Compte Rendu Méthode Danalyse2
Compte Rendu Méthode Danalyse2
Compte Rendu Méthode Danalyse2
Réaliser par :
Guerroudja Romaissa
Groupe : 5
Définition du Paracétamol :
Le paracétamol, aussi appelé acétaminophène, est une substance active aux propriétés
analgésiques et antipyrétiques non salicylés qui rentre dans la composition de nombreuses
spécialités pharmaceutiques, il est classé par l’OMS comme antalgique de palier 1
« Analgésique non opioïde », utilisé seul ou en association avec d'autres antalgiques.
Substances qui combattent la fièvre et des douleurs d’intensité faible et modérée. Il peut
être seul ou en association à d’autres analgésiques.
Le Paracétamol vient donc comme la substance active d'une large gamme de spécialités
médicamenteuses telles que : DOLIPRANE, EFFERALGAN, DAFALGAN, PARALGAN.
Caractéristiques physico-chimiques :
Le paracétamol se présente sous forme de poudre cristalline blanche assez soluble dans
l’eau, facilement soluble dans l’alcool et très peu soluble dans l’éther. Il se conserve à l’abri
de la lumière.
2. La spectrométrie UV Visible :
Définition :
La spectroscopie ultraviolet-visible ou spectrométrie ultraviolet-visible est une technique de
spectroscopie mettant en jeu les photons dont les longueurs d'onde sont dans le domaine
des ultraviolets (200-400nm), du visible (400-800nm), et jusqu'au proche infrarouge. Soumis
à un rayonnement dans cette gamme de longueurs d'onde, les molécules, les ions ou
les complexes sont susceptibles de subir une ou plusieurs transitions électroniques. Cette
spectroscopie fait partie des méthodes de spectroscopie électronique. Les substrats analysés
sont le plus souvent en solution, mais peuvent également être en phase gazeuse et plus
rarement à l'état solide.
La spectroscopie d’absorption dans l’UV et le visible est basée sur la propriété des molécules
d’absorber des radiations lumineuses de longueur d’onde déterminée.
Appareillage et principe :
L’étude des absorptions nécessite l’utilisation d’un appareil appelé spectromètre.
On dissout la substance à analyser dans un solvant et la solution obtenue est versée dans
une cuve destinée à être placée dans le spectromètre. Afin de ne pas fausser les mesures la
cuve et le solvant choisis ne doivent pas absorber les rayonnements émis par le
spectroscope.
Lorsque la cuve contenant la solution est placée dans un spectroscope, elle reçoit un
rayonnement d'intensité I0. Une partie de cette lumière incidente notée I0 est absorbée par
le milieu et le reste, noté I, est transmis. L'intensité (I) du rayonnement issu de la cuve est
donc inférieure à l'intensité du rayonnement initial (I0). La fraction de la lumière incidente
absorbée par une substance de concentration C contenue dans une cuve de longueur (L) est
donnée par la loi de Beer-Lambert :
A = log(I0/I) = ε. L. C
3.Uniformité de teneur :
Selon la Pharmacopée Européenne, chapitre 2.9.6, « l’essai d’uniformité de teneur des
préparations uni doses est basé sur la détermination de la teneur individuelle en
substance(s) active(s) des unités composant l’échantillon, permettant de vérifier que les
teneurs individuelles en substance active se trouvent dans les limites établies par rapport à
la teneur moyenne de l’échantillon ». Ce dernier consiste à dissoudre 10 comprimés
séparément dans un milieu adéquat et de doser, à l’aide de techniques analytiques
appropriées, la libération de principe actif. Les comprimés pesés doivent contenir une
concentration semblable pour assurer au patient une dose constante. La limite admise par la
Pharmacopée Européenne est un écart limite de ±15% de la moyenne. Si une valeur se situe
entre ±15% et ±25%, le test doit être refait sur 20 unités. Aucune de ces concentrations
doivent dépasser l’écart limite si non le test est rejeté.
4. L’absorbance et la transmittance :
L’absorbance (A), également appelée densité optique (DO), est la quantité de lumière
absorbée par une solution. La transmittance est la quantité de lumière traversant une
solution. L’absorbance et la transmittance en % sont souvent utilisées en
spectrophotométrie
5.Transitions électroniques :
Elles correspondent pour chacune d’elles au passage d’un électron d’une orbitale liante à
une orbitale anti liante et donne lieu à une absorption d’énergie sous forme d’une radiation
lumineuse d’une longueur d’onde déterminée il est évident que l’environnement (nature des
groupements substituants portés par les atomes impliqués) aura un retentissement plus au
moins important sur les niveaux énergétiques correspondant à cette transition.
Il est nécessaire de rappeler la signification des principaux termes utilisés dans la
spectroscopie UV-Vis.
6.Analyse quantitative :
L’analyse quantitative par la spectrométrie UV-visible est très employée (beaucoup plus que
l’analyse qualitative) grâce à l’utilisation de la loi de Beer-Lambert.
Comme applications, on peut citer :
-Le dosage d’impureté dont l’identité est connue.
- Le dosage d’un principe actif d’un médicament.
- Le dosage des métaux de transition par compléxométrie.
7.Les chromophores :
L'absorbance provient de groupements chimiques appelés chromophores.
Sont des molécules chimiques contenant dans leur structure des doubles liaisons
conjuguées. Un chromophore est un groupement fonctionnel qui peut donner une transition
électronique.
Les systèmes conjugués sont définis par une alternance de liaisons simples et de liaisons
doubles ou par un système constitué d’une liaison double suivi d’une liaison simple lié à un
atome portant un doublet d’électrons non lié.
8.Etalonnage :
L'étalonnage se fait par une méthode simple, qui consiste à préparer une série de Solutions
de concentrations bien déterminées. Celles-ci sont, par la suite analysées par
spectrophotométrie. Nous d'étalonnage représentant la densité optique D.O, au maximum
de la bande d'absorption, établissons ainsi, dans les deux techniques, la droite en fonction
de la concentration initiale C.
Considérons une radiation monochromatique (de longueur d’onde λ) incidente, d’intensité
I0(λ). Cette radiation traverse une épaisseur de solution du composé X de concentration c qui
absorbe la lumière partiellement. L’intensité transmise est I.
Le but de TP :
Le but de ce TP est de déterminer la teneur du paracétamol dans le comprimé paralgan
500mg par UV-visible pour exploiter cette technique spectrométrie (méthode d’analyse).
Mode opératoire :
1.Préparation des solutions de référence :
_Préparer une gamme d’étalonnage par dilution de la solution mère (référence) de
paracétamol.
Dans une fiole, mettre 25mg de matière première paracétamol et ajouter 25ml
d’éthanol (Solution mère).
De cette solution mère, faire une dilution, et prélever 1ml de solution mère et ajouter
25ml d’éthanol.
A partir de la solution diluée préparer la gamme d’étalonnage par prélèvement
successivement les volumes suivants : 0.2ml,0.4ml,0.6ml,0.8ml,1ml dans des fioles de
10ml et complèter au volume avec de l’éthanol.
_Prendre 25mg de poudre paracétamol dans une fiole de 25ml et on ajouter l’éthanol
jusqu’à trait de jauge.
_Faire une dilution, prélever 1ml et ajoute l’éthanol (25ml), de cette solution diluée prélever
0,5ml dans une fiole de 10ml.
3.Proccédure d’UV-visible :
_Faire un balayage de 200nm à 400nm dans un spectrophotomètre UV-visible d’une solution
de référence de paracétamol et noter l’absorbance et longueur d’onde max.
_Vérifier la valeur obtenue à celle de la solution échantillon.
_Fixer la longueur d’onde max et déterminer les absorbances des différentes solutions
diluées de la gamme d’étalonnage et de l’échantillon.
Résultats et interprétation :
1.Tableau des concentrations des solutions de référence et les absorbances A :
Calculs :
C2=1mg/ml
C2=0,04mg/ml
Solutions de référence :
Solution 1 : C2V2=C3V3
0,04×0,2=C3×10
C3=8×10-4mg/ml
Solution 2 : C2V2=C4V4
0,04×0,4=C4×10
C4=1,6×10-3mg/ml
Solution 3 : C2V2=C5V5
0,04×0,6=C5×10
C5=2,4×10-3mg/ml
Solution 4 : C2V2=C6V6
0,04×0,8=C6×10
C6=3,2×10-3mg/ml
Solution 5 : C2V2=C7V7
0,04×1=C7×10
C7=4×10-3mg/ml
2. D’après la courbe d’étalonnage, c’est une droite donc la loi de BEER LAMBERT est vérifiée
dans le domaine d’analyse.
Y=aX+b avec : b négligable.
3.Détermination graphiquement le coefficient d’absorption massique et molaire du
Paracétamol :
a =82,81cm-1ml mg-1
On a : εm = ε/ ρ avec : ρ=m/V
Donc : εm = ε×v/m
D’où : εm= (82,81×25) /25,3
=82,71mg-1cm2
CX1 0,5ml
CX2 25ml
Avec : CX=0,00145mg/ml
Donc : CX2=0,0725mg/ml
CX2 1ml
CX3 25ml
Avec : CX2=0,0725mg/ml
Donc : CX3=1,8125mg/ml
X=419mg
5. On ne peut pas analyser toutes les molécules par la technique spectrométrique UV-
Visible.
Le cas où la technique est possible lorsque on a un chromophore et une solution coloré.
Dans le cas contraire, un moyen pour rendre l’analyse possible c’est la rendre complexe
(coloré la solution) donc il faut une coloration pour mettre une réaction de complexation.
6.Les avantages et les inconvénients de cette méthode d’analyse :
Avantages :
_La spectrométrie UV Visible est une méthode d’analyse très facile, rapide, simple, fiable et
précise :1_5%e erreur.
_Elle est utilisée dans les différents produits ou bien large domaine d’application
(pharmaceutique, chimie analytique, minérale, organique, biochimie…) et 90% des analyses
médicales.
_Assurer la qualité et la conformité des produits par rapport aux spécifications techniques
préétablies par la pharmacopée.
_Une sélectivité largement adaptable : il existe souvent une longueur d’onde que seuls certains corps
à doser absorbent.
Inconvénients :
_ Le principal inconvénient de l'utilisation d'un spectromètre UV-VIS est le temps qu'il prend
pour se préparer à en utiliser un (prend beaucoup du temps).
_Il faut nettoyer la zone de toute lumière extérieure, bruit électronique ou autres
contaminants extérieurs qui pourraient interférer avec la lecture du spectromètre .
Conclusion :
La spectrométrie UV Visible est très importante dans le domaine pharmaceutique, elle
permet d’assurer la qualité et la conformité du médicament.
Le dosage par spectrophotométrie est un dosage très utilisé dans la Pharmacopée et
généralement dans l'industrie Pharmaceutique. Beaucoup de principes actifs que l’on
retrouve dans les médicaments présentent dans leur structure des groupements chimiques
qui absorbent dans l’ultra-violet et qui peuvent ainsi être dosées.