2.18(m,2H),2.09(m,2H),1.88(m,2H)。
(2)3-苄基-3-氮杂双环[3.2.1]-8-醇的制备。
将3-苄基-3-氮杂双环[3.2.1]-8-酮(2.15g,10mmol)溶于甲醇(40mL)，冰浴冷却，分批加入硼氢化钠(570mg,15mmol)，升至室温反应2小时。旋干，加水(50mL)，用乙酸乙酯(50mL×2)萃取，饱和食盐水(50mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干得淡黄色固体2.0g，即为3-苄基-3-氮杂双环[3.2.1]-8-醇，不纯化直接进行下一步反应。
(3)8-羟基-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯的制备。
将3-苄基-3-氮杂双环[3.2.1]-8-醇(2.0g,9.20mmol)溶于甲醇(30mL)，通入氢气，室温反应过夜。用硅藻土过滤，旋干，将所得物溶于二氯甲烷(30mL)，并加入三乙胺(2.55mL,18.4mmol)和Boc酸酐(2.29mL,11.0mmol)，室温反应4小时。旋干，柱层析纯化得白色固体1.5g，即为8-羟基-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯，收率：72％。
表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:4.06(m,1H),3.71(m,1H),3.57(m,1H),3.39(m,1H),3.31(m,1H),2.01(m,2H),1.74(m,3H),1.63-1.57(m,2H),1.48(s,9H)。
(4)3-{8-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-羰基}苯甲酸的制备。
参照实施例1制备3-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑4-基]甲氧基}-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-羰基}苯甲酸的方法制备3-{8-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-羰基}苯甲酸，仅是用8-羟基-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯代替2-羟基7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯。
产物表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.14(m,1H),8.06(s,1H),7.62(m,1H),7.53(m,1H),7.49-7.45(m,2H),7.43-7.39(m,1H),4.37(m,2H),4.20(m,1H),3.61(m,1H),3.26(m,1H),3.02(m,1H),2.88(m,1H),2.15(m,2H),1.91(m,1H),1.66(m,3H),1.40(m,1H),1.29(m,2H),1.16(m,2H)。
实施例6
2-{8-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制备。
参照实施例2的方法制备，仅是用8-羟基-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯代替2-羟基7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯。
产物表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.42(d,J＝1.6Hz,1H),8.11(dd,J＝1.6Hz,8.4Hz,1H),7.60(d,J＝8.4Hz,1H),7.29-7.27(m,2H),7.07(m,1H),4.42(s,2H),3.73(t,J＝5.2Hz,1H),3.49(m,2H),3.21(m,2H),2.24(m,2H),2.13(m,2H),1.75-1.62(m,4H),1.28(m,2H),1.15(m,2H)。
实施例7
3-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-羰基}苯甲酸的制备。
(1)2-羟基-6-氮杂[3.4]辛烷-6-甲酸叔丁酯的制备。
参照实施例1制备2-羟基-7-氮杂[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯的方法制备，仅是用3-氧代吡咯烷-1-甲酸叔丁酯代替4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯。
产物表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:4.35(m,1H),3.31(m,4H),2.36(m,2H),1.98-1.75(m,5H),1.48(s,9H)。
(2)3-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-羰基}苯甲酸的制备。
参照实施例1的方法制备，仅是用2-羟基-6-氮杂螺[3.4]辛烷--6-甲酸叔丁酯代替2-羟基7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯。
产物表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.24(s,1H),8.18(m,1H),7.78(d,J＝7.6Hz,1H),7.55(m,1H),7.48-7.42(m,1H),7.38-7.33(m,2H),4.22(s,1H),4.14(s,1H),3.93(m,1H),3.68-3.60(m,1H),3.52(m,1H),3.43(m,1H),3.30(d,J＝11.6Hz,1H),2.28-1.98(m,3H),1.89-1.82(m,3H),1.74-1.61(m,1H),1.27(m,2H),1.13(m,2H)。
实施例8
2-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制备。
参照实施例2的方法制备，仅是用2-羟基-6-氮杂螺[3.4]辛烷--6-甲酸叔丁酯代替2-羟基7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯。
产物表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.39(s,1H),8.08(d,J＝8.4Hz,1H),7.59(d,J＝8.4Hz,1H),7.47-7.44(m,2H),7.40-7.34(m,1H),4.22(s,1H),3.98(m,1H),3.54(m,4H),2.26-2.14(m,3H),2.01(t,J＝6.8Hz,2H),1.85(m,2H),1.29(m,2H),1.16(m,2H)。
实施例9
3-{6-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-基}苯甲酸的制备。
(1)3-{6-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-基}苯甲酸甲酯的制备。
将4-[(2-氮杂[3.3]庚烷-6-氧基)甲基]-5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑(230mg,0.61mmol)溶于甲苯(8mL)，加入间溴苯甲酸甲酯(156mg,0.73mmol)、醋酸钯(6.8mg,0.03mmol)、BINAP(19mg,0.03mmol)和碳酸铯(298mg,0.91mmol)，氩气保护，100℃反应过夜。待反应液冷至室温，用硅藻土过滤，旋干，经柱层析纯化得130mg白色固体，即为3-{6-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-基}苯甲酸甲酯，收率：41％。
表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:7.48-7.45(m,2H),7.42-7.37(m,2H),7.26(m,1H),7.07(m,1H),6.59(m,1H),4.20(s,2H),3.91(s,3H),3.87(m,1H),3.82(s,2H),3.76(s,2H),2.36(m,2H),2.16(m,1H),1.95(m,2H),1.29(m,2H),1.15(m,2H)。
(2)3-{6-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-基}苯甲酸的制备。
将3-{6-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-基}苯甲酸甲酯(130mg,0.25mmol)溶于四氢呋喃(2mL)、甲醇(2mL)和水(1mL)中，加入氢氧化锂一水合物(53mg,1.27mmol)，室温反应20小时。旋干，加水(10mL)，用1N HCl调pH至3，过滤，烘干得灰白色固体110mg，即为3-{6-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-2-氮杂螺[3.3]庚烷-2-基}苯甲酸，收率：90％。
表征数据为：1H NMR(400MHz,DMSO)δ:7.69-7.66(m,2H),7.62-7.58(m,2H),7.24(m,1H),6.89(m,1H),6.59(m,1H),4.12(s,2H),3.80(m,1H),3.74(s,2H),3.64(s,2H),2.30(m,3H),1.75(m,2H),1.15(m,2H),1.10(m,2H).
实施例10
3-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}苯甲酸的制备。
参照实施例9的方法制备，仅是用2-羟基-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸叔丁酯代替6-羟基-2-氮杂螺[3.3]庚烷--2-甲酸叔丁酯。
产物表征数据为：1H NMR(400MHz,DMSO)δ:7.68-7.64(m,2H),7.60-7.55(m,1H),7.27-7.22(m,1H),7.16(m,1H),7.01(m,1H),6.68(m,1H),4.13(d,J＝1.6Hz,2H),3.91(m,1H),3.22-3.15(m,4H),2.32(m,1H),2.07(m,2H),1.83(m,2H),1.59(m,2H),1.14(m,2H),1.10(m,2H).
实施例11
2-{10-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-8-氮杂双环[4.3.1]癸烷-8-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制备。
(1)10-羟基-8-氮杂双环[4.3.1]癸烷--8-甲酸叔丁酯的制备。
参照实施例5制备8-羟基-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯的方法制备，仅是用环庚酮代替环戊酮。
产物表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:4.16(m,1H),4.06(m,1H),4.00(m,1H),2.85(m,2H),2.17(m,2H),2.00(m,2H),1.72(m,2H),1.62-1.51(m,4H),1.48(s,9H)。
(2)2-{10-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-8-氮杂双环[4.3.1]癸烷-8-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制备。
参照实施例2的方法制备，仅是用10-羟基-8-氮杂双环[4.3.1]癸烷--8-甲酸叔丁酯代替2-羟基7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯。
产物表征数据为：1H-NMR(400MHz,DMSO)δ:8.14(m,1H),8.06(s,1H),7.62(m,1H),7.53(m,1H),7.49-7.45(m,2H),7.43-7.39(m,1H),4.37(m,2H),4.20(m,1H),3.61(m,1H),3.26(m,1H),3.02(m,1H),2.88(m,1H),2.15(m,2H),1.91(m,1H),1.66(m,3H),1.40(m,1H),1.29(m,2H),1.16(m,2H)。
实施例12
2-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}-4-甲氧基苯并[d]噻唑-6-甲酸的制备。
(1)2-氨基-4-甲氧基苯并[d]噻唑-6-甲酸甲酯的制备。
将硫氰酸钾(2.1g,22.0mmol)溶于乙酸(5mL)中，10℃下滴加4-氨基-3-甲氧基苯甲酸甲酯(1.0g,5.5mmol)的乙酸溶液(5mL)，10分钟加完，再滴加溴(283μL,5.5mmol)的乙酸溶液(5mL)，升至室温反应4h。加入水(25mL)稀释，用氨水调pH至8～9，过滤，洗涤，真空干燥得1.38g橙色固体，即为2-氨基-4-甲氧基苯并[d]噻唑-6-甲酸甲酯。收率：100％。
表征数据为：1H NMR(400MHz,DMSO)δ:7.94(d,J＝1.2Hz,1H),7.82(s,2H),7.34(d,J＝1.2Hz,1H),3.88(s,3H),3.83(s,3H)。
(2)2-氯-4-甲氧基苯并[d]噻唑-6-甲酸甲酯的制备。
将无水氯化铜(1.11g,8.25mmol)和亚硝酸叔丁酯(1.3mL,11.0mmol)加入到乙腈(20mL)中，室温下搅拌10分钟，分批加入2-氨基-4-甲氧基苯并[d]噻唑-6-甲酸甲酯(1.38g,5.5mmol)，15分钟加完，继续反应16h。硅藻土过滤，滤液加入1N HCl(15mL)搅拌15分钟，分层，水层用乙酸乙酯(15mL×2)萃取，合并有机层，饱和盐水(15mL×2)洗，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝20：1)得600mg白色固体，即为2-氯-4-甲氧基苯并[d]噻唑-6-甲酸甲酯。收率：42％。
表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.12(d,J＝1.6Hz,1H),7.61(d,J＝1.6Hz,1H),4.10(s,3H),3.98(s,3H)。
(3)2-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}-4-甲氧基苯并[d]噻唑-6-甲酸的制备。
参照实施例8的方法制备，仅是用2-氯-4-甲氧基苯并[d]噻唑-6-甲酸甲酯代替2-氯苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯。1H-NMR(400MHz,DMSO)δ:8.00(t,J＝1.6Hz,1H),7.69-7.65(m,2H),7.61-7.55(m,1H),7.38(m,1H),4.14(d,J＝4.0Hz,1H),3.96-3.89(m,4H),3.42(m,4H),2.32(m,1H),2.11(m,2H),1.94(m,1H),1.89(m,1H),1.68(m,1H),1.59(m,1H),1.16(m,2H),1.10(m,2H).
实施例13
2-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}-4-氟苯并[d]噻唑-6-甲酸的制备。
(1)3-氟-4-氨基苯甲酸甲酯的制备。
将3-氟-4-硝基苯甲酸甲酯(1.0g,5.0mmol)溶于乙酸乙酯(5mL)和甲醇(5mL)中，加入10％Pd/C(150mg)，氢气氛围下室温反应16h。硅藻土过滤，旋干溶剂得830mg白色固体，即为3-氟-4-氨基苯甲酸甲酯。收率：98％。
表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:7.69(m,1H),7.66(m,1H),6.76(m,1H),4.17(s,2H),3.88(s,3H)。
(2)2-氨基-4-氟苯并[d]噻唑-6-甲酸甲酯的制备。
将3-氟-4-氨基苯甲酸甲酯(830mg,4.9mmol)和硫氰酸钾(1.9mg,19.6mmol)溶于乙酸中(10mL)，10℃下滴加溴(250μL,4.9mmol)的乙酸溶液(5mL)，30min加完，升至30℃反应48h。加入水(30mL)稀释，用氨水调pH至8～9，过滤，用水洗涤，真空干燥得530mg黄色固体，即为2-氨基-4-氟苯并[d]噻唑-6-甲酸甲酯。收率：48％。
表征数据为：1H NMR(400MHz,DMSO)δ:8.16(m,1H),8.14(s,2H),7.56(m,1H),3.83(s,3H)。
(3)2-氯-4-氟苯并[d]噻唑-6-甲酸甲酯的制备。
将无水氯化铜(474mg,3.53mmol)和亚硝酸叔丁酯(0.56ml,4.7mmol)加入到乙腈(10mL)中，室温下搅拌10分钟，分批加入2-氨基-4-氟苯并[d]噻唑-6-甲酸甲酯(530mg,2.35mmol)，15分钟加完，继续反应16h。硅藻土过滤，滤液加入1N HCl(15mL)搅拌15分钟，分层，水层用乙酸乙酯(15mL×2)萃取，合并有机层，饱和盐水(15mL×2)洗，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝30：1)得350mg白色固体，即为2-氯-4-氟苯并[d]噻唑-6-甲酸甲酯。收率：60％。
表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.33(d,J＝1.6Hz,1H),7.88(dd,J＝1.6Hz,9.2Hz,1H),3.99(s,3H)。
(4)2-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}-4-氟苯并[d]噻唑-6-甲酸的制备。
参照实施例8的方法制备，仅是用2-氯-4-氟苯并[d]噻唑-6-甲酸甲酯代替2-氯苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯。1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.18(s,1H),7.89(m,1H),7.48-7.44(m,2H),7.41-7.34(m,1H),4.22(s,2H),3.98(m,1H),3.56(m,4H),2.26-2.13(m,3H),2.02(t,J＝6.8Hz,2H),1.84(m,2H),1.29(m,2H),1.16(m,2H)。
实施例14
2-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}苯并[d]噁唑-6-甲酸的制备。
(1)2-巯基苯并[d]噁唑-6-甲酸乙酯的制备。
将4-氨基-3-羟基-苯甲酸甲酯(0.5g,3mmol)溶于乙醇(15mL)，加入乙基黄原酸钾(577mg,3.6mmol)，加热回流反应过夜。待反应液冷至室温，旋干，所得物加水(25mL)溶解，用1N HCl调pH至5，过滤，烘干，得棕色固体370mg，即为2-巯基苯并[d]噁唑-6-甲酸乙酯。收率：59％。
(2)2-氯苯并[d]噁唑-6-甲酸乙酯的制备。
将2-巯基苯并[d]噁唑-6-甲酸乙酯(370mg,1.77mmol)溶于氯化亚砜(8mL)，加入3滴DMF，80℃反应10分钟。冷至室温，旋干，加入乙酸乙酯(30mL)和水(30mL)，有机层经无水硫酸钠干燥，旋干，柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝15:1)得270mg淡黄色固体，即为2-氯苯并[d]噁唑-6-甲酸乙酯，收率：72％。
(3)2-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}苯并[d]噁唑-6-甲酸乙酯的制备。
将4-[(6-氮杂螺[3.4]辛烷-2-氧基)甲基]-5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑(80mg,0.174mmol)和2-氯苯并[d]噁唑-6-甲酸乙酯(43mg,0.191mmol)溶于5ml乙腈中，加入三乙胺(60μl,0.450mmol)，80℃下回流反应1.5h。反应液冷却至室温，旋干，柱层析纯化(洗脱液：石油醚/乙酸乙酯＝2/1)得95mg无色油状物，即为2-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}苯并[d]噁唑-6-甲酸乙酯。收率：89％。
(4)2-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}苯并[d]噁唑-6-甲酸的制备。
将2-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}苯并[d]噁唑-6-甲酸乙酯(90mg,0.156mmol)溶于2ml四氢呋喃和2ml甲醇中，加入氢氧化锂(33mg,0.788mmol)和水(1mL)，室温下反应16h。旋干溶剂，加入10ml水溶解，用1M盐酸调pH至3-4，过滤，洗涤，真空干燥得57mg白色固体，即为2-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}苯并[d]噁唑-6-甲酸。收率：65％。
表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.04-8.00(m,2H),7.47-7.44(m,2H),7.40-7.34(m,2H),4.22(s,2H),3.98(m,1H),3.67(m,2H),3.58(s,1H),3.54(s,1H),2.25-2.13(m,3H),1.97(t,J＝6.8Hz,2H),1.83(m,2H),1.30(m,2H),1.15(m,2H).
实施例15
(R)-2-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-7-甲基-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制备。
(1)(2S,4R)-1-叔丁氧羰基-4-[(叔丁基二甲基硅基)氧基]吡咯烷-2-甲酸甲酯的制备。
将Boc-L-羟脯氨酸乙酯(5g,20.4mmol)和咪唑(2.92g,42.8mmol)溶于DMF(50mL)，加入TBSCl(3.38g,22..4mmol)，室温反应过夜。将反应液倒入水(100mL)中，用乙酸乙酯(100mL×2)萃取，合并有机层，再用饱和食盐水(100mL×3)洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干，柱层析纯化得7.26g无色油状物，即为(2S,4R)-1-叔丁氧羰基-4-[(叔丁基二甲基硅基)氧基]吡咯烷-2-甲酸甲酯，收率：99％。
(2)(2S,4R)-4-[(叔丁基二甲基硅基)氧基]-2-(羟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯的制备。
将(2S,4R)-1-叔丁氧羰基-4-[(叔丁基二甲基硅基)氧基]吡咯烷-2-甲酸甲酯(7.8g,21.7mmol)溶于四氢呋喃(60mL)，冷却至0℃，加入2M硼氢化锂四氢呋喃溶液(16.3mL)，室温反应5小时后，加入乙酸乙酯(20mL)，冷却至0℃，滴加1N HCl淬灭反应，加水(100mL)，用乙酸乙酯(100mL×2)萃取，合并有机层，再用饱和食盐水(100mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干得6.81g淡黄色油状物，收率：95％。
(3)(2S,4R)-4-[(叔丁基二甲基硅基)氧基]-2-{[(甲磺酰基)氧基]甲基}吡咯烷-1-甲酸叔丁酯的制备。
将(2S,4R)-4-[(叔丁基二甲基硅基)氧基]-2-(羟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(6.81g,20.6mmol)溶于二氯甲烷(60mL)，加入三乙胺(5.7Ml,41.2mmol)，冷却至0℃，滴加甲磺酰氯(3.54g,30.9mmol)，0℃反应过夜。将反应液倒入水(100mL)中，用二氯甲烷(60mL×2)萃取，合并有机层，再用饱和食盐水(100mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干得8.4g棕色油状物，即为(2S,4R)-4-[(叔丁基二甲基硅基)氧基]-2-{[(甲磺酰基)氧基]甲基}吡咯烷-1-甲酸叔丁酯，收率：99％。
(4)(2S,4R)-4-[(叔丁基二甲基硅基)氧基]-2-甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯的制备。
将(2S,4R)-4-[(叔丁基二甲基硅基)氧基]-2-{[(甲磺酰基)氧基]甲基}吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(3g,7.32mmol)溶于四氢呋喃(30mL)，冷却至5℃，滴加1M三乙基硼氢化钠四氢呋喃溶液(22mL)，并升至室温继续反应2小时。冷却至0℃，滴加水淬灭反应，加水(50mL)，用乙酸乙酯(50mL×2)萃取，饱和食盐水洗涤(50mL×2)，无水硫酸钠干燥，旋干得2.2g无色油状物，即为(2S,4R)-4-[(叔丁基二甲基硅基)氧基]-2-甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯，收率：98％。
(5)(2S,4R)-4-羟基-2-甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯的制备。
将(2S,4R)-4-[(叔丁基二甲基硅基)氧基]-2-甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(2.2g,6.98mmol)溶于四氢呋喃(30mL)，加入四丁基氟化铵(3.65g,14.0mmol)，室温反应过夜。将反应液倒入水(60mL)中，用乙酸乙酯(60mL×2)萃取，饱和食盐水(60mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干，经柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝2:1)得1.47g黄色油状物，即为(2S,4R)-4-羟基-2-甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯，收率：99％。
(6)(2R)--2-甲基-4-氧代吡咯烷-1-甲酸叔丁酯的制备。
将(2S,4R)-4-羟基-2-甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.47g,7.3mmol)溶于二氯甲烷(20mL)，加入硅胶(2.36g)和PCC(2.36g,11.0mmol)，室温反应过夜。过滤，旋干，柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝5：1)得1.2g淡黄色油状物，即为(2R)--2-甲基-4-氧代吡咯烷-1-甲酸叔丁酯，收率82％。
(7)(2R)--2-甲基-4-亚甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯的制备。
0℃下，将Ph3P+CH3Br-(2.48g,6.95mmol)和叔丁醇钾(0.85g,7.53mmol)加入20ml乙醚中，加完升至室温搅拌2h。0℃下，滴加(2R)--2-甲基-4-氧代吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.16g,5.79mmol)的乙醚溶液(10ml)，15min加完，升至室温反应16h。加硅藻土过滤，洗涤，旋干溶剂，柱层析(洗脱液：石油醚/乙酸乙酯＝80/1)得680mg无色透明液体，即为(2R)--2-甲基-4-亚甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯。收率：60％。
表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:5.0(s,2H),4.17-3.98(m,2H),3.88(m,1H),2.36-2.10(m,2H),1.49(s,9H),1.14(dd,J＝6.0Hz,3H)。
(8)(7R)-7-甲基-2-氧代-1,1-二氯-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸叔丁酯的制备。
将(2R)--2-甲基-4-亚甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(680mg,3.45mmol)溶于乙醚(20mL)，加入锌铜试剂(2.67g,20.7mmol)，氮气保护。将三氯乙酰氯(1.15mL,10.35mmol)溶于乙二醇二甲醚(5mL)，并滴加入反应液中，继续室温反应过夜。将反应倒入0℃的饱和食盐水(30mL)中，硅藻土过滤，用乙酸乙酯(30mL×2)萃取，饱和食盐水(50mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干，经柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝6:1)得棕色油状物1.06g，即为(7R)-7-甲基-2-氧代-1,1-二氯-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸叔丁酯，不进行进一步纯化，直接进行下一步反应。
(9)(7R)-7-甲基-2-氧代-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸叔丁酯的制备。
将(7R)-7-甲基-2-氧代-1,1-二氯-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸叔丁酯(1.06g,3.44mmol)溶于甲醇(10mL)，加入锌粉(1.34g,20.6mmol)和饱和氯化铵(10mL)，室温反应过夜。过滤除去固体，旋干滤液，加水(20mL)，用乙酸乙酯(20mL×2)萃取，饱和食盐水(20mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干，经柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝5:1)得325mg淡黄色油状物，即为(7R)-7-甲基-2-氧代-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸叔丁酯，收率：40％。
表征数据为：1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:3.97(m,1H),3.70-3.52(m,2H),3.18-2.97(m,4H),2.31(m,1H),1.85(m,1H),1.49(s,9H),1.31(m,3H).
(10)(7R)-7-甲基-2-羟基-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸叔丁酯的制备。
将(7R)-7-甲基-2-氧代-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸叔丁酯(325mg,1.36mmol)溶于甲醇(8mL)，冰浴冷却，分批加入硼氢化钠(103mg,2.72mmol)，室温反应2小时。旋干，加水(20mL)，用乙酸乙酯(20mL×2)萃取，饱和食盐水(20mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干，经柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝3:1)得淡棕色油状物300mg，即为(7R)-7-甲基-2-羟基-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸叔丁酯，收率：91％。
表征数据为：1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:4.31(m,1H),3.83(m,1H),3.40-3.33(m,2H),2.43(m,1H),2.33(m,2H),2.09-1.85(m,4H),1.48(s,9H),1.22(m,3H).
(11)(R)-2-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-7-甲基-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制备。
参照实施例2的方法制备，仅是用(R)-2-羟基-7-甲基-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸叔丁酯代替2-羟基7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯。
产物表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.40(d,J＝1.2Hz,1H),8.08(dd,J＝1.2Hz,8.4Hz,1H),7.60(d,J＝8.4Hz,1H),7.48-7.44(m,2H),7.40-7.34(m,1H),4.20(s,2H),4.08(m,1H),3.60(m,2H),2.30-2.13(m,4H),1.97-1.73(m,3H),1.41(dd,J＝6.4Hz,23.2Hz,3H),1.29(m,2H),1.15(m,2H).
实施例16
(S)-2-{2-{[5-5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-7-(氟甲基)-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制备。
(1)(2S,4R)-2-(氟甲基)-4-羟基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯的制备。
将(2S,4R)-4-[(叔丁基二甲基硅基)氧基]-2-{[(甲磺酰基)氧基]甲基}吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(4.8g,11.7mmol)溶于四氢呋喃(60mL)，加入四丁基氟化铵(12.2g,46.8mmol)室温反应6小时后，加热反应过夜。待反应液冷至室温，旋干，加水(100mL)，用乙酸乙酯(80mL×2)萃取，饱和食盐水(80mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干，经柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝2.5:1)得1.65g黄色油状液体，即为(2S,4R)-2-(氟甲基)-4-羟基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯，收率：64％。
表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:4.83-4.63(m,1H),4.50(m,2H),4.11(m,1H),3.48(m,2H),2.21-2.08(m,2H),1.87(m,1H),1.49(m,9H)。
(2)(2S,4R)-2-(氟甲基)-4-氧代吡咯烷-1-甲酸叔丁酯的制备。
将(2S,4R)-2-(氟甲基)-4-羟基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.65g,7.56mmol)溶于DCM(50mL)中，加入2.5g硅胶，0℃下，分批加入PCC(2.44g,11.34mmol)，加完，升至室温反应16小时。过滤，旋干，柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝6：1)得1.35g淡黄色油状物，即为(2S,4R)-2-(氟甲基)-4-氧代吡咯烷-1-甲酸叔丁酯。收率：82％。
表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:4.76(m,1H),4.52-4.38(m,2H),3.90(m,1H),3.72(d,J＝19.2Hz,1H),2.80(m,1H),2.56(d,J＝19.2Hz,1H),1.50(s,9H)。
(3)(2S,4R)-2-(氟甲基)-4-亚甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯的制备。
0℃下，将Ph3P+CH3Br-(2.66g,7.46mmol)和叔丁醇钾(0.91g,8.07mmol)加入20ml乙醚中，加完升至室温搅拌2h。0℃下，滴加18130(1.35g,6.21mmol)的10ml乙醚溶液，15min加完，升至室温反应16h。加硅藻土过滤，洗涤，旋干溶剂，柱层析(洗脱液：石油醚/乙酸乙酯＝100/1)得960mg无色透明液体，即为(2S,4R)-2-(氟甲基)-4-亚甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯。收率：72％。
表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:5.04(m,2H),4.49-4.08(m,4H),3.88(m,1H),2.78(m,1H),2.59(m,1H),1.49(s,9H)。
(4)(S)-7-(氟甲基)-2-羟基-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸叔丁酯的制备。
参照实施例15中制备(R)-2-羟基-7-甲基-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸叔丁酯的方法制备，仅是用(S)-2-(氟甲基)-4-亚甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯代替(R)-2-甲基-4-亚甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯。
表征数据为：1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:4.54(m,1H),4.46-4.29(m,2H),3.96(m,1H),3.48-3.31(m,2H),2.45-2.30(m,2H),2.04(m,4H),1.83(m,1H),1.48(s,9H)。
(5)(S)-2-{2-{[5-5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-7-(氟甲基)-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制备。
参照实施例2的方法制备，仅是用(S)-7-(氟甲基)-2-羟基-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-甲酸叔丁酯代替2-羟基-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯。
表征数据为：1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.42(s,1H),8.09(d,J＝8.8Hz,1H),7.60(m,1H),7.48-7.44(m,2H),7.40-7.34(m,1H),4.97-4.52(m,2H),4.32(m,1H),4.21(s,2H),3.95(m,1H),3.56(m,1H),3.48(m,1H),2.29(m,1H),2.21-2.14(m,4H),1.95-1.81(m,2H),1.29(m,2H),1.15(m,2H).
实施例17
(R)-2-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-7-甲基-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}-4-氟苯并[d]噻唑-6-甲酸的制备。
参照实施例15的方法制备，仅是用2-氯-4-氟苯并[d]噻唑-6-甲酸甲酯代替2-氯苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯。
产物表征数据为：1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.19(s,1H),7.79(d,J＝11.2Hz,1H),7.48-7.44(m,2H),7.41-7.34(m,1H),4.20(s,2H),4.09(m,1H),3.96(m,1H),3.60(m,2H),2.34-2.12(m,4H),1.98-1.73(m,3H),1.41(dd,J＝6.4Hz,21.2Hz,3H),1.29(m,2H),1.16(m,2H)。
实施例18
(R)-2-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-7-甲基-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}-4-甲氧基苯并[d]噻唑-6-甲酸的制备。
参照实施例15的方法制备，仅是用2-氯-4-甲氧基苯并[d]噻唑-6-甲酸甲酯代替2-氯苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯。
产物表征数据为：1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.08(s,1H),7.57(s,1H),7.49-7.44(m,2H),7.40-7.33(m,1H),4.19(s,2H),4.06-3.93(m,5H),3.74-3.59(m,2H),2.32-2.09(m,4H),1.97-1.71(m,3H),1.39(dd,J＝6.4Hz,21.6Hz,3H),1.28(m,2H),1.15(m,2H).
实施例19
(S)-2-{2-{[5-5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-7-(氟甲基)-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}-4-氟苯并[d]噻唑-6-甲酸的制备。
参照实施例15的方法制备，仅是用2-氯-4-氟苯并[d]噻唑-6-甲酸甲酯代替2-氯苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯。
产物表征数据为：1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.20(s,1H),7.80(d,J＝10.8Hz,1H),7.48-7.44(m,2H),7.41-7.35(m,1H),4.92(m,1H),4.67-4.49(m,1H),4.35(m,1H),4.20(s,2H),3.95(m,1H),3.59-3.44(m,2H),2.29(m,1H),2.21-2.14(m,4H),1.95-1.80(m,2H),1.29(m,2H),1.15(m,2H)。
实施例20
(S)-2-{2-{[5-5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-7-(氟甲基)-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}-4-甲氧基苯并[d]噻唑-6-甲酸的制备。
参照实施例16的方法制备，仅是用2-氯-4-甲氧基苯并[d]噻唑-6-甲酸甲酯代替2-氯苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯。
产物表征数据为：1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.09(m,1H),7.58(m,1H),7.48-7.44(m,2H),7.40-7.34(m,1H),4.97-4.49(m,2H),4.43-4.26(m,1H),4.20(s,2H),4.05(s,3H),3.94(m,1H),3.63-3.47(m,2H),2.27(m,1H),2.19-2.13(m,4H),1.94-1.78(m,2H),1.29(m,2H),1.15(m,2H).
实施例21
(S)-2-{2-{[5-5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-7-(氟甲基)-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}苯并[d]噁唑-6-甲酸的制备。
参照实施例15的方法制备，仅是用2-氯-苯并[d]噁唑-6-甲酸甲酯代替2-氯苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯。
产物表征数据为：1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.05-8.02(m,2H),7.47-7.43(m,2H),7.40-7.33(m,2H),4.91-4.48(m,2H),4.21(m,3H),3.95(m,1H),3.71(m,1H),3.62(m,1H),2.27(m,1H),2.18-2.13(m,4H),1.95-1.78(m,2H),1.28(m,2H),1.15(m,2H)。
实施例22
2-{5-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}异吲哚啉-2-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制备。
(1)5-甲氧基-2-甲基苯甲酸甲酯的制备。
将5-甲氧基-2-甲基苯甲酸(3.95g，26.0mmol)溶于DMF(30mL)中，加入Cs2CO3(21.21g，65.0mmol)，0℃下滴加CH3I(4.1ml，65.0mmol)，10min加完，升至室温反应过夜。用硅藻土过滤，滤液倒入水(100mL)中，乙酸乙酯(60mL×2)萃取，合并有机层，用饱和盐水洗(60ml×2)，Na2SO4干燥，过滤，旋干溶剂得4.80g黄色油状物，即为5-甲氧基-2-甲基苯甲酸甲酯，产物直接下一步反应。
表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:7.46(d,J＝2.8Hz,1H),7.16(d,J＝8.4Hz,1H),6.97(dd,J＝8.4Hz,2.8Hz,1H),3.91(s,3H),3.83(s,3H),2.53(s,3H)。
(2)2-(溴甲基)-5-甲氧基苯甲酸甲酯的制备。
将5-甲氧基-2-甲基苯甲酸甲酯(4.8g，26.0mmol)溶于CCl4(100mL)中，加入NBS(5.1g，28.6mmol)，(PhCO2)2(315mg,1.30mmol)，80℃下回流反应1h。冷却至室温，将反应液倒入冰水(150mL)中，用二氯甲烷萃取(100mL×3)，合并有机层，Na2SO4干燥，过滤，旋干溶剂得7.5g黄色油状物，即为2-(溴甲基)-5-甲氧基苯甲酸甲酯，产物直接下一步反应。
(3)2-苄基-6-甲氧基异吲哚啉-1-酮的制备。
将2-(溴甲基)-5-甲氧基苯甲酸甲酯(7.5g，26.0mmol)溶于甲醇(150mL)中，加入苄胺(3.0mL，27.0mmol)，三乙胺(5.6mL，40.0mmol)，70℃下回流反应过夜。冷却至室温，旋干溶剂，加入水(100mL)，用二氯甲烷(100mL)萃取，有机层Na2SO4干燥，过滤，旋干溶剂，加入石油醚(100mL)，过滤，得3.1g淡黄色固体，即为2-苄基-6-甲氧基异吲哚啉-1-酮，三步总收率：49％。
表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:7.41(d,J＝2.4Hz,1H),7.33(m,6H),7.10(dd,J＝8.4Hz,2.4Hz,1H),4.82(s,2H),4.22(s,2H),3.90(s,3H)。
(4)2-苄基-5-甲氧基异吲哚啉的制备。
氩气保护，0℃下，将LiAlH4(177mg，4.66mmol)加入无水THF(5mL)中，滴加2-苄基-6-甲氧基异吲哚啉-1-酮(585mg，2.33mmol)的无水THF(5ml)溶液，15min加完，升至65℃回流反应4h。冷却至室温，滴加水(0.8mL)淬灭反应，再滴加10％NaOH溶液(0.2mL)，搅匀后，加硅藻土过滤，旋干溶剂，柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝30：1)纯化得430mg棕色油状物，即为2-苄基-5-甲氧基异吲哚啉，收率：78％。
表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:7.45(d,J＝6.8Hz,2H),7.39(t,J＝6.8Hz,2H),7.31(m,1H),7.11(d,J＝8.8Hz,1H),3.94(s,4H),3.91(s,2H),3.81(s,3H)。
(5)5-甲氧基异吲哚啉的制备。
将2-苄基-5-甲氧基异吲哚啉(430mg，1.81mmol)溶于甲醇(10mL)中，加入Pd/C(80mg)，通入氢气，室温反应过夜。经硅藻土过滤，旋干溶剂得黄色油状物211mg，即为5-甲氧基异吲哚啉，收率：78％。
(6)2-(5-甲氧基异吲哚啉-2-基)苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯的制备。
将5-甲氧基异吲哚啉(211mg,1.41mmol)溶于DMF(10mL)中，加入2-氯苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯(342mg,1.41mmol)和三乙胺(392μL,2.82mmol)，N2保护，100℃下反应1h。冷却至室温，过滤，滤饼用石油醚(10ml)打浆，过滤得280mg白色固体，即为2-(5-甲氧基异吲哚啉-2-基)苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯，收率：56％。
表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.38(d,J＝1.2Hz,1H),8.05(dd,J＝8.6Hz,1.8Hz,1H),7.64(d,J＝8.8Hz,1H),7.26(s,1H),6.92(m,2H),4.94(s,2H),4.90(s,2H),4.41(q,J＝7.2Hz,2H),3.86(s,3H),1.43(t,J＝7.2Hz,3H)。
(7)2-(5-羟基异吲哚啉-2-基)苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯
将2-(5-甲氧基异吲哚啉-2-基)苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯(280mg,0.79mmol)溶于DCM(10mL)，冰浴冷却，再滴加三溴化硼(396mg,1.58mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液，继续0℃反应过夜，滴加甲醇(2mL)淬灭反应，旋干，经柱层析纯化(二氯甲烷：甲醇＝50：1)得120mg白色固体，即为2-(5-羟基异吲哚啉-2-基)苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯，收率：45％。
表征数据为：1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:9.53(s,1H),8.45(d,J＝1.6Hz,1H),7.89(dd,J＝1.6Hz,8.4Hz,1H),7.55(d,J＝8.4Hz,1H),7.21(d,J＝8.0Hz,1H),6.81(d,J＝1.6Hz,1H),6.75(dd,J＝1.6Hz,8.0Hz,1H),4.79(m,4H),4.30(q,J＝7.2Hz,2H),1.33(t,J＝7.2Hz,3H)。
(8)2-{5-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}异吲哚啉-2-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯的制备。
将钠氢(28mg,0.72mmol)悬浮于无水四氢呋喃(5mL)，加入2-(5-羟基异吲哚啉-2-基)苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯(80mg,0.24mmol)，室温搅拌20min，再加入4-氯甲基-5-环丙基-3-2,6-二氯苯基)异噁唑(145mg,0.48mmol)、四丁基碘化铵(18mg,0.048mmol)和DMF(2mL)，80℃加热反应2小时。待反应液冷至室温，将其倒入水(20mL)中，用乙酸乙酯(20mL×2)萃取，有机层再用饱和食盐水(30mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干，柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝5：1)得70mg灰白色固体，即为2-{5-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}异吲哚啉-2-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯，收率：49％。
表征数据为：1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.38(d,J＝1.6Hz,1H),8.05(dd,J＝1.6Hz,8.8Hz,1H),7.64(d,J＝8.8Hz,1H),7.44-7.42(m,2H),7.37-7.33(m,1H),7.20(d,J＝8.0Hz,1H),6.82-6.79(m,2H),4.89-4.86(m,6H),4.41(q,J＝7.2Hz,2H),2.63(m,1H),1.43(t,J＝7.2Hz,3H),1.31(m,2H),1.17(m,2H)。
(9)2-{5-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}异吲哚啉-2-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制备。
将2-{5-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}异吲哚啉-2-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯(65mg,0.11mmol)溶于四氢呋喃(2mL)、甲醇(2mL)和水(1mL)中，加入氢氧化锂一水合物(23mg,0.55mmol)，室温搅拌反应过夜。旋干，加水(10mL)，用1N HCl调pH至3左右，过滤，真空烘干得灰白色固体28mg，即为2-{5-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}异吲哚啉-2-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸，收率：45％。
表征数据为：1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.42(d,J＝1.6Hz,1H),7.88(dd,J＝1.6Hz,8.4Hz,1H),7.64-7.62(m,2H),7.56-7.52(m,2H),7.26(d,J＝8.4Hz,1H),6.91(d,J＝2.0Hz,1H),6.77(dd,J＝2.0Hz,8.4Hz,1H),4.80(s,2H),4.79(m,4H),2.44(m,1H),1.19-1.13(m,4H)。
实施例23
2-{6-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制备。
按照以下线路进行制备：
(1)2-(6-羟基-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯的制备。
将1,2,3,4-四氢异喹啉-6-醇(100mg,0.670mmol)，2-氯苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯(178mg,0.737mmol)溶于5ml DMF中，加入三乙胺(186μl,1.34mmol)，100℃下反应1h。反应液冷却至室温，加入15mL水和10mL石油醚，搅拌均匀后过滤，依次用水、石油醚洗涤，真空干燥得200mg淡黄色固体，即为2-(6-羟基-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯。收率：84％。
表征数据为：1H-NMR(400MHz,DMSO)δ:9.35(s,1H),8.41(d,J＝1.6Hz,1H),7.88(dd,J＝8.4Hz,1.6Hz,1H),7.51(d,J＝8.4Hz,1H),7.10(d,J＝8.0Hz,1H),6.66(m,1H),6.63(m,1H),4.69(s,2H),4.30(q,J＝7.2Hz,2H),3.81(t,J＝5.6Hz,2H),2.90(t,J＝5.6Hz,2H),1.32(t,J＝7.2Hz,2H),。
(2)2-{6-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯的制备。
将2-(6-羟基-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯(90mg,0.254mmol)和4-(氯甲基)-5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑(90mg,0.305mmol)溶于5ml乙腈中，加入碳酸钾(75mg,0.508mmol)和催化量碘化钾，85℃下回流反应16h。反应液冷却至室温，旋干溶剂，用15ml DCM溶解，过滤，旋干，柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝5：1)得130mg白色固体，即为2-{6-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯。收率：83％。
表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.35(d,J＝1.6Hz,1H),8.03(dd,J＝8.4Hz,1.6Hz,1H),7.58(d,J＝8.4Hz,1H),7.42(m,2H),7.33(m,1H),7.09(d,J＝8.4Hz,1H),6.66(dd,J＝8.4Hz,2.4Hz,1H),6.63(d,J＝2.4Hz,1H),4.82(s,2H),4.77(s,2H),4.40(q,J＝7.2Hz,2H),3.89(t,J＝5.6Hz,2H),2.97(t,J＝5.6Hz,2H),2.23-2.16(m,1H),1.42(t,J＝7.2Hz,3H),1.31-1.28(m,2H),1.18-1.12(m,2H)。
(3)2-{6-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制备。
将2-{6-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯(125mg,0.202mmol)溶于2ml四氢呋喃和2ml甲醇中，加入氢氧化锂一水合物(42mg,1.010mmol)和水(1mL)，室温下反应24h。旋干溶剂，加入水(10mL)，用1N盐酸调pH至3-4，过滤，洗涤，真空干燥得105mg白色固体，即为2-{6-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸。收率：88％。
表征数据为：1H NMR(400MHz,DMSO)δ:8.38(d,J＝1.6Hz,1H),7.86(dd,J＝8.4Hz,1.6Hz,1H),7.62-7.60(m,2H),7.55-7.51(m,1H),7.49(d,J＝8.4Hz,1H),7.15(d,J＝8.4Hz,1H),6.69-6.65(m,2H),4.85(s,2H),4.70(s,2H),3.80(t,J＝5.6Hz,2H),2.90(t,J＝5.6Hz,2H),2.43(m,1H),1.18-1.11(m,4H)。
实施例24
2-{7-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制备。
(1)7-硝基-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐的制备。
0℃下，将1,2,3,4-四氢异喹啉(2.5ml,2.0mmol)滴加到硫酸(10ml，18.0mmol)中，10min加完，然后分批加入硝酸钾(2.16g,2.14mmol)，升至室温反应16h。将反应液倒入冰水(50mL)中，用乙酸乙酯(30mL×2)洗涤，水层用氨水调pH至9-10，用乙酸乙酯萃取(50mL×2)，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，所得物再用乙酸乙酯(20mL)溶解，用HCl的乙酸乙酯溶液调pH至4-5，过滤，洗涤，干燥得1.8g黄色固体，即为7-硝基-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐，收率：42％。
表征数据为：1H NMR(400MHz,DMSO)δ:9.91(s,2H),8.20(d,J＝1.6Hz,1H),8.10(dd,J＝8.4Hz,1.6Hz,1H),7.52(d,J＝8.4Hz,1H),4.37(s,2H),3.38(t,J＝6.0Hz,2H),3.15(t,J＝6.0Hz,2H)。
(2)7-氨基-1,2,3,4-四氢异喹啉的制备。
将7-硝基-1,2,3,4-四氢异喹啉盐酸盐(1.8g,8.4mmol)溶于水(30mL)中，加入碳酸钾(3.5g,25.4mmol)，室温下搅拌30min，然后用乙酸乙酯萃取(20mL×3)，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干得棕色固体，再将其溶于甲醇(20mL)中，加入10％Pd/C(220mg)，氢气氛围下室温反应16h。加硅藻土过滤，洗涤，旋干溶剂得1.2g黄色固体，即为7-氨基-1,2,3,4-四氢异喹啉。收率：96％。产物不纯化直接下步反应。
(3)1,2,3,4-四氢异喹啉-7-醇的制备。
将7-氨基-1,2,3,4-四氢异喹啉(1.2g,8.1mmol)溶于水(15mL)中，0℃下加入硫酸(1.8mL,32.4mmol)，然后滴加亚硝酸钠(670mg,9.7mmol)的水溶液(10mL)，15min加完，120℃下回流反应1.5h。反应液冷却至室温，分批加入碳酸氢钠固体至pH＝8，过滤，滤液用DCM萃取(20mL×3)，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干得185mg红棕色油状物，即为1,2,3,4-四氢异喹啉-7-醇。收率：15％。产物的m/z(M+H+)：150.1。
(4)2-{7-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制备。
参照实施例23的方法制备，仅是用1,2,3,4-四氢异喹啉-7-醇代替1,2,3,4-四氢异喹啉-6-醇。1H NMR(400MHz,DMSO)δ:8.42(m,1H),8.10(d,J＝8.8Hz,1H),7.61(d,J＝8.8Hz,1H),7.44-7.42(m,2H),7.36-7.32(m,1H),7.07(d,J＝8.4Hz,1H),6.71(m,1H),6.66(m,1H),4.82(s,2H),4.79(s,2H,3.88(m,2H),2.97(m,2H),2.20(m,1H),1.31(m,2H),1.17(m,2H).
实施例25
2-{5-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}六氢-1H-异吲哚-2(3H)-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制备。
(1)2,3,3a,4,7,7a-六氢-1H-异吲哚的制备。
0℃、氩气保护下，分批将四氢铝锂(4.0g,105mmol)加入到无水THF(100mL)中，加完后滴加溶有3a,4,7,7a-四氢-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮(5.0g,33mmol)的无水THF溶液，30min加完，升至40℃下反应16h。冰浴下滴加水(12mL)淬灭反应，加入40g无水硫酸钠搅拌10min，加硅藻土过滤，用DCM洗涤，滤液旋干得3.2g棕色油状物，即为2,3,3a,4,7,7a-六氢-1H-异吲哚，产物不需纯化直接下一步反应。收率：80％。
(2)3a,4,7,7a-四氢-1H-异吲哚-2(3H)-甲酸叔丁酯的制备。
将2,3,3a,4,7,7a-六氢-1H-异吲哚(3.2g,26mmol)溶于THF(80mL)中，加入三乙胺(5.5mL,39mmol)，0℃下滴加Boc酸酐(7.3mL,31mmol)，15min加完，自然升至室温反应16h。将反应液倒入水(150mL)中，用乙酸乙酯萃取(150mL×2)，有机层饱和盐水(150mL)洗，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝10：1)得4.65g棕色油状物，即为3a,4,7,7a-四氢-1H-异吲哚-2(3H)-甲酸叔丁酯。收率：80％。
表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:5.65(s,2H),3.48(m,2H),3.44-3.37(m,2H),3.17(m,1H),3.08(m,1H),2.34-2.25(m,2H),1.91(m,2H),1.46(s,9H)。
(3)5-羟基六氢-1H-异吲哚-2(3H)-甲酸叔丁酯的制备。
将3a,4,7,7a-四氢-1H-异吲哚-2(3H)-甲酸叔丁酯(500mg,2.22mol)溶于无水THF(5mL)中，0℃下，滴加1M硼烷THF溶液(2.22mL)，15min加完，升至室温反应16h。0℃下，依次滴加甲醇(1.25mL)、3M氢氧化钠水溶液(0.83mL)、30％双氧水(0.83mL)，加完后升至60℃反应1.5h。反应液冷却至室温，加入乙酸乙酯(15mL)稀释，用饱和盐水(15mL)洗，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，柱层析(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)得390mg白色固体，即为5-羟基六氢-1H-异吲哚-2(3H)-甲酸叔丁酯。收率：72％。
表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:3.90(m,1H),3.38(m,2H),3.19(m,2H),2.14(m,1H),1.86(m,4H),1.56(m,2H),1.48(s,9H),1.38(m,2H)。
(4)2-{5-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}六氢-1H-异吲哚-2(3H)-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制备。
参照实施例2的方法制备，仅是用5-羟基六氢-1H-异吲哚-2(3H)-甲酸叔丁酯代替2-羟基7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯。
产物表征数据为：1H NMR(400MHz,DMSO)δ:8.34(d,J＝1.6Hz,1H),7.84(dd,J＝1.6Hz,8.4Hz,1H),7.67-7.64(m,2H),7.59-7.55(m,1H),7.43(d,J＝8.4Hz,1H),4.26(m,2H),3.58-3.36(m,5H),2.33(m,1H),2.22(m,2H),1.56(m,2H),1.47(m,2H),1.23(m,2H),1.16(m,2H),1.10(m,2H)。
实施例26
2-{5-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}六氢环戊并[c]吡咯-2(1H)-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制备。
(1)2,2’-[1-(叔丁氧基)吡咯烷-3,4-二基]二乙酸的制备。
将高锰酸钾(1.49g,9.39mmol)溶于水(15mL)，冷却至5℃，缓慢滴加3a,4,7,7a-四氢-1H-异吲哚-2(3H)-甲酸叔丁酯(700mg,3.13mmol)溶于丙酮(5mL)的溶液，加完继续5℃反应3小时。加入亚硫酸氢钠饱和溶液破坏过量的高锰酸钾，用1N HCl调pH至2，用二氯甲烷(30mL×3)萃取，饱和食盐水(30mL×3)洗涤，旋干得白色泡沫状固体900mg，即为2,2’-[1-(叔丁氧基)吡咯烷-3,4-二基]二乙酸，不纯化直接进行下一步反应。
(2)5-氧代六氢环戊[c]吡咯-2(1H)-甲酸叔丁酯的制备。
将2,2’-[1-(叔丁氧基)吡咯烷-3,4-二基]二乙酸(900mg,3.13mmol)溶于乙酸酐(15mL)，加入乙酸钠(231mg,2.82mmol)，120℃反应2小时。待反应液冷至室温，过滤，旋干，柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝5:1)得390mg淡黄色油状物，即为5-氧代六氢环戊[c]吡咯-2(1H)-甲酸叔丁酯，两步收率：55％。
表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:3.67(m,2H),3.23(m,2H),2.94(m,2H),2.50(m,2H),2.17(m,2H),1.48(s,9H)。
(3)5-羟基六氢环戊[c]吡咯-2(1H)-甲酸叔丁酯的制备。
将5-氧代六氢环戊[c]吡咯-2(1H)-甲酸叔丁酯(390mg,1.73mmol)溶于甲醇(10mL)，冷却至0℃，分批加入硼氢化钠(132mg,3.46mmol)，室温反应2小时。旋干，加水(20mL)，用乙酸乙酯(20mL×2)萃取，饱和食盐水(20mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干，经柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝2:1)得336mg淡黄色浆状物，即为5-羟基六氢环戊[c]吡咯-2(1H)-甲酸叔丁酯，收率：85％。
表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:4.32(m,1H),3.51(m,2H),3.36(m,2H),2.62(m,2H),2.19(m,2H),1.76(d,J＝4.8Hz,1H),1.56-1.47(m,11H)。
(4)2-{5-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}六氢环戊并[c]吡咯-2(1H)-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制备。
参照实施例2的方法制备，仅是用5-羟基六氢环戊[c]吡咯-2(1H)-甲酸叔丁酯代替2-羟基7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯。
产物表征数据为：1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.40(m,1H),8.09(d,J＝8.4Hz,1H),7.61(d,J＝8.8Hz,1H),7.38-7.36(m,2H),7.26(m,1H),4.23(s,2H),3.96(m,1H),3.78(m,2H),3.47(m,2H),2.79(m,2H),2.08(m,3H),1.48(m,2H),1.22(m,2H),1.07(m,2H)。
实施例27
2-{5-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}六氢环戊并[c]吡咯-2(1H)-基}苯并[d]噁唑-6-甲酸的制备。
参照实施例26的方法制备，仅是用2-氯-苯并[d]噁唑-6-甲酸甲酯代替2-氯苯并[d]噻唑-6-甲酸乙酯。
产物表征数据为：1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.05-8.00(m,2H),7.41-7.36(m,3H),7.28-7.24(m,1H),4.24(s,2H),3.96(m,1H),3.85(m,2H),3.53(m,2H),2.76(m,2H),2.07(m,3H),1.50(m,2H),1.23(m,2H),1.08(m,2H)。
实施例28
2-{9-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-3-氮杂双环[3.3.1]壬烷-3-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制备。
(1)3-苄基-3-氮杂双环[3.3.1]壬烷-9-酮的制备。
将苄胺(2.14mL,19.6mmol)溶于叔丁醇(5mL)中，0℃下，依次加入多聚甲醛(1.18g,39.2mmol)、盐酸(1.8mL,21.6mmol)、环己酮(5.26mL,50.9mmol)，加完后加热至80℃下回流反应3h。旋干溶剂，加入水(50mL)和乙酸乙酯(50mL)，分层，水层用4M氢氧化钠水溶液调pH至9-10，用乙酸乙酯萃取(30mL×2)，有机层饱和盐水(30mL)洗，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干得黄色固体，用乙酸(15mL)溶解，95℃下，滴加到乙酸(12mL)、盐酸(0.76mL)、多聚甲醛(550mg)得混合液中，30min加完，继续反应1h。旋干溶剂，加入水(20mL)和乙酸乙酯(20mL)，分层，水层用4M氢氧化钠水溶液调pH至9-10，用乙酸乙酯萃取(20mL×2)，有机层饱和盐水(20mL)洗，无水硫酸钠干燥，过滤，柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝100：1)得1.28g黄色油状物，即为3-苄基-3-氮杂双环[3.3.1]壬烷-9-酮。收率：28％。产物的m/z[M+H]+：230.2。
(2)3-苄基-3-氮杂双环[3.3.1]壬烷-9-醇的制备。
将3-苄基-3-氮杂双环[3.3.1]壬烷-9-酮(1.28g,5.5mmol)溶于甲醇(15mL)中，冰浴下分批加入硼氢化钠(0.42g,11.0mmol)，加完升至室温反应1h。旋干溶剂，加入水(15mL)，用乙酸乙酯萃取(15mL×2)，有机层无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝10：1)得900mg白色固体，即为3-苄基-3-氮杂双环[3.3.1]壬烷-9-醇。
(3)3-氮杂双环[3.3.1]壬烷-9-醇的制备。
将3-苄基-3-氮杂双环[3.3.1]壬烷-9-醇(900mg,3.85mmol)溶于甲醇(15mL)中，加入Pd/C(180mg)，氢气氛围下室温反应16h。加硅藻土过滤，洗涤，旋干得640mg白色固体，即为3-氮杂双环[3.3.1]壬烷-9-醇，产物不需纯化直接下一步反应。
(4)9-羟基-3-氮杂双环[3.3.1]-3-甲酸叔丁酯的制备。
将3-氮杂双环[3.3.1]壬烷-9-醇(640mg,4.5mmol)溶于二氯甲烷(20mL)中，加入Boc酸酐(1.24mL,5.4mmol)和三乙胺(0.94mL,6.75mmol)，室温下反应1h。加入水(20mL)洗，分层，有机层用无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝5：1)得480mg白色固体，即为9-羟基-3-氮杂双环[3.3.1]-3-甲酸叔丁酯。收率：44％。产物的m/z[M+H]+：242.2。
(5)2-{9-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-3-氮杂双环[3.3.1]壬烷-3-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制备。
参照实施例2的方法制备，仅是用9-羟基-3-氮杂双环[3.3.1]-3-甲酸叔丁酯代替2-羟基7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯。
产物表征数据为：1H NMR(400MHz,DMSO)δ:8.33(d,J＝1.2Hz,1H),7.84(dd,J＝1.2Hz,8.0Hz,1H),7.65-7.63(m,2H),7.58-7.54(m,1H),7.43(m,J＝8.4Hz,1H),4.33(s,2H),4.02(m,1H),3.56(m,4H),2.36(m,1H),1.94(m,2H),1.47(m,3H),1.35(m,2H),1.23(m,1H),1.17-1.15(m,4H).
实施例29
5-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}苯并呋喃-2-甲酸的制备。
参照实施例10的方法制备，仅是用5-溴苯并呋喃-2-甲酸乙酯代替间溴苯甲酸甲酯。
产物表征数据为：1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:7.54(s,1H),7.47-7.43(m,3H),7.38-7.33(m,1H),6.77(m,1H),6.64(m,1H),4.22(s,2H),3.97(m,1H),3.30(m,2H),3.22(m,2H),2.17(m,3H),1.95(m,2H),1.82(m,2H),1.29(m,2H),1.15(m,2H)。
实施例30
6-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}苯并噻吩-2-甲酸的制备。
参照实施例10的方法制备，仅是用6-溴苯并噻吩-2-甲酸乙酯代替间溴苯甲酸甲酯。
产物表征数据为：1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.01(s,1H),7.70(d,J＝8.8Hz,1H),7.46-7.44(m,2H),7.39-7.33(m,1H),6.83(m,1H),6.70(m,1H),4.22(s,2H),3.99(m,1H),3.37-3.26(m,4H),2.17(m,3H),1.96(m,2H),1.81(m,2H),1.29(m,2H),1.15(m,2H)。
实施例31
6-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}苯并[d]异噻唑-2-甲酸的制备。
参照实施例10的方法制备，仅是用6-溴苯并[d]异噻唑-2-甲酸甲酯代替间溴苯甲酸甲酯。
产物表征数据为：1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.64(s,1H),7.39(m,3H),6.60(m,2H),4.18(s,2H),3.93(m,1H),3.18(m,4H),2.14(m,3H),1.88(m,2H),1.74(m,2H),1.28(m,2H),1.14(m,2H)。
实施例32
5-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}-1-甲基-1H-吲哚-2-甲酸的制备。
(1)5-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}-1-甲基-1H-吲哚-2-甲酸甲酯的制备。
将4-[(6-氮杂螺[3.4]辛烷-2-氧基)甲基]-5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑(100mg,0.24mmol)溶于甲苯(5mL)，加入1-甲基-6-溴-1H-吲哚-3-甲酸甲酯(80mg,0.28mmol)、Pd2(dba)3(12mg,0.012mmol)、2-二环己基磷-2,4,6-三异丙基联苯(12mg,0.024mmol)和碳酸铯(298mg,0.91mmol)，氩气保护，100℃反应过夜。待反应液冷至室温，用硅藻土过滤，旋干，经柱层析(石油醚：乙酸乙酯＝4:1)纯化得65mg黄色油状物，即为5-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}-1-甲基-1H-吲哚-2-甲酸甲酯，收率：47％。
表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:7.46-7.43(m,2H),7.38-7.33(m,1H),7.26(m,1H),7.13(s,1H),6.81(m,1H),6.65(m,1H),4.21(s,2H),4.04(s,3H),3.98(m,1H),3.91(s,3H),3.31(m,2H),3.22(m,2H),2.17(m,3H),1.94(m,2H),1.80(m,2H),1.29(m,2H),1.15(m,2H)。
(2)5-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}-1-甲基-1H-吲哚-2-甲酸的制备。
将6-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}-1-甲基-1H-吲哚-3-甲酸甲酯(65mg,0.11mmol)溶于四氢呋喃(2mL)、甲醇(2mL)和水(1mL)中，加入氢氧化锂一水合物(23mg,0.55mmol)，室温反应过夜。旋干，加水(15mL)，用1N HCl调pH至3左右，过滤，烘干，得54mg白色固体，即为5-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}-1-甲基-1H-吲哚-2-甲酸，收率：81％。
表征数据为：1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:7.46-7.43(m,2H),7.38-7.34(m,1H),7.29(m,2H),6.87(m,1H),6.69(m,1H),4.22(s,2H),4.05(s,3H),3.97(m,1H),3.32(m,2H),3.25(m,2H),2.17(m,3H),1.95(m,2H),1.82(m,2H),1.29(m,2H),1.15(m,2H)。
实施例33
6-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}-1-甲基-1H-吲哚-3-甲酸的制备。
参照实施例32的方法制备，仅是用1-甲基-6-溴-1H-吲哚-3-甲酸甲酯代替1-甲基-5-溴-1H-吲哚-2-甲酸甲酯。
产物表征数据为：1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.02(d,J＝8.8Hz,1H),7.69(s,1H),7.46-7.43(m,2H),7.38-7.33(m,1H),6.64(m,1H),6.30(s,1H),4.22(s,2H),3.99(m,1H),3.77(s,3H),3.35(m,2H),3.26(m,2H),2.18(m,3H),1.95(m,2H),1.82(m,2H),1.29(m,2H),1.15(m,2H)。
实施例34
2-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}喹啉-6-甲酸的制备。
参照实施例10的方法制备，仅是用2-氯喹啉-6-甲酸甲酯代替间溴苯甲酸甲酯。
产物表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:9.12(m,1H),8.55(m,2H),8.28(m,1H),7.40(m,2H),7.37(m,1H),6.43(m,1H),4.16(s,2H),3.96-3.76(m,5H),2.20-2.02(m,5H),1.79(m,2H),1.23(m,2H),1.12(m,2H)。
实施例35
5-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}吡嗪-2-甲酸的制备。
(1)5-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}吡嗪-2-甲酸甲酯的制备。
将4-{[7-氮杂[3.5]壬烷-2-氧基]甲基}-5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑(100mg,0.24mmol)溶于DMF(5mL)，加入5-氯吡嗪-2-甲酸甲酯(45mg,0.26mmol)和碳酸钾(81mg,0.59mmol)，80℃加热反应2小时。待反应液冷至室温，将其倒入水(20mL)中，用乙酸乙酯(15mL×2)萃取，有机层用饱和食盐水(20mL×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，经柱层析纯化(石油醚：乙酸乙酯＝1.5:1)得100mg褐色油状物，即为5-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}吡嗪-2-甲酸甲酯，收率：81％。
表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.81(m,1H),7.86(m,1H),7.46-7.44(m,2H),7.39-7.34(m,1H),4.21(s,2H),3.97(m,4H),3.58-3.44(m,4H),2.16(m,3H),1.98(m,2H),1.83(m,2H),1.29(m,2H),1.15(m,2H)。
(2)5-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}吡嗪-2-甲酸的制备。
将5-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}吡嗪-2-甲酸甲酯(100mg,0.19mmol)溶于四氢呋喃(2mL)、甲醇(2mL)和水(1mL)中，加入氢氧化锂一水合物(40mg,0.95mmol)，室温反应过夜。旋干，加水(15mL)，用1N HCl调pH至2左右，过滤，烘干，得73mg白色固体，即为5-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}吡嗪-2-甲酸，收率：75％。
表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.86(s,1H),7.80(s,1H),7.46-7.43(m,2H),7.39-7.34(m,1H),4.21(s,2H),3.97(m,1H),3.51(m,4H),2.16(m,3H),1.97(m,2H),1.82(m,2H),1.28(m,2H),1.15(m,2H)。
实施例36
6-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}吡啶-2-甲酸的制备。
参照实施例35的方法制备，仅是用6-氯吡啶-2-甲酸甲酯代替5-氯吡嗪-2-甲酸甲酯。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:7.62(m,1H),7.46-7.37(m,4H),6.56(m,1H),4.22(s,2H),3.98(m,1H),3.49-3.35(m,4H),2.17(m,3H),1.96(m,2H),1.82(m,2H),1.27(m,2H),1.15(m,2H)。
实施例37
4-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}-3-氟苯甲酸的制备。
参照实施例10的方法制备，仅是用3-氟-4-溴苯甲酸甲酯代替间溴苯甲酸甲酯。
产物表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:7.75(m,1H),7.68(m,1H),7.45-7.43(m,2H),7.38-7.33(m,1H),6.51(m,1H),4.21(s,2H),3.96(m,1H),3.50-3.38(m,4H),2.16(m,3H),1.87(m,2H),1.78(m,2H),1.28(m,2H),1.15(m,2H)。
实施例38
2-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氟苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制备。
参照实施例8的方法制备，仅是用2,6-二氟苯甲醛代替2,6-二氯苯甲醛。
产物表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.39(s,1H),8.08(d,J＝8.4Hz,1H),7.60(d,J＝8.4Hz,1H),7.46(m,1H),7.08-7.03(m,2H),4.29(s,2H),3.97(m,1H),3.59(m,4H),2.27-2.16(m,3H),2.02(m,2H),1.90(m,2H),1.28(m,2H),1.15(m,2H)。
实施例39
2-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氟苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}苯并[d]噁唑-6-甲酸的制备。
参照实施例14的方法制备，仅是用2,6-二氟苯甲醛代替2,6-二氯苯甲醛。
产物表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.03(d,J＝8.4Hz,1H),8.00(s,1H),7.46(m,1H),7.39(d,J＝8.4Hz,1H),7.06(m,2H),4.29(s,2H),3.98(m,1H),3.66(m,2H),3.58(d,J＝11.2Hz,2H),2.27-2.15(m,3H),1.98(m,2H),1.88(m,2H),1.27(m,2H),1.15(m,2H)。
实施例40
2-{6-{[5-环丙基-3-(2,6-二氟苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制备。
参照实施例23的方法制备，仅是用2,6-二氟苯甲醛代替2,6-二氯苯甲醛。
产物表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.42(s,1H),8.10(m,1H),7.62(d,J＝8.4Hz,1H),7.44(m,1H),7.10(d,J＝8.4Hz,1H),7.03(m,2H),6.73(m,1H),6.64(m,1H),4.90(s,2H),4.78(s,2H),3.90(t,J＝5.6Hz,2H),2.97(t,J＝5.6Hz,2H),2.19(m,1H),1.28(t,m,2H),1.14(m,2H)。
实施例41
2-{2-{[5-环丙基-3-(2-三氟甲基苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制备。
参照实施例8的方法制备，仅是用2-三氟甲基苯甲醛代替2,6-二氯苯甲醛。
产物表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.39(s,1H),8.08(d,J＝8.4Hz,1H),7.82(d,J＝7.6Hz,1H),7.69-7.59(m,3H),7.49(m,1H),4.15(s,2H),3.96(m,1H),3.56(m,4H),2.24(m,2H),2.13(m,1H),2.03(m,2H),1.86(m,2H),1.27(m,2H),1.15(m,2H)。
实施例42
2-{2-{[5-环丙基-3-(2-三氟甲基苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}苯并[d]噁唑-6-甲酸的制备。
参照实施例14的方法制备，仅是用2-三氟甲基苯甲醛代替2,6-二氯苯甲醛。
产物表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.02(m,2H),7.82(d,J＝7.6Hz,1H),7.64(m,2H),7.49(m,1H),7.39(m,1H),4.15(s,2H),3.96(m,1H),3.68(m,2H),3.58(d,J＝11.2Hz,2H),2.23(m,2H),2.13(m,1H),1.99(m,2H),1.86(m,2H),1.28(m,2H),1.14(m,2H)。
实施例43
2-{6-{[5-环丙基-3-(2-三氟甲基苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制备。
参照实施例23的方法制备，仅是用2-三氟甲基苯甲醛代替2,6-二氯苯甲醛。
产物表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.41(s,1H),8.09(d,J＝8.4Hz,1H),7.81(m,1H),7.60(m,3H),7.48(m,1H),7.10(d,J＝8.4Hz,1H),6.73(m,1H),6.66(m,1H),4.78(s,2H),4.75(s,2H),3.89(m,2H),2.98(m,2H),2.16(m,1H),1.29(t,m,2H),1.15(m,2H)。
实施例44
6-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}吡啶-3-甲酸的制备。
参照实施例35的方法制备，仅是用6-氯吡啶-3-甲酸甲酯代替5-氯吡嗪-2-甲酸甲酯。
产物表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.86(s,1H),8.03(m,1H),7.43-7.34(m,3H),6.27(m,1H),4.20(s,2H),3.96(m,1H),3.45(m,4H),2.15(m,3H),1.92(m,2H),1.79(m,2H),1.28(m,2H),1.14(m,2H)。
实施例45
5-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}吡啶-2-甲酸的制备。
参照实施例32的方法制备，仅是用5-溴吡啶-2-甲酸甲酯代替1-甲基-6-溴-1H-吲哚-3-甲酸甲酯。
产物表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.02(m,1H),7.83(s,1H),7.45-7.35(m,3H),6.81(m,1H),4.21(s,2H),3.99(m,1H),3.36-3.25(m,4H),2.16(m,3H),1.98(m,2H),1.82(m,2H),1.28(m,2H),1.15(m,2H)。
实施例46
6-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}哒嗪-3-甲酸的制备。
参照实施例35的方法制备，仅是用6-氯哒嗪-3甲酸甲酯代替5-氯吡嗪-2-甲酸甲酯。
产物表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:7.97(d,J＝10.4Hz,1H),7.43(s,2H),7.38(m,1H),6.67(m,1H),4.20(s,2H),3.97(m,1H),3.52(m,4H),2.15(m,3H),1.98(m,2H),1.80(m,2H),1.28(m,2H),1.15(m,2H)。
实施例47
2-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}-N-(甲磺酰基)苯并[d]噻唑-6-甲酰胺的制备。
将2-{2-{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}-6-氮杂螺[3.4]辛烷-6-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸(50mg,0.088mmol)溶于二氯甲烷(5mL)，加入DMAP(19.5mg,0.16mmol)和EDC.HCl(31mg,0.16mmol)，室温搅拌过夜。将反应液倒入水(20mL)中，用二氯甲烷(20mL x 2)萃取，饱和食盐水(20mL x 2)洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干，经柱层析纯化(二氯甲烷：甲醇＝30:1)得34mg灰白色固体，收率：60％。
产物表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.19(s,1H),7.77(d,J＝8.4Hz,1H),7.55(d,J＝8.4Hz,1H),7.47-7.41(m,2H),7.38-7.33(m,1H),4.18(s,1H),3.95(m,1H),3.53(m,4H),3.40(s,4H),2.20-2.14(m,3H),1.99(m,2H),1.80(m,2H),1.26(m,2H),1.16(m,2H)。
实施例48
2-{4-{{[5-环丙基-3-(2,6-二氯苯基)异噁唑-4-基]甲氧基}甲基}哌啶-1-基}苯并[d]噻唑-6-甲酸的制备。
参照实施例2的方法制备，仅是用4-(羟甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯代替2-羟基7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-甲酸叔丁酯。
产物表征数据为：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.37(d,J＝1.6Hz,1H),8.06(dd,J＝1.6Hz,8.4Hz,1H),7.59(d,J＝8.8Hz,1H),7.46-7.44(m,2H),7.38-7.34(m,1H),4.19(s,2H),3.33(m,2H),2.98(m,4H),2.15(m,1H),1.85(m,1H),1.43(m,4H),1.28(m,2H),1.15(m,2H)。
实验例
将上述实施例制备得到的化合物进行FXR激动活性的体外测试。
AlphaScreen测试，采用珀金埃尔默仪器有限公司(Perkins-Elmer)的六聚组氨酸检测试剂盒(hexahistidine detection kit)，检测化合物对人法尼醇受体蛋白结合其共激活因子(SRC1-2)的影响，方法如下：
1)制备混合物，包括人法尼醇受体蛋白hFXR(100nM,15μL/孔)、多肽bSRC1-2(50nM,15μL/孔)、10×AlphaScreen缓冲液(15μL/孔)、去离子水(60μL/孔)，转入96孔板，105μL/孔；
2)上述实施例制备得到的化合物按照2倍倍比稀释12次，15μL/孔；
3)供体微珠、受体微珠一共30μL/孔；(注意：避光操作)
4)室温避光孵育2h；
5)转384孔板，40μL/孔，3个复孔。瞬时离心1000rpm，1分钟，使液滴充分混合在孔底；(注意：避光操作)
6)暗室里，仪器读板(均相发光免疫检测系统)，EC50由数据处理软件GraphPadPrism5处理得到。
结果如下表1所示：
表1 FXR激动活性测试结果
注：nM为n mol/L，A代表EC50<100nM，B代表100nM<EC50<1000nM，C代表EC50>1000nM，GW4064为阳性对照化合物，其结构如下：
从上述结果中可以看出，本发明的化合物对FXR有较好的激动活性，特别是其中部分化合物，对FXR激动的EC50达到100nM以下，显示出了非常好的FXR激动活性。
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (10)

1.具有式I结构特征的FXR受体调节剂或其药学上可接受的盐或立体异构体：
其中：
R1为环丙基；
Ar1选自：1-3个R6取代的苯基，R6选自：卤素或被1-3个氟原子取代的C1烷基；
X选自以下取代基：
c选自：0、1、2或3；
d选自：0、1、2或3；
e选自：0、1、2或3；
f选自：0、1、2或3；
当X为时，
其中，d选自：1、2或3，e选自：0、1、2或3，或，d选自：0，e选自：1、2或3；
R3独立地任选自：氢或1-5个R7取代的C1烷基；R7独立地任选自：氢或卤素；
Ar2选自：
R8选自：氢、卤素或C1烷氧基；
Y选自：COOR4或C(O)NHSO2R4；
R4独立地任选自：氢或或C1烷基。
2.根据权利要求1所述的FXR受体调节剂或其药学上可接受的盐或立体异构体，其特征在于，
Ar2选自以下基团：
R8选自：氢、卤素或C1烷氧基。
3.根据权利要求1或2所述的FXR受体调节剂或其药学上可接受的盐或立体异构体，其特征在于，
X选自以下取代基：
其中：d、e、f和R3如权利要求1所述。
4.根据权利要求1所述的FXR受体调节剂或其药学上可接受的盐或立体异构体，其特征在于，
X选自以下取代基：
当X为时，
d选自：1或2，e选自：0或1，或，
d选自：0，e选自：1；
f选自：0或1；
当X为时，
d选自：0、1或2；
R3独立地任选自：氢或1-5个R7取代的C1烷基；R7独立地任选自：氢或卤素。
5.根据权利要求1所述的FXR受体调节剂或其药学上可接受的盐或立体异构体，其特征在于，
X选自：
当X为时，
d选自：1或2，e选自：0、1或2，或，
d选自：0，e选自：1或2；
f选自：0、1或2；
当X为时，
c选自：0、1或2；
R3独立地任选自：氢或1-5个R7取代的C1烷基；R7独立地任选自：氢或卤素。
6.根据权利要求1所述的FXR受体调节剂或其药学上可接受的盐或立体异构体，其特征在于，选自如下化合物之一：
7.权利要求1-6任一项所述的FXR受体调节剂的制备方法，其特征在于，包括以下合成路线：
路线一：
或者
路线二：
或者
路线三：
其中：
EL1选自：卤素、烷基磺酰氧基或芳基磺酰氧基；
EL2选自：卤素；
R选自：C1～C6烷基；
R’为氢；
L为SO2CH3。
8.权利要求1-6任一项所述的FXR受体调节剂或其药学上可接受的盐或立体异构体在制备预防和治疗由FXR介导的疾病的药物中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述由FXR介导的疾病包括：非酒精性脂肪性肝病，慢性肝内或肝外胆汁淤积病症，由慢性胆汁淤积病症或者急性肝内胆汁淤积病症导致的肝纤维化，慢性乙型肝炎，胆囊结石，肝癌，结肠癌，或者肠道炎性疾病。
10.一种药物组合物，其特征在于，包括权利要求1-6任一项所述的FXR受体调节剂或其药学上可接受的盐或立体异构体，以及药学上可以接受的辅料。
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Families Citing this family (53)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2545964A1 (en) 2011-07-13 2013-01-16 Phenex Pharmaceuticals AG Novel FXR (NR1H4) binding and activity modulating compounds
EP3277286B1 (en) 2015-03-31 2021-04-21 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Bile acid derivatives as fxr/tgr5 agonists and methods of use thereof
US10080742B2 (en) 2016-04-26 2018-09-25 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Isoxazole derivatives as FXR agonists and methods of use thereof
US10080741B2 (en) 2016-04-26 2018-09-25 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Isoxazole derivatives as FXR agonists and methods of use thereof
US10080743B2 (en) 2016-04-26 2018-09-25 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Isoxazole derivatives as FXR agonists and methods of use thereof
WO2017201152A1 (en) 2016-05-18 2017-11-23 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Isoxazole derivatives as fxr agonists and methods of use thereof
US10149835B2 (en) 2016-05-18 2018-12-11 Elmore Patent Law Group, P.C. Isoxazole derivatives as FXR agonists and methods of use thereof
WO2017201150A1 (en) 2016-05-18 2017-11-23 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Isoxazole analogs as fxr agonists and methods of use thereof
NZ748641A (en) 2016-06-13 2020-04-24 Gilead Sciences Inc Fxr (nr1h4) modulating compounds
CA2968836A1 (en) 2016-06-13 2017-12-13 Gilead Sciences, Inc. Fxr (nr1h4) modulating compounds
TW201808283A (zh) 2016-08-05 2018-03-16 廣東東陽光藥業有限公司 含氮三環化合物及其在藥物中的應用
WO2018059314A1 (zh) * 2016-09-28 2018-04-05 四川科伦博泰生物医药股份有限公司 氮杂双环衍生物及其制备方法和用途
KR20190056436A (ko) 2016-10-04 2019-05-24 이난타 파마슈티칼스, 인코포레이티드 Fxr 작용제로서의 이속사졸 유사체 및 그의 사용 방법
WO2018081285A1 (en) 2016-10-26 2018-05-03 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Urea-containing isoxazole derivatives as fxr agonists and methods of use thereof
CN108017636A (zh) * 2016-11-04 2018-05-11 合帕吉恩治疗公司 作为fxr调节剂的含氮杂环化合物
CN108218852A (zh) * 2016-12-15 2018-06-29 宁波百纳西药业有限公司 一种螺环化合物、其制备方法、组合物及用途
CN108341822B (zh) * 2017-01-23 2021-04-16 广州市恒诺康医药科技有限公司 Fxr受体调节剂及其制备方法和应用
SI3600309T1 (sl) 2017-03-28 2022-10-28 Gilead Sciences, Inc. Terapevtske kombinacije za zdravljenje bolezni jeter
CN109265471B (zh) * 2017-06-30 2021-06-04 轩竹生物科技有限公司 Fxr受体激动剂
CN109320517B (zh) * 2017-07-31 2021-08-17 轩竹生物科技有限公司 Fxr受体激动剂
CN109320509B (zh) * 2017-07-31 2022-02-08 轩竹生物科技股份有限公司 Fxr受体激动剂
CN109575008B (zh) * 2017-09-29 2020-11-17 轩竹生物科技有限公司 Fxr受体激动剂
JP7212693B2 (ja) 2017-11-01 2023-01-25 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー ファルネソイドｘ受容体モジュレーターとしての架橋二環化合物
KR20200081435A (ko) * 2017-11-01 2020-07-07 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 파르네소이드 x 수용체 조정제로서의 멀티시클릭 화합물
SG11202003825TA (en) * 2017-11-01 2020-05-28 Bristol Myers Squibb Co Spirocyclic compounds as farnesoid x receptor modulators
WO2019089670A1 (en) 2017-11-01 2019-05-09 Bristol-Myers Squibb Company Alkene compounds as farnesoid x receptor modulators
AU2018360575A1 (en) * 2017-11-01 2020-06-18 Bristol-Myers Squibb Company Alkene spirocyclic compounds as farnesoid X receptor modulators
US10689391B2 (en) 2017-12-12 2020-06-23 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Isoxazole analogs as FXR agonists and methods of use thereof
CN110128432B (zh) 2018-02-02 2021-03-02 广东东阳光药业有限公司 含氮三环化合物及其在药物中的应用
WO2019160813A1 (en) 2018-02-14 2019-08-22 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Isoxazole derivatives as fxr agonists and methods of use thereof
CN110452235B (zh) * 2018-05-08 2023-02-17 中国科学院上海药物研究所 一类含氟异噁唑类化合物及其制备方法、药物组合物和用途
CN110818704B (zh) * 2018-08-08 2023-08-01 广州市恒诺康医药科技有限公司 螺桥环化合物、其药物组合物及其用途
EA202191566A1 (ru) 2019-01-15 2021-11-01 Джилид Сайенсиз, Инк. Соединения, модулирующие fxr (nr1h4)
KR20210123337A (ko) * 2019-01-31 2021-10-13 더 내셔널 인스티튜츠 오브 파마슈티컬 알앤디 컴퍼니 리미티드 방향족 고리 또는 헤테로방향족 고리 화합물, 이의 제조 방법 및 이의 의학 용도
WO2020168152A2 (en) 2019-02-15 2020-08-20 Bristol-Myers Squibb Company Substituted amide compounds useful as farnesoid x receptor modulators
AR118050A1 (es) 2019-02-15 2021-09-15 Bristol Myers Squibb Co Compuestos bicíclicos sustituidos como moduladores del receptor farnesoide x
CN118388473A (zh) 2019-02-19 2024-07-26 吉利德科学公司 Fxr激动剂的固体形式
US11555032B2 (en) 2019-05-13 2023-01-17 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Isoxazole derivatives as FXR agonists and methods of use thereof
KR20220035365A (ko) 2019-07-18 2022-03-22 엔요 파마 인터페론의 부작용을 감소시키는 방법
CN114080234A (zh) 2019-07-23 2022-02-22 诺华股份有限公司 包含fxr激动剂的治疗
TW202114672A (zh) 2019-07-23 2021-04-16 瑞士商諾華公司 使用fxr促效劑的肝臟疾病之組合治療
BR112022003884A2 (pt) 2019-09-03 2022-05-31 Novartis Ag Tratamento de doença ou distúrbio hepático compreendendo antagonistas do receptor de actrii
WO2021053618A1 (en) 2019-09-19 2021-03-25 Novartis Ag Treatment comprising fxr agonists
WO2021064575A1 (en) 2019-09-30 2021-04-08 Novartis Ag Treatment comprising the use of fxr agonists
TW202135811A (zh) 2019-12-20 2021-10-01 瑞士商諾華公司 使用整聯蛋白抑制劑組合治療肝臟疾病
CN113105443B (zh) * 2020-01-13 2022-10-04 中国药科大学 异噁唑类fxr受体激动剂、其制备方法和医药用途
AU2021207253A1 (en) 2020-01-15 2022-06-09 Centre National De La Recherche Scientifique Use of FXR agonists for treating an infection by hepatitis D virus
WO2022101853A1 (en) 2020-11-16 2022-05-19 Novartis Ag Method of determining liver fibrosis
CN116529246A (zh) * 2020-11-23 2023-08-01 豪夫迈·罗氏有限公司 用于治疗和预防乙型肝炎病毒感染的n-[(1,3-苯并噁唑-2-基)-杂环]酰胺衍生物
JP2024501700A (ja) * 2020-12-30 2024-01-15 ターンズ・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド Ｆｘｒを調節するための化合物及び方法
WO2022152770A1 (en) 2021-01-14 2022-07-21 Enyo Pharma Synergistic effect of a fxr agonist and ifn for the treatment of hbv infection
EP4329761A1 (en) 2021-04-28 2024-03-06 ENYO Pharma Strong potentiation of tlr3 agonists effects using fxr agonists as a combined treatment
CN114315844B (zh) * 2022-01-18 2023-06-27 中国科学院上海药物研究所 一类fxr调节剂及其制备方法和用途

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MX2009013624A (es) * 2007-06-13 2010-04-27 Glaxosmithkline Llc Agonistas de receptor farnesoide x.
TW200906823A (en) * 2007-07-16 2009-02-16 Lilly Co Eli Compounds and methods for modulating FXR
EP2128158A1 (en) * 2008-05-26 2009-12-02 Phenex Pharmaceuticals AG Heterocyclic cyclopropyl-substituted FXR binding compounds
CU24152B1 (es) * 2010-12-20 2016-02-29 Irm Llc 1,2 oxazol-8-azabiciclo[3,2,1]octano 8 il como moduladores de fxr
CN103391937A (zh) * 2010-12-20 2013-11-13 Irm责任有限公司 用于调控法尼醇x受体的组合物和方法
JP2014500318A (ja) * 2010-12-20 2014-01-09 アイアールエム・リミテッド・ライアビリティ・カンパニー ファルネソイドｘ受容体を調節するための組成物および方法
CN104045635A (zh) * 2014-06-23 2014-09-17 华东理工大学 3,4,5-三取代异恶唑类化合物及其用途
CN106146483A (zh) * 2015-04-23 2016-11-23 上海迪诺医药科技有限公司 杂环类法尼酯衍生物x受体调节剂

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