Microcultivo MICROlabuena
Microcultivo MICROlabuena
Microcultivo MICROlabuena
OBJETIVOS
Obtener las habilidades necesarias para realizar la
tcnica de microcultivo.
Entender la eficacia de un microcultivo para
MICROCULTIVO
Es una tcnica micolgica que facilita la observacin microscpica de hongos filamentosos, obtenidos de un cultivo en un portaobjetos y cubreobjetos.
UTILIDAD
ESTRUCTURAS DE HONGOS FILAMENTOSOS
OBSERVADOS
SOPORTE
CRECIMIENTO
MICROCULTIVO
CUBREOBJETOS Y HUMECTANTE
SEMBRAR
AGAR
Ventajas Permite observar la estructura de los hongos casi intacta Se puede almacenar haciendo una buena preparacin
Tcnica de emparedado
a) Sobre una caja de Petri con medio de cultivo, se deposita de 5 a 8 fragmentos del hongo por estudiar
B) Se introducen en el agar de 4 a 6cubreobjetos estriles de 22 - 22 mm en un ngulo aproximado de 45 .
e) Se deposita una gota de azul de algodn sobre el cubreobjetos y se cubre con otro cubre objetos de 24 -40 mm.
f) Se repite el procedimiento con los de ms cubreobjetos contenidos en la caja de cultivo.
Montaje hmedo
A adicin de KOH y dimetil-sulfxido (DMSO)
Morfologa macroscpica
Gnero Aspergillus sp
Aspergillus fumigatus
Aspergillus niger
Aspergillus flavus
Aspergillus oryzae
Descripcin
Descripcin: Hifas hialinas, septadas, con ramificacin dicotmica en ngulo agudo.
Morfologa macroscpica
Penicillium chrysogenum
Gnero Penicillium sp
Descripcin
Descripcin: Conidiforos hialinos con mtulas que sostienen las fialides. Conidias en cadena, esfricas e hialinas.
Morfologa macroscpica
ANVERSO Descripcin: Colonias algodonosas laxas de inicio blanco que se tornan grises o amarillas con el tiempo.
Gnero Mucor sp
Descripcin
Descripcin: Hifas gruesas y aseptadas. Esporangias redondas con esporangiosporas redondeadas de color caf, que no permiten la observacin de la columnela. No presenta rizoides.
Morfologa macroscpica
ANVERSO Descripcin: Colonias algodonosas laxas, que cubren completamente la caja de Petri. Inicia de color blanco y se torna gris con puntos negros que corresponden a las esporangias. Rhizopus sp, Agar Sabouraud Dextrosa.
REVERSO Descripcin: Reverso incoloro o de color crema. Rhizopus sp, Agar Sabouraud Dextrosa.
Gnero Rhizopus sp
Descripcin
Descripcin: Hifas gruesas y aseptadas, abundantes rizoides prominentes, de los que salen los esporangiforos largos, no ramificados, cada uno con una esporangia de 100 a 200 m de dimetro, con esporangiosporas de 6 a 8 m. Columnela ovoide, con apfisis no prominente al final del esporangiforo.
Morfologa macroscpica
ANVERSO Descripcin: Colonias algodonosas laxas, que cubren completamente la caja de Petri. Inicia de color blanco y se torna gris con puntos negros que corresponden a las esporangias.
Absidia corymbifera
Gnero Absidia sp
Descripcin
Descripcin: Hifas hialinas, gruesas, aseptadas, de pared delgada. Esporangias con esporangiosporas. Esporangiforos ramificados. Columnela piriforme, con apfisis prominente.
Referencias
Koneman E, Glenn R. Micologa prctica de laboratorio. Tercera
edicin. Buenos Aires; Editorial Mdica Panamericana, 1997: 73-101 Arenas R. Micologa mdica ilustrada. Segunda edicin. Mxico; Interamericana McGraw-Hill, 2003: 47-49 Daz R, Gamazo C, Lpez GL. Manual prctico de microbiologa. Segunda edicin. Barcelona; Mansson SA, 1999: 71-75 Prats G. Microbiologa Clnica. Buenos Aires; Editorial Mdica Panamericana, 2006: 94-99 Koneman EW, Procop GW, Schreckenberger PC, Woods GL. Koneman diagnstico microbiologico texto y atlas en color. Sexta edicin. Buenos Aires. Editorial Mdica Panamericana, 2006: 1106-1118 Larone DH. Medically important fungi a guide to identification. 4th edition. Washington D.C.; ASM Press, 2002: 303-305 Manual electrnico : Manual de prcticas de microbiologa general II. Atlas electrnico :Hongos contaminantes.