CN106692953A - 一种蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂及其制备方法与应用 - Google Patents
一种蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂及其制备方法与应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN106692953A CN106692953A CN201710063626.0A CN201710063626A CN106692953A CN 106692953 A CN106692953 A CN 106692953A CN 201710063626 A CN201710063626 A CN 201710063626A CN 106692953 A CN106692953 A CN 106692953A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- blue shark
- collagen
- gel preparation
- blue
- shark collagen
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/39—Connective tissue peptides, e.g. collagen, elastin, laminin, fibronectin, vitronectin, cold insoluble globulin [CIG]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
- A61K31/716—Glucans
- A61K31/722—Chitin, chitosan
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
- A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
- A61K47/38—Cellulose; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/06—Ointments; Bases therefor; Other semi-solid forms, e.g. creams, sticks, gels
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Meat, Egg Or Seafood Products (AREA)
- Cosmetics (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
本发明公开了一种蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂，其特征在于，该凝胶制剂由以下重量百分比的组分组成：蓝鲨鱼皮胶原蛋白1‑9%，壳聚糖0.25‑2.25%，余量为凝胶基质。本发明还提供了上述凝胶制剂的制备方法。该凝胶制剂可以用于修复口腔创面。
Description
技术领域
本发明属于医用生物材料领域，涉及一种凝胶制剂，特别是一种蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂及其制备方法与应用。
背景技术
水产胶原蛋白是一种天然的生物高分子材料，具有低抗原性、止血性、可生物吸收，可以对创伤的皮肤海绵组织提供持续而缓慢的给药，促进肉芽生长、防止再出血，促进伤口愈合。
壳聚糖是自然界中存在的天然碱性多糖，是甲壳素的脱乙酰基产物，甲壳素在自然界中含量仅次于纤维素，来源广泛。壳聚糖作为一种天然高分子材料，具有良好的生物相容性、可降解性、抗菌性、促愈性、无毒、对粘膜无刺激性，可以促进黏膜粘附，在生物医用材料领域具有广泛的应用。
口腔溃疡是一种最常见的深达真皮的粘膜上皮局限性缺损，是口腔粘膜病中最常见的临床表现，患病率高达20%。口腔溃疡病理改变以口腔局部黏膜溃疡性损害为主，发病机制极其复杂，与遗传因素、免疫因素等很多因素有关，具有周期性及烧灼性疼痛特点，一旦形成溃疡后可继续感染，造成溃疡局部组织炎症和坏死，病程迁延，其病因未完全明确，跟免疫、遗传、精神因素、维生素类缺乏等有关，因而治疗药物较多，效果不尽理想，目前临床上无根治的特效方法。
发明内容
本发明要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提出了一种蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂。
本发明还提供了前述凝胶制剂的一种制备方法。
本发明还提供了前述凝胶制剂制备修复口腔创面药物中的应用。
本发明要解决的技术问题是通过以下技术方案来实现的，一种蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂，其特点是，该凝胶制剂由以下重量百分比的组分组成：
蓝鲨鱼皮胶原蛋白 1-9%；
壳聚糖 0.25-2.25%；
余量为凝胶基质。
本发明所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白采用以下方法进行制备：
（1）取蓝鲨鱼皮，剔除皮下肌肉和脂肪组织，再至于蒸馏水中浸泡0.5-1h，将鱼皮剪成大小为3-5 mm×3-5 mm的鱼皮块，过滤抽干备用；
（2）将步骤（1）中得到的鱼皮块置于0.25-0.5 M NaOH溶液中浸泡脱脂，搅拌4-12h，置于4℃冷藏8-16h，取出后用蒸馏水冲洗干净；
（3）将脱脂处理处理后的鱼皮块置于70%乙醇溶液中浸泡脱糖，搅拌4-6h，取出后用蒸馏水冲洗干净；
（4）将脱糖处理过的鱼皮块粉碎，置于0.25M冰醋酸溶液中浸泡并搅拌2-6h，置于4℃冷藏12h，得鱼皮提取液；
（5）取鱼皮提取液过滤，收集滤液，向滤液中加入0.25-0.5M的NaOH溶液至溶液pH达6.8-7.0，至大量白色絮状物析出，过滤取沉淀物，沉淀物用蒸馏水清洗后挤干密封，冷冻干燥，得蓝鲨鱼皮胶原蛋白块状提取物；
（6）将蓝鲨鱼皮胶原蛋白块状提取物在液氮低温环境下进行超细粉碎处理，得粉状蓝鲨鱼皮胶原蛋白。
本发明所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白的分子量为100-300 KDa。
进一步优选地，所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白的分子量为130-200 KDa。
本发明所述的壳聚糖的脱乙酰度>95%。
本发明所述的凝胶基质包括以下重量份的原料：
山梨糖醇 30-40；
甘油 8-12；
纤维素胶 1.3-1.6；
羟苯甲酯钠 0.13-0.17；
羟苯丙酯钠 0.09-0.11；
柠檬酸 0.03-0.06；
水 50-56。
进一步优选地，所述的凝胶基质包括以下重量份的原料：
山梨糖醇 33-37；
甘油 9.5-10.5；
纤维素胶 1.2-1.5；
羟苯甲酯钠 0.14-0.15；
羟苯丙酯钠 0.09-0.1；
柠檬酸 0.05-0.06；
水 53-55。
进一步优选地，所述的凝胶基质包括以下重量份的原料：
山梨糖醇 35；
甘油 10；
纤维素胶 1.5；
羟苯甲酯钠 0.15；
羟苯丙酯钠 0.1；
柠檬酸 0.05；
水 53.2。
本发明还提供了以上技术方案所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂的制备方法，其特点是，该凝胶制剂采用如下方法制备：将粉状蓝鲨鱼皮胶原蛋白与壳聚糖混合，得混合物，向混合物中加入凝胶基质，充分混合研磨，即得蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂；其中，将凝胶基质中的各组分充分混匀后再加入蓝鲨鱼皮胶原蛋白与壳聚糖的混合物中。
本发明所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂可用于修复口腔创面。
本发明以蓝鲨鱼皮下脚料为原料，通过简便、高效的等电点沉淀法技术，提取出蓝鲨鱼皮胶原蛋白，有效利用了蓝鲨下脚料，变废为宝，提高了水产品加工业的附加值。本发明蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂在应用时直接涂抹于口腔溃疡面，本发明凝胶制剂中使用的蓝鲨鱼皮胶原蛋白和壳聚糖均为天然可降解的生物医用材料，通过合理的配伍，将蓝鲨鱼皮胶原蛋白和壳聚糖共同使用，同时发挥两种生物材料的功效，避免了单一治疗的弊端，具有优异的生物相容性，可用于修复口腔创面，能够显著加速缩小口腔溃疡直径，减轻充血水肿程度，加速口腔溃疡愈合，而且疗效显著，无不良反应，粘膜刺激性低，降解性好。
附图说明
图1为本发明实施例19的蓝鲨鱼皮胶原蛋白凝胶制剂对大鼠口腔溃疡疗效的光学显微镜观察结果。图中：（a）模型组；(b) 高剂量组；(c) 中剂量组；（d）低剂量组；（e）单一胶原蛋白组；（f）凝胶组；（g）阳性对照组。
具体实施方式
以下结合具体实施例及附图，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例1，一种蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂，该凝胶制剂由以下重量百分比的组分组成：
蓝鲨鱼皮胶原蛋白 9%；
壳聚糖 2.25%；
余量为凝胶基质。
实施例2，一种蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂，该凝胶制剂由以下重量百分比的组分组成：
蓝鲨鱼皮胶原蛋白 3%；
壳聚糖 0.75%；
余量为凝胶基质。
实施例3，一种蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂，该凝胶制剂由以下重量百分比的组分组成：
蓝鲨鱼皮胶原蛋白 1%；
壳聚糖 0.25%；
余量为凝胶基质。
实施例4，一种蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂，该凝胶制剂由以下重量百分比的组分组成：
蓝鲨鱼皮胶原蛋白 4%；
壳聚糖 1%；
余量为凝胶基质。
实施例5，实施例1-4任何一项所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂中，所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白的制备方法如下：
（1）取蓝鲨鱼皮，剔除皮下肌肉和脂肪组织，再至于蒸馏水中浸泡0.5h，将鱼皮剪成大小为3mm ×3mm的鱼皮块，过滤抽干备用；
（2）将步骤（1）中得到的鱼皮块置于0.25M NaOH溶液中浸泡脱脂，搅拌4h，置于4℃冷藏8h，取出后用蒸馏水冲洗干净；
（3）将脱脂处理处理后的鱼皮块置于70%乙醇溶液中浸泡脱糖，搅拌4h，取出后用蒸馏水冲洗干净；
（4）将脱糖处理过的鱼皮块粉碎，置于0.25M冰醋酸溶液中浸泡并搅拌2h，置于4℃冷藏12h，得鱼皮提取液；
（5）取鱼皮提取液过滤，收集滤液，向滤液中加入0.25M的NaOH溶液至溶液pH达6.8，至大量白色絮状物析出，过滤取沉淀物，沉淀物用蒸馏水清洗后挤干密封，冷冻干燥，得蓝鲨鱼皮胶原蛋白块状提取物；
（6）将蓝鲨鱼皮胶原蛋白块状提取物在液氮低温环境下进行超细粉碎处理，得粉状蓝鲨鱼皮胶原蛋白。
实施例6，实施例1-4任何一项所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂中，所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白的制备方法如下：
（1）取蓝鲨鱼皮，剔除皮下肌肉和脂肪组织，再至于蒸馏水中浸泡1h，将鱼皮剪成大小为5 mm ×5 mm的鱼皮块，过滤抽干备用；
（2）将步骤（1）中得到的鱼皮块置于0.5 M NaOH溶液中浸泡脱脂，搅拌12h，置于4℃冷藏16h，取出后用蒸馏水冲洗干净；
（3）将脱脂处理处理后的鱼皮块置于70%乙醇溶液中浸泡脱糖，搅拌6h，取出后用蒸馏水冲洗干净；
（4）将脱糖处理过的鱼皮块粉碎，置于0.25M冰醋酸溶液中浸泡并搅拌6h，置于4℃冷藏12h，得鱼皮提取液；
（5）取鱼皮提取液过滤，收集滤液，向滤液中加入0.5M的NaOH溶液至溶液pH达7.0，至大量白色絮状物析出，过滤取沉淀物，沉淀物用蒸馏水清洗后挤干密封，冷冻干燥，得蓝鲨鱼皮胶原蛋白块状提取物；
（6）将蓝鲨鱼皮胶原蛋白块状提取物在液氮低温环境下进行超细粉碎处理，得粉状蓝鲨鱼皮胶原蛋白。
实施例7，实施例1-4任何一项所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂中，所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白的制备方法如下：
（1）取蓝鲨鱼皮，剔除皮下肌肉和脂肪组织，再至于蒸馏水中浸泡1h，将鱼皮剪成大小为4 mm ×4mm的鱼皮块，过滤抽干备用；
（2）将步骤（1）中得到的鱼皮块置于0.4M NaOH溶液中浸泡脱脂，搅拌8h，置于4℃冷藏12h，取出后用蒸馏水冲洗干净；
（3）将脱脂处理处理后的鱼皮块置于70%乙醇溶液中浸泡脱糖，搅拌5h，取出后用蒸馏水冲洗干净；
（4）将脱糖处理过的鱼皮块粉碎，置于0.25M冰醋酸溶液中浸泡并搅拌4h，置于4℃冷藏12h，得鱼皮提取液；
（5）取鱼皮提取液过滤，收集滤液，向滤液中加入0.4M的NaOH溶液至溶液pH达6.9，至大量白色絮状物析出，过滤取沉淀物，沉淀物用蒸馏水清洗后挤干密封，冷冻干燥，得蓝鲨鱼皮胶原蛋白块状提取物；
（6）将蓝鲨鱼皮胶原蛋白块状提取物在液氮低温环境下进行超细粉碎处理，得粉状蓝鲨鱼皮胶原蛋白。
实施例8，实施例1-7任何一项所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂中，所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白的分子量为100KDa。
实施例9，实施例1-7任何一项所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂中，所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白的分子量为300 KDa。
实施例10，实施例1-7任何一项所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂中，所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白的分子量为130 KDa。
实施例11，实施例1-7任何一项所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂中，所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白的分子量为200 KDa。
实施例12，实施例1-11任何一项所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂中，所述的壳聚糖的脱乙酰度>95%。
实施例13，实施例1-12任何一项所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂中，所述的凝胶基质包括以下重量份的原料：
山梨糖醇 30；
甘油 8；
纤维素胶 1.3；
羟苯甲酯钠 0.13；
羟苯丙酯钠 0.09；
柠檬酸 0.03；
水 50。
实施例14，实施例1-12任何一项所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂中，所述的凝胶基质包括以下重量份的原料：
山梨糖醇 40；
甘油 12；
纤维素胶 1.6；
羟苯甲酯钠 0.17；
羟苯丙酯钠 0.11；
柠檬酸 0.06；
水 56。
实施例15，实施例1-12任何一项所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂中，所述的凝胶基质包括以下重量份的原料：
山梨糖醇 33；
甘油 9.5；
纤维素胶 1.2；
羟苯甲酯钠 0.14；
羟苯丙酯钠 0.09；
柠檬酸 0.05；
水 53。
实施例16，实施例1-12任何一项所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂中，所述的凝胶基质包括以下重量份的原料：
山梨糖醇 37；
甘油 10.5；
纤维素胶 1.5；
羟苯甲酯钠 0.15；
羟苯丙酯钠 0.1；
柠檬酸 0.06；
水 55。
实施例17，实施例1-12任何一项所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂中，所述的凝胶基质包括以下重量份的原料：
山梨糖醇 35；
甘油 10；
纤维素胶 1.5；
羟苯甲酯钠 0.15；
羟苯丙酯钠 0.1；
柠檬酸 0.05；
水 53.2。
实施例18，实施例13-17任何一项所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂的制备方法如下：将蓝鲨鱼皮胶原蛋白与壳聚糖混合，得混合物，向混合物中加入凝胶基质，充分混合研磨，即得蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂；其中，将凝胶基质中的各组分充分混匀后再加入蓝鲨鱼皮胶原蛋白与壳聚糖的混合物中。
实施例19，实验例，蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂对大鼠实验性口腔溃疡的影响。
1、受试药物
本发明实施例1-3的蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂，其中：蓝鲨鱼皮胶原蛋白的制备方法采用实施例7所述的方法；蓝鲨鱼皮胶原蛋白的分子量为150KDa；壳聚糖的脱乙酰度＞95%；凝胶基质由以下重量份的原料制成：山梨糖醇35、甘油10、纤维素胶1.5、羟苯甲酯钠0.15、羟苯丙酯钠0.1、柠檬酸0.05、水53.2；蓝鲨鱼皮胶原蛋白的复合凝胶制剂的制备方法采用实施例18所述的方法。
2、试验动物
雄性SD大鼠，200～220 g，上海西普尔-必凯实验动物有限公司。
3、实验方法
取健康 SD 雄性大鼠 48只，随机分为7组，每组8只。分别为：模型组；受试药物组：3个剂量组（高剂量组：蓝鲨鱼皮胶原蛋白9%，壳聚糖2.25%加入100 mL凝胶基质；中剂量组：蓝鲨鱼皮胶原蛋白3%，壳聚糖0.75%加入100 mL凝胶基质；低剂量组：蓝鲨鱼皮胶原蛋白1%，壳聚糖0.25%加入100 mL凝胶基质）；阴性对照：单一胶原蛋白组（蓝鲨鱼皮胶原蛋白3%加入100 mL凝胶基质）和凝胶对照组（凝胶基质不加任何辅料）；阳性药对照：重组人表皮生长因子凝胶（桂林华诺威基因药业有限公司，批号：201412102A）。
大鼠用10%水合氯醛（3 mL/kg）麻醉，用内径0.4 cm，长3 cm的塑料管（一端塞棉花，以防溶液漏出）， 向管内注满35%冰醋酸溶液，将塞入棉花端于大鼠下嘴唇内侧粘膜表面垂直固定60s，即可观察到下嘴唇局部有红晕，24h后观察，出现溃疡，模型即成功建立。
造模24h后观察口腔溃疡面积，并开始给药，每天给药2次，模型组不给药。给药前用棉球蘸生理盐水轻轻擦拭大鼠口腔表面，分别用小药勺取相应的药物约100mg涂抹于口腔溃疡面，给药后禁食禁水30min。每天观察口腔溃疡表面情况，并于给药前、给药后第1天，第3天、第7天、第10天和第12天，游标卡尺测定溃疡长和宽，计算溃疡面积（面积=长×宽×3.14 / 4）。
给药12天后，模型组和各给药组均取6只肉眼观察溃疡较轻的大鼠麻醉处死，取一部分嘴唇溃疡及周围组织标本，用10%甲醛液固定，常规脱水、石蜡包埋切片、HE染色，光镜下观察溃疡组织的组织病理学变化。
5、统计方法
使用SPSS 17.0 软件处理数据，数据以平均值±标准差表示（± SD），组间采用单因素方差分析（one-way ANOVA）检验差异的显著性，P < 0.05为差异具有统计学意义。
6、实验结果
模型组口腔溃疡大鼠下嘴唇内黏膜处开始出现局部有红晕，形成溃疡后表面呈灰白色，周围有充血水肿，略微凹陷，溃疡较严重，造模1-3天溃疡直径略有扩大，随后口腔溃疡逐渐减轻。
蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂给药1天后，溃疡面扩大不明显；用药3天后，溃疡表面开始有假膜覆盖，溃疡直径缩小；用药12天后，假膜脱落，新鲜创面暴露，溃疡面明显缩小，溃疡陆续愈合。蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂各剂量组均可缩小溃疡直径，给药第3天、第7天、第10天和第12天， 溃疡面积与模型组比较差异具有统计学意义（P < 0.05），且作用具有一定的剂量依赖关系。对溃疡面积的影响结果见表1，对溃疡面积的影响光学显微镜观察结果见图1。
由图1可看出，造模后第12天，模型组口腔溃疡部位组织损伤较重，溃疡部位组织坏死也较明显，可见肉芽组织和纤维化；海洋鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂各剂量组和阳性对照组口腔溃疡部位组织损伤较轻，坏死程度显著减轻，肉芽组织和纤维化形成明显。单一胶原蛋白组和凝胶组口腔溃疡部位组织有所愈合，坏死程度轻，肉芽组织和纤维化形成较明显。
表1.蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂对实验性大鼠口腔溃疡面积的影响 (n =8，±s)
注：与模型组比较，*P < 0.05，**P < 0.01
7、结论
结果显示，本发明凝胶制剂可以明显减轻大鼠口腔溃疡面积及其坏死程度，与模型组相比，给药第3天即存在极显著性差异（P ＜0.01）。由病理切片结果可见，海洋鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂各剂量组口腔溃疡部位组织损伤较轻，坏死程度显著减轻，肉芽组织和纤维化形成明显。实验结果提示：本发明蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂具有修复口腔创面的作用。
Claims (9)
1.一种蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂，其特征在于，该凝胶制剂由以下重量百分比的组分组成：
蓝鲨鱼皮胶原蛋白 1-9%；
壳聚糖 0.25-2.25%；
余量为凝胶基质。
2.根据权利要求1所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂，其特征在于，所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白的制备方法如下：
（1）取蓝鲨鱼皮，剔除皮下肌肉和脂肪组织，再至于蒸馏水中浸泡0.5-1h，将鱼皮剪成大小为3-5 mm ×3-5 mm的鱼皮块，过滤抽干备用；
（2）将步骤（1）中得到的鱼皮块置于0.25-0.5 M NaOH溶液中浸泡脱脂，搅拌4-12h，置于4℃冷藏8-16h，取出后用蒸馏水冲洗干净；
（3）将脱脂处理处理后的鱼皮块置于70%乙醇溶液中浸泡脱糖，搅拌4-6h，取出后用蒸馏水冲洗干净；
（4）将脱糖处理过的鱼皮块粉碎，置于0.25M冰醋酸溶液中浸泡并搅拌2-6h，置于4℃冷藏12h，得鱼皮提取液；
（5）取鱼皮提取液过滤，收集滤液，向滤液中加入0.25-0.5M的NaOH溶液至溶液pH达6.8-7.0，至大量白色絮状物析出，过滤取沉淀物，沉淀物用蒸馏水清洗后挤干密封，冷冻干燥，得蓝鲨鱼皮胶原蛋白块状提取物；
（6）将蓝鲨鱼皮胶原蛋白块状提取物在液氮低温环境下进行超细粉碎处理，得粉状蓝鲨鱼皮胶原蛋白。
3.根据权利要求1或2所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂，其特征在于，所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白的分子量为100-300 KDa。
4.根据权利要求1所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂，其特征在于，所述的壳聚糖的脱乙酰度>95%。
5.根据权利要求1所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂，其特征在于，所述的凝胶基质包括以下重量份的原料：
山梨糖醇 30-40；
甘油 8-12；
纤维素胶 1.3-1.6；
羟苯甲酯钠 0.13-0.17；
羟苯丙酯钠 0.09-0.11；
柠檬酸 0.03-0.06；
水 50-56。
6.根据权利要求5所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂，其特征在于，所述的凝胶基质包括以下重量份的原料：
山梨糖醇 33-37；
甘油 9.5-10.5；
纤维素胶 1.2-1.5；
羟苯甲酯钠 0.14-0.15；
羟苯丙酯钠 0.09-0.1；
柠檬酸 0.05-0.06；
水 53-55。
7.根据权利要求5或6所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂，其特征在于，所述的凝胶基质包括以下重量份的原料：
山梨糖醇 35；
甘油 10；
纤维素胶 1.5；
羟苯甲酯钠 0.15；
羟苯丙酯钠 0.1；
柠檬酸 0.05；
水 53.2。
8.一种如权利要求1-7任何一项所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂的制备方法，其特征在于，该凝胶制剂采用如下方法制备：将蓝鲨鱼皮胶原蛋白与壳聚糖混合，得混合物，向混合物中加入凝胶基质，充分混合研磨，即得蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂。
9.一种如权利要求1所述的蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂在制备修复口腔创面药物中的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710063626.0A CN106692953A (zh) | 2017-02-03 | 2017-02-03 | 一种蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂及其制备方法与应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710063626.0A CN106692953A (zh) | 2017-02-03 | 2017-02-03 | 一种蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂及其制备方法与应用 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN106692953A true CN106692953A (zh) | 2017-05-24 |
Family
ID=58909807
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201710063626.0A Pending CN106692953A (zh) | 2017-02-03 | 2017-02-03 | 一种蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂及其制备方法与应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN106692953A (zh) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107441479A (zh) * | 2017-08-08 | 2017-12-08 | 广东海洋大学 | 海洋活性肽/壳聚糖烧烫伤膏及其制备方法 |
| CN108298855A (zh) * | 2018-02-07 | 2018-07-20 | 安徽宇力环保科技有限公司 | 一种用于珍珠岩保温板的防水剂的制备方法 |
| CN108455895A (zh) * | 2018-02-07 | 2018-08-28 | 安徽宇力环保科技有限公司 | 一种用于外墙保温材料的憎水剂及其制备方法 |
| CN109908395A (zh) * | 2018-08-17 | 2019-06-21 | 上海昊海生物科技股份有限公司 | 一种鲨鱼皮天然医用胶原蛋白海绵制备方法 |
| CN110787288A (zh) * | 2019-12-25 | 2020-02-14 | 郑州康金瑞健康产业有限公司 | 医用胶原蛋白口腔溃疡防护凝胶及其制备方法 |
| CN111067921A (zh) * | 2020-01-20 | 2020-04-28 | 蓝佳堂生物医药（福建）有限公司 | 一种口咽用水凝胶的制备方法 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101307093A (zh) * | 2007-05-14 | 2008-11-19 | 上海水产大学 | 从鲨鱼皮分离纯化生物医药用胶原蛋白的方法 |
| CN101628938A (zh) * | 2009-08-12 | 2010-01-20 | 江苏省海洋资源开发研究院 | 大分子胶原蛋白提取工艺 |
| CN101829320A (zh) * | 2010-05-20 | 2010-09-15 | 佟刚 | 一种胶原蛋白凝胶及其制备方法 |
| CN102108211A (zh) * | 2009-12-28 | 2011-06-29 | 沈阳鑫盛生物科技有限公司 | 一种壳聚糖胶原蛋白凝胶及应用 |
-
2017
- 2017-02-03 CN CN201710063626.0A patent/CN106692953A/zh active Pending
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101307093A (zh) * | 2007-05-14 | 2008-11-19 | 上海水产大学 | 从鲨鱼皮分离纯化生物医药用胶原蛋白的方法 |
| CN101628938A (zh) * | 2009-08-12 | 2010-01-20 | 江苏省海洋资源开发研究院 | 大分子胶原蛋白提取工艺 |
| CN102108211A (zh) * | 2009-12-28 | 2011-06-29 | 沈阳鑫盛生物科技有限公司 | 一种壳聚糖胶原蛋白凝胶及应用 |
| CN101829320A (zh) * | 2010-05-20 | 2010-09-15 | 佟刚 | 一种胶原蛋白凝胶及其制备方法 |
Non-Patent Citations (8)
| Title |
|---|
| PHANAT KITTIPHATTANABAWON等: "Isolation and characterization of collagen from the skin of brownbanded bamboo shark(Chiloscyllium punctatum)", 《FOOD CHEMISTRY》 * |
| SHIAHID MAHBOOB: "Isolation and characterization of collagen from fish waste material-skin,scales and fins of Catla catla and Cirrhinus mrigala", 《J.FOOD SCI.TECHNOL.》 * |
| 尚柯: "一种基于鱼胶原的抗菌止血医用敷料的制备及其性能研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 工程科技I辑》 * |
| 李国英等: "《胶原化学》", 30 April 2013, 中国轻工业出版社 * |
| 杨桠楠等: "水产胶原蛋白的提取纯化及理化特性的研究进展", 《海洋科学》 * |
| 段久芳主编: "《天然高分子材料》", 30 September 2016, 华中科技大学出版社 * |
| 马道荣等: "《食品工艺学实验与工程实践》", 31 July 2016, 合肥工业大学出版社 * |
| 高峰: "《药用高分子材料学》", 31 October 2014, 华东理工大学出版社 * |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107441479A (zh) * | 2017-08-08 | 2017-12-08 | 广东海洋大学 | 海洋活性肽/壳聚糖烧烫伤膏及其制备方法 |
| CN107441479B (zh) * | 2017-08-08 | 2018-12-21 | 广东海洋大学 | 海洋活性肽/壳聚糖烧烫伤膏及其制备方法 |
| CN108298855A (zh) * | 2018-02-07 | 2018-07-20 | 安徽宇力环保科技有限公司 | 一种用于珍珠岩保温板的防水剂的制备方法 |
| CN108455895A (zh) * | 2018-02-07 | 2018-08-28 | 安徽宇力环保科技有限公司 | 一种用于外墙保温材料的憎水剂及其制备方法 |
| CN109908395A (zh) * | 2018-08-17 | 2019-06-21 | 上海昊海生物科技股份有限公司 | 一种鲨鱼皮天然医用胶原蛋白海绵制备方法 |
| CN110787288A (zh) * | 2019-12-25 | 2020-02-14 | 郑州康金瑞健康产业有限公司 | 医用胶原蛋白口腔溃疡防护凝胶及其制备方法 |
| CN111067921A (zh) * | 2020-01-20 | 2020-04-28 | 蓝佳堂生物医药（福建）有限公司 | 一种口咽用水凝胶的制备方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN106692953A (zh) | 一种蓝鲨鱼皮胶原蛋白复合凝胶制剂及其制备方法与应用 | |
| CN103006444B (zh) | 一种凝胶材料在牙体牙髓疾病治疗过程中的用途 | |
| CN106039416B (zh) | 壳聚糖—丝胶蛋白复合生物支架及其制备方法和应用 | |
| CN108837184A (zh) | 一种用于引导骨再生的复合膜及其制备方法 | |
| CN1907126A (zh) | 鹿皮胶 | |
| CN109125799A (zh) | GelMA水凝胶人脱细胞羊膜三维双层辅料的制备方法 | |
| CN107184961A (zh) | 一种活性细胞修复剂及其制备方法 | |
| CN106075539A (zh) | 负载中药积雪草苷的核/壳结构的纳米纤维膜制备方法和伤口敷料应用 | |
| CN1820790A (zh) | 一种制备可生物降解的组织工程用支架材料的方法 | |
| CN107961366A (zh) | 葵花小分子肽在降尿酸溶解痛风石修复肾功能中的应用 | |
| CN1742690A (zh) | 含蚕丝丝素的医用神经移植物及其制备方法 | |
| CN109966540A (zh) | 一种纳米甲壳素复合海藻酸钙医用敷料的制备方法及应用 | |
| CN107412861A (zh) | 重组胶原蛋白复合硫酸软骨素和聚乙二醇的骨修复凝胶 | |
| CN103536957B (zh) | 一种新型胶原蛋白-β-环糊精缓释敷料及其制备方法 | |
| CN1138574C (zh) | 壳聚糖-明胶网络/磷酸钙多孔复合支架材料的制备方法 | |
| KR20210027627A (ko) | 피부회복 및 진정 기능을 구비한 화장품 조성물 | |
| CN113648456A (zh) | 鳗鱼鱼鳔胶原蛋白-壳聚糖-复合海藻酸钠水凝胶制备 | |
| CN1310946C (zh) | 注射性胶原蛋白的制备方法及其产品 | |
| CN107441479A (zh) | 海洋活性肽/壳聚糖烧烫伤膏及其制备方法 | |
| CN1539508A (zh) | 创面修复敷料基质、敷料及制备工艺 | |
| CN106924800A (zh) | 一种再生纤维素伤口敷料及其制备方法 | |
| CN105669876A (zh) | 灰树花多糖的提取工艺及其应用 | |
| CN104225664A (zh) | 壳聚糖组合物 | |
| CN1431021A (zh) | 用于治疗妇科疾病的生物海绵体及生产方法 | |
| CN1965980A (zh) | 速效阴道收缩剂及其制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20170524 |