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    Extracción de DNA de Guayaba

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    Adii González
    Los ácidos nucleicos son compuestos nitrogenados de elevado peso molecular que se pueden encontrar en las células asociados a proteínas, formando complejos llamados núcleo- proteínas. Estas proteínas tienen carácter básico, mientras que los ácidos nucleicos son ácidos. Se conocen dos grandes grupos de ácidos nucleicos: RNA (ácido ribonucleico) y el DNA (ácido desoxirribonucleico). La hidrólisis controlada de RNA y DNA produce nucleótidos. Si la hidrólisis continúa se producen nucleósidos y finalmente fosfatos, azúcares y bases púricas y pirimídicas En la naturaleza, el DNA se localiza en el núcleo de las células eucariotas en forma de desoxirribonucleoproteína. El aislamiento requiere su extracción de la célula y posterior separación de la proteína asociada. El complejo de nucleoproteínas puede extraerse con cloruro sódico. Un método más adecuado para disociar al DNA de la proteína consiste en utilizar detergentes, como el dodecil sulfato de sodio o el xileno sulfonato sódico, aunque, como método alternativo, también se emplea mucho el fenol.

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    Extracción de DNA de Guayaba

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    Adii González
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    Los ácidos nucleicos son compuestos nitrogenados de elevado peso molecular que se pueden encontrar en las células asociados a proteínas, formando complejos llamados núcleo- proteínas. Estas proteínas tienen carácter básico, mientras que los ácidos nucleicos son ácidos. Se conocen dos grandes grupos de ácidos nucleicos: RNA (ácido ribonucleico) y el DNA (ácido desoxirribonucleico). La hidrólisis controlada de RNA y DNA produce nucleótidos. Si la hidrólisis continúa se producen nucleósidos y finalmente fosfatos, azúcares y bases púricas y pirimídicas En la naturaleza, el DNA se localiza en el núcleo de las células eucariotas en forma de desoxirribonucleoproteína. El aislamiento requiere su extracción de la célula y posterior separación de la proteína asociada. El complejo de nucleoproteínas puede extraerse con cloruro sódico. Un método más adecuado para disociar al DNA de la proteína consiste en utilizar detergentes, como el dodecil sulfato de sodio o el xileno sulfonato sódico, aunque, como método alternativo, también se emplea mucho el fenol.

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    Los ácidos nucleicos son compuestos nitrogenados de elevado peso molecular que se pueden encontrar en las células asociados a proteínas, formando complejos llamados núcleo- proteínas. Estas proteínas tienen carácter básico, mientras que los ácidos nucleicos son ácidos. Se conocen dos grandes grupos de ácidos nucleicos: RNA (ácido ribonucleico) y el DNA (ácido desoxirribonucleico). La hidrólisis controlada de RNA y DNA produce nucleótidos. Si la hidrólisis continúa se producen nucleósidos y finalmente fosfatos, azúcares y bases púricas y pirimídicas En la naturaleza, el DNA se localiza en el núcleo de las células eucariotas en forma de desoxirribonucleoproteína. El aislamiento requiere su extracción de la célula y posterior separación de la proteína asociada. El complejo de nucleoproteínas puede extraerse con cloruro sódico. Un método más adecuado para disociar al DNA de la proteína consiste en utilizar detergentes, como el dodecil sulfato de sodio o el xileno sulfonato sódico, aunque, como método alternativo, también se emplea mucho el fenol.

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    Los ácidos nucleicos son compuestos nitrogenados de elevado peso molecular que se pueden encontrar en las células asociados a proteínas, formando complejos llamados núcleo- proteínas. Estas proteínas tienen carácter básico, mientras que los ácidos nucleicos son ácidos. Se conocen dos grandes grupos de ácidos nucleicos: RNA (ácido ribonucleico) y el DNA (ácido desoxirribonucleico). La hidrólisis controlada de RNA y DNA produce nucleótidos. Si la hidrólisis continúa se producen nucleósidos y finalmente fosfatos, azúcares y bases púricas y pirimídicas En la naturaleza, el DNA se localiza en el núcleo de las células eucariotas en forma de desoxirribonucleoproteína. El aislamiento requiere su extracción de la célula y posterior separación de la proteína asociada. El complejo de nucleoproteínas puede extraerse con cloruro sódico. Un método más adecuado para disociar al DNA de la proteína consiste en utilizar detergentes, como el dodecil sulfato de sodio o el xileno sulfonato sódico, aunque, como método alternativo, también se emplea mucho el fenol.

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    de 3

    INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL

    ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLGICAS


    Prctica: Aislamiento del DNA del germen de trigo
    y su caracterizacin espectrofotomtrica
    Alumnos:

    Caldern Torres Erika


    Gonzlez Silva Adilene
    Hernndez Snchez Gustavo A.

    Seccin: 2

    Fecha: 22-mayo-14

    Introduccin:
    Los
    cidos
    nucleicos
    son
    compuestos
    nitrogenados de elevado peso molecular que se
    pueden encontrar en las clulas asociados a
    protenas, formando complejos llamados ncleoprotenas.
    Estas protenas tienen carcter bsico, mientras
    que los cidos nucleicos son cidos. Se conocen
    dos grandes grupos de cidos nucleicos: RNA
    (cido
    ribonucleico)
    y
    el
    DNA
    (cido
    desoxirribonucleico). La hidrlisis controlada de
    RNA y DNA produce nucletidos. Si la hidrlisis
    contina se producen nuclesidos y finalmente
    fosfatos, azcares y bases pricas y pirimdicas

    Objetivos:

    Conocer y realizar un procedimiento de


    purificacin del DNA de germen de trigo.
    Obtener el espectro de absorcin caracterstico
    del DNA.
    Resultados:
    Longitud de
    onda

    Absorbancia

    200

    0.47

    205

    0.764

    210

    1.004

    En la naturaleza, el DNA se localiza en el ncleo


    de las clulas eucariotas en forma de
    desoxirribonucleoprotena. El aislamiento requiere
    su extraccin de la clula y posterior separacin
    de la protena asociada.
    El complejo de
    nucleoprotenas puede extraerse con cloruro
    sdico.

    215

    1.332

    220

    1.759

    225

    1.871

    230

    1.967

    235

    1.677

    240

    1.381

    Un mtodo ms adecuado para disociar al DNA de


    la protena consiste en utilizar detergentes, como
    el dodecil sulfato de sodio o el xileno sulfonato
    sdico, aunque, como mtodo alternativo, tambin
    se emplea mucho el fenol.

    245

    1.041

    250

    0.726

    255

    0.563

    260

    0.561

    265

    0.586

    270

    0.594

    275

    0.561

    280

    0.48

    285

    0.366

    290

    0.253

    Las bases nitrogenadas tienen la propiedad de


    absorber la luz ultravioleta. Esta propiedad permite
    identificarlas y cuantificarlas, ya que cada base
    presenta un espectro de absorcin caracterstico
    con una longitud de onda mxima de
    aproximadamente 260 nm

    295

    0.176

    300

    0.143

    Espectro:

    que adicionamos fue Tris/EDTA/NaCl, el NaCl nos


    ayudar a extraer el complejo ncleo- protena y el
    EDTA funciona como agente quelante para poder
    atrapar iones divalentes que haya en la
    membrana. Y el Tris es para mantener el nivel de
    pH celular.
    Posteriormente se le adiciona amilasa, sta nos
    ayudar a degradar el almidn que hay en la
    clula y no se precipitar junto con el DNA.
    Despus de esto se le adicion el SDS al 10%,
    ste es el detergente que nos ayudar a disociar
    el DNA de la protena, as romperemos el
    complejo ncleo- protena. El EDTA junto con el
    SDS evitarn la contaminacin
    por iones
    divalentes y la degradacin del DNA por accin
    de las desoxirribonucleasas.

    Clculos:

    C=

    As260
    F . D
    225 0 0

    C=

    0.561
    22500

    C= 2.49 x

    (10)

    10

    En el nomograma nuestra concentracin fue:


    cidos nucleico= 0.017 mg/mL

    Despus adicionamos una mezcla de cloroformo:


    alcohol isoamlico (24:1), esta mezcla nos
    servir para desnaturalizar las histonas, que son
    las protenas que mantienen enrollado al DNA.
    Teniendo esto centrifugamos a 4000 rpm durante
    10 minutos. El sobrenadante lo recuperamos
    porque ah es donde se encuentra el DNA, en la
    pastilla se encuentran protenas y otras
    macromolculas que no eran de nuestro inters.
    Lo del sobrenadante lo recolectamos son una
    pipeta Pasteur y lo vertimos en un frasco que
    contena alcohol 96 fro. El alcohol servir como
    precipitante del DNA.
    Para poder leer el espectro de absorcin, se
    disolvi el DNA ya precipitado y recolectado en un
    tubo en 2 mL de solucin citrato salina

    Protena= 0.9mg
    Discusin de resultados:
    Para lograr el aislamiento del DNA de guayaba, lo
    primero que hicimos es romper la membrana
    celular para poder extraerlo, para esto lo primero

    http://www.fcn.unp.edu.ar/sitio/quimicabiologica1/w
    p-content/uploads/2010/08/TP-Extracci%C3%B3ny-caracterizaci%C3%B3n-de-DNA-y-RNA.pdf

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