NO149040B - Fremgangsmaate for fremstilling av antibiotika betegnet fortimicin d og ke - Google Patents
Fremgangsmaate for fremstilling av antibiotika betegnet fortimicin d og ke Download PDFInfo
- Publication number
- NO149040B NO149040B NO773674A NO773674A NO149040B NO 149040 B NO149040 B NO 149040B NO 773674 A NO773674 A NO 773674A NO 773674 A NO773674 A NO 773674A NO 149040 B NO149040 B NO 149040B
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- fortimicin
- water
- column
- fractions
- activity
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 30
- BIDUPMYXGFNAEJ-APGVDKLISA-N astromicin Chemical compound O[C@@H]1[C@H](N(C)C(=O)CN)[C@@H](OC)[C@@H](O)[C@H](N)[C@H]1O[C@@H]1[C@H](N)CC[C@@H]([C@H](C)N)O1 BIDUPMYXGFNAEJ-APGVDKLISA-N 0.000 title description 33
- 229930195503 Fortimicin Natural products 0.000 title description 22
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 18
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 title description 13
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 title description 13
- VYLDQCCRMFPJHA-FXJXLBQDSA-N CO[C@H]1[C@@H](O)[C@H](N)[C@@H](O[C@H]2O[C@H](CN)CC[C@H]2N)[C@H](O)[C@@H]1N(C)C(=O)CN Chemical compound CO[C@H]1[C@@H](O)[C@H](N)[C@@H](O[C@H]2O[C@H](CN)CC[C@H]2N)[C@H](O)[C@@H]1N(C)C(=O)CN VYLDQCCRMFPJHA-FXJXLBQDSA-N 0.000 claims description 60
- VYLDQCCRMFPJHA-UHFFFAOYSA-N Fortimicin D Natural products OC1C(N(C)C(=O)CN)C(OC)C(O)C(N)C1OC1C(N)CCC(CN)O1 VYLDQCCRMFPJHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 60
- SPZPNNYPYCPIPT-SDOPNMJFSA-N CN[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2O[C@H](CN)CC[C@H]2N)[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H]1OC Chemical compound CN[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2O[C@H](CN)CC[C@H]2N)[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H]1OC SPZPNNYPYCPIPT-SDOPNMJFSA-N 0.000 claims description 56
- SPZPNNYPYCPIPT-UHFFFAOYSA-N Fortimicin KE Natural products NC1C(O)C(OC)C(NC)C(O)C1OC1C(N)CCC(CN)O1 SPZPNNYPYCPIPT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 56
- 241000187708 Micromonospora Species 0.000 claims description 23
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 16
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 claims description 12
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 12
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 10
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 10
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 9
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 7
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 5
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 5
- 229910001868 water Inorganic materials 0.000 description 37
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 34
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 25
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 24
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 19
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 19
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 18
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 18
- 239000012458 free base Substances 0.000 description 17
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 17
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- WFMQYKIRAVMXSU-UHFFFAOYSA-N Fortimicin AE Natural products NC1C(O)C(OC)C(NC)C(O)C1OC1C(N)CCC(C(C)N)O1 WFMQYKIRAVMXSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- WFMQYKIRAVMXSU-LCVFDZPESA-N Fortimicin B Chemical compound N[C@H]1[C@H](O)[C@H](OC)[C@@H](NC)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](N)CC[C@@H]([C@H](C)N)O1 WFMQYKIRAVMXSU-LCVFDZPESA-N 0.000 description 15
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 13
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 13
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 12
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- BIDUPMYXGFNAEJ-UHFFFAOYSA-N Fortimicin A Natural products OC1C(N(C)C(=O)CN)C(OC)C(O)C(N)C1OC1C(N)CCC(C(C)N)O1 BIDUPMYXGFNAEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- DLVFJQXRKNWSCB-CPLRHSGFSA-N Fortimicin C Natural products CO[C@H]1[C@@H](O)[C@H](N)[C@H](O[C@H]2O[C@@H](CN)CC[C@@H]2N)[C@@H](O)[C@H]1N(C)C(=O)CNC(=O)N DLVFJQXRKNWSCB-CPLRHSGFSA-N 0.000 description 11
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 11
- VKGIGFQBOYWLHV-APGVDKLISA-N n-[(1s,2r,3r,4s,5s,6r)-4-amino-3-[(2r,3r,6s)-3-amino-6-[(1s)-1-aminoethyl]oxan-2-yl]oxy-2,5-dihydroxy-6-methoxycyclohexyl]-2-(carbamoylamino)-n-methylacetamide Chemical compound O[C@@H]1[C@H](N(C)C(=O)CNC(N)=O)[C@@H](OC)[C@@H](O)[C@H](N)[C@H]1O[C@@H]1[C@H](N)CC[C@@H]([C@H](C)N)O1 VKGIGFQBOYWLHV-APGVDKLISA-N 0.000 description 11
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 10
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 10
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N Heavy water Chemical compound [2H]O[2H] XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N 0.000 description 8
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 8
- 239000012499 inoculation medium Substances 0.000 description 8
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 8
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 8
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 8
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical group [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 7
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 7
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 7
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 7
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 description 7
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 7
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 7
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 7
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 6
- 239000003729 cation exchange resin Substances 0.000 description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 6
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 6
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 6
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 6
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 6
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 5
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 5
- URWAJWIAIPFPJE-UHFFFAOYSA-N Rickamicin Natural products O1CC(O)(C)C(NC)C(O)C1OC1C(O)C(OC2C(CC=C(CN)O2)N)C(N)CC1N URWAJWIAIPFPJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229930192786 Sisomicin Natural products 0.000 description 5
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 5
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 5
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 5
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 5
- 238000004816 paper chromatography Methods 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 5
- 235000012239 silicon dioxide Nutrition 0.000 description 5
- 229960005456 sisomicin Drugs 0.000 description 5
- URWAJWIAIPFPJE-YFMIWBNJSA-N sisomycin Chemical compound O1C[C@@](O)(C)[C@H](NC)[C@@H](O)[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@@H](CC=C(CN)O2)N)[C@@H](N)C[C@H]1N URWAJWIAIPFPJE-YFMIWBNJSA-N 0.000 description 5
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 5
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 4
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- AYJRCSIUFZENHW-UHFFFAOYSA-L barium carbonate Chemical compound [Ba+2].[O-]C([O-])=O AYJRCSIUFZENHW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 4
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 4
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 4
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 4
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 4
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 4
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 229920001467 poly(styrenesulfonates) Polymers 0.000 description 4
- 241000186361 Actinobacteria <class> Species 0.000 description 3
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 3
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 3
- 239000003957 anion exchange resin Substances 0.000 description 3
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 3
- RQPZNWPYLFFXCP-UHFFFAOYSA-L barium dihydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Ba+2] RQPZNWPYLFFXCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 229910001863 barium hydroxide Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 3
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 3
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 3
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 3
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 3
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 3
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 3
- NLVFBUXFDBBNBW-PBSUHMDJSA-N tobramycin Chemical compound N[C@@H]1C[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N NLVFBUXFDBBNBW-PBSUHMDJSA-N 0.000 description 3
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DPEYHNFHDIXMNV-UHFFFAOYSA-N (9-amino-3-bicyclo[3.3.1]nonanyl)-(4-benzyl-5-methyl-1,4-diazepan-1-yl)methanone dihydrochloride Chemical compound Cl.Cl.CC1CCN(CCN1Cc1ccccc1)C(=O)C1CC2CCCC(C1)C2N DPEYHNFHDIXMNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N Butyl acetate Natural products CCCCOC(C)=O DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 2
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 2
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- -1 XK-62-6 Chemical compound 0.000 description 2
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 2
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- OHJMTUPIZMNBFR-UHFFFAOYSA-N biuret Chemical compound NC(=O)NC(N)=O OHJMTUPIZMNBFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 2
- 235000011089 carbon dioxide Nutrition 0.000 description 2
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 2
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 2
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 2
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 2
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N hexanoic acid Chemical compound CCCCCC(O)=O FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 229960000318 kanamycin Drugs 0.000 description 2
- SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N kanamycin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N 0.000 description 2
- 229930182823 kanamycin A Natural products 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 2
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 2
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 2
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 2
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 2
- SYJXFKPQNSDJLI-HKEUSBCWSA-N neamine Chemical compound N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](N)C[C@@H]1N SYJXFKPQNSDJLI-HKEUSBCWSA-N 0.000 description 2
- 229950011272 nebramycin Drugs 0.000 description 2
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 2
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 2
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 2
- 239000012286 potassium permanganate Substances 0.000 description 2
- 239000012521 purified sample Substances 0.000 description 2
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 2
- VWDWKYIASSYTQR-UHFFFAOYSA-N sodium nitrate Chemical compound [Na+].[O-][N+]([O-])=O VWDWKYIASSYTQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- PAWQVTBBRAZDMG-UHFFFAOYSA-N 2-(3-bromo-2-fluorophenyl)acetic acid Chemical compound OC(=O)CC1=CC=CC(Br)=C1F PAWQVTBBRAZDMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VOMOHGCJIZYJCE-UHFFFAOYSA-N 2-amino-n-[4-amino-3-[3-amino-6-(aminomethyl)oxan-2-yl]oxy-2,5-dihydroxy-6-methoxycyclohexyl]-n-methylacetamide;sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O.OC1C(N(C)C(=O)CN)C(OC)C(O)C(N)C1OC1C(N)CCC(CN)O1 VOMOHGCJIZYJCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WTLKTXIHIHFSGU-UHFFFAOYSA-N 2-nitrosoguanidine Chemical compound NC(N)=NN=O WTLKTXIHIHFSGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N Ammonium bicarbonate Chemical compound [NH4+].OC([O-])=O ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000013 Ammonium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 108010082495 Dietary Plant Proteins Proteins 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 1
- DNYGXMICFMACRA-XHEDQWPISA-N Gentamicin C2b Chemical compound O1[C@H](CNC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N DNYGXMICFMACRA-XHEDQWPISA-N 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930182825 Kanamycin C Natural products 0.000 description 1
- NAELDCSKUHFKCC-UHFFFAOYSA-N Lividomycin A Natural products NCC1OC(OC2C(O)C(OC3C(O)C(N)CC(N)C3OC4OC(CO)C(O)CC4N)OC2CO)C(N)C(O)C1OC5C(O)C(O)C(O)OC5CO NAELDCSKUHFKCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BRSBFYLXCMGALM-UHFFFAOYSA-N Lividomycin B Natural products NC1C(O)C(O)C(CN)OC1OC1C(O)C(OC2C(C(N)CC(N)C2O)OC2C(CC(O)C(CO)O2)N)OC1CO BRSBFYLXCMGALM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]-N-methylprop-2-en-1-amine Chemical compound CN(CCC1=CNC2=C1C=CC=C2)CC=C GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UOZODPSAJZTQNH-UHFFFAOYSA-N Paromomycin II Natural products NC1C(O)C(O)C(CN)OC1OC1C(O)C(OC2C(C(N)CC(N)C2O)OC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)N)OC1CO UOZODPSAJZTQNH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000364057 Peoria Species 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- HQXKELRFXWJXNP-ABOIPUQESA-N Streptomycin B Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@@H]([C@@H](O[C@H]1CO)O[C@@H]1[C@@]([C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@H]([C@H](O)[C@@H](N=C(N)N)[C@H](O)[C@H]1O)N=C(N)N)(O)C=O)NC)[C@H]1O[C@@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O HQXKELRFXWJXNP-ABOIPUQESA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 239000011149 active material Substances 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 239000012670 alkaline solution Substances 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012538 ammonium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001099 ammonium carbonate Substances 0.000 description 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001166 ammonium sulphate Substances 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 229940072107 ascorbate Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 229960001192 bekanamycin Drugs 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010216 calcium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 235000013877 carbamide Nutrition 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000012136 culture method Methods 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- HNPSIPDUKPIQMN-UHFFFAOYSA-N dioxosilane;oxo(oxoalumanyloxy)alumane Chemical compound O=[Si]=O.O=[Al]O[Al]=O HNPSIPDUKPIQMN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 1
- PGBHMTALBVVCIT-VCIWKGPPSA-N framycetin Chemical compound N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](N)C[C@@H](N)[C@@H]2O)O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O2)N)O[C@@H]1CO PGBHMTALBVVCIT-VCIWKGPPSA-N 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- DNYGXMICFMACRA-UHFFFAOYSA-N gentamicin C1A Natural products O1C(CNC)CCC(N)C1OC1C(O)C(OC2C(C(NC)C(C)(O)CO2)O)C(N)CC1N DNYGXMICFMACRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XUFIWSHGXVLULG-JYDJLPLMSA-N gentamycin C2 Chemical compound O1C[C@@](O)(C)[C@H](NC)[C@@H](O)[C@H]1O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@@H](CC[C@H](O2)[C@@H](C)N)N)[C@@H](N)C[C@H]1N XUFIWSHGXVLULG-JYDJLPLMSA-N 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000004896 high resolution mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N hydrogen iodide Chemical compound I XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 229910010272 inorganic material Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011147 inorganic material Substances 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910001867 inorganic solvent Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003049 inorganic solvent Substances 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 229930027917 kanamycin Natural products 0.000 description 1
- 229930182824 kanamycin B Natural products 0.000 description 1
- SKKLOUVUUNMCJE-FQSMHNGLSA-N kanamycin B Chemical compound N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N SKKLOUVUUNMCJE-FQSMHNGLSA-N 0.000 description 1
- WZDRWYJKESFZMB-FQSMHNGLSA-N kanamycin C Chemical compound O([C@H]1[C@H](N)C[C@@H]([C@H]([C@@H]1O)O[C@@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)N)N)[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](N)[C@H]1O WZDRWYJKESFZMB-FQSMHNGLSA-N 0.000 description 1
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 1
- 229950003076 lividomycin Drugs 0.000 description 1
- DBLVDAUGBTYDFR-SWMBIRFSSA-N lividomycin A Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](N)C[C@@H](N)[C@H](O)[C@H]1O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H]([C@H]1O)O[C@H]1O[C@H]([C@H]([C@H](O)[C@H]1N)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)CN)[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C[C@H]1N DBLVDAUGBTYDFR-SWMBIRFSSA-N 0.000 description 1
- BRSBFYLXCMGALM-CDEWKRIDSA-N lividomycin B Chemical compound N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](N)C[C@@H](N)[C@@H]2O)O[C@@H]2[C@@H](C[C@H](O)[C@@H](CO)O2)N)O[C@@H]1CO BRSBFYLXCMGALM-CDEWKRIDSA-N 0.000 description 1
- IWYDHOAUDWTVEP-UHFFFAOYSA-M mandelate Chemical compound [O-]C(=O)C(O)C1=CC=CC=C1 IWYDHOAUDWTVEP-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- PGBHMTALBVVCIT-VZXHOKRSSA-N neomycin C Chemical compound N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](N)C[C@@H](N)[C@@H]2O)O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O2)N)O[C@@H]1CO PGBHMTALBVVCIT-VZXHOKRSSA-N 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000011368 organic material Substances 0.000 description 1
- 125000001477 organic nitrogen group Chemical group 0.000 description 1
- 229960001914 paromomycin Drugs 0.000 description 1
- UOZODPSAJZTQNH-LSWIJEOBSA-N paromomycin Chemical compound N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](N)C[C@@H](N)[C@@H]2O)O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)N)O[C@@H]1CO UOZODPSAJZTQNH-LSWIJEOBSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 208000019585 progressive encephalomyelitis with rigidity and myoclonus Diseases 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 229960003485 ribostamycin Drugs 0.000 description 1
- NSKGQURZWSPSBC-NLZFXWNVSA-N ribostamycin Chemical compound N[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CN)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](CO)O2)O)[C@H](O)[C@@H](N)C[C@H]1N NSKGQURZWSPSBC-NLZFXWNVSA-N 0.000 description 1
- 229930190553 ribostamycin Natural products 0.000 description 1
- NSKGQURZWSPSBC-UHFFFAOYSA-N ribostamycin A Natural products NC1C(O)C(O)C(CN)OC1OC1C(OC2C(C(O)C(CO)O2)O)C(O)C(N)CC1N NSKGQURZWSPSBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 description 1
- 239000000344 soap Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000010344 sodium nitrate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004317 sodium nitrate Substances 0.000 description 1
- 229960000268 spectinomycin Drugs 0.000 description 1
- UNFWWIHTNXNPBV-WXKVUWSESA-N spectinomycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](NC)[C@@H](O)[C@H]([C@@H]([C@H]1O1)O)NC)[C@]2(O)[C@H]1O[C@H](C)CC2=O UNFWWIHTNXNPBV-WXKVUWSESA-N 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 1
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- IIACRCGMVDHOTQ-UHFFFAOYSA-M sulfamate Chemical compound NS([O-])(=O)=O IIACRCGMVDHOTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 229960000707 tobramycin Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/20—Carbocyclic rings
- C07H15/22—Cyclohexane rings, substituted by nitrogen atoms
- C07H15/222—Cyclohexane rings substituted by at least two nitrogen atoms
- C07H15/224—Cyclohexane rings substituted by at least two nitrogen atoms with only one saccharide radical directly attached to the cyclohexyl radical, e.g. destomycin, fortimicin, neamine
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/863—Mycobacterium
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
Foreliggende oppfinnelse vedrører fremgangsmåte for fremstilling av antibiotisk virksomme forbindelser med den generelle formel:
0
H
hvor R er H (fortimicin KE) eller -CCH2NH2 (fortimicin D), eller farmasøytisk akseptable syreaddisjonssalter derav.
Disse forbindelser med formel I fremstilles ifølge foreliggende oppfinnelse ved at man dyrker en mikroorganisme tilhørende arten Micromonospora olivoasterospora i et næringsmedium, isolerer minst en av nevnte antibiotiske forbindelser fra dyrkningsvæsken og, om ønsket, omdanner den antibiotiske forbindelsen til et syreaddisjonssalt derav, og deretter, om ønsket, oppvarmer oppnådd fortimicin D i en alkalisk vandig oppløsning for omdannelse til fortimicin KE.
Antibiotika som utviser aktivitet overfor et bredt spektrum av bakterier er det alltid behov for. Til dette formål har det vist seg at når visse stammer av Micromonospora dyrkes i et næringsmedium, produseres flere antibiotiske stoffer i dyrkningsvæsken. Spesielt er fortimicin-faktorene A, B og C blitt isolert fra dyrkningsvæsken av Micromonospora olivoasterospora MK-70 (ATCC 21819)(PERM-P nr. 1560), og disse forbindelser har de følgende strukturformler:
Fortimicin A Fortimicin B Fortimicin C
De kjemiske, fysikalske og biologiske egenskaper
til disse antibiotika og fremgangsmåtene til deres fremstilling er forklart i detalj i norsk patent nr. 139•864 (fortimicin B), norsk patent nr. 142.264 (fortimicin A) og norsk patent nr. 142.919 (fortimicin C).
Det har nå vist seg at Micromonospora olioasterospora MK-70, når den dyrkes, frigir to ytterligere aktive, stoffer utover fortimicin A, fortimicin B og fortimicin C. Et studium av disse aktive stoffers kjemiske, fysikalske og biologiske egenskaper viser at stoffene er hittil ukjente antibiotiske forbindelser som nå er blitt navngitt fortimicin D og fortimicin KE.
Ved fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen fremstilles som nevnt de nye antibiotika, fortimicin-faktorene Dog KE, med den generelle formel I ved gjæring av en mikroorganisme tilhørende slekten Micromonospora, som er i stand til å produsere den ene av eller begge disse faktorer, i et næringsmedium inntil det spores vesent-lig antibakteriell aktivitet i dyrkningsvæsken. Etter dyrkningens avslutning isoleres de aktive fraksjoner inneholdende fortimicin D eller fortimicin KE fra dyrkningsvæsken ved kjente metoder, slik som behandling med ioneutvekslerharpiks.
Fortimicin D og KE utviser bred antibakteriell aktivitet og er derfor bl.a. nyttige til å rense og sterilisere labo-ratorieglassutstyr og kirurgiske instrumenter og kan også anvendes i kombinasjon med såper, vaskemidler og vaskeoppløsninger til rengjøringsformål. Videre forventes fortimicin D å kunne anvendes som terapeutisk forbindelse overfor forskjellige infeksjoner (hos mennesker og dyr) fremkalt av forskjellige bakterier.
Fremgangsmåten omfatter også fremstilling av de farmasøytisk akseptable ikke-toksiske syreaddisjonssalter av fortimicin D og fortimicin KE, inkludert mineralsyreaddisjonssaltene, slik som hydrokloridet, hydrobromidet, hydrojodidet, sulfatet, sulfamatet og fosfatet, og de organiske syreaddisjonssalter slik som maleatet, acetatet, citratet, oxalatet, succinatet, benzoatet, tartratet, fumaratet, maleatet, mandelatet og ascorbatet.
De fysikalsk-kjemiske egenskaper til den frie base av fortimicin D er følgende:
(1) Et basisk hvitt pulver
(2) Elementanalyse:
(3) Smeltepunkt: 109-H4°C
(4) Ultrafiolett absorpsjonsspektrum:
Det ultrafiolette absorpsjonsspektrum av en vandig oppløsning av stoffet viser ikke noe karakteristisk maksimum mellom 220 nm
og 360 nm, men viser kun terminal absorpsjon.
(5) Spesifikk dreining: fafl^5 = +121° (C = 0,5, H20)
(6) Infrarødt absorpsjonsspektrum:
Det infrarøde absorpsjonsspektrum måles i KBr-tablett. Den frie base av fortimicin D viser maksima ved følgende bølge-tall (cm<-1>): 3400, 2900, 1625, 1570, 1470, 1350, 1315, 1020.
(7) Fargereaksjoner:
Ninhydrin-reaksjon: positiv
Kaliumpermanganat-reaksj on: positiv
Elson-Morgan's reaksjon: negativ
Biuret-reaksjon: negativ
(8) PMR-spektra av fortimicin D måles i en deuteriumoksyd-oppløs-ning (pD - 10,1) ved anvendelse av JEOL JNM-PS-100. Resultatene er som følger: éi,10-1,90 (4H, m), 2,50-3,06 (4H, m), 3,07 (3H, s), 3,^5 (3H, s), 3,53 (2H, s), 3,70-4,25 (4H, m), 4,36 (1H, t, J = 3,0), 4,88 (1H, d, J= 4,0), 4,92 (1H, d,d, J = 3,0, 9,0). (9) CMR-spektrum av fortimicin D måles i en deuteriumoksyd-oppløsning (pD = 11,1) ved anvendelse av JEOL-PFT-100A. Resultatene er som følger: 6 176,5, 100,1, 78, 5, 73,6, 73,0, 71, 3, 71,1, 56,4, 55,5, 52,5, 50,2, 45,7, 43,4, 32,2, 32,2, 28,3, 26,3. (10) Massespektra av stoffet avslører den følgende M + 1 ion og fragmentioner. Formlene i parenteser betyr sammensetnings-formlene oppnådd ved høyoppløsningsmassespektrometri.
Ut fra resultatet av massespektrometrien bestemmes stoffets molekylvekt til å være 391, og molekylformelen bestemmes til å være C^gH^N^Og. Elementanalysen for stoffet (hydratisert
med 2,5 mol H^O) beregnet ut fra molekylformelen er C = 44,01 %, H = 8,79 % og N = 16,0 4 %. (11) Basert på de ovenfor angitte fysikalsk-kjemiske data antas strukturformelen for fortimicin D å være som følger: (12) Den frie base av fortimicin D er lett oppløselig i vann, oppløselig i metanol og tungt oppløselig i etanol og aceton, men er uoppløselig i organiske oppløsningsmidler slik som kloroform, benzen, etylacetat, butylacetat, dietyleter, butanol, petroleumeter og n-hexan.
De fysikalsk-kjemiske egenskaper til den frie base av fortimicin KE er som følger:
(1) Et basisk hvitt pulver
(2) Elementanalyse funnet: C = 48,18 %, H = 9,29 %, N = 15,84 %
(3) Smeltepunkt: 72-77°C
(4) Ultrafiolett absorpsjonsspektrum:
Det ultrafiolette absorpsjonsspektrum av en vandig oppløsning av stoffet viser ikke noe karakteristisk maksimum mellom 220 nm og 360 nm, men viser kun terminal absorpsjon.
(5) Spesifikk dreining: [o^<5> = + 28,5° (C = 0,5, H20)
(6) Infrarødt absorpsjonsspektrum:
Det infrarøde absorpsjonsspektrum måles i KBr-tablett. Den frie base av fortimicin KE viser maksima ved de følgende bølgetall (cm<-1>): 3350, 2920, 1580, 1470, 1370, 1330, 1090, 1035
(7) Pargereaksjoner:
Ninhydrin-rekasjon: positiv
Kaliumpermanganat-reaksjon: positiv
Elson-Morgan's reaksjon: negativ
Biuret-reaksjon: negativ
(8) PMR-spektra for fortimicin KE måles i deuteriumoksyd-oppløs-ning (pD = 11,1) ved anvendelse av JEOL JNM-PS-100.
Resultatene er som følger:
6 1,10-1,90 (4H, m), 2,40 (3H, s), 2,66 (2H, d, J= 6,0),
2,69-3,20 (3H, m), 3,48 (3H, s), 3,49 (1H, t, J - 9,5), 3,59-^,10 (3H, m), 3,92 (1H, d, d, J = 4,5, 9,5), 5,04 (1E,
d, J = 4,0).
(9) CMR-spektra for fortimicin KE måles i en deuteriumoksyd-oppløsning (pD = 11,0) ved anvendelse av JEOL PFT-100A.
Resultatene er som følger:
6 102, 3, 83,7, 79,9, 71, 3, 71, 3, 60,9, 59, 3, 53,8, 50,4, 45,8, 35,4, 28,3, 27,0. (10) Stoffets massespektrum avslører følgende M + 1 ion og fragmentioner. Formlene i parenteser betyr sammensetnings formlene oppnådd ved høyoppløsningsspektrometri.
m/e 335 M <+> 1 (C^H^N^O )
317 (Cl4H27N305) 235 (C9Hi<gN>2<0>5)
207 (CgH19N204) 189 (CgH17<N>203)
129 (C6H13<N>2<0>)
Ut fra resultatet av massespektrometrien bestemmes stoffets molekylvekt til å være 334, og molekylformelen bestemmes til å være C-^H-^N^Oj-. Stoffets elementanalyse (hydratisert med 1 mol H20) beregnet fra molekylformelen er C = 47,71 %,
H = 9,15 % og N = 15,89 %. (11) Basert på de ovenstående fysiskalsk-kjemiske data antas strukturformelen av fortimicin KE å være som følger: (12) Den frie base av fortimicin KE er lett oppløselig i vann, oppløselig i metanol og tungt oppløselig i etanol og aceton, men er uoppløselig i uorganiske oppløsningsmidler slik som kloroform, benzen, etylacetat, butylacetat, dietyleter, butanol, petroleumeter og n-hexan.
RF-verdiene for fortimicin D og fortimicin KE ved papirkromatografi og tynnsjiktskromatografi under anvendelse av forskjellige utviklingsmidler er vist i følgende tabeller 1-3. Til sammenligning er også anført RF-verdiene for antibiotika som ligner fortimicin D og KE.
Gram-positive og Gram-negative bakterier. Spesielt er det karakteristisk at antibiotikumet er effektivt overfor visse stammer av lischerichia coli, som er resistente overfor kanamycin, gentamicin og tobramycin. Videre forventes fortimicin D å ha en terapeutisk virkning på forskjellige infeksjoner (hos mennesker og dyr) fremkalt av de ovennevnte forskjellige bakterier. I dette henseende er LD^q av fortimicin D sulfat for dd-mus, som veide 20 + 1 g, bestemt til å være 159 mg/kg. Ved slike antibakterielle egenskaper er fortimicin D anvendelig til medisinske formål. Som det også fremgår av det ovenstående, utviser fortimicin KE et bredt anti-bakterielt spektrum. Videre utmerker fortimicin KE seg ved å være stabilt i alkalisk oppløsning.
En sammenligning av fortimicin-faktorene D og KE med kjente antibiotika belyses ytterligere deres nyhet. Som vannopp-løselige basiske antibiotika, produsert av mikroorganismer til-hørende slekten Micromonospora og med brede antibakterielle spektre, kjennes gentamicin-komplekset (M.J. Weinstein et al.: Antimicrobial Agenst and Chemotherapy, 1963, lj D.J. Cooper et al.: J. Infect. Dis. 119, 3^2, 1969; og J.A. Waitz et al.: Antimicrobial Agenst
and Chemotherapy 2, 464 1972), antibiotikum nr. 460 (japansk ut-legningsskrift nr. 46-16153), sisomicin (M.J. Weinstein et al.: J. Antibiotics, 23, 551, 555, 559, 1970), XK-62-2 (US patent nr. 4.045.298), fortimicin B, fortimicin A og fortimicin C. Som vist i den ovenfor angitte tabell 3, utviser gentamtain A, B, C^ og C^ komponenter Rf-verdier på henholdsvis 0,00, 0,00, 0,38 og 0,59 ved papirkromatografi. På den annen side er Rf-verdien ved samme papirkromatografi av fortimicin D 0,18 og av fortimicin KE 0,59. Således er fortimicin D klart forskjellige fra gentamicin-kompo-nentene og fortimicin KE er forskjellige fra alle unntagen gentamicin C^. Ved papirkromatografien i tabell 3 viser fortimicin D samme Rf-verdi (0,18) som gentamicin Ci, .a (0,18), og derfor kan fortimicin D og gentamicin C-, La ikke skjelnes fra hverandre i dette henseende. Ved silisiumdioksydgel-tynnsjiktskromatografien i tabell 2 under anvendelse av utviklingsmidlet II adskiller fortimicin D (Rf-verdi: 0,37) seg imidlertid klart fra gentamicin Cj-_a (Rf-verdi: 0,16). På samme måte viser gentamicin C-^, C2 og i tabell 2 Rf-verdier på 0,0.6 - 0,16, mens fortinricin-KE viser en Rf-verdi på 0,58. Ved sammenligning av fortimicin-faktorene D og
KE med antibiotikum nr. 460, sisomicin, XK-62-6, fortimicin B, fortimicin A og fortimicin C i tabell 3, utviser antibiotikum nr. 460, sisomicin XK-62-2, fortimicin D, fortimicin A og fortimicin C Rf-verdier på henholdsvis 0,01, 0,18, 0,49, 0,65, 0,37
og 0,18. Rf-verdien for fortimicin D er 0,18 og for fortimicin KE 0,59. Fortimicin KE er således klart forskjellig. Selv om Rf-verdien for fortimicin D er den samme (i tabell 3) som for sisomicin og fortimicin C, adskiller fortimicin C (Rf-verdi: 0,40) og sisomicin (Rf-verdi: 0,18) seg klart fra fortimicin D (Rf-verdi: 0,37) ved silisiumdioksydgel-tynnsjiktskromatografien i tabell 2.
Dessuten kan som vann opp løs elige basiske antibiotika., produsert av andre Actinomyceter enn den tilhørende slekten Micromonospora og med brede antibakterielle spektre, nevnes streptomycin A og B, ribostamycin, lividomycin A, B og D, spectinomycin, kasu-gamicin, neomycin A, B og C, kanamycin A, B og C, nebramycin-kompleks, nebramycin-faktorer 4 og 5 og paromomycin. Fortimicin-faktorene D og KE har vist seg å være sterkt forskjellige fra hvert av disse antibiotika med hensyn til fysikalsk-kjemiske egenskaper. Videre er fortimicin-faktorene D og KE, som det fremgår av tabell 3, helt forskjellige fra disse antibiotika med hensyn til Rf-verdiene ved papirkromatografien.
Fra det ovenstående antas fortimicin-faktorene D og KE å være hittil ukjente antibiotika.
Fortimicin-faktorene D og KE produseres ved gjæring av en mikroorganisme tilhørende slekten Micromonospora. Enhver stamme som tilhører slekten Micromonospora og er i stand til å danne fortimicin D og/eller fortimicin KE i dyrkningsvæsken, kan anvendes. Eksempler på foretrukne stammer er Micromonospora olivoasterospora MK-70 (FERM-P nr. 1560) (ATCC 2l8l9), Micromonospora olivoasterospora MK-80 (FERM-P nr. 2192) (ATCC 31010) og Micromonospora olivoasterospora Mm 744 (FERM-P nr. 2193) (ATCC 31009). Disse stammer er blitt deponert i the American Type Culture Collection, Rockville, Maryland, USA og i the Fermentation Research Institute Agency of Industrial Science and Technology, Tokyo, Japan og er blitt tildelt de ovenfor angitte aksesjonsnummere.
Disse stammers mikrobiologiske egenskaper er beskrevet' i norsk patent nr. 13Q.S04, Som tilfellet er med andre stammer av
Actinomyceter kan de mikroorganismer som er anvendelige ved ut-førelsen av fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen, muteres ved kun-stige midler, slik som ultrafiolett bestråling, røntgenbestråling og anvendelse av forskjellige mutasjonsinduserende kjemikalier på kjent måte til forhøyelse'av produksjonen av metaboliske produkter, og et eksempel på en slik mutant stamme er Micromonospora olivoasterospora CS-26 (FERM-P nr. 3567, NRRL 8178). Denne sist-nevnte mutantstamme er deponert i the United States Department of Agriculture, Peoria, Illinois og er fritt tilgjengelig for offent-ligheten .
Generelt kan konvensjonelle metoder for dyrkning av Actinomyceter anvendes ved foreliggende fremgangsmåte. Således
kan man benytte forskjellige næringskilder i dyrkningsmediet. Passende karbonkilder er f.eks. glucose, stivelse, mannose, fruk-tose, saccharose og melasse enten alene eller i kombinasjon. Hydrokarboner, alkoholer, organiske syrer osv. kan også anvendes, avhengig av den benyttede mikroorganismes evne til å assimilere disse. Som uorganiske og organiske nitrogenkilder kan f.eks. anvendes ammoniumklorid, ammoniumsulfat, urea, ammoniumnitrat og natriumnitrat, enten alene eller i kombinasjon, eller naturlige nitrogenkilder slik som pepton, kjøttekstrakt, gjærekstrakt, tørr-gjær, maisstøpevann, soyabønnepulver, kasaminosyre og oppløselig vegetabilsk protein. Om nødvendig kan det tilsettes uorganiske salter slik som natriumklorid, kaliumklorid, kalsiumkarbonat og fosfater til mediet. Videre kan det tilsettes organiske og uorganiske materialer som fremmer veksten av den bestemte stamme og produksjonen av fortimicin-fakt orer D og/eller KE.
En væskedyrkningsmetode, spesielt en submers omrørt dyrkningsmetode, er mest egnet. Dyrkningstemperaturen er mest ønskelig 25-40°C, og det foretrekkes å utføre dyrkningen ved omkring nøytral pH-verdi. Vanligvis er det etter 2-15 dagers væskedyrkning dannet fortimicin D og fortimicin KE i dyrkningsvæsken. Når utbyttet av de antibiotiske stoffer i dyrkningsvæsken når et maksimum, stanses dyrkningen og det ønskede produkt isoleres og renses fra dyrkningsvæsken etter at mikroorganismecellene er blitt fjernet, f.eks. ved filtrering.
Isolering og rensing av fortimicin D og fortimicin KE utføres ved metoder som vanligvis anvendes til isolering og rensing av mikrobielle metaboliske produkter fra en dyrkningsvæske.
Ettersom de antibiotiske forbindelser fortimicin D
og fortimicin KE er basiske stoffer og er lett oppløselige i vann, men tungt oppløselige i de alminnelige organiske oppløsningsmidler, kan forbindelsene renses ved de metoder som vanligvis anvendes for rensing av såkalte vannoppløselige basiske antibiotika. Nærmere bestemt kan D- og KE-faktorene renses ved passende kombinasjon av adsorpsjon og desorpsjon fra kationutvekslerharpiks, cellulose-søylekromatografi, adsorpsjon og desorpsjon under anvendelse av en søyle av "Sephadex LH-20", silisiumdioksydgel-søylekromatografi osv. Som eksempel er en egnet metode for rensing av fortimicin D fra dyrkningsvæsken, når det anvendes en stamme som er i stand til å produsere fortimicin-komplekset (en blanding inneholdende fortimicin A, B, C, D og KE og biprodukter med anti-mikrobiell aktivitet), som følger: Det cellefrie kulturfiltrat innstilles til pH 7,5 og føres deretter igjennom en kationutvekslerharpiks, slik som "Amberlite IRC-50" (ammoniumform). Etter at harpiksen er vasket med vann, gjennomføres eluering med 0,5N ammoniakkvann. De aktive fraksjoner kombineres og konsentreres under forminsket trykk. Konsentratet behandles deretter med en anionutvekslerharpiks "Dowex 1 x 2" (OH-form). De aktive fraksjoner som oppnås ved elueringen, kombineres og konsentreres under forminsket trykk for oppnåelse av et rått pulver av fortimicin-kompleks. Det rå pulver oppløses i vann og oppløsningen innstilles deretter til en pH-verdi på 5j0 med 2N svovelsyre og føres deretter igjennom en kolonne pakket med aktivkull for å adsorbere de aktive komponenter. Søylen av aktivkull vaskes deretter med vann for å fjerne urenheter. Deretter gjennomføres eluering med 0,2N svovelsyre for å eluere de aktive komponenter. De aktive fraksjoner kombineres og etter nøytralisering med en anionutvekslerharpiks, slik som "Dowex 44" (OH-form), frysetørkes blandingen for oppnåelse av fri base av fortimicin-komplekset.
I tilfelle av at fortimicin-komplekset inneholder fortimicin D underkastes det ovenfor oppnådde rå pulver av fortimicin-kompleks silisiumdioksydgel-søylekromatografi under anvendelse av et blandet oppløsningsmiddel av isopropanol, kloroform og konsentrert ammoniakkvann (volumforhold 4:2:1) som utviklingsmiddel. Det rå pulver suspenderes i opp løsningsmidlet og innføres i kolonnen. Utviklingen gjennomføres med det samme oppløsningsmiddel ved en strømningshastighet på omkring 30 ml/time. Først elueres fortimicin B og etter at flere sporkomponenter er eluert, elueres fortimicin A i store aktive fraksjoner. Deretter fortsettes elueringen og etter at fortimicin C er eluert, elueres fortimicin D
i de neste store aktive fraksjoner. De aktive fraksjoner inneholdende fortimicin D oppsamles og konsentreres under forminsket trykk. Konsentratet frysetørkes til oppnåelse av et hvitt stoff bestående av fri base av fortimicin B. På denne måte kan en betydelig renset prøve av fortimicin D oppnås ved silisiumdioksydgel-søylekromatografi. Imidlertid er det enkelte ganger noen urenheter til stede i prøven. I dette tilfelle underkastes prøven ytterligere cellulose-søylekromatografi. Som utviklingsmiddel anvendes et blandet oppløsningsmiddel av n-butanol, pyridin, eddiksyre og vann (volumforhold 6:4:2:4). De ved elueringen oppnådde aktive fraksjoner kombineres og konsentreres under forminsket trykk for oppnåelse av et renset preparat av fortimicin D. For fjerning av urenheter som utviser positiv reaksjon med ninhydrin, er søylekromatografi under anvendelse av karboksymetylcellulose også effektiv. Nærmere bestemt føres i dette tilfelle en oppløs-ning av det rå pulver igjennom en kolonne pakket med karboksymetylcellulose (ammoniumform). De aktive komponenter adsorberes på karboksymetylcellulose. Deretter vaskes søylen grundig med vann for eluering av de fleste pigmenter og uorganiske salter. Deretter elueres de aktive komponenter med 0,2N ammoniumhydrogen-karbonatoppløsning. Fraksjoner inneholdende fortimicin D kombineres og frysetørkes for oppnåelse av renset fortimicin D.
Under de ovenfor beskrevne rensningsmetoder kontrol-leres fraksjonene ved silisiumdioksydgel-tynnsjiktskromatografi. Som utviklingsmiddel anvendes et blandet oppløsningsmiddel av isopropanol, kloroform og konsentrert ammoniakkvann (volumforhold 2:1:1) og utviklingen gjennomføres ved romtemperatur i to timer. Fortimicin D viser en Rf-verdi på omkring 0,43 på silisiumdioksydgel-tynnsjiktskromatogrammet.
I tilfelle av at fortimicin-komplekset inneholder fortimicin KE og fortimicin D, oppløses det ved frysetørkingen oppnådde rå pulver i vann. Etter å være innstilt til pH. 7,5 med, 2N svovelsyre, føres oppløsningen gjennom en kolonne pakket med en kationutvekslerharpiks, "Amberlite CG-50" type I (ammonium-form). Por adsorpsjon av fortimicin-komplekset på denne. Søylen vaskes deretter med vann. Deretter gjennomføres elueringen med 0,2N ammoniakkvann. Etter at flere sporkomponenter er eluert, elueres en blanding av fortimicin B og fortimicin KE i store aktive fraksjoner. Deretter fortsettes elueringen og etter eluering av flere sporkomponenter elueres fortimicin A og fortimi-
cin D. Aktive fraksjoner inneholdende fortimicin KE og fortimicin B kombineres og tørkes for oppnåelse av et pulver av baser av fortimicin KE og fortimicin B. Deretter underkastes pulveret silisiumdioksydgel-søylekromatografi under anvendelse av et blandet opp-løsningsmiddel av isopropanol, kloroform og konsentrert ammoniakkvann (volumforhold 4:2:1) som utviklingsmiddel. Det ovennevnte pulver suspenderes i det blandede oppløsningsmiddel, og suspen-sjonen innføres i en kolonne pakket med silisiumdioksydgel. Utviklingen gjennomføres med det samme oppløsningsmiddel ved en strømningshastighet på omkring 30 ml/time. De først eluerte aktive fraksjoner er fortimicin B. Deretter elueres fortimicin KE. Fraksjonene inneholdende fortimicin KE kombineres og konsentreres under forminsket trykk. Konsentratet oppløses i en liten mengde vann og frysetørkes for oppnåelse av den frie base av fortimicin KE. På denne måte kan en betydelig renset prøve av fortimicin KE oppnås ved silisiumdioksydgel-søylekromatografi. Imidlertid er det enkelte ganger noen urenheter til stede i prøven. Om ønsket kan det for oppnåelse av fortimicin D fra de aktive fraksjoner inneholdende fortimicin D og fortimicin A, anvendes den ovennevnte lignende metode under anvendelse av silisiumdioksydge1-kromatografi.
Under de ovenfor beskrevne rensningsmetoder kontrol-leres fraksjonene ved silisiumdioksydgel-tynnsjiktskromatografi. Som utviklingsmiddel anvendes et blandet oppløsningsmiddel av isopropanol, kloroform og konsentrert ammoniakkvann (volumforhold 2:1:1) og utviklingen gjennomføres ved romtemperatur i to timer. Fortimicin KE viser en Rf-verdi på omkring 0,58 på silisiumdioksyd-ge 1-kromatogrammet.
Fortimicin KE kan også oppnås ved oppvarming av fortimicin D i en alkalisk vandig oppløsning, slik som natriumhydroksyd og bariumhydroksyd. Spesielt oppvarmes fortimicin D i en mettet vandig oppløsning av bariumhydroksyd ved en temperatur på 100°C
i tre timer. Deretter nøytraliseres reaksjonsoppløsningen med
tørr is og det resulterende bunnfall av bariumkarbonat fjernes ved filtrering. Filtratet konsentreres og føres igjennom en kolonne pakket med "Amberlite CG-50" (ammonium-form). Etter vasking av søylen med vann gjennomføres eluering med 0,2N ammoniakkvann. Først elueres en liten mengde reaksjonsbiprodukter og deretter elueres fortimicin KE. Fraksjonene inneholdende fortimicin KE kombineres og konsentreres under forminsket trykk. Konsentratet frysetørkes deretter for oppnåelse av den frie base
av fortimicin KE.
Fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen belyses nærmere
ved følgende representative eksempler på bestemte utførelsesformer av fremgangsmåten.
EKSEMPEL 1
A. Dyrking av CS-26 stammen.
Som podestamme anvendes micromonospora olivoasterospora CS-26 (NR-R1 8178) (FERM-P nr. 3567). Podestammen er en mutantstamme avledet fra micromonospora olivoasterospora MK-70 (ATCC 21819) (FERM-P nr. 1560) ved hjelp av behandling med nitro-soguanidin, ultrafiolett bestråling og Y_bestråling. Et medium inneholdende 2 g/dl glucose, 0,5 g/dl pepton, 0,5 g/dl gjærekstrakt og 0,1 g/dl kalsiumkarbonat (pH 755 før sterilisering), anvendes som et første podemedium. Et øye av podestammen innpodes i 10 ml porsjoner av det første podemedium i 50 ml store reagens-glass og dyrkes ved 30°C i fem dager. Deretter innpodes 10 ml av den således fremstilte første podekultur i 30 ml porsjoner av et annet podemedium i 250 ml Erlenmeyerkolber. Det andre podemedium har samme sammensetning som det første podemedium. Den andre podedyrkning utføres ved rysting ved 30°C i to dager, og deretter ble 30 ml av den andre podekultur innpodet i 300 ml porsjoner av det tredje podemedium i 2 1 Erlenmeyerkolber forsynt med skovler. Det tredje podemedium er av samme sammensetning som det første podemedium. Den tredje podedyrkning gjennomføres ved rysting ved 30°C i to dager. Deretter ble 1,5 1 av den tredje p'odekultur (tilsvarende 5 kolber) innpodet i 15 1 av et fjerde podemedium i en 30 1 krukkefermentor av rustfritt stål. Det fjerde podemedium har samme sammensetning som det første podemedium. Den fjerde podedyrkning i krukkefermentoren gjennomføres med lufting og om-røring (15 l/min.; 350 omdr./min.l ved 37°C i to dager. Deretter ble 15 1 av det fjerde podemedium i 150 1 av et gjæringsmedium innpodet i en 300 1 fermentor. Gjæringsmediet har følgende sammensetning : Oppløselig stivelse 4 g/dl K^PO^ 0,05 g/dl CaCO^ 0..1 g/dl Soyabønnemel 2 g/dl MgSO^H^ 0,05 g/dl
Maisstøpevann 1 g/dl KC1 0,03 g/dl
(pH 7,5 før sterilisering)
Gjæringen i fermentoren gjennomføres med lufting og omrøring (80 l/min.\ 150 omdr./min.) ved 2 7°C i fire dager.
B. Isolering av rått fortimicin-kompleks.
Etter fullføring av gjæringen innstilles dyrkningsvæsken til pH 2,5 med konsentrert svovelsyre og omrøres i 30 minutter. Deretter tilsettes omkring 7 kg av et filterhjelpe-middel, "Radiolite Np. 600" til dyrkningsmediet, og mikroorganisme-celler fjernes ved filtrering. Filtratet innstilles til pH 7,5
ved tilsetning av 6N natriumhydroksydoppløsning og sendes deretter igjennom en kolonne pakket med omkring 20 1 av en kationutvekslerharpiks, "Amberlite IRC-50" (ammonium-form). De aktive komponenter adsorberes på harpiksen, og gjennomløpet passeres. Etter at harpiksen er vasket med vann, gjennomføres eluering av de aktive komponenter med 0,5N ammoni akk vann. Eluatet underkastes, bestemmelse av aktivitet ved en papirskivemetode under anvendelse av en agar-plate av Bacillus subtinis nr. 10707. Fraksjoner som viser er. aktivitet, kombineres og konsentreres under forminsket trykk til omkring 1 liter. Konsentratet føres deretter igjennom en søyle - pakket med 500 ml av en anionutvekslerharpiks, "Dowex 1x2"
(OH-form) og deretter føres omkring 2 1 vann gjennom søylen. På denne måte fjernes urenheter og de aktive komponenter elueres med vann. De aktive fraksjoner kombineres og konsentreres under forminsket trykk til omkring 100 ml. Konsentratet føres igjennom en kolonne pakket med omkring 50 ml aktivkullpulver, hvorved de aktive komponenter adsorberes. Søylen vaskes med vann og gjennomløpet og vaskevannet kasteres. Det gjennomføres eluering med 0,2N svovelsyre. Eluatet underkastes bestemmelse av aktivitet ved en papirskivemetode under anvendelse av Bacillus subtilis nr. 10707. De aktive fraksjoner kombineres og føres igjennom en søyle av en
harpiks, "Dowex 44" (OH-form) og eluering av aktivt materiale gjennomføres med vann. De aktive fraksjoner kombineres og konsentreres til omkring 50 ml. Konsentratet frysetørkes for oppnåelse av et rått pulver av fortimicin-kompleks. Utbyttet av det rå pulver er omkring 35 gs og aktiviteten er 580 enh./mg (aktiviteten av 1 mg av det rene preparat tilsvarer 1000 enheter).
C. Isolering og rensing av fortimicin D.
Omkring 500 ml silisiumdioksydgel suspenderes i et oppløsningsmiddel bestående av isopropanol, kloroform og konsentrert ammoniakkvann (volumforhold 4:2:1) og pakkes i en glasskolonne som et tett ensartet lag. Deretter vaskes søylen grundig med det samme oppløsningsmiddel. Deretter fylles 10 g av det i det ovenstående trinn B oppnådde rå pulver over silisiumdioksydgelen i et ensartet tynt lag. Etter påfylling av det rå pulver helles det samme oppløsningsmiddel gradvis inn i søylen fra toppen og deretter gjennomføres eluering kontinuerlig med en strømningshastig-het på omkring 50 ml/time. Eluatet utvinnes i 20 ml fraksjoner,
og hver av fraksjonene underkastes bestemmelse av aktivitet ved papirskivemetoden under anvendelse av Bacillus subtilis nr. 10707» Først elueres fortimicin B etterfulgt av fortimicin A. Deretter fortsettes elueringen og etter at fortimicin C er eluert, elueres fortimicin D. De aktive fraksjoner underkastes tynnsjiktskromatografi og fraksjonene inneholdende fortimicin D kombineres og konsentreres under forminsket trykk til tilstrekkelig fjerning av oppløsningsmidlet. Resten oppløses i en liten mengde vann og opp-løsningen frysetørkes for oppnåelse av omkring 1,5 g renset preparat av den frie base av fortimicin D. Produktet utviser en aktivitet på omkring 980 enheter/mg.
D. Isolering og rensing av fortimicin KE
For oppnåelse av fortimicin KE oppløses 20 g av det
i det ovenstående trinn B oppnådde rå pulver i 30 ml vann. Opp-løsningen innstilles til pH 7>5 med konsentrert svovelsyre og. føres igjennom en kolonne pakket med 1 liter kationutvekslerharpiks, "Amberlite CG-50" (ammonium-form). Gjennomløpet kasseres. Det aktive stoff adsorberes på harpiksen. Etter vasking av harpiksen med vann gjennomføres eluering med 0,2N ammoniakkvann. Eluatet utvinnes i 50 ml fraksjoner og hver av fraksjonene underkastes bestemmelse av aktivitet ved papirskivemetoden og tynnsjikts-
kromatografi.
Først elueres flere sporkomponenter. Deretter elueres fraksjoner inneholdende fortimicin KE og fortimicin B. Fraksjonene kombineres og konsentreres til 20 ml. Konsentratet frysetørkes for oppnåelse av 8 g av et rått pulver.
Omkring 500 ml silisiumdioksydgel, suspendert i et oppløsningsmiddel bestående av isopropanol, kloroform og konsentrert ammoniakkvann (volumforhold 4:2:1), pakkes i en glasskolonne som et tett ensartet lag. Deretter vaskes kolonnen grundig med det samme oppløsningsmiddel. Deretter fylles det ovenfor oppnådde rå pulver på silisiumdioksydgelen i et ensartet tynt lag og det samme oppløsningsmiddel helles gradvis inn i kolonnen ovenifra og deretter gjennomføres elueringen kontinuerlig med en strømnings-hastighet på omkring 50 ml/time. Eluatet utvinnes i 20 ml fraksjoner og hver av fraksjonene underkastes bestemmelse av aktivitet ved papirskivemetoden under anvendelse av Bacillus subtilis nr. 10707- Først elueres fortimicin B etterfulgt av fortimicin KE.
De aktive 'fraksjoner underkastes tynnsjiktskromatografi og fraksjonene inneholdende fortimicin KE kombineres og konsentreres under forminsket trykk for fjerning av oppløsningsmidlet. Resten oppløses i en liten mengde vann og oppløsningen frysetørkes for oppnåelse av omkring 2 g renset preparat av den frie base av for-timicin KE. Produktet utviser en aktivitet på omkring 970 enh./mg.
EKSEMPEL 2
I dette eksempel anvendes den stamme som ble benyttet i eksempel 1, som podestamme, og de i eksempel 1 benyttede podemedier (første til fjerde podemedium) anvendes også som podemedier. Det benyttede gjæringsmedium har følgende sammensetning:
Gjæringen gjennomføres under de samme betingelser som beskrevet i trinn A i eksempel 1, og det isoleres et rått pulver av fortimicin-kompleks på samme måte som beskrevet i trinn B i eksempel 1. Det oppnås omkring 71 g av det rå pulver av fortimicin-kompleks, som utviser en aktivitet på omkring 670 enn./mg. Deretter underkastes 50 g av det rå pulver rensing ifølge den metode som er beskrevet i trinn C i eksempel 1. Det oppnås omkring 15 g fortimicin D, som utviser en aktivitet på omkring 840 enn./mg.-
For ytterligere rensing underkastes preparatet cellu-lose-søylekromatografi. Omkring 500 ml av et cellulosepulver ("AVICEL") suspenderes i et blandet oppløsningsmiddel av n-butanol, eddiksyre, pyridin og vann (volumforhold 6:2:4:4) og pakkes i en glasskolonne for dannelse av et tett ensartet lag. Kolonnen vaskes deretter grundig med det samme oppløsningsmiddel. Preparatet fyl-.les på cellulosepulveret for dannelse av et ensartet tynt lag.
Etter at preparatet er påført, helles det samme oppløsningsmiddel gradvis inn i kolonnen ovenifra og detter gjennomføres elueringen kontinuerlig ved en strømningshastighet på omkring 1 ml/min. Eluatet utvinnes i 10 ml fraksjoner og hver av fraksjonene underkastes bestemmelse av aktivitet ved hjelp av papirskivemetoden under anvendelse av Bacillus subtilis nr. 10707. De aktive fraksjoner kombineres og konsentreres under forminsket trykk for å fjerne opp-løsningsmidlet tilstrekkelig. Resten oppløses i en liten mengde vann og frysetørkes. På denne måte oppnås omkring 8 g av et renset preparat av den frie hase av fortimicin D som utviser en aktivitet på 970 enh./mg.
EKSEMPEL 3
I dette eksempel gjentas metoden fra eksempel 2 for oppnåelse av omkring 68 g av et rått pulver av fortimicin-kompleks. Deretter underkastes 40 g av det rå pulver rensing ifølge metoden
i trinn D i eksempel 1. Det oppnås 7 g fortimicin KE som utviser en aktivitet på omkring 860 enh./mg.
For ytterligere rensing underkastes preparatet cellu-lose-søylekromatografi. Omkring 300 ml av et cellulosepulver ("AVICEL") suspenderes i et oppløsningsmiddel bestående av n-butanol, eddiksyre, pyridin og vann (volumf orhold 6:2:4:4) og pakkes i en glasskolonne for dannelse av et tett ensartet lag. Kolonnen vaskes deretter med det samme oppløsningsmiddel. Preparatet fylles på cellulosepulveret for dannelse av et ensartet tynt lag. Etter at preparatet er påført, helles det samme oppløsningsmiddel gradvis i kolonnen ovenifra og deretter gjennomføres eluering kontinuerlig med en strømningshastighet på omkring 1 ml/min. Eluatet utvinnes i 7 ml fraksjoner og hver av fraksjonene underkastes bestemmelse av aktivitet ved papirskivemetoden under anvendelse av Bacillus subtilis nr. 10707. De aktive fraksjoner kombineres og konsentreres under forminsket trykk for fjerning av oppløsningsmidlet. Resten oppløses i en liten mengde vann og frysetørkes. På samme måte oppnås omkring 5 g av et renset preparat av den frie base av fortimicin KE som utviser en aktivitet på 980 enh./mg.
EKSEMPEL 4
I dette eksempel anvendes den i eksempel 1 benyttede stamme som podestamme, og de i eksempel 1 benyttede podemedier (første til fjerde podemedium) anvendes også som podemedier. Imidlertid anvendes et gjæringsmedium med følgende sammensetning:
Gjæringen gjennomføres under de samme betingelser
som i trinn A i eksempel 1, og fortimicin D isoleres og renses på samme måte som beskrevet i trinn B og C i eksempel 1. Det oppnås omkring 15 g renset preparat av fortimicin D som utviser en aktivitet på omkring 975 enh./mg.
EKSEMPEL 5
I dette eksempel gjentas metoden i eksempel 4 med unntagelse av at fortimicin KE isoleres og renses på samme måte som beskrevet i trinn B og D i eksempel 1. Det oppnås omkring 7 g renset preparat av fortimicin KE som utviser en aktivitet på omkring 985 enh./mg.
EKSEMPEL 6
I dette eksempel anvendes Micromonospora olivoasterospora MK-70 (ATCC 21819), Micromonospora olivoasterospora MK-80 (ATCC 31010) og Micromonospora olivoasterospora Mm 744 (ATCC 31009) som podestammer. Podemediene (første til fjerde podemedium) og gjæringsmediet er de samme som i eksempel 1. Gjæringen gjennom-føres under de samme betingelser som angitt i trinn A i eksempel 1, og fortimicin D isoleres og renses på samme måte som beskrevet i trinn B og C i eksempel 1. På lignende måte isoleres og renses fortimicin KE på samme måte som beskrevet i trinn B og D i eksempel 1. Utbyttene og aktivitetene av de rensede preparater av fortimicin D og fortimicin KE er angitt i tabell 5.
EKSEMPEL 7
I dette eksempel oppløses 10 g av den frie base av fortimicin D i 500 ml av en mettet vandig oppløsning av bariumhydroksyd. Oppløsningen oppvarmes til en temperatur på 100°C i 3 timer og hensettes deretter inntil den er avkjølt til romtemperatur. Oppløsningen nøytraliseres med tørr is for utfelling av bariumkarbonatet. Bunnfallet fjernes ved filtrering og vaskes med en liten mengde vann. Filtratet og vaskeoppløsningene kombineres og konsentreres til omkring 20 ml. Konsentratet føres igjennom en kolonne pakket med 500 ml av en kationutvekslerharpiks, "Amberlite CG-50" (ammonium-form). Etter at harpiksen er vasket med vann, gjennomføres eluering med 0,2 N ammoniakkvann. Eluatet utvinnes i 20 ml fraksjoner og hver av fraksjonene underkastes bestemmelse av aktivitet ved papirskivemetoden. Først elueres en liten mengde reaksjonsbiprodukter. Deretter elueres fortimicin KE. Aktive fraksjoner underkastes tynnsjiktskromatografi og fraksjonene inneholdende fortimicin KE kombineres og konsentreres under forminsket trykk til 20 ml. Konsentratet frysetørkes, hvorved det oppnås 7,8 g renset preparat av den frie base av fortimicin KE, hvis aktivitet er omkring 970 enh./mg.
EKSEMPEL 8
I dette eksempel oppløses 1 g av den frie base av fortimicin D i 5 ml vann. Til oppløsningen tilsettes 1,7 ml 6N svovelsyre. Deretter tilsettes 100 ml metanol til blandingen til dannelse av et hvitt bunnfall. Bunnfallet utvinnes ved filtrering og vaskes med metanol. Etter tørking av bunnfallet under forminsket trykk oppnås 1,2 g av sulfatet av fortimicin D som utviser en aktivitet på omkring 650 enh./mg.
EKSEMPEL 9
I dette eksempel oppløses 1 g av den frie base av fortimicin KE i 5 ml vann. Til oppløsningen tilsettes 2,0 ml 6N svovelsyre. Deretter tilsettes 100 ml metanol til blandingen for dannelse av et hvitt bunnfall. Bunnfallet utvinnes ved filtrering og vaskes med metanol. Etter tørking av bunnfallet under forminsket trykk oppnås 1,3 g av sulfatet av fortimicin KE som utviser en aktivitet på omkring 610 enh./mg.
Claims (2)
1. Fremgangsmåte for fremstilling av antibiotisk virksomme forbindelser med den generelle formel: 0
hvor R er H (fortimicin KE) eller -CCH2NH2 (fortimicin D), eller farmasøytisk akseptable syreaddisjonssalter derav, karakterisert ved at man dyrker en mikroorganisme tilhørende arten Micromonospora olivoasterospora i et næringsmedium, isolerer minst en av nevnte antibiotiske forbindelser fra dyrkningsvæsken og, om ønsket, omdanner den antibiotiske forbindelsen til et syreaddisjonssalt derav, og deretter, om ønsket, oppvarmer oppnådd fortimicin D i en alkalisk vandig oppløsning for omdannelse til fortimicin KE.
2. Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at man anvender en mikroorganisme valgt fra Micromonospora olivoasterospora ATCC 21819, Micromonospora olivoasterospora ATCC 31009, Micromonospora olivoasterospora ATCC 31010 og Micromonospora olivoasterospora NRRL 8178.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP51128837A JPS5834119B2 (ja) | 1976-10-28 | 1976-10-28 | 新抗生物質ホ−テイマイシンｄおよびその製造法 |
| JP233877A JPS5390241A (en) | 1977-01-14 | 1977-01-14 | Novel antibiotics fortemycin |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO773674L NO773674L (no) | 1978-05-02 |
| NO149040B true NO149040B (no) | 1983-10-24 |
| NO149040C NO149040C (no) | 1984-02-01 |
Family
ID=26335697
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO773674A NO149040C (no) | 1976-10-28 | 1977-10-27 | Fremgangsmaate for fremstilling av antibiotika betegnet fortimicin d og ke. |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US4145253A (no) |
| AR (1) | AR219305A1 (no) |
| AU (1) | AU516309B2 (no) |
| CA (1) | CA1108074A (no) |
| DE (1) | DE2748530C3 (no) |
| DK (1) | DK145893C (no) |
| ES (1) | ES463697A1 (no) |
| FR (1) | FR2369294A1 (no) |
| GB (1) | GB1572530A (no) |
| GR (1) | GR66054B (no) |
| NO (1) | NO149040C (no) |
| NZ (1) | NZ185515A (no) |
| PH (1) | PH14319A (no) |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6030320B2 (ja) * | 1978-01-13 | 1985-07-16 | 山之内製薬株式会社 | 新規抗生物質およびその製造法 |
| US4312858A (en) * | 1978-07-13 | 1982-01-26 | Kowa Company, Ltd. | Antibiotic KA-7038 and compositions containing same |
| US4380581A (en) * | 1979-05-01 | 1983-04-19 | Zaidan Hojin Biseibutsu Kagaku Kenkyu Kai | Istamycins and streptomyces culture for the production thereof |
| NL8001842A (nl) * | 1979-05-01 | 1980-11-04 | Microbial Chem Res Found | Nieuwe antibiotica die istamycinen zijn genoemd, werk- wijzen voor de bereiding van deze antibiotica, alsmede farmaceutische preparaten met werkzaamheid tegen bacterien die deze antibiotica bevatten en werkwijze voor het remmen van de groei van bacterien. |
| US4382926A (en) * | 1980-04-01 | 1983-05-10 | Zaidan Hojin Biseibutsu Kagaku Kenkyu Kai | Formimidoyl A and B useful as semi-synthetic aminoglycosidic antibiotics |
| US4338309A (en) * | 1980-11-10 | 1982-07-06 | Abbott Laboratories | 4',5'-Dihydro-antibiotic AX-127B-1; 2'-N-des-β-lysyl-4',5'-dihydro-antibiotic AX-127B-1; and 4-N-derivatives thereof |
| US5508315A (en) * | 1992-10-15 | 1996-04-16 | Ecomat, Inc. | Cured unsaturated polyester-polyurethane hybrid highly filled resin foams |
| US5604266A (en) * | 1992-10-15 | 1997-02-18 | Ecomat, Inc. | Cured unsaturated polyest-polyurethane highly filled resin materials and process for preparing them |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3976748A (en) * | 1972-10-09 | 1976-08-24 | Alkem Gmbh | Process for the production of 238 Pu 16 O2 |
| US3931400A (en) * | 1973-04-17 | 1976-01-06 | Abbott Laboratories | Fortimicin B and process for production thereof |
| US3878193A (en) * | 1973-06-26 | 1975-04-15 | Schering Corp | Process for the preparation of garamine derivatives |
| US3963695A (en) * | 1974-12-19 | 1976-06-15 | Smithkline Corporation | Tetradeoxyneamine and derivatives thereof |
| US4091032A (en) * | 1976-09-23 | 1978-05-23 | Abbott Laboratories | 4-N-acylfortimicin B derivatives and the chemical conversion of fortimicin B to fortimicin A |
| US4124756A (en) * | 1976-12-27 | 1978-11-07 | Abbott Laboratories | 3-DE-O-Methylfortimicins |
-
1977
- 1977-10-25 GR GR54643A patent/GR66054B/el unknown
- 1977-10-25 NZ NZ185515A patent/NZ185515A/xx unknown
- 1977-10-27 NO NO773674A patent/NO149040C/no unknown
- 1977-10-27 PH PH20370A patent/PH14319A/en unknown
- 1977-10-27 CA CA289,631A patent/CA1108074A/en not_active Expired
- 1977-10-27 FR FR7732525A patent/FR2369294A1/fr active Granted
- 1977-10-27 DK DK478077A patent/DK145893C/da active
- 1977-10-27 US US05/845,970 patent/US4145253A/en not_active Expired - Lifetime
- 1977-10-27 GB GB44833/77A patent/GB1572530A/en not_active Expired
- 1977-10-28 ES ES463697A patent/ES463697A1/es not_active Expired
- 1977-10-28 AU AU30158/77A patent/AU516309B2/en not_active Expired
- 1977-10-28 AR AR269767A patent/AR219305A1/es active
- 1977-10-28 DE DE2748530A patent/DE2748530C3/de not_active Expired
-
1978
- 1978-12-29 US US05/974,434 patent/US4216308A/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| NO773674L (no) | 1978-05-02 |
| AU3015877A (en) | 1979-05-03 |
| AR219305A1 (es) | 1980-08-15 |
| CA1108074A (en) | 1981-09-01 |
| DE2748530C3 (de) | 1980-10-09 |
| FR2369294B1 (no) | 1980-04-11 |
| AU516309B2 (en) | 1981-05-28 |
| GB1572530A (en) | 1980-07-30 |
| US4145253A (en) | 1979-03-20 |
| DK145893C (da) | 1983-10-31 |
| DE2748530B2 (de) | 1980-02-07 |
| GR66054B (no) | 1981-01-14 |
| DE2748530A1 (de) | 1978-05-18 |
| ES463697A1 (es) | 1979-07-16 |
| US4216308A (en) | 1980-08-05 |
| NZ185515A (en) | 1980-08-26 |
| NO149040C (no) | 1984-02-01 |
| DK145893B (da) | 1983-04-05 |
| DK478077A (da) | 1978-04-29 |
| FR2369294A1 (fr) | 1978-05-26 |
| PH14319A (en) | 1981-05-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US3976768A (en) | Fortimicin A | |
| US3931400A (en) | Fortimicin B and process for production thereof | |
| US4007167A (en) | Antibiotic BM123 and production thereof | |
| NO149040B (no) | Fremgangsmaate for fremstilling av antibiotika betegnet fortimicin d og ke | |
| US4018972A (en) | Antibacterial agents cis-BM123γ1 and cis-BM123γ2 | |
| US4279997A (en) | Process for production of aminoglycoside antibiotics | |
| US3454696A (en) | Antibiotics 460 and methods for their production | |
| NO142919B (no) | Fremgangsmaate til fremstilling av et antibiotikum betegnet fortimicin c eller syreaddisjonssalter derav | |
| DE2418349C3 (de) | Fortimicin B und dessen pharmakologisch verträgliche Säureadditionssalze, Verfahren zu deren Herstellung und Arzneimittel enthaltend diese Verbindungen | |
| US4209612A (en) | Fortimicin factors KF and KG and process for production thereof | |
| NO141343B (no) | Fremgangsmaate till fremstilling av aminoglykosid-antibiotika, betegnet xk-88-1,-2, og -5 (seldomyciner). | |
| US4097428A (en) | Fortimicin C and process for production thereof | |
| US4045610A (en) | Antibiotics designated xk-88 series | |
| US4241182A (en) | Fortimicin factors KG1, KG2 and KG3 and processes for production thereof | |
| KR790001476B1 (ko) | 포티마이신 c의 제조방법 | |
| US4298690A (en) | Antibiotics XK-62-3 and XK-62-4 and process for production thereof | |
| JPS5813156B2 (ja) | シンコウセイブツシツ ｓｆ−１８５４ ブツシツノセイゾウホウ | |
| US5096817A (en) | Process for producing antibiotics BU-3608 D and BU-3608 E | |
| JPS5831196B2 (ja) | Ｓｆ−１７７１ ブツシツノ セイゾウホウ | |
| JP3192723B2 (ja) | 新規マクロライド抗生物質ｓｆ２７４８ｂ物質、ｓｆ２７４８ｃ１物質、ｓｆ２７４８ｄ物質およびｓｆ２７４８ｅ物質ならびにその製造法 | |
| SU296323A1 (ru) | Способ получения антибиотика а204 | |
| US3657418A (en) | Antibiotic histidomycin | |
| JPS5834119B2 (ja) | 新抗生物質ホ−テイマイシンｄおよびその製造法 | |
| US4505895A (en) | Antibiotic 273a1 | |
| JPS5922513B2 (ja) | 新規物質ｓｕｍ−４およびその製造法 |