UNIVERSIDAD DEL PAPALOAPAN

LICENCIATURA EN MEDICINA
HISTOLOGÍA I

PRACTICA 1. USO Y MANEJO DEL MICROSCOPIO

Objetivo. Adquirir o desarrollar el conocimiento del uso adecuado y seguro del microscopio.
Introducción.
Todos deberíamos mantener la curiosidad de un niño para observar las cosas pequeñas a través de una lente.
Un niño como un científico se pasa largas horas observando. El microscopio óptico es un instrumento de observación de
cuerpos transparentes. El ojo humano tiene una capacidad de resolución relativamente alta, pero objetos y organismos
pequeños no son visibles a simple vista. Los microscopios tienen un poder de resolución mucho más alto que el ojo
humano, y el poder de resolución es: la propiedad que se tiene para poder ver dos puntos muy juntos con toda claridad.
La histología es la ciencia que nos permite estudiar estructuras microscópicas de los seres vivos (Hilario E.)
El microscopio compuesto es instrumento de gran importancia, en la observación e investigación, por lo que es
necesario adquirir o desarrollar habilidades y destrezas necesarias para fortalecer el conocimiento del estudiante de
Medicina, el desempeño en actividades de colaborativas fomenta la interrelación con el equipo de trabajo y sus
profesores.
Es un instrumento delicado. Mediante la práctica de montaje, enfoque y observación, es posible determinar las
características cualitativas y cuantitativas de estructuras muy pequeñas y transparentes con el fin de penetrar al micro
mundo que era casi inexistente hasta antes de su invención.
Como los microscopios son instrumentos ópticos, es necesario obtener el aumento total de la combinación del
aumento del ocular y el aumento del objetivo, y se obtiene de la siguiente manera: el ocular tiene un determinado
aumento, que generalmente es de 10 aumentos o de 10X, los objetivos tienen diferente poder de resolución que puede
ser: 4X, 10X, 40X y 100X, el resultado final de número de aumentos se da multiplicando el aumento del ocular por el
aumento del objetivo que se está utilizando; ejemplo: ocular 10X y el objetivo es de 40X, el resultado será 400 aumentos
o 400X.
El poder de resolución es la capacidad que tiene un sistema óptico de separar los detalles. Al poder o límite de resolución
se le asigna un valor numérico y equivale a la mínima distancia que debe existir entre dos puntos para que cada uno de
ellos aparezca individualizado. El límite de resolución de los mejores lentes utilizados en los microscopios fotónicos
comunes es de 0.2 micras (0.0002 mm). La riqueza de detalles de una imagen estará dada por el poder de resolución. La
parte del sistema óptico que determina el límite de resolución de un sistema óptico es el objetivo, aunque sin embargo
éste puede ser modificado ligeramente por el complejo condensador-diafragma.
Objetivos específicos:

1. Manejar en forma adecuada un microscopio óptico.

2. Identificar las partes ópticas, mecánicas y de iluminación de un microscopio óptico o fotónico.
3. Mencionar la función de los principales elementos de las partes mecánicas, ópticas y de iluminación de
un microscopio fotónico.
4. Mencionar los procedimientos de rutina para el manejo del microscopio fotónico.
5. Comprender como se realiza la iluminación de Koheler y usos.
6. Enfocar y observar en forma adecuada una preparación histológica.

Lugar: Laboratorio de docencia.

Duración de la sesión: 2 horas
Semana de ejecución La práctica se realizará en la segunda semana de clases.
Material y equipo:
  Microscopio fotónico, preparaciones histológicas.
 microscopios ópticos
 Laminillas para observación
 Reactivos: Los necesarios
 Papel filtro o papel de óptica
 Tabla de notas
 Practica impresa

Desarrollo de la práctica.

La práctica, consiste en aplicar el conocimiento adquirido durante las lecturas y en las sesiones del taller,
después de explicar a los estudiantes de Medicina, las partes que conforman un microscopio óptico compuesto,
mencionando la parte mecánica y de soporte, la parte óptica y la de iluminación. También se indicará el uso de cada una
de las partes, así como su cuidado y transporte. Trabajaran en parejas explicando uno al otro el manejo del equipo y
aplicando el conocimiento a la práctica en tiempo estimado de 15 min desde el encendido del equipo, el montaje y la
observación de la muestra de estudio en todos los objetivos, regulando la iluminación y después de utilizarlo guardar el
microscopio según corresponda.

Conocimiento del microscopio.

Para su estudio, se pueden distinguir tres partes: una mecánica, óptica y de iluminación.
1.- Parte mecánica: Constituye el soporte de la parte óptica y consta de:
 El estativo: formado por el pie o base del microscopio y el brazo o asa. (en caso de traslado del microscopio,
debe sujetarse del brazo y pie con ambas manos)
 La platina: placa cuadrada o circular en la que se apoya la preparación a observar.
Dispone de pinzas para sujetar la preparación. La platina se halla perforada en el centro para dejar paso a los
rayos luminosos procedentes de la fuente de luz.
 El tubo: pieza cilíndrica y hueca en cuya parte superior se sitúa una lente (el ocular) y en la inferior se encuentra
una pieza giratoria llamada revólver que lleva enroscadas otras lentes (los objetivos) tres, aunque en ot o más
depende del modelo de microscopio.
 Tornillos: de enfoque, permiten desplazamiento del tubo mediante una cremallera dentada, al acercar o alejar el
tubo de la preparación se consigue el enfoque de esta. Son el tornillo macrométrico que hace un desplazamiento
rápido y el tornillo micrométrico que hace un avance fino.

2.- Parte óptica: Sistemas de lentes que consta de:

 El ocular: La lente sobre la que se aplica el ojo del observador. Aumentar la imagen producida por el objetivo.
Su aumento viene señalado por una cifra y el signo X (5X, 10X, 20X, etc.)
 El objetivo: es la lente que se encuentra sobre el objeto (preparación) a observar. Es el elemento óptico más
importante, puesto que es el que produce la imagen aumentada del objeto, una imagen, que observamos
invertida (el objetivo funciona como una cámara fotográfica)
 El objetivo proyecta una imagen aumentada en dirección del ocular. Los objetivos presentan en la
porción metálica una serie de datos que a continuación se describen (Fig. 1):

Fig. 1. Objetivos 4x, 10x, 40x, 100x.

 a) Aumento nominal. viene grabado en el cuerpo del objetivo y siempre se asocia con la longitud del tubo
del microscopio (o la distancia entre el objetivo y el ocular), microscopios americanos la distancia es de
160mm y para los europeos, japoneses y rusos es de 170mm.
b) Aumento total: es el que se observa al mirar por el ocular.
Para calcularlo basta multiplicar el aumento primario del objetivo por el aumento del ocular.

Ejemplo: Ocular 15X. Objetivo 40X= 15 X 40= 600X. El objeto observado está aumentado 600 veces su tamaño
natural.

Condensador-diafragma.

3.-Iluminación: está formado por una lámpara que ilumina directamente el objetivo.
Existe también un diafragma que se puede abrir o cerrar mediante una palanquita regulando así la intensidad
luminosa.

Sistema de iluminación (fuente de luz). Consta de las siguientes partes:

Regulador de voltaje, lámpara y el condensador.
Regulador de voltaje.

Lámpara. luz.

Técnica:
Después de leer todas las instrucciones que a continuación se describen, maneja el microscopio para enfocar
una laminilla o preparado histológico.

Iluminación. Conecta la clavija al enchufe ya sea de la lámpara o del microscopio con luz integrada. Coloca el
interruptor en encendido y procura que la perilla que está sobre su superficie esté colocada en el punto más
bajo de la iluminación, posteriormente aumentar paulatinamente la iluminación girándola lentamente hacia la
derecha sin llegar a la escala roja.

Colocación de la preparación. Se coloca el portaobjetos sobre la platina, procurando siempre que el

cubreobjetos quede hacia arriba pues la distancia entre el objetivo y la laminilla está calibrada de esta forma.
Haciendo el procedimiento antes mencionado se evita romper la preparación con alguno de los objetivos.
Posteriormente el portaobjetos se fija, por medio de dos pinzas o con una pinza móvil. Esta pinza debe
accionarse hacia atrás primeramente para permitir la entrada de la laminilla; posteriormente se suelta
lentamente para permitir que la pinza aprisione el portaobjetos, el cual queda fijo de esta manera. Por medio de
los tornillos del carro, se mueve el portaobjetos para que el objeto a observar quede exactamente arriba del
condensador y pueda recibir el haz luminoso.

Enfoque del objeto.

En los microscopios binoculares es necesario regular la abertura de los oculares de tal forma que pueda
observar cómodamente con ambos oculares. Cierre ligeramente el ojo izquierdo, enfoque la preparación
utilizando exclusivamente el tornillo macrométrico. En algunos microscopios binoculares se encuentra sobre el
tubo del ocular izquierdo una escala grabada la cual se denomina tornillo dióptrico y sirve para calibrar el
microscopio a la agudeza visual en sus ojos. La observación de ahora en adelante se hará con ambos ojos.

Una vez enfocado con el tornillo macrométrico proceda a enfocar la preparación histológica con el tornillo
micrométrico. La observación con el objetivo panorámico sirve para dar una idea general del objeto observado,
procure mirar siempre varios campos microscópicos y seguir el contorno del corte histológico que observe. Gire
el revólver colocando la yema de los dedos índice y pulgar sobre la superficie dentada del mismo, de acuerdo
con las manecillas del reloj hasta sentir un tope o pause suave, que de esta manera el siguiente objetivo (10X)
estará en el sitio adecuado.

Proceda a enfocar la preparación únicamente con el tornillo micrométrico. Observe varios campos
microscópicos antes de pasar al siguiente objetivo y realice el mismo procedimiento descrito.
Después de terminar una sesión de observación, se coloca en posición de observar el objetivo 4X, se quita la
preparación, se apaga el microscopio, se desenchufa la clavija y finalmente se cubre para evitar que se
empolve. El polvo es el peor enemigo del microscopio.

ILUMINACIÓN DE KOEHLER
Este procedimiento sólo puede hacerse en cierto tipo de microscopios. Estos siempre poseen condensador
provisto de lentes y diafragma integrado, además de un sistema de iluminación que contenga lente y diafragma
de la lámpara.

Procedimiento
1. Conectar la clavija del regulador en el enchufe.
2. Colocar el objetivo panorámico en posición de observar.
3. Quitar la lentilla de la lámpara. La lámpara de ciertos microscopios tiene grabado por un lado una letra
H y una letra L; para quitar la lentilla de la lámpara se coloca la perilla en posición H y para ponerla en
posición L.
4. Cerrar el diafragma del condensador, esto puede lograrse por medio de una palanca colocada en el
borde derecho del mismo haciéndola girar.
5. Quitar los filtros del condensador, éstos son filtros de cristal montados en aros sobre la parte inferior
del propio condensador.
6. Girar el tornillo del condensador hasta subir el porta condensador hasta el tope.
7. Encender la lámpara colocando el interruptor del regulador en encendido.
8. Enfocar con el tornillo macrométrico el filamento del foco procurando que la perilla del regulador esté
en luz muy baja, esto se hace con el objeto de evitar una gran intensidad luminosa que pudiera dañar
la retina de los ojos.
9. Centrar el filamento del foco, esto se logra en ciertos microscopios por medio de perillas laterales que
están sobre el extremo posterior de la lámpara.
10. Colocar nuevamente la lentilla de la lámpara.
11. Cerrar el diafragma de la lámpara, en ciertos modelos de microscopios esto se logra con una palanca
que se encuentra en el extremo anterior de la lámpara.
12. Centrar el halo luminoso que se aprecia en el campo visual, en algunos modelos de microscopios, esto
puede hacerse por medio de unas perillas laterales situadas en el extremo anterior de la lámpara.
13. Cambiar el objetivo seco débil (10) y enfocar el borde del diafragma.
14. Abrir el diafragma hasta que desaparezcan los bordes oscuros de éste.

Estos dos últimos pasos deberán repetirse cuantas veces sea necesario para centrar el diafragma. La
importancia de realizar la iluminación de Koehler es el de obtener una iluminación adecuada del campo
microscópico, de tal forma que dicha intensidad luminosa no sea dañina para le retina de los ojos del
observador. Por otro lado, una ventaja secundaria es la de alargar la vida del filamento del foco.

Interpretación y observaciones:
Con apoyo del docente, cada alumno identificará una parte del microscopio, mencionando su función y manejo.
En parejas o equipos de 3 se realizará observación de tejidos epiteliales e iluminación de Koheler.

Cuidado del microscopio:

1.- Al finalizar el trabajo, regresar el objetivo de menor aumento en posición de observación, reducir la
iluminación, y asegurarse de que la parte mecánica de la platina no sobresale del borde de esta y cubrir el
microscopio.
2. Cuando no se está utilizando el microscopio, hay que mantenerlo cubierto con su funda para evitar que se
ensucien y dañen las lentes. Si no se va a usar de forma prolongada, se debe guardar en su caja dentro de un
armario para protegerlo del polvo.
 3. Nunca tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, limpiarlas muy suavemente con un papel de óptica.
4. No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se está utilizando el microscopio.
5. Después de utilizar el objetivo de inmersión, hay que limpiar el aceite que queda en el objetivo con papel para,
óptica. En su caso, se pasará el papel por la lente en un solo sentido y con suavidad. Si el aceite ha llegado a
secarse y pegarse en el objetivo, hay que limpiarlo. No hay que abusar de este tipo de limpieza, con xilol o
mezclas porque si se aplican estos disolventes en exceso se pueden dañar las lentes y su sujeción.
6. No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio (macrométrico, micrométrico, platina, revolver y
condensador).
7. Para cambio de objetivo se gira el revólver y observando la preparación para prevenir el roce de la lente con la
muestra. No cambiar nunca de objetivo agarrándolo por el tubo de este, ni cuando se está observando a través
del ocular.
8. Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama sobre ella algún líquido, secarlo con un paño.
Si se mancha de aceite, limpiarla con un paño humedecido en xilol.
9. Es conveniente limpiar y revisar siempre los microscopios al finalizar la sesión práctica y, al acabar el curso,
encargar un técnico un ajuste y revisión general de los mismos.

1. ¿Define qué es el poder de resolución?

2. ¿De cuántos sistemas consta el microscopio escolar que utilizaste?
3. ¿Cuántos tipos de microscopios existen? menciónalos:
4. Dibuja el siguiente esquema y escribe los nombres de cada parte que señalan las líneas que apuntan al microscopio
de la figura 2?
Figura 2.- Microscopio óptico, actividad de la práctica.

5.- Actividad: Investigar los tipos y usos de microscopio utilizados en medicina y elaborar una línea de tiempo de la
historia del microscopio, el reporte de la practica deberá entregarse en 2 días a partir de la práctica en su libreta, (3
cuartillas).
REPORTE DE LA PRACTICA EN LIBRETAS. VER RÚBRICA

Agregar SI. unidades de medición y alfabeto griego con Bibliografía o enlaces de investigación actualizada y confiable
(En formato APA 7)
Bibliografía:
Hilario, E. (2010). Prácticas de histología humana. Servicio Editorial de la Universidad del País Vasco/Euskal Herriko
Unibertsitatearen Argitalpen Zerbitzua. ISBN: 978-84-690-7712-2
 RECOMENDACIONES IMPORTANTES PARA UN MEJOR DESEMPEÑO

ANTES DE 1. Lectura y análisis previo de los pasos de la práctica con el objeto

LA PRÁCTICA de:
 Investigar Información relacionada con el tema.
 Organizar las tareas para disminuir el tiempo de trabajo.
 Bosquejar por escrito el problema que plantea la práctica.
 Establecer una o varias hipótesis de trabajo

2. Antes de iniciar la experiencia aclarar los detalles técnicos.

DURANTE 3. Registrar en la bitácora las observaciones realizadas

LA PRÁCTICA
4. Al finalizar la experiencia, concretar resultados.

5. Escribir a manera de pregunta cualquier duda que se presente

para consultar durante la misma con el profesor.
DESPUÉS DE 6. Analizar e interpretar los resultados.
LA PRÁCTICA

7. Redactar el informe de la experiencia realizada y analizar en

equipo.
 RÚBRICA GENERAL PARA EL REPORTE DE LA PRÁCTICA

Presentación Esta sección presenta los hechos (resultados) de forma Contenido 5

resultados descriptiva. relacionado con
la práctica
Valor 5 Los resultados pueden presentarse en forma de tablas y
figuras.
Contenido breve, 3
El autor tiene la libertad de utilizar la organización que relacionado
mejor sea para lograr los objetivos del estudio.
Contenido no 1
relacionado

Análisis En esta sección el alumno explicará porque obtuvo esos Contenido 5

resultados y no otros. relacionado con
Valor 5 la práctica
Así como compararlos con los resultados obtenidos por
otros investigadores.
Contenido breve, 3
relacionado

Contenido no 1
relacionado

Conclusiones Pueden ser descriptivas o inferenciales. Contenido 2.5

relacionado con
Valor 2.5 Afirmación que generaliza un resultado. Redactada como la práctica
conclusión. Que la conclusión este de acuerdo con los
resultados obtenidos.
Contenido breve, 2
relacionado

Contenido no 1
relacionado

Referencias Formato APA 7 3 citas o 2.5

bibliográficas consultas y
referencias
Valor 2.5
2 citas o 2
consultas y
referencias

1 cita o consultas 1
y referencias