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Laboratorio 2 Microssopio

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Dra.

Hilda Lezcano
INTRODUCCIÓN
El microscopio es un instrumento que permite observar objetos u organismo que son demasiado pequeños como
para ser vistos a simple vista por el ojo humano. El término microscopio se deriva de la conjunción de dos conceptos,
por un lado “micro” que es equivalente a “pequeño” y “scopio” que significa “observar”, en suma se refiere a la
observación de cosas pequeñas.

Este instrumento fue inventado por Zacharias Janssen en el año 1590. El descubrimiento de este instrumento fue
importantísimo, principalmente por sus aportes en la investigación médica. En 1665 apareció la investigación
realizada por William Harvey sobre la circulación sanguínea, al analizar los capilares sanguíneos. En 1667, Marcello
Malpighi, biólogo italiano, fue el primer investigador en estudiar tejidos vivos gracias a la observación a través del
microscopio.

El holandés Anton Van Leeuwenhoek, utilizó microscopios para describir por primera vez diversos
organismos, protozoos, bacterias, espermatozoides y glóbulos rojos. Se lo puede considerar como el fundador de la
ciencia que estudia el comportamiento de las bacterias, dio origen a la bacteriología. Lo innovador de su técnica es
que él realizaba los estudios con sus propios microscopios, dedicaba gran parte de su tiempo en dar forma a lupas,
dando a los cristales el espesor milimétrico que necesitaba.

De allí en más se ha avanzado técnicamente incrementando el nivel de ampliación de los microscopios, y esto a su vez
posibilitando que la ciencia médica realice investigaciones cada vez más exhaustivas acerca del comportamiento de
microorganismos y estudio de células. El avance gracias a la implementación y desarrollo del microscopio fue enorme
en el siglo XVIII.

Fuente: https://concepto.de/microscopio/#ixzz5o672jqW8

www.youtube.com/watch?v=EUE3AvTuspM

https://www1.udel.edu/biology/ketcham/microscope/scope.html

Lezcano H. PhD
Acosta
A. P A R T E S D E L M I C R O S C O P I O C O M P U E S T O

En este ejercicio se estudiarán las partes del microscopio compuesto y sus funciones.

MATERIALES

• Un microscopio compuesto por estudiante.

PROCEDIMIENTO

Localice las siguientes partes del microscopio y rotúlelas en la Figura 6.2. Aprenda las funciones de cada parte.

1. Base. Sostén del instrumento.

2. Columna o brazo. Sostiene los lentes oculares y los lentes objetivos.

3. Platina. Superficie para colocar la laminilla.

4. Ajuste mecánico de la platina. Ajuste para mover el portaobjetos.

5. Revólver. Contiene los lentes objetivos.

6. Lentes objetivos. Lentes principales del microscopio. Estos lentes son parafocales porque permiten que la imagen
quede casi enfocada al cambiar de objetivo. Usualmente hay cuatro lentes objetivos:

a. Rastreo – magnifica cuatro veces (4x)

b. Baja potencia – 10x

c. Alta potencia – 40x

d. Inmersión de aceite – 100x

7. Cabezal. Contiene los lentes oculares.

8. Lentes oculares. El microscopio es monocular si tiene un ocular y binocular si tiene dos oculares. Los oculares
magnifican diez veces (10x) y uno de ellos puede tener un puntero.

9. Anillo de enfoque del lente ocular izquierdo. Se usa para enfocar bien la imagen con el ojo izquierdo luego de
haber enfocado con el ojo derecho; este ajuste compensa por la diferencia entre la agudeza visual de ambos ojos.

10. Ajuste de distancia interpupilar. Aumenta o disminuye la distancia entre los lentes oculares para compensar por
diferencias en la distancia entre los dos ojos.

11. Tornillo macrométrico o ajuste grueso. Sube y baja la platina rápidamente; sólo se usa con los lentes objetivos de
4x y 10x.

12. Tornillo micrométrico o ajuste fino. Sube y baja la platina muy lentamente; se usa con todos los lentes objetivos

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Acosta
13. Lámpara. Provee una intensidad variable de iluminación.

14. Interruptor. Prende y apaga el iluminador.

15. Indicador de encendido.

16. Ajuste de iluminación. Controla la intensidad de la iluminación.

17. Condensador. Enfoca la luz en el plano del portaobjetos.

18. Ajuste del condensador. Sube y baja el condensador, aunque éste siempre debe quedar un poco por debajo de su
posición más alta.

19. Diafragma. Controla el diámetro del rayo de luz que llega a la placa; no debe usarse para aumentar o disminuir la
intensidad de la iluminación. Al disminuir la apertura del diafragma, se aumenta el contraste de la imagen y la
profundidad del foco, pero se disminuye la resolución.

Para obtener la mejor imagen posible hay que cambiar la apertura del diafragma cada vez que cambia el lente
objetivo.

20. Filtro azul. Absorbe el exceso de luz roja y amarilla que produce el iluminador de tungsteno para que la
iluminación sea más similar a la luz natural.

21. Cordón eléctrico.

F i g u r a 1. El microscopio compuesto. Rotule todas las partes indicadas.


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B. E L U S O D E L M I C R O S C O P I O C O M P U E S T O

En este ejercicio se aprenderá a usar correctamente el microscopio compuesto y a obtener la imagen más clara y
detallada que el instrumento puede brindar.

A. Uso correcto del microscopio compuesto

Antes de comenzar a usar el microscopio deben conocerse ciertas reglas:

• Es responsabilidad individual y colectiva el mantener los microscopios en óptimas condiciones.

• Al llevar el microscopio de un lugar a otro, sosténgalo siempre con ambas manos, una colocada debajo de la
base y la otra sosteniendo la columna o el brazo del instrumento.

• Cuando deposite el microscopio sobre la mesa, hágalo con delicadeza.

• No arrastre el microscopio sobre la mesa, o dentro del gabinete donde se guarda; esto produce
vibraciones que desalinean los lentes.

• Cuando guarde el microscopio doble el cordón eléctrico, NUNCA alrededor de la base.

MATERIALES

• Un microscopio compuesto por estudiante

• hoja de periódico

• hilos de diferente color, uno claro y uno oscuro

• papel milimetrado

• calculadora

PROCEDIMIENTO

1. Una de las causas principales de una imagen borrosa y poco definida es la presencia de sucio en los lentes,
especialmente polvo, huellas digitales y depósitos grasosos dejados por el roce de las pestañas con los lentes
oculares. Antes de usar el microscopio, verifique que los oculares y los objetivos estén limpios. Nunca toque los
lentes con los dedos. Si tiene que limpiar un lente, use papel de lente seco o humedezca el lente con su aliento y
frótelo muy suavemente con el papel de lente. Los portaobjetos pueden limpiarse frotándolos cuidadosamente con
papel de lente.

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2. Enchufe el microscopio, prenda la luz y ajuste la intensidad de luz a un nivel cómodo.

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3. Ajuste la distancia interocular para adaptar la distancia entre los lentes oculares a la distancia entre sus ojos;
mueva lateralmente la base de los lentes oculares hasta que vea claramente una sola imagen. El propósito principal
de tener dos lentes oculares, en vez de uno, es eliminar el cansancio que se produce al mantenerse un ojo cerrado y
reducir la interferencia de luz ambiental y de otras imágenes si se mantiene el ojo abierto. Los dos lentes oculares no
proporcionan una imagen estereoscópica porque hay un solo lente objetivo. La distancia interpupilar varía para cada
persona y por lo tanto debe ajustarse cada vez que se use el microscopio.

4. Ponga un pedacito de periódico con letras en un portaobjetos y agregue una gota de agua, cubra con un
cubreobjetos y observe con el microscopio.

5. Coloque el portaobjetos con el lente objetivo de 4x (el más corto) en posición vertical. Abra la pinza o gancho de la
platina mecánica, monte el portaobjetos en el centro sin tocar el lente objetivo con el portaobjetos y cierre la pinza
suavemente. Use los dos tornillos de la platina para centralizar la letra «e» debajo del lente objetivo.

6. Use el tornillo macrométrico para subir la platina hasta la posición más alta. Mirando por los lentes oculares (los
estudiantes que usan espejuelos pueden removerlos para facilitar el uso del microscopio), use el tornillo
macrométrico para bajar la platina hasta que el objeto quede en foco.

Cierre el ojo izquierdo y use el tornillo micrométrico para obtener una imagen en perfecto foco. Cierre el ojo derecho
y gire el ajuste del lente ocular izquierdo hasta obtener una imagen perfectamente enfocada. Al igual que la distancia
interpupilar, este ajuste debe hacerse al comienzo de cada laboratorio.

7. Observe el portaobjetos. Para ver más detalles, cambie al lente objetivo de 10x y luego al de 40x., ajustando el foco
solamente con el tornillo micrométrico. El espécimen u objeto (en este caso, la letra «e») debe mantenerse en el
centro del campo de visión. Después de cambiar el lente objetivo, aumente ligeramente la apertura del diafragma y la
intensidad del iluminador (los lentes objetivos de mayor aumento requieren mayor apertura del diafragma y mayor
intensidad de iluminación).

8. Si nota partículas de polvo u otro sucio al observar la placa, use este procedimiento para determinar dónde se
encuentran:

a. Si el sucio se mueve al mover la placa, está en el portaobjeto o en el cubre objeto.

b. Si el sucio se mueve al rotar los lentes oculares, está en los lentes oculares.

c. Si el sucio desaparece al cambiar el lente objetivo, está en el lente objetivo anterior.

d. Si el sucio entra y sale de foco al subir y bajar el condensador, está en el condensador.

e. Si el sucio no está en ninguno de los lugares anteriores, debe estar dentro del microscopio. En este caso notifique
al instructor de laboratorio; no remueva ninguna parte del microscopio.

9. Antes de remover el portaobjetos coloque el lente objetivo de 4x en la posición vertical.

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B. Interpretación de la imagen observada

¡RECUERDE!

• Siempre que monte o remueva portaobjetos de la platina, el lente objetivo colocado en posición vertical debe
ser el de de 4x ó el de 10x.Los objetivos de 40x o 100x quedan muy cerca de la placa, lo que aumenta grandemente la
probabilidad de rayar el objetivo o romper el portaobjetos.

Al usar el microscopio, no solamente es importante enfocar bien la imagen, sino también interpretar correctamente
lo que se observa. La profundidad de foco (la porción del objeto perfectamente enfocada) es muy pequeña,
especialmente con los lentes objetivos de mayor aumento, y por tal razón vemos una imagen plana. Para apreciar la
estructura tridimensional de los objetos se puede enfocar hacia arriba y hacia abajo a través del ejemplar (si éste es
grueso) o estudiar una serie de placas que contienen cortes sucesivos. La gran mayoría de las placas preparadas que
se estudiarán durante el semestre no tienen colores naturales porque éstos se pierden al preparar la muestra,
además de que se han empleado tintes para resaltar tejidos o estructuras específicas. No le preste mucha atención a
los colores, ya que placas del mismo organismo pueden mostrar colores distintos dependiendo de los tintes
empleados.

Conociendo las Propiedades del Microscopio

1 . Resolución e Inversión de la imagen – “Letra e”

a. Coloque en el microscopio un portaobjetos con la letra «e» y enfóquela con el


objetivo de 4x y luego con el de 40x.

b. Mueva la platina hacia ambos lados y luego hacia arriba y hacia abajo. ¿Hacia dónde
se mueve la letra «e»? ¿Puede explicar estas observaciones?

2 . Diámetro del Campo y tamaño de los objetos observados

a. Coloque en la platina una tira de papel milimetrado.

b. Estime el diámetro (en milímetros) del campo de visión para los lentes objetivos de
4x, 10x y 40x. Con estas medidas podrá estimar el tamaño aproximado de los objetos
que estudiará a través del semestre, el diámetro de cada objetivo será la cantidad de
cuadritos completos en línea recta en el plano ecuatorial, si no los observa completos
debe recurrir a fórmula para dicho cálculo.

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D.O.M = d.o.m. / R R= objetivo de mayor aumento / objetivo de menor aumento

D.O.M. (diámetro del objetivo de mayor aumento)


AUMENTO
OBJETIVO DIÁMETRO
d.o.m. (diámetro del objetivo de menor aumento) TOTAL
4X
Complete el siguiente cuadro y coloque los cálculos
10X
respectivos.
40X
100X

3 . Profundidad de Campo – Portaobjetos con muestra de hilos coloridos

a. Coloque en el portaobjetos, dos hilos coloridos sobre la platina y enfoque con el


objetivo de rastreo (4x).

b. Enfoque hacia arriba y hacia abajo para apreciar la estructura tridimensional de


estos hilos sintéticos.

c. ¿Cuántos hilos puede distinguir? .

d. ¿Cuántos hilos puede distinguir a 40x? .

¿Cómo se calcula el aumento de la imagen observada con el microscopio?

• Multiplique el aumento del lente ocular por el aumento del lente objetivo en uso. ¿Qué aumentos produce
el microscopio compuesto que está usando? ¿Cuál es la magnificación máxima de un microscopio de luz? .

e. ¿La resolución (capacidad para ver detalles) aumenta o disminuye con el aumento?

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. https://concepto.de/microscopio/

2. Arraiza, N. et al. Manual de microscopía. https://pagina.jccm.es/museociencias/otras%20actividades


%20web/material%20cnr%20web/manual%20de
%20microscopia.pdf
www.youtube.com/watch?v=EUE3AvTuspM

https://www1.udel.edu/biology/ketcham/microscope/scope.html
Lezcano H. PhD
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