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GUIA Práctica 8 Enzimas Ox-Red Respiración 2023-1
GUIA Práctica 8 Enzimas Ox-Red Respiración 2023-1
GUIA Práctica 8 Enzimas Ox-Red Respiración 2023-1
ASIGNATURA
BIOQUÍMICA
SEMESTRE ACADÉMICO
2023-I
TÍTULO
ENZIMAS DE ÓXIDO REDUCCIÓN DETERMINACIÓN DE LA RESPIRACIÓN CELULAR MEDIANTE EL MÉTODO
MANOMÉTRICO
DOCENTE
Woll Tosso, Patricia Gloria
INTEGRANTES
Gonzales Cañahuire, Ailin Fiorela - 22100028
Junco Flores, Alonso - 22100098
Morosini Inga, Paola - 22100099
Roca Melgarejo, Ana Bethsabe - 20100048
Salinas Inga, Abel Arturo - 22100077
Valencia Saavedra, Zinnia Mayrut - 22100111
FECHA DE ENTREGA
04/06/2023
LIMA-PERÚ
III. INFORME
En el video https://youtu.be/zfUDsxD4ZhY :
La botella contiene hidróxido de sodio, azul de metileno → permite ver a manera del cambio de
por eso es incoloro, por teoría sabemos que cuando es incoloro se ha reducido el azul de metileno, a pesar
El azul de metileno cuando se adhiere a un agente reductor en este caso la glucosa, el agente
reductor se oxida. El azul de metileno es un compuesto reversible así como se oxida se reduce.
Se pone azul cuando se oxida en presencia de oxígeno, en el experimento al mover tiene contacto
el oxígeno con el metileno por lo tanto este se oxida. Siempre y cuando el el azul de metileno este en
contacto con el oxígeno será azul, así como paso que la parte baja del experimento cambió de color
En el video https://www.youtube.com/watch?v=xEgDFrf-Pho
Contiene hidróxido de sodio, sacarosa y azul de metileno, no se decolora debido a que la sacarosa
es un disacárido y este tiene que ser hidrolizado para que el azul de metileno se reduzca y así podamos
En la primera etapa observamos que el azul de metileno no se reduce por lo que la solución esta
de color azul. Cuando en la solución se le agrega la glucosa esta sí reacciona con el azul de metileno,
esta solución en un vaso precipitado se la lleva a calentar, así con calor y en un medio ácido, así
El tubo es para comparar con los otros tubos 1,2 y 3 donde se puede apreciar la enzima succinato
deshidrogenasa, tanto el inhibidor que se usó como el malonato y las 3 gotas de aceite mineral que se
utilizó y el homogeneizado de hígado. Por el cual sirve para comparar la interacción, reacción de estos en
El tubo 1 después de cierto tiempo, se observa la forma reducida del azul de metileno, o sea
incoloro, pero en la parte de la superficie se observa un tono azul y esto es debido al oxígeno que es del
ambiente. A parte se observo que si se mueve el tubo se torna de color azul debido al oxigeno que se
El aceite al ser un líquido denso puede dificultar la entrada del oxígeno. Es por ello que cuando
los tubos que contienen azul de metileno reducido (incoloro), el aceite va a ayudar a manifestar esta forma
reducida. Ademas se sabe que el azul de metileno interacciona rapidamente cuando esta en contacto con
el oxigeno y tornarse de color azul, por ello el aceite impide eso y manifestar lo contrario, la forma
reducida.
El malonato tiene una inhibición competitiva, ya que el malonato y el succinato compiten por la
diclorofenol indofenol?.
Primero se sabe que el 2,6 diclorofenol indofenol es un indicador tipo redox. Por lo tanto se
el porqué.
No se podría apreciar las reacciones, ya que es músculo y hay mayor gasto energético.
Tubo b: Este no tendrá ninguna reacción, ya que no se utilizó sustrato y se mantendrá el color
Tubo 1: Presencia de una mayor cantidad de buffer de sodio, por lo cual se mantendrá constante
el pH.
Tubo 2: Tiene un tono claro al igual que el tubo 1 y 3, pero menor cantidad de buffer de sodio
(intensidad diferente)
Tubo 3: Tono claro al igual que el 1 y 2 y menor cantidad tanto del tubo 1 y 2 de buffer de sodio.
Tubo 4: En este tubo a diferencia de los demás se añadió malonato de sodio que funciona como
Tubo 5:Se ve un tono medio, y nos damos cuenta que no tiene malonato de sodio al igual que el
tubo 1, 2 y 3, pero si tiene oxalato de sodio a diferencia del tubo 4, por lo tanto se le ve un color medio
incoloro.
Estos tubos son muestras de control, se usarán para comparar con los resultados obtenidos de la
enzima.
a. ¿Qué es un manómetro?
sistema cerrado, como un gas o un líquido. Consiste en un tubo conectado al sistema de interés, que
contiene un fluido (generalmente mercurio o aceite) y una escala graduada para indicar la presión en una
Cuando se aplica presión al sistema, el fluido dentro del manómetro se desplaza, lo que se refleja
en la escala graduada. Esto permite al usuario conocer el valor de la presión presente en el sistema. Los
manómetros pueden tener diferentes diseños y rangos de medición, dependiendo de su aplicación
específica.
especialmente útiles para garantizar la seguridad y el rendimiento de los equipos y sistemas que operan
lleno de un líquido, generalmente mercurio o agua, para medir la diferencia de presión entre dos puntos.
transparente, que está abierto en ambos extremos y tiene una forma similar a la letra "U" mayúscula. El
tubo se llena parcialmente con el líquido de medición, dejando espacio para que el líquido se mueva en
Para utilizar el manómetro de tubo U, se conecta uno de los extremos del tubo a la fuente de
presión que se desea medir, mientras que el otro extremo se deja abierto o se conecta a la referencia de
presión. El líquido en el tubo se desplazará hacia arriba o hacia abajo en respuesta a las diferencias de
presión entre los dos puntos, creando desequilibrio de altura en los brazos del tubo en forma de U.
La diferencia de altura entre los brazos del tubo se puede medir utilizando una escala graduada
adjunta al tubo o mediante la lectura de la posición del líquido en relación con una marca de referencia.
La diferencia de altura proporciona una indicación de la diferencia de presión entre los puntos de
medición.
acondicionado), sistemas hidráulicos, entre otros. Sin embargo, cabe destacar que en muchos casos, se
utilizan dispositivos electrónicos más precisos y digitales para medir la presión en aplicaciones modernas.
c. Fundamente el rol que tiene cada uno de los reactivos empleados en el experimento.
El hidróxido de potasio (KOH) cumple con la función de atrapar el dióxido de carbono (CO2)con
el cual reacciona y se convierte en carbonato de potasio (K2CO3) KOH + CO2 → K2CO3 + H2O ,
entonces así libera agua (H2O), sin embargo no existe ninguna reacción química en el tubo con las perlas
de plástico.
diámetro interno del tubo del manómetro mide 1 mm, en el respirómetro 1, el líquido en el interior
del manómetro avanzó 30 mm y en el respirómetro 2 avanzó 0,5 mm. ¿Por qué en uno de los
3
Consumo de O2 (𝑚𝑚 ) = volumen desplazado del líquido
3
- Respirómetro 1: ((0,5 mm)2 * 3,14 * 30 mm = 23.55 𝑚𝑚
3
El consumo de O2 en el respirómetro 1 fue de 23.55 𝑚𝑚
3
- Respirómetro 2: ((0,5 mm)2 * 3.14) * 0,5mm = 0.3925 𝑚𝑚
3
El consumo de O2 en el respirómetro 2 fue de 0.3925 𝑚𝑚
La distinción entre los dos tubos de ensayo radica en que uno contiene materia viva que requiere
oxígeno para su supervivencia, lo cual ocasiona cambios en el tiempo dentro del tubo U. Este fenómeno
es conocido como respiración celular. Por otro lado, el otro tubo contiene materia inerte, como perlas de
Una de las diferencias notables se encuentra en los tubos de los manómetros, donde se emplea un
plástico transparente con líneas visibles para observar los cambios en su interior. Además, poseen un tubo
adicional que facilita la colocación de la tapa sin alterar la presión, y por ende, los niveles del líquido.
Otro contraste se evidencia en los materiales vivos utilizados en el experimento. Mientras que en
En el experimento del vídeo, se inicia colocando un algodón en ambos tubos para impedir la
absorción de gases. Luego se añade KOH y se cubre con otro algodón. A partir de ahí, el procedimiento
para insertar los materiales en los tubos es similar. Finalmente, se asegura el tubo extra para evitar la fuga
Habría un aumento de la cantidad enzimática, lo que haría variar el factor del tiempo de
https://www.pnas.org/content/pnas/100/2/473.full.pdf
(UQ) al unirse a una región que se superpone parcialmente con el sitio de unión fisiológico de UQ pero no
son capaces de bloquear por completo la transferencia de electrones desde los centros de hierro-azufre en
V. REFERENCIAS
Enzymology” Volumen 4 (Editado por S.P. Collowick y N.O. Kaplan). Academic Press; pp. 273-329 New
York.
- Harper (2012) Bioquímica ilustrada. Editor: Murray R. y colaboradores. Edit. McGraw Hill. 29a
Edic.
and Respiratory Enzyme Activity in Skeletal Muscle. JBC, Vol. 242, Nº 9, pp. 2278- 2282, 1987.
Material complementario:
https://youtu.be/5haeqvGx7_M
https://www.youtube.com/watch?v=x5PDqW41GeA
https://www.youtube.com/watch?v=RRRzC1yohHY
- https://es.khanacademy.org/science/ap-biology/cellular-energetics/cellular-respirati
on-ap/a/intro-to- cellular-respiration-and-redox
- Pantigoso Flores, C. Nota de clase. El respirómetro de O. Warburg (Lectura sobre Otto Warburg
y la creación de su manómetro).
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