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Neisseria SPP.: Gabriela Abdalla Qb. Msc. 23 de Marzo de 2023

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NEISSERIA spp.

GABRIELA ABDALLA QB. MSc.


23 de marzo de 2023
El género también contiene
muchas especies
comensales, la mayoría de
Patógenos establecidos
Cocos gramnegativos las cuales son habitantes
para el ser humano.
inocuos de los tractos
respiratorio y alimentario
superiores.

2. Neisseria
1. Neisseria
gonorrhoeae (gonococo),
Las especies patogénicas meningitidis (meningococo),
la causa de la gonorrea
son: una causa importante de
(vulgarmente, la gota
meningitis y bacteriemia,
militar).

GÉNERO NEISSERIA
Cocos
gramnegativos que
en forma típica
aparecen en pares
No tienen
(diplococos) con los
lados opuestos
movilidad.
achatados, lo que les

CARACTERISTICAS da una apariencia


de “granos de café”.

GENERALES: Sus paredes celulares


son clásicas de las
bacterias
gramnegativas, con
una capa de
No forman esporas. peptidoglucano y una
membrana externa
que contiene
polisacáridos
complejos con lípido y
proteínas.
TINCIÓN DE GRAM
DE
N. gonorrhoeae
NEISSERIA
MENINGITIDIS
Pueden presentarse
Agente etiológico Bacteremia y
solos ambos
de la enfermedad meningitis
cuadros clínicos o
meningocócica. meningocócicas.
simultáneamente.

NEISSERIA MENINGITIDIS
„ Encapsulada.
„ Se clasifica en serogrupos → reactividad inmunológica y polisacáridos
de la cápsula.
„ Los más comunes: A, B, C, Y y W135.
„ B y C: enfermedad meningocócica en las Américas y Europa.
„ A: África y Asia.
„ Se distingue de otras meningitis: grandes epidemias. (serogrupo A y
C).
„ Durante las epidemias, niños (2 años de edad) y adultos jóvenes los
más afectados.
„ Vacuna tetravalente (A, C, Y y W135), desarrollo de nuevas vacunas.
„ El personal de laboratorio (en riesgo por aerosoles) → actualizadas
vacunas, gabinetes de bioseguridad biológica.

CARACTERÍSTICAS
GENERALES
TOMA DE MUESTRA DE LÍQUIDO CEFALORRAQUÍDEO:
LCR es un fluido líquido claro, acuoso
que se forma y se secreta en el plexo
coroideo, un tejido especial que tiene
muchos vasos sanguíneos y que reviste
las pequeñas cavidades o cámaras
(ventrículos) del cerebro.
El LCR fluye alrededor del cerebro y la
médula espinal rodeándolos y
protegiéndolos.
TOMA DE MUESTRA DE
LÍQUIDO
CEFALORRAQUÍDEO:
Punción lumbar
„ Una vez que se ha obtenido el LCR, este debe
ser transportado al laboratorio de microbiología
para ser examinado tan pronto como sea
posible (preferiblemente en el plazo de 1 hora
a partir del momento de la obtención de la
muestra);
„ Lleve la muestra a mano al laboratorio siempre
que sea posible. No refrigere o exponga a frío
extremo, calor o luz solar la muestra de LCR.
„ Si se sospecha que la causa de la enfermedad
es N. meningitidis y se anticipa una demora de
algunas horas en procesar la muestra, el
incubar el LCR (con la tapa de rosca suelta) a
35°C en una atmósfera de CO2 a 5% (por
ejemplo, en una incubadora de CO2 o en un
frasco con la vela) puede mejorar la
supervivencia bacteriana.

TRANSPORTE DE LAS
MUESTRAS DE LCR AL
LABORATORIO
CONFIRMACIÓN DE LA
ID DE N. meningitidis
„ Se recomienda cultivos de 24 hrs.
„ Comprobar pureza del crecimiento.
„ Gram: diplococos gram negativo en
forma de riñón o grano de café.
„ Prueba de oxidasa del crecimiento de
una placa de agar sangre → positiva
„ Identificar
serogrupo con aglutinación
en lámina.
FLUJO DE TRABAJO
PARA ID. DE N.
meningitidis
COLORACÍON DE GRAM
DE Neisseria meningitidis
EN LÍQUIDO
CEFALORRAQUÍDEO (LCR)

Las cepas de N. meningitidis son


diplococos gramnegativos.
Pueden ser intracelulares o
extracelulares.
COLONIAS EN
AGAR SANGRE (24
HORAS)
COLONIAS EN AGAR
CHOCOLATE (24
HORAS)
„ La prueba de oxidasa determina la presencia
de citocromo oxidasa (enzimas oxidasas).
PRUEBA DE „ El reactivo de oxidasa de Kovacs (1%
tetrametil-ρ-hidroclorofenilendiamina) se torna
OXIDASA DE en un compuesto purpúreo por la presencia
KOVACS PARA de microorganismos que contienen citocromo
C como parte de su cadena respiratoria.
LA
„ El reactivo se oxida en presencia del
IDENTIFICACIÓN citocromo oxidasa formándose azul de
DE Wuster.

N. MENINGITIDIS „ La reacción positiva se verá en solo 10


segundos y adquirirá un color púrpura.
Cuando se trata de N. meningitidis, es poco
probable que haya reacciones demoradas.
„ En caso negativo no hay cambio de color.
PRUEBA DE OXIDASA
„ Los doce serogrupos basados en el polisacárido de la cápsula son comúnmente
reconocidos como: A, B, C, H, I, K, L, W135, X, Y, Z, y Z’ (29E).
„ Los antisueros de grupos están comercialmente disponibles.
„ Es un procedimiento caro, pero de gran valor.
„ Los datos de los serogrupos proporcionan a los laboratorios y a las autoridades
de salud pública los medios para:
„ Determinar los brotes que se pueden controlar por campañas de
vacunación
„ Reconocer los serogrupos que causan enfermedad esporádica
„ Detectar la aparición de nuevas cepas que causan brotes (X o W135).

IDENTIFICACIÓN DE SEROGRUPOS
DE N. MENINGITIDIS
Reacción positiva

REACCIONES DE
AGLUTINACIÓN EN LÁMINA
POSITIVA Y NEGATIVA:
ANTISUEROS DE GRUPO Y
CONTROL DE SALINA CON
AISLAMIENTOS DE Neisseria
meningitidis

Cuando una suspensión se mezcla con sus antisueros


homólogos, ocurre aglutinación (izquierda). En una
reacción negativa, como en la figura, con antisueros
heterólogos (centro) o control de salina (derecha),
la suspensión se mantiene lisa y de apariencia turbia.
UTILIZACIÓN DE CARBOHIDRATOS POR ALGUNAS
ESPECIES DE NEISSERIA Y MORAXELLA
„ Comúnmente no muestran resistencia a muchos
agentes antimicrobianos.
„ Por lo regular, bajo nivel de resistencia a la PRUEBA DE SUSCEPTIBILIDAD A
penicilina en algunas zonas del mundo. LOS ANTIMICROBIANOS DE N.
„ Aún no se ha determinado la importancia clínica meningitidis
de esta resistencia.
„ La resistencia del meningococo a las
sulfonamidas, la rifampicina (o rifampina) y el
cloranfenicol, también se ha descrito.
„ El cloranfenicol ATB de elección.
„ Profilaxis: rifampicina y las sulfonamidas se utilizan
frecuentemente.
„ La prueba de susceptibilidad a los
antimicrobianos de N. meningitidis no debe
hacerse por difusión en disco.
„ Los resultados son muy difíciles de interpretar y no
proporcionan datos útiles para tomar decisiones
de tratamiento.
„ Dos pruebas apropiadas incluyen 1) la
determinación de la concentración inhibitoria
mínima (CIM) por microdilución en caldo y 2) el
uso de la tira de Etest®.
„ Afecta
principalmente a niños
menores de 5 años.
„ Colonizaa través de la nasofaringe y
se adhiere a las células de la faringe,
pudiendo pasar a la sangre y producir
EPIDEMIOLOGIA desde fiebre transitoria y bacteriemia,
hasta meningitis.
„ Lameningitis es la complicación más
grave.
„ Paraevitar secuelas como sordera
parcial o total debe tratarse a tiempo.
NEISSERIA
GONORRHOEAE
„ Las cepas de Neisseria gonorrhoeae, también conocida comúnmente como
“gonococo” o “GC”, causan unos 62 millones de casos de gonorrea al año en todo el
mundo [Gerbase y cols. 2015].
„ Trasmitidas por contacto sexual, las cepas de N. gonorrhoeae pueden infectar las
superficies mucosas urogenitales (cuello del útero, uretra, recto) y la oro y nasofaringe
(garganta), causando infecciones sintomáticas o asintomáticas.
„ El gonococo es siempre patógeno. Sin tratar, la gonorrea es la principal causa de
enfermedad inflamatoria pélvica (EIP), infertilidad, embarazo ectópico, dolor pélvico
crónico e infección gonocócica diseminada (IGD).
„ La probabilidad de coinfección con otras infecciones de transmisión sexual (ITS) puede
ser alta en algunos grupos de pacientes.
„ Los recién nacidos pueden adquirir infección gonocócica de la conjuntiva durante el
nacimiento.

CARACTERÍSTICAS GENERALES
TIPOS DE MUESTRAS:
- Secreción o exudado mucopurulento endocervical o uretral.
- Usar medio de transporte bacteriano (Stuart)
„ Los aislamientos de N. gonorrhoeae son sumamente
susceptible a las condiciones ambientales adversas,
las cepas deben ser incubadas a 35°C–36,5°C en una
atmósfera húmeda, enriquecida con CO2.

„ Se deben subcultivar las colonias que parecen ser


gonococos (diplococos gramnegativos con
crecimiento en colonias de color entre rosado y
café, de 0,5–1 mm de diámetro) de un medio de
cultivo primario selectivo a un medio de cultivo no
selectivo, como agar chocolate GC con1% de
suplemento definido, para obtener un cultivo puro
del aislamiento.

IDENTIFICACIÓN PRESUNTIVA DE N.
GONORRHOEAE
Morfología colonial de los aislamientos de Neisseria gonorrhoeae y especies
relacionadas (en medios selectivos para gonococo)
COLORACIÓN DE GRAM DE Neisseria gonorrhoeae
(muestra clínica)
„ La prueba de superoxol es sencilla; usa 30% de
peróxido de hidrógeno (H2O2) como reactivo.

„ Las reacciones de superoxol con N. gonorrhoeae


son típicamente “explosivas” (4+, muy fuertes), en
comparación con las reacciones más débiles (2+)
SUPEROXOL / de la mayoría de las especies de Neisseria no
gonocócicas.
CATALASA
„ Por el contrario, la prueba de la catalasa que se
realiza con peróxido de hidrógeno al 3% da
resultados más débiles.

„ Crecimiento de 18 a 24 horas de un cultivo puro de


un medio selectivo o no selectivo usando un asa de
inoculación o un hisopo estéril y colóquelo en una
lámina limpia.
„ Coloque una gota de reactivo en el
crecimiento usando un gotero o una
pipeta.
„ Las cepas de N. gonorrhoeae tienen una
reacción típica muy fuerte (4+), “explosiva”
al contacto con el reactivo superoxol.
„ La catalasa dará una reacción mucho más
débil (1+ ó 2+).
„ La resistencia a la colistina puede determinarse tanto
en un medio selectivo que contenga colistina (por
ejemplo, TMM) o en agar chocolate GC usando los
principios de la difusión en disco (con un disco de 10
RESISTENCIA A µg de colistina).

COLISTINA „ Una placa de 100-mm se puede dividir en cuatro


secciones, lo que permite probar dos cepas clínicas
junto con los controles positivo y negativo.

„ Si hubiera múltiples cepas clínicas para las cuales se


requiriera a la vez de la prueba de resistencia a la
colistina y los discos de colistina fueran del mismo
lote, sería apropiado hacer la prueba de los controles
positivo y negativo en una sola placa.
„ Prepare una suspensión de un cultivo puro de toda
la noche (aproximadamente igual a una turbidez
de 0,5 en la escala de McFarland) en caldo de
Mueller-Hinton o buffer salina fosfato (BSF).

Inocule la placa agar chocolate GC de manera


RESISTENCIA A „
uniforme usando un hisopo estéril o un asa. Deje
secar la placa hasta que no se vea la superficie
COLISTINA húmeda.

„ Aplique un disco de colistina (10 µg) al centro de la


placa y apriételo hacia abajo para asegurar que se
encuentra en contacto parejo con la superficie.

„ Incube a 35°C–36,5°C en atmósfera con 5% de CO2


y humedad incrementada durante 18–24 horas.
RESISTENCIA A
„ Las cepas de N. gonorrhoeae son resistentes a
la colistina y crecerán alrededor de todo el
COLISTINA
disco al igual que las cepas de N. meningitidis,
N. lactamica y K. denitrificans.
„ Por el contrario, las cepas comensales de
especies de Neisseria, la mayoría de las cuales
son susceptibles a la colistina, mostrarán zonas
de inhibición (halo) de al menos 10 mm de
diámetro con un inóculo no estandarizado.
„ Algunas cepas de biovares de N. subflava, N.
cinerea y M. catarrhalis pueden ser
suficientemente resistentes a la colistina e
incluso crecer sobre el disco. Es por ello que la
prueba de resistencia a la colistina no es
definitiva para identificar N. gonorrhoeae,
pero ayudará en la diferenciación entre estas
especies y muchas especies comensales.
ENFERMEDAD MENINGOCÓCICA
„ Se debe contactar
inmediatamente a un médico si se
observa en el paciente el inicio de
síntomas compatibles con
enfermedad meningocócica.
„ Los síntomas pueden aparecer
como una enfermedad tipo
influenza y empeorarse
rápidamente.
„ Los dos tipos más comunes de
enfermedad meningocócica son:
meningitis y septicemia.
„ Ambos tipos de infecciones son
muy peligrosas y pueden ser
SIGNOS Y SÍNTOMAS mortales para el paciente (incluso
en horas).
Los síntomas más
comunes son:

Fiebre

Dolor de cabeza

Rigidez de cuello

MENINGITIS
MENINGOCÓCICA
También se pueden
presentar otros síntomas:

Naúsea

Vómitos

Fotofobia

Estado mental alterado


(confusión)

MENINGITIS
MENINGOCÓCICA
Se puede presentar los siguientes síntomas:

Fiebre

Fatiga (cansancio inexplicable)

Vómitos

Pies y manos frías

Dolores muy fuertes de músculos, articulaciones, pecho y abdomen.

Respiración rápida

Diarrea

en etapas avanzadas, rash con manchas púrpuras

SEPTICEMIA
MENINGOCÓCICA
SEPTICEMIA
MENINGOCÓCICA
„ Edad: se diagnostica frecuentemente en infantes (niños menores
de 5 años), adolescentes y jóvenes adultos.
„ Este tipo de infección se puede diseminar fácilmente en grupos
muy grandes de personas (colegios, universidades, etc,)
„ Condiciones médicas: inmunosupresión aumenta el riesgo de
infección.
„ Viajes a lugares con casos de meningitis y/o septicemia.

FACTORES DE RIESGO
„ Es importante que el tratamiento ATB se inicie lo antes possible
(cloranfenicol es la primer elección).
„ Dependiendo de lo grave de la enfermedad, el paciente va a
necesitar tratamientos adicionales:
„ Soporte respiratorio.
„ Medicamentos para controlar la presión arterial.
„ Cirugía para remover el tejido necrótico.
„ Cuidado de la piel dañada.

TRATAMIENTO:
VACUNACIÓN PROFILAXIS CON
ANTIBIÓTICOS

PREVENCIÓN:
„ Es una enfermedad de transmisión sexual
(ETS) causada por Neisseria gonorrhoeae.
„ N. gonorrhoeae infecta las membranas
mucosas de los órganos reproductores,
incluyendo cérvix, útero y trompas de
GONORREA: falopio en mujeres, y la uretra en hombres
y mujeres.
„ N. gonorrhoeae también puede afectar la
mucosa oral, garganta, ojos y recto.
„ Porcontacto sexual con pene, vagina o ano de una
persona infectada.
„ Noes necesario que haya eyaculación para que sea
adquirida la infección.
„ También puede trasmitirse vía perinatal.
„ Existeriesgo de reinfección, a pesar de haber recibido
tratamiento anteriormente.

TRANSMISIÓN:
GRUPOS EN
RIESGO:
Personas sexualmente activas que
no utilicen métodos de protección.
HOMBRES:
„ Disuria SIGNOS Y
„ Secreción o descarga uretral de color blanco,
amarillo, que usualmente aparece de 1 a 14 SINTOMAS:
días después de la infección.
„ Dolor testicular y de escroto.
MUJERES:
„ Muchas mujeres son asintomáticas.
„ Disuria
„ Aumento en la descarga vaginal o sangrado
entre períodos.
Complicaciones:
„ Enfermedad inflamatoria pélvica
„ Infertilidad
„ Mujeres embarazadas y al bebé
Complicaciones…
Artritis infecciosas en la rodilla, tobillos y
codos.
Lesiones de piel (pequeños puntos
purulentos principalmente en las manos
y pies).
Acometimiento del hígado,
con hepatitis.
Endocarditis (infección de válvulas del
corazón).
Meningitis.
Osteomielitis (infección de los huesos).
TRATAMIENTO:
Penicilina
Ceftriaxona intramuscular o Ciprofloxacino por vía
oral.
Azitromicina
PREVENCIÓN?

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