Informe 9 Deshidrogenasa

Resultados y discusiones Imagen 1.
Soluciones iniciales
Tabla 1. Preparación de soluciones para reacción

de la deshidrogenasa succinasa del hígado.
R
Tubos (mL)
e
Solución
c
1 2 3 4 5 6
t.
Amortigua
A 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
dor
B Sustrato ---- 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
H2O
C 1.0 0.5 0.5 --- --- ---
destilada
Azul de
D 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0
metileno
Malonato Imagen 2. Reacción de la deshidrogenasa
E --- --- --- 0.5 --- ---
de sodio
Azida de
F --- --- --- --- 0.5 ---
Sodio
Cianuro de
G --- --- --- --- --- 0.5
Sodio
Homogeni
H 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0
zado
Aceite
I 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0
mineral
Tabla 2. Resultados obtenidos

Inicio Final
Tub de Coloració de Coloración
o reacció n inicial reacció final succinasa luego del baño maría a 37°C
n (min) n (min)
Imagen 3. Reacción de oxidación del succinato
No se observó reacción por lo tanto no hubo
1 deshidrogenasa.
cambio de color. Se mantuvo azul
Turquesa
2 10:25 Turquesa 22:00
claro
Discusiones
No se observó reacción por lo tanto no hubo
3
cambio de color. Se mantuvo azul En la primera parte de esta experiencia de
laboratorio, se usaron 6 tubos de ensayo, los
No se observó reacción por lo tanto no hubo cuales contenían muestras de hígado de pollo,
4
cambio de color. Se mantuvo azul
cada uno. Se le añadió a cada tubo las
Decoloració diferentes soluciones y reactivos que se
5 12:05 Turquesa 25:00
n total observan en la Tabla 1.
Turquesa
6 7:48 Turquesa 18:00
claro
La enzima succinato deshidrogenasa es un proteína; en la mayoría de los casos, el FAD
complejo proteico ligado a la membrana se encuentra asociado a los enzimas de forma
interna mitocondrial que interviene en el ciclo no covalente (Succinato deshidrogenasa,
de Krebs y en la cadena de transporte de 2020).
electrones, y que contiene FAD (flavín-adenín-
En el tubo 1 no hubo reacción ya que no
dinucleótido) unido covalentemente (Herráez,
contenía sustrato; de esta forma no pudo
s.f.). Cataliza la reacción:
realizar su conversión de succinato a fumarato.
Succinato + ubiquinona ↔ fumarato + En el tubo 2 observamos una decoloración lo
ubiquinol cual no indica que hubo inhibición; esto nos
indica que el succinato deshidrogenasa pudo
El H2 cedido por el succinato puede ser
realizar la conversión de succinato a fumarato.
transferido del FADH2 a un colorante
Según (walla, 2000) esto se logra removiendo
susceptible como el azul de metileno que al
2H+ y 2 electrones del succinato para formar el
cambiar su estado redox pasa de coloreado a
fumarato y la coenzima reducida (FADH2) en
incoloro o viceversa.
este caso la enzima recude el azul de metileno
En la figura 1 se observan los tubos con las ya que este actúa como aceptor y el azul de
soluciones iniciales. A simple vista se puede metileno reducido es incoloro.
notar que no han tenido ningún cambio en su
En el tubo 3 no pudimos observar reacción el
coloración, ya que no han sido sometidas al
tubo 3 no podemos observar una decoloración
baño maría.
por lo tanto nos asegura que no hubo
En la figura 2 se observa que, después de los inhibición, debido a que la reacción no
30 minutos en el baño maría, hubo un cambio procedió por el hecho de calentar previamente
de coloración en los tubos 2, 5 y 6. a temperatura de 52C lo cual un aumento de la
temperatura provoca la desnaturalización de la
Para que ocurran estos cambios de coloración, enzima deshidrogenasa la cual trabaja
la enzima realiza el siguiente mecanismo: óptimamente a 37 °C. Se utiliza azul de
El FADH2 de la succinato deshidrogenasa, al metileno porque es un indicador redox
no poder desprenderse del enzima, debe apropiado para estas funcione. Se trata de una
oxidarse nuevamente in situ. El FADH 2 cede sustancia de color azul en su forma oxidada,
sus dos hidrógenos a la ubiquinona (coenzima que al aparecer átomos de hidrógenos del
Q) que se reduce a ubiquinol (QH2) y sustrato originan la forma leuco, la cual es
abandona el enzima, difundiendo en la bicapa incolora (Marks, 2006). En el tubo 4 no se
lipídica hasta alcanzar el siguiente complejo observa una variación en el color. El malonato
enzimático de la cadena respiratoria (Devlin, es un inhibidor de la respiración celular, porque
2004). se une al sitio activo de la succinato
deshidrogenasa en el ciclo del ácido cítrico,
La molécula de FAD del enzima es el aceptor pero no reacciona, compitiendo con el
de electrones de la reacción. En general la succinato. En la reacción de fosforilación
función bioquímica del FAD es oxidar los oxidativa, el malonato es un inhibidor del
alcanos a alquenos, mientras que el NAD+ complejo II que, nuevamente, contiene
oxida los alcoholes a aldehídos o cetonas. succinato deshidrogenasa. El malonato es un
Esto es debido a que la oxidación de un alcano inhibidor competitivo de la deshidrogenasa
(como el succinato) a un alqueno (como el succínica, de tal manera que la presencia de
fumarato) es suficientemente exergónica como malonato detiene el ciclo de Krebs.
para reducir el FAD a FADH2, pero no para
reducir el NAD+ a NADH. Es poco usual hallar En el tubo 5 se observa una decoloración en
una unión covalente entre el FAD y una un trascurso de tiempo parecido al tubo 2 lo
cual nos indica que hubo reacción o inhibición. Walla, M. Marchuk, D. (2000).
Las azidas afectan a la cadena respiratoria. Activatedenzymatic: Identificacion de alfa-
Son substancias que se enlazan a alguno de amilasa salival.2ª ed. España: Lancet
los componentes de la cadena de transporte
de electrones bloqueando su capacidad para
cambiar de una forma reversible desde la
forma oxidada a la forma reducida y viceversa.
Esta inhibición resulta en una acumulación de
los componentes en sus formas reducidas
antes del punto de inhibición, y la presencia de
las formas oxidadas de los componentes de la
Cadena de Transporte de Electrones después
del punto de inhibición. En el tubo 6, se utilizó
cianuro de sodio respectivamente, aquí se
presentó una reacción muy lenta al compararla
con las otras, esto debido a que el cianuro de
sodio es un inhibidor muy efectivo.
Referencias bibliográficas
Succinato deshidrogenasa. (2020, 17 de

enero). Wikipedia, La enciclopedia libre.
Fecha de consulta: 04:21, noviembre 22,
2020
desde https://es.wikipedia.org/w/index.php?
title=Succinato_deshidrogenasa&oldid=122
826375.
Herráez, A.(s.f.). Complejo II en el
transporte electrónico mitocondrial.
Recuperado el 21 de noviembre de 2020
de:
http://biomodel.uah.es/metab/mitoc/mitoE_c
II.htm
Devlin, T. (2004). Bioquímica. Libro de
textos con aplicaciones clínicas.
Recuperado el 20 de octubre de 2019 de:
https://books.google.com.pa/books?
id=p3DCb9lTLx8C&pg=PA556&dq=succina
to+deshidrogenasa&hl=es-
419&sa=X&ved=0ahUKEwiL3975hrTlAhW
GtlkKHdtECCsQ6wEIODAC#v=onepage&q
=succinato%20deshidrogenasa&f=false
Marks, R., Collen S. & Lieberman, M.
(2006).BIOQUIMICA BASICA. Un enfoque
clínico.España: Mcgraw-hills. Interamericana

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