INMUNOAGLUTINACION
INMUNOAGLUTINACION
INMUNOAGLUTINACION
Antígeno -
Anticuerpo
Ag-Ac
Características
Relación bimolecular
No covalente → Reversible
Específica
Reacciones de
aglutinación
Lasreacciones de aglutinación consisten
en el agrupamiento de una suspensión
de partículas que se debe a la reacción
entre un Ag presente en las partículas y
un anticuerpo específico de él
Cuando el Antígeno (Ag) se halla unido de
forma natural a un corpúsculo, como las
células sanguíneas o las bacterias; las
reacciones Ag-Ac producen
aglutinación.
En las reacciones con Ag soluble la
aglutinación puede conseguirse uniendo
el Ag de forma COVALENTE a corpúsculos
inertes, como las partículas de látex o los
hematíes tratados con ácido tánico. (Las
reacciones de aglutinación son más
sensibles que las de precipitación)
Factores que
influyen en las
reacciones de
aglutinación
Carga de las partículas
• La carga impide la aglutinación, para
producirse se han de eliminar previamente las
cargas.
Se
utiliza para la detección de los Ac
del suero frente a los Ag que se
adicionan.
Se puede realizar en tubo o en placa. En
estas últimas, se mezcla sobre una placa
una suspensión de la bacteria con
diversas diluciones del suero.
Se agita suave la placa unos minutos y se
observa el resultado. El resultado se
expresa como la inversa de la mayor
dilución que aglutina.
Aglutinación directa
Reacciones de aglutinación
indirecta
Pasiva
Sebasan en el empleo de una partícula
aglutinante inerte a la cual se le ha unido
un Ag (soluble).
Los
soportes particulados pueden ser
Glóbulos rojos (hemaglutinación) o
partículas de látex
Proceso de sensibilización
Partícula
(células, latex..) Ag Partícula sensibilizada
con el Ag
Ensayo de Aglutinación
Partículas
Sensibilizadas Ac Aglutinación
Reacciones de Aglutinación
pasiva reversa o Inhibición de
la Aglutinación
• Se basan en la inmovilización del anticuerpo, en la
superficie de la partícula inerte, siendo este tipo de
reacciones particularmente útiles para la detección del Ag
en distintos líquidos biológicos, o bien inmovilizar el Ag.
•
Lamayoría de las veces las pruebas de
aglutinación son meramente cualitativas,
es decir, solo establecen la presencia o la
ausencia de la sustancia buscada en la
muestra problema
• Una forma de establecer la
concentración aproximada de la
sustancia buscada en la muestra
problema(semi-cuantificar) consiste en
preparar diluciones seriadas de la
muestra problema, de forma que se
disponga de una bateria de diluciones en
la que la sustancia investigada esté en
concentraciones decrecientes.
• El paso siguiente consiste en practicar el
ensayo de aglutinación con cada una de
las diluciones preparadas. De esta forma,
aunque con las primeras diluciones la
prueba nos de positiva(haya una
aglutinación distinguible), llegará un
momento en el que la concentración de
la sustancia problema en una dilución
sea lo suficientemente pequeña como
para que la prueba se torne negativa(no
aparezca aglutinación)
Pruebas a realizar en el
laboratorio
ASTO o Antiestreptolisina “O”
Proteina C. Reactiva