BR112021009807A2

BR112021009807A2 - composição detergente, método de tratamento de um substrato de tecido e uso de uma enzima isomerase

Info

Publication number: BR112021009807A2
Application number: BR112021009807-0A
Authority: BR
Inventors: Jens Carlo BENNINGHOFF; Simone Antonio De Rose; Michail Isupov; Dietmar Andreas LANG; Jennifer Ann LITTLECHILD-BOND; Sarah Rebecca Smith; Mark Lawrence Thompson
Original assignee: Unilever Ip Holdings B.V.
Priority date: 2018-11-20
Filing date: 2019-10-30
Publication date: 2021-08-17
Also published as: EP3884022A1; ZA202102581B; EP3884022B1; WO2020104155A1; CN113056549B; CN113056549A

Abstract

COMPOSIÇÃO DETERGENTE, MÉTODO DE TRATAMENTO DE UM SUBSTRATO DE TECIDO E USO DE UMA ENZIMA ISOMERASE. A presente invenção provê uma composição detergente compreendendo: (i) de 1 a 60% em peso de um tensoativo; e, (ii) de 0,0005 a 5% em peso de uma enzima isomerase, em que a enzima isomerase é uma enzima esqualeno hopeno ciclase; a um método usando a enzima e ao uso da enzima para aprimorar a limpeza de manchas de sebo no tecido.

Description

Relatório Descritivo de Patente de Invenção COMPOSIÇÃO DETERGENTE, MÉTODO DE TRATAMENTO DE UM

SUBSTRATO DE TECIDO E USO DE UMA ENZIMA ISOMERASE Campo da Invenção

[0001] A presente invenção se refere a uma composição detergente, mais especificamente uma composição detergente de lavagem de roupas, a dita composição compreendendo uma enzima isomerase nova.

Antecedentes da Invenção

[0002] Sebo é uma sujeira oleosa que permanece uma mancha difícil de remover das roupas usadas. Com um estímulo de encorajar os consumidores a lavar em baixas temperaturas, o desafio de remoção eficaz de sebo continua existindo. Sebo consiste de uma variedade de gorduras e ésteres incluindo ésteres de cera, ésteres de colesterol, esqualeno e muitos ácidos/álcoois graxos livres. Sebo é líquido em temperatura corporal, mas sólido a temperatura ambiente.

[0003] Estas propriedades são particularmente importantes para remoção de sujeira de colarinho/punho porque é mais fácil remover um óleo corporal líquido do que sólidos das roupas. Enzimas de lavagem de roupa atuais não são capazes de degradar todos os componentes do sebo o que torna a remoção a partir do tecido difícil.

[0004] Há um problema com remoção de sebo em que os detergentes incluindo as enzimas comerciais atuais não removem sebo adequadamente.

Sumário da Invenção

[0005] Foi encontrado que a incorporação de uma nova enzima isomerase em composições detergentes aprimora a remoção de sebo de tecidos.

[0006] Em um aspecto a presente invenção provê uma composição detergente compreendendo:

(i) de 1 a 60% em peso, preferivelmente de 2 a 50% em peso, mais preferivelmente de 3 a 45%, ainda mais preferivelmente de 5 a 40% em peso, ainda mais preferivelmente de 6 a 40% em peso de um tensoativo; e, (ii) de 0,0005 a 5% em peso, preferivelmente de 0,005 a 2,5% em peso, mais preferivelmente de 0,01 a 1% em peso de uma enzima isomerase, em que a enzima isomerase é uma enzima esqualeno hopeno ciclase.

[0007] Preferivelmente a enzima tem pelo menos 60%, preferivelmente pelo menos 70%, mais preferivelmente pelo menos 75%, mais preferivelmente pelo menos 80%, mais preferivelmente pelo menos 85%, ainda mais preferivelmente pelo menos 90%, ainda mais preferivelmente pelo menos 95%, ainda mais preferivelmente pelo menos 97%, pelo menos 98% ou ainda pelo menos 99% de identidade de sequência com qualquer uma das SEQ ID NO: 1 ou 2.

[0008] Ainda mais preferivelmente a enzima isomerase tem 100% de identidade de sequência com qualquer uma das SEQ ID NO: 1 ou 2.

[0009] Preferivelmente a composição detergente compreende 0,1 a 10% em peso, preferivelmente de 0,2 a 9% em peso, mais preferivelmente de 0,25 a 8, ainda mais preferivelmente 0,5 a 6% em peso, ainda mais preferivelmente 1 a 5% em peso de polímero de liberação sujeira, mais preferivelmente um polímero de liberação de sujeira com base em poliéster.

[0010] Preferivelmente o polímero de liberação de sujeira de poliéster é um polímero de liberação de sujeira com base em polietileno e/ou polipropileno tereftalato, preferivelmente um polímero de liberação de sujeira com base em polipropileno tereftalato.

[0011] Preferivelmente a composição detergente compreende uma poliamina alcoxilada, preferivelmente em um nível de a partir de 0,1 a 8% em peso, mais preferivelmente de 0,2 a 6% em peso, ainda mais preferivelmente de 0,5 a 5% em peso.

[0012] Preferivelmente a composição detergente é uma composição detergente de lavagem de roupas. Preferivelmente a composição detergente de lavagem de roupas é um líquido ou um pó, ainda mais preferivelmente um detergente líquido.

[0013] Preferivelmente o tensoativo na composição detergente compreende tensoativo aniônico e/ou não iônico, em um caso compreendendo ambos tensoativos aniônico e não iônico.

[0014] Composições detergente preferidas, particularmente composições detergentes de lavagem de roupas adicionalmente compreendem uma enzima adicional selecionada a partir do grupo consistindo de: lipases, proteases, celulases, alfa-amilases, peroxidades/oxidases, pectato liases e/ou mananases.

[0015] Composições detergente preferidas, particularmente composições detergentes de lavagem de roupas adicionalmente compreendem um ingrediente adicional selecionado a partir de agente fluorescente, perfume, corantes tonalizantes e polímeros, e misturas dos mesmos.

[0016] Em outro aspecto a presente invenção provê um método de tratamento de um substrato de tecido com uma mancha de sebo, dito método compreendendo incorporação de uma enzima isomerase, em que a enzima isomerase é uma enzima esqualeno hopeno ciclase; em uma composição detergente compreendendo de 1 a 60% em peso de um tensoativo; e tratamento subsequente de um substrato de tecido com uma mancha de sebo, com a dita composição.

[0017] Preferivelmente no dito método, a enzima tem pelo menos 60%, preferivelmente pelo menos 70%, mais preferivelmente pelo menos 75%, mais preferivelmente pelo menos 80%, mais preferivelmente pelo menos 85%, ainda mais preferivelmente pelo menos 90%, ainda mais preferivelmente pelo menos 95%, ainda mais preferivelmente pelo menos 97%, pelo menos 98% ou ainda pelo menos 99%, ainda mais preferivelmente 100% de identidade de sequência com qualquer uma das SEQ ID NO: 1 ou 2.

[0018] Em outro aspecto a presente invenção provê o uso de uma enzima isomerase, em que a enzima isomerase é uma enzima esqualeno hopeno ciclase, para aprimorar a limpeza de manchas de sebo no tecido.

[0019] Preferivelmente no dito uso, a enzima tem pelo menos 60%, preferivelmente pelo menos 70%, mais preferivelmente pelo menos 75%, mais preferivelmente pelo menos 80%, mais preferivelmente pelo menos 85%, ainda mais preferivelmente pelo menos 90%, ainda mais preferivelmente pelo menos 95%, ainda mais preferivelmente pelo menos 97%, pelo menos 98% ou ainda pelo menos 99%, ainda mais preferivelmente 100% de identidade de sequência com qualquer uma das SEQ ID NO: 1 ou 2.

Descrição Detalhada da Invenção

[0020] O artigo indefinido “um” ou “uma” e seu correspondente artigo definido “o” ou “a” tal como usado aqui significa pelo menos um, ou um ou mais, a menos que especificado de outra forma.

[0021] Todos os níveis em % dos ingredientes em composições (formulações) listados aqui são em % em peso com base na formulação total a menos que indicado de outra forma.

[0022] É entendido que qualquer referência a um ingrediente preferido da composição detergente é considerada como sendo matéria combinável com qualquer outro ingrediente preferido da composição detergente revelada aqui.

[0023] A composição detergente pode assumir qualquer forma adequada, por exemplo líquidos, sólidos (incluindo pós) ou géis.

[0024] A composição detergente pode ser aplicada a qualquer substrato adequado. Substratos particularmente preferidos são tecidos. Composições detergentes particularmente preferidas são composições detergentes de lavagem de roupas.

[0025] Composições detergentes de lavagem de roupas podem assumir qualquer forma adequada. Formas preferidas são líquida ou pó, sendo líquida a mais preferida.

Informação das sequências

[0026] As sequências reveladas aqui são as SEQ ID NO 1 ou 2.

[0027] A SEQ ID 1 é uma sequência truncada derivada de SEQ ID 2 e é de Methanosarcina thermophila.

[0028] A SEQ ID 2 é de Methanosarcina thermophila. Enzima isomerase

[0029] A enzima isomerase pode ser descrita como sendo da classe de enzima EC 5.

[0030] A enzima isomerase é uma esqualeno hopeno ciclase, que pode ser descrita como sendo da classe de enzima EC 5.4.99.17.

[0031] Preferivelmente, a enzima tem pelo menos 60% identidade de sequência com qualquer uma das SEQ ID NO: 1 ou 2.

[0032] Preferivelmente a enzima tem pelo menos 70%, mais preferivelmente pelo menos 75%, mais preferivelmente pelo menos 80%, mais preferivelmente 85%, ainda mais preferivelmente pelo menos 90%, ainda mais preferivelmente pelo menos 95%, ainda mais preferivelmente pelo menos 97%, pelo menos 98% ou ainda pelo menos 99% de identidade de sequência com qualquer uma das SEQ ID NO: 1 ou 2.

[0033] Ainda mais preferivelmente a enzima tem 100% de identidade de sequência com qualquer uma das SEQ ID NO: 1 ou 2.

[0034] Isomerases preferidas são de Methanosarcina thermophila.

Tensoativo

[0035] A composição detergente compreende tensoativo (que pode incluir um único tensoativo ou uma mistura de dois ou mais tensoativos). A composição compreende de 1 a 60% em peso, preferivelmente de 2 a 50% em peso, mais preferivelmente de 3 a 45% em peso de tensoativo, ainda mais preferivelmente de 5 a 40% em peso, ainda mais preferivelmente de 6 a 40% em peso de tensoativo.

[0036] A composição detergente (preferivelmente uma composição detergente de lavagem de roupas) compreende tensoativo aniônico e/ou não-iônico, preferivelmente compreendendo ambos tensoativos aniônico e não-iônico.

[0037] Compostos detergentes aniônicos adequados que podem ser usados são geralmente sais de metal alcalino solúveis em água de sulfatos e sulfonatos orgânicos tendo radicais alquila contendo de cerca de 8 a cerca de 22 átomos de carbono, o termo alquila sendo usado para incluir a porção alquila de radicais alquila superiores.

[0038] Exemplos de compostos detergentes aniônicos sintéticos adequados são sulfatos de alquila de sódio e potássio, especialmente aqueles obtidos ao sulfatar álcoois C 8 a C 18 superiores, produzidos por exemplo a partir de óleo de sebo ou coco, sulfonatos de alquil C 9 a C 20 benzeno de sódio e potássio, particularmente sulfonatos de aquil C 10 a C 15 benzeno secundários lineares de sódio; e sulfatos de alquil gliceril éter de sódio, especialmente aqueles éteres de álcoois superiores derivados de óleo de sebo ou coco e álcoois sintéticos derivados de petróleo.

[0039] O tensoativo aniônico é preferivelmente selecionado de: sulfonato de alquil benzeno linear; sulfatos de alquila; sulfatos de alquil éter; sabões; sulfonatos de alquil (preferivelmente metil) éster e misturas dos mesmos.

[0040] Os tensoativos aniônicos mais preferidos são selecionados de: sulfonato de alquil benzeno linear; sulfato de alquila; sulfato de alquil éter e misturas dos mesmos. Preferivelmente o sulfato de alquil éter é um sulfato de n-alquil C 12-C14 éter com uma média de 1 a 3 unidades de EO (etoxilato).

[0041] Lauril eter sulfato de sódio (SLES) é particularmente preferido. Preferivelmente o sulfonato de alquil benzeno linear é um sulfonato de alquil C 11-C 15 benzeno de sódio. Preferivelmente o sulfato de alquila é um sulfato de alquila C 12-C18 de sódio linear ou ramificado. Sulfato de dodecila de sódio é particularmente preferido (SDS, também conhecido como sulfato de alquila primário).

[0042] Em formulações líquidas preferivelmente dois ou mais tensoativos aniônicos estão presentes, por exemplo sulfonato de alquil benzeno linear junto com um sulfato de alquil éter.

[0043] Em formulações líquidas, preferivelmente a composição de lavagem de roupas, em adição ao tensoativo aniônico, compreende tensoativo não-iônico alquil etoxilado, preferivelmente de 2 a 8% em peso de tensoativo não-iônico alquil etoxilado.

[0044] Compostos detergentes não-iônicos adequados que podem ser usados incluem, em particular, os produtos de reação de compostos tendo um grupo hidrofóbico alifático e um átomo de hidrogênio reativo, por exemplo, álcoois, ácidos ou amidas alifáticas, especialmente óxido de etileno tanto sozinho ou com óxido de propileno. Compostos detergentes não iônicos preferidos são os produtos de condensação de álcoois lineares ou ramificados primários ou secundários alifáticos C 8 a C 18 com óxido de etileno.

[0045] Mais preferivelmente, o composto detergente não-iônico é o tensoativo não-iônico alquil etoxilado que é um álcool primário C 8 a C 18 com média de etoxilação de 7 a 9 unidades de EO.

[0046] Preferivelmente, os tensoativos usados são saturados.

Polímero de liberação de sujeira

[0047] O polímero de liberação de sujeira está presente em um nível de a partir de 0,1 a 10% em peso. Níveis de inclusão preferidos do polímero de liberação de sujeira são preferivelmente de 0,2 a 9% em peso, mais preferivelmente de 0,25 a 8% em peso, ainda mais preferivelmente de 0,5 a 6% em peso, ainda mais preferivelmente de 1 a 5% em peso.

[0048] O polímero de liberação de sujeira é um polímero de liberação de sujeira com base em poliéster. Mais preferivelmente o polímero de liberação de sujeira de poliéster é um polímero de liberação de sujeira a base de polietileno e/ou polipropileno tereftalato, ainda mais preferivelmente um polímero de liberação de sujeira a base de polipropileno tereftalato.

[0049] Polímeros de liberação de sujeira à base de poliéster adequados são descritos no documento WO 2014/029479 e WO 2016/005338.

Poliamina alcoxilada

[0050] A composição detergente preferivelmente compreende uma poliamina alcoxilada. Especialmente quando a composição detergente está na forma de uma composição de lavagem de roupas, é preferido que uma poliamina alcoxilada seja incluída.

[0051] Níveis preferidos de poliamina alcoxilada estão na faixa de 0,1 a 8% em peso, preferivelmente de 0,2 a 6% em peso, mais preferivelmente 0,5 a 5% em peso. Outro nível preferido é de 1 a 4% em peso.

[0052] A poliamina alcoxilada pode ser linear ou ramificada. Pode ser ramificada na extensão em que é um dendrímero. A alcoxilação pode ser tipicamente etoxilação ou propoxilação, ou mistura de ambos. Onde um átomo de nitrogênio é alcoxilado, um grau médio preferido de alcoxilação é de 10 a 30, preferivelmente de 15 a 25.

[0053] Um material preferido é polietilenoimina alcoxilada, mais preferivelmente polietilenoimina etoxilada, com um grau médio de etoxilação sendo de 10 a 30, preferivelmente de 15 a 25, onde um átomo de nitrogênio é etoxilado.

Enzimas adicionais

[0054] Enzimas adicionais, outras que não a lipase especificada, podem estar presentes na composição detergente. É preferido que enzimas adicionais estejam presentes na composição detergente de lavagem de roupas preferida.

[0055] Caso estejam presentes, então o nível de cada enzima na composição de lavagem de roupas da invenção é de 0,0001% em peso a 0,1% em peso.

[0056] Níveis de enzima presentes na composição preferivelmente se referem ao nível de enzima como proteína pura.

[0057] Enzimas adicionais preferidas incluem aquelas no grupo consistindo de: lipases, proteases, celulases, alfa-amilases, peroxidases/oxidases, pectato liases, e/ou mananases. As ditas enzimas adicionais preferidas incluem uma mistura de duas ou mais destas enzimas.

[0058] Preferivelmente a enzima adicional é selecionada de: lipases,

proteases, celulases e/ou alfa-amilases.

[0059] Lipases adequadas incluem aquelas de origem de bactéria ou fungo. Mutantes quimicamente modificados ou de engenharia de proteínas estão incluídas. Exemplos de lipases úteis incluem lipases de Humicola (sinômino Thermomyces), e.g. H. lanuginosa (T. lanuginosus) como descrito em EP 258068 e EP 305216 ou de H. insolens como descrito em WO 96/13580, uma lipase de Pseudomonas, e.g. de P. alcaligenes ou P. pseudoalcaligenes (EP 218272), P. cepacia (EP 331376), P. stutzeri (GB 1372034), P. fluorescens, cepa de Pseudomonas sp. SD 705 (WO 95/06720 e WO 96/27002), P. wisconsinensis (WO 96/12012), uma lipase de Bacillus, e.g. de B. subtilis (Dartois et al. (1993), Biochemica et Biophysica Acta, 1131, 253-360), B. stearothermophilus (JP 64/744992) ou B. pumilus (WO 91/16422). Outros exemplos são variantes de lipase como aquelas descritas em WO 92/05249, WO 94/01541, EP 407225, EP 260105, WO 95/35381, WO 96/00292, WO 95/30744, WO 94/25578, WO 95/14783, WO 95/22615, WO 97/04079 e WO97/07202, WO 00/60063.

[0060] Enzimas lipase comercialmente disponíveis preferidas incluem ® ® ® ® Lipolase , e Lipolase Ultra , Lipex e Lipoclean (Novozymes A/S).

[0061] O método da invenção pode ser realizado na presença de fosfolipase classificada como EC 3.1.1.4 e/ou EC 3.1.1.32. No contexto da presente invenção, o termo “fosfolipase” deve ser entendido como uma enzima que tem atividade em relação à fosfolipídeos.

[0062] Fosfolipídeos, como lecitina ou fosfatidilcolina, consiste de glicerol esterificado com dois ácidos graxos em uma posição externa (sn-1) e no meio (sn-2) e esterificado com ácido fosfórico na terceira posição; o ácido fosfórico, por sua vez, pode ser esterificado para um amino-álcool. Fosfolipases são enzimas que participam na hidrólise de fosfolipídeos. Vários tipos de atividade de fosfolipase podem ser distinguidos, incluindo fosfolipases A 1 e A2 que hidrolisam um grupo acila graxo (na posição sn-1 e sn-2, respectivamente) para formar lisofosfolipídeo; e lisofosfolipase (ou fosfolipase B) que pode hidrolisar o grupo acila graxo restante em lisofosfolipídeo. Fosfolipase C e fosfolipase D (fosfodiesterases) liberam diacil glicerol e ácido fosfatídico respectivamente.

[0063] Enzimas protease hidrolisam ligações entre peptídeos e proteínas, no contexto de lavagem de roupas, isto leva a remoção melhorada de manchas contendo proteínas ou peptídeos. Exemplos de famílias de proteases adequadas incluem proteases aspárticas; proteases cisteínicas; proteases glutâmicas; peptídeo liases de asparagina; proteases serínicas e proteases treonínicas. Tais famílias de protease são descritas no banco de dados MEROPS peptidase (http://merops.sanger.ac.uk/). Proteases serínicas são preferidas. Protease serínica do tipo subtilase são mais preferidas. O termo “subtilase” se refere a um subgrupo de protease serínica de acordo com Siezen et al., Protein Engng. 4 (1991) 719-737 e Siezen et al. Protein Science 6 (1997) 501-523. Proteases serínicas são um subgrupo de proteases definidos por terem uma serina no sítio ativo, que formam um aduto covalente com o substrato. As subtilases podem ser divididas em 6 subdivisões, i.e., a família Subtilisina, a família Termitase, a família Proteinase K, a família peptidase Lantibióticas, a família Kexina e a família Pirolisina.

[0064] Exemplos de subtilases são aquelas derivadas de Bacillus como Bacillus lentus, B. alkalophilus, B. subtilis, B. amyloliquefaciens, Bacillus pumilus e Bacillus gibsonii descritos em US 7262042 e WO 09/021867, e subtilisina lentus, substilisina Novo, subtilisina Carlsberg, Bacillus licheniformis, subtilisina BPN’, subtilisina 309, subtilisina 147 e subtilisina 168 descritas em WO 89/06279 e protease PD 138 descrita em WO 93/18140. Outras proteases úteis podem ser aquelas descritas em WO 92/175177, WO 01/016285, WO 02/026024 e WO 02/016547. Exemplos de proteases do tipo tripsina são tripsina (e.g. de origem porcina ou bovina) e a protease de Fusarium descrita em WO 89/06270, WO 94/25583 e WO 05/040372 e proteases quimotripsina derivadas de Cellumonas descritas em WO 05/052161 e WO 05/052146.

[0065] Mais preferivelmente a protease é uma subtilisina (EC 3.4.21.62).

[0066] Exemplos de subtilases são aquelas derivadas de Bacillus como

Bacillus lentus, B. alkalophilus, B. subtilis, B. amyloliquefaciens, Bacillus pumilus e Bacillus gibsonii descritos em US 7262042 e WO 09/021867, e subtilisina lentus, substilisina Novo, subtilisina Carlsberg, Bacillus licheniformis, subtilisina BPN’, subtilisina 309, subtilisina 147 e subtilisina 168 descritas em WO 89/06279 e protease PD 138 descrita em WO 93/18140. Preferivelmente, a subtilisina é derivada de Bacillus, preferivelmente Bacillus lentus, B. alkalophilus, B. subtilis, B. amyloliquefaciens, Bacillus pumilus e Bacillus gibsonii conforme descrito em US 6312936 B1, US 5679630, US 4760025, US 7262042 e WO 09/021867. Mais preferivelmente a subtilisina é derivada de Bacillus gibsonii ou Bacillus Lentus.

[0067] Enzimas protease comercialmente disponíveis adequadas incluem aquelas vendidas com os nomes de marca de Alcalase ®, Blaze®, Duralase®, Duranzym®, Relase®, Relase Ultra®, Savinase®, Savinase Ultra®, Primase®, Polarzyme®, Kannase®, Liquanase®, Liquanase Ultra®, Ovozyme®, Coronase®, Coronase® Ultra, Neutrase®, Everlase® e Esperase®, todos podem ser vendidos como Ultra® ou Evity® (Novozymes A/S).

[0068] A composição pode usar cutinase, classificada em EC 3.1.1.74. A cutinase usada de acordo com a invenção pode ser de qualquer origem. Preferivelmente as cutinases são de origem microbiana, em particular de origem bacteriana, de fungo ou de levedura.

[0069] Amilases adequadas (alfa e/ou beta) incluem aquelas de origem bacteriana ou de fungo. Mutantes quimicamente modificados ou de engenharia de proteína estão inclusos. Amilases incluem, por exemplo, alfa-amilases obtidas de Bacillus, e.g. uma cepa especial de B. licheniformis, descrita em maior detalhe em GB 1296839 ou as cepas de Bacillus sp. reveladas em WO 95/026397 ou WO 00/060060. Amilases comercialmente disponíveis são Duramyl®, Termamyl®, Termamyl Ultra®, Natalase®, Stainzyme®, Amplify®, Fungamyl® e BAN® (Novozymes A/S), Rapidase ® e Purastar® (da Genencor International Inc.).

[0070] Celulases adequadas incluem aquelas de origem bacteriana ou fúngica.

Mutantes quimicamente modificados ou de engenharia de proteína estão inclusos. Celulases adequadas incluem celulases do gênero Bacillus, Pseudomonas, Humicola, Fusarium, Thielavia, Acremonium, e.g. celulase fúngica produzida por Humicola insolens, Thielavia terrestris, Myceliophthora thermophila e Fusarium oxysporum reveladas em US 4435307, US 5648263, US 5691178, US 5776757, WO 89/09259, WO 96/029397 e WO 98/012307. Celulases comercialmente disponíveis incluem Celluzyme ®, Carezyme®, Celluclean®, Endolase®, Renozyme® (Novozyme A/S), Clazinase ® e Puradax HA® (Genencor International Inc.), e KAC-500(B)®, (Kao Corporation). Celluclean® é preferida.

[0071] Peroxidases/oxidases adequadas incluem aquelas de origem de planta, bacteriana ou fúngica. Mutantes quimicamente modificados ou de engenharia de proteína estão inclusos. Exemplos de peroxidases úteis incluem peroxidases de Coprinus, e.g. de C. cinereus e variantes da mesma como aquelas descritas em WO 93/24618, WO 95/10602 e WO 98/15257. Peroxidases comercialmente disponíveis incluem Guardzyme ® e Novozym® 51004 (Novozymes A/S).

[0072] Enzimas adicionais adequadas para uso são discutidas em WO 2009/087524, WO 2009/090576, WO 2009/107091, WO 2009/111258 e WO 2009/148983.

[0073] A solução aquosa usada no método preferivelmente tem uma enzima presente. A enzima é preferivelmente presente na solução aquosa usada no método em uma concentração na faixa de 0,01 a 10 ppm, preferivelmente 0,05 a 1 ppm.

Estabilizantes de enzima

[0074] Qualquer enzima presente na composição pode ser estabilizada usando agentes de estabilização convencionais, e.g. um poliol como propileno glicol ou glicerol, um açúcar ou álcool de açúcar, ácido láctico, ácido bórico ou derivado de ácido bórico, e.g. um éster de borato aromático, ou um derivado de ácido fenil borônico como ácido 4-formilfenil borônico, e a composição pode ser formulada como descrito em e.g. WO 92/19709 e WO 92/19708.

Materiais adicionais

[0075] Materiais adicionais opcionais, mas preferidos que podem ser incluídos nas composições detergentes (preferivelmente composições detergentes de lavagem de roupa) incluem agente fluorescente, perfume, corante tonalizante, polímeros e agentes quelantes.

Agente fluorescente

[0076] A composição preferivelmente compreende um agente fluorescente (clareador óptico). Agentes fluorescentes são bem conhecidos e muitos dos ditos agentes fluorescentes são comercialmente disponíveis. Geralmente, estes agentes fluorescentes são fornecidos e usados na forma de seus sais de metal alcalino, por exemplo, sais de sódio.

[0077] A quantidade total de agente ou agentes fluorescentes usados na composição é geralmente de 0,0001 a 0,5% em peso, preferivelmente 0,005 a 2% em peso, mais preferivelmente 0,01 a 0,1% em peso.

[0078] Classes preferidas de agente fluorescente são: compostos di-estiril bifenílicos, Tinopal®, CBS-X, compostos de ácido di-amino estilbeno di- sulfônico, e.g. Tinopal DMS pure Xtra e Blankophor® HRH, e compostos pirazolina, e.g. Blankophor SN.

[0079] Agentes fluorescentes preferidos são agentes fluorescentes com CAS nº 3426-43-5; CAS nº 35632-99-6; CAS nº 24565-13-7; CAS nº 12224-16-7; CAS nº 13863-31-5; CAS nº 4193-55-9; CAS nº 16090-02-1; CAS nº 133-66-4; CAS nº 68444-86-0; CAS nº 27344-41-8.

[0080] Agentes fluorescentes mais preferidos são: 2-(4-estiril-3-sulfofenil)-2H- naftol[1,2-d]triazol de sódio, 4,4’-bis{[(4-anilino-6-(N-methyl-N-2- hidroxietil)amino 1,3,5-triazin-2-il)]amino}estilbeno-2-2’-disulfonato de di-sódio, 4,4’-bis{[(4-anilino-6-morfolino-1,3,5-triazin-2-il)]amino}estilbeno-2,2’-disulfonato de di-sódio e 4,4’-bis(2-sulfoestiril)bifenila de di-sódio.

[0081] A solução aquosa usada no método tem um agente fluorescente presente. O agente fluorescente está presente na solução aquosa usada no método preferivelmente na faixa de 0,0001 g/L a 0,1 g/L, mais preferivelmente 0,001 a 0,02 g/L.

Perfume

[0082] A composição preferivelmente compreende um perfume. Muitos exemplos adequados de perfume são providos no guia internacional de compradores da CTFA (Associação de Cosméticos, Produtos de Higiene Pessoal e Fragrâncias) de 1992, publicado pela Publicações CFTA e 80ª edição anual do Diretório de Compradores de Produtos Químicos da OPD de 1993, publicado pela Schnell Publishing Co.

[0083] Preferivelmente o perfume compreende pelo menos uma nota (composto) de: alfa-isometil ionona; salicilato de benzila; citronelol; cumarina; hexil cinamal; linalol; ácido pentanóico, 2-metil-, etil éster; octanal; acetato de benzila; 1,6-octadien-3-ol, 3,7-dimetil-, 3-acetato; ciclohexanol, 2-(1,1- dimetiletil)-1-acetato; delta-damascona; beta-ionona; acetato de verdila; dodecanal; aldeído hexil cinâmico; ciclopentadecanolida; ácido benzenoacético, 2-feniletil éster; salicilato de amila; beta-cariofileno; undecilenato de etila; antranilato de geranila; alfa-irona; benzoato de beta-fenil etila; alfa-santalol; cedrol; acetato de cedrila; formato de cedrila; salicilato de ciclohexila; gama- dodecalactona; e acetato de beta-feniletil fenila.

[0084] Componentes úteis de perfume incluem materiais de origem tanto natural e sintética. Eles incluem compostos sozinhos e misturas. Exemplos específicos de tais componentes podem ser encontrados na literatura atual, e.g. Guia Fenaroli de Ingredientes de Aromas, 1975, CRC Press; Adjuntos de Comida Sintéticos, 1947 por M.B. Jacobs, editado por Van Nostrand; ou Produtos Químicos de Perfume e Aromas por S. Arctander 1969, Montclair, N.J. (USA).

[0085] É prática comum para uma pluralidade de componentes de perfume estarem presentes em uma formulação. Nas composições da presente invenção é previsto que há quatro ou mais, preferivelmente cinco ou mais, mais preferivelmente seis ou mais ou ainda mais preferivelmente sete ou mais componentes de perfume diferentes.

[0086] Em misturas de perfume preferivelmente 15 a 25% em peso são notas de cabeça. Notas de cabeça são definidas por Poucher (Jornal da Sociedade de Químicos Cosméticos 6(2):80 [1955]). Notas de cabeça preferidas são selecionadas de óleos de citrus, linalol, acetato de linalila, lavanda, dihidromircenol, óxido de rosa e cis-3-hexanol.

[0087] A Associação Internacional de Fragrâncias publicou uma lista de ingredientes de fragrância (perfumes) em 2011 (http://ifraorg.org/en- us/ingredients#.U7Z4hPldWzk).

[0088] O Instituto de Pesquisas de Materiais de Fragrância provê um banco de dados de perfumes (fragrâncias) com informação de segurança.

[0089] Notas de cabeça de perfume podem ser usadas para sugerir benefício de brancura e brilho da invenção.

[0090] Alguns ou todos os perfumes podem ser encapsulados, componentes de perfume típicos onde é vantajoso encapsular, incluem aqueles com ponto de ebulição relativamente baixo, preferivelmente aqueles com ponto de ebulição de menos de 300, preferivelmente 100-250° Celsius. É também vantajoso encapsular componentes de perfume que tem um baixo CLog P (i.e., aqueles que tem uma maior tendência de ser particionados em água), preferivelmente com um CLog P de menos de 3,0. Estes materiais, de ponto de ebulição relativamente baixo e CLog P relativamente baixo tem sido chamados de ingredientes de perfume de “floração prolongada” e incluem um ou mais dos seguintes materiais: caproato de alila, acetato de amila, propionato de amila, aldeído anísico, anisol, benzaldeído, acetato de benzila, benzil acetona, álcool de benzila, formato de benzila, iso valerato de benzila, propionato de benzila, beta gama hexenol, goma de cânfora, laevo-carvona, d-carvona, álcool cinâmico, formato cinamílico, cis-jasmone, acetato de cis-3-hexenila, álcool cumínico, ciclal C, dimetil benzil carbinol, acetato de dimetil benzil carbinol, acetato de etila, etil aceto acetato, etil amil cetona, benzoato de etila, butirato de etila, etil hexil cetona, acetato de etil fenila, eucaliptol, eugenol, acetato de fenquiila, acetato de flor (acetato de triciclodecenil), fruteno (propionato de triciclodecenil), geraniol, hexenol, acetato de hexenila, acetato de hexila, formato de hexila, álcool hidratrópico, hidroxicitronelal, indona, álcool isoamílico, iso mentona, acetato de isopulegila, isoquinolona, ligustral, linalol, óxido de linalol, formato de linalila, mentona, mentil acetofenona, metil amil cetona, antranilato de metila, benzoato de metila, acetato de metil benzila, metil eugenol, metil heptenona, carbonato de metil heptina, metil heptil cetona, metil hexil cetona, acetato de metil fenil carbinila, salicilato de metila, antranilato de metil-n-metila, nerol, octalactona, álcool de octila, p-cresol, p-cresol metil éter, p-metoxi acetofenona, p-metil acetofenona, fenoxi etanol, fenil acetaldeído, acetato de fenil etila, álcool fenil etílico, fenil etil dimetil carbinol, acetato de prenila, bornato de propila, pulegona, óxido de rosa, safrol, 4-terpinelol, alfa- terpinelol e/ou viridina. É prática comum que uma pluralidade de componentes de perfume esteja presente em uma formulação. Nas composições da presente invenção é previsto que há quatro ou mais, preferivelmente cinco ou mais, mais preferivelmente seis ou mais ou ainda mais preferivelmente sete ou mais componentes de perfume diferentes da lista dada acima de perfumes de floração prolongada estejam presentes no perfume.

[0091] Outro grupo de perfumes com os quais a presente invenção pode ser aplicada são os chamados materiais de ‘aromaterapia’. Estes incluem vários componentes também usados na perfumaria, incluindo componentes de óleos essenciais como sálvia esclaréia, eucalipto, gerânio, lavanda, extrato de maçã, neroli, noz-moscada, hortelã, erva doce violeta e valeriana.

[0092] É preferido que a composição de tratamento para lavagem de roupas não contenha um alvejante de peroxigênio, e.g. percarbonato de sódio, perborato de sódio e perácido.

Corante tonalizante

[0093] Preferivelmente quando a composição é uma composição detergente de lavagem de roupas, então ela compreende um corante tonalizante. Preferivelmente, o corante tonalizante está presente de 0,0001 a 0,1% em peso da composição.

[0094] Corantes são descritos em Síntese da Química de Cor, Propriedades e Aplicações de corantes e pigmentos orgânicos (H. Zollinger, Wiley VCH, Zürich, 2003) e, Química de Corantes Industriais, Propriedades e Aplicações (K Hunger (ed), Wiley-VCH Weinheim 2003).

[0095] Corantes tonalizantes para uso em composições de lavagem de roupas preferivelmente tem um coeficiente de extinção na absorção máxima na faixa do visível (400 a 700nm) de mais de 5000 L mol-1cm-1, preferivelmente mais que 10000 L mol-1cm-1. Os corantes são azuis ou violeta em cor.

[0096] Cromóforos de corante tonalizante preferidos são azo, azina, antraquinona e trifenilmetano.

[0097] Corantes azo, antraquinona, ftalocianina e trifenilmetano preferivelmente carregam uma carga líquida aniônica ou são sem carga. Azina preferivelmente carrega uma carga líquida aniônica ou catiônica. Corantes tonalizantes azul ou violeta depositam no tecido durante a etapa de lavagem ou enxágue do processo de lavagem provendo um tom visível ao tecido. Neste contexto, o corante dá uma cor azul ou violeta a um tecido branco com um ângulo de tom de 240 a 345, mais preferivelmente 250 a 320, mais preferivelmente 250 a 280. O tecido branco usado neste teste foi um lençol de algodão entrelaçado não mercerizado alvejado.

[0098] Corantes tonalizantes são descritos em WO 2005/003274, WO 2006/032327 (Unilever), WO 2006/032397 (Unilever), WO 2006/045275 (Unilever), WO 2006/027086 (Unilever), WO 2008/017570 (Unilever), WO 2008/141880 (Unilever), WO 2009/132870 (Unilever), WO 2009/141173 (Unilever), WO 2010/099997 (Unilever), WO 2010/102861 (Unilever), WO

2010/148624 (Unilever), WO 2008/087497 (P&G), WO 2011/011799 (P&G), WO 2012/054820 (P&G), WO 2013/142495 (P&G) e WO 2013/151970 (P&G).

[0099] Corantes mono-azo preferivelmente contém um anel heterocíclico e são, mais preferivelmente, corantes tiofeno. Os corantes mono-azo são preferivelmente alcoxilados e são preferivelmente sem carga ou carregados anionicamente em pH=7. Corantes de tiofenos alcoxilados são descritos em WO 2013/142495 e WO 2008/087497. Exemplos preferidos de corantes tiofeno são mostrados abaixo: e,

[0100] Corantes bis-azo são preferivelmente corantes bis-azo sulfonados. Exemplos preferidos de compostos bis-azo sulfonados são violeta direto 7, violeta direto 9, violeta direto 11, violeta direto 26, violeta direto 31, violeta direto 35, violeta direto 40, violeta direto 41, violeta direto 51, violeta direto 66,

violeta direto 99 e versões alcoxiladas dos mesmos. Corantes bis-azo alcoxilados são descritos em WO 2012/054058 e WO 2010/151906.

[0101] Um exemplo de um corante bis-azo alcoxilado é:

[0102] Corantes tiofeno estão disponíveis pela Milliken sob o nome de marca de Liquitint Violet DD e Liquitint Violet ION.

[0103] Corante azina são preferivelmente selecionados de corantes fenazina sulfonados e corantes fenazina catiônicos. Exemplos preferidos são azul ácido 98, violeta ácido 50, corante com o CAS nº 72749-80-5, azul ácido 59 e corante fenazina selecionado de: em que: X3 é selecionado de: -H; -F; -CH3; -C 2H5; -OCH3; e –OC 2H5; X4 é selecionado de: -H; -CH3; -C2H5; -OCH3; e –OC2H5; Y2 é selecionado de: -OH; -OCH2CH2OH; -CH(OH)CH2OH; -OC(O)CH3; e C(O)OCH3.

[0104] O corante tonalizante está presente na composição na faixa de 0,0001 a 0,5% em peso, preferivelmente 0,001 a 0,1% em peso. Dependendo da natureza do corante tonalizante, há faixas preferidas dependendo da eficácia do corante tonalizante que é dependente da classe e eficácia particular dentro de qualquer classe particular. Conforme mencionado acima, o corante tonalizante é um corante tonalizante azul ou violeta.

[0105] Uma mistura de corantes tonalizantes pode ser usada.

[0106] O corante tonalizante é ainda mais preferivelmente um corante antraquinona azul reativo ligado covalentemente a uma polietilenoimina alcoxilada. A alcoxilação é preferivelmente selecionada de etoxilação e propoxilação, mais preferivelmente propoxilação. Preferivelmente 80 a 95% em mol dos grupos N-H na polietilenoimina são substituídos como grupos álcool isopropílico por propoxilação. Preferivelmente a polietilenoimina antes da reação com o corante e a propoxilação tem um peso molecular de 600 a 1800.

[0107] Um exemplo de estrutura de uma antraquinona reativa preferida covalentemente ligada a uma polietilenoimina propoxilada é: (Estrutura I)

Polímeros

[0108] A composição pode compreender um ou mais polímeros adicionais. Exemplos são carboximetilcelulose, poli(etileno glicol), poli(álcool vinílico), policarboxilatos como poliacrilatos, copolímeros de ácido maleico/acrílico e copolímeros de lauril metacrilato/ácido acrílico.

Agente quelante

[0109] Agentes quelantes podem estar presentes ou ausentes das composições detergentes.

[0110] Se presente, então o agente quelante está presente em um nível de a partir de 0,01 a 5% em peso.

[0111] Exemplos de agentes quelantes de ácido fosfônico (ou sal do mesmo) são: ácido 1-hidroxietilideno-1,1-difosfônico (HEDP); ácido dietilenotriaminopenta(metilenofosfônico) (DTPMP); ácido hexametilenodiaminotetra(metilenofosfônico) (HDTMP); ácido aminotris(metilenofosfônico) (ATMP); ácido etilenodiaminotetra(metilenofosfônico) (EDTMP); ácido tetrametilenodiaminotetra(metilenofosfônico) (TDTMP); e ácido fosfonobutanotricarboxílico (PBTC).

Exemplos

[0112] A invenção será demonstrada pelos seguintes exemplos não limitantes.

Exemplos Clonagem & expressão incluindo informação da sequência

[0113] A sequência de DNA codificando uma proteína com atividade hidrolítica putativa foi identificada na base de dados NCBI e sintetizada com otimização de códon para Escherichia coli. A clonagem foi executada usando o kit de clonagem e expressão aLICator LIC para uma marcação His 6 C-terminal (pLATE31). No processo de clonagem o sítio C-terminal das hélices de ligação transmembranar da proteína foi truncado para aumentar a solubilidade da proteína. E. coli XL2 azul foi usada como cepa de clonagem e transformada usando o método de choque térmico. Após o isolamento do plasmídeo o plasmídeo foi sequenciado e o sucesso da clonagem foi confirmado. E. coli BL21 (DE3) carregando o plasmídeo pkJE7 para co-expressão de chaperonas foi transformada (choque térmico) e usada como uma cepa de expressão para produção de proteína.

[0114] Sequência Aa da proteína heteróloga e truncada é SEQ ID NO1. :

[0115] Proteína de comprimento total É SEQ ID NO2. :

[0116] Esqualeno hopeno ciclase [Methanosarcina thermophila CHTI-55] Fermentação (coleta) & purificação

[0117] Produção de proteína foi executada em frascos Erlenmeyer de 2L com 1L de meio LB e o antibiótico apropriado para seleção de plasmídeo (Ampicilina, 100 µg/mL, cloranfenicol 35 µg/mL). O meio LB foi inoculado com 1-3% (v/v) de pré-cultura e incubado a 37 °C e 180 rpm até alcançar OD 600 = 0,6. A expressão das chaperonas foi induzida por 20 mg/mL de L-arabinose e a cultura foi cultivada por 30 min a 20 °C. A expressão do gene foi induzida pela adição de IPTG para final 1 mM e realizado por 3h em 20 °C e 180 rpm. Células foram coletadas por centrifugação (4750 x g, 20 min, 4 °C) e armazenadas a -80 °C. Lise de célula foi executada por ressuspensão da pasta de célula em tampão de equilíbrio (25 mM Tris-HCl, pH 8,0, 500 mM NaCl, 20 mM imidazol, 10 mL tampão para 1 g de peso líquido de célula) e sonicação em gelo para quebrar as células. A purificação da proteína foi executada usando uma coluna HisTrap FF (GE Healthcare) de 1 mL e um sistema de purificação AKTA (GE Healthcare) por cromatografia por afinidade via marcação de poli histidina. Eluição da proteína foi executada por um gradiente linear por 30 min usando tampão com concentração de imidazol aumentada (25 mM Tris-HCl, pH 8,0, 500 mM NaCl, 500 mM imidazol). Frações de eluição foram identificadas por absorbância (280 nm) e aplicadas a um SDS-PAGE. Frações contendo a proteína de interesse foram agrupadas e dialisadas por uma noite frente a 5 L de tampão sem imidazol (25 mM Tris-HCl, pH 8,0, 500 mM de NaCl). A proteína dialisada foi suplementada com 0,005% (v/v) de azida de sódio e 10% (v/v) de glicerol para congelamento e armazenamento a -80 °C.

Bioanalítica Determinação da concentração de proteína

[0118] A quantidade total de proteína das amostras de enzima foi estimada pelo uso de kit de ensaio BCA da Sigma-Aldrich (ácido bicinconínico). O reagente BCA foi preparado ao misturar solução A [1% (p/v) de ácido bicinconínico na forma de sal de sódio, 2% (p/v) de carbonato de sódio, 0,16% (p/v) de tartarato de sódio, 0,4% (p/v) de hidróxido de sódio, 0,95% (p/v) de hidrogeno carbonato de sódio, pH 11,5] com solução B [4% (p/v) de sulfato de cobre] em razão (v/v) 50:1. Uma diluição em série de albumina de soro bovino (2 mg/mL) foi realizada em água deionizada para criar 7 pontos de uma curva padrão. Para executar o ensaio, o reagente BCA (200 µL) foi adicionado dentro de poços de placa de 96 poços, seguido de diluições de proteína de amostra (20 µL). As placas de microtitulação (MTP) foram seladas e incubadas a 37 °C por 30 min. Após incubação, a absorbância em 540 nm foi medida em um espectrofotômetro.

Determinação da pureza da enzima

[0119] Amostras de proteína contendo enzima (20 µL) foram preparadas com tampão de amostra SDS-PAGE e aquecidas a 70 °C por 10 min antes de correr em géis Bis-Tris NuPage 4-12% com tampão MOPS em 170V. Marcador de peso molecular PageRulerPlus foi corrido junto com as amostras para a determinação da massa molecular. Cada gel foi então corado usando corante de proteína GelCode Blue Safe.

Teste de aplicação Composição de modelo de sebo semelhante ao humano e aplicação ao tecido

[0120] A tabela 1A mostra a composição de sebo semelhante ao humano para ser usado nos estudos de lavagem, e que é comparável ao sebo humano analisado na literatura (tabela 1B). Corante violeta Macrolex (0,4% p/p) foi adicionado ao sebo modelo, e então 100 µL foram aplicados a uma amostra 10x10cm de polialgodão que foi pré-aquecida a 60 °C. Drenagem da mancha foi facilitada ao deixar a mancha para secar por uma noite em 60 °C. Uniformidade do manchamento foi confirmado por determinação colorimétrica dos valores SRI ao longo da amostra que foi subsequentemente cortada em círculos menores de 30 mm de diâmetro, permitindo uma adaptação em placas de microtitulação de 6 poços para testes de lavagem subsequentes.

[0121] Tabela 1: (A) Composição de sebo semelhante ao humano testada. Mostrada em comparação (B) é a composição de sebo humano como proposto por Nikkari 1974, em Ro 2005, Stefaniak 2010. Modelo de sebo semelhante ao humano foi projetado para imitar a descrição da literatura.

Tabela 1(A) (A) Modelo de sebo semelhante ao humano testado Ingrediente Tipo % de inclusão Ácido oleico Ácidos graxos 8 Ácido Isoesteárico (12%) 4 Tricaprina Triglicerídeos 1,8 Trioleina (39,2%) 28,2 Triisoestearina 9,2 Oleato de oleíla Ésteres de cera 11,9 Miristato de miristila (29,8%) 11,9 Isoestearato de 6 isoestearila Esqualeno Esqualeno 13,8 (13,8%) Oleato de colesterol Colesterol 3,4 Colesterol (ésteres) 1,7 (5,1%) Total 99,9

Tabela 1(B) (B) Sebo humano (literatura) Tipo % de inclusão mediana (faixa) Ácidos graxos 28,3 (2,3 – 38,3) Triglicerídeos 32,5 (14,8 - 44) Ésteres de cera 25 (10 - 26) Esqualeno 10,6 (3,3 – 20) Colesterol 6 (1 – 9,5) (ésteres) Estudos de lavagem para o desempenho de lavagem enzimática contra sebo semelhante ao humano

[0122] Leituras pré-lavagem foram tomadas para as manchas de sebo de 30 mm de diâmetro para medir a intensidade da mancha. Os estudos de lavagem foram conduzidos tanto em um volume de 5 mL (dentro de uma placa de 6 poços, a 40 °C por 1 hora em 100 rpm) ou em 100 mL (dentro de frascos de vidro, a 40 °C por 1 hora em 100 rpm). Enzimas estavam presentes em 25 mg/L dentro de 2 g/L de uma formulação de tensoativos 7,5%. As manchas foram então enxaguadas três vezes após a lavagem para remover completamente o líquido de lavagem e qualquer enzima residual. Após a secagem, as placas de mancha foram escaneadas digitalmente e seu deltaE foi medido. Este valor é usado para expressar efeito de limpeza e é definido como a diferença de cor entre uma roupa branca e aquela da roupa manchada após ser lavada.

[0123] Matematicamente, a definição do deltaE é: 𝑑𝑒𝑙𝑡𝑎𝐸 = √[(𝛥𝐿)2 + (𝛥𝑎)2 + (𝛥𝑏)2 ] em que ΔL é medido pela diferença em escuridez entre o tecido lavado e o branco; Δa e Δb são medidos pela diferença em vermelhidão e amarelidão respectivamente entre ambos os tecidos. A partir desta equação, fica claro que quanto menor o valor de deltaE, mais branco o tecido será. Em relação a esta técnica de medição de cor, é feita referência à Comissão Internacional de l’Eclairage (CIE); Recomendação em espaços de cor uniformes, equações de diferença de cor, termos de cor psicométricos, suplemento nº 2 a publicação CIE, nº 15, Colorimetria, Escritório Central da CIE, Paris, 1978.

[0124] Aqui o efeito de limpeza é expresso na forma de índice de remoção de mancha (SRI): SRI = 100 – deltaE

[0125] Quanto maior o SRI, mais limpo está o tecido, SRI = 100 (branco).

Desempenho de limpeza enzimática contra sebo semelhante ao humano

[0126] Estudos de lavagem em um volume de lavagem de 5 mL identificou que as isomerase, neste caso uma enzima esqualeno hopeno ciclase (SHC), mostraram desempenho aprimorado em relação a remoção de sebo semelhante ao humano frente às amostras de controle. O aumento do SRI para a enzima experimental SHC, mostra desempenho aprimorado em relação à remoção de sebo semelhante ao humano frente às amostras de controle que incluem a referência de esterase de lavagem de roupas (Cutinase) e a referência de lipase de lavagem de roupas (Lipex Evity). As 3-6 unidades de aumento de SRI para as enzimas experimentais mostradas é um aprimoramento de limpeza claramente visualizado acima daquele da enzima controle cutinase e da referência de lipase de lavagem de roupas (Lipase Evity). O teste foi realizado em triplicata em 40 °C por 1h. A formulação aplicada contém 7,5% de tensoativo total.

[0127] As >3 unidades de aumento de SRI para a enzima isomerase da invenção é uma melhoria de limpeza claramente visualizada comparado à Cutinase e Lipex Evity (tabela 2).

Tabela 2 Desempenho de Amostra lavagem (SRI) Controle negativo (água) 68,5 ± 1,03 Controle positivo (formulação + Lipex Evity) 70,6 ± 0,6 Controle positivo (formulação + Cutinase) 73,9 ± 0,98 Invenção (formulação + isomerase (SHC) da SEQ 77,2 ± 1,32 ID 1)

[0128] Tabela 2: Desempenho de limpeza da enzima isomerase da SEQ ID 1 (em relação a modelo de sebo semelhante ao humano) mostrado em comparação a controles de lavagens em tanto: água, ou formulação mais referência de esterase comercial (Cutinase) ou formulação mais referência de lipase de lavagem de roupas comercial (Lipex Evity).

[0129] O índice de remoção de manchas (SRI) indicando o desempenho de lavagem foi medido. As estatísticas ± se referem a nível de confiança de 95%. O teste mostra que a isomerase da SEQ ID 1 tem desempenho muito melhor contra sebo do que a enzima esterase comercial (Cutinase) e lipase (Lipex Evity).

Desempenho de limpeza enzimática contra sebo semelhante ao humano

[0130] Estudos de lavagem em um volume de 100 mL confirmam que a isomerase da SEQ ID 1 mostrou desempenho aprimorado em relação a remoção de sebo semelhante ao humano frente às amostras de controle que incluem a enzima esterase comercial atual (Cutinase) e lipase (Lipex Evity) (tabela 3). O teste foi realizado em triplicata em 40 °C por 1h. A formulação aplicada contém 7,5% de tensoativo total

Tabela 3 Desempenho de Amostra lavagem (SRI) Controle negativo (água) 72,6 ± 1,2 Controle positivo (formulação + Lipex Evity) 79,7 ± 1,28 Controle positivo (formulação + Cutinase) 81,4 ± 1,65 Invenção (formulação + isomerase (SHC) da SEQ ID 1) 84,5 ± 0,61

[0131] Tabela 3: Desempenho de limpeza da enzima isomerase da SEQ ID 1 (em relação a modelo de sebo semelhante ao humano) mostrado em comparação a controles de lavagens em tanto: água, ou formulação mais referência de esterase comercial (Cutinase) ou formulação mais referência de lipase de lavagem de roupas comercial (Lipex Evity).

Claims

Reivindicações

1. Composição detergente caracterizada por compreender: (i) de 1 a 60% em peso, preferivelmente de 2 a 50% em peso, mais preferivelmente de 3 a 45% em peso, ainda mais preferivelmente de 5 a 40% em peso, ainda mais preferivelmente de 6 a 40% em peso de um tensoativo; e, (ii) de 0,0005 a 5% em peso, preferivelmente de 0,005 a 2,5% em peso, mais preferivelmente de 0,01 a 1% em peso de uma enzima isomerase, em que a enzima isomerase é uma enzima esqualeno hopeno ciclase.

2. Composição detergente de acordo com a reivindicação 1 caracterizada pela enzima ter pelo menos 60%, preferivelmente pelo menos 70%, mais preferivelmente pelo menos 75%, mais preferivelmente pelo menos 80%, mais preferivelmente pelo menos 85%, ainda mais preferivelmente pelo menos 90%, ainda mais preferivelmente pelo menos 95%, ainda mais preferivelmente pelo menos 97%, pelo menos 98% ou ainda pelo menos 99% de identidade de sequência com qualquer uma das SEQ ID NO: 1 ou 2.

3. Composição detergente de acordo com a reivindicação 1 ou 2 caracterizada pela enzima ter 100% de identidade de sequência com qualquer uma das SEQ ID NO: 1 ou 2.

4. Composição detergente de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3 caracterizada por compreender 0,1 a 10% em peso, preferivelmente de 0,2 a 9% em peso, mais preferivelmente de 0,25 a 8, ainda mais preferivelmente 0,5 a 6% em peso, ainda mais preferivelmente 1 a 5% em peso de polímero de liberação sujeira, mais preferivelmente um polímero de liberação de sujeira com base em poliéster.

5. Composição detergente de acordo com a reivindicação 4 caracterizada pelo polímero de liberação de sujeira de poliéster ser um polímero de liberação de sujeira com base em polietileno e/ou polipropileno tereftalato, preferivelmente um polímero de liberação de sujeira com base em polipropileno tereftalato.

6. Composição detergente de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5 caracterizada pela composição detergente compreender uma poliamina alcoxilada, preferivelmente em um nível de a partir de 0,1 a 8% em peso, mais preferivelmente de 0,2 a 6% em peso, ainda mais preferivelmente de 0,5 a 5% em peso.

7. Composição detergente de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6 caracterizada pela composição detergente ser uma composição detergente de lavagem de roupas, preferivelmente a composição detergente de lavagem de roupas é um líquido ou um pó, ainda mais preferivelmente um detergente líquido.

8. Composição detergente de lavagem de roupas de acordo com a reivindicação 7 caracterizada pelo tensoativo compreender tensoativo aniônico e/ou não iônico, preferivelmente compreendendo ambos tensoativos aniônico e não iônico.

9. Composição detergente de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8 caracterizada por ser preferivelmente uma composição detergente de lavagem de roupas, adicionalmente compreendendo uma enzima adicional selecionada a partir do grupo consistindo de: lipases, proteases, celulases, alfa-amilases, peroxidades/oxidases, pectato liases e/ou mananases.

10.Composição detergente de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9 caracterizada por ser preferivelmente uma composição detergente de lavagem de roupas, adicionalmente compreendendo um ingrediente adicional selecionado a partir de agente fluorescente, perfume, corantes tonalizantes e polímeros, e misturas dos mesmos.

11.Método de tratamento de um substrato de tecido caracterizado por ser com uma mancha de sebo, dito método compreendendo incorporação de uma enzima isomerase, em que a enzima isomerase é uma enzima esqualeno hopeno ciclase; e tratamento subsequente de um substrato de tecido com uma mancha de sebo, com a dita composição.

12.Método de tratamento de acordo com a reivindicação 11 caracterizado pelo dito método compreender incorporação de uma enzima tendo pelo menos 60%, preferivelmente pelo menos 70%, mais preferivelmente pelo menos 75%, mais preferivelmente pelo menos 80%, mais preferivelmente pelo menos 85%, ainda mais preferivelmente pelo menos 90%, ainda mais preferivelmente pelo menos 95%, ainda mais preferivelmente pelo menos 97%, pelo menos 98% ou ainda pelo menos 99%, ainda mais preferivelmente 100% de identidade de sequência com qualquer uma das SEQ ID NO 1 ou 2 em uma composição detergente compreendendo de 1 a 60% em peso de um tensoativo; e tratamento subsequente de um substrato de tecido com uma mancha de sebo, com a dita composição.

13.Uso de uma enzima isomerase, caracterizado pela enzima isomerase ser uma enzima esqualeno hopeno ciclase, para aprimorar a limpeza de manchas de sebo no tecido.

14.Uso, de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pela enzima ter pelo menos 60%, preferivelmente pelo menos 70%, mais preferivelmente pelo menos 75%, mais preferivelmente pelo menos 80%, mais preferivelmente pelo menos 85%, ainda mais preferivelmente pelo menos 90%, ainda mais preferivelmente pelo menos 95%, ainda mais preferivelmente pelo menos 97%, pelo menos 98% ou ainda pelo menos 99%, ainda mais preferivelmente 100% de identidade de sequência com qualquer uma das SEQ ID NO 1 ou 2.