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    2 - Tecnicas de Siembra

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    Vanesa Salazar
    Este documento presenta diferentes técnicas para la siembra y aislamiento de microorganismos, incluyendo la siembra en tubos de ensayo, cajas de Petri, y procedimientos para incubación y observación de colonias. Explica métodos como la siembra por agotamiento, en cuadricula o masa, e incluye un taller práctico para la clasificación e identificación de colonias y microorganismos.

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    Vanesa Salazar
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    Este documento presenta diferentes técnicas para la siembra y aislamiento de microorganismos, incluyendo la siembra en tubos de ensayo, cajas de Petri, y procedimientos para incubación y observación de colonias. Explica métodos como la siembra por agotamiento, en cuadricula o masa, e incluye un taller práctico para la clasificación e identificación de colonias y microorganismos.

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    2_Tecnicas de siembra

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    Este documento presenta diferentes técnicas para la siembra y aislamiento de microorganismos, incluyendo la siembra en tubos de ensayo, cajas de Petri, y procedimientos para incubación y observación de colonias. Explica métodos como la siembra por agotamiento, en cuadricula o masa, e incluye un taller práctico para la clasificación e identificación de colonias y microorganismos.

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    Este documento presenta diferentes técnicas para la siembra y aislamiento de microorganismos, incluyendo la siembra en tubos de ensayo, cajas de Petri, y procedimientos para incubación y observación de colonias. Explica métodos como la siembra por agotamiento, en cuadricula o masa, e incluye un taller práctico para la clasificación e identificación de colonias y microorganismos.

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    UNIVERSIDAD COOPERATIVA DE COLOMBIA

    Guía No. 2: Técnicas de Siembra y aislamiento de microorganismos

    Facultad: Facultad de Medicina

    Programa: Programa de Medicina

    Curso: Microbiología y Laboratorio Clínico

    Docente: Melissa Portilla Chaves

    COMPETENCIAS

     El estudiante identificara y realizara las diferentes técnicas de inoculación para la


    obtención y aislamiento de microorganismos que se encuentren en el ambiente.
    FUNDAMENTO

    Sembrar o inocular es introducir artificialmente una porción de muestra (inóculo) en


    un medio adecuado, con el fin de iniciar un cultivo microbiano, para su desarrollo y
    multiplicación. Una vez sembrado, el medio de cultivo se incuba a una temperatura
    adecuada para el crecimiento. Las reglas fundamentales para efectuar la siembra son:
     Que se efectúen asépticamente
     Que los medios de cultivo y el instrumental a utilizar estén esterilizados
     Que se realicen solo los manipuleos indispensables
     Que se trabaje fuera de toda corriente de aire. De ser posible utilizando un
    mechero o bien Flujo laminar.
    Técnicas de siembra

    Siembra en Tubos de Ensayo

    Siembra en medio liquido: Se obtiene


    la muestra con asa bacteriológica o
    escobillón y se introduce en el caldo de
    cultivo, haciendo movimientos de
    rotación.
    Siembra en agar inclinado o pico de
    flauta: Se obtiene la muestra con asa y
    se realiza estrías en la superficie del
    medio.

    Siembra en agar semisólido: Se


    obtiene la muestra con asa recta y se hace
    una picadura por el centro hasta la mitad
    del medio

    Siembra en Cajas de Petri

    Siembra por agotamiento: El objetivo


    de esta técnica es diluir la muestra de tal
    manera que al final se obtenga colonias
    separadas para poder iniciar el estudio de
    identificación y sensibilidad a los
    antimicrobianos.

    1. Obtener la muestra con escobillón o asa


    y suspenderla en un extremo de la placa
    de agar, haciendo estrías (líneas) de un
    extremo a otro (primer cuadrante)

    2. Flamear el asa, enfriar en el extremo e


    iniciar estrías desde el cuadrante primero
    y extenderlas hasta el cuadrante dos

    3. Flamear el asa, enfriar en el extremo e


    iniciar estrías desde el cuadrante dos y
    extenderlas hasta el cuadrante tres.

    4. Flamear el asa, enfriar en el extremo e


    iniciar estrías desde el cuadrante tres y
    extenderlas hasta el cuadrante cuatro.
    Siembra en cuadricula o masa: El
    objetivo de esta técnica es hacer recuento
    de unidades formadoras de colonias (UFC)

    1. Obtener la muestra con asa calibrada o


    pipeta automática que dispense una
    cantidad exacta y distribuirla con el asa en
    línea recta por todo el centro

    2. Hacer estrías de extremo a extremo en


    sentido contrario a la línea de inóculo

    3. Girar la placa y hacer estrías de


    extremo a extremo, en sentido contrario
    a las anteriores

    PROCEDIMIENTO

    1. Con la ayuda de un escobillón tome muestras de diferentes superficies (manos,


    zapatos, baños, mesas cafetería).
    2. Realice siembras en cultivos líquidos y solidos teniendo en cuenta la
    fundamentación de la guía.
    3. Marque las cajas Petri y tubos de ensayo (Nombre, tipo de muestra, fecha)
    4. Lleve a incubación por 48 Horas a 37°C.
    5. Observe las colonias formadas y realice Coloración de Gram.

    TALLER

    1. Realice una clasificación teniendo en cuenta las colonias que se pueden obtener en
    una caja Petri, de acuerdo a la forma, margen y elevación, dibújelas y explíquelas.
    2. Qué tipo de crecimiento se puede observar en el agar slant o tubos inclinados.
    Dibújelos y explíquelos.
    3. Que pasos se debe seguir después de obtenido un crecimiento para la identificación
    Bacteriana. Que pruebas bioquímicas existes y cuál es su fundamento y utilidad.
    REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

    Madigan, M., Martinko, J., Parker, J. (2003). Brock biología de los microorganismos.
    Décima edición. Editorial Pearson Prentice-Hall. México.

    Casado, M., Torrico, G., Medina, M. (2012). Medios de cultivo en un laboratorio de


    microbiología. Revisado el 6 de Julio de 2015. Recuperado de
    https://libroslaboratorio.files.wordpress.com/2012/09/medios-de-cultivo-en-un-
    laboratorio-de-microbiologc3ada.pdf

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