CN104725381B

CN104725381B - 生长因子受体抑制剂及其应用

Info

Publication number: CN104725381B
Application number: CN201310705259.1A
Authority: CN
Inventors: 王勇; 丁晔; 张小猛; 张先; 王小伟; 廖文辉; 张迪; 张仓; 徐信
Original assignee: Nanjing Sanhome Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Nanjing Huicheng Pharmaceutical Co., Ltd.
Priority date: 2013-12-19
Filing date: 2013-12-19
Publication date: 2018-04-10
Anticipated expiration: 2033-12-19
Also published as: CN104725381A

Abstract

本发明属于化学医药领域，具体涉及式I所示的化合物或其药学可接受的盐、异构体、溶剂合物、结晶或前药，以及含有这些化合物的药物组合物和这些化合物或组合物在药物制备中的应用。所述的化合物具有良好的生长因子受体抑制活性，可以有效降低肿瘤发生率、延长肿瘤患者生命。

Description

生长因子受体抑制剂及其应用

技术领域

本发明属于化学医药领域，具体涉及一类具有生长因子受体抑制活性的化合物或其药学可接受的盐、异构体、溶剂合物、结晶或前药，以及含有这些化合物的药物组合物和这些化合物或组合物在药物制备中的应用。

背景技术

大多数细胞生长因子受体含有酪氨酸激酶的肽链序列，故这类受体通称为酪氨酸激酶受体。根据肽链序列的相似性，这些受体目前被分为若干大类：(1)表皮生长因子受体，如EGFR、HER2、HER3、HER4，高表达常见于上皮细胞肿瘤；(2)胰岛素受体家族，如胰岛素受体、胰岛素样生长因子受体(IGFR)、胰岛素相关受体(IRR)，高表达常见于血液细胞肿瘤中；(3)血小板衍生的生长因子受体家族，如PDGFRa、PDGRRb、克隆刺激因子(CSF-1R)、c-Kit等，高表达常见于脑肿瘤、血液细胞肿瘤中；(4)成纤维细胞生长因子受体(FGFR)家族，如FGFR1、FRFR2、FGFR3、FGFR4和角化细胞生长因子等，在血管生成方面起重要作用；(5)血管内皮细胞生长因子受体（VEGFR），是血管生成的重要正性调控因子；此外，还有肝细胞生长因子受体(HGFR)、Fibronectin III型受体及神经细胞生长因子受体(NGFR)等。酪氨酸激酶受体分别在不同类型肿瘤中过度表达，致使其细胞内信号激活，细胞转化、不断增殖，促进肿瘤的发生、发展。

血管内皮细胞生长因子受体(VEGFR）是血管内皮细胞生长因子(VEGF)特异性的膜受体，具有高亲和力，属于典型的跨膜镶嵌蛋白，分为胞外区、跨膜区及膜内区三部分，以胞外7个免疫球蛋白样的超二级结构、胞内2个间开的酪氨酸激酶区为其特征。根据其结构与功能的不同主要可分为VEGFR-1、VEGFR-2及VEGFR-3共3种亚型。其中，VEGFR-1、VEGFR-2主要在血管内皮细胞表达。研究表明，VEGF与VEGFR-2结合后，引起受体自身的磷酸化，激活丝裂原活化的蛋白激酶，实现VEGF的丝裂原特性，诱导血管内皮细胞的分裂增殖；VEGF与VEGFR-1结合后，增加血管内皮细胞通透性，使血管内的蛋白外渗，形成内皮细胞迁移的支架和血管生成的临时基质；同时VEGF能增强血浆酶原活化因子活性，提高血浆酶原活化因子和血浆酶原活化因子抑制因子的_mRNA的水平，促进细胞外蛋白水解，有利于毛细血管的生成；再者VEGF可改变内皮细胞基因的活化形式，诱导内皮细胞表达蛋白水解酶、间质胶原酶和组织因子来促进血管生成。大量研究证实，实体肿瘤的生长和转移与VEGF-VEGFR信号通路过度激活引起的血管生长密切相关，生长迅速和有转移的肿瘤的血管密度明显高于生长缓慢和无转移的肿瘤。当VEGF的信号被抑制时，肿瘤的血管生成和肿瘤生长受到遏制。

成纤维细胞生长因子受体(FGFR)与其配体成纤维细胞生长因子结合，调控着一大类细胞发育的进程，包括细胞凋亡、增殖、移行和血管生成。大量证据证明，成纤维细胞生长因子和血管内皮细胞生长因子协同促进血管发生。由于突变或者受体-配体过度表达引起的FGFR信号通路调控失常，也已经被证实存在于多种肿瘤细胞中，并且可以通过调节肿瘤血管生成或直接刺激肿瘤生长而在肿瘤的发展进程中发挥重要作用。

因此，开发具有生长因子受体抑制活性的药物，特别是对血管的生成具有重要调控作用的VEGFR和/或FGFR，抑制VEGFR信号通路和/或FGFR信号通路的过度激活，必将在临床上有着良好的应用前景。

发明内容

本发明的目的是提供通式I的一类具有生长因子受体抑制活性的化合物或其药学可接受的盐、异构体、溶剂合物、结晶或前药，

其中：

X选自O、S、N(R₄)、C_1-3亚烷基；

环A选自含有0-3个杂原子的四元、五元、六元、七元或八元环，所述的杂原子选自N、O、S；

R₁选自氢、氧代、烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、-OH、-NH₂、硝基、卤素、CN、单烷基氨基、双烷基氨基、酰氨基、酯基、环烷基、杂环烷基；

R₂选自氢、烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、-OH、-NH₂、硝基、卤素、CN、单烷基氨基、双烷基氨基、酰氨基、酯基、环烷基、杂环烷基；

R₃选自氢、氧代、卤素、羟基、羧基、氨基、氰基、烷基、硝基、烷氧基、烷氧基烷基、氨烷基、酰氨基、酰基、烷基酰氨基、烷基酰基、环烷基、杂环烷基，所述的羟基、羧基、氨基、烷基、烷氧基、烷氧基烷基、氨烷基、酰氨基、酰基、烷基酰氨基、烷基酰基、环烷基、杂环烷基可以被一个或多个卤素、羟基、羧基、氨基、氰基、硝基、烷基、环烷基、杂环烷基、羟基烷基、羧基烷基、烷氧基、单烷基氨基、双烷基氨基、烷氧基酰基、酰氨基、单烷基氨基酰基、双烷基氨基酰基、烷基酰基、烷基酰基氧基、羧基烷基酰基氧基、羟基烷基酰基氧基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、杂环基磺酰基、氨基磺酰基、单烷基氨基磺酰基、双烷基氨基磺酰基取代；

R₄选自氢、烷基；

n选自1、2、3、4。

本发明的另一个目的是提供制备本发明的通式I的化合物或其药学可接受的盐、异构体、溶剂合物、结晶或前药的方法。

本发明的再一个目的是提供包含本发明的通式I的化合物或其药学可接受的盐、异构体、溶剂合物、结晶或前药和药学可接受的载体的组合物，以及包含本发明的通式I的化合物或其药学可接受的盐、异构体、溶剂合物、结晶或前药和另一种或多种蛋白酪氨酸激酶抑制剂的组合物。

本发明的还一个目的是提供本发明的通式I的化合物或其药学可接受的盐、异构体、溶剂合物、结晶或前药治疗和/或预防肿瘤的方法，以及本发明的通式I的化合物或其药学可接受的盐、异构体、溶剂合物、结晶或前药在制备用于治疗和/或预防肿瘤的药物中的应用。

针对上述目的，本发明提供以下技术方案：

第一方面，本发明提供通式I的化合物或其药学可接受的盐、异构体、溶剂合物、结晶或前药，

其中：

X选自O、S、N(R₄)、C_1-3亚烷基；

R₂选自氢、烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、-OH、-NH₂、卤素、硝基、CN、单烷基氨基、双烷基氨基、酰氨基、酯基、环烷基、杂环烷基；

R₄选自氢、烷基；

n选自1、2、3、4。

在一些优选的实施方案中，本发明的化合物为通式I的化合物及其药学可接受的盐、异构体、溶剂合物、结晶或前药，其中：

环A选自含有4-8个碳原子的碳环，例如环丁烷基、环丁烯基、环戊烷基、环戊烯基、环己烷基、环己烯基、环庚烷基、环庚烯基、环辛烷基、环辛烯基，优选为含有5-7个碳原子的碳环，例如环戊烷基、环戊烯基、环己烷基、环己烯基、环庚烷基、环庚烯基，进一步优选为含有5-6个碳原子的碳环，更进一步优选为环戊烷基、环戊烯基、环己烷基、环己烯基。

在另一些优选的实施方案中，本发明的化合物为通式I的化合物及其药学可接受的盐、异构体、溶剂合物、结晶或前药，其中：

环A选自含有1-2个杂原子的四元、五元、六元、七元或八元杂环，优选为含有1-2个杂原子的五元、六元或七元杂环，进一步优选为含有1-2个杂原子的五元或六元杂环，所述的杂原子选自O、N、S，更进一步优选为四氢呋喃环基、四氢吡咯环基、四氢吡喃环基、哌啶基。

R₁选自氢、氧代、烷基、卤代烷基、卤素，优选为氢、C_1-6烷基、卤代C_1-6烷基、卤素，进一步优选为氢、氧代、C_1-3烷基、卤代C_1-3烷基、卤素，更进一步优选为氢、氧代、甲基、乙基、丙基、异丙基、三氟甲基、三氟乙基、氟、氯。

R₂选自氢、烷基、卤代烷基、卤素，优选为氢、C_1-6烷基、卤代C_1-6烷基、卤素，进一步优选为氢、C_1-3烷基、卤代C_1-3烷基、卤素，更进一步优选为氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、三氟甲基、三氟乙基、氟、氯。

R₃选自氢、氧代、卤素、羟基、羧基、氨基、氰基、C_1-10烷基、硝基、C_1-10烷氧基、C_1-10烷氧基C_1-10烷基、氨基C_1-10烷基、酰氨基、酰基、C_1-10烷基酰氨基、C_1-10烷基酰基、C_3-6环烷基、C_3-6杂环烷基，所述的羟基、羧基、氨基、C_1-10烷基、C_1-10烷氧基、C_1-10烷氧基C_1-10烷基、氨基C_1-10烷基、酰氨基、酰基、C_1-10烷基酰氨基、C_1-10烷基酰基、C_3-6环烷基、C_3-6杂环烷基可以被一个或多个卤素、羟基、羧基、氨基、氰基、硝基、C_1-6烷基、C_3-6环烷基、C_3-6杂环烷基、羟基C_1-6烷基、羧基C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、单C_1-6烷基氨基、双C_1-6烷基氨基、C_1-6烷氧基酰基、酰氨基、单C_1-6烷基氨基酰基、双C_1-6烷基氨基酰基、C_1-6烷基酰基、C_1-6烷基酰基氧基、羧基C_1-6烷基酰基氧基、羟基C_1-6烷基酰基氧基、C_1-6烷基磺酰基、芳基磺酰基、C_1-6杂环基磺酰基、氨基磺酰基、单C_1-6烷基氨基磺酰基、双C_1-6烷基氨基磺酰基、四氢吡咯烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、四氢噻唑基、四氢噁唑基、哌啶基、哌嗪基、取代哌嗪基、吗啉基取代；

进一步优选地，

R₃选自氢、氧代、卤素、羟基、羧基、氨基、氰基、C_1-6烷基、硝基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷氧基C_1-6烷基、氨基C_1-6烷基、酰氨基、酰基、C_1-6烷基酰氨基、C_1-6烷基酰基、C_3-6环烷基、C_3-6杂环烷基，所述的羟基、羧基、氨基、氰基、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷氧基C_1-6烷基、氨基C_1-6烷基、酰氨基、酰基、C_1-6烷基酰氨基、C_1-6烷基酰基、C_3-6环烷基、C_3-6杂环烷基可以被一个或多个卤素、羟基、羧基、氨基、氰基、C_1-6烷基、C_3-6环烷基、C_3-6杂环烷基、羟基C_1-6烷基、羧基C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、单C_1-6烷基氨基、双C_1-6烷基氨基、C_1-6烷氧基酰基、酰氨基、单C_1-6烷基氨基酰基、双C_1-6烷基氨基酰基、C_1-6烷基酰基、C_1-6烷基酰基氧基、羧基C_1-6烷基酰基氧基、羟基C_1-6烷基酰基氧基、C_1-6烷基磺酰基、芳基磺酰基、C_1-6杂环基磺酰基、氨基磺酰基、单C_1-6烷基氨基磺酰基、双C_1-6烷基氨基磺酰基、四氢吡咯烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、四氢噻唑基、四氢噁唑基、哌啶基、哌嗪基、取代哌嗪基、吗啉基取代；

更进一步优选地，

R₃选自氢、氧代、卤素、羟基、羧基、氨基、氰基、-C_1-6烷基、硝基、-O-C_1-6烷基、-C_1-6烷基-O-C_1-6烷基、-O-C_1-6烷基-O-C_1-6烷基、-NH-C_1-6烷基、-N(C_1-6烷基)(C_1-6烷基)、-C_1-6烷基-NH-C_1-6烷基、-C_1-6烷基-N(C_1-6烷基)(C_1-6烷基)、-C(O)-O-C_1-6烷基、-C_1-6烷基-C(O)-O-C_1-6烷基、-C(O)-NH₂、-C(O)-NH-C_1-6烷基、-C(O)-NH-C_3-6环烷基、-C(O)-N-(C_1-6烷基)(C_1-6烷基)、-C_1-6烷基-C(O)-NH₂、-C_1-6烷基-C(O)-NH-C_1-6烷基、-C_1-6烷基-C(O)-N-(C_1-6烷基)(C_1-6烷基)、-C(O)-C_1-6烷基、-C_1-6烷基-C(O)-C_1-6烷基、-O-C(O)-C_1-6烷基、-C_1-6烷基-O-C(O)-C_1-6烷基、-C_1-6烷基-OH、-C_1-6烷基-C(O)-OH、-C_1-6烷基-NH₂、-C(O)-NH-C_1-6烷基-OH、-C(O)-NH-C_1-6烷基-C(O)-OH、-C_1-6烷基-C(O)-NH-C_1-6烷基-OH、-C_1-6烷基-C(O)-NH-C_1-6烷基-C(O)-OH、-C_1-6烷基-O-C_1-6烷基-OH、-C_1-6烷基-O-C_1-6烷基-O-C_1-6烷基、-C_1-6烷基-O-C(O)-C_1-6烷基-C(O)-OH、-C_1-6烷基-O-C(O)-C_1-6烷基-OH、-C_1-6烷基-四氢吡咯烷、-C_1-6烷基-四氢呋喃、-C_1-6烷基-四氢噻吩、-C_1-6烷基-四氢噻唑、-C_1-6烷基-四氢噁唑、-C_1-6烷基-哌啶、-C_1-6烷基-哌嗪、-C_1-6烷基-吗啉，所述的四氢吡咯烷、四氢呋喃、四氢噻吩、四氢噻唑、四氢噁唑、哌啶、哌嗪吗啉可以被一个或多个卤素、羟基、烷基、羟烷基、羧基、氨基、氰基、烷氧基取代。

X选自O、N(R₄)，所述的R₄选自氢、C_1-6烷基；优选为O、N(R₄)，所述的R₄选自氢、C_1-3烷基；进一步优选为NH、O。

当n选自2,3,4时，R₃可以选自相同的基团，也可以选自不同的基团。

X选自O、S、N(R₄)、CH₂；

环A选自C_4-8环烷基或C_4-8杂环烷基，所述的杂原子选自N、O、S；

R₁选自氢、氧代、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、卤代C_1-6烷基、卤代C_1-6烷氧基、-OH、-NH₂、硝基、卤素、CN、单C_1-6烷基氨基、双C_1-6烷基氨基、酰氨基、酯基、C_1-6环烷基、C_1-6杂环烷基；

R₂选自氢、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、卤代C_1-6烷基、卤代C_1-6烷氧基、-OH、-NH₂、硝基、卤素、CN、单C_1-6烷基氨基、双C_1-6烷基氨基、酰氨基、酯基、C_1-6环烷基、C_1-6杂环烷基；

R₄选自氢、C_1-6烷基；

n选自1、2和3。

X选自O、S、NH；

环A选自C_5-7环烷基或C_5-7杂环烷基，所述的杂原子选自N、O、S；

R₁选自氢、氧代、C_1-3烷基、C_1-3烷氧基、卤代C_1-3烷基、卤代C_1-3烷氧基、-OH、-NH₂、硝基、卤素、CN、单C_1-3烷基氨基、双C_1-3烷基氨基、酰氨基、酯基、C_1-3环烷基、C_1-3杂环烷基；

R₂选自氢、C_1-3烷基、C_1-3烷氧基、卤代C_1-3烷基、卤代C_1-3烷氧基、-OH、-NH₂、硝基、卤素、CN、单C_1-3烷基氨基、双C_1-3烷基氨基、酰氨基、酯基、C_1-3环烷基、C_1-3杂环烷基；

R₄选自氢、C_1-3烷基；

n选自1和2。

优选地，本发明提供通式Ia的化合物或其药学可接受的盐、异构体、溶剂合物、结晶或前药，

其中：

X选自O、S、N(R₄)、C_1-3亚烷基；

环A₁选自含有4-8个碳原子的碳环；

R₄选自氢、烷基；

n选自1、2、3、4。

在一些优选的实施方案中，本发明的化合物为通式Ia的化合物及其药学可接受的盐、异构体、溶剂合物、结晶或前药，其中：

X选自N(R₄)、O，所述的R₄选自氢、C_1-6烷基；优选为N(R₄)、O，所述的R₄选自氢、C_1-3烷基；进一步优选为NH、O；

环A₁选自含有5-7个碳原子的碳环，进一步优选为含有5-6个碳原子的碳环，更进一步优选为环戊烷基、环戊烯基、环己烷基、环己烯基；

R₁选自氢、氧代、烷基、卤代烷基、卤素，优选为氢、C_1-6烷基、卤代C_1-6烷基、卤素，进一步优选为氢、氧代、C_1-3烷基、卤代C_1-3烷基、卤素，更进一步优选为氢、氧代、甲基、乙基、丙基、异丙基、三氟甲基、三氟乙基、氟、氯；

R₂选自氢、烷基、卤代烷基、卤素，优选为氢、C_1-6烷基、卤代C_1-6烷基、卤素，进一步优选为氢、C_1-3烷基、卤代C_1-3烷基、卤素，更进一步优选为氢、甲基、乙基、丙基、异丙基、三氟甲基、三氟乙基、氟、氯；

进一步优选地，

R₃选自氢、氧代、卤素、羟基、羧基、氨基、氰基、C_1-6烷基、硝基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷氧基C_1-6烷基、氨基C_1-6烷基、酰氨基、酰基、C_1-6烷基酰氨基、C_1-6烷基酰基、C_3-6环烷基、C_3-6杂环烷基，所述的羟基、羧基、氨基、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、C_1-6烷氧基C_1-6烷基、氨基C_1-6烷基、酰氨基、酰基、C_1-6烷基酰氨基、C_1-6烷基酰基、C_3-6环烷基、C_3-6杂环烷基可以被一个或多个卤素、羟基、羧基、氨基、氰基、硝基、C_1-6烷基、C_3-6环烷基、C_3-6杂环烷基、羟基C_1-6烷基、羧基C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、单C_1-6烷基氨基、双C_1-6烷基氨基、C_1-6烷氧基酰基、酰氨基、单C_1-6烷基氨基酰基、双C_1-6烷基氨基酰基、C_1-6烷基酰基、C_1-6烷基酰基氧基、羧基C_1-6烷基酰基氧基、羟基C_1-6烷基酰基氧基、C_1-6烷基磺酰基、芳基磺酰基、C_1-6杂环基磺酰基、氨基磺酰基、单C_1-6烷基氨基磺酰基、双C_1-6烷基氨基磺酰基、四氢吡咯烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、四氢噻唑基、四氢噁唑基、哌啶基、哌嗪基、取代哌嗪基、吗啉基取代；

更进一步优选地，

R₄选自氢、C_1-6烷基，优选为氢、C_1-3烷基，进一步优选氢；

n选自1、2、3，优选为1或2。

优选地，本发明提供通式Ib的化合物或其药学可接受的盐、异构体、溶剂合物、结晶或前药，

其中：

X选自O、S、N(R₄)、CH₂；

环A₂选自含有1-2个杂原子的四元、五元、六元、七元或八元杂环，所述的杂原子选自N、O、S；

R₄选自氢、烷基；

n选自1、2、3、4。

在一些优选的实施方案中，本发明的化合物为通式Ib的化合物及其药学可接受的盐、异构体、溶剂合物、结晶或前药，其中：

X选自N(R₄)、O，所述的R₄选自氢，C_1-6烷基；优选为N(R₄)、O，所述的R₄选自氢、C_1-3烷基；进一步优选为NH、O；

环A₂选自含有1-2个杂原子的四元、五元、六元、七元或八元杂环，进一步优选自含有1-2个杂原子的五元、六元或七元杂环，更进一步优选自含有1-2个杂原子的五元或六元杂环，所述的杂原子选自N、O、S；

进一步优选地，

更进一步优选地，

R₃选自氢、氧代、卤素、羟基、羧基、氨基、氰基、-C_1-6烷基、硝基、-O-C_1-6烷基、-C_1-6烷基-O-C_1-6烷基、-O-C_1-6烷基-O-C_1-6烷基、-NH-C_1-6烷基、-N(C_1-6烷基)(C_1-6烷基)、-C_1-6烷基-NH-C_1-6烷基、-C_1-6烷基-N(C_1-6烷基)(C_1-6烷基)、-C(O)-O-C_1-6烷基、-C_1-6烷基-C(O)-O-C_1-6烷基、-C(O)-NH₂、-C(O)-NH-C_1-6烷基、-C(O)-NH-C_3-6环烷基、-C(O)-N-(C_1-6烷基)(C_1-6烷基)、-C_1-6烷基-C(O)-NH₂、-C_1-6烷基-C(O)-NH-C_1-6烷基、-C_1-6烷基-C(O)-N-(C_1-6烷基)(C_1-6烷基)、-C(O)-C_1-6烷基、-C_1-6烷基-C(O)-C_1-6烷基、-O-C(O)-C_1-6烷基、-C_1-6烷基-O-C(O)-C_1-6烷基、-C_1-6烷基-OH、-C_1-6烷基-C(O)-OH、-C_1-6烷基-NH₂、-C(O)-NH-C_1-6烷基-OH、-C(O)-NH-C_1-6烷基-C(O)-OH、-C_1-6烷基-C(O)-NH-C_1-6烷基-OH、-C_1-6烷基-C(O)-NH-C_1-6烷基-C(O)-OH、-C_1-6烷基-O-C_1-6烷基-OH、-C_1-6烷基-O-C_1-6烷基-O-C_1-6烷基、-C_1-6烷基-O-C(O)-C_1-6烷基-C(O)-OH、-C_1-6烷基-O-C(O)-C_1-6烷基-OH、-C_1-6烷基-四氢吡咯烷、-C_1-6烷基-四氢呋喃、-C_1-6烷基-四氢噻吩、-C_1-6烷基-四氢噻唑、-C_1-6烷基-四氢噁唑、-C_1-6烷基-哌啶、-C_1-6烷基-哌嗪、-C_1-6烷基-吗啉，所述的四氢吡咯烷、四氢呋喃、四氢噻吩、四氢噻唑、四氢噁唑、哌啶、哌嗪吗啉可以被一个或多个卤素、羟基、烷基、羟烷基、羧基、氨基、氰基、烷氧基取代；

n选自1、2、3，优选为1或2。

本发明提供了以下具体化合物：

本发明还提供了以下制备本发明化合物的关键中间体：

另一方面，本发明提供本发明的通式化合物的制备方法：

(1)关键中间体M1的制备：

其中，n、R₃及环A具有通式I中的定义，Y为卤素；

具体步骤如下：

a)式1的化合物与对甲苯亚磺酸钠和I₂反应制得式2的化合物；

b)式2的化合物发生消除反应制得式3的化合物；

c)式3的化合物与异氰基乙酸甲酯反应制得式4的化合物；

d)式4的化合物与二苯基膦酰羟胺反应制得式5的化合物；

e)式5的化合物与甲酰胺反应制得式6的化合物；

f)式6的化合物经过卤代反应制得式M1的关键中间体。

(2)通式I化合物的制备：

其中，X、R₁、R₂、R₃、R₄、n及环A具有通式I中的定义，Y为卤素，X₁选自氨基或羟基。

具体步骤：

式M1的化合物与式M2的化合物在碱性条件下反应制得式I的化合物，所述的碱选自碳酸钠、碳酸钾或三乙胺。

第三方面，本发明提供药物组合物，其包含本发明的化合物或其药学可接受的盐、异构体、溶剂合物、结晶或前药。

在一些实施方案中，本发明提供药物组合物，其包含本发明的化合物、异构体、溶剂合物、结晶或前药，还包含选自下列组成的一种或多种：酪氨酸蛋白酶抑制剂、EGFR抑制剂、VEGFR抑制剂、BCR-ABL抑制剂、c-kit抑制剂、c-Met抑制剂、Raf抑制剂、MEK抑制剂、组蛋白去乙酰酶抑制剂、VEGF抗体、EGF抗体、HIV蛋白激酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制剂等。

可以将本发明的化合物、异构体、溶剂合物、结晶或前药与药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂混合制备成药物制剂，以适合于经口或胃肠外给药。给药方法包括，但不限于皮内、肌内、腹膜内、静脉内、皮下、鼻内和经口途径。所述制剂可以通过任何途径施用，例如通过输注或推注，通过经上皮或皮肤粘膜(例如口腔粘膜或直肠等)吸收的途径施用。给药可以是全身的或局部的。经口施用制剂的实例包括固体或液体剂型，具体而言，包括片剂、丸剂、粒剂、粉剂、胶囊剂、糖浆、乳剂、混悬剂等。所述制剂可通过本领域已知的方法制备，且包含药物制剂领域常规使用的载体、稀释剂或赋形剂。

第四方面，本发明提供本发明的化合物、异构体、溶剂合物、结晶或前药或本发明的药物组合物治疗或预防肿瘤的方法和在制备预防或治疗肿瘤药物中的应用，包括向肿瘤易发人群或肿瘤患者施用本发明的化合物、异构体、溶剂合物、结晶或前药或者包含本发明的化合物、异构体、溶剂合物、结晶或前药的药物组合物，以有效降低肿瘤发生率、延长肿瘤患者生命。

术语说明

本发明的“烷基”是指直链或支链的饱和烃基。

本发明的“烷氧基”是指-O-烷基。

本发明的“卤素”是指氟、氯、溴、碘。

本发明的“卤代烷基”是指至少被一个卤素取代的烷基。

本发明的“卤代烷氧基”是指至少被一个卤素取代的烷氧基。

本发明的“酰氨基”是指-C(O)-NH₂。

本发明的“酰基”是指-C(O)-。

本发明的“烷基酰氨基”是指-烷基-C(O)-NH₂。

本发明的“烷基酰基”是指-烷基-C(O)-。

本发明的“羟基烷基”是指-烷基-OH。

本发明的“羧基烷基”是指-烷基-C(O)OH。

本发明的“烷氧基酰基”是指-C(O)-O-烷基。

本发明的“单烷基氨基酰基”是指-C(O)-NH-烷基。

本发明的“双烷基氨基酰基”是指-C(O)-N(烷基)(烷基)。

本发明的“烷基酰基”是指-C(O)-烷基。

本发明的“烷基酰基氧基”是指-O-C(O)-烷基。

本发明的“羧基烷基酰基氧基”是指-O-C(O)-烷基-C(O)OH。

本发明的“烷基磺酰基”是指-S(O)₂-烷基。

本发明的“芳基磺酰基”是指-S(O)₂-芳基。

本发明的“杂环基磺酰基”是-S(O)₂-杂环基。

本发明的“氨基磺酰基”是指-S(O)₂-氨基。

本发明的“单烷基氨基磺酰基”是指-S(O)₂-NH-烷基。

本发明的“双烷基氨基磺酰基”是指-S(O)₂-N(烷基)(烷基)。

在本文中，术语“四元、五元、六元、七元或八元环”是指4到8元饱和的、部分不饱和/或全部不饱和的单环，其不含杂原子或含有一个或多个选自N、O和S的杂原子，包括C_4-8环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基。本文中，所述环烷基被理解为单环，其可以是饱和环或不饱和的、非芳环，在适当时其可包含双键，而所述杂环烷基是指饱和或不饱和、非芳族单环，其含有杂原子N、O或S以替代一个或多个碳原子。如本文所述，所述“四元、五元、六元、七元或八元环”被稠合到吡咯环上。

本发明的“芳基”是指含有一个或多个苯环的芳烃基团。合适的芳基包括苯基、萘基。

本发明的“杂芳基”是指芳基中至少有一个碳原子被杂原子替代的芳香性基团。所述的杂原子为O、S、N。

本发明的“溶剂合物”在常规意义上是指溶质（如活性化合物、活性化合物的盐）和溶剂（如水）组合形成的复合物。溶剂是指本领域的技术人员所知的或容易确定的溶剂。如果是水，则溶剂合物通常被称作水合物，例如一水合物、二水合物、三水合物等。

本发明的“结晶”是指本发明所述的化合物形成的各种固体形态，包括晶型、无定形。

指本发明的“异构体”包括化合物顺构型构体、构象异构体和对映异构体。构型异构体是指顺式或反式构型的顺反异构体；构象异构体是指由于单键旋转产生的立体异构体。

本发明的“前药”是指在生物体的生理条件下，由于与酶、胃酸等反应而转化成本发明的化合物的化合物，即通过酶的氧化、还原、水解等转化成本发明的化合物的化合物和/或通过胃酸等的水解反应等转化成本发明的化合物的化合物。

本发明的“药学可接受的盐”是指本发明的化合物与酸形成的药学上可接受的盐，所述的酸包括但不限于磷酸、硫酸、盐酸、氢溴酸、柠檬酸、马来酸、丙二酸、扁桃酸、琥珀酸、富马酸、醋酸、乳酸、硝酸等等。

本发明的“药物组合物”是指包含任何一种本文所述的化合物，包括异构体、前药、溶剂合物、药学上可接受的盐或其化学的保护形式，和一种或多种药学上可接受载体的混合物。

本发明的“药学上可接受的载体”是指对有机体不引起明显刺激性和不干扰所给予化合物的生物活性和性质的载体，包含溶剂、稀释剂或其它赋形剂、分散剂、表面活性剂、等渗剂、增稠剂或乳化剂、防腐剂、固体粘合剂、润滑剂等。除非任何常规载体介质与本发明化合物不相容。可以作为药学上可接受的载体的一些实例包括，但不限于糖类，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素及其衍生物，如羧甲基纤维素钠、以及纤维素和乙酸纤维素；麦芽、明胶等。

本发明的“赋形剂”指加入到药用组合物中以进一步促进给予化合物的惰性物质。赋形剂可以包括碳酸钙、磷酸钙、多种糖类和多种类型的淀粉、纤维素衍生物、明胶、植物油、聚乙二醇。

本发明的“在制备用于治疗或预防肿瘤的药物中的应用”是指可以抑制肿瘤的生长、发展和/或转移，主要向所需要的人或动物给治予治疗有效剂量的本发明的化合物以抑制、减慢或逆转受治疗者肿瘤的生长、发展或扩撒。

本发明的化合物是指本发明所有的通式化合物，包括通式I、通式Ia和通式Ib任一通式所述的化合物及具体化合物。

具体实施方式

下面代表性的实施例是为了更好地说明本发明，而非用于限制本发明的保护范围。

实施例14-氯-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-甲酸甲酯的合成

步骤11-碘-2-对甲苯磺酰基-4-甲酸甲酯-环戊烷的合成

冰浴条件下，称取10g3-环戊烯-1-甲酸甲酯和21.2g对甲苯亚磺酸钠，置于反应瓶中，加入500mL体积比为1:1的二氯甲烷/水混合溶剂，搅拌1h后，分批加入20g I₂，加完后，室温反应3小时后，静置分层，取有机相，水相用二氯甲烷萃取(2次×250mL)，合并有机相，依次用亚硫酸氢钠水溶液、饱和碳酸氢钠水溶液和饱和氯化钠水溶液洗涤两次，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，得标题化合物。不经纯化，直接用于下一步反应。

ESI-MS m/z:409[M+H]⁺,447[M+K]⁺。

步骤21-对甲苯磺酰基-4-甲酸甲酯-环戊烯的合成

称取31.8g步骤1制备的化合物于反应瓶中，缓慢加入10g三乙胺、600mL乙腈，加热至70℃，反应3小时后旋干，加入400mL乙酸乙酯溶解，依次用饱和碳酸氢钠水溶液和饱和食盐水溶液洗涤两次，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，得标题化合物。不经纯化，直接用于下一步反应。

ESI-MS m/z:281[M+H]⁺。

步骤32,4-二甲酸甲酯-戊环并[3,4]吡咯的合成

氮气保护下，称取2g NaH于反应瓶中，加入100mL无水THF，冷却至0℃左右，缓慢加入200mL溶解有5.6g步骤2制备的化合物和3.96g异氰基乙酸甲酯的无水THF溶液，加毕继续在0℃条件下反应1小时后，加入2～3mL无水甲醇，搅拌5分钟，旋干，残留物用200mL乙酸乙酯溶解，硅藻土过滤，滤饼用乙酸乙酯洗涤3次，合并有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，得黑色油状物，柱层析纯化，得标题化合物。

ESI-MS m/z:224[M+H]⁺,262[M+K]⁺。

步骤4N-氨基-2,4-二甲酸甲酯-戊环并[3,4]吡咯的合成

氮气保护下，称取73mg NaH于反应瓶中，加入3mL无水DMF，冷却至0℃左右，缓慢滴入5mL溶解有270mg步骤3制备的化合物的无水DMF溶液，保持0℃反应30min后，分批加入350mg二苯基膦酰羟胺，升温至20℃反应30min。反应完毕，加入30mL乙酸乙酯和30mL冰水萃取，取有机层，水层用乙酸乙酯萃取(2次×15mL)，合并有机层，饱和食盐水洗涤一次，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，柱层析纯化得标题化合物。

ESI-MS m/z:239[M+H]⁺。

步骤54-羟基-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-甲酸甲酯的合成

称取1.4g步骤4制备的化合物于反应瓶中，加入5mL甲酰胺溶解，升温至180℃条件下反应2小时。反应完毕，将反应液倾入20mL冰水中，乙酸乙酯萃取(3×20mL)，合并有机层，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，柱层析纯化，得标题化合物。

¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ12.44(s,1H),7.66(s,1H),7.28(s,1H),3.72-3.67(m,1H),3.64(s,3H),3.22-3.02(m,4H)。

ESI-MS m/z:234[M+H]⁺。

步骤64-氯-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-甲酸甲酯的合成

称取300mg步骤5制备的化合物于反应瓶中，加入20mL甲苯溶解，依次加入5当量三氯氧磷(POCl3)，5当量N,N-二异丙基乙胺(DIPEA)，升温至110℃，反应6小时。反应完毕，减压蒸除溶剂得黑色油状物，加入20mL乙酸乙酯溶解后，用0～5℃的饱和碳酸氢钠水溶液调pH值至中性，取有机层，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干得标题化合物。ESI-MS m/z:252[M+H]⁺。

实施例24-氯-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三嗪并[6,1-a]异吲哚-7-甲酸甲酯的合成

以3-环己烯-1-甲酸甲酯为原料，同实施例1的方法制得标题化合物。

ESI-MS m/z:266[M+H]⁺。

实施例34-氯呋喃并[3',4':3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7(5H)-酮的合成

以2(5H)-呋喃酮为起始原料，同实施例1的方法制得标题化合物。

ESI-MS m/z:210[M+H]⁺。

实施例44-氯-5H-哌喃并[3',4':3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-8(6H)-酮的合成

以5,6-二氢-2H-吡喃-2-酮为原料，同实施例1的方法制得标题化合物。

ESI-MS m/z:224[M+H]⁺。

实施例54-氯-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪的合成

以环戊烯为起始原料，同实施例1的方法制得标题化合物。

ESI-MS m/z:194[M+H]⁺。

实施例64-氯-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三嗪并[6,1-a]异吲哚的合成

以环己烯为起始原料，同实施例1的方法制得标题化合物。

ESI-MS m/z:208[M+H]⁺。

实施例74-氯-5,6-二氢-[1,2,4]三嗪并[6,1-a]异吲哚的合成

以2-环己烯-1-酮为起始原料，同实施例1的方法制得标题化合物。

ESI-MS m/z:206[M+H]⁺。

实施例84,8-二氯-5,6-二氢-[1,2,4]三嗪并[6,1-a]异吲哚的合成

ESI-MS m/z:240[M+H]⁺。

实施例94-氯-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6,6(7H)-二甲酸二乙酯的合成

以3-环戊烯-1,1-二甲酸二乙酯为起始原料，同实施例1的方法制得标题化合物。

ESI-MS m/z:338[M+H]⁺。

实施例102-(4-氯-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)乙酸甲酯的合成

步骤1：2-环戊烯-1-乙酸甲酯的合成

称取1.12g2-环戊烯-1-乙酸于50mL圆底烧瓶中，加入10mL无水甲醇，滴加入2滴浓硫酸，加热回流2h，反应停止后，减压脱溶，加水，用碳酸氢钠水溶液调节pH至弱碱性，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥有机相后减压脱溶，得目标产物。

ESI-MS m/z:141[M+H]⁺。

步骤2：2-(4-氯-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)乙酸甲酯的合成

以2-环戊烯-1-乙酸甲酯为起始原料，同实施例1的方法制得标题化合物。

ESI-MS m/z:280[M+H]⁺。

实施例114-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-甲酸甲酯（B-47）的合成

称取319mg实施例1制备的化合物，加入10mL DMF溶解后，加入96.5mg4-氟-5-羟基-2-甲基吲哚和67.3mg无水碳酸钾，室温搅拌2小时后停止反应，加入40mL乙酸乙酯和80mL水萃取，水相用乙酸乙酯萃取2次，合并有机相，饱和氯化钠水溶液洗一次，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，柱纯化，制得标题化合物。

¹H NMR(500M Hz,DMSO-d₆)δ:11.34(s,1H),7.83(s,1H),7.52(s,1H),7.08-7.05(m,1H),6.99-6.93(m,1H),6.33(s,1H),4.25-4.18(m,1H),3.49-3.43(m,2H),3.26-3.24(m,2H),3.44（s,3H）,1.33-1.24(m,3H)。ESI-MS(m/z):381[M+H]⁺。

实施例124-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三嗪并[6,1-a]异吲哚-7-甲酸甲酯（B-37）的合成

以实施例2制得化合物和4-氟-5-羟基-2-甲基吲哚为原料，同实施例11的方法制得标题化合物。

¹H NMR(500M Hz,DMSO-d₆)δ:11.32(s,1H),7.88-7.80(m,1H),7.90(s,1H),7.15-7.13(m,1H),6.99-6.96(m,1H),6.24(s,1H),3.75(s,2H),3.67-3.66(m,1H),3.39-2.96(m,2H),2.92-2.89(m,3H),2.41(s,3H),2.24-2.19(m,1H),1.82-1.80(m,1H)。

ESI-MS(m/z):395[M+H]⁺。

实施例134-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)呋喃并[3',4':3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7(5H)-酮(B-34)的合成

以实施例3制得化合物和4-氟-5-羟基-2-甲基吲哚为原料，同实施例11的方法制得标题化合物。

¹H NMR(500M Hz,DMSO-d₆)δ:11.43(s,1H,N-H),8.71(s,1H),8.27(s,1H),7.16-7.19(m,1H)7.01-7.03(m,1H),6.26(s,1H),5.66(s,2H),2.41(s,3H)。

ESI-MS(m/z):339[M+H]⁺。

实施例144-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)哌喃并[3',4':3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-8(6H)-酮（B-31）的合成

以实施例4制得化合物和4-氟-5-羟基-2-甲基吲哚为原料，同实施例11的方法制得标题化合物。

¹H NMR(500M Hz,DMSO-d₆)δ:11.41(s,1H,N-H),8.59(s,1H),8.17(s,1H),7.18-7.15(m,1H),7.05-7.00(m,1H),6.26(s,1H),4.66-4.62(m,2H),3.33-3.32(m,2H),2.41(s,3H)。

ESI-MS(m/z):353[M+H]⁺。

实施例154-((2-吲哚酮-5-基)氧基)-5H-哌喃并[3',4':3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-8(6H)-酮（B-33）的合成

以实施例4制得化合物和5-羟基吲哚-2-酮为原料，同实施例11的方法制得标题化合物。

¹H NMR(500M Hz,DMSO-d₆)δ:8.61(s,1H),8.22(s,1H),8.00(s,1H,N-H),6.98-6.92(m,2H),6.20-6.18(m,1H),4.64-4.62(m,2H),3.65-3.63(m,2H),3.33-3.29(m,2H)。

ESI-MS(m/z):337[M+H]⁺。

实施例164-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪（B-44）的合成

以实施例5制得化合物和4-氟-5-羟基-2-甲基吲哚为原料，同实施例11的方法制得标题化合物。

¹H NMR(500M Hz,DMSO-d₆)δ:12.13(s,1H,N-H),7.98(s,1H),7.80(s,1H),7.15-7.12(m,1H),6.99-6.94(m,1H),6.23(s,1H),3.02(t,2H),2.87(t,2H),2.45-2.41(m,5H)。

ESI-MS(m/z):323[M+H]⁺。

实施例174-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三嗪并[6,1-a]异吲哚(B-35)的合成

以实施例6制得化合物和4-氟-5-羟基-2-甲基吲哚为原料，同实施例11的方法制得标题化合物。

¹H NMR(500M Hz,DMSO-d₆)δ:11.30(s,1H,N-H),7.87(s,1H),7.77(s,1H),7.14-7.12(m,1H),6.98-6.95(m,1H),6.23(s,1H),3.00(t,2H),2.73(t,2H),2.41(s,3H),1.82-1.78(m,4H)。

ESI-MS(m/z):337[M+H]⁺。

实施例184-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)-5,6-二氢-[1,2,4]三嗪并[6,1-a]异吲哚（B-39）的合成

以实施例7制得化合物和4-氟-5-羟基-2-甲基吲哚为原料，同实施例11的方法制得标题化合物。

¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ:8.00(s,br,1H,N-H),7.80(s,1H),7.54(s,1H),7.10-7.07(m,1H),7.02-6.96(m,1H),6.57(d,1H),6.35(s,1H),6.02-5.95(m,1H),3.22-3.14(m,2H),2.61-2.59(m,2H),2.45(s,3H)。

ESI-MS(m/z):335[M+H]⁺。

实施例194-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)-8-氯-5,6-二氢-[1,2,4]三嗪并[6,1-a]异吲哚（B-42）的合成

以实施例8制得化合物和4-氟-5-羟基-2-甲基吲哚为原料，同实施例11的方法制得标题化合物。

¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ:8.01(s,1H,N-H),7.82(s,1H),7.55(s,1H),7.08-7.11(m,1H),6.99-7.03(m,1H),6.59(d,1H),6.03-5.97(m,1H),3.24-3.16(m,2H),2.63-2.58(m,2H),2.46(s,3H)。

ESI-MS(m/z):369[M+H]⁺。

实施例204-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6,6(7H)-二甲酸二乙酯（B-61）的合成

以实施例9制得化合物和4-氟-5-羟基-2-甲基吲哚为原料，同实施例11的方法制得标题化合物。

¹H NMR(500M Hz,DMSO-d₆)δ:11.35(s,1H,N-H),7.95(s,1H),7.83(s,1H),7.16-7.13(m,1H),7.02-6.97(m,1H),6.25(s,1H),4.15-4.22(m,4H),3.66(s,2H),3.53(s,2H),2.41(s,3H),1.20(t,6H).

ESI-MS(m/z):467[M+H]⁺。

实施例212-(4-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)乙酸乙酯（B-62）的合成

以实施例10制得化合物和4-氟-5-羟基-2-甲基吲哚为原料，同实施例11的方法制得标题化合物。

1H NMR(300M Hz,CDCl₃)δ:8.09(s,1H,N-H),7.83(s,1H),7.50(s,1H),7.06-7.04(m,1H),6.98-6.95(m,1H),6.32(s,1H),3.98-3.94(m,1H),3.63(s,3H),3.60(t,2H),3.32-3.28(m,1H),2.90-2.78(m,3H),2.58-2.53(m,2H),2.41(s,3H)。

ESI-MS(m/z):409[M+H]⁺。

实施例224-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-基)甲醇（B-48）的合成

在盛有8mL的四氢呋喃(THF)的25mL单口瓶中，加入18mg四氢铝锂(LAH)，搅拌下滴加7mL溶解有190mg实施例11制备的化合物的四氢呋喃溶液，加毕后，TLC监测至原料消失，淬灭反应，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥有机相，过滤，旋干，制得标题化合物。

¹H NMR(500M Hz,DMSO-d₆)δ:11.34(s,1H,N-H),7.88(s,1H),7.78(s,1H),7.16-7.13(m,1H),6.99-6.94(m,1H),6.24(s,1H),4.74-4.71(m,1H),3.51-3.47(m,2H),3.13-3.08(m,1H),3.12-2.65(m,4H),2.41(s,3H)。

ESI-MS(m/z):353[M+H]⁺。

实施例234-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三嗪并[6,1-a]异吲哚-7-甲醇（B-43）的合成

以实施例12制得化合物为原料，同实施例22的方法制得标题化合物。

¹H NMR(500M Hz,DMSO-d₆)δ:11.32(s,1H,N-H),7.88(s,1H),7.80(s,1H),7.14-7.13(m,1H),6.99-6.96(m,1H),6.24(s,1H),4.59-4.58(m,1H),3.47-3.48(m,2H),3.29-3.20(m,1H),2.93-2.84(m,2H),2.72-2.65(m,1H),2.41(s,3H),2.04-1.89(m,2H),1.60-1.41(m,1H)。

ESI-MS(m/z):367[M+H]⁺。

实施例242-(4-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)乙醇（B-65）的合成

以实施例21制得化合物为原料，同实施例22的方法制得标题化合物。

¹H NMR(500M Hz,DMSO-d₆)δ:11.32(s,1H,N-H,重水交换后消失),7.89(s,1H),7.79(s,1H),7.13-7.16(m,1H),6.98-6.93(m,1H),6.24(s,1H),4.41(s,br,1H,-OH,重水交换后消失),3.53-3.45(m,2H),2.96-2.75(m,3H),2.41(s,3H),2.28-2.17(m,2H),1.68-1.66(m,1H),1.63-1.58(m,1H)。

ESI-MS(m/z):367[M+H]⁺。

实施例25(4-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6,6-二基)二甲醇（B-66）的合成

以实施例20制得化合物为原料，同实施例22的方法制得标题化合物。

¹H NMR(500M Hz,DMSO-d₆)δ:11.32(s,1H,N-H),7.86(s,1H),7.74(s,1H),7.12-7.14(m,1H),6.98-6.95(m,1H),6.24(s,1H),4.69(s,br,2H,-OH),3.46(s,4H),2.88(s,2H),2.71(s,2H),2.41(s,3H)。

ESI-MS(m/z):383[M+H]⁺。

实施例262-(4-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-基)丙-2-醇（B-67）的合成

将38mg实施例11制备的化合物溶于5mL无水THF中，氩气保护下，室温下，缓慢加入溶有29mg甲基氯化镁的THF溶液。反应结束后，减压脱溶，加入饱和食盐水，乙酸乙酯萃取2次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，柱层析纯化，制得标题化合物。

¹H NMR(500M Hz,DMSO-d6)δ:11.33(s,1H,N-H),7.87(s,1H),7.75(s,1H),7.12-7.15(m,1H),6.94-6.99(m,1H),6.24(s,1H),4.31(s,1H,-OH),2.87-3.01(m,5H),2.41(s,3H),1.17(s,6H)。

ESI-MS(m/z):381[M+H]⁺。

实施例274-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-甲酸（B-49）的合成

称取190mg实施例11制得的化合物于25mL单口瓶中，加入体积比为7:3的THF/甲醇的混合溶剂10mL，缓慢加入18mg氢氧化锂，反应完毕后加水淬灭反应，用1M的稀盐酸溶液调节pH至5～6，乙酸乙酯萃取，干燥有机相后过滤，旋干，制得标题化合物。

¹H NMR(500M Hz,DMSO-d₆)δ:12.5(s,br,1H,COOH),11.34(s,1H,N-H),7.89(s,1H),7.80(s,1H),7.13-7.11(m,1H),6.96-6.93(m,1H),6.22(s,1H),3.78-3.60(m,1H),3.31-3.12(m,4H),2.39(s,3H)。

ESI-MS(m/z):365[M-H]^-。

实施例284-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)-5,6,7,8-四氢-[1,2,4]三嗪并[6,1-a]异吲哚-7-甲酸（B-40）的合成

以实施例12制得化合物为原料，同实施例27的方法制得标题化合物。

¹H NMR(500M Hz,DMSO-d₆)δ:12.5(s,br,1H,COOH),11.34(s,1H,N-H),7.89-7.82(m,1H),7.92(s,1H),7.16-7.14(m,1H),7.01-6.97(m,1H),6.26(s,1H),4.61-4.59(m,1H),3.49-3.47(m,2H),3.33-3.31(m,1H),2.94-2.92(m,1H),2.71-2.66(m,2H),2.41(s,3H)。

ESI-MS(m/z):379[M-H]^-。

实施例294-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氨基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-甲酸（B-59）的合成

步骤1以实施例1制得的化合物和4-氟-5-氨基-2-甲基吲哚为原料，同实施例11的方法制得4-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氨基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-甲酸甲酯。

步骤2以步骤1制得的化合物为原料，同实施例27的方法制得标题化合物。

¹H NMR(500M Hz,DMSO-d₆)δ:12.29(s,br,1H,COOH),11.23(s,1H,N-H),8.74(s,1H,N-H),7.65(s,1H),7.45(s,1H),7.13-7.10(m,1H),7.04-6.99(m,1H),6.21(s,1H),3.64-3.56(m,1H),3.31-3.27(m,2H),3.06-3.03(m,2H),2.40(s,3H)。

ESI-MS(m/z):364[M-H]^-。

实施例302-(4-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)乙酸（B-64）的合成

以实施例21制得的化合物为原料，同实施例27的方法制得标题化合物。

¹H NMR(500M Hz,DMSO-d₆)δ:12.17(s,br,1H,COOH),11.34(s,1H,N-H),7.80(s,1H),7.69

(s,1H),7.13-7.02(m,1H),6.99-6.97(m,1H),6.24(s,1H),3.09-3.04(m,1H),2.88-2.74(m,4H),2.12-1.56(m,2H),2.41(s,3H)。

ESI-MS(m/z):379[M-H]^-。

实施例313-((4-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-基)甲氧基)-3-氧亚基丙酸（B-72）的合成

在50mL圆底瓶中，依次加入348mg N,N-二异丙基乙胺(DIEA)、0.5mg4-二甲氨基吡啶(DMAP)，用5mL四氢呋喃(THF)溶解，冰水浴下搅拌10min后缓慢滴加入5mL溶有175mg1-乙基-3-(3-二甲胺丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDCI)的THF溶液，然后滴加5mL溶有320mg实施例22制备的化合物的THF溶液，室温搅拌待反应结束后，减压脱溶，加入饱和食盐水，乙酸乙酯萃取2次，合并有机相，无水硫酸钠干燥后过滤，旋干，柱层析纯化，制得标题化合物。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ:12.41(s,br,1H,COOH，重水交换后消失),11.36(s,1H,重水交换后消失),7.89(s,1H),7.79(s,1H),7.15-7.13(m,1H),6.98-6.95(m,1H),6.23(s,1H),4.10(s,2H),3.20-3.17(m,2H),3.06-3.00(m,3H),2.89-2.84(m,1H),2.73-2.69(m,1H),2.41(s,3H)。

ESI-MS (m/z):[M-H]^-437。

实施例324-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-甲酰胺（B-51）的合成

称取73mg实施例27制备的化合物于50mL圆底瓶中，加入5mL DMF、12mg4-二甲氨基吡啶(DMAP)、152mg2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)，室温搅拌反应0.3h后，依次加入54mg NH₄Cl、258mgN,N-二异丙基乙胺（DIPEA），继续室温搅拌反应8.0h后，用1MHCl调节pＨ为6～7，然后加入乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤旋干后柱层析纯化，制得标题化合物。

¹HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ:11.3(s,N-H,重水交换后消失),7.94(s,1H),7.89(s,1H),7.78(s,1H,N-H,重水交换后消失),7.19-7.16(m,1H),7.01-6.93(m,2H),6.26(s,1H),3.69-3.61(m,1H),3.30-308(m,4H),2.53(s,3H)。

ESI-MS(m/z):366[M+H]⁺。

实施例33N-甲基-(4-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-基)甲酰胺

以实施例28制备的化合物和甲胺为原料，同实施例32的方法制得标题化合物。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:11.32(s,N-H,重水交换后消失),7.99(s,1H),7.89(s,1H),7.78(s,1H),7.12-7.15(m,1H),6.95-6.98(m,1H),6.24(s,1H),3.61-3.68(m,1H),3.00-3.28(m,4H),2.63(s,3H),2.40(s,3H)。

ESI-MS(m/z):380[M+H]⁺。

实施例342-(4-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)乙酰胺（B-68）的合成

以实施例30制得的化合物为原料，同实施例32的方法制得标题化合物。

¹H NMR(500M Hz,DMSO-d6)δ:11.34(s,1H,N-H,重水交换后消失),7.91(s,1H),7.80(s,1H),7.34(s,1H,N-H,重水交换后消失),7.16-7.13(m,1H),7.02-6.96(m,1H),6.81(s,1H,N-H,重水交换后消失),6.24(s,1H),3.78-3.75(s,1H),2.97-2.77(m,3H),2.63-2.57(m,1H),2.41(s,3H),2.29-2.01(m,2H)。

ESI-MS(m/z):380[M+H]⁺。

实施例35N-((S)-1-羟基丙烷-2-基)-(4-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-基)甲酰胺（B-50）的合成

以实施例27制得的化合物和L-氨基丙醇为原料，同实施例32的方法制得标题化合物。

¹H NMR(500M Hz,DMSO-d₆)δ:11.30(s,br,1H,N-H,重水交换后消失),7.89(s,1H),7.78(s,1H),7.71(s,1H,N-H,重水交换后消失),7.15-7.12(m,1H),6.99-6.96(m,1H),6.24(s,1H),4.65(s,1H,O-H,重水交换后消失)3.81(s,1H),3.62-3.60(m,1H),3.38-3.35(m,3H),3.16-3.05(m,3H),2.40(s,3H),1.05(s,3H)。

ESI-MS(m/z):424[M+H]⁺。

实施例362-(4-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-N-((S)-1-羟基丙烷-2-基)乙酰胺（B-69）的合成

以实施例30制得的化合物和L-氨基丙醇为原料，同实施例32的方法制得标题化合物。

1H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:11.32(s,1H),7.90(s,1H),7.79(s,1H),7.63-7.61(m,1H),7.15-7.13(d,1H),6.96-6.90(t,1H),6.24(s,1H),4.61-4.60(m,1H),3.79-3.75(m,2H),3.22-3.16(m,2H),2.95-2.78(m,4H),2.41(s,3H),2.22-2.30(m,1H),2.11-2.05(m,1H),1.01-0.98(t,3H)。

ESI-MS(m/z):438[M+H]⁺。

实施例374-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)-6-((2-甲氧基乙氧基)甲基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪（B-57）的合成

将35mg实施例22制备的化合物用3mL DMF溶解后，加入20mg2-溴乙基甲基醚和20mg无水碳酸钾，反应液室温搅拌2小时后停止反应，加入乙酸乙酯40ml和水80ml萃取，水相用乙酸乙酯萃取2次，合并有机相，用饱和氯化钠水溶液洗涤一次，无水硫酸钠干燥后过滤，旋干，柱层析纯化，制得标题化合物。

¹H NMR(500M Hz,DMSO-d₆)δ:11.31(s,1H),7.88(s,1H)，7.78(s,1H),7.15-7.12(m,1H),6.99-6.94(m,1H),6.24(s,1H),3.57-3.44(m,6H),3.13(s,3H),3.02-2.95(m,2H),2.86-2.83(m,1H),2.80-2.76(m,1H),2.67-2.62(m,1H),2.40(s,3H)。

ESI-MS(m/z):411[M+H]⁺。

实施例38N-(4-(4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)-6-((2-甲氧基乙氧基)甲基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺（B-58）的合成

步骤1：4-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氨基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-甲酸甲酯的合成

以实施例1制得的化合物和4-氟-5-氨基-2-甲基吲哚为原料，同实施例11的方法制得4-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氨基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-甲酸甲酯。

步骤2：4-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氨基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-甲醇

以步骤1制得的化合物为原料，同实施例22的方法制得4-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氨基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-甲醇。

步骤3：N-(4-(4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)-6-((2-甲氧基乙氧基)甲基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-4-胺的合成

以步骤2制得的化合物和2-溴乙基甲基醚为原料，同实施例37的方法制得标题化合物。

¹H NMR(500M Hz,DMSO-d₆)δ:11.22(s,1H),8.66(s,1H),7.63(s,1H),7.42(s,1H),7.09-6.95(m,2H),6.20(s,1H),3.52-3.45(m,6H),3.25(s,3H),3.07-3.05(m,2H),2.92-2.72(m,3H),2.40(s,3H)。

ESI-MS(m/z):410[M+H]⁺。

实施例392-((4-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-基)甲氧基)乙醇（B-60）的合成

以实施例22的化合物和氯乙醇为原料，同实施例37的方法制得标题化合物。

¹H NMR(500M Hz,DMSO-d6)δ:11.32(s,1H,N-H,重水交换后消失),7.88(s,1H),7.78(s,1H),7.14-7.13(m,1H),6.98-6.97(m,1H),6.24(s,1H),4.56(s,br,1H,OH,重水交换后消失),3.62-3.50(m,6H),3.16-3.14(m,2H),3.02-2.97(m,1H),2.86-2.82(m,1H),3.02-2.70(m,1H),2.41(s,3H)。

ESI-MS(m/z):397[M+H]⁺。

实施例404-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)-6-(2-甲氧基乙氧基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪（B-63）的合成

步骤1：4-(2-甲氧基乙氧基)环戊烯的合成

称取0.84g3-环戊烯-1-醇与反应瓶中，加入1.66g K₂CO₃，10mL乙腈，常温搅拌0.5h后，加入2-溴乙基甲基醚，反应过夜，反应结束后，减压除去溶剂，加入水，乙酸乙酯萃取，干燥，过滤，旋干，制得标题化合物，直接用于下一步反应。

ESI-MS(m/z):143[M+H]⁺。

步骤2：4-氯6-(2-甲氧基乙氧基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪的合成

以步骤1制得的化合物为原料，同实施例1的方法制得标题化合物。

ESI-MS(m/z):268[M+H]⁺。

步骤3：4-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)-6-(2-甲氧基乙氧基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪的合成

以步骤2制得的化合物为原料，同实施例11的方法制得标题化合物。

¹H NMR(300M Hz,DMSO-d₆)δ:11.34(s,1H,N-H),7.90(s,1H),7.82(s,1H),7.15-7.12(m,1H),7.00-6.95(m,1H),6.24(s,1H),4.70-4.66(m,1H),3.63(t,2H),3.60(t,2H),3.47-3.43(m,2H),3.24(s,3H),3.00-2.81(m,2H),2.41(s,3H)。

ESI-MS(m/z):397[M+H]⁺。

实施例41(4-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-基)甲胺（B-70）的合成

以实施例32制备的化合物为原料，同实施例22的方法制得标题化合物。¹H NMR(500M Hz,DMSO-d6)δ:11.51(s,1H,N-H),7.87(s,1H),7.76(s,1H),7.15-7.12(m,1H),6.99-6.97(m,1H),6.23(s,1H),3.73(s,2H,N-H,重水交换后消失),3.17-3.11(m,1H),3.01-2.50(m,6H),2.41(s,3H)。

ESI-MS(m/z):352[M+H]⁺。

实施例424-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-甲腈（B-71）的合成

步骤1：4-氰基环戊烯的合成

称取12.1g二烯丙基乙腈于150mL单口瓶中，加入50mL二氯甲烷搅拌溶解，加入约0.5g(1,3-双-(2,4,6-三甲基苯)-2-咪唑啉)二氯(苯亚甲基)(三环己基磷)化钌（GRUBB‘S第二代催化剂），室温搅拌过夜，点板跟踪，待反应完全后，用150mL饱和食盐水洗涤，有机相经无水硫酸钠干燥后，减压脱溶，得4-腈基环戊烯。

步骤2：4-氯-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-甲腈的合成

以步骤1所得物为原料，同实施例1的方法制得标题化合物。

步骤3：4-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-甲腈的合成

以步骤2所得物为原料，同实施例11的方法制得标题化合物。

¹H NMR(500M Hz,DMSO-d₆)δ:11.35(s,1H,N-H),7.97(s,1H),7.89(s,1H),7.16-7.13(m,1H),7.02-6.96(m,1H),6.24(s,1H),4.01-3.93(m,1H),3.57-3.49(m,1H),3.48-3.42(m,1H),3.26-3.20(m,1H),3.18-2.13(m,1H),2.41(s,3H)。

ESI-MS(m/z):348[M+H]⁺。

实施例43N-环丙基-4-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-咪唑羧酰胺

以实施例28制备的化合物和环丙胺为原料，同实施例32的方法制得标题化合物。

¹H NMR(500M Hz,DMSO-d₆)δ:11.33(s,1H,N-H),8.02-7.78(m,3H),7.15-7.12(d,1H),6.99-6.95(t,1H),6.23(s,1H),3.57-3.52(m,1H),3.24-3.15(m,1H),3.06-3.04(m,2H),2.89(s,1H),2.73-2.69(d,1H),2.41(s,3H),0.63-0.61(m,2H),0.44-0.43(m,2H)。

ESI-MS(m/z):406[M+H]⁺。

实施例44((2S)-1-((4-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-基)甲基)吡咯-2-基)甲醇（B-85）

步骤14-((4-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-甲醛的合成

称取200mg实施例22制备的化合物于50ml单口瓶中，加入乙酸乙酯/DMSO混合溶液14mL(4:3)溶解，室温搅拌下加入480mg邻碘苯甲酸(IBX)，85℃反应15min，反应结束后，加入20ml水，乙酸乙酯萃取(3×30mL)，合并有机相，饱和食盐水洗涤，干燥，过滤，柱层析纯化得到标题化合物。

ESI-MS(m/z):351[M+H]⁺。

步骤2:((2S)-1-((4-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-基)甲基)吡咯-2-基)甲醇（B-85）的合成

称取120mg步骤1制备的化合物于50ml单口瓶中，加入10mL甲苯/乙醇混合溶剂（体积比16：3）溶解，加入52mgD-脯氨醇，110℃反应6h，反应结束后，冷却至室温，加入218mg三乙酰氧基硼氢化钠，室温搅拌2h，反应结束后，直接加入1ml水，制备柱层析得标题化合物。

¹H NMR(500M Hz,DMSO-d₆)δ:11.37(s,1H,N-H),7.94(s,1H),7.87-7.7.86(d,1H),7.17-7.15(d,1H),7.00-6.97(t,1H),6.26(s,1H),5.55-5.52(m,1H),3.80-3.58(m,5H),3.38-3.34(m,3H),3.24-3.15(m,2H),2.97-2.90(m,1H),2.75-2.70(m,1H),2.45(s,3H),2.17-2.09(m,1H),2.07-2.00(m,1H),1.92-1.88(m,1H),1.78-1.72(m,1H)。

ESI-MS(m/z):436[M+H]⁺。

实施例45N-((4-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-基)甲基)乙酰胺（B-86）

称取200mg实施例41制备的化合物于50ml三口瓶中，加入10ml无水二氯甲烷溶解，0-5℃搅拌10min后，滴加5ml溶解有80mg乙酰氯的二氯甲烷溶液，0-5℃反应1h，反应结束后，加入20ml水，二氯甲烷萃取(3×20mL)，干燥，过滤，旋干，柱层析纯化得标题化合物。

¹H NMR(500M Hz,DMSO-d₆)δ:11.32(s,1H,N-H),8.00(s,1H),7.87(s,1H),7.78(s,1H),7.14-7.11(d,1H),6.98-6.93(t,1H),6.23(s,1H),3.23-3.10(m,3H),3.01-2.92(m,2H),2.82-2.71(m,1H),2.64-2.57(m,1H),2.49(s,3H),1.82(s,3H)。

ESI-MS(m/z):394[M+H]⁺。

实施例46N-((4-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-基)甲基)甲磺酰胺（B-87）

以实施例41制备的化合物和甲磺酰氯为原料，同实施例45的方法制得标题化合物。

¹H NMR(500M Hz,DMSO-d₆)δ:11.33(s,1H,N-H),7.88(s,1H),7.80(s,1H),7.19-7.13(m,2H),6.98-6.95(t,1H),6.23(s,1H),3.21-3.16(m,1H),3.11-3.10(m,2H),3.03-3.00(m,2H),2.91(s,3H),2.87-2.83(m,1H),2.70-2.68(m,1H),2.41(s,3H)。

ESI-MS(m/z):430[M+H]⁺。

实施例471-(4-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-基)乙醇（B-88）

称取40mg实施例44步骤1制备的化合物4-((4-((4-氟-2-甲基-1H-吲哚-5-基)氧基)-6,7-二氢-5H-戊环并[3,4]吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-6-甲醛于25ml单口瓶中，加入8ml无水THF溶解，-50℃下，滴加1当量的CH₃MgCl，滴毕，-50℃下反应30min，反应结束后，加入NH₄Cl淬灭，乙酸乙酯萃取，干燥，过滤，旋干，柱层析纯化得标题化合物。

¹H NMR(500M Hz,DMSO-d6)δ:11.33(s,1H,N-H),7.87(s,1H),7.76(s,1H),7.15-7.12(d,1H),7.00-6.94(m,1H),6.24(s,1H),4.62(s,1H),3.75(s,1H),3.10-2.68(m,5H),2.41(s,3H),1.14-1.12(d,3H)。

ESI-MS(m/z):367[M+H]⁺。

实验例1本发明的化合物体外酶活性评价

1实验材料

1.1化合物

以上实施例制备的本发明的化合物，每个化合物用DMSO溶解至1.5mM后，依次3倍稀释，共11个浓度。

1.2试剂

血管内皮细胞生长因子受体2（Vascular endothelial growth factorreceptor2,VEGFR2），购自于日本Carna Biosciences公司；

成纤维细胞生长因子受体1（Fibroblast growth factor receptor1,FGFR1），购自于日本Carna Biosciences公司；

二甲基亚砜（Dimethyl sulfoxide,DMSO），购自于美国Sigma公司；

EDTA，购自于美国Sigma公司；

96孔板（96well plate），购自于美国Corning公司；

384孔板（384well plate），购自于美国Corning公司。

1×激酶缓冲液（50mM HEPES,pH7.5,0.0015%Brij-35,10mM MgCl₂,2mM DTT），临用前配制；

终止液（100mM HEPES,pH7.5,0.015%Brij-35,0.2%Coating Reagent#3，50mMEDTA），临用前配制。

1.3仪器

LabChip EZ Reader，购自于美国Caliper公司。

2实验方法

1)取每个浓度的化合物溶液10μl至96孔板中，加入90μl1×激酶缓冲液；同时设立DMSO对照组和无酶活对照组，均仅含10μl DMSO和90μl1×激酶缓冲液。各组在室温下混匀10min，然后分别转移5μl至384孔板中；

2)将激酶VEGFR2或FGFR1溶于1×激酶缓冲液，配制成2.5×激酶溶液，然后转移10μl2.5×激酶溶液至上述含各浓度化合物的384孔板中；DMSO对照组加入10μl2.5×激酶溶液；无酶活对照组加入10μl不含激酶的1×激酶缓冲液。室温下孵育10min；

3)将FAM标记的多肽和ATP溶于1×激酶缓冲液，配制成2.5×底物溶液，然后转移10μl2.5×底物溶液至上述384孔板中，28℃孵育1hr；

4)各孔中加入25μl终止液终止反应；

5)置于LabChip EZ Reader上读取转化率数据，并计算抑制率I%，计算公式为I%=(Max-Conversion)/(Max-Min)×100，其中Max为DMSO对照组的转化率，Min为无酶活对照组的转化率，Conversion为化合物处理组的转化率。数据经XLfit处理，拟合得IC₅₀。IC₅₀值表示与未加化合物处理组相比，化合物抑制50%酶活力时对应的化合物浓度。IC₅₀结果见表1。

表1

从以上实验结果可以看出，本发明的化合物对VEGFR2或FGFR1具有较好的抑制活性。

尽管以上已经对本发明作了详细描述，但是本领域技术人员理解，在不偏离本发明的精神和范围的前提下可以对本发明进行各种修改和改变。本发明的权利范围并不限于上文所作的详细描述，而应归属于权利要求书。

Claims

1.通式I的化合物或其药学可接受的盐，

其中：

X选自O、S、N(R₄)和C_1-3亚烷基；

环A选自含有5和6个碳原子的碳环和含有1-2个杂原子的五元和六元杂环，所述的杂原子选自N、O、S；

R₁选自氢、氧代、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、卤代C_1-6烷基、卤代C_1-6烷氧基、-OH、-NH₂、硝基、卤素、CN、单C_1-6烷基氨基和双C_1-6烷基氨基；

R₂选自氢、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、卤代C_1-6烷基、卤代C_1-6烷氧基、-OH、-NH₂、硝基、卤素、CN、单C_1-6烷基氨基和双C_1-6烷基氨基；

R₃选自氢、氧代、卤素、羟基、羧基、氨基、氰基、-C_1-6烷基、硝基、-O-C_1-6烷基、-C_1-6烷基-O-C_1-6烷基、-O-C_1-6烷基-O-C_1-6烷基、-NH-C_1-6烷基、-N(C_1-6烷基)(C_1-6烷基)、-C_1-6烷基-NH-C_1-6烷基、-C_1-6烷基-N(C_1-6烷基)(C_1-6烷基)、-C(O)-O-C_1-6烷基、-C_1-6烷基-C(O)-O-C_1-6烷基、-C(O)-NH₂、-C(O)-NH-C_1-6烷基、-C(O)-NH-C_3-6环烷基、-C(O)-N-(C_1-6烷基)(C_1-6烷基)、-C_1-6烷基-C(O)-NH₂、-C_1-6烷基-C(O)-NH-C_1-6烷基、-C_1-6烷基-C(O)-N-(C_1-6烷基)(C_1-6烷基)、-C(O)-C_1-6烷基、-C_1-6烷基-C(O)-C_1-6烷基、-O-C(O)-C_1-6烷基、-C_1-6烷基-O-C(O)-C_1-6烷基、-C_1-6烷基-OH、-C_1-6烷基-C(O)-OH、-C_1-6烷基-NH₂、-C(O)-NH-C_1-6烷基-OH、-C(O)-NH-C_1-6烷基-C(O)-OH、-C_1-6烷基-C(O)-NH-C_1-6烷基-OH、-C_1-6烷基-C(O)-NH-C_1-6烷基-C(O)-OH、-C_1-6烷基-O-C_1-6烷基-OH、-C_1-6烷基-O-C_1-6烷基-O-C_1-6烷基、-C_1-6烷基-O-C(O)-C_1-6烷基-C(O)-OH、-C_1-6烷基-O-C(O)-C_1-6烷基-OH、-C_1-6烷基-四氢吡咯烷、-C_1-6烷基-四氢呋喃、-C_1-6烷基-四氢噻吩、-C_1-6烷基-四氢噻唑、-C_1-6烷基-四氢噁唑、-C_1-6烷基-哌啶、-C_1-6烷基-哌嗪、-C_1-6烷基-吗啉，所述的四氢吡咯烷、四氢呋喃、四氢噻吩、四氢噻唑、四氢噁唑、哌啶、哌嗪、吗啉可以被一个或多个卤素、羟基、C_1-6烷基、羟C_1-6烷基、羧基、氨基、氰基、C_1-6烷氧基取代；

R₄选自氢和C_1-6烷基；

n选自1、2、3和4。

2.根据权利要求1的化合物或其药学可接受的盐，其中：

X选自O、S、N(R₄)和CH₂；

R₄选自氢和C_1-6烷基；

n选自1、2和3。

3.根据权利要求1的化合物或其药学可接受的盐，其中环A选自环戊烷基、环戊烯基、环己烷基和环己烯基。

4.根据权利要求1的化合物或其药学可接受的盐，其中环A选自四氢呋喃环基、四氢吡咯环基、四氢吡喃环基和哌啶基。

5.根据权利要求2-4之任一项所述的化合物或其药学可接受的盐，其中X选自N(R₄)和O，所述的R₄选自氢和C_1-6烷基。

6.根据权利要求5的化合物或其药学可接受的盐，其中X选自N(R₄)和O，所述的R₄选自氢和C_1-3烷基。

7.根据权利要求6的化合物或其药学可接受的盐，其中X选自NH和O。

8.根据权利要求1所述的化合物或其药学可接受的盐，其中所述化合物为选自以下的化合物：

9.制备权利要求1至8之任一项所述的化合物或其药学可接受的盐的中间体：

10.一种药物组合物，其包含权利要求1至8之任一项所述的化合物或其药学可接受的盐和可药用载体。

11.权利要求1-8之任一项所述的化合物或其药学可接受的盐或权利要求10所述的药物组合物在制备用于治疗或预防肿瘤的药物中的应用。