Informe de Laboratorio Nº09

UNIVERSIDAD NACIONAL JORGE BASADRE GROHMANN
FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA EN INDUSTRIAS ALIMENTARIAS
INFORME DE LABORATORIO Nº09

ESTUDIANTE:
CLAUDIA NAYELI MAMANI VELASCO
CODIGO:
2019-111022
CURSO:
BIOQUIMICA
TEMA:
LIPASA PANCREATICA
DOCENTE:
SOLEDAD BORNAZ
LIPASA PANCREATICA
1. INTRODUCCION
Gran parte de los alimentos que ingiere un individuo está constituido por grasas,
en las cuales los triglicéridos representan un 90%. Los triglicéridos al nivel del
intestino proximal se hidrolizan en sus componentes debido a la acción de la
lipasa pancreática, cuya acción se incrementa por la presencia de sales biliares
que favorecen su emulsión. El pH para la lipasa pancreática es aproximadamente
8. Los triglicéridos se hidrolizan en ácidos grasos, glicerol, mono y diglicéridos.
Todos estos componentes son emulsionados hasta pequeñas micelas (40 a 100Ǻ)
que se absorben fácilmente.
Los aceites son líquidos constituidos básicamente de ácidos grasos insaturados,
como el palmítico, esteárico y el ácido mirístico.
La hidrólisis de los triglicéridos del aceite de oliva usando pancreatina, liberará
ácidos grasos que podrán ser titulados.
2. OBJETIVOS
• Demostrar la hidrólisis de los triglicéridos del aceite de oliva por la
lipasa pancreática.
• Demostrar la acción activadora de las sales biliares sobre la lipasa
pancreática la importancia del pH.
3. MATERIAL Y METODOS
3.1 MATERIALES
3.1.1 Materiales biológicos
• Emulsion de aceite
3.1.2 Materiales de vidrio
• Tubos de ensayo
• Pipetas
• Vaso de precipitación
3.1.3 Reactivos
• Solución de sales biliares
• Fenolftaleína 1%
• Solución de pancreatina
• Hidróxido de sodio 0,1N
• Buffer fosfato pH 8
• Agua destilada
3.1.4 Equipos y otros
• Cocina
• Guantes
3.2 METODOS
Mediante la observación y exploración se aplicará el método de titulación
que nos demuestra la cantidad de ácidos grasos libres por acción de la
enzima, con la ayuda del indicador fenolftaleína.
4. PROCEDIMIENTO
4.1 Titulación de ácidos grasos libres
• En 6 tubos de ensayo medir lo siguiente:

1 2 3 4 5 6
Emulsión de aceite 3ml 3ml 3ml 3ml 3ml 3ml
Buffer fosfato pH 8 2ml 2ml
Sales biliares 2ml 2ml
Pancreatina 2ml 2ml 2ml
Pancreatina hervida 2ml 2ml 2ml
Agua destilada 2ml 2ml
• Mezclar los sistemas y colocarlos en baño maría a 37°C durante 30
minutos, agitando los tubos de ensayo a intervalos.
• Al finalizar el tiempo de incubación, retirar los tubos de ensayo del
baño y agregar a cada uno 3 gotas de fenolftaleína.
• Luego realizar la titulación de los ácidos grasos liberados con
hidróxido de sodio 0,1M hasta que aparezca una coloración rosada.
• Anotar las cantidades gastadas de la base en mililitros
5. RESULTADOS
Tubo 1: la ausencia de sales biliares desestabiliza la emulsión y no facilita el
contacto entre enzima y sustrato.
Tubo 2: se observa una coloración rosa debido a que se le adicionó la enzima ya
desnaturalizada.
Tubo 3: se observa una coloración ya que se le agrego sales biliares, al emulsificar,
los lípidos lograron una mayor superficie de acción de la enzima.
Tubo 4: no se observa coloración debido a que no se le agrego el extracto
enzimático, al no tener enzima que actúe sobre los lípidos, al titular se encontró
muy pocos ácidos grasos.
Tubo 5: no se observa cambio de color debido a la ausencia de sales biliares, por
lo tanto, la enzima no pudo actuar con gran eficiencia.
Tubo 6: en este caso la enzima esta desnaturalizada y no hay presencia de sales
biliares que estabilicen la emulsión por lo tanto no hay presencia de ácidos grasos.
6. CONCLUSIONES
Las sales biliares emulsionan las grasas, es decir, ocasionan que los lípidos se
hagan solubles en agua, también dividen los acidos grasos hidrolizados y los
monogliceridos para prevenir la formación de triglicéridos. La lipasa es una
enzima de la clase de las hidrolasas, que se usa en el organismo para disgregar los
lípidos de los alimentos de manera que se puedan absorber, la acción de la lipasa
pancreática es favorecer la hidrolisis de los lípidos; su carencia resulta en la no
digestión de las grasas.
La lipolisis se incrementa en proporción con el área de superficie de las gotitas de
grasa, y la presencia de sales biliares, estas logran una mayor superficie de acción
para la lipasa pancreática, aumentando su eficiencia. La lipasa pancreática cataliza
la hidrolisis de los triglicéridos convirtiéndolos en 1-2 diacilglicerol y 2
acilglicerol que vienen hacer ácidos grasos. La fenolftaleína es un indicador redox
que cambia de color en medio básico, es decir, detecta el exceso de NaOH que no
se han unido a un ácido graso. Por lo tanto, mientras mayor sea la concentración
de ácidos grasos en la solución, mayor será la cantidad de gotas de NaOH
utilizado.
7. CUESTIONARIO
7.1 ¿Es esencial para la digestión la función de sales biliares en el tracto digestivo.
Sería normal la absorción de lípidos en esas condiciones?
La bilis ayuda a la digestión y ayuda a las enzimas en su cuerpo para
descomponer las grasas en ácidos grasos, que pueden introducirse en el cuerpo
a través del tracto digestivo
7.2 Comente el rol del ATP y Mg en la beta-oxidación de los ácidos grasos.
La beta-oxidación es un proceso que se encarga de “desestructurar”
progresivamente las largas cadenas de carbonos de los ácidos grasos y
convertirlas en moléculas más pequeñas.
El ATP y el Mg son activadores de los acidos grasos.
7.3 ¿Cómo realizaría usted la misma práctica con otra metodología?

Por la acción emulsificante de las sales biliares sobre las grasas
7.4 ¿Cómo se inhibe la reacción enzimática? Explique.
Los inhibidores enzimáticos son moléculas que se unen a enzimas y
disminuyen su actividad. La unión de un inhibidor puede impedir la entrada
del sustrato al sitio activo de la enzima y/u obstaculizar que la enzima catalice
su reacción correspondiente.
8. BIBLIOGRAFIA
• Murray R, BenderD, Botham K, Kenelly P, Rodwell V, Weil P. Harper.
Bioquimica ilustrada. 29 ed. México:McGraw – Hill Interamericana
editores, 2013.
• Conceptos. Emulsion química. Citado el 10 de octubre de 2020.
Recuperado de https://concepto.de/emulsion-quimica/
• Román Gonzales Mora. Lifeder. Lipasa pancreática: estructura,
funciones, valores normales. Citado el 10 de octubre de 2020.
Recuperado de https://www.lifeder.com/lipasa-pancreatica/.

Informe de Laboratorio Nº09 - Lipasa Pancreatica

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UNIVERSIDAD NACIONAL JORGE BASADRE GROHMANN

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

intestino proximal se hidrolizan en sus componentes debido a la acción de la

lipasa pancreática, cuya acción se incrementa por la presencia de sales biliares

que favorecen su emulsión. El pH para la lipasa pancreática es aproximadamente

8. Los triglicéridos se hidrolizan en ácidos grasos, glicerol, mono y diglicéridos.

que se absorben fácilmente.

Los aceites son líquidos constituidos básicamente de ácidos grasos insaturados,

como el palmítico, esteárico y el ácido mirístico.

La hidrólisis de los triglicéridos del aceite de oliva usando pancreatina, liberará

ácidos grasos que podrán ser titulados.

• Demostrar la hidrólisis de los triglicéridos del aceite de oliva por la

• Demostrar la acción activadora de las sales biliares sobre la lipasa

pancreática la importancia del pH.

3.1.2 Materiales de vidrio

• Solución de sales biliares

• Hidróxido de sodio 0,1N

3.1.4 Equipos y otros

Mediante la observación y exploración se aplicará el método de titulación

que nos demuestra la cantidad de ácidos grasos libres por acción de la

enzima, con la ayuda del indicador fenolftaleína.

4.1 Titulación de ácidos grasos libres

• En 6 tubos de ensayo medir lo siguiente:

Emulsión de aceite 3ml 3ml 3ml 3ml 3ml 3ml

Buffer fosfato pH 8 2ml 2ml

Sales biliares 2ml 2ml

Pancreatina 2ml 2ml 2ml

Pancreatina hervida 2ml 2ml 2ml

Agua destilada 2ml 2ml

• Mezclar los sistemas y colocarlos en baño maría a 37°C durante 30

minutos, agitando los tubos de ensayo a intervalos.

• Al finalizar el tiempo de incubación, retirar los tubos de ensayo del

baño y agregar a cada uno 3 gotas de fenolftaleína.

• Luego realizar la titulación de los ácidos grasos liberados con

hidróxido de sodio 0,1M hasta que aparezca una coloración rosada.

• Anotar las cantidades gastadas de la base en mililitros

contacto entre enzima y sustrato.

Tubo 2: se observa una coloración rosa debido a que se le adicionó la enzima ya

Tubo 3: se observa una coloración ya que se le agrego sales biliares, al emulsificar,

los lípidos lograron una mayor superficie de acción de la enzima.

Tubo 4: no se observa coloración debido a que no se le agrego el extracto

muy pocos ácidos grasos.

Tubo 5: no se observa cambio de color debido a la ausencia de sales biliares, por

lo tanto, la enzima no pudo actuar con gran eficiencia.

Tubo 6: en este caso la enzima esta desnaturalizada y no hay presencia de sales

monogliceridos para prevenir la formación de triglicéridos. La lipasa es una

lípidos de los alimentos de manera que se puedan absorber, la acción de la lipasa

pancreática es favorecer la hidrolisis de los lípidos; su carencia resulta en la no

digestión de las grasas.

La lipolisis se incrementa en proporción con el área de superficie de las gotitas de

la hidrolisis de los triglicéridos convirtiéndolos en 1-2 diacilglicerol y 2

acilglicerol que vienen hacer ácidos grasos. La fenolftaleína es un indicador redox

de ácidos grasos en la solución, mayor será la cantidad de gotas de NaOH

Sería normal la absorción de lípidos en esas condiciones?

La bilis ayuda a la digestión y ayuda a las enzimas en su cuerpo para

descomponer las grasas en ácidos grasos, que pueden introducirse en el cuerpo

a través del tracto digestivo