CN105288583A - 一种口服胸腺五肽制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种口服胸腺五肽制剂及其制备方法，该制剂的原料包括胸腺五肽、海藻酸钠、氯化钙、聚乙二醇、吸收促进剂和酶抑制剂。本发明还提供一种对应的口服胸腺五肽制剂的制备方法。本发明将胸腺五肽制备成胸腺五肽微球，提高了的生物稳定性，能较好的抵抗胃酸和酶的降解作用，可以口服给药，避免了长期频繁注射给患者带来的痛苦与不便，具有很好的临床应用前景。

Description

一种口服胸腺五肽制剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及医药领域，尤其涉及一种口服胸腺五肽制剂及其制备方法。

背景技术

胸腺五肽(thymopentin，TP-5)是人工合成的五肽，由精氨酸、赖氨酸、天门冬氨酸、缬氨酸、酪氨酸五种氨基酸组成。胸腺五肽与胸腺生成素II(ThymopoietinII，TP-II)的免疫活性中心的五肽片段(第32-36位氨基酸)相同，具有与胸腺生成素II相同的全部生理功能，具有免疫双向调节作用。临床上胸腺五肽主要用于治疗慢性肝炎、各种原发性或继发性T细胞缺陷疾病、某些自身免疫性疾病、各种细胞免疫功能低下的疾病以及恶性肿瘤的辅助治疗等。

胸腺五肽是肽类药物，易被胃酸和胃肠道的蛋白酶降解，口服无效，因此，胸腺五肽目前临床给药的主要途径为静脉或皮下注射。胸腺五肽在血液中易被蛋白酶和氨肽酶降解为氨基酸，半衰期只有大约30秒，需要每日或隔日给药，长期频繁的注射给患者带来很多痛苦和不便，依从性差，并且还会产生许多不良反应。

海藻酸(Alginicacid)是从褐藻中提取的一种酸性多糖，是由β-D-甘露醛酸(M)和α-L-古罗糖醛酸(G)组成的线形高分子化合物，其分子中含有自由的羧基和羟基，能与多价金属离子反应形成难溶性凝胶，比如与钙形成的海藻酸钙，适于包埋蛋白质、酶与细胞等活性物质，具有良好的生物相容性与生物粘附性，可作为口服药物缓(控)释制剂载体，可防止胃酸和酶对药物的降解作用，提高多肽蛋白质类药物的稳定性，有效促进多肽蛋白质类药物的肠道吸收，提高药物的生物利用度。

口服给药依从性好，是目前最理想的非注射途径，因此，研制一种新型的口服胸腺五肽制剂具有极大的临床应用前景。

发明内容

本发明的目的是提供了一种口服胸腺五肽制剂，口服胸腺五肽制剂能较好的抵抗胃酸和酶的降解作用，可以口服给药，避免了长期频繁注射给患者带来的痛苦与不便。

为了实现上述目的，本发明的技术方案为：提供一种口服胸腺五肽制剂，其中，将胸腺五肽和聚乙二醇加入海藻酸钠溶液中搅拌混匀，将混合液滴入氯化钙溶液中后获得的胸腺五肽微球加入吸收促进剂、酶抑制剂制备而成；所述胸腺五肽、聚乙二醇和海藻酸钠的重量比为1：1～10：5～20。

本发明的另一目的在于提供一种口服胸腺五肽制剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)配制浓度为10～30mg/ml海藻酸钠溶液；

(2)称取胸腺五肽和聚乙二醇加入海藻酸钠溶液中，搅拌，使其充分混匀，获得混合液；胸腺五肽、聚乙二醇和海藻酸钠的重量比为1：1～10：5～20；

(3)将步骤(2)中获得的混合液滴入浓度为10～50mg/ml氯化钙溶液中，混合液与氯化钙溶液的体积比为1：20～100，轻微搅拌1～5h后，过滤，将形成的微球用蒸馏水洗涤后，加入浓度为3％甘露醇水溶液重新分散，置于零下20～30℃下预冻24h，再经过真空冷冻干燥24～48h即得胸腺五肽微球；

(4)将步骤(3)中获得胸腺五肽微球加入吸收促进剂、酶抑制剂和常规辅料，采用常规方法制成片剂、胶囊剂、小丸剂、微丸剂、粉剂、干混悬剂、混悬剂。

所述的聚乙二醇为PEG3350、PEG4000、PEG6000，有利于胸腺五肽微球的均一形成，避免载药不均匀，增加胸腺五肽的稳定性，并促进其吸收。

具体实施方式

实施例1

称取2g海藻酸钠、0.4g胸腺五肽、1gPEG3350，分别用蒸馏水溶解后，混合搅拌均匀，定容100ml。将100ml混合液在搅拌条件下滴入浓度为20mg/ml的氯化钙溶液中，反应1h后，过滤，收集微球，蒸馏水洗涤后，用浓度为3％的甘露醇溶液重悬，置于零下20℃预冻24h，经过真空冷冻干燥48h即得胸腺五肽微球；加入脱氧胆酸钠60mg，抑肽酶10mg，采用常规方法制成散剂。

实施例2

称取1g海藻酸钠、0.1g胸腺五肽、0.5gPEG4000，分别用蒸馏水溶解后，混合搅拌均匀，定容100ml。将100ml混合液在搅拌条件下滴入浓度为15mg/ml的氯化钙溶液中，反应0.5h后，过滤，收集微球，蒸馏水洗涤后，用浓度为3％的甘露醇溶液重悬，置于零下30℃预冻24h，经过真空冷冻干燥48h即得胸腺五肽微球；加入脱氧胆酸钠60mg，抑肽酶10mg，采用常规方法制成胶囊剂。

实施例3

称取2g海藻酸钠、0.1g胸腺五肽、1gPEG6000，分别用蒸馏水溶解后，混合搅拌均匀，定容100ml。将100ml混合液在搅拌条件下滴入浓度为25mg/ml的氯化钙溶液中，反应2h后，过滤，收集微球，蒸馏水洗涤后，用浓度为3％的甘露醇溶液重悬，置于零下20℃预冻24h，经过真空冷冻干燥48h即得胸腺五肽微球；加入脱氧胆酸钠60mg，抑肽酶10mg，采用常规方法制成片剂。

口服胸腺五肽的初步药效学实验观察

以上述实施例1所制成的口服胸腺五肽散剂，进行二硝基氟苯诱导小鼠迟发型变态反应的影响实验和环磷酰胺致小鼠免疫功能低下的影响实验。具体如下：

(1)口服胸腺五肽(TP-5)对二硝基氟苯诱导小鼠迟发型变态反应的影响

实验目的：研究口服TP-5制剂对二硝基氟苯(DNFB)诱导的小鼠迟发型变态反应的影响，考察其对特异性细胞免疫功能的调节作用。

实验动物及试剂：昆明小鼠，雄性，18～22g，按体重随机分组，每组10只。D.2,4-二硝基氟苯(DNFB)溶液DNFB50mg，加入新鲜配制的丙酮麻油溶液(丙酮：麻油＝1：1)5ml，混匀备用。

实验方法：小鼠随机分为对照组、模型组、空白对照样品组、口服TP-5制剂组(5mg/kg；10mg/kg；20mg/kg)和TP-5针剂组(皮下1mg/kg)。空白对照样品组和口服TP-5制剂组隔天口服给药，共给药7次。TP-5针剂组皮下注射，隔天给药，共给药7次。除对照组外，各组小鼠在给药2天后，刮去腹部的毛，面积约3×3cm2大小，均匀涂抹DNFB溶液50μl致敏，次日强化一次。于致敏后第5日，各组小鼠左耳均匀涂抹DNFB溶液10μl进行攻击。24小时后处死动物，剪下双耳，用直径为8mm的不锈钢铳子冲下左右耳片，分别称重，以左右耳片重量之差作为肿胀程度。同时取小鼠胸腺及脾脏称重，分别以小鼠每10g体重的脾重(mg)和胸腺重(mg)作为脾脏指数和胸腺指数，统计各组的差别。

结果：口服TP-5制剂在10mg/kg和20mg/kg剂量下口服给药对DNFB诱导的小鼠耳肿胀有明显的增强作用，其增加率分别为115.2％和57.6％。空白对照样品对小鼠耳肿胀无影响。提示口服TP-5制剂具有明显增强细胞免疫功能的作用。

表1.口服TP-5制剂对DNFB诱导的小鼠迟发型变态反应的作用(n＝10，)

P<0.001，与对照组比较。

P<0.05,P<0.01，与模型组比较。

(2)口服胸腺五肽(TP-5)制剂对环磷酰胺致小鼠免疫功能低下的影响

实验目的：考察口服TP-5制剂对环磷酰胺致小鼠免疫功能低下的影响，评价其免疫调节作用。

实验动物：昆明种小鼠，雄性，16～18g，按体重随机分组，每组10只。

实验方法：将小鼠随机分为口服TP-5制剂组(5mg/kg；10mg/kg；20mg/kg)、TP-5针剂组(皮下1mg/kg)、空白对照样品组、环磷酰胺模型组和正常组。口服TP-5制剂组和空白对照样品组口服给药，隔天一次，共7次。TP-5针剂组皮下注射给药，隔天1次，共7次。给药结束后，除正常组外，各组小鼠在给药第9天，腹腔注射环磷酰胺30mg/kg，每日1次，连续3天。于环磷酰胺注射6天后眼眶取血，计数白细胞数，同时取小鼠胸腺及脾脏，称重，以小鼠每10g体重的脾重(mg)和胸腺重(mg)作为脾脏指数和胸腺指数，并进行统计学处理。

结果:不同剂量的口服TP-5制剂5、10和20mg/kg给药7次后可明显增加环磷酰胺致免疫功能低下小鼠血中白细胞数，其增加率分别为44％、50％和38％，与环磷酰胺模型组有明显学差别。提示口服TP-5制剂在剂量5、10和20mg/kg下具有增强环磷酰胺致免疫功能低下小鼠的免疫功能的作用。

表2.口服TP-5制剂对环磷酰胺致小鼠免疫功能低下的影响(n＝10，)

P<0.001,与正常组比较

P<0.05，与环磷酰胺模型组比较。

结论：口服TP-5制剂在剂量5mg/kg时即具有增强环磷酰胺导致免疫功能低下小鼠的免疫功能的作用，并能明显增强细胞免疫功能的作用，相当与皮下注射TP-5针剂组(1mg/kg)。

上述药效学试验说明，本发明药物(口服TP-5制剂)口服有效，具有增强环磷酰胺导致免疫功能低下小鼠的免疫功能的作用，并能明显增强细胞免疫功能的作用，与TP-5针剂的皮下注射相当。本发明针对目前胸腺五肽只能采取注射给药缺陷，提供了一种新的口服给药途径，避免了患者因长期注射给药所承受的痛苦与不便。同时，本发明药物易于保存，不需要如TP-5针剂低温或冷冻保存，在室温下保存即可。

以上所揭露的仅为本发明的较佳实施例而已，当然不能以此来限定本发明之权利范围，因此依本发明权利要求所作的等同变化，仍属于本发明所涵盖的范围。

Claims (3)

1.一种口服胸腺五肽制剂，其特征在于：将胸腺五肽和聚乙二醇加入海藻酸钠溶液中搅拌混匀，将混合液滴入氯化钙溶液中后获得的胸腺五肽微球加入吸收促进剂、酶抑制剂制备而成；所述胸腺五肽、聚乙二醇和海藻酸钠的重量比为1：1～10：5～20。

2.如权利要求1所述的口服胸腺五肽制剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

(1)配制浓度为10～30mg/ml海藻酸钠溶液；

(2)称取胸腺五肽和聚乙二醇加入海藻酸钠溶液中，搅拌，使其充分混匀，获得混合液；胸腺五肽、聚乙二醇和海藻酸钠的重量比为1：1～10：5～20；

(3)将步骤(2)中获得的混合液滴入浓度为10～50mg/ml氯化钙溶液中，混合液与氯化钙溶液的体积比为1：20～100，轻微搅拌1～5h后，过滤，将形成的微球用蒸馏水洗涤后，加入浓度为3％甘露醇水溶液重新分散，置于零下20～30℃下预冻24h，再经过真空冷冻干燥24～48h即得胸腺五肽微球；

(4)将步骤(3)中获得胸腺五肽微球加入吸收促进剂、酶抑制剂和常规辅料，采用常规方法制成片剂、胶囊剂、小丸剂、微丸剂、粉剂、干混悬剂、混悬剂。

3.如权利要求1所述的口服胸腺五肽制剂，其特征在于：所述聚乙二醇为PEG3350或PEG4000或PEG6000。