Dosaje de Hemoglobina 1 (1) (Guia)

DOSAJE DE HEMOGLOBINA
1.- lNTRODUCClON
La hemoglobina es una proteína conjugada de peso molecular 68000. consta de cuatro unidades, dos cadenas
alfa y dos cadenas beta, cada una de las cuales contiene un complejo de Fe2+ - porfirina o complejo hemo.
A diferencia de la mioglobina que consta de una sola cadena pollpeptfdica y es el almacén de 02 de los
músculos rojos, la hemoglobina transporta el oxígeno desde los pulmones hastalos tejidos; además transporta
el C02 desde los tejidos hasta los
pulmones para su eliminación y actúa como un sistema buffer importante en el mantenimiento
del equilibrio ácido básico del organjsm o.
Los valores normales oscilan entre 11a 16 mg% correspondiendo los valores más bajos a las mujeres. Las
variaciones patológicas pueden ser en el sentido de la disminución, constituyendo los diversos tipos de
anemia y en elsentido del aumento lo cual constituye las denominadas policitemias de diferentes orígenes.
Existendiferentes mét.odos para cuantificar hemoglobina, en la práctica emplearemos elmétodo modificado

de Sherd Sanford y Szizeli, que se basa en la transformación de la hemoglobina en oxihemoglobina por acción
de una solución de hidróxido de amonio al 4%
11.- OBJETIVOS
Determinar la concentración de hemoglobina en sangre.
EQUIPOS MATERIALES Y REACTIVOS EQUIPOS

Centrífuga
Especb·ofotómetro
MATERIALES Y REACTIVO
PROPORClO NADO POR EL ALUM NO
01 frasco de alcoholmedicinal
01 bolsa de algodón
01 aguja descartable Nº 21 PROPORCIONADO POR EL LABORATORIO
l. Solución de hidróxido de amonio 4%
Tubos de ensayo3.2.6 Embudos
Pipetas de 1y 10 mi
Micropipeta de Sali
IV.- PROCEDIMIENTO EXPER IMENTAL
'fUBOS mi 11
Sol. de hidróxido de amonio 5.0 5.0
Sangre medida en micropipeta 1 0.02 1 ---

Lavar la micropi peta por succión repetidas veces con el líquido del
tubo
Mezcla Dejar en reooso por 10 min. Leer a 540 nm.
VI.- CALCU LOS
l. Gramos de hemoglobina % = FC (lectura prob - lectura blanco) VII.- RESU LTADOS Y
DISCUSIÓN
l. Explicar sus resultados con ayuda de la literatura recomendada. Compare sus resu ltados con los
demás grupos de trabajo
VII I. CU ESTI ONAR IO
l. I ndiq ue 5 organismos acuáticos que tiene hemoglobina

I ndiq ue 3 diferencias entre hemoglobina y mioglobina
Investigue que otros métodos se podrían usar para el dopaje de hemoglobina
Que a plicación tendrá la práctica realizada en el campo de su especialidad.
I X. R EFER ENCIAS BI BLIOGRAF1CAS
l. jungermann, K. 1984.Bi oquímica. Ediciones Pi rámide, S.A. Mad rid.

2. Mu rray, R. 1996. Bioquímica de Harper.13 Edicion. Manua l moderno, S:A: de C.V.México,
D.F.
M ETODO DE LA CIANOMETA HEMOGLO BI NA
Este método se fundamenta en la prod ucción de la metahemoglo bi na como resu ltado de la

oxidación de la carboxi hemoglobi na y la oxihemoglobi na por medio del ferricia nuro de potasio,
y l uego la conversión de la metahemoglobi111a y la hemoglobina red ucida a cianme tahemoglo
bina por medía del cianuro de potasio. Durante este proceso, el átomo de h ierro de la
hemoglobina pasa del estado ferroso al estado férrico, el h emo se convierte en hematina la cual
luego pasa de ferroprofi na a ferroporfi na, y la concen tración de l a cianometahemoglobi na
puede ser determ inada colorimétricamente. El método es de gran utili dad práctica en l a
hematologfa pisciaria, por cuan to muestras preparadas en el campo pueden ser conservadas
durante un tiempo rela tivamente largo (hasta por varias semanas) sin perder el color
permanente form ado. Además, se trata de un método muy sencillo y muy preciso cuan do
se lo eval úa frente a la determi nación del contenido de hierro en l a sangre según el método
fenimétrico de Wong. Por tanto, se adapta perfectamente a los requerimientos de biólogos
pesqueros, piscicultores, patobiólogos acuáticos y otros quienes necesitan un método sencillo y
confia ble de hemoglobinometrfa.
PROCEDIM I E NTO:
Con una pipeta Salí, se aspira 20 µL (microlitros) de sangre bien mezclada hasta la marca "20" de la
pipeta. Se limpia la parte externa de la pipeta, y se coloca la muestra de sangre en 5 mi de solución
de DRA BKJN, como diluyente, en un tubo de ensayo. Se mezcla cuidadosame nte repetidas veces
con el diluyen te por inversión.
Se ci erra el tu bo con u n tapón de jebe, y se deja a temperatura del ambiente durante 10 - 15
min utos. Se determ ina la densidad óptica (O.O.) de la muestra en espectrofotómetro a una
longitud de onda de 540 (nm), así como la O.O. de un patrón arti ficial a la misma longitud de
ond a.
CALCULOS
% Hb = O.O. X Factor (59,76)

Dosaje de Hemoglobina 1 (1) (Guia)

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

Dosaje de Hemoglobina 1 (1) (Guia)

Cargado por

Información del documento

Descripción original:

Título original

Derechos de autor

Formatos disponibles

Compartir este documento

Compartir o incrustar documentos

Opciones para compartir

¿Le pareció útil este documento?

¿Este contenido es inapropiado?

Copyright:

Formatos disponibles

Dosaje de Hemoglobina 1 (1) (Guia)

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

DOSAJE DE HEMOGLOBINA

Existendiferentes mét.odos para cuantificar hemoglobina, en la práctica emplearemos elmétodo modificado

Determinar la concentración de hemoglobina en sangre.

EQUIPOS MATERIALES Y REACTIVOS EQUIPOS

IV.- PROCEDIMIENTO EXPER IMENTAL

Sangre medida en micropipeta 1 0.02 1 ---

VII I. CU ESTI ONAR IO

l. I ndiq ue 5 organismos acuáticos que tiene hemoglobina

I X. R EFER ENCIAS BI BLIOGRAF1CAS

l. jungermann, K. 1984.Bi oquímica. Ediciones Pi rámide, S.A. Mad rid.

M ETODO DE LA CIANOMETA HEMOGLO BI NA

Este método se fundamenta en la prod ucción de la metahemoglo bi na como resu ltado de la

También podría gustarte