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Metodos Proteina Hidrolizada de Tarwi

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MÉTODOS

1. Realizar la caracterización de la harina de tarwi mediante un análisis proximal


(métodos AOAC) para conocer su contenido en proteínas, humedad, cenizas,
carbohidratos y fibra; además se realiza un análisis granulométrico para
determinar el tamaño de partícula.
2. Aislar las proteínas mediante método de punto isoeléctrico
2.1 Dispersar a harina de tarwi en agua. Se evalúan dos relaciones harina: solvente, a
1:11 y a 1:28.
2.2 Realizar una extracción alcalina para solubilizar las proteínas y separarlas del
resto de compuestos no solubles. Se trabaja con NaOH a un pH= 9.3 y se evalúan
dos temperaturas de trabajo, a temperatura ambiente y a T=43ºC.
2.3 Centrifugar a 4000 rpm durante 20 minutos
2.4 Realizar precipitación isoeléctrica al extracto obtenido. Se ajusta el pH hasta el
punto isoeléctrico pH=4,5) y agitar por 15 minutos.
2.5 Centrifugar a 4000 rpm durante 20 minutos
2.6 Lavar el precipitado proteico 2 veces a razón de 1:5(pp/agua)
2.7 Eliminar el agua del precipitado proteico mediante centrifugación a 4000 rpm
durante 15 minutos
2.8 Secar el precipitado proteico en un secador de bandejas
3. Realizar la caracterización del aislado proteínas mediante un análisis proximal
(métodos AOAC) y electroforesis en geles de poliacrilamida para determinar las
masas moleculares de la proteína

Diagrama para obtención de aislado


Harina
Suspensión
Agua

Extracción alcalina Compuestos no solubles

Centrifugación Residuos sólidos


Extracto(sobrenadante)

Precipitación isoeléctrica

Centrifugación Residuos líquidos


Precipitado proteico

Lavado

Centrifugación
Residuos líquidos
Precipitado proteico lavado

Secado Aislado

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