Universidad Rafael Landívar Wendy María Denisse Calvillo Salguero

Facultad de Ciencias Ambientales y Agrícolas Carné: 1073111

Licenciatura en Ciencias Ambientales con énfasis en
Gestión Ambiental
Bioquímica Guatemala, 20 de Septiembre de 2012

Práctica #3
CARBOHIDRATOS: PRUEBAS DE REDUCCIÓN

Objetivos
 Determinar la existencia de azúcares en los reactivos y en jugos comerciales
proporcionados por el alumno.
 Comparar el grado de concentración de glucosa en distintas diluciones mediante el
uso del Reactivo de Benedict.

Antecedentes
Los carbohidratos son los compuestos orgánicos más abundantes de la biosfera y a su vez
los más diversos. Normalmente se los encuentra en las partes estructurales de los
vegetales y también en los tejidos animales, como glucosa o glucógeno. Estos sirven como
fuente de energía para todas las actividades celulares vitales.
Aportan 4 kcal/gramo al igual que las proteínas y son considerados macro nutrientes
energéticos al igual que las grasas. Se pueden encontrar en una innumerable cantidad y
variedad de alimentos y cumplen un rol muy importante en el metabolismo [ CITATION
Boh81 \l 4106 ]

Reacción de Benedict
Una de las reacciones más comunes en la identificación de carbohidratos es la reacción de
Benedict. Esta reacción es específica para azúcares con grupo reductores libres (C=O)
Todos los monosacáridos poseen un grupo reductor libre. Los disacáridos maltosa y
lactosa tienen grupos reductores libres, pero la sacarosa no los posee, ya que se pierden
los grupos reductores de sus componentes cuando ésta es formada. Se basa en la
capacidad del carbohidrato de reducir el + 2 Cu en un medio alcalino. Este + 1 Cu se
oxida y precipita enorme de O Cu2, lo que proporciona la coloración positiva de la reacción.
La coloración dependerá de la concentración de óxido de cobre y ésta a su vez de la
reducción del cobre; va desde verde, amarillo, anaranjado o rojizo, dependiendo de la
coloración [ CITATION GGu07 \l 4106 ]

Glucosa
Glucosa o dextrosa es una forma de azúcar encontrada en las frutas y en la  miel. Es un
monosacárido con la misma fórmula empírica que la fructosa pero con diferente
estructura. Es una hexosa, es decir, que contiene 6 átomos de carbono. Todas las frutas
naturales tienen cierta cantidad de glucosa (a menudo con fructosa) que puede ser
extraída y concentrada para hacer un azúcar alternativo. A nivel industrial tanto la glucosa
líquida (jarabe de glucosa) como la dextrosa (glucosa en polvo) se obtienen a partir de la
hidrólisis enzimática de almidón de cereales (generalmente trigo o maíz). La glucosa es el
2° compuesto orgánico más abundante de la naturaleza, después de la celulosa. Es la
fuente principal de energía de las células, mediante la degradación catabólica y es el
componente principal de polímeros de importancia estructural como la celulosa y de
polímeros de almacenamiento energético como el almidón [ CITATION Fer10 \l 4106 ]

1
En su forma (D-Glucosa) sufre una ciclación hacia su forma hemiacetálica para lograr sus
formas furano y pirano (D-glucofuranosa y D-glucopiranosa) que a su vez presentan
anómeros Alpha y Beta. Estos anómeros no presentan diferencias de composición
estructural, pero si difieren de características físicas y químicas. La D-(+)-glucosa es uno
de los compuestos más importantes para los seres vivos, incluyendo a seres humanos.
En su forma ß -D-glucopiranosa, una molécula de glucosa se une a otra gracias a los -OH
de sus carbonos 1-4 para formar Celobiosa[1-4] a través de un enlace ß , y al unirse
varias de estas moléculas, formar Celulosa [ CITATION Fer10 \l 4106 ]

Fructosa
La fructosa es un endulzante natural que se obtiene principalmente de la frutas, razón por
la que se le conoce como “azúcar de la fruta”. También se le puede encontrar en algunas
verduras, en la miel y en otras plantas como el azúcar de caña y la remolacha, de donde
se extrae para elaborar un azúcar alternativo. La fructosa es un azúcar simple
(monosacárido), posee la misma fórmula química de la glucosa, pero tiene una estructura
molecular diferente [ CITATION Laf12 \l 4106 ]

Lactosa
Lactosa es el azúcar (formado por la glucosa y la galactosa) que está presente en la leche.
Se trata de un disacárido que se halla en una proporción de entre el 4% y el 5% en la
leche de las hembras de los mamíferos. En el caso de los seres humanos, la correcta
absorción de la lactosa requiere de la presencia de una enzima denominada
lactasa (producida en el intestino delgado y sintetizada durante la infancia). Si el
organismo presenta una escasa o nula cantidad de lactasa, la lactosa no puede ser
asimilada de manera correcta y se producen diversas molestias [ CITATION Lac08 \l 4106 ]

Maltosa
Posee enlaces a- D-Glucopiranosil -(1→4) - a -D-Glucopiranosa, formados por dos
glucosas cicladas, con el carbono anomérico en posición A. Intervienen en el enlace el
carbono 1 de la primera glucosa y el carbono 4 de la segunda. Es un disacárido que no se
encuentra libre en la Naturaleza. Se obtiene por digestión de almidón o glucógeno. Posee
poder reductor. Es un enlace que contiene mucha energía. [ CITATION Mal12 \l 4106 ]

Diagrama de flujo
INICIO

Identifique cada tubo de ensayo y coloque en cada uno 20 gotas de las soluciones de
azúcares y jugos naturales. No mezcle los jugos en un tubo, coloque cada solución en un
tubo diferente.

A cada uno de los tubos de ensayo agregue 5ml de reactivo de Benedict

Prepare un baño maría. Agregue perlas de ebullición al mismo para eviar salpicaduras.

2
Al ebullir, coloque los tubos de ensayo en el baño maría, apague el mechero y deje enfriar.

Observe los cambios de color en cada uno de los tubosy el tiempo en que este cambio
sucede. El color del precipitado depende de las concentraciones de azúcares en la solución.
Cuando solo hay trazas de azúcar, el precipitado aparece despacio.

Después de cinco minutos de haber colocado los tubos en lel baño térmico, sáquelos y
colóquelos en la gradilla.

Organice los tubos con base al color iniciando por los azules, verdes, amarillos, naranjas y
finalizando con los rojos y corintos. Anote los resultados.

A continuación coloque en la gradulla cinco tubos de ensayo y agregue un mililitro de agua

a cada uno.

Añada al primero 1ml de soluciónde glucosa al 5% y mezcle bien (la glucosa queda al 2.5%)

Del tubo del inciso anterior tome 1ml y agréguelo al segundo tubo (la glucosa queda al
1.25%)

Del tubo del inciso anterior, tome 1ml y agréguelo al tercer tubo. Haga la misma operación
hasta completar los cinco tubos. Esta es una rpáctica de dilución muy común utilizada en
microbiología, bioquímica y otros laboratorios.

Coloque otros cinco tubos más en la gradilla y agregue 5ml del reactivo de Benedict y
agregye 1' gotas de cada una de las cinco diluciones de glucosa que preparó.

Mezcle bien y someta a baño maría. Después de 3 minutos, saque los tubos y anote los
resultados. Esto le dará una idea de los cambios de color basándose en las concentraciones
de glucosa.

FIN

3
 Resultados
Cuadro 1. Resultados de la coloración del reactivo de Benedict en carbohidratos y jugos
Reactivo Color
Fructosa Rojo
Glucosa Rojo
Maltosa Rojo
Lactosa Rojo
Jugo de Pera Naranja
Jugo de Manzana Naranja

Cuadro 2. Resultados de la coloración del reactivo de Benedict en distintas concentraciones de Glucosa

Concentración Color
2.5% Rojo vivo
1.25% Naranja oscuro
0.625% Café
0.3125% Café azulado
0.15625% Azul verdoso

Discusión
En la primera parte de la práctica se trabajó con los carbohidratos Fructosa, Glucosa,
Maltosa y Lactosa, además de dos clases de jugos de pera y manzana, en este caso
comerciales marca “Petit”. Como todos los reactivos poseían azúcares reductores, es decir,
que poseían su grupo carbonilo intacto, las pruebas de Benedict fueron todas positivas. En
el caso del jugo de pera y de manzana la coloración fue un poco distinta y más leve que el
de los sacáridos, pues aparte de que no era la misma concentración que los reactivos del
laboratorio estos jugos por ser comerciales necesitan preservantes para que no vayan a
vencer muy rápido, por lo que pudo afectar en el resultado que hubiera sido diferente de
haber sido jugos naturales recién exprimidos.

Para la segunda parte de la práctica se trabajó con distintas concentraciones de glucosa. A

medida que la concentración era menor, el reactivo de Benedict no reaccionaba y era
evidente en el resultado de los colores. Este resultado indica que mientras más azúcares
reductores haya en la solución más fuerte el color del reactivo será al final de la reacción,
y por lo tanto más carbohidratos. La dilución fue hecha en agua, y como el agua no
contiene azúcares reductores, a medida que era mayor la cantidad de agua y menor la
cantidad de glucosa, el reactivo iba reaccionando menos hasta llegar a no reaccionar
como en el último caso.

Cuestionario
1. Investigue sobre la prueba de Benedict
La prueba de Benedict se utiliza para probar la presencia de todos los monosacáridos y
azúcares reductores. Incluye la glucosa, galactosa, manosa, lactosa y maltosa. La solución
de Benedict se compone de carbonato de sodio, citrato de sodio y sulfato de cobre. Se
lleva a cabo la prueba para detectar la presencia de monosacáridos y azúcares reductores
en los alimentos, la muestra de alimento primero se disuelve en el agua. Una pequeña
cantidad de reactivo de Benedict, se añade. Si no hay azúcar presente, el color del líquido
que se estudia permanecerá azul durante el transcurso de la prueba que puede durar de 4
a 10 minutos. En presencia de azúcar en el color cambia a verde, amarillo, naranja, rojo y

4
marrón. Un cambio de color confirme la presencia de glucosa. La sacarosa no se identifica
directamente en esta prueba, ya que es un azúcar no reductor. Si ácido clorhídrico diluido
se añade al líquido que se estudia y se calienta antes de añadir el reactivo de Benedict, es
capaz de producir resultados positivos para la presencia de sacarosa. La prueba de
Benedict también se utiliza para probar para los carbohidratos simples. Los carbohidratos
complejos como los almidones no dan resultado positivo en esta prueba a menos que se
descomponen por el calor. El azúcar de mesa es un azúcar no reductor y no se pueden
detectar en esta prueba.

2. ¿Qué puede concluir de las diversas coloraciones obtenidas en la primera parte del
experimento?
Dependiendo de la cantidad de azúcares es la intensidad de la coloración. Como todos
presentaron un cambio positivo todos los reactivos poseían azucares. En el caso de los
jugos de pera y manzana su coloración fue un poco menor debido a algunos ingredientes
que son agregados para su preservación u coloración.

3. Investigue sobre métodos cuantitativos y cualitativos para determinar azúcares en

diferentes medios.
o Prueba de Molish
Es una reacción general para carbohidratos que contienen más de 5 átomos de carbono.

o Prueba de Barfoed 
Es una reacción para identificar monosacáridos, aunque algunos disacáridos (los
reductores) dan positiva la reacción, pero con más tiempo de calentamiento, ya que así se
hidroliza el disacárido. El fundamento radica en la reducción del acetato cúprico a óxido
cuproso.

o Prueba de Bial o de Orcinol-HCl

Es una prueba específica para pentosas. La positividad se reconoce por la formación de
una coloración verde botella brillante.

o Prueba de Seliwanoff 
Es específica para cetosas que contengan 5 o más átomos de carbono, pero se usa casi
exclusivamente para identificar fructosa.

o Prueba de Lugol
Es una prueba que se usa para identificar almidón. El color azul, se debe, posiblemente a
laformación de un complejo: Ioduro de almidón.

o Prueba de Benedict
Es una prueba específica para las sustancias reductoras con grupos carboxilos libres.

o Prueba Fenilhidrazina
Es una prueba para distinguir asas (y oligosacáridos). Los carbohidratos que solo se
diferencian en sus átomos de carbono 1 y/o 2 darán la misma osazona, como es el caso
de la glucosa y la fructosa, que son isómeros de función.

5
 Conclusiones
 En todos los reactivos y jugos naturales hubo presencia de azúcares tornando el
reactivo de Benedict a coloración rojo, siendo mayor en los reactivos y un poco
menor en los jugos, siendo éstos de color naranja.
 A medida que la concentración de la glucosa en las dilusiones iba disminuyendo, la
coloración del reactivo de Benedict iba cambiando, siendo de más concentrado
(rojo) a menos concentrado (azul verdoso).

Referencias bibliográficas
Lactosa. (2008). Obtenido de http://definicion.de/lactosa/

Ferato. (2010). Obtenido de http://www.ferato.com/wiki/index.php/Glucosa

La fructosa ¿qué es? (2012). Obtenido de http://www.dietas.com/articulos/la-fructosa-

que-es.asp

Maltosa. (2012). Obtenido de

http://recursos.cnice.mec.es/biosfera/alumno/2bachillerato/biomol/explicamalt.htm

Bohinski, R. (1981). Bioquímica. México: Pearson Education.

Guerrero, G. (2007). Reacciones De Identificacion Para Los Carbohidratos. Guayaquil:

Facultad de Ciencias Químicas, Escuela de Química y Farmacia.

Anexos
Imagen 1. Coloración del Reactivo de Benedict en reactivos y jugos

Imagen 2. Coloración del Reactivo de Benedict en distintas concentraciones de Glucosa

6
7