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Manual de Laboratorio Parte 1
Manual de Laboratorio Parte 1
Manual de Laboratorio Parte 1
LABORATORIO # 1
NORMAS DE BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE BIOLOGÍA
OBJETIVO GENERAL
Aplicar las normas de bioseguridad durante la realización de las prácticas de
laboratorio con la finalidad de evitar accidentes de trabajo, daños a la
infraestructura y minimizar los impactos ambientales de acuerdo a los procesos
desarrollados.
OBJETIVOS ESPECÍFICOS
1. Analizar las normas de bioseguridad con la finalidad de evitar accidentes en el
laboratorio.
2. Comprender la importancia del conocimiento y cumplimiento de las normas de
bioseguridad en el laboratorio.
INTRODUCCIÓN
Bio = vida, Seguridad= confianza, bienestar, ausencia de riesgo, este término tiene
tantas definiciones que al resumirlos puedo concluir que se refiere a preservar,
conservar y asegurar la vida de peligros que ponen en riesgo la integridad física
de los seres vivos. La Bioseguridad hace parte de la Biología que estudia el uso
seguro de los recursos biológicos y genéticos.
La Bioseguridad
está! compuesta por un conjunto de normas y medidas preventivas que nos
ayudan a sostener y mantener el control de los riesgos que se puedan presentar
en el laboratorio, que afecten la salud y atenten con la vida misma del estudiante.
por esto se hace necesario acatar las normas de seguridad para evitar cualquier
accidente y prevenir afecciones en la salud de los estudiantes. por precaución,
todo individuo que ingrese al laboratorio debe aportar los elementos requeridos de
Bioseguridad y así generar un habito de cultura y crear un ambiente seguro dentro
del laboratorio y evitar riesgos que pongan en peligro su vida.
Las normas de bioseguridad están destinadas a reducir el riesgo de transmisión
de microorganismos de fuentes reconocidas o no reconocidas de infección
vinculadas a accidentes agentes cancerígenos por exposición a sangre y fluidos
corporales.
NORMAS BÁSICAS DE BIOSEGURIDAD
GUIAS DE LABORATORIO DE BIOLOGIA
Actividad complementaria
1. Forme grupos de 3 o 4 personas. Conversen y relacionen las normas de Bioseguridad
en el laboratorio leídas anteriormente que deberían tomar en cuenta dentro de un hospital.
Anote 5 normas que serían comunes a ambos lugares y 2 normas que serían aplicables a
un hospital y que no estén dentro de la lista de normas de laboratorio. Normas comunes al
laboratorio y a un hospital.
2. Normas para un hospital que no consten dentro de esta guía:
3. Lea el documento adjunto y realice un mapa conceptual o mapa mental que incluya las
ideas principales respecto a los niveles de bioseguridad
4. Investigue sobre las frases H y P (anteriormente llamadas frases R y S) y anote la
importancia que tienen en el laboratorio de biología a la hora de manejar reactivos.
5. Escriba las frases H y P y dibuja los pictogramas de los siguientes reactivos: ácido
clorhídrico, Lugol, Benedict, sudan III y IV, hidróxido de sodio, azul de metileno, cristal
violeta, alcohol cetona, safranina, verde jano, sulfato de cobre, permanganato de potasio,
nitrato de plata, aceto-orceina, peróxido de hidrogeno, etanol.
GUIAS DE LABORATORIO DE BIOLOGIA
Referencias:
Gadea, E., NTP 269: Cancerígenos, mutágenos y teratógenos: manipulación en el
laboratorio. Disponible en:
http://www.insht.es/InshtWeb/Contenidos/Documentacion/FichasTecnicas/N
TP/Ficheros/201a300/ntp_269.pdf
HISPACOOOP & CECU, (2011). Nuevos pictogramas de peligro. Madrid.
Disponible en: https://cecu.es/publicaciones/INC11_seguridad_guia.pdf
Instituto de Biología de la UNAM., (2010). Lineamientos para el uso del
Laboratorio de Código de Barras de ADN en el Departamento de Zoología.
Disponible en: http://www.ibiologia.unam.mx/pdf/reglamento/Lineamientos
%20Laboratorio%20MexBOLIBUNAM%20CI%20marzo%202011%20v
%20final.pdf
Suarez, H., (2014), Guía de Laboratorio de Biología Molecular Básica. Disponible
en:
https://www.researchgate.net/publication/275639881_Guia_de_Laboratorio_
de_Biologia_Molecular_Basica?enrichId=rgreq-
33f56e7365b7c50c7b0d8770a1a5acdf-
XXX&enrichSource=Y292ZXJQYWdlOzI3NTYzOTg4MTtBUzoyMjM1Nzc1Nj
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LABORATORIO # 2
RECONOCIMIENTO DE MATERIALES Y EQUIPOS EN EL LABORATORIO DE
BIOLOGÍA
OBJETIVOS
INTRODUCCIÓN
MATERIALES Y EQUIPOS
Equipos de laboratorio
Instrumentos de medición
Materiales de vidrio, de porcelana o de metal: tubos de ensayo, beaker, matraz
erlenmeyer, matraz de fondo plano, matraz de fondo redondo, matraz aforado,
embudo, vidrio reloj, agitador, pipeta volumétrica, pipeta graduada, bureta,
probeta, placa o caja de petri, capsula de porcelana, crisol de porcelana, mortero,
espátula, soporte universal, rejilla metálica, aro metálico, pinza para soporte
universal, pinza para crisol, mecheros, entre otros.
PROCEDIMIENTO
ACTIVIDAD 1
Discute con tus compañeros sobre la importancia que tiene el conocimiento de los
materiales e instrumentos de laboratorio, elabore un ensayo corto con base en las
conclusiones emitidas por cada uno de los miembros de tu equipo.
Localice e identifique los materiales de uso frecuente para realizar
actividades prácticas experimentales de biología. Descríbelos. Dibújalos y
explique su funcionamiento. Tenga en cuenta las normas de seguridad para
el trabajo en el laboratorio. Socialice con sus compañeros las conclusiones
del grupo.
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Elabore una lista de los principales instrumentos que sirven para determinar
el volumen, el peso y la temperatura de las sustancias.
Caja de coplin
ACTIVIDAD 2
Ubique los equipos que se usan con mayor frecuencia para el trabajo experimental
en el laboratorio de biología. Describe su estructura e identifique sus partes.
Explique cómo funciona, haciendo énfasis en su utilización. Consulte acerca de la
importancia en el trabajo de laboratorio de biología. Debe orientar el trabajo hacia
los siguientes equipos: Mufla, autoclave, calorímetro, centrífuga, agitador
electrónico, balanza electrónica, balanza convencional, micrótomos, mecheros.
Cabina de flujo laminar, termociclador, cámara de electroforesis, calentadores,
baño de María, microscopios, estereoscopios, entre otros.
Se requiere trabajo en equipo, indagación bibliográfica como herramienta del
conocimiento.
ACTIVIDAD COMPLEMENTARIA
Redacte un informe descriptivo cada equipo estudiado y materiales, explicando su
funcionamiento. Indique las normas de seguridad que se deben tener en cuenta en
la manipulación de cada equipo y materiales. Socialice sus conclusiones con sus
compañeros de clase.
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Balanza granataria
Agitador de placas
Baño de María
Balanza granataria
Agitador de placas
Baño de María
Refractómetro
salinómetro
Cámara de
electroforesis
Termociclador
Espectrofotómetro
Contador de
Estufa de colonias
Cabina de flujo laminar esterilización
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PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS
1. Anota el uso principal de cada material.
2. Nombra los distintos instrumentos que se utilizan para medir volúmenes de
líquidos. ¿Qué semejanzas y diferencias existen entre ellos?
3. Comprueba si la graduación de una probeta es correcta. ¿Cómo lo has hecho?
BIBLIOGRAFÍA
González de Buitrago JM (1985): Material de laboratorio. En González de Buitrago
JM (ed): Técnicas de Laboratorio Clínico, 1ª ed. Editorial Alambra (Madrid,
España), pp. 1 – 10. Peña J, Morell M (1981): Medidas de volúmenes.
Peña J, Morell M (eds): Prácticas de Bioquímica Médica, 1ª ed. Editorial
Universidad de Málaga (Málaga, España), pp. 11- 17.
Wright DN (1995): Recursos de laboratorio. En Anderson SC, Cockayne (eds):
Química Clínica, 1ª Ed. Editorial Interamericana McGraw-Hill (México DF, México),
pp. 1 – 10.
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LABORATORIO # 3
II. OBJETIVOS.
III. MATERIALES:
IV. PROCEDIMIENTO.
PARTE OPTICA.
OBJETIVOS.
Son los elementos más importantes del microscopio. Están formados por la
reunión de varias lentes para corregir las aberraciones. Deben tratarse con mucho
cuidado, pues cualquier golpe puede variar la posición de las lentes y averiarlas.
Se atornillan a la parte inferior del tubo o al revolver portaobjetivos.
OCULARES.
DIAGFRAGMA Y CONDENSADORES:
El diafragma va montado bajo la platina. Es de sistema iris, y permite, por medio
de una palanca, obtener a voluntad conos luminosos de distinto tamaño y,
mediante condensadores, conos luminosos muy grandes. Los condensadores
constan de un sistema de lentes de gran abertura sujetos a una montura y
colocados entre la platina y el espejo, pueden subirse y bajarse a voluntad y tienen
un diafragma unido al conjunto.
PARTES MECANICAS:
Está compuesta por el pie, la platina y el tubo.
EL PIE. Es una pieza maciza y pesada, para asegurar la estabilidad del aparato y
servir de soporte a sus demás partes. Suele estar provista de charnela, que
permite la inclinación de la parte superior.
LA PLATINA: Es una pieza metálica, redonda o cuadrada, donde se colocan las
preparaciones; tiene en el centro una abertura circular por la que pasarán los
rayos luminosos procedentes del sistema de iluminación. El pie se prolonga
por encima de la platina, en arco más o menos curvo. La parte superior de este
arco es la que sostiene el tubo y su mecanismo de traslación vertical. Esta tiene
suma importancia, pues permite enfocar el objetivo mediante dos movimientos
uno rápido, gracias a una cremallera, y otro lento, con un tornillo micrométrico.
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Se encuentra situado bajo la platina y tiene la misión de iluminar los objetivos por
medio de luz transmitida, a causa de que la mayoría de las observaciones se
realizan por transparencia. Consta de un espejo y de un diafragma. El espejo,
redondo y adaptable a las más variadas posiciones, tiene una superficie plana y
otra cóncava, que pueden intercambiarse a voluntad. Es espejo plano, para
objetivos de escaso aumento, y el cóncavo, para grandes aumentos. La fuente
luminosa puede ser natural o artificial. Esta última es idónea cuando proviene de
una lámpara especial para estos aparatos.
mirando solo con uno. Es fácil de conseguir cuanto menor iluminada esté la mesa.
El objetivo de inmersión requiere más cuidado: depositada ya la gota de líquido
sobre la preparación, bajase el objetivo hasta que la toque. Para enfocar se utiliza
el tornillo micrométrico, pero sin perder contacto con la gota y sin tocar la
preparación.
1 gota de agua
OBSERVACIÓN
MUESTRA MICRSCÓPICA 4, 10 Y
HIDRATACIÓN
40X
D (vidrio)
Reutilizable
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Una vez terminado este ejercicio, enfoque nuevamente la letra con el objetivo de
menor aumento, y observando a través del microscopio, mueva el carro hacia
delante.
¿En qué dirección se mueve la letra?
Ahora mueva el carro o la lámina portaobjetos hacia atrás ¿Hacia dónde se mueve
la imagen?
¿Cómo es el desplazamiento de la imagen con relación al movimiento de la lámina
portaobjetos?
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4. GRANOS DE POLEN
Coloque granos de polen del androceo de una flor en un portaobjetos, con ayuda
de un gotero ponga una gota de agua y observe al microscopio. Es necesario
colocar el cubreobjetos. Haga observaciones de polen de diferentes clases de
flores. Esquematice sus observaciones. ¿Cuantas veces está aumentada la
imagen que observa?
V. DISCUSIÓN DE RESULTADOS
1. ¿Cuáles pueden ser las causas de daños de los lentes del microscopio?
3. La imagen dada por el microscopio ¿es real o virtual? Explique por qué
VII. BIBLIOGRAFIA.
Avers J., Charlotte. Biología Celular. 1ª. Edic. México, Iberoamericana, 1989
CURTIS, Helena. BARNES, N. Sur. Et. Al. Biología. México: 2000. 1490 p.
Audesirk T. Audesirk T. Biología. 4ta. Edic. México, Prentice Hall. 1996.
Gerald Karp. Biología Celular. 3era. . Edic., México, MACGRAWHILL. 1998.
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LABORATORIO # 4
DETERMINACIÓN DE MEDIDAS AL MICROSCOPIO
I. INTRODUCCION.
II. OBJETIVO
Microscopio
Porta y cubre objetos
Gotero
Papel milimetrado*
Tijeras*
Un pedazo de lana*
Cabello*
agua de charca
IV PROCEDIMIENTO
Figura 1. Medición del diámetro del campo visual utilizando papel milimetrado
a. En milímetros _______________
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b. En micras _______________
c. En Angstrom _______________
Calcule en milímetros el área del campo visual del objetivo de menor aumento
para ello utilice la siguiente fórmula: Área: π.r2
Con el dato anterior es posible determinar el diámetro correspondiente al objetivo
de mayor aumento. Para ello basta dividir el diámetro encontrado del campo
visual de menor aumento por la razón resultante entre el número del objetivo de
mayor aumento y el número de objetivo de menor aumento. Por ejemplo, si el
número del objetivo de mayor aumento es 45X y el de menor aumento 15X, la
razón será 45X/15X= 3. Si9 el diámetro del campo visual de menor aumento es
de 1.500 micras, el diámetro del campo visual de mayor aumento será 1.500
micras/3= 500 micras.
Calcule el diámetro y área del campo visual de cada uno de los objetivos de su
microscopio.
1 gota de agua
OBSERVACIÓN
Papel milimetrado MICRSCÓPICA 4X. Medir
HIDRATACIÓN diámetro
D (vidrio)
Reutilizable
1 gota de agua
OBSERVACIÓN
MUESTRA MICRSCÓPICA 4, 10 Y
HIDRATACIÓN
40X
D (vidrio)
Reutilizable
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V. DISCUSIÓN DE RESULTADOS
1. De acuerdo a los poderes de resolución estudiados. (con qué observarías los
siguientes organismos y/o célula?
a. Bacteria (diámetro 0.5 a 1.0 µm)
b. Glóbulos rojos humanos 7.5 µm
c. Virus del mosaico del tabaco 10 -300 nanómetros
d. Ovulo humano 150 µm
e. Ovulo de pato 7 cm
c. 30 angstron
VII. BIBLIOGRAFIA.
LABORATORIO # 5
IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS Y LIPIDOS POR REACCIONES
QUIMICAS, DE COLOR, Y MICROSCOPIA DE LUZ
(BIOMOLECULAS)
I. INTRODUCCION.
La mayor parte de la materia orgánica de las células está constituida por cuatro
tipos principales de macromoléculas: los ácidos nucleicos, las proteínas, los
carbohidratos y los lípidos.
Los glúcidos o carbohidratos son moléculas formadas por C, H y O, donde los
átomos de carbono están unidas a radicales hidroxilo o alcohol (-OH) y a radicales
hidrógenos (-H). En todos los glúcidos siempre hay un grupo carbonilo, que puede
ser un grupo aldehído (-CHO) o un grupo cetona (-CO), pudiendo definirse a los
glúcidos como polihidroxialdehídos o polihidroxicetonas.
Los glúcidos se clasifican según su tamaño molecular, desde los más pequeños o
azúcares simples: monosacáridos (glucosa, galactosa y fructosa), los intermedios
u oligosacáridos (disacáridos como maltosa, sacarosa, lactosa), y las largas
moléculas llamadas polisacáridos (almidón, glucógeno, celulosa).
Los lípidos son moléculas orgánicas formadas principalmente por carbono e
hidrógeno, y en menor proporción oxígeno. Además, pueden contener también
fósforo, nitrógeno y azufre. Es un grupo de sustancias muy heterogéneas que solo
tienen en común que son insolubles en agua, pero solubles en solventes
orgánicos como benceno, éter, cloroformo, etc.
Los lípidos más importantes en los seres vivos son los triglicéridos y fosfolípidos
(que contienen ácidos grasos) y los esteroides (que no poseen ácidos grasos en
su composición).
Las proteínas están formadas básicamente por C, H, O y N, siendo el elemento
característico el N.
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II. OBJETIVOS.
Microscopio compuesto
Porta y cubre-objetos
15 tubos de ensayo, resistentes al calor (pyrex o quimax)
2 pipetas
2 goteros
1 beacker de 50 ml
Gradilla para tubos de ensayo
Cuchilla de afeitar nueva*
Palillos*
Orina * 5 cm
Jugo* 5 cm
Leche* 5 cm
Pan*
Un pedazo pequeño de fruta*
Solución de Lugol
Solución de Sudán III ó IV
Solución de Benedict
Solución de Glucosa al 1%
Solución de Sacarosa al 1 %
Solución de Almidón al 1%
Un pedazo pequeño de grasa animal (tocino o grasa de la carne) *
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El material marcado con asterisco (*) lo aportan los estudiantes por grupo.
IV. PROCEDIMIENTO
IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS: El almidón se identifica con Lugol
(solución de I2/KI) dando un azul o morado intenso y los azúcares reductores se
identifican con la solución de Benedict, los cuales después de calentarse en baño
maría durante 3 minutos, dan una gama de colores que va del azul verdoso,
pasando por el amarillo hasta un precipitado color rojo ladrillo que demuestra un
mayor porcentaje de azúcar.
1. DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE AZÚCARES:
Enumere 7 tubos de ensayo
1. Al tubo No. 1 Agregue 1 ml de almidón
2. Al tubo No. 2 Agregue 1 ml de glucosa
3. Al tubo No. 3 Agregue 1 ml de jugo
4. Al tubo No. 4 Agregue 1 ml de leche
5. Al tubo No. 5 Agregue 1 ml de orina
6. Al tubo No. 6 Agregue 1 ml de sacarosa
7. Al tubo No. 7 Agregue el macerado de un pedacito de fruta madura y adiciónela
a un tubo de ensayo
4. leche
5. Orina
6. Sacarosa
7. Macerado de fruta
COLOR RESULTADO
Azul Negativo
Azul verdoso Ligeros vestigios de glucosa
Verde Aproximadamente 0.5%
Pardo verdoso Aproximadamente 1.0%
Amarillo Aproximadamente 1.5%
Rojo ladrillo Mayor del 2.0%
1. Por medio de la hoja de afeitar haga un corte muy fino del tubérculo de papa y
colóquelo sobre un portaobjetos, haga una preparación utilizando Lugol diluido
como medio de montaje y obsérvela al microscopio usando el objetivo 40X para
hacer el esquema de lo observado.
V. DISCUSIÓN DE RESULTADOS
VI. BIBLIOGRAFIA.
DIAGRAMA DE FLUJO
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LABORATORIO # 6
IDENTIFICACION DE PROTEINAS Y ENZIMAS
I. INTRODUCCION.
Muchas de las propiedades fisicoquímicas y biológicas características de las
proteínas son reflejo de los aminoácidos que las constituyen y las reacciones de
tipo cualitativo se utilizan para su detectar la presencia de unos aminoácidos
específicos.
Las proteínas debido al gran tamaño de sus moléculas, forman con el agua
soluciones coloidales. Estas soluciones pueden precipitar con formación de
coágulos al ser calentadas a temperaturas superiores a los 70 ºC al ser tratadas
con soluciones ácidas y alcohol, etc. La coagulación de las proteínas es un
proceso irreversible y se debe a su desnaturalización por los agentes indicados
anteriormente, que al actuar sobre la proteína la desordenan por la destrucción de
su estructura terciaria y cuaternaria.
Cuando se realizan reacciones químicas a veces es necesario agregar sustancias
que aceleren o faciliten la reacción, a estas sustancias se les llama catalizadores.
Las enzimas son proteínas, también llamadas catalizadores biológicos, porque son
de naturaleza orgánica, producidas por la célula para acelerar la velocidad de las
reacciones químicas, quedando estas intactas al terminar estas reacciones.
Las enzimas son proteínas que actúan como catalizadores en las células y hacen
posible las reacciones, al disminuir la energía de activación que se necesita. Las
miles de reacciones que constituyen el metabolismo de los seres vivos están bajo
el control de miles de enzimas. Diferentes enzimas controlan diferentes
reacciones. La sustancia sobre la cual actúa una enzima se conoce como sustrato,
el cual se convierte en uno o más productos al ocurrir la reacción. El sitio activo es
la región específica en la enzima donde se unen con un o más sustratos
específicos.
Las enzimas no se consumen en las reacciones y se pueden volver a utilizar. Los
factores que afectan la estructura de las proteínas también afectan la función o
actividad de las enzimas. Estos factores pueden ser: temperatura, pH y
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II. OBJETIVO.
Al finalizar el laboratorio cada estudiante será capaz de interpretar los
mecanismos
subyacentes de la acción enzimática sobre sustratos específicos.
Al finalizar la práctica cada estudiante será capaz de analizar los mecanismos
subyacentes de la actividad de la catalasa en tejido animal y vegetal.
III. MATERIAL.
3 Pinzas para sujetar tubos de ensayo
Solución de almidón al 1%
Saliva*
Lugol enfrasco gotero
Reactivo de Benedict
1 Docena de tubos de ensayo, resistentes al calor
Pastillas de cuajo (renina)*
HCl al 10%
30 cc. de leche*
1 Huevo* (Solución de clara al 5% y solución de yema al 5%)
Gelatina sin sabor* (Solución de gelatina al 5%)
Solución de CuSO4 al 1%
Solución de NaOH concentrado
100ml de HCl al 50%
4 pipetas de pasteur
4 pipetas de 5 ml.
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Guantes descartables*
4 Cajas de petri
Papa, rábano, espinaca y zanahoria*
Agua oxigenada (Peróxido de hidrógeno)
Trozo de hígado, riñón, corazón y carne de res*
Semillas de papaya*
Jamón*
Hojas de afeitar (dos)*
El material marcado con asterisco (*) lo aportan los estudiantes por grupo.
DETERMINACIÓN CUALITATIVA DE LA PRESENCIA DE PROTEÍNAS
PROCEDIMIENTO:
Procedimiento 1
Enumere 4 tubos de ensayo, adicione materiales como sigue:
1. Tubo No. 1: 3 ml de solución de yema de huevo.
2. Tubo No. 2: 3 ml de solución de clara de huevo
3. Tubo No. 3: 3 ml de solución de gelatina.
4. Tubo No. 4: 3 ml de leche
Agregue en cada tubo 1 ml de la solución de sulfato de cobre + 2 ml de Hidróxido
de sodio concentrado (Reactivo de Biuret) Agite los tubos hasta que se produzca
una coloración violeta o púrpura, color que indica que la prueba es positiva.
Observe, anote y explique los resultados.
Procedimiento 2.
En un Beaker agrega la clara de huevo, añade 10 ml de ácido clorhídrico diluido y
observa la coagulación de las proteínas encontradas en la clara de huevo (se
forma un sólido blanco).
Preguntas de discusión
1. Indique las principales características estructurales y funcionales de las
proteínas
2. Señale la importancia de la estructura primaria, secundaria, terciaria y
cuaternaria, en la determinación de las propiedades funcionales de las proteínas.
3. ¿Cuál es el fundamento de la reacción de Biuret?
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4. (leche + Renina
calentada)
Flavín oxidasa
R H2 + 02 R + H2O2
Catalasa
2H202 2H2O + O2 (gas)
PROCEDIMIENTO:
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1. Haga un corte fino de rábano, uno de papa, uno de zanahoria, una porción de
espinaca macerada cuyas dimensiones sean iguales, colóquelos cada uno en
diferente vidrio de reloj. Agregue tres gotas de H 2O2.
¿Qué observa?
2. Haga un corte fino de rábano, uno de papa, uno de zanahoria, una porción de
espinaca macerada, cuyas dimensiones sean iguales, colóquelos cada uno en
diferente vidrio de reloj. Agregue tres gotas HCl espere 1 minuto y 3 de H 2O2.
¿Qué ocurre en la actividad de la enzima?
3. Haga un corte fino de rábano, uno de papa, uno de zanahoria, una porción de
espinaca macerada, cuyas dimensiones sean iguales, colóquelos cada uno en
diferente vidrio de reloj. Colóquelos en el calentador hasta cocinarlos espere 1
minuto y 3 de H2O2. ¿Qué ocurre en la actividad de la enzima?
REPORTE DE LABORATORIO
o 1 2 3 4 5
TEJIDO/ESCA
LA
Papa
Rábano
Zanahoria
Espinaca
Hígado
Riñón
Corazón
Carne
IDENTIFICACIÓN DE LA PAPAÍNA
1. Coloque en un mortero diez semillas de papaya con un poco de agua, muélelas
y decante.
2. En otro mortero muela 2 gr de jamón con un poco de agua. Coloca en un tubo
de ensayo 2 ml del líquido decantado del jamón, inmediatamente agregue 4 gotas
de reactivo de Biuret y agite. La coloración lilácea indicará la presencia de
proteínas.
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V. INTERPRETACION DE RESULTADOS:
¿Cuál es el tejido con mayor actividad y cuál el que tiene menor actividad?
¿Qué tienen en común y en qué se diferencian?
¿En base a sus observaciones qué puede concluir acerca de cómo afecta a la
actividad enzimática el tiempo, la concentración y la temperatura?
VII. BIBLIOGRAFIA.
Avers J., Charlotte. Biología Celular. 1ª. Edic. México, Iberoamericana, 1989
CURTIS, Helena. BARNES, N. Sur. Et. Al. Biología. México: 2000. 1490 p.
Audesirk T. Audesirk T. Biología. 4ta. Edic. México, Prentice Hall. 1996.
Gerald Karp. Biología Celular. 3era. . Edic., México, MACGRAWHILL. 1998.
DIAGRAMA DE FLUJO
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LABORATORIO # 7
OBSERVACIÓN MICROSCÓPICA DE HONGOS Y BACTERIAS
Objetivos
1. Conocer procesos de preparación en fresco y en cinta adhesiva de distintas
especies de hongos
2. Observar la morfología de los hongos y distinguir las diferentes estructuras
que presenta.
3. Implementar algunas técnicas de tinción para observar las diferentes
morfologías bacterianas.
4. Comprender y explicar la vitalidad de los colorantes en la identificación de
estructuras celulares
INTRODUCCION
Para realizar el estudio microbiológico, ya sea humana o animal, vegetal, hongo,
industrial o del medio ambiente, se debe someter a una serie de procesos
estandarizados de laboratorio, que permitan reconocer los microorganismos. Las
coloraciones permiten diferenciar formas, agrupaciones, características tintoriales
y estructuras de los diferentes microorganismos en las muestras.
La célula es un microcosmos con limites definidos por una membrana celular,
dentro de la cual se desarrolla continuamente una gran actividad bioquímica;
constituye un sistema organizado complejo, dinámico y autoregulado de moléculas
y agregados moleculares, que toma y emplea energía del medio que la rodea para
utilizarla en fenómenos de biosíntesis, crecimiento y reproducción celular.
La citología trata de definir la diversidad de células, para comprender su
organización y estructura, en relación con su función; y ver a la célula no solo
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como una entidad individual independiente, sino como parte integrante de tejidos,
órganos y sistemas complejos de los seres vivos. La actividad de un organismo es
el resultado de la sumatoria de las actividades de las células que lo componen y
de sus interacciones.
El perfeccionamiento del microscopio y desarrollo de nuevas técnicas han
permitido a los bioquímicos conocer la composición química, estructura y
reacciones químicas que se producen en las células, y relacionados con su
estructura.
Muchos principios biológico fundamentales se han descubierto a través de la
observación de células aisladas y de experimentación sobre ellas. Para estudiar
en detalle la estructura y morfología celular, es necesario el uso de tejidos
previamente preparados.
Los hongos que son los organismos del reino Fungi, incluyen mohos y levaduras.
El ambiente está cargado de esporas de diversos hongos y, por lo general, estas
flotan en el aire. Entre la amplia variedad de esporas que caen sobre la piel o son
inhaladas hacia los pulmones solo algunos producen infecciones menores, y solo
rara vez se extienden hacia otras partes del organismo. Algunos pocos tipos de
hongos, como las variedades de Candida, pueden vivir normalmente sobre la
superficie del cuerpo o dentro del intestino. Estos habitantes habituales del
organismo solo ocasionalmente pueden causar infecciones locales de la piel, la
vagina o la boca, pero muy rara vez producen más daño. En ciertos casos, no
obstante, determinadas variedades de hongos pueden producir infecciones graves
de los pulmones, el hígado y el resto del cuerpo.
Los hongos obtienen los nutrientes por absorción y tienen un metabolismo
quimioheterótrofo, ya que obtienen la energía y el carbono de compuestos
orgánicos sintetizados por otros organismos. Este hecho condiciona su modo de
vida, ya que en la naturaleza se encuentran asociados a la materia orgánica en
descomposición, participando en los ciclos naturales de reciclado del carbono y
otros elementos naturales o Bial - Arístegui 3 4 Rev Iberoam Micol 2002 como
patógenos oportunistas de los animales y plantas. Los hongos pueden degradar
una gran cantidad de componentes, para lo que disponen de potentes exoenzimas
que en algunos casos pueden servirles como factores de virulencia en el
hospedador. En el laboratorio, los hongos crecen fácilmente en la mayoría de los
medios de cultivo, necesitando una fuente de carbono orgánica e iones amonio o
nitrato como fuentes de nitrógeno. Esta facilidad para crecer en cualquier medio
de cultivo y la presencia de conidios en el aire hace que sean contaminantes
habituales en el laboratorio. Los hongos filamentosos son aerobios y los
levaduriformes anaerobios facultativos. Sus requerimientos de temperatura y de
pH son poco exigentes y la mayoría crecen en un rango de pH de 2 a 9 y a
temperaturas entre 10 y 40 °C. La mayoría de los hongos presentan reproducción
sexual y asexual. El estado sexual se denomina teleomorfo o meiospórico y el
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pierden el colorante si se los trata con alcohol. Esto indica que el colorante es
fijado a nivel del protoplasto, y que la pared celular de las bacterias Gram positivas
es la que impide la extracción del colorante. Corroborando esta suposición se
observa que cuando B. subtilis emerge de su espora su pared celular está
inmadura y se comporta como Gram negativas. Cuando la pared celular adquiere
su estructura final pasa a ser Gram positiva. La pared bacteriana está compuesta
por elementos comunes para la mayoría de especies como son peptidoglucano,
ácido diaminopimélico, y componentes especiales que están presentes solo en
algunas especies como ácido teicoico – teicurónico en Gram positivas,
lipopolisacaridos en Gram negativas, ácido micólico – arabinogalactano en
mycobacterias, formas meso – levo de ácido diaminopimélico o carencia de ellas
como sucede en Actinomices, Streptomyces y Nocardias, ausencia de
peptidoglucano en Micoplasma y Ureaplasma.
Microscopio
Caja de petri
Asa bacteriológica
Beaker
Mechero de alcohol
Pipeta pasteur
Estilete
Puente de coloración
REACTIVOS A UTILIZAR
Azul de metileno
Azul de lactofenol
Cristal violeta
Lugol
Safranina o fucsina básica
Alcohol cetona
Aceite de inmersión
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Portaobjetos
Laminillas cubreobjetos
Pan con Moho
Fruta cítrica con moho
Yogurt con probióticos (Preferiblemente Regeneris)
Vinagre de plátano
Levadura
Guantes descartables
Cinta transparente de grosor 2 cm
Palillo
Sarro dental
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PROCEDIMIENTO
Una semana antes de realizar el laboratorio se deberán cultivar hongos, los cuales
serán observados en el laboratorio. En diferentes frascos de vidrio de plástico o
vidrio de boca ancha, colocar los siguientes materiales: a) un trozo de pan de
marca o de panadería, b), un trozo de naranja o limón en descomposición. Dejar la
caja a la intemperie un día en un lugar sombreado y después taparla. Colocar los
frascos de preferencia en un lugar fresco por cinco días y llevarla posteriormente
al laboratorio.
Observación de levaduras
TINCION DE GRAM
1. Preparar los frotis bacterianos (Yogurt, vinagre y sarro dental) descrito
anteriormente
2. Teñir con cristal violeta 1min.
3. Lavar con abundante agua el exceso de colorante.
4. Cubrir con Lugol 1min.
5. Lavar con agua el exceso de Lugol.
6. Decolorar con alcohol-acetona o simplemente con alcohol hasta que la
preparación deje de perder color (30seg)
7. Lavar con abundante agua para eliminar el resto de disolvente.
8. Teñir con safranina o fucsina básica 1min.
9. Lavar con agua para eliminar el colorante de contraste.
10. Secar la preparación.
11. Observar en microscopio con los objetivos de 40x y 100 x. Para el objetivo de
100x aplicar aceite de inmersión y observar.
12. Examinar al microscopio fijándose sobre todo en el color de cada preparación.
Los tiempos de exposición a los colorantes son orientativos. Cada vez que se
prepara la batería de colorantes para realizar la tinción Gram presentan algunas
diferencias respecto a los preparados en otro momento, por lo que puede ser
necesario ajustar los tiempos
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Para investigar
1. Describa las características más importantes de las bacterias, realizar
esquemas de las formas que presentan y los tipos de agrupaciones que
presentan.
2. Realizar una revisión de las aplicaciones de células bacterianas más
importantes a nivel ambiental e industrial.
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PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS
1. Qué diferencias existe entre un desinfectante y un antiséptico
2. En qué consiste el proceso de esterilización y la importancia de este.
3. Explique la importancia de la pasteurización de la leche
BIBLIOGRAFIA.
DIAGRAMA DE FLUJO
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LABORATORIO # 9
PROPIEDADES FÍSICAS DE LA MATERIA VIVA
I. INTRODUCCION
Con la aparición de la vida en el planeta, se inicia una nueva etapa de desarrollo de la
naturaleza, caracterizada por la predominancia de las leyes biológicas. A pesar de sus
características específicas, los fenómenos biológicos tienen una base fisicoquímica,
consecuencia del desarrollo de la vida a partir de la materia inorgánica.
Las bases estructurales de la materia viva son moleculares, el funcionamiento del ser
viviente se reduce en última instancia a transformaciones moleculares o movimientos
energéticos de naturaleza física. La diferencia básica entre material viviente y material
inerte radica en el grado de complejidad, el ordenamiento estructural y funcional. La
estructura de la materia viva a pesar de su carácter molecular, revela un elevado grado de
organización y complejidad. Las transformaciones energéticas y los movimientos del ser
vivo son de tal magnitud, que a no ser por la precisión y forma organizada como
transcurren, podrían generar grandes explosiones.
El paso de sustancias en las células y sus organelas, está regulado por las membranas
celulares. Las células en general, están sumergidas en una diversidad de ambientes
(agua dulce, salada o salobre, agua de solución del suelo, humedad del aire, condiciones
extremas de salinidad y condiciones medioambientales, entre otros en todos los casos, la
membrana celular tiene la función de mantener el equilibrio químico entre el interior de la
célula y su medio. El transporte activo de moléculas hacia dentro y hacia fuera de la
célula es igualmente importante, pues la célula tiene la capacidad de transportar iones y
moléculas a través de su membrana en contra de gradientes de concentración, usando el
mecanismo de transporte activo. En esta práctica estudiaremos los fenómenos de
difusión, diálisis, ósmosis y los efectos que sobre estos tienen la temperatura, tamaño de
moléculas y concentración.
II. OBJETIVOS:
Determinar el efecto de la concentración y de solutos y la temperatura sobre el
tiempo de difusión de una sustancia.
Visualizar los fenómenos de diálisis y ósmosis y modelos celulares.
Comprender la importancia de éstos fenómenos para la célula y los efectos que
puede tener sobre ella.
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III. MATERIALES:
13 Tubos de ensayos
Gradilla
Pipetas de 10 ml
Termómetro
Pipeta de pasteur
calentador
Papel milimetrado*
Hielo*
Beaker de 200 ml
Agua destilada
Solución de KMnO4
Solución de Lugol
Reactivo de Benedict
Nitrato de plata
Cloruro de sodio 0.1 M
Cloruro de sodio de alta concentración
Semillas de maíz o fríjol o alverjas*
Pita o hilo*
Cebolla*
Sangre*
Calentador
Microscopio compuesto
Porta y Cubre objetos
Papel limpia lentes*
Intestino delgado animal de cerdo*
El material marcado con asterisco (*) lo aportan los estudiantes por grupo.
IV PROCEDIMIENTO
1. Imbibición: La planta dispone de otro sistema para tomar agua, fenómeno para tomar
agua, fenómeno conocido como imbibición. Al igual que la ósmosis, la imbibición puede
ser considerada como un tipo especial de difusión puesto que el movimiento de agua se
realiza según un gradiente de potencial hídrico entre la sustancia que se embebe y el
líquido imbibiente. Si se coloca un vegetal seco se produce un hinchamiento visible que
en algunos casos alcanza un aumento considerable del volumen del vegetal.
Tome una porción de semillas de fríjol, maíz (30 aproximadamente) que deberá pesarse,
estas quedaran como testigo del experimento. Tome otras 30 del mismo tipo, péselas y
sumérjalas en agua durante varias horas sáquelas y péselas.
Determine:
Diferencias de peso entre las semillas embebidas y las testigos
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2. 2. Diálisis: Las membranas que rodean a las células y a algunos organelos de ella,
poseen permeabilidad diferencial, lo cual significa que la membrana celular deja pasar
unas sustancias y otras no, sirviendo de barrera para el paso de una sustancia disuelta
(soluto) dándose el fenómeno llamado DIALISIS, y la difusión del solvente (agua)
dándose el fenómeno llamado OSMOSIS.
a. Tome 6 tubos de ensayos y numérelos. En cada uno coloque los siguientes materiales:
Tubo No. 1: 3 ml de agua destilada
Tubo No. 2: 3 ml de solución de almidón al 1%
Tubo No. 3: 3 ml de agua destilada
Tubo No. 4: 3 ml de solución de glucosa 1%
Tubo No. 5: 3 ml de agua destilada
Tubo No. 6: 3 ml de solución de cloruro de sodio 2%
Mida el tiempo de difusión en cada caso para ello anote el tiempo inicial cuando se agregó
el colorante y el tiempo final en el que difundió totalmente. La diferencia entre ambos es
el tiempo de difusión. Haga una gráfica en el papel milimetrado.
V. PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS:
1. ¿Explique la razón del fenómeno de plasmólisis? ¿Qué estructura celular juega papel
importante en la regulación de dicho fenómeno?
2. ¿Qué naturaleza tiene la membrana celular que permite que se realice el intercambio a
través de ella?
3. ¿Qué otros factores intervienen en la velocidad de difusión aparte de la concentración y
la temperatura?
4. ¿Qué efectos producen el calentamiento y la congelación sobre las membranas
celulares?
5. ¿Qué importancia tienen los procesos de intercambio de sustancias a través de la
membrana para la vida de la célula?
6. ¿Para qué les sirve a las células los procesos de intercambio a través de la
membrana?
7. ¿Qué relación hay entre el peso molecular de las sustancias y la velocidad de difusión?
8. ¿Cuál es la importancia del proceso de Imbibición?
9. ¿Dónde se puede apreciar mejor el proceso de plasmólisis en la Elodea o en la
epidermis de Cebolla?
10. ¿Qué factores cree usted que pueden condicionar el paso de sustancias y moléculas
a través de la membrana celular?
11. Qué es transporte activo. De un ejemplo de este proceso.
12. Qué es diálisis y de un ejemplo.
13. En que consiste la electrodiálisis.
14. Dé un ejemplo de una aplicación práctica de la diálisis en el campo de la salud.
VI. BIBLIOGRAFIA.
Avers J., Charlotte. Biología Celular. 1ª. Edic. México, Iberoamericana, 1989
CURTIS, Helena. BARNES, N. Sur. Et. Al. Biología. México: 2000. 1490 p.
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LABORATORIO # 8
OBSERVACIÓN DE CÉLULAS ANIMALES Y VEGETALES
I. INTRODUCCIÓN:
CÉLULA VEGETAL
Son células eucariotas, constituyen los tejidos vegetales, caracterizadas por ser de
mayor tamaño que las animales, tener pared celular, plastidios (por lo que son
autótrofas) y vacuolas más grandes.
CÉLULA ANIMAL
Células que constituyen los organismos del reino animal. Se caracteriza por no
tener pared celular, no tienen plastidios, es decir son heterótrofas.
OBJETIVOS
OBJETIVO GENERAL
Observar microorganismos y reconocer la diversidad morfológica y estructural de
los diferentes tipos de células, con el fin de establecer las diferencias.
OBJETIVOS ESPECÍFICOS
Preparar placas temporales de células vegetales y animales
Identificar algunos organelos celulares
Reconocer la diversidad morfológica y estructural de las células
Comparar las células animales con las vegetales
Ver las estructuras de un órgano vegetal
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Materiales y reactivos
III. PROCEDIMIENTO
1.1 En epitelio bucal (células animales): Coloque una gota de solución salina en el
centro de una lámina portaobjeto limpio. Con el extremo de un palillo, haga un raspado
ligero sobre la parte interna de la mejilla parte inferior de la boca. El material obtenido
mézclelo cuidadosamente mediante movimientos circulares, con la gota de solución
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salina, hasta formar un fluido homogéneo, fije al calor, coloree con una gota de azul de
metileno y colóquele la laminilla.
¿Qué forma tiene este tipo de células? Compare la forma de estas células con las
vegetales.
1.2 Observación de Glóbulos rojos. Con una lanceta estéril desechable pinche la yema de
uno de sus dedos, previamente desinfectado con alcohol, obtenga una gota de sangre; y
colóquela en el extremo de un portaobjeto. Con la ayuda de otro portaobjeto haga un
extendido, deje secar al aire libre y observe al microscopio con menor y mayor aumento.
Esquematice sus observaciones. Apóyese en la figura 1. sobre características de células
sanguíneas humanas.
1.3 Observación de glóbulos blancos. Con una lanceta estéril desechable pinche la yema
de uno de sus dedos, previamente desinfectado con alcohol, obtenga una gota de sangre; y
colóquela en el extremo del portaobjeto. Con la ayuda de otro portaobjeto haga un
extendido, deje secar al aire, cúbrala con colorante Wright y solución buffer deje actuar por
cinco minutos y lave con solución buffer. Identifique los distintos tipos de leucocitos
Esquematice sus observaciones. De acuerdo con la figura 2
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Glóbulos blancos
Neutrofilos: constituyen aproximadamente el 62% de los leucocitos totales, posen
núcleo no segmentado en etapa de maduración y segmentado por dos, tres o más lóbulos
unidos por un filamento, con colorante Wright se observa el citoplasma rosado pálido con
granulaciones pequeños y su núcleo de color morado o azul
Eosinófilos: constituyen aproximadamente el 2% de los leucocitos totales, poseen un
núcleo que a veces parecen dos, (bilobulado) con colorante Wright se observa el
citoplasma anaranjado intenso y granulaciones naranjas mientras que el núcleo es de
color morado o azul y porciones rosadas
Basófilos: constituyen aproximadamente el 1% de los leucocitos presente, poseen un
núcleo grande redondeado en forma de riñón o lobulado, con colorante Wright se observa
de color morado intenso
Linfocitos: constituyen aproximadamente el 30% de los leucocitos totales, poseen un
núcleo grande redondeado que ocupa casi toda la célula, con colorante Wright se colorea
de morado café
Monocitos: constituyen aproximadamente el 5% de los leucocitos totales, poseen son de
mayor tamaño que los neutrófilos, un núcleo que a veces parecen con colorante Wright se
observa el citoplasma azul claro sin gránulos y un núcleo de varias formas de color
morado oscuros.
¿Qué función cumple los eritrocitos, leucocitos y plaquetas
Con la ayuda de un bisturí haga cortes muy finos del jamón pietrán y colóquelos
sobre el portaobjetos. Luego adicione unas gotas de fucsina ácida y coloque un
cubreobjetos. Realice la observación en el microscopio hasta llegar al objetivo de
40x. Para la descripción de las células musculares estriadas, revise la Figura que
sigue.
Observe al microscopio primero con menor aumento y luego con mayor aumento.
Esquematice sus observaciones. Observe nuevamente con menor y mayor aumento.
Identifique las estructuras observadas.
2.2 Hoja de elodea. Haga un montaje húmedo con una hoja de elodea joven, localice el
ápice (punta de la hoja) donde hay pocas capas de célula. Enfoque a mayor aumento que
solo se a visible a claridad una sola célula. Hacia la periferia de la célula note la
presencia de cloroplastos y en la parte media la gran vacuola central. El núcleo se haya
junto con los cloroplastos en el citoplasma parietal, sin embargo, es difícil de observar.
2.3 Observación de células estomáticas: Con una pinza o una desprenda la membrana
transparente superficial del envés de una hoja de lirio, Corte una pequeña porción de esta
membrana y ubíquela en un portaobjetos. Coloque una gota de agua sobre el preparado,
Observe al microscopio con menor y mayor aumento y esquematice, visualice las células
oclusivas y la abertura estomática.
2.4 Pétalos de Flor. Tome un pétalo colorido de una flor y con un palillo macérelo
suavemente con una gota de agua sobre un portaobjetos limpio, cubra el preparado con
un cubreobjetos sin hacer presión. Observe al microscopio con menor y mayor aumento y
esquematice.
¿Cuáles son los principales Pigmentos que dan coloración a los pétalos de las flores y
que coloraciones reflejan en ellas?
hacia el interior. Repita este procedimiento con la muestra de ñame, yuca, maíz, plátano,
al banano no le agregue Lugol. Observe al microscopio con menor y mayor aumento y
esquematice, visualice la pared celular y gránulos de almidón.
Maíz
Maíz Ñame
Tomate Zanahoria
BIBLIOGRAFÍA:
VILLE, Claude. Biología De Ville, AUDESIRK, Teresa Y Gerald. Biología “la vida
en la tierra”
BARNES, Sue y CURTIS, Helena. Biología. TÉLLEZ, Gonzalo. Biología
Avers J., Charlotte. Biología Celular. 1ª. Edic. México, Iberoamericana, 1989
CURTIS, Helena. BARNES, N. Sur. Et. Al. Biología. México: 2000. 1490 p.
DIAGRAMA DE FLUJO
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LABORATORIO # 10
Introducción
El proceso fotosintético es fundamental en la supervivencia de los vegetales,
primero porque es el que le confiere a estos su condición autótrofa y, segundo,
porque de su capacidad de adaptación a situaciones extremas depende la
capacidad del vegetal completo de adaptarse a tales condiciones.
La fotosíntesis puede definirse como un proceso anabólico que se produce en los
cloroplastos y en el que la energía luminosa es transformada en energía química
que posteriormente será empleada para la fabricación de sustancias orgánicas a
partir de sustancias inorgánicas.
Procesos que se dan en la fotosíntesis
En la fotosíntesis se van a producir los siguientes procesos:
1º) Captación por las clorofilas y otros pigmentos fotosintéticos de la energía
luminosa y su transformación en energía química contenida en el ATP.
2º) Obtención de electrones a partir del agua. Estos electrones, convenientemente
activados por la energía luminosa, servirán para reducir NADP+.
3º) Incorporación del carbono del CO2 a las cadenas carbonadas.
4º) Reducción por el NADPH del carbono incorporado y síntesis de compuestos
orgánicos.
5º) Reducción de otras sustancias inorgánicas (nitratos, nitritos, sulfatos, etc.) para
su incorporación a las cadenas carbonadas.
ECUACIÓN GLOBAL DE LA FOTOSÍNTESIS
La fotosíntesis, en su conjunto, es un proceso redox en el que el CO2 y otras
sustancias inorgánicas son reducidas e incorporadas en las cadenas carbonada,
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FASES DE LA FOTOSÍNTESIS
La fotosíntesis es un proceso muy complejo. Se ha demostrado que sólo una parte
requiere energía luminosa, a esta parte se le llama fase luminosa; mientras que la
síntesis de compuestos orgánicos no necesita la luz de una manera directa, es la
fase oscura. Es de destacar que la fase oscura, a pesar de su nombre, se realiza
también durante el día, pues precisa el ATP y el NADPH que se obtienen en la
fase luminosa.
Fase luminosa
Se realiza en la membrana de los tilacoides y se llama así pues es la fase que
requiere luz de manera directa. Consiste en un transporte de electrones,
desencadenado por fotones, con síntesis de ATP y de NADPH +H+. Guardan cierto
parecido con las de la última fase de la respiración celular. También consisten en
un transporte de electrones a través de una cadena de transportadores, que en
este caso están ubicados en la membrana tilacoidadal de los cloroplastos.
Fase oscura
La fase oscura de la fotosíntesis es una etapa en la que no se necesita la luz,
aunque se realiza en su presencia. Ocurre en los cloroplastos y depende
directamente de los productos obtenidos en la fase lumínica. En esta fase, el
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Materiales y reactivos
4 tubos de ensayos
Planta acuática (Elodea)*
Bicarbonato de sodio (1/2 libra por grupo) *
Solución de NaHCO3 (0.5%, 1.0%, 2.0%, y 4.0%)
Bombilla de 25W, 40W, 60W, 100W, 150 (uno por grupo) *
Procedimiento
1. Efecto de la intensidad lumínica
a) Seleccione una ramita de elodea que tenga la parte apical, elimine el exceso de
agua. Coloque la rama en un tubo de ensayo Como se muestra en la figura 1).
b) Llene 4 tubos de ensayo con la rama de Elodea con solución de NaHCO 3 de
0,5%, 1,0%, 2.0% y 4,0%
c) Coloque el tubo de ensayo a 10 cm de la fuente lumínica de 25W. Permita que
transcurran 5 minutos, tiempo necesario para estabilizar el sistema. Pasado este
tiempo empiece a contar las burbujas que se desprenden de la elodea durante 5
minutos (tres burbujas pequeñas equivalen a una grande
d) deje reposar 1 min el tubo de ensayo que contiene la elodea y proceda a
colocarlo en la bombilla de 40W y repita lo dicho en el punto c.
e) Repita el mismo procedimiento con las bombillas de 40W, 60W, 100W y 150W
utilizando la misma concentración de NaHCO3 de 0,5%, 1,0%, 2.0% y 4,0%
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Figura 1
Registre los datos de la experiencia en la siguiente tabla haga su respectiva
gráfica.
Bombilla Concentración de Numero de Burbujas
NaHCO3
25W
40W
60W
100W
150W
Ejemplo de cómo hacer las 5 grafica del procedimiento anterior. En este caso con
la intensidad lumínica de 40W
60
40
20
0
0,00% 0,50% 1.0% 2,00% 4,00%
[NaHCO3]
2. Efecto de la
concentración de NaHCO3
a) Seleccione una ramita de elodea que tenga la parte apical, elimine el exceso de
agua. Coloque la rama en un tubo de ensayo.
b) Llene los 4 tubo de ensayo con la rama de Elodea con solución de NaHCO 3 de
0.5%, 1,0%, 2.0% y 4,0%
c) Coloque los tubos de ensayo a 10 cm de la fuente lumínica de 25W, 40W, 60W,
100W y 150W. Permita que transcurran 5 minutos, tiempo necesario para
estabilizar el sistema. Pasado este tiempo empiece a contar las burbujas que se
desprenden de la elodea durante 5 minutos (tres burbujas pequeñas equivalen a
una grande)
Registre los datos de la experiencia en la siguiente tabla y haga su respectiva
gráfica.
Concentración de Bombilla Numero de Burbujas
NaHCO3
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0,5%
1,0%
2,0%
4,0%
Ejemplo de cómo hacer las 5 grafica del procedimiento anterior. En este caso con
la concentración de 2,0% de bicarbonato de sodio
100
No de burbujas
80
60
40
20
0
25w 40w 60w 100w 150w Sol
Intensidad luminica
Preguntas Complementarias
1. Describa la reacción general de la fotosíntesis
2. Explique en pocas palabras lo que ocurre durante las reacciones en fase
luminosa y en la fase oscura de la fotosíntesis
3. ¿Por qué la fotosíntesis es esencial para la vida en la tierra?
4. ¿Qué otros factores pueden influir en el proceso de fotosíntesis?
5. Indagar sobre los efectos que produce sobre la fotosíntesis las variables
intensidad lumínica, temperatura, humedad del suelo y concentración de CO 2 en la
atmosfera
6. Indague sobre el ciclo de Calvin, y sus productos.
7. ¿Cuál es la diferencia entre plantas C 3 y plantas C4?, ¿Cuál es su adaptación
principal?
BIBLIOGRAFÍA
Guía didáctica del docente, Biología, 1º Medio, Santillana
Biología 1º Medio, Marenostrum
Guía didáctica para el profesor, Biología 1º Medio, Pearson
Imágenes extraídas en Paginas de la web
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LABORATORIO # 11
MITOSIS
INTRODUCCIÓN
La reproducción, como una actividad celular, comprende una serie ordenada de
eventos que se realizan en el núcleo y a los que se denomina Mitosis. El resultado
de este proceso es la división del núcleo en dos núcleos idénticos que contienen la
misma cantidad de material hereditario (1). La duración del fenómeno varía según
el tipo celular y las condiciones del medio, sobre todo la temperatura. El proceso
de la mitosis es continuo y sólo para facilitar su descripción se ha dividido en
cuatro fases: Profase, Metafase, Anafase y Telofase (2). Profase: Es la primera
parte de la mitosis, en ella la membrana nuclear y el nucléolo desaparecen. El
centriolo se divide en dos centriolos hijos, los cuales emigran a cada uno de los
polos opuestos de la célula, formando entre ellos los filamentos del uso
acromático. los filamentos de la cromatina se condensan de manera que los
cromosomas se hacen visibles al microscopio, notándose que están formados por
dos unidades longitudinales llamadas cromátidas. Metafase: Los cromosomas se
disponen en el ecuador del uso acromático formando la placa ecuatorial. Anafase:
Las cromátidas que forman cada cromosoma se separan dirigiéndose cada una a
los polos opuestos. Telofase: Se integran los núcleos hijos con sus membranas
nucleares y nucléolos, los cromosomas se alargan y vuelven a su forma de
filamentos de cromatina, desaparece el uso acromático y por último se forma un
tabique en el citoplasma o un estrangulamiento en el mismo que divide a la célula
en dos (3). Interfase: El periodo durante el cual la célula no se está reproduciendo
se denomina interfase. Generalmente las células permanecen más tiempo en esta
fase, que en la mitosis. esta etapa es importante en relación a la mitosis, porque
durante éste periodo se duplica el ADN (1).
OBJETIVO
Observar las fases de la mitosis en un tejido en crecimiento, en este caso se
utilizará el meristemo apical de la raíz de la cebolla.
HIPÓTESIS: Si el meristemo de la raíz de la cebolla es un tejido en crecimiento
entonces podremos observar las fases de la mitosis.
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MATERIALES Y REACTIVOS
1 par de Guantes*
Toallita o papel absorbente*
1 Cebolla con raíz* – por Grupo
Portaobjetos* y cubreobjetos*
Barniz de uña transparente*
Colbon transparente*
Patilla de colchicina*
Cuchilla*
Ácido clorhídrico
Aceto-orceina
Agua destilada
Microscopio
Vidrio de reloj
Aceite de inmersión
PROCEDIMIENTO
1. Llenar un vaso de agua y colocar un bulbo de cebolla de manera que la parte
inferior quede inmersa en el agua como se observa en la figura. Al cabo de 3 – 4
días aparecerán numerosas raicillas en crecimiento de unos 3 o 4 cm. de longitud.
El día anterior a la práctica de laboratorio (24 horas antes), adicionar media
pastilla de colchicina al agua donde crecen las raíces de la cebolla.
2. Cortar con unas tijeras finas o cuchilla, los 3 últimos milímetros de las raicillas.
3. Coloca el corte en un vidrio de reloj y agregar HCl al 10% durante 10 minutos.
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PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS
¿Por qué en la interfase no se pueden observar los cromosomas?
2. ¿En qué fase de la mitosis se observan los cromosomas alineados en el
ecuador de la célula?
3. ¿Por qué se utilizaron las células de la punta de las raíces de la cebolla para
realizar esta práctica?
4. ¿Qué sucede durante la citocinesis?
5. ¿Qué diferencias existen entre la mitosis de una célula animal y en una célula
vegetal?
6. Que función tiene la colchicina
GUIAS DE LABORATORIO DE BIOLOGIA
BIBLIOGRAFÍA
1. Nelson, G. 1976. Conceptos fundamentales de Biología. Ed. Limusa, México.
2. Savín C. 1984. Procesos Celulares. Ed. Trillas. México.
3. Alonso, E. 1981. La Ciencia de la Vida 1. Ed. Mc Graw Hill. México.
4. Ramírez, L. J. y Reyes, L. A. 2003. Manual de prácticas de Biología. Ed.
Pearson Prentice Hall. México.
5. Biggs, A. et al. 2007. Biología. Ed. Mc Graw Hill. U.S.A
GUIAS DE LABORATORIO DE BIOLOGIA
LABORATORIO # 12
I. INTRODUCIÓN:
hereditaria que tiene gran importancia en obstetricia y que también hay que tener
muy en cuenta en las transfusiones sanguíneas.
Al igual que en el sistema ABO, también está implicado un antígeno que se
localiza en la superficie de los eritrocitos. El grupo Rh+ posee este antígeno en su
superficie; el Rh- no lo posee y es capaz de generar anticuerpos frente a él, por
tanto, se puede desencadenar una respuesta inmune cuando se hace una
transfusión de sangre de un individuo Rh+ a uno Rh-, aunque no al contrario.
También puede aparecer respuesta inmune entre la madre y el feto: la madre Rh-
se inmuniza por vía placentaria contra los antígenos del hijo Rh+. La inmunización
resulta del paso de los glóbulos rojos fetales a la madre, y, al igual que en el caso
de las transfusiones, no ocurre cuando la madre es Rh+, de ahí su importancia en
obstetricia.
La inmunidad en la madre se mantiene durante toda la vida. En posteriores
embarazos, si el feto es Rh+, se genera la denominada incompatibilidad
fetomaterna, de forma que los anticuerpos maternos atraviesan la placenta y se
fijan a los antígenos que portan los glóbulos rojos fetales. El resultado es una
enfermedad denominada eritroblastosis fetal o anemia hemolítica del recién
nacido.
II. OBJETIVOS
Conocer las características de clasificación en base a la reacción antígeno-
anticuerpo que interviene en los parámetros de clasificación de los sistemas
sanguíneos ABO y RH
III. MATERIALES
Kit de antisueros de hemoclasificación
Placa anillada
Lancetas estériles*
Algodón*
Alcohol antiséptico*
Palillos*
IV. PROCEDIMIENTO
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Con un algodón impregnado de alcohol limpie la yema del dedo medio de la mano,
frotando vigorosamente hacia el extremo. Luego introduzca la lanceta en forma
transversal a las crestas de las huellas. Coloque tres (3) gotas de sangre, una en
cada uno de los aros que corresponde a la fila de su nombre.
PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS
1. Explique brevemente la base genética de los sistemas sanguíneos ABO y RH.
2. Diga ejemplos de otros sistemas sanguíneos diferentes al sistema ABO y al
sistema RH que esté presentes en la especie humana.
3. Explique la importancia de la determinación de los grupos sanguíneos ABO y el
RH.
IV. BIBLIOGRAFIA
VILLE, Claude. Biología De Ville, AUDESIRK, Teresa Y Gerald. Biología “la vida
en la tierra”
BARNES, Sue y CURTIS, Helena. Biología. TÉLLEZ, Gonzalo. Biología
Avers J., Charlotte. Biología Celular. 1ª. Edic. México, Iberoamericana, 1989
CURTIS, Helena. BARNES, N. Sur. Et. Al. Biología. México: 2000. 1490 p.
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