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Informe #1 Cultivo Vegetales
Informe #1 Cultivo Vegetales
Informe #1 Cultivo Vegetales
RESUMEN
La preparación de medios de cultivos es el primer paso para realizar cultivos vegetales, este se
debe realizar con asepsia para evitar desde este punto la contaminación en los cultivos. En este
trabajo se desarrollaron tres medios diferentes teniendo como base la preparación del medio
Murashige y Skoog (MS), enriquecido con BAP y 2,4-D en el primer medio, para el segundo se
enriqueció con BAP y ANA y para el último medio se enriqueció con BAP y AIA. Se preparo
500 ml de cada medio colocando los componentes en el siguiente orden: macronutrientes,
micronutrientes, vitaminas, hormonas fitorreguladores, sacarosa, ajustar pH y agregar gelificante
para realizar posteriormente el autoclavado por un día para uso en las practicas a realizar.
ABSTRACT
The preparation of culture media is the first step to carry out vegetable crops, it must be done with
asepsis to avoid from this point the contamination in the crops. In this work, three different media
were developed based on the preparation of the Murashige and Skoog (MS) media, enriched with
BAP and 2,4-D in the first medium, for the second it was enriched with BAP and ANA and for
the last medium it was enriched with BAP and AIA. 500 ml of each medium was prepared by
placing the components in the following order: macronutrients micronutrients, vitamins,
phytoregulatory hormones, sucrose, adjust pH and add gelling agent to subsequently perform
autoclaving for one day for use in practices to be performed.
I. INTRODUCCIÓN
En los primeros experimentos que utilizaron así facilitar el trabajo en prácticas
medios de cultivar tejidos vegetales se posteriores. Las soluciones madres deben ser
suministraba los elementos necesarios por preparadas en altas cantidades, en el caso de
medio de tres sales KH2PO4, Ca(NO3)2 Y que la solución madre contenga precipitados
MgSO4 (Roca & Mroginski, 1991). En la se debe decantar para tener un balance
actualidad los medios de cultivos se adecuado en la solución (Abdelnour &
presentan en forma de solución acuosa que Vincent, 1994)
sirve como fuente de sacarosa debido a la
escasa actividad fotosintética de los cultivos Dependiendo la especie a cultivar se deberá
in vitro. Para enriquecer el medio se añade preparar el medio, debido a que no todos
vitaminas, hormonas y sales minerales las tienes los mismos requerimientos como por
cuales son elementos importantes para los ejemplo la edad de la planta.
macronutrientes y micronutrientes. Para la Uno de los medios más utilizados y base
preparación del medio se debe utilizar agua para cualquier otro medio es el medio de
desionizada y las sustancias a utilizar para su Murashige y Skoog este medio
preparación deben tener gran alto de pureza, experimentado en el desarrollo de plantas de
el almacenamiento prolongado de los tabaco. Este medio tiene alto contenido de
medios de cultivo acumula contaminantes potasio y nitrógeno. Para plantas leñosas se
(Roca & Mroginski, 1991). utiliza el medio Lloyd y McCow (UnADM,
Uno de los factores más importantes para el 2017).
cultivo vegetal in vitro es la preparación del
medio. Un aspecto importante que
considerar es preparar soluciones madre para
II. MATERIALES Y MÉTODOS 𝑚𝑔
0.5 ⁄𝐿 ∗ 0.5 𝐿
𝑉1 = 𝑚𝑔
Antes de realizar la práctica, se debe realizar 1 ⁄𝑚𝐿
la desinfección a todo el material a utilizar
como son: balón de 500ml, pipetas y puntas 𝑽𝟏 = 𝟎. 𝟐𝟓 𝒎𝑳
de micropipeta. En la Tabla #1 se detalla los
C1: 1 mg/mL V1: 1 mL
reactivos, concentraciones y cantidad a usar
para el volumen de medio de cultivo vegetal C2: 2mg/L V2: 0.5 L
a elaborar. Sin embargo, es indispensable la
verificación de la funcionalidad y 𝐶2 ∗ 𝑉2
𝑉1 =
calibración de: pH-metro, microondas, 𝐶1
agitador magnético con placa calefactora y 𝑚𝑔
autoclave con el fin de optimizar tiempo. 2 ⁄𝐿 ∗ 0.5 𝐿
𝑉1 = 𝑚𝑔
1 ⁄𝑚𝐿
Tabla #1.
Reactivos: Concentración y Volumen 𝑽𝟏 = 𝟏 𝒎𝑳
2,4-D (Ácido 2,4 - diclorofenoxiacético)
Micronutrientes Stock - 50 mL
𝐶2 ∗ 𝑉2
𝑉1 =
𝐶1
Vitaminas 10x - 5 mL
𝑚𝑔
3 ⁄𝐿 ∗ 0.5 𝐿
0.5 mg/L 0.25 mL 𝑉1 = 𝑚𝑔
BAP (6-Bencilamino
1 ⁄𝑚𝐿
1 mg/mL 20 uM 50 uL
purina)
2mg/L 1 mL
𝑽𝟏 = 𝟏. 𝟓 𝒎𝑳
𝑽𝟏 = 𝟎. 𝟐𝟓 𝒎𝑳
Las cantidades por utilizar se deberán
calcular para la elaboración de un medio de A. Elaboración del medio de cultivo
cultivo de 500ml en volumen. vegetal.