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    Curso Malaria - Descargable Proceso Tinción

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    Este documento proporciona instrucciones detalladas para realizar un diagnóstico microscópico de la malaria mediante tinción de Giemsa. El proceso incluye fijar una muestra de sangre con metanol, preparar una solución de colorante de Giemsa al 10% en buffer de fosfatos pH 7.2, teñir la muestra durante 8-10 minutos, lavar para eliminar el exceso de colorante y secar la lámina antes de examinarla al microscopio para identificar parásitos de la malaria.

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    Curso Malaria - Descargable Proceso Tinción

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    Este documento proporciona instrucciones detalladas para realizar un diagnóstico microscópico de la malaria mediante tinción de Giemsa. El proceso incluye fijar una muestra de sangre con metanol, preparar una solución de colorante de Giemsa al 10% en buffer de fosfatos pH 7.2, teñir la muestra durante 8-10 minutos, lavar para eliminar el exceso de colorante y secar la lámina antes de examinarla al microscopio para identificar parásitos de la malaria.

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    Este documento proporciona instrucciones detalladas para realizar un diagnóstico microscópico de la malaria mediante tinción de Giemsa. El proceso incluye fijar una muestra de sangre con metanol, preparar una solución de colorante de Giemsa al 10% en buffer de fosfatos pH 7.2, teñir la muestra durante 8-10 minutos, lavar para eliminar el exceso de colorante y secar la lámina antes de examinarla al microscopio para identificar parásitos de la malaria.

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    Curso teórico de autoaprendizaje

    Diagnóstico microscópico
    de la malaria

    PROCESO DE TINCIÓN

    MATERIALES:

    Equipo de protección: Lámina con gota Metanol Cronómetro


    guantes y gabacha gruesa y frotis
    (término usado en Centro sanguíneo
    América para nombrar la previamente seca
    bata o delantal).

    BUFFER

    Colorante de Giemsa Buffer de fosfatos Bandeja para


    pH 7.2 tinción o placa de
    Petri

    PROCEDIMIENTO
    Antes de iniciar colóquese el equipo de protección personal.

    1. Fijación del frotis sanguíneo

    Sumerja el frotis en un recipiente de boca ancha con metanol, de manera que quede
    completamente impregnado.

    Se debe dejar la distancia adecuada para que el metanol no suba y fije la gota gruesa.

    Retire el excedente de metanol y deje secar la lámina en posición horizontal a temperatura


    ambiente por alrededor de 2 minutos.

    Si se colocara de manera vertical el metanol podría ascender y los vapores fijar la gota gruesa.
    2.Preparación de la solución de coloración

    Prepare el buffer según las indicaciones provistas por el fabricante.

    En un recipiente limpio, prepare una dilución al 10% del colorante de Giemsa (9 partes de buffer
    de fosfatos por 1 parte de colorante de Giemsa).

    Tome el colorante de la superficie de la botella, ya que si lo hace del fondo arrastrará


    sedimento.

    Cada lámina puede requerir entre 3 y 5 mililitros de solución de coloración y esta, se


    prepara inmediatamente antes de teñir, debido a que si se hace con tiempo previo el
    colorante se puede oxidar y la tinción no queda de la manera adecuada.

    Una vez lista la solución, mezcle cuidadosamente por inmersión, evitando la formación de
    burbujas, porque pueden interferir a la hora de la tinción.

    3. Tinción de la lámina

    Antes de iniciar este procedimiento, verifique que el metanol se haya evaporado.

    Coloque la lámina en la bandeja para tinción o placa Petri, ya sea hacia abajo (con la lámina
    inclinada) o hacia arriba.

    En caso de que se utilice la tinción hacia abajo, se recomienda poner un relieve para que la gota
    gruesa esté del lado opuesto, de manera que entre en contacto con la mayor cantidad de
    colorante posible.

    Agregue el colorante asegurándose que cubra toda la lámina, que no se haya retraído, ni que
    queden burbujas.

    Deje que las láminas se tiñan el tiempo determinado, durante la estandarización de cada lote.
    Por lo general, el tiempo de coloración puede rondar, aproximadamente, entre 8 y 10 minutos.

    Al finalizar el tiempo de tinción, levante la lámina despacio, de forma cuidadosa, ya que de lo


    contrario, se puede desprender la gota gruesa.

    Para retirar el exceso de colorante, lave con cuidado la lámina con agua o buffer de fosfatos,
    mediante su inmersión en un recipiente de boca ancha, destinado para ese fin.

    Durante este lavado, se debe evitar que la capa metálica que se formó durante la tinción se
    adhiera a la lámina, ya que dificulta la lectura microscópica.

    A continuación, retire el excedente de agua o buffer y limpie la parte de atrás de la lámina, para
    asegurarse que no queden manchas de colorante que lleguen a interferir en la lectura.

    Luego, déjela secar a temperatura ambiente.

    Finalmente, examine las láminas al microscopio con objetivo de inmersión para evaluar la
    calidad de la tinción y verifique la correcta deshemoglobinización y coloración de las estructuras
    celulares.

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